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Christine Hackel 2
1 Laboratório de Citogenética Abstract A major share of the grain farming (wheat and soybeans) in the State of Rio Grande
Humana, Instituto
do Sul is in the Passo Fundo area. For crop pest control, large amounts of agrochemicals (fungi-
de Ciências Biológicas,
Universidade de Passo cides, insecticides, and herbicides) are used. To evaluate the genotoxicity of these products, the
Fundo. Campus I, BR 285, micronucleus test was performed in farm workers directly exposed to these chemicals. He-
Km 171, Passo Fundo, RS
parinized blood samples were drawn by venipuncture from 30 exposed workers and 30 non-ex-
90001-970, Brasil.
adil@vitoria.upf.tche.br posed controls. Micronuclei frequency was evaluated by counting 1,000 binucleated cells per in-
2 Departamento de Genética dividual in both groups. Smoking habits, age, and duration of exposure showed no effect on the
Médica, Faculdade
frequency of micronuclei in both groups. However, statistical analysis showed significantly high-
de Ciências Médicas,
Universidade Estadual er mean numbers of binucleated cells with micronuclei in exposed individuals (14.3/1,000 cells)
de Campinas. as compared to controls (7.1/1,000 cells), allowing the authors to conclude that the micronucleus
C. P. 6111, Campinas, SP
13081-970, Brasil.
test is an efficient biological assay for monitoring population exposure to mixtures of agrochem-
hackel@unicamp.br icals.
Key words Occupational Health; Poisoning; Pesticide Exposure; Chromosome Aberrations
Resumo A região de Passo Fundo no Planalto Médio do Rio Grande do Sul, caracteriza-se pela
produção de grãos (trigo, soja), nas quais grandes quantidades de agroquímicos (fungicidas, in-
seticidas e herbicidas) são utilizadas. Para avaliar a atividade genotóxica desses produtos em se-
res humanos, utilizou-se a técnica de micronúcleos, através de amostras de sangue periférico de
trinta trabalhadores expostos e de trinta indivíduos controles não expostos. A freqüência de mi-
cronúcleos foi avaliada em 1.000 células binucleadas por indivíduo em ambos os grupos. Fatores
como tabagismo, idade e tempo de exposição não exerceram qualquer efeito sobre a freqüência
de micronúcleos em ambos os grupos. No entanto, a análise estatística revelou números signifi-
cativamente mais elevados de micronúcleos em expostos (14,3/1.000 células) do que em não ex-
postos (7,1/1.000 células), indicando que o teste do micronúcleo é um ensaio biológico eficiente
para monitorar populações expostas a misturas de agroquímicos.
Palavras-chave Saúde Ocupacional; Envenenamento; Exposição a Praguicidas; Aberrações
Cromossômicas
cionados 0,2ml de Citocalasina B para cada 5ml eles (tcalc = 1,3682; G.L. = 28, p = 0,1821), de for-
de meio, para impedir a citocinese das células ma que esses dados foram agrupados para as
em divisão. Ao completar 72 horas, a cultura foi análises subseqüentemente realizadas.
interrompida com 0,5ml de fixador metanol- O número médio de células MN encontrado
ácido acético (3:1) durante 5 minutos à tempe- no grupo dos trabalhadores expostos foi de 14,3,
ratura ambiente. O material foi submetido à e 7,1 no grupo dos doadores não-expostos, sen-
centrifugação a 800rpm, descartando-se o so- do essa diferença estatisticamente significativa
brenadante. A seguir, adicionou-se 5ml de fixa- (tcalc = 4,2855; G.L. = 58, p < 0,0001).
dor, agitando-se o material e realizando-se no- A comparação entre não-fumantes expostos
va centrifugação. Esse procedimento foi repeti- (n = 22; 13,91MN/1.000 células) e não-fumantes
do 3 a 4 vezes, até o precipitado ficar limpo. O controles (n = 26; 7,15MN/1.000 células) reve-
material foi gotejado sobre lâminas que foram lou a existência de um aumento estatisticamen-
secas à temperatura ambiente e coradas com te significativo do número de células MN no pri-
Giemsa (Wright) na proporção de 1:3 em tam- meiro grupo (tcalc = 3,5842; G.L. = 46; p = 0,0008).
pão fosfato (pH = 6,8) durante 5 a 8 minutos. Já entre fumantes expostos (n = 8; 15,25MN/
As lâminas foram examinadas em teste-ce- 1.000 células) e fumantes não-expostos (n = 4;
go. Para cada indivíduo foram contados mil lin- 6,50MN/1.000 células) não houve diferença es-
fócitos binucleados, identificando-se os mi- tatisticamente significativa ao nível de 5% (tcalc =
cronúcleos de acordo com os critérios propos- 2,0278; G.L. = 10; p = 0,0701), provavelmente
tos por Titenko-Holland et al. (1997). Os dados devido ao pequeno número de indivíduos em
foram analisados estatisticamente, utilizando- cada categoria.
se o teste t com o nível de significância de 5%. A análise de regressão linear permitiu con-
Foi também utilizado o teste de regressão line- firmar esses achados, em relação à idade e ao
ar com o auxilio do programa BioEstat (Ayres & tempo de exposição. Nos indivíduos expostos,
Ayres Jr., 1998), para confirmar os resultados ob- não houve influência da idade (F = 0,0311; p =
tidos com o teste t. 0,8554; r = -0,0195) ou dos anos de exposição (F =
Os dados utilizados no presente trabalho 0,5510; p = 0,5295; r = 0,1124) sobre o número
cumprem os princípios éticos da Declaração de de células binucleadas com micronúcleos. A va-
Helsinki (1996). Para tanto, todos os envolvidos riável idade também não exerceu influência
preencheram e assinaram o Consentimento In- sobre a expressão de micronúcleos no grupo de
formado ficando uma via com o pesquisador e doadores não-expostos (F = 1,9460; p = 0,1709;
outra para o doador voluntário. r = 0,1144).
Também foram avaliados os dados relativos
ao tempo de exposição, idade e tabagismo em
Resultados cada grupo. Os resultados dessa análise estatís-
tica demonstraram não ocorrer diferenças sig-
Os resultados obtidos a partir da contagem de nificativas. A influência das variáveis sexo e in-
mil células binucleadas dos indivíduos do gru- gestão de álcool não pôde ser estatisticamente
po exposto, são apresentados na Tabela 1 e os avaliada, tendo em vista o pequeno número in-
referentes aos indivíduos do grupo controle es- divíduos de sexo feminino e a presença de ape-
tão listados na Tabela 2. nas um indivíduo no grupo controle com relato
Nos trabalhadores expostos a média de ida- de consumo freqüente de bebidas alcoólicas.
de foi 41,8 anos enquanto que no grupo con-
trole a média foi de 40,4 anos. O tempo médio
de exposição aos praguicidas foi de 10,7 anos. Discussão
Entre os fumantes, somente o indivíduo identi-
ficado pelo número 13 (Tabela 1), relatou ter fu- A utilização de agroquímicos para controlar
mado por mais de 35 anos, os demais referiram as pragas da lavoura é um fato inegável, porém
uma exposição menor a esse componente e ha- os cuidados com seu manuseio continuam
viam deixado o hábito há mais de três anos. sendo negligenciados pelos aplicadores e pelo
Uma vez que as amostras dos trabalhadores poder público que regulamenta o seu uso. Vá-
expostos foram coletadas em dois locais dife- rios relatos apontam para a má utilização des-
rentes (HSPV e CEPAGRO), os dados referentes ses produtos pelo homem (Paumgartten et al.,
à análise de micronúcleos (MN) dos vinte indi- 1998).
víduos internados, foram comparados com os Os resultados obtidos comparando trinta
obtidos nos dez indivíduos expostos, sem sin- indivíduos expostos a essas substâncias quími-
tomatologia clínica. Não foram detectadas di- cas utilizadas nas plantações de Passo Fundo,
ferenças estatisticamente significativas entre Rio Grande do Sul, demonstram que as altera-
Tabela 1
Dados referentes ao número de células binucleadas com micronúcleos (MN), hábito de fumar, ingestão de álcool,
idade, sexo e tempo de exposição a agroquímicos de trabalhadores expostos.
01 17 – – 29 4 Masculino
02 20 – – 39 10 Masculino
03 16 – – 30 5 Masculino
04 14 – – 25 7 Masculino
05 11 – – 27 5 Masculino
06 6 + – 47 4 Masculino
07 16 – – 40 10 Masculino
08 19 – – 44 12 Masculino
09 27 – – 39 20 Masculino
10 23 + – 37 10 Masculino
11 7 – – 29 15 Masculino
12 15 – – 24 5 Feminino
13 24 + – 54 45 Masculino
14 14 – – 70 2 Feminino
15 20 + – 47 7 Masculino
16 6 + – 66 2 Masculino
17 5 – – 50 2 Masculino
18 8 + – 52 3 Masculino
19 2 – – 33 15 Masculino
20 11 + – 58 10 Masculino
21 4 – – 50 30 Masculino
22 9 – – 37 10 Masculino
23 3 – – 43 25 Masculino
24 19 – – 33 8 Masculino
25 19 – – 39 8 Masculino
26 12 – – 24 11 Masculino
27 28 – – 67 15 Masculino
28 24 + – 45 3 Feminino
29 23 – – 27 15 Masculino
30 6 – – 49 4 Masculino
ções cromossômicas, sob a forma de micronú- dores de zonas rurais. Em relação aos micronú-
cleos (Figura 1), estão presentes em uma fre- cleos, sua freqüência acha-se significativamen-
qüência bem mais elevada do que em 30 indi- te aumentada nos floricultores italianos estu-
víduos não expostos, da mesma região. dados por Bolognesi et al. (1993), embora Scar-
Esses dados estão de acordo com a maioria pato et al. (1996) relatem achados negativos em
dos estudos cromossômicos realizados em tra- estudo semelhante.
balhadores expostos a misturas de pesticidas, Com relação a variáveis como hábito de fu-
independentemente do parâmetro citogenéti- mar, idade e tempo de exposição, o teste estatís-
co avaliado. Assim, aumentos significativos na tico não apontou diferenças significativas em
incidência de aberrações cromossômicas e/ou relação à freqüência de células com micronú-
no intercâmbio de cromátides irmãs, foram cleos entre os expostos e não-expostos da re-
constatadas por De Ferrari et al. (1991), em flo- gião de Passo Fundo. Como visto, a influência
ricultores; por Kourakis et al. (1992), em traba- das variáveis sexo e ingestão de álcool não pô-
lhadores em casas de vegetação e por Carbonell de ser avaliada no presente trabalho, devido a
et al. (1995) e Bréga et al. (1998), em trabalha- presença de apenas três indivíduos de sexo fe-
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