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MANUAL DE
BIOSSEGURANA
I. INTRODUO
10. Trabalho com patgenos no deve ser realizado em local movimentado. O acesso ao
laboratrio deve ser restrito a pessoas que, realmente, manuseiem o material biolgico.
11. O trnsito pelos corredores com material patognico deve ser evitado ao mximo.
Quando necessrio, utilize bandejas.
Aquele que nunca trabalhou com patgenos, antes de comear a manuse-los, deve:
13. Ao iniciar o trabalho com patgenos, o estagirio dever ficar sob a superviso de um
pesquisador experimentado, antes de estar completamente capacitado para o trabalho em
questo.
14. Sada da rea de trabalho, mesmo que temporariamente, usando luvas (mesmo que o
pesquisador tenha certeza de que no esto contaminadas), mscara ou avental,
estritamente proibida. No se deve tocar com as luvas em maanetas, interruptores,
telefone, etc. (S se deve tocar com as luvas o material estritamente necessrio ao trabalho).
15. Seja particularmente cuidadoso para no contaminar aparelhos dentro ou fora da sala
(use aparelhos extras, apenas em caso de extrema necessidade).
16. Em caso de acidente:
lcool iodado deve ser passado na rea afetada (com exceo dos olhos, que devem
ser lavados exaustivamente com gua destilada);
Em caso de ferida, deve ser lavada com gua corrente e comprimida de forma a sair
sangue (cuidado para no aumentar as dimenses da ferida deve ser tomado);
17. As normas de trabalho com material radioativo e com material patognico devem ser
lidas com ateno antes de se comear a trabalhar com os mesmos.
18. Recomendao final para minimizar o risco de acidentes: no trabalhe sob tenso.
II BIOSSEGURANA
DEFINIO
Biossegurana um conjunto de procedimentos, aes, tcnicas, metodologias,
equipamentos e dispositivos capazes de eliminar ou minimizar riscos inerentes as
atividades de pesquisa, produo, ensino, desenvolvimento tecnolgico e prestao de
servios, que podem comprometer a sade do homem, dos animais, do meio ambiente ou a
qualidade dos trabalhos desenvolvidos.
TIPOS DE RISCO
(Portaria do Ministrio do Trabalho, MT no. 3214, de 08/06/78)
1. Riscos de Acidentes
2. Riscos Ergonmicos
3. Riscos Fsicos
4. Riscos Qumicos
5. Riscos Biolgicos
1. RISCOS DE ACIDENTES
Considera-se risco de acidente qualquer fator que coloque o trabalhador em situao
de perigo e possa afetar sua integridade, bem estar fsico e moral. So exemplos de risco de
acidente: as mquinas e equipamentos sem proteo, probabilidade de incndio e exploso,
arranjo fsico inadequado, armazenamento inadequado, etc.
2. RISCOS ERGONMICOS
Considera-se risco ergonmico qualquer fator que possa interferir nas caractersticas
psicofisiolgicas do trabalhador causando desconforto ou afetando sua sade. So
exemplos de risco ergonmico: o levantamento e transporte manual de peso, o ritmo
excessivo de trabalho, a monotonia, a repetitividade, a responsabilidade excessiva, a
postura inadequada de trabalho, o trabalho em turnos, etc.
3. RISCOS FSICOS
Consideram-se agentes de risco fsico as diversas formas de energia a que possam
estar expostos os trabalhadores, tais como: rudo, vibraes, presses anormais,
temperaturas extremas, radiaes ionizantes, radiaes no ionizantes, ultra-som, materiais
cortantes e ponteagudos, etc.
4. RISCOS QUMICOS
Consideram-se agentes de risco qumico as substncias, compostas ou produtos que
possam penetrar no organismo pela via respiratria, nas formas de poeiras, fumos, nvoas,
neblinas, gases ou vapores, ou que, pela natureza da atividade de exposio, possam ter
contato ou ser absorvido pelo organismo atravs da pele ou por ingesto.
5. RISCOS BIOLGICOS
Consideram-se agentes de risco biolgico as bactrias, fungos, parasitos, vrus, entre
outros.
Classificao de risco biolgico:
Os agentes de risco biolgico podem ser distribudos em quatro classes de 1 a 4 por ordem
crescente de risco (anexo 1), classificados segundo os seguintes critrios:
Virulncia.
Modos de transmisso
Endemicidade.
Nunca pipete com a boca, nem mesmo gua destilada. Use dispositivos de
pipetagem mecnica.
Evite o hbito de levar as mos boca, nariz, olhos, rosto ou cabelo, no laboratrio.
No devem ser usados jias ou outros adornos nas mos, porque podem impedir
uma boa limpeza das mesmas.
Qualquer pessoa com corte recente, com leso na pele ou com ferida aberta (mesmo
uma extrao de dente), devem abster-se de trabalhar com patgenos humanos.
Cuidados especiais devem ser tomados com agulhas e seringas. Use-as somente
quando no houver mtodos alternativos.
BOAS
PRTICAS
LABORATORIAIS
PRINCPIOS
DE
Fique atento qualquer alterao no seu quadro de sade e dos funcionrios sob sua
responsabilidade, tais como: gripes, alergias, diarrias, dores de cabea, enxaquecas,
tonturas, mal estar em geral, etc... e notifique imediatamente chefia do laboratrio.
B. - BARREIRAS
B.1. - BARREIRAS PRIMRIAS
B.1.1. EQUIPAMENTO DE PROTEO INDIVIDUAL EPI
So empregados para proteger o pessoal da rea de sade do contato com agentes
infecciosos, txicos ou corrosivos, calor excessivo, fogo e outros perigos. A roupa e o
equipamento servem tambm para evitar a contaminao do material em experimento ou
em produo. So exemplos:
LUVAS
As luvas so usadas como barreira de proteo prevenindo contra contaminao das
mos ao manipular material contaminado, reduzindo a probabilidade de que
microrganismos presentes nas mos sejam transmitidos durante procedimentos.
O uso de luvas no substitui a necessidade da LAVAGEM DAS MOS porque elas
podem ter pequenos orifcios inaparentes ou danificar-se durante o uso, podendo
contaminar as mos quando removidas.
Usar luvas de ltex SEMPRE que houver CHANCE DE CONTATO com sangue,
sensibilidade).
Lavar instrumentos, roupas, superfcies de trabalho SEMPRE usando luvas.
Luvas (de borracha) usadas para limpeza devem permanecer 12 horas em soluo de
JALECO
Os vrios tipos de jalecos so usados para fornecer uma barreira de proteo e
profissional.
Devem sempre ser de mangas longas, confeccionados em algodo ou fibra
pessoais.
Devem ser descontaminados antes de serem lavados.
OUTROS EQUIPAMENTOS
impacto).
Mscara (tecido, fibra sinttica descartvel, com filtro HEPA, filtros para gases,
p, etc.).
Avental impermevel.
Classe III
Procedimento correto para uso da Cabine de Segurana Biolgica encontra-se no
anexo 2.
FLUXO LAMINAR DE AR
Massa de ar dentro de uma rea confinada movendo-se com velocidade uniforme ao
longo de linhas paralelas.
CAPELA QUMICA NB
Cabine construda de forma aerodinmica cujo fluxo de ar ambiental no causa
turbulncias e correntes, assim reduzindo o perigo de inalao e contaminao do operador
e ambiente.
CHUVEIRO DE EMERGNCIA
Chuveiro de aproximadamente 30 cm de dimetro, acionado por alavancas de mo,
cotovelos ou joelhos. Deve estar localizado em local de fcil acesso.
LAVA OLHOS
Dispositivo formado por dois pequenos chuveiros de mdia presso, acoplados a
uma bacia metlica, cujo ngulo permite direcionamento correto do jato de gua. Pode
fazer parte do chuveiro de emergncia ou ser do tipo frasco de lavagem ocular.
MANTA OU COBERTOR
Confeccionado em l ou algodo grosso, no podendo ter fibras sintticas. Utilizado
para abafar ou envolver vtima de incndio.
VASO DE AREIA
Tambm chamado de balde de areia, utilizado sobre derramamento de lcalis para
neutraliz-lo.
EXTINTOR DE INCNDIO A BASE DE GUA
Utiliza o CO2 como propulsor. usado em papel, tecido e madeira. No usar em
eletricidade, lquidos inflamveis, metais em ignio.
EXTINTOR DE INCNDIO DE CO2 EM P
Utiliza o CO2 em p como base. A fora de seu jato capaz de disseminar os
materiais incendiados. usado em lquidos e gases inflamveis, fogo de origem eltrica.
No usar em metais alcalinos e papel.
Lixo contaminado deve ser embalado em sacos plsticos para o lixo tipo 1, de
de seu contedo, mesmo se virados para baixo. Uma vez fechados, precisam ser
mantidos ntegros at o processamento ou destinao final do resduo. Caso ocorram
rompimentos freqentes dos sacos, devero ser verificados, a qualidade do produto
ou os mtodos de transporte utilizados. No se admite abertura ou rompimento de
saco contendo resduo infectante sem tratamento prvio.
Havendo derramamento do contedo, cobrir o material derramado com uma soluo
Estas lixeiras devem ser lavadas, pelo menos uma vez por semana, ou sempre que
houver vazamento do saco.
2 - RESDUOS PERFUROCORTANTES
Os resduos perfurocortantes constituem a principal fonte potencial de riscos, tanto
de acidentes fsicos como de doenas infecciosas. So compostos por: agulhas, ampolas,
pipetas, lminas de bisturi, lminas de barbear e qualquer vidraria quebrada ou que se
quebre facilmente.
PROCEDIMENTOS RECOMENDADOS PARA O DESCARTE
No caso de seringa de vidro, lev-la juntamente com a agulha para efetuar o processo de
descontaminao.
3 - RESDUOS RADIOATIVOS
Compostos por materiais radioativos ou contaminados com radionucldeos com
baixa atividade provenientes de laboratrios de pesquisa em qumica e biologia,
laboratrios de anlises clnicas e servios de Medicina Nuclear. So normalmente, slidos
ou lquidos (seringas, papel absorvente, frascos, lquidos derramados, urina, fezes, etc.).
Resduos radioativos, com atividade superior s recomendadas pela Comisso Nacional de
Energia Nuclear (CNEN), devero ser acondicionados em depsitos de decaimento (at que
suas atividades se encontrem dentro do limite permitido para sua eliminao).
PROCEDIMENTOS ESPECFICOS PARA O DESCARTE
Os containers devem ser identificados com: Istopo presente, tipo de produto qumico e
concentrao, volume do contedo, laboratrio de origem, tcnico responsvel pelo
descarte e a data do descarte.
Considerar como de dez meias vidas o tempo necessrio para obter um decrscimo
quase total para a atividade dos materiais (fontes no seladas) empregadas na rea
biomdica.
OBSERVAES IMPORTANTES:
Os Procedimentos estabelecidos para a eliminao de rejeitos radioativos foram
padronizados pela Norma CNEN-NE-6.05 (CNEN, 1985).
O pessoal envolvido na manipulao desses rejeitos devem receber treinamento
especfico para realizao dessa atividade, alm de uma regular vigilncia mdico sanitria.
4 - RESDUOS QUMICOS
Os resduos qumicos apresentam riscos potenciais de acidentes inerentes s suas
propriedades especficas. Devem ser consideradas todas as etapas de seu descarte com a
finalidade, de minimizar, no s acidentes decorrentes dos efeitos agressivos imediatos
(corrosivos e toxicolgicos), como os riscos cujos efeitos venham a se manifestar a mais
longo prazo, tais como os teratognicos, carcinognicos e mutagnicos. So compostos por
resduos orgnicos ou inorgnicos txicos, corrosivos, inflamveis, explosivos,
teratognicos, etc.
Para a realizao dos procedimentos adequados de descarte, importante a
observncia do grau de toxicidade e do procedimento de no mistura de resduos de
diferentes naturezas e composies. Com isto, evitado o risco de combinao qumica e
combusto, alm de danos ao ambiente de trabalho e ao meio ambiente. Para tanto,
necessrio que a coleta desses tipos de resduos seja peridica.
Os resduos qumicos devem ser tratados antes de descartados. Os que no puderem
ser recuperados, devem ser armazenados em recipientes prprios para posterior descarte.
No armazenamento de resduos qumicos devem ser considerados a compatibilidade
dos produtos envolvidos, a natureza do mesmo e o volume.
resduos deve ser afixada uma etiqueta autoadesiva, preenchida em grafite contendo
as seguintes informaes: Laboratrio de origem, contedo qualitativo, classificao
quanto natureza e advertncias.
Os rejeitos orgnicos ou inorgnicos sem possibilidade de descarte imediato devem
resduos
que
sero
armazenados
para
posterior
recolhimento
5 - RESDUOS COMUNS
Composto por todos os resduos que no se enquadram em nenhuma das categorias
anteriores e que, por sua semelhana com os resduos domsticos comuns, podem ser
considerados como tais.
ROTINAS DE ESTERILIZAO
Vidraria a ser autoclavada de rotina:
A vidraria deve ser autoclavada a 120O C por 20 minutos e postas para secar em
estufa. A vidraria com tampa de poliestireno no deve ser submetida a temperatura acima
de 50O C no forno. Os demais materiais a serem esterilizados devem ser solicitados,
diretamente, ao pessoal da esterilizao, pelos prprios usurios.
1. Tubos de ensaio, frascos e pipetas:
a) Contaminados ou sujos com material proteico:
Aps o uso imerg-los em soluo de hipoclorito de sdio a 1% em vasilhames
apropriados (pipetas Pasteur e demais separadamente) por, no mnimo, 12 horas.
b) Vidraria suja com material aderente (Nujol, Percoll, Adjuvantes oleosos, etc.):
Lavar em gua de torneira e coloc-los em soluo de Extran a 2% prximos a pia
das salas dos laboratrios por um perodo mnimo de 04 horas (Pipetas Pasteur e demais
separadamente).
Observao: A vidraria maior que no couber dentro dos vasilhames deve ser tratada
colocando-se a soluo desinfetante ou detergente dentro da mesma.
c) Vidrarias utilizadas com gua ou solues tampes sem protenas:
Os frascos devero ser lavados pelo prprio usurio, em gua corrente e, em
seguida, trs vezes em gua destilada, colocados para secar deixando-os emborcados sobre
papel toalha no laboratrio, prximo a pia. Aps secarem, devero ser tampados com papel
alumnio e guardados nos armrios. Tubos e pipetas devero ser processados como se
estivessem contaminados.
d) Pipetas sujas com gel:
Colocar em vasilhames separados e ferver antes de juntar as demais pipetas.
2. Lminas e Lamnulas
Colocar nos vasilhames apropriados e rotulados para as mesmas com soluo de
hipoclorito a 1%. Aps o trabalho, colocar as lminas e lamnulas em vasilhames
separados.
Lavar as lamnulas no laboratrio e colocar em vasilhames contendo lcool, na mesa
de apoio do fluxo.
3 - Cmara e Lamnula de Neubauer e Homogeneizadores de Vidro:
Aps uso, colocar em vasilhame imergindo em hipoclorito a 1%. Aps 1 hora, lavar
em gua corrente, secar e guardar.
MATERIAL PLSTICO
1) Frasco, tubos de ensaio, seringas, ponteiras e tampas
a) Contaminados:
Imergir em hipoclorito de sdio a 1% no mesmo vasilhame utilizado para as
vidrarias, com exceo das ponteiras, que devero ser colocadas em recipientes menores,
separados.
Observao: Encher as ponteiras com a soluo de hipoclorito ao desprez-las.
b) No contaminados, porm sujos com material aderente (adjuvante oleoso, Nujol,
Percoll,etc):
Lavar em gua corrente e imergir em Extran a 2% por tempo mnimo de 04 horas
em vasilhame apropriado.
2) Pipetas Descartveis
a) Contaminadas:
Colocar no vasilhame para pipeta de vidro.
b) Sujas com material aderente:
Lavar em gua corrente e colocar no vasilhame para pipeta de vidro.
Anexo 1
Anexo 2
Lavar as mos e antebraos com gua e sabo e secar com toalha ou papel toalha
descartvel.
Usar jaleco de manga longa, luvas, mscara, gorro e pr-p quando necessrio.
Limpar a cabine, ao trmino do trabalho, com gaze estril embebida com lcool etlico
ou isoproplico a 70%.
Os recipientes para descarte de material devem estar sobre o cho, carrinhos ou mesas
ao lado da cabine de segurana.