Roteiros

Toxicologia e Análises Toxicológicas

Manual de Estágio

Disciplina: Toxicologia e Análises Toxicológicas

Título da Aula: Padronização de Fármacos por AULA 1
Cromatografia em Camada Delgada (CCD)

OBJETIVO: Padronizar o comportamento do fármaco na realização de testes rápidos

utilizados como triagem da exposição do organismo a fármacos ou drogas.

AMOSTRA
Padrões
1. Ácido salicílico

REAGENTES E SOLUÇÕES
Agentes cromogênicos:
1. Solução de cloreto férrico (FeCl3) 5%

SISTEMA SOLVENTE:
Cuba ácida: clorofórmio: acetona (9:1)

TÉCNICA
1. Aplicar de 5 a 10 µL (5 a 10 µg) da solução padrão em uma placa cromatográfica, por
meio de tubos capilares ou micropipetas.
Deve-se atentar que o diâmetro do solvente não deve ultrapassar 5 mm, uma vez que
manchas muito grandes podem descaracterizar a identificação da substância. Um secador
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de cabelo a frio pode ser utilizado para evaporar o solvente mais rapidamente e aplicar a
2,0 cm da borda inferior da placa.
2. Colocar a cromatoplaca em uma cuba de desenvolvimento previamente saturada
contendo o sistema solvente clorofórmio: acetona (9:1).
Após o desenvolvimento das placas (10 cm, a partir do ponto de aplicação), retirá-las
das cubas e deixá-las a temperatura ambiente para a completa evaporação do solvente,
sob capela.
3. A seguir, revelar a cromatoplaca com FeCl3 e avaliar o comportamento da mancha.
4. Expressar os resultados segundo a forma da mancha, cor da mancha e Rf, em que:
Rf = distância percorrida pelo analito
distância percorrida pela fase móvel

hRf = Rf x 100; utiliza-se o hRf para evitar o uso de decimais.

MATERIAIS QUANTIDADE
Acetona 100 mL
Ácido acético 50 mL
Clorofórmio 500 mL
Éter de petróleo 100 mL
Fe(NO3)3.9H2O Nitrato férrico
40 g
nanohidratado
Iodeto de Potássio 4,0 g
Metanol 100 mL
NaOH 1g
Nitrato de bismuto 2,0 g
Solução de cloreto férrico 10 g
Sulfato de sódio 10 g
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EQUIPAMENTOS QUANTIDADE
Placas cromatográficas de
1
sílica gel (0,25 mm de espessura)
Capilar de vidro para aplicação
2
em cromatografia
Cubas de vidro 1
Nebulizadores 1
Bomba a vácuo 1

Descarte do material utilizado conforme Normas Internacionais de Segurança.

QUESTÕES NORTEADORAS

1. Um paciente foi encontrado com hipertermia, zumbido no ouvido, acidose

metabólica e alcalose respiratória. Em um teste rápido por CCD, o resultado foi
positivo para exposição a salicilatos.
Não, porque a CCD é uma técnica de triagem. Após a confirmação na triagem, deve ser
realizada uma análise por técnica confirmatória.

2. Durante a revelação, ao nebulizar o cloreto férrico, observou-se que a mancha

característica dessa revelação não foi formada. Proponha sugestões que possam
justificar e, consequentemente, corrigir essa situação.
O ferro do cloreto férrico reage com a hidroxila fenólica do salicilato, gerando cor.
Quando não há reação cromogênica, possivelmente a solução do cloreto férrico não foi
preparada adequadamente.
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3. Em uma placa de CCD podem ser aplicados e revelados mais padrões?

Sim. Dependendo das substâncias que são reveladas, pode haver vários padrões na
mesma placa de CCD.
Uma das observações relevantes nesse contexto é que a aplicação dos padrões ou das
amostras deve manter distância adequada entre os padrões, para que não haja interferência
no desenvolvimento do analito, na placa cromatográfica.

4. Fármacos de caráter ácido podem ser aplicados na mesma placa, juntamente

com os de caráter alcalino?
Não, uma vez que a extração líquido/líquido separa substâncias de caráter ácido com as
básicas.
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Disciplina: Toxicologia e Análises Toxicológicas

Título da Aula: Triagem em Urina por
Cromatografia em Camada Delgada (CCD) AULA 2
Extração Líquido/Líquido e Identificação
de Fármacos por CCD

OBJETIVO: Teste rápido como triagem da exposição do organismo a fármacos ou drogas

de abuso e extração de substâncias em material biológico.

AMOSTRA
Padrões
1. ácido salicílico

REAGENTES E SOLUÇÕES
Agentes cromogênicos:
Solução de cloreto férrico (FeCl3) 5%

Sistema solvente:
Cuba ácida: clorofórmio: acetona (9:1)
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TÉCNICA
EXTRAÇÃO
Extração de substâncias de caráter ácido e neutro
1. Colocar 10 mL da amostra (urina com ácido salicílico) em funil de separação (125 mL)
e ler o pH;
2. Ajustar o pH entre 4,0 e 5,0 por meio de solução de H2SO4 1%;
3. Extrair com 20 mL da mistura clorofórmio: éter (3:1), agitando vigorosamente o funil
por 1 minuto;
4. Deixar o funil em repouso por 5 minutos para a separação das fases;
5. Filtrar a camada orgânica sobre Na2SO4 1% anidro, previamente umedecido com a
mistura clorofórmio: éter. Recolher o extrato em béquer;
6. Repetir os itens 3 e 4 recolhendo o filtrado no mesmo béquer;
7. Evaporar o solvente à secura e reservar o resíduo (Ra= ácido);
8. Desprezar o remanescente aquoso, que ficou no funil de separação.

TÉCNICA DE IDENTIFICAÇÃO
Após a volatilização dos solventes, proceder a análise do resíduo por cromatografia em
camada delgada (CCD) nas condições previamente padronizadas.
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MATERIAIS QUANTIDADE
Acetona 100 mL
Ácido acético 50 mL
Clorofórmio 500 mL
Éter de petróleo 100 mL
Fe(NO3)3.9H2O Nitrato férrico
40 g
nonahidratado
Iodeto de Potássio 4,0 g
Metanol 100 mL
NaOH 1g
Nitrato de bismuto 2,0 g
Solução de cloreto férrico 10 g
Sulfato de sódio 10 g

EQUIPAMENTOS QUANTIDADE
Funil de separação (125 mL) 2
Bastão de vidro 1
Funil de vidro capacidade 100 mL 01
Béquer 100 mL 02
Bastão de vidro 01
Papel Universal pH 02 fitas
Béqueres 100 mL 03
Placas cromatográficas de
02
sílica gel (0,25 mm de espessura)
Capilar de vidro para aplicação
10
em cromatografia
Cubas de vidro 2
Nebulizadores 1

Descarte do material utilizado conforme Normas Internacionais de Segurança.

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QUESTÕES NORTEADORAS

1. No procedimento “Extrair com 20 mL da mistura clorofórmio: éter (3:1),” qual

é o objetivo do clorofórmio? Explique, levando em consideração a dissociação do
fármaco.
Extrair os fármacos que estão na forma molecular.

2. Quais são as características que destacam a urina, o conteúdo gástrico e o

sangue (plasma ou soro), como amostras biológicas, na toxicologia de urgência?
URINA: Amostra biológica de escolha para triagem de fármacos, quando se trata de
exposição aguda; grande volume disponível, facilidade na coleta, maior concentração na
urina que no sangue. Inalterados ou na forma de produtos de biotransformação.
SANGUE: Utilizado para controle terapêutico ou para direcionamento analítico, após
testar positivo na CCD.
CONTEÚDO GÁSTRICO: Grande quantidade obtida, os fármacos se encontram na forma
inalterada.

3. Caso haja na amostra um analito de carácter ácido, um de caráter anfótero

e outro de caráter alcalino, em qual fase do sistema heterogêneo líquido/líquido
estarão cada uma das substâncias.
A forma molecular sempre estará no solvente orgânico. Por isso é que se acidifica e
alcaliniza a amostra, para a extração líquido-líquido.

4. Faça um fluxograma expondo a dinâmica de extração líquido/líquido de

fármacos de caráter ácido, anfótero e alcalinos.
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Disciplina: Toxicologia e Análises Toxicológicas

Título da Aula: Identificação de Aflatoxina por AULA 3
Cromatografia em Camada Delgada (CCD)

OBJETIVO: Identificação de micotoxinas (aflatoxinas B1, B2, G1 e G2) presentes

em alimentos, sementes, grãos ou rações, com extração por solventes orgânicos e
Cromatografia em Camada Delgada (CCD).
Preparação da amostra – Triture ou moa, de acordo com a natureza da amostra, a fim
de que se obtenha massa homogênea, podendo utilizar liquidificador, moinho ou moedor
de carne. Passe a amostra pela peneira de 20 mesh. Homogeneize novamente e retire uma
subamostra de 30 g.
Extração e purificação – Pese 30 g da amostra previamente homogeneizada e transfira
para um frasco Erlenmeyer. Adicione cerca de 10 mL de água aquecida a 60 ºC para facilitar
a penetração do solvente orgânico nos tecidos hidrofílicos. Homogeneize com bastão de
vidro. Adicione 100 mL de clorofórmio, tampe o frasco com algodão e agite manualmente
por 30 segundos. Prossiga esta operação com agitador mecânico por mais 30 minutos.
Filtre o extrato clorofórmico em funil de vidro com papel de filtro qualitativo.
No caso de amostra de amendoim ou derivados, adicione pequena quantidade de celite*
ao funil para acelerar a filtração. Colete 50 mL do extrato em outro frasco Erlenmeyer
e evapore em banho-maria a 80 ºC até que todo o clorofórmio tenha sido eliminado.
Ressuspender o resíduo com 50 mL de metanol, transfira quantitativamente para o funil de
separação, adicione 50 mL da solução de NaCl a 4% e agite lentamente. Extraia as gorduras
e os demais interferentes com três porções de 50 mL de hexano. Descarte a fração com
hexano (superior). Recolha o extrato metanólico em béquer ou frasco Erlenmeyer.
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Transfira quantitativamente o extrato metanólico para um funil de separação limpo e

extraia as aflatoxinas com 50 mL de clorofórmio, agitando o funil de separação suavemente
por três minutos. Deixe as fases se separarem e recolha a inferior (clorofórmio) em frasco
Erlenmeyer de 250 mL. Repita a operação com mais 50 mL de clorofórmio. Recolha o total
de clorofórmio juntamente com o extrato da primeira partição e evapore em banho-maria
a 80 ºC ou rotavapor a 50 °C a 60 °C. O resíduo deve ser transferido quantitativamente
com clorofórmio para um frasco Erlenmeyer de 25 ou 50 mL e evaporado sob corrente
de nitrogênio**. Para efetuar a cromatografia em camada delgada, dissolva o resíduo em
clorofórmio em quantidade adequada, normalmente entre 200 a 500 μL e utilize banho de
ultrassom por cerca de 30 segundos para assegurar total dissolução das aflatoxinas.
Triagem das micotoxinas por cromatografia em camada delgada – Aplique em placa de
sílica gel, 5 a 10 μL da amostra e alguns pontos de cada padrão, separadamente, fazendo
sobrepor no segundo ponto do padrão 5 μL da amostra. Desenvolva o cromatograma em
cuba previamente preparada para garantir a saturação com tolueno-acetato de etila-ácido
fórmico (50:40:10). Remova a placa depois de 12 cm de desenvolvimento do solvente e
seque. Observe o cromatograma sob lâmpada de luz UV de comprimento de onda longo.
Excepcionalmente, na ausência do ácido fórmico, utilizar clorofórmio-acetona (90:10).
* Na ausência da celite, preceder a filtração mesmo sem a utilização da substância.
** O fluxo de nitrogênio é sugerido, mas não obrigatório. A volatilização do solvente
orgânico pode ocorrer por chapa de aquecimento.
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MATERIAIS QUANTIDADE
Celite
Clorofórmio 100 mL
Metanol 300 mL
Cloreto de sódio
Cloreto de potássio 2g
Hexano

EQUIPAMENTOS QUANTIDADE
Algodão 1
Agitador mecânico 1
Balão volumétrico 25 mL 1
Banho-maria ou rotavapor 1
Bastão de vidro 2
Béquer 500 mL 1
Cubeta para leitura no espectrofotômetro 2
Erlenmeyer de 25 ou 50 mL 1
Funil de separação 1
Lâmpada de luz UV de
1
comprimento de onda longo
Liquidificador, moinho ou moedor de carne 1
Papel de filtro qualitativo 2
Peneira de 20 mesh 1
Placas cromatográficas de
1
sílica gel (0,25 mm de espessura)
Rotavapor 1
Tubo de ensaio 2
Papel alumínio 1

Descarte do material utilizado conforme Normas Internacionais de Segurança.

Serviço Social

REFERÊNCIAS

ASSOCIATION OF OFFICIAL ANALYTICAL CHEMISTS. Official Methods of Analysis of

the Association of Official Analytical Chemists.15 th ed., v. 2. Arlington: A.O.A.C., 1990,
chapter 49. p. 1184-1199.
INSTITUTO ADOLFO LUTZ. Normas analíticas do Instituto Adolfo Lutz. v.1, Métodos
químicos e físicos para análise de alimentos. 2. ed. São Paulo: IMESP, 1976. p. 323-325.
PRZYBYLSKI, W. Formation of aflatoxin derivatives on thin-layer chromatographic
plates. J. Assoc. Off. Analyt. Chem., v. 58, p. 163-164, 1975.
VELASCO, J. Replacement of benzene as a solvent for aflatoxin standards. J. Am. Oil
Chem. Soc., p. 938A-940A, 1981.
STACK, M.E.; POHLAND, A.E. Colaborative study of a method for chemical confirmation
of the identity of aflatoxin. J. Assoc. Off. Analy. Chem., v. 58, p. 110-113, 1975.

QUESTÕES NORTEADORAS

1. Durante o método de extração das aflatoxinas, em um dos momentos, se

orienta: “adicione 100 mL de clorofórmio”. Explique por que esse solvente orgânico é
utilizado para essa extração e se a água fervente seria suficiente para essa extração.
Sugestão: solicitar que o(a) aluno(a) analise a estrutura química das aflatoxinas.
As aflatoxinas são lipossolúveis. Assim, são extraídas por solventes orgânicos.
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2. Observe parte do procedimento analítico: “Observe o cromatograma sob

lâmpada de luz UV de comprimento de onda longo”. Explique por que o método
solicita que a análise seja realizada nesse espectro, ou seja, no UV.
Sugestão: solicitar que o(a) aluno(a) analise a estrutura química das aflatoxinas.
As duplas ligações das aflatoxinas, quando submetidas à radiação UV, por ressonância,
fluorescem.

3. No procedimento “Recolha o total de clorofórmio juntamente com o extrato da

primeira partição e evapore em banho-maria a 80 ºC”, há risco de perda do analito
por degradação, por conta dessa elevada temperatura? Justifique sua resposta.
As aflatoxinas toleram elevadas temperaturas.
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Disciplina: Toxicologia e Análises Toxicológicas

Título da Aula: Determinação da AULA 4
Carboxihemoglobinemia

OBJETIVO: Determinar os níveis de carboxihemoglobina de amostras biológicas

para verificar se estão dentro dos limites máximos permitidos.

AMOSTRA
Sangue. Deve ser colhido no final da jornada de trabalho em vacutainer heparinizado e
conservado a 4 ºC por, no máximo, uma semana. Para os fumantes devem ser colhidas duas
amostras, antes e após a jornada de trabalho.

REAGENTES E SOLUÇÕES
ƒ Sol. Tampão pH = 6,85: KH2PO4 (fosfato monobásico de potássio)/K2HPO4 (fostato
dibásico de potássio) 0,1 M.
ƒ Sol. Hemolisante: diluir o tampão com água de 1:10. Preparar semanalmente.
ƒ Sol Diluente: dissolver 25 mg de hidrossulfito de sódio em 20 mL de sol. Tampão.
Preparar antes do uso.
Manual de Estágio

TÉCNICA
1. Em tubo de ensaio com tampa, colocar 0,1 mL de sangue (amostra) e 12 mL de
solução hemolisante. Agitar, deixar em repouso por 10 minutos.
2. Diluir 0,2 mL do hemolizado com 2,3 mL de solução diluente. Tampar.
3. Deixar a temperatura ambiente por 10 minutos. Ler a absorvâncias a 420 e 432 nm,
usando como branco a solução diluente.

CÁLCULO DA CARBOXIEMOGLOBINA
% COHb = 1 – ( AR . F1) x 100
AR ( F2 – F1 ) – F3 + 1

SENDO: AR = Abs. 420

Abs. 432

F1 = Abs. Hb 432
Abs. Hb 420

F2 = Abs. HbCO 432

Abs.HbCO 420

F3 = Abs. HbCO 420

Abs. Hb 420
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EM QUE:
AR= A 420/ A 432
F1= A Hb red 432 / A Hbred 420 (1,3330)
F2= A HbCO 432 / A Hb red 420 (0,4787)
F3= A HbCO 420 / A Hb red 432 (1,9939)

INTERPRETAÇÃO
O Índice Biológico Permitido (IBMP) é de 3,5% e o Valor de Referência (VR) é < 1%,
ambos para não fumantes.

MATERIAIS QUANTIDADE
Amostra de Sangue 2 mL
KH2PO4 3g
K2HPO4 3g
Hidrossulfito de sódio 25 mg
Água destilada 1L

EQUIPAMENTOS QUANTIDADE
Espectrofotômetro 01
Cubeta para leitura no espectrofotômetro 01
Tubo de Ensaio com tampa
03
Capacidade 10 mL
Pipeta Capacidade 5 mL 02
Vórtex para Agitação 01
Manual de Estágio

REFERÊNCIAS

BEUTLER, E & WEST. C. Simplified determination of carboxihemoglobin. Clin. Chem,

30(6):871-4. 1984.

Descarte do material utilizado conforme Normas Internacionais de Segurança.

QUESTÕES NORTEADORAS

1. Equívocos pré-analíticos, ou seja, os equívocos cometidos antes da análise

toxicológica, não é incomum. Para evitar esses equívocos prioriza-se trabalhar com
profissionais experientes e manter a equipe de analistas informada. Imaginemos
que um laboratório de análise toxicológica coletasse o sangue do trabalhador, para
análise de HbCO, no início da jornada. O que você espera desse resultado analítico?
Justifique sua resposta.
Poderia dar um falso-negativo, uma vez que não teria havido exposição ocupacional, ao
longo do dia.

2. Imagine que a solução diluente utilizada na técnica tenha tido algum problema
de qualidade. Que tipo de interferência analítica haveria, caso você identificasse
essa situação? Explique.
Não haveria a redução de elementos cromóforos e consequentemente, haveria resposta
analítica inconsistente.
Serviço Social

3. Discorra sobre o risco de intoxicação de um trabalhador que apresenta como

nível de HbCO igual a 3,0%. Ele apresenta risco de intoxicação?

QUESTÃO 4. Discorra sobre o risco de intoxicação de uma pessoa não exposta

ocupacionalmente ao CO e que apresenta como nível de HbCO igual a 3,0%. Ele
apresenta risco de intoxicação?
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Disciplina: Toxicologia e Análises Toxicológicas

Título da Aula: Determinação AULA 5
de Nitrito em Alimento

OBJETIVO: Determinar os teores de nitrito como conservante em amostra de

salsicha para verificar se estão dentro dos Limites Máximos Permitidos segundo a
Legislação Brasileira preconizados pelo Ministério da Agricultura.

AMOSTRA
Salsichas.

REAGENTES E SOLUÇÕES
Solução I
Tetraborato de sódio decahidratado
(Na2B4O7. 10 H2O).........................................................50 g
Água destilada até completar 1 L

Solução II
Ferrocianeto de potássio trihidratado
K4Fe(CN)6 . 3H2O.......................................................106 g
Água destilada até completar 1L.
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Solução III
Acetato de zinco dihidratado
Zn(CH3COO)2..................................................................220 g
Ácido acetico glacial........................................................30 mL
Água destilada até completar 1 L.

Reagente Cromogênico.
Solução de alfa-naftol: aquecer 360 mL de água destilada e 50 mL de ácido acético a
50 *C. Transferir esta solução para um frasco escuro contendo 0,25 g de ácido sulfanílico.
Agitar até dissolver, adicionar 0,20 g de alfa-naftol agitando bem. Esfriar a temperatura
ambiente e adicionar 90 mL de solução de NH4OH a 10%. O pH desta solução deverá ser
4,0 + 0,5.
Solução tampão: em 500 mL de H2O destilada adicionar 20 mL de HCl concentrado.
Agitar e adicionar 50 mL de NH4OH concentrado e diluir com água destilada até 1000 mL.
O pH obtido é de 9,6 - 9,7.
Solução padrão de nitrito: 0,25 g NaNO2 em 500 mL H2O.

PROCEDIMENTO:
Padronização
(1) Transferir alíquotas de 1, 2, 4, 8 e 16 mL da solução padrão de nitrito de sódio em 5
diferentes balões volumétricos de 100 mL; adicionar 5 mL do tampão e completar com H2O
destilada, q.s.p. 100 mL, a cada um dos balões.
(2) Transferir 10 mL de cada alíquota da solução (1) para 5 diferentes balões volumétricos
de 100 mL e completar com H2O destilada, q.s.p. 100 mL, a cada um dos balões.
Manual de Estágio

(3) Transferir 5 mL de cada uma das soluções (2) em tubos de vidro e acrescentar 10 mL
de reagente cromogênico, 5 mL de água destilada e 5 mL da solução tampão a cada um dos
diferentes tubos.
(4) Deixar em banho de H2O a 30 ºC por 30 minutos.
(5) Leitura espectrofotométrica em 474 nm, contra um branco.
Obs.: O branco se constituirá de 10 mL do reagente cromogênico em 10 mL de água e 5
mL tampão (deixar em banho de água a 30 ºC por 30 minutos).

Desproteinização
Pesar 10 g do alimento homogeneizado em um béquer de 150 mL. Adicionar 5 mL
da solução I (bórax) e cerca de 40 mL de água destilada, a temperatura acima de 70 C.
Aquecer em banho de água fervente por 15 minutos, agitando frequentemente. Deixar
esfriar a temperatura ambiente. Adicionar 2 mL da solução II (ferrocianeto de potássio) e 2
mL da solução III (acetato de zinco). Agitar vigorosamente após cada adição.
Transferir a amostra para um balão volumétrico de 100 mL. Deixar o balão em repouso
por 30 minutos a temperatura ambiente.
Completar o volume com água destilada, q.s.p. 100 mL. Agitar o conteúdo do balão
vigorosamente e filtrar em papel livre de nitritos. Determinar a concentração de nitrito
presente nesta solução.

Determinação de nitrito
Pipetar 10 mL da solução desproteinizada da amostra de alimento para um tubo de
ensaio. Adicionar 5 mL da solução tampão e 10 mL da solução de alfa-naftol.
Deixar em banho de água a 30 *C, durante 30 minutos, esfriar a temperatura ambiente:
ler em 474 nm.
Calcular o valor de nitrito presente na amostra, usando a curva padrão previamente
estabelecida.
Serviço Social

INTERPRETAÇÃO
Segundo a Portaria nº 1.004 de 11 de dezembro de 1998 da Secretaria de Vigilância
Sanitária do Ministério da Saúde, a quantidade residual máxima de nitritos e nitratos
em produtos cárneos, excetuando-se o charque brasileiro, é de 150 mg/Kg e 300 mg/Kg,
respectivamente, expressos como sal de sódio.

MATERIAIS QUANTIDADE
Acetato de zinco dihidratado -
220 g
Zn(CH3COO)2
Ácido acético 50 mL
Ácido sulfanílico 0,25 g
Ácido acetico glacial 30 mL
Água Destilada 2L
Alfa naftol 0,20 g
Amostra de salsicha 10 g
Ferrocianeto de potássio trihidratado
106 g
(K4Fe(CN)6 . 3H2O
HCl 20 mL
NaNO2 0,25 g
NH4OH 50 mL
NH4OH a 10% 90 mL
Tetraborato de sódio decahidratado
50g
(Na2B4O7. 10 H2O)
Manual de Estágio

EQUIPAMENTOS QUANTIDADE
Bageta de vidro 01
Banho de água fervente 01
Béqueres 100 mL 03
Cubeta para leitura no espectrofotômetro 01
Espectrofotômetro 01
Funil de vidro capacidade 100 mL 01
Papel de Filtro 02
Papel Universal PH 02 fitas
Pipeta Capacidade 1 mL 02
Pipeta Capacidade 10 mL 02

REFERÊNCIAS

ARAUJO, A. C. P. Determinação de nitratos e nitritos em alimentos destinados à

população infantil. (Dissertação de Mestrado) – Apresentada à Faculdade de Ciências
Farmacêuticas da Universidade de São Paulo, 1988.

LARA, W. H.; TAKAHASHI, M. Y.; SILVEIRA, N. Determinação de nitritos e nitratos em

conservas de carne. Rev. Inst. Adolfo Lutz, 38(2):161-166, 1978.

MORIE, G. P. et al. Determination of Nitrate and Nitrite in Mixture with Nitrate ion
eletrode. Ana. Clin. Acta., 60:397-403, 1972.

Descarte do material utilizado conforme Normas Internacionais de Segurança.

Serviço Social

QUESTÕES NORTEADORAS

1. Os nitritos e nitratos são substâncias químicas adicionadas intencionalmente

nos alimentos, com alguns fins, como o de realçar as propriedades organolépticas
do alimento e inibir a proliferação bacteriana.
Sob a óptica toxicológica, qual é o significado de determinar os níveis desses
sais, nos alimentos industrializados?
São responsáveis pela formação do anidrido nitroso, que leva à formação dos compostos
N-nitrosos, potencialmente carcinogênicos.

2. Pesar 10 g do alimento homogeneizado em um béquer de 150 mL. Adicionar

5 mL da solução I (bórax) e cerca de 40 mL de água destilada, a temperatura acima
de 70 ºC.
Explicar o objetivo da adição do bórax, no procedimento.
O nitrito e nitrato podem ficar ligados a proteínas da carne e consequentemente, para
serem determinados, se faz necessária a desproteinização.

3. Transferir alíquotas de 1, 2, 4, 8 e 16 mL da solução padrão de nitrito de sódio.

Qual é a concentração de nitritos em cada um desses volumes?