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1 edio junho/2007
HISTOLOGIA BSICA www.bioaula.com.br
SUMRIO
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INTRODUO HISTOLOGIA
Histologia
definida como sendo a cincia, parte da biologia, que estuda os
tecidos. O termo histologia foi usado pela primeira vez em 1819 por Mayer,
que aproveitou o termo tecido que Bichat (anatomista francs) instituiu,
muito tempo antes (por volta de 1800), para descrever macroscopicamente
as diferentes texturas encontradas por ele no corpo animal. Mayer fez a
conjuno do termo histos = tecido e logos = estudo. E o que tecido?
Tecido
H vrios conceitos para tecido. possvel encontrar alguns autores
que definem tecido como sendo um conjunto de clulas que apresentam
mesma forma, mesma funo e mesma origem embrionria. Mas, este
conceito no possui muita sustentao histolgica. Se analisarmos, por
exemplo, o sangue, veremos que a forma de uma hemcia (disco
bicncavo, anucleado na maioria dos animais domsticos) totalmente
diferente de um neutrfilo (ovide, quando no sangue, com ncleo
lobulado). Quanto funo destas clulas: a hemcia transporta oxignio e
gs carbono, enquanto o neutrfilo uma clula fagocitadora. Portanto,
vemos que apesar de pertencerem ao mesmo tecido elas no tm a mesma
forma e to pouco a mesma funo. Ainda outro exemplo nos remete a
raciocinar: no tecido sseo os ostecitos so clulas arredondadas cuja
funo contribuir na manuteno da matriz ssea, enquanto os
osteoclastos so clulas cuja forma varia muito, pois se movem atravs da
emisso de pseudpodes e so responsveis pela reabsoro ssea.
Portanto, nem possuem a mesma forma e muito menos a mesma funo.
Poderamos discorrer muito mais, mostrando inmeros exemplos em que se
constata que a grande maioria dos tecidos constituda por clulas que tm
funes e forma diferentes. J quanto afirmao de que as clulas de um
tecido apresentam mesma origem embrionria, de fato esta afirmao
aplicvel. As clulas que compem um tecido normalmente apresentam
mesma origem embrionria. Assim, como conceituar tecido? Tecido um
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Tecidos Fundamentais
Macroscopicamente Bichat, por volta de 1800, conseguiu identificar
21 diferentes tipos de tecidos. Mas com o advento do microscpio foi
possvel identificar muitos outros tecidos (aproximadamente 41). Mas todos
estes tipos podem ser agrupados em quatro diferentes tecidos, chamados
de tecidos fundamentais: os tecidos epiteliais, os tecidos conjuntivos, os
tecidos musculares e o tecido nervoso.
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2. Tecidos Conjuntivos
2.1. Propriamente dito de propriedades gerais
2.1.1. Tecido Conjuntivo Frouxo
2.1.2. Tecido Conjuntivo Denso 2.1.2.1. Modelado
2.1.2.2. No-modelado
2.2. Propriamente dito de propriedades especiais
2.2.1. Elstico
2.2.2. Mucoso
2.2.3. Reticular 2.2.3.1. Linfide
2.2.3.2. Mielide
2.2.4. Adiposo 2.2.4.1. Branco ou Unilocular
2.2.4.2. Pardo ou Multilocular
2.3. De sustentao
2.3.1.1. Hialino
2.3.1. Cartilaginoso 2.3.1.2. Elstico
2.3.1.3. Fibroso
2.3.2. sseo 2.3.2.1. Compacto
2.3.2.2. Esponjoso
2.3.3. Cimento e Dentina
2.4. De Transporte
2.4.1 Sangue
2.4.2. Linfa
2.4. Tecido Muscular
2.4.1. Tecido muscular estriado esqueltico
2.4.2. Tecido muscular estriado cardaco
2.4.3. Tecido liso
2.5. Tecido Nervoso
2.5.1. Tecido Nervoso propriamente dito
2.5.2. Neurglia
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2 Etapa: Fixao
A base de uma boa preparao histolgica a fixao que deve ser
completa e adequada. Para tanto preciso tomar algumas precaues que
so obrigatrias:
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3 etapa: Processamento
Aps a preservao do tecido, a etapa seguinte consiste em prepar-
lo para o exame microscpico. Com a finalidade de permitir que a luz o
atravesse, cortes muito delgados de tecido tm que ser feitos. Infelizmente,
embora o processo de fixao endurea o tecido, o material no se torna
suficientemente firme ou coeso para permitir cortes delgados perfeitos. Para
que esse grau de firmeza seja atingido, o tecido deve ser completamente
impregnado com algum meio de sustentao que manter juntas as clulas
e as estruturas intercelulares. Os materiais de sustentao usados so
denominados materiais de incluso.
Certos materiais de incluso, tais como Carbowax e a gelatina so
solveis em gua e os tecidos no precisam ser desidratados antes do uso.
Os materiais mais comumente usados so substncias semelhantes
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4 Etapa: Desidratao
Antes que um material de incluso, tal como a parafina, possa
penetrar no tecido seu contedo em gua deve ser removido. A
desidratao levada a efeito imergindo o bloco de tecido em
concentraes crescentes de lcool etlico. O lcool o agente mais
comumente utilizado neste processo, sendo empregado numa srie
crescente (70% - 80% - 90% - 100%) para se evitar a retrao
pronunciada do tecido ocasionando leses estruturais da clula de carter
irreversvel. O lcool tem a vantagem de endurecer mais o tecido. O volume
de lcool dever ser 10 a 20 vezes maior que o volume da pea.
Vrias so as substncias utilizadas como agentes de desidratao:
lcoois etlico, butlico, metlico e isoproplico, a acetona, o ter, o
clorofrmio e o xido propileno. O lcool etlico o mais utilizado em
tcnica de rotina.
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7 etapa: Microtomia
Para se obter cortes de material includo em parafina ou por
congelao necessrio um instrumento especial: o micrtomo. Os
micrtomos variam de acordo com os fabricantes e tem como fundamento
duas peas principais: o suporte ou mandril (onde fixada a pea a cortar)
e a navalha. O suporte sempre encaixado a um parafuso micromtrico ou
a uma espiral metlica que o faz adiantar segundo seu eixo, em medida
conhecida e que pode ser regulada vontade. Esta medida tem como
unidade o micrmetro que corresponde milsima parte do milmetro.
Normalmente um micrtomo faz cortes cuja espessura varia de 1 a 50
micrmetros, mas a espessura mais utilizada em microscopia ptica de 4
a 6 micrmetros. H vrios tipos de micrtomos: rotativo, tipo Minot, de
congelao e o destinado a trabalhos de microscopia eletrnica.
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9 etapa: Colorao
a tcnica tintorial empregada para facilitar o estudo dos tecidos sob
microscopia. A colorao de importncia fundamental em histologia, pois
os tecidos no tratados tm pouca diferenciao ptica. As coloraes de
um modo geral se efetuam por processos fsico-qumicos ou puramente
fsicos e podem ser consideradas, segundo a modalidade, a ao, o carter,
o grau de ao, o tempo, o nmero de corantes e a cromatizao.
Quanto cromatizao, ou seja, de acordo com o nmero de cores
conferidas s estruturas pelas coloraes simples ou combinadas, estas
tomam a denominao de coloraes monocrmicas (uma cor),
bicrmicas (duas cores), tricrmicas (trs cores) e policrmicas (mais
de trs cores).
Para se corar convenientemente a clula, deve-se recorrer a um
mtodo de colorao sucessiva do ncleo e do citoplasma.
A combinao mais comum de corantes usada em Histologia e
Histopatologia a Hematoxilina e Eosina (HE). A hematoxilina um
corante natural obtido da casca de pau campeche. Ela no realmente um
corante e deve ser oxidada em hematena a fim de tornar-se um corante.
Ademais, o corante que resulta (hematoxilina-hematena) no tem afinidade
para os tecidos. Deve ser usado um mordente, como o alumnio ou o ferro,
juntamente com a mistura de hematoxilina antes que ela possa corar os
tecidos. A mistura cora em azul-prpura. A eosina um corante sinttico
e produz uma colorao vermelha.
Nas clulas coradas com HE os cidos nuclicos presentes no ncleo
so corados pela hematoxilina, dando ao ncleo um tom azul-prpura. A
eosina atrada pelos elementos bsicos da protena do citoplasma da
clula, corando-o de rseo a vermelho. Os componentes dos tecidos que se
coram prontamente com os corantes bsicos so chamados basfilos; os
que tm afinidade pelos corantes cidos so chamados acidfilos. A
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10 etapa: Montagem
Depois que o corte tiver sido corado com a soluo apropriada, ele
passado atravs de concentraes crescentes de lcool para remover, de
novo, a gua (desidratao). Objetiva-se com esta desidratao aumentar a
sobrevida do preparado histolgico.
Finalmente, o corte banhado em xilol antes de ser montado em um
meio solvel em xilol, que o meio de montagem (para os cortes de
parafina usado o Blsamo de Canad). Uma gota do meio de montagem
colocada sobre o corte e a lamnula posicionada sobre o corte de forma
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INTRODUO MICROSCOPIA
1. Microscpio ptico
Um microscpio ptico pode ser simples ou composto: o microscpio
simples possui uma nica lente e s fornece uma imagem moderadamente
aumentada do objeto que se est estudando; o microscpio composto
consiste de uma srie de lentes e fornece um aumento muito maior.
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