13/05/2014

Fermentao Descontnua
Fermentao por batelada
Processo descontnuo

Fermentao Descontnua Carga Fermentao Descarga

A soluo Terminada a Lava-se a

nutriente fermentao, dorna,
esterilizada no descarrega-se a esteriliza-a e
fermentador dorna e o meio recarrega
inoculada com fermentado como novo
microrganismo segue para os mosto e
e incubada tratamentos inculo.
finais;

Presena de tempos mortos;

Baixos rendimentos e/ou Menores riscos de contaminao;
produtividade quando o substrato Grande flexibilidade de operao;
adicionado de uma s vez no incio Controle da estabilidade gentica do microrganismo;
da fermentao. Capacidade de identificar todos os materiais relacionados

Inculo (P de cuba, p de fermentao)

Fases de preparao do inculo
Volume de suspenso microbiana de concentrao adequada capaz de garantir, em Fase de laboratrio
condies econmicas, a fermentao de um dado volume de mosto. O microrganismo transferido do meio slido para o meio lquido esterilizado em
condies asspticas (proporo varia de 10 a 200 vezes);
Capacidade produtiva do inculo Aps incubao transfere-se o contedo do frasco para frascos com meio sterilizado
apropriados para shakers;
Manuteno da cepa do microrganismo: Aps incubao transfere-se a suspenso microbiana para frascos maiores com meio
Secagem do microrganismo em terra, areia slica ou outro material slido; esterilizado;
Conservao em gar inclinado;
Congelamento em nitrognio lquido; Fase Industrial
Manuteno de esporos em gua; A suspenso microbiana ento transferida para o pr-fermentador at o volume
Liofilizao. encerrar 10% da capacidade til da dorna

Centros especializados
Distribuir os microrganismos para as fbricas; As transferncias devem ser feitas nas fases logartmicas de crescimento
Realizar testes de viabilidade e estabilidade gentica; microbiano.
Empregar metodologias de melhoramento gentico

Mosto (Meio de fermentao) Mosto (Meio de fermentao)

Exceto para C, O e H, a formulao do meio nutriente baseada na tabela abaixo:
Fontes de elementos principais Deve-se
C, H, O e N Elemento Percentual da clula seca
lembrar que o
Carbono 50
mosto, alm de
Nitrognio 7-12
Fontes de elementos secundrios propiciar o
Fsforo 1-3
P, K, S, Mg desenvolviment
Enxofre 0,5 10
o microbiano,
Magnsio 0,5
Vitaminas e hormnios deve favorecer
Cu, Co, Fe, Ca, Zn, Mo, Mn: 10-4 a 10-5 M para 30g de clulas secas/L e 3 g de clulas
a formao do secas/L, respectivamente.
Fontes de traos de elementos produto que se
deseja. A quantidade do substrato limitante ser em funo do quanto se deseja
Ca, Mn, Fe, Co, Cu e Zn produzir de microrganismo, ou produto levando em conta a relao
estequiomtrica entre substrato e quantidade possvel de se produzir de
clulas ou de produto.

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Mosto (Meio de fermentao) Mosto (Meio de fermentao)

Fatores a serem considerados na definio do mosto:
Meios naturais: extratos de plantas ou animais
Sucos de uva, leite, gua de macerao de milho, etc.. Custo do substrato;
O custo o fator Quantidade de carbono disponvel;
Composio indefinida e varivel limitante da Exigncias para sua fermentao;
Meios ricos que geralmente dispensam complementao utilizao de Suprimento do substrato;
meios sintticos Disponibilidade;
em escala Variabilidade na composio da matria-prima;
Meios sintticos: meios elaborados quimicamente industrial. Condies de armazenamento;
Dificuldade de esterilizao do mosto;
Elucidar efeitos nutricionais
Fermentescibilidade;
Comportamento do mosto durante e aps a fermentao;

Outros Custos: transporte, combustvel, disponibilidade de gua, etc...

Classificao de Processos Descontnuos Nmero de Dornas

Um inculo por dorna: inoculao de uma dorna com um microrganismo
que foi propagado a partir de uma cultura pura.
Pequeno risco de contaminao
Recirculao de microrganismos: reaproveitam como inculo o
microrganismo de batelada anterior;
Espera-se a sedimentao do microrganismo (cervejarias) ou centrifuga
o meio fermentado (lcool).
Tratamento do leite de lvedo com gua e cido sulfrico para
eliminao de contaminantes e clulas em fase de degenerao.
Processo por meio de corte: inocula-se uma dorna. Em um estgio
apropriado transfere-se parte do contedo do fermentador A para um fermentador B
vazio e em seguida enche-se as duas dornas com meio a fermentar.
Instalaes de fermentao, funcionando por processo descontnuo,
fornecendo de maneira ininterrupta, lquido fermentado ao setor
encarregado dos tratamentos finais.
F = Vazo mdia de lquido fermentado que deve ser fornecido ininterruptamente ao setor de
tratamentos finais;
tf = Tempo necessrio para que o contedo de uma dorna fermente;
V = Capacidade til da dorna;
D = nmero de dornas, de capacidade til V, necessria para garantir a vazo F de lquido
fermentado;
td = tempo necessrio para se descarregar uma dorna;
tc = tempo necessrio para se limpar e carregar uma dorna.
M = massa do produto final que interessa produzir em um tempo t.
r = rendimento dos tratamentos finais
C = concentrao do produto final no lquido fermentado.

Nmero de Dornas Nmero de Dornas

Consideraes iniciais Processo contnuo de alimentao do setor de tratamentos finais
Vazo quantidade
de material
transportado atravs O valor de tc varia de caso para caso, mas quando se pretende dimensionar uma
de uma tubulao, instalao toma-se como ponto de partida que tc = td para o clculo do nmero de
por unidade de tempo dornas (D).
Onde: 1 Incio de preparo da dorna
F = Vazo mdia de lquido fermentado que deve ser fornecido 2 Fim da carga
ininterruptamente ao setor de tratamentos finais; 3 Fim da fermentao
M = massa do produto final que interessa produzir em um tempo t. 4 Fim da descarga
r = rendimento dos tratamentos finais
C = concentrao do produto final no lquido fermentado. Dever existir um intervalo de tempo
td separando o incio de
tf = depende de cada processo de fermentao, portanto no pode ser usado genericamente nesse funcionamento de duas dornas
clculo; consecutivas.

Assim sendo, utilizaremos td que pode A dorna D funcionar no

ser calculado:
instante:
Ex.: A dorna 3 comear a ser carregada no instante:
(3-1)td = 2td

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Nmero de Dornas
Processo contnuo de alimentao do setor de tratamentos finais

De acordo com a figura ao lado, Fermentao Descontnua

para :
Alimentada
A dorna D iniciar seu
funcionamento no instante:

Processo Descontnuo Alimentado

Processo Descontnuo Alimentado
Tcnica em processos microbianos, onde uma ou mais nutrientes so adicionados ao
fermentador durante o cultivo e em que os produtos a permanecem at o final da Curva hipottica com vazo constante de alimentao
fermentao.
Devido a flexibilidade de utilizao de diferentes vazes de enchimento de dornas com meio
nutriente, possvel controlar a concentrao de substrato no fermentador, de modo, que por
exemplo, o metabolismo microbiano seja deslocado para uma determinada via metablica,
levando ao acmulo de um produto especfico. V Volume de meio
S Concentrao de substrato
Mp Massa do produto
Mx Massa celular TE Tempo de enchimento
X Concentrao celular TF - Tempo de fermentao
TE Tempo de enchimento
TF Tempo de fermentao

Durante a fase de enchimento possvel

observar massa celular crescente e
concentrao celular decrescente at TE.

Processo Descontnuo Alimentado Processo Descontnuo Alimentado

Aplicaes Aplicaes
Minimizao dos efeitos do controle do metabolismo celular
Preveno da inibio por substratos ou precursores

O controle da vazo de alimentao permite que se evite o trabalho em condies inibitrias,

Eficincia do microrganismo mecanismo regulatrio do metabolismo celular
melhorando a produtividade e/ou rendimento de processos fermentativos.
Ex.: glicose reprime genes que codificam enzimas relacionadas ao metabolismo de outras fontes
Minimizao da formao de produtos de metabolismo txicos
de carbono (represso catablica).
Fermentaes com altas densidades celulares devido ao baixo rendimento celular
Em processos descontnuos alimentados a concentrao de glicose pode permanecer baixa e a
biossntese de enzimas desreprimidas.
Fonte de carbono em excesso leva a formao de cido actico que est relacionada ao aumento
da velocidade de crescimento do microrganismo.
Na produo de protenas evitando a formao de proteases (adio de fontes de nitrognio);
Na produo de antibiticos;
Manter as velocidades de crescimento celular em intervalos desejados.
Processos em que a formao de produtos no seja associada ao crescimento;
Na produo de aminocidos os quais tm suas vias de formao reguladas por retroinibio.
Na utilizao de mutantes auxotrficos controlando a alimentao do nutriente requerido para
o seu crescimento.

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Processo Descontnuo Alimentado Processo Descontnuo Alimentado

Aplicaes Classificao
Superao de problemas freqentes de estabilidade em processo contnuo Processo Descontnuo Alimentado Repetitivo

Contaminao Uma frao constante de volume de cultura removida em intervalos de tempos regulares,
Mutao podendo o processo de fermentao ser mantido indefinidamente.
Instabilidade de plasmdeo
Ex.: Produo de leveduras e antibiticos
Adequao do processo fermentativo a condies operacionais
Processo Descontnuo Alimentado Extendido
Evitar a produo de espuma na produo de etanol
No caso de nutrientes instveis; A concentrao de substrato limitante mantida constante no meio em fermentao pelo
Em fermentao de antibiticos (1 a 2 semanas) para reposio de lquidos e substrato. suprimento contnuo do nutriente.

Estudo de cintica de processos fermentativos

Permite manuteno de baixos nveis de substrato por longo perodo de tempo que favorvel
a estimao de parmetros cinticos,
Permite manter concentrao celular constante e controlar a velocidade de crescimento em
condies transientes.

Processo Descontnuo Alimentado

Classificao
Classificao baseada na adio de substrato controlada ou no por retroalimentao.

Processo Descontnuo Alimentado Processo Descontnuo Alimentado

Modelos Matemticos para Clulas Modelos Matemticos para Clulas
Dividindo por V
Velocidade de Variao da Massa Celular Total
= Massa Celular Decorrente do Crescimento
e

Considerando que a variao de volume da
dorna deve-se exclusivamente alimentao: ! !" #" " % % " " &"''" % ( (" % &) 0

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Processo Descontnuo Alimentado

Modelos Matemticos para Clulas - Exemplo
Processo Descontnuo Alimentado
Modelos Matemticos para Substrato

/0 /
1
,
+ A Velocidade de Massa de substrato
Massa de substrato
variao da massa utilizada para
de substrato no = adicionada por - crescimento
tempo
fermentador celular
+
+
/
1
0,
+

% '% " ( . &)

Processo Descontnuo Alimentado Processo Descontnuo Alimentado

Modelos Matemticos para Substrato Modelos Matemticos para Produto
Produto
/ Considerando que a variao de volume da
1 dorna deve-se exclusivamente alimentao: 7 7

/ Dividindo por V
1
A Velocidade de Massa de produto
variao da massa formada devido ao
de produto no
= metabolismo
1 /
1 fermentador microbiano

8

1 / ! ( %# " % ' & ' 3' "
7
/

8 Considerando que a variao de volume da

1 1 8 7 dorna deve-se exclusivamente alimentao:
1 / 1
4 /6 4 /6

Processo Descontnuo Alimentado

Modelos Matemticos para Produto
Produto

8
8 7

8
8 7 Dividindo por V

8
8 7

7
7 8