SEPARAO DOS PIGMENTOS DE MANJERICO

NOMES: Ayeska M. P. Barbosa e Mariana M. Fraga TURMA: QUI-3 T1 DISCIPLINA: Orgnica aplicada PROFESSORA: Rodrigo Verly

Belo Horizonte 30 de maro de 2011

Separao de pigmentos de manjerico

Relatrio apresentado para avaliao na disciplina de Orgnica Aplicada, do Curso Tcnico de Qumica do Centro Federal de Educao Tecnolgica de Minas Gerais, ministrado sob orientao do professor Rodrigo Verly.

Belo Horizonte 30 de maro de 2011

INTRODUO
A cromatografia em camada delgada a tcnica de cromatografia mais utilizada para anlises, por ser menos dispendiosa que a cromatografia em coluna e por ter uma resoluo melhor que a cromatografia em papel. Pode ser utilizada tambm na escala preparativa, no entanto, s fornece uma pequena quantidade de componentes. um mtodo simples, rpido, visual e econmico. A prtica tem como objetivo separar os pigmentos do manjerico por CCD e comparar os resultados obtidos atravs da cromatografia em papel, na prtica anterior. Sendo que nessa hortalia esto presentes as clorofilas a e b, carotenos e xantofilas.

OBJETIVOS
Separar os pigmentos presentes no manjerico por cromatografia de camada delgada (CCD) e comparar com os resultados anteriormente obtidos por cromatografia de papel.

MATERIAIS E EQUIPAMENTOS
2 placas para cromatografia em camada delgada 1 cuba cromatogrfica 1 proveta 10mL 3 pipetas de Pasteur 2 capilares 6 bqueres 50mL Manjerico

SUBSTNCIAS
Acetona Acetato de etila ter de petrleo Metanol

PROCEDIMENTOS
Testes de concentrao
1) Preparar a placa com a amostra:

Em uma placa cromatogrfica com slica, aplicar o extrato de manjerico de acordo com o desenho abaixo, sendo no primeiro ponto aplicado 5 vezes, no segundo 9 vezes e no terceiro 13 vezes.

2) Preparar o eluente:

Em uma cuba cromatogrfica, colocar 20mL de eluente sendo este composto por 76% de ter de petrleo, 10% de acetato de etila, 10% de acetona e 4% de metanol.

3) Cromatografia Colocar a placa dentro da cuba e tampar, esperando at que o eluente alcance a marca superior. Retirar a placa da cuba, revelar com iodo e observar os resultados.

Testes de decomposio
1) Preparar a placa

Em uma placa cromatogrfica com slica, aplicar o extrato de manjerico e, ao lado, o extrato decomposto foradamente, como no desenho abaixo, sendo em cada ponto 13 aplicaes.

2) Repetir o procedimento 2 anterior para preparao do eluente. 3) Repetir o procedimento 3 anterior para cromatografia.

METODOLOGIA
Prepara-se o extrato de manjerico adicionando acetona s folhas picadas em um bquer. Em seguida 20mL da fase mvel preparada e vertida na cuba cromatogrfica. Ento realizado o teste de concentrao, aplicando diferentes volumes de amostra na placa de slica (5, 9 e 13 aplicaes). A placa colocada

dentro da cuba at que o solvente atinja o limite superior, a cerca de 1 centmetro da borda. A partir dos resultados obtidos, realiza-se o teste de decomposio, aplicando na placa a amostra natural e a decomposta foradamente, na melhor concentrao. Por fim os resultados so analisados.

CLCULOS
Fator de reteno = distncia percorrida pela substncia distncia percorrida pelo solvente

RESULTADOS
Tabela de Rfs 1
Subst/ N de aplic. A B C D

15 Aplicaes 1,00 0,80 0,35 0.056

Figura 1

Tabela de Rfs 2
Subst/ N de aplicaes A B C D E F G

Decomposio natural 1,00 0,91 0,60 0,40 0,24 0,13

Decomposio forada 1,00 0,73 0,45 0,15

Figura 2

DISCUSSO
O nmero de aplicaes ideal aquele que permite uma boa visualizao de todos os componentes separados. No entanto, a quantidade de amostra no pode ser muito grande para no ocorrer a difuso da mesma. Na prtica, o melhor resultado foi obtido com 13 aplicaes. Sabe-se que no manjerico existem compostos denominados clorofilas e carotenides. Estes so diferenciados na placa atravs das cores e da diferena de polaridade. Na primeira placa foram encontradas quatro substncias, sendo duas clorofilas, duas manchas verdes, e dois carotenides (carotenos e xantofilas), duas manchas amarelas. As clorofilas so as substncias com maior fator de reteno, devido a sua maior polaridade. Estas so mais polares que os carotenides porque estes ltimos possuem a estrutura molecular mais prxima de um hidrocarboneto, enquanto as primeiras possuem nitrognio, magnsio e oxignio em suas estruturas.

A partir da diferena do fator de reteno pode-se definir qual das substncias a mais polar. A substncia com maior fator de reteno ser considerada a mais polar, j que foi a mais arrastada pelo solvente predominantemente polar. Como a clorofila b mais polar, seu fator de reteno ser o maior. E a clorofila a ser identificada como a mancha inferior.

Da mesma maneira que se diferenciaram as clorofilas, a partir dos fatores de reteno, diferenciaram-se os carotenides. As xantofilas so carotenides oxigenados e, por isso, so mais polares que os carotenos (carotenides hidrocarbonetos). Portanto, pode-se dizer que a substncia com menor Rf um caroteno. Exemplo de xantofila

Exemplo de caroteno

Na segunda placa, foram comparadas a clorofila decomposta e a normal. A clorofila se decompe Atravs do seguinte conceito pode-se explicar porque observou-se na aplicao da amostra decomposta a presena de grande quantidade de uma substncia verde oliva com Rf 1 e a quase ausncia de substancias verdes ( clorofila) quando comparamos com a aplicao da amostra natural e fresca. "O on de Mg+2 nas clorofilas facilmente eliminado por reao com cidos orgnicos provenientes do vacolo, resultando dessa reao a feofitina de cor verde oliva. "(KOBLITZ, 2008). Portanto, identificou se o reagente usado para a decomposio como um cido. Este reagente eliminou o Mg2+ das molculas de clorofila substituindo-o por tomos de hidrognio, gerando a feofitina, um composto com a cor da nova substancia encontrada (verde oliva) e com uma maior polaridade. Na aplicao natural tambm foi encontrada a substncia verde oliva, resultado da decomposio natural da clorofila, porm em uma menor concentrao. Pode-se explicar o resultado atravs do conceito: As clorofilas tendem a ser foto-oxidadas sob alta irradiao e, devido aos carotenides poderem prevenir a foto-oxidao das clorofilas, a relao entre as clorofilas e carotenides pode ser usada como um indicador potencial de perdas foto-oxidativas causadas por fortes irradiaes (HENDRY & PRICE, 1993).

Portanto, a decomposio ocorreu em menor quantidade pelo retardamento da reao devido aos carotenos, que embora presentes na decomposio forada, no foram suficientes para "proteger" a clorofila do meio cido. Observou-se que os resultados obtidos na cromatografia em camada delgada foram mais ntidos que os da cromatografia em papel devido porosidade da slica que adsorve uma maior quantidade de substncia. Alm disso, a CCD possui uma maior sensibilidade, o que permite a separao de um maior nmero de substncias.

CONCLUSO
Conclui-se que os ojetivos foram alcanados j que conseguiu-se separar os pigmentos presentes no manjerico atravs de CCD e percebeu-se que a cromatografia em camada delgada mais eficiente que a cromatografia em papel e apresenta uma melhor resoluo.

Referncias Bibliogrficas:
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