Engenharia Bioquímica

Aula 2: Células importantes em Bioprocessos

Profa.Caroline Casagrande Sipoli

 Escutem a Ciência!
Em tempos que alguns grupos (e autoridades) ridicularizam a
ciência (movimentos como da terra plana, anti-vacinas e que a
teoria da relatividade é uma construção Marxista, são três bons
exemplos do renascimento do culto à ignorância) é bom
lembrar o que os cientistas alertaram (em 2007) em um artigo
publicado na revista CLINICAL MICROBIOLOGY REVIEWS da
Sociedade Americana de Microbiologia. Nas considerações
finais, página 683, os autores escreveram:

“Coronaviruses are well known to undergo genetic

recombination (375), which may lead to new genotypes and
outbreaks. The presence of a large reservoir of SARS-CoV-like
viruses in horseshoe bats, together with the culture of eating
exotic mammals in southern China, is a time bomb.”
Foto: Estrutura do Coronavírus criada pelo Centro Link para artigo
de Controle e Prevenção de Doenças (CPC) a https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2176051/pdf/
partir de observações de microscopia eletrônica. 0023-07.pdf?fbclid=IwAR1kXHG5h-RT-
hSF4l1YgaW09lG4g3ZQ9YrPN4nE_iQvxtHINeIPGkrASY4
 Como é feita a classificação das células?

Quais as células importantes em Bioprocessos?

O que é
importante saber? Estrutura celular: função, crescimento e reprodução.

Metabolismo celular – como as células trabalham?

Podemos modificar as células? Modificação genética.

Equacionamento em Bioprocessos: Balanço de massa

 Células importantes em Bioprocessos

Vegetal

Microbiana Animal
 Principais grupos de microorganismos utilizados em
Biorreatores.

Saccharomyces cerevisae

Fungos: eucariontes
Ø Leveduras: unicelulares
Ø Bolores: multicelulares
Bactérias: procariontes

Lactobacillus casei Shirota

Penicillium roqueforti

Staphylococcus aureus
 Característica universal das células

As características universais das células vivas. Todas as células têm núcleo ou nucleoide contendo DNA,
membrana plasmática e citoplasma. O citosol é definido como a porção do citoplasma que permanece
no sobrenadante após rompimento suave da membrana plasmática e centrifugação do extrato
resultante a 150.000 g por 1 hora. As células eucarióticas têm uma grande variedade de organelas
delimitadas por membranas (mitocôndrias e cloroplastos) e partículas maiores (p. ex., ribossomos), que
são sedimentadas nestas condições de centrifugação e podem ser recuperadas no precipitado.

Fonte: Princípios de Bioquímica de Lehninger – 7ª Edição (Minha biblioteca)

Característica universal das células
Teoria Celular

Robert Hooke fez o primeiro

relato de células em 1665.

Célula é a unidade básica de

qualquer organismo (unidades
menores que as células não Todos organismos são compostos
são vivas). por células (unicelulares e
pluricelulares).

Os organismos vivos se
reproduzem, ingerem ou obtém
seus alimentos a fim de produzir
Com exceção das hemácias,
energia e sintetizar compostos
observou-se núcleo em todas as
químicos para as estruturas
células.
celulares e excretam substâncias.
 Nomenclatura para os organismos

TAXONOMIA - Sistema de organização, classificação e

nomenclatura dos seres

Gênero – primeira letra: maiúscula

Sempre em itálico
ou Bacillus subtilis Espécie –letras em minúsculo
Grifado
Pode-se adicionar letras
ou números para especificar
Uma determinada linhagem

EX: E.coli B/rA e E. coli K12

B. Albus
B. coagulans Sistema Binomial
Nomenclatura para os organismos

Sistema de organização, classificação e nomenclatura dos seres é chamado de Taxonomia

A abreviatura "sp. (espécie)" e “spp. (espécies)” quando o material foi

determinado até o nível gênero ou quando não interessa ser especificado.

Por exemplo: Canis sp. - uma espécie do género Canis.

Reinos dos organismos vivos

Reinos Segundo Whittaker

Eucariontes pluricelulares

Eucariontes unicelulares

Procariontes
 Reinos dos organismos vivos

Reinos Segundo Woese

Bactérias primitivas
Bactérias verdadeiras
Estrutura celular dos organismos
2 categorias de células se avaliando a ultra-estrutura celular!!!
Material nuclear
Núcleo separado
disperso no citoplasma.
do citoplasma!!!
Estrutura celular dos organismos
Características Procarióticas Eucarióticas
Membrana Celular (Plasmática) Presente Presente
Nucléolo Ausente Presente
Número de cromossomos Um Mais que um
Retículo Endoplasmático Ausente Presente
Aparelho de Golgi Ausente Presente
Mitocôndria Ausente Presente
Lisossomas Ausente Presente
Histonas associadas ao cromossoma Ausente* Presente
Ribossomas 70s 80s
Cloroplastos Ausente Presente em plantas
Parede celular com mucocomplexo Presente* Ausente
Transporte de elétrons Membrana Mitocôndrias
Fagocitose e Pinocitose Ausente Às vezes presente
Experimento
separação organelas
Procariontes - Bactérias

Pequenos e de organização simples

Possui duas regiões:
v Citoplasma
v Nucleoplasma

No citoplasma
v Grânulos (responsáveis pelo armazenamento Célula de E. coli
do produto das secreções.)
v Ribossomos
Possui também:
v Parede celular (proteção)
v Membrana celular (barreira seletiva)
Características - bactérias

v Tamanho: as esféricas entre 0,5 e 4

micrômetros. O comprimento das
cilíndricas não ultrapassa 19
micrômetros
Célula de E. coli
v Crescem rapidamente (tempo de
duplicação de 30 min a horas)

v Utilizam uma variedade de nutrientes

como fonte de carbono (carboidratos,
proteínas e CO2)
 Preparação do esfregaço
Morfologia e agrupamentos

Fixação das células por calor

Técnica Coloração Gram : + ou -
Adição de cristal violeta
Hans Cristian Gram - 1884
Descobriu a técnica de coloração
Adição de iodo
de bactérias.

Adição de etanol

Adição de safranina
Morfologia e agrupamentos
Formas - bactérias
Bacilos

Cocos

Espiroqueta

Espirilo
Formas - bactérias

Cocos Diplococos Estafilococos

Estreptococos Sarcina Tétrade

Formas - bactérias
Diplococos

Streptococcus thermophilus

Sarcina lutea Staphylococcus aureus

Formas - bactérias

Paliçadas, agrupados lado a lado

Formas de transição- bactérias

Cocobacilos – Bacilos muito curtos.

Ex.: Prevotella

Vibriões - espirilos muito curtos,

assumindo formas de vírgula.
Ex.: Vibrio cholerae
Estrutura células procarióticas - bactérias

Transferência genética entre

duas bactérias.

https://www.sciencenews.org/article/bacteria-nearly-killed-antibiotics-recover-
gain-resistance
Estrutura celular dos organismos

vFagocitose
Processo de Endocitose
vPinocitose
Estrutura células procarióticas - bactérias

Gram + Paredes celulares mais rígidas

Estrutura células procarióticas - bactérias

Gram +
Estrutura células procarióticas - bactérias
Gram - = fração de lipossacarídeos, proteínas e espaço periplasmático

Porinas: proteínas e servem

como canais de difusão para as
moléculas passarem.
Toxinas- bactérias Muitas bactérias produzem toxinas, enzimas e pigmentos.
As toxinas e enzimas desempenham papel importante. As
toxinas de bactérias podem ser divididas em duas classes:
Exotoxinas: são proteínas geralmente sensíveis ao calor
e secretadas por alguns tipos de bactérias.

Endotoxinas são proteínas lipopolissacarídicas complexas

e estáveis ao calor. Fazem parte da estrutura da parede
celular das bactérias Gram-Negativas. Essas toxinas são
liberadas na lise celular ou na morte da bacteria.

Endotoxina
Diarreia, vômitos,
febre e choque
potencialmente fatal.
Estrutura células procarióticas - bactérias

Febre tifóide
Endotoxinas Infecções no trato urinário
Meningite meningocócica

Tétano
Botulismo
Exotoxinas Coqueluche
Infecções pulmonares em pacientes com fibrose
cística
Formação endósporo - bactérias

Condições Adversas
Fungos - eucariontes Rhizopus

vEucariontes
vHeterótroficos
vArmazenam glicogênio como material de reserva, ao invés do
amido
vNão têm celulose na parede celular (exceção alguns fungos
aquáticos)
vUbíquos – presentes em todos lugares.

Penicillium roqueforti

Saccharomyces cerevisae
 Fungos - eucariontes
Classificação quanto a morfologia

Bolores
Ledevuras - unicelulares v Produção de antibióticos
v Aditivos alimentares
v Enzimas

Saccharomyces cerevisae

Produção de vinho, cerveja, fermento de pão

Penicillium notatum
 Estrutura celular dos organismos
Animal
1. Nucléolo: grande quantidade de RNA.
2. Núcleo celular: cromossomos do DNA
3. Ribossomos: fazem a síntese de Proteínas
4. Vesículas
5. Ergastoplasma ou Retículo endoplasmático rugoso (RER):
transporte de proteínas ( há ribossomos grudados nele )
6. Complexo de Golgi armazena e libera as proteínas
7. Microtúbulos
8. Retículo Endoplasmático Liso: síntese de lipídeos
9. Mitocôndrias: Respiração. Energia para a célula.
10. Vacúolo: existem em célula animal, porém são muito maiores
na celula vegetal, serve como reserva energética
11. Citoplasma
12. Lisossomas: digestão (possuem enzimas hidrolíticas).
13. Centríolos: divisão celular
Células animais

v Células removidas de tecido animal podem ser cultivadas em um meio nutritivo fora do corpo do doador

v Oportunidade de estudar doenças como o câncer, determinar compatibilidade para transplante de órgãos

Exemplo:
Produção de biomoléculas importantes como Anticorpos monoclonais
Células animais
Produção de biomoléculas importantes como Anticorpos monoclonais
 Células animais

Alternativa para pacientes de

câncer!
Células animais

Histórico Cultivo de células e tecidos

Ø Século 19: Sydney Ringer desenvolveu solução salina contendo cloreto de sódio,
potássio, cálcio e magnésio para manter os batimentos cardíacos de um coração
isolado fora do corpo;

Ø 1885: Wilhelm Roux manteve células embriões de galinha vivas em solução salina
aquecida por vários dias;

Ø 1907: Ross Granville Harrison isolou pequenos pedaços da medula espinhal de anfíbios
em coágulo linfático e os manteve por alguns dias;

Ø 1913: Alexis Carrel demonstra que células podem crescer por longos períodos em
cultura, desde que alimentadas regularmente, sob condições assépticas.
Células animais Organ on a chip

J. H. Sung, Shuler lab, Cornell University

Canais simulam fluxo de sangue em

dispositivos (diferentes orgãos).

Technische Universität Berlin, Institute of

Biotechnology, Department Medical
WYSS INST. Biotechnology, Berlin, German

Miniaturas de orgãos como o baço. Man on a chip

Testes podem acelerar alguns testes
com farmácos
Células animais

Organ on a chip
https://www.youtube.com/watch?v=Mg2fJ0UBj_0

Células HeLa
https://www.bbc.com/portuguese/internacional-39248764

https://www.youtube.com/watch?v=22lGbAVWhro
Estrutura celular dos organismos
Vegetal
Principal diferença da célula animal
está na presença de vacúolos,
plastos.

E também há diferença na parede

celular.
 Células Vegetais

CÉLULAS ADQUIREM E UTILIZAM ENERGIA

Plantas: realizam a Fotossíntese – organismos autotróficos

A maioria das células respiram, convertendo energia de compostos orgânicos para CO2, H2O e ATP.
 Células Vegetais

CÉLULAS ADQUIREM E UTILIZAM ENERGIA

Plantas: realizam a Fotossíntese

Fontes de vários componentes químicos:

Ao invés de se cultivar a planta como um todo
cultura
v Aromasdas células das plantas em suspensão
Porém…as
v Pigmentoscélulas de plantas 10 a 100 maiores que
bactérias
v Fármacose fungos Metabolismo mais lento Células
tendem a se agregarem sedimentação Mais Ao invés de se cultivar a planta como um todo ---˃ cultura das
v Agroquímicos células das plantas em suspensão
sensíveis ao cisalhamento que as células
v Fragrâncias
microbianas Processo metabólico mais complicado Porém…as células de plantas 10 a 100 maiores que bactérias e
fungos
Metabolismo mais lento
Células tendem a se agregarem ---˃ sedimentação
Mais sensíveis ao cisalhamento que as células microbianas
Processo metabólico mais complicado
 Vírus
AONDE SE ENCAIXAM?
v Não se classificam em nenhuma das classes anteriormente citadas
v São acelulares
v Não são organismos vivos livres
v Parasitam outras células (bactérias, fungos, algas, células animais e
vegetais)
v Tamanho aproximado: 200 a 300 nm
 INTERESSANTE - Biotecnologia

Extremófilos: a estrela da indústria

Técnica de PCR – simples e é utilizada

amplamente!!!