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MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO TERCEIRA EDIO

Durante mais de 20 anos, desde que foi publicado em 1983, o Manual de Segurana Biolgica nos Laboratrios tem sido uma fonte de orientaes prticas sobre tcnicas de segurana biolgica para os laboratrios de todos os nveis. Boas Tcnicas de Microbiologia e a utilizao apropriada do equipamento de proteco por parte de um pessoal bem formado continuam a ser os elementos fundamentais da segurana biolgica laboratorial. No entanto, a globalizao, os progressos considerveis da tecnologia, a emergncia de novas doenas e as ameaas graves que constituem a utilizao e libertao intencionais de agentes microbiolgicos e toxinas obrigaram a uma reviso dos procedimentos em vigor. Nesta nova edio, o Manual foi portanto alvo de uma ampla reviso e expanso do seu mbito. O Manual abrange agora a avaliao dos riscos e a utilizao segura da tecnologia de recombinao de ADN, e fornece igualmente orientaes para a fiscalizao e certificao dos laboratrios. Foram igualmente introduzidos conceitos de biosegurana e os mais recentes regulamentos internacionais para o transporte de substncias infecciosas. Documentao sobre segurana em laboratrios de unidades de sade, publicada anteriormente pela OMS noutras publicaes, foi igualmente incorporada no Manual. Esperamos que o Manual continue a estimular os pases a introduzir programas de segurana biolgica e cdigos nacionais de procedimentos para o manuseamento seguro de materiais potencialmente infecciosos.
ISBN 92 4 254650 1

MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO


Terceira edio

OMS

Organizao Mundial da Sade

Manual de segurana biolgica em laboratrio


Terceira edio

Organizao Mundial da Sade Genebra 2004

Catalogao pela Biblioteca da OMS Organizao Mundial da Sade Manual de segurana biolgica em laboratrio 3a edio 1.Connamento de riscos biolgicos mtodos 2.Laboratrios padres em laboratrio preveno e controlo 4.Manuais I.Ttulo. ISBN 92 4 154650 6 (Classicao LC/NLM: QY 25) 3.Infeco

WHO/CDS/CSR/LYO/2004.11

Esta publicao foi apoiada com uma subveno Grant/Cooperative Agreement Number U50/CCU012445-08 dos Centros para Controlo e Preveno de Doenas (CDC), Atlanta, GA, EUA. A responsabilidade pelas informaes contidas nesta publicao cabe exclusivamente aos seus autores e no representam necessariamente o ponto de vista ocial dos CDC.

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Prefcio Agradecimentos 1. Princpios gerais Introduo PARTE I. Directivas de segurana biolgica 2. Avaliao dos riscos microbiolgicos Espcimes sobre os quais se dispe de informaes limitadas Avaliao de riscos e microrganismos geneticamente modicados 3. Laboratrios de base Nveis 1 e 2 de segurana biolgica Cdigo de prticas Concepo e instalaes do laboratrio Equipamento laboratorial Vigilncia mdica do pessoal Formao Manuseamento de resduos Segurana qumica, elctrica, do equipamento e contra incndios e radiaes 4. Laboratrio de connamento Nvel 3 de segurana biolgica Cdigo de prticas Concepo e instalaes do laboratrio Equipamento laboratorial Vigilncia mdica do pessoal 5. Laboratrio de connamento mximo Nvel 4 de segurana biolgica Cdigo de prticas Concepo e instalaes do laboratrio 6. Instalaes laboratoriais para animais Instalao para animais Nvel 1 de segurana biolgica

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MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

Instalao para animais Nvel 2 de segurana biolgica Instalao para animais Nvel 3 de segurana biolgica Instalao para animais Nvel 4 de segurana biolgica Invertebrados 7. Directivas para a scalizao da construo de instalaes laboratoriais 8. Directivas para a certicao de instalaes laboratoriais PARTE II. Directivas de proteco biolgica 9. Conceitos de proteco biolgica em laboratrio PARTE III. Equipamento de laboratrio 10. Cmaras de segurana biolgica Cmara de segurana biolgica Classe I Cmaras de segurana biolgica Classe II Cmara de segurana biolgica Classe III Ligaes de ar da cmara de segurana biolgica Escolha de uma cmara de segurana biolgica Utilizao de cmaras de segurana biolgica em laboratrio 11. Equipamento de segurana Isoladores de presso negativa em plstico exvel Material de pipetar Homogeneizadores, batedores, misturadores e geradores de ultra-sons Ansas descartveis Microincineradores Equipamento e roupa de proteco pessoal PARTE IV. Boas tcnicas microbiolgicas 12. Tcnicas de laboratrio Manipulao segura de amostras em laboratrio Uso de pipetas e meios de pipetar Evitar a disperso de materiais infecciosos Utilizao de cmaras de segurana biolgica Evitar a ingesto de material infeccioso e o contacto com a pele e os olhos Evitar a inoculao de material infeccioso Separao de soro Utilizao de centrifugadoras

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Utilizao de homogeneizadores, batedores, misturadores e geradores de ultra-sons Utilizao de separadores de tecidos Manuteno e utilizao de frigorcos e congeladores Abertura de ampolas contendo material infeccioso liolizado Armazenagem de ampolas contendo material infeccioso Precaues de base com sangue e outros uidos, tecidos e excrees orgnicos Precaues a ter com materiais podendo conter pries 13. Planos de emergncia e medidas a tomar Plano de emergncia Medidas de emergncia em laboratrios microbiolgicos 14. Desinfeco e esterilizao Denies Limpar materiais de laboratrio Germicidas qumicos Descontaminao do meio ambiente local Descontaminao de cmaras de segurana biolgica Lavagem/descontaminao das mos Desinfeco e esterilizao pelo calor Incinerao Eliminao 15. Introduo ao transporte de substncias infecciosas Regulamentos internacionais sobre transportes O sistema bsico de embalagem tripla Processo de limpeza de derrames PARTE V. Introduo a biotecnologias 16. Segurana biolgica e tecnologia de recombinao de ADN Consideraes de segurana biolgica para sistemas de expresso biolgica Consideraes de segurana biolgica para vectores de expresso Vectores virais para transferncia de genes Animais transgnicos e knock-out Plantas transgnicas Avaliaes de risco para organismos geneticamente modicados Outras consideraes
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PARTE VI. Segurana em relao a produtos qumicos, incndio e electricidade 17. Produtos qumicos perigosos Vias de exposio Armazenagem de produtos qumicos Regras gerais relativas a incompatibilidades qumicas Efeitos txicos dos produtos qumicos Produtos qumicos explosivos Derrames de produtos qumicos Gazes comprimidos e liquefeitos 18. Outros tipos de risco em laboratrio Risco de incndio Riscos elctricos Rudo Radiaes ionizantes PARTE VII. Segurana: organizao e formao 19. Responsvel da segurana biolgica e comisso de segurana biolgica Responsvel da segurana biolgica Comisso de segurana biolgica 20. Segurana do pessoal auxiliar Servios de manuteno de aparelhos e instalaes Servios de limpeza 21. Programas de formao PARTE VIII. Lista de controlo de segurana 22. Lista de controlo de segurana Locais Armazenagem Saneamento e instalaes para o pessoal Aquecimento e ventilao Iluminao Servios Segurana Preveno e proteco contra incndios Armazenagem de lquidos inamveis

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NDICE

Gases comprimidos e liquefeitos Riscos elctricos Proteco individual Sade e segurana do pessoal Equipamento de laboratrio Materiais infecciosos Produtos qumicos e substncias radioactivas PARTE IX. Referncias, anexos e ndex Referncias Anexo 1 Primeiros socorros Anexo 2 Vacinao do pessoal Anexo 3 Centros Colaboradores da OMS para a Segurana Biolgica Anexo 4 Segurana na utilizao do equipamento Equipamento capaz de criar riscos Anexo 5 Produtos qumicos: perigos e precaues ndice remissivo

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Prefcio

A Organizao Mundial de Sade (OMS) reconhece h muito tempo que a segurana, e particularmente a segurana biolgica, so questes importantes a nvel internacional; a primeira edio do Manual de Segurana Biolgica em Laboratrio foi publicada em 1983. Este manual estimulava os pases a aceitar e introduzir conceitos bsicos de segurana biolgica e a elaborar cdigos nacionais de procedimentos para um manuseamento seguro dos microrganismos patognicos nos laboratrios dentro dos seus territrios. Desde essa data (1983), numerosos pases tm utilizado as orientaes fornecidas no manual para elaborar os referidos cdigos. Em 1993 foi publicada a segunda edio. Nesta terceira edio do manual, a OMS continua a desempenhar o seu papel de liderana internacional no campo da segurana, ao abordar as questes de proteco e de segurana biolgicas, que temos de enfrentar no novo milnio. Nesta terceira edio sublinha-se devidamente a importncia da responsabilidade pessoal; acrescentaram-se novos captulos sobre a avaliao dos riscos, a utilizao segura da tecnologia ADN recombinante e o transporte de materiais infecciosos. Os recentes acontecimentos mundiais revelaram novas ameaas sade pblica, atravs da utilizao e libertao intencionais de agentes microbiolgicos e toxinas; em consequncia, nesta edio introduziram-se conceitos de proteco biolgica proteco dos recursos biolgicos contra roubo, perda ou desvio que possam levar utilizao inapropriada desses agentes como ameaa sade pblica. Esta nova edio engloba igualmente informaes sobre segurana extradas da publicao da OMS Safety in Health Care Laboratories (1997). A terceira edio do Manual da OMS sobre Segurana Biolgica em Laboratrios uma referncia til e um guia para os pases que aceitam o desao de elaborar e estabelecer cdigos nacionais de procedimentos para um manuseamento seguro dos recursos microbiolgicos, assegurando simultaneamente a sua disponibilidade para ns clnicos, epidemiolgicos e de investigao.

Dr. A. Asamoa-Baah Director-Geral Adjunto Doenas Transmissveis Organizao Mundial de Sade Genebra Sua
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Agradecimentos

A elaborao desta terceira edio do Manual de Segurana Biolgica em Laboratrio foi possvel graas s competncias das pessoas a seguir nomeadas e a quem apresentamos os nossos profundos agradecimentos: Dr. W. Emmett Barkley, Howard Hughes Medical Institute, Chevy Chase, MD, USA Dr. Murray L. Cohen, Centers for Disease Control and Prevention, Atlanta, GA, USA (reformado) Dr. Ingegerd Kallings, Swedish Institute of Infectious Disease Control, Stockholm, Sweden Sra. Mary Ellen Kennedy, Consultant in Biosafety, Ashton, Ontario, Canada Sra. Margery Kennett, Victorian Infectious Diseases Reference Laboratory, North Melbourne, Australia (reformada) Dr. Richard Knudsen, Ofce of Health and Safety, Centers for Disease Control and Prevention, Atlanta, GA, USA Dra. Nicoletta Previsani, Biosafety programme, World Health Organization, Geneva, Switzerland Dr. Jonathan Richmond, Ofce of Health and Safety, Centers for Disease Control and Prevention, Atlanta, GA, USA (reformado) Dr. Syed A. Sattar, Faculty of Medicine, University of Ottawa, Ontario, Canada Dra. Deborah E. Wilson, Division of Occupational Health and Safety, Ofce of Research Services, National Institutes of Health, Department of Health and Human Services, Washington, DC, USA Dr. Riccardo Wittek, Institute of Animal Biology, University of Lausanne, Lausanne, Switzerland Tambm agradecemos a ajuda das seguintes pessoas: Sra. Maureen Best, Ofce of Laboratory Security, Health Canada, Ottawa, Canada Dr. Mike Catton, Victorian Infectious Diseases Reference Laboratory, North Melbourne, Australia Dr. Shanna Nebsy, Ofce of Health and Safety, Centers for Disease Control and Prevention, Atlanta, GA, USA
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MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

Dr. Stefan Wagener, Canadian Science Centre for Human and Animal Health, Winnipeg, Canada Os autores e os revisores tambm desejam agradecer aos numerosos especialistas que contribuiram para a primeira e segunda edies do Manual de Segurana Biolgica em Laboratrio assim como para a publicao da OMS Safety in health-care laboratories (1997).

1. Princpios gerais

Introduo Neste manual, faz-se referncia aos perigos relativos de microrganismos infecciosos, por grupos de risco (Grupos de Risco 1, 2, 3 e 4 da OMS). Esta classicao s deve ser utilizada em trabalho laboratorial. No quadro a seguir descrevem-se os grupos de risco. Quadro 1. Classicao de microrganismos infecciosos por grupo de risco
Grupo de Risco 1 (nenhum ou baixo risco individual e colectivo) Um microrganismo que provavelmente no pode causar doena no homem ou num animal. Grupo de Risco 2 (risco individual moderado, risco colectivo baixo) Um agente patognico que pode causar uma doena no homem ou no animal, mas que improvvel que constitua um perigo grave para o pessoal dos laboratrios, a comunidade, o gado ou o ambiente. A exposio a agentes infecciosos no laboratrio pode causar uma infeco grave, mas existe um tratamento ecaz e medidas de preveno e o risco de propagao de infeco limitado. Grupo de Risco 3 (alto risco individual, baixo risco colectivo) Um agente patognico que causa geralmente uma doena grave no homem ou no animal, mas que no se propaga habitualmente de uma pessoa a outra. Existe um tratamento ecaz, bem como medidas de preveno. Grupo de Risco 4 (alto risco individual e colectivo) Um agente patognico que causa geralmente uma doena grave no homem ou no animal e que se pode transmitir facilmente de uma pessoa para outra, directa ou indirectamente. Nem sempre est disponvel um tratamento ecaz ou medidas de preveno.

As instalaes laboratoriais designam-se por: laboratrio de base Nvel 1 de segurana biolgica; laboratrio de base Nvel 2 de segurana biolgica, de connamento Nvel 3 de segurana biolgica, de connamento mximo Nvel 4 de segurana biolgica. Estas designaes baseiam-se num conjunto de caractersticas de concepo, estruturas de connamento, equipamento, prticas e normas operacionais necessrias para trabalhar com agentes de diversos grupos de risco. No quadro 2 relacionam-se mas no se equacionam os grupos de risco aos nveis de segurana biolgica dos laboratrios que devem trabalhar com os organismos em cada grupo de risco. Os pases (regies) devem estabelecer uma classicao nacional (regional) dos microrganismos, por grupo de risco, levando em considerao:
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MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

Quadro 2. Relao dos grupos de risco com nveis de segurana biolgica, prticas e equipamento
GRUPO DE RISCO NVEL DE SEGURANA BIOLGICA TIPO DE LABORATRIO PRTICAS DE LABORATRIO EQUIPAMENTO DE PROTECO

Bsico Nvel 1 de segurana biolgica Bsico Nvel 2 de segurana biolgica Connamento Nvel 3 de segurana biolgica Connamento mximo Nvel 4 de segurana biolgica

Ensino bsico, pesquisa

BTM

Nenhum; mesa/ bancada de trabalho

Servios bsicos de sade; servios de diagnstico, pesquisa Servios especiais de diagnstico, pesquisa Servio de manipulao de agentes patognicos perigosos

BTM e fatos de proteco, sinal de perigo biolgico Como Nvel 2, mais roupa especial, acesso controlado, ventilao dirigida Como Nvel 3, mais entrada hermtica, sada com duche, eliminao especial de resduos

Bancada de trabalho e CSB para aerossis potenciais CSB e/ou outros dispositivos primrios para todas as actividades CSB classe III ou fatos de presso positiva em conjunto com CSB classe II, autoclave duas portas (atravs da parede), ar ltrado

CSB Cmaras de segurana biolgica. BTM Boas Tcnicas de Microbiologia (ver Parte IV deste Manual).

1. A patogenicidade do organismo 2. O modo de transmisso e raio de aco do organismo. Estes podem ser inuenciados pelos nveis de imunidade da populao local, pela densidade e movimentos da populao atingida, pela presena de vectores apropriados e normas de higiene ambiental. 3. A disponibilidade local de medidas de preveno ecazes, nomeadamente: prolaxia por vacinao ou administrao de antisoros (vacinao passiva); medidas sanitrias (higiene dos alimentos e da gua); controlo de reservatrios animais ou vectores artrpodes. 4. A disponibilidade local de tratamento ecaz, nomeadamente vacinao passiva, vacinao ps-exposio e utilizao de agentes antimicrobianos, antivirais e quimioteraputicos, levando em considerao a possibilidade de emergncia de estirpes resistentes aos medicamentos. A atribuio do nvel de segurana biolgica a um agente num trabalho laboratorial deve basear-se numa avaliao dos riscos. Esta avaliao deve levar em conta o grupo de risco e outros factores ao determinar o nvel apropriado de segurana biolgica.
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1. PRINCPIOS GERAIS

Por exemplo, um agente afectado no Grupo de Risco 2 precisa, de um modo geral, de instalaes, equipamento, prticas e normas de segurana biolgica de Nvel 2 para realizar o seu trabalho em segurana. Contudo, se determinadas experincias exigirem a gerao de aerossis de alta concentrao, o Nvel 3 de segurana biolgica pode ser mais apropriado para dar o grau de segurana necessrio, visto que assegura uma maior connamento de aerossis no ambiente de trabalho do laboratrio. O nvel de segurana biolgica atribuda a um determinado trabalho deve depender de uma avaliao prossional baseada numa estimao dos riscos, em vez da atribuio automtica de um nvel laboratorial de segurana biolgica, de acordo com a designao do grupo de risco atribudo ao agente patognico a utilizar (ver Captulo 2). O Quadro 3 resume as instalaes e equipamentos necessrios para os 4 nveis de segurana biolgica. Quadro 3. Resumo dos requisitos para os diversos nveis de segurana biolgica
NVEL DE SEGURANA BIOLGICA

1 Isolamentoa do laboratrio Sala selada para descontaminao Ventilao: Aduo do ar Sistema ventilao controlada Exaustor com ltro HEPA* Entrada com porta dupla Cmara de vcuo Cmara de vcuo com duche Antecmara Antecmara com duche Tratamento dos euentes Autoclave in loco numa sala do laboratrio de duas portas Cmaras de segurana biolgica Meios de monitorizao da proteco do pessoald
a b

2 No No Desejvel Desejvel No No No No No No No Desejvel No No Desejvel No

3 Sim Sim Sim Sim Sim/Nob Sim No No Sim Sim/Noc Sim/Noc Sim Desejvel Desejvel Sim Desejvel

4 Sim Sim Sim Sim Sim Sim Sim Sim No Sim Sim Sim Sim Sim Sim

No No No No No No No No No No No No No No No No

Isolamento ambiental e funcional do trnsito em geral. Segundo a localizao do exaustor (ver Captulo 4). c Dependente dos agentes utilizados no laboratrio. d Por exemplo, janela, circuito fechado de televiso, comunicao em dois sentidos. * Ar particulado de alta ecincia.

A atribuio do nvel de segurana biolgica leva em considerao o organismo (agente patognico) utilizado, as instalaes disponveis, bem como o equipamento, prticas e normas necessrias para trabalhar, com segurana, no laboratrio.
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PARTE I

Directivas de segurana biolgica

2. Avaliao dos riscos microbiolgicos

A pedra angular da prtica da segurana biolgica a avaliao dos riscos. Embora existam vrios meios para ajudar a avaliar os riscos inerentes a uma determinada experincia ou processo, a componente mais importante a ponderao prossional. A avaliao dos riscos deve ser efectuada pelas pessoas mais familiares com as caractersticas especcas dos eventuais organismos, normas, equipamento e modelos animais a utilizar, bem como do equipamento de connamento e instalaes disponveis. O director do laboratrio ou o investigador principal deve assegurar-se da realizao de avaliaes de riscos adequadas e atempadas e trabalhar em ligao estreita com a comisso de segurana e o pessoal da instituio, a m de assegurar a disponibilidade de equipamento e instalaes apropriadas para apoiar as actividades em questo. Uma vez efectuadas, as avaliaes dos riscos devem ser reanalisadas de tempos a tempos e revistas sempre que necessrio, tendo em considerao novos dados que tenham um impacto no grau de risco, bem como novas informaes pertinentes da literatura cientca. Um dos instrumentos disponveis mais teis para efectuar uma avaliao dos riscos microbiolgicos a elaborao de uma lista dos grupos de risco por agentes microbiolgicos (ver Captulo 1). Contudo, a simples referncia a um grupo de risco insuciente para realizar uma avaliao de riscos. Outros factores devem ser considerados, nomeadamente: 1. Patogenicidade do agente e dose infecciosa 2. Resultado potencial da exposio 3. Via natural da infeco 4. Outras vias de infeco, resultantes de manipulaes laboratoriais (parentricas, via area, ingesto) 5. Estabilidade do agente no ambiente 6. Concentrao do agente e volume do material concentrado a manipular 7. Presena de um hospedeiro apropriado (humano ou animal) 8. Informao disponvel de estudos sobre animais e relatrios de infeces adquiridas em laboratrios ou relatrios clnicos 9. Actividade laboratorial planeada (gerao de ultra-sons, produo de aerossis, centrifugao, etc.) 10. Qualquer manipulao gentica do organismo que possa alargar o raio de aco do agente ou alterar a sensibilidade do agente a regimes de tratamento ecazes conhecidos (Ver Captulo 16) 11. Disponibilidade local de prolaxia ecaz ou intervenes teraputicas.
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MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

De acordo com a informao obtida durante a avaliao dos riscos, pode atribuir-se um nvel de segurana biolgica actividade planeada, seleccionar o equipamento de proteco pessoal apropriado e conceber normas-padro de procedimento englobando outras intervenes de segurana, a m de assegurar a realizao mais segura possvel da referida actividade. Espcimes sobre os quais se dispe de informaes limitadas O processo de avaliao dos riscos descrito atrs funciona bem quando est disponvel uma informao adequada. Porm, h situaes em que a informao insuciente para efectuar uma avaliao de riscos adequada, por exemplo, no caso de amostras clnicas ou epidemiolgicas colhidas no terreno. Nestes casos, aconselhvel adoptar uma abordagem prudente na sua manipulao. 1. Respeitar sempre as precaues-padro (2) e utilizar proteces (luvas, batas, culos) nos casos de amostras colhidas em pacientes. 2. As normas e procedimentos de connamento bsico Nvel 2 de segurana biolgica so o requisito mnimo para manusear amostras. 3. O transporte de amostras deve obedecer s regras e regulamentos nacionais e/ou internacionais. Certas informaes podem ajudar a determinar o risco de manuseamento destes espcimes: 1. Dados mdicos sobre o doente 2. Dados epidemiolgicos (sobre morbilidade e mortalidade, via provvel de transmisso, outros dados de investigao sobre o surto) 3. Informaes sobre a origem geogrca do espcime. Nos casos de surtos de doena de etiologia no conhecida, podem ser elaboradas e enviadas pela Internet (www) directivas ad hoc apropriadas, tanto pelas autoridades nacionais competentes como pela OMS (como foi o caso durante a emergncia do sndroma respiratrio agudo (SARS) em 2003) indicando como embalar as amostras para transporte e o nvel de segurana biolgica necessria para anlise das mesmas. Avaliao de riscos e microrganismos geneticamente modicados No Captulo 16 encontra-se uma anlise detalhada sobre avaliao de riscos e organismos geneticamente modicados (OGM).

3. Laboratrios de base Nveis 1 e 2 de segurana biolgica


Neste manual, as orientaes e recomendaes apresentadas como requisitos mnimos para os laboratrios de todos os nveis de segurana biolgica visam microrganismos nos Grupos de Risco 1 a 4. Embora algumas precaues possam parecer desnecessrias para alguns organismos no Grupo de Risco 1, elas so desejveis para efeitos de formao, tendo em vista promover Boas (seguras) Tcnicas de Microbiologia (BTM). Os laboratrios para diagnsticos e cuidados de sade (sade pblica, clnicos ou hospitalares) devem todos ser concebidos para o Nvel 2 de segurana biolgica, no mnimo. Dado que nenhum laboratrio tem um controlo total dos espcimes que recebe, os agentes laboratoriais podem car expostos a organismos em grupos de risco mais elevado do que o previsto. Esta possibilidade tem de ser levada em conta na elaborao dos planos e polticas de segurana biolgica. Em certos pases, os laboratrios clnicos tm de estar ocialmente acreditados. De um modo geral, devem adoptar-se e utilizar-se sempre as precaues-padro (2). As directivas para laboratrios de base Nveis 1 e 2 de segurana biolgica aqui apresentadas so abrangentes e detalhadas, dado que so fundamentais para os laboratrios de todos os nveis de segurana biolgica. Para os laboratrios de connamento Nvel 3 de segurana biolgica, e laboratrios de connamento mximo Nvel 4, estas directivas foram alvo de modicaes e acrscimos tendo em conta o trabalho com agentes patognicos especialmente perigosos (ver Captulos 4 e 5 a seguir). Cdigo de prticas Este cdigo uma lista das prticas e normas laboratoriais mais essenciais que esto na base das BTM. Em muitos laboratrios e programas nacionais para laboratrios, pode servir para elaborar prticas e normas escritas para actividades laboratoriais seguras. Cada laboratrio deve adoptar um manual de segurana ou de trabalho, que identique perigos conhecidos e potenciais e que especique as prticas e as normas para eliminar ou minimizar esses perigos. As BTM so fundamentais para a segurana dos laboratrios. O equipamento laboratorial especializado um suplemento dessa segurana, mas no pode substituir as normas apropriadas. A seguir se descrevem os conceitos mais importantes.
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MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

Ilustrao 1. Sinal de risco biolgico a axar nas portas do laboratrio

RISCO BIOLGICO
ENTRADA RESERVADA A PESSOAL AUTORIZADO
Nvel de segurana biolgica : ______________________ Investigador responsvel : _________________________ Contacto em caso de emergncia : ___________________ Telefone de dia : _______________________________ Telefone privado : _______________________________ A autorizao para entrar deve ser pedida ao investigador responsvel acima nomeado

Acesso

1. O smbolo e o sinal internacionais de risco biolgico (Ilustrao 1) devem estar expostos nas portas das salas onde se esto a manusear microrganismos do Grupo de Risco 2 ou acima. 2. S o pessoal autorizado deve entrar nas reas de trabalho do laboratrio. 3. As portas do laboratrio devem permanecer fechadas. 4. As crianas no devem poder nem ser autorizadas a entrar nas reas de trabalho do laboratrio. 5. O acesso aos compartimentos de animais requer autorizao especial. 6. Nenhum animal deve entrar no laboratrio, alm dos que se inserem nas actividades do mesmo.
Proteco individual

1. Devem utilizar-se sempre capas, batas ou fatos nos trabalhos de laboratrio. 2. Devem utilizar-se luvas apropriadas em todos os trabalhos que impliquem contacto directo ou acidental com sangue, uidos corporais, materiais potencialmente

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3. LABORATRIOS DE BASE NVEIS 1 E 2 DE SEGURANA BIOLGICA

infecciosos ou animais infectados. Aps utilizao, devem tirar-se as luvas de forma assptica e lavar bem as mos. 3. O pessoal deve lavar as mos aps manusear material infeccioso e animais, e antes de sair das reas de trabalho do laboratrio. 4. Devem utilizar-se culos de segurana, viseiras ou outros dispositivos de proteco, sempre que for necessrio proteger os olhos e a cara de salpicos, impactos de objectos e raios articiais ultravioleta. 5. proibido utilizar roupa de proteco laboratorial fora do laboratrio (cantina, cafetaria, escritrios, biblioteca, salas do pessoal e quartos de banho). 6. Sandlias e chinelos no devem ser utilizados nos laboratrios. 7. proibido comer, beber, fumar, maquilhar-se e pr lentes de contacto nas reas de trabalho do laboratrio. 8. proibido guardar comidas e bebidas nas reas de trabalho do laboratrio. 9. A roupa de proteco laboratorial utilizada no laboratrio no deve ser guardada nos mesmos cacifos ou armrios da roupa normal.
Normas

1. Pipetar com a boca deve ser imperiosamente proibido. 2. Nenhum material deve ser colocado na boca. No lamber rtulos. 3. Todos os procedimentos tcnicos devem ser efectuados de forma a minimizar a formao de aerossis e gotculas. 4. A utilizao de agulhas e seringas hipodrmicas deve ser limitada; estas no devem ser utilizadas como substitutos de pipetas ou qualquer outro m, alm de injeces parentricas ou aspirao de uidos de animais de laboratrio. 5. Qualquer derrame, acidente, exposio efectiva ou potencial a materiais infecciosos deve ser noticado ao supervisor do laboratrio. Deve manter-se um registo escrito de tais acidentes e incidentes. 6. Devem ser elaboradas normas escritas para a limpeza destes derrames e devidamente aplicadas. 7. Os lquidos contaminados devem ser (qumica ou sicamente) descontaminados antes de serem lanados nos esgotos sanitrios. Pode ser necessrio um sistema de tratamento de euentes, segundo a avaliao de riscos do agente (ou agentes) manuseado. 8. Os documentos escritos susceptveis de sarem do laboratrio precisam de ser protegidos de contaminao dentro do laboratrio.
reas de trabalho do laboratrio

1. O laboratrio deve estar arrumado, limpo e sem materiais que no sejam pertinentes para as suas actividades. 2. As superfcies de trabalho devem ser descontaminadas aps qualquer derrame de material potencialmente perigoso e no m de um dia de trabalho.

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MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

3. Todos os materiais contaminados, espcimes e culturas devem ser descontaminados antes de serem ejectados ou limpos para reutilizao. 4. A embalagem e o transporte devem obedecer aos regulamentos nacionais e/ou internacionais pertinentes. 5. Se as janelas forem de abrir, devem ter redes de proteco contra artrpodes.
Controlo da segurana biolgica

1. O director do laboratrio (a pessoa que tem a responsabilidade directa do laboratrio) responsvel pela elaborao e adopo de um plano de controlo da segurana biolgica e de um manual de segurana ou de operaes. 2. O supervisor do laboratrio (que depende do director do laboratrio) deve assegurarse de que o pessoal recebe uma formao regular em segurana laboratorial. 3. O pessoal deve ser alertado para os perigos especiais e deve ler o manual de segurana ou de operaes e seguir as prticas e normas-padro. O supervisor deve assegurar-se de que o pessoal compreende bem estas instrues. Um exemplar do manual de segurana deve estar disponvel no laboratrio. 4. O laboratrio deve ter um programa de controlo de artrpodes e roedores. 5. O pessoal deve dispor de observao mdica, vigilncia e tratamento adequados, sempre que necessrio, devendo assegurar-se a manuteno do historial mdico. Concepo e instalaes do laboratrio Ao conceber um laboratrio e atribuir-lhe um determinado nmero de actividades, deve prestar-se uma ateno especial s condies susceptveis de provocar problemas de segurana nomeadamente: 1. Formao de aerossis 2. Actividades com grandes volumes e/ou altas concentraes de microrganismos 3. Sobrelotao de pessoal e equipamento 4. Infestao de roedores e artrpodes 5. Entradas no autorizadas 6. Fluxo de trabalho: utilizao de amostras e reagentes especcos. Nas ilustraes 2 e 3 a seguir, mostram-se exemplos de concepes de laboratrios para os Nveis 1 e 2 de segurana biolgica.
Caractersticas

1. Espao amplo para empreender as actividades laboratoriais de forma segura, bem como para a limpeza e manuteno. 2. As paredes, o tecto e o pavimento devem ser lisos, fceis de limpar, impermeveis e resistentes a produtos qumicos e desinfectantes normalmente utilizados em laboratrios. O pavimento deve ser anti-derrapante. 3. As bancadas devem ser impermeveis e resistentes a desinfectantes, cidos, lcalis, solventes orgnicos e calor moderado.
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3. LABORATRIOS DE BASE NVEIS 1 E 2 DE SEGURANA BIOLGICA

Ilustrao 2. Laboratrio tpico para o Nvel 1 de segurana biolgica (grcos gentilmente cedidas por CUH2A, Princeton, NJ, EUA)

4. A iluminao deve ser adequada a todas as actividades; devem evitar-se reexos e brilho indesejveis. 5. O mobilirio deve ser robusto. O espao entre e debaixo de bancadas, cmaras e equipamentos deve ser acessvel para a limpeza. 6. O espao de armazenamento deve ser apropriado para guardar o material de uso corrente e evitar assim amontoados nas bancadas e passagens. Deve igualmente prever-se um espao de armazenagem a longo prazo, convenientemente localizado fora da rea de trabalho do laboratrio. 7. Deve igualmente prever-se espao e meios para um manuseamento seguro e armazenagem de solventes, material radioactivo e gs comprimido e liquefeito. 8. Devem existir instalaes, fora da rea de trabalho do laboratrio, para guardar roupas e objectos pessoais. 9. Devem igualmente existir, fora da rea de trabalho do laboratrio, instalaes para comer, beber e descansar.
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MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

10. Em cada sala de laboratrio deve existir um lavatrio, se possvel com gua corrente, e de preferncia perto da porta de sada. 11. As portas devem ter painis transparentes, proteco anti-fogo adequada e de preferncia um sistema de fecho automtico. 12. No Nvel 2 de segurana biolgica, deve existir uma autoclave ou outro meio de descontaminao, na proximidade adequada do laboratrio. 13. Os sistemas de segurana devem prever o combate a incndios, emergncias elctricas, chuveiros de emergncia e meios de lavagem dos olhos. 14. Devem estar previstas reas ou salas de primeiros socorros convenientemente equipadas e facilmente acessveis (ver anexo 1). 15. Ao planear novas instalaes, deve examinar-se a possibilidade de prever sistemas de ventilao mecnica que injectem um uxo de ar sem recirculao. Se no houver ventilao mecnica, as janelas devem ser de abrir e estar equipadas de redes contra artrpodes. 16. essencial dispor de um abastecimento seguro de gua de boa qualidade. No devem existir inter-conexes entre a gua de beber e a gua para o laboratrio. Deve instalar-se um dispositivo anti-reuxo para proteger o sistema de abastecimento de gua. 17. Deve haver um fornecimento de electricidade adequado e de conana e iluminao de emergncia que permita uma sada segura. desejvel dispor de um gerador para apoio do equipamento essencial, como incubadoras, cmaras de segurana biolgica, congeladores, etc., bem como para a ventilao dos compartimentos dos animais. 18. Deve igualmente dispor-se de um fornecimento de gs adequado e de conana. A boa manuteno do sistema imprescindvel. 19. Os laboratrios e os compartimentos de animais so ocasionalmente alvo de vandalismo. Deve examinar-se a possibilidade de instalar um sistema de proteco das instalaes e contra incndios. Portas robustas, grades nas janelas e restrio do nmero de chaves so elementos imprescindveis. Outras medidas que aumentem a segurana devem ser examinadas e aplicadas, se apropriado. Equipamento laboratorial Juntamente com as boas prticas e procedimentos, a utilizao do equipamento de segurana ajudar a reduzir os riscos ao enfrentar os perigos inerentes segurana biolgica. Nesta seco, abordam-se os princpios bsicos relativos ao equipamento apropriado para os laboratrios dos diversos nveis de segurana biolgica. Os requisitos para equipamento de laboratrio de um nvel de segurana biolgica mais elevado so abordados nos captulos pertinentes. O director do laboratrio, aps consulta com o responsvel da segurana biolgica e a comisso de segurana (se houver), deve assegurar-se da disponibilidade do equipamento adequado e da sua boa utilizao. A escolha do equipamento deve levar em conta determinados princpios gerais, nomeadamente:
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3. LABORATRIOS DE BASE NVEIS 1 E 2 DE SEGURANA BIOLGICA

Ilustrao 3. Laboratrio tpico para o Nvel 2 de segurana biolgica (grcos gentilmente cedidos por CUH2A, Princeton, NJ, EUA). As manipulaes susceptveis de gerar aerossis tm lugar numa cmara de segurana biolgica. As portas so mantidas fechadas e com os sinais de perigo apropriados. Os resduos potencialmente contaminados so separados do sistema geral de evacuao de resduos.

1. Ser concebido para evitar ou limitar o contacto entre o operador e o material infeccioso 2. Ser construdo com materiais impermeveis aos lquidos, resistentes corroso e conformes aos requisitos estruturais 3. Ser fabricado sem asperidades, arestas cortantes e partes-movedias sem proteco 4. Ser concebido, construdo e instalado de forma a facilitar o seu manuseamento, manuteno, limpeza, descontaminao e testes de certicao; vidro e outros materiais quebrveis devem ser evitados, sempre que possvel. Pode ser necessrio analisar as possibilidades detalhadas de utilizao e as especicaes de construo do equipamento, para se assegurar que possui as necessrias caractersticas de segurana (ver tambm captulos 10 e 11).
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MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

Equipamento essencial de segurana biolgica

1. Meios de pipetar para evitar pipetar com a boca. Existem as mais diversas formas. 2. Cmaras de segurana biolgica, para utilizar sempre que: se manusear material infeccioso; este material pode ser centrifugado no laboratrio se forem utilizados copos hermticos de segurana centrfuga e se forem enchidos e esvaziados numa cmara de segurana biolgica houver um risco acrescido de infeco por via area forem utilizados procedimentos com alto potencial de produo de aerossis, tais como: centrifugao, moagem, mistura, agitao, separao por ultra-sons, abertura de recipientes com material infeccioso, cuja presso interna seja diferente da presso ambiental, inoculao intranasal em animais e colheita de tecidos infecciosos de animais e de ovos. 3. Ansas de plstico descartveis; podem utilizar-se incineradores de espirais elctricos, dentro das cmaras de segurana biolgica, a m de reduzir a produo de aerossis. 4. Tubos e frascos com tampa de rosca. 5. Autoclaves ou outros meios apropriados para descontaminar o material infeccioso. 6. Pipetas Pasteur de plstico, descartveis, sempre que disponveis, para evitar o vidro. 7. O equipamento como as autoclaves e as cmaras de segurana biolgica precisa de ser validado com mtodos apropriados, antes de ser utilizado. A recerticao deve ser feita a intervalos peridicos, segundo as instrues do fabricante (ver Captulo 7). Vigilncia mdica do pessoal A entidade empregadora, atravs do director do laboratrio, tem de assegurar uma vigilncia apropriada da sade do pessoal do laboratrio. O objectivo desta vigilncia controlar o aparecimento de doenas do trabalho. Para o efeito deve: 1. Proceder vacinao activa ou passiva, sempre que pertinente (ver Anexo 2) 2. Facilitar a deteco precoce das infeces adquiridas no laboratrio 3. Excluir as pessoas altamente susceptveis (grvidas e imunodecientes) de trabalhos laboratoriais de alto risco 4. Fornecer equipamento e meios de proteco pessoal ecazes.
Directivas para a vigilncia do pessoal de laboratrio que manuseia microrganismos, ao Nvel 1 de segurana biolgica

A experincia mostra que no provvel que os microrganismos manuseados a este nvel provoquem doena no homem ou doena animal de importncia veterinria. Contudo, todo o pessoal de laboratrio deve ser submetido a um controlo de sade

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3. LABORATRIOS DE BASE NVEIS 1 E 2 DE SEGURANA BIOLGICA

pr-emprego, onde se registe a sua histria mdica. aconselhvel a noticao imediata de doenas ou acidentes laboratoriais e deve chamar-se a ateno de todo o pessoal para a importncia de manter boas tcnicas de microbiologia.
Directivas para a vigilncia do pessoal de laboratrio que manuseia microrganismos ao Nvel 2 de segurana biolgica

1. necessrio um controlo de sade antes de assumir as suas funes. Deve registar-se a histria mdica da pessoa e efectuar-se uma avaliao centrada na sade ocupacional. 2. A administrao do laboratrio deve manter registo de doenas e ausncias. 3. O pessoal feminino em idade de procriar deve ser avisado dos riscos para o feto inerentes sua exposio a determinados microrganismos (vrus da rubola). As medidas exactas a tomar para proteger o feto variam, segundo os microrganismos a que a me esteja exposta. Formao Erros humanos e ms tcnicas podem comprometer as melhores salvaguardas de proteco do pessoal de laboratrio. Assim, um pessoal consciente da importncia da segurana, bem informado sobre a forma de reconhecer e controlar os perigos eventuais nos laboratrios, uma pea fundamental para prevenir infeces, incidentes e acidentes nos laboratrios. Por este motivo, essencial assegurar uma formao contnua in loco sobre medidas de segurana. Um programa ecaz de segurana comea pelos responsveis dos laboratrios que devem assegurar a integrao de prticas e procedimentos laboratoriais seguros na formao bsica do pessoal. A formao em medidas de segurana deve ser parte integrante da insero de novos trabalhadores; estes devem familiarizar-se com o cdigo de prticas e directivas do laboratrio, incluindo o manual de segurana ou de operaes. Devem adoptar-se medidas que assegurem que os novos agentes leram e compreenderam as directivas, tais como assinar certas pginas. Os supervisores dos laboratrios desempenham o papel mais importante na formao do seu pessoal em boas tcnicas laboratoriais. O responsvel pela segurana biolgica pode ajudar na formao e na elaborao de material de formao e de documentao (ver igualmente Captulo 21). A formao do pessoal deve sempre incluir informao sobre mtodos seguros para situaes de alto risco, que o pessoal de laboratrio tem frequentemente de enfrentar, nomeadamente: 1. Riscos de inalao (durante a produo de aerossis, por exemplo) ao utilizar ansas, semear s riscas a gelose, pipetar, fazer esfregaos, abrir frascos de culturas, tirar amostras de sangue/soro, centrifugar, etc. 2. Riscos de ingesto ao manusear amostras, esfregaos e culturas 3. Riscos de perfuraes cutneas ao utilizar seringas e agulhas 4. Mordidelas e arranhes ao manusear animais

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MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

5. Manuseamento de sangue e outros materiais patolgicos potencialmente perigosos 6. Descontaminao e eliminao de material infeccioso. Manuseamento de resduos Consideram-se como resduos tudo aquilo que se deve deitar fora. Nos laboratrios, a descontaminao dos resduos e a sua eliminao nal esto intimamente interligadas. No dia a dia, so poucos ou nenhuns os materiais contaminados que precisam de ser retirados do laboratrio ou destrudos. A maior parte dos recipientes de vidro, instrumentos e roupa de laboratrio so reutilizados ou reciclados. O princpio dominante que todo o material infeccioso deve ser descontaminado, esterilizado em autoclave ou incinerado no laboratrio. Antes de deitar fora qualquer objecto ou material de laboratrio utilizado em microrganismos ou tecidos animais potencialmente infecciosos, devemos assegurar-nos: 1. Se os referidos objectos ou materiais foram bem descontaminados ou desinfectados segundo as normas em vigor. 2. Na negativa, se foram embalados segundo as normas para a incinerao imediata in loco ou transferncia para outras instalaes com capacidade de incinerao. 3. Se a eliminao dos objectos ou materiais descontaminados implica, para as pessoas que procedem sua eliminao ou que possam entrar em contacto com eles, qualquer outro perigo potencial, biolgico ou outro, fora das instalaes.
Descontaminao

A esterilizao pelo calor, em autoclave, o mtodo preferencial para todos os processos de descontaminao. O material a descontaminar e eliminar deve ser colocado num recipiente (ex.: sacos de plstico para autoclaves) com cores codicadas, segundo se destinem a autoclaves e/ou incineradores. Outros mtodos s podem ser considerados se removerem e/ou matarem os microrganismos (ver Capitulo 14 para mais pormenores).
Normas de manuseamento e eliminao de resduos e materiais contaminados

Deve adoptar-se um sistema de identicao e separao de materiais e recipientes infecciosos. Devem seguir-se os regulamentos nacionais e internacionais, tendo em conta as seguintes categorias: 1. Resduos no-contaminados (no-infecciosos) que podem ser reutilizados, reciclados ou eliminados como resduos domsticos ordinrios 2. Material cortante contaminado (infeccioso) agulhas hipodrmicas, escalpelos, facas e vidro partido; este material deve sempre ser arrumado em recipientes antiperfurantes, munidos de tampas, e tratado como material infeccioso 3. Material contaminado para descontaminao em autoclave, lavagem posterior e reutilizao ou reciclagem
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3. LABORATRIOS DE BASE NVEIS 1 E 2 DE SEGURANA BIOLGICA

4. Material contaminado para descontaminao em autoclave e eliminao 5. Material contaminado para incinerao directa.
Material cortante

As agulhas hipodrmicas, uma vez utilizadas, no devem ser reintroduzidas nos seus invlucros, partidas ou retiradas das seringas descartveis. Todo o conjunto deve ser posto num recipiente para descartveis. As seringas descartveis, quer utilizadas com ou sem agulhas, devem ser colocadas em recipientes para descartveis e incineradas, aps descontaminao em autoclave, se necessrio. Os recipientes para agulhas descartveis devem ser resistentes/antiperfurantes e no devem ser totalmente cheios; quando estiverem quase cheios (3/4 da sua capacidade) devem ser postos em contentores para resduos infecciosos e incinerados, aps descontaminao em autoclave, se as prticas do laboratrio o exigirem. Os recipientes para agulhas descartveis no devem ser deitados em aterros.
Material contaminado (potencialmente infeccioso) para descontaminao em autoclave e utilizao ulterior

No procurar fazer qualquer prlavagem a este material. Qualquer limpeza ou reparao s pode ser feita aps descontaminao em autoclave ou desinfeco.
Material contaminado (potencialmente infeccioso) para eliminao

Com excepo das agulhas, j atrs abordadas, todo o material contaminado (potencialmente infeccioso) deve ser descontaminado em autoclave, em recipientes impermeveis, por exemplo sacos de plstico para autoclaves com cores codicadas, antes de ser eliminado. Aps a descontaminao, o material deve ser colocado em recipientes de transporte para ser levado para o incinerador. O material proveniente de actividades ligadas a cuidados de sade no deve ser deitado fora em aterros, mesmo que j tenha sido descontaminado. Se o laboratrio possuir um incinerador, pode omitir-se a descontaminao em autoclave, colocando os resduos contaminados em recipientes especcos (com cores codicadas) e levando-os directamente para o incinerador. Os recipientes de transporte reutilizveis tm de ser impermeveis e ter tampas hermticas. Devem ser desinfectados e limpos, antes de serem enviados de volta ao laboratrio. Em todos os postos de trabalho devem ser colocados recipientes para descartveis (baldes ou vasos) de preferncia inquebrveis (ex. plstico). Quando se utilizam desinfectantes o material deve permanecer em contacto ntimo com o desinfectante (no protegido por bolhas de ar) o tempo apropriado, segundo o desinfectante utilizado (ver Capitulo 14). Os recipientes para descartveis devem ser descontaminados e lavados, antes de serem reutilizados. A incinerao de material contaminado deve ser aprovada pelas autoridades de sade pblica e ambiental, bem como pelo responsvel da segurana biolgica no laboratrio (ver Captulo 14 seco Incinerao).
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Segurana qumica, elctrica, do equipamento e contra incndios e radiaes Acidentes qumicos, elctricos e provocados por incndio ou radiao podem provocar uma ruptura no connamento de organismos patognicos. portanto essencial manter altos padres de segurana nestes domnios, em qualquer laboratrio de microbiologia. As regras e regulamentos pertinentes so normalmente estabelecidos pelas autoridades nacionais/locais competentes, a quem se deve solicitar assistncia, se necessrio. Na Parte IV deste manual (Captulos 17 e 18) descrevem-se pormenorizadamente os eventuais perigos qumicos, elctricos, de incndio e radiao. No Captulo 11 encontra-se informao adicional sobre equipamentos de segurana.

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4. Laboratrio de connamento Nvel 3 de segurana biolgica

O laboratrio de connamento Nvel 3 de segurana biolgica foi concebido e equipado para trabalhar com microrganismos do Grupo de Risco 3 e com grandes quantidades ou altas concentraes de microrganismos do Grupo de Risco 2 que constituem um risco acrescido de propagao de aerossis. O connamento ao Nvel 3 de segurana biolgica exige um reforo dos programas operacionais e de segurana superior ao dos laboratrios bsicos Nveis 1 e 2 de segurana biolgica (ver Captulo 3). As directivas apresentadas neste captulo so de facto suplementos s directivas para laboratrios de base Nveis 1 e 2 de segurana biolgica, as quais devem portanto ser aplicadas, antes de aplicar as directivas para os laboratrios de connamento Nvel 3 de segurana biolgica. Os principais acrscimos e alteraes encontram-se: 1. No cdigo de prticas 2. Na concepo e instalaes do laboratrio 3. Na vigilncia mdica do pessoal. Esta categoria de laboratrios deve estar registada junto (ou na lista) das autoridades nacionais competentes. Cdigo de prticas O cdigo de prticas para os laboratrios de base Nveis 1 e 2 de segurana biolgica aplicvel, excepto nos seguintes casos: 1. O sinal/smbolo internacional de risco biolgico (Ilustrao 1) colocado nas portas de acesso ao laboratrio deve indicar o nvel de segurana biolgica e o nome do supervisor do laboratrio que controla o acesso, bem como denir eventuais condies especcas para entrar na referida rea, por exemplo, estar vacinado. 2. A roupa de proteco deve ser do tipo: batas envolventes e com a parte da frente reforada, fatos de esfrega, capas, gorras e, quando apropriado, proteco de sapatos ou sapatos de laboratrio. Batas normais de laboratrio, de apertar frente, no so apropriadas, bem como mangas curtas ou arregaadas. A roupa de proteco no pode ser utilizada fora do laboratrio e tem de ser descontaminada antes de ser lavada. Quando se trabalha com determinados agentes (ex. agrcolas ou zoonticos) pode ser necessrio tirar a roupa toda e vestir-se com roupa especca de laboratrio.
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MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

3. A manipulao de qualquer material potencialmente infeccioso deve ser realizada numa cmara de segurana biolgica ou noutro dispositivo de connamento primrio (ver Captulo 10). 4. A utilizao de material de proteco respiratria pode ser necessria em certos procedimentos laboratoriais ou ao trabalhar com animais infectados com certos agentes patognicos (ver Captulo 11). Concepo e instalaes do laboratrio A concepo e instalaes para os laboratrios de base Nveis 1 e 2 de segurana biolgica so aplicveis, excepto nos seguintes casos: 1. O laboratrio tem de estar separado de reas de passagem livre, dentro do edifcio. Pode obter-se uma separao adicional, colocando o laboratrio na parte sem sada de um corredor, ou construindo uma parede de separao e porta de acesso atravs de uma antecmara (ex. entrada de porta dupla ou laboratrio de base de Nvel 2 de segurana biolgica) reservando uma rea especca destinada a manter o diferencial de presso entre o laboratrio e o seu espao adjacente. A antecmara deve ter instalaes para separar a roupa limpa da roupa suja e um chuveiro pode igualmente ser necessrio. 2. As portas da antecmara devem fechar-se automaticamente e estar interligadas, de modo que s possa abrir-se uma de cada vez. Pode prever-se um painel quebrvel para utilizar como sada de emergncia. 3. As superfcies das paredes, tectos e pavimentos devem ser resistentes gua e fceis de lavar. As perfuraes nessas superfcies (ex. passagens de cabos e canalizaes) devem estar seladas para facilitar a descontaminao do local. 4. A sala de laboratrio deve poder ser selada para descontaminao. Os sistemas de aduo de ar devem ser construdos de modo a permitir a descontaminao por meio de gases. 5. As janelas devem ser fechadas, seladas e inquebrveis. 6. Um lavatrio com comandos no manuais deve ser instalado perto das portas de sada. 7. Deve existir um sistema controlvel de ventilao com aduo de ar para a sala de laboratrio. Deve ser instalado um sistema de monitorizao visual, com ou sem alarme, para que o pessoal possa sempre assegurar-se do bom funcionamento da ventilao. 8. O sistema de ventilao do edifcio deve ser concebido e instalado, de forma que o ar do laboratrio de confinamento Nvel 3 de segurana biolgica no seja encami-nhado para outras reas do edifcio. Este ar pode ser filtrado (HEPA Ar Particulado de Alta Eficincia) recondicionado e recirculado dentro deste laboratrio; quando este ar do laboratrio (e no o ar das cmaras de segurana biolgica) for lanado para o exterior, deve ser expelido longe do edifcio e das entradas de ar; dependendo dos agentes utilizados, pode ser expelido atravs de filtros HEPA. A fim de evitar uma pressurizao positiva contnua do laboratrio, pode instalar-se um sistema de controlo HVAC (HVAC Aquecimento, Ventilao e Ar Condicionado). Pode igualmente ponderar-se a possibilidade de
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4. LABORATRIO DE CONFINAMENTO NVEL 3 DE SEGURANA BIOLGICA

instalar alarmes audveis ou bem visveis para informar o pessoal de uma falha no sistema HVAC. 9. Todos os ltros HEPA devem ser instalados de forma a permitir descontaminao por meio de gases e vericao. 10. As cmaras de segurana biolgica devem estar situadas longe das zonas de passagem e das correntes de ar provenientes das portas e sistemas de ventilao (ver Captulo 10). 11. O ar expelido das cmaras de segurana biolgica Classe 1 ou 2 (ver Captulo 10) e que passou atravs dos ltros HEPA, tem de ser expelido de forma a evitar interferncia com o equilbrio do ar da cmara ou com o exaustor do edifcio. 12. O laboratrio de connamento deve possuir uma autoclave para descontaminar resduos contaminados. Se for necessrio remover resduos infecciosos do laboratrio de connamento para descontaminao e eliminao, preciso faz-los transportar em recipientes selados, inquebrveis e hermticos, segundo os regulamentos nacionais ou internacionais pertinentes. 13. O sistema de abastecimento de gua deve estar equipado com dispositivos antireuxo. As linhas de vcuo devem ser protegidas com sifes de desinfectantes lquidos e ltros HEPA, ou equivalentes. As bombas de vcuo alternativas devem tambm ser devidamente protegidas com sifes e ltros. 14. A concepo das instalaes e os procedimentos operacionais do laboratrio de connamento Nvel 3 de segurana biolgica devem estar documentados. Na Ilustrao 4 d-se um exemplo de concepo de um laboratrio para o Nvel 3 de segurana biolgica. Equipamento laboratorial Os princpios para a escolha do equipamento do laboratrio, incluindo as cmaras de segurana biolgica (ver Captulo 10) so os mesmos que para os laboratrios de base Nvel 2 de segurana biolgica. No entanto, no Nvel 3 de segurana biolgica, o manuseamento de todo o material potencialmente infeccioso tem de ser efectuado dentro de uma cmara de segurana biolgica ou outro dispositivo de connamento primrio. Deve igualmente considerar-se equipamento como centrifugadoras, que requerem, no entanto, acessrios de connamento adicionais, tais como baldes de segurana ou rotores de connamento. Algumas centrifugadoras e outros equipamentos, como os instrumentos de triagem de clulas para utilizar com clulas infectadas, podem precisar de ventilao adicional do exaustor com ltragem HEPA para uma conteno ecaz. Vigilncia mdica do pessoal Os objectivos dos programas de vigilncia mdica do pessoal para os laboratrios de base Nvel 1 e 2 de segurana biolgica tambm se aplicam aos laboratrios de connamento Nvel 3 de segurana biolgica, excepto nos seguintes casos:

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MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

Ilustrao 4. Laboratrio tpico para o Nvel 3 de segurana biolgica (grcos gentilmente cedidos por CUH2A, Princeton, NJ, EUA). O laboratrio est separado do local de passagem geral e a ele se acede atravs de uma antecmara (que pode ser uma entrada de porta dupla ou um laboratrio de base Nvel 2 de segurana biolgica) ou uma caixa de ar. O laboratrio est equipado de uma autoclave para descontaminao de resduos antes da sua eliminao, assim como de um lavatrio com comandos no manuais. O ar circula do exterior para o interior e todo o trabalho com material infeccioso realizado numa cmara de segurana biolgica.

1. O exame mdico de todo o pessoal de laboratrio, que trabalha em laboratrios de connamento Nvel 3 de segurana biolgica, obrigatrio.Este exame deve incluir o registo da histria clnica detalhada e um exame fsico centrado na prosso. 2. Aps um exame clnico satisfatrio, o agente recebe um carto de contacto mdico (ver Ilustrao 5) mencionando que o portador trabalha numa unidade equipada com um laboratrio de connamento Nvel 3 de segurana biolgica. Este carto deve conter uma fotograa do portador, ter formato de bolso e estar sempre na posse do portador. O nome da pessoa a contactar tem de ser denido no laboratrio, mas pode incluir o director do laboratrio, o mdico assistente e/ou o responsvel da segurana biolgica.
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4. LABORATRIO DE CONFINAMENTO NVEL 3 DE SEGURANA BIOLGICA

A. Recto do carto

Contacto mdico Nome Fotografia do portador

Para o empregado Guardar este carto na sua possesso. No caso de doena febril inexplicvel, apresent-lo ao seu mdico e notificar uma das seguintes pessoas segundo a ordem da lista: Dr. Tel. profissional Tel. pessoal Dr. Tel. profissional Tel. pessoal

B. Verso do carto

Para o mdico O portador deste carto trabalha para numa zona onde esto presentes vrus, rickettsias, bactrias, protozorios ou helmintas patognicos. No caso de um acesso febril inexplicvel, queira por favor contactar o patro para obter informaes sobre os agentes aos quais o empregado pode ter sido exposto. Nome do laboratrio: Endereo:

Tel.:

Ilustrao 5. Modelo proposto de carto mdico

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5. Laboratrio de connamento mximo Nvel 4 de segurana biolgica


O laboratrio de connamento mximo Nvel 4 de segurana biolgica foi concebido para trabalhar com microrganismos do Grupo de Risco 4. Antes de construir e pr a funcionar um laboratrio deste tipo, deve proceder-se a amplas consultas com as instituies que tm a experincia de trabalhar com instalaes semelhantes. Os laboratrios operacionais de connamento mximo Nvel 4 de segurana biolgica devem estar sob o controlo das autoridades sanitrias nacionais ou organismos equivalentes. A informao a seguir apresentada deve ser considerada como material de introduo. As entidades que procuram criar um laboratrio deste tipo devem contactar o programa de Segurana Biolgica da OMS para obter informaes adicionais1. Cdigo de prticas O cdigo de prticas para o Nvel 3 de segurana biolgica aplicvel, excepto nos seguintes casos: 1. Deve aplicar-se a regra de trabalho a dois , isto nenhuma pessoa pode trabalhar sozinha. Isto particularmente importante quando se trabalha nas instalaes de Nvel 4 de segurana biolgica onde preciso trabalhar com fatos pressurizados. 2. necessrio mudar totalmente de roupa e de sapatos antes de entrar e de sair do laboratrio. 3. O pessoal deve receber uma formao em tcnicas de extraco de emergncia, em caso de ferimentos ou doena. 4. Deve existir um mtodo de comunicao entre o pessoal que est a trabalhar no laboratrio de connamento mximo Nvel 4 de segurana biolgica e o restante pessoal do laboratrio, para contactos de rotina e casos de emergncia. Concepo e instalaes do laboratrio As caractersticas de um laboratrio de connamento Nvel 3 de segurana biolgica tambm se aplicam ao laboratrio de connamento mximo Nvel 4 de segurana biolgica, acrescentando-se as seguintes:

Biosafety programme, Departement of Communicable Disease Surveillance and Response, World Health Organization, 20 Avenue Appia, 1211 Geneva 27, Switzerland (http://www.who.int/csr/).

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5. LABORATRIO DE CONFINAMENTO MXIMO NVEL 4 DE SEGURANA BIOLGICA

1. Connamento primrio. Deve existir um sistema ecaz de connamento primrio, composto por um ou uma combinao dos seguintes requisitos: Laboratrio com cmaras de Classe 3 necessrio passar por duas portas, no mnimo, antes de entrar nas salas que contm cmaras de segurana biolgica Classe 3 (Sala de cmaras). Nesta congurao laboratorial, as cmaras de segurana biolgica Classe 3 constituem o connamento primrio. necessrio um chuveiro nos vestirios internos e externos. O material e os abastecimentos que no entrem na sala das cmaras pelos vestirios, so introduzidos atravs de uma autoclave ou cmara de fumigao de duas portas. Uma vez a porta exterior bem fechada, o pessoal dentro do laboratrio pode abrir a porta interior para retirar o material. As portas da autoclave ou da cmara de fumigao so concebidas de forma a que a porta exterior no se possa abrir antes da autoclave ter terminado o ciclo de esterilizao ou da cmara de fumigao ter sido descontaminada (ver Captulo 10). Laboratrio para trabalhos com fatos pressurizados A concepo e as instalaes de um laboratrio com fatos pressurizados com aparelhos de respirao incorporados diferem signicativamente das do laboratrio de Nvel 4 de segurana biolgica com cmaras de segurana biolgica Classe 3. As salas deste tipo de laboratrio so concebidas de forma a encaminhar o pessoal atravs dos vestirios e zonas de descontaminao, antes de penetrar nas reas onde se manuseiam os materiais infecciosos. necessrio instalar um chuveiro de descontaminao dos fatos para uso obrigatrio do pessoal que sai da zona de connamento. entrada e sada dos vestirios, existem igualmente duches para o pessoal. O pessoal que vai trabalhar na zona onde se trabalha com fatos pressurizados tem de se equipar com um fato hermtico, de presso positiva, com ltro HEPA e dispositivo de respirao; o sistema de fornecimento de ar tem de ter uma capacidade 100% redundante com uma fonte independente, para utilizao em caso de emergncia. A entrada no laboratrio feita atravs de uma cmara de vcuo com portas hermticas. O laboratrio deve possuir um sistema apropriado de alerta para o pessoal que a trabalha, para utilizao em caso de ruptura num dos sistemas (ver Captulo 10). 2. Acesso controlado. O laboratrio de connamento mximo Nvel 4 de segurana biolgica deve estar situado num edifcio independente ou numa zona bem delimitada, dentro de um edifcio seguro. A entrada e sada do pessoal e dos abastecimentos feita atravs de uma cmara de vcuo ou sistema de ltros. Ao entrar, o pessoal tem de mudar completamente de roupa; ao sair, tem de tomar duche antes de vestir a sua prpria roupa. 3. Sistema de ar controlado. Nas instalaes preciso manter presso negativa. Tanto admisso como evacuao, o ar tem de ser processado atravs de um ltro HEPA. H diferenas signicativas nos sistemas de ventilao do laboratrio com cmaras de Classe 3 e do laboratrio com fatos pressurizados:
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MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

Laboratrio com cmaras de Classe 3 O ar fornecido cmara de segurana biolgica de Classe 3 pode ser extrado da prpria sala de laboratrio, atravs de um ltro HEPA instalado na cmara ou enviado directamente pelo sistema de abastecimento de ar. O ar expelido da cmara de segurana biolgica de Classe 3 tem de passar atravs 2 ltros HEPA, antes de ser lanado para o exterior. A cmara deve funcionar sempre a uma presso negativa em relao ao laboratrio. necessrio um sistema de ventilao prpria no-recirculante para o laboratrio de cmaras. Laboratrio para trabalhos com fatos pressurizados So necessrios sistemas prprios de fornecimento e de expulso do ar. H um equilbrio entre as componentes fornecimento e expulso do sistema de ventilao, de modo a permitir um uxo de ar dirigido, desde a rea de menor perigo para a rea ou reas de maior perigo potencial. So necessrios exaustores em abundncia para assegurar que as instalaes permanecem sempre em presso negativa. As presses diferenciais dentro do laboratrio e entre o laboratrio e as zonas adjacentes devem ser monitorizadas. O uxo de fornecimento e expulso de ar do sistema de ventilao tem de ser monitorizado e deve utilizar-se um sistema apropriado de controlo para evitar a pressurizao do laboratrio. necessrio assegurar o fornecimento de ar ltrado HEPA rea onde se usam os fatos pressurizados, ao chuveiro de descontaminao, e s cmaras de vcuo ou de descontaminao. O ar expelido deste laboratrio tem de ser processado atravs de um conjunto de 2 ltros HEPA, antes de ser lanado no exterior. Como alternativa, aps a passagem pelos 2 ltros HEPA, o ar pode ser recirculado mas apenas dentro do laboratrio com fatos pressurizados. Em nenhuma circunstncia, o ar evacuado de um laboratrio de segurana biolgica de nvel 4 deve ser recirculado para outros locais. Ao optar-se pela recirculao do ar num laboratrio com fatos pressurizados, devem tomar-se as maiores precaues. Devem levar-se em conta os tipos de pesquisa feita, equipamento, produtos qumicos e outros materiais utilizados no laboratrio, bem como espcies animais eventualmente envolvidas na(s) pesquisa(s). Todos os ltros HEPA precisam de ser testados e certicados anualmente. Os receptculos dos ltros HEPA foram concebidos para permitir uma descontaminao in loco antes de retirar os ltros. Como alternativa, pode remover-se o ltro e coloc-lo num recipiente selado prova de gs, para uma posterior descontaminao e/ou incinerao. 4. Descontaminao de euentes. Todos os euentes da rea de fatos pressurizados, cmara de descontaminao, chuveiro de descontaminao ou cmara de segurana biolgica Classe 3 tm de ser descontaminados antes de serem denitivamente eliminados. O tratamento por calor o mtodo de eleio. Os euentes podem tambm precisar de uma correco para um PH neutro antes da sua eliminao. As guas dos duches e retretes podem ser deitadas directamente nos esgotos sem tratamento.
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5. LABORATRIO DE CONFINAMENTO MXIMO NVEL 4 DE SEGURANA BIOLGICA

5. Esterilizao de resduos e material. No laboratrio, deve existir uma autoclave de duas portas ( frente e atrs). Devem existir igualmente outros mtodos de descontaminao para artigos e equipamento que no suportam a esterilizao por vapor. 6. Pontos de entrada para amostras, material e animais devem igualmente estar previstos. 7. Sistema de emergncia e linha(s) prpria(s) de fornecimento de energia devem estar previstas. 8. Drenos de connamento devem estar instalados. Devido grande complexidade da concepo e construo de instalaes de Nvel 4 de segurana biolgica, quer do tipo cmara ou fato pressurizado, no se incluram representaes esquemticas de tais instalaes. Devido grande complexidade do trabalho nos laboratrios de Nvel 4 de segurana biolgica, deve elaborar-se, em separado, um manual de trabalho detalhado, e testado em seguida em exerccios de formao. Por outro lado, deve conceber-se um programa de emergncia (ver Captulo 13). Para preparar este programa, deve estabelecer-se uma cooperao activa com as autoridades sanitrias nacionais e locais. Devem igualmente envolver-se outros servios de emergncia, por exemplo: bombeiros, polcia e hospitais designados.

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6. Instalaes laboratoriais para animais

Todos os que utilizam animais para ns experimentais e de diagnstico tm a obrigao moral de tomar todas as precaues para evitar inigir-lhes dor e sofrimento desnecessrios. Os animais devem ter alojamentos higinicos e confortveis e comida e gua salubres e apropriadas. No nal das experincias devem ser tratados com humanidade. Por razes de segurana, o alojamento dos animais deve ser uma unidade independente e separada. Se for adjacente a um laboratrio, a sua concepo deve prever o seu isolamento das partes pblicas do laboratrio, se tal for necessrio, bem como a sua descontaminao e desinfestao. Quadro 4. Nveis de connamento das instalaes para animais: resumo das prticas e equipamento de segurana.
GRUPO DE RISCO NVEL DE CONFINAMENTO PRTICAS LABORATORIAIS E EQUIPAMENTO DE SEGURANA

1 2

NSBIA 1 NSBIA 2

Acesso limitado, roupa de proteco e luvas Prticas de NSBIA 1 mais: sinais de alerta para perigos. CSB Classe 1 e 2 para actividades que produzem aerossis. Descontaminao de resduos e alojamentos antes de lavar. Prticas de NSBIA 2 mais: acesso controlado. CSB e roupa de proteco especial para todas as actividades Prticas de NSBIA 3 mais: acesso estritamente limitado. Mudar de roupa antes de entrar. CSB Classe 3 ou fatos de presso positiva. Duche sada. Descontaminao de todos os resduos antes da sua remoo da instalao.

3 4

NSBIA 3 NSBIA 4

NSBIA Nvel de segurana biolgica em instalaes para animais. CSB Cmaras de segurana biolgica.

As instalaes para animais, tal como os laboratrios, podem ser classicadas de Nvel 1, 2, 3 e 4 de segurana biolgica de instalaes para animais, segundo a avaliao do risco e o grupo de risco dos microrganismos a serem investigados. Quanto aos agentes a utilizar no laboratrio animal, devemos considerar os seguintes factores:
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6. INSTALAES LABORATORIAIS PARA ANIMAIS

1. A via normal de transmisso 2. As quantidades e concentraes a utilizar 3. A via de inoculao 4. Se estes agentes podem ser excretados e qual a via. No que se refere aos animais a utilizar em laboratrio, devemos considerar os seguintes factores: 1. A natureza dos animais (agressividade e tendncia para morder e arranhar) 2. Os seus ecto- e endoparasitas naturais 3. As zoonoses a que so susceptveis 4. A possvel disseminao de alrgenos. Tal como nos laboratrios, os requisitos para as caractersticas de concepo, equipamentos e precaues a tomar tornam-se mais rigorosos, segundo o nvel de segurana biolgica. Estes nveis, j resumidos no Quadro 4, descrevem-se a seguir. Estas directivas so de carcter aditivo, isto : cada nvel superior engloba automaticamente as normas do nvel inferior, acrescentando-lhe as suas prprias normas. Instalao para animais Nvel 1 de segurana biolgica Este nvel adequado para a manuteno da maior parte dos animais aps quarentena (excepto primatas no humanos, sobre os quais se deve consultar as autoridades nacionais) e para os animais que foram deliberadamente inoculados com agentes do Grupo de Risco 1. So necessrias boas tcnicas de microbiologia. O director das instalaes para animais tem de estabelecer polticas, procedimentos e protocolos para todas as operaes e para o acesso ao viveiro. Deve ser estabelecido um programa de vigilncia mdica apropriada para o pessoal. Deve igualmente preparar-se e adoptar-se um manual de segurana ou de operaes. Instalao para animais Nvel 2 de segurana biolgica Este nvel adequado para trabalhar com animais que foram deliberadamente inoculados com microrganismos do Grupo de Risco 2. As seguintes precaues de segurana so aplicveis: 1. necessrio observar todos os requisitos estabelecidos para o Nvel 1 de segurana biolgica. 2. Devem axar-se sinais de risco biolgico (ver Ilustrao 1) nas portas e outros locais apropriados. 3. A instalao deve ser concebida de forma a facilitar a sua limpeza e manuteno. 4. As portas devem abrir para dentro e fechar automaticamente. 5. O aquecimento, a ventilao e a iluminao devem ser adequados. 6. Se houver ventilao, o uxo do ar deve ser dirigido para o interior. O ar usado deve ser expelido e no recirculado para qualquer outra parte do edifcio. 7. O acesso deve ser restringido ao pessoal autorizado.
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MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

8. Nenhum animal deve entrar nas instalaes, alm daqueles utilizados em experincias. 9. Deve existir um programa de controlo de roedores e artrpodes. 10. As janelas, se houver, devem ser seguras, inquebrveis e, se forem de abrir, devem estar equipadas com redes contra artrpodes. 11. As superfcies de trabalho devem ser descontaminadas com desinfectantes ecazes, aps utilizao (ver Captulo 14). 12. Cmaras de segurana biolgica (Classes 1 e 2) ou caixas isolantes com fornecimento de ar e exaustores com HEPA so necessrias para trabalhos que impliquem eventualmente a produo de aerossis. 13. Deve existir uma autoclave in loco ou na proximidade adequada da instalao. 14. Os forros para instalao dos animais devem ser retirados de forma a minimizar a produo de aerossis e p. 15. Todos os resduos e forros tm de ser descontaminados antes de eliminados. 16. A utilizao de instrumentos cortantes deve ser limitada, sempre que possvel. O material cortante deve ser recolhido em recipientes no perfurveis com tampas e tratado como material infeccioso. 17. O material destinado a autoclaves ou incinerao tem de ser transportado de forma segura, em recipientes fechados. 18. As caixas/gaiolas tm de ser descontaminadas, aps utilizao. 19. As carcaas dos animais devem ser incineradas. 20. O pessoal tem de utilizar roupa e equipamento de proteco nas instalaes e retir-los antes de sair. 21. Devem existir lavatrios na instalao e o pessoal tem de lavar as mos antes de sair. 22. Qualquer ferimento, por mais pequeno que seja, tem de ser tratado apropriadamente, noticado e registado. 23. Comer, beber, fumar e maquilhar-se formalmente proibido nas instalaes. 24. Todo o pessoal tem de receber uma formao apropriada. Instalao para animais Nvel 3 de segurana biolgica Este nvel adequado para trabalhar com animais que foram deliberadamente inoculados com agentes do Grupo de Risco 3, ou quando indicado de outra forma por uma avaliao dos riscos. Todos os sistemas, prticas e procedimentos precisam de ser revistos e certicados de novo, todos os anos. As seguintes precaues de segurana so aplicveis: 1. necessrio observar todos os requisitos estabelecidos para os Nveis 1 e 2 de segurana biolgica. 2. O acesso tem de ser rigorosamente controlado. 3. A instalao tem de estar separada de outras zonas de alojamento e do laboratrio por uma sala com uma entrada de duas portas, formando uma antecmara.

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6. INSTALAES LABORATORIAIS PARA ANIMAIS

4. A antecmara deve dispor de lavatrios. 5. A antecmara deve dispor de chuveiros. 6. necessria uma ventilao mecnica para assegurar um uxo de ar contnuo atravs de todas as salas. O ar usado tem de passar por ltros HEPA antes de ser lanado para o exterior sem recircular. O sistema tem de ser concebido de forma a evitar um reuxo acidental e uma pressurizao positiva em qualquer parte do alojamento animal. 7. Deve existir uma autoclave num local conveniente para o alojamento, onde se encontra o risco biolgico. Resduos infecciosos devem ser processados pela autoclave, antes de passarem para outras zonas das instalaes. 8. Deve existir igualmente um incinerador in loco ou encontrar uma soluo alternativa com as autoridades competentes. 9. As caixas/gaiolas de animais infectados com microrganismos do Grupo de Risco 3 devem ser colocadas em isoladores ou salas com exaustores atrs das caixas/gaiolas. 10. Os forros devem libertar o menor p possvel. 11. Toda a roupa de proteco tem de ser descontaminada antes de ser lavada. 12. As janelas devem estar fechadas e seladas e ser inquebrveis. 13. A vacinao do pessoal deve ser assegurada, sempre que necessrio. Instalao para animais Nvel 4 de segurana biolgica As actividades nesta unidade esto normalmente ligadas s do laboratrio de connamento mximo Nvel 4 de segurana biolgica e as regras e regulamentos nacionais e locais tm de ser harmonizados para se aplicarem a ambas instalaes. Se as actividades tiverem de ser realizadas num laboratrio de trabalhos com fatos pressurizados, devem respeitar-se prticas e procedimentos adicionais aos aqui descritos (ver Captulo 5). 1. necessrio observar todos os requisitos estabelecidos para os Nveis 1, 2, e 3 de segurana biolgica. 2. O acesso tem de ser rigorosamente controlado; s o pessoal designado pelo director do laboratrio tem autorizao de entrar. 3. Nenhum membro do pessoal pode trabalhar sozinho; a regra das duas pessoas aplica-se. 4. O pessoal deve ter recebido o nvel mais elevado de formao em microbiologia e estar familiarizado com os perigos inerentes ao seu trabalho e as precaues necessrias. 5. Nas zonas de alojamento dos animais infectados com os agentes do Grupo de Risco 4 tm de observar-se os critrios de connamento descritos e aplicados nos laboratrios de connamento mximo Nvel 4 de segurana biolgica. 6. A entrada para a instalao faz-se atravs de uma antecmara de vcuo, com um vestirio e chuveiros separando a rea limpa da rea restrita.

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7. O pessoal tem de tirar a sua prpria roupa e vestir roupa especial de proteco. Quando terminar, tem de retirar a roupa de proteco para descontaminao numa autoclave e tomar um duche antes de sair. 8. A instalao deve possuir um sistema de ventilao com ltro HEPA, concebido de forma a assegurar uma presso negativa (uxo de ar dirigido para dentro). 9. O sistema de ventilao deve ser concebido de forma a evitar o retrouxo e a pressurizao positiva. 10. igualmente necessrio uma autoclave de duas portas, com a parte no contaminada num quarto fora das salas de connamento, para a troca de material. 11. Deve igualmente existir uma passagem (cmara) de vcuo, com a parte no contaminada num quarto fora das salas de connamento, para a troca de material que no se pode descontaminar em autoclave. 12. Todo o manuseamento de animais infectados com agentes do grupo de Risco 4 deve processar-se em condies de connamento mximo Nvel 4 de segurana biolgica. 13. Todos os animais devem estar alojados em isoladores. 14. Todos os forros dos alojamentos e resduos dos animais tm de ser processados em autoclave, antes de ser retirados das instalaes. 15. O pessoal deve estar sob vigilncia mdica. Invertebrados Tal como no caso dos vertebrados, o nvel de segurana biolgica da instalao para animais determinado pelos grupos de risco dos agentes sob investigao, ou quando indicado por uma avaliao dos riscos. As seguintes precaues suplementares so necessrias com determinados artrpodes, particularmente com insectos voadores: 1. Devem prever-se salas separadas para os invertebrados infectados e para os no infectados. 2. As salas devem poder ser seladas para fumigao. 3. Pulverizadoresinsecticidas devem estar disponveis no local. 4. Devem estar disponveis meios de arrefecimento para reduzir, quando for necessrio, a actividade dos invertebrados. 5. O acesso s instalaes deve efectuar-se atravs de uma antecmara com armadilhas para insectos e redes contra os artrpodes nas portas. 6. Todas as sadas de ventilao (exaustores) e janelas de abrir devem estar equipadas com redes contra os artrpodes. 7. Os ralos para resduos nas pias e esgotos nunca devem car secos. 8. Todos os resduos devem ser descontaminados em autoclaves dado que alguns invertebrados no morrem com desinfectantes. 9. Deve controlar-se os nmeros de formas larvares e adultas de artrpodes voadores, rastejantes e saltitantes.

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6. INSTALAES LABORATORIAIS PARA ANIMAIS

10. Os receptculos de carraas e caros devem permanecer em bandejas de leo. 11. Os insectos voadores infectados ou potencialmente infectados devem ser guardados em gaiolas de rede dupla. 12. Os artrpodes infectados ou potencialmente infectados devem ser manuseados em cmaras de segurana biolgica ou caixas isoladoras. 13. Os artrpodes infectados ou potencialmente infectados podem ser manipulados em bandejas de arrefecimento. Para mais informaes ver referncias (36).

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7. Directivas para a scalizao da construo de instalaes laboratoriais


A scalizao da construo das instalaes pode denir-se como o processo sistemtico de anlise e documentao assegurando que determinados componentes estruturais, sistemas ou componentes de sistemas foram instalados, inspeccionados, testados operacionalmente e vericados como conformes s normas nacionais e internacionais apropriadas. Os critrios e funes de concepo do respectivo sistema de construo estabelecem esses requisitos. Por outras palavras, os laboratrios do Nvel 1 a 4 de segurana biolgica tm requisitos de licenciamento diferentes e cada vez mais complexos. As condies geogrcas e climticas, tais como as falhas geolgicas e o calor, frio ou humidade extremos, tambm podem afectar a concepo do laboratrio e os requisitos de scalizao. Aps a concluso do processo de scalizao, os componentes estruturais e sistemas de apoio pertinentes tm sido sujeitos s diversas condies de funcionamento e falhas eventuais que se possam normalmente prever e tm sido aprovados. O processo de scalizao e os critrios de aceitao devem ser estabelecidos na fase inicial, de preferncia durante a fase de programao do projecto de construo ou renovao. Ao entrar em contacto com o processo de scalizao na fase inicial do projecto, os arquitectos, engenheiros, pessoal de segurana e de sade e os prprios donos dos laboratrios compreendem as capacidades do referido laboratrio e estabelecem expectativas uniformes para a performance do laboratrio e/ou instalao. O processo de scalizao d instituio e comunidade vizinha uma maior conana que os sistemas estruturais, elctricos, mecnicos, de canalizao, de connamento e descontaminao, de segurana e alarme funcionam conforme previsto, assegurando o connamento de qualquer microrganismo potencialmente perigoso com que se esteja a trabalhar num determinado laboratrio ou instalao para animais. As actividades de scalizao comeam geralmente durante a fase de programao do projecto e prosseguem durante a construo e perodo de garantia subsequente do laboratrio ou instalao. O perodo de garantia dura geralmente um ano aps a ocupao dos locais. Aconselha-se que o scal escolhido seja independente dos arquitectos, engenheiros e construtores envolvidos na concepo e construo da obra. O scal serve de advogado da instituio que constri ou renova o laboratrio e deve ser considerado como um membro da equipa de concepo; a participao do scal na fase de programao inicial do projecto essencial. Nalguns casos, a instituio pode
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7. DIRECTIVAS PARA A FISCALIZAO DA CONSTRUO DE INSTALAES LABORATORIAIS

actuar como o seu prprio scal. No caso de instalaes laboratoriais mais complexas (Nveis 3 e 4 de segurana biolgica) a instituio deve escolher um scal externo com experincia e xito comprovado na scalizao de laboratrios complexos de segurana biolgica e instalaes para animais. Mesmo nos casos em que se utiliza um scal independente, a instituio deve sempre ser membro da equipa de scalizao; aconselha-se que alm do scal, o Responsvel da Segurana, o Responsvel do Projecto, o Director do Programa e um representante do pessoal de Operaes e Manuteno faam parte da equipa. A seguir se encontra uma lista de sistemas e componentes laboratoriais que podem ser includos num plano de scalizao para testes funcionais, segundo o nvel de connamento da instalao a renovar ou construir. A lista no exaustiva. evidente que o plano de scalizao reectir a complexidade do laboratrio a planear. 1. Construir sistemas de automao incluindo ligaes a postos remotos de monitorizao e controlo 2. Sistemas de vigilncia e deteco electrnicos 3. Fechaduras de segurana e leitores de proximidade electrnicos 4. Sistemas de aquecimento, ventilao (aduo e exausto) e ar condicionado 5. Sistemas de ltragem de ar particulado de alta ecincia (HEPA) 6. Sistemas de descontaminao HEPA 7. Controlo sistemas HVAC, exaustor e sincronismos 8. Amortecedores isoladores hermticos 9. Sistemas de refrigerao de laboratrios 10. Caldeiras e sistemas a vapor 11. Sistemas de deteco, alarme e extino de incndios 12. Dispositivos de preveno do reuxo das guas domsticas 13. Sistemas de tratamento da gua (osmose de reverso, gua destilada) 14. Sistemas de tratamento e neutralizao de euentes lquidos 15. Sistemas elementares de drenagem de esgotos 16. Sistemas de descontaminantes qumicos 17. Sistemas de gs para laboratrios mdicos 18. Sistemas de ar para respirao 19. Sistemas de ar para servios e instrumentos 20. Vericao diferencial de presso em cascada nos laboratrios e reas de apoio 21. Rede da rea local (LAN) e sistemas de dados informticos 22. Sistemas normais de energia (rede de electricidade) 23. Sistemas elctricos de emergncia 24. Sistemas elctricos ininterruptveis 25. Sistemas luzes de emergncia 26. Vedantes para xaes elctricas 27. Vedantes para perfuraes elctricas e mecnicas 28. Sistemas telefnicos

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29. Sincronizadores de controlo das portas de passagens de vcuo 30. Vedantes de portas hermticas 31. Vedantes de janelas e de painis de observao 32. Proteco contra perfuraes do revestimento 33. Vericao da integridade das estruturas (pavimentos, paredes e tectos) 34. Vericao do revestimento de proteco (pavimentos, paredes e tectos) 35. O connamento a Nvel 4 de segurana biolgica engloba pressurizao e isolao 36. Cmaras de segurana biolgica 37. Autoclaves 38. Sistema de nitrognio lquido e alarmes 39. Sistemas de deteco de gua (no caso de inundaes dentro da zona de connamento) 40. Sistemas de chuveiros de descontaminao e aditivos qumicos 41. Sistemas de lavagem e neutralizao de gaiolas/jaulas 42. Tratamento de resduos.

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8. Directivas para a certicao de instalaes laboratoriais

Os laboratrios so meios complexos e dinmicos. Hoje em dia, os laboratrios clnicos e de investigao biomdica tm de adaptar-se rapidamente s necessidades e presses sempre crescentes de sade pblica. Um exemplo disto a necessidade dos laboratrios ajustarem as suas prioridades, para enfrentar os desaos das doenas infecciosas emergentes ou re-emergentes. A m de assegurar que a adaptao e manuteno se processa prontamente e de forma segura e apropriada, todos os laboratrios clnicos e de investigao biolgica devem ser certicados regularmente. A certicao de um laboratrio ajuda a assegurar que: 1. Esto a ser utilizados controlos tcnicos apropriados e esto a funcionar adequadamente, conforme previsto 2. Existem controlos administrativos apropriados in loco e previstos nos protocolos 3. O equipamento de proteco pessoal apropriado s tarefas realizadas 4. A descontaminao dos resduos e do material foi resolvida de forma adequada e existem procedimentos apropriados para o tratamento dos resduos 5. Existem procedimentos adequados para a segurana geral do laboratrio, incluindo a segurana fsica, elctrica e qumica. A certicao dos laboratrios diferente das actividades de scalizao (Captulo 7) em diversos pontos importantes. A certicao de um laboratrio a anlise sistemtica de todas as caractersticas e procedimentos de segurana, dentro do laboratrio (controlos tcnicos, equipamentos de proteco pessoal e controlos administrativos). As prticas e procedimentos de segurana biolgica so igualmente examinados. A certicao dos laboratrios uma actividade contnua de controlo da qualidade e da segurana, que deve decorrer regularmente. Os prossionais de segurana e sade ou de segurana biolgica, devidamente formados, podem efectuar actividades de certicao de laboratrios. As instituies podem utilizar pessoal que tenha o conjunto de aptides necessrias para efectuar as scalizaes, vistorias ou inspeces (termos sinnimos) ligadas ao processo de certicao. Contudo, podem decidir ou ser estimuladas a recrutar terceiros para essas funes. As instalaes laboratoriais clnicas e de investigao biomdica podem criar instrumentos de scalizao, vistoria ou inspeco, a m de assegurar consistncia no processo de certicao. Tais instrumentos devem ser sucientemente exveis para
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abranger as diferenas fsicas e de procedimento entre os laboratrios, que exige o tipo de trabalho a efectuar, permitindo simultaneamente uma abordagem consistente dentro da instituio. Deve, porm, ter-se o cuidado de assegurar que os referidos instrumentos so apenas utilizados por pessoal devidamente formado e que no so utilizados como substitutos de uma boa avaliao prossional da segurana biolgica. Nos Quadros 5 a 7 do-se exemplos desses instrumentos. Os resultados da scalizao, vistoria ou inspeco devem ser debatidos com o pessoal e a direco do laboratrio. Dentro do laboratrio, deve identicar-se e responsabilizar-se uma pessoa para assegurar que so tomadas as medidas de correco das decincias identicadas durante o processo de scalizao. A certicao do laboratrio no estar completa e o laboratrio no ser declarado funcional, at que as referidas decincias tenham sido devidamente corrigidas. A complexidade das operaes laboratoriais do Nvel 4 de segurana biolgica ultrapassa o mbito deste manual. Para mais informaes e detalhes, queira contactar o programa de Segurana Biolgica da OMS1 (ver Anexo 3).

WHO Biosafety programme, Department of Communicable Disease Surveillance and Response, World Health Organization, 20 Avnue Appia, 1211 Geneva 27, Switzerland (htp://www.who.int/csr/).

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8. DIRECTIVAS PARA A CERTIFICAO DE INSTALAES LABORATORIAIS

Quadro 5. Laboratrio de base Nvel 1 de segurana biolgica: Vistoria da segurana em laboratrio


Localizao . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Data . . . . . . . . . . . . . . . . . Responsvel do laboratrio . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
ITEM VISTORIADO (DATA DA VISTORIA) SIM NO N/A COMENTRIOS

Laboratrio Sinalizao prpria: Luz ultravioleta, laser, material radioactivo, etc. ......................................................... Directivas de segurana biolgica apropriadas, disponveis e aplicadas ............................................. Equipamento laboratorial devidamente etiquetado (risco biolgico, radioactivo, txico, etc.) ................. Concepo do laboratrio Concebido para limpeza fcil ......................................... Luzes ultravioletas com comutador interligado ............. Todas as prateleiras xas ............................................... Tampos das bancadas impermeveis e resistentes a cidos, lcalis, solventes orgnicos e ao calor ...... Iluminao apropriada ................................................... Espao de armazenagem adequado e bem utilizado ..... Cilindros de gs Todos os cilindros xos ................................................. Cilindros de reserva com tampas .................................. Gases asxiantes e perigosos s em salas ventiladas .. Cilindros de reserva ou vazios in loco ........................... Produtos qumicos Inamveis armazenados em armrios apropriados ..... Geradores de perxidos (com data de recepo e data de abertura) ...................................................... Produtos qumicos bem separados ............................... Produtos qumicos perigosos armazenados acima do nvel dos olhos .................................................... Produtos qumicos armazenados no cho ..................... Recipientes de produtos qumicos no fechados .......... Todas as solues devidamente etiquetadas ................. Termmetros de mercrio em utilizao ....................... Frigorcos/congeladores/cmaras frigorcas Presena de alimentos para consumo humano ............. Inamveis em contentores antiexplosivos ................... Avisos nas portas caso contenham substncias cancergenas, radioactividade e/ou riscos biolgicos ................................................................. Cmara frigorca dispe de disparo de emergncia ....

Nvel de segurana biolgica: Anexar formulrio apropriado Vistoria do Nvel de Segurana Biolgica

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ITEM VISTORIADO (DATA DA VISTORIA)

SIM

NO

N/A

COMENTRIOS

Equipamento elctrico Existem extenses ......................................................... Tomadas com ligao terra e polaridade adequada .... Conexes perto de pias, debaixo de chuveiros, etc. ...... Equipamento com cabos esados ou danicados ......... Tomadas ou ligaes elctricas sobrecarregadas .......... Ligaes elctricas instaladas no pavimento ................. Fusveis adequados nas caixas-condutas ...................... Tomadas elctricas perto de fontes de gua esto conformes as normas locais ..................................... Cabos elctricos possuem ligao terra ..................... Aquecedores portteis ................................................... Equipamento de proteco pessoal Soluo para lavar os olhos .......................................... Chuveiros de segurana ................................................. Equipamento de proteco pessoal (luvas, batas, culos, etc.) ........................................ Pessoal devidamente equipado ...................................... Batas, capas, aventais, luvas e outro material de proteco no utilizado fora do laboratrio ......... Equipamento de proteco pessoal disponvel para armazenagem criognica .................................. Tratamento de resduos Provas de eliminao inadequada dos resduos ............ Resduos separados em contentores apropriados ......... Contentores de resduos qumicos etiquetados, datados e selados ................................................................... Contentores de resduos qumicos devidamente acondicionados e armazenados ................................ Recipientes de objectos cortantes devidamente utilizados e eliminados .............................................. Nenhum lixo no cho ..................................................... Normas para a eliminao dos resduos axadas no laboratrio ................................................................. Programas de sade ocupacional e de segurana existentes Comunicao de riscos .................................................. Proteco respiratria .................................................... Proteco auditiva .......................................................... Monitorizao do formaldedo ....................................... Monitorizao do xido de etileno ................................. Monitorizao do gs anestsico ...................................

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8. DIRECTIVAS PARA A CERTIFICAO DE INSTALAES LABORATORIAIS

ITEM VISTORIADO (DATA DA VISTORIA)

SIM

NO

N/A

COMENTRIOS

Controlos tcnicos gerais Fluxo de ar do laboratrio negativo, para instalaes gerais, corredores e escritrios ............. Pias e drenos servem de respiradouros ......................... Lavatrios disponveis para lavar as mos .................... Partes de mquinas expostas (polias, engrenagens) .... Circuito de vcuo tem ltros e sifes nas bancadas do laboratrio ........................................................... Riscos de reuxo no abastecimento de gua ................ Sistemas de gua destilada em boas condies ........... Programa de controlo de artrpodes e roedores activo e ecaz ........................................................... Prticas e procedimentos gerais Comida para consumo humano armazenada fora do laboratrio ........................................................... Fornos microondas com avisos bem visveis: No preparar comida S para uso do laboratrio ..... Comer, beber, fumar e/ou maquilhar-se no laboratrio . Recipientes de vidro pressurizados protegidos (por exemplo, cmaras de vcuo) ............................ Pipetar com a boca proibido .......................................... Meios mecnicos de pipetar disponveis e utilizados. .................................................................. Roupa de proteco do laboratrio guardada separadamente da roupa pessoal. ............................ Manuteno geral do laboratrio Frascos arrumados no cho. ......................................... Riscos evidentes de tropear. ........................................ Panos absorventes limpos nas superfcies de trabalho . Estilhaos de vidro manuseados com meios mecnicos (escovas, aparadores lixo, pinas, etc.) .. Proteco contra incendios Cabeas de extintores livres e no obstrudas .............. Perfuraes nas paredes, tectos, pavimentos, etc. ....... Cablagem ou tubagem pelas aberturas das portas ........ Largura de passagem mnima de 1m no laboratrio ..... Armazenagem em cima de canalizaes ou de montagens elctricas ................................................ Restos de combustveis armazenados no laboratrio ... Banheiras aquecidas a temperaturas constantes Equipadas com nvel mnimo de gua e vlvula de sobreaquecimento. .................................................... Construdas com materiais noinamveis .................

Assinatura do vistoriador. . . . . . . . . . Data do termo da vistoria . . . . . . . . . . . . .

43

MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

Quadro 6. Laboratrio de base Nvel 2 de segurana biolgica: Vistoria da segurana em laboratrio. Formulrio a utilizar com o formulrio de vistoria de segurana em laboratrio do Nvel 1 de segurana biolgica.
Localizao . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Data . . . . . . . . . . . . . . Responsvel do laboratrio . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
ITEM VISTORIADO (DATA DA VISTORIA) SIM NO N/A COMENTRIOS

Cmara de segurana biolgica (CSB) Certicao no ano anterior ............................................. Superfcie da CSB limpa com desinfectante apropriado no incio e no nal de cada procedimento ................. Grelha frontal e ltro exaustor no obstrudos ................ Chamas vivas utilizadas dentro da cmara ...................... Circuitos de vcuo dispondo de ltros em srie e sifes desinfectantes ............................................................. CSB comprometida pelo ar da sala ou localizao .......... CSB utilizada quando h risco de formao de aerossis...................................................................... Laboratrio Acesso limitado e restrito ao pessoal autorizado ............ Entrada limitada ao pessoal avisado de todos os perigos potenciais ................................................................... Sinal de risco biolgico axado na porta do laboratrio, sempre que tal for o caso .......................................... Sinal com informaes exactas e actuais ............ Sinal legvel e em bom estado. ............................ Todas as portas fechadas. ................................................ Descontaminao Descontaminante especco ao organismo utilizado ....... Todos derrames e acidentes com materiais infecciosos noticados ao supervisor do laboratrio. ................... Descontaminante apropriado utilizado para limpeza de derrames ................................................................ Superfcies de trabalho descontaminadas antes e depois de cada procedimento, diariamente e aps derrames. .................................................................... Manuseamento de resduos contaminados Utilizao correcta de recipientes de resduos infecciosos .................................................................. Recipientes no cheios demais ....................................... Recipientes devidamente etiquetados e fechados ........... Stocks de culturas e outros resduos regulamentados devidamente descontaminados antes de eliminados ..................................................................

Data: Local: Modelo: Tipo: N Srie:

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8. DIRECTIVAS PARA A CERTIFICAO DE INSTALAES LABORATORIAIS

ITEM VISTORIADO (DATA DA VISTORIA)

SIM

NO

N/A

COMENTRIOS

Materiais descontaminados fora do laboratrio transportados em contentores fechados, resistentes, estanques, em conformidade com regras e regulamentos locais .................................................... Resduos diversos biologicamente descontaminados, antes de eliminao como resduos qumicos ou radiolgicos ................................................................ Proteco pessoal Pessoal de laboratrio alertado para vacinao/testes apropriados contra agentes manuseados ................... Apelo a servios mdicos apropriados para exames, vigilncia e tratamento em caso de exposio prossional ................................................................. Utilizao de luvas ao manusear material infeccioso ou equipamento contaminado ......................................... Proteco da cara ao trabalhar fora da CSB com material infeccioso ...................................................... Lavagem das mos depois de tirar as luvas, depois de trabalhar com agentes infecciosos e antes de sair do laboratrio ...................................................... Agente antimicrobiano disponvel para primeiros socorros imediatos ..................................................... Prticas Utilizar CSB sempre que existir potencial para produo de aerossis/salpicos infecciosos .............................. Manual de segurana biolgica preparado e adoptado .... O pessoal l, estuda e segue as instrues sobre prticas e procedimentos, incluindo o manual de segurana ou de operaes (todo o pessoal, anualmente) ................................................................ As manipulaes so realizadas de forma a minimizar aerossis/salpicos ...................................................... Com agentes infecciosos, utilizar seringas de agulha xa/seringas-agulhas descartveis ............................. Recipientes e rotores de centrifugadora s devem ser abertos numa CSB ...................................................... O transporte de espcimes infecciosos fora de CSB deve ser feito em contentores aprovados, segundo os regulamentos de transporte aprovados ................. Instalaes Lavatrio para lavar mos instalado perto da sada do laboratrio. ............................................................

Assinatura do vistoriador. . . . . . . . . . Data do termo da vistoria . . . . . . . . . . . . .

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Quadro 7. Laboratrio de connamento Nvel 3 de segurana biolgica: Vistoria da segurana em laboratrio. Formulrio a utilizar com os formulrios de vistoria de segurana em laboratrio dos Nveis 1 e 2 de segurana biolgica.
Localizao . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Data . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Responsvel do laboratrio . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
ITEM VISTORIADO (DATA DA VISTORIA) SIM NO N/A COMENTRIOS

Instalaes Laboratrio separado de reas de passagem livre no edifcio .......................................................................... Acesso ao laboratrio atravs de antecmara com portas que fecham automaticamente ............................................ Todas as entradas do laboratrio so ou podem ser seladas para descontaminao ....................................................... O ar expelido da sala de passagem nica enviado para longe das reas ocupadas ................................................. Sistema de ventilao controlado para monitorizar o sentido da circulao do ar ............................................... Proteco pessoal Batas fechadas frente a utilizar no laboratrio .................... Roupa de proteco a utilizar unicamente em locais do laboratrio ......................................................................... Lavatrio para lavar as mos controlado por pedal, cotovelo ou automtico ..................................................... Proteco das mos Utilizar luvas duplas ao manusear material infeccioso e equipamento e superfcies de trabalho potencialmente contaminados .................................................................... Proteco respiratria Todo o pessoal deve utilizar proteco respiratria no laboratrio, quando os aerossis no forem contidos de forma segura numa CSB ................................................... Prticas Proteger as membranas mucosas ao trabalhar com material infeccioso fora de uma CSB .............................................. Alertar o pessoal para perigos especiais ligados ao(s) agentes(s) .......................................................................... Aconselhar o pessoal a ler, estudar e seguir as instrues sobre prticas e procedimentos, incluindo o manual de segurana biolgica ou de operaes ............................... Fornecer ao pessoal actualizaes anuais e formao adicional sobre alteraes aos procedimentos .................. Desinfectar em autoclave todos os resduos contaminados antes de os eliminar ..........................................................

Assinatura do vistoriador. . . . . . . . . . Data de termo da vistoria . . . . . . . . . . . . .

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PARTE II

Directivas de proteco biolgica

9. Conceitos de proteco biolgica em laboratrio

O Manual de Segurana Biolgica em Laboratrio tem-se centrado no passado em directivas tradicionais sobre segurana biolgica em laboratrios. Sublinha a utilizao de boas prticas microbiolgicas e de equipamentos de connamento apropriados; a concepo, funcionamento e manuteno adequadas das instalaes, bem como as observaes administrativas para minimizar o risco de ferimentos e doenas entre os membros do pessoal. Ao seguir estas recomendaes, minimiza-se obviamente os riscos para o ambiente e a comunidade vizinha em geral. Agora tornou-se necessrio alargar esta abordagem tradicional da segurana biolgica atravs da introduo de medidas de proteco biolgica em laboratrio. Os eventos mundiais dos ltimos tempos tm vindo a sublinhar a necessidade de proteger os laboratrios e os materiais neles contidos de exposio intencional a uma situao capaz de causar danos populao, aos animais, agricultura e/ou ao ambiente. Contudo, antes de denir as necessidades de proteco biolgica em laboratrio de uma instalao, importante compreender a diferena entre segurana biolgica e proteco biolgica . Segurana biolgica o termo utilizado para descrever os princpios de connamento, as tecnologias e as prticas que so implementadas para evitar a exposio no intencional a agentes patognicos e toxinas, ou o seu escape acidental. Proteco biolgica em laboratrio refere-se a medidas de proteco estabelecidas e pessoais concebidas para evitar perda, roubo, utilizao indevida, desvio ou escape intencional de agentes patognicos e toxinas. Prcticas ecazes de segurana biolgica so a verdadeira base de actividades de proteco biolgica. Atravs de avaliaes de risco efectuadas como parte integrante do programa de segurana biolgica de uma instituio, recolhe-se informao sobre o tipo de organismos disponveis, sua localizao fsica, o pessoal com necessidade de acesso a tais organismos, e identicao das pessoas por eles responsveis. Esta informao pode ser utilizada para avaliar se uma instituio dispe de material biolgico aliciante para quem desejar utiliz-lo indevidamente. Devem elaborar-se normas nacionais reconhecendo e assumindo a responsabilidade constante dos pases e instituies pela proteco de espcimes, agentes patognicos e toxinas contra utilizao abusiva. Para cada servio, preciso preparar e implementar um programa especco sobre proteco biolgica em laboratrio, segundo as exigncias do servio, o tipo de trabalho realizado, e as condies locais. Em consequncia, as actividades de proteco
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MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

biolgica em laboratrio devem ser representativas das vrias necessidades da instituio e devem incluir dados de directores cientcos, investigadores principais, responsveis de segurana biolgica, pessoal cientco do laboratrio, pessoal de manuteno, administradores, pessoal de tecnologia de informao e, quando apropriado, agncias e pessoal de segurana. As medidas de proteco biolgica em laboratrio devem basear-se num programa integral de responsabilidade por agentes patognicos e toxinas, incluindo um inventrio actualizado com localizao da armazenagem, identicao do pessoal com acesso, descrio da utilizao, documentao de transferncias internas e externas dentro e entre servios, e qualquer desactivao e/ou eliminao de materiais. Da mesma maneira, deve estabelecer-se um protocolo sobre proteco biolgica em laboratrio para identicao, noticao, investigao e reparao de infraces proteco biolgica em laboratrio, incluindo desacordos em resultados de inventrio. No caso de infraco proteco, a participao e os papis e responsabilidades das autoridades de sade e de proteco pblica devem ser claramente denidos. A formao em proteco biolgica em laboratrio, distinta da formao em segurana biolgica em laboratrio, deve ser administrada a todo o pessoal. Esta formao deve ajudar o pessoal a compreender a necessidade de proteco de tais materiais e o fundamento lgico de medidas de proteco biolgica especcas, e deve incluir um estudo de normas nacionais pertinentes e de procedimentos especcos instituio. Durante a formao tambm se deve tomar conhecimento do papel e responsabilidades do pessoal no caso de uma infraco proteco. A aptido prossional e tica de todo o pessoal com acesso regular autorizado a materiais sensveis para trabalhar com agentes patognicos perigosos est tambm no centro de actividades ecazes de proteco biolgica em laboratrio. Em resumo, as precaues de segurana devem fazer parte do trabalho de rotina de laboratrio, tal como as tcnicas de assepsia e as prticas microbiolgicas seguras. As medidas de proteco biolgica em laboratrio no devem entravar a troca eciente de materiais de referncia, espcimes clnicos e epidemiolgicos e informao relacionada necessria para investigaes clnicas ou de sade pblica. A gesto competente da proteco no deve interferir indevidamente nas actividades dirias dos cientistas, nem ser um impedimento investigao. O acesso legtimo a materiais clnicos e de investigao importantes tem de ser preservado. A avaliao da aptido do pessoal, a formao centrada na proteco e a observncia rigorosa dos procedimentos de proteco dos agentes patognicos so meios razoveis de reforo da proteco biolgica em laboratrio. Todos estes esforos devem ser estabelecidos e mantidos por meio de avaliaes regulares de risco e de ameaa, e reviso e actualizao regulares dos procedimentos. A vericao da conformidade com tais processos, com instrues claras sobre papis, responsabilidades e aces de soluo, deve ser uma parte integrante de programas de proteco biolgica em laboratrio e de normas nacionais para proteco biolgica de laboratrios.

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Parte III

Equipamento de laboratrio

10. Cmaras de segurana biolgica

As cmaras de segurana biolgica (CSB) foram concebidas para proteger o operador, o ambiente laboratorial e o material de trabalho da exposio a aerossis e salpicos resultantes do manuseamento de materiais que contm agentes infecciosos, tais como culturas primrias, stocks e amostras para diagnstico. Qualquer actividade que liberta energia num lquido ou semilquido, tal como agitar, verter, misturar ou deitar um lquido numa superfcie ou noutro lquido, produz partculas de aerossol. Outras actividades laboratoriais, como semear s riscas uma placa de gelose, inocular culturas de clulas em frascos com pipetas, utilizar uma pipeta com vrios canais para injectar suspenses lquidas de agentes infecciosos em placas de microculturas, homogeneizar e turbilhonar material infeccioso, centrifugar lquidos infecciosos ou trabalhar com animais, podem gerar aerossis infecciosos. Partculas de aerossis inferiores a 5 m de dimetro e gotculas entre 5 e 100 m de dimetro no so visveis a olho nu. O pessoal de laboratrio nem sempre se apercebe que estas partculas esto a ser geradas e podem ser inaladas ou contaminar materiais na superfcie de trabalho. As CSB, quando devidamente utilizadas, tm-se revelado altamente ecazes na reduo de infeces adquiridas em laboratrio e contaminaes cruzadas de culturas, devido a exposio a aerossis. As CSB tambm protegem o ambiente. Entretanto, a concepo bsica das CSB sofreu diversas alteraes. A principal foi a adio de um ltro de ar particulado de alta ecincia (HEPA) ao sistema de exausto. O ltro HEPA retm 99.97% das partculas de 0.3 m de dimetro e 99.99% das partculas maiores ou mais pequenas. Isto permite que o ltro HEPA retenha efectivamente todos os agentes infecciosos conhecidos e que s ar isento de micrbios seja expelido da cmara. A segunda alterao foi dirigir o ar do ltro para a superfcie de trabalho, protegendo assim os materiais que a se encontram de contaminao. Esta caracterstica frequentemente designada de proteco do produto . Estes conceitos bsicos levaram criao de 3 tipos de CSB; no Quadro 8, a seguir, descreve-se o tipo de proteco que cada um deles fornece. Nota. Cmaras horizontais e verticais de escoamento ( equipamentos de ar limpo ) no so cmaras de segurana biolgica e no devem ser utilizadas como tal. Cmara de segurana biolgica Classe I A Ilustrao 6, abaixo, apresenta um diagrama esquemtico de uma CSB da Classe I. O ar da sala aspirado atravs da abertura na frente, a uma velocidade mnima de
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MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

Quadro 8. Seleco de cmaras de segurana biolgica (CSB), segundo o tipo de proteco necessria
TIPO DE PROTECO SELECO DE CSB

Proteco do pessoal, microrganismos nos Grupos de Risco 13 Proteco do pessoal, microrganismos no Grupo de Risco 4, laboratrio com porta-luvas Proteco do pessoal, microrganismos no Grupo de Risco 4, laboratrio com fatos pressurizados Proteco do produto Proteco contra radionucldios/qumicos volteis, quantidades mnimas Proteco contra radionucldios/qumicos volteis

Classe I, II, III Classe III Classe I, II Classe II ou III unicamente se uxo laminar includo Classe IIB1, Classe IIA2 de evacuao exterior Classe I, IIB2 ou III

B A

ar da sala ar potencialmente contaminado ar filtrado com filtro HEPA corte lateral Ilustrao 6. Diagrama esquemtico de uma cmara de segurana biolgica de Classe I A Abertura frontal; B Painel de observao; C Filtro exaustor HEPA; D Conduta do exaustor

0,38 m/s, passa por cima da superfcie de trabalho e expelido pelo canal de escape. O uxo de ar varre as partculas de aerossol que possam gerar-se na superfcie de trabalho para longe do operador e envia-as para o canal de escape. A abertura na frente permite igualmente que os braos do operador cheguem superfcie de trabalho dentro da cmara, enquanto este observa a operao atravs de um painel de vidro.
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10. CMARAS DE SEGURANA BIOLGICA

Este pode ser completamente levantado, permitindo o acesso superfcie de trabalho para a sua limpeza ou outros ns. O ar da cmara expelido atravs de um ltro HEPA: a) para o laboratrio e depois para o exterior do edifcio atravs do exaustor do mesmo; b) para o exterior atravs do exaustor do edifcio; c) directamente para o exterior. O ltro HEPA pode estar colocado na conduta do exaustor do CSB ou no exaustor do edifcio. Algumas CSB da Classe I esto equipadas com um exaustor de ventoinha, enquanto outras dependem da ventoinha do exaustor do edifcio. A CSB da Classe I foi a primeira CSB reconhecida e, devido sua concepo simples, continua a ser amplamente utilizada no mundo inteiro. Tem a vantagem de fornecer proteco pessoal e ambiental e pode igualmente ser utilizada para trabalhar com radionucldios e qumicos txicos volteis. Contudo, dado que o ar aspirado da sala e que varre a superfcie de trabalho no-esterilizado, considera-se que no assegura uma proteco do produto consistente e digna de conana. Cmaras de segurana biolgica Classe II Dado o aumento da utilizao de culturas de clulas e tecidos para a propagao de vrus e outros ns, considerou-se que j no era satisfatrio varrer a superfcie de trabalho com ar no-esterilizado. A CSB da Classe II foi concebida para fornecer proteco pessoal, mas tambm para proteger os materiais na superfcie de trabalho do ar contaminado da sala. As CSB da Classe II, da qual existem 4 tipos (A1, A2, B1 e B2), distinguem-se das CSB da Classe I pelo facto de s permitirem o uxo de ar esterilizado (ltro HEPA) sobre a superfcie de trabalho. A CSB da Classe II pode ser utilizada para trabalhar com agentes infecciosos dos Grupos de Risco 2 e 3 e mesmo do Grupo de Risco 4 se forem utilizados fatos de presso positiva.
Cmara de segurana biolgica Classe II, tipo A1

Na Ilustrao 7, a seguir, apresenta-se um esquema desta cmara. Uma ventoinha interna suga ar da sala (abastecimento de ar) pela abertura na frente e envio-o para a cmara atravs da grelha de entrada. A velocidade de entrada deste ar deve ser, no mnimo, 0,38 m/s na abertura da frente. O ar passa ento por um ltro HEPA de abastecimento, antes de ser injectado para a superfcie de trabalho. medida que o uxo de ar desce, a cerca de 618 cm da superfcie de trabalho, divide-se em duas correntes secundrias: metade do uxo de ar passa atravs da grelha da frente do exaustor e a outra metade atravs da grelha de trs. Quaisquer partculas de aerossol geradas na superfcie de trabalho so imediatamente capturadas neste uxo de ar descendente e enviadas para as grelhas (posterior ou anterior) do exaustor, assegurando assim o mais elevado nvel de proteco do produto. O ar ento expelido atravs da conduta traseira no espao entre os ltros de abastecimento e do exaustor, localizados no topo da cmara. Devido ao tamanho destes ltros, cerca de 70% do ar reenviado atravs do ltro HEPA de abastecimento para a zona de trabalho; os restantes 30% passam pelo ltro do exaustor para a sala ou para o exterior.
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MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

C E B A

F corte frontal ar da sala ar potencialmente contaminado ar filtrado com filtro HEPA Ilustrao 7. Diagrama esquemtico de uma cmara de segurana biolgica da Classe IIA1 A Abertura frontal; B Painel de observao; C Filtro exaustor HEPA; D Conduta traseira; E Filtro HEPA de abastecimento; F Ventoinha corte lateral

O ar do exaustor da CSB Classe IIA1 pode ser reenviado para a sala ou expelido para o exterior do edifcio atravs de uma conexo a uma conduta prpria ou atravs do exaustor do edifcio. Recircular o ar usado para a sala tem a vantagem de fazer baixar os custos de combustvel, porque no se est a expelir para o exterior ar aquecido e/ou arrefecido. Uma conexo a um sistema de ventilao por condutas tambm permite utilizar algumas CSB em trabalho com radionucldios volteis e qumicos txicos volteis (Quadro 8).
Cmaras de segurana biolgica Classe II tipo A2 com ventilao para o exterior, B1 e B2

As CSB Classe IIA2 com ventilao para o exterior, Classe IIB1 (Ilustrao 8) e Classe IIB2 so variantes da Classe II tipo A1. No Quadro 9, mostram-se as suas caractersticas, bem como as das CSB da Classe I e da Classe III. Cada variante permite utilizar as CSB para ns especcos (ver Quadro 8). Estas CSB distinguem-se umas das outras em diversos aspectos: a velocidade de entrada do ar pela abertura frontal; a quantidade de ar recirculado pela superfcie de trabalho e expelido da cmara; o sistema de ventilao, que determina se o ar da cmara expelido para a sala, para o exterior atravs de um sistema prprio, ou para o sistema de ventilao do edifcio;
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10. CMARAS DE SEGURANA BIOLGICA

D B A

F corte frontal ar da sala ar potencialmente contaminado ar filtrado com filtro HEPA

F corte lateral

Ilustrao 8. Diagrama esquemtico de uma cmara de segurana biolgica da Classe IIB1 A Abertura frontal; B Painel de observao; C Filtro exaustor HEPA; D Filtro de admisso HEPA; E Plenum do exaustor de presso negativa; F Ventoinha; G Filtro HEPA de admisso de ar. necessrio ligar o exaustor da cmara ao sistema de ventilao do edifcio

o sistema de presso (se as cmaras dispem de condutas e plenums biologicamente contaminados sob presso negativa ou condutas e plenums biologicamente contaminados, rodeados por condutas e plenums de presso negativa). Descries detalhadas das diversas CSB Classe IIA e IIB podem ser extradas das referncias (7) e (8) e das brochuras dos fabricantes. Cmara de segurana biolgica Classe III Este tipo de cmara (Ilustrao 9) fornece o nvel mais elevado de proteco pessoal e utilizado para os agentes do Grupo de Risco 4. Todas as perfuraes so seladas prova de gs . O ar fornecido ltrado por HEPA e o ar expelido passa por 2 ltros HEPA. O uxo de ar mantido por um sistema de ventilao prprio, fora da cmara, que mantm o interior da mesma sob presso negativa (cerca de 124,5 Pa). O acesso superfcie de trabalho requer luvas de borracha de grande resistncia, colocadas entrada da cmara. As CSB Classe III devem possuir uma caixa de passagem anexa que possa ser esterilizada e equipada com um exaustor de ltro HEPA. As
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MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

Quadro 9. Diferenas entre as Cmaras de segurana biolgica (CSB) das Classes I, II e III
CSB VELOCIDADE(m/s) FLUXO DE AR (%) RECIRCULADO EXPELIDO SISTEMA DE EXAUSTO

Classe Ia Classe IIA1 Classe IIA2 Ventilao para o exteriora Classe IIB1a Classe IIB2 Classe III
a a

0,36 0,380,51 0,51

0 70 70

100 30 30

Conduta dura Exausto para sala ou conexo dedal Exausto para sala ou conexo dedal Conduta dura Conduta dura Conduta dura

0,51 0,51 NA

30 0 0

70 100 100

NA No aplicvel. a Todas as condutas biologicamente contaminadas esto sob presso negativa ou rodeadas por condutas e plenums de presso negativa.

D B

E F

corte frontal ar da sala ar potencialmente contaminado ar filtrado com filtro HEPA

corte lateral

Ilustrao 9. Diagrama esquemtico de uma cmara de segurana biolgica da Classe III (com porta-luvas) A Porta-luvas (cobrindo o brao todo); B Painel de observao; C Filtros exaustores HEPA duplos; D Filtros de admisso HEPA; E Autoclave de duas portas ou caixa de passagem; F Reservatrio de desinfeco qumica. necessrio ligar o exaustor da cmara ao sistema de ventilao do edifcio.

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10. CMARAS DE SEGURANA BIOLGICA

cmaras podem ser conectadas a uma autoclave de duas portas, apropriada para descontaminar todos os materiais que entram ou saem das cmaras. Podem juntar-se vrias caixas de luvas para ampliar a superfcie de trabalho. As CSB de Classe III so apropriadas para trabalhar em laboratrios dos Nveis 3 e 4 de segurana biolgica. Ligaes de ar da cmara de segurana biolgica As ligaes de dedal ou de capuz foram concebidas para utilizar em CSB de Classes IIA1 e IIA2 com ventilao para o exterior. O dedal encaixa na caixa do exaustor da cmara, aspirando o ar da cmara e expelindo-o para as condutas do exaustor do edifcio. Entre o dedal e a caixa do exaustor da cmara mantm-se um pequeno orifcio, geralmente de 2,5 cm de dimetro, o que permite que o ar da sala seja tambm aspirado e expelido para o exaustor do edifcio. A capacidade deste sistema tem de ser suciente para captar o ar da sala e o ar do exaustor da cmara. O dedal deve poder ser removido ou ser concebido de forma a permitir testes operacionais da cmara. De um modo geral, o rendimento de uma CSB com ligao de dedal no muito afectado por utuaes no uxo de ar do edifcio. As CSB de Classe IIB1 e IIB2 tm condutas rgidas, solidamente ligadas sem qualquer abertura ao sistema de ventilao do edifcio, ou, de preferncia, a um sistema prprio de condutas. O sistema de ventilao do edifcio tem de corresponder rigorosamente s necessidades de uxo de ar especicadas pelo fabricante, tanto no que se refere ao volume como presso esttica. A certicao de CSB de condutas rgidas demora mais tempo do que a de cmaras que recirculam o ar para a sala ou que tm ligao de dedal. Escolha de uma cmara de segurana biolgica A escolha de uma CSB depende em primeiro lugar do tipo de proteco necessria: proteco do produto; proteco pessoal contra microrganismos dos Grupos de Risco 1 a 4; proteco pessoal contra exposio a radionucldios e qumicos txicos volteis; ou uma combinao destes. No Quadro 8 so indicadas as CSB recomendadas para cada tipo de proteco. Qumicos txicos ou volteis no devem ser utilizados em CSB que reenviam o ar usado para a sala: cmaras da Classe I, que no esto conectadas ao exaustor do edifcio, ou da Classe IIA1 e IIA2. Cmaras da Classe IIB1 so aceitveis para trabalhos com quantidades diminutas de qumicos volteis e radionucldios. Quando estiver previsto trabalhar com quantidades signicativas de radionucldios e qumicos volteis, necessrio utilizar uma CSB da Classe IIB2, tambm conhecida por cmara de exaustor mximo. Utilizao de cmaras de segurana biolgica em laboratrio
Localizao

A velocidade do uxo de ar atravs da abertura frontal para dentro da cmara de aproximadamente 0,45 m/s. A esta velocidade, a integridade do uxo frgil e pode
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MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

ser facilmente desintegrada por correntes de ar causadas por pessoas que passam perto da cmara, janelas abertas, registos do fornecimento de ar e pelo abrir e fechar de portas. A soluo ideal seria instalar a CSB num local afastado da circulao das pessoas e de correntes de ar que a perturbem. Sempre que possvel, deve prever-se um espao livre de cerca de 30 cm nas traseiras e em cada lado da cmara, permitindo um acesso fcil para a manuteno do aparelho. Pode igualmente ser necessrio um espao livre de cerca de 3035 cm acima da cmara, para a medio exacta da velocidade do ar atravs do ltro exaustor e para a mudana do ltro.
Operadores

Se as CSB no forem utilizadas de forma apropriada, a proteco que fornecem pode car muito reduzida. Os operadores das CSB tm de ser muito cuidadosos ao introduzir e retirar os seus braos da cmara, a m de manter a integridade do uxo de ar proveniente da abertura frontal. Deve-se introduzir e retirar os braos lentamente, na perpendicular da abertura frontal. O manuseamento dos materiais dentro da cmara s deve comear 1 minuto depois de introduzir as mos e os braos na cmara, para que o ambiente no interior se estabilize e o uxo de ar varra a superfcie das mos e dos braos do operador. igualmente necessrio minimizar os movimentos de entrada e sada da cmara, introduzindo previamente todos os materiais necessrios, antes de iniciar a manipulao.
Colocao do material

A grelha frontal de entrada das CSB da Classe II no pode estar bloqueada com papel, equipamento ou outros artigos. A superfcie do material a colocar dentro da cmara deve ser descontaminada com lcool a 70%. O trabalho pode ser efectuado sobre toalhas absorventes embebidas num desinfectante, a m de capturar borrifos e salpicos. Todo o material deve ser colocado no fundo da cmara, perto da borda traseira da superfcie de trabalho, sem bloquear a grelha traseira. O equipamento gerador de aerossis (misturadores, centrifugadoras) deve ser colocado no fundo da cmara. Artigos volumosos, tais como sacos de proteco biolgica, bandejas de pipetas descartveis e frascos de suces devem ser colocados numa das partes laterais do interior da cmara. O trabalho em si deve uir ao longo da superfcie de trabalho, da rea limpa para a rea contaminada. O saco de segurana para recolha de material perigoso e a bandeja de pipetas que podem ser descontaminados em autoclave, no devem ser colocados no exterior da cmara. A frequncia dos movimentos para dentro e para fora que implica a utilizao destes recipientes iria perturbar a integridade da barreira de ar na cmara e comprometer tanto a proteco pessoal como a do produto manipulado.
Funcionamento e manuteno

A maior parte das CSB so concebidas para trabalhar 24 horas/dia, e os investigadores acham que o funcionamento contnuo ajuda a controlar os nveis de p e partculas
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10. CMARAS DE SEGURANA BIOLGICA

no laboratrio. As CSB Classe IIA1 e IIA2 com exaustor para a sala ou conectadas a condutas exaustoras prprias, por ligaes de dedal, podem ser desligadas quando no forem necessrias. Outros tipos de CSB, como as da Classe IIB1 e B2, que possuem instalaes de condutas rgidas, precisam de manter um uxo de ar ininterrupto, para ajudar a manter o equilbrio do ar da sala. As cmaras devem ser ligadas, pelo menos 5 minutos antes do incio das actividades, e permanecer ligadas 5 minutos aps o termo das mesmas, a m de purgar a cmara, isto , dar tempo para que o ar contaminado seja expelido do ambiente interior da cmara. Todas as reparaes numa CSB devem ser efectuadas por um tcnico qualicado. Qualquer defeito no funcionamento deve ser assinalado e reparado antes de voltar a utilizar a cmara.
Lmpadas ultravioleta

Lmpadas ultravioleta no so necessrias nas CSB. Se forem utilizadas, devem ser limpas todas as semanas, para retirar o p e sujidade que podem bloquear a eccia germicida dos raios. A intensidade destes deve ser vericada quando a cmara recerticada, a m de assegurar que a emisso de luz apropriada. necessrio desligar as lmpadas ultravioleta quando a sala est ocupada, para proteger os olhos e a pele de exposio descuidada.
Chamas vivas

Deve evitar-se chamas vivas no ambiente quase isento de micrbios, criado dentro da CSB; elas perturbam os padres do uxo de ar e podem ser perigosas quando se utilizam substncias inamveis volteis. Para esterilizar ansas bacteriolgicas existem microqueimadores ou fornos elctricos, que so preferveis chama viva.
Derrames

Deve estar axada no laboratrio uma cpia dos procedimentos necessrios em caso de derrames; todo o pessoal do laboratrio deve ler e compreender estes procedimentos. Se ocorrer um derrame de material perigoso dentro de uma CSB, deve comear-se imediatamente a limpeza da mesma, continuando a cmara a funcionar. Deve utilizar-se um desinfectante ecaz e aplic-lo de forma a minimizar a produo de aerossis. Todo o material que entrou em contacto com o produto derramado deve ser desinfectado e/ou esterilizado em autoclave.
Certicao

O funcionamento e a integridade operacional das CSB devem ser certicados conformes s normas nacionais e internacionais, aquando da instalao e depois periodicamente, por tcnicos qualicados, de acordo com as instrues do fabricante. A avaliao da eccia do connamento das cmaras deve incluir testes sobre a integridade da cmara, fugas nos ltros HEPA, perl de velocidade do uxo de descida, velocidade aparente, presso negativa/taxa de ventilao, modelo de fumo do uxo de
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MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

ar, alarmes e interconexes. Pode igualmente fazer-se testes opcionais para fugas de electricidade, intensidade de iluminao, intensidade das luzes ultravioleta, nvel de rudo e vibrao. Para efectuar estes testes necessrio uma formao, aptido e equipamento especiais, sendo por isso imprescindvel que sejam feitos por um prossional qualicado.
Limpeza e desinfeco

Todos os artigos na CSB, incluindo o equipamento, devem ser descontaminados e retirados da cmara no nal das operaes, dado que os meios de cultura residuais podem permitir a proliferao de micrbios. As superfcies internas das CSB devem ser descontaminadas antes e depois de cada utilizao. As superfcies de trabalho e as paredes interiores devem ser esfregadas com um desinfectante que mate qualquer microrganismo que se encontre na cmara. No nal do dia de trabalho, a descontaminao nal da superfcie deve incluir uma esfregadela geral da superfcie de trabalho, das partes laterais e do fundo e do interior do vidro. Deve utilizar-se uma soluo de hipoclorito de clcio ou lcool a 70%, se ecaz para os organismos visados. necessrio esfregar uma segunda vez com gua esterilizada, quando se utilizar um desinfectante corrosivo como o hipoclorito de clcio. aconselhvel que a cmara continue a funcionar durante a descontaminao. Caso tenha sido desligada, deve voltar a ser ligada e funcionar durante 5 minutos para purgar o ar interior, antes de ser desligada.
Descontaminao

As CSB precisam de ser descontaminadas antes de mudar ltros ou quando mudam de localizao. O mtodo de descontaminao mais comum a fumigao com gs formaldedo. A descontaminao das cmaras deve ser efectuada por um prossional qualicado.
Equipamento de proteco pessoal

Deve utilizar-se este equipamento sempre que se utilizar uma CSB. Batas de laboratrio so aceitveis para os trabalhos realizados aos Nveis 1 e 2 de segurana biolgica. Batas de fechar atrs, com frente slida, fornecem uma melhor proteco e devem ser utilizadas nos Nveis 3 e 4 de segurana biolgica (excepto nos laboratrios onde os fatos pressurizados so obrigatrios). As luvas devem cobrir os punhos da bata e no devem car debaixo das mangas. Podem utilizar-se mangas elsticas para proteger os pulsos do investigador. Para certos procedimentos podem ser necessrias mscaras e culos de proteco.
Alarmes

As CSB podem ser equipadas com um ou dois tipos de alarme. Alarmes no painel de observao s existem nas cmaras com painel de correr; o alarme accionado quando o operador no coloca o painel na posio apropriada; para corrigir esta situao,
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10. CMARAS DE SEGURANA BIOLGICA

basta voltar a colocar o painel na posio correcta. Alarmes no uxo de ar indicam que h uma decincia no uxo normal de ar da cmara; isto signica que h um perigo imediato para o operador ou para o produto. Quando este alarme se activar, o trabalho deve ser imediatamente interrompido e o supervisor do laboratrio deve ser informado. O manual de instrues do fabricante deve fornecer mais informaes. A formao na utilizao das CSB deve abranger este aspecto.
Informaes suplementares

Escolher o tipo apropriado de CSB, instal-la, utiliz-la correctamente e certicar o seu bom funcionamento todos os anos so processos complexos. Assim, aconselhvel que isto se faa sob a superviso de um prossional de segurana biolgica, devidamente formado e com experincia. Este prossional deve estar bem familiarizado com a documentao pertinente, enumerada na seco Referncias, e ter recebido uma formao sobre todos os aspectos das CSB. Os operadores devem receber uma formao formal sobre o funcionamento e utilizao das CSB. Para mais informaes ver referncias (5) e (716), bem como Captulo 11.

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11. Equipamento de segurana

Dado que os aerossis so uma fonte importante de infeco, deve tomar-se a precauo de reduzir as possibilidades da sua formao e disperso. Diversas operaes laboratoriais (fundir, misturar, separar, agitar, mexer, separar por ultra-sons e centrifugar materiais infecciosos) podem produzir aerossis perigosos. Mesmo quando se utiliza equipamento seguro, melhor, sempre que possvel, efectuar estas operaes numa cmara de segurana biolgica. No captulo anterior (10) analisa-se a utilizao e testes de controlo destas cmaras. A utilizao de equipamento de segurana no , em si, uma segurana de proteco, excepto se o operador estiver devidamente formado e utilizar tcnicas adequadas. O equipamento deve ser testado regularmente, a m de assegurar a eccia da proteco. No quadro 10 encontra-se uma lista de controlo do equipamento de segurana, concebida para eliminar ou reduzir certos perigos, bem como um resumo das suas caractersticas de proteco. Nas pginas subsequentes, do-se mais pormenores sobre estes equipamentos. No Captulo 12, encontra-se informao adicional sobre a sua utilizao correcta. No Anexo 4 encontram-se informaes sobre o equipamento e as operaes que podem criar perigos. Isoladores de presso negativa em plstico exvel O isolador de presso negativa em plstico exvel um dispositivo de connamento primria completo, que fornece a proteco mxima contra materiais biolgicos perigosos. Pode ser montado numa estrutura mvel e o espao de trabalho est totalmente envolvido num invlucro transparente de cloreto de polivinilo (PVC), suspenso numa estrutura de ao. O isolador mantido a uma presso interna inferior presso atmosfrica. O ar de entrada passa atravs de um ltro HEPA e o ar de sada atravs de 2 ltros HEPA, o que evita a necessidade de canalizar o ar usado para o exterior do edifcio. O isolador pode ser equipado com incubadora, microscpio e outro equipamento laboratorial, tal como centrifugadoras, gaiolas/caixas para animais, blocos trmicos, etc. O material introduzido e removido do isolador atravs de aberturas prprias sem comprometer a segurana microbiolgica. O manuseamento das operaes feito com mangas e luvas incorporadas, descartveis. Existe igualmente um manmetro para controlar a presso no invlucro.
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11. EQUIPAMENTO DE SEGURANA

Quadro 10. Equipamento de segurana biolgica


EQUIPAMENTO RISCO EVITADO CARACTERSTICAS DA SEGURANA

Cmara de segurana biolgica Classe I

Aerossis e salpicos

Fluxo de ar de entrada mnimo (velocidade frontal) ao nvel da abertura de acesso ao trabalho. Filtragem adequada do ar evacuado. No fornece proteco ao produto Fluxo de ar de entrada mnimo (velocidade frontal) ao nvel da abertura de acesso ao trabalho. Filtragem adequada do ar evacuado. Fornece proteco ao produto Connamento mximo Fornece proteco ao produto se tiver uxo de ar laminar Connamento mximo.

Cmara de segurana biolgica Classe II

Aerossis e salpicos

Cmara de segurana biolgica Classe III Isolador de presso negativa, em plstico exvel Escudo contra salpicos Material de pipetar

Aerossis e salpicos

Aerossis e salpicos

Salpicos de produtos qumicos Riscos devidos a pipetar com a boca, como ingerir agentes patognicos, inalar aerossis produzidos pela suco na pipeta, derramar lquido ou gotas da pipeta, contaminao da extremidade de suco da pipeta

Cria uma barreira entre o operador e a operao Facilidade de utilizao Controlo da contaminao da extremidade de suco da pipeta, proteco do meio de pipetar, do utilizador e do circuito de vcuo. Podem ser esterilizados Controlo de fugas pela extremidade da pipeta

Microincineradores de Salpicos das ansas de ansas, ansas descartveis transferncias

Protegido por um tubo de vidro ou cermica fechado numa extremidade. Aquecido a gs ou electricidade Descartvel, aquecimento desnecessrio Construo estanque com tampa Duradouros Utilizveis em autoclaves

Recipientes estanques para recolha e transporte dentro do servio de materiais infecciosos a esterilizar

Aerossis, derrames e fugas

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MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

EQUIPAMENTO

RISCO EVITADO

CARACTERSTICAS DA SEGURANA

Recipientes para objectos cortantes ou aados descartveis Contentores para transporte entre laboratrios/instituies Autoclaves manuais ou automticas Garrafas com tampas de rosca Proteco da linha de vcuo

Feridas por picadas

Utilizveis em autoclaves Robustos, no perfurveis Robustos Contentores primrios e secundrios impermeveis, para evitar derrames Material absorvente para derrames Concepo aprovada Esterilizao por calor ecaz Connamento ecaz Filtro de cartucho evita passagem de aerossis (tamanho das partculas 0,45 m) Frasco de descarga contm desinfectante apropriado. Uma vlvula de borracha pode servir para fechar o vcuo automaticamente quando o frasco-depsito estiver cheio. Todo o equipamento utilizvel em autoclave.

Libertao de microrganismos

Material infeccioso (tornado seguro para eliminar ou reutilizar) Aerossis e derrames Contaminao do sistema de vcuo do laboratrio com aerossis e uidos derramados

Utilizam-se isoladores de plstico exvel para manusear organismos de alto risco (Grupos de Risco 3 e 4) em trabalhos no terreno, onde no possvel nem apropriado instalar ou manter cmaras de segurana biolgica convencionais. Material de pipetar Deve sempre utilizar-se este material para pipetar, e a suco com a boca deve ser rigorosamente proibida. Nunca demais sublinhar a importncia de utilizar este material. Os perigos mais comuns ligados utilizao de pipetas so causados pela suco bucal. A aspirao pela boca e a ingesto de matrias perigosas tm sido responsveis por muitas infeces de origem laboratorial. Tambm possvel transferir agentes patognicos para a boca quando se pe um dedo contaminado na extremidade de suco da pipeta. Um perigo menos conhecido a inalao de aerossis causados pela suco. O tampo de algodo no um ltro ecaz de micrbios, presso negativa ou positiva, podendo sugar-se partculas atravs do mesmo. Pode mesmo ocorrer uma suco mais violenta, se o tampo estiver muito apertado, aspirando-se o tampo, aerossis e o prprio lquido. S a utilizao do material prprio de pipetar pode evitar a ingesto de agentes patognicos.
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11. EQUIPAMENTO DE SEGURANA

Podem igualmente produzir-se aerossis quando caem gotas de uma pipeta na superfcie de trabalho, quando se misturam culturas sugando e soprando alternadamente e quando se sopra a ltima gota de uma pipeta. A inalao de aerossis, inevitavelmente produzidos durante as operaes de pipetar, pode ser evitada trabalhando numa cmara de segurana biolgica. O material de pipetar deve ser escolhido com cuidado. A sua forma e utilizao no devem criar um risco adicional de infeco, e o material deve ser fcil de esterilizar e limpar. Para manusear microrganismos e culturas de clulas devem utilizar-se tampes (resistentes a aerossis) nas extremidades da pipeta,. No devem utilizar-se pipetas com a extremidade de suco rachada ou lascada, dado que danicam as juntas de encaixe do material de pipetar e tornam-se assim um perigo. Homogeneizadores, batedores, misturadores e geradores de ultra-sons Os homogeneizadores domsticos (de cozinha) no so selados e libertam aerossis. S deve ser utilizado equipamento que foi concebido para laboratrios, cuja construo minimiza ou evita essa libertao. Os separadores, que podem actualmente ser utilizados para pequenos e grandes volumes, tambm podem produzir aerossis. Os homogeneizadores utilizados para os microrganismos do Grupo de Risco 3 devem ser sempre enchidos e abertos em cmaras de segurana biolgica. Os geradores de ultra-sons podem libertar aerossis; devem funcionar em cmaras de segurana biolgica ou cobertos com proteces durante a sua utilizao. As proteces e o exterior do gerador de ultra-sons devem ser descontaminados aps a sua utilizao. Ansas descartveis A vantagem destas ansas no precisarem de ser esterilizadas podendo portanto ser utilizadas em cmaras de segurana biolgica, onde queimadores Bunsen e microincineradores perturbariam o uxo do ar. Estas ansas devem ser postas num desinfectante, aps a sua utilizao, e eliminadas como resduos contaminados (ver Captulo 3). Microincineradores Os microincineradores a gs e electricidade tm escudos de vidro borossilicato ou de cermica, que minimizam os borrifos e asperso de material infectado quando se esterilizam ansas. Contudo, podem perturbar o uxo de ar e devem portanto ser colocados na parte detrs da superfcie de trabalho das cmaras de segurana biolgica. Equipamento e roupa de proteco pessoal O equipamento e a roupa de proteco pessoal podem servir de barreira, minimizando o risco de exposio a aerossis, salpicos e inoculao acidental. A roupa e o equipamento escolhido dependem da natureza do trabalho a efectuar. Deve
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MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

vestir-se roupa de proteco quando se trabalha no laboratrio. Antes de sair do laboratrio, deve tirar-se a roupa de proteco e lavar as mos. No Quadro 11, a seguir, descreve-se de forma sucinta alguns equipamentos de proteco pessoal utilizados em laboratrio e a proteco que fornecem. Quadro 11. Equipamento de proteco pessoal
EQUIPAMENTO RISCO EVITADO CARACTERSTICAS DE PROTECO

Blusas, batas e fatos de laboratrio Aventais plsticos Calado culos de proteco (tipo culos de soldador)

Contaminao do vesturio Abertura atrs Cobrem o vesturio pessoal Contaminao do vesturio Impermeveis Impactos e salpicos Impactos e salpicos Fechados frente Lentes resistentes a impactos (opticamente correctas ou utilizadas por cima de culos de correco) Proteces laterais Lentes resistentes a impactos (opticamente correctas) Proteces laterais Protegem a cara toda Fcil de tirar em caso de acidente H diversos modelos: descartvel, completa ou meia mscara puricadora de ar, completa ou de capuz com ar ltrado presso, e com abastecimento de ar Em latex, vinilo ou nitrilo microbiologicamente aprovados, descartveis Proteco das mos Malha de ao

culos de segurana

Impactos

Viseira de proteco facial Impactos e salpicos Aparelhos e mscaras de respirao Inalao de aerossis

Luvas

Contacto directo com microrganismos

Cortes

Blusas, batas, fatos e aventais de laboratrio

As blusas de laboratrio devem ser totalmente abotoadas. Contudo, batas e fatos de mangas compridas e de apertar atrs do melhor proteco do que as blusas de laboratrio e so preferidos nos laboratrios de microbiologia e quando se trabalha com cmaras de segurana biolgica. Quando necessrio, podem envergar-se aventais por cima dos fatos ou das batas, a m de dar uma proteco adicional contra o derrame de produtos qumicos ou biolgicos, tais como sangue ou uidos de culturas. Deve existir uma lavandaria nas instalaes ou perto delas.
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11. EQUIPAMENTO DE SEGURANA

Tais blusas, batas, fatos e aventais no devem ser utilizados fora dos locais do laboratrio.
culos de proteco, culos de segurana e viseiras de proteco facial

A escolha do equipamento para proteger os olhos e a cara contra salpicos e impactos de objectos depende da operao a efectuar. culos normais ou graduados podem ser fabricados com uma armao especial que permite inserir lentes na frente da armao, utilizando um material inquebrvel que acompanha a forma do rosto, ou ser equipados com proteces laterais (culos de segurana). Os culos de segurana no fornecem porm uma proteco adequada contra salpicos, mesmo quando acompanhados de proteco lateral. Nesse caso, devem utilizar-se culos de proteco (tipo culos de soldador) que protegem contra salpicos e impactos, por cima dos culos graduados ou lentes de contacto (que no oferecem proteco contra perigos biolgicos ou qumicos). As viseiras de proteco facial so feitas de plstico inquebrvel, ajustam-se cara e so seguras cabea por tiras ou por uma touca. culos de proteco, de segurana e viseiras no devem ser utilizados fora do laboratrio.
Respiradores

Ao proceder a trabalhos de alto risco (por exemplo: limpeza de um derrame de material infeccioso) pode ser necessrio utilizar material de proteco respiratria. A escolha do respirador depende do tipo de perigo(s). Existem respiradores com ltros permutveis: proteco contra gazes, vapores, partculas e microrganismos; imprescindvel que o ltro escolhido corresponda ao tipo apropriado de respirador. Para assegurar a proteco ideal, o respirador deve ser instalado na cara do operador e testado. Os respiradores auto-sucientes, com abastecimento de ar integral, asseguram uma proteco total. Deve solicitar-se o conselho de uma pessoa devidamente qualicada, por exemplo um higienista prossional, para escolher o respirador adequado. As mscaras utilizadas em cirurgia foram concebidas para a proteco dos doentes e no asseguram a proteco respiratria dos operadores. Alguns respiradores descartveis (ISO 13.340.30) foram concebidos para assegurar a proteco contra a exposio a agentes biolgicos. Os respiradores no devem ser utilizados fora das reas laboratoriais.
Luvas

Durante certas manipulaes laboratoriais pode ocorrer a contaminao das mos. Estas so igualmente vulnerveis a ferimentos causados por objectos cortantes. No trabalho normal de laboratrio e no manuseamento de agentes infecciosos, sangue e uidos corporais, usam-se geralmente luvas descartveis de latex, vinilo ou nitrilo, microbiologicamente aprovados, semelhantes s utilizadas em cirurgia. Pode igualmente recorrer-se a luvas reutilizveis, mas tem de assegurar-se a lavagem, remoo, limpeza e desinfeco adequadas das mesmas.
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MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

Devem tirar-se as luvas e lavar bem as mos, aps manusear materiais infecciosos, trabalhar em cmaras de segurana biolgica e antes de sair do laboratrio. Depois de utilizadas, as luvas descartveis devem ser eliminadas com os resduos laboratoriais infectados. Reaces alrgicas como dermatite e hipersensitividade imediata tm sido assinaladas em laboratrios e entre outros trabalhadores que utilizam luvas de latex, particularmente nas que contm p. Devem estar disponveis alternativas s luvas de latex com p. Devem utilizar-se luvas de malha de ao inoxidvel, sempre que existir a probabilidade de exposio a instrumentos cortantes, como nas autpsias. Estas luvas protegem contra cortes mas no contra perfuraes. No devem utilizar-se luvas fora das reas laboratoriais. Para mais informaes ver referncias (12), (17) e (18).

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PARTE IV

Boas tcnicas microbiolgicas

12. Tcnicas de laboratrio

Erros humanos, ms tcnicas e m utilizao do equipamento esto na origem da maioria dos acidentes em laboratrio e infeces relacionadas com o trabalho. Este captulo fornece um resumo de mtodos tcnicos destinados a evitar ou a reduzir os problemas mais vulgarmente assinalados. Manipulao segura de amostras em laboratrio A recolha, o transporte e a manipulao de amostras em laboratrio no correctamente efectuadas representam um risco de infeco para o pessoal implicado.
Recipientes de amostras

Os recipientes de amostras devem ser de vidro ou de preferncia em plstico. Devem ser resistentes e estanques uma vez a tampa ou rolha correctamente colocada. O exterior dos recipientes no deve ter traos do material. Os recipientes devem ser correctamente etiquetados para facilitar a identicao. Os formulrios de pedidos ou de especicao de amostras no devem ser embrulhados com os recipientes mas metidos em envelopes de preferncia impermeveis.
Transporte de amostras dentro do servio

Para evitar escoamento ou derrame acidental, devem utilizar-se recipientes secundrios, por exemplo caixas, munidos de separaes para que os recipientes com as amostras se mantenham em posio vertical. Estes recipientes secundrios podem ser de metal ou de plstico, devem poder ser esterilizados em autoclave ou devem ser resistentes a desinfectantes qumicos, e o fecho deve, de preferncia, ter uma junta. Devem ser regularmente descontaminados.
Recepo de amostras

Os laboratrios que recebem grande nmero de amostras devem ter uma sala ou zona especial para tal efeito.
Abertura de embalagens

O pessoal que recebe e desembrulha os recipientes com amostras deve conhecer os riscos potenciais para a sade que isso implica, e deve ser treinado para adoptar medidas de precauo de base (2) especialmente no caso de recipientes partidos ou
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que vertem. Os recipientes de amostras devem ser abertos numa cmara de segurana biolgica. Devem ter-se disposio desinfectantes. Uso de pipetas e meios de pipetar 1. Deve utilizar-se sempre um meio de pipetar. Pipetar com a boca deve ser proibido. 2. Todas as pipetas devem ter um tampo de algodo para reduzir a contaminao dos dispositivos para pipetar 3. Nunca se deve soprar com a pipeta num lquido contendo agentes infecciosos. 4. No misturar materiais infecciosos aspirando e soprando alternadamente atravs de uma pipeta. 5. No soprar na pipeta para expelir os lquidos. 6. Deve dar-se preferncia a pipetas graduadas que no necessitam de expulsar as ltimas gotas. 7. As pipetas contaminadas devem ser imersas num desinfectante apropriado contido num recipiente inquebrvel. Devem car no desinfectante durante o tempo que for indicado antes de serem eliminadas. 8. Um recipiente para as pipetas a eliminar deve ser colocado no interior e no no exterior da cmara de segurana biolgica. 9. No se devem utilizar seringas com agulha hipodrmica para pipetar. 10. Devem utilizar-se dispositivos para abrir frascos com cpsula que permitem a utilizao de pipetas e evitam a utilizao de seringas e agulhas hipodrmicas. 11. Para evitar a disperso de material infeccioso cado de uma pipeta, a rea de trabalho deve ser coberta com um material absorvente que depois deve ser eliminado como resduo infeccioso. Evitar a disperso de materiais infecciosos 1. Para evitar o derrame prematuro do material, as ansas de transferncia microbiolgica devem ter um dimetro de 23 mm e estar completamente fechadas. Os cabos no devem ter mais de 6 cm de comprido para minimizar a vibrao. 2. O risco de projeco de material infeccioso com a chama do bico de Bunsen pode ser evitado utilizando um micro-incinerador elctrico para esterilizar as ansas de transferncia. Devem preferir-se as ansas descartveis que no precisam de ser esterilizadas. 3. Ao secar amostras de saliva, preciso ter cuidado para evitar criar aerossis. 4. Amostras e culturas a esterilizar em autoclave e/ou a eliminar devem ser colocadas em recipientes estanques, por exemplo, sacos de resduos de laboratrio. Antes de colocados em contentores de lixo, devem ser bem fechados (por exemplo, com ta isoladora de autoclave). 5. As zonas de trabalho devem ser descontaminadas com um desinfectante apropriado no m de cada perodo de trabalho. Para mais informaes ver referncia (12).

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12. TCNICAS DE LABORATRIO

Utilizao de cmaras de segurana biolgica 1. A utilizao e limitaes das CSB devem ser explicadas a todos os utilizadores potenciais (ver Captulo 10), referindo-se s normas nacionais e documentao apropriada. O pessoal deve receber protocolos escritos ou manuais sobre proteco ou funcionamento. Em especial, deve ser bem explicado que a cmara no protege o trabalhador de derrame, quebra ou tcnica deciente. 2. A cmara s deve ser utilizada se estiver a funcionar correctamente. 3. O painel de vidro no deve ser aberto quando a cmara estiver em funcionamento. 4. Na cmara deve ter-se o mnimo de aparelhos e materiais para no bloquear a circulao do ar no espao do fundo. 5. Os bicos de Bunsen no devem ser utilizados dentro da cmara. O calor produzido desvia o uxo de ar e pode danicar os ltros. possvel utilizar um microincinerador mas deve dar-se preferncia a ansas de transferncia estreis e descartveis. 6. Todas as operaes devem ser realizadas no centro ou na parte de trs da rea de trabalho e devem ser visveis atravs do painel. 7. A passagem de pessoal por trs do operador deve ser reduzida ao mnimo. 8. O operador no deve perturbar o uxo do ar introduzindo ou retirando os braos da cmara repetidamente. 9. As grelhas de ar no devem ser obstrudas com papis, pipetas ou outro material pois isso interrompe o uxo do ar causando contaminao potencial do material e exposio do operador. 10. Uma vez o trabalho terminado e no m do dia, a superfcie da cmara de segurana biolgica deve ser limpa com um desinfectante apropriado. 11. O ventilador da cmara deve funcionar pelo menos durante 5 minutos antes do incio do trabalho e outros 5 depois do trabalho terminado. 12. Nunca se deve colocar documentos dentro das CSB. Para mais informaes sobre cmaras de segurana biolgica ver o Captulo 10. Evitar a ingesto de material infeccioso e o contacto com a pele e os olhos 1. As partculas e gotculas (>5 m de dimetro) libertadas durante as manipulaes microbiolgicas depositam-se rapidamente nas reas de trabalho e nas mos do operador. Devem utilizar-se luvas descartveis. O pessoal de laboratrio deve evitar tocar na boca, olhos e cara. 2. Alimentos e bebidas no devem ser consumidos nem armazenados no laboratrio. 3. No laboratrio no se deve levar boca nenhum objecto canetas, lpis, goma de mascar. 4. No se deve fazer a maquilhagem no laboratrio. 5. Durante operaes que possam resultar em projeces de materiais potencialmente infecciosos, deve proteger-se a face, olhos e boca.

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MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

Evitar a inoculao de material infeccioso 1. A inoculao acidental devido a ferimento com vidros ou utenslios partidos pode ser evitada com medidas de precauo. Sempre que possvel, os utenslios de vidro devem ser substitudos por utenslios em plstico. 2. Ferimentos com agulhas ou seringas hipodrmicas, pipetas de Pasteur de vidro ou vidro partido, por exemplo, podem causar inoculao acidental. 3. Podem reduzir-se os ferimentos com agulhas: (a) limitando ao mnimo o uso de seringas e agulhas (por exemplo, dispondo de dispositivos simples para abrir frascos com cpsulas de forma a utilizar pipetas em vez de seringas e agulhas); (b) utilizando dispositivos de segurana especiais quando as seringas e agulhas so realmente necessrias. 4. As agulhas nunca devem ser reinseridas nos seus invlucros. Os artigos descartveis devem ser colocados em recipientes especiais imperfurveis, providos de tampa. 5. As pipetas de vidro devem ser substitudas por pipetas Pasteur de plstico. Separao de soro 1. Este trabalho s deve ser realizado por pessoal devidamente formado. 2. Devem utilizar-se luvas e proteco para os olhos e as membranas mucosas. 3. Projeces e aerossis s podem ser evitados ou minimizados com boas tcnicas de laboratrio. O sangue e o soro devem ser pipetados cuidadosamente e no vazados de um recipiente para outro. Pipetar com a boca deve ser proibido. 4. Depois de utilizadas, as pipetas devem ser completamente submergidas num desinfectante apropriado. Devem car no desinfectante durante o tempo que for indicado antes de serem eliminadas ou lavadas e esterilizadas para nova utilizao. 5. Tubos de amostras contendo cogulos de sangue, etc. destinados a ser eliminados devem ser tapados com as suas tampas e colocados em recipientes estanques apropriados para esterilizao em autoclave e/ou incinerao. 6. Desinfectantes adequados devem estar disponveis para limpar salpicos e derrames (ver Captulo 14). Utilizao de centrifugadoras 1. O bom funcionamento mecnico de centrifugadoras de laboratrio um requisito prvio de segurana microbiolgica na sua utilizao. 2. As centrifugadoras devem ser utilizadas segundo as instrues do seu fabricante. 3. As centrifugadoras devem ser colocadas de maneira que os agentes possam ver o interior da cuba para colocar correctamente os recipientes e os copos. 4. Os tubos e recipientes de amostras para centrifugadora devem ser feitos de vidro espesso ou de preferncia de plstico e antes de serem utilizados devem ser inspeccionados para detectar defeitos eventuais. 5. Os tubos e recipientes de amostras devem ser sempre bem tapados (se possvel com rolhas de rosca) para centrifugao.
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12. TCNICAS DE LABORATRIO

6. Os copos devem ser carregados, equilibrados, fechados e abertos em CSB. 7. Os copos e os recipientes devem ser postos aos pares segundo o peso e, uma vez os tubos no lugar, correctamente equilibrados. 8. O espao que deve ser deixado entre o nvel do uido e a borda do tubo de centrifugao deve estar assinalado nas instrues do fabricante. 9. Para equilibrar os copos vazios deve utilizar-se gua destilada ou lcool (propanol a 70%). No se devem utilizar solues salinas nem hipocloretos pois corroem os metais. 10. Para microrganismos dos Grupos de Risco 3 e 4 devem utilizar-se copos de centrifugadora fechados (copos de segurana). 11. Ao utilizar rotores angulares, preciso assegurar-se que os tubos no estejam demasiado cheios pois podem verter. 12. O interior da cuba da centrifugadora deve ser inspeccionado todos os dias para vericar se h manchas ou sujidades a nvel do rotor. Havendo provas de manchas ou sujidade, os protocolos de centrifugao devem ser novamente avaliados. 13. Os rotores e copos da centrifugadora devem ser inspeccionados todos os dias para detectar sinais de corroso e rachas nas. 14. Copos, rotores e cubas das centrifugadoras devem ser descontaminados depois de cada utilizao. 15. Depois de utilizados, os copos devem ser guardados invertidos para secar o lquido que serviu para equilibrar. 16. Quando as centrifugadoras esto a funcionar, pode haver ejeco de partculas infecciosas transportadas pelo ar. Tais partculas deslocam-se a velocidades demasiado grandes para poderem ser retidas pelo uxo de ar da cmara de segurana se a centrifugadora estiver colocada numa cmara de segurana biolgica tradicional de abertura frontal de Classe I ou Classe II. Encerrar as centrifugadoras em cmaras de segurana de Classe III evita a disperso generalizada dos aerossis emitidos. Contudo, uma boa tcnica de centrifugao e tubos cuidadosamente tapados oferece proteco apropriada contra aerossis infecciosos e partculas dispersas. Utilizao de homogeneizadores, batedores, misturadores e geradores de ultra-sons 1. Os homogeneizadores domsticos (de cozinha) no devem ser utilizados em laboratrio pois podem verter ou libertar aerossis. Misturadores e separadores de laboratrio so mais seguros. 2. As tampas e copos ou frascos devem estar em boas condies e sem rachas ou deformaes. As tampas devem vedar bem e as juntas devem estar em boas condies. 3. Durante o funcionamento de homogeneizadores, batedores e geradores de ultra-sons, a presso aumenta no interior dos recipientes, e aerossis contendo material infeccioso podem escapar-se por interstcios entre estes e as tampas.
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Recomendam-se recipientes plsticos, em particular em politetrauoroetileno (PTFE), pois o vidro pode partir-se libertando material infeccioso e ferindo possivelmente o trabalhador. 4. Durante a utilizao, homogeneizadores, batedores e geradores de ultra-sons devem estar cobertos com uma cobertura plstica transparente e robusta que ser desinfectada depois da utilizao. Sempre que possvel, tais mquinas devem ser utilizadas com a sua cobertura numa cmara de segurana biolgica. 5. No m da operao, o recipiente deve ser aberto numa cmara de segurana biolgica. 6. Uma proteco auditiva deve ser fornecida ao pessoal utilizando geradores de ultra-sons. Utilizao de separadores de tecidos 1. Os separadores em vidro devem ser envolvidos em material absorvente e seguros por mos protegidas com luvas. Os separadores plsticos (PTFE) so mais seguros. 2. Os separadores de tecidos devem ser utilizados e abertos numa cmara de segurana biolgica. Manuteno e utilizao de frigorcos e congeladores 1. Frigorcos, congeladores e arcas de dixido de carbono slido (neve carbnica) devem ser descongelados e limpos periodicamente, e ampolas, tubos, etc. quebrados durante a conservao devem ser retirados. Durante a limpeza, deve utilizarse uma proteco facial e luvas de borracha resistentes. Depois da limpeza, devem desinfectar-se as superfcies internas da cmara. 2. Todos os recipientes conservados em frigorcos, etc. devem estar claramente etiquetados com o nome cientco do contedo, a data em que foram colocados no frigorco e o nome da pessoa que o fez. Materiais sem etiqueta e antigos devem ser desinfectados em autoclave e eliminados. 3. Deve manter-se um inventrio do contedo do congelador. 4. No se devem guardar solues inamveis num frigorco excepto se este for prova de exploso. Para este efeito, devem colocar-se avisos nas portas dos mesmos. Abertura de ampolas contendo material infeccioso liolizado preciso ter cuidado quando se abrem ampolas de material liolizado pois, estando o interior da ampola a uma presso inferior, a entrada sbita de ar pode dispersar uma parte do contedo na atmosfera. As ampolas devem ser sempre abertas numa cmara de segurana biolgica. O processo recomendado : 1. Primeiro, desinfectar a superfcie exterior da ampola. 2. Fazer um trao no tubo com uma lima mais ao menos a meio do tampo de algodo ou celulose, se este existir. 3. Segurar a ampola com algodo embebido em lcool para proteger as mos antes de a partir no risco da lima.
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12. TCNICAS DE LABORATRIO

4. Retirar delicadamente a parte superior da ampola e trat-la como material contaminado. 5. Se o tampo de algodo ainda estiver por cima do contedo da ampola, remov-lo com pinas esterilizadas. 6. Juntar lquido para voltar a formar a suspenso tendo o cuidado de o fazer lentamente para evitar a formao de espuma. Armazenagem de ampolas contendo material infeccioso Ampolas contendo material infeccioso nunca devem ser mergulhadas em azoto lquido pois pode haver o risco das que esto rachadas ou mal arrolhadas partirem ou explodirem sada. Sendo necessrio temperaturas muito baixas, as ampolas devem ser conservadas unicamente na fase gasosa acima do azoto lquido. Tambm se pode armazenar material infeccioso em criostato ou neve carbnica. O pessoal de laboratrio deve usar proteco para os olhos e as mos quando retira ampolas assim armazenadas. A superfcie externa das ampolas deve ser desinfectada quando so retiradas da armazenagem. Precaues de base com sangue e outros uidos, tecidos e excrees orgnicos Precaues de base (que incluem precaues universais (19) so destinadas a reduzir o risco de transmisso de microrganismos tanto de fontes de infeco reconhecidas como desconhecidas (2).
Recolha, etiquetagem e transporte de amostras

1. Devem sempre tomar-se as precaues de base (2); usar luvas para todas as manipulaes. 2. A recolha de sangue de pacientes e animais deve ser feita por pessoal com experincia. 3. Para ebotomias, os sistema convencionais de agulha e seringa devem ser substitudos por dispositivos de segurana descartveis (recolha no vcuo) que permitem a recolha de sangue directamente para tubos fechados de transporte e/ou de cultura, inutilizando automaticamente a agulha no m da operao. 4. Os tubos devem ser colocados em recipientes adequados para transporte at ao laboratrio (ver Captulo 15) e dentro do laboratrio (ver neste Captulo a seco sobre transporte de amostras dentro do servio). Os formulrios de pedido devem ser colocados parte em sacos ou envelopes impermeveis. 5. O pessoal que recebe as amostras no deve abrir estes sacos.
Abertura de tubos com amostras e contedos de amostragens

1. Os tubos de amostras devem ser abertos numa cmara de segurana biolgica. 2. O uso de luvas obrigatrio. Tambm se recomenda proteco para olhos e membranas mucosas (culos de proteco ou viseiras).
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MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

3. A roupa de proteco deve ser completada com um avental de plstico. 4. Para evitar projeces, deve pegar-se no tampo com uma folha de papel ou gaze.
Vidro e objectos cortantes

1. Sempre que possvel, o vidro deve ser substitudo por plstico. S deve ser usado vidro resistente (borossilicato), e o material deteriorado ou rachado deve ser eliminado. 2. As agulhas hipodrmicas no devem ser utilizadas como pipetas (ver tambm neste Captulo a seco sobre Evitar a inoculao de material infeccioso).
Esfregaos para microscopia

Fixar e colorir amostras de sangue, expectorao e fezes para microscopia no mata necessariamente todos os organismos ou vrus nos esfregaos. Tais artigos devem ser manipulados com pinas, guardados correctamente e descontaminados e/ou desinfectados em autoclave antes de serem eliminados.
Equipamento automtico (gerador de ultra-sons, misturador de vrtice)

1. O equipamento deve ser de preferncia fechado para evitar projeces de gotculas e aerossis. 2. Os euentes devem ser recolhidos em recipientes fechados para desinfeco em autoclave e/ou eliminao. 3. O equipamento deve ser desinfectado no m de cada sesso, segundo as instrues do fabricante.
Tecidos

1. Deve utilizar-se xadores de formaldedo. 2. Deve evitar-se cortes em congelao. Quando necessrio, o criostato deve ser protegido e o trabalhador deve usar uma viseira. Para descontaminao, a temperatura do instrumento deve subir pelo menos a 20C.
Descontaminao

Para descontaminao recomendam-se os hipocloretos e desinfectantes do melhor nvel. Solues de hipocloretos preparadas no momento devem conter cloro activo a 1g/l quando so destinadas para uso geral e 5g/l quando so utilizadas para limpar sangue derramado. Para descontaminar superfcies pode utilizar-se o glutaraldedo (ver Captulo 14). Precaues a ter com materiais podendo conter pries Os pries (tambm conhecidos como vrus lentos ) esto associados a encefalopatias espongiformes transmissveis (TSE), principalmente a doena de CreutzfeldtJakob (CJD, incluindo a nova variante), sndroma Gerstmann-Strussler-Scheinker, insnia familiar fatal e kuru em seres humanos; scrapie em carneiros e cabras; encefalopatia espongiforme bovina (BSE) em gado bovino; e outras encefalopatias
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12. TCNICAS DE LABORATRIO

transmissveis em veados, alces e martas. Embora a doena de Creutzfeldt-Jakob tenha sido transmitida a humanos, no parece haver casos provados de infeces associadas a laboratrios com quaisquer de tais agentes. Contudo, prudente adoptar certas precaues durante a manipulao de material proveniente de pessoas ou animais infectados ou potencialmente infectados. A escolha de um nvel de segurana biolgica para trabalhar com materiais associados s TSE depender da natureza do agente e das amostras a estudar, e deve ser feita em consulta com as autoridades nacionais. no tecido do sistema nervoso central que se encontram as maiores concentraes de pries. Estudos sobre animais sugerem a probabilidade de tambm se encontrar grandes concentraes de pries no bao, timo, ndulos linfticos e pulmo. Estudos recentes indicam que a presena de pries em tecido muscular da lngua e do esqueleto tambm pode apresentar um risco de infeco potencial (2023). Como inactivar completamente os pries difcil de conseguir, importante privilegiar a utilizao de instrumentos descartveis sempre que possvel, bem como de uma cobertura protectora descartvel para cobrir a superfcie de trabalho da cmara de segurana biolgica. A principal precauo a tomar evitar a ingesto de material contaminado ou a puno da pele do pessoal de laboratrio. Como os agentes no so destrudos pelos processos normais de desinfeco e esterilizao utilizados em laboratrio, devem ser tomadas as seguinte precaues suplementares. 1. A utilizao de equipamento exclusivo, isto , equipamento no compartilhado com outros laboratrios fortemente recomendada. 2. Deve utilizar-se roupa de proteco de laboratrio (bata e avental) e luvas (para patologistas, luvas de malha de ao entre luvas de borracha). 3. A utilizao de artigos de plstico descartveis, que podem ser tratados e eliminados como resduos secos fortemente recomendada. 4. Os processadores de tecidos no devem ser utilizados devido a problemas de desinfeco. Em vez disso, devem utilizar-se frascos e provetas. 5. Todas as manipulaes devem ser realizadas em CSB. 6. Devem tomar-se as maiores precaues para evitar a formao de aerossis, ingesto de produtos e cortes e picadelas na pele. 7. Os tecidos xados ao formol devem ser considerados como ainda infecciosos, mesmo depois de exposio prolongada. 8. Amostras histolgicas contendo pries so largamente inactivadas depois de expostas a cido frmico a 96% durante uma hora (24), (25). 9. Os resduos de trabalho, incluindo luvas, batas e aventais descartveis, devem ser desinfectados em autoclave utilizando um esterilizador a vapor a 134137C durante um nico ciclo de 18 minutos, ou seis ciclos sucessivos de 3 minutos cada, seguido de incinerao. 10. Instrumentos no descartveis, incluindo luvas de malha de ao, devem ser recolhidos para descontaminao.
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11. Resduos lquidos infecciosos contaminados com pries devem ser tratados com hipocloreto de sdio com cloro activo a 20g/l (2%) (concentrao nal) durante 1 hora. 12. A vaporizao com paraformaldedo no diminui os ttulos de pries os quais tambm so resistentes a irradiao por ultravioletas. Contudo, as cmaras devem continuar a ser descontaminadas utilizando os mtodos normais (por exemplo, com gs formaldedo) para inactivar outros agentes que possam estar presentes. 13. CSB e outras superfcies contaminadas por pries podem ser descontaminadas com hipocloreto de sdio contendo cloro activo a 20g/l (2%) durante 1 hora. 14. Filtros de partculas de ar de alta ecincia (HEPA) devem ser incinerados a uma temperatura mnima de 1000C depois de removidos. Outras medidas recomendadas antes da incinerao incluem: a. pulverizar a face exposta do ltro com laca do cabelo antes da sua remoo, b. ensacar os ltros durante a remoo, e c. remover o ltro HEPA da cmara de trabalho para que o plenum (no acessvel) da cmara no seja contaminado. 15. Os instrumentos devem ser mergulhados em hipocloreto de sdio contendo cloro activo a 20g/l (2%) durante 1 hora e depois bem passados por gua antes de serem esterilizados em autoclave. 16. Os instrumentos que no podem ser desinfectados em autoclave podem ser limpos molhando-os repetidamente com hipocloreto de sdio contendo cloro activo a 20g/l (2%) durante 1 hora. necessrio uma lavagem correcta para remover o hipocloreto de sdio residual. Para mais informaes sobre o manuseamento de agentes no convencionais ver referncias (12), (26) e (27).

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13. Planos de emergncia e medidas a tomar

Qualquer laboratrio que trabalhe com microrganismos infecciosos deve estabelecer medidas de segurana apropriadas aos riscos inerentes aos organismos e animais manipulados. Um plano de emergncia escrito para acidentes em laboratrio e instalaes para animais uma necessidade em qualquer servio que trabalhe com ou guarde microrganismos dos Grupos de Risco 3 ou 4 (laboratrio de connamento Nvel 3 de segurana biolgica e laboratrio de connamento mximo Nvel 4 de segurana biolgica). As autoridades sanitrias nacionais e/ou locais devem participar na elaborao do plano de preparao para casos de emergncia. Plano de emergncia O plano deve indicar os procedimentos operacionais: 1. Precaues contra desastres naturais, por exemplo, incndio, inundao, tremor de terra e exploso 2. Avaliao do risco de perigo biolgico 3. Medidas a tomar em caso de exposio acidental e descontaminao 4. Evacuao de emergncia de pessoas e animais presentes nos locais 5. Tratamento mdico de urgncia de pessoas expostas e feridas 6. Vigilncia mdica das pessoas expostas 7. Tratamento clnico das pessoas expostas 8. Investigao epidemiolgica 9. Continuao das operaes depois do acidente. Ao elaborar este plano, prever a incluso dos seguintes pontos: 1. Identicao de organismos de alto risco 2. Localizao de zonas de alto risco, por exemplo, laboratrios, zonas de armazenagem, instalaes para animais 3. Identicao de pessoal e populaes a risco 4. Identicao do pessoal responsvel e suas obrigaes, por exemplo, responsvel da segurana biolgica, pessoal de segurana, autoridade sanitria local, mdicos, microbiologistas, veterinrios, epidemiologistas, bombeiros e polcia 5. Listas de servios de tratamento e isolamento que podem receber pessoas expostas ou infectadas
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6. Transporte de pessoas expostas ou infectadas 7. Listas de fontes de soro imune, vacinas, medicamentos, material e fornecimentos especiais 8. Proviso de material de emergncia, por exemplo, roupa de proteco, desinfectantes, conjuntos para derrames qumicos e biolgicos, material e equipamentos de descontaminao. Medidas de emergncia em laboratrios microbiolgicos
Ferimentos por picadas, cortes e abraso

A pessoa acidentada deve retirar a roupa de proteco, lavar as mos e qualquer outra zona afectada, aplicar um desinfectante cutneo apropriado, e se necessrio consultar um mdico. Deve noticar-se a causa do ferimento e os organismos implicados, e manter registos mdicos correctos e completos.
Ingesto de material potencialmente infeccioso

Tirar a roupa de proteco e consultar um mdico. Identicar e noticar s autoridades o material ingerido e as circunstncias do incidente, e manter registos mdicos correctos e completos.
Formao de aerossis potencialmente infecciosos (fora de uma cmara de segurana biolgica)

Todas as pessoas devem evacuar a rea afectada e as que tenham sido expostas devem ser encaminhadas para um mdico. O supervisor do laboratrio e o responsvel da segurana biolgica devem ser informados imediatamente. Ningum deve entrar na sala durante um espao de tempo apropriado (por exemplo, 1 hora), para permitir a evacuao dos aerossis e o depsito das partculas mais pesadas. Se o laboratrio no tiver um sistema central de exausto do ar, a entrada deve ser retardada, por exemplo, de 24 horas. Devem colocar-se sinais indicando que a entrada proibida. Aps este prazo, a descontaminao deve continuar controlada pelo responsvel da segurana biolgica. Deve utilizar-se roupa de proteco apropriada e proteco respiratria.
Recipientes partidos e substncias infecciosas derramadas

Recipientes partidos contaminados com substncias infecciosas e substncias infecciosas derramadas devem ser cobertos com panos ou papel absorvente. Estes so depois regados com um desinfectante que ca a actuar durante o tempo devido. O pano ou papel e o material partido so ento retirados; os fragmentos de vidro devem ser manipulados com pinas. A rea contaminada deve ento ser esfregada com um desinfectante. Se para retirar o material partido forem utilizados apanhadores, estes devem ser esterilizados em autoclave ou imersos num desinfectante ecaz. Panos, papis e esfreges utilizados para limpar devem ser colocados num recipiente de resduos contaminados. Todas estas aces devem ser efectuadas com luvas.
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13. PLANOS DE EMERGNCIA E MEDIDAS A TOMAR

Se formulrios ou outros documentos impressos ou escritos mo estiverem contaminados, a informao neles contida deve ser copiada e o original deitado para o recipiente de resduos contaminados.
Quebra de tubos contendo material potencialmente infeccioso dentro de centrifugadoras que no tm recipientes estanques

Se ocorrer ou se suspeitar de uma quebra enquanto a mquina est em funcionamento, parar o motor e deixar a mquina fechada durante uns 30 minutos para permitir o depsito do material. Se a quebra for descoberta quando a mquina pra, voltar a fechar a tampa imediatamente e esperar cerca de 30 minutos. Nos dois casos, o responsvel da segurana biolgica deve ser informado. Para todas as operaes seguintes devem utilizar-se luvas resistentes (por exemplo, de borracha espessa), cobertas, se necessrio, com luvas descartveis. Para retirar restos de vidro, devem utilizar-se pinas guarnecidas ou no de algodo. Todos os tubos partidos, fragmentos de vidro, recipientes e o rotor devem ser colocados num desinfectante no-corrosivo cuja eccia contra o organismo implicado conhecida (ver Captulo 14). Os tubos intactos e arrolhados podem ser colocados em desinfectante num recipiente separado e depois recuperados. A cuba da centrifugadora deve ser esfregada com o mesmo desinfectante numa diluio apropriada e esfregada de novo, lavada com gua e seca. Todos os materiais utilizados na limpeza devem ser considerados como resduos infecciosos.
Quebra de tubos encerrados em recipientes de centrifugao fechados (copos de segurana)

Todos os recipientes de centrifugadora fechados devem ser carregados e descarregados numa cmara de segurana biolgica. Se houver suspeita de quebras dentro do recipiente, a tampa de segurana pode ser relaxada e o recipiente esterilizado em autoclave. Como alternativa, o recipiente de segurana pode ser quimicamente desinfectado.
Incndio e desastres naturais

Os servios de socorros em caso de incndio e outros desastres devem participar elaborao de planos de preparao para emergncias. Devem ser informados antecipadamente da localizao das salas que contm materiais potencialmente infecciosos. Ser benco organizar uma visita do pessoal desses servios ao laboratrio para car a conhecer o traado dos locais e seu contedo. Depois de um desastre natural os servios de emergncia locais ou nacionais devem ser prevenidos dos riscos potenciais existentes dentro e/ou perto dos edifcios do laboratrio. S devem entrar nos locais acompanhados de um membro devidamente formado do pessoal. Os materiais infecciosos devem ser recolhidos em caixas estanques ou sacos descartveis resistentes. A equipa de segurana biolgica que deve determinar, com base em regulamentos locais, o que deve ser recuperado ou eliminado.
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Servios de emergncia: quem contactar

Os nmeros de telefone e endereos das pessoas e servios abaixo designados devem estar axados nas instalaes de modo bem visvel: 1. A prpria instituio ou laboratrio (a pessoa que telefona ou o servio que recebe a chamada pode no conhecer bem o endereo e a localizao) 2. O director da instituio ou laboratrio 3. O supervisor do laboratrio 4. O responsvel da segurana biolgica 5. Os servios de incndio 6. Hospitais/servios de ambulncias/pessoal mdico (nomes de postos de sade, departamentos, e/ou pessoal mdico se possvel) 7. Polcia 8. Mdico 9. Tcnico responsvel 10. Os servios de gua, de gs e de electricidade.
Material de emergncia

O material de emergncia seguinte deve estar disponvel: 1. Mala de primeiros socorros incluindo antdotos universais e especiais. 2. Extintores de incndio apropriados, cobertores para fogo. Tambm se sugere o material a seguir, mas que pode variar segundo as circunstncias locais: 1. Roupa de proteco total (fatos especiais de uma s pea, luvas e touca para incidentes implicando microrganismos dos Grupos de Risco 3 e 4) 2. Mscaras respiratrias completas com ltros apropriados para produtos qumicos e partculas 3. Aparelhos de desinfeco das salas, por exemplo, pulverizadores e vaporizadores de formol 4. Macas 5. Utenslios, como martelos, machados, chaves-inglesas, chaves de parafusos, escadotes, cordas 6. Equipamento para marcar e sinalizar a rea de perigo. Para mais informaes ver referncias (12) e (28).

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14. Desinfeco e esterilizao

Para a segurana biolgica do laboratrio crucial um conhecimento bsico de desinfeco e esterilizao. Como os artigos muito contaminados no podem ser desinfectados nem esterilizados prontamente, igualmente importante compreender os fundamentos da limpeza antes da desinfeco (limpeza prvia). A este respeito os seguintes princpios gerais aplicam-se a todas as classes conhecidas de agentes patognicos microbianos, com a excepo notvel dos pries que so examinados separadamente neste captulo. As exigncias especcas de descontaminao dependero do tipo de experincia e da natureza do agente ou agentes infecciosos manipulados. A informao genrica aqui fornecida pode ser utilizada para elaborar tanto procedimentos padres como outros mais especcos para enfrentar riscos biolgicos num dado laboratrio. O tempo de aplicao de desinfectantes especco a cada material e fabricante. Assim, todas as recomendaes para utilizao de desinfectantes devem seguir as especicaes dos fabricantes. Denies Em desinfeco e esterilizao utilizam-se os mais variados termos. Os seguintes esto entre os mais comuns em segurana biolgica: Antimicrobiano Agente que mata microrganismos ou impede o seu desenvolvimento e multiplicao. Anti-sptico Substncia que inibe o crescimento e desenvolvimento de microrganismos sem necessariamente os matar. Anti-spticos so normalmente aplicados sobre superfcies do corpo. Biocida Termo geral para qualquer agente que mata organismos. Germicida qumico Substncia qumica ou mistura de substncias qumicas utilizadas para matar microrganismos. Descontaminao Qualquer processo de remoo e/ou eliminao de microrganismos. O mesmo termo tambm utilizado para remoo ou neutralizao de produtos qumicos perigosos e materiais radioactivos. Desinfectante Substncia qumica ou mistura de substncias qumicas utilizadas para matar microrganismos, mas no necessariamente esporos. Desinfectantes so normalmente aplicados em superfcies ou objectos inanimados.
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Desinfeco Meio fsico ou qumico de matar microrganismos, mas no necessariamente esporos. Esporocida Substncia qumica ou mistura de substncias qumicas utilizadas para matar microrganismos e esporos. Esterilizao Processo que mata e/ou remove todas as classes de microrganismos e esporos. Microbicida Substncia qumica ou mistura de substncias qumicas que matam microrganismos. O termo muitas vezes utilizado em vez de biocida , germicida qumico ou antimicrobiano . Limpar materiais de laboratrio Limpar signica remover o lixo, a matria orgnica e as manchas, e inclui escovar, aspirar, limpar a seco, lavar ou esfregar com gua contendo sabo ou detergente. Lixo, terra e matria orgnica podem servir de proteco a microrganismos e podem interferir com a aco destruidora de produtos de descontaminao (anti-spticos, germicidas qumicos e desinfectantes). Para se conseguir uma desinfeco ou esterilizao correcta, essencial proceder a uma limpeza prvia. Muitos produtos germicidas s so activos em materiais previamente limpos. A limpeza prvia deve ser realizada com cuidado para evitar exposio a agentes infecciosos. Devem utilizar-se materiais quimicamente compatveis com os germicidas a aplicar mais tarde. vulgar utilizar o mesmo germicida qumico para limpeza prvia e desinfeco. Germicidas qumicos H muitos tipos de qumicos que podem ser usados como desinfectantes e/ou anti-spticos. Como existe um nmero e variedade crescente de produtos comerciais, as composies devem ser cuidadosamente escolhidas segundo necessidades especcas. A actividade germicida de muitos produtos qumicos desenvolve-se melhor e mais rapidamente com o aumento da temperatura. Contudo, temperaturas altas podem acelerar a sua evaporao e tambm provocar a sua degradao. Um cuidado especial necessrio para utilizar e armazenar tais produtos qumicos em regies tropicais onde a sua validade pode ser mais curta devido s altas temperaturas ambientais. Muitos germicidas podem ser nocivos para os seres humanos ou para o meio ambiente. Devem ser escolhidos, armazenados, manipulados, utilizados e eliminados com cuidado, respeitando as instrues dos fabricantes. Para proteco pessoal, recomenda-se a utilizao de luvas, aventais e proteces oculares durante a preparao de diluies de germicidas qumicos. Para a limpeza regular de solos, paredes, materiais e mobilirio no se exige geralmente germicidas qumicos. Contudo, o seu uso pode ser apropriado em certos casos de controlo de surtos.
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14. DESINFECO E ESTERILIZAO

Quadro 12. Diluies recomendadas de compostos libertando cloro


SITUAO LIMPA a SITUAO SUJA b

Cloro activo necessrio Soluo de hipocloreto de sdio (5% de cloro activo) Soluo de hipocloreto de clcio (70% de cloro activo) P de dicloroisocianureto de sdio (60% de cloro activo) Comprimidos de dicloroisocianureto de sdio (1,5 g de cloro activo/comprimido) Cloramina (25% de cloro activo)c
a b c

0,1% (1 g/l) 20 ml/l 1,4 g/l 1,7 g/l 1 comprimido/l 20 g/l

0,5% (5 g/l) 100 ml/l 7,0 g/l 8,5 g/l 4 comprimidos/l 20 g/l

Depois do lixo mais importante ter sido removido. Para deitar directamente, por exemplo, sobre o sangue ou antes do lixo mais importante ter sido removido. Ver texto.

A utilizao correcta de germicidas qumicos contribuir para segurana no local de trabalho, reduzindo ao mesmo tempo o risco de agentes infecciosos. Tanto quanto possvel, o nmero de germicidas qumicos a utilizar deve ser limitado por razes econmicas e de controlo de inventrio, e para limitar a poluio ambiental. Descreve-se a seguir classes de germicidas qumicos vulgarmente utilizados, com informaes genricas sobre as suas aplicaes e pers de segurana. Se no houver outras indicaes, as concentraes de germicida so dadas em peso/volume (w/v). O Quadro 12 resume as diluies recomendadas de compostos que libertam cloro. Cloro (hipocloreto de sdio) O cloro, oxidante rpido, um germicida qumico disponvel em toda a parte e de vasto campo de aco. vendido normalmente como lixvia, uma soluo aquosa de hipocloreto de sdio (NaOCI) que pode ser diluda com gua resultando em vrias concentraes de cloro activo. O cloro, especialmente como lixvia, muito alcalino e pode corroer os metais. A sua actividade fortemente reduzida pela matria orgnica (protena). Reservas ou solues de lixvia armazenadas em recipientes abertos, especialmente a altas temperaturas, libertam gs de cloro o que enfraquece o seu potencial germicida. A frequncia com que se devem mudar as solues de lixvia para trabalhar depende da sua concentrao inicial, tipo (por exemplo, com ou sem tampa) e tamanho dos recipientes, frequncia e natureza da utilizao e condies ambientes. De uma maneira geral, as solues destinadas a materiais com altos nveis de matria orgnica vrias vezes ao dia, devem ser mudadas pelo menos diariamente, enquanto as utilizadas com menos frequncia podem chega a durar uma semana.
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Um desinfectante geral deve ter uma concentrao de 1 g/l de cloro activo. Para o caso de derrames que representem riscos biolgicos e na presena de grandes quantidades de matria orgnica recomenda-se uma soluo mais forte contendo 5 g/l de cloro activo. As solues de hipocloreto de sdio, como a lixvia domstica, contm 50 g/l de cloro activo e devem por isso ser diludas a 1 : 50 ou 1 : 10 para obter concentraes nais de 1 g/l e 5 g/l respectivamente. As solues industriais de lixvia tm uma concentrao de hipocloreto de sdio de cerca de 120 g/l e devem ser diludas de maneira a obter os nveis acima indicados. Os grnulos ou comprimidos de hipocloreto de clcio (Ca(CIO)2) contm geralmente cerca de 70% de cloro activo. Assim, solues preparadas com grnulos ou comprimidos, contendo 1,4 g/l e 7,0 g/l, contm respectivamente 1,0 g/l e 5 g/l de cloro activo. A lixvia no aconselhada como anti-sptico mas pode ser utilizada como desinfectante universal e para mergulhar materiais contaminados que no contenham metal. Em casos de emergncia, a lixvia tambm pode ser utilizada para desinfectar a gua de beber, com uma concentrao nal de 12 mg/l de cloro activo. O gs de cloro muito txico e por isso a lixvia deve ser armazenada e utilizada unicamente em reas bem ventiladas. Tambm no deve ser misturada com cidos para evitar a libertao rpida de gs de cloro. Muitos produtos derivados de cloro podem ser nocivos para os humanos e o meio ambiente, e assim deve ser evitado o uso indiscriminado de desinfectantes baseados em cloro, em particular a lixvia. Dicloroisocianureto de sdio O dicloroisocianureto de sdio (NaDCC) sob a forma de p contm 60% de cloro activo. Solues preparadas com p de NaDCC a 1,7 g/l e 8,5 g/l tero 1 g/l ou 5 g/l de cloro activo respectivamente. Os comprimidos de NaDCC contm geralmente o equivalente a 1,5 g/l de cloro activo por comprimido. Um ou quatro comprimidos dissolvidos em 1 l de gua daro as concentraes exigidas de 1 g/l ou 5 g/l de cloro activo respectivamente. NaDCC em p ou comprimidos mais fcil e seguro de armazenar. NaDCC sob a forma slida pode ser aplicado sobre derrames de sangue ou outros lquidos biologicamente perigosos e deixado durante pelo menos 10 minutos antes de removido. A limpeza da rea afectada pode ento ter lugar. Cloraminas As cloraminas existem em p contendo cerca de 25% de cloro activo. Atendendo a que as cloraminas libertam o cloro mais lentamente que os hipocloretos, as concentraes iniciais devem ser superiores para que a eccia seja equivalente dos hipocloretos. Por outro lado, as solues de cloramina no so inactivadas por matria orgnica tanto quanto as solues de hipocloreto, sendo recomendado tanto para situaes limpas como para situaes sujas concentraes de 20 g/l. As solues de cloramina so virtualmente sem odor. Contudo, os artigos imersos nestas solues devem ser muito bem passados por gua corrente para remover
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qualquer resduo da maioria dos agentes adicionados aos ps de cloramina-T (tosilcloramide de sdio). Dixido de cloro O dixido de cloro (CLO2) um germicida potente e de aco rpida, agente desinfectante e oxidante, muitas vezes noticado como activo a nveis de concentrao inferiores aos do cloro ou da lixvia. O gs resultante de dixido de cloro instvel e sofre decomposio em gs de cloro (Cl2), oxignio (O2), produzindo calor. Contudo, o dixido de cloro solvel em gua e estvel numa soluo aquosa. Pode ser obtido de duas maneiras: (1) misturando dois componentes separados, cido hidroclrico (HCI) e cloreto de sdio (NaCIO2); e (2) encomendando a sua forma estabilizada que depois activada no stio quando necessrio. Dos biocidas oxidantes, o dixido de cloro o mais selectivo. O ozono e o cloro so muito mais reactivos do que o dixido de cloro, e sero consumidos pela maior parte dos compostos orgnicos. Contudo, o dixido de cloro s reage com compostos de enxofre reduzidos, aminas secundrias e tercirias, e outros compostos orgnicos muito reduzidos e reactivos. Assim, pode conseguir-se um resduo mais estvel com dixido de cloro a doses muito mais baixas do que utilizando cloro ou ozono. Produzido correctamente, o dixido de cloro pode ser usado mais ecazmente do que ozono ou cloro em casos de maior carga orgnica devido sua selectividade. Formaldedo O formaldedo (HCHO) um gs que mata todos os microrganismos e esporos a temperaturas superiores a 20C. Contudo, no activo contra pries. O formaldedo actua lentamente e necessita de um nvel de humidade relativa de cerca de 70%. comercializado sob a forma de polmero slido, o paraformaldedo, em ocos ou comprimidos, ou como formalina, uma soluo do gs em gua de cerca de 370 g/l (37%) contendo metanol (100 ml/l) como estabilizador. Ambas as formas so aquecidas para libertao do gs que utilizado para descontaminao e desinfeco de espaos fechados tais como cmaras e salas de segurana (ver seco sobre Descontaminao do meio ambiente local neste captulo). O formaldedo (5% de formalina em gua) pode ser utilizado como desinfectante lquido. Suspeita-se que o formaldedo seja cancergeno. um gs perigoso, irritante, com um odor forte e cujos fumos podem irritar os olhos e as membranas mucosas. Assim, deve ser armazenado e utilizado em salas com chamin ou bem ventiladas. Devem respeitar-se os regulamentos nacionais sobre segurana qumica. Glutaraldedo Tal como o formaldedo, o glutaraldedo (OHC(CH2)3CHO) tambm activo contra bactrias vegetativas, esporos, fungos e vrus lipdicos e no lipdicos. no corrosivo e actua mais depressa do que o formaldedo. Contudo, leva vrias horas a matar esporos bacterianos.
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O glutaraldedo geralmente fornecido como uma soluo com uma concentrao de cerca de 20 g/l (2%) e certos produtos podem necessitar, antes da sua utilizao, de ser activados (tornados alcalinos) pela adio de um composto de bicarbonato fornecido com o produto. A soluo activada pode ser reutilizada durante 14 semanas dependendo da frmula e do tipo e frequncia da sua utilizao. As tiras reactivas fornecidas com certos produtos s do uma indicao aproximativa dos nveis de glutaraldedo activo disponvel nas solues utilizadas. Uma vez que se tornam turvas, as solues de glutaraldedo devem ser eliminadas. O glutaraldedo txico e irritante para a pele e membranas mucosas, e deve evitarse o seu contacto. Deve ser utilizado em salas com chamin ou reas bem ventiladas. No recomendado para pulverizaes ou como soluo para descontaminao de superfcies ambientais. Os regulamentos nacionais de segurana qumica devem ser respeitados. Compostos fenlicos Os compostos fenlicos, um vasto grupo de agentes, foram dos primeiros germicidas. Contudo, preocupaes mais recentes sobre segurana restringem a sua utilizao. So activos contra bactrias vegetativas e vrus lipdicos e, na frmula correcta, tambm mostram actividade contra micobactrias. No so activos contra esporos e a sua actividade contra vrus no lipdicos varivel. Muitos produtos fenlicos so utilizados para descontaminao de superfcies ambientais, e alguns deles (por exemplo, triclosan e cloroxilenol) esto entre os anti-spticos mais vulgarmente utilizados. O triclosan corrente em produtos de lavar as mos. activo principalmente contra bactrias vegetativas e incuo para a pele e as membranas mucosas. Contudo, em estudos baseados em laboratrio, bactrias tornadas resistentes a concentraes fracas de triclosan tambm mostraram resistncia a certos tipos de antibiticos. O signicado eventual destes resultados no terreno no conhecido. Certos compostos fenlicos so sensveis a e podem ser inactivados pela dureza da gua e por isso devem ser diludos com gua distilada ou desionizada. No se recomenda a utilizao de compostos fenlicos em superfcies em contacto com alimentos e em reas com crianas pequenas. Podem ser absorvidos pela borracha e tambm podem penetrar na pele. Os regulamentos nacionais de segurana qumica devem ser respeitados. Compostos de amnio quaternrio Muitos tipos de compostos de amnio quaternrio so utilizados como misturas e muitas vezes em combinao com outros germicidas tal como alcois. So bem activos contra certas bactrias vegetativas e vrus lipdicos. Certos tipos (por exemplo, cloreto de benzalkonium) so utilizados como anti-spticos. A actividade germicida de certos tipos de compostos de amnio quaternrio muito reduzida com matria orgnica, dureza da gua e detergentes aninicos. Assim,
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preciso ter cuidado ao escolher agentes para limpeza prvia quando se vai utilizar na desinfeco compostos de amnio quaternrio. Bactrias potencialmente nocivas podem desenvolver-se em solues de compostos de amnio quaternrio. Devido a fraca biodesintegrao estes compostos podem tambm acumular-se no meio ambiente. Alcois O etanol (lcool etlico, C2H5OH) e o 2-propanol (lcool isoproplico, (CH3)2CHOH) tm propriedades desinfectantes similares. So activos contra bactrias vegetativas, fungos e vrus lipdicos mas no contra esporos. A sua aco sobre vrus nolipdicos varivel. Para a maior eccia devem ser utilizados em concentraes prximas de 70% (v/v) em gua: pode acontecer que concentraes mais altas ou mais baixas no tenham um poder germicida to elevado. Uma vantagem importante das solues aquosas de alcois no deixar resduos nos objectos tratados. Misturas com outros agentes so mais ecazes do que unicamente lcool, por exemplo lcool a 70% (v/v) com 100 g/l de formaldedo, e lcool contendo 2 g/l de cloro activo. Uma soluo aquosa a 70% (v/v) de etanol pode ser utilizada sobre a pele, em superfcies de trabalho e CSB, e como banho para pequenas peas de instrumentos cirrgicos. Como o etanol pode secar a pele, muitas vezes misturado com emolientes. Para a descontaminao de mos pouco sujas em situaes onde a lavagem destas inconveniente ou impossvel, recomenda-se esfregar as mos com produtos base de lcool. Contudo, no se deve esquecer que o etanol inecaz contra esporos e pode no matar todos os tipos de vrus no lipdicos. Os alcois so volteis e inamveis e no devem ser utilizados perto de chamas. As solues de trabalho devem ser armazenadas em recipientes apropriados para evitar a evaporao dos alcois. Estes podem endurecer a borracha e dissolvem certos tipos de cola. muito importante que o inventrio e o armazenamento de etanol no laboratrio sejam correctos, para evitar que seja utilizado para outros ns alm de desinfeco. Botijas com solues contendo lcool devem ser claramente etiquetadas para evitar a desinfeco em autoclave. Iodo e iodoforos A aco destes desinfectantes semelhante do cloro, embora possam ser ligeiramente menos restringidos por matria orgnica. O iodo pode manchar tecidos e superfcies ambientais e no geralmente indicado para utilizao como desinfectante. Por outro lado, iodoforos e tinturas de iodo so bons anti-spticos. O polividone de iodo um produto de conana e seguro para lavagem das mos em cirurgia e um anti-sptico pr-operatrio da pele. Anti-spticos base de iodo no esto geralmente indicados para uso em aparelhos mdicos/dentrios. O iodo no deve ser utilizado em alumnio ou cobre. O iodo pode ser txico. Produtos orgnicos base de iodo devem ser armazenados a 410C para evitar o desenvolvimento de bactrias nocivas.
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Perxido de hidrognio e percidos Tal como o cloro, o perxido de hidrognio (H2O2) e os percidos so oxidantes fortes e podem ser potentes germicidas de largo campo de aco. Tambm so mais seguros para o homem e o meio ambiente. O perxido de hidrognio fornecido, quer como soluo a 3% pronta a ser utilizada, quer como soluo aquosa a 30% (gua oxigenada) a diluir 510 vezes o seu volume com gua esterilizada. Contudo, solues a 36% de perxido de hidrognio unicamente so relativamente lentas e limitadas como germicidas. Os produtos agora disponveis tm outros ingredientes para estabilizar o contedo de perxido de hidrognio, acelerar a sua aco germicida e torn-lo menos corrosivo. O perxido de hidrognio pode ser utilizado para descontaminao de bancadas de trabalho em laboratrios e CSB, e solues mais fortes podem estar indicadas para desinfectar aparelhos mdicos/dentrios sensveis ao calor. A utilizao de perxido de hidrognio ou cido peractico (CH3COOOH) em vaporizao para descontaminar aparelhos mdicos/dentrios sensveis ao calor exige equipamento especializado. Perxido de hidrognio e percidos podem ser corrosivos sobre metais tais como alumnio, cobre, lato e zinco, e tambm podem descolorar tecidos, cabelos, pele e membranas mucosas. Artigos tratados com estes produtos devem ser muito bem passados por gua antes de contacto com olhos e membranas mucosas. Devem ser sempre armazenados longe de fontes de calor e protegidos da luz. Descontaminao do meio ambiente local A descontaminao do ar, mobilirio e equipamento de laboratrio exige uma combinao de desinfectantes lquidos e gasosos. Para superfcies pode utilizar-se uma soluo de hipocloreto de sdio (NaOCI); uma soluo contendo 1 g/l de cloro activo pode estar indicada para a salubridade geral do meio ambiente, mas recomendam-se solues mais fortes (5 g/l) para situaes de grande risco. Para descontaminao do meio ambiente, solues contendo 3% de perxido de hidrognio (H2O2) so substitutos apropriados de solues de lixvia. As salas e o equipamento podem ser descontaminados por meio de fumigao com gs de formaldedo, quer aquecendo paraformaldedo, quer fervendo formol. Isto so processos muito perigosos que exigem pessoal especialmente treinado. Todas as aberturas da sala (janelas, portas, etc.) devem ser hermeticamente fechadas com ta colante ou outro meio semelhante antes de principiar a produo de gs. A fumigao deve ser realizada a uma temperatura ambiente de pelo menos 21C e uma humidade relativa de 70%. (Ver tambm a seco sobre Descontaminao de CSB neste captulo). Depois da fumigao, a sala deve ser muito bem ventilada antes que seja permitida a entrada de pessoal. Qualquer pessoa que entre na sala antes desta ventilada deve usar mscara respiratria apropriada. Para neutralizar o formaldedo pode utilizar-se bicarbonato de amnio gasoso. A fumigao de espaos mais pequenos com vapor de perxido de hidrognio tambm ecaz mas necessita de equipamento especializado para gerar o vapor.
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Descontaminao de cmaras de segurana biolgica Para descontaminar cmaras de Classe I e Classe II existe equipamento que, de maneira independente, gera, circula e neutraliza o gs de formaldedo. Como alternativa, a quantidade apropriada de paraformaldedo (concentrao nal de 0,8% de paraformaldedo no ar) pode ser colocada numa vasilha e posta a aquecer numa placa elctrica. Outra vasilha contendo 10% mais de bicarbonato de amnio do que paraformaldedo tambm colocada dentro da cmara numa segunda placa. As placas elctricas so ligadas corrente elctrica fora da cmara para que a operao possa ser controlada do exterior, ligando e desligando as placas elctricas segundo as necessidades. Se a humidade relativa inferior a 70%, deve colocar-se dentro da cmara um recipiente aberto com gua quente, antes do painel frontal ser selado com ta forte (por exemplo, ta de canalizao). A abertura frontal e a sada do exaustor devem ser tapadas com uma folha de plstico muito resistente para impedir a sada do gs. As entradas de os elctricos no painel frontal tambm devem ser seladas com ta de canalizao. Liga-se a placa elctrica da vasilha de paraformaldedo e desliga-se quando tudo se tiver evaporado. Durante pelo menos 6 horas no se mexe na cmara. Liga-se ento a placa elctrica da segunda vasilha, deixando-se evaporar todo o bicarbonato de amnio. Depois desliga-se a placa e liga-se o ventilador da cmara durante dois curtos perodos de 2 segundos cada para permitir a circulao do gs de bicarbonato de amnio. No se mexe na cmara durante 30 minutos antes de remover as proteces do painel frontal e da sada do exaustor. As superfcies da cmara devem ser limpas para remover resduos antes de ser utilizada. Lavagem/descontaminao das mos Sempre que possvel, devem utilizar-se luvas apropriadas para manipular materiais apresentando riscos biolgicos. Contudo, isto no elimina a necessidade do pessoal de laboratrio lavar as mos regularmente e correctamente. As mos devem ser lavadas depois de trabalhar com materiais apresentando riscos biolgicos, animais e antes de sair do laboratrio. Na maioria dos casos, lavar bem as mos com gua e sabo suciente para as descontaminar, mas em situaes de grande risco recomenda-se a utilizao de sabes germicidas. As mos devem ser completamente cobertas de espuma de sabo e esfregadas durante pelo menos 10 segundos, passadas por gua limpa e secas utilizando um papel ou toalha limpos (no caso de existirem, deve utilizar-se secadores de mos a ar quente). Recomenda-se torneiras accionadas com o p ou cotovelo. No havendo, deve utilizar-se papel/toalha para fechar a torneira com o m de evitar voltar a contaminar as mos lavadas. Tal como j mencionado, podem esfregar-se as mos com produtos base de lcool se estas esto ligeiramente sujas e no se dispe de meios apropriados para as lavar.
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Desinfeco e esterilizao pelo calor O calor o agente fsico mais vulgarmente utilizado para a descontaminao de agentes patognicos. O calor seco , que totalmente no corrosivo, utilizado para tratar muitos objectos de laboratrio que podem suportar temperaturas de 160C ou superiores durante 24 horas. Combusto ou incinerao (ver mais adiante) tambm uma forma de calor seco. O calor hmido muito ecaz quando utilizado em autoclave. A fervura no mata necessariamente todos os microrganismos e/ou agentes patognicos, mas pode ser utilizada como tratamento mnimo para desinfeco quando outros mtodos (desinfeco qumica ou descontaminao, desinfeco em autoclave) no forem aplicveis ou no estiverem disponveis. Os artigos esterilizados devem ser manuseados e armazenados de forma a no se contaminarem at serem utilizados de novo.
Esterilizao em autoclave

A esterilizao por vapor saturado sob presso (autoclave) o meio mais ecaz e seguro de esterilizar materiais de laboratrio. Na maior parte dos casos, os ciclos a seguir indicados asseguraro a esterilizao de materiais correctamente carregados em autoclave: 1. Durante 3 minutos a 134C 2. Durante 10 minutos a 126C 3. Durante 15 minutos a 121C 4. Durante 25 minutos a 115C. Exemplos de diversas autoclaves: Autoclaves de deslocao da gravidade (a vapor directo). A Ilustrao 10 mostra o plano geral de uma autoclave de deslocao de gravidade. O vapor entra na cmara sob presso e desloca o ar mais pesado para baixo atravs da vlvula no dreno da cmara equipado com um ltro HEPA. Autoclaves de pr-vacuum. Estas mquinas permitem a extraco do ar da cmara antes da entrada do vapor. O ar extrado evacuado atravs de uma vlvula equipada com um ltro HEPA. No m do ciclo, o vapor automaticamente extrado. Estas autoclaves podem funcionar a 134C e por isso o ciclo de esterilizao pode ser reduzido a 3 minutos. So ideais para artigos porosos, mas no podem ser utilizadas para lquidos devido ao vcuo. Autoclaves do tipo panela de presso por aquecimento exterior. Estas autoclaves s devem ser utilizadas se no houver disponibilidade de autoclaves de deslocao de gravidade. So carregadas por cima e aquecidas a gs, electricidade ou outro tipo de combustvel. O vapor obtido aquecendo a gua contida na base do aparelho, e o ar deslocado para cima atravs de um tubo de escape. Uma vez todo o ar removido, a vlvula do

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Ilustrao 10. Autoclave de deslocao da gravidade

tubo de escape fechada e o calor reduzido. A presso e a temperatura aumentam at que a vlvula de segurana comece a funcionar a um nvel pr-estabelecido. a partir deste momento que se conta o tempo de espera. No m do ciclo, desliga-se a fonte de calor e deixa-se a temperatura descer para 80C ou menos, antes de abrir a tampa.
Carregamento de autoclaves

Os materiais a esterilizar no devem car muito juntos uns aos outros para facilitar a circulao do vapor e a remoo do ar. Os sacos devem estar abertos para que o vapor possa atingir o seu contedo.
Precaues na utilizao de autoclaves

As regras apresentadas a seguir podem minimizar os perigos inerentes utilizao de aparelhos sob presso. 1. A responsabilidade pela utilizao e cuidados de rotina deve ser atribuda a pessoal devidamente formado. 2. Um programa de manuteno preventiva deve incluir inspeco regular, por pessoal qualicado, da cmara, juntas da porta e todas as vlvulas e instrumentos de controlo.
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3. O vapor deve estar saturado e sem produtos qumicos (por exemplo, inibidores de corroso) que possam contaminar os materiais a esterilizar. 4. Todos os materiais a esterilizar em autoclave devem estar dispostos em recipientes que permitam rpida remoo do ar e boa penetrao do calor; a cmara no deve car demasiado carregada para que o vapor atinja bem toda a carga. 5. Se a autoclave no tiver um dispositivo de segurana que impea a abertura da porta quando a cmara est sob presso, preciso que a principal vlvula de vapor esteja fechada e que a temperatura baixe para menos de 80C antes de abrir a porta. 6. necessrio utilizar um processo de evacuao lenta para esterilizar lquidos em autoclave pois estes podem transbordar ao ser retirados devido ao superaquecimento. 7. Os utilizadores da autoclave devem utilizar luvas e viseiras apropriadas como proteco para abrir a autoclave, mesmo quando a temperatura baixa para menos de 80C. 8. Em qualquer controlo de rotina do funcionamento da autoclave, devem colocarse no centro de cada carga indicadores biolgicos ou termopares. fortemente aconselhado o controlo regular com termopares e dispositivos de registo numa situao de pior carga possvel para determinar ciclos de funcionamento correctos. 9. O ltro de esvaziamento da cmara (se existir) deve ser tirado e limpo todos os dias. 10. Deve ter-se o cuidado de assegurar que as vlvulas de escape de autoclaves tipo panela de presso no cam obstrudas com papis, etc. contidos na carga. Incinerao A incinerao til para eliminar carcassas de animais assim como outros resduos de laboratrio, com ou sem descontaminao prvia (ver Captulo 3). A incinerao de materiais infecciosos s uma alternativa a esterilizao em autoclave se o incinerador estiver sob controlo laboratorial. Uma incinerao correcta exige meios ecientes de controlo da temperatura e uma cmara de combusto secundria. Muitos incineradores, especialmente os que tm uma nica cmara de combusto, so inadequados para tratar materiais infecciosos, carcassas de animais e plsticos. A destruio de tais materiais pode no ser completa e o euente que sai da chamin pode poluir a atmosfera com microrganismos, produtos qumicos txicos e fumos. Contudo, existem muitas conguraes satisfatrias para cmaras de combusto. O ideal que a temperatura na cmara primria seja pelo menos de 800C e na segunda pelo menos de 1000C. Mesmo se previamente descontaminados, os materiais para incinerao devem ser transportados para o incinerador em sacos, de preferncia de plstico. O pessoal encarregado do funcionamento do incinerador deve receber instrues apropriadas sobre o carregamento e o controlo da temperatura. Tambm preciso notar que o
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funcionamento eciente de um incinerador depende imenso da mistura correcta de materiais nos resduos a tratar. H actualmente uma certa inquietude sobre os possveis efeitos negativos para o meio ambiente dos incineradores existentes ou em estudo, prosseguindo assim os esforos para produzir incineradores mais incuos e mais ecientes em relao energia. Eliminao A eliminao de resduos mdicos e de laboratrio regida por vrios regulamentos regionais, nacionais e internacionais, cujas verses mais recentes devem ser consultadas antes de elaborar e implementar um programa de manuseamento, transporte e eliminao de resduos apresentando riscos biolgicos. Em geral, cinzas resultantes de incinerao podem ser tratadas como resduos domsticos normais e removidas pelas autoridades locais. Os resduos de autoclaves podem ser eliminados num centro de incinerao exterior ou em aterros sanitrios autorizados (ver Captulo 3). Para mais informaes ver referncias (13) e (2939).

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15. Introduo ao transporte de substncias infecciosas

O transporte de materiais infecciosos e potencialmente infecciosos est sujeito a severa regulamentao nacional e internacional. Tal regulamentao descreve a utilizao apropriada de materiais de acondicionamento, assim como outros requisitos de expedio. O pessoal de laboratrio deve expedir as substncias infecciosas segundo os regulamentos aplicveis a transporte. A observncia destes regulamentos: 1. Reduz a probabilidade das embalagens sofrerem danos e deixarem escapar algum contedo, o que leva a uma 2. Reduo de exposies que resultem em infeces possveis e 3. Melhor ecincia no transporte de embalagens. Regulamentos internacionais sobre transportes Os regulamentos sobre o transporte de materiais infecciosos (qualquer modo de transporte) baseiam-se nos Regulamentos Modelo das Naes Unidas sobre Transporte de Mercadorias Perigosas (40). Estas recomendaes so elaboradas pela Comisso de Especialistas das Naes Unidas sobre o Transporte de Mercadorias Perigosas (UNCETDG). Para que se tornem legalmente obrigatrios, os Regulamentos Modelo das Naes Unidas devem ser introduzidos nos regulamentos nacionais e regulamentos modais internacionais pelas autoridades competentes (por exemplo, as Instrues Tcnicas para o Transporte Seguro de Mercadorias Perigosas por Via Area (41) da Organizao da Aviao Civil Internacional (OACI) para o transporte areo e o Acordo Europeu sobre o Transporte Internacional de Mercadorias Perigosas por via Terrestre (ADR) (42)). A Associao do Transporte Areo Internacional (IATA) publica todos os anos Directivas sobre Expedio de Substncias Infecciosas (43). As directivas da IATA devem conformar-se com as Instrues Tcnicas da OACI, como padro mnimo, mas podem impor outras restries. As directivas da IATA so aplicveis se a expedio for feita por um dos seus membros. Dado que os Regulamentos Modelo das Naes Unidas sobre Transporte de Mercadorias Perigosas so um conjunto dinmico de recomendaes sujeitas a recticaes bienais, necessrio consultar as ltimas emisses de regulamentos modais nacionais e internacionais para encontrar os textos reguladores aplicveis.
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15. INTRODUO AO TRANSPORTE DE SUBSTNCIAS INFECCIOSAS

A OMS tem um papel consultivo junto da UNCETDG. Na 13a edio (2003) dos Regulamentos Modelo das Naes Unidas (40) foram introduzidas alteraes importantes em relao ao transporte de substncias infecciosas. Orientao sobre o contexto das correces adoptadas pode ser obtida junto da OMS (44). Os regulamentos modais internacionais no so destinados a suplantar requisitos locais ou nacionais. Contudo, em situaes onde no existam requisitos nacionais, devem seguir-se os regulamentos modais internacionais. importante notar que o transporte internacional de substncias infecciosas est tambm dependente e sujeito aos regulamentos nacionais de importao/exportao. O sistema bsico de embalagem tripla Na Ilustrao 13 d-se um exemplo do sistema de embalagem tripla que o mtodo escolhido para o transporte de substncias infecciosas e potencialmente infecciosas. Este sistema composto por trs elementos: o primeiro receptculo, a embalagem secundria e a embalagem exterior. O primeiro receptculo contendo a amostra deve ser estanque e estar correctamente etiquetado de acordo com o contedo. Este receptculo embalado em material absorvente suciente para absorver todo o lquido em caso de quebra ou derrame. Para embrulhar e proteger o primeiro receptculo ou receptculos utiliza-se outra embalagem estanque. Nesta embalagem secundria podem colocar-se vrios primeiros receptculos embrulhados. Certos textos reguladores indicam os limites de volume e/ou peso para embalagens de substncias infecciosas. A terceira embalagem protege a segunda contra danos durante o transporte. Dados, cartas e outros tipos de informaes identicando ou descrevendo a amostra e que identicam o expedidor e o destinatrio, assim como qualquer outro documento exigido, tambm devem ser fornecidos de acordo com os regulamentos mais recentes. Os Regulamentos Modelo das Naes Unidas determinam o uso de dois sistemas diferentes de embalagem tripla. O sistema bsico de embalagem tripla aplica-se ao transporte de vrias substncias infecciosas; contudo, organismos de alto risco devem ser expedidos de acordo com exigncias mais rigorosas. Para mais detalhes sobre a utilizao de diferentes embalagens segundo os materiais a transportar, aconselhvel consultar os regulamentos nacionais e/ou internacionais para acesso aos textos reguladores aplicveis. Processo de limpeza de derrames No caso de derrame de material infeccioso ou potencialmente infeccioso, deve utilizar-se o seguinte processo de limpeza: 1. Utilizar luvas e vesturio protector, incluindo, se necessrio, proteco para a face e os olhos. 2. Para no deixar espalhar, cobrir o derrame com toalhas de papel ou de pano.

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MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

Embalagem e etiquetagem de substncias infecciosas de Categoria A


Tampa Material absorvente Registo da amostra (incluindo lista do contedo) Embalagem exterior Etiqueta indicando a orientao da amostra (no obrigatria se o primeiro receptculo no exceder 50 ml) Especificao das NU

Primeiro receptculo p (tubo dede ensaio) (tubo ensaio) g Embalagem secundria (estanque) (estanque)

Embalagem e etiquetagem de substncias infecciosas de Categoria B


Primeiro receptculo Primeiro receptculo (estanque) (estanque) (estanque) Recipiente tipo porta-tubos Recipiente tipo porta-tubos (styrofoam ouou esponja) (styrofoam ou esponja) (styrofoam esponja) Material dede Material de Material embalagem embalagem absorvente absorvente absorvente Lista do contedo Lista do contedo Lista do contedo (registo da amostra) (registo da amostra)

Tampa Tampa impermevel

Embalagem Embalagem secundria secundria (estanque) (estanque) (estanque)

Embalagem Embalagem exterior rgida Designao da expedio expedio Marca da Marca da embalagem embalagem embalagem

Etiquetas Etiquetas destinatrio/expedidor destinatrio/expedidor

Ilustrao 11. Exemplos de sistemas bsicos de embalagem tripla (grcos gentilmente fornecidos por CUH2A, Princeton, NJ, EUA)

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15. INTRODUO AO TRANSPORTE DE SUBSTNCIAS INFECCIOSAS

3. Deitar um desinfectante apropriado sobre as toalhas de papel e a rea imediatamente circundante (geralmente, esto indicadas solues de lixvia a 5%; mas para derrames em aeronaves devem utilizar-se desinfectantes de amnio quaternrio). 4. Aplicar o desinfectante de uma forma concntrica, principiando pelo exterior da rea do derrame e avanando para o centro. 5. Depois do perodo de tempo apropriado (por exemplo, 30 minutos), retirar os materiais. No caso de haver vidro partido ou outros objectos cortantes, utilizar um apanhador ou um pedao de carto rgido para recolher o material e coloclo num recipiente resistente para eliminao. 6. Limpar e desinfectar a rea do derrame (se necessrio, repetir os passos 25). 7. Descartar os materiais contaminados para um recipiente estanque e imperfurvel de eliminao de resduos. 8. Uma vez terminada a desinfeco, informar as autoridades competentes de que o stio foi descontaminado.

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PARTE V

Introduo a biotecnologias

16. Segurana biolgica e tecnologia de recombinao de ADN


A tecnologia de recombinao de ADN implica combinar material gentico de diferentes fontes criando assim organismos geneticamente modicados (OGM) que podem nunca ter existido antes. Inicialmente, os biologistas moleculares preocuparam-se com a possibilidade de tais organismos terem propriedades imprevisveis e indesejveis podendo, no caso de escaparem do laboratrio, representar um risco biolgico. Tal preocupao foi o centro de uma conferncia cientca realizada em Asilomar, CA, EUA em 1975 (45), durante a qual foram discutidas questes de segurana e propostas as primeiras directivas para a tecnologia de recombinao de ADN. Os 25 anos seguintes de investigao experimental demonstraram que a engenharia gentica pode ser realizada de maneira segura quando se faz uma avaliao apropriada do risco e se tomam medidas de segurana adequadas. A tecnologia de recombinao de ADN ou engenharia gentica foi utilizada pela primeira vez para clonar segmentos de ADN em hospedeiros bacterianos a m de pr em relevo produtos de genes especcos para estudos mais aprofundados. Molculas de tecnologia de recombinao de ADN tambm tm sido utilizadas para criar OGM tais como animais transgnicos e knock-out (animais em que certos genes so inactivados ou suprimidos) e plantas transgnicas. A tecnologia de recombinao de ADN j teve um enorme impacto na biologia e na medicina, e provavelmente ter uma inuncia ainda maior agora que a sequncia nucletida de todo o genoma humano est disponvel. Dezenas de milhares de genes de funes ainda no conhecidas sero estudados utilizando tal tecnologia. A terapia gentica poder tornar-se um tratamento de rotina para certas doenas, e provvel que utilizando a engenharia gentica se possam inventar novos vectores para transferncia de genes. Plantas transgnicas produzidas por tecnologia de recombinao de ADN tambm podem desempenhar um papel cada vez mais importante na agricultura moderna. Experincias implicando a criao ou utilizao de OGM devem ser realizadas depois de uma avaliao do risco de segurana biolgica. As propriedades patognicas e quaisquer riscos associados a tais organismos podem ser inusitados e no estar bem caracterizados. As propriedades do organismo doador, a natureza das sequncias ADN que sero transferidas, as propriedades do organismo receptor, e as propriedades do ambiente devem ser avaliadas. Estes factores devem ajudar a determinar o nvel de segurana biolgica exigido para a manipulao segura do OGM
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MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

resultante, e a identicar os sistemas de connamento biolgico e fsico que devem ser utilizados. Consideraes de segurana biolgica para sistemas de expresso biolgica Os sistemas de expresso biolgica consistem em vectores e clulas hospedeiras. Para que a sua utilizao seja ecaz e segura preciso que um certo nmero de critrios sejam respeitados. Um exemplo de um tal sistema de expresso biolgica o plasmdeo pUC18. A sequncia do plasmdeo pUC18, frequentemente utilizado como um vector de clonagem em combinao com clulas K12 de Escherichia coli, foi inteiramente estabelecida. Todos os genes necessrios para expresso em outras bactrias foram removidos do seu precursor o plasmdeo pBR322. A E. coli K12 uma estirpe no patognica que no pode colonizar permanentemente os intestinos de seres humanos ou animais saudveis. Experincias de rotina de engenharia gentica podem ser realizadas com segurana em E. coli K12/pUC18 ao Nvel 1 de segurana biolgica, desde que os produtos de expresso de ADN estranha introduzida no exijam nveis superiores de segurana biolgica. Consideraes de segurana biolgica para vectores de expresso Pode haver necessidade de nveis de seguranca biolgica superiores quando: 1. A expresso de sequncias de ADN derivadas de organismos patognicos pode aumentar a virulncia do OGM 2. As sequncias de ADN introduzidas no esto bem caracterizadas, por exemplo durante a preparao de bibliotecas de ADN de genomas de microrganismos patognicos 3. Produtos de genes podem ter actividade farmacolgica 4. Produtos genticos codicam por toxinas. Vectores virais para transferncia de genes Para transferir genes para outras clulas utilizam-se vectores virais, por exemplo, vectores adenovrus. Tais vectores no tm certos genes de replicao de vrus e so propagados em linhas celulares que complementam a falha. Reservas de tais vectores podem ser contaminadas com vrus capazes de replicao, gerados por acontecimentos raros de recombinao espontnea nas linhas celulares de propagao, ou que possam derivar de uma puricao insuciente. Tais vectores devem ser manipulados ao mesmo nvel de segurana biolgica que os adenovrus dos quais derivam. Animais transgnicos e knock-out Os animais portadores de material gentico estrangeiro (animais transgnicos) devem ser manipulados a nveis de connamento apropriados s caractersticas dos produtos dos genes estrangeiros. Animais a quem foram suprimidos determinados genes

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16. SEGURANA BIOLGICA E TECNOLOGIA DE RECOMBINAO DE ADN

especcos (animais knock-out ) no apresentam geralmente riscos biolgicos particulares. Exemplos de animais transgnicos incluem animais que apresentam receptores de vrus normalmente incapazes de infectar tais espcies. Se tais animais escaparem dum laboratrio e transmitirem o gene transgnico aos seus congneres selvagens, teoricamente possvel que se constitua no seio de tal populao animal um reservatrio para esse dado vrus. Esta possibilidade tem sido discutida em relao a poliovrus e especialmente pertinente no contexto da erradicao da poliomielite. Ratos transgnicos que apresentavam o receptor do poliovrus humano gerados em diferentes laboratrios eram susceptveis a infeco por poliovrus por vrias vias de inoculao e a doena resultante era do ponto de vista clnico e histopatolgico semelhante poliomielite humana. Contudo, o rato difere do ser humano na medida em que a replicao no trato digestivo de poliovrus administrados por via oral ineciente ou no tem lugar. Assim, muito pouco provvel que a fuga de tais ratos transgnicos para a natureza possa resultar no estabelecimento de um novo reservatrio animal de poliovrus. Contudo, este exemplo indica que, para cada nova linha de animais transgnicos, devem realizar-se estudos detalhados para determinar as vias de infeco dos animais, a quantidade do material inoculado necessrio para provocar infeco, e a amplitude da propagao do vrus pelos animais infectados. Alm disso, devem tomar-se todas as medidas para assegurar o connamento rigoroso de ratos transgnicos receptores. Plantas transgnicas Plantas transgnicas exprimindo genes que conferem tolerncia a herbicidas ou resistncia a insectos geram actualmente uma grande controvrsia em muitas partes do mundo. As discusses concentram-se sobre a inocuidade alimentar de tais plantas, e as consequncias ecolgicas a longo prazo do seu cultivo. Plantas transgnicas exprimindo genes de origem animal ou humana so utilizadas para desenvolver produtos medicinais e nutricionais. Uma avaliao do risco deve determinar o nvel adequado de segurana biolgica para a produo de tais plantas. Avaliaes de risco para organismos geneticamente modicados As avaliaes de risco para trabalhar com OGM devem entrar em linha de conta com as caractersticas dos organismos doadores e dos receptores/hospedeiros. Exemplos de caractersticas a considerar incluem os seguintes.
Riscos directamente resultantes do gene introduzido (organismo doador)

Em situaes em que o produto do gene introduzido tem propriedades biolgicas ou farmacolgicas activas conhecidas podendo originar perigo necessrio uma avaliao, por exemplo: 1. Toxinas 2. Citocinas
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MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

3. Hormonas 4. Reguladores de expresso de genes 5. Factores ou reforadores de virulncia 6. Sequncias de genes oncognicos 7. Resistncia a antibiticos 8. Alrgenos. A considerao de tais casos deve incluir uma estimativa do nvel de expresso necessrio para atingir actividade biolgica ou farmacolgica.
Riscos associados ao receptor/hospedeiro

1. Susceptibilidade do hospedeiro 2. Patogenicidade da estirpe hospedeira, incluindo virulncia, infectividade e produo de toxinas 3. Modicao da gama de hospedeiros 4. Estado de imunidade do recipiente 5. Consequncias da exposio.
Riscos resultantes da alterao das caractersticas patognicas existentes

Muitas modicaes no implicam genes cujos produtos so inerentemente perigosos, mas podem surgir efeitos secundrios devido a alterao de caractersticas patognicas ou no patognicas existentes. A modicao dos genes normais pode alterar a patogenicidade. Numa tentativa para identicar estes riscos potenciais, podem ser considerados os seguintes pontos (a lista no exaustiva). 1. H um aumento da infectividade ou patogenicidade? 2. Uma qualquer mutao incapacitante no recipiente pode ser superada como resultado da insero do gene estrangeiro? 3. O gene estrangeiro codica uma determinante de patogenicidade de outro organismo? 4. Se a ADN estrangeira inclui uma determinante de patogenicidade, de prever que este gene possa contribuir para a patogenicidade do OGM? 5. H disponibilidade de tratamento? 6. A susceptibilidade dos OGM a antibiticos ou outra forma de terapia ser afectada como consequncia da modicao gentica? 7. A erradicao dos OGM possvel? Outras consideraes A utilizao de animais ou plantas na sua integridade para ns de experimentao tambm exige uma anlise cuidadosa. Os investigadores devem acatar os regulamentos, restries e exigncias para a realizao de trabalhos com OGM nos pases e instituies que os acolhem.

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16. SEGURANA BIOLGICA E TECNOLOGIA DE RECOMBINAO DE ADN

Os pases podem ter autoridades nacionais que estabelecem directivas para trabalhar com OGM, e podem ajudar os cientistas a classicar o seu trabalho ao nvel apropriado de segurana biolgica. Em certos casos, a classicao pode divergir entre pases, ou o pas pode decidir classicar o trabalho a um nvel inferior ou superior quando surgem novas informaes sobre um sistema determinado de vector/ hospedeiro. A avaliao de riscos um processo dinmico que toma em considerao novos desenvolvimentos e o progresso da cincia. A realizao de avaliaes de risco correctas assegurar que os benefcios da tecnologia de recombinao de ADN continuaro disposio da humanidade nos anos futuros. Para mais informaes ver referncias (17) e (4648).

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PARTE VI

Segurana em relao a produtos qumicos, incndio e electricidade

17. Produtos qumicos perigosos

O pessoal de laboratrios de microbiologia est no s exposto a microrganismos patognicos como a produtos qumicos perigosos. Assim, importante que conhea bem os efeitos txicos de tais produtos, as vias de exposio e os riscos que possam estar associados sua manipulao e armazenagem (ver Anexo 5). Os fabricantes e/ou fornecedores de produtos qumicos fornecem folhas de dados sobre a segurana do material ou outras informaes sobre riscos qumicos. Tais folhas devem estar disponveis em laboratrios onde estes produtos qumicos so utilizados, por exemplo, como parte de um manual de segurana ou de operaes. Vias de exposio A exposio a produtos qumicos pode ocorrer por: 1. Inalao 2. Contacto 3. Ingesto 4. Picadas de agulhas 5. Cortes na pele. Armazenagem de produtos qumicos No laboratrio s devem ser armazenadas as quantidades de produtos qumicos necessrias para uso dirio. Os stocks devem ser armazenados em salas ou edifcios especialmente destinados para tal m. Os produtos qumicos no devem ser armazenados em ordem alfabtica. Regras gerais relativas a incompatibilidades qumicas Para evitar incndios e/ou exploses, as substncias mencionadas na coluna da esquerda do Quadro 13 devem ser armazenadas e manipuladas de maneira a no entrarem em contacto com as substncias da coluna da direita. Efeitos txicos dos produtos qumicos Certos produtos qumicos so nocivos para a sade das pessoas que os manipulam ou que inalam os seus vapores. Alm dos venenos notrios, um certo nmero de produtos qumicos so conhecidos como tendo vrios efeitos txicos. O sistema respiratrio,
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Quadro 13. Regras gerais sobre incompatibilidades qumicas


CATEGORIA DA SUBSTNCIA SUBSTNCIAS INCOMPATVEIS

Metais alcalinos como sdio, potssio, csio e ltio Halogneos cido actico, sulto de hidrognio, anilina, hidrocarbonetos, cido sulfrico

Dixido de carbono, hidrocarbonetos clorados, gua Amonaco, acetileno, hidrocarbonetos Agentes oxidantes como cido crmico, cido ntrico, peroxidos, permanganatos

o sangue, os pulmes, o fgado, os rins e o sistema gastrintestinal, assim como outros rgos e tecidos, podem ser afectados ou gravemente danicados. Certos produtos qumicos tm propriedades cancergenas ou teratognicas conhecidas. Certos vapores de solventes so txicos quando inalados. Alm dos efeitos mais graves acima assinalados, a exposio pode provocar danos que no mostram efeitos imediatos na sade, mas que podem incluir perda da coordenao, sonolncia e sintomas semelhantes, o que aumenta o risco de acidentes. A exposio prolongada ou repetida fase lquida de muitos dissolventes orgnicos pode resultar em leses cutneas o que pode ser devido a um efeito de dissoluo das gorduras, mas tambm pode provocar sintomas alrgicos e corrosivos. Para informaes detalhadas sobre os efeitos txicos dos produtos qumicos ver o Anexo 5. Produtos qumicos explosivos A azida, muitas vezes utilizada em solues antibacterianas, no deve entrar em contacto com o cobre ou o chumbo (por exemplo, em canalizaes) pois estas podem explodir violentamente quando sujeitas mesmo a um impacto ligeiro. Os teres que envelheceram e secaram em cristais so extremamente instveis e potencialmente explosivos. O cido perclrico quando seca sobre madeira, tijolo ou tecido, explode e inamase sob o efeito de um impacto. O cido pcrico e os picratos explodem sob o efeito do calor e de choques. Derrames de produtos qumicos A maior parte dos fabricantes de produtos qumicos utilizados em laboratrio fornecem instrues sobre a maneira de proceder em caso de derrame. Instrues e material a utilizar em tais casos tambm se encontram no comrcio. Nos laboratrios, estas instrues devem ser colocadas bem vista. Deve igualmente estar disponvel o seguinte material: 1. Conjuntos de material para derrames 2. Roupa de proteco, como por exemplo, luvas de borracha espessa, proteces de sapatos ou botas de borracha, respiradores 3. Ps e apanhadores 4. Pinas para apanhar estilhaos de vidro
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17. PRODUTOS QUMICOS PERIGOSOS

5. Esfreges, panos e papel absorvente 6. Baldes 7. Soda calcinada (carbonato de sdio, Na2CO3) ou bicarbonato de sdio (NaHCO3) para neutralizar cidos e produtos qumicos corrosivos 8. Areia (para cobrir derrames alcalinos) 9. Detergente no inamvel. No caso de derrame importante de produtos qumicos, proceder da seguinte maneira: 1. Noticar o responsvel da segurana. 2. Evacuar da zona o pessoal no essencial. 3. Prestar cuidados s pessoas que possam ter sido contaminadas. 4. Se o material derramado inamvel, apagar todas as chamas vivas, desligar o gs na sala e nas zonas vizinhas, abrir as janelas (se possvel), e desligar da corrente o equipamento elctrico que possa produzir fascas. 5. Evitar de respirar os vapores produzidos pelo material derramado. 6. Ligar o exaustor se tal operao no representar perigo. 7. Arranjar o material necessrio para limpar o derrame (ver mais acima). Gases comprimidos e liquefeitos O Quadro 14 fornece informaes sobre a armazenagem de gases comprimidos e liquefeitos. Quadro 14. Armazenagem de gases comprimidos e liquefeitos
RECIPIENTES INFORMAES SOBRE ARMAZENAGEM E MANUSEAMENTO

Cilindros de gs comprimido e recipientes de gs liquefeitoa,b

Devem ser solidamente presos (por exemplo, com uma corrente) parede ou a uma estrutura slida para que no possam ser deslocados inadvertidamente Devem ser transportados numa carreta com rodas, bem tapados com as tampas protectoras. Devem ser armazenados em conjunto num outro edifcio a certa distncia do laboratrio. Essa zona deve ser fechada chave e devidamente identicada. No devem ser colocados perto de radiadores, chamas vivas ou outras fontes de calor, equipamento elctrico que produza fascas ou directamente expostos ao sol.

Pequenas botijas de gs de uso nicoa,b


a

No devem ser incineradas.

A principal vlvula de alta presso deve ser fechada quando o equipamento no est a ser utilizado e quando a sala no est ocupada. As salas onde se utilizam e/ou se armazenam cilindros de gs inamvel devem estar devidamente assinaladas com avisos nas portas.

Para mais informaes ver referncias (1) e (4951), e Anexo 5.


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18. Outros tipos de risco em laboratrio

O pessoal de laboratrio pode ser exposto a riscos ligados a certas formas de energia e nomeadamente a fogo, electricidade, radiaes e barulho. Neste captulo apresentamse informaes bsicas sobre cada um deles. Risco de incndio Uma colaborao estreita entre os responsveis da segurana e os responsveis locais da preveno de incndios essencial. Alm dos riscos de natureza qumica, deve levar-se em conta os efeitos de um incndio numa disseminao eventual de material infeccioso. Isto pode determinar se prefervel extinguir o incndio ou circunscrev-lo. desejvel pedir a colaborao de responsveis locais da preveno de incndios para formar o pessoal de laboratrio em preveno e aco imediata em caso de incndio, e utilizao de material de luta contra incndios. Cartazes com instrues sobre a maneira de proceder em caso de incndio e que indiquem as sadas de socorro devem estar bem visveis nas salas, corredores e vestbulos. As causas mais correntes de incndio em laboratrio so: 1. Circuito elctrico sobrecarregado 2. M manuteno do sistema elctrico, por exemplo, isolao dos cabos defeituosa ou em mau estado 3. Tubos de gs ou os elctricos demasiado longos 4. Equipamento deixado ligado desnecessariamente 5. Equipamento que no foi concebido para trabalho em laboratrio 6. Chamas vivas 7. Tubos de gs deteriorados 8. Erros na manipulao e armazenagem de materiais inamveis ou explosivos 9. Erros na separao de produtos qumicos incompatveis 10. Aparelhos que produzem fascas na proximidade de substncias ou vapores inamveis 11. Ventilao mal adaptada ou insuciente. O material de combate a incndios deve ser colocado perto das portas das salas e em pontos estratgicos de corredores e vestbulos. Tal material deve incluir mangueiras, baldes (de gua ou areia) e extintores. Os extintores devem ser objecto de inspeco
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18. OUTROS TIPOS DE RISCO EM LABORATRIO

Quadro 15. Tipos de extintores e sua utilizao


TIPO UTILIZADO PARA NO UTILIZADO PARA

gua Gases extintores de dixido de carbono (CO2) P

Papel, madeira, tecido Lquidos e gases inamveis, fogos de origem elctrica Lquidos e gases inamveis, metais alcalinos, fogos de origem elctrica Lquidos inamveis

Fogos de origem elctrica, lquidos inamveis, metais incandescentes Metais alcalinos, papel

Material e instrumentos reutilizveis pois os resduos so muito difceis de eliminar Fogos de origem elctrica

Espuma

e manuteno peridicas e devem estar dentro do prazo de validade. O Quadro 15 apresenta diversos tipos de extintores e sua utilizao. Para mais informaes, ver a referncia (49). Riscos elctricos essencial que todas as instalaes e equipamentos elctricos sejam vericados e controlados regularmente, incluindo os sistemas de ligao terra. Disjuntores e interruptores diferenciais devem ser instalados nos circuitos elctricos de laboratrio. Os disjuntores no protegem as pessoas; destinam-se a proteger os circuitos de uma sobrecarga elctrica e assim evitar incndios. Os interruptores diferenciais protegem as pessoas de choques elctricos. Todos os aparelhos elctricos de laboratrio devem estar ligados terra, de preferncia com tomadas tripolares. Todos os aparelhos e circuitos elctricos de laboratrio devem ser conformes aos padres e normas nacionais de segurana elctrica. Rudo Os efeitos de uma exposio a rudo excessivo so, com o decorrer do tempo, insidiosos. Alguns aparelhos de laboratrio, como por exemplo, certos sistemas de laser, assim como instalaes para animais, podem expor os trabalhadores a um rudo considervel. Para determinar o risco de exposio a rudo podem fazer-se medies acsticas. Quando justicado pelos dados obtidos, podem tomar-se certas medidas, como a colocao de vedaes ou barreiras anti-rudo volta do equipamento ruidoso ou entre as zonas ruidosas e outras zonas de trabalho. Quando no possvel baixar o nvel de rudo e o pessoal de laboratrio est permanentemente exposto a um rudo excessivo, deve ser institudo um programa de proteco auditiva incluindo a utilizao de protectores auriculares para os trabalhos em ambiente ruidoso e um controlo mdico para determinar o efeito do rudo sobre o pessoal.
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Radiaes ionizantes A radioproteco tem por objectivo proteger os seres humanos contra os efeitos nocivos das radiaes ionizantes, nomeadamente: 1. Efeitos somticos, por exemplo, sintomas clnicos observveis em indivduos expostos. Tais efeitos incluem cancros induzidos por radiaes como leucemias ou cancro dos ossos, dos pulmes e da pele, que podem s aparecer muitos anos depois da irradiao. Outros efeitos menos graves incluem leses cutneas, perda de cabelo, decincias sanguneas, leses gastrintestinais e cataratas. 2. Efeitos hereditrios, por exemplo, sintomas observados em descendentes de indivduos expostos. Os efeitos hereditrios da exposio das gnadas a radiaes incluem dano nos cromossomas ou mutao gentica. A irradiao em fortes doses das clulas germinativas nas gnadas tambm pode causar a morte celular, provocando problemas de fertilidade nos dois sexos ou alteraes menstruais na mulher. A exposio do feto durante o seu desenvolvimento, em especial entre a 8a e a 15a semana de gravidez, pode aumentar o risco de malformaes congnitas, atraso mental ou cancros induzidos por irradiao, anos mais tarde.
Princpios de radioproteco contra a irradiao ionizante

Para limitar os efeitos nocivos da irradiao ionizante, preciso que a utilizao de radioistopos seja controlada e respeite as normas nacionais pertinentes. A radioproteco apoia-se em quatro princpios: 1. Reduzir ao mnimo o tempo de exposio a radiaes 2. Manter-se o mais longe possvel da fonte de irradiao 3. Blindar a fonte de irradiao 4. Substituir a utilizao de radionclidos por tcnicas no radiomtricas. As actividades de proteco incluem: 1. Tempo. O tempo de exposio durante as manipulaes de material radioactivo pode ser reduzido: Exercitando-se em tcnicas novas e no familiares sem utilizar radionclidos at estar perfeitamente apto Trabalhando com radionclidos no momento oportuno, de maneira segura e sem precipitaes Assegurando-se que todas as fontes radioactivas voltam imediatamente para o seu local de armazenagem depois de utilizadas Eliminando frequentemente do laboratrio os resduos radioactivos Passando o menos tempo possvel na zona de irradiao do laboratrio Procurando gerir e planear ecazmente as manipulaes em laboratrio de substncias radioactivas e a sua durao. Quanto menos tempo se passar no campo de irradiao, mais fraca a dose recebida individualmente, como demonstra a seguinte equao:
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18. OUTROS TIPOS DE RISCO EM LABORATRIO

2. Distncia. A taxa de dosagem para a maior parte das radiaes g ou X varia como o inverso do quadrado da distncia a uma fonte de ponta:

Multiplicando por 2 a distncia a uma fonte de radiao resultar numa exposio reduzida a um quarto durante o mesmo perodo de tempo. Para aumentar tal distncia utilizam-se vrios dispositivos e mecanismos, por exemplo, pinas com cabos compridos, tenazes, ganchos e auxiliares de pipetar distncia. No esquecer que um pequeno aumento da distncia pode resultar numa reduo importante da taxa de dosagem. 3. Blindagem. Colocar entre a fonte e o operador ou outros ocupantes do laboratrio proteces capazes de absorver ou de atenuar a energia irradiada ajudar a limitar a exposio. A escolha de qualquer proteco e da sua espessura depende da capacidade de penetrao da radiao (tipo e energia). Barreiras em resina acrlica, madeira ou metal ligeiro, de uma espessura de 1,3 a 1,5 cm, protegem contra partculas de grande energia, mas para proteger contra a irradiao g e X de alta energia preciso utilizar barreiras de chumbo de densidade elevada. 4. Substituio. No se devem utilizar radionclidos quando existem outras tcnicas. Se a substituio no possvel, deve utilizar-se o radionclido cuja radiao seja a menos penetrante ou a menos energtica possvel.
Regras de segurana para trabalhar com radionclidos

As regras para trabalhar com substncias radioactivas devem incluir consideraes em quatro reas: 1. rea de irradiao 2. rea de trabalho 3. rea de resduos radioactivos 4. Registos e resposta em casos de emergncia. Algumas das regras mais importantes incluem: 1. rea de irradiao Utilizar substncias radioactivas unicamente em reas especialmente destinadas a tal efeito. S permitir a presena do pessoal indispensvel. Utilizar equipamento de proteco individual, incluindo batas, culos de proteco e luvas descartveis. Utilizar um dosmetro pessoal para controlo da exposio a irradiaes. Os laboratrios onde se manipulam radionclidos devem ser concebidos de maneira a simplicar a conteno, a limpeza e a descontaminao. A rea de tra-

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Ilustrao 12. Smbolo internacional de risco de irradiao

PERIGO

MATERIAL RADIOACTIVO
balho com radionclidos deve ser localizada numa sala pequena contgua ao laboratrio principal ou numa zona exclusiva dentro do laboratrio afastada das outras zonas de actividade. Na entrada da rea de irradiao devem ser colocados painis com o smbolo internacional de risco de irradiao (Ilustrao 12). 2. rea de trabalho Utilizar tabuleiros com materiais absorventes descartveis para recolha de derrames. Limitar as quantidades de radionclidos utilizados. Colocar proteces volta das fontes de irradiao, das reas de trabalho e de resduos radioactivos. Marcar nos recipientes de produtos radioactivos o smbolo de radioactividade, e indicar igualmente a identidade do radionclido, a sua actividade e a data da experincia. Utilizar radimetros para controlar zonas de trabalho, roupa de proteco e mos, uma vez o trabalho terminado. Utilizar contentores de transporte correctamente blindados. 3. rea de resduos radioactivos Eliminar frequentemente da rea de trabalho os resduos radioactivos. 4. Registos e resposta em casos de emergncia Manter registos precisos sobre a utilizao e eliminao de materiais radioactivos. Vericar os registos de dosmetros para detectar qualquer produto que tenha eventualmente excedido a dose limite. Estabelecer e experimentar regularmente planos de aco para situaes de emergncia. Em caso de emergncia, ocupar-se em primeiro lugar dos feridos. Limpar muito bem as zonas contaminadas. Se disponvel, pedir auxlio ao servio de segurana. Fazer relatrios dos casos de incidente e conserv-los nos arquivos.
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PARTE VII

Segurana: organizao e formao

19. Responsvel da segurana biolgica e comisso de segurana biolgica

indispensvel que todos os laboratrios tenham uma poltica de segurana global, um manual de segurana e programas para a sua implementao. A responsabilidade pertence normalmente ao director ou ao chefe do instituto ou laboratrio, o qual poder delegar certas tarefas no responsvel da segurana ou noutros membros competentes do pessoal. A segurana em laboratrio igualmente da responsabilidade de todos os supervisores e empregados, e cada trabalhador responsvel pela sua prpria segurana e pela segurana dos seus colegas. Espera-se que os empregados desempenhem o seu trabalho segundo as regras de segurana e que comuniquem ao seu supervisor qualquer acto, condio ou incidente que comportem riscos. Seria desejvel mandar executar por agentes externos ou internos inspeces peridicas das condies de segurana. Responsvel da segurana biolgica Sempre que possvel, deve nomear-se um responsvel de segurana biolgica encarregado de assegurar que as polticas e programas de segurana biolgica so respeitados sistematicamente em todo o laboratrio. Este responsvel executa estas tarefas em nome do director do instituto ou laboratrio. Em unidades pequenas, o responsvel da segurana biolgica pode ser um microbiologista ou um membro do pessoal tcnico que poder desempenhar tais tarefas numa base determinada a tempo parcial. Seja qual for o grau de participao na segurana biolgica, a pessoa designada deve possuir a competncia prossional necessria para sugerir, examinar e aprovar actividades especcas que respeitem procedimentos apropriados de conteno e segurana biolgicas. O responsvel da segurana biolgica deve aplicar as regras, regulamentos e directivas nacionais e internacionais pertinentes, assim como ajudar o laboratrio a elaborar normas de trabalho padro. Esta pessoa deve ter uma formao tcnica em microbiologia e bioqumica com conhecimentos bsicos em cincias fsicas e biologia. O conhecimento de prticas laboratoriais, clnicas e de segurana, incluindo material de conteno e princpios tcnicos relacionados com a concepo, o funcionamento e a manuteno dos servios, muito desejvel. O responsvel da segurana biolgica tambm deve ser capaz de comunicar ecazmente com o pessoal administrativo, tcnico e auxiliar.
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MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

O responsvel da segurana biolgica deve: 1. Participar em reunies tcnicas sobre segurana biolgica, proteco biolgica e observncia de tcnicas. 2. Organizar auditorias peridicas internas de segurana biolgica sobre mtodos tcnicos, prticas e protocolos, agentes biolgicos, materiais e equipamento. 3. Examinar com as pessoas implicadas as violaes de protocolos ou procedimentos de segurana biolgica. 4. Vericar se todo o pessoal recebeu formao apropriada em questes de segurana biolgica. 5. Assegurar formao contnua em segurana biolgica. 6. Investigar incidentes que impliquem a fuga eventual de material potencialmente infeccioso ou txico, e noticar as concluses e recomendaes ao director do laboratrio e comisso de segurana biolgica. 7. Cooperar com o pessoal mdico em relao a eventuais infeces adquiridas em laboratrio. 8. Assegurar a descontaminao apropriada aps derrames ou outros incidentes que impliquem material infeccioso. 9. Assegurar o processamento apropriado dos resduos. 10. Assegurar a descontaminao apropriada de qualquer aparelho antes de uma reparao ou um controlo. 11. Informar-se sobre as atitudes da comunidade em relao a questes de sade e meio ambiente. 12. Estabelecer medidas apropriadas para a entrada/sada de material patognico, de acordo com os regulamentos nacionais. 13. Analisar os aspectos de segurana biolgica de todos os planos, protocolos e procedimentos operacionais do trabalho de investigao que envolvem agentes infecciosos, antes da implementao de tais actividades. 14. Estabelecer um sistema para enfrentar emergncias. Comisso de segurana biolgica conveniente constituir uma comisso de segurana biolgica para elaborar polticas de segurana biolgica e cdigos de procedimento. Esta comisso tambm deve examinar os protocolos de investigao para trabalhos que envolvam agentes infecciosos, utilizao de animais, tcnicas de recombinao da ADN e organismos geneticamente modicados. Outras funes da comisso podem incluir avaliaes de risco, elaborao de novas polticas de segurana e arbitragem em conitos sobre questes de segurana. A composio da comisso de segurana biolgica deve ser representativa dos diversos ramos prossionais da organizao assim como das suas especialidades cientcas. A composio de uma comisso bsica de segurana biolgica pode incluir: 1. Um ou mais responsveis de segurana 2. Cientistas
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19. RESPONSVEL DA SEGURANA BIOLGICA E COMISSO DE SEGURANA BIOLGICA

3. Pessoal mdico 4. Um ou mais veterinrios (no caso de experimentaes com animais) 5. Representantes do pessoal tcnico 6. Representantes da direco do laboratrio. A comisso de segurana biolgica deve consultar os responsveis de segurana dos diversos servios e especialidades (por exemplo, especialistas em radioproteco, segurana industrial, preveno contra incndios, etc.) e pode eventualmente pedir assistncia a especialistas independentes em vrios domnios ans, bem como a autoridades locais e organismos nacionais reguladores. No caso de um protocolo particularmente litigioso ou sensvel, pode ser igualmente til procurar o conselho de membros da comunidade.

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20. Segurana do pessoal auxiliar

O bom funcionamento e a segurana de um laboratrio dependem muito do pessoal de manuteno e de limpeza, e essencial que tal pessoal receba formao adequada sobre segurana. Servios de manuteno de aparelhos e instalaes Os engenheiros e os operrios qualicados responsveis pela manuteno e reparao das instalaes e equipamento, devem ter certos conhecimentos sobre a natureza do trabalho realizado no laboratrio e os regulamentos e procedimentos de segurana. A experimentao de aparelhos aps a sua reviso, por exemplo, vericao da eccia das cmaras de segurana biolgica depois da instalao de novos ltros, deve ser realizada pelo responsvel da segurana ou sob o seu controlo. Os laboratrios ou instituies que no tenham os seus prprios servios tcnicos devem ter boas relaes com os fornecedores locais desses servios e familiariz-los com o equipamento e o trabalho do laboratrio. Os engenheiros e o pessoal de manuteno s devem entrar nos laboratrios de nvel 3 ou 4 de segurana biolgica com autorizao do responsvel da segurana e/ou do chefe do laboratrio e sob a sua superviso. Servios de limpeza A limpeza dos laboratrios de Nvel 3 e 4 de segurana biolgica deve ser feita pelo pessoal do laboratrio. O pessoal de limpeza s deve entrar em tais laboratrios com autorizao do responsvel da segurana e/ou do chefe do laboratrio e sob a sua superviso.

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21. Programas de formao

Uma formao contnua no local de trabalho essencial para manter o pessoal do laboratrio e o pessoal auxiliar sensibilizados para o problema da segurana. Os chefes de laboratrio, com a ajuda do responsvel da segurana biolgica e outras pessoas competentes, desempenham o principal papel na formao do pessoal. A eccia desta formao, assim como qualquer formao em sade e segurana, depende do empenho da direco, de factores de motivao, boa formao prossional inicial, boa comunicao e por m as metas e objectivos da organizao. Os elementos a seguir apresentados so vitais para um programa ecaz de formao em segurana biolgica. 1. Avaliar as necessidades. Este processo inclui a denio das tarefas a desempenhar, a ordem de importncia (em termos de frequncia, necessidade e complexidade) e detalhes das medidas necessrias para as realizar. 2. Estabelecer objectivos de formao. Estes so comportamentos observveis que se espera o pessoal adoptar no trabalho, depois da formao. Estes objectivos podem levar em linha de conta as condies em que decorrem certas actividades ou comportamentos e o nvel de competncia exigido. 3. Especicar o contedo da formao e os meios utilizados. O contedo representa os conhecimentos ou competncias que a pessoa deve conhecer a fundo para poder atingir os objectivos de comportamento. O contedo do programa de formao em segurana biolgica normalmente denido pelas pessoas que conhecem melhor o trabalho e as suas exigncias. Outras abordagens utilizadas podem concentrar-se nos resultados de exerccios de resoluo de problemas ou na concepo de medidas de aprendizagem para corrigir erros cometidos ao utilizar uma dada tcnica. No est provado que um determinado mtodo pedaggico (conferncias, ensino atravs da televiso, ensino por computador, vdeo interactivo, etc.) seja superior a um outro. Tudo depende das necessidades especcas de formao, da composio do grupo em formao, etc. 4. Levar em linha de conta as capacidades individuais para aprender. Uma formao ecaz deve levar em linha de conta as caractersticas ou atributos das pessoas em formao. Indivduos e grupos podem diferir em aptides, grau de instruo, cultura, maneira de se exprimir e nveis de competncia antes da formao. A abordagem adoptada poder ser ditada pela maneira como as pessoas em formao vem o programa em termos de melhoria da sua competncia pros 129

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sional ou da sua segurana pessoal. Certas pessoas aprendem de uma maneira mais visual ou prtica, enquanto outras preferem documentos escritos. Tambm se deve levar em considerao qualquer necessidade especial do pessoal, como por exemplo adaptar os cursos para as pessoas com problemas de audio. Alm de levar em conta todos estes elementos, recomenda-se a todas as pessoas que preparem programas de formao em segurana que se familiarizem com os princpios de formao de adultos. 5. Especicar as condies de aprendizagem. O meio de instruo (por exemplo, curso, videocassete, documentos escritos, etc.) no deve inibir nem estar em contradio ou sem relao com a aprendizagem da tcnica ou tpico ensinado. Por exemplo, se a instruo tem por objectivo desenvolver aptides em tcnicas de resoluo de problemas, a abordagem pedaggica deve privilegiar a reexo e a dialctica mais do que a simples memorizao. A formao prestada deve exigir comportamentos produtivos e/ou resultados apropriados (positivos, exactos, crveis). Por outro lado, todos os elementos da formao que forneam oportunidades para aplicao prtica em condies anlogas s do trabalho reforaro a transferncia da competncia para o trabalho efectivo. 6. Avaliao da formao. Esta componente fornece informaes que ajudam a determinar se a formao atingiu o objectivo esperado. Esta avaliao faz-se geralmente de quatro formas: medindo a reaco dos participantes formao prestada medindo a memorizao e/ou os resultados dos participantes avaliando as alteraes de comportamento no posto de trabalho medindo os resultados tangveis em termos dos objectivos ou metas da organizao. A avaliao mais completa de uma aco de formao inclui avaliaes de cada uma das quatro reas. O meio de avaliao menos ecaz o de s levar em conta as reaces do participante formao, dado que isso pode ter pouca relao com o mbito da formao em si; este meio no dever ser utilizado como a nica forma de medir a eccia da formao. 7. Reviso da formao. As avaliaes de uma formao raramente indicam se um programa de formao um xito ou um fracasso total dado que para medir os resultados se utilizam mltiplos critrios. Geralmente, os dados indicam que certas partes do curso foram melhor compreendidas, memorizadas ou aplicadas do que outras. Depois da formao, variaes ou lacunas nos conhecimentos ou competncias desejadas podem reectir a necessidade de prolongar a formao, de mudar as tcnicas pedaggicas ou de recrutar instrutores mais competentes. A OMS fornece vrios meios para formao em segurana microbiolgica.

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PARTE VIII

Lista de controlo de segurana

22. Lista de controlo de segurana

Esta lista de controlo destina-se a facilitar a avaliao do grau de segurana e de proteco microbiolgicas de laboratrios biomdicos. Locais 1. Na construo das instalaes ou em avaliaes ulteriores levou-se em linha de conta as directivas da scalizao e certicao? 2. Os locais esto em conformidade com as exigncias nacionais e locais para obras pblicas, incluindo as relacionadas com precaues para o caso de desastres naturais? 3. Os locais esto geralmente em ordem e sem obstrues? 4. Os locais esto limpos? 5. Os solos tm defeitos de estrutura? 6. Os solos e os degraus das escadas so uniformes e antiderrapantes? 7. O espao de trabalho adequado para trabalhar sem perigo? 8. Os espaos de circulao e os corredores so adequados para o movimento de pessoas e de grandes aparelhos? 9. As bancadas de trabalho, o mobilirio e as instalaes esto em boas condies? 10. As superfcies de trabalho so resistentes a dissolventes e produtos qumicos corrosivos? 11. H um lavatrio em cada sala do laboratrio? 12. A construo e a manuteno das instalaes impedem a entrada e refgio de animais roedores e artrpodes? 13. Todas as canalizaes de vapor e de gua quente vista esto isoladas ou resguardadas para proteger o pessoal? 14. O laboratrio dispe de um grupo electrogneo para o caso de uma falta de corrente? 15. O acesso aos locais do laboratrio pode ser limitado ao pessoal autorizado? 16. Foi feita uma avaliao dos riscos para assegurar que o laboratrio dispe de equipamento e instalaes apropriadas para a execuo do trabalho a que est destinado? Armazenagem 1. As instalaes de armazenagem, prateleiras, etc. esto arranjadas de maneira que o material armazenado no possa escorregar, desabar nem cair?
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MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

2. As instalaes de armazenagem no tm acumulao de lixo, materiais inteis e objectos nos quais se pode tropear e que representem perigo de incndio, de exploso ou de abrigo de animais nocivos? 3. Os congeladores e os locais de armazenagem podem ser fechados chave? Saneamento e instalaes para o pessoal 1. Os locais so mantidos em boas condies de limpeza, ordem e higiene? 2. Dispem de gua potvel? 3. Tm instalaes sanitrias limpas e correctas para homens e mulheres separadamente? 4. Dispem de gua quente e fria, sabo e toalhas das mos? 5. Tm vestirios separados para homens e mulheres? 6. Os membros do pessoal dispem de armrios (por exemplo, cacifos) onde podem deixar a sua prpria roupa? 7. O pessoal dispe de uma sala para almoar, etc.? 8. O nvel sonoro aceitvel? 9. O sistema de recolha e eliminao do lixo corrente satisfatrio? Aquecimento e ventilao 1. A temperatura do local de trabalho agradvel? 2. As janelas viradas ao sol tm persianas? 3. A ventilao adequada, por exemplo, ar renovado pelo menos seis vezes por hora, especialmente nas salas com ventilao mecnica? 4. O sistema de ventilao est munido de ltros HEPA? 5. A ventilao mecnica compromete os uxos de ar no interior e volta das CSB e cmaras de ventilao? Iluminao 1. A iluminao geral adequada (por exemplo, 300400 lux)? 2. As bancadas de trabalho tm iluminao prpria? 3. Todas as reas esto bem iluminadas sem cantos sombrios nas salas e corredores? 4. Os tubos uorescentes esto paralelos s superfcies de trabalho? 5. Os tubos uorescentes tm um espectro de cores equilibrado? Servios 1. Cada sala de laboratrio est equipada com um nmero suciente de bancas, torneiras de gua e de gs e tomadas elctricas para trabalhar sem perigo? 2. Existe um programa adequado de inspeco e manuteno de fusveis, lmpadas, cabos, canalizaes, etc.? 3. As avarias so reparadas num espao de tempo razovel? 4. Existem servios tcnicos e de manuteno internos, com engenheiros e operrios competentes com alguns conhecimentos da natureza dos trabalhos efectuados no laboratrio?
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22. LISTA DE CONTROLO DE SEGURANA

5. O acesso do pessoal tcnico e de manuteno a vrias reas do laboratrio controlado e registado? 6. No existindo servios tcnicos e de manuteno internos, engenheiros e construtores locais foram contactados e familiarizados com o equipamento e o trabalho do laboratrio? 7. O laboratrio dispe de servios de limpeza? 8. O acesso do pessoal de limpeza a vrias reas do laboratrio controlado e registado? 9. Existem servios informticos e esto protegidos? Segurana 1. Foi feita uma avaliao qualitativa de riscos e ameaas possveis para denir os riscos que o sistema de segurana deve controlar? 2. Foram denidos os riscos aceitveis e os parmetros de planicao da resposta a incidentes? 3. Quando no est ningum no edifcio, ca este fechado com segurana? 4. As portas e as janelas podem resistir a actos de vandalismo? 5. As salas onde se encontram materiais perigosos e equipamento caro cam fechadas chave quando no h ningum dentro? 6. O acesso a tais salas, ao equipamento e aos materiais devidamente controlado e registado? Preveno e proteco contra incndios 1. Existe um sistema de alarme de incndio? 2. As portas anti-fogo esto em boas condies? 3. O sistema de deteco de incndios est em boas condies de funcionamento e regularmente vericado? 4. Os postos de alarme de incndio so acessveis? 5. Todas as sadas esto marcadas com sinais luminosos adequados? 6. O acesso s sadas est indicado quando no imediatamente visvel? 7. As sadas no esto obstrudas com decoraes, mveis ou equipamento, nem fechadas quando o edifcio est ocupado? 8. O acesso s sadas est organizado de maneira a que, para fugir, no seja necessrio passar atravs de uma rea de alto risco? 9. Todas as sadas do para o exterior? 10. Os corredores, passagens e reas de circulao esto livres e no obstrudos de maneira a permitir movimentos de pessoal e de material de combate a incndios? 11. O material e o equipamento de combate a incndios facilmente identicvel graas a um cdigo de cores apropriado? 12. Os extintores portveis esto sempre cheios, em bom estado e colocados nos lugares previstos?
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13. As salas de laboratrio onde existem riscos potenciais de incndio esto equipadas com extintores e/ou cobertores anti-fogo para casos de emergncia? 14. Se numa sala se utilizam lquidos e gases inamveis, a ventilao mecnica suciente para remover os vapores antes que estes atinjam uma concentrao perigosa? 15. O pessoal est formado para responder a casos de incndio? Armazenagem de lquidos inamveis 1. As reservas de lquidos inamveis so armazenadas num local separado do edifcio principal? 2. O local est claramente identicado como rea de risco de incndio? 3. Tal local est equipado de um sistema de ventilao natural ou mecnica distinto do sistema do edifcio principal? 4. Os interruptores da luz so estanques ou esto colocados no exterior do edifcio? 5. O sistema de iluminao interior est protegido para impedir a inamao dos vapores ao contacto de fascas? 6. Os lquidos inamveis esto armazenados em recipientes apropriados e ventilados, feitos de materiais no combustveis? 7. O contedo dos recipientes est correctamente indicado nas etiquetas? 8. H extintores e/ou cobertores anti-fogo apropriados colocados no exterior mas perto do armazm de lquidos inamveis? 9. H cartazes Proibido fumar bem visveis no interior e no exterior do armazm de lquidos inamveis? 10. A quantidade de substncias inamveis conservadas nas salas de laboratrio a mais pequena possvel? 11. Tais substncias esto armazenadas em armrios devidamente fabricados para conter produtos inamveis? 12. Tais armrios esto devidamente etiquetados com avisos Lquido inamvel Perigo de incndio ? 13. O pessoal foi preparado para utilizar e transportar correctamente lquidos inamveis? Gases comprimidos e liquefeitos 1. Cada botija de gs porttil claramente etiquetada indicando o seu contedo e o respectivo cdigo de cor? 2. Os cilindros de gs comprimido e as suas vlvulas reguladoras de presso so regularmente vericadas? 3. A manuteno de tais vlvulas feita regularmente? 4. Quando se utiliza um cilindro, liga-se ao mesmo um dispositivo de reduo da presso? 5. Quando os cilindros no esto a ser utilizados ou so transportados, esto fechados com as tampas de proteco?
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22. LISTA DE CONTROLO DE SEGURANA

6. Todos os cilindros de gs comprimido esto arrumados de maneira a no cair, especialmente no caso de catstrofe natural? 7. Os cilindros e reservatrios de gs de petrleo lquido esto colocados longe de fontes de calor? 8. O pessoal foi formado para utilizar e transportar correctamente gases comprimidos e liquefeitos? Riscos elctricos 1. Todas as instalaes novas e todas as substituies, modicaes ou reparaes so feitas e mantidas segundo as normas nacionais de segurana elctrica? 2. A instalao elctrica interior est ligada terra (por exemplo, um sistema de trs os)? 3. Todos os circuitos do laboratrio tm disjuntores e os de terra? 4. Todos os aparelhos elctricos foram aprovados por um laboratrio de testes? 5. Os cabos de ligao exveis de todos os aparelhos so to curtos quanto possvel, esto em boas condies, e no esto gastos, estragados ou emendados? 6. Cada tomada s utilizada para um aparelho (sem qualquer adaptador)? Proteco individual 1. Para o seu trabalho normal, todos os membros do pessoal dispem de roupa de proteco com modelos e tecidos aprovados tais como batas, fatos, aventais, luvas? 2. Para trabalhar com produtos qumicos perigosos e substncias radioactivas e cancergenas o pessoal dispe de roupa de proteco suplementar tal como aventais e luvas de borracha para limpar derrames, e luvas resistentes ao calor para esvaziar autoclaves e fornos? 3. O pessoal dispe de culos de proteco e viseiras? 4. Existem locais para lavagem dos olhos? 5. Existem chuveiros de emergncia? 6. A proteco contra radiaes conforme s normas nacionais e internacionais, incluindo o fornecimento de dosmetros? 7. O laboratrio dispe de mscaras respiratrias que so regularmente limpas, desinfectadas, vericadas e guardadas em condies de limpeza e higiene? 8. Tais mscaras so providas de ltros apropriados, por exemplo, ltros HEPA para reteno de microrganismos e ltros especiais para gases e partculas? 9. As mscaras so bem adaptadas aos utilizadores? Sade e segurana do pessoal 1. Existe um servio de sade ocupacional? 2. H caixas de primeiros socorros em locais estratgicos? 3. O laboratrio dispe de socorristas qualicados? 4. Tais socorristas esto formados para enfrentar emergncias prprias ao laboratrio, como por exemplo, contacto com produtos qumicos corrosivos, ingesto acidental de venenos e material infeccioso?
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5. O pessoal que no trabalha no laboratrio (de limpeza e administrativo) est informado dos riscos potenciais que podem provir do laboratrio e dos materiais nele manipulados? 6. H avisos axados de maneira visvel com informaes claras sobre a localizao dos postos de primeiros socorros, os nmeros de telefone de servios de emergncia, etc.? 7. As mulheres em idade de reproduo so informadas das consequncias possveis do trabalho com certos microrganismos, agentes cancergenos, mutagnicos e teratognicos? 8. Diz-se s mulheres em idade de reproduo que se esto ou suspeitam estar grvidas, devem informar o membro indicado do pessoal mdico/cientco para que, se necessrio, se tomem medidas alternativas para o seu trabalho? 9. Existe um programa de vacinao pertinente com o trabalho do laboratrio? 10. H disponibilidade de testes cutneos e/ou exames radiolgicos para o pessoal que trabalha com material eventualmente infectado com bacilos tuberculosos ou outros materiais que exijam tais medidas? 11. Existem registos seguros de doenas e acidentes? 12. Utilizam-se sinais de alerta e de preveno de acidentes para reduzir os acidentes de trabalho? 13. O pessoal est formado para adoptar prticas apropriadas de segurana biolgica? 14. O pessoal de laboratrio encorajado a assinalar riscos de exposio? Equipamento de laboratrio 1. Todos os aparelhos esto certicados como seguros? 2. Existem protocolos para descontaminao do material antes da manuteno? 3. As CSB e as cmaras de ventilao de fumo so regularmente vericadas? 4. As autoclaves e outros aparelhos que funcionam sob presso so regularmente inspeccionados? 5. Os cestos de centrifugao e os rotores so regularmente inspeccionados? 6. Os ltros HEPA so mudados regularmente? 7. Utilizam-se pipetas em vez de agulhas hipodrmicas? 8. Os objectos de vidro que estejam rachados e lascados so sempre deitados fora e nunca reutilizados? 9. Existem recipientes seguros para vidros partidos? 10. Quando possvel, utiliza-se plstico em vez de vidro? 11. Existem recipientes especiais para objectos cortantes e so realmente utilizados? Materiais infecciosos 1. As amostras so recebidas em boas condies de segurana? 2. Conservam-se registos dos materiais que chegam? 3. As amostras so desembaladas em CSB com cuidado e ateno para o caso de eventuais quebras ou derrames?
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22. LISTA DE CONTROLO DE SEGURANA

4. Utilizam-se luvas e outra roupa de proteco para desembalar amostras? 5. O pessoal foi formado para expedir substncias infecciosas segundo os regulamentos nacionais e/ou internacionais em vigor? 6. As bancadas de trabalho so mantidas limpas e arrumadas? 7. Os resduos de material infeccioso so removidos diariamente ou com mais frequncia e eliminados segundo as normas de segurana? 8. Todos os membros do pessoal sabem como proceder em caso de quebra e derrame de culturas e materiais infecciosos? 9. O funcionamento dos esterilizadores controlado por meio de indicadores qumicos, fsicos e biolgicos apropriados? 10. Existem procedimentos para descontaminar as centrifugadoras regularmente? 11. Dispe-se de cestos estanques para centrifugadoras? 12. Utilizam-se desinfectantes apropriados? So utilizados correctamente? 13. Existe uma formao especial para o pessoal que trabalha em laboratrios de connamento Nvel 3 de segurana biolgica e laboratrios de connamento mximo Nvel 4 de segurana biolgica? Produtos qumicos e substncias radioactivas 1. Os produtos qumicos incompatveis so efectivamente armazenados ou manipulados separadamente? 2. Todos os produtos qumicos so correctamente etiquetados com nomes e advertncias? 3. Os avisos de risco qumico esto bem vsiveis? 4. So fornecidos conjuntos para limpeza de derrames? 5. O pessoal est preparado para se ocupar de derrames? 6. Os produtos inamveis esto armazenados correctamente, em segurana e em pequenas quantidades em armrios aprovados? 7. Existem carrinhos para transportar botijas? 8. H um responsvel de proteco contra radiaes ou um manual de referncia que se possa consultar? 9. O pessoal est devidamente formado para trabalhar com materiais radioactivos em condies de segurana? 10. Mantm-se registo dos stocks e da utilizao de substncias radioactivas? 11. O laboratrio dispe de blindagens de proteco contra a radioactividade? 12. A exposio do pessoal a radiaes controlada?

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PARTE IX

Referncias, anexos e ndex

Referncias

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MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

15. Biological safety cabinets laminar ow biological safety cabinets (Class II) for personnel, environment and product protection. Sydney, Standards Australia International, 1994 (Standard AS 2252.2-1994). 16. Standards Australia/Standards New Zealand. Biological safety cabinets installation and use. Sydney, Standards Australia International, 2000 (Standard AS/NZS 2647:2000). 17. Advisory Committee on Dangerous Pathogens. Guidance on the use, testing and maintenance of laboratory and animal exible lm isolators. London, Health and Safety Executive, 1990. 18. Standards Australia/Standards New Zealand. Safety in laboratories microbiological aspects and containment facilities. Sydney, Standards Australia International, 2002 (Standard AS/NZS 2243.3:2002). 19. Centers for Disease Control and Prevention. Recommendations for prevention of HIV transmission in health-care settings. Morbidity and Mortality Weekly Report, 1987, 36 (Suppl. 2):1S18S. 20. Bosque PJ et al. Prions in skeletal muscle. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 2002, 99:38123817. 21. Bartz JC, Kincaid AE, Bessen RA. Rapid prion neuroinvasion following tongue infection. Journal of Virology, 2003, 77:583591. 22. Thomzig A et al. Widespread PrPSc accumulation in muscles of hamsters orally infected with scrapie. EMBO Reports, 2003, 4:530533. 23. Glatzel M et al. Extraneural pathologic prion protein in sporadic Creutzfeld-Jakob disease. New England Journal of Medicine, 2003, 349:18121820. 24. Brown P, Wolff A, Gajdusek DC. A simple and effective method for inactivating virus infectivity in formalin-xed tissue samples from patients with Creutzeld-Jakob disease. Neurology, 1990, 40:887890. 25. Taylor DM et al. The effect of formic acid on BSE and scrapie infectivity in xed and unxed brain-tissue. Veterinary Microbiology, 1997, 58:167174. 26. Safar J et al. Prions. In: Richmond JY, McKinney RW, eds. Biosafety in microbiological and biomedical laboratories, 4th ed. Washington, DC, United States Department of Health and Human Services, 1999:134143. 27. Bellinger-Kawahara C et al. Puried scrapie prions resist inactivation by UV irradiation. Journal of Virology, 1987, 61:159166. 28. Health Services Advisory Committee. Safe working and the prevention of infection in clinical laboratories. London, HSE Books, 1991. 29. Russell AD, Hugo WB, Ayliffe GAJ. Disinfection, preservation and sterilization, 3rd ed. Oxford, Blackwell Scientic, 1999. 30. Ascenzi JM. Handbook of disinfectants and antiseptics. New York, NY, Marcel Dekker, 1996. 31. Block SS. Disinfection, sterilization & preservation, 5th ed. Philadelphia, PA, Lippincott Williams & Wilkins, 2001. 32. Rutala WA. APIC guideline for selection and use of disinfectants. 1994, 1995, and 1996 APIC Guidelines Committee. Association for Professionals in INfection Control and Epidemiology, INC. American Journal of Infection Control, 1996, 24:313342. 33. Sattar SA, Springthorpe VS, Rochon M. A product based on accelerated and stabilized hydrogen peroxide: evidence for broad-spectrum germicidal activity. Canadian Journal of Infection Control, 1998, 13:123130. 34. Schneider PM. Emerging low temperature sterilization technologies. In: Rutala WA, eds. Disinfection & sterilization in health care. Champlain, NY, Polyscience, 1997:7992.

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REFERNCIAS

35. Springthorpe VS. New chemical germicides. In: Rutala WA, eds. Disinfection & sterilization in health care. Champlain, NY, Polyscience, 1997:273280. 36. Steelman VM. Activity of sterilization processes and disinfectants against prions. In: Rutala WA, eds. Disinfection & sterilization in health care. Champlain, NY, Polyscience, 1997: 255271. 37. Taylor DM. Transmissible degenerative encephalopathies: inactivation of the unconventional causal agents. In: Russell AD, Hugo WB, Ayliffe GAJ, eds. Disinfection, preservation and sterilization, 3rd ed. Oxford, Blackwell Scientic, 1999:222236. 38. Infection control guidelines for hand washing, cleaning, disinfection and sterilization in health care, 2nd ed. Ottawa, Laboratory Centre for Disease Control, Health Canada, 1998. 39. Springthorpe VS, Sattar SA. Chemical disinfection of virus-contaminated surfaces. CRC Critical Reviews in Environmental Control, 1990, 20:169229. 40. Recommendations on the transport of dangerous goods, 13th revised edition, New York and Geneva, United Nations, 2003, (http://www.unece.org/trans/danger/publi/unrec/ rev13/13les_e.html). 41. Technical instructions for the safe transport of dangerous goods by air, 20032004 Edition. Montreal, International Civil Aviation Organization, 2002. 42. Economic Commission for Europe Inland Transport Committee. Restructured ADR applicable as from 1 January 2003. New York and Geneva, United Nations, 2002, (http://www.unece.org/trans/danger/publi/adr/adr2003/ContentsE.html). 43. Infectious substances shipping guidelines. Montreal, International Air Transport Association, 2003, (http://www.iata.org/ads/issg.htm). 44. Transport of Infectious Substances. Geneva, World Health Organization, 2004, (http://www.who.int/csr/resources/publications/WHO_CDS_CSR_LYO_2004_9/en/). 45. Berg P et al. Asilomar conference on recombinant DNA molecules. Science, 1975, 188: 991994. 46. European Council. Council Directive 98/81/EC of 26 October 1998 amending Directive 90/219/EEC on the contained use of genetically modied microorganisms. Ofcial Journal, 1998, L330:1331. 47. OMalley BW Jr et al. Limitations of adenovirus-mediated interleukin-2 gene therapy for oral cancer. Laryngoscope, 1999, 109:389395. 48. World Health Organization. Maintenance and distribution of transgenic mice susceptible to human viruses: memorandum from a WHO meeting. Bulletin of the World Health Organization, 1993, 71:497502. 49. Furr AK. CRC handbook of laboratory safety, 5th ed. Boca Raton, FL, CRC Press, 2000. 50. Lenga RE. The Sigma-Aldrich Library of Chemical Safety Data, 2nd ed. Milwaukee, WI, Aldrich Chemical Company, 1988. 51. Lewis RJ. Saxs dangerous properties of industrial materials, 10th ed. Toronto, John Wiley and Sons, 1999.

145

ANEXO 1

Primeiros socorros

Os primeiros socorros consistem na aplicao correcta e imediata de princpios aceites de tratamento mdico no local de um acidente. o mtodo aprovado de tratamento de uma pessoa acidentada at esta poder ser tratada por um mdico para receber o tratamento denitivo das suas leses. O material de primeiros socorros compe-se no mnimo de uma caixa de primeiros socorros, vesturio de proteco e equipamento de segurana para o socorrista, e dispositivo de irrigao ocular.
Caixa de primeiros socorros

A caixa de primeiros socorros deve ser feita de materiais que protejam o seu contedo da poeira e da humidade. Deve estar bem vista e ser facilmente reconhecida. Segundo uma conveno internacional, deve estar marcada com uma cruz branca em fundo verde. A caixa de primeiros socorros deve conter: 1. Uma cha de informao com conselhos gerais 2. Pensos adesivos esterilizados em embalagens individuais e de vrios tamanhos 3. Pensos oculares esterilizados com meios de xao 4. Ligaduras triangulares 5. Compressas esterilizadas para cobrir feridas 6. Alnetes de segurana 7. Diversas ligaduras esterilizadas mas no impregnadas de substncias medicinais 8. Um manual de primeiros socorros reconhecido, por exemplo, publicado pela Cruz Vermelha Internacional. O equipamento de proteco para o socorrista inclui: 1. Proteco bocal para o boca-a-boca 2. Luvas e outras proteces mecnicas contra exposio a sangue1 3. Conjunto para limpeza de derrames sanguneos (ver Captulo 14 do Manual). Tambm preciso haver disposio equipamento de irrigao ocular e o pessoal deve estar preparado para o utilizar correctamente.
1

Garner JS, Hospital Infection Control Practices Advisory Committee. Guideline for isolation precautions in hospitals.American Journal ofInfection Control,1996,24:2452 (http://www.cdc.gov/ncidod/hip/isolat/isolat.htm).

146

ANEXO 2

Vacinao do pessoal

Os riscos inerentes ao trabalho com certos agentes infecciosos devem ser discutidos em detalhe com cada investigador. Antes do incio do trabalho sobre tais agentes, preciso considerar a disponibilidade local, a autorizao de venda e a utilidade de possveis vacinas e/ou medicamentos (por exemplo, antibiticos) em caso de exposio. Certos membros do pessoal podem j estar imunizados devido a uma vacinao ou infeco anteriores. Se uma dada vacina ou toxide est localmente disponvel e autorizado venda, a sua administrao deve ser proposta uma vez realizada uma avaliao do risco de exposio possvel e um exame clnico da pessoa. preciso igualmente poder dispor de servios para tratamento clnico especco aps infeces acidentais.

147

ANEXO 3

Centros Colaboradores da OMS para a Segurana Biolgica


Informaes sobre a disponibilidade de cursos, meios e materiais pedaggicos podem ser obtidas escrevendo a qualquer dos seguintes organismos: Biosafety programme, Department of Communicable Disease Surveillance and Response, World Health Organization, 20 Avenue Appia, 1211 Geneva 27, Sua (http://www.who.iny/csr.). WHO Collaborating Centre for Biological Safety, Swedish Institute for Infectious Disease Control, Nobels Vg 18, S-171 82 Solna, Sucia (http://www.smittskyddsinstitutet.se/English/english.htm). WHO Collaborating Centre on Biosafety Technology and Consultative Services, Ofce of Laboratory Security, Health Canada, 100 Colonnade Road, Loc.: 6201A, Ottawa, Ontario, Canad K1A 0K9 (http://www.hc-sc.gc.ca/pphb-dgspsp/ols-bsl). WHO Collaborating Centre for Applied Biosafety Programmes and Training, Ofce of Health and Safety, Center for Disease Control and Prevention, 1600 Clifton Road, Mailstop F05, Atlanta, GA 30333, EUA (http://www.cdc.gov/). WHO Collaborating Centre for Applied Biosafety Programmes and Research, Division of Occupational Health and Safety, Ofce of Research Services, National Institutes of Health, Department of Health and Human Services, 13/3K04 13 South Drive MSC 5760, Bethesda, MD 20892-5760, EUA (http://www.nih.gov/). WHO Collaborating Centre for Biosafety, Victoria Infectious Diseases Reference Laboratory, 10 Wreckyn St, Nth Melbourne, Victoria 3051, Australia. Postal address: Locked Bag 815, PO Carlton Sth, Victoria 3053, Australia (http://www.vidrl. org.au/).

148

ANEXO 4

Segurana na utilizao do equipamento


A utilizao de certos aparelhos e instrumentos pode implicar riscos microbiolgicos. Outros so especialmente concebidos para evitar ou reduzir riscos biolgicos (ver Captulo 11). Equipamento capaz de criar riscos No Quadro A4-1 encontra-se uma lista dos equipamentos e manipulaes que podem criar riscos e sugestes sobre a maneira como tais riscos podem ser eliminados ou reduzidos.

Quadro A4-1. Equipamento e manipulaes que podem criar riscos


EQUIPAMENTO RISCO COMO ELIMINAR OU REDUZIR O RISCO

Agulhas hipodrmicas

Inoculao acidental, aerossol ou derrame

No voltar a inserir no invlucro nem partir as agulhas. Utilizar um tipo de seringa que evita a separao da agulha e seringa, ou um tipo descartvel em que a agulha parte integral do conjunto. Utilizar boas tcnicas de laboratrio, isto : encher a seringa com cuidado para evitar ao mximo a formao de bolhas e de espuma evitar a utilizao de seringas para misturar lquidos infecciosos; no caso de no poder, assegurar-se que o bico da agulha est sob a superfcie do lquido do recipiente e evitar de exercer fora excessiva antes de retirar uma agulha introduzida num frasco atravs duma rolha de borracha, embrulhar a agulha e a rolha numa compressa de algodo impregnada de um desinfectante apropriado mantendo a seringa na vertical, rejeitar o excesso de lquido e as bolhas de ar para uma compressa de algodo impregnada de um desinfectante apropriado ou para um pequeno frasco que contenha algodo.

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MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

EQUIPAMENTO

RISCO

COMO ELIMINAR OU REDUZIR O RISCO

Utilizar uma CSB para todas as manipulaes com matria infecciosa. Colocar os animais num dispositivo de conteno para os inocular. Utilizar agulhas grossas e curtas ou cnulas para inoculao intranasal ou oral. Utilizar uma CSB. Depois da utilizao, descontaminar a autoclave e assegurar eliminao correcta. Se utilizar um conjunto agulha-seringa descartvel, no o desmonte antes de o descontaminar na autoclave. Centrifugadoras Aerossis, projeces e quebra de tubos Utilizar copos de centrifugao (copos de segurana) ou rotores fechados. Abrir os copos ou os rotores depois de estes repousarem cerca de 30 minutos ou numa CSB. Instalar um ltro HEPA entre a centrifugadora e a bomba de vcuo. Manter um registo das horas de utilizao de cada rotor e estabelecer um programa de manuteno preventiva para reduzir o risco de avaria mecnica. Encher e esvaziar os copos ou rotores dentro de uma CSB. Vericar se o cesto metlico volta do catalisador est em bom estado.

Ultracentrifugadoras Aerossis, projeces e quebra de tubos

Garrafas anaerbias

Exploso, disperso de matria infecciosa Imploso, disperso de fragmentos de vidro e matria infecciosa. Aerossis, escoamentos e quebras

Dissecadores

Colocar numa caixa metlica slida.

Homogeneizadores, separadores de tecidos

Fazer funcionar e abrir o equipamento numa CSB. Utilizar modelos especialmente concebidos para evitar escoamentos a nvel dos rolamentos do rotor e juntas circulares, ou utilizar um separador de tecidos tipo stomacher. Antes de abrir a cuba do misturador, esperar 30 minutos para que o aerossol tenha tempo de assentar. Refrigerar para condensar os aerossis. Se utilizar um separador manual, segurar o tubo com um tampo de matria absorvente.

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ANEXO 4. SEGURANA NA UTILIZAO DO EQUIPAMENTO

EQUIPAMENTO

RISCO

COMO ELIMINAR OU REDUZIR O RISCO

Geradores de ultra-sons, limpadores a ultra-sons

Aerossis, Fazer funcionar e abrir o equipamento numa CSB leses do ou num local connado. aparelho auditivo, Assegurar o isolamento para proteger contra os dermites ultra-sons. Usar luvas para proteger a pele contra os efeitos qumicos de detergentes. Aerossis, projeces e derrames Trabalhar numa CSB ou num local de connamento primrio especialmente concebido. Utilizar frascos de cultura slidos munidos de rolhas de rosca, com uma sada protegida com ltro, se necessrio, e bem seguros. Utilizar ligaes circulares para manter o aparelho hermeticamente fechado. Utilizar ltros de ar para proteger o circuito de vcuo. Utilizar um mtodo satisfatrio de descontaminao, por exemplo, por via qumica. Fornecer um captador de humidade inteiramente metlico e um condensador de vapor. Vericar com cuidado todos os frascos de vidro para ver se no esto estragados. Utilizar unicamente frascos de vidro concebidos para utilizao no vcuo.

Misturadores de culturas, agitadores

Congeladores (liolizadores)

Aerossis e contaminao por contacto directo

Aparelhos para banho-maria

Proliferao de Limpar e desinfectar regularmente. microrganismos. No utilizar azida de sdio para evitar a A azida de sdio proliferao de microrganismos. forma compostos explosivos com certos metais.

Alm dos riscos microbiolgicos, tambm preciso prever e evitar os riscos associados a equipamento. O Quadro A4-2 d uma lista de exemplos de algumas causas de acidentes.

151

MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

Quadro A4-2. Causas correntes de acidentes relacionados com o equipamento


ACIDENTE CAUSA DO ACIDENTE ELIMINAR OU REDUZIR O RISCO

Defeito de concepo ou construo Incndio de origem Falta de interruptor de excesso elctrica em de temperatura incubadoras Electrocusso Utilizao incorrecta Acidente com centrifugadora Exploso de uma incubadora anaerbia Adaptao incorrecta Exploso numa garrafa vazia de utilizao domstica Exploso num frigorco de tipo domstico Falta de ligao terra apropriada Falta de equilbrio dos copos de centrifugao sobre os rotores de oscilao livre Utilizao de gs no indicado

Respeitar as normas nacionais

Formar e dirigir o pessoal

Formar e dirigir o pessoal

Ms condies de transporte do azoto lquido Produto qumico perigoso no guardado em recipiente prova de fascas/exploso, por exemplo, ter dietlico num recipiente que verte pela rolha

Utilizar equipamento especialmente concebido. Guardar os dissolventes e extractos a ponto de centelha baixo unicamente em frigorcos ou cmaras prova de fascas/exploses. Formar e dirigir o pessoal

Falta da manuteno devida Incndio num Montagem incorrecta dos fotmetro de chama componentes durante a manuteno

152

ANEXO 5

Produtos qumicos: perigos e precaues


Este anexo apresenta as informaes bsicas de sade e segurana assim como dados e precaues apropriadas para um certo nmero de produtos qumicos correntemente utilizados em laboratrios de anlises biolgicas e de investigao. A lista no exaustiva e a ausncia de qualquer produto qumico especial no signica que tal produto no seja perigoso. Todos os produtos qumicos utilizados em laboratrio devem ser manipulados com cuidado e de maneira a reduzir ao mnimo a exposio.

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Quadro A5-1. Produtos qumicos: perigos e precaues


RISCO DE INCNDIO PRECAUES A TOMAR PRODUTOS QUMICOS INCOMPATVEIS OUTROS RISCOS

PRODUTO QUMICO

PROPRIEDADES FSICAS

RISCOS PARA A SADE

Acetaldedo CH3CHO

Lquido ou gs incolor, odor picante e a fruta; ponto de fuso -121C, ponto de ebulio 21C.

Ligeira irritao para os olhos e as vias respiratrias. Efeitos sobre o sistema nervoso central, o aparelho respiratrio e os rins. Eventualmente cancergeno.

Extremamente inamvel; as misturas vapor/ar so explosivas; ponto de ignio -39C, limites de inamao 457%.

MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

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Manter os recipientes bem fechados. Trabalhar em cmara de fumo, sob chamin ou com exaustor. Utilizar roupa de proteco incluindo mscara respiratria, culos de segurana para laboratrio de qumica, luvas de borracha ou plstico, proteco ocular.

Nem chamas vivas nem fascas, proibido fumar, evitar contacto com superfcies quentes. Conservar em recipientes hermeticamente fechados em reas separadas de produtos oxidantes; guardar unicamente se o produto estiver estabilizado. Utilizar em cmara com exaustor ou com boa ventilao. Utilizar luvas de borracha, culos de proteco e proteco respiratria.

Ao contacto com o ar pode formar perxidos explosivos. Pode polimerizar-se sob a aco de cidos, substncias alcalinas e na presena de vestgios de metais. Redutor forte, reage violentamente com oxidantes, diversas substncias orgnicas, halogneos, cido sulfrico e aminas.

Acetato de tlio TIC2H3O2

Cristais brancos deliquescentes; ponto de fuso 110C; muito solvel na gua.

Extremamente txico no caso de ingesto com possveis efeitos cumulativos. Afecta os sistemas nervoso e cardiovascular. Nocivo em caso de contacto ocular e cutneo.

Acetileno HC CH

Gs incolor, odor ligeiro, como ter ou alho; ponto de fuso -81C, sublimado a -84C.

Asxiante; gangrena causada por frio intenso ao contacto com a pele.

Extremamente inamvel; limites de inamao 2,5100%.

Para proteger a pele utilizar luvas isolantes contra o frio intenso e culos de proteco ou viseira. Nem chamas vivas nem fascas, proibido fumar. Trabalhar com exaustor, e com aparelhos elctricos e iluminao prova de exploso.

Forte agente redutor; reage violentamente com oxidantes e com o or ou cloro sob aco da luz. Reage com o cobre, a prata e o mercrio ou seus sais, formando compostos sensveis aos choques.

ANEXO 5. PRODUTOS QUMICOS: PERIGOS E PRECAUES

Acetona CH3COCH3

155

Lquido voltil incolor, odor adocicado; ponto de fuso -95C, ponto de ebulio 56C.

Ligeiramente irritante para os olhos, nariz e garganta. A inalao pode provocar tonturas, narcose e coma.

Extremamente inamvel; ponto de ignio -18C, limites de inamao 2,212,8%.

Armazenar os recipientes num local bem ventilado e afastados de qualquer fonte de ignio. No inalar os vapores. Utilizar proteces respiratrias e oculares.

Reage violentamente com oxidantes (p.e. cido crmico e cido ntrico) e com o clorofrmio em presena de uma base. Incompatvel com misturas de cido sulfrico e cido ntrico concentradas.

Grandes recipientes e contentores ligados terra para evitar electricidade esttica.

PRODUTO QUMICO

PROPRIEDADES FSICAS

RISCOS PARA A SADE

RISCO DE INCNDIO

PRECAUES A TOMAR

PRODUTOS QUMICOS INCOMPATVEIS

OUTROS RISCOS

Acetonitrilo CH3CN

Lquido incolor, odor aromtico; ponto de fuso -46C, ponto de ebulio 82C.

Irritante para os olhos, vias respiratrias e pele. A exposio pode resultar em convulses, perda de sentidos, envenenamento por cianeto.

Extremamente inamvel; ponto de ignio 12,8C, limites de exploso 3,016%.

MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

156
Inamvel; ponto de ignio 40C, limites de inamao 5,416%. No inalar os vapores. Em caso de contacto com os olhos, lavar imediatamente com gua e consultar um mdico. Utilizar luvas de nitrilo e proteco ocular.

Nem chamas vivas nem fascas, proibido fumar, evitar o contacto com oxidantes. Utilizar unicamente em reas sem fontes de ignio. Armazenar em recipientes hermeticamente fechados em reas separadas de oxidantes. Trabalhar com exaustores. Evitar o contacto com a pele, olhos e membranas mucosas. Utilizar proteco respiratria e luvas de borracha. Reaco violenta ou explosiva com oxidantes.

Reage com cidos e bases em soluo aquosa, produzindo vapores txicos. Reage com oxidantes fortes. Ataca certos tipos de plstico, borracha e revestimento. Decompe-se por combusto produzindo cianeto de hidrognio e xidos de azoto.

cido actico CH3CO2H

Lquido incolor, odor picante; ponto de fuso -17C, ponto de ebulio 118C; miscvel com gua.

Corrosivo; provoca queimadelas graves; vapores irritantes. Os efeitos podem ser retardados.

cido clordrico (1037%) HCI Cloreto de hidrognio

Lquido fumegante incolor com odor picante; ponto de ebulio -121C; miscvel com gua.

Corrosivo para os olhos, vias respiratrias e pele; inalao repetida de vapores pode causar bronquite crnica.

No inalar os vapores; utilizar uma proteco respiratria. No caso de contacto com os olhos, lavar imediatamente com gua e consultar um mdico; no caso de contacto com a pele, lavar imediatamente com muita gua. Trabalhar em cmara de ventilao de fumo. Utilizar luvas de borracha ou plstico e proteco ocular (culos ou culos de proteco). Decomposio a 250C em xido crmico e oxignio com aumento do risco de incndio. Muitas reaces podem causar riscos. Evitar o contacto com a pele e os olhos; evitar a inalao de poeiras nas e nvoa. Trabalhar com ventilao, com exaustor local ou proteco respiratria. Em soluo aquosa um cido forte que reage com bases e que corrosivo. Oxidante poderoso, reage com combustveis, matrias orgnicas ou outras matrias facilmente oxidveis (papel, madeira, enxofre, alumnio, plsticos, etc.). Corrosivo para os metais.

Reage violentamente com bases (slidos e solues concentradas), e de maneira explosiva com o permanganato de potssio slido. Liberta gases txicos ou explosivos ao contacto com muitos metais.

Liberta vapores muito txicos em caso de incndio.

ANEXO 5. PRODUTOS QUMICOS: PERIGOS E PRECAUES

157

cido crmico CrO3 xido de crmio VI

Escamas ou p inodoros vermelhoescuro frequentemente utilizado em solues aquosas; ponto de fuso 197C.

Irritante para os olhos, pele e sistema respiratrio. Contacto repetido ou prolongado com a pele pode causar dermatites, lceras crmicas e sensibilizao cutnea. Inalao pode causar reaces de tipo asmticas. Pode causar perfurao do septo nasal. Cancergeno para o homem.

PRODUTO QUMICO

PROPRIEDADES FSICAS

RISCOS PARA A SADE

RISCO DE INCNDIO

PRECAUES A TOMAR

PRODUTOS QUMICOS INCOMPATVEIS

OUTROS RISCOS

cido fosfrico H3PO4

Lquido viscoso incolor ou cristais brancos higroscpicos; ponto de fuso 42C; decompe-se abaixo do ponto de ebulio a 213C; solvel em gua. Oxidante; o contacto com matria combustvel pode causar incndio. Liberta vapores txicos em caso de incndio. No respirar os vapores; utilizar proteco respiratria. No caso de contacto com os olhos, lavar imediatamente e consultar um mdico; no caso de contacto com a pele, lavar imediatamente; retirar a roupa contaminada. Utilizar luvas de PVC, avental plstico e culos de proteco para laboratrio de qumica. Trabalhar em cmara de fumo. cido actico, cido crmico, cido ciandrico, anilina, carbono, sulfeto de hidrognio, bases, metais e muitas outras substncias.

Corrosivo; causa queimaduras cutneas e oculares.

Ataca muitos metais produzindo hidrognio. Em caso de incndio, liberta vapores txicos.

No caso de contacto com os olhos, lavar com gua e consultar um mdico. Utilizar luvas de borracha nitrilo e proteco ocular.

MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

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cido ntrico (5070%) HNO3

Lquido fumegante incolor ou amarelo claro; ponto de fuso -42C ponto de ebulio 83121C; miscvel com gua.

Corrosivo; causa queimaduras graves aos olhos e pele. A inalao dos vapores pode causar edema pulmonar.

O cido ntrico concentrado pode produzir reaces mais perigosas do que qualquer outro reagente qumico.

cido oxlico HO2CCO2H

Cristais incolores; solvel em gua; ponto de fuso 190C com decomposio.

Nocivo no caso de contacto com a pele ou de ingesto. A poeira irritante para as vias respiratrias e olhos. As solues irritam os olhos e podem causar queimaduras cutneas.

Combustvel. Liberta vapores (ou gases) irritantes ou txicos no caso de incndio.

Evitar o contacto com a pele e os olhos.; utilizar proteco ocular e luvas.

Oxidantes; prata e mercrio e seus compostos.

cido perclrico HCIO4

Lquido incolor; miscvel com gua.

ANEXO 5. PRODUTOS QUMICOS: PERIGOS E PRECAUES

159

Corrosivo; causa queimaduras graves se ingerido e no caso de contacto com os olhos e pele. Os vapores so corrosivos para os olhos, pele e sistema respiratrio. A inalao pode causar edema pulmonar.

Oxidante forte. No combustvel mas facilita a combusto de outras substncias.

Evitar de respirar os vapores e qualquer outra exposio; utilizar roupa de proteco incluindo luvas de borracha nitrilo e proteco ocular e facial. Trabalhar com solues quentes em cmara de fumo ou sob chamin.

Matrias combustveis e redutoras: anidrido actico, bismuto e suas ligas, lcool, metal, papel, madeira e outras matrias orgnicas.

Oxidante poderoso; pode formar produtos explosivos no caso de contacto com muitas matrias inorgnicas e orgnicas; solos e bancadas de madeira contaminados podem explodir em caso de choques.

PRODUTO QUMICO

PROPRIEDADES FSICAS

RISCOS PARA A SADE

RISCO DE INCNDIO

PRECAUES A TOMAR

PRODUTOS QUMICOS INCOMPATVEIS

OUTROS RISCOS

cido pcrico C6H2(NO2)3OH 2,4,6-trinitrofenol

Cristais amarelos humedecidos com gua ou dissolvidos em lcool; ponto de fuso 122C; ligeiramente solvel em gua.

Txico por ingesto, Explosivo inalao ou quando seco. contacto com a pele. A ingesto pode resultar em cefaleias, nuseas. Irritante para os olhos.

Manter continuamente hmido ou s utilizar em soluo alcolica.

Forma sais com muitos metais que so mais explosivos que o prprio cido. Em contacto com cimento pode formar picrato de clcio que um explosivo por frico. Pode reagir vigorosamente com redutores.

Marcas amarelas na pele.

cido sulfrico H2SO4

MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

160

Lquido viscoso, incolor e inodoro; ponto de fuso 10C ponto de ebulio 340C (decomposio).

A soluo concentrada corrosiva e causa queimaduras graves; aerossol e vapor muito corrosivo por inalao; as solues diludas so irritantes para os olhos e pele; risco de queimaduras e dermite.

Em caso de incndio pode libertar vapores txicos. No combustvel. Muitas reaces podem causar incndio ou exploso. Diluio com gua gera calor e pode haver projeces ou ebulio. Deitar sempre o cido na gua, nunca a gua no cido.

No caso de contacto com os olhos lavar imediatamente e consultar um mdico; no caso de contacto cutneo lavar imediatamente e tirar a roupa contaminada. Utilizar luvas de borracha nitrilo e proteco ocular e facial. Evitar qualquer contacto com substncias inamveis.

Oxidante e desidratante poderoso, reage violentamente com muitos reagentes incluindo compostos orgnicos nitrados, permanganato de potssio, metais alcalinos e percloratos, matrias combustveis, oxidantes, aminas, bases, gua, calor excessivo e a maior parte dos metais.

Quando se acrescenta cido concentrado a gua, pode ocorrer ebulio localizada.

cido tricloroactico CCI3COOH

Cristais brancos higroscpicos com odor picante; ponto de fuso 58C ponto de ebulio 197,5C; solvel em gua, etanol, ter etilco. Extremamente inamvel; ponto de ignio -26C, limites de exploso 2,831%. Evitar o contacto com a pele, e os olhos. Trabalhar em cmara de ventilao de fumo ou com uma boa ventilao.

Corrosivo; causa queimaduras graves nos olhos, pele, vias respiratrias.

No combustvel. Pode libertar vapores txicos em caso de incndio.

Evitar o contacto com os olhos e a pele; utilizar luvas de borracha ou plstico e culos de segurana para laboratrio de qumica ou viseira com proteco respiratria. Em caso de contacto com os olhos lavar imediatamente e consultar um mdico.

Reaco violeta com misturas de cobre/sulfxido de dimetilo e ao contacto com bases, oxidantes fortes e metais como ferro, zinco, alumnio.

Armazenar num local seco. Solues aquosas concentradas podem sofrer uma decomposio violenta.

Acrolena CH2CHCHO

Lquido incolor ou amarelado, odor penetrante desagradvel; ponto de fuso -87C, ponto de ebulio -53C.

ANEXO 5. PRODUTOS QUMICOS: PERIGOS E PRECAUES

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Gs de amonaco: limites de inamao 1528%. Manter o recipiente bem fechado. No caso de contacto com os olhos, lavar imediatamente com gua e consultar um mdico. Trabalhar em cmara de ventilao de fumo. Utilizar luvas de borracha ou plstico e culos de proteco para laboratrio de qumica.

Efeito lacrimogneo. Fortemente irritante para as vias respiratrias; edema pulmonar em caso de exposio intensa. Os efeitos podem ser retardados.

Oxidantes, cidos, lcalis, amnia, aminas. Sem inibidor (normalmente hidroquinona) polimerizao espontnea. Com o decorrrer do tempo, pode formar perxidos sensveis aos choques. Reage violentamente com metais pesados tais como o mercrio e seus sais para formar compostos explosivos.

Solues de amonaco

Lquido incolor, odor picante; para gs: ponto de fuso -33C ponto de ebulio -78C; para solues a 25%: ponto de fuso 58C ponto de ebulio -38C; miscvel com gua.

Corrosivo para os olhos, sistema respiratrio, pele e sistema digestivo em caso de ingesto; edema pulmonar em caso de exposio intensa ao gs ou vapores.

PRODUTO QUMICO

PROPRIEDADES FSICAS

RISCOS PARA A SADE

RISCO DE INCNDIO

PRECAUES A TOMAR

PRODUTOS QUMICOS INCOMPATVEIS

OUTROS RISCOS

Anidrido actico (CH3CO)2O

Lquido incolor, odor picante e a vinagre; ponto de fuso -73C, ponto de ebulio 139C.

Extremamente irritante para os olhos e vias respiratrias superiores; aco corrosiva. Os efeitos podem ser retardados.

Inamvel; liberta vapores ou gases irritantes ou txicos em caso de incndio; ponto de ignio 49C, limites de exploso 2,7 -10,3%. Combustvel; ponto de ignio 70C, limites de exploso 1,211%. Conservar em recipientes hermeticamente fechados em reas separadas de produtos oxidantes. Evitar o contacto com a pele e os olhos. Trabalhar com exaustor ou proteco respiratria, utilizar luvas e roupa de proteco e viseira. Oxidantes fortes, cidos fortes.

Nem chamas vivas nem fascas, proibido fumar. Evitar o contacto com a pele e os olhos.

Reage violentamente com gua a ferver, vapor de gua, oxidantes fortes, alcois, aminas, bases fortes e muitos outros compostos. Em presena da gua, ataca muitos metais.

MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

162

Anilina C6H5NH2

Lquido oleaginoso, incolor a castanho, odor aminado aromtico; ponto de fuso -6C ponto de ebulio 185C.

Cianose devido a metemoglobinemia. Irritao dos olhos e pele. Pode ser absorvida atravs da pele; exposio repetida ou prolongada pode causar sensibilizao.

Auramina 4,4-carbonimidoilbis (N,Ndimetilbenzanamina)

Escamas ou p amarelo; ponto de fuso 136C; insolvel em gua. No caso de contacto com a pele, lavar imediatamente. No inalar a poeira. Utilizar luvas de borracha ou plstico e proteco ocular.

Nocivo em caso de ingesto, inalao e contacto com a pele. Pode causar irritao ocular ou cutnea. Eventualmente cancergeno.

Evitar o contacto com a pele e a inalao de poeira. Utilizar luvas de borracha ou plstico e culos de proteco para laboratrio de qumica.Trabalhar em cmara de ventilao de fumo ou utilizar uma mscara contra a poeira.

Agentes oxidantes fortes.

Azida de sdio N3Na

Slido cristalino incolor; ponto de fuso 300C; solvel em gua.

ANEXO 5. PRODUTOS QUMICOS: PERIGOS E PRECAUES

163

Muito txico no caso de ingesto, inalao e contacto cutneo; pode causar queimaduras. A poeira e a soluo so irritantes para os olhos e pele; pode ser absorvido atravs da pele.

Decomposio explosiva se aquecido para alm do ponto de fuso. Liberta vapores txicos quando aquecido; no utilizar gua para apagar o fogo.

Reaces explosivas com bromo, dissulfeto de carbono, ou cloreto de cromil. No estado slido reage com metais pesados incluindo cobre, chumbo e mercrio para formar sais explosivos de azidas. Ao contacto com cido, liberta um gs muito txico e explosivo.

PRODUTO QUMICO

PROPRIEDADES FSICAS

RISCOS PARA A SADE

RISCO DE INCNDIO

PRECAUES A TOMAR

PRODUTOS QUMICOS INCOMPATVEIS

OUTROS RISCOS

Benzeno C6H6

Lquido voltil incolor, odor aromtico caracterstico; ponto de fuso 6C, ponto de ebulio 80C.

Extremamente inamvel; ponto de ignio -11C, limites de inamao 1,38%.

A inalao de vapores afecta o sistema nervoso central resultando em vertigens e cefaleias; em fortes concentraes, h perda de sentidos e morte. Em caso de exposio prolongada ou crnica risco de anemia aplstica, leucemia, leses hepticas. Pode ser absorvido atravs da pele. Combustvel, liberta vapores ou gases txicos em caso de incndio. Evitar qualquer exposio. Utilizar proteces para os olhos e a pele. Trabalhar em cmara de ventilao de fumo com ventilao por exaustor. A sua utilizao proibida ou regulamentada em muitos pases.

Armazenar os recipientes num local bem ventilado e afastados de qualquer fonte de ignio. Trabalhar em cmara de ventilao de fumo ou sob uma chamin devidamente ventilada. Utilizar proteco ocular e luvas de borracha nitrilo ou PVC. Evitar a formao de cargas elctricas pela ligao terra.

Pode reagir violentamente com oxidantes incluindo cido crmico, permanganato de potssio e oxignio lquido.

MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

164

Benzidina 1,1-bifenil-4,4diamina

P amarelo claro; ponto de fuso 128C, ponto de ebulio 400C; ligeiramente solvel em gua mas muito solvel em cidos e dissolventes orgnicos.

Pode ser absorvida atravs da pele. Risco de cancro da bexiga. Evitar qualquer exposio.

Bisselenito de sdio NaHSeO3

P cristalino incolor ou branco; solvel em gua.

Txico no caso de ingesto e inalao da poeira; risco possvel de efeitos cumulativos. Teratognico segundo experimentao. Contacto cutneo prolongado pode causar dermatite.

Utilizar roupa de proteco. Oxidantes.

ANEXO 5. PRODUTOS QUMICOS: PERIGOS E PRECAUES

Brometo de cianogneo BrCN

165

Cristais incolores ou brancos com odor picante; ponto de fuso 52C, ponto de ebulio 61C.

Efeitos graves para os olhos, pele e sistema respiratrio; inalao dos vapores pode causar edema pulmonar que pode resultar em convulses, perda de sentidos, insucincia respiratria e morte.

No combustvel mas por aquecimento forma um gs inamvel. Em caso de incndio, liberta vapores ou gases irritantes ou txicos.

Trabalhar em sistema fechado com ventilao. Utilizar luvas e roupa de proteco, culos de segurana, viseira ou proteco ocular combinada com proteco respiratria.

Decomposio por aquecimento ou contacto com cidos produzindo cianeto de hidrognio muito txico e inamvel e brometo de hidrognio corrosivo. Reage com oxidantes fortes. Reage lentamente com gua e humidade para produzir brometo e cianeto de hidrognio. Ataca muitos metais em presena de gua.

PRODUTO QUMICO

PROPRIEDADES FSICAS

RISCOS PARA A SADE

RISCO DE INCNDIO

PRECAUES A TOMAR

PRODUTOS QUMICOS INCOMPATVEIS

OUTROS RISCOS

Bromo Br2

Lquido fumegante de cor castanha avermelhada escura com odor picante; ponto de fuso -7,2C, ponto de ebulio 58,8C.

Utilizar em sistema fechado e com ventilao. Utilizar luvas e roupa de proteco, culos de proteco, viseira ou proteco ocular combinada com mscara respiratria.

Oxidante forte, reage violentamente com matrias combustveis e redutoras. Reage violentamente com solues de amonaco, oxidantes, metais, compostos orgnicos e fsforo.

Ataca certas formas de plstico, borracha e revestimentos.

MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

166

Corrosivo. Os vapores so corrosivos para os olhos e vias respiratrias; inalao pode causar edema pulmonar e efeitos sobre o sistema nervoso central. Contacto com os olhos pode resultar em viso enevoada, vermelhido, dores e graves queimaduras dos tecidos.

No combustvel mas facilita a combusto de outras substncias. Muitas reaces podem resultar em incndios ou exploses. O aquecimento pode provocar um aumento da presso com riscos de queimaduras.

Cianeto de sdio NaCN

P cristalino branco com odor de amndoa; ponto de fuso 563C ponto de ebulio 1496C; muito solvel na gua.

Extremamente txico por ingesto, inalao e contacto cutneo; muito irritante para os olhos. Pode ser absorvido atravs da pele. A exposio repetida pode afectar a tiride.

Em caso de incndio pode libertar vapores txicos.

No inalar a poeira; utilizar proteco respiratria. Evitar o contacto com os olhos e a pele; no caso de contacto cutneo lavar imediatamente com gua e tirar a roupa contaminada. Utilizar culos de proteco de laboratrio de qumica e luvas de borracha ou plstico. Armazenar em local ventilado e fechado com segurana.

Liberta gs de cianeto de hidrognio (HCN) extremamente txico ao contacto com cidos ou gua contendo dixido de carbono dissolvido. Pode formar misturas explosivas com nitritos.

ANEXO 5. PRODUTOS QUMICOS: PERIGOS E PRECAUES

167
Evitar o contacto com olhos, pele, roupa; utilizar culos de proteco para laboratrio de qumica e luvas de borracha ou plstico. Agentes oxidantes fortes.

Tratar os derrames de solues com hipocloreto de sdio em p e deixar repousar durante 24 h. Varrer cuidadosamente os resduos slidos e deitlos em gua contendo hipocloreto de sdio; deixar repousar 24 h antes de eliminar. O laboratrio deve ter um kit para tratar casos de envenenamento por cianeto.

Citochalasina (AJ)

P branco; ponto de fuso varivel.

Txico em caso de ingesto, inalao ou absoro cutnea. Pode causar malformaes congenitais.

PRODUTO QUMICO

PROPRIEDADES FSICAS

RISCOS PARA A SADE

RISCO DE INCNDIO

PRECAUES A TOMAR

PRODUTOS QUMICOS INCOMPATVEIS

OUTROS RISCOS

Cloro Cl2

Gs amareloesverdeado com odor picante; ponto de fuso -101C, ponto de ebulio -34C.

No combustvel mas facilita a combusto de outras substncias.

Trabalhar em sistema fechado e ventilado. Utilizar luvas isolantes do frio, roupa de proteco, culos de proteco ou proteco ocular combinada com proteco respiratria.

Corrosivo para os olhos, pele e vias respiratrias. A inalao pode causar pneumonia e edema pulmonar, resultando na sndroma de disfuno reactiva das vias respiratrias. A evaporao rpida do lquido pode causar gangrena. Exposies fortes podem causar a morte. Possibilidade de efeitos retardados; manter sob observao mdica.

A soluo aquosa um cido forte, reage violentamente com bases e muitos compostos orgnicos, acetileno, butadieno, benzeno e outros produtos petroleiros, amonaco, hidrognio, carboneto de sdio, terebentina e metais namente divididos com risco de incndio e exploso.

Ataca muitos metais em presena da gua. Ataca plsticos, borracha e revestimentos.

MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

168

Clorofrmio CHCI3

Lquido voltil incolor de odor caracterstico; ponto de fuso -63C, ponto de ebulio 61C; ligeiramente solvel em gua.

Utilizar roupa de proteco, luvas de borracha nitrilo e proteco ocular. Trabalhar em cmara de ventilao de fumo.

Bases fortes; certos metais, como alumnio ou magnsio, p de zinco; oxidantes fortes.

Quando aquecido decompe-se formando gs de fosgnio. Ataca os plsticos e a borracha.

ANEXO 5. PRODUTOS QUMICOS: PERIGOS E PRECAUES

169
Combustvel. Trabalhar com exaustor local ou proteco respiratria, luvas e culos de proteco.

Nocivo em caso de inalao, ingesto e contacto com a pele. Pode ter efeitos sobre o fgado, rins e sistema nervoso central que se traduzem por cefaleias, nuseas, ictercia ligeira, perda de apetite e narcose. Exposio prolongada ou crnica causa cancro em animais; suspeita de cancergeno para o homem. Compostos sensveis a choques so formados com compostos acetilnicos, xido de etileno, azidas e perxido de hidrognio. Reage com oxidantes fortes como cloratos, bromatos e iodatos, com risco de exploso.

Cobre Cu

Slido avermelhado, brilhante, malevel, inodoro; p vermelho, vira ao verde por exposio a ar hmido; ponto de fuso 1083C, ponto de ebulio 2567C.

A inalao de vapores de cobre pode causar a febre dos fundidores.

PRODUTO QUMICO

PROPRIEDADES FSICAS

RISCOS PARA A SADE

RISCO DE INCNDIO

PRECAUES A TOMAR

PRODUTOS QUMICOS INCOMPATVEIS

OUTROS RISCOS

Dimetilamina (CH3)2NH

Gs incolor liquefeito voltil com odor picante; ponto de fuso -93C, ponto de ebulio 7C; miscvel com gua.

Muito irritante para os olhos e sistema respiratrio; inalao pode causar edema pulmonar. Evaporao rpida pode causar gangrena. A soluo corrosiva para os olhos e a pele. Manter hmido para reduzir Pode reagir o risco de exploso. Utilizar violentamente com mscara de respirao oxidantes e redutores. antipoeiras, luvas de borracha ou plstico e culos de proteco para laboratrio de qumica.

Extremamente inamvel; ponto de ignio -26C, limites de inamao 2,814%.

Manter afastada de Pode reagir com qualquer fonte de ignio; oxidantes e mercrio. em caso de contacto com os olhos lavar imediatamente consultar um mdico. Trabalhar em cmara de ventilao de fumo. Utilizar luvas de borracha nitrilo e culos de proteco para laboratrio de qumica.

MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

170

2,4-dinitrofenilhidrazina C6H3(NO2)2NHNH2 1-hidrazino2,4-dinitrobenzeno

P cristalino vermelho alaranjado; ponto de fuso 200C; ligeiramente solvel em gua.

Irritante para a pele e olhos. Nocivo em caso de ingesto, inalao e contacto com a pele.

Dioxana Lquido incolor C4H8O2 com odor Dixido de dietileno caracterstico; ponto de fuso 12C, ponto de ebulio 101C.

Muito inamvel; ignio distncia possvel; movimentos, agitao, etc., podem provocar a formao de cargas de electricidade esttica.

Irritante para os olhos e sistema respiratrio. Pode afectar o sistema nervoso central causando cefaleia, nuseas, tosse, dores de garganta, dores abdominais, vertigens, sonolncia, vmitos, perda dos sentidos. Pode ser absorvido atravs da pele. Leses renais e hepticas. Provavelmente cancergeno para o homem. Utilizar luvas de proteco isolantes. Armazenar unicamente em locais ventilados ou num recipiente aberto. Metais alcalinos, bases fortes.

Trabalhar com ventilao e exaustor local. Nada de chamas vivas e fascas, proibio de fumar, evitar o contacto com oxidantes fortes ou superfcies quentes. No utilizar ar comprimido para encher, esvaziar ou manusear; utilizar instrumentos que no produzam fascas. Utilizar luvas e roupa de proteco, viseira ou proteco ocular, em combinao com proteco respiratria.

Pode formar perxidos explosivos. Reage vigorosamente com oxidantes fortes e cidos fortes concentrados. Tem uma reaco explosiva com certos catalisadores. Ataca muitos plsticos.

ANEXO 5. PRODUTOS QUMICOS: PERIGOS E PRECAUES

171

Dixido de carbono (slido; gelo seco ) CO2

Slido branco translcido a -79C; sublima-se temperatura ambiente.

Riscos de asxia em locais fechados ou mal ventilados; o contacto com gelo seco provoca gangrena.

PRODUTO QUMICO

PROPRIEDADES FSICAS

RISCOS PARA A SADE

RISCO DE INCNDIO

PRECAUES A TOMAR

PRODUTOS QUMICOS INCOMPATVEIS

OUTROS RISCOS

Dixido de cloro CIO2

Gs amarelo a vermelho ou lquido vermelhocastanho; ponto de fuso -59C, ponto de ebulio 10C.

Fortemente irritante para os olhos, pele e vias respiratrias; a inalao do gs pode causar edema pulmonar. Os efeitos podem ser retardados; manter sob observao mdica.

No combustvel mas facilita a combusto de outras substncias; pode explodir com aquecimento, exposio luz solar, ou se submetido a choques e fascas. Muito inamvel; ponto de ignio 12C, limites de inamao 319%. Manter os recipientes bem fechados e afastados de qualquer fonte de ignio. Reage violentamente com oxidantes fortes.

Trabalhar em sistema fechado e ventilado. Utilizar luvas isolantes do frio, roupa de proteco, culos de proteco ou proteco ocular combinada com proteco respiratria.

Oxidante forte; reage violentamente com combustveis, redutores, fsforo, hidrxido de potssio, enxofre, amonaco, metano, fosna e sulfeto de hidrognio.

MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

172

Etanol CH3CH2OH

Lquido voltil incolor com ligeiro odor caracterstico; ponto de fuso -117C, ponto de ebulio -79C; miscvel com gua.

Nocivo no caso de ingesto. Irritante para os olhos. Pode afectar o sistema nervoso central.

Etanolamina H2NCH2 CH2OH 2aminoetanol

Lquido incolor, no voltil, viscoso com odor de amonaco; ponto de fuso 10C, ponto de ebulio 171C; miscvel com gua.

Corrosivo para os olhos, sistema respiratrio e pele. Pode afectar o sistema nervoso central.

Ponto de ignio 85C.

Utilizar luvas de borracha ou plstico e proteco ocular.

Reage com oxidantes fortes.

ter dietlico C2H5OC2H5

ANEXO 5. PRODUTOS QUMICOS: PERIGOS E PRECAUES

173

Lquido incolor muito voltil com odor adocicado caracterstico; ponto de fuso -116C, ponto de ebulio 34C; ligeiramente solvel em gua.

Irritante para os olhos e sistema respiratrio. Pode afectar o sistema nervoso central causando sonolncia e perda dos sentidos. Inalao repetida pode causar hbito.

Extremamente inamvel; ponto de ignio -45C, limites de inamao 1,748%.

Guardar os recipientes num local bem ventilado; manter afastados de fontes de ignio; ligar os recipientes terra para evitar descargas de electricidade esttica. Trabalhar em cmara de ventilao de fumo. Utilizar luvas de borracha nitrilo para evitar escamao da pele.

A exposio ao ar e luz pode resultar na formao de perxidos explosivos. Pode reagir violentamente com oxidantes e halogneos.

PRODUTO QUMICO

PROPRIEDADES FSICAS

RISCOS PARA A SADE

RISCO DE INCNDIO

PRECAUES A TOMAR

PRODUTOS QUMICOS INCOMPATVEIS

OUTROS RISCOS

Fenol C6H5OH

Cristais incolores ou rosa plido com odor caracterstico; ponto de fuso 41,4C ponto de ebulio 182C; miscvel com gua.

Ponto de ignio -80C, limites de inamao 1,76%.

Reage com oxidantes com riscos de incndio e exploso.

MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

174

Substncia e vapores corrosivos para os olhos, pele e sistema respiratrio causando queimaduras graves; absorvido atravs da pele. Perturbaes do sistema nervoso central, coma. Leses renais e hepticas. Sintomas incluem dores abdominais, vmitos, diarreia, irritao cutnea, dores oculares. Contacto prolongado com solues diludas pode causar dermatite.

Evitar a inalao de vapores; utilizar proteco respiratria. Evitar o contacto com os olhos e pele. Trabalhar em cmara de fumo. Utilizar luvas de borracha nitrilo e proteco ocular. No caso de contacto com os olhos lavar imediatamente com gua e consultar um mdico; no caso de contacto com a pele, remover toda a roupa contaminada e aplicar sobre a regio tocada glicerol, polietileno-glicol 300 ou uma mistura de polietileno-glicol lquido (70%) e lcool desnaturado (30%), e depois lavar abundantemente com gua.

Formaldedo em soluo (3741% de formaldedo com 1114% de metanol) HCHO

Lquido incolor com odor picante; ponto de ebulio 96C; miscvel com gua.

Ponto de ignio 50C.

Utilizar roupa de proteco como avental plstico, luvas de borracha ou plstico, e culos de proteco para laboratrio de qumica. Trabalhar em cmara de ventilao de fumo ou local bem ventilado.

Pode reagir vigorosamente com oxidantes, com nitrometano para produzir produtos explosivos, com cido clordrico para formar um cancergeno potente, o ter bis (clorometil).

ANEXO 5. PRODUTOS QUMICOS: PERIGOS E PRECAUES

175

Muito irritante para os olhos e pele, irritante para as vias respiratrias; a exposio prolongada aos vapores pode causar sintomas do tipo de asma, conjuntivite, laringite, bronquite ou broncopneumonia. Pode causar sensibilizao por contacto cutneo. Risco possvel de efeitos nocivos irreversveis. Possivelmente cancergeno. Trabalhar em cmara de Pode reagir ventilao de fumo ou local vigorosamente com bem ventilado. Utilizar oxidantes. luvas de borracha ou plstico e proteco ocular. Fornecido muitas vezes em soluo aquosa de concentrao varivel com um aditivo para reforar a estabilidade.

As solues concentradas de formaldedo cam turvas quando conservadas a menos de 21C; assim, devem ser conservadas entre 2125C. Solues diludas (15%) e de concentrao mdia (525%) apresentam quase todos os riscos das formas concentradas.

Glutaraldedo OHC(CH2)3CHO

Soluo incolor ou amarelo claro com odor picante; ponto de fuso -14C, ponto de ebulio 189C; miscvel com gua.

Fortemente irritante para os olhos e vias respiratrias superiores; exposio prolongada a inalao ou contacto cutneo pode provocar sensibilizao.

PRODUTO QUMICO

PROPRIEDADES FSICAS

RISCOS PARA A SADE

RISCO DE INCNDIO

PRECAUES A TOMAR

PRODUTOS QUMICOS INCOMPATVEIS

OUTROS RISCOS

Hidrxido de potssio KOH

Escamas, p, pastilhas ou pauzinhos brancos; ponto de fuso 360C ponto de ebulio 1320C; muito solvel em gua.

Corrosivo para o sistema respiratrio, olhos e pele; inalao da poeira causa edema pulmonar.

No caso de contacto com os olhos lavar imediatamente com gua e consultar um mdico; no caso de contacto com a pele lavar imediatamente e remover toda a roupa contaminada. Utilizar luvas de borracha ou plstico e proteco ocular mesmo no caso de solues diludas.

Reage violentamente com cidos e com nitrobenzeno e muitos outros detergentes. Liberta grande quantidade de calor quando misturado com gua; guardar em recipientes bem fechados.

Ataca certos metais (alumnio, zinco, estanho) em presena de humidade.

MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

Hidrxido de sdio NaOH

176

Escamas, p, pastilhas ou paus incolores: ponto de fuso 318C ponto de ebulio 1390C; solvel na gua.

Muito perigoso em caso de ingesto ou de contacto com os olhos e a pele com o produto slido ou em soluo concentrada. A inalao da poeira causa leses nas vias respiratria e edema pulmonar. Corrosivo em caso de ingesto. As solues diludas so irritantes para ou olhos e podem provocar leses graves no caso de contacto ocular prolongado.

No combustvel. Em presena de humidade ou gua pode gerar calor suciente para inamar substncias combustveis.

No caso de contacto com os olhos lavar imediatamente e consultar um mdico; no caso de contacto cutneo lavar imediatamente com gua e tirar a roupa contaminada. Utilizar luvas de borracha ou plstico e proteco ocular, mesmo para trabalhar com solues diludas.

Liberta grandes quantidades de calor quando misturado com gua. Reage vigorosamente com misturas de clorofrmio-metanol e com cidos fortes.

Guardar em recipiente bem fechado e ao seco.

Hipocloreto de sdio (soluo a 1014% de cloro livre) NaOCI

Soluo incolor ou amarelo plido com odor de cloro; miscvel com gua.

Corrosivo para os olhos e pele, por ingesto e para as vias respiratrias; a inalao pode causar edema pulmonar. A exposio repetida pode causar sensibilizao cutnea.

Oxidante forte. Pode libertar vapores txicos no caso de incndio.

No caso de contacto com os olhos lavar imediatamente e consultar um mdico; no caso de contacto cutneo lavar imediatamente. No inalar os vapores; utilizar proteco respiratria. Trabalhar em local bem ventilado. Utilizar luvas de borracha ou plstico e proteco ocular tipo laboratrio de qumica.

Em contacto com cidos, liberta gs extremamente txico. Pode reagir vigorosamente com matrias combustveis e redutoras. Pode reagir com compostos azotados para formar compostos Nclorados explosivos; pode reagir violentamente com o metanol.

ANEXO 5. PRODUTOS QUMICOS: PERIGOS E PRECAUES

177

As emanaes de cloro durante a armazenagem reduzem gradualmente o teor em cloro activo; as solues diludas utilizadas como desinfectante deterioram-se rapidamente. Guardar afastado de cidos num local escuro, fresco e bem ventilado.

PRODUTO QUMICO

PROPRIEDADES FSICAS

RISCOS PARA A SADE

RISCO DE INCNDIO

PRECAUES A TOMAR

PRODUTOS QUMICOS INCOMPATVEIS

OUTROS RISCOS

Iodo I2

Escamas cristalinas negras azuladas com odor caracterstico; ponto de fuso 114C ponto de ebulio 184C; praticamente insolvel em gua.

Irritante para os olhos, sistema respiratrio e pele. exposio repetida pode causar sensibilizao cutnea. Pode ter efeitos sobre a tiride.

No respirar os vapores; evitar o contacto com os olhos. Utilizar luvas de borracha nitrilo.

Reage violentamente com metais incluindo alumnio, potssio e sdio, e com misturas etanol/fsforo, acetileno e amonaco.

MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

178

No combustvel mas facilita a combusto de outras substncias. Muitas reaces podem causar incndios ou exploses. Em caso de incndio liberta vapores (ou gases) irritantes ou txicos.

Mercrio Hg

Lquido prateado muito denso; ponto de fuso -39C ponto de ebulio 357C; insolvel em gua.

Pode ser absorvido pela pele. Exposio repetida pode afectar os rins e o sistema nervoso central, e pode causar vmitos, diarreia, cefaleias, nuseas, inchao das gengivas, dentes descarnados.

No combustvel. Liberta vapores irritantes ou txicos em caso de incndio.

Conservar os recipientes bem fechados. Trabalhar em cmara de fumo ou local bem ventilado. Evitar derrames. Observar uma higiene rigorosa. Utilizar luvas de borracha nitrilo.

Acetileno, cido fulminico. Reage com amonaco, azidas e xido de etileno para formar produtos explosivos. Reage violentamente com o bromo. Forma amlgamas com muitos metais.

ANEXO 5. PRODUTOS QUMICOS: PERIGOS E PRECAUES

179

Armazenar os recipientes e trabalhar sobre tabuleiros para conter os derrames; aspirar as gotas fragmentadas por meio de um pequeno frasco munido de um capilar e ligado a uma bomba; tratar as superfcies onde houve derrames com p de zinco para formar uma amlgama.

PRODUTO QUMICO

PROPRIEDADES FSICAS

RISCOS PARA A SADE

RISCO DE INCNDIO

PRECAUES A TOMAR

PRODUTOS QUMICOS INCOMPATVEIS

OUTROS RISCOS

Metanol CH3OH

Lquido incolor e voltil com odor caracterstico; ponto de fuso -98C ponto de ebulio 65C; miscvel com gua.

Efeitos sobre o sistema nervoso central resultando em perda dos sentidos; irritao das membranas mucosas. A exposio crnica pode causar danos retina e nervo ptico. Contacto prolongado com a pele pode causar dermite. Pode ser absorvido atravs da pele. Combustvel. Evitar qualquer exposio; utilizar roupa de proteco apropriada. Trabalhar em cmara de fumo ou sob chamin ou com ventilao por exaustor. Utilizao proibida ou legalmente controlada em muitos pases.

Muito inamvel; ponto de ignio -16C, limites de inamao 737%.

Conservar os recipientes bem fechados e afastados de fontes de ignio. Evitar de respirar os vapores e contacto com a pele. Trabalhar em cmara de fumo ou local bem ventilado. Utilizar luvas de borracha ou plstico e proteco ocular.

Pode reagir vigorosamente com oxidantes. Reaces com magnsio ou bromo podem ser violentas e com oxidantes fortes ou clorofrmio com sdio podem ser explosivas.

MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

180

Naftilamina (alfa e beta) C10H9N N-fenil-a-naftilamina e N-fenil-b-naftilamina.

Cristais de cor branca a rosa com odor caracterstico; alfa: ponto de fuso 50C ponto de ebulio 301C; beta: ponto de fuso 113C ponto de ebulio 306C; pouco solvel em gua, mas o cloridrato solvel.

Ambos so muito txicos por inalao, ingesto e contacto com a pele. Cancergenos para o homem causando cancro da bexiga. Experincia mostra propriedades mutagnicas e teratognicas. Absorvidos atravs da pele.

Nidrina C9H6O4

Slido amarelo claro, decompondose a 241C. Fornecido em pulverizador numa soluo a 0,5% em butanol; solvel em gua.

Nocivo em ingesto e inalao. Irritante para os olhos, sistema respiratrio e pele. A exposio repetida pode causar sensibilizao cutnea.

Slido inamvel e combustvel; ponto de ignio -39C.

Evitar a inalao do aerossol ou dos vapores e o contacto com os olhos. Utilizar luvas de borracha ou plstico e culos de proteco para laboratrio de qumica.

O contacto com a pele produz uma marca violeta persistente.

ANEXO 5. PRODUTOS QUMICOS: PERIGOS E PRECAUES

181
No combustvel mas facilita a combusto de outras substncias. Evitar a disperso da poeira. Respeitar uma higiene rigorosa. Utilizar luvas de borracha ou plstico e viseira ou proteco ocular juntamente com proteco respiratria. No caso de contacto com os olhos, lavar com gua e consultar um mdico.

Nitrato de prata AgNO3

Cristais brancos; ponto de fuso 212C ponto de ebulio 444C; solvel na gua.

Pode causar irritao forte e queimaduras graves aos olhos e pele. Corrosivo em caso de ingesto. Pode causar uma colorao cutnea vermelha-azulada no caso de exposio prolongada ou repetida (argiria).

Solues amoniacais podem formar um precipitado explosivo de nitrito de prata na presena de base ou glucose. Pode formar produtos explosivos com etanol e causar polimerizao explosiva com acrilonitrilo. Risco de ignio de exploso se misturado com carvo, magnsio, fsforo ou enxofre.

PRODUTO QUMICO

PROPRIEDADES FSICAS

RISCOS PARA A SADE

RISCO DE INCNDIO

PRECAUES A TOMAR

PRODUTOS QUMICOS INCOMPATVEIS

OUTROS RISCOS

Nitrobenzeno C6H5NO2

Lquido oleoso amarelo claro com odor caracterstico; ponto de fuso 6C ponto de ebulio 211C.

Metemoglobinemia com cianose, leses hepticas; sintomas incluem lbios, unhas e pele que cam de cor azulada, vertigens, nuseas, fraqueza, perda de sentidos. Absorvido atravs da pele.

Combustvel; risco de incndio e exploso; ponto de ignio -88C.

Trabalhar com ventilao, exaustor local ou proteco respiratria. Utilizar luvas e roupa de proteco e culos de proteco.

MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

182
No combustvel mas facilita a combusto de outras substncias. O aquecimento faz aumentar a presso no recipiente com risco de rotura. Nada de chamas vivas, fascas, proibio de fumar, evitar o contacto com substncias inamveis.

A combusto liberta vapores corrosivos incluindo xidos de azoto. Reage violentamente com oxidantes fortes e redutores, com riscos de incndio e exploso. Ataca muitos plsticos. Forma substncias ou misturas explosivas (termicamente instveis) com muitos compostos orgnicos e inorgnicos. Forte oxidante, reage com matrias combustveis e redutoras com riscos de incndio e exploso. Reage com leos, gorduras, hidrognio e lquidos, slidos e gases inamveis.

Oxignio O2

Gs incolor comprimido; ponto de fuso -218,4C ponto de ebulio -183C.

Em fortes concentraes irritante para o sistema respiratrio.

Pentxido de fsforo P2O5

Cristais brancos higroscpicos ou p branco; ponto de fuso 340C ponto de sublimao 360C.

Trabalhar com exaustor local. Utilizar luvas e roupa de proteco, viseira ou proteco ocular com proteco respiratria.

A soluo aquosa um cido forte; reage violentamente com bases e corrosivo. Reage violentamente com o cido perclrico com risco de incndio e exploso. Reage violentamente com gua dando cido fosfrico. Em presena de gua, ataca muitos metais.

ANEXO 5. PRODUTOS QUMICOS: PERIGOS E PRECAUES

183

Corrosivo para os olhos, pele, sistema respiratrio provocando dores de garganta, tosse, sensao de queimadura, diculdades respiratrias; risco de queimaduras cutneas, dores, bolhas, queimaduras oculares. Inalao pode causar edema pulmonar. Ingesto pode provocar contraces abdominais, sensao de queimadura, diarreia, dores de garganta, vmitos.

No combustvel mas facilita a combusto de outras substncias. Muitas reaces podem causar incndio ou exploso. Liberta vapores (ou gases) txicos em caso de incndio.

PRODUTO QUMICO

PROPRIEDADES FSICAS

RISCOS PARA A SADE

RISCO DE INCNDIO

PRECAUES A TOMAR

PRODUTOS QUMICOS INCOMPATVEIS

OUTROS RISCOS

Permanganato de potssio KMnO4

Cristais violeta; ponto de fuso 240C (decomposio); facilmente solvel em gua.

Corrosivo em caso de ingesto ou inalao da poeira. Extremamente irritante para os olhos e sistema respiratrio. Inalao da poeira pode causar edema pulmonar.

Oxidante forte; pode inamar matrias combustveis.

Utilizar roupa de proteco, proteco ocular e uma mscara munida de ltro de partculas se houver produo de poeira.

Reage violentamente ou de maneira explosiva se misturado com uma grande variedade de compostos inorgnicos e orgnicos ou metais triturados.

MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

Perxido de hidrognio H2O2

184

Lquido incolor; ponto de fuso -39C (70%), ponto de ebulio 125C (70%); miscvel com gua, fornecido em soluo aquosa com vrias concentraes.

Corrosivo a forte concentrao (60%), e a baixa concentrao (6%) se o contacto com a pele for prolongado. As solues diludas so irritantes para os olhos, vias respiratrias e pele.

Oxidante; risco de incndio no caso de contacto com matria combustvel.

No caso de contacto com a pele, lavar imediatamente com muita gua. Utilizar luvas de borracha nitrilo e proteco ocular se a concentrao excede 20%.

Reage violentamente com diversas substncias qumicas incluindo oxidantes e bases. Ataca a maior parte dos metais ou seus sais, lquidos inamveis e outras matrias combustveis (papel, txteis), anilina e nitrometano.

Pode decompor-se libertando oxignio, provocando o aumento da presso no recipiente. Armazenar num local fresco e ao abrigo da luz. No utilizar recipientes ou equipamento metlico, p.e. lato, cobre, ferro.

Piridina C5H5N

Lquido incolor com odor caracterstico; ponto de fuso 42C ponto de ebulio 115C.

Trabalhar com ventilao, Reage violentamente exaustor local ou proteco com oxidantes e respiratria; utilizar luvas e cidos fortes. roupa de proteco.

ANEXO 5. PRODUTOS QUMICOS: PERIGOS E PRECAUES

185

Afecta o sistema nervoso central provocando vertigens, cefaleias, nuseas, diculdades respiratrias, perda de sentidos. Pode ser absorvido atravs da pele causando vermelhido e uma sensao de queimadura. Ingesto causa dores abdominais, diarreia, vmitos, fraqueza. Exposio repetida provoca problemas hepticos e renais.

Muito inamvel; ponto de ignio -20C, limites de exploso 1,812,4%. Liberta vapores (ou gases) irritantes ou txicos em caso de incndio. As misturas ar/vapor so explosivas.

PRODUTO QUMICO

PROPRIEDADES FSICAS

RISCOS PARA A SADE

RISCO DE INCNDIO

PRECAUES A TOMAR

PRODUTOS QUMICOS INCOMPATVEIS

OUTROS RISCOS

Prata Ag

Metal branco escurecendo em exposio ao ozono, sulfeto de hidrognio ou enxofre; ponto de fuso 170 217C ponto de ebulio 685C.

No combustvel excepto sob a forma de p.

Trabalhar com exaustor local. Utilizar luvas e culos de proteco ou proteco ocular com proteco respiratria para poeiras ou fumos.

Incompatvel com acetileno, compostos de amnio, cido oxlico e cido tartrico.

MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

186
Muito inamvel; ponto de ignio -112C, limites de inamao 2,312,7%. Manter o recipiente bem fechado e afastado de qualquer fonte de ignio. Trabalhar em cmara de fumo. Utilizar luvas de borracha nitrilo e proteco ocular.

A inalao de grandes quantidades de vapores de prata pode causar leses nos pulmes com edema pulmonar. No caso de exposio prolongada ou repetida (argiria) pode causar uma colorao cinzentaazul dos olhos, nariz, garganta e pele. Pode reagir vigorosamente com oxidantes para formar perxidos instveis no caso de exposio prolongada ao ar e luz. A soluo aquosa de propanol-2 a 7085% utilizada como desinfectante em aerossol continua a apresentar um risco de inamao e no deve ser utilizada perto de fontes de ignio.

Propanol-2 (CH3)2CHOH Isopropanol

Lquido incolor com odor alcolico; ponto de fuso -89C ponto de ebulio 82C; miscvel com gua.

Irritante para os olhos e sistema respiratrio. Pode afectar o sistema nervoso central causando cefaleias, vertigens, nuseas, vmitos e coma.

Selnio Se

Irritante para a pele e os olhos. A inalao de poeira pode causar edema pulmonar. A exposio repetida pode causar perda de unhas, distrbios gastrintestinais.

Combustvel. Liberta vapores (ou gases) irritantes ou txicos em caso de incndio.

Evitar a disperso da poeira. Respeitar uma higiene rigorosa. Trabalhar com exaustor local. Utilizar luvas, roupa e culos de proteco.

Reage violentamente com oxidantes e cidos fortes. Reage com a gua a 50C formando hidrognio inamvel e cidos de selnio. Reage com incandescncia por aquecimento brando na presena de fsforo e metais como nquel, potssio, platina, sdio e zinco.

ANEXO 5. PRODUTOS QUMICOS: PERIGOS E PRECAUES

187

Slido inodoro presente sob diversas formas: slido amorfo de vermelho escurocastanho a azulescuro, ou cristais de cor vermelha transparentes ou cinzento metlico a preto; ponto de fuso 170217C ponto de ebulio 685C.

PRODUTO QUMICO

PROPRIEDADES FSICAS

RISCOS PARA A SADE

RISCO DE INCNDIO

PRECAUES A TOMAR

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OUTROS RISCOS

Sulfeto de hidrognio H2S

Gs incolor com odor forte a ovos estragados; ponto de fuso -60C ponto de ebulio -85C.

Extremamente inamvel; limites de exploso 4,346%.

Trabalhar com ventilao com exaustor local. utilizar culos de proteco especiais ou proteco ocular juntamente com proteco respiratria.

Oxidantes fortes e cido ntrico concentrado. Ataca muitos metais e plsticos.

O odor emanado torna-se rapidamente saturado e no serve para prevenir da presena contnua do gs.

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188
Utilizar roupa de proteco.

Pode afectar o sistema nervoso central causando cefaleia, vertigens, tosse, dores de garganta, nuseas, diculdades respiratrias, sonolncia, vmitos, perda dos sentidos e morte. A inalao pode causar edema pulmonar. A nvel dos olhos, vermelhido, dores, queimaduras graves e profundas.

Telurite de potssio K2TeO3

Cristais brancos deliquescentes; muito solvel em gua.

Txico por ingesto e inalao de poeira. Irritante para a pele e olhos.

Tetracloreto de carbono CCI4

Lquido incolor com odor de ter caracterstico; ponto de fuso -23C, ponto de ebulio 76,5C.

No combustvel. Em caso de incndio liberta vapores ou gases irritantes ou txicos.

Evitar qualquer contacto. Trabalhar com ventilao, exaustor local ou proteco respiratria; utilizar luvas de borracha nitrilo e roupa de proteco, viseira ou proteco ocular completada com proteco respiratria.

Ao contacto de superfcies quentes ou chamas, decompe-se formando vapores e gases txicos e corrosivos (cloreto de hidrognio, cloro, fosgnio). Reage com certos metais como alumnio, magnsio, zinco.

ANEXO 5. PRODUTOS QUMICOS: PERIGOS E PRECAUES

189

Pode ser absorvido atravs da pele; pode causar dermatite no caso de exposio prolongada. Irritao ocular. Pode causar leses hepticas e renais e distrbios no sistema nervoso central que se traduzem por cefaleias, nuseas, ictercia ligeira, perda de apetite e narcose. Cancergeno para animais.

PRODUTO QUMICO

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RISCO DE INCNDIO

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OUTROS RISCOS

Tetra-hidrofurano C4H8O xido de dietileno xido de tetrametileno

Lquido incolor com odor caracterstico; ponto de fuso -108,5C ponto de ebulio 66C.

Depresso do sistema nervoso central causando narcose. Irritante para os olhos, pele e sistema respiratrio.

Trabalhar com ventilao, exaustor local ou proteco respiratria, luvas e culos de proteco.

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190

Muito inamvel; pode formar perxidos explosivos; ponto de ignio -14C. A gua pode ser inecaz para combater fogos implicando tetrahidrofurano, mas pode ser utilizada para arrefecer os recipientes expostos ao fogo.

Reage violentamente com oxidantes e bases fortes, e certos haletos metlicos, com risco de incndio e exploso. Ataca certas formas de plstico, borracha e revestimentos. O tetra-hidrofurano pode se polimerizar na presena de iniciadores catinicos. Reuxo com hidrxido de clcio pode provocar exploses.

Tetrxido de smio OsO4

Cristais amarelo claro com odor picante; ponto de fuso 40C ponto de ebulio 130C; sublima-se abaixo do seu ponto de ebulio; solvel em gua.

Muito txico por inalao, ingesto e contacto cutneo, causando queimaduras graves e irritao. No estado de vapor, slido e em solues corrosivo para a pele e o sistema respiratrio. A inalao pode causar edema pulmonar. Combustvel. Em caso de incndio, liberta vapores (ou gases) irritantes ou txicos. Evitar qualquer contacto; utilizar proteco ocular e luvas. Oxidantes.

Oxidante forte. No combustvel mas favorece a combusto de outras substncias.

Conservar os recipientes bem fechados num local bem ventilado. Trabalhar com o slido e solues em cmara de fumo ou sob chamin. Utilizar culos de proteco para laboratrio de qumica e luvas de proteco. Para preparar solues introduzir a ampola fechada no volume de gua desejado, tapar e agitar at partir a ampola.

ANEXO 5. PRODUTOS QUMICOS: PERIGOS E PRECAUES

191

o-tolidina (C6H3-(3CH3)-(4NH2))2 3,3-dimetil(1,1-bifenil)4,4-diamina

Cristais incolores; ponto de fuso 131C ponto de ebulio 200C; pouco solvel na gua.

Nocivo em caso de contacto ou ingesto. A poeira irritante para o sistema respiratrio e olhos. Provavelmente cancergeno para o homem.

PRODUTO QUMICO

PROPRIEDADES FSICAS

RISCOS PARA A SADE

RISCO DE INCNDIO

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PRODUTOS QUMICOS INCOMPATVEIS

OUTROS RISCOS

Tolueno C7H8 Metilbenzeno

Lquido incolor com odor caracterstico; ponto de fuso -95C ponto de ebulio 111C; no miscvel com gua.

Depresso do sistema nervoso central. Irritao dos olhos, membranas mucosas, pele. A exposio repetida pode ter efeitos txicos sobre a reproduo e o desenvolvimento humano.

Muito inamvel; o vapor pode causar fogo instantneo; ponto de ignio 4C, limites de inamao 1,47%. Meios de extino de um pequeno incndio: produtos qumicos secos, anidrido carbnico, espuma, vaporizao com gua ou gs inerte (azoto).

Manter o recipiente bem fechado e afastado de fontes de ignio; ligar os recipientes terra para evitar descargas de electricidade esttica. No inalar o vapor; utilizar proteco respiratria. Trabalhar em cmara de fumo ou em local bem ventilado. Utilizar luvas de borracha nitrilo.

Pode reagir com cidos fortes, bases e oxidantes.

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192

Tricloroetileno CHCICCI2

Lquido incolor com odor caracterstico; ponto de fuso -73C ponto de ebulio 87C.

Irritante para os olhos e pele; a exposio prolongada pode causar dermatite e afectar o sistema nervoso central resultando em perda de memria. Pode afectar o fgado e os rins. Provavelmente cancergeno para o homem.

Combustvel sob certas condies.

Trabalhar com ventilao ou exaustor local. Utilizar luvas, culos de segurana ou outro tipo de proteco ocular com proteco respiratria.

ANEXO 5. PRODUTOS QUMICOS: PERIGOS E PRECAUES

193

Ao contacto de superfcies quentes ou chamas, decompe-se formando gases txicos e corrosivos (fosgnio, cloreto de hidrognio). Decomposio ao contacto de bases alcalinas fortes produzindo dicloroacetileno; reage violentamente com metais em p como alumnio, brio, magnsio e titnio; decomposio lenta luz na presena de humidade, com formao de cido clordrico.

PRODUTO QUMICO

PROPRIEDADES FSICAS

RISCOS PARA A SADE

RISCO DE INCNDIO

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PRODUTOS QUMICOS INCOMPATVEIS

OUTROS RISCOS

Xileno (mistura de ismeros) C6H4(CH3)2 Dimetilbenzeno

Lquido incolor com odor aromtico; ponto de fuso -95 a -13C ponto de ebulio 136 145C; no solvel na gua.

Lquido inamvel; ponto de ignio 27 32C.

Evitar o contacto com os olhos, utilizar luvas de borracha nitrilo e proteco ocular. Manter o recipiente hermeticamente fechado e afastado de fontes de ignio.

Pode conter etilbenzeno como impureza. O etilbenzeno possivelmente cancergeno para o homem.

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194

Pode afectar o sistema nervoso central resultando em cefaleias, vertigens, fadiga e nuseas. Lquido e vapor irritantes para os olhos, pele, membranas mucosas, sistema respiratrio. Nocivo em caso de ingesto. Contacto cutneo prolongado pode provocar secura da pele. Insucincia neurolgica no especca. Exposio pode reforar leses auditivas provocadas por exposio a barulho. A experimentao animal sugere efeitos indesejveis para a reproduo e o desenvolvimento humanos.

ndice remissivo

abraso 84 caros 35 acesso instalaes para animais 31, 32, 33 laboratrio 10, 22, 27 acetaldedo 154 acetato de tlio 154 acetileno 155 acetona 155 acetonitrilo 156 acidentes 11 relacionados com equipamento 152 ver tambm primeiros socorros; ferimentos; derrames cido actico 156 cido clordrico 157 cido crmico 157 acido fosfrico 158 cido ntrico 158 cido oxlico 159 cido perclrico 116, 159 cido pcrico/pricatos 116, 160 cido sulfrico 160 cido tricloroactico 161 acrolena 161 aerossis actividades geradoras de 53 cmaras de segurana biolgica 1516, 53 equipamento de segurana e 64 potencialmente infecciosos, libertao de 84 riscos de pipetagem 66 agulhas, hipodrmicas 11, 80, 149150 eliminao 18 alarmes 22, 62 lcool 93

lcool/produtos base de lcool 93, 95 alergia, ltex 69 2-aminoetanol 173 amostras 73 recolha 79 recipientes 73, 79, 102 etiquetagem 79 com informaes limitadas 8 abertura de embalagens 73 abertura de tubos e contedos de 79 recepo 73 precaues padro 79 transporte 73, 79 sistema de embalagem tripla 101, 102 amonaco ver solues de ampolas de materiais infecciosos abertura 78 armazenagem 79 anidrido actico 162 anilina 162 animais eliminao de carcaas 32 no destinados a experincias 10, 32 transgnicos e knock-out 108109 ansas de transferncia descartveis 16, 65, 67 microincineradores 65, 67 utilizao segura 74 antecmaras 22, 32, 33 antimicrobial 87 anti-spticos 87, 92, 93 aparelhos de banho-maria 151 ar, exaustor ver exaustor de ar rea de irradiao 121 reas de trabalho, laboratrio 11

195

MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

armagenagem ampolas de materiais infecciosos 78 espao, laboratrio 12 gases comprimidos e liquefeitos 117, 136 instalaes, lista de controlo 133134 lquidos inamveis 136 produtos qumicos 115 artrpodes controlo de 12, 32 instalaes anti- 35 Associao de Transporte Areo Internacional (IATA) 100 auramina 163 autoclaves 66, 9698 carregamento 97 de deslocao da gravidade 96, 97 de pr-vacuum 96 disponibilidade 14, 16, 22, 29 instalaes para animais 33, 34 passagem com duas portas 27, 29 precaues na utilizao 97 tipo panela de presso por aquecimento exterior 96 validao 16 avaliao de risco, microbiolgico 2, 78 instalaes para animais 3031 organismos geneticamente modicados 109110 aventais 68, 69 azida de sdio 163 azidas 116, 163 bancadas 12 batas 68, 69 batedores 67, 77 beber 11, 13, 32 benzeno 164 benzidina 164 bicarbonato de amnio 95 bicarbonato de sdio 117 bicos de Bunsen 74, 75 1,1bifenil-4,4-diamina 164 biocida 87 bisselenito de sdio 165 blusas 68, 69 boas tcnicas microbiolgicas (GMT) 912, 7382

brometo de cianognio 165 bromo 166 caixa de primeiros socorros 146 caixas isolantes 32, 34 caixas/gaiolas animais 32, 33 insectos voadores 3435 calado 11, 21, 26, 68 calor desinfeco e esterilizao 96, 98 hmido 96 seco 96 cmara de exaustor mximo 59 cmaras de segurana biolgica (CSB) 5363, 64 certicao 61 classe I 5355, 58 classe II 5455, 58 classe III 57, 58 contaminao por pries 8182 descontaminao 62, 95 escolha 54, 59 funcionamento e manuteno 60 instalaes para animais 32 laboratrio 2628 ligaes de ar 59 localizao 22, 59 tipo A1 5556 tipos A2, B1 e B2 56, 57 utilizao exigida 16, 22, 23 utilizao segura 5962, 75 cmaras de vcuo 27, 28, 33 cmaras horizontais e verticais de escoamento 53 capas ver equipamento/vesturio de proteco pessoal carbonato de sdio 117 4,4-carbonimidoilbis (N,Ndimetilbenzenamina) 163 carraas 35 carto de contacto mdico 2324, 25 centrifugadoras 7677, 150 acessrios de connamento 23 quebra de tubos 8485 utilizao incorrecta 152 Centros Colaboradores da OMS para a Segurana Biolgica 148

196

NDICE REMISSIVO

certicao cmaras de segurana biolgica 61 laboratrio/instalao 3940 chamas, abertas 61, 74 chuveiros 27, 33 cianeto de sdio 167 citochalasina 167 cloraminas 89, 90 cloreto de hidrognio 157 cloro 8991, 168 clorofrmio 169 cobre 169 cdigos de prticas Nvel 1 e 2 de Segurana Biolgica 912 Nvel 3 de Segurana Biolgica 2122 Nvel 4 de Segurana Biolgica 26 comer 11, 13, 32, comida 11 Comisso de Especialistas das Naes Unidas sobre o Transporte de Mercadorias Perigosas (UNCETDG) 100 comisso de segurana biolgica 126 compostos de amnio quaternrio 92 compostos fenlicos 92 compostos que libertam cloro 8991 concepo, laboratrios Nvel 1 e 2 de Segurana Biolgica 1214, 16 Nvel 3 de Segurana Biolgica 2223, 24 Nvel 4 de Segurana Biolgica 2628 requisitos de scalizao e 36 connamento primrio 2627 connamento, primrio a Nvel 4 de Segurana Biolgica 2526 congeladores 7879 congeladores (liolizadores) 151 controlo de roedores 12, 31 cortes 84 cosmticos/maquilhagem 11 crianas 10 CSB ver cmaras de segurana biolgica derrames em cmaras de segurana biolgica 61 materiais infecciosos 11, 84, 101103

produtos qumicos 116117 sangue 80 desastres naturais 83, 85 descontaminao cmaras de segurana biolgica 62, 94 denio 87 euentes 11, 28 mos 95 materiais contaminados por pries 80 meio ambiente local 94 resduos 18, 23 sangue/udos corporais 80 ver igualmente limpeza; desinfeco descontaminao das mos 95 desinfeco 8797 calor 9698 cmaras de segurana biolgica 62 denio 87 derramamentos 101103 limpeza prvia 87, 88 produtos qumicos 8894 resduos 19 ver igualmente descontaminao; esterilizao desinfectantes 87, 8894 dicloroisocianurato de sdio 89, 90 3,3-dimetil-(1,1-bifenil)-4,4-diamina 191 dimetilamina 170 dimetilbenzeno 194 2,4-dinitrofenil-hidrazina 170 dioxana 171 dixido de carbono, slido (gelo seco) 171 dixido de cloro 91, 172 dixido de dietileno 171 director de laboratrio 12, 125 disjuntores 119 disperso de materiais infecciosos, evitar 74 dissecadores 150 doena Creutzfeldt-Jakob (CJD) 80 drenos de conteno 29 euentes, contaminados 11, 28 emergncias 8386 laboratrio 84, 86 nvel 4 de segurana biolgica 26, 29 planos de 83 engenharia gentica 107

197

MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

encefalopatia espongiforme transmissveis (TSE) 80 equipamento de proteco pessoal ver equipamento/ vesturio de proteco pessoal emergncia 86 laboratrio bsico 1416 laboratrio de connamento 23 riscos 149152 segurana 6470 lista de controlo 138 equipamento de ar limpo 53 equipamento/vesturio de proteco pessoal 6769 cmaras de segurana biolgica 62 instalaes para animais 32, 34 laboratrio de base 1011 laboratrio de conteno mxima 26, 27 laboratrio de conteno 2122 lista de controlo 137 pries 8082 escafandro/fato pressurizado 27 Escherichia coli K12 102 escudo contra salpicos 62 esfregaos para microscopia 80 esporocida 88 esterilizao 29, 8799 calor 9698 denio 87 limpeza prvia 87, 88 materiais contaminados por pries 80 ver igualmente descontaminao; desinfeco esterilizao em autoclave 18, 9698 etanol (lcool etlico) 93, 172 etanolamina 173 teres 116 ter dietlico 173 etiquetagem, amostras 79 exaustor de ar cmaras de segurana biolgica 23, 28, 53, 5457, 59 instalaes para animais 32 laboratrio de conteno mxima 26, 27 laboratrio de conteno 21, 22

excrees, precaues de base 7980 extintores de incndio 118119 fatos, de laboratrio 68, 69 N-fenil--naftilamina 180 N-fenil--naftilamina 180 fenol 174 ferimentos medidas de emergncia 84 pessoal em instalaes para animais 32 preveno 7576 ferimentos com agulhas, evitar 76 fervura 96 ltros de ar particulado de alta ecincia (HEPA) cmaras de segurana biolgica 53, 55, 59 contaminao por pries 82 instalaes para animais 33 nvel 3 de segurana biolgica 22, 23 nvel 4 de segurana biolgica 27, 28 ltros de ar ver ltros HEPA Ar Particulado de Alta Ecincia ltros HEPA ver ltros de ar particulado de alta ecincia scal 3637 scalizao, laboratrio/instalao 3638 udos corporais, precaues de base 7980 uxo de ar, direccional alarmes 22, 62 cmaras de segurana biolgica 55, 57 instalaes para animais 31, 32, 33 nvel 3 de segurana biolgica 22 nvel 4 de segurana biolgica 26, 29 formao 129130 proteco biolgica 49 trabalhadores de laboratrio 17 trabalhadores em instalaes para animais 32, 33 utilizao de cmaras de segurana biolgica 63 formaldedo 91, 94, 175 formalina 91, 94 fornecimento de gua 14, 23 fornecimento de electricidade 14, 29 forro, animais 32, 34

198

NDICE REMISSIVO

fotmetro de chama 152 frigorcos 78, 152 fumar 11, 32 fumigao 94 garrafas anaerbicas/incubadoras 150, 152 garrafas com tampa de rosca 16, 66 garrafas vazias 152 gases comprimidos e liquefeitos 117, 136 fornecimento a laboratrio 14 geradores de ultra-sons 67, 77, 80, 151 germicidas qumicos 87, 8894 glutaraldedo 175 grupos de risco, microbiolgico classicao 12 laboratrios de base 9 nveis de segurana biolgica e 22 1-hidrazino-2,4-dinitrobenzeno 170 hidrxido de potssio 176 hidrxido de sdio 176 hipocloreto de clcio 89 hipocloreto de sdio (lixvia) 8990, 94, 177 homogeneizadores 67, 77, 150 iluminao 13, 14, 134 imunizao, do pessoal 147 incndios 19, 118119 causas 118, 152 lista de controlo de preveno e proteco 135136 medidas de emergncia 84 incinerao 19, 9899 incineradores 33, 98 ingesto de material infeccioso 75, 84 inoculao, acidental 7576 insectos, voadores 34 inspeco, laboratrio 3940 instalaes para animais 10, 3035 Nvel 1 de Segurana Biolgica: 31 Nvel 2 de Segurana Biolgica: 3132 Nvel 3 de Segurana Biolgica: 3233 Nvel 4 de Segurana Biolgica: 3334 nveis de connamento 30 invertebrados 34

instalaes para descanso 13 instalaes, laboratrio classicao dos nveis de segurana biolgica 1 nvel 1 e 2 de segurana biolgica 1214 nvel 3 de segurana biolgica 2223, 24 nvel 4 de segurana biolgica 2629 interruptores diferenciais 119 invertebrados 34 iodo 93, 178 iodoforos 93 irradiao, ionizante 19, 120122 bancada de trabalho 122 efeitos nocivos 120 lista de controlo de segurana 139 princpios de proteco 120122 isoladores de presso negativa em plstico exvel 64, 66 isopropanol (lcool isoproplico) 93, 186 janelas instalaes para animais 32, 33, 34 instalaes para invertebrados 34 laboratrio 12, 14, 22 laboratrio reas de trabalho 11 certicao 3940 scalizao 3638 formulrios de vistoria da segurana 4146 instalaes ver instalaes, laboratrio locais, lista de controlo de segurana 133 nveis de segurana biolgica ver nveis de segurana biolgica proteco biolgica 4950 servios, lista de controlo de segurana 134135 tcnicas 7382 ver igualmente laboratrio de base; laboratrio de connamento; laboratrio de connamento mximo

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MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

laboratrio bsico (Nveis 1 e 2 de Segurana Biolgica) 1, 920 cdigo de prticas 912 concepo e instalaes 1214, 16 equipamento 1416 formao 17 formulrios de vistoria 4145 manuseamento de resduos 1819 segurana qumica, elctrica, do equipamento e contra incndios e radiaes 20 vigilncia sanitria e mdica 4145 laboratrio com cmaras de Classe III 2628 sistema de ar controlado 2728 laboratrio com escafandro 27 sistema de ar controlado 2728 laboratrio de connamento (Nvel 3 de Segurana Biolgica) 1, 3, 2124 cdigo de prticas 2122 concepo e instalaes 2123, 24 equipamento 23 formulrios de vistoria 46 vigilncia sanitria e mdica 2324, 25 laboratrio de connamento mximo (nvel 4 de segurana biolgica) 1, 3, 2628 cdigo de prticas 26 concepo e instalaes 2628 lmpadas ultravioleta 61 ltex, alergia 69 lavagem das mos 10, 70, 95 instalaes 14, 22, 32 pessoal de instalaes para animais 32 lentes de contacto 11 limpadores a ultra-sons 151 limpeza cmaras de segurana biolgica 62 frigorcos e congeladores 78 materiais de laboratrio 88 pessoal de 128 limpeza prvia 87, 88 limpeza, derramamentos 101103 linhas de vcuo 23, 66 liolizadores 151 lquidos/euentes contaminados 11, 28 lquidos inamveis, armazenagem de 136

lista de controlo de segurana 133139 lixvia (hipocloreto de sdio) 8990, 94, 177 luvas 10, 62, 68, 69 materiais infecciosos contacto com a pele e os olhos 75 derramamentos 11, 84, 101103 descontaminao em autoclave e utilizao ulterior 19 descontaminao de, ver descontaminao eliminao 18, 19, 23 evitar a disperso 74 ingesto 75, 84 lista de controlo de segurana 138139 material contaminado ver material infeccioso material cortante 19 evitar ferimentos 69, 7576, 79 instalaes para animais 30 recipientes para eliminao de 19, 66 material de emergncia 86 material de segurana ver equipamento, segurana material infeccioso liolizado, abertura de ampolas 78 meios de arrefecimento, artrpodes 34 meios de comunicao 26 mercrio 179 metanol 180 metilbenzeno 192 microbicida 88 microincineradores 65, 67 microrganismos infecciosos, grupos de risco ver grupos de risco, microbiolgico microscopia, esfregaos para 80 misturadores 67, 77 mobilirio, laboratrio 13 mulheres em idade de reproduo 17, 138 Naftilamina 180 Nidrina 181 nitrato de prata 181 nitrobenzeno 182

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NDICE REMISSIVO

Nvel 1 de segurana biolgica: 1, 3, 920 concepo do laboratrio 1214 formulrio de vistoria de segurana biolgica 4143 instalaes para animais 31 vigilncia sanitria e mdica 16 ver igualmente laboratrio bsico Nvel 2 de segurana biolgica: 1, 3, 920 concepo do laboratrio 1214, 16 formulrio de vistoria de segurana biolgica 4445 instalaes para animais 3132 vigilncia sanitria e mdica 16 ver igualmente laboratrio bsico Nvel 3 de segurana biolgica: 1, 3, 2124 concepo do laboratrio 2223 formulrio de vistoria de segurana biolgica 46 instalaes para animais 3233 ver igualmente laboratrio de connamento Nvel 4 de segurana biolgica: 1, 3, 2629 concepo do laboratrio 2629 instalaes para animais 3334 ver igualmente laboratrio de connamento mximo nveis de connamento, instalaes para animais 30 ver igualmente nveis de segurana biolgica nveis 1 de segurana biolgica grupos de risco microbiolgico e 13 instalaes para animais (NSBIA) 30 requisitos de instalaes 3 culos de proteco 6869 culos de segurana 6869 OGM ver organismos geneticamente modicados organismos geneticamente modicados (OGM) 101104 avaliaes de risco 109110 outras consideraes 110 tipos 108109 Organizao da Aviao Civil Internacional (ICAO) 100

Organizao Mundial da Sade (OMS) Centros Colaboradores em Segurana Biolgica 148 programa de segurana biolgica 26 xido de crmio VI 157 xido de dietileno 190 oxido de tetrametileno 190 oxignio 182 paraformaldedo 91, 94 paredes 12, 22 pavimentos (solos) 12, 22 pele contacto com 75 ferimentos por picadelas, cortes e abraso 84 ver igualmente ferimentos pentxido de fsforo 183 pracidos 94 perodos de garantia, laboratrio/instalao 36 permanganato de potssio 184 perxido de hidrognio 94, 95, 184 pessoal apoio 128 controlo da segurana biolgica 12 instalaes, lista de controlo 134 objectos pessoais/vesturio 13 questes de proteco biolgica 49 responsabilidade pela sua prpria segurana 125 vacinao 147 ver igualmente formao ver igualmente vigilncia mdica e sanitria pessoal auxiliar 128 pessoal de manuteno 128 pipetagem 74 auxiliares de 15, 65, 66, 74 com a boca 11, 63 pipetas 16, 74 piridina 185 planos de emergncia 83 plantas transgnicas 107, 109 plasmdio pUC18 108 portas instalaes para animais 29 laboratrio 14, 22, 27

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MANUAL DE SEGURANA BIOLGICA EM LABORATRIO

prata 186 precaues de base 7980 precaues de proteco 15, 135 precaues universais 7982 primatas, no humanos 29 primeiros socorros 14, 146 pries 8082 produtos para lavar as mos, base de lcool 93, 95 produtos qumicos (perigosos) 20, 115117 armazenagem 115 cmaras de segurana biolgica 59 derrames 116117 efeitos txicos 115116 especcos 153 explosivos 108, 152 incompatveis, regras gerais 115116 lista de controlo de segurana 138139 vias de exposio 115 produtos qumicos explosivos 116, 152 propano-2-ol (2-propanol) 93, 186 proteco auditiva 119 proteco biolgica 4950 proteco de produtos 53, 55 proteco facial 11, 6869 proteco ocular 11, 6869, 75 radionclidos cmaras de segurana biolgica 59 prticas de trabalho seguras 120122 substituio 121 ratos susceptveis a poliovrus 109 recipientes amostras 73, 79, 101 estanques 65 material cortante 19, 66 partidos 84 resduos contaminados 1819 redes prova se artrpodes 34 regra das duas pessoas 26, 33 regulamentos sobre transportes internacionais 100101 resduos 1819 contaminados com pries 80 descontaminao 18, 23 eliminao 1819, 2324, 99 instalaes para animais 32, 33

instalaes para invertebrados 34 nvel 4 de segurana biolgica 29 radioactivos 122 resduos radioactivos 122 respiradores (equipamento de proteco respiratria) 22, 6869 responsvel da segurana biolgica 17, 125126 riscos elctricos 20, 119, 152 lista de controlo de segurana 137 roupa de laboratrio 67, 68 rudo 119 saneamento 134 sangue, precaues de base 7980 sapatos ver calado segurana biolgica controlo 12 versus proteco biolgica 49 selnio 187 separadores de tecidos 78, 142 seringas 11, 17, 19 servios de emergncia 86 servios de manuteno de instalaes 128 servios tcnicos 128 smbolo de risco de irradiao 122 sinal de risco biolgico 108 sistema de aquecimento, ventilao e ar condicionado (HVAC) 22 lista de controlo de segurana 134 sistemas de ar cmaras de segurana biolgica 5354, 5556, 5859 escafandro 27 ver igualmente sistemas de ventilao sistemas de embalagem 101, 102 sistemas de embalagem tripla 101, 102 sistemas de expresso biolgica 108 sistemas de ventilao instalaes para animais 31, 33, 34 laboratrio de base 14 laboratrio de connamento mximo 27 laboratrio de connamento 22 lista de controlo 134 soda calcinada 117 solos (pavimentos) 12, 22

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NDICE REMISSIVO

solues de amonaco 161 soro, separao 76 sulfeto de hidrognio 188 superfcies de trabalho instalaes para animais 32 laboratrio 11, 12 supervisor de laboratrio 12, 125 papel de formador 17, 129 surtos, doenas de etiologia desconhecida 8 tampa de rosca, garrafa/tubo 16, 66 tecidos contendo pries 80 precaues de base 80 tecnologia recombinante ADN 107111 tectos 12, 22 telurite de potssio 188 tetracloreto de carbono 189 tetra-hidrofurano 190 tetrxido de smio 191 o-tolidina 191 tolueno 192 transferncia de genes 107, 108 transporte 12, 100103 amostras 73, 79 regulamentos internacionais 100101 resduos infecciosos 19, 23 sistema de embalagem tripla 101, 102 tricloroetileno 193 triclosan 92

2,4,6-trinitrofenol (cido pcrico) 116, 160 tubos com tampa de rosca 16 partidos em centrifugadoras 85 ultracentrifugadoras 150 validao, equipamento 16 vectores 108 vectores de expresso 108 vectores virais 108 vesturio/roupa, de proteco ver equipamento/roupa de proteco pessoal vidro 80 manuseamento de vidro partido 84, 85, 103 precaues em utilizao 76, 80 vigilncia mdica ver vigilncia sanitria e mdica vigilncia sanitria e mdica laboratrio de base 16 laboratrio de connamento 2324, 25 lista de controlo 129 viseiras 11, 6869 vistoria, segurana em laboratrio 3940 formulrios 4146 xileno 194

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