Utilização de Saccharomyces cerevisiae para o estudo da

fermentação

Introdução:
Com esta experiência pretendemos responder às seguintes questões problema:

● A libertação de dióxido de carbono resultante da fermentação alcoólica depende da

glicose disponível?
● A fermentação depende da atividade de enzimas?

Fundamentação teórica:
A Saccharomyces cerevisiae é uma levedura (ser unicelular e eucarionte que pertence ao
reino dos fungos) que realiza a fermentação alcoólica em situações de anaerobiose ( sem
oxigénio).
A fermentação alcoólica é um processo de obtenção de energia através de um composto
orgânico, a glicose. Este processo está dividido em duas etapas: glicólise e redução do
piruvato.
A glicólise inicia- se fornecendo duas moléculas de ATP a uma molécula de glicose, para
que esta se torne quimicamente ativa e se dê início à sua degradação. Então a glicose
divide-se em duas trioses (2 G3P), que por sua vez vão ser oxidadas e passar eletrões para
o NAD+, formando 2 NADH, um por cada triose. Como algumas destas reações são
exoenergéticas, libertam-se 4 ATP, mas uma vez que no início do processo foram gastos
2ATP, o rendimento da glicólise foi de 2ATP. No fim deste processo formam-se duas
moléculas de piruvato.
Na fermentação alcoólica a glicólise é a única etapa em que há produção de energia, a
função da etapa de redução do piruvato é a oxidação do NADH, pois se este se acumular
nas células pode ser prejudicial.
Na etapa da redução do piruvato, inicialmente o piruvato é descarboxilado e libertam-se
duas moléculas de dióxido de carbono, depois o NADH reduz o piruvato e formam-se duas
moléculas de etanol e duas moléculas de NAD+. Estas moléculas de NAD+ vão ser
utilizadas na glicólise e isto vai evitar que o NADH se acumule nas células.
Balanço da fermentação alcoólica: libertam- se duas moléculas de dióxido de carbono, duas
moléculas de etanol e duas moléculas de ATP.

Materiais da Atividade Laboratorial:

● Água;
● Balões;
● Erlenmeyer;
● Leveduras;
● Placo elétrica/ estufa;
● Glicose;
● Cronómetro
Procedimento:
1ºPasso- Preparar uma solução num Erlenmeyer:
30g de glicose (açúcar);
100mL de água;
10 mL de suspensão de leveduras ( a 20%);
A 30 ºC.
2ºPasso-Agitar esta solução até homogeneizar e tapar com um balão.
Reservar durante 40 minutos.
3ºPasso-Preparar uma solução num Erlenmeyer em que só varia a concentração da glicose
relativamente à solução inicial:
100mL de água;
10 mL de suspensão de leveduras ( a 20%);
A 30 ºC.
4ºPasso-Agitar esta solução até homogeneizar e tapar com um balão.
Reservar durante 40 minutos.
5ºPasso-Preparar uma solução num Erlenmeyer em que só varie a temperatura
relativamente à solução inicial:
30g de glicose (açúcar);
100mL de água;
10 mL de suspensão de leveduras ( a 20%);
A 40 ºC
6ºPasso-Agitar esta solução até homogeneizar e tapar com um balão.
Reservar durante 40 minutos.
7ºPasso-Analisar os resultados obtidos em 40 minutos.

Dispositivo de controlo:
Solução com:
● 30g de glicose (açúcar),
● 100 mL de água,
● 10 mL de suspensão de leveduras a (20%),
● a 30ºC.

Variáveis dependentes:
● Libertação de dióxido de carbono
● Libertação de Etanol

Variáveis independentes:
● Concentração de glicose
● Temperatura

Previsão dos resultados:

A libertação de dióxido de carbono resultante da fermentação alcoólica depende da
glicose disponível?
Sim, pois o substrato inicial da fermentação alcoólica é a glicose. Este processo está
dividido em duas etapas, e uma delas é a glicólise, em que ocorre a degradação da glicose,
logo sem este composto orgânico a fermentação alcoólica não ocorre e consequentemente
não se liberta dióxido de carbono.
A fermentação depende da atividade de enzimas?
Sim, pois quase todas as reações que ocorrem nos seres vivos são catalisadas por
enzimas, no caso da fermentação a enzima que catalisa a reação de descarboxilação do
piruvato é a piruvato descarboxilase.

Trabalho realizado por:

● Joana Sousa nº7;
● Joana Freitas nº8;
● Lara Teixeira nº10;
● Lara Costa nº11.