ATUALIDADES BIOLGICAS 1

TEMR5 0E BlULUlR
ATUALIDADES BIOLGICAS
NMERO 8 ABRI L DE 1998 EDI TORA MODERNA
*
Professor do Departamento de Biologia do Instituto de Biocincias da Universidade de So Paulo
ASPECTOS MODERNOS DA DIVISO CELULAR
J. M. Amabis* e

G. R. Martho
Desenho de uma clula embrionria de salamandra
previamente fixada e corada, feito pelo citologista pio-
neiro Walther Flemming em 1882. A clula encontra-
se em estgio final de anfase.
A DESCOBERTA DA DIVISO CELULAR
A clula foi pioneiramente descrita por Robert Hooke,
em 1665, mas seu estudo s ganhou impulso aps a elabo-
rao da Teoria Celular por Schleiden e Schwann, em 1838
e 1839. Segundo essa teoria, todos os seres vivos so cons-
titudos por clulas, as unidades bsicas da vida.
No incio do sculo XIX, diversos pesquisadores j
haviam observado clulas divididas ao meio, aparente-
mente em processo de originar clulas menores. Seria essa
diviso uma aberrao ou um processo normal na vida das
clulas? Com base na observao microscpica de clulas
fixadas, alguns estudiosos sugeriram que a diviso celular
seria a maneira pela qual tm origem todas as clulas dos
organismos multicelulares.
As pesquisas revelavam cada vez mais casos de clulas
em diviso. Em 1855, o influente citologista Rudolf Virchow
expressou sua convico de que as clulas sempre tm
origem a partir de clulas preexistentes. Como era norma na
poca utilizar a lngua latina em textos cientficos, Virchow
resumiu sua idia na frase que se tornou clebre: omnis
cellula e cellula (toda clula provm de outra clula).
O conceito de que as clulas surgem pela diviso de
clulas preexistentes tambm teve seus opositores, entre
eles, curiosamente, Theodor Schwann. Ele acreditava que
as clulas surgiam espontaneamente pela aglutinao de
substncias orgnicas presentes no corpo dos seres vivos.
O desenvolvimento de microscpios mais poderosos e
de tcnicas citolgicas mais adequadas possibilitou gran-
des avanos nas pesquisas sobre diviso celular. Em 1873,
o zologo A. Schneider, em um amplo estudo anatmico
sobre o verme platelminto Mesostoma, publicou a primeira
descrio razovel das alteraes que ocorrem em uma
clula que se divide em duas. Tanto Schneider como outros
pesquisadores notaram o aparecimento de filamentos (que
hoje sabemos ser os cromossomos) no ncleo das clulas
em diviso. Aparentemente, esses filamentos eram repar-
tidos entre as clulas-filhas. Um dos grandes desafios foi
provar que os filamentos observados no eram simples
artefatos de tcnica, isto , estruturas artificialmente cria-
das pelos tratamentos aos quais as clulas so submetidas
para permitir sua observao (fixao, corte, colorao etc.).
Em 1882, o citologista Walther Flemming finalmente
comprovou a formao de filamentos nucleares (cromos-
somos) em clulas vivas que se dividiam, e props o termo
mitose para designar a diviso celular. Mitose vem do grego
mitos, que significa fio, referindo-se ao aparecimento de
filamentos no ncleo de clulas em diviso. Esses fila-
mentos foram denominados cromossomos pelo citologista
W. Waldeyer, em 1888.
M
itose um processo de diviso celular pelo qual uma clula eucaritica origina duas clulas-
filhas, cada uma com nmero de cromossomos idntico ao seu. A extraordinria preciso
da mitose garante que cada clula-filha receba todas as informaes genticas necessrias
sua vida. No final da dcada de 1980 ficou claro que os mecanismos moleculares bsicos da mitose
so fundamentalmente os mesmos em todos os seres eucariticos. Assim, o estudo desses mecanismos
de grande importncia porque eles se referem a uma ampla variedade de seres vivos. A seguir
apresentamos alguns conhecimentos obtidos em pesquisas recentes, que explicam por que a mitose
assegura, com altssimo grau de sucesso, a distribuio eqitatitiva das informaes hereditrias ao
longo das geraes celulares.
2 ATUALIDADES BIOLGICAS
Encurtamento
das fibras
cromossmicas
Cromossomos-irmos
migrando para plos
opostos
Centro celular
Fibras do fuso
em formao
Nuclolo em
desaparecimento
Cromossomos
duplicados em
condensao
PRFASE
Fuso
acromtico
Fibras
cromossmicas
Cromossomos condensados
alinhados no equador
(placa metafsica)
Cromtides-
irms
Fragmentos da
carioteca
METFASE
ANFASE
Cromossomos
simples em
descondensao
Diviso
citoplasmtica
(citocinese)
Reorganizao
da carioteca
Reaparecimento
dos nuclolos
TELFASE
AS FASES DA MITOSE
Prfase
Metfase
Anfase
Telfase
Apesar de a mitose ser um processo contnuo, possvel
dividi-la em fases, o que facilita seu estudo. As fases da
mitose so: prfase, metfase, anfase e telfase. Alguns
autores sugerem uma fase intermediria entre a prfase e a
metfase, a prometfase.
Durante a prfase, os finssimos fios que compem a
cromatina os cromossomos vo se condensando
no interior do ncleo, tornando-se mais visveis e indivi-
dualizados. Nessa fase, cada cromossomo constitudo
por dois fios idnticos (cromtides) unidos por uma regio
chamada centrmero.
A progressiva condensao cromossmica acarreta
diminuio na produo das substncias que compem os
nuclolos, os quais vo gradualmente desaparecendo.
Ao final da prfase, a carioteca (membrana nuclear)
desintegra-se. Os cromossomos, j bastante condensados,
espalham-se na regio central do citoplasma.
No decorrer da prfase, os centros celulares vo se
afastando, dando origem a um complexo conjunto de fibras
denominado fuso acromtico.
Na metfase, cada cromossomo liga-se a fibras do fuso
provenientes de plos opostos (fibras cromossmicas). Essa
ligao ocorre na regio do centrmero cromossmico. A
tenso nas fibras de plos opostos faz com que os cromos-
somos permaneam temporariamente estacionados na re-
gio equatorial da clula, formando a placa metafsica.
Na anfase, os centrmeros se dividem e as cromtides-
irms se separam. O encurtamento gradual das fibras cro-
mossmicas arrasta as cromtides-irms em sentidos
opostos, at os plos do fuso acromtico.
Na telfase, os cromossomos, j em plos opostos da
clula, descondensam-se e voltam a produzir nuclolos.
Cada conjunto cromossmico envolvido por uma nova
carioteca, organizada a partir dos fragmentos da carioteca
original. Surgem, assim, dois ncleos-filhos com conjuntos
idnticos de cromossomos.
Aps a formao dos ncleos-filhos (cariocinese), ocorre
a diviso do citoplasma, fenmeno denominado citocinese.
esquerda, de cima para baixo, seqncia das fases
da mitose. Os desenhos coloridos apresentam deta-
lhes descobertos com o emprego da microscopia ele-
trnica e da citoqumica. Nos quadros, desenhos fei-
tos em 1882 por Walther Flemming, que representam
clulas vivas de salamandra em processo de diviso.
Carioteca
ATUALIDADES BIOLGICAS 3
Ciclo celular o perodo compreendido entre a origem
de uma clula, por diviso de uma clula preexistente, e sua
subseqente diviso em duas clulas-filhas, que repetiro o
ciclo. Evidentemente, nem todas as clulas cumprem intei-
ramente esse ciclo de vida. H clulas que nunca se divi-
dem (por exemplo, nossas clulas musculares e nervosas) e
outras que podem morrer acidentalmente antes de se dividir.
O intervalo do ciclo celular em que a clula no est se
dividindo a intrfase. Para os primeiros citologistas, a
intrfase parecia ser um perodo de pouca atividade, se
comparado mitose. Isso porque os estudos sobre a clula,
no princpio, eram basicamente centrados na observao
microscpica. Mais recentemente, os estudos bioqumicos
e citoqumicos mostraram que a intrfase um perodo de
intensa atividade metablica, durante o qual as clulas
fabricam todas as substncias de que necessitam. tambm
durante a intrfase que a clula duplica seus cromossomos,
preparando-se para a diviso celular.
Em sua descrio da mitose, Walther Flemming desta-
cou o fato de que os cromossomos j se apresentam duplica-
dos no incio da prfase. Estudos recentes realizados com
substncias radiativas mostraram que a duplicao dos
cromossomos ocorre em uma etapa particular da intrfase,
geralmente algumas horas antes do incio da mitose. Essa
etapa denominada fase S (abreviatura da palavra inglesa
synthesis, sntese), porque nela ocorre a sntese de DNA. A
etapa da intrfase que antecede a fase S chamada fase G1,
e a que a sucede, fase G2. A abreviatura G provm do
ingls gap, que significa intervalo.
A durao do ciclo celular varia nos diferentes tipos de
clula. Nos primeiros estgios da vida de um embrio huma-
no, por exemplo, a intrfase das clulas embrionrias
curtssima, e praticamente no apresenta as fases G1 e G2.
Assim que a mitose termina, as clulas recm-formadas
duplicam imediatamente seus cromossomos e iniciam nova
mitose. A fase S tambm muito curta, uma vez que o
DNA, principal componente dos cromossomos, duplica-se
muito rapidamente nas clulas embrionrias.
Uma pessoa adulta tem clulas com diferentes ciclos ce-
lulares. Por exemplo, as clulas presentes na camada germi-
nativa de nossa epiderme dividem-se constantemente, pro-
duzindo sempre novas clulas epidrmicas para substituir as
que morrem. O mesmo ocorre nas clulas que revestem
internamente nosso tubo digestivo. J as clulas musculares e
nervosas nunca se dividem, permanecendo estacionadas em
uma fase do ciclo celular chamada G0 (zero).
O CICLO CELULAR
Duplicao do
centro celular
Duplicao dos
cromossomos
Incio da separao
dos centros
celulares
Formao do
fuso acromtico
PRFASE
METFASE
ANFASE
TELFASE
MITOSE
(30 minutos)
G1
(9 horas)
S
(10 horas)
Centro celular
com centrolos
Ncleo
Diviso
citoplasmtica
(citocinese)
Separao dos
cromossomos
Ligao dos
cromossomos
ao fuso
G2
(4,5 horas)
Condensao dos
cromossomos
Descondensao
dos cromossomos
INTRFASE
Esquema do ciclo celular. Embora
ocupe mais de metade do esquema,
a mitose representa apenas 30 minu-
tos em um ciclo celular de 24 horas,
no qual G1 dura 9 horas, S dura 10
horas e G2 dura 4 horas e 30 minu-
tos, aproximadamente.
4 ATUALIDADES BIOLGICAS
Esquema que mostra os principais nveis da estrutura
dos cromossomos de clulas eucariticas.
Cromossomo
metafsico
CONDENSAO DO
CROMONEMA
(dois enrolamentos
sucessi vos)
Cromonema
(filamento
cromossmico
bsico)
30 nm
Esqueleto
protico
Cromtide
700 nm
300 nm
Nucleossomos
DNA
Glbulo de
histona
2 nm
Enrolamento helicoidal
dos nucleossomos
At o comeo do sculo XX, no se sabia se os cromos-
somos surgiam apenas durante a diviso celular ou se j
existiam anteriormente na clula. As pesquisas mostraram
que, apesar de no poderem ser observados como entidades
individualizadas durante a intrfase, os cromossomos esto
presentes em todo o ciclo celular. Ocorre que, na intrfase,
cada cromossomo encontra-se na forma de um fio muito
longo e fino, sendo impossvel observ-lo individualmente
ao microscpio. Os cromossomos interfsicos compem um
emaranhado filamentoso, que foi denominado cromatina
pelos primeiros estudiosos.
Um cromossomo constitudo por uma longa molcula
de DNA enrolada, a espaos regulares, em torno de glbulos
de certos tipos de protena, as histonas. Cada glbulo de
histona com o segmento de DNA enrolado sobre si um
nucleossomo, a unidade bsica do cromossomo.
A CONDENSAO DOS CROMOSSOMOS
O FUSO ACROMTICO
Na mitose, cada uma das clulas-filhas deve receber
um conjunto cromossmico idntico ao existente na clula-
me. A distribuio correta dos cromossomos nas divises
celulares garantida pelo fuso acromtico, estrutura cons-
tituda por microtbulos proticos e que se forma durante
a prfase, desaparecendo ao fim da telfase.
Microtbulos so estruturas tubulares, com cerca de
24 nm de dimetro, constitudos por molculas da protena
tubulina. Um microtbulo uma estrutura dinmica, que
pode crescer ou encurtar rapidamente por adio (polimeri-
zao) ou perda (despolimerizao) de molculas de tubu-
lina, preferencialmente em uma das extremidades, identifi-
cada pelo sinal +.
O citoplasma da clula interfsica contm uma vasta
rede de microtbulos que, juntamente com outros compo-
nentes fibrosos de natureza protica, constituem o cito-
esqueleto, responsvel pela sustentao e pela manuten-
o da forma da clula. As extremidades - dos microtbu-
los do citoesqueleto convergem para uma regio especia-
lizada do citoplasma, localizada perto do ncleo e deno-
minada centrossomo. a partir do centrossomo que os
microtbulos comeam a se formar, crescendo sempre no
sentido - > +.
Na maioria das clulas animais h um par de centrolos
no centrossomo. Cada centrolo uma estrutura cilndrica,
formada por nove feixes de trs microtbulos dispostos
cilindricamente. No h centrolos em clulas de plantas
fanergamas (gimnospermas e angiospermas).
Nucleossomos vizinhos associam-se formando uma es-
trutura helicoidal, semelhante a um fio telefnico, com
aproximadamente 30 nm (nanometro = 10
- 9
mm) de espes-
sura. Esse fio espiralado, por sua vez, associa-se a um
componente protico, o esqueleto cromossmico, consti-
tuindo o filamento cromossmico bsico, ou cromonema,
com cerca de 300 nm de espessura.
Durante a diviso celular, o cromonema sofre dois enro-
lamentos helicoidais sucessivos, de modo que ao final da
prfase, quando a carioteca se fragmenta em inmeras pe-
quenas bolsas, o comprimento dos cromossomos est muito
reduzido, o que facilita a separao das cromtides para as
clulas-filhas.
A condensao dos cromossomos durante a diviso ce-
lular leva inativao temporria dos genes, uma vez que
o DNA incapaz de transcrever RNA quando compactado.
Conseqentemente, deixa de ser produzido RNA riboss-
mico, o qual, juntamente com protenas, constitui o
nuclolo. No decorrer da prfase, portanto, os nuclolos
vo progressivamente desaparecendo.
Na telfase ocorre descondensao dos cromossomos, o
que os traz de volta atividade; assim, os nuclolos reapare-
cem. As bolsas resultantes da fragmentao da carioteca
agregam-se em torno dos cromossomos e fundem-se entre si,
reconstituindo as cariotecas dos ncleos-filhos.
Microtbulos
ATUALIDADES BIOLGICAS 5
Acima, desenho de uma clula animal em incio de
prfase. Os centrossomos, duplicados na intrfase,
esto se afastando e dando origem aos microtbu-
los do fuso. Cada centrossomo contm um par de
centrolos e envolvido por um conjunto de microtbu-
los curtos, que constituem o ster.
Centrolos Feixes de trs
microtbulos
Centrossomo
com centrolos
Fibras do fuso
acromtico em
formao
Ncleo
Citoplasma
Fibras do
ster
150 nm
400 nm
Um dos sinais de que a clula vai se dividir a dupli-
cao do centrossomo. Isso ocorre ainda na fase G1, pouco
antes do incio da fase S. Em clulas animais, os centrolos
presentes no centrossomo duplicam-se, originando
centrolos-filhos, que terminam de se formar na fase S. Na
fase G2 cada um dos centrossomos j possui dois pares de
centrolos completos.
O fuso acromtico comea a surgir na prfase, quando
os microtbulos do citoesqueleto se desorganizam e as
molculas de tubulina por eles liberadas so utilizadas na
formao dos microtbulos do fuso. A desintegrao do
citoesqueleto durante a diviso celular faz com que a clula
perca seu aspecto caracterstico e assuma forma esfrica.
Os microtbulos do fuso formam-se a partir de cada um
dos centrossomos, irradiando em todas as direes, como
os espinhos de um ourio-do-mar. Os centrossomos afas-
tam-se progressivamente um do outro, provavelmente em-
purrados pelos microtbulos que se formam entre eles.
Os centrossomos atingem plos opostos da clula ao
final da prfase, quando se completa o fuso. Este uma
estrutura dinmica, e seus microtbulos esto em processo
constante de crescimento e desintegrao. A alta capaci-
dade que os microtbulos tm de formarem-se e desman-
charem-se com rapidez o que lhes permite capturar os
cromossomos, aps a fragmentao da carioteca.
Nas extremidades do fuso acromtico, em clulas ani-
mais, h um conjunto de microtbulos que irradiam em
direo superfcie celular, formando o ster. Clulas de
plantas fanergamas no possuem centrolos nem ster em
torno de seus centrossomos.
Microtbulos que crescem a partir de um centrossomo,
em direo regio central (equador) da clula, associam-
se a microtbulos que crescem do plo oposto, originando
uma estrutura fibrosa em forma de fuso, abaulada no equa-
dor e afilada nos plos. Esses so os microtbulos polares,
tambm chamados fibras polares.
Alm dos microtbulos do ster e dos microtbulos po-
lares, o fuso contm ainda os microtbulos cromoss-
micos, ou fibras cromossmicas, que vo dos centrosso-
mos aos centrmeros dos cromossomos.
Formao do fuso
Protofilamento
Dmero de
tubulina
(unidade
estrutural)
8 nm
24 nm
Extremidade +
Extremidade -
Adio
de
tubulina
Dmeros
livres de
tubulina
esquerda, esquema de um microtbulo e das uni-
dades que o constituem (dmeros de tubulina). direi-
ta, esquema de um microtbulo em processo de cresci-
mento pela adio de tubulina na extremidade +.
6 ATUALIDADES BIOLGICAS
MP
MC
Centrossomo
com centrolos
Regio de
interao dos MP
+
+
+
-
-
-
MA
Microtbulos
cromossmicos
Centrmero
Cinetcoros das
cromtides-irms
Cromtides-irms
esquerda, esquema do fuso acromtico. H trs tipos de microtbulo no fuso: do ster (MA, em azul), polares (MP,
em vermelho) e cromossmicos (MC, em preto). As extremidades - dos microtbulos convergem para os centros-
somos. Em clulas animais, cada centrossomo contm um par de centrolos. direita, esquema de um cromossomo
metafsico ligado ao fuso pelos cinetcoros do centrmero.
+
-
em direo a um ou a outro plo da clula, antes de fi-
nalmente estacionarem na regio equatorial, constituindo
a placa metafsica.
O que faz os cromossomos alinharem-se no equador da
clula? Como j vimos, h alta chance de um cromossomo
ser fisgado por fibras provenientes de plos opostos.
Segundo as recentes descobertas, a fora exercida por uma
fibra cromossmica sobre o cinetcoro diretamente
proporcional ao comprimento da fibra, isto , quanto mais
perto um cromossomo estiver de um plo, menor ser a
fora com que ele puxado. A tendncia, portanto, que
os cromossomos estacionem na regio equatorial da clula,
onde as foras que puxam seus cinetcoros em direo a
plos opostos se equivalem.
A formao da placa metafsica, com ligao correta
de todos os cromossomos s fibras do fuso, crucial para o
prosseguimento da diviso celular. Somente quando todos
os cromossomos estiverem ligados a ambos os plos, com
tenses equivalentes nas fibras cromossmicas opostas,
que ser dado o sinal para que a diviso tenha prosse-
guimento. Esse mecanismo impede que a mitose continue
em caso de erros de ligao dos cromossomos ao fuso.
Algumas substncias de origem vegetal, como a
colchicina, a vimblastina e o taxol, interferem na formao
do fuso acromtico e, dependendo da concentrao, podem
bloquear a diviso celular. A colchicina, por exemplo, com-
bina-se especificamente com os dmeros de tubulina, des-
polimerizando os microtbulos. Conseqentemente, clulas
em diviso tratadas com colchicina ficam estacionadas em
metfase. Recentemente, algumas dessas substncias vem
sendo usadas no tratamento de cncer, uma vez que inibem
a rpida diviso caracterstica das clulas tumorais.
As cromtides-irms de um cromossomo duplicado
encontram-se unidas por uma regio altamente especia-
lizada denominada centrmero. No centrmero de cada
cromtide evidencia-se, no fim da prfase, uma estrutura
em forma de disco chamada cinetcoro. Na superfcie
externa desse disco ligam-se as extremidades + de fibras
cromossmicas, cujas extremidades opostas (-) convergem
para um dos centrossomos.
No fim da prfase, a carioteca se fragmenta e os cromos-
somos espalham-se no citoplasma. Se a extremidade + de
um microtbulo atingir o cinetcoro de um cromossomo,
ela se prende a ele. Microtbulos que no encontram cine-
tcoros diminuem de tamanho pela desagregao de tu-
bulina e mais tarde crescem novamente. Assim, graas ao
seu crescimento dinmico, os microtbulos agem como
pescadores jogando o anzol (a extremidade +) no citoplas-
ma onde esto os cromossomos. Um microtbulo, ao
fisgar um cinetcoro, torna-se mais estvel e mantm
preso o cromossomo.
Quando o cinetcoro de uma cromtide prende-se a
microtbulos provenientes de um dos plos, a cromtide-
irm acaba por ficar com seu cinetcoro voltado para o
plo oposto, tendo grande probabilidade de se prender a
microtbulos provenientes dele.
Unio dos cromossomos ao fuso
Os antigos citologistas j haviam observado que, no
fim da prfase, aps a ruptura da carioteca, os cromos-
somos executam movimentos oscilatrios, movendo-se
Formao da placa metafsica
-
+
ATUALIDADES BIOLGICAS 7
H evidncias de que as cromtides-irms de um cro-
mossomo esto unidas na regio do centrmero por pro-
tenas especiais. Quando todos os cromossomos esto ali-
nhados na placa metafsica e, portanto, corretamente liga-
dos aos plos do fuso, as protenas que unem centrmeros-
irmos so degradadas, e as cromtides-irms separam-se
simultaneamente em todos os cromossomos da clula.
Com a diviso do centrmero, as cromtides-irms,
agora chamadas cromossomos-irmos, comeam a migrar
para plos opostos. Dentre as hipteses aventadas para
explicar a migrao dos cromossomos na anfase, uma que
ganhou destaque foi a do deslizamento das fibras cromos-
smicas sobre as fibras polares do fuso acromtico. Resul-
tados experimentais recentes, no entanto, mostram que a
migrao dos cromossomos se d pelo encurtamento dos
microtbulos cromossmicos devido despolimerizao
em suas extremidades +.
Contribui tambm para a separao dos cromossomos-
irmos o alongamento do fuso, causado pelo crescimento
das fibras polares provenientes de centrossomos opostos.
Migrao dos cromossomos
para os plos
A migrao dos cromossomos para os plos da clu-
la, na anfase, decorre principalmente do encurta-
mento dos microtbulos que compem a fibra cromos-
smica. Os microtbulos encurtam devido liberao
de tubulina (despolimerizao), preferencialmente na
extremidade +, ligada ao cinetcoro.
Acima, esquema da captura dos cromossomos pelos
microtbulos cinetocricos. (A) Captura de um dos cine-
tcoros. (B) Captura do cinetcoro oposto. (C) Equilbrio
de tenses nas fibras cromossmicas, com formao da
placa metafsica. (D) Separao dos centrmeros e
encurtamento das fibras cromossmicas na anfase.
BIBLIOGRAFIA
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Science, 275: 632-637, 1997.
NASMYTH, K. Viewpoint: putting the cell cycle in order.
Science, 274: 1643-1645, 1996.
Extremidade +
Microtbulo
cromossmico
Para o
centrossomo
Liberao de
unidades de
tubulina
Cinetcoro
Sentido de
migrao do
cromossomo
Cromossomo
A B C D
Crecimento dos
microtbulos
cromossmicos
Fibras
cromossmicas
Placa
metafsica
Encurtamento
das fibras
cromossmicas