Instituto de Cincias da

Sade

Curso: FARMCIA
Disciplina: Anlises Toxicolgicas
Titulo da Aula: Extrao, padronizao e
identificao de frmacos por CCD

AULA
1

OBJETIVO: Teste rpido para estimar a exposio do organismo a frmacos

ou drogas de abuso
PADRONIZAO DE FRMACOS POR CROMATOGRAFIA EM CAMADA
DELGADA (CCD)
MATERIAL
Padro
- Nicotina
Amostras
- 2 amostras de urina (A e B)

PROCEDIMENTO
EXTRAO DAS 2 AMOSTRAS DE URINA (A E B)
1. Colocar outra alquota de 10 mL da mesma amostra em funil de separao (125
mL) e ler o pH;
2. Ajustar o pH entre 8,0 e 9,0 por meio de soluo de NaOH 2 %;
3. Extrair com 20 mL da mistura clorofrmio: ter (2:1), agitando vigorosamente o
funil por 1 minuto;
4. Deixar o funil em repouso por alguns minutos para a separao das fases;
5. Filtrar a camada orgnica sobre Na2SO4 1% anidro, previamente umedecido com
a mistura clorofrmio: ter. Recolher o extrato em bquer;
6. Repetir os itens 3 e 4 recolhendo o filtrado no mesmo bquer;
1

7. Evaporar o solvente secura e reservar o resduo (Rb= bsico)

8. Desprezar o remanescente aquoso, que ficou no funil de separao.
2. APLICAO NA CROMATOPLACA
1. Preparar 10 mL do sistema solvente (clorofrmio: metanol 4:1) e adicionar em
um bquer de 250mL, colocar um pedao de papel dentro do bequer e fechar o
com filme
2. Aplicar por capilaridade a soluo padro e as amostras de urina (A e B) na
placa cromatogrfica (medindo 10 cm de altura e 5 cm de largura)
3. Aps o desenvolvimento das placas (~ 8 cm), retir-las das cubas e deix-las
temperatura ambiente para a completa evaporao do solvente.
4. A seguir revelar a cromatoplaca com a soluo de Dragendorff Iodado (DI).
5. Avaliar cor e valor do Rf (fator de reteno) para cada mancha
6. Identificar qual das amostras est contaminada
Rf =

Distncia percorrida pela amostra

hRf = Rf x 100

Distncia percorrida pela fase mvel

MATERIAIS

QUANTIDADE

cido actico

50 mL

Clorofrmio

500 mL

ter de petrleo

100 mL

Iodeto de Potssio

4,0 g

Metanol

100 mL

NaOH

1g

Nitrato de bismuto

2,0 g

Sulfato de sdio

10 g

EQUIPAMENTOS

QUANTIDADE

Funil de separao (125 mL)

Funil de vidro capacidade 100 mL

01

Basto de vidro

01

Papel Universal pH

02 fitas

Bqueres 100 mL

03

placas cromatogrficas de slica gel (0,25 mm de espessura)

1 (10 x 5cm)

Capilar de vidro para aplicao em cromatografia

10

Cubas de vidro bequer de 250mL

Nebulizadores

Descarte do material utilizado conforme Normas Internacionais de Segurana:

Compostos Mercuriais: Incinerao.