RELATÓRIO DE ATIVIDADE LABORATORIAL

Ano Letivo 2021 / 2022

DATA TURMA Número
NOME DO ALUNO
10º C 14
Lara Viana
29/04/2022

Cromatografia de Pigmentos Fotossintéticos

Objetivos:
Os objetivos desta atividade experimental são:
 Demonstrar a presença dos diferentes pigmentos fotossintéticos;
 Interpretar uma cromatografia.
 Extrair pigmentos fotossintéticos.

Introdução:
A cromatografia é uma técnica da química analítica utilizada para a separação de substâncias e misturas, sendo
a cromatografia em papel uma das técnicas mais simples e que requerem menos instrumentos para a realização, mas
também apresenta maiores restrições na realização em termos analíticos.
O processo pelo qual o vegetal transforma energia luminosa em energia química denominado de fotossíntese é
dependente dos pigmentos, moléculas orgânicas que captam a luz.
Os pigmentos fotossintéticos que se encontram nas plantas são as clorofilas a e b, respetivamente de cor verde
intensa e verde‐amarelada, e os carotenoides que incluem os carotenos e xantofilas, respetivamente de cor laranja e
amarela.
Uma das técnicas empregadas para analisar a extração de pigmentos fotossintéticos é a cromatografia sobre
papel, que baseia‐se no princípio da absorção. O solvente sobe por capilaridade no papel e arrasta os diferentes
pigmentos ficando estes dispostos, da parte inferior para a parte superior, na seguinte ordem: clorofila b, clorofila a,
xantofilas e carotenos.
Os cloroplastos são constituintes das células eucarióticas vegetais, pois desempenham um papel muito
importante para elas, como a fotossíntese. É possível obter um extrato de pigmentos fotossintéticos das folhas
macerando essas folhas juntamente com um solvente.
Quando se introduz papel de filtro no extrato, o solvente sobe por capilaridade, transportando os pigmentos em
função do seu grau de solubilidade no solvente. Esses pigmentos vão ficando depositados no papel de filtro a diferentes
níveis por ordem crescente do seu grau de solubilidade.
Ao fim de algum tempo conseguem-se observar, de baixo para cima, bandas de diferentes cores que
correspondem aos diferentes pigmentos constituintes da clorofila.

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Material:
Material utilizado:
 Folhas de espinafre;
 Álcool;
 Almofariz e pilão;
 Funil;
 Copo que substituiu um Gobelé;
 Tupperware que substitui a Placa de Petri;
 Tesoura;
 Coador; Figura 1 | Materiais Utilizados

 Papel de Filtro.

Espécie de planta:
Espinafre é uma erva rasteira originária do centro e sudoeste da Ásia, pertencente à família das amarantáceas,
cujas folhas são comestíveis. É uma planta anual (raramente bianual), que cresce até cerca de 30 cm de altura. O
espinafre pode sobreviver durante o inverno em zonas temperadas.
É largamente produzida na Europa e nos Estados Unidos e muito popular. O espinafre apresenta folhas simples,
basais ou alternas, ovais a triangulares, maiores próximo a base da planta e menores nas extremidades.

Procedimento Experimental (Página 119 do Manual de Biologia)

1. Num almofariz, coloque as folhas de espinafre (já cortadas).
2. Adicione um pouco de álcool.
3. Triture com a ajuda do pilão.

Figura 2

4. Filtre a solução preparada para o copo com a ajuda de um funil e do coador.

Figura 4 Figura 3

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 5. Coloque a solução filtrada num tupperware e introduza o papel de filtro

Figura 5

6. Aguarde algum tempo até obter o resultado pretendido.

Registo das observações:

Figura 6

Primeiro vamos observar e fazer a respetiva legenda dos diferentes pigmentos por cromatografia:
Observou-se a separação dos pigmentos clorofilados (verde) e carotenóides (amarelo).

Xantofila
Figura 8 | Observação dos diferentes
pigmentos.

Clorofila b

Clorofila a

Figura 7 | Observação dos diferentes

pigmentos.

Na cromatografia do espinafre, observou-se alguns pigmentos: clorofila a que é o tipo mais abundante, é
encontrada em praticamente todos os organismos que realizam fotossíntese, esta possui papel fundamental no processo
de fotossíntese, atuando ativamente na produção de substâncias orgânicas; clorofila b que é encontrada em plantas,
algas verdes e euglenófitas, esta pode ser convertida em a pela ação da enzima clorofila a oxigenase; por último a
xantofila é o pigmento amarelo das células vegetais que acompanha a clorofila, sendo habitualmente oculto por ela.
Portanto, com a visualização da cor dos pigmentos por meio da cromatografia em papel, verificou se que a folha
de espinafre contém clorofilas, pois o papel apresentou coloração verde/amarelo.

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 Na imagem seguinte podemos observar as diferentes cores correspondentes a cada pigmento:

Conclusões / Discussão
Com a realização deste trabalho, não encontrei nenhuma dificuldade, logo, alcancei todos os objetivos
pretendidos definidos no início do trabalho.
Depois da realização do trabalho concluí que:
 Através da cromotografia realizada consegui observar diferentes pigmentos presentes nas células dos seres
fotossíntéticos, neste caso nas folhas de espinafre;
 Com a extração da coloração dos pigmentos fotossintéticos através do papel de filtro (processo de
cromatografia) concluímos que existem duas bases de pigmentos fotossintéticos que permitem a realização da
fotossíntese, sendo estes as Clorofilas (clorofilas: b, que apresenta uma cor verde-amarelada, e a, que
apresenta uma cor verde intensa) e os Carotenoides (xantofilas que tem uma cor amarelada).
Por fim concluo que a clorofila não é o único pigmento fotossintético presente nos cloroplastos existem
diferentes pigmentos nas células vegetais utilizados na experiência (clorofila a, b e carotenóides).

Bibliografia / Webgrafia
http://www.sapc.embrapa.br/arquivos/consorcio/spcb_anais/simposio8/34.pdf (29-04-2022 às 16:45)
https://www.fcav.unesp.br/Home/departamentos/biologia/DURVALINAMARIAM.DOSSANTOS/TEXTO-70-
identificacao_de_Pigmentos_Fotossinteticos.pdf (29-04-2022 às 17:03)
https://periodicos.unipampa.edu.br/index.php/SIEPE/article/view/85093 (30-04-2022 às14:18)
https://www.biologianet.com/botanica/pigmentos-fotossintetizantes.htm (30-04-2022 às 14:57)
https://pt.wikipedia.org/wiki/Xantofila (30-04-2022 às 15:26)
https://ctne.fct.unl.pt/pluginfile.php/16847/mod_data/content/8161/
Maria_da_Encarnacao_Martins_Braga_Diversidade_dospigmentos_fotossinteticos_professor.pdf (01-05-2022 às 15:32)
https://www.ufjf.br/fisiologiavegetal/files/2018/07/3_2-Separa%c3%a7%c3%a3o-Pigmentos-Cromatografia-em-Papel.pdf
(01-04-2022 às 16:04)
Manual Biofoco 10ºano

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