II Congresso de Pesquisa e Inovao da Rede Norte Nordeste de Educao Tecnolgica Joo Pessoa - PB - 2007

IDENTIFICAO DE RISCOS QUMICOS EM UM LABORATRIO DE BIOTECNOLOGIA

Francisco Rodrigo Lemos CALDAS (1); Danbio Andrade Bezerra FARIAS (2); Hlio Frota VIEIRA (3); Maria Laise VIEIRA (4); Cristianne Sousa BEZERRA (5)
(1) Laboratrio de Biologia Molecular/DACT/FFOE/UFC; Rua Capito Francisco Pedro, 1210 Rodolfo Tefilo, Fortaleza - CE; telefone: (085) 3366-8270; fax (085) 3366-8270, e-mail: f_br2004@hotmail.com.br (2) Laboratrio de Biologia Molecular/DACT/FFOE/UFC, e-mail: danubioandrade@hotmail.com (3) Laboratrio de Biologia Molecular/DACT/FFOE/UFC, e-mail: helio@ufc.br (4) Laboratrio de Biologia Molecular/DACT/FFOE/UFC, e-mail: laise@ufc.br (5) CEFETRN/UNED Mossor, e-mail: tiannebezerra@yahoo.com.br

RESUMO
Os experimentos dos laboratrios nem sempre incluem princpios de qumica limpa, produzindo resduos e rejeitos. O crescente nmero de substncias perigosas tem exigido solues eficazes por parte dos profissionais que trabalham com esses produtos. O gerenciamento dos resduos permite o controle efetivo da gerao, manipulao, transporte, tratamento e disposio final dos resduos e a adequao a legislao ambiental. Infelizmente, em muitos centros de pesquisa, regras gerais de segurana em laboratrio so ignoradas. A falta de infra-estrutura e a negligncia por parte de alguns, aumentam os riscos ocupacionais e ambientais associados a atividades que envolvem produtos qumicos, fazendo com que profissionais, professores e alunos se submetam a condies insalubres. Mesmo nesses locais se desconhece muitas vezes a conduta correta em relao ao manuseio de alguns insumos e informaes quanto sua toxicidade. Com base nesta lacuna, foi realizado levantamento bibliogrfico dos principais reagentes utilizados no Laboratrio de Biologia Molecular do Departamento de Anlises Clnicas e Toxicolgicas da Universidade Federal do Cear, bem como do destino que dado aos resduos provenientes destes compostos txicos. Identificando os riscos e sugerindo a implantao de uma infra-estrutura adequada e a adoo de protocolos de manuseio, descontaminao e degradao, resgatando o compromisso social da Universidade no gerenciamento adequado de seus resduos. Palavras-chave: Risco qumico, biotecnologia, biossegurana.

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1.

INTRODUO

O laboratrio pode ser visto como um ambiente hostil. Convivem em um mesmo espao vrios elementos. Isso implica na necessidade de organizao para que no aconteam acidentes e para garantir a confiabilidade dos resultados. Quem executa atividades de laboratrio est freqentemente exposto a agentes qumicos, fsicos e biolgicos nocivos sade. Este fato faz com que os profissionais busquem condies mais seguras de trabalho para minimizar riscos de acidentes e/ou contaminao, aumentando assim a expectativa de uma vida longa e saudvel. Biossegurana, em sentido amplo conceituada como a vida livre de perigos. Genericamente, medidas de biossegurana so aes que contribuem para a segurana da vida, assim, essas normas englobam todas as medidas que visam evitar riscos fsicos (radiao ou temperatura), ergonmicos (posturais), qumicos (substncias txicas), biolgicos (agentes infecciosos) e psicolgicos, (como o estresse). Sabe-se que algumas medidas bsicas de biossegurana associadas s boas prticas laboratoriais reduzem os riscos de acidentes; assim, devem-se seguir normas e rotinas dentro de padres tcnico-cientficos. Alm de efetuar o controle de qualidade e a padronizao das atividades tcnicas e dos equipamentos, importante entender que o laboratrio apresenta caractersticas prprias, que devem ser levadas em considerao para a correta aplicao das medidas de biossegurana. importante eliminar ou minimizar os riscos de contaminao do ambiente, solues, bancadas, equipamentos, utenslios ou vidrarias por substncias txicas para o organismo humano (Teixeira, et al. 1998) de alta temperatura de resduos acumulados em papis (Lunn & Sansone, 1987, 1989; Quillardet & Hofnung, 1988; Bensaude, 1988).

2.

FUNDAMENTAO TERICA

A preocupao com substncias qumicas remonta ao tempo do antigo Egito. Segundo dados histricos, os responsveis pelo processo de mumificao utilizavam durante suas atividades, meios de proteo para as mos e o rosto, o que poderamos considerar, hoje, como os ancestrais dos conhecidos EPI's (Equipamentos de Proteo Individual). Os romanos conheciam muito bem a toxicidade de algumas substncias, como o chumbo e o enxofre, por isso, por isso, apenas os escravos, cujas vidas nada valiam, participavam dos trabalhos de extrao desses materiais (Costa, 2004). Com a revoluo industrial e o desenvolvimento da qumica, a humanidade passou a conhecer os benefcios e os malefcios desses conhecimentos. Atualmente, a cincia ocupa um papel muito importante na nossa histria. Atravs do conhecimento cientfico, o homem, hoje, consegue controlar e muitas vezes erradicar doenas dcadas consideradas fatais. Nesse leque de agresses, encontramos as substncias qumicas, que embora contribuam decisivamente para o bem-estar da sociedade, sem dvida elas so tambm uma das principais causas de acidentes no trabalho e no lar. Em relao aos efeitos sobre a sade humana, apenas 130 substncias foram estudadas detalhadamente (Costa, 2004). A biossegurana no possui identidade prpria, trata-se de uma interdisciplinaridade que envolve profissionais das mais diversas reas, como qumicos, mdicos, veterinrios, bilogos, engenheiros e farmacuticos, alm dos profissionais da administrao e apoio. Diante desse cenrio multiprofissional, torna-se extremamente importante a questo da segurana qumica, j que muitos cursos de graduao e psgraduao de reas no qumicas no apresentam em seus currculos a disciplina de riscos qumicos, levando esses profissionais, muitas vezes, a ingressarem no mercado de trabalho sem os conhecimentos bsicos necessrios ao desenvolvimento pleno das suas atividades (Costa, MAF & Costa, MFB, 2004). A educao assume, nesse enfoque, a base para qualquer programa de segurana qumica, e, por que no dizer, da prpria Biossegurana Sem dvida, o grande desafio da educao ser o de preparar o homem para convier com a imprevisibilidade dos eventos.

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As indstrias de biotecnologia so sistemas complexos, que utilizam em grande escala reaes qumicas. Por serem altamente competitivas e para manter sua eficincia, elas necessitam buscar com freqncia processos que facilitem esse objetivo, caso contrrio o mercado torna-se distante. Em seus processos de trabalho, extremamente acentuada a quantidade de substncias qumicas utilizadas. Pelo fato de a biotecnologia no estar devidamente regulamentada, muitos desses processos ainda so desconhecidos. Nesse contexto, algumas centenas de substncias qumicas podem estar sendo manuseadas e descartadas sem nenhum tipo de controle governamental, sendo desconhecidos seus efeitos no homem e no meio ambiente. A grande maioria dos compostos qumicos como: Acrilamida, Brometo de Etdio, Mercaptoetanol, Dodecilsulfato de Sdio, Formamida, Formaldedo, Fenol, Dimetilsulfxido, Clorofrmio, Pirocarbonato de Etila, Cloreto de Ltio e outros, considerados txicos e de alta gravidade para o homem, so lanados diretamente no ambiente de trabalho durante o manuseio, armazenamento, descarte incorreto, criando micro climas artificiais capazes de influenciarem diretamente na sade tanto dos trabalhadores envolvidos, como das comunidades vizinhas (Costa, 2004). Em 1992, Estados Unidos e Reino Unido divulgam documentos de grande generalidade sobre os princpios que deveriam nortear ao regulatria da Biossegurana, seguindo a evoluo da cincia e da tcnica, e dos novos mercados que se abre com a biotecnologia. O documento americano foi apresentado pela casa Branca, chamado Documento de Escopo, estabelece limites para atuao das agncias governamentais americanas, que passariam a examinar apenas os produtos que apresentassem riscos irrazovel. At ento ningum ousava pedir aprovao de experincias de alto risco, ou seja, de risco irrazovel. As primeiras normas eram to severas que inibiram pesquisas e novos produtos. O interessante a partir dos anos 80, que um largo consenso entre os cientistas que o risco est associado s caractersticas de um produto e no ao uso de uma tcnica de modificao gentica. Nos Estados Unidos, apontavam que o gerenciamento de riscos deveria estar orientado e desencadeado pelo princpio de risco do produto e no da tecnologia empregada. Esse documento foi a primeira interveno de um governo que tentou definir um padro de normas baseado no risco propriamente dito e a partir da estabelecer um grau de avaliao que fosse ao mesmo tempo necessrio e suficiente. A reao imediata do avano americano vem da Comisso Europia que props o abrandamento de todos os dispositivos at ento adotados, reivindicando nova poltica de biossegurana europia para fazer face competio internacional. Segundo a comisso, os requisitos de segurana assim como os procedimentos administrativos, devem ser apropriados aos riscos para a sade humana e o meio ambiente e devem refletir a experincia adquirida, os avanos no conhecimento cientfico e as prticas internacionais estabelecidas. Os relatrios citados serviram de base para o trabalho de regulamentao da biossegurana no Brasil. No pas foi recentemente aprovada a LEI N 11.105, de 24 de maro de 2005. Regulamenta os incisos II, IV e V do 1o do art. 225 da Constituio Federal, estabelece normas de segurana e mecanismos de fiscalizao de atividades que envolvam organismos geneticamente modificados OGM e seus derivados, cria o Conselho Nacional de Biossegurana CNBS, reestrutura a Comisso Tcnica Nacional de Biossegurana CTNBIO, dispe sobre a Poltica Nacional de Biossegurana PNB, revoga a Lei no 8.974, de 5 de janeiro de 1995, e a Medida Provisria no 2.191-9, de 23 de agosto de 2001, e os arts. 5o, 6o, 7o, 8o, 9o, 100 e 160 da Lei n0 10.814, de 15 de dezembro de 2003, e d outras providncias. Diante dos novos avanos da regulamentao de Biossegurana devemos atentar para o fato de garantir a observncia das normas estabelecidas, transformarem regulamento, em estmulo inovao e a capacidade tecnolgica nacional; o esforo dever ser balancear a necessidade de segurana com o mnimo de restrio indstria e pesquisadores; o estmulo pesquisa no implica em descaso com a segurana e tambm no devemos recair no erro da super-regulamentao ou regulamentao inoperante e impraticvel. Devemos possibilitar continuidade a poltica aes de carter informativo e preparativos para os debates ticos inevitveis, ganhar a credibilidade da comunidade internacional para recebermos fundos em marketing da nossa poltica, atrair parcerias em investimentos privados, atentando sempre para a soberania nacional e finalmente garantir o bom cumprimento de todos os dispositivos regulatrios, atravs de procedimentos adequados fiscalizao e regras de punio viveis. No adianta legislar sem poder de fiscalizao e punio.

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3. 3.1.

MATERIAIS E MTODOS Identificao de riscos

Foram identificados os principais compostos manuseados no laboratrio de Biologia Molecular do Departamento de Anlises Clnicas e Toxicolgicas da Universidade Federal do Cear que possuem risco de toxicidade aos manipuladores. Para cada composto foi identificado os riscos inerentes ao manuseio, recomendaes quanto manipulao e a conduta em caso de acidente. Xileno (C8H10) O xileno comercial uma mistura dos ismeros orto, meta e para-xileno e do etilbenzeno. utilizado na etapa de desparafinizao, prvia a extrao de DNA, obtido a partir de fontes de material parafinado. Possui os seguintes efeitos sobre o organismo: dermatoses, leses na crnea, em elevadas concentraes ao ser inalado tem efeito narctico, podendo produzir falta de ar, dispnia, perda dos sentidos, parada respiratria e morte. As exposies contnuas a baixas concentraes podem ocasionar: alteraes cardiovasculares, hemorragias nasais, distrbios nervosos, gastrointestinais, leses hepticas e renais e bronquites. As mulheres podem apresentar alteraes e se tornar estreis. Danoso ou fatal se for ingerido. Afeta o sistema nervoso central. Causa severas irritaes na pele, olhos e trato respiratrio. Pode ser danoso se absorvido pela pele. Em caso de inalao deve-se remover a vtima da rea contaminada, mantendo-a deitada, quieta e aquecida. Manter as vias respiratrias livres e chamar um mdico. No induzir vmito ou fornecer gua vtima inconsciente ou com convulses. Em caso de contato com a pele no apalpar nem friccionar a partes atingidas. Em caso de contato com os olhos lavar com gua corrente por no mnimo 20 minutos. Recomenda-se ao manipular esse composto uso de culos de segurana, luvas impermeveis, mscara com filtro especfico, avental impermevel. Fenol (C6H60) utilizado para extrao de cidos nuclicos. Efeitos sobre o organismo: ao corrosiva em qualquer tecido, edema, necrose e gangrena dos tecidos, dependendo do tempo de contato e da concentrao da soluo. Pode provocar inchao da conjuntiva, podendo ocorrer perda da viso. Na forma de vapor causa irritao nas membranas mucosas, provocando dispnia e tosse. A absoro sistmica causa danos ao fgado, rins e sistema nervoso central. facilmente absorvido pelo trato gastrointestinal. Provoca queimaduras intensas, cianose, fraqueza muscular, coma. Podem ainda ser observados tremores e contraes musculares. A morte pode advir por parada respiratria. Em caso de contato seguir medidas de emergncia. Material recomendado: luvas, protetor facial, culos de proteo contra gases, mscara com filtro especfico.
TEMED (C6H16N2)

Utilizado na preparao do gel de poliacrilamida. Causa queimaduras a qualquer rea de contato. Pode ser fatal de engolido. Danoso se for inalado. Lquido e vapor combustveis. Corrosivo. Extremamente destrutivo aos tecidos da membrana mucosa e trato respiratrio superior. Os sintomas devem incluir uma sensao de queimaduras, tosse, respirao ofegante, laringite, cefalia, nusea e vmito. Inalao pode ser fatal pois, resulta em inflamao e edema da laringe e brnquios, pneumonite qumica e edema pulmonar. Corrosivo. Engolir o produto pode causar severas queimaduras boca, garganta e ao estmago. Pode causar dores de garganta, vmito, diarria. Corrosivo. Podem acarretar viso embaada, vermelhido, dor e queimadura severas dos tecidos com danos aos olhos.

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Formaldedo (CH2O) Utilizado como reagente na colorao pelo "Mtodo da Prata", a oxidao do aldedo acompanhada da reduo do on prata para prata livre, que aparece em forma de espelho, condies apropriadas. Apresenta os seguintes efeitos sobre o organismo: irritao e endurecimento da pele, podendo causar rachaduras e ulceraes, sensibilizao e dermatoses. Pode causar graves queimaduras aos olhos, inclusive cegueira, inflamao da plpebra, irritao das vias areas respiratrias superiores acompanhadas de tosse, dificuldade na respirao e lacrimao. Quando a exposio prolongada pode causar dor de cabea, palpitao, inflamaes das vias respiratrias, laringite, bronquite e bronco pneumonia. Em casos extremos pode ocasionar a morte por edema ou espasmo da glote. Poliacrilamida Polimeriza-se a partir da reao da acrilamida com a bis-acrilamida (N, N' -Metileno-bis-acrilamida) em presena de perssulfato de amnio e catalisada por TEMED (N,N,N',N'-tetrametiletilenodiamino). O gel formado ento utilizado na eletroforese. Txico em contato com a pele, ingesto, inalao. Sempre usar EPIS e em casos de acidentes seguir medidas de emergncia. Acrilamida (CH2CHCONH2) A acrilamida suspeita de ser carcinognica, severamente neurotxica, causar irritao dos olhos, pele ( imediatamente absorvida) e trato respiratrio. Deve causar sonolncia, sensao de formigamento, fadiga, fraqueza, discurso lento e confuso e tremedeira. Deve causar danos ao sistema nervoso central e perifrico. Intoxicaes severas devem causar danos permanentes nos nervos. Causa irritao ao trato respiratrio. Deve afetar o sistema reprodutivo e agir como teratognico. A exposio prolongada ou repetida atravs de quaisquer meios pode causar fraqueza muscular, descoordenao, erupes cutneas, transpirao excessiva das mos e ps, mos frias, descamao da pele, entorpecimento, sensaes de pele e msculos anormais, fatiga; causa danos ao sistema nervoso central e perifrico. Carcinognico e teratognico. M formao fetal. Danoso se for engolido ou inalado. Prejudicial se for absorvido atravs da pele. Causam irritao pele, olhos e trato respiratrio. Pode causar cncer (o risco de cncer depende na durao e nvel de exposio). Afeta o sistema nervoso central e perifrico e o sistema reprodutor. Pode causar m formao congnita. Termalmente instvel. Pode polimerizar explosivamente se aquecido ao ponto de fuso. Persulfato de amnio (NH4)2S2O8. Pode irritar as membranas mucosas. Pode causar edema pulmonar. Sintomas podem incluir dor de garganta, inflamao nasal e tosse. Qualquer exposio pode causar uma reao alrgica. Bisacrilamida (H2C=CHCONH)2 CH2 Pode causar desorientao, prurido, fadiga, fraqueza, quedas, discurso confuso e tremores. Edema pulmonar pode ocorrer. A exposio crnica atravs de qualquer rota, em pequenas quantidades, pode resultar em fraqueza muscular, descoordenao, erupes cutneas, sudorese excessiva das mos e ps, mos frias e descamao da pele. Tiossulfato de sdio (Na2S2O3) Baixo nvel de toxicidade por ingesto. Doses altas podem causar diarria. Causa irritao ao trato respiratrio. Sintomas incluem tosse e diminuio da freqncia respiratria (Site http://www.qca.ibilce.unesp.br/prevencao/produtos/msds). Sempre que no for possvel salvar as substncias para reutilizao ou reciclagem, estas devem ser colocadas em um aparato aprovado e apropriado para eliminao do lixo. O processamento, o uso ou contaminao destes produtos devem alterar a forma de administrar o lixo.

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4.

ANLISE E INTERPRETAO DOS RESULTADOS

A identificao desses compostos permite o desenvolvimento de um plano de descarte de resduos ambientalmente correto baseado na seguinte CLASSIFICAO DOS RESDUOS (RESOLUO N 283, DE 12 DE JULHO DE 2001). Resduos Grupo A Resduos que apresentam risco sade pblica e ao meio ambiente devido presena de agentes biolgicos: inculo, mistura de microrganismos e meios de cultura inoculados provenientes de laboratrio clnico ou de pesquisa, bem como, outros resduos provenientes de laboratrios de anlises clnicas; vacina vencida ou inutilizada; - filtros de ar e gases aspirados da rea contaminada, membrana filtrante de equipamento mdico hospitalar e de pesquisa, entre outros similares; sangue e hemoderivados e resduos que tenham entrado em contato com estes; tecidos, membranas, rgos, placentas, fetos, peas anatmicas; animais inclusive os de experimentao e os utilizados para estudos, carcaas, e vsceras, suspeitos de serem portadores de doenas transmissveis e os morto a bordo de meios de transporte, bem como, os resduos que tenham entrado em contato com estes, objetos perfurantes ou cortantes, provenientes de estabelecimentos prestadores de servios de sade; excrees, secrees, lquidos orgnicos procedentes de pacientes, bem como os resduos contaminados por estes; resduos de sanitrios de pacientes; resduos advindos de rea de isolamento; materiais descartveis que tenham entrado em contato com paciente; lodo de estao de tratamento de esgoto (ETE) de estabelecimento de sade; e resduos provenientes de reas endmicas ou epidmicas definidas pela autoridade de sade competente. Resduo Grupo B Resduos que apresentam risco sade pblica e ao meio ambiente devido as suas caractersticas fsica, qumicas e fsico-qumicas: drogas quimioterpicas e outros produtos que possam causar mutagenicidade e genotoxicidade e os materiais por elas contaminados; medicamentos vencidos, parcialmente interditados, no utilizados, alterados e medicamentos imprprios para o consumo, antimicrobianos e hormnios sintticos; demais produtos considerados perigosos, conforme classificao da NBR 10.004 da ABNT (txicos, corrosivos, inflamveis e reativos). Resduo Grupo C Resduos radioativos: enquadram-se neste grupo os resduos radioativos ou contaminados com radionucldeos, provenientes de laboratrios de anlises clnicas, servios de medicina nuclear e radioterapia. Resduo Grupo D Resduos comuns. So todos os demais que no se enquadram nos grupos descritos anteriormente. Os dados obtidos sobre cada substncia permitir o Descarte segregado A separao por categoria (segregao) se d no local onde so gerados os resduos devendo ser acondicionados em recipientes prprios: O acondicionamento de resduo deve ser feito em contenedores resistentes e impermeveis, no momento e local de sua gerao, medida que forem gerados, de acordo com a classificao e o estado fsico do resduo. Grupo A (infectante) devem ser acondicionados em saco branco leitoso, resistente, impermevel, utilizando-se saco duplo para os resduos pesados e midos, devidamente identificado com rtulos de fundo branco, desenho e contornos pretos, contendo smbolo e a inscrio de RESDUO BIOLGICO. Grupo B (farmo-qumicos) devem ser acondicionados em saco branco leitoso, resistente, impermevel, utilizando-se saco duplo para os resduos pesados e midos, devidamente identificado com rtulos de fundo vermelho, desenho e contornos pretos, contendo smbolo de substncia txica e a inscrio de RESDUO TXICO.

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Grupo C devem ser acondicionados em recipientes contendo o smbolo de material radioativo e encaminhados a servios especializados de descontaminao. Grupo D (comum) Os resduos do GRUPO D, materiais reutilizveis e reciclveis, devem ser acondicionados de acordo com as normas dos servios locais de limpeza.

5.

CONSIDERAES FINAIS

A questo da gesto e descarte de compostos txicos polmica e de ampla abrangncia em relao sade humana e ao meio ambiente. O problema se complica quando constatamos as precrias condies de tratamento e disposio de resduos nas cidades e tambm no descaso das instituies, at mesmo das ligadas ao poder pblico. No se discutem de forma mais ampla e conseqente questes de saneamento bsico ou, por exemplo, o destino de resduos de laboratrios de anlises clnicas, resduos qumicos e radioativos de unidades de sade, mesmo nas universidades, detentoras de conhecimento e formadores de opinio, corpo docente e discente, esses cuidados so ignorados, medida que resduos provenientes de experimentos so lanados sem tratamento adequado sob o olhar displicente de orientados e orientadores. Sempre possvel reduzir os riscos no manuseio e disposio dos resduos atravs de um planejamento bem elaborado, mesmo com poucos recursos disponveis, desde que os profissionais estejam conscientes dos riscos e dispostos a assumir suas responsabilidades como cidado. Os geradores de resduos devem adotar um Programa de Gerenciamento de Resduos de que se constitui num conjunto de procedimentos de gesto, planejados e implementados a partir de bases cientficas, normativas e legais com o objetivo de minimizar a produo de resduos e proporcionar aos resduos gerados, um encaminhamento seguro, de forma eficiente, visando e proteo dos funcionrios, a preservao da sade pblica, dos recursos naturais e do meio ambiente. Os procedimentos de descarte de resduos no LBM/DACT/FOOE/UFC sero realizados conforme manual de biossegurana desenvolvido a partir desse trabalho.

REFERNCIAS
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SAMBROOK, J; FRITSCH, E.F; MANIATIS, T.Molecular cloning: a laboratory manual. Nem York: Cold Spring Harbor, 1989. 3 v. SITE: http://www.biologytoday/ethidium_bromide Acesso em : 25/08/2007 SITE: http://www.qca.ibilce.unesp.br/prevencao/produtos/msds). Acesso em : 25/08/2007 TEIXEIRA, K. R; PIRES, W.O; BALDANI, J. I. Descontaminao de substncias txicas: fenol e brometo de etdio. Comunicado tcnico, No 25, dez/98, p. 1/3. ISSN 0104-8945. TEIXEIRA, P & VALLE, S. (org.). Biossegurana. Uma Abordagem Multidisciplinar. Rio de Janeiro: FIOCRUZ , 1998.3 reimp. WORLD HEALTH ORGANIZATION. Safe management of wastes from health-care activities. Genebra, 1995.

AGRADECIMENTOS Agradecemos ao Laboratrio de Biologia Molecular do Departamento de Anlises Clnicas e Toxicolgicas da Universidade Federal do Cear pelo apoio aos experimentos realizados, especialmente ao professor Titular Dr. Hlio Frota Vieira, pioneiro na Investigao de Paternidade no estado do Cear.