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34 1.I~uIg.n .~u.n 1~:~u:I:.u~uI - u 2U - un.

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+HOFJ???KI
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/sjet|es meleteleres e ejl1emleleltes
lotos codidas polos autoros
Ayrc A1cT1ry 1aaT1
MS M.:.Ig.n
1uI:nuun ~u 1.Ig.n ~IuIn: ~ MI~uIn:
U1RS
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MI~uIn: ~ 1.I~uIg.n ~ 1~:gu.:nu: u
~uI: u~ 1.I~uIg.n 1.I U1RS
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Mar1Tcrc Hcrr1ry 1a1r1c1r
1I1, 1:J~:::n uuuIn u 1~jI u~
M.:.Ig.n ~ 1~:gu.:nu:n u ~uI: u~
1.I~uIg.n, 1.I, U1RS
uI:6uun.IuJ:g::
O mIcrorganIsmo
laxonomicamonto, os organismos
agrupados no Roino lungi so, om
goral, ospcios saprtitas, quo so adap-
tam, para croscimonto, a uma grando
variodado do condios amliontais, com
oxigncias nutricionais mnimas, com
corca do 200 ospcios comprovadamon-
to associadas a intocos humanas.
Aposar do poquono numoro do ospci-
os onvolvidas, a incidncia do intocos
tungicas tom croscido, solrotudo na
ultima dcada, como a intoco hospi-
talar, ou intoctando indivduos com o
sistoma imuno compromotido.
O :,jIu: u~J:unu: toi idon-
titicado como patgono humano om
1894. Sua importncia clnica tom au-
montado drasticamonto, om virtudo da
incidncia da AlDS tSndromo da lmu-
nodoticincia Adquirida) a partir do
1981. O tormo criptococoso utilizado
para dotinir a intoco causada polo
tungo lovoduritormo oncapsulado
u~J:unu: Isso microrganismo podo
causar intoco om indivduos hgidos,
ontrotanto, a maior proporo do hu-
manos acomotidos ocorro naquolos di-
tos imunocompromotidos. A doona
caractorizada por um primoiro ostgio,
ondo a intoco tica dolimitada ao sisto-
ma rospiratrio, podondo assumir as tor-
mas aguda, sulaguda ou cronica. Podo,
ainda, aprosontar-so como uma intoco
socundria, rosultanto da dissominao
para o sistoma norvoso contral, stio polo
qual a lovodura aprosonta tropismo, po-
dondo acarrotar quadros do moningito,
oncotalito ou moningooncotalito.
Atualmonto, a grando maioria dos
casos do criptococoso sintomtica ocorro
om paciontos imunocompromotidos. lsso
roprosonta uma mudana na opidomiolo-
gia do intocos criptoccicas dosdo 1950,
quando os casos oram doscritos om indi-
vduos aparontomonto hgidos. u~J:-
unu: um tungo cosmopolita o tm sido
rolatados casos do criptococoso om todas
as rogios do mundo. O tungo um
organismo do vida livro, quo podo solro-
vivor om variados nichos amliontais o
paroco no sor um comonsal humano. A
transmisso da criptococoso ontro huma-
nos raramonto documontada o a pro-
sona comum do u~J:unu: no am-
lionto indica quo a intoco humana
provavolmonto adquirida do tontos amli-
ontais. onsidorando as intocos opor-
tunistas quo acomotom paciontos porta-
doros do HlV, a criptococoso a quarta
causa mais troquonto do intoco. O
numoro crosconto do paciontos portado-
ros do HlV no Brasil rotloto aumonto nas
intocos causadas por osso tungo pato-
gnico. Do acordo com dados do Vinis-
trio da Saudo - oordonao Nacional
do DSlAlDS, no porodo comproondido
ontro 1980 o 199, 4,3/ das intocos
oportunistas associadas a paciontos com
HlV toram causadas por u~J:unu:
tlovi, 1998).
Im tormos clnicos, o u~J:unu:
aprosonta-so, grando parto das vozos, na
torma lovoduritormo, onvolta por oxton-
sa cpsula do naturoza polissacardica,
FIgura 1: Portil do ampliticao por RAPD, com a utilizao do
ditorontos j:.u~::. tA) OPG3, V, 100 lp laddor, 1, nuu.un nI.nu:,
2, T:.I:j:u uu.u~:, 3-11, isolados clnicos o amliontais do
u~J:unu:. tB) OPG10, V, 100 lp laddor, 1, T. uu.u~:, 2-14,
isolados clnicos o amliontais do u~J:unu:
1.I~uIg.n .~u.n 1~:~u:I:.u~uI - u 2U - un.uuI 2UUI 35
quo podo sor oncontrada no lquor, om
socos do tocidos o no oscarro. A
mosma corrospondo torma assoxuada
dosso microrganismo o sua roproduo
ocorro por lrotamonto. Introtanto, osso
microrganismo tamlm podo so ropro-
duzir soxuadamonto, corrospondondo
ao ostado portoito, sondo, nosso ost-
gio, donominado 1.In:.u.~IIn u~J:-
unu:. A torma toloomrtica tom como
caractorstica principal a produo do
lasidiosporos o, ocasionalmonto, psou-
do-hitas.
O oxamo do u~J:unu: por
microscopia ptica, com a utilizao do
mtodos tradicionais como a propara-
o com tinta da lndia, rovola clulas
lovoduritormos do tamanho varivol,
com dimotro mdio do 4 a 6 mm,
usualmonto ovais ou rodondas, com um
duplo contorno quo as tornam altamon-
to rotrtois.
A prosona do cpsula polissacardi-
ca uma caractorstica distintiva om
rolao a outras lovoduras do importn-
cia mdica. O polissacardoo capsular
atua como um tator do virulncia do
uma manoira anloga quolas do lact-
rias oncapsuladas, tais como SI:~jI-
u: ju~uuu.n, Hn~ujI.Iu: .uJIu~u-
zn~ o N~.::~:.n u~u.ug.I.u.: tPirotski 8
asadovall, 1996). Intro outros tatoros,
associados com a virulncia do u~-
J:unu:, podom sor citados a prosona
da onzima tonoloxidaso, quo sintotiza
molanina o outros pigmontos a partir do
uma variodado do procursoros tonlicos
o da onzima uroaso, rosponsvol pola
hidrliso da uria, somadas capacida-
do do croscimonto a 3.
A naturoza polissaca-
rdica da cpsula, quo
consisto, principalmonto,
om polissacardoos glicu-
ronoxilomanana, galacto-
xilomanana o manopro-
tona, pormito a sua sopa-
rao om cinco soroti-
pos, agrupados om duas
variodados: u~J:-
unu: var. u~J:unu:
tsorotipos A, AD o D) o
u~J:unu: var. gnII..
tsorotipos B o ) tSorroll
~I nI, 1996). Introtanto,
ostudos rocontos sugorom
uma nova classiticao:
u~J:unu: var. g:u-
.. tsorotipo A) o u~-
J:unu: var. u~J:unu:
tsorotipo D), amlos do
distriluio mundial,
u~J:unu: var. gnII..
tsorotipos B o ), rostritos a rogios do
clima tropical o sultropical tlranzot ~I
nI., 1999, Stoonlorg ~I nI., 2000). lais
variodados aprosontam ditoronas sig-
niticativas tanto om quostos mortotisi-
olgicas quanto om distriluio o hli-
tat.
EcoIogIa c EpIdcmIoIogIa
Divorsos ostudos opidomiolgicos
tm sido roalizados para molhor com-
proonso do comportamonto mundial
do u~J:unu:. Normalmonto, nota-
so um prodomnio das linhagons do
u~J:unu: var. u~J:unu:, quando
comparadas com a provalncia do isola-
montos tanto do amlionto quanto do
casos clnicos, om rolao s linhagons
do u~J:unu: var. gnII.. Ocorro,
tamlm, uma associao ospoctica do
u~J:unu: var. u~J:unu: com
solos o oxcrotas do avos o do u~J:-
unu: var. gnII.. com rvoros do 1u-
nI,jIu: nunIuuI~u:.:. Os roproson-
tantos rolativos aos sorotipos A o D
goralmonto so oncontram halitando
solos o tozos do avos domsticas -
pomlos o porus - sondo, usualmonto, o
agonto causador da criptococoso om
paciontos imunocompromotidos, j a
var. gnII.. tom sido associada a oucalip-
tos, intoctando paciontos dosprovidos
do complicaos imunolgicas.
As oxcrotas do pomlos pormitom a
solrovivncia do u~J:unu: var.
u~J:unu: por um longo tompo o os
cultivos podom pormanocor vivois at
dois anos quando mantidos om oxcrotas
do pomlo dossocadas. linhagons do
u~J:unu: quando croscom om oxcro-
tas do pomlos goralmonto aprosontam
uma cpsula poquona, s vozos impor-
coptvol, com um dimotro do 1,0 a 5,5
mm. O dosonvolvimonto dossa varioda-
do om oxcrotas do avos provavolmonto
so dovo adaptao lioqumica, quo
consisto na halilidado do assimilar cro-
atinina, lom como cido urico o purinas
como tontos do nitrognio, compostos
ostos oncontrados om alundncia nos-
so nicho ocolgico. Aposar do tamlm
sor capaz do assimilar croatinina,
u~J:unu: var. gnII.. no ost associa-
do a oxcrotas do avos. lalvoz isso so
dova a ditoronas na rogulao das
onzimas rosponsvois polo motalolis-
mo do croatinina.
O papol dos pomlos na dissomina-
o do u~J:unu: no amlionto no
ost totalmonto comproondido aposar
do considorvol numoro do oxporimon-
tos roalizados por divorsos posquisado-
ros. Dovido alta concontrao do
u~J:unu: om oxcrota do pomlos, a
alta provalncia do pomlos om muitas
roas urlanas o o risco do intoco
criptoccica om humanos, oxisto consi-
dorvol intorosso na rolao ontro os
pssaros, suas oxcrotas o a criptococoso
humana.
As ovidncias sugorindo as oxcrotas
do pomlos como tonto do intoco
humana so contirmadas pola idontiti-
cao das mosmas linhagons om oxcro-
tas do pomlos o om isolados do amos-
tras clnicas por mtodos do tipagom do
DNA om ostudos indopondontos tlran-
zot ~I nI., 199). A doscolorta do part-
culas intocciosas do u~J:unu: om
oxcrotas do pomlos com um tamanho
compatvol com doposio alvoolar, a
rocuporao do u~J:unu: do ar
solro stios contaminados com oxcrotas
do avos, a virulncia das linhagons iso-
ladas o a alta provalncia do anticorpos
om inquritos sorolgicos o tostos intra-
drmicos om criadoros do pomlos tam-
lm trazom sulsdios para sugorir quo
a origom amliontal da intoco soja
provonionto dossas tontos amliontais.
Introtanto, oxistom muitas quostos
no rospondidas a rospoito da ocologia
do u~J:unu: o da patognoso hu-
mana, quo possam, dotinitivamonto,
associar linhagons om oxcrotas do pom-
los com aquolas quo causam intoco
om humanos. Um oxomplo dossa diti-
culdado a incortoza do quo uma intoc-
o soja rosultanto do uma oxposio
aguda ou a roativao do uma intoco
latonto, sondo ditcil tazor a ligao
ontro casos do intoco o do tontos
FIgura 2 - Portil do ampliticao por RAPD
do amostras do u~J:unu: oltido com o
j:.u~: R-2. V, marcador laddor 100pl, 1,
Al 32045 tsorotipo A), 2, Al 24065
tsorotipo B), 3, Al 24066 tsorotipo ), 4,
Al 2895 tsorotipo D), 5 o 8, isolados
clnicos t36 o 5), 6 o , isolados amliontais
tA6 o A), 9, controlo nogativo
36 1.I~uIg.n .~u.n 1~:~u:I:.u~uI - u 2U - un.uuI 2UUI
pontuais no amlionto. I possvol quo
linhagons do u~J:unu: var. u~J:-
unu: om oxcrotas do pomlos so origi-
nom do uma torcoira, ainda no doscolor-
ta, tonto amliontal.
Dctcco do poIImorIIsmo
Nosso tralalho tom onvolvido ostu-
dos solro alguns aspoctos opidomiolgi-
cos da criptococoso, ondo procuramos
caractorizar lioqumica, mortolgica o
gonoticamonto isolados clnicos o amli-
ontais do u~J:unu: oltidos no Ista-
do do Rio Grando do Sul. As amostras
toram caractorizadas tonotipicamonto por
anliso do portil do assimilao do carloi-
dratos, da tormao do cpsula, da susco-
tililidado a drogas antitungicas o do tostos
do assimilao do nitrato o uria. Os
isolados oltidos toram classiticados como
u~J:unu: pola produo do colonia
marrom om gar Nigor a 3
o
, tosto posi-
tivo da uroaso, tosto nogativo do nitrato,
polo portil do assimilao do 20 ditorontos
tontos do carloidratos, o polo tosto do
aglutinao om ltox tlatox-rypto Anti-
gon Dotoction Systom - immuno-Vycolo-
gics, lnc.).
A comproonso da opidomiologia o
das caractorsticas patognicas do u~-
J:unu: podo, atualmonto, sor auxiliada
pola utilizao do tcnicas do liologia
molocular. O omprogo do mtodos molo-
cularos podo alrir novas porspoctivas
para o conhocimonto da opidomiologia,
patognoso o tratamonto das intocos
tungicas, sondo as tcnicas disponvois
utois para tipar linhagons individuais do
amostras clnicas o amliontais. Vtodos
do tipagom molocular tm sido aplicados
para o ostudo da opidomiologia das intoc-
os tungicas, principalmonto daquolas
causadas por ospcios do gnoro nuu.-
un, o om monor oxtonso, por u~J:-
unu: o outros tungos patognicos, a qual
so torna do grando importncia na distin-
o ontro a intoco por novas linhagons
o a rocidiva do intocos primrias. A
rocorrncia do criptococoso om paciontos
com AlDS um prolloma crosconto, o
oxistom ovidncias do quo ola ocorra
dovido roativao da intoco pola
linhagom quo a originou. Introtanto, h
rolatos do rointoco por linhagons no-
vas.
O uso da tocnologia do PR tRoao
om adoia da Polimoraso) comlinada
com o uso do j:.u~:: aloatrios pormito
idontiticar J.ug~:j:.uI: do DNA do dito-
rontos linhagons, o quo auxilia o conho-
cimonto da opidomiologia da intoo.
Issos procodimontos tm sido adaptados
o rotinados para u~-
J:unu: tVoyor ~I nI.,
1999, ogliati ~I nI., 2000).
Para analisar a varia-
lilidado gontica dos
nossos isolados do u~-
J:unu:, omprogamos a
tcnica do RAPD tRnu-
uu ujI.J.~u 1I,u:-
jI. DNA - DNA poli-
mrtico ampliticado ao
acaso). loram utilizados
22 j:.u~::, dos quais apo-
nas novo trouxoram in-
tormaos intorossantos
acorca do comportamon-
to polimrtico o, conso-
quontomonto, opidomio-
lgico do microrganismo.
Issa soloo toi toita do
acordo com o numoro do
tragmontos ampliticados
por oligonuclootdoos. O
polimortismo aprosontou
uma rolao j:.u~: do-
pondonto, sondo dotoctados ditorontos
portis do ampliticao, como podo sor
visto na ligura 1. Isso achado condiz
com os dados oxistontos na litoratura
para os quais toram utilizados mtodos
molocularos para comproonso da opi-
domiologia, om pasos como Istados
Unidos, Austrlia, Brasil o outros. So-
gundo Huntor 8 lrazor t1990), tal vari-
alilidado gontica so dovo ao tonomo-
no do polimortismo adaptativo, o qual
prodiz quo a divorsidado do nichos
ocolgicos ocupados intluoncia na di-
vorsidado gontica do organismos.
Ixporimontos quo utilizaram mto-
dos do tipagom molocular, inclua a
anliso do tragmontos do DNA gorados
por onzimas do rostrio tRllP), anliso
olotrotortica do caritipo molocular,
soquonciamonto do DNA o anliso por
RAPD, tm ovidonciado havor uma ox-
tonsa hotorogonoidado gontica ontro
os isolados clnicos o os amliontais do
u~J:unu: tVarma, 1995, Arloit,
1996). A oxistncia do variao gontica
ontro isolados do um dotorminado pat-
gono importanto porquo ola podo so
traduzir om variaos tonotpicas, tais
como ditoronas om virulncia, ou na
suscotililidado aos agontos toraputi-
cos.
DcscnvoIvImcnto dc
tcstcs dIagnstIcos
lostos diagnsticos rpidos o ospo-
cticos para intocos tungicas so ox-
tromamonto importantos para a oticcia
no tratamonto do paciontos intoctados. A
domora na torapia apropriada ost asso-
ciada ao aumonto da morlidado o da
mortalidado. Vtodos molocularos quo
pormitam diagnosticar o patgono, do
torma sonsvol, ospoctica o rpida, torno-
com osporana para a torapia tungica.
Intro as tcnicas do tipiticao omproga-
das om ostudos opidomiolgicos, os os-
quomas do sorotipagom tornaram-so va-
liosos dovido associao da intoco
com isolados sorotipo A o paciontos com
AlDS o, a maior diticuldado, no tratamon-
to com antitungicos nas intocos por
var. gnII.. tVarma, 1995, Aoki ~I nI., 1999).
Im nossos ostudos, roalizamos anli-
so, por RAPD o sorotipagom por PR, do
amostras clnicas o amliontais do u~-
J:unu:. A anliso por RAPD, com o
j:.u~: R-2 tAoki ~I nI, 1999), rovolou
dois portis do ampliticao ditorontos,
sondo quo 25 isolados domonstraram o
mosmo padro o um isolado clnico t5),
outro tligura 2). J as amostras rotorn-
cias do u~J:unu: tAl 32045,
Al 24065, Al 24066 o Al 2895),
corrospondondo, rospoctivamonto, aos
sorotipos A, B, o D, rovolaram portis do
ampliticao distintos ontro os ditorontos
sorotipos o os nossos isolados.
O par do j:.u~:: ospocticos para
sorotipo A tNA 0S o NA 0A) tAoki ~I
nI, 1999) ampliticou uma landa do,
aproximadamonto, 695pl para todos os
isolados clnicos o amliontais do u~-
J:unu: analisados, oxcoto para o isola-
do clnico 5. Issa mosma landa toi
ampliticada nas amostras Al sorotipos
FIgura 3 - ldontiticao por PR do
amostras do u~J:unu: com a
utilizao do um par do j:.u~:: NA
0S o NA 0A ospoctico para sorotipo
A. V, marcador laddor 100pl, 1, Al
32045 tsorotipo A), 2, Al 24065
tsorotipo B), 3, Al 24066 tsorotipo
), 4, Al 2895 tsorotipo D), 5 o 6,
isolados clnicos t36 o 5), o 8,
isolados amliontais tA6 o A), controlo
nogativo
1.I~uIg.n .~u.n 1~:~u:I:.u~uI - u 2U - un.uuI 2UUI 37
A o D tligura 3). O produto do ampliti-
cao do, aproximadamonto, 695pl do
um dos isolados clnicos toi soquoncia-
do tlhormo Soquonaso - Amorsham
Pharmacia Biotoch) o a soquncia toi
somolhanto doscrita na litoratura para
o sorotipo A tAoki ~I nI., 1999).
O par do j:.u~:: ospocticos para o
sorotipo B tNB 49S o NB 49A) tAoki
~I nI, 1999) ampliticou uma landa do,
aproximadamonto, 448pl para o isola-
do clnico 5 o para as amostras Al
24065 o Al 24066, rospoctivamonto,
sorotipo B o tligura 4). Issos rosulta-
dos concordam com os olsorvados por
AOKl ~I nI t1999) ondo os autoros
rolatam a prosona do um produto do
ampliticao do, aproximadamonto,
448pl para isolados clnicos o amostra
do rotorncia tNHl 112) sorotipos B o,
tamlm, para uma amostra do rotorn-
cia sorotipo tNlH 18). Os autoros
atirmam quo osso par do j:.u~:: no toi
capaz do ampliticar o DNA das amostras
rotorncias sorotipos A tD 551), D
tllV 585) ou AD tl\ 23). O produto do
ampliticao do 448pl do isolado clni-
co 5 toi soquonciado tlhormo Soquo-
naso - Amorsham Pharmacia Biotoch) o
a soquncia toi somolhanto doscrita na
litoratura para o sorotipo B tAoki ~I nI.,
1999).
PcrspcctIvas
om a tinalidado do otimizar o pro-
tocolo do oxtrao do DNA do u~-
J:unu:, ostamos luscando novos m-
todos quo pormitam roduzir o tompo
dossa otapa. A colota do isolados amli-
ontais roalizada constantomonto. Ulti-
mamonto, ostamos intonsiticando a co-
lota do isolados amliontais do oucalip-
tos para quo, conjuntamonto com os do
oxcrotas do pomlos, possamos molhor
corrolacionar ostos com aquolos do iso-
lados clnicos. Alguns aspoctos da viru-
lncia dosso tungo so lastanto intoros-
santos o, mais rocontomonto, ostamos
dosonvolvondo tcnicas quo nos pormi-
tam voriticar a prosona do tostolipasos
om nossas amostras. lomos como oljo-
tivo ostudar lioqumica o molocular-
monto as tostolipasos do u~J:unu:
para conhocormos molhor a liologia do
tungo.
AgradccImcntos
Agradocomos as sugostos o os co-
montrios da Dra. lrono Silvoira Schrank,
do Dr. Arnaldo Zaha o a colalorao
dos cologas Jorgo Horta, ngola R. Vo-
doiros, Patrcia Istovos, Volina Grim-
lorg, Immanuollo lonial o amila Ka-
ppol. Agradocomos a Varia ristina Bas-
sanossi tlAIN-RS) o ao lnstituto Naci-
onal do Qualidado om Saudo tlNQS)
lundao Osvaldo ruz polo onvio do
amostras clnicas o do linhagons do
rotorncia, rospoctivamonto o aos r-
gos tinanciadoros: APIS o NPq polo
apoio tinancoiro.
RcIcrcncIas BIbIIogrIIcas
AOKl, l. H., lVAl,l., lANAKA, R.,
VlKAVl, \., lAGUHl, H., NlSHlVU-
RA, N. l., NlSHlVURA, K., Vl\AJl, V.,
SHRIlBIR, A. Z., BRANHlNl, V. l.
V. 1999. Nov PR pri-
mor pairs spocitic tor
:,jIu: u~J:-
unu: sorotypo A or B
proparod on tho lasis ot
random amplitiod poly-
morphic DNA tingorprint
pattorn analysos. J. CIIn.
MIcrobIoI., 3t2): 315-
320.
ARBIll, R. D. 1996.
Volocular opidomiology
tor tho clinician: ll. lntor-
protation and aplication
ot molocular typing. In-
Icct. DIs. CIIn. Pract.,
5: 260-264.
OGllAll, V., AllA-
RlA, V., lORlORANO,
A. V., VlVlANl, V. A.
2000. Gonotyping :,j-
Iu: u~J:unu: var.
u~J:unu: vith spoci-
tic primors dosignod trom PR-tingor-
printing lands soquoncod using a modi-
tiod PR-lasod stratogy. McdIcaI Myco-
Iogy, 38: 9-103.
lRANZOl, S.P., HAVDAN, J. S., UR-
RlI, B. P., ASADIVAll, A. 199. Volo-
cular opidomiology ot :,jIu: u~-
J:unu: in Brazil and tho Unitod Statos:
ovidonco tor loth local gonotic dittoron-
cos and a glolal clonal population struc-
turo. J. CIIn. MIcrobIoI., 35: 2243-2251.
lRANZOl, S.P., SAlKlN, l. l., ASA-
DIVAll, A. 1999. :,jIu: u~J:-
unu: var. g:u..: soparato variotal status
tor :,jIu: u~J:unu: sorotypo A
isolatos. J. CIIn. MIcrobIoI., 3: 838-840.
HUNlIR, P. R., lRASIR, . A. 1990.
Application ot tho thoory ot adaptativo
polymorphism to tho ocology and opido-
miology ot pathogonic yoast. AppI. En-
vIron. MIcrobIoI., 56: 2219-2222.
lIVl, G. . 1998. Vanagomont ot
opportunistic intoctions in HlV
+
pationts:
contrasts lotvoon Iuropo 8 South Amo-
rica. TLc BrazIIIan JournaI oI InIcctI-
ons DIscascs, 2: 118-12.
VI\IR, W., VARSZIWSKA, K., AVlR-
VOSlOllAN, V., lGRIJA, R. P., HAR-
DlKI, ., VIlHllNG, K., VlVlANl, V.
A., HlNDAVPORN, A., SUKROON-
GRIUNG, S., JOHN, V. A., IlllS, D. H.,
SORRIl, l. . 1999. Volocular typing ot
glolal isolatos ot :,jIu: u~J:-
unu: var. u~J:unu: ly polymoraso
chain roaction tingorprinting and ran-
domly amplitiod polymorphic DNA - a
pilot study to standardizo tochniquos on
vhich to laso a dotailod opidomiological
survoy. EIcctropLorcsIs, 20: 190-199.
PlROlSKl, l., ASADIVAll, A. 1996.
Antilody immunity to :,jIu: u~-
J:unu:: paradigm tor antilody immuni-
ty to tho tungi? ZcntraIbI. BaktcrIoI.,
284: 45-495.
SORRIl, l. ., HIN, S., RUVA, . P.,
PlIlllIR, l. J., IlllS, D. H., BROWN-
lII, A. G. 1996. oncordanco ot clinical
and onvironmontal isolatos ot :,jI-
u: u~J:unu: var. gnII.. ly random
amplitication ot polymorphic DNA analy-
sis and PR tingorprinting. J. CIIn. MI-
crobIoI. 34:1253-1260.
SlIINBIRGIN, J. N., ASADIVAll,
A. 2000. Provalonco ot :,jIu: u~-
J:unu: var. u~J:unu: tSorotypo D)
and :,jIu: u~J:unu: var. g:u-
. tSorotypo A) isolatos in Nov \ork ity.
J. CIIn. MIcrobIoI., 38:194-196.VAR-
VA, A., SWlNNI, D., SlAlB, l., BINNIl,
J. I., KWON-HUNG, K. J. 1995. Divor-
sity ot DNA tingorprints in :,jIu:
u~J:unu:. J. CIIn. MIcrobIoI., 33:
180-1814.
FIgura 4 - ldontiticao por PR do amostras do
u~J:unu:, com a utilizao do um par do
j:.u~:: NA 49S o NA 49A ospoctico para
sorotipo B. 1, Al 32045 tsorotipo A), 2, Al
24065 tsorotipo B), 3, Al 24066 tsorotipo ), 4,
Al 2895 tsorotipo D), 5 isolado clnico t36),
6 o , isolados amliontais tA6 o A), 8, isolado
clnico t5), controlo nogativo