Histórico da Microbiologia

Microbiologia e Parasitologia I  Postulados de Robert

Professora: Roseneide Koch:
Acadêmica: Ana Júlia Trierweiler  Estudou o Bacillus anthracis,
Aula 1 causador do carbúnculo, e chegou
à conclusão que esse organismo
era um bacilo gram positivo. Para
ter certeza de que era essa a
 Iniciou-se em 1600 por meio de
causadora do Carbúnculo ele
observações.
inoculou em cobaias e viu seus
 Teoria Abiogênica: os seres
sintomas e também amostras
surgem inanimados, ou seja, geração
sanguíneas, chegando ao veredito
espontânea (Aristóteles).
de que esse era o causador.
 Teoria Biogênica: a origem
 No mesmo tempo ele chegou a
desses seres vivos é oriunda de
conclusão de que essa doença era
ancestrais comuns, ou seja, por meio
transmitida por meio de esporos e
da reprodução ( Francesco Redi).
também que um tipo especifico de
 Pasteur e Tyndall:
microrganismo cauda um tipo
conseguiram demonstrar, por meio do
definido de doença.
experimento do balão com pescoço de
 Quatro Postulados de Koch:
cisne que só nascem seres vivos por
1. Microrganismos específicos
meio de outro ser vivo.
podem sempre estar associados a
 Teoria microbiana da
uma doença.
Fermentação (Pauster):
2. O microrganismo pode ser isolado
 Diz que a fermentação é um
e cultivado, em cultura pura, em
produto de microrganismos.
condições laboratoriais.
Assim, ele assegurou que a
3. Cultura pura do microrganismo
seleção de microrganismos leva a
produzira doença quando
um bom produto (queijo, vinho...).
inoculada.
 Pasteurização: é quando
4. É possível recuperar o
você produz um alimento e o
microrganismo inoculado do
aquece (entre 50 e 60 graus
animal infectado
Celsius) sem alterar o
experimentalmente.
sabor/textura/cor fazendo com
 Descobertas:
que ele dure mais tempo.
 Dmitri Ivanovski:
 Argumenta que microrganismos
o Chegou a conclusão de que os
causam doenças (agente
vírus não crescem em meios
etiológico) e que agentes distintos
artificiais.
geram doenças distintas.
o Tentou isolar o MO do filtro do
 Teoria Microbiana da tabaco.
doença:
 Theoblad Smith:
 Girolamo Fracastoro
o Descobriu que um protozoário
(1546) -> MO transmitidos de
era parasita intracelular de
pessoa a pessoa.
artrópode que se alimentava
 Anton Von Plencie (1705-
de gado, causando a febre do
1786) -> diferentes agentes =
gado.
diferentes doenças.
  Com o descobrimento do uma amostra antiga em carneiros
vírus alguns postulados não obteve a doença. Mostrando
de Koch caíram, e novos assim que aquele vírus perdeu sua
surgiram: virulência.
o Um microrganismo pode  Culturas avirulentas = vacina.
causar doenças distintas.  Processo de imunização =
o Uma doença pode ser causada vacinação. Só se foi dados esses
por mais de um tipo de termos após descobrir a vacina
microrganismo. contra hidrofobia (raiva).
 Após isso se iniciou os conceitos  Elie Metchnikoff:
de antissepsia e imunização, além  Observou que no organismo
do tratamento que já era humano existiam células capazes
existente. de englobar outros elementos.
o Sepsis: efeito toxico da
 Esses organismos foram chamados
presença de microrganismos
de fagócitos, e que esses seriam a
no corpo, durante a infecção.
primeira e mais importante linha
o Antissepsia: Medidas que
de defesa contra infecções.
previnem a doença por meio
 Quimioterapia:
de inibição ou destruição total
 Mercúrio era usado para tratar
de microrganismos.
sífilis, casca de cinchona para
 Técnicas Assépticas:
malaria, ipecacuanha para
 Oliver Holmes (1843) ->
disenteria. Portanto, plantas eram
dizia que a febre puerperal era
as fontes originais de agentes
transmissível e contagiosa de
quimioterápicos.
pessoa em pessoa.
 Paul Ehrlich -> sintetizou o
 Ignaz Philpp Semmelweis
composto 606 = Salvarsan (sífilis)
(1946) -> substancias cloradas
tinham ótima reação com  Gerald Domagk -> descobriu
microrganismo, sendo bons para a classe das sulfonamidas, o que
lavagens de mãos. diminuiu bruscamente o numero
de soldados mortos por infecção
 Joseph Lister (1864) ->
percebeu que 45% dos pacientes meningocócica após a segunda
morriam no pós-cirúrgico, para guerra mundial.
evitar isso ele iniciou o uso de  Alexander Fleming ->
solução de fenol n pele do descobriu a substancia química
paciente e na sala cirúrgica Penicilina, sintetizada pelo
reduzindo exponencialmente o Penicillium notatum (fungo).
Sendo posteriormente usada para
numero de mortos.
o tratamento de doenças no
 Imunização (Pasteur):
campo de batalha.
 Pesquisando sobre a cólera
aviaria, ele descobriu que algumas
bactérias podem se tornar
avirulentas quando cultivadas por
muito tempo.
 Bactérias avirulentas podem
estimular no hospedeiro a
produção de substancias que
protegem de infecções
subsequentes, tornando-o imune
a doença.
 Para descobrir isso ele descobriu o
causador de cólera e ao inocular
Classificação e características
distintivas de microrganismos
Microbiologia e Parasitologia I
Professora: Roseneide
Acadêmica: Ana Júlia Trierweiler
Aula 2
 Taxonomia:
 Classificação: Reino -> Filo -> Classe
-> Ordem -> Família -> Gênero ->
Espécie. (ReFiCOFaGE).
 Nomenclatura nomeia as unidades
definidas.
 Identificação, descrição e
caracterização.
 Linnaeus:
 Determina que a unidade
taxonômica mais simples é a
espécie, e que o nome cientifico é
Gênero + espécie.
 Essa deve ser feita com o gênero
maiúsculo, espécie minúsculo e
sublinhada (quando escrito a mão)
ou em itálico. Ex: Homo sapiens
 1753 -> Divide em dois reinos,
Plantae (plantas e algas
unicelulares), Animalia
(protozoários e animais superiores).
 Hackel:
 1853 -> Propõem os reinos
Plantae (plantas e algas
unicelulares), Animalia (animais) e
Protista (bactérias, fungos, algas e
protozoários).
 Década de 40 -> descobre-se
dois tipos de células, as eucariotas
(possuem a carioteca – núcleo
definido) e procarióticas (não
possuem) – diferença base para
separação de todas as células.
 Robert h. Whittaker – 1969:
 Analisa as três formas de nutrição
(fotossíntese, absorção e ingestão),
além da presença de carioteca, e
formula a ideia de 5 reinos.
 Fotossíntese: luz fornece
energia para converter CO2 em
água e açúcar.
 Absorção: capitação de
nutrientes químicos dissolvidos em
água.
 Ingestão: entrada de partículas
alimentares não dissolvidas.
o Monera: bactérias (procarioto de
absorção)
o Protista: plantas verdes,
protozoários e fungos limosos
(eucariontes unicelulares com os
3 tipos de nutrição).
o Plantae: plantas verdes e algas
superiores.
o Animalia: animais (eucarioto)
o Fungi: fungos (possuem parede
celular e sem pigmento
fotossintético).
 Carl Woese e Co. (1977):
 Percebe que temos dois tipos de
bactérias (Arqueobactérias e
Eubactérias). Chegara, a essa
conclusão ao estudar o RNA-r de
bactérias.
 Arqueobactérias, Eubactérias e
Eucariontes representam os três
reinos primários que evoluíram de
maneira distinta.
 Teoria endossimbiôntica:
 Ideia da origem das organelas
eucarióticas a partir de
organismos procarióticos.
 Organelas ->estruturas celulares
internas que possuem membrana
própria.
 Características distintivas:

 Protozoários: Eucariontes,
unicelulares, fazem ingestão (sem
clorofila), parede celular ausente,
móveis (flagelos/ cílios) ou imóveis
(pseudopodes – movimento
ameboide), aclorofilados, presentes
no ambiente terrestre e aquático,
podem ser parasitas ou mutualistas.
 Algas: Seres eucariontes, uni ou
pluricelular, com parede celular
rígida (composição diferente das
bactérias), possuem clorofila, com
tamanho e formas variadas, maioria
é aquática, são fonte de alimento,
espessante, emulsificador e de
fonte de Agar, podem liberar
substancias tóxicas (maré
vermelha).
 Fungos: Eucarionte com parede
celular rígida, uni/pluricelular,
micro/macroscópicos, ausentes de
clorofila, fazem a absorção de
nutrientes e produzem antibióticos
(penicilina), molho de soja e
queijos. Causam doenças em
animais e deterioração de
materiais.
 Bactérias: procariontes;
o Eubactérias: possuem
formas diversas, sendo
unicelulares, moveis ou não,
fazem a reciclagem de lixo
orgânico, produção de
antibióticos e causam
doenças no homem.
o Arqueobactérias:
Semelhantes na microscopia,
porém com composição
química diferente, habitat
inóspito, produzem gás
metano a partir de dióxido de
carbono e hidrogênio.
 Vírus: São menores que
eucariotos e procariotos, contem
um ácido nucleico (só RNA ou só
DNA ou ambos) que é envolto por
envelope proteico ou capa,
multiplicam-se somente dentro de
células vivas.
 Ultraestrutura bacteriana
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Professora: Roseneide
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Aula 3
 Célula procariótica:
 DNA – circular, dupla fita e
disperso no citoplasma.
 Não possui organelas revestidas
por membranas.
 DNA não esta associado a
proteínas histonas.
 Parede Celular -
peptideoglicano e polissacarídeo
complexo.
 Replicação por divisão binária
 Estruturas externas:
 Flagelos:
o Constituído de proteína
flagelina e tem corpo basal.
o Filamento longo e função de
locomoção.
o Fixado à parede celular e à
membrana citoplasmática.
o Possui antígeno H (Ag H) –
proteína presente só no
flagelo.
 Fimbria:
o Constituição de uma proteína
denominada pilina.
o Função: aderência entre as
superfícies mucosas ->
colonização.
o Filamentos curtos, retos e
finos.
o Distribuídos pelo corpo
bacteriano.
o Podem fixar em sentidos
distintos, causando infecção
urinaria repetida.
Ex: escherichia coli.
 Pili:
o Pili F -> transferência de
material genético durante a
conjuração bacteriana.
o No pili passa pedaços de plasmidio,
portanto dissemina a resistência
plasmidal e informação genética do
cromossomo.
o Reprodução por conjunção
o Mais longo que fimbria
 Glicocalix:
o Composta por polímeros
viscoso, gelatinoso e frouxo.
o Produção na maioria das
bactérias – dentro da célula e
excretado para a superfície
celular ajudando na adesão.
Composto de polímeros
(viscoso e gelatinoso) situado
externamente à parede celular.
 Cápsula:
o Polímeros orgânicos de
glicoproteinas e
polissacarídeos.
o Polímero viscoso, firme e
reveste a bactéria.
o Inibe a fagocitose.
o Proteção da célula bacteriana
contra desidratação.
o Fixação da bactéria em varias
superfícies.
 o Evitar a absorção de
bacteriófagos na célula
bacteriana.
o Possui antígeno K (Ag K) – que
esta presente só na capsula.
o Quando esta presente, ela se
torna mais virulenta e menos
permeável à antibióticos, uma
vez que impede a fagocitose.
o É a estrutura mais externa.
o Quando juntam diversas
bactérias com capsula elas se
juntam e formam o Biofilme.
Estrutura limosa que dificulta a
entrada de antibióticos.
 Parede Celular:
o N-acetiglicosamina, ácido N-
acetilmurâmico e um
tetrapeptídeo.
o Estrutura complexa,
semirrígida e que confere
forma à célula.
o Previne a ruptura da célula (lise
celular).
o Proteção contra choques
térmicos.
o Essencial para crescimento e
divisão da célula.
o Importância clinica e taxonômica.
o Membrana Externa:
 Composta de
lipopolssacarídeos.
 Lipídio A- endotoxina.
 Polissacarídeos O- atuam
como antígenos e são uteis
para diferenciar espécies de
bactérias Gram-negativas.
o Gram positiva:
 Possui N-acetilglcosamina
(NAG), ácido N-
acetilmurâmico (NAM), porém
não tem membrana externa e,
portanto o corante cora a
célula.
 Possuem proteínas de
superfície, e ácidos que são
imunogênicas.
 Possui coloração roxa/
púrpura, pois tem uma parede
espessa rica em
peptideoglicanos.
 Esses peptideoglicanos
protegem a bactéria.
 Quando corada com álcool
ela contrai, desidrata e
fica púrpura/roxa pois os
corantes se aderem nessa
parede.
 É mais suscetível a penicilina.
o Gram Negativa:
 Possui camada mais fina e rica
em lipídeos (LPS) e esses ao
serem tratados com álcool
perdem a coloração e ficam
vermelha, após tratados com
safrina ou fucsina.
 O lipídio A é a estrutura mais
antigênica/ imunogênica
presente na membrana
externa (exclusivo das gram -).
 Os peptideoglicanos (que são
pouquíssimos) ficam no
espaço periplasmático – entre
MP e Membrana Externa.
 Possuem maior virulência e
são mais resistentes à
antibióticos.
 Possui o antígeno O (Ag O) – é
presente só na estrutura da
parede.
o Processo de coloração:
 Nesse processo são necessários 4
corantes “gram”, totalizando 4
etapas.
 Inicialmente a lâmina é pingada
com solução de cristal
violeta/púrpura, após a retirada de
corante em excesso a lâmina é
pingada com Lugol (solução de
Iodo) fixando a cor. Na terceira
etapa a lâmina é limpa com álcool -
nesse estágio as bactérias gram -
perdem a sua camada de lipídios
devido a interação e devido a
pequena [peptideoglicanos] (até
antes dessa etapa ambas as
bactérias eram roxas). A etapa final
é a coloração com fucsina ou
safranina, deixando as grams -
vermelhas e as gram positivas
roxo-púrpuras.
  A diferença de cor é devido ao fato de que o complexo cristal violeta- iodo (CVI) se
gruda nos peptideoglicanos enquanto nos lipídios esse fato não ocorre.
 Membrana Citoplasmática:
o Bicamada de fosfolipídios com
proteínas, lipídeos, carboidratos e
colesterol.
o Reveste o citoplasma da célula.
o Sitio de localização de permeasses.
o Função:
 Transporte seletivo de
moléculas solúveis em água.
 Apresenta enzimas envolvidas
na produção de energia, síntese
da parede celular e replicação
do DNA (mesossomos).
 Comunicação entre a célula e
seu ambiente.
 Estruturas internas:
 Citoplasma:
o Espesso, aquoso e
semitransparente.
o 80% -> água.
o 20% -> proteínas, carboidratos,
lipídios, íons inorgânicos,
compostos de peso molecular leve.
o DNA, ribossomos e inclusões.
 Cromossomo:
o DNA -> circular e único com
informações hereditárias.
o As filhas dessa célula herdarão tudo
que há nele.
o Caso haja gene de resistência a
antibiótico nesse DNA, todas as
bactérias desse gênero e espécie
serão resistentes.
 Plasmídio:
o DNA extracromossômico interno que
é responsável pela disseminação da
resistência antimicrobiana (isso é
chamado de resistência plasmidial) e
características de metabolismo.
o Ele é fora do cromossomo
(extracelular)
o Esse DNA é mais responsável pela
diversidade/variabilidade genética.
o Portanto a bactéria X é resistente a
penicilina, porém o Y, do mesmo
gênero e espécie da X, não.
o Circular ou linear
 Ribossomos:
o Síntese proteica.
o 40% proteína e 60% RNA
ribossômico (rRNA).
  Inclusões:
o Função de armazenamento de
carbono, energia e outras
estruturas. Ou é utilizado como
reservatório de constituintes
estruturais.
o Envolvidas por uma fina camada de
lipídios.
o Polímeros de armazenamento de
carbono.
o Bactérias com inclusão são
chamadas de Grânulos
metacromáticos.
 Esporos (formas latentes):
o Formas metabolicamente inativas,
resistentes a dessecamento e calor
(mais de 80°C), com capacidade de
voltar a germinar sob condições
favoráveis.
o Os esporos formados dentro das
células (endósporos) são exclusivos
das bactérias.
o Mas frequentes nos gêneros
Bacilus e Clostridium.
o As bactérias multiplicam seu
material genético e iniciam uma
invaginação com a membrana
plasmática e a camada de
peptídeos. Após isso ela faz uma
camada de parede celular, dentro
da célula ate quando formar a
estrutura esporo. Essa estrutura
pode ficar dentro da célula, sendo
endósporo ou sair, exósporo.
o Quando essa nova “célula” sai da
bactéria ela se chama esporo.
 Forma e arranjo dizem o
gênero e possivelmente a
espécie – quando agregados
com a classificação gram:
o Cocos (formas esféricas)
– divisão em diferentes planos e
agrupamentos.
 Os arranjos são: Diplo;
Tetra; Staphylo;Saecina e
Strepto.
o Bacilos ou bastonetes –
cilíndricos, forma de bastão, longos
ou delgados, pequenos e grossos
sendo eles ou extremidade retos
ou convexos ou arredondados.
 Não possuem arranjo.
o Espiral- possuem 3 formas que
variam de 5 a 40 μm de largura e
100 μm de comprimento. Formas:
Vibrio; Spirillum (corpo rígido e
movimentação com flagelos);
Spirochete.
 Não possuem arranjo.

 Bactéria – morfologia
bacteriana:
 Tamanho 0,3 a 2um (micro
milímetros) de diâmetro e 2 a 8um de
comprimento.
o Patogênicas variam entre 0,5 a
1um por 2 a 5um.
 Formas: cocos, bacilos, vibrio e
espirilo.
 Metabolismo Microbiano
Microbiologia e Parasitologia I
Professora: Roseneide Campos
Acadêmica: Ana Júlia Trierweiler
Exigências físicas para
crescimento bacteriano
 Metabolismo microbiano
 Metabolismo: é o conjunto de
transformações que as substâncias
químicas sofrem no interior dos
organismos vivos.
 Catabolismo: relações químicas que
liberam energia a partir de substancia
orgânica. (decomposição/degradação).
 Anabolismo: reações químicas que
consomem energia para formação de
compostos mais complexos. (síntese).
 Crescimento Bacteriano
 Condições Físicas para
crescimento:
 Temperatura
 pH
 Atmosfera gasosa
 Pressão osmótica
 Pressão hidrostática
 Luz
Temperatura:
 Psicrófilos -> sobrevivem em baixa
temperatura
 Mesófilos -> sobrevivem em temperaturas
medianas (10 a 38°C) e crescem mais de 35 a
37°C. Mais de 80% das patogênicas são dessa
classe
 Termófilos -> crescem em temperatura
superior a 120°C
 Altas Temperaturas -> as enzimas
sofrem desnaturação e perdem duas
propriedades catalíticas.
 Baixas Temperaturas -> a taxa de
reação metabólica diminui.
PH:
 Acidófilicas -> pH de 1,8 a 5.
Extremamente ácido tendo crescimento
otimizado em pH 3.
 Neutrófilas -> pH entre 5,5 a 8,5.
Sendo seu pH ideal 7.
 Alcalifílicas -> pH entre 7,5 a 11. São as
que metabolizam o enxofre e deixam
mau cheiro.
 Cada bactéria tem um pH ideal para
sobreviver, porém grande maioria
floresce melhor em um pH neutro.
Atmosfera Gasosa:
 Aeróbio obrigatório -> só crescem na
presença de oxigênio.
 Anaeróbio -> sem O2
 Aeróbio facultativo -> não se
importa.
 Microaerófilo -> querem oxigênio
porém com pouca quantidade ,ou seja,
sobrevivem com pouca quantidade de
oxigênio.
  Aerotolerante -> atura os dois tipos de
meio, tanto com oxigênio, quanto sem
oxigênio.

Pressão Osmótica:
 É a força que a água exerce sobre a
membrana plasmática para que ela
passe para o citoplasma.
 De baixa concentração de soluto para o
meio com alta concentração de soluto.
 Osmoadaptação -> A capacidade dos
microrganismos de se adaptar a
pressões osmóticas.
 Meio hipertônico -> célula
desidratada;
 Devido a saída da água do meio
menos para o mais concentrado
em soluto.
 Meio hipotônico -> célula entra em
lise.
 Pois a água vai para o meio
menos concentrado em soluto.

Pressão Hidrostática:
 Pressão exercida pela água sobre os
microrganismos.
 Mais relacionada aos microrganismos
que sobrevivem dentro da água.

Umidade:
 Altas concentrações abaixam a aeração
e aumentam a proliferação das
bactérias anaeróbias.

 Tempo de geração:
 Tempo que leva para a reprodução das
células.
 Exigências nutricionais dos
microrganismos
Microbiologia e Parasitologia I
Professora: Roseneide Campos
Acadêmica: Ana Júlia Trierweiler
 Microrganismos são versáteis e
diversificados em suas exigências
nutricionais.
 Compartilham algumas necessidades
nutricionais em comum.
 Todos necessitam de variedades de
elementos químicos para síntese e
função normal dos componentes
celulares.
Elementos Químicos
 São metabolizados em:
 Compostos orgânicos
 Compostos inorgânicos
Carbono
 É obtido por meio de carboidratos,
lipídios e proteínas.
 São usados para gerar energia.
 Bactérias Heterotróficas:
recebem o carbono por meio de
compostos orgânicos (glicose).
 Bactérias Autotróficas:
Adquirem carbono pelo dióxido de
carbono.
Nitrogênio:
 Faz parte dos aminoácidos.
 São adquiridos por meio do nitrogênio
gasoso, compostos nitrogenados
inorgânicos e orgânicos.
 Nitrogênio gasoso -> fixação de
nitrogênio.
 Compostos nitrogenados
inorgânicos -> nitratos, nitritos ou
sais de amônia.
 Compostos nitrogenados
orgânicos -> aminoácidos,
peptídeos.
Hidrogênio e oxigênio
 Absorvidos por meio de compostos
orgânicos.
Enxofre
 São essências na biossíntese de
algumas proteínas (cisteina, cistina e
metionina).
Fósforo
 Usados na síntese de ácidos nucleicos
e ATP.
Outros
 K -> atividade enzimática
 Mg -> estabilidade do ribossomo
 Ca -> estabilidade da parede ceular/
termoestabilidade do endósporo.
 Na -> maior quantidade para
microrganismos marinhos.
 Bactérias halofílicas extremas não
crescem com menos de 15% de sal.
 Fe -> componente dos citocromos e
proteínas envolvidas no transporte de
elétrons.
 Elementos traço-> pouquíssima
concentração; Atuam nas enzimas.
 Zinco, cobre, manganês, cobalto e
molibdênio. O ultimo faz conversão
de N2 em N3 (fixação de
nitrogênio).
Classificação nutricional dos
microrganismos
 Quimiotróficos -> obtém energia
por meio de compostos químicos.
 Fototrópicos -> obtém energia
por meio da luz.
Exigências especificas de
bactérias e leveduras
 São usados para identificar a
taxonomia.
 Sistemas automatizados de
identificação.
 Microrganismos requerem meios de
cultura apropriados para o
crescimento em laboratório.
 Meios de cultura consistem da
associação qualitativa e
quantitativa de substancias que
fornecem os nutrientes necessários
ao desenvolvimento (cultivo) de
microrganismos fora do seu meio
natural.
 Cada bactéria tem seu habitat
natural, e portanto o meio deve ser
similar/imitar o mesmo.
Meios para cultivo de
microrganismos
 Quimicamente definidos ->
composição exata do meio é conhecida
(sabe que tem X, Y e Z).
 Usado para determinar a
necessidade nutricional.
 Quimicamente indefinidos ->
são produtos naturais complexos.
 Como extrato de carne,
peptonas, açucares,
aminoácidos, extrato de
leveduras, sangue, sais e
vitaminas.
Meios de Cultivo
 Sólidos -> 1 a 2% ágar
 Semissólidos -> 0,075% a 0,5%
ágar
 Consistência intermediária ->
permite crescimento de
microrganismos em tensões variadas
de oxigênio/ verificação da motilidade.
 Líquidos sem agentes
solidificantes (caldo) ->
ativação das culturas, repiques de
microrganismo, provas bioquímicas,
entre outros.
Ágar
 Derivado de algas marinhas – Classe
Rhodophyceae
 Polissacarídeo agarose e agaropectina
 Propriedades:
 Funde a 100°C
 Estando líquido a 40°C
 Não é metabolizado
 Meios para cultivo de bactérias
especificas normalmente imitam seu
habitat natural.
 Microrganismos fastidiosos
->necessitam de meios de cultivo
complexos que podem conter certa de
20 aminoácidos e várias vitaminas.
Meios para cultivo de fungos
 Heterotróficos aeróbicos (precisam de
compostos orgânicos)
 Concentração maior de açúcar (4%)
 pH 3,8 a 5,6
 A absorção é auxiliada por enzimas
secretadas.
Meios para cultivos de
protozoários
 Heterotróficos aeróbios
 Possuem exigências nutricionais
complexas
 Aminoácidos, vitaminas e
carboidratos.
 Soro fetal bovino, emulsão de
tecido cerebral, infusão de
fígado.
 pH 6 a 8.
Meios para cultivos de algas
 Fotoautotróficas
 Necessitam de luz, CO2, luz, água e
íons inorgânicos solúveis.
 Euglena sp -> no escuro cresce
como heterotrófica com pequena
variedade de substratos. (exceção)
Meios para cultivo de anaeróbios
 Livre de O2/ baixas concentrações
 Camada profunda de meio solidificado
carecem de O2
 Adição de agente redutor remove O2
 Tioglicato de sódio, cisteina.
Meios de cultivos seletivos
 Permitem o crescimento de um tipo
particular de microrganismo e/ou
suprimem o crescimento de outros
tipos.
 Exemplos:
 Ágar Sabouraud: fungos.
 Ágar verde brilhante: Gram-negativas.
 Ágar feniletanol: Gram-positivas.
 Adição de antibióticos específicos aos
meios de cultivo.
Meios de cultivo diferenciais
 Esses fazem a diferenciação de
diversos tipos de microrganismos.
 Ex: ágar sangue demonstra os
microrganismos hemolíticos dos não
hemolíticos. Esses não possuem halo
branco/amarelado, já aqueles possuem
halos amarelado/brancos.
Meios seletivos e diferenciais
 Ágar MacConkey -> inibe gram-
positivas porém diferencia os lactose
positivos e negativos. Essas ficam
amareladas e aquelas roxas.
Meios de enriquecimento
 Favorecem o crescimento da espécie
desejada e não o de outras espécies.
 Técnicas de enriquecimento resultam
em aumento do numero da espécie
inicialmente em minoria.
 Ambiente químico/ físico.
Meios de cultivo para ensaios
microbiológicos
 Microrganismos específicos usados
para medir concentrações de
antibióticos e vitaminas.
 Concentração de antibióticos no soro
usando microrganismos sensíveis grau
de inibição é proporcional à
quantidade do fármaco.
 Concentração inibitória mínima (MC) <
concentração de substancia que inibe o
crescimento do MO
 Meios padronizados
Meios para cultivo de tecidos
 Células animais e vegetais
 Cuidadosa preparação e manuseio
 Evitar contaminação com MO
 Aplicações:
 Cultivo de vírus in vitro,
clamídias, riquetsias e algumas
espiroquetas.
Isolamento e conservação de
culturas puras
 Cultura pura -> todas as células
da população se originaram de uma
mesma célula parental.
 Cultura mista -> composta por
espécie diferentes num mesmo
ambiente.
Técnicas de isolamento
 Estrias -> “cortes”/ traços na placa
para orientar o crescimento.
 Pour-plate -> ágar a 45°C,
crescendo entre o ágar e os nutrientes.
 Semeadura em superfície ->
coloco os microrganismos acima dos
nutrientes. Alça de Drigalsky.
Conservação de culturas puras
 Refrigeração -> Geladeira; de 4 a
10°C.
 Duração de dias a meses
 Congelamento -> freezer de -70 a
-120°C.
 Dura por longos períodos de
tempo.
 Nitrogênio liquido ->
temperatura de -196°C.
 Dura por longos períodos de
tempo.
 Liofilização -> Congeladas,
desidratadas e fechadas a vácuo.
 Viável por muitos anos.
 Reprodução e Genética em
Procariotos
Microbiologia e Parasitologia I
Professor: Paulo França
Acadêmica: Ana Júlia Trierweiler Vieira
Introdução
 Procariotos = bactérias/ seres +
simples/ capacidade de auto
reprodução.
 Um dos critérios que definem VIDA é a
capacidade do organismo de gerar
indivíduos semelhantes a ele.
 Sendo assim, quando uma bactéria só e
considerada viva se ela tem o potencial
de se reproduzir.
 Do contrario é considerada morta
mesmo que metabolicamente ativa.
Crescimento de uma célula
 Crescimento de uma CÉLULA
microbiana: tem como finalidade a
divisão celular (replicação); crescimento
ordenado (síntese).
 Crescimento de uma CULTURA/
Cultivo/ População/ Conjunto
microbiana: Aumento no número de
células devido ao conjunto de bactérias
ter se dividido, ou seja, crescimento
populacional.
 Geralmente se reproduzem em
minutos ou algumas horas.
 Aumento do n° de células devido à
reprodução dos organismos
individuais.
Características
 A reprodução em procariotos é apenas
de forma assexuada (ausência do
envolvimento de células sexuais).
 As células filhas são idênticas às células
mãe (célula parental única).
 Não ocorre troca de material genético.
Tipos de Reprodução
1. Fissão Binária Transversa:
o Modo de reprodução da maioria dos
procariotos.
o Ocorre a replicação do cromossomo
bacteriano e a célula desenvolve
uma parede celular transversa,
dividindo-se então em duas novas
células.
o Células parentais (que tem flagelo)
individualmente se dividem em 2
células filhas (criam flagelo depois da
divisão) de tamanho +/- igual.
o Sem flagelo a bactéria fica séssil
o Células filhas podem separar-se
completamente ou permanecer
acopladas em arranjos característicos
(Streptococus e Estafilococos).
o Exemplo: Nitrosomonas.
2. Brotamento:
o Similar à reprodução em leveduras
(fungos).
o Geração de pequena protuberância
em uma das extremidades da célula
parental com separação desta após a
síntese de todos os constituintes
celulares.
o A célula mãe expele uma célula filha
que “brota” originando uma nova
bactéria.
o Após sucessivos brotamentos forma-
se uma colônia.
o Exemplo: gênero Mycobacterium
(lepra) e Corynebacterium (difteria)
– ambos só fazem brotamento.
3. Fragmentação
o Bem rara.
o Realizada por bactérias de
crescimento filamentoso.
o Bactéria= tem carioteca
(basicamente núcleo)
o Exemplo: gênero Nocardia.
4. Conídios:
o Esporos externos.
o Esporos externos com fins de
reprodução.
o Exemplo: Streptomyces (muitas
espécies fazem antibióticos).
Variabilidade Genética em
Procariotos
 Existem quatro maneiras para ocorrer à
variabilidade genética em procariotos:
mutação, conjugação, transformação e
transdução.
1. Mutação:
o Variação passada em sucessivas
variações.
o Transferência vertical de genes.
o Mais frequente.
o É qualquer mudança na sequencia de
bases no DNA.
o Pode ser:
 Letal (resultando em morte
celular).
 Condicional (expressa apenas em
determinadas condições
ambientais).
o Mecanismos:
 Espontânea: Quando as causas que
deram origem à alteração no DNA
são desconhecidas. Menos
frequente.
 Induzida: Quando ocorre
exposição a agentes mutagênicos
(químicos ou físicos). Mais
frequente. É randômica.
o Tipos:
 Silenciosa: Alteração de bases
nitrogenadas sem que haja
alteração de aminoácidos na
proteína codificada, uma vez que
diferentes códons podem
especificar o mesmo aminoácido.
 Ex: AGG (arg) -> CGG (arg)
 Missense: Perda de sentido;
 Substituição;
 Alteração de bases nitrogenadas
que acarretam substituição de
aminoácidos na proteína,
podendo ou não alterar sua
estabilidade ou funcionalidade.
 Ex: ATG (met) -> GTG (val).
 Nonsense: Sem sentido;
 Interrompe a síntese proteica.
 Alterações de bases nitrogenadas
que acarretam na formação de
um códon terminal, produzindo
terminação prematura e
produção de uma proteína
truncada.
 Ex: TCG (cis) -> TGA (códon
terminal).
 Alteração de fase de leitura:
 Inserção ou deleção: ocorre
perda ou ganho de nucleotídeos.
2. Conjunção:
o Transmissão de informação genética
(plasmidial e cromossômica) através
de fímbrias sexuais, que estabelecem
conexão citoplasmática direta entre
duas células bacterianas.
o Através de uma conexão
citoplasmática (“pelo sexual”) entre
duas células bacterianas, ocorre a
transferência unidirecional de
informação genética de uma bactéria
doadora para uma receptora.
o Insensível a DNAse (enzima que
quebra DNA) extracelular.
o Transferência horizontal de genes.
o Exemplo: Escherichia coli
o Tipos:
a) F+ vs. F- : A célula F+, durante o
contato com uma célula F-,
transfere para esta ultima cópia
do plasmidio F, tornando-a F+.
 F+ =Doador; contem fator
extracromossomal F ->encarregado
da formação do pelo sexual.
 F- = Receptor
 Baixa frequência de recombinação
(baixa vantagem evolutiva).
b) Hfr (alta frequência de
recombinação): passa +
informação genética.
 Nessa linhagem somente parte do
fator F é transferida conjuntamente
com parte do cromossomo (trecho
de DNA) da doadora F+.
 Nesse caso, a célula receptora
permanece F- após a conjugação.
 Fator F como epissomo (infiltrou-se
no cromossomo).
3. Transformação:
o DNA é responsável pela informação.
o Transferência horizontal de genes
o Incorporação de fragmentos de DNA,
livres no meio extracelular, por
bactéria competente.
o Bactéria competente -> possui
maquinário enzimático para trazer.
o Algumas bactérias conseguem adquirir
trechos de moléculas de DNA ou
plasmídios livres no meio extracelular
e incorporá-los ao seu DNA.
o Requerimento-> compatibilidade
entre linhagens doadora e receptora,
ausência de DNAse no meio
extracelular, etc...
o A competência da transformação
depende da espécie bacteriana e do
estágio do desenvolvimento.
o Exemplo: Streptococcus pneumonia,
Bacillus, Neisseria, Pseudomonas,
Heremophilus influenzae.

4. Transdução:
o É o tipo de reprodução bacteriana
mais frequente.
o Transferência horizontal de genes
o Um vírus bacteriano como vetor
(bacteriófago) leva informações
genéticas de uma bactéria a outra.
o Quando o bacteriófago entra numa
célula bacteriana, o DNA do vírus
mistura-se com uma parte do DNA
bacteriano, de modo que o vírus
agora carrega esta parte do DNA.
o Se ele infectar uma segunda bactéria, o
DNA da primeira bactéria poderá
misturar-se com o DNA da segunda
bactéria.
o Possui vantagem de adaptação.
o Classificada como:
 Generalizada: ocorre durante o
ciclo lítico (ruptura da célula) de
fagos virulentos.
 Quando a incorporação de
fragmentos de DNA (da célula
hospedeira) é randômica devido
a um empacotamento acidental.
 Especializada: se os fagos em
questão incorporarem sequencias
especificas de DNA da célula
hospedeira.
 Ocorre durante o ciclo lítico de
fagos temperados.
 Métodos químicos de controle
do crescimento microbiano
Microbiologia e Parasitologia I
Professor: Tarcisio Crocomo
Acadêmica: Ana Júlia Trierweiler Vieira
Terminologia relacionada ao
controle do crescimento microbiano
 Esterilização: destruição total de
microrganismos, mesmo nas formas mais
resistentes, sendo um processo absoluto.
 Pode ser realizada por meio de
esterilizantes físicos, químicos, ou vapor
de gás.
 Exemplo: calor seco, ácido peracético e
vapores de peróxido de hidrogênio.
 CME = central de materiais e
esterilização.
 Descontaminação: o tratamento de
um objeto ou uma superfície, de modo a
torná-los seguros à manipulação.
 É a continuação da limpeza e se aplica
mais ao que fazemos com objetos e
embalagens.
 Desinfecção: : Destruição ou remoção
de patógenos na forma vegetativa,
embora possa não eliminar todos os
microrganismos.
 Quando a desinfecção é realizada em
tecido vivo, é denominada ASSEPSIA.
 Não é considerado esterilizante pela
baixa eficácia sobre as formas
esporulantes.
 Em seu nível alto elimina a forma
vegetativa e esporulada, além dos
vírus; Utilizada geralmente em área
hospitalar.
 Não precisa seguir regras da ANVISA.
 Asséptico: ausência de germes, entre
eles bactérias, vírus e outros
microrganismos que podem causar
doenças.
 Ambiente asséptico: sem
microrganismo.
 Antissepsia: processo que visa reduzir
ou inibir o crescimento de microrganismos
na pele ou nas mucosas.
 Os produtos usados para fazer a
antissepsia são chamados de
antissépticos.
 Degerminação: eliminação parcial ou
redução de microorganismos (exceto
endósporos) de determinada região por
ação quimiomecânica.
 Exemplo: limpeza de uma região da
pele antes da aplicação de uma
injeção.
 Sanitização: redução de
microorganismos a níveis seguros de saúde
pública, tornando mínima a chance de
transmissão de doenças entre os usuários
de um mesmo objeto.
 Para grandes ambientes- > precisa
seguir regras da ANVISA (ex: indústrias de
alimentos).
 Agente antimicrobiano: são agentes
químicos que inibem o crescimento de
microorganismos.
 Concentração inibitória mínima
(CIM): é a mais baixa concentração de um
produto químicos responsável por limitar
o crescimento visível dos microrganismos.
 Seu valor depende do microrganismo,
do alvo da infecção e do antibiótico
em uso.
 Mede a atividade antimicrobiana.
 Menor concentração de agente capaz
de inibir completamente o crescimento
do organismo-teste.
 Agentes biocidas: tratamentos que
causam a morte direta dos micro-
organismos.
 Ligam-se fortemente a seus alvos
celulares e matam as células dos micro-
organismos.
 Agentes biostáticos: tratamentos
que inibem ou diminuem o crescimento e
a multiplicação de bactérias.
 São geralmente inibidores de algum
importante processo bioquímico,
como a síntese proteica, e a ligação é
relativamente fraca; se o agente é
removido, as células podem retomar
seu crescimento.
 Muitos antibióticos se enquadram
nesta categoria.
 Agentes biolíticos: matam as células
devido à lise e liberação do conteúdo
citoplasmático.
 A lise resulta em uma diminuição tanto
no número de células viáveis quanto
no número de células total.
 A escolha de um desinfetante depende da
eficácia, segurança, toxicidade, efeitos
corrosivos e facilidade de remoção, entre
outros fatores.
 No entanto, a eficácia dos desinfetantes é
frequentemente afetada pela presença de
materiais orgânicos, pH, temperatura,
dureza da água, inibidores químicos,
concentração, tempo de exposição e
resistência bacteriana.
Fatores que influenciam a efetividade
dos tratamentos antimicrobianos
 Número de micro-organismos:
Quanto mais micro-organismos existem
no início, mais tempo ou concentração
são necessários para eliminar a população
inteira.
 Influências ambientais: A presença
de matéria orgânica (gorduras e proteínas
especialmente) inibe frequentemente a
ação dos antimicrobianos químicos.
 Os desinfetantes agem melhor em
condições climáticas mais quentes
porque sua atividade é condicionada a
reações químicas dependentes de
temperatura.
 Tratamentos com calor são muito
mais eficientes sob condições ácidas.
 Tempo de exposição: Os
antimicrobianos químicos frequentemente
requerem exposição prolongada para que
os microrganismos ou endósporos mais
resistentes sejam afetados.
 Características microbianas: Os
microrganismos variam consideravelmente
quanto à susceptibilidade aos agentes
antimicrobianos em função de sua
constituição.
 Os príons são as formas mais
resistentes, resistindo à desinfecção e à
autoclave, seguido dos endósporos
bacterianos, as micobactérias, os cistos
e os oocistos protozoários, bactérias
gram-negativas, fungos vegetativos e
esporos de fungos, vírus não
envelopados, bactérias gram-positivas
e os vírus envelopados.
 Micro-organismos em biofilmes sobre
superfícies são mais difíceis de serem
atingidos com eficiência pelos biocidas.
Danos dos agentes antimicrobianos
 Síntese da parede celular
 Membrana plasmática: Danos aos
lipídeos ou proteínas da membrana
plasmática por agentes antimicrobianos
produzem câmbios na permeabilidade,
potencial, na síntese de ATP e no
transporte de elétrons, causando o
extravasamento do conteúdo celular no
meio circundante e interferindo no
crescimento da célula.
 Citoplasma: coagula-se
 Proteínas, enzimas e ribossomos:
sofrem desnaturação pelo rompimento
das ligações de hidrogênio, produzindo a
perda da estrutura tridimensional, e das
ligações covalentes.
 Ácidos nucleicos DNA e RNA:
sofrem danos que frequentemente são
letais para a célula, que não pode mais se
replicar, nem realizar funções metabólicas
normais como a síntese de enzimas.
 Biossíntese de lipídeos
Métodos químicos de controle do
crescimento microbiano
 Uso para controlar o crescimento de
microrganismos em tecidos vivos e objetos
inanimados.
 Agentes químicos -> poucos
proporcionam a esterilidade.
o Maioria reduz as populações
microbianas em níveis seguros ou
removem as formas vegetativas de
patógenos.
1. Compostos fenólicos e bifenóis:
 Contêm uma molécula de fenol que
foi quimicamente alterada - reduz
propriedades irritantes ou aumentar
sua atividade antibacteriana em
combinação com um detergente.
 Lesam as membranas plasmáticas
lipídicas.
 Permanecem ativos em presença de
compostos orgânicos, são estáveis e
persistem por longos períodos após a
aplicação.
 Os bifenóis são derivados do fenol
que possuem dois grupos fenólicos
ligados por uma ponte, como o
triclosano.
2. Biguanidas:
 Apresentam um amplo espectro de
atividade, sendo especialmente efetivas
contra gram-positivas e maioria de
gram-negativas (exceto pseudômonas).
 Não apresentam atividade esporocida,
mas possuem alguma ação contra vírus
envelopados.
 Afetam principalmente as membranas
celulares bacterianas.
 A biguanida mais conhecida é a
clorexidina.
3. Halogênios:
 São agentes antimicrobianos eficazes,
tanto isoladamente quanto como
constituintes de compostos inorgânicos
ou orgânicos.
 O iodo é um antisséptico eficiente
contra todos os tipos de bactérias,
muitos endósporos, vários fungos e
alguns vírus.
 Impede a síntese de algumas
proteínas e causa alterações nas
membranas celulares, sendo
usado na desinfecção da pele e
no tratamento de feridas.
 Um iodóforo é a combinação
de iodo e uma molécula
orgânica, da qual o iodo é
lentamente liberado.
 Eles possuem a atividade
antimicrobiana do iodo, mas
não mancham e são menos
irritantes.
 O cloro, como gás ou em combinação
com outras substâncias químicas
(hipoclorito de cálcio, hipoclorito de
sódio, dióxido de cloro e cloraminas),
é amplamente usado como
desinfetante.
 Sua ação germicida é causada pelo
ácido hipocloroso (HOCl), formado
quando o cloro é adicionado à água,
sendo um forte agente oxidante de
fácil difusão através da parede celular
que impede o funcionamento de boa
parte do sistema enzimático celular.
4. Alcoóis:
 Alcoóis como o etanol e o isopropanol
matam efetivamente as bactérias e os
fungos, mas não os endósporos e os
vírus não envelopados.
 Seu mecanismo de ação é a
desnaturação de proteínas, o
rompimento de membranas e a
dissolução de lipídeos.
 Os alcoóis têm a vantagem de agir e
então evaporar rapidamente, sem
deixar resíduo.
5. Metais pesados e seus compostos:
 A prata, o mercúrio e o cobre são
biocidas ou antissépticos com ação
oligodinâmica (atividade
antimicrobiana a baixas concentrações)
que se combinam com os grupos
sulfidrila nas proteínas celulares
causando a sua desnaturação.
 A prata é usada como antisséptico
(nitrato de prata a 1%) e como agente
antimicrobiano em embalagens
plásticas de alimentos (nanopartículas
de prata) e em camisas para reduzir
odores.
 O cloreto de mercúrio é um agente
bacteriostático de amplo espectro,
porém seu uso é limitado devido à sua
toxicidade, poder de corrosão e
ineficácia em presença de matéria
orgânica.
 O sulfato de cobre é usado como
algicida em reservatórios, tanques,
piscinas e aquários.
 O zinco é usado como antimicrobiano
em telhas galvanizadas, impedindo o
crescimento de algas.
6. Agentes de Superfície:
 Os agentes de superfície (tensoativos
ou surfactantes) podem reduzir a
tensão superficial entre as moléculas de
um líquido.
 Os mais amplamente usados são os
detergentes catiônicos, como os
compostos quaternários de amônio
(cloreto de benzalcônio, cloreto de
cetilpiridínio).
 Alteram a permeabilidade celular e
causam a perda de constituintes
citoplasmáticos essenciais (K+ ).
 São antimicrobianos eficazes contra
bactérias gram-positivas, gram-
negativas, fungos, amebas e vírus
envelopados, mas não matam
endosporos ou micobactérias.
 São incolores, inodoros, insípidos,
estáveis, facilmente solúveis e atóxicos,
exceto em altas concentrações, porém
a matéria orgânica interfere com sua
atividade e são neutralizados por
sabões e detergentes aniônicos.
 O sabão é um agente degerminante
que emulsiona os óleos dos
microrganismos em gotículas pequenas
que são removidas junto com a água.
 Os desinfetantes ácido-aniônicos
reagem com a membrana plasmática,
são de amplo espectro, são atóxicos,
não corrosivos e possuem rápida ação.
7. Conservantes químicos de
alimentos:
 São adicionados aos alimentos para
retardar sua deterioração.
 O ácido sórbico, o sorbato de
potássio e o benzoato de sódio inibem
o crescimento de bolores em certos
alimentos ácidos, interferindo no seu
metabolismo ou na integridade de sua
membrana plasmática.
 São ácidos orgânicos simples ou sais de
ácidos orgânicos, que o corpo
metaboliza prontamente e que em
geral são considerados seguros em
alimentos.
 O nitrato de sódio e o nitrito de sódio
interferem no crescimento de
endosporos botulínicos presentes em
produtos derivados de carne, porém a
sua reação com os aminoácidos da
carne produz os carcinogênicos
conhecidos como nitrosaminas.
8. Antibióticos:
 A nisina é uma bacteriocina (proteína
que é produzida por uma bactéria e
que inibe outra) frequentemente
adicionada ao queijo para inibir o
crescimento de certas bactérias
formadoras de endosporos que causam
deterioração. A nisina é insípida,
facilmente digerida e atóxica.
 A natamicina (pimaricina) é um
antibiótico antifúngico aprovado para
uso em alimentos, principalmente para
os queijos.
11. Peroxigênios e outras formas de
9. Aldeídos:
 Os aldeídos (formaldeído,
glutaraldeído) são antimicrobianos
muito eficazes que inativam as
proteínas pela formação de ligações
cruzadas covalentes com vários grupos
funcionais orgânicos delas.
 O glutaraldeído é um desinfetante
químico líquido menos irritante e mais
efetivo que o formaldeído, sendo um
dos poucos que pode ser considerado
como agente esterilizante.
10. Esterilização química:
 Os quimioesterilizantes gasosos
frequentemente são utilizados como
substituintes de processos físicos de
esterilização.
 Sua aplicação requer a utilização de
uma câmara fechada similar a uma
autoclave.
 O óxido de etileno forma ligações
cruzadas em ácidos nucleicos e
proteínas, inibindo funções celulares
vitais.
 Ele é altamente penetrante e capaz de
esterilizar à temperatura ambiente,
matando todos os microrganismos e
endosporos, mas requer um período
de exposição prolongado, é tóxico e
explosivo em sua forma pura.
 A esterilização por plasma é um
método confiável para a esterilização
de instrumentos médicos tubulares.
 Os instrumentos são colocados em um
recipiente onde peróxido de
hidrogênio é excitado em vácuo por
um campo eletromagnético para
formar o plasma.
 Este plasma possui muitos radicais
livres, que rapidamente destroem todo
tipo de microrganismos. Este processo
possui elementos de esterilização tanto
química quanto física e requer apenas
baixas temperaturas, embora seja
relativamente caro.
 O uso de fluidos supercríticos em
processos de esterilização combina
métodos físicos e químicos.
 O dióxido de carbono comprimido
em estado “supercrítico” apresenta
maior solubilidade e menor tensão
superficial, inativando a maioria dos
organismos vegetativos que causam
deterioração e que se desenvolvem em
alimentos. Mesmo a inativação dos
endosporos requer apenas uma
temperatura de cerca de 45°C.
oxigênio.
 Os peroxigênios são um grupo de
agentes oxidantes que inclui:
 O peróxido de hidrogênio: é um
bom antisséptico de objetos
inanimados, e chega a apresentar
efeito esporocida em concentrações
elevadas. O peróxido suplanta as
enzimas protetoras das bactérias
aeróbicas e anaeróbicas facultativas.
 O ácido peracético: é um dos mais
efetivos esporocidas químicos
líquidos disponíveis e pode ser usado
como esterilizante. Seu modo de
ação é similar ao do peróxido de
hidrogênio. Não deixa resíduos
tóxicos e é minimamente afetado
pela presença de matéria orgânica.
 O ozônio: forma altamente reativa
do oxigênio, gerada pela passagem
de oxigênio por descargas elétricas
de alta voltagem.
 É usado para complementar a
cloração na desinfecção da
 água, pois ajuda a neutralizar
sabores e odores.
 Também é utilizado na
descontaminação de produtos
alimentícios, superfícies de
contato com alimentos,
equipamentos e ambiente de
processamento de alimentos.
 O ozônio é gerado no local e
apresenta baixo impacto
ambiental porque se decompõe
rapidamente sem deixar
resíduos tóxicos.
 O ozônio não tem dianas
seletivas nos microrganismos,
pelo que estes não foram
capazes de gerar resistências.
 No entanto, a estabilidade do
ozônio é afetada pelas
condições de temperatura e pH
e sua eficácia é diminuída pela
presença de matéria orgânica.
12. Óleos essenciais:
 São conhecidos mais de 3000 óleos
essenciais extraídos de diferentes partes
das plantas, como flores, frutos, folhas,
raízes e sementes.
 Os óleos essenciais têm uma versátil
composição, que pode variar
dependendo da área geográfica, do
clima, da estação, da composição do
solo, da idade, do ciclo vegetativo da
planta e do método de extração
utilizado, entre outros fatores.
 Ademais, numerosos óleos essenciais
mostraram ter propriedades
antioxidantes, bactericidas,
antiparasitas, inseticidas, antivirais e
antifúngicas.
 Os óleos essenciais são capazes de
causar mudanças na morfologia das
células, nas propriedades físicoquímicas
da membrana, assim como alterar a
produção de toxinas, romper a
membrana intracelular, inibir reações
enzimáticas e a divisão celular.
 Porém, a utilização dos óleos essenciais
vem sendo limitada pelo seu sabor
marcante, por terem pouca
solubilidade e parcial volatilidade.
13. Água eletrolisada:
 É considerado um desinfetante seguro,
não poluente e não corrosivo.
 É mais rentável do que os
desinfetantes tradicionais porque, uma
vez comprada a unidade geradora, as
únicas despesas operacionais são água,
sal e eletricidade.
 A atividade bactericida da água
eletrolisada procede da ação
combinada de pH, potencial de
oxidação-redução e concentração de
cloro disponível.
 A água eletrolisada danifica as
membranas celulares e reduz a
atividade enzimática.
14. Bacteriófagos:
 Consiste na aplicação de vírus que
infectam as bactérias presentes na
cadeia alimentar.
 Estes vírus expressam proteínas
específicas, tais como endolisinas e
outras hidrolases que degradam ou
interferem diretamente na biossíntese
de peptídeoglicanos bacterianos.
 Esta técnica é versátil para o controle
de biofilmes, altamente ativa e
específica (sem efeitos adversos sobre a
microbiota intestinal e inócua para
células de mamíferos), de baixo custo e
geneticamente maleável.
 O espectro de infeção limitado de cada
bacteriófago necessita da identificação
de patógenos bacterianos causais e da
sua susceptibilidade a fagos.
 Algumas bactérias podem desenvolver
resistência aos fagos bloqueando a
adsorção dos fagos, inibindo a injeção
de genomas fágicos, sistemas de
modificação de restrições e sistemas de
infecção abortados.
 Os bacteriófagos devem ser
geneticamente bem caracterizados para
evitar a disseminação de traços
indesejáveis (virulência e genes de
resistência aos antibióticos) que
possam envolver preocupações com a
segurança.
15. Nanopartículas:
 Nanopartículas de prata, ouro ou
quitosana mostraram uma alta eficácia
como antimicrobianos pela sua alta
reatividade contra sistemas biológicos.
 Estas nanopartículas podem carregar
adicionalmente outros antimicrobianos
por encapsulação física, adsorção ou
conjugação química, controlando a sua
libertação e melhorando a sua
atividade bactericida contra patógenos
microbianos.
 Controle do crescimento
microbiano: Aspectos físicos
Microbiologia e Parasitologia I
Professora: Dra. Roseneide Campos Deglmann
Acadêmica: Ana Júlia Trierweiler Vieira

 Ignaz Philip Semmelwes (1818-1865)  Tempo de exposição: de acordo com a

 Joseph Lister: técnicas antissépticas em
operações cirúrgicas.
 Destruir, inibir ou remover microrganismo
agentes físicos ou químicos.
 Microrganismo em n° aceitáveis ou
ausência dos mesmos.
Por que controlar o crescimento
microbiano?
 Bem estar da humanidade.
 Prevenir a transmissão de doenças
 Evitar a decomposição de alimentos
 Evitar a contaminação da água com o
ambiente.
OMS (Organização Mundial da Saúde), o
tempo mínimo de exposição é 30
minutos.
 Temperatura: temperaturas mais altas
-> mais eficiência no tratamento.
 PC aumenta 10x eficiência.
 Condições Ambientais: presença de
material orgânico inibe a ação dos
antimicrobianos químicos.
 pH do meio e calor, ácido (potencializa
o resultado).
Método Físico

Como controlar?

 Agentes físicos
 Agentes químicos (aula do professor
Tarcisio)

Controle do crescimento microbiano

 Sufixo CIDA causam a morte direta dos

micróbios -> germicida, fungicida.
 Sufixo STÁTICO/STASE inibem o
crescimento e multiplicação ->
bacteriostático.

Fatores que influenciam o tratamento

microbiano

 Tamanho da população: quanto> a

população microbiana > tempo de
tratamento.
 Natureza da população:
 Presença de endósporos mais resistentes.
 Diferentes estágios de crescimento;
células jovens mais suscetíveis (do que as
na fase estacionaria).
 Concentração dos agentes:
MAIOR concentração do agente >
eficiência.
1. Calor:
 Calor seco:
 Flambagem: o material é levado
diretamente ao fogo, seja seco ou
embebido em álcool (utilizado na
desinfecção de alças de vidro)
 Incineração: processo de eliminação dos
microrganismos e destroem o produto.
 Esterilização com ar quente- oxidação
(ex: vidros vazios, agulhas, instrumentos
 e seringas de vida) – Forno de Pasteur radiação ionizante (normalmente acima
(180° por 2 horas). de 1nm)
 Calor úmido: o Luz ultravioleta (UV): comprimento de
 Fervura ou fluxo de vapor (100°C)- onda de 4 a 400nm, sendo o
desnaturação proteica- mata células comprimento de 260nm mais eficiente.
vegetativas (bactérias e fungos) e vírus. o Desvantagem: baixo poder de
 Autoclave: temperatura acima da água penetração (não atravessa vidros,
fervente (através do vapor sob pressão). filmes escuros e outros materiais).
o Quanto maior a pressão da autoclave
> a temperatura.
o 121°C – suficiente para matar todos os
microrganismos e seus endósporos por
15 minutos.
 Pasteurização: desnaturação proteica –
72°C por 15 segundos (mata a maioria
dos microrganismos patogênicos).
 Filtração: para líquidos com
composição que seria inativada pelo calor.
 Filtros de membrana compostos de
substancias como ésteres de celulose ou
polímeros plásticos.
 Filtros HEPA: removem quase todos os
microrganismos – maiores que cerca de
0,3 micrometros de diâmetro (ar)
 Frio:
 Refrigeração e congelamento:
o Redução das reações químicas e
possíveis alterações nas proteínas.
o Tem efeito bacteriostático.
o É utilizado para a conservação dos
alimentos, fármacos e culturas.
 Liofilização: redução das reações
químicas e possíveis alterações de
proteínas.
o É efetivo para conservação prolongada
de culturas microbianas em que a água
é removida por alto vácuo em baixa
temperatura.
 Ressecamento, interrupção do
metabolismo:
 Remoção de água dos micróbios, mas os
endósporos/ esporos permanecem
viáveis.
 Tem efeito bacteriostático.
 É utilizado na conservação de alimentos.
 Radiação: tem vários efeitos sobre as
células, dependendo do seu comprimento
de onda, intensidade e duração.
 Radiação ionizante: ioniza
macromoléculas -> altera composição
química da célula -> formação de
radicais OH -> reagem com
componentes orgânicos especialmente o
DNA (destroem as pontes de H, duplas
ligações).
o Ionizantes (alfa, beta, gama, Raio X)
-> grande poder de penetração.
 Radiação não ionizante: possui
comprimento de onda > que da
 Processo Infecioso
Microbiologia e Parasitologia I
Professor: Tarcísio Crocomo
Acadêmica: Ana Júlia Trierweiler Vieira
Etapas
→ Penetração no hospedeiro – >passando
defesas primárias.
→ Adesão ao hospedeiro.
→ Propagação.
→ Danos ->toxinas ou respostas
inflamatórias.
→ Passar pelas defesas.
Conceitos Básicos
→ Patógeno: organismo que vive na
superfície ou no interior do hospedeiro,
causando danos.
→ Patogenicidade: capacidade do
microrganismo provocar danos em um
hospedeiro (doenças).
❖ Dependente do sucesso do
microrganismo completar os
estágios.
→ Virulência: grau de patogenicidade, ou
seja, a dose ou o número de células que
resultará em resposta patológica em um
dado período de tempo.
❖ Quantos organismos precisa para
causar uma doença.
→ É importante saber o tempo de
incubação da doença para saber o
provável lugar de contágio, tempo ideal
para realizar o exame.
Fatores de Virulência
→ Características da bactéria que
aumentam sua patogenicidade
(capacidade de causar doença).
1. Entrada no Hospedeiro:
❖ Várias portas
❖ No interior do hospedeiro ->
ultrapassa várias defesas, até se
estabelecer
❖ Fagocitose-> bactérias que tem
substâncias inibem a fagocitose
❖ pH do ambiente-> estomago, com
pH ácido, muitas vezes mata
bactérias que não sobrevivem em
pH´s baixos.
❖ Enzimas -> proteolíticas e
hidroliticas.
❖ Bactérias com capsula tem +
chances de sobrevivência
(principalmente as primeiras
etapas)
2. Aderência ao hospedeiro:
❖ Pili, fímbrias, moléculas de adesão
ou parede celular hidrofóbica
❖ Uma vez aderida-> impede a
remoção por muco ou fluidos
❖ A aderência permite a formação de
colônias
❖ Biofilme
3. Invasão:
❖ Que entram nas células ou
penetram mucosas e se espalham
❖ Facilitada por enzimas ->
colagenase e hialuronidase
❖ Enzimas que degradam estrutura
extracelular e facilita acesso a
superfície da célula hospedeira.
❖ Após invasão-> pode ser piogênica
(produz pus- detritos-neutrófilos)
ou granulomatosa (inflamação –
oque sobra são cicatrizes-
fibroblastos, linfócitos e
macrófagos).
4. Toxinas Bacterianas:
❖ Possuem 2 tipos:
a. Exotoxina: gram positiva e gram
negativa.
o Mais “venenosas”
o Pequeno volume é capaz de
causar dano importante
(exemplo: tétano)
o Geralmente tem 2 componentes
polipeptídicos-> 1 ligante da
proteína a célula do hospedeiro
e outro do efeito toxico.
o Alvos identificados->toxina
diftérica (exemplo)
o Maioria inativadas por
aquecimento médio (60°) ->
 com exceção do estafilo e expressos- a partir disso Ag
toxinas termoestáveis. incorpora estruturas diferentes.
o Formaldeído-> destrói
atividade da maioria das Identificar o patógeno
exotoxinas (mas não afeta sua → Isolado: não se pode concluir que o que
antigenicidade) – uteis para foi isolado inicialmente seja o
vacinas. responsável por uma lesão de pele.
o Codificadas por genes de ❖ Pode ter seu habitat natural a pele
plasmídeos (DNA- extracelular) → Não sendo seu habitat natural =
e bacteriófagos. oportunista.
b. Endotoxina: mais relacionada aos
→ Koch: definiu critérios para determinar a
gram negativos; lipoproteína em
identidade de um organismo causador
parte integrante da parede celular
(falho para não cultiváveis in vitro)
gram negativa.
o LPS termoestáveis da membrana Infecção em Populações Humanas
externa gram negativa.
o Liberadas na circulação após a → Doenças podem ser transmissíveis ou
lise bacteriana. não entre pessoas.
o LPS-> com o polissacarídeo O → Oportunistas = geralmente, pessoas
(ag. Somático) protuberante, saudáveis não desenvolvem doenças,
um cerne polissacarídeo e mas quando a pessoa está
componente lipídico (lipídio A) imunodeprimida, desenvolve.
voltado para dentro. → Cólera -> muito transmissível –
❖ Efeitos dessas toxinas-> febre, contagiosa- epidemias.
choque, hipotensão e trombose → Botulismo -> não transmissíveis
(produzidos indiretamente pela
ativação de macrófagos) com
liberação de citocinas, ativação de
complemento e ativa a cascata de
coagulação.
❖ Falência de múltiplos órgãos =
morte.
❖ LPS em gram + = efeitos de menor
gravidade.
→ A eliminação da bactéria causadora por
antibióticos pode inicialmente exacerbar
os sintomas por provocar uma liberação
súbita e massiva da endotoxina na
circulação.

Variação Antigênica
→ Patógeno bem sucedido escapa das
defesas.
→ Estratégias -> várias Ag de superfície.
→ Mecanismos:
❖ Variação de fase -> capaz de
geneticamente ativar ou desativar
genes que codificam a expressão
dos Ag.
❖ Modificação genética -> modifica
gene que expressa o Ag – por
exemplo sequencia genes não
 Microbiota Humana Normal
Microbiologia e Parasitologia I
Professor: Tarcísio Crocomo
Acadêmica: Ana Júlia Trierweiler Vieira
→ Humanos no período fetal estão em um
ambiente estéril e protegido.
→ Ao nascer ->fica exposto a
microrganismos que passam a colonizar
seu organismo de maneira equilibrada.
→ Cada região do corpo tem características
-> temperatura, umidade, substâncias
inibitórias e nutrientes do local.
→ O microrganismo no corpo humano
está submetido a constantes mudanças.
→ Fatores que podem alterar o balanço
dos microrganismos:
➢ Idade
➢ Alimentação
➢ Higiene
➢ Regulação hormonal
→ Microrganismos permanecem de forma
comensal no organismo (ambos são
beneficiados).
→ Função: proteção e defesa do
organismo na tentativa de colonização
de patógenos.
→ Estimula o sistema imune em recém
natos.
→ Auxiliam na absorção de nutrientes
→ Os microrganismos são ubíquos
(habitam diversos locais).
→ Ecossistemas -> colonizados por uma
ampla e diversa microbiota.
→ Microbiota que coloniza o corpo
humano = numerosa, complexa e
diversa.
→ Corpo humano é habitado por 100
trilhões de células microbianas (10x + o
n° de células humanas).
→ Órgãos -> contato com o ambiente Microbiota Normal específica de
externo, ricos em microbiota. cada região
→ Cavidades -> são estéreis, como a
cavidade peritoneal.
→ Escherichia coli: organismo anaeróbio
facultativo que constitui menos de 0,1%
da população total de bactérias do trato
intestinal. Entretanto, essa E. coli
endógena é a principal causa de
infecções do trato urinário.
→ Existem dois tipos:
➢ Microbiota residente: microrganismo
que em grande quantidade em uma
região anatômica, em uma dada
população.
➢ Microbiota transitória: local, que não
o habitual, temporária, eliminada por
mecanismos naturais de defesa ou por
ações de limpeza.

Microbiota Residente vs. Transitória 1. Pele:

→ Caso a microbiota permanente esteja
intacta, a microbiota transitória não
causa danos e é eliminada.
→ Porém, em desequilíbrio, a microbiota
transitória pode provocar doenças.
➢ Se tornam patógenos se encontrados
em outro local que não o habitual.
→ Microbiota residente, indígena, normal
ou autóctone:
➢ É importante na manutenção da
integridade do hospedeiro, quando
em equilíbrio.
➢ Oferecem barreiras contra colonização
por patógenos:
• Produzem substâncias utilizáveis
pelo hospedeiro.
• Degradam produtos tóxicos.
• Participam da modulação do
sistema imune dos hospedeiros.
→ Microrganismos podem se comportar
como patógenos oportunistas em
situações de desequilíbrio ou ao serem
introduzidos em sítios estéreis ou não
específicos.
→ Microbiota Transitória:
➢ Microrganismo não patogênicos ou
potencialmente patogênicos,
encontrados em superfícies externas
e internas, horas, dias ou semanas.
➢ Pouca importância se a microbiota
residente estiver em equilíbrio.
➢ Caso ocorra alteração neste
equilíbrio, podem produzir doença.
→ Toda extensão, + concentrada em
regiões + quentes e úmidas. (Exemplo:
axila e períneo).
→ Chegando ao n° de 106 bactérias por
cm2.
→ Predominam as bactérias Gram
positivas, como: Staphylococcus,
Corynebacterium e Propionobacterium.
(São normais).
2. Vias aéreas superiores:
→ Cavidade bucal, orofaringe e
nasofaringe.
→ Podem ser encontrados: Streptococcus,
Lactobacillus, Fusobacterium, Velionella,
Neisseria, Treponema, Candida,
Staphylococcus, Mycoplasma dentre
outras.
→ A microbiota da cavidade oral tem
grande importância já que doenças
periodontais e até endocardites
subagudas podem ser causadas por
constituintes dessa microbiota.
→ Fossas nasais = Corynebacterium e
Staphylococcus.
3. Vias aéreas Inferiores:
→ Laringe, traqueia e bronquíolos
→ São regiões estéreis.
4. Trato geniturinário:
→ Predominam as Gram negativas.
→ Vagina -> população variada devido a
alterações hormonais.
→ Recém-nascidos são colonizadas por
lactobacilos nas primeiras 6 semanas.
→ Depois, a taxa de estrogênio decai, e há
colonização por estreptococos,
estafilococos e enterobactérias.
→ No início da puberdade a alteração nas
taxas de estrogênio geram novas
mudanças, tendo lactobacilos
predominantes.
→ O pH também é responsável por essas
mudanças, devido a quantidade de
glicogênio, que ao sofrer fermentação,
diminui o pH, dificultando o
→ Esôfago -> microbiota pouco
desenvolvimento de algumas bactérias.
numerosa, geralmente de colonização
→ Uretra anterior ->colonização variada,
apenas transitória.
podendo lactobacillus, estreptococos,
→ Estômago -> devido ao pH altamente
estafilococos, epidermidis e difteróides.
ácido, são tolerantes poucas bactérias,
➢ Estreptococos fecalis e Candida
como Lactobacillus, Streptococcus spp.
pode também estar presente de
(produtoras de ácido lático) e
forma transitória, assim como E.coli.
Helicobacter pylori (causadora de
→ Ureteres, bexiga e rins -> não possuem
gastrites e úlceras).
microbiota residente e a cérvice
→ Intestino Delgado -> mais frequentes,
geralmente não é colonizada.
estafilococos, estreptococos e
lactobacilos, encontrados anaeróbicos.
5. Conjuntiva:
➢ Podem ser encontrados no delgado
→ Pode ser estéril ou colonizada por
proximal também cocos Gram
Difteróides, Estafilo epidermidis e
positivos resistentes a acidez gástrica.
estreptococos não hemolíticos.
➢ Ácidos biliares são inibidores do
→ Esta microbiota é controlada pela
crescimento das bactérias um vitro.
lágrima que contém lizosima que age
→ Íleo -> aumenta a microbiota, inclui
como importante bactericida.
bactérias anaeróbias devido ao baixo
poder de oxirredução.
6. Ouvido externo:
→ Intestino grosso -> maior concentração
→ Possui semelhança com a microbiota da
de microrganismos até 1011 g/ fezes, além
pele.
do aumento de bactérias anaeróbias,
7. Microbiota Intestinal Humana:
superando as outras.
→ Atuação:
➢ Nesta microbiota normal, predomina
➢ Modulação do sistema imune
a Eubacterium, Bifidobacterium e
➢ Degradação de componentes não
Bacterióides.
digeríveis da dieta
➢ Todos humanos também são
➢ Produção de ácido graxo de cadeia
portadores de E.coli nesta
curta
microbiota. Também de cocos Gram
➢ Proteção do epitélio intestinal contra
+ resistentes á acidez.
patógenos
→ Distribuição horizontal: luz, camada de muco e
➢ Síntese de vitaminas -> tiamina,
epitélio.
riboflavina, piridoxina, B12 e K
→ A luz intestinal é a região com maior variedade
→ Papel importante na manutenção da
microbiana comparada com a camada de muco
integridade do hospedeiro, forte
e o epitélio,
impacto na fisiologia e na nutrição do
→ Algumas ações são feitas pela própria flora
hospedeiro e é crucial para a vida
intestinal para garantir suas características
humana.
próprias:
 ➢ E.coli inibe o crescimento bacteriano
de Shiguela e de outras bactérias por
competir por fontes de carbono em
locais com baixo oxigênio.
➢ Lactobacilos competem por sítios de
adesão com outras bactérias, além de
produzir substanciais inibidoras de
crescimento para outros
microrganismos da microbiota.
➢ Bactérias facultativas, por seu alto
consumo de oxigênio, criam
condições de anaerobiose,
garantindo o crescimento de
anaeróbios.
➢ Subprodutos do metabolismo
próprio principalmente das bactérias
anaeróbias, como ácido acético,
butírico e propiônico, promovem
um ambiente intralumial de restrito
crescimento bacteriano, contribuindo
para um equilíbrio da microbiota
intestinal.
➢ Quorum-sensing é realizado com a
produção e detecção de moléculas
sinalizadoras denominadas auto
indutoras, utilizando por bactérias
Gram positivas e Gram negativas.
Moduladores bacterianos,
importantes para a formação e
manutenção da flora intestinal.
Microbiota Intestinal em diferentes
fases da vida
1. Recém-nascido:
→ Quando amamentado com leite
materno, possui maior concentração de
estafilococos e bifidobactérias e menor
quantidade de clostrídeos e enterococos
que as outras crianças. Também
influenciam o crescimento bacteriano da
mesma ou de diferentes espécies.
→ Os lactobacilos não são influenciados
pelo tipo de amamentação.
→ Crianças amamentadas LM menos
colonizadas por Klebsiella, Enterobacter
e menos quantidade de sorotipos de
E.coli (possuem menor frequência de
E.coli portadora de antígeno K I, que
costuma causar meningite em recém-
nascidos)
→ A microbiota da criança deriva da mãe,
(canal de parto), e tardiamente bactérias
que se encontram nos alimentos e do
meio em que vive (cesárea).
→ As bactérias hospitalares e dos
profissionais da saúde envolvidos no
nascimento também fontes de formação
da microbiota do bebê.
→ Portanto há diferença MB de RN de
países desenvolvidos e
subdesenvolvidos, principalmente por
questões de higiene, do local de
nascimento e da própria mãe.
2. Idosos:
→ Mais rica em clostrídeos e menos
acentuada, em lactobacilos, coliformes e
enterococos que adulta.
→ As bifidobactérias em menor
quantidade, enquanto os bacterióides e
eubactérias se mesma proporção em
ambas as faixas etárias.
Desequilíbrio da microbiota intestinal
→ Pode ser provocada por diversos fatores
como alimentação inadequada,
utilização indiscriminada de alguns
medicamentos, estresse e
envelhecimento.
→ Algumas doenças decorrentes deste
desequilíbrio são:
➢ Síndrome do intestino irritável
➢ Infecções intestinais
➢ Enterocolite pseudomembranosa
➢ Síndrome da alça estagnante
➢ ITU
➢ Infecções peritoneais
➢ Infecções intravasculares
➢ Doenças inflamatórias intestinais
➢ Câncer
 Interações bactérias hospedeiro
→ Corpo humano é um conjunto de
nichos ambientais que fornece nutrientes
necessários para o seu crescimento.
→ Corpo não é ambiente uniforme –
crescimento de determinados
microrganismos é favorecido:
➢ Pele: ambiente relativamente seco
favorece crescimento d e S. aureus.
➢ Pulmões: ambiente altamente
oxigenado favorece crescimento do
aeróbio Mycobacterium tuberculosis.
➢ Intestino grosso: ambiente anóxico
favorece crescimento dos anaeróbios
estritos Clostridium e Bacteroides.
→ Hospedeiros -> mecanismo de defesa.
→ Microrganismos que conseguem
colonizar um hospedeiro com sucesso
sobrepujam esses mecanismos de defesa.