Manual de TÃ©cnicas de LaboratÃ Rio

ESCOLA POLITCNICA DA UNIVERSIDADE DE SO PAULO
DEPARTAMENTO DE ENGENHARIA HIDRULICA E SANITRIA

LABORATRIO DE SANEAMENTO PROFO LUCAS NOGUEIRA GARCEZ
MANUAL DE PROCEDIMENTOS
E TCNICAS LABORATORIAIS
VOLTADO PARA ANLISES DE
GUAS E ESGOTOS SANITRIO
E INDUSTRIAL
2004
SUMRIO
1. SEGURANA EM LABORATRIOS QUMICOS
1.1. Normas e documentos regulamentadores
1.2. Definies
1.3. Regras bsicas de segurana
1.4. Primeiros socorros
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2. CONCEITOS BSICOS DE MEDIO
3. COLETA E PRESERVAO DE AMOSTRAS

3.1. Tcnicas e cuidados na coleta de amostras
3.2. Coletas rotineiras principais parmetros
3.3. tcnicas de preservao e armazenamento de amostras
3.3.1. tcnicas de preservao de amostras para exames fsico-qumicos
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4. METODOLOGIAS ANALTICAS
4.1. ACIDEZ
4.1.1. Introduo
4.1.2. Mtodo de determinao titulao potenciomtrica
4.1.3. Equipamentos e vidrarias
4.1.4. Reagentes
4.1.5. Procedimentos
4.1.6. Clculos
4.2. ALCALINIDADE
4.2.1. Introduo
4.2.2. Mtodo de determinao titulao potenciomtrica.
4.2.4. Reagentes
4.2.6. Clculos
4.3. DUREZA
4.3.1. Introduo
4.3.2. Mtodo de determinao
4.3.4. Reagentes
4.3.6. Clculos
4.4. CLCIO
4.4.1. Introduo
4.4.4. Reagentes
4.4.6. Clculos
4.5. CLORETOS
4.5.1. Introduo
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4.5.2. Mtodo de determinao - argentomtrico

4.5.4. Reagentes
4.5.6. Clculos
4.6. CLORO RESIDUAL
4.6.1. Introduo
4.6.2. Mtodo de determinao I mtodo Iodomtrico
4.6.4. Reagentes
4.6.6. Clculos
4.6.7. Mtodo de determinao II DPD
4.6.9. Reagentes
4.6.10. Procedimento para Cloro Livre
4.6.11. Clculos
4.7. DIXIDO DE CLORO
4.7.1. Introduo
4.7.2. Mtodo de determinao DPD
4.7.4. Reagentes
4.7.5. Procedimento para Dixido de cloro
4.7.6. Procedimento para Cloro livre, combinado e Clorito
4.7.7. Clculos
4.8. SULFETO
4.8.1. Introduo
4.8.5. Clculos
4.9. SULFATOS
4.9.1. Introduo
4.9.2. Mtodo de determinao gravimtrico
4.9.3. Equipamentos e vidraria
4.9.4. Reagentes
4.9.5. Procedimento I remoo de slica
4.9.6. Procedimento II determinao de sulfato em amostras at 50mg/L
4.9.7. Clculos
4.10. FLUORETO
4.10.1. Introduo
4.10.2. Mtodo de determinao eletrodo on-especfico
4.10.4. Reagentes
4.10.5. Procedimento preparo de curva calibrao
4.10.6. Procedimento determinao da concentrao de fluoreto
4.10.7. Clculos
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4.11. FENOL
4.11.1. Introduo
4.11.2. Mtodo de determinao mtodo de extrao com clorofrmio
4.11.4. Reagentes
4.11.5. Procedimentos extrao de interferentes
4.11.6. Procedimentos destilao
4.11.7. Procedimentos mtodo extrao com clorofrmio (baixa conc.)
4.11.8. Procedimentos preparo da curva padro
4.11.9. Procedimentos mtodo direto (alta conc.)
4.11.10. Procedimentos preparo de curva padro
4.11.11. Clculos
4.12. RESDUOS
4.12.1. Introduo
4.12.2. Mtodo de determinao - gravimetria
4.12.4. Procedimentos (A) Slidos Totais
4.12.5. Procedimentos (B) Slidos em Suspenso
4.12.6. Procedimentos (C) Slidos Dissolvidos
4.12.7. Procedimentos Slidos Fixos e Volteis
4.12.8. Clculos
4.13. DEMANDA QUMICA DE OXIGNIO - DQO
4.13.1. Introduo
4.13.2. Mtodo de determinao Refluxo aberto
4.13.4. Reagentes
4.13.5. Procedimentos amostras com DQO acima de 50mgO2/L
4.13.6. Procedimentos amostras com DQO abaixo de 50mgO2/L
4.13.7. Clculos
4.14. DEMANDA BIOQUMICA DE OXIGNIO DBO
4.14.1. Introduo
4.14.2. Mtodo de determinao Teste de DBO5,20 (5dias, 20o C)
4.14.4. Reagentes
4.14.5. Procedimentos calibrao do Oxmetro
4.14.6. Procedimentos preparao dos frascos de DBO
4.14.7. Procedimentos DBO sem semente
4.14.8. Procedimentos DBO com semente
4.14.8.1. Preparo da Semente
4.14.8.2. Procedimentos anlise 62
4.14.9. Clculos
4.14.10. Tabela estimativa para diluio de DBO com base nos valores de
DQO
4.15. SRIE NITROGENADA
4.15.1. Introduo
4.15.2. Nitrognio Amoniacal
4.15.2.1. Mtodo de determinao destilao preliminar/titulao
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4.15.2.2. Equipamentos e vidrarias

4.15.2.3. Reagentes
4.15.2.4. Procedimentos
4.15.2.5. Clculos
4.15.3. Nitrito
4.15.3.1. Mtodo de determinao Colorimtrico
4.15.3.3. Reagentes
4.15.3.5. Procedimento preparao de curva padro
4.15.3.6. Clculos
4.15.4. Nitrato
4.15.4.1. Mtodo de determinao eletrodo on seletivo
4.15.4.3. Reagentes
4.15.4.5. Calibrao do eletrodo de on seletivo
4.15.5. Nitrognio Total Kjeldahl NKT
4.15.5.1. Mtodo de determinao macro - Kjeldahl
4.15.5.3. Reagentes
4.15.5.5. Clculos
4.15.6. Nitrognio Orgnico
4.16. FSFORO
4.16.1. Introduo
4.16.2. Mtodo de determinao Fsforo Solvel
4.16.4. Reagentes
4.16.6. Procedimento preparao de curva padro
4.16.7. Procedimento Fsforo total
4.16.8. Clculos
4.17. LEOS E GRAXAS (OG)
4.17.1. Introduo
4.17.4. Reagentes
4.17.5. Procedimento
4.17.6. Clculos
4.18. SURFACTANTES
4.18.1. Introduo
4.18.4. Reagentes
4.18.5. Procedimento Sublao
4.18.6. Procedimento Determinao do Surfactante
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4.18.7. Procedimento preparo de curva padro

4.18.8. Clculos
4.19. CIDOS ORGNICOS VOLTEIS AOV
4.19.1. Mtodo de determinao mtodo simplificado
4.19.3. Reagentes
4.19.5. Clculos
4.20. OXIGNIO CONSUMIDO MATRIA ORGNICA
4.20.1. Introduo
4.20.4. Reagentes
4.20.6. Clculos
4.21. GUA OXIGENADA
4.21.1. Mtodo de determinao Mtodo do Cobalto II
4.21.3. Reagentes
4.21.5. Procedimento mtodo do Titnio
4.22. FERRO EM AMOSTRAS COM COAGULANTE (Fe2(SO4)3)
4.22.2. Reagentes
4.22.4. Clculos
4.23. DETERMINAO DA ACIDEZ LIVRE EM COAGULANTE (Fe2(SO4)3)
4.23.2. Reagentes
4.23.4. Clculos
4.24. FERRO TOTAL
4.24.1. Mtodo de determinao FerroVer (Kit da Hach)
4.24.3. Reagentes
4.24.5. Clculos
4.25. MANGANS
4.25.1. Mtodo de determinao Mtodo PAN (Kit da Hach)
4.25.3. Reagentes
4.25.5. Clculos
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5. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
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6. ANEXOS LEGISLAO
1. SEGURANA EM LABORATRIO QUMICO
1.1.
Normas e documentos regulamentadores
Decreto no 79037 de 24/12/1976

Regulamento do Seguro de acidentes de Trabalho
Publicado no D.O.U. de 28/12/1976
Lei no 6367 de 19/10/1976

Dispe sobre o Seguro de Acidentes de Trabalho a cargo do INPS e outras
providncias
Publicado no D.O.U. de 21/10/1976
NR 5 da Portaria no 3214 do Ministrio do Trabalho

Publicado em 08/06/1978 no D.O.U.
Obs.: NR 5: Comisso Interna de Preveno de Acidentes CIPA
1.2.
Definies
a) Acidente de trabalho
Conceito legal: Aquele que ocorre pelo exerccio do trabalho a servio da

Empresa, provocando leso corporal, perturbao funcional ou doena que
cause morte, perda ou reduo (permanente ou temporria) da capacitao
para o trabalho, incluindo-se os acidentes de trajeto (percurso de residncia
para o trabalho ou vice-versa), alm dos dispositivos contidos na Lei 6367 de
19/10/1976, e Decreto no 79037 de 24/12/1976.
Conceito tcnico: ocorrncia inesperada ou no que interrompe ou interfere no

processo normal de uma atividade e da qual poder resultar danos fsicos
(corpo humano) materiais e econmicos Empresa.
b) Segurana do Trabalho
Conjunto de medidas tcnicas, educacionais e psicolgicas empregadas no

reconhecimento, avaliao e controle dos riscos que possam advir do trabalho,
com conseqncias de carter agudo.
c) Condio insegura
Condio fsica que compromete a segurana existente no local, na mquina,

no equipamento ou nas instalaes e que conduz ocorrncia de acidentes.
d) Dispositivos de Proteo Individual (EPI)
Meio ou dispositivo de uso pessoal destinado a preservar a incolumidade da

pessoa no exerccio de suas funes, quando as medidas de segurana de
ordem geral so insuficientes ou imprprias para a atividade especfica.
e) Lquido combustvel
Lquido com ponto de fulgor igual ou superior a 70o C e inferior a 93,3o C.
f) Lquido inflamvel
Lquido com ponto de fulgor inferior a a70o C e presso de vapor absoluta

menor do lque 2,6.105 Pa (2,8kgf/cm2) a 37,7o C.
g) Corrosivo
Substncia qumica que provoca danos a pele, olhos e tecidos do trato

respiratrio e digestivo quando inalados ou ingeridos. Podem provocar,
tambm, deteriorao de materiais e instalaes. Como exemplos, temos os
cidos e lcalis em geral, metais alcalinos, cianetos etc...
h) Oxidante
Substncia qumica que supre oxignio para as reaes qumicas, podendo

iniciar e alimentar reaes de combusto. Exemplos: xidos, perxidos, nitritos,
nitratos, bromatos, cromatos, percloratos, permanganatos etc...
i) Explosivo
Substncia qumica que ao ser exposta a variaes trmicas ou reao

qumica libera grande quantidade de energia sob a forma de calor e/ou gases
em expanso, provocando exploses. Exemplos: cloratos, perxidos, metais
alcalinos etc...
1.3.
Regras Bsicas de Segurana
Os acidentes de trabalho ocorridos em mbito de laboratrios qumicos so muito

freqentes, sendo em sua grande parte oriundos de atitudes inconvenientes
(brincadeiras), distraes, mau uso de equipamentos, negligncia quanto ao uso
de EPIs (equipamento de proteo individual) ou desconhecimento da tcnica
analtica empregada. Dessa forma, deve-se criar na estrutura do laboratrio
Normas de Segurana a serem seguidas por todos os usurios, a fim de se evitar
a ocorrncia de acidentes em suas dependncias.
Recebe o nome de Good Laboratory Practies (Boas Prticas de Laboratrio
GLP), o conjunto de recomendaes de ordem pessoal a serem desenvolvidas
nos laboratrios a fim de se ter um convvio com segurana neste ambiente.
De acordo com as Normas Tcnicas desenvolvidas pela CETESB (L5.015) e o
Manual de Tcnicas de Anlises Fsico-qumicas para Controle Operacional de
ETA, so listadas abaixo, procedimentos bsicos de ordem geral, que devem ser
implantadas pelos responsveis do laboratrio qumico (com nfase a anlise de
gua) e seguidos pelos usurios do laboratrio:
Realizar controles mdicos peridicos, envolvendo exames clnicos e

laboratoriais de sangue, urina, fezes e raio X. Para trabalhos com guas
contaminadas, ou potencialmente contaminadas, proceder vacinao contra
febre tifide, ttano e outras, critrio mdico;
Proibir correrias ou brincadeiras nas dependncias do laboratrio;
Conhecer e avaliar os riscos com a operao de amostras, reativos, solventes,

vidrarias e utilidades e tomar as medidas preventivas necessrias;
Saber operar corretamente com o s equipamentos e aparelhagens do

laboratrio, conhecer seus riscos, usos e limitaes;
Incentivar o uso de EPIs;
Nunca pipetar com a boca nenhum tipo de substncia, usar sempre a pra de
borracha ou vcuo para aspirar;
Trabalhar sempre com avental de manga longa e devidamente abotoado;
Evitar usar roupas de tecido sinttico (facilmente inflamvel);
Proibir fumar nas dependncias do laboratrio, por perigo de contato com

material inflamvel;
Evitar comer e beber nos laboratrios, lavar bem as mos antes de qualquer
refeio;
Comunicar a chefia a ocorrncia de qualquer acidente, por mais simples que

seja.
No misturar pertences pessoais com material de laboratrio;
Seguir as orientaes de segurana e de uso de equipamentos e reagentes;
Com relao ao laboratrio do ponto de vista funcional, de suma importncia

que o mesmo oferea condies de segurana a seus usurios, para tanto, ser
listado abaixo, algumas recomendaes:
Manter as bancadas sempre limpas e livre de materiais estranhos ao trabalho;
Fazer uma limpeza prvia, com gua, antes de descartar frascos de reagentes
vazios;
Rotular imediatamente o frasco com o reagente preparado e as amostras

coletadas, discriminando o produto, data e concentrao, quando for o caso;
Limpar imediatamente qualquer derramamento de produtos e/ou reagentes.

Proteger-se, se necessrio, para fazer essa limpeza, utilizando os materiais e
recursos adequados;
Descartar todos e quaisquer materiais de vidro trincado ou que possa oferecer

perigo quando do seu uso;
Acondicionar os cacos de vidro num recipiente prprio, no misturando com o

lixo comum;
Discriminar a voltagem de todas as tomadas, de preferncia padronizando

suas cores, bem como indicar nos equipamentos suas respectivas voltagens;
Indicar com um aviso do tipo Chapa quente as chapas de aquecimentos

utilizadas;
Ter sempre disponvel os EPIs;
Possuir em suas dependncias uma Caixa de Primeiro Socorros, de

conhecimento de todos os usurios;
Possuir, em local estratgico, um chuveiro de emergncia e um lava-olhos;
Manter os extintores de incndio sinalizados e em dia com suas recargas;
Oferecer um sistema de iluminao de emergncia, para os casos de falta de

energia eltrica;
Possuir um sistema de exausto e recirculao de ar.
1.4.
Primeiros Socorros
Os riscos mais comuns de acidentes em laboratrios qumicos so: cortes,

queimaduras, derramamento de produtos qumicos e intoxicao com substncias
nocivas.
Os primeiros socorros devem ser ministrados o mais prximo possvel do
momento do acidente, sendo que, dependendo da gravidade, o acidentado dever
ser encaminhado ao hospital mais prximo, imediatamente.
Abaixo, procedimentos bsicos a serem ministrados em caso de acidentes:
Por ingesto de substncia qumica: no provocar vmito quando tratar-se

de ingesto de cidos ou bases; deve-se no primeiro caso (ingesto de cidos)
ministrar leite de magnsia e gua para beber, e no segundo caso (ingesto de
bases) ministrar cerca de 30 ml de vinagre diludos em 250 ml de gua,
seguido de suco de laranja ou limo.
Por inalao de vapores corrosivos: remover a pessoal do local, dispondo-a

num ambiente ventilado
Por queimaduras: no caso de queimaduras com cidos, deve-se lavar com

gua em abundncia e, em seguida, com Bicarbonato de sdio a 5%; em
tratando-se de queimaduras com bases, deve-se lavar com gua em
abundncia e, em seguida, com vinagre. Quando a regio afetado for os olhos,
deve-se utilizar o lavador de olhos para proceder a lavagem.
Por cortes: deve-se lavar com gua e sabo o local da leso e, em seguida,
ministrar soluo base de Iodo.
2. CONCEITOS BSICOS DE MEDIO

O resultado de uma anlise qumica funo direta do cuidado, da manipulao e
da correta aplicao da metodologia analtica, no qual pequenos descuidos podem
significar grandes erros, sobretudo, em determinao de parmetros em amostras
com concentrao da ordem de miligrama por litro.
Dessa forma, necessrio o preparo tcnico para se proceder a uma anlise, e o
uso de equipamentos e vidrarias apropriadas e em boas condies.
Uma das mais comuns fontes de erros encontra-se no preparo ou na manipulao
das vidrarias volumtricas empregadas nas anlises, so erros primrios, que,
uma vez evitados, podem significar um aumento do grau de confiabilidade do
resultado. Entre os procedimentos que auxiliam a evitar esses tipos de erros,
pode-se citar:
Temperatura: a capacidade de uma vidraria volumtrica varia com a

temperatura, logo, deve-se utiliz-las sempre em temperaturas prximas
aferio. Da mesma forma, a densidade do lquido tambm varia com a
temperatura, portanto, deve-se utiliz-los somente em temperatura ambiente;
Limpeza da vidraria: presena de material gorduroso pode aumentar o erro

na leitura devido a m formao do menisco, alm do que, tal sujeira pode
servir como interferente, alterando o valor do resultado da anlise.
Ajuste do menisco: deve-se tomar muito cuidado com o erro de paralaxe: o

menisco deve estar posiciona de maneira que sua parte inferior tangencie
horizontalmente a parte superior da linha do lquido, tendo a linha da viso no
mesmo plano.
Linha da viso
Ajuste da capacidade volumtrica: tanto em provetas, bales volumtricos

ou buretas, deve-se tomar os cuidados mencionados nos itens anteriores, fim
de se evitar a ocorrncia de desvios no resultado final.
Pipetas volumtricas e graduadas: deve-se utilizar uma pra para suco,

devendo-se passar alguns milmetros acima da linha de graduao final, em
seguida, deve-se secar a ponta da pipeta com papel higinico, e ajustar o
menisco. Feito isso, pode-se transferir o volume para outro frasco. Existem
dois tipos de pipetas:
Pipetas volumtricas de sopro: possuem dois traos horizontais na poro
superior, e no momento da transferncia do lquido pipetado para outro
frasco, deve-se expulsar o volume restante que permanece na ponta da
pipeta, uma vez que ele, nesse tipo de pipeta, considerado parte
integrante do volume total pipetado; para tanto, deve-se utilizar a pra de
suco para soprar esse volume para o frasco.
Pipetas volumtricas comuns: apresentam apenas um trao horizontal na
poro superior, deve ser desconsiderado o volume restante na ponta da
pipeta a final do escoamento, ou seja, no deve-se soprar esse volume
para o frasco; para tanto, deve-se apenas encostar a ponta da pipeta at o
trmino do escoamento e permanecer por alguns segundos aps esse
momento.
Limpeza da vidraria: toda a aparelhagem de vidro ou de plstico empregada

na anlise ou na preparao de reagentes, dever ser perfeitamente limpa,
livre de substncias estranhas ao processo, caso contrrio, os resultados no

ofereceram uma boa confiabilidade. Para tanto, existem vrias tcnicas de
limpeza de vidrarias, s quais se destacam:
Detergentes: o detergente mais recomendado no meio laboratorial o
detergente neutro da marca EXTRAN, o que no impede o uso de outros,
contudo, deve-se ter cuidados na escolha, sobretudo nos quesitos
biodegradabilidade e presena de grupos de fosfatos. Aps a lavagem da
vidraria com o detergente, essencial que se enxge com gua em
abundncia para se remover os resqucios do detergente, e em seguida,
enxaguar com gua destilada.
Soluo Sulfocrmica: trata-se de uma soluo cida, constituda por cido
sulfrico concentrado e dicromato de potssio, tem por objetivo eliminar
contaminantes orgnicos e inorgnicos atravs da reao de oxido-reduo;
para tanto, deve-se utiliz-la de forma diluda, e deixar a vidraria de molho por
algumas horas, ao cabo do que retira-se a soluo sulfocrmica (que deve ser
reutilizada at que apresente uma cor esverdeada, indicativo de que o cromo
est presente em maior quantidade na forma trivalente, o que significa perda
do poder oxidativo, causado pelo cromo hexavalente) e lava-se com gua de
torneira em abundncia e, em seguida, com gua destilada.
Preparo da soluo sulfocrmica:
1. Pesar 60g de Dicromato de potssio grau tcnico, transferir para um bcker
de 2L;
2. Adicionar 300ml de gua destilada e homogeneizar;
3. Transferir COM EXTREMO CUIDADO 1L de cido Sulfrico concentrado,
com constante agitao (no se esquecer de usar os EPIs apropriados);
4. Aguardar esfriar e acondicionar em frascos devidamente rotulados.
Soluo de cido ntrico 1:1: trata-se de uma soluo indicada para a
limpeza de vidrarias impregnadas pela anlise de metais, ou no preparo de
frascos para coleta de amostras para anlise de metais.
Preparo da soluo de lavagem:
1. Deve-se misturar 500ml de cido ntrico 500ml de gua destilada
2. Acondicionar em frasco devidamente rotulado.
Observaes: cada material dever ter sua anlise adequada anlise para qual
ser destinado; deixar a vidraria em molho por muito tempo em soluo
sulfocrmica ou soluo cida de lavagem pode danificar as marcas de
identificao e graduao originais de fbrica.
3. COLETA E PRESERVAO DE AMOSTRAS
3.1. Tcnicas e cuidados na coleta de amostras

Uma coleta de amostras no deve ser encarado com o simples ato de se
mergulhar uma garrafa na gua para retirar um determinado volume desta, tornase necessrio uma caracterizao das condies do local da coleta. Assim
sendo, ao coletar a amostra, a pessoa deve ter o cuidado de anotar qualquer
ocorrncia de relevncia, tal como: cor, odor, presena de algas, leos, corantes,
material sobrenadante, peixes ou outros animais aquticos mortos etc...
A tcnica a ser adotada para a coleta de amostras depende da matriz a ser
amostrada (gua superficial, subterrnea, encanada, residuria, sedimento de
fundo, biota aqutica), do tipo de amostragem (amostra simples ou composta) e,
tambm, da natureza do exame a ser efetuado (anlises fsico-qumicas ou
microbiolgicas). Assim sendo, de uma maneira geral, deve-se adotar esses
cuidados no momento da coleta:
As amostras no devem incluir folhas, partculas grandes, detritos ou outro tipo
de material acidental, salvo quando se tratar de amostra de sedimento;
Para minimizar a contaminao da amostra convm recolhe-la com a boca do
frasco de coleta contra a corrente;
Coletar volume suficiente de amostra para eventual necessidade de se repetir
alguma anlise no laboratrio;
Fazer todas as determinaes de campo em alquotas de amostra separadas
das que sero enviadas ao laboratrio;
Empregar os frascos e as preservaes adequadas a cada anlise no ato da
coleta;
As amostras que exigem refrigerao devem ser acondicionadas em caixas de
isopor com gelo;
Eticar e identificar bem o frasco com a amostra;
Respeitar o prazo de validade para cada anlise em questo.
O tempo demandado entre a coleta e a execuo das anlises laboratoriais de
extrema importncia para a validade do resultado, isso devido a impossibilidade
de se preservar completamente a amostra. As alteraes qumicas que podem
ocorrer na estrutura dos constituintes acontecem em funo das condies fsicoqumicas da amostra; assim metais podem precipitar-se como hidrxidos, ou
formar complexos com outros constituintes, ctions e nions podem mudar o
10
estado de oxidao, outros compostos podem dissolver-se ou volatilizar-se com o

tempo, alteraes em nveis biolgicos tambm so notados, sobretudo, na
medida indireta da matria orgnica ou dos nutrientes fsforo e nitrognio.
Podem ser adotados, de acordo com a anlise a ser executada na amostra, as
seguintes tcnicas de preservao: adio qumica, congelamento e refrigerao.
3.2.Coletas rotineiras principais parmetros

Estao de Tratamento de gua (ETA)
De maneira geral, para mananciais pouco poludos, os principais parmetros de
controle so os seguintes:
Parmetros qumicos: cloro residual, cor, turbidez, pH, alumnio (em ETAs
que utilizem o sulfato de alumnio como coagulante), oxignio consumido,
ferro, fluoreto (quando houver fluoreto natural ou fluoretao artificial);
Parmetros microbiolgicos: coliformes fecais e totais, contagem de

bactrias heterotrficas.
Sistema de distribuio
Parmetros qumicos: cloro residual, cor, turbidez, alumnio, ferro, odor
Parmetros microbiolgicos: coliformes fecais e totais, ferrobactrias.
guas superficiais e subterrneas

Rios, lagos e barragens: dependem do objetivo da anlise.
Efluentes de ETEs e industriais
O ponto e o tipo de coleta dependem dos objetivos a que se destinam tais
amostragens.
3.3. Tcnicas de preservao e armazenamento de amostras
Exames microbiolgicos:
Os frascos e as tampas devem ser de material resistentes s condies de
esterilizao e ao solvente da gua e no devem liberar compostos
txicos, como bactericidas ou bacteriostticos durante a esterilizao. Podem
ser de vidro neutro, de vidro borossilicato ou plstico autoclavvel, com boca
larga (mais ou menos 4cm) para facilitar a coleta e a limpeza.
11
Lavagem dos frascos: os frascos para anlises microbiolgicas devem ser

submetidos descontaminao em autoclave, temperatura de 121o C e
presso de 1ATM, durante 30 minutos. Aps a autoclavagem, deve-se
proceder a lavagem dos frascos observando-se a seguinte seqncia: limpar a
parte externa com uma esponja; adicionar uma gota de detergente lquido, no
txico, no interior de cada frasco e escovar a parte interna com auxlio de uma
escova; enxaguar 10 vezes com gua corrente e, em seguida, mais 3 vezes
com gua destilada; aps a lavagem deixar os frascos emborcados numa
estufa a 80/100o C durante 1 hora para secagem
Frascos para coleta de amostras contendo cloro residual:
Adicionar 0,1ml de uma soluo de tiossulfato de sdio 1,8% para cada

100ml de amostra, a fim de neutralizar o cloro residual; tal quantidade de
tiossulfato de sdio suficiente para neutralizar at 5mg/L de Cloro.
Frascos para coleta de amostras contendo metais pesados com

concentrao superiores a 0,01mg/L (cobre, nquel, zinco, chumbo etc...)
Adicionar 0,3ml de uma soluo de EDTA a 15% para cada 100ml de

amostra a ser coletada. Antes da esterilizao, a tampa e o gargalo dos
frascos devem ser recobertos com folha de papel alumnio ou kraft, os
quais so presos aps esterilizao por elstico adequado.
Esterilizao dos frascos: (os reagentes para preservao devem ser

adicionados previamente, antes da esterilizao.)
Frascos de vidro: devem ser esterilizados em estufa temperatura de

170/180o C durante 2 horas;
Frascos de plstico autoclavvel: sero esterilizados em autoclave a

121o C e 1atm por 30 minutos
Preparo das solues condicionantes:
Soluo de EDTA 15%: pesar 150g de EDTA sal dissdico, transferir para
um balo volumtrico de 1L, adicionar gua destilada promover a completa
dissoluo. Completar o volume do balo;
Soluo de Tiossulfato de sdio a 1,8%: pesar 18g de tiossulfato de

sdio, transferir para um balo volumtrico de 1L, adicionar gua destilada
e promover a completa dissoluo. Completar o volume do balo.
12
Anlise Fsico-qumicas:
O tipo de frasco recomendado para o armazenamento de amostra para cada

parmetro bem como sua preservao, ser detalhada no prximo item.
Lavagem dos frascos: deve-se lavar os frascos e suas tampas com
detergentes isentos de fosfatos, enxaguar com gua corrente e, em seguida, gua
destilada; escorrer para secar e tampar o frasco antes de guard-los. Para anlise
de:
metais, deve-se lavar o frasco com detergente e enxaguar com gua destilada,
colocar cido ntrico 1:1 at a metade do frasco, tampar e agitar vigorosamente,
esvaziar o frasco e enxaguar pelo menos 5 vezes com gua destilada. Deve-se
reaproveitar o cido ntrico usado na lavagem;
fosfatos, deve-se lavar com uma soluo de cido clordrico 1:1 e enxaguar com
gua destilada.
3.3.1. Tcnicas de preservao de amostras para exames fsico-qumicos.
Abreviaturas: P (polietileno)
V (vidro borossilicato pirex)
R (refrigerar a 4o C)
parmetro
frasco
preservao
validade
ACIDEZ
P, V
24h
ALCALINIDADE
P, V
CARBONO ORGNICO TOTAL (COT)
P, V
NaOH
10N O
mais
at pH >12; R breve
possvel
CLORETO
P, V
O
mais
breve
possvel
CLORO RESIDUAL
P, V
O
mais
breve
possvel
CONDUTIVIDADE
P, V
24h
COR
P, V
24h
13
parmetro
frasco
preservao
validade
DEMANDA BIOQUMICA DE OXIGNIO P, V

(DBO)
DEMANDA
(DQO)
H2SO4 at pH 7 dias
<2; R
QUIMCA
DE
OXIGNIO P, V
DUREZA
P, V
FENIS
V, cor H2SO4 at pH O
mais
mbar <2
breve
possvel
FLUORETO
FERRO II
P, V
2ml de HCl O
mais
para
cada breve
100ml
de possvel
amostra
FOSFATO
P, V
H2SO4 at pH 24h
<2; R
NDICE VOLUMTRICO DE LODO (IVL)
P, V
METAIS
P, V
HNO3 at pH 180 dias

<2; R
NITROGNIO
ORGNICO
7 dias
7 dias
7 dias
E/OU P, V
H2SO4 at pH 24h
<2; R
NITRATO
P, V
H2SO4 at pH 24h
<2; R
NITRITO
P, V
MATERIAL
(MSH)
AMONIACAL
24h
SOLVEL
EM
N-HEXANO V
HCl at
<2; R
48h
pH 24h
OXIGNIO CONSUMIDO
P, V
24h
OXIGNIO DISSOLVIDO
V
(frasco
de
DBO)
1mL
de 4 a 8h
MnSO4 e 1mL
de
AlcaliIodeto-Azida
14
parmetro
frasco
preservao
validade
PH
P, V
6h
RESDUOS
P, V
7dias
SULFATO
P, V
7dias
SULFETO
V
(frasco
de
DBO)
6 gotas
acetato
zinco 2N
gotas
NaOH 6N
SURFACTANTES
P, V
TURBIDEZ
P, V
R
(evitar 24h
exposio
luz)
de 24h
de
e 9
de
24h
4. METODOLOGIAS ANALTICAS
4.1. ACIDEZ
4.1.1. Introduo
Acidez de uma gua a capacidade dela reagir quantitativamente com uma base
forte at um valor estipulado de pH.
Tal parmetro contribui para a ocorrncia de processos corrosivos e influencia as
taxas de reaes qumicas, especialmente os processos biolgicos.
4.1.2. Mtodo de determinao Titulao potenciomtrica
Princpio do mtodo: ons hidrogeninicos presentes na amostra como resultantes
de dissociao ou hidrlise reagem com a adio de um lcali padro. O valor da
acidez depende do pH do ponto final ou do indicador usado.
Ponto final: idealmente, o ponto final de uma titulao de acidez corresponde
estequiometricamente ao ponto de equivalncia para neutralizao dos cidos
presentes. Geralmente, temos o Dixido de Carbono dissolvido (CO2) como maior
componente da acidez em guas de superfcie; portanto, nas amostras contendo
apenas esse tipo de componente causador de acidez (dixido de carbonobicarbonato-carbonato), titula-se at o pH 8,3 a 25o C, o qual correspondente
15
estequiometricamente ao ponto de neutralizao do cido carbnico-carbonato.

Nessa faixa de pH, o indicador mais empregado a Fenolftalena. Em virtude de
existir, via de regra, uma mistura muito mais complexa de substncias causadoras
de acidez, usa-se fixar dois pontos finais: 4,5 e 8,3 para determinar, via titulao
potenciomtrica, os valores de acidez a bicarbonatos e acidez a demais cidos
minerais. Para o ponto final de pH 4,5 recomenda-se o uso do indicador Vermelho
de Metila.
Abaixo, tem-se as reaes qumicas envolvidas:
pH 4,5 acidez mineral:
H+ + OH-
H 2O
pH 8,3 acidez total

H2CO3 + OHHCO3- + OH-
HCO3CO3-2
pHmetro;
Agitador magntico;
Barra magntica;
Bureta ;
Pipeta volumtrica;
Bcker.
4.1.4. Reagentes
Soluo padro de Hidrogenoftalato de potssio 0,05N

Secar 15 a 20g de padro primrio de hidrogenoftalato de potssio em estufa a
120o C por 2h; aguardar esfriar e pesar 10,0 +/- 0,5g, transferir para um balo
volumtrico de 1L, promover a dissoluo e completar o volume do balo.
Soluo padro (estoque) de Hidrxido de Sdio 0,1N

Pesar 4g de NaOH e transferir para um balo volumtrico de 1L, promover a
dissoluo e completar at o menisco. Padronizar com 40mL de soluo
padro de Hidrogenoftalato de potssio 0,05N, titulando at o ponto final da
reao, pH 8,7. Calcular a normalidade real do NaOH:
16
N = A.B
204,2 . C
Onde:
A : massa (g) de hidrogenoftalato de potssio presente no balo de 1L;
B : volume (mL) de hidrogenoftalato de potssio usado na padronizao;
C : volume (mL) de NaOH gastos na titulao.
Soluo padro de NaOH 0,02N

Diluir 200mL da soluo estoque de NaOH 0,1N em um balo volumtrico de
1L; padronizar novamente com soluo padro de hidrogenoftalato de
potssio, usando 15mL; o clculo da normalidade real idntico ao j
demonstrado.
Fenolftalena (indicador pH 8,3)

Pesar 1g de fenolftalena e dissolver em 60mL de lcool etlico, transferir para
um balo volumtrico de 100mL e completar o volume com gua.
Vermelho de metila (indicador pH 3.7)

Pesar 0,2g de vermelho de metila e dissolver em 60ml de lcool, transferir para
4.1.5. Procedimento
1. Homogeneizar o frasco contendo a amostra;
2. Pipetar 100mL de amostra e transferir para um bcker de 250mL;
3. Adicionar uma barra magntica e acomodar o bcker num agitador magntico;
4. Introduzir o eletrodo (previamente calibrado) do pHmetro no contedo do
bcker, e ligar a agitao;
5. Encher uma bureta de 50mL com NaOH 0,02N e acoplar ao conjunto
bcker/eletrodo;
6. Aguardar a estabilizao do valor do pH original da amostra;
7. Iniciar a titulao, vagarosamente;
8. Titular at o pH 4,5 e anotar o volume gasto de NaOH V1 (caso a amostra
tenha um pH original maior que 4,5 desconsidere esse passo);
17
9. Prosseguir a titulao at pH 8,3 e anotar o volume gasto V2.

4.1.6. Clculos
Acidez mineral:
mgCaCO3/L =
N NaOH V 1 NaOHgastos 50000

vol.amostra
Acidez Total:
mgCaCO3/L =
N NaOH V 2 NaOHgastos 50000

vol.amostra
4.2. ALCALINIDADE
4.2.1. Introduo
Alcalinidade de uma gua sua capacidade em neutralizar cidos, em outras
palavras, sua capacidade de tamponamento. Usualmente, as substncias mais
comuns encontradas em guas de superfcie causadoras de alcalinidade so os
carbonatos (CO3-2), bicarbonatos (HCO3-) e hidrxidos (OH-). Uma gua pode ter
baixa alcalinidade e alto valor de pH e vice-versa.
possvel relacionar-se o valor da alcalinidade com o de outro parmetro: o de
dureza, uma vez que os ctions mais comuns atrelados aos nions causadores de
alcalinidade so os de Clcio (Ca+2) e de Magnsio (Mg+2), que, por sua vez, esto
relacionados com a dureza da gua.
4.2.2. Mtodo de determinao Titulao potenciomtrica
Princpio do mtodo: ons relacionados a alcalinidade presentes na amostra
resultantes da dissociao ou hidrlise de solutos, reagem com a adio de um
cido padro. A alcalinidade, tal qual a acidez, depende do valor do ponto final de
pH fixado (usa-se aqui, o sistema de dissociao do Bicarbonato-carbonato e
presena de hidrxidos, de forma anloga ao empregado na acidez, logo, os
pontos finas estipulados so os de pH 4,5 para alcalinidade a hidrxidos e de 8,3
para alcalinidade a bicarbonatos/carbonatos).
Abaixo tem-se as reaes qumicas envolvidas:
pH 8,3 alcalinidade mineral
OH- + H+
H2 O
pH 4,5 alcalinidade total
18
CO32- + OH-
HCO3-
HCO3- + OH-
H2CO3 (dissocia-se imediatamente em CO2 e H2O).
pHmetro;
Agitador magntico;
Barra magntica;
Bureta ;
Pipeta volumtrica;
Bcker.
4.2.4. Reagentes
Soluo padro de Carbonato de sdio (Na2CO3) 0,05N

Secar em estufa a 250o C por 4h, aproximadamente 3g de Na2CO3, aguardar
esfriar e pesar 2,5+/-0,2g e transferir para um balo volumtrico de 1L,
adicionar gua e promover a dissoluo, completar o volume do balo.
Soluo estoque de cido sulfrico (H2SO4) 1N

Pipetar 27mL de H2SO4 concentrado (com extremo cuidado!) e transferir
lentamente para um balo volumtrico de 1L com aproximadamente 500mL de
gua, completar o volume do balo.
Soluo Padro de cido sulfrico 0,02N

Pipetar 20mL da soluo estoque de cido sulfrico 1N e transferir para um
balo volumtrico de 1L, completar o volume do balo. Padronizar com 20mL
de soluo padro de Carbonato de sdio 0,05N, titulando at o pH de 4,5
(ponto final). Calcular a normalidade real do cido sulfrico:
N = A.B
53 . C
Onde:
A : massa (g) de carbonato de sdio presente no balo de 1L;
B : volume (mL) de carbonato de sdio usado na padronizao;
19

Verde de Bromocresol (indicador pH 4,5)

Pesar 0,1g de verde de bromocresol e dissolver em 60mL de lcool etlico,
transferir para um balo de 100mL e completar o volume com gua.
4.2.5. Procedimento
2. Pipetar 100mL de amostra e transferir para um bcker de 250mL;
3. Adicionar uma barra magntica e acomodar o bcker num agitador magntico;
4. Introduzir o eletrodo (previamente calibrado) do pHmetro no contedo do
bcker, e ligar a agitao;
5. Encher uma bureta de 50mL com H2SO4 0,02N e acoplar ao conjunto
bcker/eletrodo;
6. Aguardar a estabilizao do valor do pH original da amostra;
8. Titular at o pH 8,3 e anotar o volume gasto de H2SO4 V1 (caso a amostra
tenha um pH original menor que 8,3 desconsidere esse passo);
9. Prosseguir a titulao at pH 4,5 e anotar o volume gasto V2.
4.2.6. Clculos
Alcalinidade mineral:
mgCaCO3/L =
N H 2 SO 4 V 1 H 2 SO 4 gastos 50000
vol.amostra
Alcalinidade Total:
mgCaCO3/L =
N H 2 SO 4 V 2 H 2 SO 4 gastos 50000
vol.amostra
20
4.3. DUREZA
4.3.1. Introduo
Originalmente, gua dura era entendido como sendo a capacidade da gua em
precipitar sabo, sendo que tal fato se dava em virtude da presena, sobretudo, de
ons clcio (Ca+2) e magnsio (Mg+2). Correntemente, dureza total de uma gua
definida como sendo a soma da concentrao desses dois ons, sendo expresso
em mgCaCO3/L. Esse parmetro, como j foi dito, guarda estreita relao
numrica com o parmetro Alcalinidade.
4.3.2. Mtodo de determinao titulomtrico
Princpio do mtodo: o quelante Etilenodiaminotetractico sal dissdico (EDTA)
forma um complexo quando em contato com certos metais; se uma pequena
quantidade de indicador Preto de Eriocromo T adicionado a soluo aquosa
contendo ons clcio e magnsio, numa faixa de pH de 10 +/-0,1, a soluo fica
com uma cor rsea. Com a adio de EDTA, os ons clcio e magnsio so, por
ele, complexados, e a soluo fica com uma colorao azul, indicando o ponto
final da reao.
Bureta ;
Pipeta volumtrica;
Erlenmeyer de 250mL;
Esptula de inx
4.3.4. Reagentes
Soluo padro de carbonato de clcio (CaCO3) 0,02N

Pesar 1g de CaCO3 anidro e transferir para um balo volumtrico de 1L,
adicionar cerca de 500mL de gua e gotejar HCL 6N (1:1) at completar a
dissoluo; adicionar mais 200mL de gua e aquecer at ebulio. Aguardar
esfriar e adicionar algumas gotas de vermelho de metila, ajustando a colorao
para laranja com HCl 6N ou NH4OH 3M.
Soluo padro de EDTA 0,02N

Pesar 3,723g de EDTA sal dissdico, transferir para um balo volumtrico de
1L, adicionar gua para promover a dissoluo, e completar o volume do
balo. Padronizar com 10mL de soluo padro de carbonato de clcio, com o
pH ajustado para 10+/-0,1 com soluo tampo, e titular contra a soluo
padro de EDTA. Calcular a normalidade real da soluo padro de EDTA:
21
NEDTA
N CaCO 3 *VCaCO 3
V EDTA gastos
Soluo tampo
Pesar 16,9g de Cloreto de Amnio (NH4Cl) e dissolver em 143mL de Hidrxido
de amnio (NH4OH) concentrado, em seguida, adicionar 1,25g de EDTA sal de
magnsio e promover a dissoluo; transferir tudo para um balo volumtrico
de 250mL e completar o volume.
Indicador Preto de Eriocromo T

Pesar 0,5g de indicador Preto de Eriocromo T e 100g de Trietanolamina (ou
Cloreto de Sdio), transferir os dois para um almofariz, e triturar com o pistilo,
at obter um material uniforme.
4.3.5. Procedimento
2. Pipetar 100mL de amostra e transferir para um erly de 250mL;
3. Adicionar soluo tampo at pH de 10+/-0,1 (aproximadamente 1mL);
4. Adicionar uma ponta de esptula de indicador preto de eriocromo T
5. Encher uma bureta de 50mL com EDTA 0,02N
7. Titular at a viragem da cor vermelha para o azul.
4.3.6. Clculo
Dureza total:
mgCaCO3/L =
N EDTA V 1 EDTAgastos 50000

vol.amostra
4.4. CLCIO
4.4.1. Introduo
Dentro do parmetro dureza, exposto no item 4.3, podemos identificar e
quantificar o valor distinto dos principais ons que compe tal parmetro.
22
4.4.2. Mtodo de determinao titulomtrico

Princpio do mtodo: similar ao exposto no item 4.3.2, com a alterao do
indicador usado, sendo empregado para essa anlise o indicador Murexida, alm
disso, necessrio ajustar o pH para a faixa de 12. A viragem do indicador vai do
rsea para o prpura.
Bureta ;
Pipeta volumtrica;
Esptula de inx
4.4.4. Reagentes
Soluo padro de carbonato de clcio (CaCO3) 0,02N

Pesar 1g de CaCO3 anidro e transferir para um balo volumtrico de 1L,
adicionar cerca de 500mL de gua e gotejar HCL 6N (1:1) at completar a
dissoluo; adicionar mais 200mL de gua e aquecer at ebulio. Aguardar
esfriar e adicionar algumas gotas de vermelho de metila, ajustando a colorao
para laranja com HCl 6N ou NH4OH 3M.
Soluo padro de EDTA 0,02N

Pesar 3,723g de EDTA sal dissdico, transferir para um balo volumtrico de
1L, adicionar gua para promover a dissoluo, e completar o volume do
balo. Padronizar com 10mL de soluo padro de carbonato de clcio, com o
pH ajustado para 10+/-0,1 com soluo tampo, e titular contra a soluo
padro de EDTA. Calcular a normalidade real da soluo padro de EDTA:
NEDTA
N CaCO 3 *VCaCO 3
V EDTA gastos
Soluo de Hidrxido de Sdio (NaOH) 6N

Pesar 240g de NaOH e transferir para
um bcker de 1L, adicionar
aproximadamente 800mL de gua e promover a dissoluo. Como a reao do
NaOH com a gua exotrmica, deve-se acomodar o bcker num banho frio;
quando a temperatura da soluo estiver prxima da ambiente, transferir o
contedo para um balo volumtrico de 1L e completar o volume at o
menisco.
23
Indicador Murexida
Pesar 0,2g de indicador Murexida e 100g de Trietanolamina (ou Cloreto de
Sdio), transferir os dois para um almofariz, e triturar com o pistilo, at obter
um material uniforme.
4.4.5. Procedimento
3. Adicionar soluo de NaOH 6N at pH de 12+/-0,1 (aproximadamente 1mL);
4. Adicionar uma ponta de esptula de indicador Murexida;
5. Encher uma bureta de 50mL com EDTA 0,02N
7. Titular at a viragem da cor rsea para o prpura
4.4.6. Clculo
Clcio:
mgCaCO3/L =
N EDTA V 1 EDTAgastos 50000

vol.amostra
4.5. CLORETOS
4.5.1. Introduo
Cloreto, na forma inica de Cl-, um dos ons mais comuns em guas naturais,
esgotos domsticos e em despejos industriais. Mesmo em concentraes
elevadas os cloretos no so prejudiciais sade humana, porm, conferem
sabor salgado a gua; contudo, tal propriedade organolptica no depende
exclusivamente da concentrao de cloretos, sendo funo da composio
qumica global da gua. Assim, guas com at 250mg/L de cloretos tem sabor
salgado, enquanto que outras contendo at 1000mg/L e muito clcio e magnsio
(alta dureza) no apresentam esse gosto.
guas contendo muito cloretos oferecem prejuzo s canalizaes e no so
recomendadas para o uso agrcola.
24
4.5.2. Mtodo de determinao argentomtrico

Princpio do mtodo: uma soluo neutra ou levemente alcalina de cromato de
potssio (K2CrO4) pode ser usado com indicador do ponto final de uma titulao
de Nitrato de prata (AgNO3) contra uma amostra contendo Cloretos.
A reao entre o AgNO3 e o K2CrO4 resulta num precipitado de cor vermelho
tijolo, devido a formao do Ag2CrO4 (cromato de prata), e a reao entre o
AgNO3 e o on Cl- resulta num precipitado branco, devido a formao do AgCl
(cloreto de prata); porm, o produto de solubilidade do cloreto de prata maior
que a do cromato de prata, logo, esse ir ter preferncia na reao, de tal forma
que apenas quando todos ons cloretos tiverem reagidos e sido retirados da
soluo por meio de precipitao, que, a menor quantidade de Nitrato de prata
promover o aparecimento do precipitado do cromato de prata, indicando o ponto
final da reao.
Bureta ;
Pipeta volumtrica;
4.5.4. Reagentes
Soluo padro de Cloreto de Sdio (NaCl) 0,0141N

Secar em estufa a 140o C por 2h aproximadamente 1g de NaCl , aguardar
esfriar em dessecador; em seguida, pesar 0,824g e transferir para um balo
volumtrico de 1L, adicionar gua e promover a dissoluo do sal; completar o
volume do balo.
Soluo indicadora de Cromato de potssio (K2CrO4)

Pesar 50g de cromato de potssio e dissolver em 100mL de gua, adicionar
AgNO3 0,0141N at formar um precipitado vermelho tijolo; deixar em repouso
por 12h, aps isso, filtrar em papel de filtro watman n 40 e transferir para um
balo volumtrico de 1L, completar o volume do balo. (guardar em frasco
mbar).
Soluo padro de Nitrato de prata (AgNO3) 0,0141N

Pesar 2,395g de nitrato de prata, e transferir para um balo volumtrico de 1L,
adicionar gua e promover a dissoluo do sal; completar com gua o volume
do balo. (guardar em frasco mbar). Padronizar com10mL de soluo padro
de cloreto de sdio 0,0141N, tendo o pH ajustado na faixa de 7 a 10, e com
1mL de soluo indicadora de cromato. Titular contra a soluo padro de
25
Nitrato de prata 0,0141N at o ponto final (precipitado vermelho tijolo). Calcular

a normalidade real do nitrato de prata:
NAgNO3
N NaCl *V NaCl
V AgNO 3 gastos
4.5.5. Procedimento
3. Ajustar o pH na faixa de 7 a 10 (usar NaOH ou H2SO4);
4. Adicionar 1mL de indicador de cromato de potssio;
5. Encher uma bureta de 50mL com AgNO3 0,0141N;
7. Titular at o ponto final da reao: aparecimento do precipitado vermelho-tijolo.
4.5.6. Clculo
Cloretos:
mgCl-/L
N AgNO 3 V 1 AgNO 3 gastos 35450

vol.amostra
4.6. CLORO RESIDUAL

4.6.1. Introduo
A clorao de gua de abastecimento e guas poludas serve primeiramente, para
destruir ou desativar microrganismos patognicos; um segundo benefcio advindo
ao uso do cloro, a melhora de caractersticas fsicas, qumicas e organolpticas
da gua, devido a reao do cloro com amnia, ferro, mangans, sulfeto, e outras
substncias orgnicas presentes.
O cloro livre reage com amnia e certos compostos nitrogenados formando o
chamado cloro combinado, constitudo por monocloroaminas, dicloroaminas e
tricloreto de nitrognio; a presena e a concentrao dessas espcies funo
direta da condio de temperatura, pH do meio e da relao inicial de cloronitrognio.
26
A clorao pode produzir efeitos indesejveis, como o aparecimento de subprodutos na forma de THM (trihalometanos) com alto potencial carcinognico, ou
da liberao de gosto e odor, sobretudo, quando da presena de compostos
fenlicos, devido a formao do cloro-fenol (cheiro de peixe podre).
O cloro aplicado, quer na sua forma elementar , quer na forma de hipoclorito (OCl-)
reage com gua sofrendo hidrlise com produo de cloro livre (Cl2), cido
hipocloroso (HOCl) e on hipolorito (OCl-); a produo dessas diversas formas de
cloro depende exclusivamente do pH.
4.6.2. Mtodo de determinao I mtodo iodomtrico
Princpio do mtodo: Cloro pode reduzir a Iodo (I2) livre o iodeto de potssio (KI)
em um pH em torno de 8 ou menor. O I2 livre titulado contra uma soluo padro
de tiossulfato de sdio (Na2S2O3) usando amido como indicador do ponto final da
reao. Realiza-se a titulao em um pH entre 3 e 4 porque a reao no
estequiomtrica numa faixa de pH neutro, no que diz respeito a oxidao do
tiossulfato a sulfato.
Bureta ;
Pipeta volumtrica;
4.6.4. Reagentes
cido actico glacial (concentrado);
Iodeto de potssio (KI) em cristais;
Soluo estoque de Tiossulfato de sdio (Na2S2O3.5H2O) 0,1N

Pesar 25g de Na2S2O3.5H2O e transferir para um balo volumtrico de 1L,
adicionar gua e promover a dissoluo do sal, acrescentar aproximadamente
1mL de clorofrmio, e completar o volume do balo com gua. Padronizar com
10mL de soluo de dicromato de potssio (K2Cr2O7) 0,1N, acrescidos de 1mL
de cido sulfrico concentrado mais cerca de 80mL de gua, deve-se deixar
por 6 minutos o erly no escuro, em seguida, adicionar uma esptula (1g) de KI,
e titular contra soluo de tiossulfato at o aparecimento de uma colorao
amarelo-palha, nesse ponto, adicionar amido e prosseguir a titulao at a
viragem do azul para o incolor. Calcular a normalidade real do tiossulfato:
NNa2S2O3 =
N K 2Cr 2O 7 *V K 2Cr 2O 7
V Na 2 S 2O 3 gastos
27
Soluo padro de Dicromato de potssio (K2Cr2O7) 0,1N

Pesar 4,904g de dicromato de potssio e transferir para um balo
volumtrico de 1L, adicionar gua e promover a dissoluo do sal;
completar o volume do balo.
Soluo Padro de Tiossulfato de Sdio (Na2S2O3.5H2O) 0,025N

Diluir da soluo estoque de tiossulfato de sdio 0,1N 250mL num balo
volumtrico de 1L; completar com gua o volume do balo.
Soluo indicadora de Amido

Dissolver 5g de amido em um pouco de gua, misturar almofariz e pistilo at
formar uma pasta uniforme; transferir para um bcker contendo 1L de gua
fervendo e promover a mistura; aguardar esfriar e sedimentar por 24h; retirar o
sobrenadante e adicionar a ele 1,25g de cido saliclico e 4g de cloreto de
zinco, para preservar a soluo.
4.6.5. Procedimento
3. Ajustar o pH na faixa de 3 a 4 com a adio de 5mL de cido actico glacial;
4. Adicionar 1g (uma esptula) de KI;
5. Manter por 6 minutos o erly no escuro;
6. Encher uma bureta de 50mL com Na2S2O3 0,025N (amostras com alto teor de
cloro residual, deve-se usar uma soluo 0,01N ou mais adequada);
7. Iniciar a titulao, vagarosamente at a cor amarelo palha;
8. Adicionar amido;
9. Prosseguir a titulao at o ponto final da reao: viragem do azul para o
incolor.
4.6.6. Clculo
Cloro:
mgCl2/L
N Na 2 S 2O 3 V 1 Na 2 S 2O 3 gastos 35450
vol.amostra
28
4.6.7. Mtodo de determinao II DPD

princpio do mtodo: o N,N dietil-p-fenilenodiamina (DPD) usado como
indicador de um processo titulomtrico com o sulfato ferroso amoniacal.
possvel, com esse mtodo, identificar as formas livres e combinadas do Cloro.
Contudo, h, nesse mtodo a limitao de ser empregado apenas em amostras
com baixo teores de cloro.
Bureta ;
Pipeta volumtrica;
4.6.9. Reagentes
Soluo tampo de fosfato

Dissolver 24g de hidrogenofosfato de sdio anidro (Na2HPO4) e fosfato
bibsico de potssio (KH2PO4) em aproximadamente 800mL de gua.
Dissolver parte, 0,8g de EDTA sal dissdico em 100mL de gua; aguardar a
dissoluo das solues, e transferi-las para um balo volumtrico de 1L e
adicionar 0,02g de cloreto de mercrio, completar o volume do balo com
gua.
Soluo indicadora de DPD-sulfato

Dissolver 1,5g de DPD-sulfato pentahidratado ou 1,1g de DPD-sulfato anidro
em aproximadamente 800mL de gua, adicionar 8mL de cido sulfrico 1+3 e
0,2g de EDTA sal dissdico; transferir para um balo volumtrico de 1L e
completar o volume do balo com gua. Estocar em frasco mbar.
Soluo padro de Sulfato Ferroso Amoniacal SFA

Dissolver 1,106g de SFA em aproximadamente 800mL de gua, adicionar 1mL
de cido sulfrico 1+3; transferir para um balo volumtrico de 1L e completar
o volume do balo com gua. Padronizar 100mL dessa soluo acrescidos de
10mL de cido sulfrico 1+5 e 5 mL de cido fosfrico concentrado, usando
2mL de soluo de difenilaminassulfonato de brio a 0,1% como indicadora do
ponto final da reao. Titular contra uma soluo padro de dicromato de
potssio at o ponto final, indicado por uma colorao violeta que persiste por
30 segundos. So requeridos, teoricamente, 20mL da soluo de dicromato de
potssio para uma soluo de SFA cuja relao seja de 1mLSFA = 1mgCl2/L.
Iodeto de potssio (KI) em cristais.
29
EDTA sal dissdico.
Soluo de dicromato de potssio (K2Cr2O7)

Dissolver 0,691g de dicromato de potssio em aproximadamente 800mL de
gua, transferir para um balo volumtrico de 1L e completar o volume do
balo com gua.
Soluo indicadora de Difenilaminassulfonato de brio a 0,1%

Dissolver 0,1g do indicador em 100mL gua.
Soluo de arsenito de sdio

Dissolver 5g de arsenito de sdio em 1L de gua. Usar 0,5mL dessa soluo
aps a adio do tampo para cada 100mL de amostra, quando a mesma
apresentar formas de mangans oxidado.
Soluo de tioacetamida
Dissolver 0,25g de tioacetamida em 100mL de gua. Adicionar 0,5mL dessa
soluo em amostras com mais de 0,5mg/L de Cloro combinado,
imediatamente aps a adio do reagente de DPD.
Soluo de Glicina
Dissolver 10g de glicina em 100mL de gua, estocar em cmara fria.
4.6.10. Procedimento para Cloro livre

2. Adicionar, em um erly, 5mL de soluo tampo;
3. Adicionar 5mL de soluo de DPD
4. Adicionar 100mL de amostra;
5. Adicionar 200mg de EDTA;
6. Encher uma bureta com soluo de SFA diludo 5 vezes;
7. Titular at o ponto final da reao, indicado pela cor rsea, anotar o volume A
gasto;
8. Adicionar uma esptula de KI;
9. Titular com SFA, sem zerar a bureta, at a viragem do indicador, anotar o
volume C gasto.
30
4.6.11. Clculos
Cloro livre
mgCl2/L
= (leitura A/5)
Cloro combinado
mgCl2/L
= (C-A)/5
4.7. DIXIDO DE CLORO

4.7.1. Introduo
O dixido de cloro (ClO2) apresenta-se como uma alternativa ao uso do Cloro
como agente desinfetante.
4.7.2. Mtodo de determinao DPD
Princpio do mtodo: anlogo ao j mencionado no item 4.6.7.
Bureta ;
Pipeta volumtrica;
4.7.4. Reagentes
Todos os reagentes requeridos no item 4.6.9;
Soluo de cido sulfrico

Diluir 5mL de cido sulfrico concentrado em 100mL de gua.
Soluo de Bicarbonato de sdio (NaHCO3)

Dissolver 27,5g de NaHCO3 em 500mL de gua.
4.7.5. Procedimento para Dixido de Cloro

1. Homogeneizar a amostra;
31
3. Adicionar 2mL de glicina;

4. Agitar vigorosamente o erly;
5. Em outro erly, adicionar 5mL de soluo tampo e 5mL de soluo de DPD,
juntamente com 200mg de EDTA;
6. Misturar a amostra/glicina no segundo erly;
7. Titular com SFA diludo 5 vezes;
8. Anotar a leitura G
4.7.6. Procedimento para Cloro Livre, Combinado e Clorito
3. Adicionar 5mL de soluo tampo;
4. Adicionar 5mL de soluo de DPD;
5. Adicionar 200mg de EDTA;
6. Titular com SFA diludo 5 vezes
7. Anotar a leitura A;
8. Adicionar 1g de KI;
9. Titular com SFA diludo 5 vezes, sem zerar a bureta;
10. Anotar a leitura C;
11. Adicionar ao erly 1mL de soluo de cido sulfrico;
12. Aguardar 2 minutos;
13. Adicionar 5mL de soluo de Bicarbonato de sdio;
14. Titular com SFA diludo 5 vezes;
15. Anotar a leitura D.
4.7.7. Clculos
Cloro Livre:
mgCl2/L
= (A-G)/5
32
Cloro Combinado:
mgCl2/L
Dixido de cloro
mgClO2/L
= (C-A)/5
= (G/5).1,9
Clorito
mgClorito/L = (D/5) ((C/5) + 4.(G/5))
4.8. SULFETO
4.8.1. Introduo
ons sulfetos (S-2) so encontrados em guas subterrneas e ocorrem
freqentemente em guas residurias oriundas de despejos industriais, da
decomposio da matria orgnica ou da reduo do sulfato (bactrias do tipo
sulfobactrias oxidam compostos contendo enxofre para obterem energia).
Mesmo em baixas concentraes j causa odores na gua e no ar. muito txico,
ataca metais diretamente e corroe tubulaes de concreto por ser oxidado
biologicamente a cido sulfrico nas paredes das tubulaes.
Pode ser dividido em:
Sulfeto total: a poro de sulfeto constituda pelas pores de H2S e HSdissolvidos e de S-2 metlicos do material em suspenso em meio cido;
Sulfeto dissolvido: a poro que permanece na amostra aps remoo do

material em suspenso da mesma.
4.8.2. Mtodo de determinao iodomtrico

Princpio do mtodo: o sulfeto presente na amostra precipitado com acetato de
zinco na forma de Sulfeto de Zinco (ZnS), tal precipitado lavado para retirar-se
eventuais impurezas e transferido para um erlenmeyer onde ser reduzido com
uma soluo em excesso de Iodo (I2) em meio cido; o Iodo (I2) excedente ser
quantificado pela titulao com Tiossulfato de sdio (Na2S2O3) em presena de
amido, constituindo-se uma titulao de retrocesso.
Bureta ;
Pipeta volumtrica;
33
Frasco de DBO;
Mangueira de silicone para sifonamento;
Barra magntica;
Agitador magntico.
4.8.4. Reagentes
Soluo de Hidrxido de sdio (NaOH) 6N

Dissolver 240g de NaOH em 1L de gua.
Soluo de Acetato de zinco 2N

Dissolver 220g de acetato de zinco em um balo volumtrico de 1L.
Soluo de cido clordrico (HCl) 6N 1:1

Dissolver, lentamente, 500mL de HCl concentrado em 500mL de gua.
Soluo padro de Tiossulfato de sdio (Na2S2O3.H2O) 0,025N

Preparar como descrito em 4.6.4.
Soluo padro de Iodo (I2) 0,025N

Dissolver de 20 a 25g de KI em cerca de 100mL de gua, adicionar 3,2g de
Iodo ressublimado e diluir em um balo volumtrico de 1L. Padronizar com
10mL de soluo padro de Tiossulfato de sdio 0,025N, em meio cido (usar
HCL) e em presena de amido. Titular contra a soluo padro de Iodo 0,025N
at a viragem do indicador do incolor para o azul. Calcular a normalidade real
do Iodo:
NI2
N Na 2 S 2O 3 *V Na 2 S 2O 3
V I 2 gastos
Soluo de amido
Preparar como descrito em 4.6.4.
4.8.5. Procedimento
34
2. Transferir a amostra para um frasco de DBO at completar seu volume;

3. Adicionar 9 gotas de acetato de zinco e 6 gotas de NaOH 6N;
4. Tampar o frasco e agitar;
5. Deixar em repouso para sedimentar o precipitado formado;
6. Retirar, com auxlio de um sifo, o sobrenadante;
7. Ressuspender o precipitado com gua;
8. Deixar novamente em repouso para sedimentar o precipitado;
9. Repetir o sifonamento;
10. Ressuspender novamente o precipitado com gua (caso o sobrenadante ainda
esteja sujo, repetir os itens de 8 a 10);
11. Transferir o contedo do frasco para um erly de 500mL;
12. Adicionar 10mL de soluo padro de Iodo 0,025N;
13. Adicionar 2mL de HCl 6N para cada 200mL de amostra (caso a amostra no
demonstre ter Iodo em excesso caracterizado pela colorao amarelo tpico
de iodo adicionar mais 10mL de soluo padro de Iodo 0,025N);
14. Adicionar amido e titular contra soluo de Tiossulfato de sdio 0,025N, at a
viragem do indicador do azul para o incolor.
4.8.6. Clculos
Sulfeto total:
mgS-2/L
A B 16000
vol.amostra
onde:
A: (NI2 * VI2);
B: (NNa2S2O3 * VNa2S2O3);
Vol. amostra = volume do frasco de DBO.
35
4.9. SULFATOS
4.9.1. Introduo
O nion Sulfato (SO4-2) um dos ons mais abundantes na natureza. Surge nas
guas subterrneas atravs da dissoluo de solos e rochas, como o gesso
(CaSO4) e o sulfato de magnsio (MgSO4), bem como pela oxidao da pirita
(sulfeto de ferro FeS).
Nas guas de abastecimento pblico, o sulfato deve ser controlado uma vez pode
provocar efeitos laxativos, sendo o padro de potabilidade fixado em 400mg/L.
Nas guas de abastecimento industrial, o sulfato pode causar incrustaes em
caldeiras e trocadores de calor.
4.9.2. Mtodo de determinao gravimtrico
princpio do mtodo: o sulfato precipitado em presena de HCl a sulfato de brio
(BaSO4), pela adio de Cloreto de brio (BaCl2) soluo.
O precipitado cuidadosamente mantido prximo temperatura de ebulio, e,
aps um perodo de digesto filtrado em um cadinho de porcelana previamente
tarado,
e conduzido a altas temperaturas (800o C), sendo esfriado em
dessecador, e novamente pesado (cadinho+BaSO4). Por diferena de peso, temse a massa de Sulfato presente na amostra.
Bcker de 250mL;
Bagueta;
Pipetas volumtricas;
Cadinho de goch;
Kitassato;
Cpsula de porcelana;
Bomba de vcuo;
Mufla;
Banho-maria;
Balana analtica.
36
4.9.4. Reagentes
Soluo de cido clordrico (HCl) 6N 1:1;

Dissolver 500mL de cido clordrico concentrado em 500mL de gua.
Soluo de Cloreto de brio (BaCl2)

Dissolver 100g de cloreto de brio em 500mL de gua, transferir para um balo
volumtrico de1L e completar o volume do balo.
Soluo reagente de cido ntrico-nitrato de prata

Dissolver 8,5g de AgNO3 e 0,5ml de cido ntrico concentrado em 500mL de
gua.
4.9.5. Procedimento I remoo de slica (para amostras com conc. de slica

superior a 25mg/L)
2. Pipetar 100mL da amostra e transferir para uma cpsula de porcelana;
3. Levar ao banho-maria at secura;
4. Adicionar 1mL de cido clordrico concentrado pelas paredes da cpsula;
5. Levar novamente secura;
6. Conduzir a cpsula para a estufa a 180o C para completar a evaporao da
gua;
7. Adicionar 2mL de gua quente e mais 1mL de HCl concentrado;
8. Levar novamente secura no banho-maria;
9. Adicionar mais 2mL de HCl concentrado;
10. Diluir com gua quente;
11. filtrar e lavar o papel de filtro com gua quente (tomar cuidado para no
extrapolar dos 100mL);
12. Combinar os filtrados e prosseguir a anlise de sulfatos.
4.9.5.1 Procedimento II determinao de sulfato em amostras com at
50mg/L
1. Coletar 100mL de amostra;
37
2. Ajustar o pH para 4,5 5,0 com HCl 6N;

3. Adicionar mais 1mL de HCl;
4. Aquecer at ebulio;
5. Adicionar lentamente, seguida de agitao (lenta), soluo de Cloreto de brio,
at precipitar BaSO4 (precipitado branco);
6. Adicionar mais 2mL de soluo de BaCl2;
7. Levar ao banho-maria e manter a uma temperatura de 80-90o C por
aproximadamente 2h;
8. Paralelamente, preparar o cadinho de goch, levando-o a mufla por 15min a
800o C, esperar esfriar em dessecador, pesar e obter o p1;
9. Aps a digesto em banho-maria, filtrar a amostra em cadinho de goch
previamente preparado;
10. Lavar vrias vezes o precipitado;
11. testar presena de Cloretos no filtrado, adicionando soluo reagente de nitrato
de prata-cido ntrico (presena de cloretos = precipitado branco de Cloreto de
prata AgCl);
12. Lavar o cadinho at no acusar mais a presena de Cl-;
13. Levar mufla por 1h temperatura de 800o C;
14. Esfriar em dessecador e pesar, obtendo p2.
4.9.6. Clculos
Sulfato:
mgSO4-2/L
( p 2 p1) 411,6
vol.amostra
4.10. FLUORETO
4.10.1. Introduo
Uma concentrao de aproximadamente 1mg/L de fluoreto (F-0 em gua potvel,
reduz
efetivamente a ocorrncia de crie dentria, contudo, em uma
concentrao maior, pode causar prejuzo sade humana, sobretudo em
crianas, s quais atacar o esmalte do dente causando o aparecimento de
38
manchas escuras de carter irreversvel, caracterizando a doena Fluorose

dentria.
Tal efeito nocivo comea a aparecer j em concentraes da ordem de 1,4 ou
1,6mg/L de fluoreto, da a necessidade do controle rgido do processo de
fluoretao nas Estaes de Tratamento de gua.
4.10.2. Mtodo de determinao eletrodo on-seletivo
Princpio do mtodo: o eletrodo de fluoreto um sensor de on seletivo. Trata-se
de um eletrodo de estado slido com uma membrana de fluoreto de lantnio
tratado com terras raras para aumentar a sua condutividade. Responde s
mudanas na concentrao de fluoreto na soluo, sendo milhares de vezes mais
sensvel para fluoreto que para outros nions presentes na soluo.
A atividade do ons fluoreto depende da fora inica total da soluo, do pH e das
substncias capazes de complexar o fluoreto. A adio de um tampo apropriado
mantm a fora inica uniforme, ajusta o pH e destri os complexos. Dessa forma,
o eletrodo fornece uma resposta precisa em termos de concentrao de fluoreto
O eletrodo calibrado com solues padres de concentrao conhecida, da
ordem de 0,5 a 5,0mgf-/l. A funo especfica dessas solues de fixar a posio
e a inclinao da reta que obtida plotando-se concentrao por mV (lida no
equipamento); o ideal que o sloope resultante situe-se na faixa de 58mV a
20oC.
O eletrodo detecta apenas a forma de fluoreto ionizada, isto , a forma livre. Por
esse motivo torna-se fundamental o uso da soluo tampo denominada TISAB
III, para eventual ajuste de pH e liberao dos ons F-.
Bcker de 250mL;
Barra magntica;
Agitador magntico;
Balo volumtrico;
Potencimetro;
Eletrodo de on especfico de F-
39
4.10.4. Reagentes
Soluo estoque de Fluoreto de sdio (NaF)

Dissolver 0,221g de NaF anidro em 500mL de gua, transferir para um balo
volumtrico de 1L e completar o volume. Esta soluo apresenta 100mgF-/L.
Soluo padro de Fluoreto de sdio (NaF)

Diluir 10mL da soluo estoque de NaF em um balo volumtrico de 1L,
completar o volume do balo com gua.
Soluo tampo TISAB III

Adicionar 170g de Nitrato de sdio, 68g de acetato de sdio trihidratado e
92,4g de citrato de sdio dihidratado, em 500mL de gua; promover a
dissoluo dos sais, e transferir para um balo volumtrico de 1L, completar o
volume do balo com gua. possvel comprar a soluo TISAB III j pronta,
da marca ORION, nmero de catlogo: 940911.
4.10.5. Procedimento preparo da curva de calibrao

1. Diluir num balo volumtrico de 100mL, da soluo estoque de NaF, volumes
suficientes para produzir concentraes de 0,5 a 5mg/L de F:
Conc. F(mg/L)
Volume (mL) da soluo padro diludo

num balo volumtrico de 100mL
0,5
10
20
30
40
50
2. Pipetar 50mL de cada padro e transferir para um bcker de 100mL;

3. Adicionar 5mL de soluo tampo TISAB III;
4. Manter aproximadamente 3 minutos em agitao;
5. Introduzir o eletrodo de on especfico para F- e fazer a leitura (aguardar a
estabilizao da leitura);
40
6. Plotar num grfico (usar os rescursos do Excell) as leituras de Mv em

funo da concentrao (mg/L), para obter uma curva semilogartmica.
7. Obter a equao da reta;
8. O coeficiente de correlao (R2) deve ser superior a 98%.
4.10.6. Procedimento determinao da concentrao de Fluoreto
2. Pipetar 50mL e transferir para um bcker de 100mL;
3. Adicionar 5mL de soluo tampo TISAB III amostra;
4. Manter em agitao por, pelo menos, 3 minutos;
5. Introduzir o eletrodo de on especfico de F-;
6. Manter a agitao constante enquanto o equipamento faz a leitura;
7. Aguardar a estabilizao e anotar a leitura obtida;
4.10.7. Clculos
Fluoreto
mgF-/L
=usar a equao da reta obtida com a construo da curva padro.
4.11. FENOL
4.11.1. Introduo
Os fenis e os hidrxidos derivados do anel benznico esto presentes em
esgotos domsticos e efluentes industriais, inclusive em guas superficiais usadas
para fins de potabilidade. Em reao com o cloro, forma o composto clorofenol de
odor desagradvel, gerando um problema para as ETAs, quando de sua
presena, devido ao processo de clorao. Os fenis podem ser removidos da
fase lquida por superclorao, tratamento com dixido de cloro ou com
cloraminas, ozonizao e adsoro em carvo ativado, tambm mostram-se
eficientes na sua remoo, assim como o tratamento biolgico.
4.11.2. Mtodo de determinao mtodo de extrao com clorofrmio.
Princpio do mtodo: uma amostra previamente destilada (a fim de se retirar os
interferentes) contendo fenis, pode reagir com 4-aminoantipirina em um pH da
faixa de 7,9 +/-0,1 em presena de ferricianeto de potssio, originando um
41
pigmento colorido de tintura de antipirina. Este pigmento pode ser extrado da fase
aquosa com clorofrmio (CHCl3) e sua absorbncia medida no comprimento de
onda de 460nm.
Este mtodo indicado para amostras cuja concentrao de fenol variem de 0,1 a
250g/L
Bcker de 600mL;
Funil de separao de 1L;
Funil de filtrao;
Balo de destilao para fenol;
Condensador do tipo reto;
Bales volumtricos;
Papel de filtro Watman nmero 40;
Kitassato;
Chapa de aquecimento;
pHmetro;
bomba de vcuo;
espectrofotmetro UV/VISVEL;
banho-maria.
4.11.4. Reagentes
Soluo estoque de Fenol

Dissolver 1g de fenol em aproximadamente 500mL de gua, promover a
dissoluo e transferir (com cuidado, evitando o contato da soluo com a
pele) para um balo volumtrico de 1L, completar o volume do balo com
gua. Padronizao:
Pipetar 50mL da soluo estoque de Fenol e transferir para um erly de
500mL;
42
Adicionar 50mL de gua;

Adicionar 10mL de soluo de Bromato-brometo;
Imediatamente adicionar 5mL de cido clordrico concentrado;
Caso no se forme uma colorao marrom, caracterstica da presena de
bromato-brometo em excesso, adicionar mais 10mL da soluo (junto a
essa colorao, deve ter sido formado um precipitado floculoso branco de
brometo de fenol) geralmente, so necessrios 40mL de sol.
bromato/brometo;
Adicionar 1g de Iodeto de potssio (uma esptula);
Fazer um branco seguindo as mesmas etapas;
Titular com Tiossulfato de sdio 0,025N, usando amido como indicador
Calcular a concentrao real da soluo estoque:
mgFenol/L
=7,842 . [(A . B) C]
onde:
A :volume (mL) de soluo padro de Tiossulfato de sdio utilizados na
titulao do branco;
B :volume (mL) de soluo de bromato-brometo utilizados na amostra dividido
por 10;
C :volume (mL) de soluo padro de Tiossulfato de sdio utilizados na
titulao da amostra.
Soluo padro de Fenol

Diluir a soluo estoque (1g/L) 1000 vezes, obtendo uma concentrao de
1mg/L, para tanto, pipetar 1mL da soluo estoque e transferir para um balo
volumtrico de 1L, completar o volume do balo com gua. Essa soluo deve
ser preparada com, no mximo, 2h de antecedncia ao seu uso.
Soluo de Bromato-brometo
Dissolver 2,784g de Bromato de potssio anidro (KBrO3) em aproximadamente
500mL de gua, adicionar em seguida 10g de Brometo de potssio (KBr),
promover a dissoluo dos sais, transferir para um balo volumtrico de 1L , e
completar o volume do balo com gua.
Soluo de cido clordrico (HCl) concentrado
43
Soluo padro de Tiossulfato de sdio

Preparar como descrito no item 4.6.4.
Soluo de Amido
Preparar como descrito no item 4.6.4.
Soluo de Hidrxido de amnio (NH4OH) 0,5N

Diluir 35mL de NH4OH concentrado em um balo volumtrico de 1L, completar
o volume do balo com gua.
Soluo tampo de Fosfato

Dissolver 104,5g de Fosfato de potssio bibsico (K2HPO4) E 72,3g de Fosfato
de potssio monobsico (KH2PO4) em aproximadamente 800mL de gua, e
transferir para um balo volumtrico de 1L, completar o volume do balo com
gua. O pH dessa soluo deve ser da ordem de 6,8.
Soluo de 4-aminoantipirina
Dissolver 2g de 4-aminoantipirina em gua e transferir para um balo
volumtrico de 100mL, completar o volume do balo com gua preparar no
dia de uso.
Soluo de Ferricianeto de potssio (K3Fe(CN)6)

Dissolver 8g de Ferricianeto de potssio em gua e transferir para um balo
volumtrico de 100mL, completar o volume do balo com gua; estocar em
frasco mbar, refrigerado preparar semanalmente.
Clorofrmio (CHCl3) concentrado;
Sulfato de sdio anidro (Na2SO4);
Iodeto de potssio (KI)
cido Fosfrico (H3PO4) 1+9

Diluir 10mL de cido Fosfrico em 100mL de gua.
Soluo indicadora Alaranjado de metila

Dissolver 0,2g de alaranjado de metila em 50mL de gua quente, aps esfriar,
filtrar se necessrio e diluir num balo volumtrico de 100mL com gua. No pH
3,1 apresenta uma colorao levemente vermelha, j num pH de 4,4,
apresenta uma colorao laranja amarelada.
44
Soluo de cido Sulfrico 1N

Preparar como descrido no item 4.2.4.
Cloreto de sdio (NaCl).
Soluo de Hidrxido de sdio 2,5N

Dissolver 100g de NaOH em 800mL de gua, transferir para um balo
volumtrico de 1L e completar o volume do balo.
4.11.5. Procedimento extrao de interferentes

2. Transferir 500mL para um bcker de 600mL;
3. Ajustar o pH para 12,5 com NaOH 2,5N;
4. Transferir para um funil de separao de 1L;
5. Adicionar 50mL de clorofrmio;
6. Agitar vigorosamente;
7. Aguardar separar as fases;
8. Extrair a fase do clorofrmio e descartar;
9. Transferir o restante para um bcker de 600mL e manter em banho-maria at a
soluo ficar lmpida;
10. Ajustar o pH para 4 com cido fosfrico 1+9;
4.11.6. Procedimento destilao
1. Transferir 500mL da amostra com pH ajustado para 4 com cido Fosfrico para
um balo de destilao de Fenol ;
2. Adicionar prolas de vidro para controlar a ebulio;
3. Conectar a um destilador reto;
4. Manter a destilao, coletando o destilado num bcker de 600mL;
5. Ao completar 450mL de destilado, adicionar 50mL de gua quente no balo de
destilao e prosseguir at obter 500mL de destilado;
45
Obs.: caso a destilao no fornea um destilado lmpido:

1. Adicionar gotas de indicador alaranjado de metila ao destilado;
2. Ajustar o pH com cido sulfrico 1N (at a cor vermelha);
4. Adicionar 150g de NaCl;
6. Adicionar 5 pores de clorofrmio, usando 40mL na primeira e 25mL nas
seguintes, intercalando-as com vigorosa agitao;
7. Transfira a fase do clorofrmio para outro funil de separao de 1L;
8. Adicione 3 pores de NaOH 2,5N, usando 4mL na primeira e 3mL nas
seguintes, intercalando-as com vigorosa agitao;
9. Separar o extrato alcalino e levar para o banho-maria afim de remover o
clorofrimio residual;
10. Diluir para 500mL.
4.11.7. Procedimento mtodo de extrao com clorofrmio baixas
concentraes de Fenol
1. Adicionar a amostra destilada, 12mL de NH4OH 0,5N e ajustar o pH para 7,9
+/- 0,1 com o tampo de fosfato;;
3. Adicionar 3mL de soluo de 4-aminoantipirina;
5. Adicionar 3mL de soluo de Ferricianeto de potssio;
7. Deixar o funil de separao em repouso por 15 minutos;
8. Adicionar 25mL de clorofrmio;
9. Agitar 10 vezes vigorosamente (deixando o ar sair entre cada agitao);
10. Extrair a fase do clorofrmio, passando-a por um meio filtrante contendo 5g de
Sulfato de Sdio anidro;
46
11. Ler o filtrado num espectrofotmetro, num comprimento de onda de 460nm,

numa cubeta de caminho tico de 1cm.
4.11.8. Procedimento preparao da curva padro (extrao com
clorofrmio)
1. Os padres devem ser preparados com, no mximo, 2h de antecedncia;
2. Diluir num balo volumtrico de 250mL, da soluo padro de Fenol (1mg/L),
volumes suficientes para produzir concentraes de 1 a 10g/L:
Conc.
Fenol
(g/L)

2,5
10
15
20
10
25
3. Transferir para um bcker de 600mL e diluir os padres para 500mL com

gua;
4. Ajustar o pH para 7,9 +/- 0,1 usando as solues de NH4OH e tampo de
fosfato;
5. Adicionar 3mL de 4-aminoatipirina;
6. Adicionar 3mL de ferricianeto de potssio;
8. Ler no espectrofotmetro num comprimento de onda de 460nm;
9. Plotar num grfico as absorbncias obtidas em funo da concentrao dos
padres;
11. coeficiente de correlao (R2) deve ser superior a 98%.
47
4.11.9. Procedimento mtodo direto altas concentraes de Fenol

1. Aps a destilao, pipetar 100mL do destilado e transferir para um bcker de
250mL;
2. Adicionar 2,5mL de NH4OH 0,5N;
3. Adicionar 3mL de tampo de Fosfato;
4. Ajustar o pH para 7,9 +/- 0,1 com NH4OH;
6. Adicionar 1mL de soluo de ferricianeto de potssio;
8. Ler em espectrofotmetro num comprimento de onda de 500nm.
9. Anotar o valor da absorbncia da amostra.
4.11.10. Procedimento preparao da curva padro (mtodo direto)
2. Diluir a soluo estoque de Fenol (1g/L) para 100mg/L (diluir 10x);
3. Diluir num balo volumtrico de 100mL, da soluo de Fenol (100mg/L),
volumes suficientes para produzir concentraes de 1 a 5 mg/L.
Conc.
Fenol
(mg/L)

4. Transferir para um bcker de 250mL;

5. Adicionar 2,5mL de NH4OH 0,5N;
6. Adicionar 3mL de tampo de Fosfato;
48
7. Ajustar o pH para 7,9 +/- 0,1 com NH4OH;

9. Adicionar 1mL de soluo de ferricianeto de potssio;
11. Ler em espectrofotmetro num comprimento de onda de 500nm.
12. Plotar num grfico as absorbncias obtidas em funo das concentraes dos
padres.
4.11.11. Clculos
Fenol
mg ou g Fenol/L
=usar a equao da reta obtida com a construo da curva

padro.
4.12.RESDUOS
4.12.1. Introduo
Resduos ou Slidos so todas as matrias suspensas ou dissolvidas na gua,
nos despejos domsticos ou industriais.
Pode-se interpretar o termo slido como sendo toda a matria que permanece
como resduo aps evaporao, secagem ou calcinao, a uma temperatura
preestabelecida e por um tempo fixado.
Os slidos de uma gua podem ser classificados de acordo com o fluxograma
disposto abaixo:
Slidos Totais
Slidos em
Suspenso Totais
Slidos
Dissolvidos Totais
De acordo com o tratamento trmico efetuado na amostra, pode-se, ainda,

fragmentar os slidos em termos de fixos e volteis; sendo que o termo
slidos fixos aplicado ao resduo total, em suspenso ou dissolvido, aps
aquecimento e secagem por um perodo especfico e a uma temperatura
49
especfica. A massa perdida por ignio chamada de slidos volteis; a

determinao dessas pores no permite destinguir com preciso entre matria
orgnica e inorgnica, uma vez que a perda por ignio no envolve apenas a
matria orgnica, podendo ser em razo da decomposio ou volatilizao de
vrios sais minerais.
4.12.2. Mtodo de determinao mtodo gravimtrico.
Princpio do mtodo: a gravimetria baseia-se na diferena entre massa, dessa
forma, a determinao das vrias formas de slidos prende-se a diferena entre a
massa seca e a massa mida, em relao ao volume de amostra disposta no
teste.
Bomba de Vcuo;
Balana analtica;
Manifould;
Dessecador;
Estufa;
Mufla;
Pina de Mohr;
Pina simples e esptula;
Cpsula de porcelana de 80mL de capacidade;
Cpsula de porcelana de 130mL de capacidade;
Kitassato;
Membrana de filtrao de 1,2m (GF/C);
Membrana de filtrao de 0,45m;
Pipeta graduada e volumtrica;
Bcker;
Cone Imhoff.
50
4.12.4. Procedimento (A) Slidos Totais

1. Calcinar a cpsula de porcelana (130 mL), na mufla a 550 C 50 C por 1
hora;
2. Deixar resfriar em dessecador;
3. Tarar, anotando o peso P0;
4. Retirar uma alquota de amostra e passar para um bcker de 600mL;
5. Manter a amostra sob agitao;
6. Retirar, com balo volumtrico ou pipeta volumtrica, um volume prdeterminado de amostra;
7. Transferir para a cpsula;
8. Transportar, manuseando com luvas, a cpsula at a estufa;
9. Deixar em estufa 103-105 C at peso constante (24 horas);
10. Retirar a cpsula da estufa, com auxlio de uma pina de Mohr, e deixar esfriar
em dessecador;
11. Pesar e anotar o peso P1.
4.12.5. Procedimento (B) Slidos em Suspenso Totais
1. Calcinar a membrana de GF/C umedecida dentro de uma cpsula de porcelana
de 80mL, na mufla a 550 C 50 C por 15minutos;
6. Retirar, com balo volumtrico ou pipeta volumtrica,
determinado de amostra;
um volume pr-
7. Acondicionar a membrana tarada num sistema de filtrao - manifould (usar

pinas para manusear a membrana);
8. Passar a amostra pelo sistema de filtrao e acionar o vcuo;
9. Aguardar o trmino da filtrao;
51
10. Lavar, com gua destilada, as paredes do copo de filtrao;

11. Retirar a membrana, com uma pina, e acomod-la na cpsula, levando-a at
a estufa;
12. Deixar em estufa 103-105 C at peso constante (aproximadamente 2h);
13. Retirar a cpsula da estufa e deixar esfriar em dessecador;
4.12.6. Procedimento (C) Slidos em Dissolvidos Totais
1. Calcinar a cpsula de porcelana (130 mL), na mufla a 550 C 50 C por 1
hora;
6. Montar o sistema de filtrao utilizando um Kitassato e aparato de filtrao;
7. Acomodar uma membrana de GF/C;
8. Filtrar um volume pr-determinado de amostra;
9. Retirar do filtrado, com auxlio de um balo volumtrico ou pipeta volumtrica,
um volume pr-determinado de amostra;
10. Transferir para a cpsula previamente tarada;
11. Transportar, manuseando com luvas, a cpsula at a estufa
12. Deixar em estufa 180 +/-2 C at peso constante (24 horas);
13. Retirar a cpsula da estufa, com auxlio de pina de Mohr, e deixar esfriar em
dessecador;
4.12.7. Procedimento Slidos Fixos e Volteis
1. Acondicionar os resduos dos mtodos A, B e C (cpsulas e membranas) na
mufla a 550oC;
52
2. Manter a essa temperatura por aproximadamente 20 minutos;

3. Retirar, com auxlio de uma pina de Mohr, e deixar esfriar em dessecador;
4. Pesar e anotar o P2.
4.12.8. Clculos
Slidos Totais :
ST (mg/L)
Slidos Totais Fixos:
STF (mg/L) =
P1 P0
. 1000
vol.amostra ( L)
P2 P0
. 1000
vol.amostra(L)
Slidos Totais Volteis:
STV (mg/L) = ST-STF
Slidos em Suspenso Totais:
SST (mg/L)
Slidos em Suspenso Fixos:
SSF (mg/L) =
P1 P 0
. 1000
vol.amostra( L)
P2 P0
. 1000
vol.amostra(L)
Slidos em Suspenso Volteis:
SSV (mg/L) = SST-SSF
Slidos Dissolvidos Totais:
SDT (mg/L) =
P1 P0
.1000
vol.amostra (L)
Slidos Dissolvidos Fixos:
SDF (mg/L) =
P2 P0
. 1000
vol.amostra(L)
53
Slidos Dissolvidos Volteis:
SDV (mg/L) = ST-STF
4.13. DEMANDA QUMICA DE OXIGNIO (DQO)

4.13.1. Introduo
Demanda Qumica de Oxignio (DQO) definida como a quantidade de oxignio
necessria para oxidar quimicamente a matria orgnica e inorgnica oxidvel de
uma determinada gua.
O Dicromato reduzido a on Cromo trivalente (Cr+3) mediante reao com a
matria oxidvel presente na amostra, em presena de cido Sulfrico (H2SO4),
sendo a reao O parmetro DQO largamente empregado na medida de
poluentes presentes em guas e esgotos; seu valor pode ser correlacionado com
outros parmetros, como, p.ex., Demanda Bioqumica de Oxignio (DBO).
4.13.2. Mtodo de determinao Refluxo Aberto.
Princpio do mtodo: a matria orgnica/inorgnica oxidvel oxidada em meio
cido (H2SO4) por um forte agente oxidante (K2Cr2O7) em excesso conhecido num
condensador de refluxo do tipo Friedrichs. Toda reao catalisada por Sulfato de
Prata (Ag2SO4) e calor.
Aps a digesto o excesso de Dicromato titulado contra uma soluo de Sulfato
Ferroso Amoniacal SFA (Fe(SO4)2(NH4)2), e assim determina-se a quantidade
de oxidante consumida na reao; tal quantidade ser expressa em termos
equivalentes de oxignio. O tempo ideal para a digesto de 2 horas.
Existe uma proporo a ser respeitada entre os reagentes e amostra, que da
ordem de: 1(dicromato):2(amostra):3(cido sulfrico).
Como nos esgotos existe uma grande quantidade de ons Cloretos, necessrio a
adio de Sulfato de Mercrio (HgSO4), para que assim precipite o Cloreto de
Mercrio (HgCl2) e no haja interferncia no consumo de dicromato.
Chapa de aquecimento contendo condensadores Friedrichs;
Balo de fundo chato de 500mL;
Prolas de vidro para controlar ebulio;
Esptulas;
54
Balo volumtricos;
Dispenser;
Proveta;
Bureta de 50mL.
4.13.4. Reagentes
cido Sulfrico com Sulfato de Prata:

Adicionar 10g de Sulfato de Prata em 1L de cido Sulfrico concentrado.
Deixar um dia para a dissoluo.
Soluo de Dicromato de Potssio 0,25N:

Dissolver 12,259g de Dicromato de Potssio p.a., previamente seco a 150oC
por 2 horas, em aproximadamente 800mL de gua destilada, transferir para um
balo volumtrico de 1L e completar o menisco.
Soluo de Dicromato de Potssio 0,025N:

Diluir 100mL da soluo de Dicromato de Potssio 0,25N em um balo de 1L,
completar o volume com gua destilada.
Soluo de Sulfato Ferroso Amoniacal (SFA) 0,25N:

Dissolver 98g de SFA em aproximadamente 800mL de gua destilada,
adicionar 20mL de cido Sulfrico concentrado, aguardar esfriar e transferir
para um balo volumtrico de 1L, completar o volume com gua destilada.
Padronizao:
Adicionar 10mL de Dicromato de Potssio 0,25N num erly;
Elevar o volume do erly para 100mL com gua destilada;
Adicionar, com um Dispenser, 30mL de cido Sulfrico;
Aguardar esfriar;
Adicionar de 3 a 6 gotas de indicador Ferroin;
Titular com a soluo de SFA at a viragem do indicador (verde para
marrom).
Calcular a Normalidade da soluo de SFA:
55
N(SFA)
vol.dicromato(mL)
N (dicromato)
vol.gasto de SFA(mL)
Soluo de Sulfato Ferroso Amoniacal (SFA) 0,025N:

Diluir 100mL da soluo de SFA 0,25N num balo volumtrico de 1L e
completar o volume com gua destilada. Padronizar da mesma forma descrita
para o SFA 0,25N, com uma alterao: utilizar a Soluo de Dicromato de
Potssio 0,025N.
Soluo Indicadora de Ferroin:

Dissolver 1,485g de 1,10 fenantrolina monohidratada e 695mg de Sulfato
Ferrosos heptahidratado em 100mL de gua destilada;
Sulfato de Mercrio
Soluo Padro de Hidrogenoftalato de Potssio (HFP):

Dissolver 425mg de HFP, previamente seco a 110oC por aproximadamente 2
horas, em 800mL de gua destilada, transferir para um balo volumtrico de
1L, e completar o volume. Essa soluo apresenta um valor de DQO de
500mgO2/L.
4.13.5. Procedimento amostras com DQO acima de 50mgO2/L

1. Misturar a amostra no frasco de coleta;
2. Retirar pelo menos 200 mL num bcker de 250 mL;
3. Homogeneizar a amostra com auxlio de agitador magntico;
4. Em um balo de fundo chato (500 mL), introduzir 1 g de Sulfato de Mercrio
(Hg2SO4) e uma poro de prolas de vidro;
5. Com o Dispenser, adicionar 25 mL de H2SO4 / Ag2SO4 ;
6. A seguir pipetar 25 mL de soluo de K2Cr2O7 0,25N e introduzir no balo;
7. Com o auxlio de uma pipeta, transferir 50 mL de amostra para o balo e
misturar (amostras com DQO superior a 300mgO2/L precisam ser diludas);
8. Adicionar, com o Dispenser, mais 50 mL de H2SO4/ Ag2SO4 e homogeneizar
bem;
9. Conectar o balo no condensador de refluxo;
56
10. Seguindo os mesmos procedimentos, fazer anlise de um branco com gua

destilada;
11. Deixar duas horas em refluxo;
12. Findas as duas horas, retirar e adicionar, com uma proveta de 250 mL, 150 mL
de gua destilada;
13. Esperar at a temperatura do contedo do balo atingir a temperatura
ambiente;
14. Adicionar soluo de sulfato ferroso amoniacal (SFA) 0,25N em uma bureta de
50 mL;
15. Adicionar aproximadamente 6 gotas de soluo Indicadora Ferroin no balo;
16. Titular, com o auxlio de um agitador magntico, at a viragem do verdeazulado para o marrom;
17. Anotar o volume gasto.
4.13.6. Procedimento amostras com DQO abaixo de 50mgO2/L
1. Seguir os mesmos passos do procedimento 4.13.5, trocando tanto o SFA como
o Dicromato 0,25N, pelos respectivos reagentes 0,025N.
4.13.7. Clculo:
DQO =
( A B ).N SFA .8000

ml amostra
Onde,
A = ml SFA gastos no branco;
B = ml SFA gastos na amostra;
NSFA = Normalidade real do SFA;
VSFA = Volume gasto de SFA (ml);
NK2Cr2O7 = Normalidade da soluo de Dicromato de Potssio.
4.14. DEMANDA BIOQUMICA DE OXIGNIO (DBO)

4.14.1. Introduo
57
A Demanda Bioqumica de Oxignio (DBO) uma teste emprico no qual

procedimentos padronizados de laboratrio so usados para determinar a
quantidade de oxignio relativa em guas naturais, efluentes domsticos e
industriais.
O teste de DBO empregado para determinar os nveis de poluio, para avaliar
cargas poluidoras e para avaliar a eficincia de um determinado sistema de
tratamento.
Pode-se relacionar os valores obtidos no teste de DBO com os obtidos nos testes
de DQO, sendo que, teoricamente, para esgotos domsticos, os valores de DQO
so duas vezes os de DBO.
4.14.2. Mtodo de determinao Teste de DBO5, 20 (5dias, 20oC )
Princpio do mtodo: grande parte dos organismos vivos dependem, direta ou
indiretamente, de oxignio para manter seus processos metablicos que
produzem energia necessria para o seu crescimento e reproduo.
Chama-se de organismos aerbios queles que dependem exclusivamente do
oxignio da forma livre para mineralizao da matria orgnica, resultando como
produtos finais substncias inorgnicas mais simples tais como o CO2, NH3, H2O
etc...
A matria orgnica presente nas guas naturais e nos efluentes domsticos e
industriais tende a ser mineralizada naturalmente pelos microrganismos aerbios
existentes, consumindo oxignio dissolvido no meio aquoso. O teste de DBO tem
por objetivo, determinar essa quantidade de oxignio consumido, e assim,
relacionar com a quantidade de matria orgnica biodegradvel presente na
amostra.
O mtodo usualmente empregado para a determinao da DBO o da diluio,
incubao por um perodo de 5 dias a 20oC, com a determinao dos nveis
iniciais e finais de oxignio atravs do mtodo da Azida modificado.
Para garantir uma melhor eficincia no metabolismo dos microrganismos
envolvidos no teste, adicionado ao frasco de incubao, solues nutritivas e
uma soluo tampo, a fim de garantir um pH neutro de 6,5 a 7,5 (chamada de
gua de Diluio).
importante frisar que, durante os 5 dias do teste, as amostras ficaro num
ambiente desprovido de luz, fim de evitar o aparecimento de seres clorofilados
fotossintticos.
Incubadora (termo-regulvel);
58
Oxmetro;
Frascos de DBO;
Bales volumtricos;
Bckeres;
Erlenmeyer;
Bureta de 50mL;
Garrafo para gua de diluio provido de sistema de sifo.
4.14.4. Reagentes
Soluo Tampo de Fosfatos (A):

Dissolver em aproximadamente 600mL de gua destilada:
8,5g de fosfato monobsico de potssio (KH2PO4);
21,75g de fosfato bibsico de potssio (KHPO4);
33,4g de fosfato bibsico de sdio heptahidratado (Na2HPO4.7H2O);
1,7g de cloreto de amnio (NH4Cl)
transferir para um balo volumtrico de 1L e completar o volume com gua
destilada; tal soluo deve ser guardada em baixas temperaturas e na
ausncia de luz.
Soluo de Sulfato de Magnsio (MgSO4) (B):

Dissolver 22,5g de sulfato de magnsio heptahidratado em aproximadamente
800mL de gua, transferir para um balo volumtrico de 1L e completar o
volume; tal soluo deve ser guardada em baixas temperaturas e na ausncia
de luz.
Soluo de Cloreto de Clcio (CaCl2) (C):

Dissolver 27,5g de cloreto de clcio anidro em aproximadamente 800mL de
gua, transferir para um balo volumtrico de 1L e completar o volume; tal
soluo deve ser guardada em baixas temperaturas e na ausncia de luz.
Soluo de Cloreto Frrico (FeCl3) (D):
59
Dissolver 0,25g de cloreto frrico hexahidratado em aproximadamente 800mL

de gua, transferir para um balo volumtrico de 1L e completar o volume; tal
soluo deve ser guardada em baixas temperaturas e na ausncia de luz.
gua de Diluio
Adicionar a um garrafo previamente limpo e estril gua destilada de acordo
com a necessidade a ser empregada no teste; manter o contedo desse
garrafo em aerao por, no mnimo, 2 horas; deixar em repouso por
aproximadamente 30 minutos, e acrescentar a tal gua 1mL de cada uma das
solues A, B, C e D para cada litro de gua destilada usado.
Inibidor de Nitrificao (2-cloro-6-(triclometil)piridina, frmula 2533/HACH
Sulfito de sdio;
Cloreto de cobalto;
Soluo Padro de cido glutmico/glucose

Dissolver, previamente secos em estufa a 103oC por 1 hora, 150mg de glucose
e 150mg de cido glutmico, em aproximadamente 800mL de gua destilada,
transferir para um balo volumtrico de 1L. Preparar semanalmente. Tal
soluo deve apresentar uma DBO terica de 194mg/L (sendo tolerado um
desvio padro de at +/- 15%).
Soluo de Sulfato Manganoso (MnSO4):

Dissolver 364g de sulfato manganoso monohidratado (MnSO4.H2O) em
aproximadamente 800mL de gua destilada, filtrar em papel de filtro Watman
no 40, e diluir em balo volumtrico de 1L.
Soluo de Alcali-Iodeto-Azida (AIA):

Dissolver em aproximadamente 800mL de gua:
500g de hidrxido de Sdio (NaOH);
135g de iodeto de sdio (NaI);
diluir em 1L de gua destilada; adicionar 10g de Azida Sdica (NaN3)
previamente dissolvida em 40mL de gua destilada. Guardar em frasco de
PVC.
cido Sulfrico concentrado;
Soluo Padro de Tiossulfato de Sdio (Na2S2O3.5H2O) 0,025M
60
Dissolver 6,205g de tiossulfato de sdio pentahidratado, juntamente com

1,5mL de Hidrxido de Sdio 6N (ou 0,4g de NaOH), em aproximadamente
800mL de gua destilada, transferir para um balo volumtrico de 1L e
completar o volume. Padronizao:
Padronizar com 10mL de soluo de dicromato de potssio (K2Cr2O7) 0,1N,
acrescidos de 1mL de cido sulfrico concentrado mais cerca de 80mL de
gua, deve-se deixar por 6 minutos o erly no escuro, em seguida, adicionar
uma esptula (+/-1g) de KI, e titular contra soluo de tiossulfato at o
aparecimento de uma colorao amarelo-palha, nesse ponto, adicionar
amido e prosseguir a titulao at a viragem do azul para o incolor. Calcular
a normalidade real do tiossulfato:
NNa2S2O3
N K 2Cr 2O 7 *V K 2Cr 2O 7
Soluo indicadora de Amido

4.14.5. Procedimento calibrao do Oxmetro

1. aerar 1 litro de gua destilada por aprox. 2 horas;
2. deixar em repouso por 30 minutos;
3. transferir a gua para dois frascos de DBO;
4. em um dos frascos, colocar a sonda do oxmetro e ligar o aparelho;
5. no outro frasco, adicionar 1mL (20gotas) de soluo alcali-iodeto-azida mais 1
mL (20gotas) de sulfato manganoso;
6. tampar e agitar vigorosamente 10 vezes;
7. deixar o precipitado marrom sedimentar at metade do frasco;
8. adicionar 1mL (20gotas) de cido sulfrico concentrado;
9. tampar e agitar mais 10 vezes;
10. retirar uma alquota de 100mL e transferir para um erly de 250mL;
11. adicionar amido;
61
12. titular contra tiossulfato de sdio 0.025N at cor incolor.

13. calcular Oxignio Dissolvido (OD);
14. ajustar no oxmetro o valor de OD obtido;
15. em dois outros frascos de DBO, completar com gua destilada;
16. adicionar em ambos sulfito de sdio uma esptula, juntamente com uma
ponta de esptula de cloreto de cobalto (traos);
17. num dos frascos, adicionar 1mL (20gotas) de soluo de alcali-iodeto-azida
mais 1mL (20gotas) de sulfato manganoso, caso forme um precipitado branco,
continue, caso contrtrio, repetir adicionando mais sulfito de sdio;
18. colocar a sonda no outro frasco, ajustar o zero no aparelho.
4.14.6. Procedimento preparo dos frascos de DBO
1. deixar com sol. sulfocrmica por 1 dia;
2. enxaguar vrias vezes com gua de torneira seguida de gua destilada;
3. autoclavar os frascos a uma temperatura de 120oC e 1 kgl/cm2 de presso, por
aproximadamente 30 minutos;
4. deixar esfriar.
4.14.7. Procedimento DBO sem semente
1. adicionar a amostra ao frasco preparado de DBO completar ou alquota da
diluio (de acordo com a proposta da tabela abaixo) fazer, pelo menos, 4
diluies diferentes;
2. anotar o no e o volume do frasco;
3. adicionar, se necessrio, inibidor de nitrificao;
4. completar o volume do frasco com gua de diluio evitando a formao de
bolhas e turbulncias;
5. medir OD inicial;
6. levar incubadora;
7. aps 5 dias desencubar;
8. medir OD final.
62
4.14.8. Procedimento DBO com semente

4.14.8.1. Preparo da semente
1. acondicionar um volume conhecido de esgoto domstico em um bcker de
500mL;
2. deixar sedimentar por 1 hora;
3. retirar o sobrenadante e utiliz-lo como a Semente.
4.14.8.2. Procedimento anlise
1. adicionar a amostra ao frasco preparado de DBO completar ou alquota da
diluio (de acordo com a proposta da tabela abaixo) fazer, pelo menos, 4
diluies diferentes;
2. anotar o no e o volume do frasco;
3. adicionar, se necessrio, inibidor de nitrificao;
4. num frasco em separado, incubar a semente, adicionando 2mL da Semente
preparada, juntamente com o inibidor de nitrificao, e completando o volume
com gua de diluio;
5. adicionar, em cada frasco, de 2mL de Semente;
6. completar o volume do frasco com gua de diluio evitando a formao de
bolhas e turbulncias;
7. medir OD inicial;
8. levar incubadora;
9. aps 5 dias desencubar;
10. medir OD final.
4.14.9. Clculos
Oxignio Dissolvido (OD):
mgO2/L = vol. Tiossulfato * N tiossulfato * 8000

100
DBO sem semente:
63
DBO (mg O2/L) =
ODf ODi
f
Onde:
f
ml de amostra
volume de frasco de DBO
DBO com semente:

Calcular DBO da semente;
Subtrair esse valor da DBO das amostras
4.14.10. Tabela estimativa para diluio de DBO com base nos valores de
DQO
Alquota para diluio
Faixa de DQO
(mL)
(mg/L)
0.001
128000 130000
0.002
118000 125000
0.005
60000 115000
0.02
12000 42000
0.1
6000 21000
0.2
3000 10000
600 2100
300 1050
120 420
10
60 210
20
30 105
50
12 42
100
6 21
300
07
OBS.: Algumas condies a serem respeitadas:
64
ODi - ODf 2mg/L;

1 ODf 6 mg/L.
4.15. SRIE NITROGENADA

4.15.1. Introduo
Em guas naturais ou efluentes domsticos e industriais, as formas nitrogenadas
so de grande interesse, em ordem decrescente de estado de oxidao, tem-se:
nitrato, nitrito, amnia e nitrognio orgnico. Todas essas formas, inclusive o
nitrognio gasoso (N2), esto presentes no chamado ciclo do nitrognio.
Nitrognio orgnico definido como um composto orgnico que possui o
nitrognio na forma trivalente negativo. Analiticamente, nitrognio orgnico e
amoniacal podem ser determinados em conjunto no teste de Nitrognio Kjeldahl,
termo o qual refere-se a tcnica empregada em sua determinao. O nitrognio
orgnico apresenta-se na forma de protenas, peptdeos, cidos nucleicos e uria,
alm de numerosos compostos sintticos. A concentrao tpica de Nitrognio
orgnico em esgotos domsticos da ordem de 20mg/L,
A forma nitrogenada referente ao ltimo estado de oxidao, o Nitrato geralmente
ocorre em pequenas quantidades em guas de superfcie, mas pode ocorrer em
grandes quantidades em guas subterrneas. Sua excessiva presena pode
desenvolver uma doena chamada Metaemoglobinemia, sobretudo, em crianas;
h uma restrio em at 10mg/L de nitrognio na forma de nitrato para guas de
abastecimento. Trata-se de um nutriente essencial para muitos seres auttrofos
fotossintticos, sendo, em alguns casos, considerado nutriente limitante de
crescimento populacional.
O Nitrito a forma intermediria de oxidao do nitrognio, uma forma instvel,
podendo ser oxidada, facilmente, a nitrato. Amnia presente naturalmente em
guas superficiais e esgotos, sendo, tambm, oriunda de determinados processos
industriais como os observados em indstrias siderrgicas.
As diversas formas nitrogenadas so expressas em equivalentes de Nitrognio na
forma apresentada, assim, tem-se, p.ex., para nitrato: mgN-NO3-/L, e assim por
diante.
4.15.2. Nitrognio Amoniacal
4.15.2.1. Mtodo de determinao destilao preliminar/ titulomtrico
Princpio do mtodo: a amostra tamponada num pH de 9,5 com tampo de
borato para evitar a hidrlise de tiocianatos e outros compostos orgnicos, em
seguida destilada, e o contedo destilado coletado numa soluo absorvente
65
de cido Brico; esse destilado coletado no cido Brico e titulado,

potenciometricamente, contra uma soluo de cido Sulfrico. Esse mtodo
indicado para a faixa de concentrao de 5 a 100mgN-NH3/L.
Aparelho de destilao;
pHmetro;
balo volumtrico;
pipetas volumtricas;
bckeres;
bureta de 50mL;
dispenser;
agitador magntico/barra magntica;
frasco Kjeldahl.
4.15.2.3. Reagentes
Soluo Tampo de Borato:

Dissolver 9,5g de Tetraborato de Sdio juntamente com 176mL de Hidrxido
de Sdio 0,1N em aproximadamente 1200mL de gua destilada, transferir para
um balo volumtrico de 2L e completar o volume.
Soluo de Hidrxido de Sdio (NaOH) 6N:

Dissolver 240g de NaOH em 800mL de gua destilada, aguardar esfriar e
completar o volume para 1L.
Indicador Misto:
Dissolver 200mg de Vermelho de Metila em 100mL de lcool Etlico; dissolver
100mg de Azul de Metileno em 50mL de lcool etlico; Juntar as duas
solues. Preparar mensalmente.
Soluo absorvente de cido Brico

Dissolver 20g de cido Brico em 800mL de gua destilada, adicionar 10mL de
indicador misto, transferir para um balo volumtrico de 1L e completar o
volume.. Preparar mensalmente.
66

Soluo Padro de cido Sulfrico 0,02N

N = A.B
53 . C
Onde:
4.15.2.4. Procedimento
2. Retirar uma alquota representativa em relao a quantidade de nitrognio
amoniacal presente na amostra, tal qual sugere a tabela abaixo, e transferir
para um bcker:
Nitrognio Amoniacal
(mg/L)
Volume para amostra

(mL)
5 - 10
250
10 20
100
20 50
50
50 - 100
25
Obs.: amostras com valores acima de 100mgN-NH3/L devem ser diludas.

3. Adicionar 25mL de Soluo Tampo de Borato;
4. Ajustar o pH para 9,5 com Hidrxido de Sdio;
5. Reservar;
67
6. Adicionar 50mL de Soluo Absorvente de cido Brico num balo volumtrico

de 250mL;
7. Transferir a amostra preparada e reservada para um frasco Kjeldahl;
8. Conectar o frasco ao destilador;
9. Programar destilador para 10 minutos;
10. Acoplar o balo volumtrico de 250mL contendo a soluo de cido Brico na
sada do destilado, de modo que a mangueira de sada esteja submersa na
soluo;
11. Aguardar a destilao dos 200mL de amostra (at o menisco do balo);
12. Transferir o contedo do balo para um bcker de 600mL;
13. Titular, com um pH, contra a soluo de cido Sulfrico 0,02N at o ponto final
da soluo padro de cido Brico, o qual obtido da seguinte forma:
Transferir 50mL de soluo absorvente de cido Brico para um balo
volumtrico de 250mL e completar o volume com gua destilada;
Medir o pH dessa soluo, o qual ser considerado como referencial para o
ponto final da titulao das amostra.
4.15.2.5. Clculos
mgN-NH3/L =
volume A 280
vol.amostra
onde:
Volume A: volume de cido Sulfrico 0,02N gastos na titulao
4.15.3. Nitrito
4.15.3.1. Mtodo de determinao mtodo colorimtrico
Princpio do mtodo: o nitrito determinado mediante a formao de um composto
azo da cor prpura, em um pH da ordem de 2,0 a 2,5, por diazotao por
sulfanilamida
com
N-(1-naftil)-etilenodiamino
dihidroclordrico
(NED
dihidroclordrico). A escala de concentrao aplicada ao mtodo de 10 a
1000gN-NO2-/L em espectrofotmetro, sendo empregado o comprimento de onda
de 543nm.
Espectrofotmetro UV-Visvel;
68
Bomba de vcuo;
Kitassato;
Membrana de filtrao de 0,45m;
Bcker;
Pipeta volumtrica;
Balo volumtrico;
Bureta de 50mL.
4.15.3.3. Reagentes
Soluo de N-(1-naftil)-etilenodiamino dihidroclordrico:

Dissolver 0,5g de n-1-naftil em 300mL de gua destilada, transferir para um
balo volumtrico de 500mL e completar o volume.
Soluo de Sulfanilamida:
Dissolver 5g de sulfanilamida em 300mL de gua destilada, adicionar 50mL de
cido Clordrico concentrado, transferir para um balo volumtrico de 500mL e
completar o volume.
Soluo de Oxalato de Sdio (Na2C2O4) 0,025M:

Dissolver 3,35g de oxalato de sdio em aproximadamente 800mL de gua
destilada, transferir para um balo volumtrico de 1L e completar o volume.
Soluo de Sulfato Ferroso Amoniacal (SFA) 0,05N

Dissolver 19,607g de SFA em aproximadamente 800mL de gua destilada,
adicionar 20mL de cido Sulfrico concentrado, transferir para um balo
volumtrico de 1L e completar o volume. Padronizao:
Adicionar 10mL de Dicromato de Potssio 0,25N num erly;
Elevar o volume do erly para 100mL com gua destilada;
Adicionar, com um Dispenser, 30mL de cido Sulfrico;
Aguardar esfriar;
Adicionar de 3 a 6 gotas de indicador Ferroin;
69
Titular com a soluo de SFA at a viragem do indicador (verde para

marrom).
Calcular a Normalidade da soluo de SFA:
N(SFA)
vol.dicromato(mL)
N (dicromato)
vol.gasto de SFA(mL)
Soluo padro de Permanganato de Potssio (KmnO4) 0,01M (0,05N):

Dissolver 1,6g de Permanganato de potssio em aproximadamente 800mL de
gua destilada, transferir para um balo volumtrico de 1L e completar o
volume, armazenar em frasco mbar. Padronizao:
Pesar de 100 a 200mg de Oxalato de Sdio anidro, e transferir para um
bcker de 250mL fazer duplicada;
Adicionar, em cada bcker, 100mL de gua destilada;
Adicionar 10mL de cido Sulfrico 1+1;
Aquecer a amostra at 90oC;
Titular, rapidamente, com soluo padro de Permanganato de Potssio
0,05N (a temperatura no pode ser inferior a 85oC) at a viragem do incolor
para o prpura;
Em geral, 100mg de Oxalato consomem cerca de 6mL de soluo de
permanganato.
Calcular a Normalidade real:
N KmnO4 =
massa( g ) Na 2C 2O 4
vol. A 0,33505
Onde:
Vol.A: volume de permanganato gastos na titulao.
Soluo Estoque de Nitrito

Dissolver 1,232g de Nitrito de Sdio (NaNO2) em aproximadamente 800mL de
gua destilada, transferir para um balo volumtrico de 1L e completar o
volume. Essa soluo apresenta 250mgN-NO2-/L. Padronizao:
Adicionar 50mL
250mL;
da soluo padro de Permanganato em um erly de
70
Adicionar 5mL de cido Sulfrico concentrado;

Adicionar (com a ponta da pipeta submersa) 50mL da soluo estoque de
nitrito;
Manter o erly em aquecimento a uma temperatura de 70 a 80oC;
Titular contra a soluo de SFA 0,05N vagarosamente e em constante
agitao, at o ponto de viragem (prpura para incolor persistindo por 5
minutos).
Calcular a concentrao real da soluo estoque de Nitrito:
mgN-NO2-/L
[( A B ) (C * D ) ]* 7000
E
onde:
A : volume total de Permanganato gastos;
B : normalidade do Permanganato;
C : volume total de SFA gastos;
D : normalidade do SFA;
E : volume (mL) da soluo estoque de Nitrito
1. homogeneizar a amostra e retirar uma alquota, transferindo para um bcker;
2. montar um sistema de filtrao com um kitassato e uma bomba de vcuo;
3. acomodar uma membrana filtrante de 0,45m; e filtrar aproximadamente
100mL de amostra;
4. pipetar 50mL da amostra filtrada em 0,45m;
5. transferir para um bcker de 150mL;
6. adicionar 2mL do reagente sulfanilamida;
7. deixar reagir por 5 minutos;
8. adicionar 2mL do reagente n-naftiletilenodiamina;
71
10. ler no espectrofotmetro no comprimento de onda de 543nm.

4.15.3.5. Procedimentos - preparao da curva padro
2. diluir 1mL da Soluo estoque de Nitrito em um balo volumtrico de 250mL,
obtendo-se uma soluo Intermediria de 1mg/L; em seguida, diluir 10mL
dessa soluo Intermediria em um balo volumtrico de 100mL, obtendo-se
uma nova soluo Padro com 10g/L; preparar padres de acordo com a
tabela abaixo:
Conc. N-NO2(g/L)
Volume (mL) da soluo Padro a ser

diludo em um balo volumtrico de
50mL
0.5
2.5
10
30
15
50
25

4. adicionar 2mL do reagente sulfanilamida em cada padro;
6. adicionar 2mL do reagente n-naftiletilenodiamina em cada padro;
9. plotar num grfico as absorbncias obtidas em funo da concentrao dos
padres;
10. obter a equao da reta;
11. o coeficiente de correlao (R2) deve ser superior a 98%.
72
4.15.3.6. Clculos
Nitrito
gN-NO2-/L =usar a equao da reta obtida com a construo da curva

padro.
4.15.4. Nitrato
4.15.4.1. Mtodo de Determinao eletrodo on-especfico.
Princpio do mtodo: o on Nitrato determinado mediante o uso de um eletrodo
de on-especfico; tal eletrodo responde a atividade inica do Nitrato numa faixa de
0,14 a 1400mgN-NO3-/L. Tal mtodo tem como inconveniente a presena de
inmeras substncias que interferem na resposta do eletrodo, tais como: nitrito,
cianetos, sulfetos, brometos, iodetos, cloratos, percloratos, bicarbonatos etc...
Para evitar a ao desses ons confundindo a leitura do eletrodo, adicionado a
amostra, no momento da leitura da mesma, uma soluo Tampo, cujo objetivo
eliminar tais interferncias. Essa soluo Tampo contem: Sulfato de Prata
(AgSO4), que inibe a interferncia dos ons cloretos, brometos, iodetos e cianetos;
cido Sulfmico que inibe a interferncia de nitritos; um sistema tampo em pH 3
para eliminar os bicarbonatos e manter constante a fora inica; e Sulfato de
Alumnio (Al2(SO4)3) para inibir complexos de cidos orgnicos.
Potencimetro;
Eletrodo de on-especfico para nitrato;
Bomba de vcuo;
Agitador magntico/barra magntica;
Kitassato;
Membrana filtrante de 0,45m;
Balo volumtrico;
Bcker de 25mL.
73
4.15.4.3. Reagentes
Soluo Tampo:
Dissolver, em aproximadamente 600mL de gua destilada, 17.32g de Sulfato
de Alumnio (Al2(SO4)3.18H2O); 3.43g de Sulfato de Prata (Ag2SO4); 1.28g de
cido Brico (H3BO3) e 2.52g de cido Sulfmico (H2NSO3H); ajustar o pH para
3.00 com Hidrxido de Sdio (NaOH) 0.1N; transferir para um balo
volumtrico de 1L e completar o volume.
Soluo de enchimento do eletrodo ORION (900046);
Soluo estoque de Nitrato:

Dissolver 0,7218g de Nitrato de Potssio (KNO3), previamente seco a 105oC
por 24 horas, em aproximadamente 800mL de gua, transferir para um balo
volumtrico de 1L e completar volume, adicionar 2mL de Clorofrmio para
preservar. Tal soluo apresenta 100mgN-NO3-/L.
3. acomodar uma membrana filtrante de 0,45m; e filtrar aproximadamente 50mL
de amostra;
4. pipetar 10mL da amostra filtrada em 0.45m;
6. adicionar 10mL de soluo Tampo;
7. ler no potencimetro utilizando o eletrodo de onespecfico, devidamente
calibrado.
4.15.4.5. Calibrao do Eletrodo de on - especfico
1. preparar, mediante diluies da soluo Estoque de Nitrato, solues padres
como indicado na tabela a seguir:
74
Conc. N-NO3(mg/L)

100mL
10
10
100
100
2. pipetar 10mL de cada padro;

4. adicionar 10mL de soluo Tampo;
5. entrar no mdulo de calibrao do equipamento e ler os padres;
6. o Sloop obtido pela curva deve estar entre 54 e 60mV.
4.15.5. Nitrognio Total Kjeldahl (NKT)
4.15.5.1.Mtodo de determinao macro-Kjeldahl
Princpio do mtodo: em presena de cido Sulfrico, sulfato de Potssio e Sulfato
de Cobre, ocorre a catlise de converso das diversas formas de Nitrognio
Orgnico em Nitrognio Amoniacal. Aps essa digesto, a amostra tratada
igualmente como na determinao de Nitrognio Amoniacal.
aparelho Digestor;
Lavador de Gases;
Aparelho de destilao;
pHmetro;
balo volumtrico;
pipetas volumtricas;
bckeres;
bureta de 50mL;
75
dispenser;
frasco Kjeldahl.
4.15.5.3. Reagentes
Reagente de Digesto:
Dissolver, em aproximadamente 600mL de gua destilada, 134g de Sulfato de
Potssio (K2SO4), 7,3g de Sulfato de Cobre (CuSO4) e, cuidadosamente,
134mL de cido Sulfrico (H2SO4) concentrado; transferir para um balo
volumtrico de 1L e completar o volume.
Soluo de Hidrxido de Sdio/Tiossulfato de Sdio

Dissolver, em aproximadamente 800mL de gua destilada, 500g de Hidrxido
de Sdio (NaOH) e 25g de Tiossulfato de Sdio (Na2S2O3.H2O), aguardar
esfriar e completar o volume para 1L.
Indicador Misto:
Dissolver 200mg de Vermelho de Metila em 100mL de lcool Etlico; dissolver
100mg de Azul de Metileno em 50mL de lcool etlico; Juntar as duas
solues. Preparar mensalmente.
Soluo absorvente de cido Brico

Dissolver 20g de cido Brico em 800mL de gua destilada, adicionar 10mL de
indicador misto, transferir para um balo volumtrico de 1L e completar o
volume.. Preparar mensalmente.

Soluo Padro de cido Sulfrico 0,02N

N = A.B
53 . C
76
Onde:
2. Retirar uma alquota representativa em relao a quantidade de Nitrognio
Total presente na amostra, tal qual sugere a tabela abaixo, e transferir para um
frasco kjeldahl:
NKT
(mg/L)
Volume para amostra

(mL)
0-1
500
1 10
250
10 20
100
20 50
50
50 100
25
Obs.: amostras com valores acima de 100mgN-NKT/L devem ser diludas.

3. Adicionar 50mL de Reagente de Digesto;
4. Acoplar o frasco kjeldahl no digestor e ligar o lavador de gases;
5. Aguardar o trmino da digesto (at o aparecimento de fumos brancos na
poro superior do frasco);
6. Deixar chegar a temperatura ambiente;
7. Adicionar aproximadamente 120mL de gua destilada;
8. Adicionar 25mL de soluo de Hidrxido de Sdio/Tiossulfato de sdio;
9. Acoplar imediatamente ao Aparelho de Destilao;
10. Introduzir um balo volumtrico de 250mL contendo 50mL de soluo
absorvente de cido Brico na sada do destilado;
11. Coletar o destilado at atingir o menisco do balo;
77
12. Transferir para um bcker de 500mL;

13. Titular com cido Sulfrico 0.02N usando um eletrodo de pH;
14. Titular at o pH do padro e anotar o volume.
Padro:
Transferir 50 mL de indicador de H3BO3 para um balo volumtrico de 250 mL,

completar com H2O destilada e medir o pH. Titular as amostras at esse valor
de pH.
4.15.5.5. Clculo:
mgN-NKT/L =
VA.SULFRICO x 280
Volamost.
4.15.6. Nitrognio Orgnico

Essa forma de Nitrognio obtida mediante subtrao dos valores de Nitrognio
Total Kjeldahl pelo Nitrognio Amoniacal.
4.16. FSFORO
4.16.1. Introduo
Compostos contendo Fsforo ocorrem em guas naturais e em efluentes
(domsticos e industriais), na forma de Fosfatos. Tais formas so classificadas
em: Ortofosfatos, Fosfatos Condensados (piro, meta e outros poli-fosfatos) e
Fosfatos Orgnicos; podendo apresentar-se na forma de soluo, de particulado
ou de detritos, ou ainda na constituio dos organismos aquticos.
Os compostos contendo Fsforo so essenciais para o crescimento de
organismos e podem ser considerados nutrientes que limitam a produo primria
de novas clulas.
A anlise de Fsforo envolve dois grandes passos: (1o) converso dos compostos
contendo fsforo a forma de interesse de orto-fosfato dissolvidos e (2o)
determinao colorimtrica desse orto-fosfato dissolvido.
Filtrando-se a amostra em membrana filtrante de 0,45m, pode-se separar as
formas de fsforo em suspenso e dissolvidas; gerando, assim, as formas de
Fsforo Solvel e Total.
preciso, para se quantificar o fsforo contido em compostos orgnicos, converter
tais formas em Orto-fosfatos, para tanto, faz-se uso de uma digesto cida
78
catalisada pelo calor, onde ocorre a hidrlise desses compostos orgnicos,

gerando os Orto-fosfatos.
Sendo assim, pode-se dizer que h, tambm, a possibilidade de se quantificar os
Fosfatos Orgnicos (mediante digesto) e Inorgnicos. Para efeito de facilitar o
entendimento, denominaremos de Fsforo Total a determinao de todas as
formas de fsforo contidas na amostra (obtido mediante a digesto cida), e de
Fsforo Solvel, as formas inorgnicas de fsforo dissolvidas (obtido mediante a
filtrao da amostra).
4.16.2. Mtodo de determinao Fsforo Solvel
Princpio do Mtodo: em presena de meio cido, o Molibdato de Amnia
juntamente com o Antimonio-tartarato de Potssio reagem com o Orto-fosfato
formando o composto cido Fosfomolibdico, o qual reduzido, pelo cido
Ascrbico, ao pigmento Azul de Molibdnio.
Espectrofotmetro UV/Visvel;
Bomba de vcuo;
Membrana filtrante de 0.45m;
Kitassato;
Sistema de filtrao;
Balo volumtrico;
Bcker;
Pipeta volumtrica
4.16.4. Reagentes
Soluo de cido Sulfrico (H2SO4) 5N:

Diluir, cuidadosamente, 140mL de cido Sulfrico em um balo volumtrico de
1L contendo aproximadamente 600mL de gua destilada. Aguardar esfriar e
completar o volume.
Soluo de Antimonio-tartarato de Potssio (K(sob)C4H4O4. H2O):

Dissolver 1.3715g de Antimonio-tartarato de Potssio em aproximadamente
300mL de gua destilada; transferir para um balo volumtrico de 0.5L e
completar o volume.
79
Soluo de Molibdato de Amnia

Dissolver, em aproximadamente 300mL de gua destilada, 20g de Molibdato
de Amnia, transferir para um balo volumtrico de 0.5L e completar o volume.
cido Ascrbico
Soluo estoque de Fsforo

Dissolver 219.5mg de Fosfato monocido de Potssio (KH2PO4) anidro em
aproximadamente 800mL de gua destilada, transferir para um balo
volumtrico de 1L e completar o volume. Essa soluo apresenta
50mgP-PO4-3/L.
Reagente Combinado:
Adicionar, respeitando a ordem disposta, os seguintes reagentes:
60mL de cido Sulfrico 5N;
20mL de Antimonio-tartarato de Potssio;
20mL de Molibdato de Amnia;
0.7g de cido Ascrbico
Tal soluo deve ser preparada diariamente.
3. acomodar uma membrana filtrante de 0,45m; e filtrar aproximadamente
100mL de amostra;
4. pipetar 50mL da amostra filtrada em 0,45m (caso a amostra tenha uma
concentrao de Fsforo acima de 1,3mgP-PO4-3/L deve-se dilu-la);
6. adicionar 4 gotas de fenolftalena;
7. adicionar NaOH 6N at colorao rosa;
8. neutralizar com H2SO4 5N (sem excesso);
9. adicionar 8mL do Reagente Combinado;
80

4.16.6. Procedimentos - preparao da curva padro
2. diluir 5mL da Soluo estoque de Fsforo em um balo volumtrico de 50mL,
obtendo-se uma soluo Intermediria de 5mg/L; preparar padres de acordo
com a tabela abaixo:
Conc. P-PO4-3
(mg/L)

50mL
0.2
0.4
0.6
0.8
1.0
10

4. adicionar 8mL do Reagente Combinado em cada padro;
padres;
4.16.7. Procedimento Fsforo Total
1. pipetar 10 ml de amostra e transferir para o frasco de destilao (ou outro
volume condizente com a concentrao esperada de fsforo);
81
2. pipetar 2 ml de H2SO4 concentrado e 10 ml de HNO3;

3. conectar o frasco na unidade de digesto;
4. ligar o lavador de gases;
5. deixar digerir at reduzir para 1 ml (tem que estar clarificado) ou at liberar
fumos brancos do h2SO4;
6. adicionar 20 ml de gua destilada;
7. adicionar 4 gotas de fenolftalena;
8. adicionar NaOH 6N at colorao rosa;
9. filtrar em papel de filtro 1540 e colher o filtrado num balo de 100 ml ,
completar o volume adicionando as guas de lavagem , ou com destilada;
10. pipetar 50 ml e transferir para um bcker de 150 ml;
11. neutralizar com H2SO4 5N (sem excesso);
12. adicionar 8mL do Reagente Combinado;
4.16.8. Clculos
Fsforo Solvel ou Total
mgP-PO4-3/L =usar a equao da reta obtida com a construo da curva

padro.
4.17. LEOS E GRAXAS OG (MATERIAL SOLVEL EM N-HEXANO MSH)
4.17.1. Introduo
A determinao quantitativa das substncias designadas por leos e Graxas no
possvel de ser realizada; entretanto, grupos dessas substncias com
caractersticas fsicas semelhantes podem ser determinadas quantitativamente
com base numa solubilidade comum num determinado solvente orgnico. Dessa
forma, o parmetro leos e Graxas definido como sendo a determinao de
substncias recuperadas atravs de extrao e solubilizao num determinado
solvente orgnico.
82
Inclui-se nesse grupo outros compostos que no especificamente leos e Graxas,

mas que aps acidificao da amostra e eventual extrao, sejam solubilizadas no
solvente orgnico.
O solvente orgnico indicado para a extrao o N-Hexano (podendo tambm
utilizar-se de uma mistura de 80% de N-Hexano e 20% de ter metil-terc-butil), por
isso tal parmetro tambm pode ser denominado de Material Solvel em NHexano.
A determinao de OG (ou MSH) faz-se importante, medida que tais compostos
podem causar influncias perniciosas para o ambiente aqutico. Sua presena
excessiva pode interferir nos processos biolgicos, tanto aerbio como anaerbio,
alm de prejudicar a eficincia no tratamento de efluentes.
4.17.2. Mtodo de determinao Soxhlet
Princpio do mtodo: a amostra contendo OG (ou MSH) acidificada, ocasionando
a hidrlise desses compostos, que gera a quebra da emulso; dessa forma, tais
compostos torna-se insolveis e se separam da fase lquida; em seguida, a
amostra filtrada e o material retido no filtro submetido a uma extrao no
aparelho de Soxhlet, empregando-se o N-Hexano para extrao do OG; aps a
extrao, o solvente evaporado, permanecendo no recipiente apenas o OG, que,
por gravimetria, , ento, determinado.
Aparelho de Soxhlet;
Bomba de vcuo;
Balana analtica;
Dessecado;
Estufa;
Pina;
Kitassato;
Funil de Bchiner;
Papel de filtro (watman 40);
Tecido tipo Musseline;
Balo volumtrico;
83
Cartucho de extrao;
Extrator;
Balo de fundo chato de 250mL;
Bcker;
Proveta.
4.17.4. Reagentes
cido Clordrico (HCl) 6N - 1+1:

Diluir, num balo volumtrico de 1L com 500mL de gua destilada,
cuidadosamente 500mL de cido Clordrico.
N-Hexano
Suspenso de Terra Diatomcea:

Dissolver, em 1L de gua destilada, 10g de Terra Diatomcea, manter em
suspenso.
2. Transferir para um balo volumtrico de 500 mL;
3. Antes de completar o menisco, adicionar aproximadamente 1 mL de HC 6N;
4. Homogeneizar;
5. Montar o sistema de filtrao acoplando o funil de bchiner em um kitassato e
ligando-o a uma bomba de vcuo;
6. Por no funil de bchiner o musseline, fix-lo com gua, e em seguida o papel
de filtro, fix-lo igualmente com gua;
7. Adicionar 100 mL de suspenso de terra de diatomcea de forma uniforme
sobre o papel de filtro fazendo-se passar vcuo;
8. Passar a amostra, j acidificada, no funil de Bchiner de forma bem lenta;
9. Retirar o musseline com o papel de filtro + torta com auxlio de uma pina e
transferir para o cartucho de extrao;
10. Levar o cartucho a estufa a 103oC por 30 minutos;
84
11. Acoplar o extrator no balo de fundo chato de 250 mL (previamente tarado

p0);
12. Acondicionar o cartucho dentro do extrator;
13. Adicionar 150 mL de N-Hexano no extrator;
14. Levar para o aparelho de Soxhlet e deixar em recrculo por 4 horas;
15. Em seguida, destilar o contedo do balo (N-Hexano + MSH) a 700 C;
16. Levar o balo para a estufa por aproximadamente 20 minutos ou at secar
completamente o balo;
17. Deixar esfriar em dessecador;
18. Pesar para encontrar o P1.
4.17.6. Clculo
mgMSH/L
P1 P0 x 1000
vol. da amostra (mL)
4.18. SURFACTANTES
4.18.1. Introduo
Surfactante a denominao dada aos diversos tipos de tensoativos (detergentes)
presentes nas guas naturais e nos esgotos (domsticos e industriais). O
Surfactante uma molcula com um forte grupo hidrofbico e um, igualmente
forte, grupo hidroflico; dessa forma, suas molculas tendem a congregar na
interface entre o meio aquoso (com o grupo hidroflico) e em outra fase (com o
grupo hidrofbico) como no ar, leo, lquidos e partculas, originando espumas,
emulses e suspenso de partculas
O grupo hidrofbico , geralmente, formado por um radical hidrocarboneto (R)
contendo de 10 a 20 tomos de carbono; j seu grupo hidroflico podem ser de
dois tipos: um que se ioniza na gua e outro que no. Os surfactante inicos so
subdivididos em duas categorias, de acordo com sua carga eltrica; sendo-o
Surfactante Aninico (RSO3-)-Na+, e o Catinico (Rme3N)+Cl-. Existe ainda o
Surfactante No-Inico.
O descarte corrente de detergentes em esgoto faz com que os nveis de
Surfactante variem de 1 a 20 mg/L
85
A presena excessiva de Surfactante no meio aquoso pode causar srios

prejuzos a vida aqutica e qualidade da gua, alm de complicaes em
Estaes de Tratamento.
Princpio do mtodo: a amostra a ser analisada, contendo Surfactantes, sofre um
processo denominado de Sublao, na qual ocorre a extrao do Surfactante do
meio aquoso e sua solubilizao em Acetato de Etila, por meio de sua prvia
quebra de emulso, seguida de arraste em presena de Nitrognio gasoso, no
aparelho Sublador. O solvente contendo o Surfactante isolado, desidratado e
evaporado, e o resduo (contendo o surfactante) levado para anlise.
A anlise do Surfactante ora descrita refere-se categoria de Surfactante
Aninico, e baseia-se na formao da Substncia Ativa ao Azul de Metileno
(MABS).
O mtodo relativamente simples e preciso, compreende trs sucessivas
extraes com Clorofrmio em um meio cido contendo o Azul de Metileno, sendo
a fase extrada, submetida a anlise em espectrofotmetro, em um comprimento
de onda de 652nm.
O Alquil-benzeno-sulfonato Linear (LAS) o surfactante aninico mais empregado
para padronizar esse mtodo.
Sublador;
Cilindro de Nitrognio;
Agitador magntico/barra magntica;
Espectrofotmetro;
Manta de aquecimento;
Bcker;
Proveta;
Pipeta;
Funil de separao;
Balo volumtrico.
86
4.18.4. Reagentes
Soluo Estoque de Alquil-benzeno-sulfonato Linear LAS

Dissolver, precisamente, 1g de LAS em aproximadamente 800mL de gua,
transferir para um balo volumtrico de 1L e completar o volume. Preparar
semanalmente.
Soluo Padro de LAS

Diluir 10mL da Soluo estoque de LAS em um balo volumtrico de 1L,
completar o volume com gua. Essa soluo apresenta a concentrao de
10mgLAS/L.

Soluo de cido sulfrico (H2SO4) 1N

Soluo de cido sulfrico (H2SO4) 6N

Soluo de Hidrxido de Sdio 1N

dissoluo e completar at o menisco.
Clorofrmio
Reagente de Azul de Metileno

Dissolver 100mg de Azul de Metileno em 100mL de gua; transferir 30mL para
um balo volumtrico de 1L, adicionar 500mL de gua destilada juntamente
com 41mL de cido Sulfrico 6N e 50g de Fosfato de Sdio Monobsico,
monohidratado (NaH2PO4.H2O), promover a dissoluo completar o volume do
balo com gua destilada.
87
Soluo de Lavagem
Dissolver 50g de Fosfato de Sdio Monobsico, monohidratado
(NaH2PO4.H2O) em aproximadamente 500mL de gua destilada, adicionar
41mL de cido Sulfrico 6N e transferir para um balo volumtrico de 1L,
completar o volume com gua destilada.
Acetato de etila;
Metanol;
L de vidro;
Bicarbonato de sdio;
Cloreto de sdio;
Nitrognio gasoso.
4.18.5. Procedimento - Sublao

2. Transferir 1L de amostra para um bcker e manter em agitao;
3. Filtrar a amostra (papel de filtro qualitativo);
4. Adicionar a amostra 5g de Bicarbonato de Sdio e 100g de Cloreto de Sdio;
5. Montar o Sublador;
6. Conectar o cilindro de Nitrognio no lavador de gs;
7. Conectar o lavador de gs na coluna do Sublador;
8. Encher o frasco do lavador de gs at 2/3 com Acetato de etila;
9. Adicionar a amostra no Sublador;
10. Preencher com gua destilada at a sada da torneira superior do Sublador;
11. Adicionar 100mL de Acetato de etila ao Sublador;
12. Abrir o registro do cilindro de Nitrognio em 1L/min, inicialmente;
13. Manter a sublao por 5 minutos;
14. Cessar o fluxo do gs Nitrognio;
88
15. Recolher a fase do Acetato de etila (com o Surfactante) para bcker;

16. Adicionar novamente 100mL de Acetato de etila no Sublador;
17. Manter a sublao por 10 minutos;
18. Recolher a fase do Acetato de etila (com o Surfactante) e juntar com o primeiro
extrato no bcker;
19. Evaporar, com auxlio de uma manta aquecedora, o contedo do bcker at
secar (recomenda-se tampar com um vidro de relgio);
20. Dissolver o resduo com Metanol;
21. Evaporar, novamente, o contedo do bcker, sem, contudo, deixar secar
totalmente;
22. Diluir com gua;
23. Transferir para um balo volumtrico de 100mL.
4.18.6. Procedimento Determinao do Surfactante
1. Adicionar 100mL de amostra (previamente tratada) a um funil de separao de
1L;
2. Adicionar 6 gotas de soluo Indicadora de Fenolftalena;
3. Adicionar, se necessrio, Hidrxido de Sdio 1N at formao da colorao
rosa;
4. Neutralizar com cido Sulfrico 1N;
5. Adicionar 10mL de Clorofrmio;
6. Adicionar 25mL de Soluo de Azul de Metileno;
7. Agitar vigorosamente 10 vezes;
8. Extrair a fase do Clorofrmio/Azul de Metileno para outro funil de separao de
1L;
9. No primeiro funil de separao, adicionar mais 10mL de clorofrmio;
10. Repetir o item 8;
11. Repetir o item 9 e 10;
89
12. Adicionar no segundo funil de separao (com 3 extratos), 50mL de Soluo

de Lavagem;
14. Extrair a fase do Clorofrmio para um balo volumtrico de 100mL fazendo-se
passar por um funil contendo L de Vidro;
15. Adiconar pores de 10mL de Clorofrmio no funil de separao e juntar ao
balo volumtrico, at clarificar o contedo do funil;
16. Completar o volume do balo com Clorofrmio;
17. Ler no espectrofotmetro no comprimento de onda de 652nm;
4.18.7. Procedimentos - preparao da curva padro
2. Utilizando a Soluo Padro de LAS (10mg/L), preparar padres de acordo
com a tabela abaixo:
(mg/L)

100mL
0.5
0.8
1.0
10
1.5
15
2.0
20
Conc. LAS
3. Adicionar os 100mL do padro a um funil de separao de 1L;

4. Adicionar 6 gotas de soluo Indicadora de Fenolftalena;
5. Adicionar, se necessrio, Hidrxido de Sdio 1N at formao da colorao
rosa;
6. Neutralizar com cido Sulfrico 1N;
90
7. Adicionar 10mL de Clorofrmio;

8. Adicionar 25mL de Soluo de Azul de Metileno;
10. Extrair a fase do Clorofrmio/Azul de Metileno para outro funil de separao de
1L;
11. No primeiro funil de separao, adicionar mais 10mL de clorofrmio;
12. Repetir o item 8;
13. Repetir o item 9 e 10;
14. Adicionar no segundo funil de separao (com 3 extratos), 50mL de Soluo
de Lavagem;
16. Extrair a fase do Clorofrmio para um balo volumtrico de 100mL fazendo-se
passar por um funil contendo L de Vidro;
17. Adiconar pores de 10mL de Clorofrmio no funil de separao e juntar ao
balo volumtrico, at clarificar o contedo do funil;
18. Completar o volume do balo com Clorofrmio;
padres;
4.18.8. Clculos
Surfactante
mgLAS/L
=usar a equao da reta obtida com a construo da curva

padro.
91
4.19. CIDOS ORGNICOS VOLTEIS AOV

4.19.1. Mtodo de determinao - Mtodo Simplificado
Centrfuga;
Sistema de filtrao e Membrana filtrante de 0.45m (opo em relao ao uso

da centrfuga);
pHmetro;
pipeta;
bcker;
prolas de vidro;
bureta;
tubos de Nesler.
4.19.3. Reagentes
Soluo padro de Carbonato de sdio (Na2CO3) 0,5N

Secar em estufa a 250o C por 4h, aproximadamente 3g de Na2CO3, aguardar
esfriar e pesar 25+/-0,2g e transferir para um balo volumtrico de 1L,
adicionar gua e promover a dissoluo, completar o volume do balo.

Soluo Padro de cido sulfrico 0,2N

(ponto final). Calcular a normalidade real do cido Sulfrico:
92
N = A.B
53 . C
Onde:
Soluo padro de Hidrogenoftalato de potssio 0,05N

Secar 15 a 20g de padro primrio de hidrogenoftalato de potssio em estufa a
120o C por 2h; aguardar esfriar e pesar 10,0 +/- 0,5g, transferir para um balo
volumtrico de 1L, promover a dissoluo e completar o volume do balo.
Soluo padro de Hidrxido de Sdio 0,2N

dissoluo e completar at o menisco. Padronizar com 40mL de soluo
padro de Hidrogenoftalato de potssio 0,05N, titulando at o ponto final da
reao, pH 8,7. Calcular a normalidade real do NaOH:
N = A.B
204,2 . C
Onde:
A : massa (g) de hidrogenoftalato de potssio presente no balo de 1L;
B : volume (mL) de hidrogenoftalato de potssio usado na padronizao;
1. Homogeneizar a amostra no frasco de coleta;
2. Passar para 4 tubos de nessler;
3. Conect-los na centrfuga;
4. Centrifugar a 4000 RPM por 15 minutos;
5. Pipetar ......mL de sobrenadante;
6. Transferir para um bcker;
7. Adicionar 50 mL de gua deionizada;
93
8. Encher uma bureta com H2SO4 0,2N (padronizado)

9. Titular com o auxlio do pHmetro, at pH 3,00;
10. Adicionar prolas de vidro;
11. Levar chapa de aquecimento;
12. Deixar em ebulio por 5 minutos;
13. Aguardar chegar temperatura ambiente;
14. Encher uma bureta com NaOH 0,2N (padronizado);
15. Titular com auxlio do pHmetro at pH 4,0 e anotar o volume V1;
16. Prosseguir na titulao at pH 7,0 e anotar o volume gasto V2.
4.19.5. Clculo
AOV
mg/L = 480 . f . (V2-V1)

Expresso em mg/L de cido actico
Onde:
f = fator da N do NaOH
V1, V2 = volumes gastos de NaOH
Obs.: caso no seja possvel centrifugar a amostra, deve-se filtr-la em membrana
de 0.45m.
4.20. OXIGNIO CONSUMIDO MATRIA ORGNICA

4.20.1. Introduo
Oxignio Consumido refere-se quantidade de oxignio necessrio para oxidar a
matria orgnica presente na amostra.
A determinao indireta da matria orgnica se d atravs da oxidao por
Permanganato de Potssio em meio cido, catalisado pelo calor.
Tal parmetro tem sido substitudo pela determinao da Demanda Bioqumica de
Oxignio (DBO) ou pela Demanda Qumica de Oxignio (DQO).
94

Princpio do mtodo: realizada oxidao da matria orgnica por Permanganato
de Potssio em meio cido, a 80oC; utilizando-se o mtodo de titulao de
retrocesso (com emprego de Oxalato de Sdio) determinada a concentrao de
Permanganato de Potssio utilizada para consumir toda a matria orgnica, sendo
expressa em mgO2consumido/L.
Balana analtica;
Termmetros;
Erlenmeyers;
Pipetas;
Balo volumtricos;
Buretas.
4.20.4. Reagentes
Soluo de cido Sulfrico 1+3

Diluir, com cuidado, 100mL de cido Sulfrico em 300mL de gua destilada.
Soluo Padro de Oxalato de Sdio 0.01N

Secar uma pequena quantidade de Oxalato de Sdio a 110o C por 2 horas;
pesar exatamente 0.67g, dissolver em aproximadamente 800mL de gua
destilada, transferir para um balo volumtrico de 1L e completar o volume.
Soluo Estoque de Permanganato de Potssio (KMnO4) 0.1N

Dissolver 3.2g de KmnO4 em aproximadamente 1L de gua destilada, manter
entre 60 a 70o C por 2 horas e filtrar usando funil de vidro sinterizado. Essa
soluo deve ser armazenada em frasco mbar.
95
Soluo Padro de Permanganato de Potssio 0.01N

Diluir 10mL da soluo Estoque de Permanganato de Potssio 0.1N em um
balo volumtrico de1L, completar o volume com gua destilada. Preparar
diariamente. Padronizao:
Pipetar 10mL da soluo de Oxalato de Sdio 0.01N para um erly de
250mL;
Adicionar 90mL de gua destilada;
Aquecer a soluo a 75+/- 2o C;
Titular com a soluo de Permanganato de Potssio 0.01N, at o
aparecimento da colorao rsea;
Fazer um branco com 100mL de gua destilada.
Clculo:
Nreal
= 0.1/(Va Vb)
Onde:
Va: volume de KmnO4, em mL, gastos na titulao do Oxalato de Sdio;
Vb: volume de KmnO4, em mL, gastos na titulao do branco;
0.1: normalidade da soluo de Oxalato de Sdio (0.01N) multiplicado pelo
volume, em mL, da soluo de Oxalato de Sdio utilizado na anlise (10mL).
Soluo Estoque de cido Oxlico 0.1N

Diluir 6.3g de cido Oxlico em aproximadamente 800mL de gua destilada,
transferir para um balo volumtrico de 1L e completar o volume;
Soluo Padro de cido Oxlico 0.01N

Diluir 10mL de soluo Estoque de cido Oxlico 0.1N em um balo
volumtrico de 1L, completar o volume com gua destilada. Padronizao:
Pipetar 10mL da soluo de cido Oxlico 0.01N para um erly de 250mL;
Adicionar 90mL de gua destilada;
96
Aquecer a soluo a 75+/- 2o C;

Titular com a soluo de Permanganato de Potssio 0.01N, at o
aparecimento da colorao rsea;
Fazer um branco com 100mL de gua destilada.
Clculo:
Nreal
= [NrealKMnO4 . (Va Vb)]/10
Onde:
Va: volume de KmnO4, em mL, gastos na titulao do Oxalato de Sdio;
Vb: volume de KmnO4, em mL, gastos na titulao do branco;
10: volume de cido Oxlico 0.01N utilizado na anlise.
3. Adicionar 5mL de cido Sulfrico 1+3;
4. Levar o contedo do erly ebulio e adicionar 10mL de soluo Padro de
Permanganato de Potssio 0.01N;
5. Logo aps reiniciar a ebulio, deixar ferver por 10 minutos;
6. Titular com soluo de cido Oxlico 0.01N, a uma temperatura de 70 a 75o C,
at o aparecimento de colorao rsea.
4.20.6. Clculo
mgO2consumido/L ={(Vc+10) [10 . (Nra/Nrp)]} . 0.8
onde:
Vc: volume, em mL, de Permanganato de potssio gastos na titulao;
Nra: normalidade real do cido Oxlico 0.01N;
Nrp: normalidade real do Permanganato de potssio 0.01N;
0.8: fator de converso do volume de permanaganato consumido em volume de
oxignio consumido.
97
4.21. GUA OXIGENADA H2O2

4.21.1. Mtodo de determinao Mtodo de Cobalto Co - II
Bomba de vcuo;
Sistema de filtrao;
Membrana filtrante de 0.45m;
Espectrofotmetro UV/Visvel;
Pipeta;
Balo volumtrico;
Erly;
Bureta.
4.21.3. Reagentes
Soluo de Titnio;
Soluo de Bicarbonato de Sdio (NaHCO3)

Dissolver 25g de Bicarbonato de Sdio em 250mL de gua destilada , filtrar
em papel de filtro Watman nmero 40;
Sol. De Co II
Dissolver 16,13 g de CoCl2 6H2O em 1L de gua destilada. Guardar em
frascos mbar.
Soluo de Permanganato de Potssio 0.01M

Dissolver, em aproximadamente 800mL de gua destilada,
1.6g de
Permanganato de Potssio, transferir para um balo volumtrico de 1L e
completar o volume.
Soluo de gua Oxigenada determinar concentrao

Diluir 1mL da soluo estoque de gua Oxigenada em 100mL de gua
destilada;
Pipetar 50mL e transferir para um erly de 250mL;
98
Adicionar 5mL de cido Sulfrico;

Titular contra a soluo de Permanganato de Potssio 0.01M, at a
colorao rsea;
Clculo:
gH2O2/L = {5/2 . [(MKmnO4 . Vgastos . 34 (mol da H2O2) / Vsoluo]} . fator de
diluio
1. Filtrar cerca de 50mL de amostra em membrana filtrante de 0,45 m, reservar;
2. Adicionar aproximadamente 15mL de Soluo de Bicarbonato de Sdio em um
balo volumtrico de 50mL;
3. Adicionar 0,5mL da soluo de Co-II;
4. Transferir 25mL de amostra filtrada em 0,45 m para o balo volumtrico;
5. Completar o volume do balo volumtrico com Bicarbonato de Sdio;
6. Deixar reagir por 15 minutos;
8. Fazer um branco com H2O destilada;
4.21.5. Procedimento - Mtodo do Titnio
1. Pipetar 10 mL de amostra filtrada em membrana 0,45 m;
2. Adicionar 1 mL da soluo de titnio;
3. Deixar reagir por 10 minutos;
4. Ler em espectrofotmetro de 405 nm;
5. Fazer 5 padres e construir uma curva de calibrao;
Obs.: Conc. De H2O de at 10 mg/L caso seja superior, diluir sempre 10 vezes.
99
4.22. FERRO (Fe+3) EM AMOSTRAS COM COAGULANTE Fe2(SO4)3

4.22.1. Equipamento e vidraria
Balana analtica;
Pipeta;
Erly;
Bureta;
Bcker;
4.22.2. Reagentes
HCl concentrado;
KI em cristais;
Soluo Indicadora de Amido

Soluo estoque de Tiossulfato de sdio (Na2S2O3.5H2O) 0,1N

Pesar 25g de Na2S2O3.5H2O e transferir para um balo volumtrico de 1L,
adicionar gua e promover a dissoluo do sal, acrescentar aproximadamente
1mL de clorofrmio, e completar o volume do balo com gua. Padronizar com
10mL de soluo de dicromato de potssio (K2Cr2O7) 0,1N, acrescidos de 1mL
de cido sulfrico concentrado mais cerca de 80mL de gua, deve-se deixar
por 6 minutos o erly no escuro, em seguida, adicionar uma esptula (1g) de KI,
e titular contra soluo de tiossulfato at o aparecimento de uma colorao
amarelo-palha, nesse ponto, adicionar amido e prosseguir a titulao at a
viragem do azul para o incolor. Calcular a normalidade real do tiossulfato:
NNa2S2O3 =
N K 2Cr 2O 7 *V K 2Cr 2O 7
100
1. Pesar aproximadamente 20g de amostra lquida num balo volumtrico de
100mL;
2. Diluir, com gua destilada, at completar o volume do balo;
3. Pipetar 50mL do contedo do balo e transferir para um bcker de 150mL;
4. Adicionar 12mL de cido Clordrico concentrado;
5. Adicionar de 2 a 3g de Iodeto de Potssio;
6. Deixar reagir, no escuro, por seis minutos;
7. Adicionar 1mL de amido;
8. Titular contra soluo de Tiossulfato de Sdio 0,1N, at viragem do azul para o
incolor.
4.22.4. Clculo
%Ferro (Fe+3)
vol. Na 2S 2O3 0,1 11,17

10 ( fator de diluio)
massa pesada
4.23. DETERMINAO DA ACIDEZ LIVRE EM COAGULANTE Fe2(SO4)3

4.23.1. Equipamento e vidraria
Balana analtica;
pHmetro;
Pipeta;
proveta
Erly;
Bureta;
Bcker;
101
4.23.2. Reagentes
Hidrxido de Sdio (NaOH) 0.2M

Dissolver 8g de NaOH em 1L de gua destilada.
cido Sulfrico (H2SO4) 0.25M

Dissolver, com cuidado, 6.8mL de cido Sulfrico concentrado em um balo
volumtrico de 1L contendo, aproximadamente, 800mL de gua destilada.
Completar o volume do balo.
Fluoreto de Potssio (KF) 3.5M

Dissolver 164.73g de KF em 300mL de gua destilada, ajustar o pH com cido
sulfrico para 9.0; transferir para um balo volumtrico de 0.5L e completar o
volume com gua destilada.
Fluoreto de Sdio (NaF) soluo saturada

Dissolver 41g de NaF em 1L de gua destilada.
Indicador de Fenolftalena
1. Pesar, aproximadamente, 3g de amostra num bcker de 250mL;
2. Adicionar 50mL de gua destilada e agitar;
3. Filtrar, se necessrio;
4. Adicionar 5mL de cido Sulfrico 0.25M;
5. Adicionar, com uma proveta, 30mL de KF ou 150mL de NaF;
6. Adicionar de 3 a 5 gotas de Indicador de Fenolftalena;
7. Titular contra a soluo de NaOH 0.2M at a viragem do indicador do incolor
para rsea.
102
4.23.4. Clculo
%cido Sulfrico (mol H/100g)
(V 1 C1) (V 2 * 2C 2)
* 49
M *10
onde:
V1: volume de NaOH gastos na titulao;
C1: normalidade do NaOH;
V2: volume usado de cido sulfrico;
C2: normalidade do cido sulfrico;
M: massa do coagulante.
4.24. FERRO TOTAL

4.24.1. Mtodo de determinao FerroVer (kit da Hach)
Mtodo 265 (mtodo da fenantrolina)
4.24.2. Equipamentos e vidrarias.
DR 2000;
Cubetas para o DR 2000.
4.24.3. Reagentes
Kit de reagente FerroVer Powder Pillows (nmero de catlogo: 854-99) para

25mL.
1. Entrar no DR 2000 com o mtodo 265;
2. Ajustar o comprimento de onda para 510nm;
3. Pressionar o boto READ/ENTER;
4. Introduzir uma cubeta contendo gua destilada como o Branco;
5. Pressionar o boto ZERO;
6. Adicionar a amostra numa cubeta;
103
7. Adicionar um sache do reagente FerroVer;

8. Garantir a dissoluo do reagente na amostra;
9. Acionar o TIMER do DR 2000;
10. Aguardar os 3 minutos;
11. Ler no DR 2000.
4.24.5. Clculo
mgFe/L
=valor indicado no visor do DR 2000.
4.25. MANGANS
4.25.1. Mtodo de determinao mtodo PAN (kit da Hach)
Mtodo 290, para Baixas Concentraes.
DR 2000;
Cubetas para o DR 2000.
Proveta;
Pipeta de pasteur;
Conta-gotas.
4.25.3. Reagentes
Kit de reagente Cianeto/Alcalino (nmero de catlogo: 21223-32);
Kit de reagente cido Ascrbico Powder Pillows (nmero de catlogo: 1457799);
Kit de reagente Indicador PAN 0.1% (nmero de catlogo: 272-56).
104
1. Entrar no DR 2000 com o mtodo 290;
2. Ajustar o comprimento de onda para 560nm;
3. Pressionar o boto READ/ENTER;
4. Adicionar gua destilada numa cubeta para fazer o Branco;
5. Adicionar um sache do reagente cido Ascrbico;
6. Garantir a completa dissoluo do reagente no Branco;
7. Adicionar, com um conta-gotas, 1mL de reagente Cianeto/Alcalino;
8. Garantir a homogeneizao;
9. Adicionar, com uma pipeta de pasteur, 1mL de reagente PAN 0.1%;
10. Garantir a homogeneizao;
11. Acionar o TIMER no DR 2000;
12. Aguardar os 2 minutos;
13. Introduzir a cubeta no DR 2000;
14. Pressionar o boto ZERO;
15. Repetir os mesmos procedimentos descritos para a amostra;
16. Ler no DR 2000.
4.25.5. Clculo
mgMn/L
=valor indicado no visor do DR 2000.
105
5. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
AMERICAN PUBLIC HEALTH ASSOCIATION, AMERICAN WATER WORKS
ASSOCIATION, WATER ENVIROMENTAL FEDERATION. Standard Methods for
the Examination of Water and Wastewater. 20o edio, Washington,
APHA/AWWA/WEF, 1998.
MANUAL DE PROCEDIMENTOS PARA ESPECTROFOTMETRO DR 2000

HACH/1996
MANUAL DE SOLUES, REAGENTES & SOLVENTES. MORITA,

ASSUMPO R. M..; 2a edio. Editora Edgard Blcher Ltda., 1972
T.;
NORMAS TCNICAS DA CETESB, nmeros: L5.015; L5.102; L5.120; L5.121;

L5.128; L5.143. 1a Edio, 1978,
QUMICA GERAL. RUSSELL, J.B. So Paulo, Editora McGraw-Hill do Brasil,

1981.
TCNICAS
DE
ANLISES
FSICO-QUMICAS
PARA
CONTROLE
OPERACIONAL DE ETA. Companhia de Saneamento Bsico do Estado de
So Paulo SABESP. 1a edio, 1999.
106
107

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Os acidentes de trabalho ocorridos em mbito de laboratrios qumicos so muito

Realizar controles mdicos peridicos, envolvendo exames clnicos e

Proibir correrias ou brincadeiras nas dependncias do laboratrio;

Conhecer e avaliar os riscos com a operao de amostras, reativos, solventes,

Saber operar corretamente com o s equipamentos e aparelhagens do

Incentivar o uso de EPIs;

Trabalhar sempre com avental de manga longa e devidamente abotoado;

Evitar usar roupas de tecido sinttico (facilmente inflamvel);

Proibir fumar nas dependncias do laboratrio, por perigo de contato com

Comunicar a chefia a ocorrncia de qualquer acidente, por mais simples que

No misturar pertences pessoais com material de laboratrio;

Seguir as orientaes de segurana e de uso de equipamentos e reagentes;

Com relao ao laboratrio do ponto de vista funcional, de suma importncia

Manter as bancadas sempre limpas e livre de materiais estranhos ao trabalho;

Rotular imediatamente o frasco com o reagente preparado e as amostras

Limpar imediatamente qualquer derramamento de produtos e/ou reagentes.

Descartar todos e quaisquer materiais de vidro trincado ou que possa oferecer

Acondicionar os cacos de vidro num recipiente prprio, no misturando com o

Discriminar a voltagem de todas as tomadas, de preferncia padronizando

Indicar com um aviso do tipo Chapa quente as chapas de aquecimentos

Ter sempre disponvel os EPIs;

Possuir em suas dependncias uma Caixa de Primeiro Socorros, de

Possuir, em local estratgico, um chuveiro de emergncia e um lava-olhos;

Manter os extintores de incndio sinalizados e em dia com suas recargas;

Oferecer um sistema de iluminao de emergncia, para os casos de falta de

Possuir um sistema de exausto e recirculao de ar.

Os riscos mais comuns de acidentes em laboratrios qumicos so: cortes,

Por ingesto de substncia qumica: no provocar vmito quando tratar-se

Por inalao de vapores corrosivos: remover a pessoal do local, dispondo-a

Por queimaduras: no caso de queimaduras com cidos, deve-se lavar com

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Pipetas volumtricas e graduadas: deve-se utilizar uma pra para suco,

Limpeza da vidraria: toda a aparelhagem de vidro ou de plstico empregada

livre de substncias estranhas ao processo, caso contrrio, os resultados no

3. COLETA E PRESERVAO DE AMOSTRAS