UNIVERSIDADE CATÓLICA DE MOÇAMBIQUE

Faculdade de Ciencias de Saude

Curso: Medicina Geral

Ano Propedêutico
Disciplina: Biologia Celular e Molecular

AULA 11- CITOGENÉTICA – Parte 2

Docente: Joana J.
03/2021

1
 EXPRESSÃO GÊNICA

O termo expressão gênica refere-se ao processo em que a informação codificada por um

determinado gene é descodificada em uma proteína. Teoricamente, a regulação em
qualquer uma das etapas desse processo pode levar a uma expressão gênica
diferencial.
 OBJETIVOS DA REGULAÇÃO DA EXPRESSÃO GÊNICA EM BACTÉRIAS E
EM ORGANISMOS MULTICELULARES

•Nas bactérias e outros unicelulares o controle da expressão gênica

serve principalmente para permitir que as células se ajustem às
mudanças nutricionais no ambiente, de forma que o seu crescimento e
divisão sejam optimizados.

•Em organismos multicelulares a expressão gênica controlada regula um

programa genético fundamental para a diferenciação e o
desenvolvimento do organismo.
COMO UMA CÉLULA PODE CONTROLAR AS PROTEÍNAS QUE ELA PRODUZ?

•Controlando quando e como um determinado gene deve ser transcrito;

•Controlando como um transcrito primário de RNA sofre o “splicing” ou é

processado;

•Selecionando quais mRNAs são traduzidos;

•Activando ou inactivando seletivamente as proteínas depois da sua

síntese.
 ESTRUTURA GÉNICA

Gene
• Segmento de DNA que é necessária para a síntese de uma molécula de
mRNA que irá comandar a sintese de um polipeptídeo funcional .

Unidade de Transcrição / fita codificante ou activa:

•segmento de DNA que codifica a sequência no transcrito primário.

Promotor:
• É a sequência de DNA mínima necessária para que a transcrição se inicie
corretamente.
Reguladores
• São elementos/ na sua mairia proteinas que regulam a iniciação e o
decurso da transcrição.

•Os elementos Reguladores e o promotor são activados por factores de

transcrição.
• Factores de transcrição (TFs)/ proteínas acessórias

• são proteínas necessárias para o início da transcrição, mas que

não sejam parte integrante do RNA polimerase.

• Identificam ao longo de um gene as sequências específicas do

DNA que indicam o local de início da transcrição, ou seja, a partir
de qual base o gene deve ser descodificado em RNA.

• permitem que haja uma ligação perfeita entre a enzima RNA-

polimerase e o DNA, permitindo assim a transcrição e a futura
tradução.

• são responsáveis pelo posicionamento correto da RNA-

polimerase no promotor, ajudam na separação das fitas de DNA
para permitir o início da transcrição.
• Factores de transcrição (TFs)
Os Factores de transcrição se classificam em:

• Factores de transcrição específicos: interagem com o regulador

do gene.

• Factores de transcrição basais: se unem à sequência TATA do

promotor para iniciar a síntese da molécula de RNA.
 ESTRUTURA GENICA

Além das sequências codificadoras, os genes eucarióticas possuem

muitas sequências não traduzidas (UTRs), com função regulatória.
 TRANSCRIÇÃO GÊNICA / SÍNTESE DE RNA
• Transcrição é o processo pelo qual uma molécula de RNA é sintetizada a
partir de um molde de DNA.
• Através da transcrição, são sintetizados todos os tipos de RNAs da célula,
ou seja, o (mRNA), o (rRNA), o (tRNA) e outros RNAs menores.
• Todos os RNAs estão envolvidos activamente na síntese protéica.
• A transcrição é realizada por um complexo enzimático cuja enzima chave
é a RNA polimerase, que realiza a síntese do RNA a partir de um molde
de DNA.
• Enquanto as bactérias contêm um único tipo de RNA-polimerase, as
células eucarióticas apresentam três:
• RNA-polimerase I,
• RNA-polimerase II e
• RNA-polimerase III.
 TRANSCRIÇÃO / SÍNTESE DE mRNA

• A transcrição espelha o estado fisiológico da célula pois, ocorre

para atender às suas necessidades e as do organismo num
determinado momento.
• Dependendo da necessidade da célula, o mesmo gene pode ser
transcrito incontáveis vezes até que a necessidade seja
suprimida.

Principais etapas Transcrição

• Iniciação
• Alongamento e
• Finalização
 INICIAÇÃO DA TRANSCRIÇÃO/ sintese de mRNA.

• O processo da transcrição ocorre apenas no gene que deverá ser transcrito.

• Para que a RNA polimerase consiga encontrar o ponto de início da transcrição

ela necessita de proteínas conhecidas como Fatores de Transcrição.

• A síntese de mRNA começa em regiões do DNA chamadas de promotoras.

• Nos eucarióticos a principal região promotora é conhecida como TATA box.

Esta deve necessariamente ser reconhecido por uma proteína específica, a
TBP =TATA Binding Protein para que a Transcrição inicie.

• Além do TATA box, outras sequências consenso são necessárias para a correta
e eficiente transcrição de um gene, como os chamados CAAT box e GC box.

• Quando um factor de transcrição se liga ao TATA Box, um sinal é emitido para

que outros factores se liguem entre si e a outros elementos do promotor.
 INICIAÇÃO DA TRANSCRIÇÃO-Cont

• Quando todos os factores já estiverem em seus devidos locais, o

complexo estará pronto para receber a RNA-Polimerase II e formar o
chamado complexo de iniciação da transcrição.

• A RNAPolimerase II é responsável por abrir a dupla fita de DNA, e

colocar a primeira base.
 ALONGAMENTO

• Alongamento é o aumento da cadeia de mRNA para o qual outros factores

acessórios são necessários.

• O factor sigma se desliga e a RNA polimerase é activada;

• Os factores utilizados no complexo de iniciação da transcrição (factor sigma

etc) são liberados e a RNAPolimerase II sofre alterações na sua conformação
tornando se activa.

• A RNA polimerase abre a dupla-hélice do DNA e a desespiraliza a sua frente;

• A RNAPolimerase II encaixa ribonucleotídeos, produzindo uma única fita de

mRNA, complementar à fita de DNA que serve de molde.

• É formado um híbrido RNA/DNA;

• A fita de DNA utilizada é sempre a mesma e é denominada fita codificante ou

activa.
 ALONGAMENTO - CONT.
• O pareamento será : A → U, C → G, T → A e G → C
• À medida que o mRNA vai sendo sintetizado, o DNA é
despareado à sua frente.
A transcrição também ocorre no sentido 5’ 3’
 Finalização

• O mRNA recém-formado vai se desligando do DNA que lhe

serviu de molde.

• Quando a RNA-polimerase II encontra a sequência de finalização

(região terminação), o mRNA pára de ser sintetizado e adquire o
nome de Transcrito primário.

• A molécula de DNA é novamente pareada e se enrola

completamente.
• Sabe-se que todas as três RNAPolimerases terminam a síntese em
regiões consenso do DNA ricas em pares de bases T__A
consecutivas com as Adeninas na fita molde.
 Finalização Da Transcrição

NB: A Finalização Da Transcrição é um processo

ainda muito pouco conhecido
Resumo – Sintese de RNA
 Comparação
da transcrição em procariontes e eucariontes.
Transcrição em Procariontes Transcrição em Eucariontes

1. Catalizada por uma Enzima RNA 1.Catalizada por 3 RNAs polimerases.

polimerase.
2. Promotor reconhecido diretamente pela 2. Precisa de vários fatores de transcrição
RNA polimerase. para o reconhecimento do promotor.

3. Unidade de Transcrição simples. 3. Unidade de transcrição complexa.

4. Genes transcritos sem íntrons. 4. Genes transcritos majoritariamente com

íntrons e éxons.

5. Transcrição e tradução acopladas (Na 5. Transcrição (núcleo) separada temporal e

maioria das vezes acontecem em espacialmente da tradução (citosol).
simultâneo).
REPLICAÇÃO DO DNA EM VIRUS
Transcriptase reversa – uma enzima responsável pela Síntese de DNA á partir de RNA
 RETROVÍRUS
Os retrovírus correspondem a um grupo de vírus cujo material genético é
constituído por RNA.

Eles têm uma enzima chamada transcriptase reversa, que faz (como o nome
indica) uma transcrição inversa, produzindo uma molécula de DNA a partir do seu
RNA.

É importante lembrar que a transcrição, que ocorre normalmente em todos os

outros seres vivos, consiste na síntese de RNA a partir do DNA.

Uma vez produzido o DNA, este se integra ao cromossomo da célula hospedeira e

ocorre a síntese de proteínas virais, seguindo o processo normal da síntese
protéica (DNA-RNA-proteína).

Um exemplo muito conhecido de retrovírus é o vírus HIV, agente causador da

SIDA.
Há três principais tipos de RNA:
• RNA-m (RNA mensageiro),
• RNA-t (RNA transportador ou de transferência) e
• RNA-r (RNA ribossomico ou sintetizador).

ALÉM DESSES TRÊS TIPOS DE RNA, EXISTEM OS SEGUINTES:

• O RNA citosólico pequeno ou RNAcp (em inglês, small cytosolic RNA),
• Os RNA nucleares pequenos ou RNAnp (em inglês, small nuclear RNA) que fazem
parte de certas ribonucleoproteínas chamadas RNPnp.
• Estas moléculas desempenham funções importantes durante o processamento
dos RNAm.
• Os RNA nucleolares pequenos ou RNAnop (em inglês, small nucleolar RNA), que
fazém parte de certas ribonucleoproteínas chamadas RNPnop.
• O RNA de inativação do cromossomo X ou RNAxist (em inglês, X- inactivation
specific transcript RNA);
• Etc.
 RNA-MENSAGEIRO (mRNA)
• Determina a posição dos aminoácidos nas proteínas,
através da sequência de bases de sua molécula.
• É o único que será traduzido.
• Ocorre tanto no núcleo (onde é sintetizado) quanto
no citoplasma, onde se associa aos ribossomos para a
síntese de proteínas.
• É formado sempre que for necessário e depois de
exercer sua função é degradado para que os
nucleotídeos possam ser reciclados
RNA-MENSAGEIRO (mRNA)
 RNA RIBOSSÓMICO (rRNA)
• É fundamentalmente estrutural e ocorre em maior quantidade.
• É encontrado no nucléolo, onde é produzido e no citoplasma, associado a
proteínas e forma os ribossomos.
• Os ribossomos se combinam com o mRNA para formar os polirribossomos.
• Os ribossomas são os sítios da tradução, nestes ocorre a síntese das
proteínas.
RNA RIBOSSÓMICO (rRNA)
 RNA TRANSPORTADOR (tRNA)

• Pssuei o formato de trevo, é o que

ocorre em menor quantidade.

• É Sintetizado no núcleo e passa

imediatamente para o citoplasma.

• É Capaz de se combinar de modo

reversível, com certos aminoácidos
que serão transportados por ele
até aos ribossomas para formar as
proteínas.

• Cada tRNA é capaz de reconhecer

um determinado aminoácido e um
determinado códon no RNA-m.
Os três principais tipos de RNA:
 PROCESSAMENTO DO RNA
• Nos seres eucariontes, a informação necessária para a formação
de uma proteína não se encontra no DNA de forma contínua mas
fragmentada.
• O RNA produzido inicialmente (RNA pré-mensageiro ou RNA
precursor ou Primeiro transcrito) sofre um PROCESSAMENTO OU SPLICING,
antes de sair do núcleo:
- O Splicing é um processo que remove os íntrons e junta os
éxons para formar mRNA funcional. A ribozima é responsável
pela clivagem das ligações entre os nucleotídeos.
- As células procarióticas não possuem íntrons.
- Intrões: segmentos do RNA que são removidas (sem
informação para a síntese proteica);
– Exões: segmentos do RNA que são ligadas entre si para formar o
mRNA funcional.
PROCESSAMENTO OU SPLICING DO RNA
 PROCESSAMENTO DO RNA

O mRNA funcional sai do núcleo e migra para o citoplasma onde

será utilizado como molde para a produção de proteínas.

Não somente o RNA-m passa por processamento pós-transcricional,

o RNA-t também necessita de alterações, sofrendo clivagem
(remoção das extremidades).
TRADUÇÃO / CÓDIGO GENÉTICO/ SÍNTESE DE
PROTEÍNAS
 CÓDIGO GENÉTICO
• O código genético - é um dicionário que
fornece a correspondência entre uma
sequência de bases nucleotídicas e uma
sequência de aminoácidos.
• Um codão é um tripleto de nucleótidos
ou sequência de três bases no mRNA
que codifica um aminoácido específico.
• Anticodão – sequência de 3 bases
nucleotídicas no tRNA.
• Os pares codão e anticodão têm de ser
complementares.
Como se formam os codões de mRNA para poderem corresponder aos vinte
aminoácidos diferentes que ocorrem nos seres vivos?
Como se formam os codões de mRNA para poderem
corresponder aos vinte aminoácidos diferentes que
ocorrem nos seres vivos?

• A sequência de nucleótidos de mRNA contém as instruções

codificadas que deverão ser convertidas na linguagem dos
aminoácidos de modo que seu "significado" (uma proteína
útil) seja expresso.

• São quatro as letras do alfabeto do mRNA: A, U, C e G.

• Para formar os codões de mRNA, as 4 letras (A, U, C e G)

3
devem ser combinadas 3 a 3, ou seja, 4 = 64 codões
distintos. Destes, 61 correspondem aos 20 aa que entram na
constituição das proteínas.
 Código Genético
• A Tabela do Código Genético nos informa qual aminoácido será incorporado na
proteína de acordo com o codão presente no RNAm.
• Um códon (AUG) é o de inicio
• Os três (UAA), (UAG) e (UGA) são codões de terminação ou de parada ou sem
sentido; não codificam aminoácidos.
 Características do Código Genético
1 - Universalidade - é conservado em todas as espécies ou seja, os
codões têm o mesmo significado em quase todos os organismo do
planeta.

2 - Codão de iniciação – o codão AUG tem uma dupla função: inicia a leitura do
código (para a síntese proteica) e codifica o aminoácido metionina

3 - codões de terminação/finalização – os codões UAA, UAG e UGA

terminam a síntese da proteína
 Características do Código Genético - Cont

Degeneração do código

4 - Redundância ou Degeneração -
existem vários codões que codificam o
mesmo aminoácido. Apenas a metionina e
o triptofano são cada um deles especificado
por um único códon

5 - Não Ambíguo: um único códão não

especifica mais do que um aminoácido.

6 - Contínuo – sempre lido de 3 em 3

bases.
 Tradução
• É o processo no qual as sequências de nucleotídeos em uma
molécula de mRNA direccionam a incorporação de aminoácidos
em uma proteína.
• É a Segunda Etapa da Síntese de proteínas e ocorre no citoplasma,
precisamente nos Ribossomos. Estes possuem 2 subunidades, as
quais se unem quando o Ribossomos se ligam ao mRNA.
• Existem Códons de Início (AUG) e Códons de Parada (UAA), (UAG)
e (UGA)
• Na Tradução cada CÓDON (3 bases do RNAm) codifica um
Aminoácido.
• OBS.
• A maioria dos aminoácidos pode ser especificada por mais de um códon, a
leucina e a arginina e serina são especificadas por seis códons.
• Apenas a metionina e o triptofano são cada um deles especificado por um
único códon.
• O código genético é redundante (ou degenerado) pois, um aminoácido pode
ser especificado por mais de um códon porem, cada códon só pode designar
um aminoácido.
• Essa redundância é fundamental para e explica entre outras coisas, o facto de
que nem toda alteração no código genético leva a uma doença.
• Por ex: uma alteração de guu para GUC,, não deverá causar absolutamente
nenhuma alteração no fenótipo de um individuo, porque ambos codificam o
mesmo aminoácido (Valina).
• Porém há alterações na seqüência de ácidos nucléicos que podem resultar em
um aminoácido inapropriado e, se for inserido na cadeia polipeptídica,
causaraá uma doença ou mesmo a morte do organismo.
 Tradução e Síntese Proteica

Intervenientes Principais da Tradução:

Aminoácidos, RNA mensageiro, RNA transportador, Ribossomos,,
Fatores protéicos, moleculas energeticas ( ATP e GTP).
.

RNA transportador Metionina

Prolina

RNA mensageiro
Códon Serina

Anticódon Aminoácidos
Ribossomo
 Intervenientes da Tradução e Síntese Proteica - Cont

1-Os aas essenciais são obtidos pela alimentação.

2-RNAm – Serve de molde
3-Os RNAt também são denominadas moléculas adaptadoras:
– Em humanos existem em torno de 50 espécies de RNAt,
enquanto bactérias possuem em torno de 30-40 espécies;
– Sítios de ligação ao aa – extremidade 3’ do RNAt se liga ao
grupo carboxila do aa;
– Anticódon → sequência de 3 nucleotídeos que reconhece o
códon específico do RNAm
intervenientes da Tradução e Síntese Proteica -Cont

3-RNAt:
AA é ligado aqui

O pareamento códon-anticódon é
Estrutura secundária: folha de trevo complementar e antiparalelo

1 anticódon pode reconhecer mais de um códon

 intervenientes da Tradução e Síntese Proteica
-Cont

4-Ribossomos:

Ribossomos: grandes complexos de RNAr e

proteínas compostos por duas subunidades.

São as estruturas responsáveis pela síntese

protéica (é o aparelho da síntese ). Livres ou no
RER.

RNAr: responsáveis pela estabilização do

complexo de iniciação e dos demais
participantes da tradução
 intervenientes da Tradução e Síntese -Cont
4-Ribossomos:

• Sítio P: neste sítio, o códon de iniciação é posicionado para seu pareamento

com o anticódon do RNAt que transposta metionina – primeiro aa da tradução.

• Sítio A: neste sítio, o códon adjacente é posicionado para seu pareamento

com o anticódon do RNAt que transposta o próximo aa da cadeia polipeptídica.

• Sítio E: depois de ser traduzido, o códon é posicionado no sítio E (ou sítio de

saída) para seu desligamento com o RNAt, agora descarregado.
intervenientes da Tradução e Síntese - Cont
5- Fatores de iniciação, alongamento e
terminação . São representados por uma
família de enzimas que ligam os aa aos seus
RNAt. Ex: Aminoacil-RNAt sintetase

6-ATP e GTP – moléculas energéticas.

 Reconhecimento dos Códons pelo RNAt
• A ligação entre códon do RNAm e
anticódon do RNAt é
antiparalela;
• O códon é lido de 5’ para 3’; o
anticódon também deve ser lido
de 5’ para 3’. Portanto a primeira
base do códon pareia com a
última base do anticódon;
Etapas da Tradução e Síntese Proteica
 Etapas da Tradução e Síntese Protéica

Etapa 1
• Ativação e ligação dos aas aos seus RNAt. Ocorre no citosol com a
participação das aminoacil-RNAt sintetases.
Esta etapa Requer:
- 20 aas
- 20 aminoacil-tRNA sintetases
- Energia – ATP e GTP
- RNAt e RNAm
 Etapas da Síntese Protéica
Etapa 2 - Iniciação

O mRNA liga-se a
subunidade menor do
ribossoma e ao aminoacil-
RNAt de iniciação;

O RNAt carregado com a

metionina emparelha o seu
antecodão UAC com o codão
de iniciação AUG do RNAm.
 Etapa 3 - Alongamento:
O RNAt que inicia a tradução aloja-se
ao sitio P da subunidade maior e
adere a Metionina a superfície do
ribossoma.

Com o primeiro RNAt alojado no sitio P, o

ribossoma caminha para o próximo códão
e, um segundo RNAt carregado de prolina
liga-se ao sitio A também de forma
complementar ao segundo codão do
RNAm.

Com os 2 primeiros RNAt encaixados

aos sítios P e A, o ribossoma cataliza a
separação da Metionina e sua
imediata ligação a prolina através de
uma ligação peptídica.
 Etapa 3 - Alongamento:

O RNAt livre é liberado (através do sitio E)

deixando o sítio P para o segundo RNAt e,
o sítio A torna-se novamente disponível
para a entrada do próximo RNAt.

O ribossoma caminha em direção à

extremidade 3´do mRNA, ocupa o
terceiro codão e orienta a entrada do
terceiro RNAt carreador da Tirosina
que se liga no sítio A do ribossoma.

Assim, a medida que o ribossoma se

desloca sobre o RNAm a cadeia
polipeptídica cresce.
 Etapa 4 -Terminação:

Ocorre quando 1 dos 3 códons

(UAA, UAG, UGA) de terminação é
“colocado” no sítio A com auxilio do
factor de terminação ou liberação.

factor de
liberação

O factor de liberação
desconecta o polipeptídeo do
ribossoma e do RNAt e, este é
librado para o citoplasma.
EXPRESSÃO GÊNICA - SÍNTESE PROTEICA -
RESUMO
 Destino dos polipeptídios

Ex: As proteínas recém-sintetizadas no RER são envolvidas por membranas que brotam
continuamente no RER , formando as chamadas vesículas de transição; estas se fundem às
bolsas do complexo de golgi e liberam nelas o seu conteúdo proteico.
Código Genético
 Referências Bibliográficas:
1-AMABIS, J. M.; MARTHO, G. R.; Biologia das Células .Vol.1. 3 ed. São.

2- CHAMPE, Pamela C.; HARVEY, Richard A.; FERRIER, Denise R. Bioquímica

ilustrada. 3. ed. Porto. Alegre: Artes Médicas, 2006.

3- DE ROBERTIS, E.M.F. & HIB, J. Bases da Biologia Celular e Molecular. 3ª Ed.

Guanabara Koogan -‐ Rio De Janeiro. 2001.

4- Lewis, R. Genética Humana-‐ Conceitos e Aplicações. 1ª ed, Guanabara

Koogan, Rio de Janeiro, 2005.

5-Anthony J. F. Griffiths; Richard C. Lewontin; Carroll, Sean B.; Susan R.

Wessler. Introdução a Genética 9. ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2009.
FIM