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RADIOLOGIA

RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS: MICROBIOLOGIA E IMUNOLOGIA

CABO FRIO – RIO DE JANEIRO

2022
TEMA DE AULA: INTRODUÇÃO AO LABORATÓRIO DE MICROBIOLOGIA

RELATÓRIO:

Os riscos ocupacionais dentro do laboratório, podem ser divididos em cinco principais grupos:
 Riscos de acidentes: coloca em risco a integridade e bem-estar físico e moral do
profissional que trabalha dentro do local. Os maiores riscos estão associados a máquinas e
equipamentos que podem causar incêndio e explosões. Como, por exemplo: queimaduras,
cortes e perfurações.
 Riscos ergonômicos: Acontece devido aos esforços repetitivos que
prejudicam a postura do profissional, causando lesões graves a médio e longo prazo. São
considerados riscos ergonômicos: trabalhos em turnos muito longos e postura incorreta do
trabalhador durante a execução de suas funções.
 Riscos físicos: O risco físico pode ser gerado por máquinas e condições físicas
inadequadas, tais como: pressões anormais, temperaturas extremas de frio ou calor, ruídos e
vibrações, umidade, radiações ionizantes ou não.
 Riscos biológicos: Está relacionado ao manuseio ou contato com materiais e/ou
animais infetados com agente biológico como: bactérias, fungos, vírus e protozoários.
 Riscos químicos: Estão relacionados com a exposição do profissional a agentes e
substâncias químicas na forma líquida, gasosa ou em partículas de poeira, mineral e vegetal.
Os equipamentos de proteção individual (EPI’s) necessários, para que possa ser evitado os riscos
de acidentes dentro do laboratório:
 Óculos de proteção;
 Touca;
 Máscara de proteção;
 Luvas descartáveis;
 Sapato fechado;
 Calça.

Técnicas assépticas:
 Higienizar a bancada com álcool 70%;
 Higienizar mãos com sabonete liquido e sanitizar com álcool 70%
 Não trabalhar em corrente de ar
 Não falar nem respirar em frente ao recipiente aberto contendo material de estudo;
 Acender bico e Bunsen ou lamparina e manipular todo o material, com 30cm em um
raio de 360° ao redor do bico de Bunsen ou lamparina.
 Abrir o recipiente inclinado junto à chama, onde o ar está rarefeito de formas vivas;
 Retirar o tampão de algodão com o dedo mínimo e a palma da mão sem tocar na boca
do recipiente e sem encostar o tampão em lugar algum;
 Flambar a boca do recipiente sempre que for iniciar uma inoculação, para que uma
corrente de ar quente seja formada de dentro para fora;
 Introduzir o mais rápido possível a alça ou pipeta sem tocar nas paredes do
recipiente;
 Ao terminar a inoculação, flambar a boca do recipiente e ajustar o tampão,
conservando o material ao abrigo da poeira e umidade.
Principais funções das vidrarias citadas abaixo, dentro do laboratório de microbiologia:

Vidrarias Função
Placa de Petri facilita o isolamento de microrganismos devido à grande
superfície de crescimento que apresenta, possibilitando o
aparecimento de colônias separadas.
Balão volumétrico Preparo de soluções
Bastão de vidro Misturar ou dissolver substâncias no meio de cultura
Tubo de Durham Retém o ar na contagem de tubos de ensaio.
Becker Usado para pesagem, transferência de meio de cultura e mais
variados usos.
Pipeta Transferência de volume.
Lâmina de microscopia Utilizado no microscópio para fazer coloração de GRAM.
Tubo de ensaio Usado para análise microbiológica e diluição seriada.

Equipamentos Função
Microscópio um conjunto de lentes que ampliam a imagem a imagem
transpassada por um feixe de luz
Estufa de secagem Esteriliza e seca toda a vidraria.
Estufa de esterilização Esteriliza a seco toda vidraria convenientemente
acondicionada, a temperatura de 170 a 200o C por 1-2
horas.
pHmetro Termômetro de acidez para identificar o PH, na substância
manuseada.
Balança analítica Utilizada para pesar reagentes em meio de cultura.
Autoclave Câmara de vapor com parede dupla, equipada com
dispositivos que permitem o enchimento da câmara com vapor
saturado e sua manutenção em determinadas temperatura e
pressão por quaisquer períodos de tempo.
Lamparina A lamparina de álcool pode ser usada para fornecer uma
zona de segurança (20cm ao redor da chama) eficiente para a
manipulação de meios de cultura, e para a flambagem de alças
e agulhas
Estufa de incubação Manutenção do meio semeado em determinadas
condições para promover o desenvolvimento dos
microrganismos.
Alça de Drigalski É utilizada para espalhar microrganismos em meio de
cultura sólido.

Meios de cultura e Função / utilização

reagentes
Agar O PCA é um meio de cultivo sólido total de bactérias.
Peptona É um meio de cultura de enriquecimento microbiano,
também utilizado para preparação de água peptonada.
Dextrose O PDA é utilizado para o cultivo de fungos no ambiente
de laboratório.
Azul de metileno Indicador utilizado na preparação de lâminas.
 Cloreto de sódio Utilizado na preparação de solução salina, utilizada
em preparações destinadas a observação em laboratório.
Etanol Utilizado como antisséptico, na sanitização e fixação de
microrganismos, entre outras.
Este, mata os mesmos, desnaturando as suas
proteínas e solubilizando os lipídeos que constituem as
suas membranas celulares.

Materiais Função
Papel filtro O papel de filtro utilizado em funis de Büchner, para
filtrações por pressão reduzida. É usado para separar
substâncias finas de líquidos ou ar.
Algodão Faz-se o uso do algodão, como tampão para o Erlenmeyer,
para higienização, etc.
Pinça Utilizada para pinçar objetos, evitando o contato direto das
mãos no meio de cultura
Bisturi Utilizado para abrir amostra lacrada sem precisar do contato
do conteúdo com as mãos.
Swab Usado para a coleta de amostra estéril.

TEMA DE AULA: PREPARAÇÃO DE MEIOS DE CULTURA

RELATÓRIO:
Meios de cultura são composições de substâncias que fornecem nutrientes necessários para o
desenvolvimento de microrganismos. Sendo favorecido o crescimento, é possível a identificação
desses organismos através das suas atividades bioquímica e metabólica.

Preparação e distribuição do meio de cultura:

A seguir segue uma descrição simplificada do procedimento de preparo de um meio de cultura

geral.

1. Pesar o ágar (pó) e colocar em um béquer ou erlenmeyer com capacidade maior do que o
volume que será usado.

2. Medir o volume de água destilada necessário em uma proveta. A adição da água no meio
deve ser realizada colocando-se primeiro uma pequena quantidade de água até que o meio
fique úmido e depois acrescentar o restante devagar.

3. Homogeneizar o meio agitando o frasco devagar, com movimentos circulares.

4. Aquecer o frasco em micro-ondas ou em bico de bunsen, sobre uma tela de amianto.

Como é preciso agitar constantemente é recomendado uso de luvas térmicas.

5. O meio não deve chegar à fervura. Deve apenas ser aquecido até se fundir
completamente.

6. Os meios para diagnóstico microbiológico passam por algum processo de esterilização

antes do uso. Pode ser em autoclave, por 15 minutos a 121ºC, ou por filtração, com filtro de
porosidade de 0,22 micra.

7. A distribuição dos meios em tubos ou placas pode ser feita antes ou depois da
esterilização. Se for feita antes, as placas podem ser não estéreis, se for depois é preciso usar
placas já esterilizadas.
 8. Se for feita a autoclavação do meio, tanto distribuído em placas, tubos ou em maior
quantidade, deve ser feita com o recipiente semiaberto para a esterilização completa e por
igual.

Os meios de cultura são classificados de acordo com seu estado físico: sólidos, semissólidos
e líquidos.
Quando contém agentes solidificantes, principalmente ágar (cerca de 1 a 2,0 %); semi- sólidos,
quando a quantidade de ágar e ou gelati na é de 0,075 a 0,5 %, dando uma consistência intermediária,
de modo a permitir o crescimento de microrganismos em tensões variadas de oxigênio ou a
verificação da motilidade e também para conservação
de culturas; e líquidos, sem agentes solidificantes, apresentando-se como um caldo,
utilizados para ativação das culturas, repiques de microrganismos, provas bioquímicas, dentre
outros.

Entre os principais componentes de um meio de cultura estão as fontes

de carbono e energia (como os açúcares), as fontes de nitrogênio, fósforo e sais
minerais. Pode-se encontrar outros componentes, para favorecer o cultivo de uma bac- téria
especifica (meio seletivo), impedindo o crescimento de outras bactérias. A e xemplo, tem-se: Ágar
sabouraud dextrose, PH 5,6, é utilizado no crescimento de fungos que são favorecidos, em relação
as bactérias, pelo baixo PH.
A adequada preparação dos diversos tipos de cultura, como também a escolha correta dos
nutrientes para cada grupo de microrganismos que será cultivado, é de suma importância para o
crescimento e desenvolvimento dos mesmos fora do seu habitat natural, permitindo seu estudo,
identificação e análise.

Referências bibliográficas:
http://www3.uma.pt/gcosta/docs/microbiology/prat2.pdf https://pt.wikipedia.org/wiki/Meio_de_cultura

http://www.revistas.usp.br/rmrp/article/view/272/273- Assepsia e antissepsia: técnicas de

esterilização.

MADIGAN, Michael T. et al. Microbiologia de Brock. 14. ed. Porto Alegre: ArtMed, 2016;
págs:76-79 .