Relatrio da Actividade Laboratorial realizada a 4 de Maro de 2011

IDENTIFICAO DE BIOMOLCULAS
Biologia e Geologia
Ana Benvindo n2 Carolina Librio n5 10D 10D

Escola Secundria Dr. Ginestal Machado

Entregue a: 11 de Maro de 2011

Introduo
O trabalho realizado na aula prtica de 4 de Maro de 2011 teve como objectivos: Identificar os principais constituintes orgnicos da matria viva. Conhecer tcnicas laboratoriais para a identificao de biomolculas. Este relatrio tem como base o trabalho prtico, no qual se identificaram diferentes biomolculas utilizando diferentes mtodos. nele que vamos expor os resultados das experincias realizadas e dar a conhecer as tcnicas que utilizamos para identificar as biomolculas.

Fundamentao Terica
Os elementos biognicos combinam-se entre si para formar molculas que se encontram sempre na matria viva, e que podem isolar-se e identificar-se atravs de tcnicas de anlise como a centrifugao, a filtrao, a dilise, a electroforese, a cristalizao, a cromatografia, a espectrografia, etc. Estas substncias, inorgnicas ou orgnicas, que fazem parte da constituio dos seres denominam-se biomolculas ou princpios imediatos. Classificam-se em dois grupos: biomolculas ou princpios imediatos inorgnicos, como a gua, os sais minerais, o dixido de carbono, o enxofre, etc.; e biomolculas ou princpios imediatos orgnicos, como os hidratos de carbono ou glcidos, os lpidos, os prtidos e os cidos nucleicos. Glcidos

Designados tambm por hidratos de carbono ou acares, os glcidos so compostos orgnicos ternrios, constitudos por carbono (C), oxignio (O) e hidrognio (H). So biomolculas importantes, quer a nvel energtico quer a nvel estrutural, constituindo, juntamente com as gorduras (lpidos) e as protenas (prtidos), as substncias essenciais para os organismos animais, incluindo o homem. Os glcidos so produzidos pelas plantas verdes a partir do dixido de carbono e da gua, custa da energia solar captada pela clorofila. Enquanto as plantas constroem os glcidos, os animais, pelo contrrio, efectuam a sua degradao para obter energia. De acordo com a sua complexidade, os glcidos podem ser agrupados em trs tipos principais: os monossacardeos, os oligossacardeos e os polissacardeos. Os glcidos mais simples so os monossacardeos (oses), que quimicamente so polilcoois que contm um grupo aldedo ou um grupo cetnico. So molculas no hidrolisveis e redutoras e so classificados tendo em conta o nmero de tomos de carbono. Os monossacardeos mais importantes so os que contm cinco tomos de carbono, denominados pentoses (ex.: ribose e desoxirribose), e seis tomos de carbono, chamados hexoses (ex.: glicose ou glucose, frutose e galactose). Os oligossacardeos so glcidos hidrolisveis que resultam da ligao glicosdica de dois, os dissacardeos (ex.: sacarose, maltose e lactose), a dez monossacardeos. A sacarose um acar constitudo por uma molcula de frutose e uma de glicose, presente em muitas plantas, especialmente na cana-de-acar e na beterraba, sendo utilizada no nosso dia-a-dia como vulgar acar; a maltose constituda por duas molculas de glicose e pode obter-se pela hidrlise do amido; e a lactose, ou o acar do leite, composta por uma molcula de glicose e uma molcula de galactose.
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Os polissacardeos so glcidos constitudos por mais de dez monossacardeos (ex.: amido, glicognio e celulose). O amido um p branco, insolvel em gua fria, que tem uma funo de reserva vegetal e que se encontra presente nas batatas e nos cereais. O glicognio, tal como o amido, tem funes de reserva e armazenado no fgado. Por fim, a celulose um hidrato de carbono que existe nas plantas e o principal constituinte das membranas celulares das clulas vegetais. Lpidos

Macromolculas heterogneas, constitudas por carbono (C), hidrognio (H) e oxignio (O), podendo ainda incluir azoto, enxofre e fsforo. Os lpidos so caracterizados pela fraca solubilidade em gua e elevada solubilidade em solventes orgnicos. Como biomolculas, os lpidos tm um papel importante como reserva energtica, desempenhando funo estrutural, protectora e vitamnica. Existem vrias classificaes para os lpidos, no entanto, podem considerar-se dois grupos de lpidos: os de reserva e os estruturais. Os lpidos de reserva, vulgarmente conhecidos por gorduras, so lpidos que constituem reservas alimentares. Este tipo de lpidos formado, essencialmente, por um lcool, geralmente o glicerol, e cidos gordos, saturados ou insaturados. As gorduras so as fontes de energia mais concentradas utilizadas na alimentao dos seres humanos, fornecendo mais do dobro da energia dos glcidos. Os lpidos estruturais, como os fosfolpidos e os glicolpidos, so lpidos que entram na constituio de estruturas celulares. Os fosfolpidos, constituintes mais abundantes das membranas biolgicas, so lpidos que integram um grupo fosfato. So molculas anfipticas, apresentando uma zona hidroflica polar, composta por molculas de lcool, o grupo fosfato e um radical, e uma zona hidrofbica apolar, formada pelas cadeias hidrocarbonadas dos cidos gordos. Os glicolpidos, que tambm so componentes de membranas celulares, so lpidos associados a glcidos. Prtidos

Compostos quaternrios orgnicos, constitudos por carbono (C), hidrognio (H), oxignio (O) e azoto (N), por vezes associados a outros elementos qumicos, como, por exemplo, o enxofre (S), o fsforo (P), o magnsio (Mg) e o ferro (Fe). Os prtidos podem ser classificados, segundo o grau de complexidade, em aminocidos, pptidos e protenas: Os aminocidos so as unidades estruturais dos pptidos e das protenas. Existem cerca de 20 aminocidos diferentes nos seres vivos. Os pptidos resultam da ligao de dois (dipptido), trs (tripptido) ou vrios aminocidos, unidos por ligaes peptdicas. Os prtidos mais complexos so as protenas, constitudos por uma ou mais cadeias polipeptdicas com conformao tridimensional definida.
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Protenas

As protenas so compostos orgnicos constitudos por cadeias de aminocidos unidos por ligaes peptdicas. So as molculas orgnicas mais abundantes e constituem mais de 50% do peso seco dos organismos vivos. Cada protena constituda por cerca de 20 aminocidos diferentes. No entanto, a grande variedade de combinaes possveis permite a formao de dezenas de milhares de protenas diferentes, com estruturas e funes muito diversas. Desempenham muitas funes nos seres vivos. As enzimas, a insulina, uma hormona, e a hemoglobina so exemplos de protenas com funes diversas. Tendo sido identificadas em 1838, por Gerardus Mulder, as protenas so reconhecidas actualmente como o principal constituinte celular, imprescindveis para a construo e manuteno das clulas individuais e, portanto, para a existncia de qualquer ser vivo. Qualquer protena constituda por aminocidos, que por sua vez so constitudos por carbono, hidrognio, oxignio, azoto e, frequentemente, enxofre, unidos por ligaes peptdicas. Algumas protenas contm, alm da(s) cadeia(s) de aminocidos, outros grupos qumicos, podendo nesse caso ser classificadas como nucleoprotenas (quando contm cidos nucleicos), lipoprotenas (com lpidos), fosfoprotenas (com cido fosfrico), metaloprotenas (com ferro ou outros metais) e glicoprotenas (com glcidos). A forma das protenas depende da sua estrutura, sendo distinguveis quatro nveis diferentes de organizao: a estrutura primria, que se refere sequncia linear de aminocidos; a estrutura secundria, constituda pelo arranjo regular, peridico, da cadeia polipeptdica, que fora a molcula a tomar uma forma em hlice ou "quebrada" devido formao de ligaes com caractersticas especficas; a estrutura terciria, que se forma quando a protena se dobra, tomando uma forma compacta, em trs dimenses, como, por exemplo, no caso das protenas globulares, que formam um novelo; finalmente, se uma protena formada por mais do que uma cadeia polipeptdica, a estrutura quaternria refere-se forma como essas cadeias se dispem umas relativamente s outras.

Procedimento experimental
Material utilizado: a) Material Tubos de Ensaio; Suporte para tubos de ensaio; Conta-gotas; Pipetas de Pasteur; Esptulas; Pinas de madeira; Lamparina; Proveta de 5ml; Fsforos; Gobels de 100ml; Caneta de acetato. b) Material Biolgico Licor de Fehling (solues A e B) Soluo de sulfato de cobre; Hidrxido de sdio; cido clordrico; Glicose; Sacarose cido actico; lcool; Amido; Azeite; gua destilada; Soluto de Lugol; Clara de ovo; Sudo III.

Metodologia: A. Identificao de Acares Redutores 1. Num tubo de ensaio (tubo A) coloque 2ml de gua destilada e glicose. 2. Adicione as solues A e B de licor de Fehling (1ml da soluo A e 1ml da soluo B) e aquea lamparina at a mistura entrar em ebulio (Teste do licor de Fehling). Registe o resultado no quadro I. B. Identificao de Acares No Redutores 1. Faa uma soluo de sacarose num gobel. 2. Coloque dois tubos de ensaio (tubos B1 e B2) 2ml da soluo de sacarose anterior. 3. No tubo B1 proceda ao teste do licor de Fehling como foi descrito em A2. Registe o resultado no quadro I. 4. Ao tubo B2, adicione 1ml de cido clordrico e ferve a mistura durante alguns minutos. 5. Deixe arrefecer e de seguida adicione mistura (tubo B2) algumas gotas de hidrxido de sdio para neutralizar o meio. 6. No tubo B2 faa o teste do licor de Fehling. Observe e registe o resultado obtido no quadro I. C. Identificao do Amido 1. Num tubo de ensaio (tubo C), misture amido com gua destilada e agite. Observe. 2. Adicione cerca de 2 gotas de soluto de Lugol (ou gua iodada). 3. Observe e registe o resultado no quadro I. D. Identificao dos Lpidos 1. Coloque gua destilada num tubo de ensaio (tubo D 1) e adicione um pouco de azeite. Agite e deixe repousar durante alguns minutos. Observe. 2. Adicione ao tubo de ensaio D1 cerca de 5 gotas de Sudo III. 3. Agite e deixe repousar durante cerca de 2 minutos. 4. Observe. Registe no quadro I em qual das fases o corante se instalou. 5. No tubo de ensaio D2 coloque um pouco de azeite e adicione 1ml de lcool (ou clorofrmio, ter ou benzina). 6. Agite. Observe o resultado e compare-o com o obtido no tubo D1. E. Identificao de Protenas 1. Coloque num tubo de ensaio E uma poro de clara de ovo. 2. No tubo E adicione umas gotas de hidrxido e de seguida acrescente cerca de 4 gotas de sulfato de cobre (reaco do Biureto). 3. Agite o tubo, observe e registe o resultado no quadro I.

Registo de Observaes:

Substncia a Identificar

Reagente Qumico

Reaco Caracterstica
No inicio a soluo era azul-escura, mas quando entrou em ebulio mudou para cor-de-tijolo. Ocorreu formao de um precipitado, que se depositou no fundo. Tubo B1 A soluo tinha a mesma cor que a anterior, mas ao contrrio desta, depois de ser aquecida mudou para azulpetrleo e no ocorreu formao de um precipitado. Tubo B2 Esta soluo adquiriu as mesmas cores que a soluo do tubo A, e tambm ocorreu a formao de um precipitado. O amido apresentava uma cor branca, quando se adicionaram as gotas do soluto de Lugol, a soluo ficou azul-arroxeada. Antes e depois de fazermos o preparado, tivemos que agitar, porque o amido se depositava no fundo. Tubo D1 Quando a soluo foi agitada, formaramse bolhas de gua entre a gua e o azeite. Depois de ter repousado, estas bolhas desapareceram. Ficou apenas uma camada de ligaes a separar o azeite da gua. Quando se adicionou o Sudo III, este instalou-se por cima do azeite, formando uma aurlia. Tubo D2 Ao contrrio do que aconteceu no tubo anterior, o azeite misturou-se com o lcool. Quando se adicionou o hidrxido de

Glicose

Licor de Fehling

Sacarose

Licor de Fehling

Amido

Soluto de Lugol

Lpidos

Sudo III

Protenas

Sulfato de Cobre sdio a soluo ficou roxa, e depois de Hidrxido de Sdio adicionarmos o sulfato de cobre (reaco do Biureto) formaram-se flocos de cor azul-clara. No
se formou nenhum anel violeta no topo.

Quadro I - Registo das reaces observadas em cada experincia.

Discusso dos Resultados

Questes
Glcidos
1. Compare a solubilidade do amido a frio com a observada para a glicose e sacarose. 2. Considerando que: - O poder redutor dos acares simples se manifesta na reaco destes com o licor de Fehling, obtendo-se um precipitado cor de tijolo; - A sacarose um dissacardeo formado pela ligao entre a molcula de glicose e outra de frutose. 2.1. Explique os resultados obtidos no tubo de ensaio A. 2.2. Justifique o facto do produto do tubo de ensaio B2 adquirir propriedades redutoras aps a adio de cido clordrico (HCL), depois de aquecido. 2.3. Procure explicar a funo do cido clordrico no tubo B2.

Lpidos
1. Indique o aspecto apresentado pela mistura de gua com o azeite: a. Aps a agitao do tubo; b. Ao fim de algum temo em repouso. 2. Indique a propriedade do azeite que di posta em evidncia nos tubos D1 e D2. 3. Compare os resultados obtidos nos tubos 3 e 4. Diga que concluso se pode retirar. 4. Diga qual das fases (aquosa ou lipdica) da mistura com azeite que o indicador Sudo III se ligou.

Protenas
1. Procure retirar uma concluso relativamente aco do sulfato de cobre e do hidrxido de sdio.

Respostas
Glcidos
1. A sacarose e a glicose so mais solveis que o amido em gua fria (este deposita-se com frequncia no fundo). 2. 2.1. O teste da glicose d negativo, no ocorre formao de precipitado, porque a glicose est ligada frutose, se estivessem separadas o teste da glicose daria positivo. 2.2. A glicose tem propriedades redutoras, quando est separada da frutose. Com o cido clordrico estas vo separar-se, e a soluo adquire propriedades redutoras. 2.3. A funo do cido clordrico no tubo B2 hidrolisar a ligao da glicose com a frutose.

Lpidos
1. a. Quando agitamos o tubo formaram-se bolhas de azeite entre os dois componentes. b. Estas bolhas desaparecem, ficando a ver-se as ligaes do azeite com a gua. 2. A propriedade do azeite posta em evidncia a solubilidade deste. 3. No tubo D1, o azeite e a gua no se misturam, enquanto que no tubo D2, o azeite e o lcool se misturam (no totalmente, pois conseguem-se observar bolhas de lcool). Podemos concluir que os lpidos so solveis em solventes orgnicos e insolveis em gua. 4. O Sudo III instalou-se na fase lipdica da mistura.

Protenas
1. A identificao das protenas faz-se provocando a desnaturao das protenas por aco de cidos, bases ou de calor. Esta desnaturao permite que as protenas se destaquem da soluo e formem precipitados designados por cogulos. Esta ligao resulta da quebra das ligaes das protenas. Na reaco do Biureto, a adio do hidrxido de sdio que uma base, vai desnaturar as protenas. Com a adio do sulfato de cobre formaram-se flocos azuis de sulfato de cobre. Deixando repousar os flocos, o lquido fica com uma cor violeta devido fixao do cobre sobre as ligaes peptdicas.

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Concluso
Todos os objectivos desta actividade laboratorial foram alcanados, visto que foi-nos possvel concluir que existem diferentes tcnicas de identificao de biomolculas, como por exemplo a utilizao de reagentes, ou o uso do calor (lamparinas). Conclumos tambm que: a sacarose e a glicose tm na sua constituio glicose; o amido contem na sua constituio amido; o azeite tem na sua constituio lpidos; e as claras de ovos apresentam na sua constituio protenas.

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Webgrafia
biomolculas. In Diciopdia 2010 [DVD-ROM]. Porto : Porto Editora, 2009. ISBN: 978-972-0-65265-2 glcidos. In Diciopdia 2010 [DVD-ROM]. Porto : Porto Editora, 2009. ISBN: 978972-0-65265-2 lpidos. In Diciopdia 2010 [DVD-ROM]. Porto : Porto Editora, 2009. ISBN: 978972-0-65265-2 prtidos. In Diciopdia 2010 [DVD-ROM]. Porto : Porto Editora, 2009. ISBN: 978-972-0-65265-2 protenas. In Diciopdia 2010 [DVD-ROM]. Porto : Porto Editora, 2009. ISBN: 978-972-0-65265-2

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