GRAZI OLIVEIRA

LARISSA FERREIRA
MICHELE EIDT
MICHELLE VISCARDI

FISIOLOGIA VEGETAL
RELATRIO DE AULAS PRTICAS
G1

Professor Srgio Augusto Loreto Bordignon

CANOAS, 2014

Introduo

O presente relatrio aborda trs aulas prticas que ocorreram no laboratrio

de Biologia do Centro Universitrio La Salle em Agosto e Setembro de 2014, sob
orientao e superviso do Dr. Professor Srgio Bordignon.
A primeira parte dos experimentos tratou sobre as relaes hdricas
(Osmose, Turgescncia e Presso de Parede), utilizando folhas de Trapoerabaroxa (Tradescantia pallida purpurea) em visualizao microscpica e pesagem de
batatas (Solanum tuberosum).J, a segunda, sobre extrao e cromatofrafia de
pigmentos fotossintticos, utilizou-se Marcela ( Achyrocline satureioides ), Ip
Roxo ( Handroanthus impetiginosus ), Hibisco ( Hibiscus rosa-sinensis L. ) e
Trapoeraba-roxa (Tradescantia pallida purpurea) novamente, para visualizao do
fenmeno fluorescente e capilaridade no papel. Por fim, na terceira e ltima,
fotomorfognese e fotoperodo (Plantas de Sol e Plantas de Sombra), foram
manuseados o Catigu (Trichilia claussenii) e o Louro Podre (Cordia ecalyculata),
para medies com rgua e observao microscpirca do mesfilo foliar.
So apresentados materiais, procedimentos e resultados dos experimentos,
assim como anexos, tabelas e introdues acerca dos assuntos vistos.

1. RELAES HDRICAS
Osmose, Turgescncia e Presso de Parede
(19.08.2014)
A gua executa papis cruciais na vida da planta, sendo que por cada grama de
matria orgnica feita ,cerca de 500 gramas de gua so absorvidas pelas razes,
transportada atravs do corpo da planta e perdidas para a atmosfera. Este lquido
representa de 80 a 95% da massa dos tecidos em crescimento, assim sendo,
portanto, o principal constituinte do protoplasma. neste ambiente aquoso que as
reaes metablicas ocorrem, com a gua sendo reagente ou produto de muitas
destas.
1.1 PLASMLISE

a condio em que o protoplasto se desprende parcialmente da parede celular,

devido sada de gua, por osmose, do vacolo, quando a clula se encontra em
um meio hipertnico, ocorrendo o seu murchamento.

1.2 Material
gua destilada
Folha de Trapoeraba-roxa (Tradescantia pallida purpurea)
Lmina
Lamnula
Microscpio
Pina e Pincel
Soluo de HCL
Soluo de sacarose 2N
1.3 Procedimentos
Foi feito um corte paradrmico destacando a epiderme inferior da folha de
Trapoeraba-Roxa; aps este foi colocado em lmina com gua destilada e lamnula
para ser visualizado no microscpio; Aps o processo foi repetido com soluo de
HCl e novamente levado para observao no microscpio.

Lmina 1 gua destilada

Observa-se um estmato com suas clulasguarda trgidas. Isto ocorre por que a gua
destilada um meio hipotnico em relao ao
interior dessas clulas.

400x

Lminas 2 e 3 Soluo de HCl

400x

Este tecido vegetal foi colocado em um meio hipertnico em relao ao interior das
clulas. Assim houve plasmlise, com o desprendimento de algumas partes da
membrana plasmtica da parede celular, em conseqncia do esvaziamento do
vacolo e murchamento das
clulas. Observa-se, acima, uma clula da epiderme murcha, e, abaixo, um
estmato com suas clulas-guarda, tambm murchas.

400x
Fotos: Michelle Viscardi

1.4 PRESSO DE PAREDE

a presso mecnica exercida pela parede celular, para o interior da clula. Quanto
mais rgida a parede (parede secundria), maior vai ser a presso exercida por ela,
limitando o aumento de volume da clula. oposta Presso de Turgor.

1.5 Material
gua destilada (H2O)
Bquer
Caule de planta da famlia Boraginaceae
Gilete
1.6 Procedimentos
Realizado um corte em cruz no caule da Boraginaceae, esta foi mantida em
um bquer com gua destilada por cerca de trinta minutos.

Figura 4 planta em corte imersa

Figura 5 Clulas da medula inchadas

Fotos: Gabriel Guimares

O caule foi colocado em um ambiente hipotnico em relao ao interior das suas

clulas, sendo possvel observar o aumento de volume do caule, em consequncia
da presso de turgor exercida pelo interior das clulas na parede celular.

1.7 OSMOSE
Difuso de gua atravs da membrana plasmtica, que semipermevel.
regulada por um Gradiente de Potencial Hdrico, sendo um processo passivo.

1.8 Material
gua destilada (H2O)
Balano de massa
Batatas (Solanum tuberosum)
Bqueres
Papel toalha
Soluo de Sacarose 2N em diferentes porcentagens
1.9 Procedimentos
Foram cortadas batatas em seis cubos de 1,5cm x 1,5 cm e estes mantidos em
soluo de H2O por um minuto. Aps, os cubos foram enxaguados em papel toalha
e pesados. Anotada a pesagem, as batatas em cubos permaneceram em solues
preparadas de H2O e diferentes porcentagens de sacarose, por trinta minutos;
depois do que foram lavadas, secadas e pesadas novamente.

Figura 6 Batatas sendo pesadas antes de colocadas na soluo de sacarose

Foto: Michele Eidt

Figura 7 Batatas em solues de sacarose.

Foto: Gabriel Guimares

1.10 Resultados
gua destilada

Sacarose 1%

Sacarose 2%

Sacarose 5%

Sacarose 10%

1 pesagem

20.835g

19.873g

20.177g

21.494g

19.001g

2 pesagem

21.405g

20.416g

20.715g

21.571g

18.215g

Tabela 1 - Resultados das pesagens dos cubos de batatas antes e aps estes serem mantidos em
solues de sacarose.

Na gua destilada e na soluo de sacarose 1% observa-se o aumento de peso dos

pedaos de batata por estes serem meios com maior potencial hdrico em relao ao
interior das batatas, ocorrendo ento a passagem de gua do meio para as clulas.
Isto tambm observado nas solues de sacarose 2% e 5%, o que no era
esperado, j que se supes que estas solues sejam mais concentradas que o
interior das clulas dos pedaos de batata, o que deveria ter ocasionado a
diminuio de peso destes, que teriam perdido gua para este meio mais
concentrado. Na soluo de sacarose 10% observa-se o j esperado, que a
diminuio do peso, em virtude da perda de gua das batatas para o meio
hipertnico.

2. EXTRAO E CROMATOGRAFIA DE PIGMENTOS FOTOSSINTTICOS

(02.09.2014)
O processo pelo qual o vegetal transforma energia luminosa em energia
qumica (matria inorgnica em orgnica) chama-se fotossntese e depende de
pigmentos (molculas orgnicas que captam a luz). De acordo com Flix (2010), os
pigmentos fotossintticos que se encontram nas plantas so denominados clorofilas
a e b, respectivamente de cor verde intensa e verde-amarelada, e os carotenides
que incluem os beta-carotenos e xantofilas, respectivamente de cor laranja e
amarela. A clorofila ocorre em todas as clulas fotossintetizadoras, e tem papel
essencial no processo de bioconverso de energia, enquanto que os outros
pigmentos so acessrios.
Uma das tcnicas utilizadas para analisar a extrao de pigmentos
fotossintticos a cromatografia sobre papel, a qual baseia-se no princpio de
absoro. O solvente sobe por capilaridade no papel e arrasta os diferentes
pigmentos, ficando estes dispostos, da parte inferior para a parte superior, na
seguinte ordem: clorofila b, clorofila a, xantofilas e carotenos.
O objetivo desta prtica foi observar a extrao de pigmentos fotossintticos
em folhas de Trapoeraba-roxa e flores de Marcela, Ip Roxo e Hibisco, com auxlio
da cromatoplaca.
2.1 Material
Acetona (CH3-CO-CH3)
gua destilada (H20)
Almofariz
Bqueres pequenos
Capilar
Cromatoplaca
ter etlico (CH2-CH2-O-CH2-CH3)
Flores de Marcela ( Achyrocline satureioides )
Flores de Ip Roxo ( Handroanthus impetiginosus )
Flores de Hibisco ( Hibiscus rosa-sinensis L. )
Folha de Trapoeraba-roxa (Tradescantia pallida purpurea)

Papel filtro
Tubos de ensaio

Figura 8 - Flores a serem picadas

Figura 9 - Solventes

Fotos : Larissa Ferreira

2.2 Procedimento
Para a extrao e separao de pigmentos fotossintticos, foram picadas as folhas e
flores, e logo, colocadas ao almofariz onde foi feita a macerao com o pistilo,
adicionando 20ml de soluo de acetona (80%), para a solubilizao dos pigmentos
fotossintticos, alm de ter etlico e gua destilada.
Em seguida os compostos foram filtrados com papel separadamente em tubos de
ensaio, resultando em um extrato o qual foi coletado com o uso do capilar e
colocado em um Ponto de Aplicao da cromatoplaca, a qual ficou submetida um
bquer contendo ter durante 10 minutos, onde os extratos foram absorvidos e os
pigmentos foram separados, obtendo-se por fim a presena de pigmentos
clorofilados e carotenoides.

Figura 10 - Flores de Ip Roxo picadas

Fotos : Larissa Ferreira

Figura 11 - Folhas de Trapieraba-Roxa e

Flores de Marcela maceradas

Figura 12 - Filtrao do composto de Ip-Roxo

Figura 13 Filtrao das spalas de Hibisco

Fotos : Larissa Ferreira

2.3 Resultados
2.3.1 Polaridade
Hexano
Clorofrmio
Acetiletila
Acetona
Metanol
Etanol
gua
Tabela 2 - Polaridade de alguns solventes

Nos tubos de ensaio, gua e acetona se misturam perfeitamente porque ambas so

substncias polares, porm, por ser pouco polar, o ter no se mistura, embora no
seja perceptvel de inicio, j que os trs solutos so transparentes.
Pigmentos no fotossitentizantes como as Antocianinas so bastante polares,
diluindo-se na soluo de gua e acetona, como pode-se observar na fase
vermelha; sendo as clorofilas e os beta-carotenos (pigmentos fotossintetizantes)
menos polares, estes diluem-se no ter, como pode-se observar na fase verde.

Figura 14 Fase verde: Pigmentos fotossintetizantes diludos em ter;

Fase vermelha: Antocianinas diludas em gua e acetona.
Foto: Aline Oliveira

2.3.2 Fenmeno da Fluorescncia

O fton, quantum de energia eletromagntica (luz), ao ser absorvido pela molcula

de uma substncia, excita seus eltrons, fazendo-os saltar para nveis energticos
superiores. Assim, a molcula ativada transforma o excesso de energia em
movimento, chocando-se com as vizinhas. Dessa forma, o efeito inicial da radiao
incidente se propaga em todas as direes. Em certos casos, esse excesso de
energia tambm emitido sob forma de radiao, geralmente com freqncia
inferior, quando o eltron retorna a seu nvel energtico original, o que d origem
fluorescncia.

Figura 15 Spalas de hibisco maceradas, filtradas e diludas em acetona sob luz ultravioleta
(360mm), onde o espectro vermelho da clorofila refletido.
Foto: Larissa Ferreira

2.3.3 Cromatoplaca

A clorofila presente no papel como uma faixa verde escuro um pigmento menos
polar, portanto, corre devagar no papel e, de acordo com Magalhes (1985) a
distribuio da clorofila no cloroplasto pode ser avaliada atravs do conhecimento da
estrutura da molcula e o seu comportamento quando associada s membranas de
natureza lipoprotica. As camadas lipdicas e proticas que compem as
membranas, hidrofbicas e hidroflicas, respectivamente, interagem com a molcula
de clorofila de modo que a regio polar, representada pelo anel de porfirina e que
contm o tomo de magnsio com carga positiva, tem afinidade pela gua e se
orienta na direo da camada de protena. A regio no polar, composta pelo fitol,
fica localizada na regio hidrofbica da camada de lipdio. Por outro lado, os
pigmentos carotenides (amarelados) so pigmentos apolares, mais rpidos e
intensos. Portanto, com a visualizao da cor dos pigmentos por meio da
cromatografia em papel, verificou-se que a folha de Trapoeraba-Roxa contm
clorofilas (havendo migrao de pigmentos) e Antocianina (sem migrao), enquanto
que a folha de Marcela apontou presena de Flavonis (migrao de cumarina e
clorofila), e por fim as ptalas de Hibisco apresentaram Antocianina (sem migrao)
e as spalas, pednculo e ovrios da planta, demonstraram presena de Clorofila e
Caroteno (com migrao).

Figura 16 Cromatoplaca com amostras dos extratos, representando (da esquerda para direita,
clorofila b, clorofila a, xantofilas e carotenos.
Foto: Aline Oliveira

3. FOTOMORFOGNESE e FOTOPERODO
Plantas de Sol e Plantas de Sombra
(23.09.2014)

Durante o ciclo de vida vegetal, diversas respostas, que conferem enormes

vantagens no estabelecimento e na sobrevivncia da planta, tais como germinao
de sementes, inibio do alongamento caulinar, sntese de clorofila e antocianinas,
expanso foliar, florao e tuberizao, esto envolvidas diretamente com a durao
e a qualidade da iluminao. O processo pelo qual a luz regula o desenvolvimento
das plantas denominado fotomorfognese (Kendrick & Kronenberg 1994).
A periodicidade regular entre luz e escuro no desenvolvimento da planta
conhecida como fotoperiodismo. O efeito do fotoperodo na florao o aspecto
mais evidente da presena ou ausncia da luz sobre as mudanas dos padres de
crescimento durante o ciclo de vida das angiospermas.
Este experimento teve como objetivo comparar comprimento e largura das
folhas da mesma espcie, separando as espcies crescidas sob luz e as que se
desenvolvem no escuro, chamadas de folha de sol e folha de sombra,
respectivamente.
3.1 Material
10 Folhas de sol e 10 Folhas de Sombra de Catigu (Trichilia claussenii);
10 Folhas de sol e 10 Folhas de Sombra de Louro Podre (Cordia ecalyculata);
gua destilada (H2O);
Azul de Metileno (0,5 % e 10%);
Isopor;
Lmina de barbear
Lminas;
Lamnulas;
Pincel;
Placa de Petri;
Rgua;

Figura 17 e 18 Materiais utilizados

Fotos:Gabriel Guimares

3.2 Procedimentos
3.3. Mdias de comprimento e largura de Folhas de Sol e Folhas de Sombra

Foram retiradas dez folhas dos ramos de cada amostra, as quais foram
medidas com rgua, para obteno do seu comprimento, no fololo central e para
largura, no meio da folha em sentido horizontal. Calculadas as mdias de medidas e
anotados os resultados das folhas de sol e sombra de cada espcie, foi comparado
seu desenvolvimento.

Figura 19 - Cordia ecalyculata (Louro podre)

Folhas de Sombra

Figura 20 - Cordia ecalyculata (Louro podre)

Folhas de Sol

Figura 21 - Trichilia claussenii ( Catigu )

Folhas de Sombra

Figura 22 - Trichilia claussenii ( Catigu )

Folhas de Sol

3.3.1 Resultados
Cordis ecalyculata - Sol
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10

Comprimento
8,5 cm
7,5 cm
7,9 cm
7,6 cm
7,1 cm
6,7cm
7,5cm
6,8cm
5,8cm
5,0cm

Largura
2 cm
2,4 cm
1,8 cm
2,3 cm
1,6 cm
1,5 cm
2 cm
1,5 cm
2 cm
1,7 cm

Cordis ecalyculata - Sombra

1
2
3
4
5
6
7
8
9
10

Comprimento
12,8 cm
12,5cm
11,5 cm
11,6 cm
10,5 cm
13,1 cm
11,4 cm
10,8 cm
10,2 cm
9 cm

Largura
4 cm
3 cm
3 cm
3 cm
3 cm
3,2 cm
3 cm
3 cm
2,7 cm
2,5 cm

Tabela 3 - Medies de Louro Podre (Cordis ecalyculata)

Trichilia claussenii - Sol

1
2
3
4
5
6
7
8
9
10

Comprimento
15,5 cm
14 cm
13 cm
14 cm
13,8 cm
12 cm
13,8 cm
14 cm
15 cm
12,4 cm

Largura
2,4 cm
2,8 cm
2,3 cm
2,6 cm
2,4 cm
2,1 cm
2,8 cm
2,8 cm
3 cm
2,5 cm

Trichilia claussenii - Sombra

1
2
3
4
5
6
7
8
9
10

Comprimento
18,4 cm
16,9 cm
17,4 cm
15,9 cm
15,8 cm
20,2 cm
23,9 cm
17,4 cm
18,3 cm
22,7 cm

Largura
3,6 cm
3,5 cm
3,4 cm
3,1 cm
3 cm
4 cm
4,1 cm
3,4 cm
3,4 cm
4 cm

Tabela 4 - Medies de Catigu (Trichilia claussenii )

Com os devidos resultados acima, observa-se que as folhas de sol tem menor
desenvolvimento que as folhas de sombra, em ambas espcies, que explica-se
segundo a morfognese.
Em comparao com as folhas de sol, as folhas de sombra so maiores em
rea e menos espessas, possuem mais clorofila por unidade de massa, apresentam
menos protinas (incluindo o Rubisco) nos cloroplastos, alm de terem uma maior
quantidade de complexos coletores de luz, o que permite absorver e utilizar
praticamente toda a luz que atinge a folha.

3.4 Observao de clulas do mesfilo foliar de sol e de sombra

Foi realizado corte transversal nas folhas de sol e de sombra de Cordia

ecalyculata (Louro podre) e a este adicionado gua destilada e azul de metileno em
duas porcentagens (0,5 % e 10%), sendo colocado na lmina e coberto com
lamnula para observao ao miscroscpio da espessura do mesfilo foliar.

100x
Figuras 23 - Corte de Folha de Sombra de Cordia ecalyculata (Louro podre)

100x
Figura 24 - Corte de Folha de Sol de Cordia ecalyculata (Louro podre)

400x
Figura 25 - Corte de Folha de Sol de Cordia ecalyculata (Louro podre)
Fotos: Gabriel Guimares

3.4.1 Resultados
Verificou-se que as folhas que esto expostas ao sol apresentam maior espessura,
com mais camadas de clulas compondo o mesfilo foliar, sendo duas camadas
deste de parnquima palidico e aproximadamente seis de parnquima lacunoso.

Concluso
O estudo apresentado foi de fundamental importncia, j que atravs dos
materiais examinados e experimentos praticados, foi possvel verificar como ocorre o
processo das relaos hdricas nas clulas vegetais, a extrao e cromatofrafia
de pigmentos fotossintticos e a fotomorfognese e fotoperodo, agregando
conhecimentos sobre plasmlise, osmose, presso de parede, turgidez, polaridade,
capilaridade, fluorescncia e como comportam-se e desenvolvem-se folhas de sol e
sombra.
Ao longo das aulas, foi possvel conhecer mais a respeito do funcionamento
fisiolgico vegetal, alm de avaliar detalhadamente estruturas comuns e importantes
para a flora.

REFERNCIAS

KERBAUY, Gilberto B. Fisiologia vegetal. 2 ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan,

2012.

SUTCLIFFE, James F. As plantas e a gua. So Paulo: EPU, 1980. 126 p. (Temas

de biologia ;v.23)

RAVEN, Peter H.; EVERT, Ray F.; EICHHORN, Susan E. Biologia vegetal. 7. ed. Rio
de Janeiro: Guanabara Koogan, 2007.

TAIZ, Lincoln; ZEIGER, Eduardo. Fisiologia vegetal. 3. ed. Porto Alegre: Artmed,
2004.

MAJEROWICZ, Nidia; FRANA, Marcel G. C.; PERES, Lzaro E. P.; MEDICI,

Leonardo O.; FIGUEIREDO, Srgio A. Fisiologia Vegetal Curso Prtico, Rio de
Janeiro: mbito Cultural Edies LTDA., 2003

FLIX, A. A. F. Extrao e separao de pigmentos fotossintticos - Protocolo

experimental. Biologia e Geologia (ano 1), julho de 2010.

CARVALHO, Rogrio F.; PERES, Lzaro E.P. Fotomorfognese. Escola Superior

de Agricultura Luiz de Queiroz. Disponvel em :
<http://www.pucrs.br/fabio/fisiovegetal/fitocromo.pdf>. Acesso em : 26, set. 2014.