DOSEAMENTO DE ACIDO FLICO EMPREGANDO TITULAO

PONTECIOMTRICA

OLIVEIRA, Juliana R (Unitri) julianaroberta4@hotmail.com

ROSA, Gisele Arajo Alvarenga (Unitri) giselealvarenga.udi@hotmail.com
ARANTES, Delaine E (Unitri) Correspondncia: delainearantes@hotmail.com

Resumo: O cido flico uma vitamina, auxilia na deficincia de folato. uma

vitamina amplamente distribuda na natureza, estando presente em quase
todos os alimentos. O cido flico e indicado em profilaxia e tratamento de
anemias megaloblsticas, devida deficincia de cido flico, e diagnostico de
deficincia de folatos. Todo medicamento necessita de testes para avaliar o
teor de princpios ativos, a fim de garantir sua eficcia e segurana. Buscando
isso, o presente artigo teve como objetivo o doseamento de cido flico
utilizando-se a titulao cido e base. Foram utilizadas amostras de cido flico
em comprimidos de 5 mg, para a realizao das anlises. Na titulao
potenciomtrica cido-base, o teor de cido flico encontrado na amostra foi de
4,99%. Aps as anlises verificou-se que o mtodo potenciomtrico foi muito
eficiente.

Palavras-chave: cido Flico; Titulao; Potenciometria

5
1 Introduo
A deficincia de cido flico uma das deficincias vitamnicas mais
comum e sua carncia no organismo humano pode produzir graves problemas
de sade destacando-se defeitos na formao do tubo neural e anemia
megaloblstica (BAYNES; DOMINICZAK, 2000). As causas de deficincia do
cido flico podem incluir: ingesto inadequada, absoro insuficiente,
metabolismo deficitrio e demanda aumentada.
A gestao e a lactao incluem-se ainda, como causa de deficincia
aumentada. A necessidade de cido flico pelo organismo aumenta devido ao
aumento do volume sanguneo e do nmero de clulas, de modo que, no
terceiro trimestre de gestao as exigncias de cido flico dobram (BAYNES;
DOMINICZAK, 2000).
No sentido de reduzir sua carncia, o cido flico vem sendo adicionado
em alimentos consumidos em grande escala pela populao, compensando
sua necessidade atravs de uma dieta alimentar (AGUIAR et al., 2003).Outra
forma de suprir a necessidade de cido flico a sua prescrio mdica, sendo
encontrado facilmente, em drogaria comprimido cotendo cido flico como
principio ativo.
O cido flico, folacina ou cido pteroil-L-glutmico, tambm conhecido
como vitamina B9 ou vitamina M, uma vitamina hidrossoluveis pertencente ao
complexo B necessria para a formao de protinas estruturais e
hemoglobina. S a alimentao no oferece a quantidade suficiente de cido
flico que a mulher precisa ingerir diariamente, pois o cozimento dos alimentos
diminui a ao da vitamina (KOROKOLVAS, 2000).
A quantidade indicada pela Organizao Mundial da Sade e defendida
pelos mdicos de 0,4 miligrama por dia de cido flico para a preveno de
ocorrncia dos defeitos do tubo neural. As mames que j tiveram um filho com
algum tipo de alterao do tubo neural merecem dose extra de ingesto dessa
vitamina. O cido flico previne outras alteraes tambm como doenas do
corao, do trato urinrio e fissura lbio-palatina. Para a mame, a vitamina
traz benefcios como prevenir doenas cardacas, certos tipos de cncer e
anemia (CATHARINO, 2006).
A descoberta do cido flico foi nos anos quarenta, fora isolado da folha de
espinafre. Sua primeira sntese foi realizada em 1945, por Angier e
colaboradores que tambm determinaram sua estrutura em 1946.Investigaes
posteriores evidenciaram que o cido flico e vitamina amplamente
disseminada na natureza ocorrendo nas formas tanto livre como conjugada
(KOROLKOVAS, 2006, p. 412).
O acido flico e quimicamente conhecido como cido N-[p-[(2-amino-4-
hidroxi-6-pteridinil)metil]- amino]benzoil]-L-glutmico (figura 1) com a frmula
molecular C19H19N7O6 pertence a classe das vitaminas, complexo, sendo
indicado no tratamento de carncias de cido flico, anemias hemolticas, e
megaloblsticas (RANG, 2001, p. 98).

6
 HO O
O

N
H
O
OH NH

OH N
N

H2 N N N
Figura 1 - Frmula estrutural plana do cido flico.

O cido flico largamente utilizado, fazendo-se necessrio seu

doseamento em amostras de frmacos.
A literatura vem apresentando avanos nos mtodos para determinao
de folatos, atravs de tcnicas como cromatografia liquidade alta eficincia
(CLAE), em funo de sua rapidez, alta sensibilidade, preciso e exatido.
Pesquisa como (CLAE) tm sido realizadas para determinao simultnea de
folatos, em preparaes farmacuticas multivitamnicas e em alimentos
(CATHARINO, 2006).
De acordo com a Farmacopia Brasileira (3 edio, 2000), o limite
aceitvel da dose de cido flico 98-102%. A administrao de um
medicamento com concentrao de princpio ativo acima ou abaixo da
concentrao declarada na formulao pode representar um srio risco para o
paciente.O cido flico administrado, de preferncia, por via oral, reservando
a via parenteral para os pacientes que no conseguem absorver por essa via.
A dose aconselhada de 0,4 a 0,8 mg/dia. Quando houver antecedente
com deficincia na formao do tubo neural (DFTN), a dosagem recomendada
de 4,0mg/dia, sendo esta considerada dose farmacolgica. Portanto,
extremamente necessrio o doseamento do cido flico em formulaes
farmacuticas com intuito de evitar riscos ao paciente durante o
tratamento.(RANG, 2001.P 99). O presente trabalho teve como objetivo
encontrar um mtodo simples e barato para facilitar anlises de rotina durante
o doseamento de acido flico.
O objetivo deste trabalho foi estudar o comportamento da curva de
titulao potenciomtrica do cido flico com hidrxido de sdio e, determinar o
teor de cido flico em amostras de frmacos comerciais.

7
2. Metodologia

2.1. Amostras
As amostras de cido flico foram adiquiridas no comrcio da cidade de
Morrinhos, na forma de comprimido 5mg, sendo todas as amostras de
comprimidos obtidas do mesmo fabricante e do mesmo lote. Tais amostras
foram analisadas de acordo com os mtodos propostos potenciometria e
titulao.

2.2. Preparo e Padronizao da Soluo de Hidrxido de Sdio

Na preparao da soluo de hidrxido de sdio (NaOH), pesou-se
4,2000 g de NaOH P.A (Fabricante:VETEC) que foi dissolvida em gua
destilada previamente fervida e resfriada, ambos foram colocados em balo
volumtrico de 1 L e, houve agitao a fim de homogeneizar a soluo. Em
seguida, a soluo alcalina foi armazenada em frasco plstico de um litro.
Utilizou-se na padronizao da soluo de hidrxido de sdio, biftalato
de potssio, C6H4(COOH)(COOK) (Fabricante: QEEL Qumica Especializada
Erich LTDA), o qual foi deixado em estufa (Fabricante: NEVONI, Modelo: NV
1.3) por 2 horas a 110C e colocado em dessecador at a anlise. Pesou-se
trs amostras deste sal, e transferiu cada uma delas para um erlenmeyer de
250 mL, no qual se adicionou 25 mL de gua destilada e duas gotas de
fenolftalena. Titulou-se cada amostra separadamente com a soluo de NaOH
0,1 mol/L previamente preparada. Anotou-se o volume gasto de soluo de
NaOH ao observar uma colorao rosada, a qual perdurou por cerca de 30
segundos.
Aps padronizao da soluo, esta foi diluda de 10 vezes para ser
empregada nas titulaes das amostras de cido flico.

2.3 Metodologia do peso mdio

Pesou-se, individualmente, 10 comprimidos de cido Flico. Anotou-se
o peso de cada comprimido e, posteriormente, calculou-se o peso mdio de
cada amostra. O clculo foi realizado atravs da soma dos valores obtidos de
cada amostra, dividindo pelo nmero de amostras de cada comprimido, 10
amostras.
Nos valores encontrados, pode-se tolerar no mais que duas unidades
fora dos limites especificados, em relao ao peso mdio, porm nenhuma
poder estar acima ou abaixo do dobro das porcentagens indicadas
(FARMACOPIA BRASILEIRA, 1988 p. V.1.1 e V.1.1.2).

2.4 Titulao potenciomtrica

O pHmetro (Fabricante: Quimis, Modelo: Q 400A) foi calibrado antes da

sua utilizao. Desta forma, lavou-se o eletrodo de vidro com gua destilada
secando-o com papel absorvente macio. Em seguida, colocou o eletrodo numa
soluo tampo pH 7,0 e, utilizando o boto Calibrao ajusto-se o
8
potencimetro para esse valor. Logo aps, retirou-se o eletrodo desta soluo,
que foi lavado e seco como anteriormente. Colocou-se o eletrodo em uma
soluo tampo pH 4,0 e, ajustou-se o potencimetro para esse valor utilizando
o boto Sensibilidade.
Pesou-se 0,444g da amostra de cido Flico (sendo que essa massa
corresponde a 4 comprimidos do mesmo). Colocou-se amostra em becker de
100 mL, sendo antes macerados em gral de vidro, adicionou-se gua destilada
at imerso completa do eletrodo, e manteve em constante agitao com o
auxlio de um agitador magntico. Na bureta colocou-se a soluo padronizada
de hidrxido de sdio, NaOH, 9,892x10-3 mol/L. Ligou-se o pHmetro
(Fabricante: Quimis Modelo: Q 400A) para obteno do pH inicial.
Em seguida, adicionou-se NaOH 0,1 mol/L anotando-se o pH do
sistema. Depois de obtidos os valores, fez-se um grfico para cada amostra
representando os pontos de equivalncia.

3 - Resultados e discusses

3.1 Padronizao da soluo de NaOH 0,1 mol/L

O experimento foi realizado em triplicata para maior confiabilidade dos
resultados. Em cada amostra pesou-se diferentes massas de biftalato de
potssio e, obteve volumes diferentes do titulante. Realizou-se clculos para
determinar a concentrao do titulante e obter a mdia e o desvio padro.
A soluo de hidrxido de sdio, foi diluda de dez vezes para ser
utilizada na determinao da amostra de cido flico.

Tabela 1 Resultados obtidos pos padronizao da soluo de hidrxido de sdio de

0,1mol/L
Amostra Massa Biftalato / g VNaOH / mL [NaOH] / mol.L-1
1 0,138 6,6 0,1025
2 0,105 5,4 0,09532
3 0,111 5,5 0,09893
0,09892

3.2 Determinao do peso mdio

O peso mdio essencial para a realizao de uma amostragem. Desta

forma, encontram-se as massas dos comprimidos analisados, nas tabelas 1 e
2.

9
 Tabela 2 - Valores obtidos aps a pesagem dos comprimidos de cido flico.

Amostra Massa / g

1 0,111g

2 0,112g

3 0,109g

4 0,115g

5 0,116g

6 0,111g

7 0,109g

8 0,115g

9 0,109

10 0,109

Peso Mdio = 0,112g 0,003g

3.3 Titulao potenciomtrica

A anlise potenciomtrica consiste na medio do pH medida que se
adiciona o titulante, soluo de hidrxido de sdio, NaOH. Utiliza-se para
obteno da atividade do on H+ em solues, um eletrodo de membrana de
vidro, que altamente seletivo e tem boa sensibilidade na deteco desse on
(Figura 2).
O eltrodo de vidro apresenta um formato de tubo de ensaio, fechado no
alto, sendo que no final contm um bulbo de vidro de paredes delgadas
sensvel ao pH. Ele possui em seu interior uma soluo-tampo de cloreto de
um eltrodo de referncia, geralmente prata-cloreto de prata ou calomelano
(EWING, 2001 p.214 ).

10
 Figura 2 Eletrodo de vidro combinado utilizado
na obteno do pH da soluo aps adio do
titulante. Fonte: EWING, G. W., 2001.

A titulao potenciomtrica uma tcnica que requer bastante ateno

do analista. Por se tratar de uma anlise instrumental, antes de se iniciar a
anlise deve-se calibrar o pHmetro, a fim de evitar erros. O eletrodro de vidro
muito sensvel, portanto deve ser manuseado com bastante cuidado.
importante fazer a calibragem do pHmetro antes de sua utilizao. Para isso,
deve-se empregar solues tampo devidamente preparadas, pois os erros de
medida podem ocorrer quando as solues-teste so pouco tamponadas e
quase neutras.
O eletrodo de vidro deve ser lavado com gua destilada soluo e, seco
utilizando papel absorvente macio. No deve secar bruscamente o eletrodo ou
esfreg-lo pois poderia ocasionar um erro na leitura do pH ao ser introduzido
na prxima soluo.
Aps terminar a anlise o eletrodo de vidro deve ser mantido em gua
destilada, exceto durante longos perodos de estocagem, os quais coloca-se o
eletrodo mergulhado em uma soluo tampo previamente preparada.
Deve-se ter os cuidados necessrio com a calibrao, lavagem dos
aparelhos e o conhecimento da tcnica para que se evite erros durante a
anlise. Realizou-se todos os cuidados com os instrumentos e tcnica, no
presente artigo, a fim de evitar os erros determinados.
Na titulao potenciomtrica, anotou-se o valor do pH aps cada adio
da base bem como o volume adicionado. Em seguida, obtve-se o grfico do pH
versus volume do titulante (Figura 3).

11
 11

10
V2 = 17,6 mL

9
pH

7 V1 = 5,1 mL

5
0 5 10 15 20 25
VNaOH / mL

Figura 3 - Curva da titulao potenciomtrica da

amostra de cido flico com soluo de hidrxido
-3 -1
de sdio 9,892x10 mol.L .

Como pode ser observado no grfico, h dois pontos de inflexo. Isto

caracteriza a presena de 2 mols de H+1 ionizveis (Figura 4).

HO O
O

N
H
O
OH NH

OH N
N

H2 N N N

Figura 4 Frmula estrutural plana do cido

flico. Em destaque encontram-se os H ionizveis.

12
 O primeiro ponto de inflexo, forneceu o valor de 5,1 mL da soluo de
hidrxido de sdio e apresenta viragem entre pH 6,2 e 7,5. O segundo ponto de
equivalncia ocorre no volume de 17,6 mL da soluo bsica na faixa de pH de
9,2 a 10,5.
Utilizando-se o volume de 5,1 mL da soluo de hidrxido de sdio
9,892x10-3 mol.L-1, foi possvel obter os resultados contidos na tabela 3, a
seguir, para a dosagem da amostra de cido flico.

Tabela 3 Resultados obtidos aps anlise da amostra de cido flico.

Massa
Teor Teor Massa Massa Massa por
da
esperado encontrado encontrada esperada comprimido
amostra
/% /% /g /g / mg
/g

0,446 4,50 4,99 0,0223 0,020 5,5

De acordo com a Farmacopia Brasileira, (3 edio, 2000), para

determinao do cido flico em amostra de frmaco utiliza-se uma
metodologia que requer o emprego de vrios reagentes, tornando o
procedimento dispendioso. Utiliza-se tambm um fotocolormetro, equipamento
que no encontrado na maioria dos laboratrios de anlise. Assim a tcnica
proposta, no presente trabalho foi muito precisa e o equipamento utilizado
relativamente barato e, encontrado facilmente nos laboratrios de anlises.

4 - Concluses
De acordo com a Farmacopia Brasileira (3 edio, 2000), o limite
aceitvel da dose de cido flico 98-102%. Com base nos clculos feitos com
base nesse padro. O valor esperado do teor seria de 4,50% e o valor obtido
nesse experimento foi de 4,99%. Referente massa esperada por comprimido,
em miligrama, seria de 5,0 mg e o valor obtido foi de 5,5 mg.
Conclui-se que o valor de 0,5 mg encontrado que est acima do valor
esperado, no prejudicial a sade. Geralmente, a empresa coloca um pouco
a mais do que consta no rtulo para garantir que vai ser absorvida a
quantidade ideal para o tratamento do paciente. Desta forma, aps anlise dos
resultados, foi possvel concluir que o valor esperado est muito prximo ao
valor encontrado. Assim, esta anlise muito precisa na determinao de
cido flico em amostras de medicamentos.

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5 - Referncias

AGUIAR, M. J. B; CAMPOS, A. S; AGUIAR, RALP; LANA, A; MAGALHES RL,

BABETO LT. Defeitos de fechamento do tubo neural e fatoresassociados em
recm-nascidos vivos e natimortos. Jornal de pediatria, Rio de Janeiro, v. 79,
n. 2, 2003, p. 129 -134.

BAYNES, J., DOMINICZACK, Marek H. Bioqumica mdica. So Paulo:

Manole, 2000. p 116 -120.

CATHARINO, R. R., GODOY, H. T., LIMA-PALLONE, J. A. Metodologia

analtica para determinao de folatos e cido flico em alimentos. Qumica
nova, So Paulo, v. 29, n. 5, 2006. p. 972-976.

EWING, G. W. Mtodos intrumentais de anlise qumica: volume I. So

Paulo: Edgard Blucher, 2001. p. 214, 215, 219.

Farmacopeia brasileira: parte I. 4. ed. So Paulo: Atheneu, 1988. p. V.1.1 e

V.1.1.-2.

Farmacopeia brasileira. 3. ed. So Paulo: Atheneu, 2000.

KOROLKOVAS, A., Dicionrio teraputico Guanabara : 2006/2007. Rio de
Janeiro: Guanabara Koogan, 2006, p. 9.5.

RANG, H. P.; DALE, M. M.; RITTER, J. M., Farmacologia. 4. ed. Rio de

Janeiro: Guanabara Koogan, 2001. p. 98.

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