QUMICA ANALTICA

JOS CARLOS MARQUES

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Programa geral
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Introduo

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Anlise espectrofotomtrica

Teoria / critrios de classificao / modelos de equilbrio / glossrio

Cromatografia em camada fina
Cromatografia Gs-lquido
Cromatografia Lquido-lquido

Tcnicas hifenadas

Introduo espectroscopia
Anlise por infra-vermelhos
Anlise por UV-vis
Absoro atmica

Tcnicas de separao cromatogrficas

Histrico / aspectos gerais

Anlise qualitativa / anlise quantitativa
Anlise clssica / anlise instrumental

Introduo a EM / NMR
GCFTIR / GCMS / LCMS

Tratamento de amostras / Tratamento de dados / Segurana

Funcionamento
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Objectivos

Dar aos alunos um conhecimento geral da qumica analtica, com destaque para a anlise instrumental

Abordar os mtodos de anlise espectromtrica e mtodos cromatogrficos bem como dos equipamentos e terminologia a usar.

Desenvolver nos alunos a noo das potencialidades destas tcnicas na separao, identificao e na determinao de componentes de
misturas complexas.

Familiarizar os alunos com os mtodos correntes de aquisio e tratamento de dados analticos



Carga horria
Tericas: 48 horas
Inicio a 21/09
Prticas: 24 horas
Incio a 11/10
Atendimento ao aluno





Avaliao

Presena nas aulas: 10%

Trabalhos grupo: 10%

1 teste: 25%, marcado para: 18.11.10

2 teste: 25%, marcado para: 13.01.11

Informao prtica: 20% (+ 10% da apresentao, prevista para 20.01.11)

Presena de 75% das aulas, excepto se justificado

Haver reteno em caso de incumprimento

Exame de recurso: avaliao inferior a 50% (ou falta de 1 teste ou 2 elementos de avaliao (apenas um teste)
A falta de mais de 2 elementos de avaliao (ou 2 testes) implica reteno
O exame de recurso permite uma valorizao de 40% da avaliao global e envolve toda a matria

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Avaliao

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Bibliografia

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Analytical Chemistry; Skoog, West, Heller; Saunders

Principles of Instrumental Analysis; D.A. Skoog; Saunders

Thin Layer Chromatography; Hamilton, Hamilton; ACOL

Instrumental Methods of Chemical Analysis; Galen W. Ewing; McGraw-Hill

Anlise Instrumental; H. Willard, L. Merrit Jr., J. Dean; Fundao Calouste Glubenkian

Introduo Prtica da Cromatografia Gs-Lquido; H.J.Chaves das Neves;

Universidade Nova de Lisboa

Practice of Thin Layer Chomatography; Joseph C. Touchstone; Wiley

Tcnicas e Operaes Unitrias em Qumica Laboratorial; A.J.L.O. Pombeiro;

Fundao Calouste Gulbenkian

Documentao disponibilizada pelo docente

Informao adicional
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Analytical Chemistry; Skoog, West, Heller; Saunders

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Thin Layer Chromatography; Hamilton, Hamilton; ACOL

Captulos 1, 2, 3, 4, 5

Qualquer matria includa nestes captulos pode ser utilizada em exame (ou testes), independentemente
da profundidade em que tratada nas aulas

Aconselha-se a leitura dos captulos adequados da restante bibliografia

Os alunos sem foto no InfoAlunos, devem enviar um foto digitalizada para

(jcmensino@gmail.com)

Os transparentes sero colocados na net (www.uma.pt/jcmarques/qa.htm)

Os grupos tero um trabalho a desenvolver durante o semestre

Video (at 5 minutos) sobre uma tcnica analtica

As aulas prticas tero incio mais tarde (a definir) ------- 11.10.2010

Fica definida uma hora (e meia) de apoio aos alunos: Tera Feira das 10:30 s 12:00

Captulos: 1, 2, 3, 4, 22, 23, 24, 26, 28, 29, 30, 31, 32

Podem vir falar comigo em qualquer hora, sempre que necessrio

Teste de diagnstico
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Objectivo

Conhecer as vossas necessidades e expectativas

No necessita de ser assinado

Todas as sugestes construtivas sero bem vindas

Resultados

Os resultados sero divulgados posteriormente

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Fins do sculo XIX - Ostwald (1895)

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Fins do sculo XX

identificao de compostos maioritrios

Anlise clssica
IV - NMR ... mtodos de pouca sensibilidade

Anlise quantitativa

ramo da Cincia associado ao desenvolvimento e melhoramento contnuo dos mtodos de

caracterizao de produtos. A interpretao de resultados envolve vrias reas da
Cincia.

Anlise qualitativa

Qumica analtica ... Arte de reconhecer substncias diferentes e de determinar os seus

constituintes.

doseamentos
determinao de traos (ordem do fg)
Geralmente baseada na utilizao de equipamentos sofisticados

Especificao de Hiclato de doxiciclina (farm.port.)

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Especificao de Hiclato de doxiciclina

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Note que a molcula de doxiciclina est

associada a:
molcula de gua

molcula de etanol
1 molcula de HCl

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Cristalino ? Importante?
Amarelo ? Porqu?
solubilidade ? como medir?

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pH?
Polarimetria?

Cromatogramas ?
Doseamento?

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349 nm?
490 nm?
UV-vis?
Substncia seca e isenta
de etanol?

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254 nm?
Cromatografia
lquida?

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Etanol? GC? 4,3 a 6%?

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Coluna? Enchimento?
Detector de ionizao de chama?

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Metais pesados?
Karl-Fischer?
Cinzas? 650 C?
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Endotoxinas?

Anlise qumica
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Anlise clssica (wet chemistry)

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Envolve reaces qumicas, dissoluo, extraco e estequiometria;

Pode apresentar elevada exactido, se correctamente realizada
Usual em pequenos laboratrios
Podem ser muito elaboradas e demoradas
Equipamentos usados: aparelho de pH e balana analtica.

Anlise instrumental

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identificaes em geral / presena de impurezas

elevada preciso e exactido nos resultados / sensibilidade aos avanos da electrnica

e informtica

Usa essencialmente equipamento sofisticado, podendo envolver reaces qumicas

geralmente mais rpida (pode no ser mais sensvel nem mais precisa)
Muito usada na identificao e quantificao de traos

Importncia da anlise qumica

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Controlo da qualidade

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Determinao de produtos perigosos

Valor relativo (por comparao)

Determinao das propriedades

sade

Determinao do valor econmico dos bens

segurana

Diagnstico de doenas

Manufactura (medicamentos)

Aplicaes

Investigao

Mais de 100 000 molculas registadas (de uso comercial)

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Registo Einecs- Registo Europeu das substncias qumicas

10 000 novas molculas por ano

Interdisciplinaridade
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A Quimica analtica tem uma natureza interdisciplinar, envolvendo noes de Qumica-Fsica, fsica,
electrnica, informtica, biologia, fisiologia, toxicologia, qumica dos materiais, estatstica

A diviso tradicional em qumica analtica clssica (gravimetria e volumetria) e qumica analtica instrumental
considerada obsoleta. Mesmo a diviso entre anlise qualitativa e quantitativa perdeu muito do seu significado.

Cada vez mais a anlise qumica se define como o processo de identificao e quantificao de diversas espcies
qumicas, formas ou fases em que um elemento pode ocorrer num material

Cobre a maior parte de todas as reas da actividade humana

Controlo ambiental (gua, ar, solo)

Anlises clnicas (sangue, urina, )

Qualidade alimentar

Farmacologia

Controlo de qualidade industrial

rea legal (limites, normalizao)

rea forense

Desenvolvimento dos materiais

Anlise Instrumental
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A partir dos anos 30 (desenvolvimento da electrnica)

uso de outras caractersticas tal como:

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aplicao em anlises quantitativas de produtos orgnicos, inorgnicos e bioqumicos

aparecimento de tcnicas de separao de elevada eficincia



condutividade, absoro / emisso de luz, m/z, fluorescncia ...

a cromatografia rapidamente suplantou a destilao / extraco / precipitao

emprega teorias e fenmenos conhecidos h muito mas que apenas a electrnica e a

informtica tornaram acessveis.

Mtodos instrumentais
carga elctrica

coulometria

corrente elctrica

polarografia

resistncia elctrica

condutometria

disperso
refraco

espectroscopia de emisso
(Rx, UV, Vis) / florescncia
fosforescncia
espectrofotometria (Rx, UV, Vis, IR,
NMR, ESR
turbidimetria, Raman
refractometria

razo m/z

espectrometria de massa

velocidade de reaco

cintica

rotao

polarimetria / dicrosmo circular

propriedades trmicas

condutividade trmica

potencial elctrico

potenciometria

radioactividade

activao

emisso de radiao

absoro de radiao

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Mtodos de anlise quantitativa

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Massa ou volume

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Outras caractersticas

electroanaltica - medio de propriedades elctricas

potencial / corrente / resistncia / quantidade de electricidade

espectroscopia - medio da interaco com a radiao electromagntica

Rx / UV / Vis / IV / RMN

miscelnea

m/z / condutcividade / calor de reaco / velocidade de reaco / ndice de refraco /

conductividade trmica ...

Para DOSEAR um produto so necessrios mtodos rigorosos

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Gravimetria (massa)
Volumetria (volume)

doseamento - determinao da quantidade de dado composto / elemento na amostra em

estudo

Um bom analista deve conhecer e aplicar uma dezena de mtodos quantitativos

Metodologia de anlise quantitativa

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Passos de uma anlise quantitativa

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Seleccionar o mtodo
Obter amostra representativa
Preparar a amostra
Definir rplicas
Dissolver as amostras
Eliminar interferncias
Efectuar a medio
Calcular os resultados
Estimar a confiana no resultado

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Metodologia
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Seleccionar o mtodo

Natureza da amostra (e matriz)

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Tipo de anlise (qualitativa ou quantitativa)

Incerteza (preciso, exactido)

Tempo de anlise / custos

amostragem envolve a obteno de uma pequena quantidade de amostra representativa

planos de amostragem (Military Standard E105 Practice for Probability Sampling of Materials)

Preparar a amostra

moagem / homogeneizao
armazenagem / higroscopicidade - determinao a seco

Definir rplicas

rplicas aumentam a qualidade dos resultados - aumenta o grau de confiana

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definio da exactido necessria / compromisso entre exactido e custos

Obter amostra representativa

Pequena quantidade no permite testar o mtodo

A complexidade da matriz influencia a metodologia a seguir
Nvel de concentrao

A validao pode diminuir o nmero de ensaios a realizar

Metodologia
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Dissolver as amostras

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falta de selectividade / exige por vezes o uso de sofisticadas tcnicas de separao

(cromatografia / extraco em fase slida / SPME)

Efectuar a medio

ignio / decomposio / fuso / oxidao / reduo / derivatizao

Eliminar interferncias

incluir calibrao do equipamento

Calcular os resultados

A maioria dos programas de aquisio inclue tratamento de dados

Estimar a confiana no resultado

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Maioria das anlise feita na fase lquida

Problemas de discriminao (solubilidade) e insolubilidade

um resultado analtico sem estimativa do nvel de confiana no tem valor

os erros podem ser determinados / estimados atravs da realizao de rplicas
validao do mtodo

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Validao

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Validao
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Especificidade (selectividade)

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Linearidade

medida do desvio ao valor real

Preciso

descreve a influncia de erros aleatrios

repetibilidade



de tempo

medies feitas em condies diferentes: pessoas / local / equipamento / tempo

Limite de quantificao (coeficiente de variao < 10%)

medies feitas nas mesmas condies de operao e num curto intervalo

reproductibilidade

Valor mais baixo da linearidade (cerca de 10x o rudo de fundo)

Limite de deteco

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medida da proporcionalidade em relao quantidade medida

A falta de linearidade representa um desvio entre a quantidade medida e a quantidade real

Exactido (accuracy)

poucos mtodos so especficos (vlidos para uma nica substncia)

falta de especificidade implica a necessidade de separaes prvias

3X rudo de fundo!

A validao de um mtodo analtico imprescindvel obteno de resultados de confiana

Validao - definio de termos

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Mdia aritmtica

valor obtido dividindo a soma dos valores obtidos pelo

nmero de rplicas

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reprodutibilidade de valores obtidos do mesmo modo (ou no)

N
desvio mdia:
di = xi x
(x i
desvio padro:
s = i =1

coeficiente de variao ( % do desvio padro):

x)

Mdia: 19,8
mediana: 19,7

N 1

CV = (s / x).100%

aproximao ao valor real

Erro absoluto
Erro relativo

E = xi xt

Er =

xi xt
100%
xt

Brancos - determinaes em branco

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19,4; 19,5; 19,6; 19,7;

19,8; 20,1; 20,3

Exactido

Exemplo:

valor mdio de um conjunto organizado por ordem de tamanhos

Preciso

Mediana

x =

xi

i =1

realizao do teste sem amostra / elimina possveis erros de interferncias

validao
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Num laboratrio de cromatografia com dois analistas foram realizados vrios

testes para verificar se o mtodo em uso para a determinao por GC de
etanol em doxiciclina (tipicamente de 4,5%) poderia ser considerado vlido.
Foram obtidos os seguintes resultados:

tempos de reteno relativos: metanol: 0,3 / acetona : 0,6 / etanol 1,0

soluo amostra (100%) : 12345 / 12450 / 11950 / 12456 / 12100
solues a: 20%: 3500 / 40%: 4980 / 60%: 7305 / 80%: 9850 / 100%:
12300 / 120%: 14650
soluo amostra (repetio): 12245 / 12650 / 12405 / 12158 / 12250
soluo amostra (outro dia /analista): 11900 / 13070 / 12347 / 11250 / 12440

Nota: as percentagens indicadas dizem respeito ao valor tpico: 4,5%.

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Qual o valor obtido? Que concluses poder tirar quanto validade do mtodo e
destreza dos analistas envolvidos na determinao? Que sugeria para melhorar a
confiana no resultado?

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Soluo

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Resumo

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A qumica analtica uma rea interdisciplinar

Para uma anlise quantitativa deve seguir-se uma metodologia precisa

A confiana de um resultado est relacionada com a validao do mtodo

A validao pode dar indicaes precisas sobre a fragilidade da

metodologia, inclusive a falta de experincia (carncia de formao)