Disciplina: Metabolismo e Desenvolvimento Vegetal

Prof. responsável: Dra Selma A. Hebling

Roteiro adaptado de MAESTRI, M. et al. Fisiologia Vegetal – Exercícios Práticos. Viçosa:
Editora UFV. 1998.

AULA PRÁTICA 1

PLASMÓLISE E EFEITO DE SUBSTÂNCIAS TÓXICAS SOBRE A

PERMEABILIDADE DAS MEMBRANAS CELULARES

INTRODUÇÃO
Quando se coloca uma célula vegetal numa solução, ela ganha ou perde água,
conforme seu potencial hídrico seja menor ou maior do que o potencial hídrico da solução
externa. Se o potencial hídrico da célula for maior do que o da solução externa, a célula
perderá água e o protoplasma (com o vacúolo) vai se retraindo até separar-se da parede
celular. Esse fenômeno é denominado plasmólise e o inverso, desplasmólise. Ambos só
ocorrem porque o protoplasma é envolvido por membrana plasmática ou plasmalema,
dotada de permeabilidade diferencial (permeabilidade seletiva ou semipermeabilidade).
Essa permeabilidade mantém as duas fases (solução externa e solução interna) separadas. A
membrana plasmática deixa a água passar livremente, mas impede, em maior ou menor
grau, a passagem de solutos, e isso faz com que as fases externa e interna se conservem
individualizadas. É certo que o vacúolo possui sua própria membrana também com
características semipermeáveis, mas em série com a membrana plasmática e, assim, o
protoplasma e o vacúolo funcionam como um todo em suas relações hídricas.
Se as membranas plasmáticas, cuja integridade física é essencial para a manutenção
da permeabilidade, forem danificadas por agentes químicos ou físicos, os solutos terão livre
trânsito e se distribuirão no meio aquoso (externo e interno) por difusão. As células e
organelas perderão, portanto, a capacidade de reter solutos contra o gradiente de
concentração.
No tecido que perde água na forma de vapor (transpiração), as células tendem à
retração (diminuição do volume), sem que o protoplasma se separe da parede celular. A esse
fenômeno natural chamamos citorize. Grandes tensões desenvolvem nas células, podendo
levar à ruptura e desorganização da estrutura protoplasmática e, conseqüentemente, à
morte.

OBJETIVOS

Observar os processos de plasmólise e deplasmólise em células de tecido foliar.

Verificar o efeito do álcool etílico sobre a permeabilidade das membranas celulares.
MATERIAL

- solução de sacarose a 0,25 M

- álcool etílico
- microscópio
- lâminas e lamínulas de vidro, para microscopia
- lâmina de barbear
- tiras de papel-filtro
- estilete e bastão de vidro
- pinça de ponta fina
- folha de zebrina ou de outra espécie indicada

PROCEDIMENTO

Com o auxílio de uma lâmina de barbear e uma pinça, remova alguns fragmentos da
epiderme inferior de uma folha de zebrina (de preferência sobre a nervura principal) ou de
outra folha conveniente.
Coloque-os em uma lâmina com uma gota de água destilada, cubra com a lamínula
e observe ao microscópio.
Seque a água com papel-filtro e coloque a solução de sacarose 0,25 M. Observe
como o protoplasma se desloca da parede celular em conseqüência de sua diminuição de
volume, fenômeno que se chama plasmólise.
Substitua a solução de açúcar por água destilada. Se não houver mudança alguma,
repita o procedimento com células plasmolisadas recentemente.
Depois de provocar a desplasmólise num fragmento de epiderme de zebrina,
segundo a técnica usada anteriormente, trate-o com uma ou duas gotas de álcool. Observe o
que acontece com o pigmento vermelho do vacúolo (antocianina).

QUESTÕES

1. Defina plasmólise e desplasmólise.

2. Desenhe uma célula normal e uma plasmolisada.
3. Qual é o pigmento vermelho das células de zebrina e onde se localiza?
4. O que sai da célula durante a plasmólise, água ou suco celular? Qual a evidência para
essa conclusão?
5. Por que o pigmento não saiu das células quando houve plasmólise? E por que saiu
quando as células plasmolisadas foram tratadas com álcool?
6. Por que, quando se quer determinar plasmólise em células, se utilizam soluções de
sacarose ou de carbonato de cálcio e nunca substâncias como éter ou acetona?
7. Por que as células de uma folha não se plasmolisam quando ela murcha?