Instituto Federal do Norte de Minas Gerais (IFNMG - Salinas)

Tecnologia em Produção de Cachaça - 2° período

Docente: Profa. Cláudia Emanuele Machado Camargos

EXPERIMENTO 3:
EXTRAÇÃO DE PIGMENTOS DE PIMENTÕES E SEPARAÇÃO POR
CROMATOGRAFIA EM PAPEL

Tauany Teixeira de Almeida

João Matheus Ferreira Sena

Jean Carlos Ferreira Dos Santos

Victhor De Oliveira Sarmento

Salinas – MG
26 de Julho de 2023
1.0 Introdução

A separação cromatográfica utilizando pigmentos extraídos de produtos naturais

proporciona uma abordagem didática e interessante para a matéria de química orgânica, e
permite o acompanhamento de uma separação pela simples observação das cores dos
pigmentos possibilitando uma correlação entre a Química e o cotidiano. Essa pratica descreve
um experimento de extração e separação cromatográfica de pigmento de pimentões utilizando
materiais alternativos. O experimento permitiu ilustrar conceitos de misturas, substâncias,
solubilidade, polaridade e de funções orgânicas. Vale salientar que metodologia além de
ilustrativa e de utilizar materiais alternativos, mostrou-se bastante eficiente na separação dos
principais componentes do pigmento do pimentão vermelho, verde e amarelo.

A utilização de substâncias naturais tem sido empregada como uma importante

alternativa metodológica para o ensino de química, principalmente, aquelas relacionadas ao
emprego dos conceitos e técnicas utilizadas na química orgânica, como a cromatografia e
extração de óleos essenciais (Fonseca e Gonçalves, 2004).

Segundo Ribeiro e Nunes (2008), a cromatografia é uma técnica de separação bastante

adequada para ilustrar os conceitos de interações intermoleculares, polaridade e propriedades
de funções orgânicas, com uma abordagem ilustrativa e relevante. A cromatografia pode ser
utilizada tanto para a identificação de compostos por comparação com padrões previamente
existentes, para a purificação de compostos, separando-se as substâncias indesejáveis, como
para a separação dos componentes de uma mistura (Degani et al., 1998).

Neste sentido, diversos experimentos envolvendo ensaios cromatográficos são

descritos na literatura, uns utilizando como fase estacionária a sílica gel e alumina (Collins et
al., 1997), outros utilizando materiais alternativos como, o giz (Oliveira et al., 1998), mistura
de areia e mármore (Celeghini e Ferreira, 1998) e o açúcar comercial (Fonseca e Gonçalves,
2004), os quais favorecem a análise e separação dos princípios ativos de medicamentos (Ikan,
1991), extrato de folhas de espinafre (Fonseca e Gonçalves, 2004; Quach et al., 2004), tinta de
caneta (Bessler e Neder, 2004), extrato de flores (Okumura et al., 2002), pigmentos de
pimentões (Ribeiro e Nunes, 2008) entre outros.
2.0 Objetivos

Este experimento tem como objetivo observar a separação dos carotenoides presentes
nos pimentões por cromatografia de papel.

3.0 Parte Experimental

3.1 Materiais e Reagentes

Os materiais utilizados foram: balança, béquer (100 mL e 50 mL), espátula, bastão de

vidro, agitador, capilar de vidro, vidro de relógio, papel de filtro, tesoura, equipamento banho-
maria, pistilo de porcelana, almofariz, filtro de vidro pequeno, proveta (50 mL), bomba de
vácuo, funil de Buchner, kitasato, mangueira, placa de sílica, água destilada, sulfato de sódio,
hexano, acetona, ácido benzóico, solução eluente (5% acetona, 95% hexano).

4.0 Procedimento Experimental

Primeiramente, os corantes são extraídos para avaliar a solubilidade entre esses solutos
e solventes. Corte 30,0 g de pimenta em pequenos fragmentos e adicione a um béquer de 100
mL juntamente com 10 mL de acetona e 50 mL de hexano. Grupo 01, adicionar pimenta
vermelha, 10mL de acetona e 50 mL de hexano; grupo 02, adicionar pimenta verde, 10mL de
acetona e 50mL de hexano; grupo 03, adicionar pimenta amarela, 10mL de acetona e 50 mL
de hexano, esse processo de preparo dos pimentões para extração dos corantes e preparo do
eluente para as aulas práticas já foi elaborado pelo técnico do laboratório.

As misturas foram maceradas individualmente com pilão de porcelana e deixadas por

1 hora. Em seguida, o extrato de pimenta foi filtrado e o papel de filtro foi colocado em um
funil de Buchner próximo ao kitasato e conectado a uma bomba de vácuo para evaporar o
solvente, em seguida o anel foi anexado ao meio e as misturas foram filtradas em um funil de
vidro comum com um papel de filtro pregueado e usando um funil decantador, as fases
orgânica e aquosa do filtrado foram separadas. À porção orgânica obtida do funil de
decantação, adicionou-se 1 ponta de espátula de sulfato de sódio anidro e filtrou-se. Logo em
seguida, a amostra foi aquecida em banho-maria mantido a 70°C para reduzir o volume em até
1 ml.

A amostra foi então aplicada em uma placa de vidro de sílica (SiO2), foi marcada uma
linha reta com uma régua, aproximadamente 1 cm acima da borda e 1 cm abaixo da borda, e
uma pequena gota padronizada foi aplicada usando um capilar de vidro usado para
próximo à base da placa (cerca de 0,5 cm) do concentrado obtido de cada extrato de pimentão
amarelo, verde e vermelho respectivamente.

Pouco tempo depois, o vaso foi preparado para cromatografia. Durante a revelação do
cromatograma, o eluente foi preparado com hexano e acetona 5%, adicionado à câmara de
cromatografia e outras tiras de papel na câmara, e o béquer foi fechado com um vidro de
relógio para que a atmosfera do recipiente ficasse saturada com vapor de fase móvel.

Durante a cromatografia, o eluente foi colocado em um recipiente plástico e uma placa

de sílica foi adicionada para que pudesse absorver a fase móvel (abaixo da linha da régua). Foi
observado o tempo necessário e permitido a separação dos pigmentos. Foi tirada uma foto do
resultado final da placa de cromatografia após a separação.

Observação! O processo de preparação dos pimentões para a extração dos corantes e o

preparo do eluente para a aula prática já havia sido preparado pelo técnico.

5.0 Resultados e Discussões

Os carotenoides são pigmentos lipossolúveis responsáveis pela coloração laranja,

vermelha e amarela de vários organismos. A separação de carotenoides se deve a sua
composição química, sendo estes polares ou apolares. Nos pimentões verdes e amarelos
possuem o carotenoide criptoxantinas. E o pimentões vermelho, possuem carotenoide
capsantinas e capsorubina. A separação de pigmentos ocorre, pois apresentam diferentes
afinidades pelos diversos solventes orgânicos e pela água devido à proporção de radicais
hidrofóbicos ou hidrofílicos que cada um deles possui. O experimento da cromatografia dos
pimentões teve como resultado o extrato dos principais pigmentos dos pimentões:
criptoxantinas, capsantinas e capsorubina. Os pimentões verde e amarelo possuem
criptoxantina e apresenta uma tendência à retenção pela fase estacionária e durante o tempo
do processo de cromatografia, tendem a se distanciar moderadamente do ponto de aplicação
da amostra.

O pimentão vermelho apresenta capsantinas e a capsorubina que possuem uma maior

afinidade com a fase estacionária da cromatografia. E mostram uma tendência à retenção pela
fase estacionária e durante o tempo do processo de cromatografia, se distanciam pouco do
ponto de aplicação.
Figura 1 - Corrida cromatográfica dos extratos dos pimentões amarelo, vermelho e verde.

Analisando o cromatograma, percebe-se que os pigmentos foram separados em função

da solubilidade das moléculas e da aderência destes na placa. As moléculas com maior
solubilidade e/ou menor peso molecular (carotenos) percorreram uma maior distância na placa
do que as moléculas com menor solubilidade e/ou maior peso molecular (criptoxantinas,
capsantinas e a capsorubina). Em resumo, neste trabalho apresentamos um experimento
simples de ser efetuado no laboratório e/ou em sala de aula e com considerável subsídio para
discussões teóricas sobre interações intermoleculares, polaridade e funções orgânicas, a partir
de materiais alternativos, que é diferencial em relação a outros trabalhos.na Figura 2:

Fórmula estrutural

Fórmula estrutural

Figura 2 - Representação das fórmulas estruturais de alguns carotenóides (Ribeiro e Nunes, 2008).
 No experimento o pimentão vermelho tem mais substâncias apolares na composição e
interage melhor com o eluente pois contém mais substâncias apolares em relação ao pimentão
verde e amarelo, apresentando grupos que ficaram mais acima na placa. O pimentão verde tem
a concentração de carotenóides baixa e pouca quantidade de grupos apolares, logo, não
interage de forma significativa com o eluente, mas interage melhor com a fase fixa que é a
placa de sílica que é de natureza polar, a qual faz ligações de hidrogênio muito forte e puxa as
substâncias de natureza polar presente na composição do pimentão verde, logo, os grupos
polares ficam retidos na parte inferior da placa.

6.0 Conclusão

O experimento realizado foi focado na extração e separação por cromatografia,

permitindo uma visualização clara da separação cromatográfica dos principais pigmentos
presentes nos pimentões, como os carotenos, as criptoxantinas, a capsorubina e as capsantinas.
Além disso, o procedimento também proporcionou insights sobre as interações
intermoleculares, as polaridades e as funções orgânicas envolvidas no processo.

A técnica cromatográfica utilizada se baseia no princípio da retenção seletiva, em que a

mistura é aplicada na fase estacionária e, em seguida, a fase móvel é introduzida. A fase móvel
arrasta os diferentes componentes presentes na mistura, e devido às diversas afinidades que as
substâncias possuem com a fase estacionária, obtém-se uma separação eficiente.
7.0 Bibliografia

FONSECA, S. F.; GONÇALVES, C .C. S. Extração de pigmentos do espinafre e separação

em coluna de açúcar comercial. Química Nova na Escola, São Paulo, n. 20, p. 55-58, 2004.
RIBEIRO, N. M.; NUNES, C. R. Análise de Pigmentos de Pimentões por Cromatografia
em Papel. Química Nova na Escola, São Paulo, n. 29, p. 34-37, 2008.
Revista Brasileira de ensino Ciência e tecnologia Extração e separação cromatográfica
de pigmentos de pimentão vermelho: utilização de materiais alternativos
Disponível em Fórmula da acetona: Definição, Conceitos e Exemplos | Association
LEA (assolea.org) > Acesso em: 25 de Julho de 2023.
Disponível em: Cromatografia de Pigmentos de Pimentões - Relatório de
pesquisa - 10051994 (trabalhosgratuitos.com)
Acesso em: 22 de Julho de 2023.

Disponível em: Hexano: você conhece essa substância? - General Instruments

> Acesso em: 23 de Julho 2023.