GENÉTICA:

Bases moleculares da Hereditariedade - Aula 1

Alexia Vial

GENOMA: todo material genético de um organismo

O genoma é composto de ácidos nucleicos: DNA ou RNA (são polímeros de nucleotídeos)

Os ácidos nucléicos (DNA ou RNA) são capazes de armazenar informação e levar a informação
que está contida no genoma a ser funcional, ou seja, a ser traduzida numa proteína ou numa
sequencia de RNA

DNA:

É composto de nucleotídeos!! Nucleotídeos = 1 base nitrogenada ligada a um açúcar e um

grupo fosfato.

Bases nitrogenadas são classificadas em purinas e pirimidinas

Purinas = adenina e guanina

Pirimidinas = Uracil (só está presente no RNA), timina e citosina

Curiosidade sobre mutação: Citosina tem um grupo amino e pode sofrer perda natural do
grupo amino dentro da célula, e a citosina se transforma em uracil. (citosina é desaminada e se
transforma em uracil)

DNA É FITA DUPLA, como ele é organizado em fita simples:

Dna é composto de ligação do tipo fosfodiéster entre os nucleotídeos, ligando o grupo fosfato
de um nucleotídeo com a hidroxila do outro. Estrutura mais externa: de arcabouço; açúcar -
fosfato.

Do lado mais interno estão as bases nitrogenadas que vão se ligar com as bases nitrogenadas
da fita complementar formando a dupla hélice de DNA.

Grupos fosfatos ficam na parte mais externa formando arcabouço, na parte interna da
molécula tem-se as bases nitrogenadas. O paramento entre as partes se dá por pontes de
hidrogênio. O açúcar no DNA se chama desoxirribose

Base Adenina parea com Timina por ligação de 2 pontes de hidrogênio, enquanto que
a ligação entre Citosina e Guanina é feita por 3 pontes de hidrogênio.

Quando queremos abrir essas fitas de DNA: Adenina e Timina por terem uma ligação
de 2 pontes de hidrogenio é mais fácil de romper essa ligação do que Citosina e Guanina.

Como romper as pontes de hidrogênio? Como transformar um DNA dupla fita em DNA
simples fita? Por que às vezes é importante ter um DNA simples fita no ponto de vista de
laboratório? Resposta: Sequenciamento genético para descobrir doenças ou mutações da
família!! PCR = reação de amplificação de DNA
PCR:

Necessita de DNA molde e o DNA SEMPRE É DUPLA FITA ENTÃO = PRECISA usar alguma
metodologia para romper as pontes de hidrogênio e tornar o DNA em SIMPLES FITA!!

COMO??? Se aquecer o DNA em temperatura em torno de 90ºC essas pontes de hidrogênio

se ROMPEM. SE DIMINUIR A TEMPERATURA as pontes de hidrogênio são refeitas!! =
Dissociação e Ressociação!

Romper pontes de hidrogênio = desnaturação

Cuidar ao usar o termo "fita" porque a MÓLECULA DE DNA POSSUI 2 FITAS!

COMPLEMENTAR: Se tem uma Adenina do lado tem uma Timina e vice-versa. Ou seja, na
REPLICAÇÃO DO DNA = essa complementação é mantido e isso faz com que o DNA replicado
tenha a MESMA informação, os mesmos nucleotídeos do DNA original

Nos sulcos maiores se ligam proteínas relacionadas com a duplicação ou transcrição.

RNA ácido ribonucleico:

Nos eucariotos o RNA não é o material genético. O material genético é o DNA.

O RNA é importante porque leva a informação contida no DNA a ser traduzida numa
proteína. (em vírus o RNA pode ser material genético = mas só em vírus)

Ribose do RNA tem um grupo hidroxila. Por isso é um açúcar!

O açúcar no RNA se chama ribose.

Ligações iguais ao DNA - fosfodiester entre as bases

Diferença entre DNA - RNA não tem timina, porém tem Uracila

O RNA É SIMPLES FITA: Entretanto algumas vezes ele pode se dobrar e parear entre si
mesmo

No DNA há pareamento de duas fitas diferentes que se paream. No RNA se tem uma única fita
que pode se dobrar e parear entre si.

TIPOS DE RNA:

CODIFICADOR: Pega a informação que está no DNA e transforma numa molécula que é o
mRNA (RNA MENSAGEIRO) e depois isso será traduzido virando uma proteína.

RNAt RNA TRANSPORTADOR: transporta o aminoácido

RNA ribossomal: forma o ribossomo onde há a síntese de proteína

CLASSES DE RNA

CODIFICANTE- O RNA codifica a informação necessária para produzir cadeias polipeptídicas

(proteínas): RNA mensageiro (mRNA)

FUNCIONAL- O RNA não codifica informação para produzir proteínas. Em vez disso, o próprio
RNA é o produto funcional final: tRNA, rRNA, snRNA, microRNA, siRNA, etc...

As principais classes de RNA funcionais contribuem para as diversas etapas na transferência da

informação do DNA para a proteína, no processamento de outros RNA e na regulação do RNA
e dos níveis de proteínas na célula.
  As moléculas de RNA transportador ou de transferência (tRNA) são responsáveis por
transportar o aminoácido correto até o mRNA no processo de tradução
 As moléculas de RNA ribossômico (rRNA) são os principais componentes dos
ribossomos, que são grandes máquinas macromoleculares que guiam a montagem da
cadeia de aminoácidos pelos mRNA e tRNA.

RIBOSSOMO - É um associado de RNA's diferentes e proteínas diferentes

Ácidos nucleicos são material genético.

Manutenção e fluxo do material genético dentro das células se dão através de 3 processos:
 1. Replicação ou duplicação do DNA: Faz manutenção, processo que permite a
passagem dessa informação pras células filhas. A replicação garante que ambas células
filhas recebam as mesmas informações genéticas:
 Para fazer a replicação precisa fazer a abertura das fitas do DNA de dupla fita.
A informação é correta garantida porque o DNA é complementar.
 Como a fita original é mantida, dizemos que a replicação do DNA é semi
conservativa. Quando a fita dupla do DNA é aberta, teremos uma nova fita
sendo sintetizada chamada "fita filha"
 No final da síntese nós teremos uma molécula de DNA que ficou com uma das
fitas parental e a outra fita que foi sintetizada, a fita "filha". Dessa forma, a
informação genética foi mantida porque foi utilizada a fita parental como
molde.

 Iniciação: dentro do DNA terá locais onde se inicia a replicação: pontos de

abertura das fitas onde se forma a forquilha de replicação. O dna é replicado

no momento de fase S, antes da divisão celular, então varias origens de
replicação surgem.
 Fita está fechada e enrolada, para ser replicada ela precisa se abrir, o DNA vai
abrindo, as fitas filhas vão sendo sintetizadas e ele vai ficando dupla fita
novamente, ficando com uma fita mãe e uma fita filha.
 No final da replicação teremos: 1 molécula de DNA possuindo fita mãe e fita
filha E MAIS UMA molécula de DNA possuindo fita mãe e fita filha
 Temos 46 cromossomos, ou seja temos 46 moléculas de DNA todas essas
moleculas sao replicadas ao mesmo tempo
2. Transcrição: processo de copiar o DNA e transformar num RNAm (pagina 14)
3. Síntese proteíca: processo de copiar/traduzir a informação do RNAm formando uma
proteína

Quando uma célula se divide ela precisa duplicar seu material genético!!

Doença associada com problemas/controle/divisões celulares: câncer = perda do

controle das divisões celulares, exacerbada

Síntese do DNA:
  Quem faz a síntese do DNA é a enzima dna-polimerase (polimerisa os nucleotídeos)
 Ponto curioso: dna polimerase é uma olo enzima composta por várias subunidades
que se agrupam formando uma polimerase
 Polimerase só consegue fazer ligação dos nucleotídeos quando ela tem uma
extremidade 3' hidroxila livre, ou seja DNA polimerase sintetiza no sentido 5' ---> 3' se
não ela não consegue colocar um nucleotídeo
 DNA polimerase não consegue iniciar sozinha, necessita de primer iniciador de RNA
que depois são retirados e substituídos por DNA

Dizemos que a replicação é semidescontínua em uma das fitas porque: uma das fitas
de DNA é replicada linearmente, já a outra não, sendo replicada aos poucos. Fita
atrasada - replicação mais lenta que as outras.

Síntese do filamento descontínuo:

Na fita descontínua ela será sintetizada aos pedaços onde terá um primer, cada pedaço é
chamado de fragmento de Okazaki.
ALONGAMENTO DO TELÔMERO:
A telomerase sintetiza molécula de RNA pra funcionar como um primer para poder fazer a
extensão dessa molécula

O telômero é a extremidade do cromossomo. É uma região de repetição, replicado

pela telomerase porque a dna polimerase não consegue fazer essa replicação. A telomerase
não está presente (ou está presente em quantidades muito baixas) em células somáticas. A
telomerase está presente em grandes quantidades durante o desenvolvimento embrionário
nas células somáticas e nas células germinativas (que levam a formação dos gametas).
 Ter pouca telomerase nas células somáticas é bom ou ruim? Resposta: Bom, de certa
maneira. Como o encurtamento dos telômeros sinaliza para morte celular (apoptose), se os
cromossomos estão com telômero curto (originados de várias divisões celulares, aquela célula
já se dividiu diversas vezes, o DNA já foi replicado muitas vezes) isso significa que pode ter
havido erro durante a replicação e a célula está com o DNA com mutações. Entretanto a
apoptose (morte celular programada) é fundamental para o desenvolvimento, porém o
encurtamento dos telômeros também estão associados com o envelhecimento. "não quero
envelhecer então vou ter que ter telomerase nas minhas células"

Câncer - divisão celular descontrolada. Mecanismo para o câncer crescer: escapar da

apoptose. 1 dos mecanismos para escapar da apoptose é ter a função de telomarase
novamente. Em vários tipos de câncer observamos que a telomerase está funcional.

Resumo: é importante a presença do telomero para manter o tamanho do

cromossomo no período embrionário e nas células germinativas. Mas, a ausência dela
também é importante para que o ciclo celular seja correto.

SÍNDROME DE WERNER:

Causa envelhecimento precoce

Estudos genéticos e bioquímicos observaram que pessoas afetadas apresentam

telômeros mais curtos do que aqueles de pessoas normais em virtude de uma mutação em um
gene denominado WRN, que codifica uma proteína (uma helicase = enzima que atua na
abertura/torsão das fitas do DNA) que está associada a proteínas que formam a estrutura de
revestimento do telômero TRF2
 A proteína WRN se liga a duas outras proteínas chamada TRF1 e TRF2 que
formam uma proteção do telômero. Na ausência da proteína WRN o telômero é
degradado mais rapidamente, por isso está associado ao envelhecimento precoce.

COMO É POSSÍVEL COLOCAR TODO DNA DENTRO DO NÚCLEO?

Compactação do DNA - dentro do núcleo o DNA está compactado

Ocorre por causa das proteínas que estão associadas ao DNA, são elas:

Histonas: proteínas de carga positiva que se ligam ao DNA que tem carga negativa. Há
cinco tipos diferentes no DNA de eucariotos. Fazem compactação inicial da molécula
de DNA.

 nível de organização básicos da cromatina;

 responsáveis por grande parte da compactação do DNA nuclear
 regulação na expressão gênica

Não Histonas: São carregadas negativamente. Tem papel estrutural e na regulação

gênica
Cromatina = termo utilizado para DNA + proteína dentro do núcleo. Falamos "o dna
está dentro do núcleo" quando na verdade a cromatina é o dna + proteína
(organização dentro do núcleo). DNA + histonas = nucleossomos; vários nucleossomos
= cromatina
 2. TRANSCRIÇÃO:
 DNA(fita codificante) é copiado por RNA
 Síntese/cópia é feita por complementariedade a partir de outra fita de DNA -
fita molde
 A cópia/síntese é feita pela enzima RNA polimerase2. RNA polimerase II que faz
a transcrição, sem ela não há a transcrição
 O RNA gerado é chamado de RNA mensageiro (mRNA) = porque carrega a
informação para a tradução; diferente dos RNA ribossomais que não são
traduzidos, o mRNA é traduzido!!
 A transcrição é um processo geralmente bem regulado onde nem todo DNA é
transcrito até porque DNA tem regiões que não codificam e mesmo que
codifique, não é em todas as células que aquela proteína pode ser necessária.
 RNA polimerase 2 se liga a uma região promotora (tem esse nome por
PROMOVER a transcrição) em uma sequencia (região TATA BOX)
 Entre o início da transcrição e a regiao tatabox tem cerca de 25 nucleotídeos.
Negativo quando é antes do início da transcrição
 Fatores de transcrição (GTF) se ligam na região TATABOX, são necessários para
ligação da RNA polimerase II
 Fatores de transcrição específicos - que atuam em tecidos específicos
permitindo a ligação da RNA polimerase II em genes que precisam ser
transcritos naquele determinado tecido. Nem todo gene é transcrito em todos
os tecidos. E essa regulação se dá por meio desses fatores de transcrição
específicos
 Síntese RNA sentido 5'-->3'
 Sítio +1 da transcrição: início do RNA
 Sítio + 1 da tradução (AUG): início da proteína
 Rna polimerase II transcreve na verdade um mRNA inicial (RNA heterogenio
nuclear), ele está no nucleo e será modificado, aí sim irá ser traduzido no
citoplasma. A modificação é chamada de processamento de RNA mensageiro.
 Protegem o mRNA de degradação os processos: 1) capeamento químico da
extremidade 5; 2) Poliadenilação - adição de uma cadeia de adenosinas na
extremidade 3'. Tornam a molécula mais estável.

 Mecanismo SPLICING (corte e junção): retira os introns (sequencias

que não são usadas para formar aquela proteína)
 Exons = sequencia codificadora; Intron = sequencia que será retirada
 SÍNTESE PROTEÍCA:
Tradução: pegar informação e levar na síntese proteíca

Como a sequencia de nucleotideos leva a colocação de um aminoácido? Por causa do

CÓDIGO GENÉTICO!!

 Temos 20 aminoácidos essenciais que compõem as nossas proteínas; nem

todas proteínas tem 20 tipos de aminoácidos
 A ordem que esses aminoácidos são colocados na proteína, determina também
a função da proteína. Não podem ser colocados de forma aleatória.
 O DNA é transcrito em um RNA que será lido e traduzido num aminoácido. Isso
ocorre porque temos os "CODON".
 Cada 3 nucleotídeos corresponde a um aminoácido, exemplo: UGG
corresponde ao Triptofano

Esses aminoácidos são inseridos porque são transportados pelo RNA

transportador.
Cada aminoácido tem seu tRNA
 Na região do anticódon é complementar ao codon do RNA. Esse aminoácido vai
ser ligado dentro do ribossomo. Então terá as ligações entre os aminoácidos
formando a proteína.
 CÓDIGO GENÉTICO: universal para todos os organismos.
 Degenerado = para alguns aminoácidos, há vários códigos ex.: Leucina
(CUU;CUC;CUA;CUG)
 Codon de parada = quando esse codon é encontrado no mRNA, o
ribossomo dissocia, ou seja, para a síntese de proteína. (UAA;UAG;UGA)
 Codon de iniciação = AUG

RESUMO DE TUDO EM UMA IMAGEM:

Dessa forma temos uma cadeia polipeptídica, onde para ser proteína funcional deve
sofrer várias modificações inclusive na sua estrutura