KATIANE DE OLIVEIRA PINTO COELHO NOGUEIRA

MORFOLOGIA E ULTRA-ESTRUTURA DO OVIDUTO DE Hemidactylus mabouia

(MOREAU DE JONNS, 1818) (REPTILIA, SQUAMATA, SAURIA, GEKKONIDAE)
DURANTE O CICLO REPRODUTIVO










Dissertao apresentada
Universidade Federal de
Viosa, como parte das
exigncias do Programa de
Ps-Graduao em Biologia
Celular e Estrutural, para
obteno do ttulo de Magister
Scientiae.
















VIOSA
MINAS GERAIS BRASIL
2008
iii

KATIANE DE OLIVEIRA PINTO COELHO NOGUEIRA













MORFOLOGIA E ULTRA-ESTRUTURA DO OVIDUTO DE Hemidactylus mabouia
(MOREAU DE JONNS, 1818) (REPTILIA, SQUAMATA, SAURIA, GEKKONIDAE)
DURANTE O CICLO REPRODUTIVO







Dissertao apresentada
Universidade Federal de Viosa,
como parte das exigncias do
Programa de Ps-Graduao em
Biologia Celular e Estrutural,
para obteno do ttulo de
Magister Scientiae.



APROVADA: 22 de fevereiro de 2008.




Prof. Izabel R. S. C. Maldonado Prof. Luciane C. O.Lisboa
(Co-Orientadora)





Prof. Oswaldo P. Ribeiro Filho Prof
a
. Silvia das Graas Pompolo





Prof. Clvis Andrade Neves
(Orientador)

ii





























O essencial saber ver. Saber ver
sem estar a pensar. Saber ver
quando se v, e nem pensar quando
se pensa! Mas isso, tristes de ns
que trazemos a alma vestida!
Isso exige um estudo profundo, uma
aprendizagem de desaprender.
(Fernando Pessoa)



iii













































Ao meu esposo Leonardo Brando Nogueira
e ao meu filho Lucas Oliveira Brando.












iv

AGRADECIMENTOS


Ao ensino pblico e de qualidade da Universidade Federal de Viosa, sem o
qual dificilmente teria acesso a um curso de ps-graduao. A Capes pelo suporte
financeiro ao longo dos ltimos anos.
A Deus, por sua imensa bondade em me prover a vida.
Ao meu esposo Leonardo pelo inigualvel incentivo, confiana e dedicao
nossa famlia que me permitiu ter tranqilidade nos momentos de ausncia.
Ao meu querido filho Lucas, por ser o incentivo de toda minha caminhada. Foi
o pensamento em voc que me trouxe foras nos momentos mais difceis.
A minha amada me pelo seu amor, fonte de fora, simplicidade e otimismo
que regem minha vida.
Ao meu pai pelo orgulho e o brilho nos olhos a cada passo da minha
caminhada, na qual sempre procurei seguir o exemplo de honestidade, dignidade e
respeito.
Ao meu irmo, Amantino, pelo elo de cumplicidade e fraternidade que nos une.
A toda minha famlia, fonte de apoio e carinho.
Ao professor Clvis Andrade Neves pela orientao, pelos grandes
ensinamentos e exemplo de tica profissional. Sou muito grata por ter aceitado o
desafio de me orientar e me proporcionar a oportunidade de trabalhar com
lagartixas, animais que para muitos parecem asquerosos, mas que possuem uma
histologia maravilhosa que conquistou minha admirao!
Aos meus conselheiros Renato Neves Feio e Izabel Regina C. Maldonado pela
sabedoria, simplicidade e por estarem sempre disposio para ajudar e ensinar.
professora Silvia Pompolo pela prestatividade em ceder seu laboratrio e
materiais, e pela gentileza em aceitar o convite para participar e enriquecer com
sua competncia e experincia este trabalho.
Ao laboratrio de Biologia Estrutural: aos professores Adilson e Srgio, aos
amigos Mariana Lanna, Llian, Manuela, Raquel, J uliana. Ao Alex pelo
companheirismo dirio e disponibilidade em sempre me ajudar.
Ao meu querido amigo Vincius, por estar presente nos momentos mais difceis
me auxiliando na microscopia eletrnica e na confeco da verso final deste
trabalho. Bem humorado, otimista e sempre transmitindo palavras de apoio e
carinho.
Sirlene, minha companheira na realizao deste trabalho.
Ao professor Lino, por me ajudar nos momentos difceis do incio do curso, me
possibilitando dar continuidade ao mesmo.
v

Luciane, pela simpatia, incentivo e pela fora nos momentos mais difceis.
Ao professor Oswaldo, por ter aceito o convite para participar deste trabalho.
Ao professor Marcelo Vilela, pelas longas conversas que me proporcionaram
conforto e nimo para nunca desistir de um sonho.
Ao coordenador do Programa de Ps-graduao em Biologia Celular e
Estrutural, professor J os Eduardo Serro sempre empenhado em aprimorar a
qualidade do programa e tambm por sua infinita prestatividade.
Ao ncleo de Microscopia e Microanlise pelo suporte da minha pesquisa, em
especial doce Cludia.
Ao Departamento de Biologia Geral pelo apoio logstico, em especial a Beth e
Diana.
A todos os meus contemporneos da Biologia Celular e Estrutural, em
especial: Cirlei, Marclia, Mnica, que fizeram estes quase dois anos inesquecveis!
Por fim, agradeo a todos que de alguma forma contriburam para realizao
deste trabalho.

















vi

BIOGRAFIA



Katiane de Oliveira Pinto Coelho Nogueira, filha de J os Mauro
Santana Pinto Coelho e Teresinha do Carmo de Oliveira Pinto Coelho. Nasceu em
Viosa, Minas Gerais, em 05 de outubro de 1981.
Em fevereiro de 2005 casou-se com Leonardo Brando Nogueira e, em
julho do mesmo ano recebeu o maior presente de Deus, seu filho Lucas Oliveira
Brando.
Em agosto de 2006, graduou-se como Bacharel em Cincias Biolgicas
pela Universidade Federal de Viosa (UFV), Viosa-MG. Durante o perodo de
graduao, de 2003 a 2006, foi estagiria do Laboratrio de Biologia Estrutural do
Departamento de Biologia Geral da UFV e monitora de histologia.
Em maio de 2006, iniciou o curso de Mestrado em Biologia Celular e
Estrutural, na Universidade Federal de Viosa, Viosa-MG, defendendo a tese em
fevereiro de 2008. No mesmo ano ingressou no curso de Doutorado em Biologia
Celular e Estrutural pela Universidade Federal de Viosa, Viosa-MG.
















vii

SUMRIO

RESUMO............................................................................................................... viii
ABSTRACT .......................................................................................................... ix
1. INTRODUO GERAL ................................................................................... 01
2. OBJETIVOS ..................................................................................................... 02
3. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS ................................................................ 03
4. ARTIGOS
4.1. Morfologia e Ultra-estrutura do Oviduto de Hemidactylus mabouia
(Moreau de J onns, 1818) (Reptilia, Squamata, Sauria, Gekkonidae).....
04

4.2. Modificaes Estruturais no Oviduto de Hemidactylus mabouia
(Moreau de J onns, 1818) (Reptilia, Squamata, Sauria, Gekkonidae)
Durante o Ciclo Reprodutivo.....................................................................

23

5. CONCLUSO GERAL ..................................................................................... 42
viii

RESUMO

NOGUEIRA, Katiane de Oliveira Pinto Coelho, M.Sc., Universidade Federal de
Viosa, fevereiro de 2008. Morfologia e ultra-estrutura do oviduto de
Hemidactylus mabouia (Moreau de Jonns, 1818) (Reptilia, Squamata,
Sauria, Gekkonidae) durante o ciclo reprodutivo. Orientador: Clvis Andrade
Neves. Co-Orientadores: Izabel Regina dos Santos Costa Maldonado e Renato
Neves Feio.




Em geral, o aparelho reprodutor feminino dos rpteis constitudo por um
par de ovrios e pelos ovidutos que funcionam como um conduto para o ovo desde
a ovulao at a oviposio. As lagartixas pertencem ao gnero Hemidactylus, o
qual est inserido na famlia Gekkonidae e na ordem Squamata. A estrutura do
oviduto de lagartixas da espcie Hemidactylus mabouia foi analisada ao
microscpio eletrnico de varredura e ao microscpio de luz atravs de tcnicas de
rotina e histoqumicas, que evidenciaram a presena de quatro regies distintas que
comeando anteriormente so: infundbulo, segmento mais anterior do oviduto que
se abre na cavidade celomtica; tuba uterina, local de estocagem de
espermatozides; tero, regio onde formada a casca do ovo e vagina, poro
final do oviduto. Ao longo do ciclo reprodutivo o oviduto sofre modificaes
morfolgicas marcantes permitindo a identificao de quatro fases distintas
denominadas: proliferativa, vitelognica, gravdica e regressiva. Este estudo obteve
resultados consistentes com outros trabalhos envolvendo rpteis, alm disso,
forneceu dados que podero contribuir de maneira significativa para a compreenso
da filogenia e de aspectos comportamentais da biologia reprodutiva de H. mabouia.

ix

ABSTRACT

NOGUEIRA, Katiane de Oliveira Pinto Coelho, M.Sc., Universidade Federal de
Viosa, February, 2008. Oviductal Morphology and Ultrastructure of the
Hemidactylus mabouia Moreau de Jonns, 1818) (Reptilia, Squamata,
Sauria, Gekkonidae) during the reproductive cycle. Adviser: Clvis Andrade
Neves. Co-Advisers: Izabel Regina dos Santos Costa Maldonado and Renato
Neves Feio.




In general, the female reproductive tract of reptiles consists of a pair of
ovaries and oviducts that act as a conduct for the egg between ovulation to
oviposition. The gekkonid lizard belong to the genus Hemidactylus, which is inserted
in the family Gekkonidae and in the order Squamata. The oviduct structure of the
Hemidactylus mabouia was examined by light and scanning electron microscopy
through routine and histochemical techniques which revealed the presence of four
distinct regions that, starting anteriorly, include: infundibulum, earlier segment of the
oviduct that opens to the coelomic cavity; uterine tube, place of sperm storage;
uterus, where it is formed the eggshell; and vagina, final portion of the oviduct. Over
the course of the reproductive cycle the oviduct undergoes morphological changes
allowing the identification of four distinct phases: proliferative, vitellogenic, gravidity
and regressive. This study obtained results consistent with other studies involving
reptiles, in addition, provided data that could contribute significantly to the
understanding of phylogeny and behavioral aspects of the reproductive biology of H.
mabouia.

1


1. INTRODUO GERAL

As lagartixas so rpteis de hbito crepuscular/noturno intimamente
associadas a habitaes humanas (Rocha et al., 2002). No entanto, pode ocorrer
em outros ambientes naturais no antrpicos como a Floresta Amaznica, a Mata
Atlntica, o Cerrado, a Caatinga, as Restingas e algumas ilhas da costa brasileira
(Anjos, 2004). As lagartixas pertencem ao gnero Hemidactylus, o qual est
inserido na famlia Gekkonidae e na ordem Squamata. Segundo Pough et al.(1993),
a famlia Gekkonidae compreende 733 espcies de lagartos terrestres e arborcolas
de tamanho diminuto (3 cm) a mdio (30 cm). Os espcimes adultos de lagartixas
(Hemidactylus mabouia) normalmente tem tamanhos que variam entre 5 e 7 cm
sem considerar a cauda.
Originrias da frica, as lagartixas dispersaram-se por todos os continentes,
com exceo da Antrtica, o que demonstra a grande capacidade de adaptao
desse animal diversidade ambiental (Pough et al., 1993). No Brasil, a espcie
Hemidactylus mabouia ocorre em todas as regies (Vanzolini, 1978; Vanzolini et al.,
1980). Normalmente as espcies exticas so motivos de preocupao em virtude
do prejuzo que podem causar a populaes e comunidades de organismos nativos
com os quais interagem ou nas quais estejam inseridas. No entanto, diferente de
outros animais exticos, as lagartixas parecem no oferecer ameaas s espcies
nativas, j que ocuparam um nicho ainda inabitado por outros rpteis. Alm disso,
elas podem ser extremamente teis na predao e controle biolgico de insetos
que muitas vezes so considerados pragas domsticas.
O desenvolvimento de trabalhos envolvendo a descrio da histologia do
aparelho reprodutor feminino de H. mabouia contribuiria de maneira significativa
para a compreenso posterior de aspectos comportamentais de sua biologia
reprodutiva. Isso de grande valia principalmente para animais exticos, pois
constitui um elemento essencial para planejar seu controle ou mesmo erradicao
caso esses animais venham a trazer efeitos negativos sobre populaes nativas.
Alm disso, H. mabouia uma espcie comumente encontrada e de fcil acesso, o
que a torna hbil para ser usada como modelo para anlises morfolgicas
comparativas entre espcies de rpteis.

2

2. OBJETIVOS


O trabalho foi realizado com os seguintes objetivos:

descrever a morfologia do oviduto de Hemidactylus mabouia durante o
perodo vitelognico;
descrever as modificaes que ocorrem no oviduto durante seu ciclo
reprodutivo;
estabelecer padres morfolgicos do ciclo reprodutivo que possam ser
usados como modelo de estudo da biologia reprodutiva deste e de outros
rpteis; e
gerar dados morfolgicos que possam ser utilizados em estudos
filogenticos dos Squamata.
3

3. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS

Anjos LA (2004) Ecologia de um lagarto extico (Hemidactylus mabouia,
Gekkonidae) vivendo na natureza (campo ruderal) em Valinhos, So Paulo.
Dissertao de Mestrado apresentada ao Instituto de Biologia, Universidade
Estadual de Campinas.

Pough FH (1993). A vida dos vertebrados. So Paulo. Ed. Ateneu. 875p.

Rocha CFD; Dutra GF; Vcibradic CD; Menezes VA (2002) The terrestrial reptile
fauna of the Abrolhos archipelago: species list and ecological aspects. Braz. J .
Biol., 62(2): 285-291.

Vanzolini PE (1978) On south america Hemidactylus (Sauria, Gekkonidae). Pap. Av.
Zool., 31: 307-343.

Vanzolini PE; Ramos-Costa AMM; Vitt LJ (1980) Rpteis das Caatingas. Academia
Brasileira de Cincias. Rio de J aneiro, Brasil. 1980.
4

Morfologia e Ultra-estrutura do Oviduto de Hemidactylus mabouia (Moreau de
Jonns, 1818) (Reptilia, Squamata, Sauria, Gekkonidae)




Resumo. Os rpteis da famlia Gekkonidae exibem uma variedade de padres reprodutivos
que pode ser observada pela presena de representantes vivparos e ovparos. A espcie
Hemidactylus mabouia, constituda por indivduos ovparos possui uma grande capacidade
reprodutiva. As fmeas podem depositar ninhadas contendo dois ovos ao longo de todo o
ano, que aliado a estratgia alimentar generalista e a plasticidade na utilizao de distintos
habitats favorecem o sucesso evolutivo desta espcie. Com o emprego de tcnicas
histolgicas de rotina e histoqumicas, em conjunto com a microscopia eletrnica de
varredura, descrevemos a morfologia do oviduto de fmeas vitelognicas de H. mabouia.
Esta estrutura formada por quatro regies distintas: infundbulo, segmento que se abre na
cavidade celomtica e recebe o ovcito liberado no momento da ovulao; tuba uterina,
local onde ocorre a estocagem de espermatozides; tero, regio responsvel pela
produo da casca do ovo e vagina, poro final do oviduto que desemboca na cloaca. O
oviduto de H. mabouia se assemelha ao de algumas outras espcies de lagartos ovparos
descritos. Entretanto, algumas diferenas foram notadas e podem fornecer dados para a
compreenso da biologia reprodutiva desta e de outras espcies de rpteis. Esta descrio,
tambm gerou informaes que podem ser utilizadas em estudos filogenticos.

Palavras-chave. Hemidactylus mabouia, oviparidade, capacidade reprodutiva, infundbulo,
tuba uterina, tero, vagina.


5

Oviductal Morphology and Ultrastructure of the Hemidactylus mabouia
Moreau de Jonns, 1818) (Reptilia, Squamata, Sauria, Gekkonidae)



Abstract. The reptiles of the family Gekkonidae display a variety of reproductive patterns
that can be observed by the presence of viviparous and oviparous representatives. The
specie Hemidactylus mabouia, consisting of oviparous individuals, have a great reproductive
capacity. Females can deposit hatches containing two eggs throughout the year, allied to
generalist food strategy and plasticity in the use of different habitats favour the evolutionary
success of this specie. Routine histological and histochemical techniques associated with
scanning electron microscopy were used to describe the morphology of the oviduct of
vitellogenic females of H. mabouia. This structure is formed by four different regions:
infundibulum, which opens into the coelomatic cavity and receives the oocyte released at the
time of ovulation; uterine tube, where sperm storage take place; uterus, responsible for the
eggshell production; and vagina, final portion of the oviduct that leads out to the cloaca. The
oviduct of H. mabouia is similar to other species of oviparous lizards. However, some
differences were observed and could provide data to the understanding of the reproductive
biology of this and other species of reptiles. This study also provided information that can be
used in phylogenetic studies.

Key Words: Hemidactylus mabouia, oviparity, reproductive capacity, infundibulum, uterine
tube, uterus, vagina.

6

Introduo

As mltiplas funes do oviduto dos rpteis refletem a variedade de padres
de reproduo exibidos por esse diverso grupo animal. Isso pode ser observado
entre os lagartos da famlia Gekkonidae, a qual possui representantes vivparos e
ovparos (Girling 98). Estes ltimos ainda apresentam significativa variao nos
padres da casca do ovo, que podem ser macias (Packard et al. 82) ou rgidas
(Couper et al. 93). Em geral, o aparelho reprodutor feminino dos rpteis
constitudo por um par de ovrios e pelos ovidutos que funcionam como um
conduto para o ovo desde a ovulao at a oviposio e/ou parturio; sendo ainda
o local para a fertilizao e, em algumas espcies, para estocagem de
espermatozides. Em indivduos ovparos o oviduto participa ativamente da
produo da casca que envolve o ovo; nos vivparos atua na formao da placenta
(Girling, 2002). O termo oviduto, em rpteis, designa as estruturas derivadas dos
ductos de Mller no perodo embrionrio (Girling et al., 97). Em geral, o oviduto
pode ser dividido anatomicamente em cinco regies que comeando da
extremidade anterior so: infundbulo, tuba uterina, istmo, tero e vagina. Algumas
dessas regies, que sofrem modificaes morfolgicas expressivas em funo do
perodo do ciclo sexual em que se encontram, podem no ser reconhecidas em
todas as espcies de rpteis (Girling, 2002).
O oviduto de exemplares da famlia Gekkonidae, a qual pertence o gnero
Hemidactylus, tem sido muito estudado na tentativa de criar um modelo de estudo
para esse grupo, alm de descrever caractersticas que possam contribuir para sua
filogenia (Picariello et al., 89; Girling et al., 97; 98; 2000). Embora existam
trabalhos que retratem a ecologia (Zamprogno et al.,1998; Rocha et al., 2002 ) e o
comportamento (Vitt,1986; Vanzolini, 1978) da espcie Hemidactylus mabouia, a
morfologia do oviduto ainda no foi descrita.
Fmeas de H. mabouia podem depositar mais de uma ninhada anual, sendo
que cada ninhada consiste de dois ovos (Vitt,1986). Alm dos aspectos
reprodutivos, uma caracterstica relevante de H. mabouia sua estratgia alimentar
generalista que, associada a sua plasticidade no uso de distintos habitats, pode ser
considerada como atributo ecologicamente importante que, provavelmente favorece
a colonizao e o estabelecimento desta espcie em ambientes novos (Zamprogno
et al.,1998).
Estudos morfolgicos do aparelho reprodutor feminino de H. mabouia
contribuiro de maneira significativa para a compreenso posterior de aspectos
comportamentais de sua biologia reprodutiva. Alm disso, H. mabouia uma
7

espcie comumente encontrada e de fcil manipulao, o que a torna hbil para ser
usada como modelo para anlises morfolgicas comparativas entre espcies de
rpteis.
Neste estudo descrevemos a histologia e com o auxlio da microscopia
eletrnica de varredura a ultra-estrutura de cada segmento do oviduto de H.
mabouia no perodo vitelognico.

Materiais e Mtodos

Foram utilizadas seis fmeas adultas de Hemidactylus mabouia, doadas
pelo Museu de Zoologia J oo Moojen, da Universidade Federal de Viosa (UFV)
(Tab. 1). A caracterizao dos exemplares como adultos se baseou nos estudos de
Rocha et al. (2002).

Tabela 1: Identificao, comprimento, peso, perodo do ciclo e local de coleta dos
exemplares de H. mabouia utilizados no presente estudo.
Animal
Comprimento
crnio-cloacal (mm)
Peso (g) Perodo do ciclo Local da coleta
L11 57,0 3,81 Vitelognico Viosa-MG
L52 57,2 3,65 Vitelognico Cambuci-RJ
L53 52,9 2,62 Vitelognico Cambuci-RJ
L60 55,5 3,24 Vitelognico Viosa-MG
L68 56,2 3,62 Vitelognico Viosa-MG
L69 51,4 2,86 Vitelognico Viosa-MG

Todos os animais foram anestesiados e eutanasiados sob mtodos
rotineiros de laboratrio.
A identificao e coleta dos rgos do aparelho reprodutor foram realizadas
in situ atravs de uma inciso longitudinal mediana na regio ventral dos animais
em soluo salina. Fragmentos dos rgos e regies foram imediatamente fixados
em soluo de Carson (Carson et al., 1973) por, no mnimo, 24 horas temperatura
ambiente.
Os fragmentos do material coletado e destinados ao estudo sob microscopia
de luz foram desidratados em concentraes crescentes de lcool (70, 80, 95 e
100 GL) com trocas a cada trinta minutos. Aps a desidratao, foram includos
8

em glicol-metacrilato (Historesin, Leica) e levados estufa (45C) por 24 horas
para polimerizao.
O material foi seccionado na espessura de 0,5 e 2m, em micrtomo
automtico (Leica mod. RM-2155.) com navalhas de vidro. As seces obtidas
foram coradas com azul de toluidina-borax 1% (AT) ou submetidas as seguintes
tcnicas histoqumicas: cido peridico de Schiff (PAS) e alcian blue pH 2,5 (AB)
para deteco de glico-conjugados neutros e cidos, respectivamente; sulfato de
azul do Nilo (AN) para deteco de lipdeos cidos e neutros (Bancroft e Stevens,
1996); e xilidine Pouceau (XP) para deteco de protenas (Mello e Vidal, 1980),
aps os tratamentos foram montadas com Entellan (Merk).
A anlise e documentao do material foi realizada em microscpio
Olympus BX-60 com cmera digital Q-Color 3 (Olympus) no Laboratrio de
Citogentica de Insetos da UFV.
Para anlise ultra-estrutural, fragmentos dos tecidos foram fixados em
soluo de Karnovsky por 4 horas em temperatura ambiente. Depois de lavados em
tampo cacodilato de sdio 0,1M (pH 7,2) foram desidratados em srie crescente
de etanol e submetidos ao CPD (critical point drying). O material foi montado em
stubbs e coberto por uma fina camada de ouro para posterior anlise ao
microscpio eletrnico de varredura (SEM) (LEO VP1430) no Ncleo de Microscopia
e Micro-anlise da UFV.
As imagens digitalizadas de microscopia de luz tiveram seus aumentos
calculados com o uso do aplicativo Image-Pro Plus 4.5 (Media Cybernetcs) e as
pranchas montadas com auxlio do Power Point (Microsoft).

Resultados

Os ovidutos so rgos pares posicionados na cavidade celomtica das
fmeas. Normalmente, a extremidade anterior do oviduto direito se localiza
anteriormente ao esquerdo. Cada oviduto de H. mabouia pode ser dividido
anatomicamente em quatro regies que comeando da extremidade anterior so:
infundbulo, tuba uterina, tero e vagina. O istmo no foi identificado nessa espcie.
A vagina a poro final do oviduto que termina na cloaca, regio composta de trs
cmaras onde desembocam os sistemas digestivo, genital e urinrio (Fig.1).

Infundbulo
O infundbulo o segmento mais anterior do oviduto. Organiza-se em
diversas dobras longitudinais que se acomodam na cavidade celomtica. Sua
9

extremidade anterior possui um stio, atravs do qual o ovcito penetra aps a
ovulao.
A mucosa do infundbulo (Fig. 2A e 2B) constituda por um epitlio simples
contendo predominantemente clulas ciliadas e, em menor quantidade, clulas no-
ciliadas. As clulas epiteliais so alongadas em funo das inmeras pregas da
mucosa. Os clios so desenvolvidos e chegam a ter altura equivalente ao restante
do citoplasma. Os ncleos das clulas no-ciliadas se projetam, juntamente com o
citoplasma apical fazendo protuberncia para o lmen. A membrana basal das
clulas epiteliais no se cora pelo AT, originando regies claras entre as clulas
epiteliais e a lmina prpria. A lmina prpria delgada, com conjuntivo frouxo e
no possui glndulas. Abaixo da mucosa ocorre uma camada delgada de msculo
liso com uma ou duas clulas de espessura. Estas clulas apresentam superfcie
irregular e no tem uma orientao claramente definida. Envolvendo a tnica
muscular est posicionada a serosa, formada por epitlio simples pavimentoso
recobrindo um fino feixe conjuntivo muito vascularizado e com numerosos
mastcitos.
Algumas clulas no ciliadas possuem grnulos apicais ricos em glico-
conjugados cidos, pois eram AB positivos e PAS negativos.

Tuba Uterina
Anatomicamente um discreto espessamento entre a poro terminal do
infundbulo e o incio do tero.
O epitlio da tuba uterina composto, tambm, por clulas ciliadas e por
clulas secretoras, entretanto estas clulas so muito mais altas do que aquelas do
infundbulo. A secreo desta regio altamente metacromtica quando corada
com AT (Fig. 2C) e respondem positivamente ao PAS e ao AB, indicando a
presena de glico-conjugados neutros e cidos na secreo. O epitlio de
revestimento penetra na lmina prpria e origina criptas compostas exclusivamente
por clulas ciliadas. Algumas criptas estavam repletas de espermatozides (Fig.
2D). A lmina prpria, a muscular e a serosa so semelhantes s do infundbulo.

tero
O tero possui a parede com inmeras dobras e pode ser reconhecido
anatomicamente como a regio mais espessa de todo o oviduto. O epitlio
constitudo por clulas colunares com ncleos elpticos, essas podem ou no conter
clios. As clulas no-ciliadas so de dois tipos: uma possui a superfcie luminal
abaulada com microvilosidades, enquanto a outra tem pice mais estreito com
10

superfcie lisa (Fig. 2E). Cortes semifinos do tero de uma fmea em perodo
vitelognico tardio, com um dos ovcitos no infundbulo, permitiram observar que
este epitlio simples, apesar de parecer estratificado na maioria dos cortes
analisados. Nesta fmea, as clulas epiteliais apresentaram o volume
sensivelmente aumentado. A regio infra-nuclear das clulas epiteliais rica em
material granular ortocromtico quando corado com o AT. Abaixo da lmina epitelial
h uma profuso de pequenos vasos sanguneos formando extenso plexo entre o
epitlio e as glndulas (Fig. 2F). As tcnicas histoqumicas para verificao da
presena de glico-conjugados demonstraram que a borda apical das clulas no-
ciliadas exibem positividade homognea (no granular) tanto para PAS quanto para
AB. As clulas que revestem o ducto das glndulas apresentam grnulos PAS
positivos. Grnulos positivos para glico-conjugados neutros (Fig. 3A) e cidos
ocorrem no conjuntivo subjacente muito prximo ao epitlio. interessante notar
que as clulas no ciliadas, ao contrrio daquelas da tuba, no apresentam aspecto
morfolgico de clulas secretoras. As tcnicas histoqumicas utilizadas para
deteco de protenas e lipdeos reagiram negativamente com as clulas epiteliais
de revestimento do tero.
As glndulas uterinas, tambm denominadas glndulas da casca, so do
tipo simples tubulosa ramificada (Fig. 3B, 3C e 3D). As clulas glandulares
apresentam ncleo arredondado com cromatina descondensada e nuclolo
evidente. O citoplasma claro e a extremidade apical das clulas possui borda em
escova pouco desenvolvida delimitando um pequeno lmen. As clulas glandulares
reagiram negativamente s tcnicas histoqumicas para glico-conjugados e
protenas. Reao positiva para gorduras neutras foi notada em grnulos
localizados abaixo do ncleo de algumas clulas e prximo borda em escova, no
lmen (Fig. 3E).
O tecido conjuntivo que circunda as glndulas frouxo e ricamente
vascularizado. Nesse conjuntivo comum a ocorrncia de mastcitos e de grandes
clulas contendo vacolos PAS positivos, que so, provavelmente, macrfagos.
A tnica muscular que envolve a mucosa espessa, formada por um feixe
de fibras com orientao circular interno e outro com orientao longitudinal
externamente. A serosa, assim como nas outras regies do oviduto circunda a
muscular.

Vagina
A vagina a regio final do oviduto. Possui mucosa organizada em dobras
que aumentam de tamanho medida que se aproximam da cloaca. As
11

caractersticas morfolgicas da parede vaginal possibilitam sua diviso em dois
segmentos. Segmento anterior, logo aps o tero; e posterior que desemboca na
cloaca. Ambas as pores da vagina esto envolvidas pela camada muscular, que
se espessa medida que se aproxima da cloaca.
A regio anterior da vagina constituda por um epitlio simples prismtico
formado por clulas ciliadas e secretoras. Clulas ciliadas predominam e esto
presentes em grande nmero em toda a extenso da vagina anterior (Fig. 4A). Dois
tipos de clulas secretoras foram observados (Fig. 4B). O primeiro tipo predomina
imediatamente aps o tero. Essas clulas possuem uma fina granulao
ortocromtica no citoplasma apical e ncleo claro de forma piramidal situado na
base da clula. O outro tipo celular possui secreo metacromtica e predomina na
regio posterior, prxima transio vagina anterior posterior (Fig. 4C). O
citoplasma dessas clulas est repleto de secreo rica em glico-conjugados
neutros e cidos e morfologicamente se assemelham s clulas caliciformes
clssicas.
A vagina posterior possui epitlio estratificado com clulas grandes repletas
de secreo (Fig. 4D). Essa secreo apresenta leve positividade tcnica de AB e
no reage s tcnicas para glico-conjugados neutros (PAS) e para protenas (XP).
As clulas mais superficiais desse epitlio geralmente so achatadas, fazem
protruso para o lmen e apresentam uma fina camada granular de secreo
contendo glico-conjugados neutros em sua poro apical.


Discusso

O comprimento dos exemplares de Hemidactylus mabouia utilizados nesse
estudo variou entre 51,4 e 57,2 mm, conforme os padres estabelecidos por Rocha
et al. (2002) para caracteriz-los como adultos. O perodo do ciclo foi reconhecido
pela palpao do abdmen dos animais e pela confirmao da presena de um
grande folculo, que em H. mabouia tinha cerca de 6 mm de dimetro, em cada
ovrio, o que est de acordo com os critrios utilizados por Girling (1998) em outros
Gekkonidae para determinao da fase vitelognica.
A terminologia usada para a diviso anatmica e histolgica do oviduto dos
rpteis varia entre os autores, principalmente quando se trata de comparaes
interespecficas. Segundo Guillette et al. (89) trs regies distintas geralmente so
reconhecidas nos ovidutos dos Squamata: infundbulo, tero e vagina. O
infundbulo pode ser subdividido em dois segmentos, sendo o posterior denominado
12

tuba por alguns autores (Girling, 2002). Server et al. (2000) utilizou esse mesmo
padro para o oviduto da serpente Seminatrix pygaea. Organizao semelhante foi
observada nos ovidutos de Hemidactylus mabouia que foram anatomicamente
divididos em quatro regies: infundbulo, tuba, tero e vagina. Essa diviso
anatmica no segue os padres estabelecidos por Picariello et al., (89) ao estudar
Tarentola mauritanica, um lagarto ovparo da famlia Gekkonidae. De acordo com
esse estudo o oviduto de T. mauritanica divido em cinco regies que
respectivamente so: infundbulo, tuba uterina, istmo, tero e vagina. Essa mesma
diviso anatmica foi feita para quatro espcies da famlia Gekkonidae:
Hemidactylus turcicus, Saltuarius wyberba, Hoplodactylus maculatus e
Hoplodactylus duvauvelii por Girling et al. (98), que definiu o istmo como uma
pequena regio glandular de transio entre tuba e o tero. Contudo, como j
relatado anteriormente, esta regio no foi observada nesse estudo.
O comportamento das clulas no-ciliadas que fazem protruso para o
lmen do infundbulo de H. mabouia tambm foi notado no infundbulo de
Hemidactylus turcicus por Girling (2002). Essas observaes podem ser explicadas
pela influncia de alguns hormnios sobre o oviduto. Sabe-se que o estrognio,
hormnio secretado pelo ovrio, responsvel por estimular o crescimento e
hipertrofia do oviduto enquanto a progesterona atua na induo da produo e
liberao de diversas protenas no oviduto dos mamferos e dos rpteis (Roberts e
Bazer, 88; Abrams Motz e Callard, 91). Dentre estas protenas destaca-se a
avidina (albmen) em rpteis (Guillette et al. 91; Callard et al.,92). Essa protena
possui propriedades antimicrobianas, nutritivas, de proteo mecnica e hdrica
para o embrio em desenvolvimento (Palmer e Guillette, 91). Apesar de tamanha
importncia destinada ao albmen no desenvolvimento de embries de rpteis e
aves, em H. mabouia essa protena no foi observada. Esse dado consistente
com as observaes feitas por Packard et al (88) e Cordeno-Lpez et al (95).
Segundo esses autores parece que os ovos dos rpteis da subclasse Lepidosauria
(Tuatara e Squamata) perderam a camada de albmen. possvel que a secreo
AB positiva notada em algumas das clulas no ciliadas sejam resqucios da
secreo de albmen que em associao com os clios, possa ter alguma funo
protetora, j que o oviduto se abre na cavidade celomtica.
A observao das clulas no ciliadas no infundbulo e na tuba ao
microscpio eletrnico de varredura foi dificultada pela presena de grande
quantidade de clulas ciliadas que cobriam quase toda a superfcie desses rgos
em Lampropholis guichenoti (Adams et al., 2004) Em H. mabouia a superfcie
13

apical das clulas no ciliadas foram facilmente observadas entre os clios e sua
natureza secretora pode ser confirmada pela histologia e histoqumica.
A tuba uterina de H. mabouia se apresenta anatomicamente como um
discreto espessamento entre a poro terminal do infundbulo e o incio do tero.
Apesar da dificuldade na sua identificao ao olho desarmado, no pode ser
considerada somente uma regio de transio, pois existem diferenas histolgicas
significativas, tanto em relao ao infundbulo, quanto ao tero. Alm disto, a
regio onde ocorre a estocagem de espermatozides. Dentre as funes da tuba
talvez uma das mais relevantes seja a estocagem de espermatozides. Esse
comportamento j foi observado em outras espcies de Squamata, alm de
quelnios e crocodilos (Girling, 2002). Em lagartos a estocagem de
espermatozides j foi observada na poro posterior do infundbulo (similar tuba
uterina em H. mabouia), na vagina ou em ambas as regies (Siegel et al., 2007).
Essa variao nos locais de estocagem est diretamente relacionada com os
padres evolutivos dos rpteis, segundo os quais a estocagem de espermatozides
evoluiu independentemente nos diferentes grupos (Server e Hamlett., 2002).
Certamente a estocagem de espermatozides est diretamente relacionada com o
sucesso evolutivo desses grupos. Em algumas espcies ela essencial, pois o
ciclo reprodutivo de machos e fmeas assincrnico e, esse recurso permite que a
cpula seja um processo independente da fertilizao (Girling, 2002), o que pode
explicar a capacidade de postura de ovos de fmeas de H. mabouia ao longo de
todo ano. A estocagem de espermatozides na tuba uterina de H. mabouia indica
que esta seja a possvel regio de fertilizao nesta espcie, j que o ovcito
liberado no momento da ovulao capturado pelo infundbulo, atravessando essa
regio at alcanar a tuba uterina, onde encontrar os espermatozides. Estes
provavelmente so liberados das criptas nesse momento por simples presso
mecnica exercida pelo ovcito sobre elas. No entanto, no existem evidncias que
comprovem essa hiptese e outros autores sugerem o infundbulo como o possvel
local da fertilizao, pois ela deve ocorrer antes do ovo ficar coberto pelo albmen
e/ou pelas membranas da casca do ovo (Girling et al., 97).
As clulas no ciliadas da tuba uterina em tartarugas e crocodilos so
responsveis pela secreo do albmen (Girling et al., 98), no entanto, como no
h produo de albmen em Squamata provavelmente essas clulas exercem
outras funes em H. mabouia. Nesta espcie as clulas no ciliadas se coram
fortemente quando submetidas s tcnicas histoqumicas para glico-conjugados
neutros e cidos, indicando uma funo secretria. Resultados semelhantes foram
relatados por Girling (2002) para secrees produzidas pela tuba uterina em vrias
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espcies de Squamata. Esses resultados coincidiram com os observados por
Server e Ryan (99) para a tcnica de PAS, no entanto, esses autores observaram
uma fraca positividade ou resultados negativos para AB na rea de estocagem de
espermatozides da serpente Seminatrix pygaea. O papel exato exercido pela
secreo da tuba no est muito bem estabelecido, j que ainda no se conhece
em detalhes sua composio qumica. No entanto, provvel que a secreo da
tuba uterina de H. mabouia esteja envolvida na atrao e nutrio dos
espermatozides como sugerido para outras espcies (Adams e Cooper 88; Siegel
et al. 2007). A presena de criptas para estocagem de espermatozides na tuba
uterina de H. mabouia e em outros Squamata parece ser um caracter filogentico
primitivo se comparado com aquelas espcies que possuem estas estruturas na
vagina, embora o nmero de espcies estudadas seja ainda pouco consistente
(Snchez-Martnez et al., 2007).
O tero de H. mabouia revestido por um epitlio colunar com clulas ciliadas
e no ciliadas, se enquadra nas descries anteriores relacionadas ao tero de
outros lagartos ovparos feitas por diversos autores, tanto em seus aspectos
histolgicos quanto histoqumicos (Guillette et al., 89; Picariello et al., 89; Palmer et
al., 93; Perkins et al., 96; Girling et al., 97, 98, 2000; Girling, 2002). A combinao
de tcnicas histolgicas com a MEV permitiu observar que a morfologia descrita por
Girling et al. (98) para H. turcicus e Adams et al., (2004) para Lampropholis
guichenoti semelhante de H. mabouia. No h evidncias de secreo nas
clulas epiteliais de revestimento do tero de H. mabouia durante o perodo
vitelognico e os glico-conjugados presentes nas clulas no-ciliadas,
provavelmente fazem parte do glicoclice, enquanto os grnulos da regio basal
so material de reserva. O aumento na altura das clulas no perodo vitelognico
tardio est de acordo com os achados de Girling et al. (2000) que demonstram que
altos nveis de estrgeno levam ao aumento significativo do volume celular.
A presena de inmeras glndulas uterinas, provavelmente responsveis
pela secreo de componentes da casca do ovo, observadas em H. mabouia
consistente com as descries feitas para lagartos ovparos da famlia Gekkonidae
(Guillette et al., 89; Palmer et al., 93; Girling et al., 98). Em espcies vivparas de
Squamata o nmero de glndulas muito reduzido (Girling, 2002). Apesar da
conhecida funo secretora exercida pelas glndulas uterinas, elas reagiram
negativamente s tcnicas para identificao de glico-conjugados e protenas no
perodo vitelognico de H. mabouia. Ausncia de glico-conjugados nas glndulas
uterinas tambm foi notada nas espcies ovparas Hoplodactylus maculatus e
Hemidactylus turcicus (Girling et al., 97, 98). Lipdeos neutros foram encontrados
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nas glndulas de um dos exemplares analisados neste trabalho, resultado
consistente com o observado por Server et al. (2000) nas glndulas uterinas da
serpente vivpara Seminatrix pygaea. A natureza da secreo destas glndulas ,
provavelmente, modificada em funo de pequenas alteraes hormonais ao longo
do ciclo sexual, o que poderia explicar pequenas diferenas nos resultados
histoqumicos em diferentes exemplares.
Adams e Cooper (88) ao estudarem a morfologia vaginal do lagarto
Holbrookia propinqua, identificaram trs regies caracterizadas como anterior,
mdia e posterior, todas com a presena de clulas ciliadas. Entretanto, segundo
Snchez-Martnez et al. (2007) a vagina dos Squamata no apresenta diferenas
consistentes em sua morfologia que justifiquem sua diviso em regies; e quando
estas ocorrem so em resposta fases do ciclo sexual. Contudo, em H. mabouia a
transio entre as regies anterior e posterior da vagina claramente demarcada,
no s pela transio de um tipo de epitlio em outro, mas tambm por
modificaes na musculatura e aumento no nmero e no tamanho de pregas, como
tambm observado em Sceloporus woodi por Palmer et al. (93). No entanto, um
arranjo diferente foi observado por Botte (73) e Girling et al. (97, 98). Segundo
esses autores as dobras da mucosa reduzem de tamanho medida que se
aproximam da cloaca.
A vagina no possui criptas no delgado tecido conjuntivo que constitui sua
lmina prpria, o que indica que os espermatozides no ficam estocados na
vagina nessa espcie de lagarto. Essa poro final do oviduto o conduto para a
passagem do ovo durante a oviposio. A presena de pregas na mucosa da
vagina aumenta a superfcie desse rgo para permitir a passagem do ovo. Alm
disso, a musculatura desenvolvida da vagina posterior age como um esfncter que
permite a manuteno do ovo no tero, durante o perodo gravdico e ajuda a
expelir o ovo no momento da parturio (Girling et al., 97).
A importncia da descrio histolgica, histoqumica e ultra-estrutural do
oviduto de H. mabouia durante o perodo vitelognico no se limita aos aspectos
morfolgicos observados. Ela fornece dados que podero ser utilizados em estudos
comportamentais e ecolgicos desta e de outras espcies de lagartos, bem como
esclarecer aspectos importantes sobre a filogenia dos Squamata.





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Figura 1. Desenho esquemtico do aparelho reprodutor feminino de H. mabouia.
a infundbulo; b - tuba uterina; c tero; d vagina; e ovrios; * - cloaca.
Barra: 2 mm.