BacteriologiaProvaI

Morfologia:EstruturaF
sicaeQu
micadace
lulaprocario
tica

Apesardesuacomplexidadeevariedade,todasasclulasvivaspodemserclassificadas
emdoisgrupos,procariticaseeucariticas:

ClulaProcaritica
Paredecelularcompeptdeoglicana
CromossomocircularePlasmdeos
Nopossuemorganelasmembranosas
Tamanhomenor(amaioriadas
bactriasvariade0,2a2,0mde
dimetroede2a8mdecomprimento)
DNAnoassociadoahistonas
Reproduoassexuada(divisobinria)
ClulaEucaritica
Podeounoterparedecelular(masno
compeptdeoglicana)
Ncleoorganizado
OrganelasMembranosas
Tamanhomaior
DNAassociadoahistonas
Reproduosexuadae/ouassexuada
(variadeacordocomaespcie)

Tamanho,forma,earranjodasce
lulasbacterianas:
Taiscaractersticasajudamaidentificarabactria.

1.Tamanho:
Asbactriaspossuemtamanhosmuitovariveis0,1m600moumais.Asbactrias
possuemumtamanhomaiordoqueosvrus.

2.Forma:
Cocosformaesfrica
BaciloFormadebasto
Espiraiscomumaoumaiscurvaturas

3.Arranjo:
Asbactriaspodemapresentamdiversosarranjos.
Cocos: Quando os cocos de dividem as clulas podem permanecer unidas umas s
outras,empares(diplococos),cadeias(enterococos),ttrades,cubosoucachos.
 Bacilos: sozinhos (bacilos simples), diplobacilos (2), spreptobacilos (cadeia)
,cocobacilos(2juntosmaisabaulados),entreoutras.
Espirais: Tem em 3 tipos: vibrio (em forma de basto curvado); espirilo ( forma
helicoidal rgida); espiroqueta (forma helicoidal flexvel)> Se encontram sempre
sozinhos,notemarranjos.

A maior parte das bactricas so monofrmica( tem uma nica forma celular), mas o
Rizhobium um exemplo de bactria pleomrfica, ou seja, que pode ser encontrado
emmaisdeumaformacelular.

As caractersticas citadas acima ajudam no reconhecimento de uma bactria, porm

parachegaraumarespostaconclusivanecessrioqueserealizeoutrosteste.

Cocos
Quandooscocosdedividemasclulaspodempermanecerunidasumassoutras,em
pares(diplococos),cadeias(enterococos),ttrades,cubosoucachos.


Bacilos
sozinhos,diplobacilos(2),spreptobacilos(cadeia),cocobacilos(2juntosmais
abaulados),entreoutras.

Espirais
Existem3tipos:vibrio(emformadebastocurvado);espirilo(formadehelicoidal
rgida);espiroqueta(formahelicoidalflexvel)>Seencontramsempresozinhos,no

temarranjos.

Amaiorpartedasbactricassomonofrmicas(temumanicaformacelular),mas
Rizhobiumumexemplodebactriapleomrfica(maisdeumaformacelular).

Ascaractersticascitadasacimaajudamnoreconhecimentodeumabactria,porm
parachegaraumarespostaconclusivanecessrioqueserealizeoutrosteste.

Estruturadace
lulaprocario
tica
Aseguirserodiscutidasestruturastpicasencontradasnasbactrias.Algumasdestas
estruturascontribuemparaavirulnciadabactriaetmumpapelimportantena
identificaodestas,almdeseremalvosdeagentesantibacterianos.


Glicoca
lice
o termo geral para a substncia que circunda a clula procaritca. O glicoclise
composto por polissacardeos, polipeptdeos, ou ambos, e envolvem a clula
bacteriana.Eleproduzidodentrodaclulaesecretadoparaasuperfcie.

Quando o glicoclice est firmemente aderido a parede e a camada que o compem

est organizada chamado de cpsula, quando no chamado de camada mucoide
camadaviscosa(biofilme).

A Cpsula contribui na virulncia da bactria, pois impede a fagocitose desta por

macrfagos e poliformonucleares. Ex: Streptococcus pneumoniae causa pneumonia
quando suas clulas so envoltas por uma cpsula; sem cpsula, so rapidamente
fagocitados.

Um glicoclice que auxilia as clulas em um biofilme a se fixarem em seu alvoeumas

as outras chamado de SUBSTNCIA POLIMRICA ESTRACELULAR (SPE). Est
responsvel pela proteo das clulas dentro do glicoclice , facilita a comunicao
entreasclulasepermiteasobreivnciacelularpelafixaoavriosambiente.

Bioilme: aderncia superfcie e proteo da bactria (um exemplo a placa

dentria). Dificultamuitoaaodosantibiticos.Obiofilmeatuanaadernciapois
um reservatrio de gua e nutrientes, logo, aumenta a capacidade invasiva de
bactriaspatognicaseaumentamaresistnciamicrobianaabiocidas.
Exdebactrias:streptococcusmutansimportanteagentecausadordacrie,aderese
superfciedosdentesatravsdobiofilme.
RizhobiumbactriafixadoradenitrognioligaseatravsdaSPEemrazes.

**OBS:Obiofilmeapresentaumgraneproblemanareadasade.

Ca
psula
Contribuinavirulnciapoisimpedeafagocitosepormacrfagosepoliformonucleares.

Flagelos(na
oobrigato
rio)
Asclulasprocariticasquenopossemflagelossochamadasdeatrqueas.
Os flagelos tm a funo de movimentao, podendo variar a velocidadeedireode
rotao do flagelo. Eles possuem vrias formas, e podem ser peritrquios (por toda a
superfcie) ou polares (em um ou ambos lados da clula), os polares se dividem em:
Monotrqueo( 1 flagelo em 1 polo); lofotrqueos (um tufo de flagelos naextremidade
daclula);anfitrquio(flagelosemambasasextremidades)

Oflageloconstituidoportrsregies:f ilamento,ganchoecorpobasal.
O filamento corresponde a longa regio mais externa, composto por protenas
flagelina. O filamento esta aderido a um gancho e a terceira poro, o corpo basal,
ancoraoflageloparedecelularemembranaplamtica.
O filamento pode ser reconhecido por
clulasdosistemaimune(desvantagem).

Bactrias que possuem flagelo so

mveis.

FimbriasePili(na
oobrigato
rio)
So estruturas semelhantes a pelos, porm mais curtos, mais finos e retos do que os
flagelos,soutilizadasparaadernciaoufixao,etransfernciadeDNA.

Soutilizadasparaadernciaoufixao.
FIMBRIAS: pode ocorrer nos plos das clulas bacterianas ou podem estar
homogeneamente distribudas em toda a superfcie. Tm a funo de aderncia
(podemseaderirumassoutrasformaodobiofilme).

PILI: geralmente so mais longas queasfmbrias,eexistemapenas1ou2porclulas,

elas interligam 2 bactrias paraatransfernciadeDNAdeumaclulaparaoutrapili
sexual. Neste processo o pilus de conjugao de uma bactria chamada clula F+
conectase ao receptor na superfcie de outra bactria de sua prpria espcie ou de
espcie diferente. As duas clulas fazem contato fsico, e o DNA da clula F+
transferido para aoutraclula.ODNAcompartilhadopodeadicionarumanovafuno
clula receptor, como resistncia a um antibiticoouahabilidadededegradaroseu
meiocommaiseficincia.

Paredecelular(Obrigato
rio)
A parede celular de uma clula bacteriana uma estrutura complexa, semirrgida,
responsvel pela forma da clula. Sua principal funo previnir arupturadasclulas
bacterianas quando a presso da gua dentro da clula maior doquefora.Elaserve
tambm como ponto de ancoragem para os flagelos. Est presente em todas as
bactrias,comexceodamycobactrias.
Muitos antibiticos atuam na parede celular. Porm a composio da parede celular
variaentreasbactrias(bactriagrampositivaegramnegativa).

Composio:
A parede celular bacteriana composta por uma rede de macromolculas
denominadas peptdeoglicana, que pode estar presente isoladamente ou em
combinao com outrassubstncias.Apeptdeoglicanaformadaporumdissacardeo
composto por Nacetilglicosamina NAG e cido N acetilmurmico NAM e pode estar
associadaaoutrospolipeptdeos.

NAG e NAM so ligadas em fileiras de 1065 acares para formar o esqueleto do
peptdeoglicano.
Fileiras adjacentes so ligadas por polipeptdeos (cadeia lateral com 4 aminocidos
ligadosaNAM).Ascadeiaslateraissoligadasporumapontecruzadapeptdica.

ParedescelularesdeBacte
riasGRAMPOSITIVAEGRAMNEGATIVA

GRAM POSITIVA: Apresentam muitas camadas de peptdeoglicanos formando uma
estrutura espessa e rgida. Elas contm adicionalmente cido teicico que ligam e
regulam o movimento de ctions para dentro e para fora da clula; tambm atua na
especificidadeantignica.
*Osantibiticosqueatuamnapeptdeoglicanaatuamfortementenestasbactrias.

GRAM NEGATIVA: Estas bactrias possuem poucas camadas de peptdeoglicano e

umamembranaexterna.
A membrana externa possui lipoprotenas, porinas, lipopolisacardeos (LPS), e
fosfolipdeos.
As bactrias com parede gram negativa, nocontmcidoteiicoemaissusceptvel
quebramecnicadevidoabaixaquantidadedepeptidioglicana.

Devido presena de LPS (lipopolisacardeo), estas basctrias gram negativas tem

maior chance de causar um choquespticoemumindivduo.IssoocorreporqueoLPS
possui um endotoxina em suaestruturaqueseliberadapoderomperaparedecelular,
provocandoumarespostaimuneintensaepodendolevaraochoquesptico.


Coloraa
odeGRAM:

1 em um esfregao fixado pelo calor recoberto com um corante bsico prpura,

geralmenteocristalvioleta(penetramempeptdeoglicano).coloraoprimria.

2Utilizarmordente(soluodeiodoutilizamoslugol)queformacomplexosmaiores
CVI(cristaisvioleta+iodo)emaranhadosnapeptideoglicana.

3 descoramos com lcool cidos que desestabiliza a membrana externa do gram

negativo e devido as poucas camadas de peptdeoglicano dessas, consegue retirar os
complexos dela, ( mas no retiramdagram+).Comissoosgramnegativovoltamaser
incolorenquantoospositivoscontinuamcorvioleta.
4 Utilizase safranina (ou fuccina) contra corante que ir corar ento os gram
negativosdevermelho.

**As bactrias gram positivas tem uma camada mais espessa de peptdeoglicana do
queasdegramnegativas,oquedificultaaretiradadocomplexoCVIpelolcool.

Explicaopassoapasso:
Ocristalvioleta,ocoranteprimrio,coraasclulasgrampositivasegramnegativasde
prpura, pois, penetra no citoplasma de ambos os tipos celulares. Quando o lugol,
soluo iodoiodetada (o mordente) aplicado, forma cristais com o corante que so
muito grandes para escapar pela parede celular. A aplicao de lcool desidrata a
peptdeoglicana das clulas grampositivas para tornla mais impermevel ao cristal
violetaiodo. O efeito nas clulas gramnegativas bem diferente; o lcool dissolve a
membrana externa das clulas gramnegativas, deixando tambm pequenos buracos
na fina camada de peptdeoglicana, pelos quaisocristalvioletaiodosedifunde.Como
as bactrias gramnegativas ficam incolores aps a lavagem com lcool, a adio de
safranina (contracorante) torna as clulas corderosa. A safranina fornece cor
contrastante colorao primaria (cristalvioleta). Embora as clulas grampositivas e
gramnegativas absorvam a safranina, a colorao rosa da safranina mascaradapelo
coranteroxoescuropreviamenteabsorvidopelasclulasgrampositivas.

MembranaPlasta
tica(Obrigato
rio):
A membrana plasmtica uma estrutura fina situada no interior da parede celular,
revestindo o citoplasma da clula. Ela composta de fosfolipdeos e protenas. a
membranaqueseparaomeiointernodoexterno.
As protenas podem estar arranjadas na membrana de diversas maneiras. As
protenas perifricas ficam na superfcie mais interna ou maisexternadamembranae
podemservircomoenzimasquecatalizamreaesqumicas.
As protenas integrais, no entanto penetram completamentenamembranaepodem
formarcanaisdeentradaesadadesubstncia.
A membrana apresenta um modelo de mosaico fluido devido movimentao dos
fosfolipdeos e da protenas. Uma diferena entre asclulaseucariotaseprocariotas
que as primeiras contem na membrana plasmtica carboidratos e esteris, que esto
ausentesnassegundas.

Funo: permeabilidade seletiva, e stios de enzimas capazes de catalisar reaes

qumicas que degradam nutrientes e produzem ATP, stios e diversas enzimas e
protenasdetransporteestiodereceptorescelularesedesistemassensoriais..

Otransporteatravsdasmembranaspodeserativooupassivo.

Transportepassivo:NOhgastodeenergia(ATP)
difuso simples: molculas ou ons passam de uma rea de alta concentrao para
umadebaixaconcentrao.
difusofacilitada:molculapassacomoauxiliodeumaprotenacarregadora.
Osmose: movimento de solvente de uma rea de baixa concentrao para outra de
altaconcentrao.Issoocorreatravsdeumamembranasemipermevel.

ProcessosAtivos:H gastodeenergia(ATP).
transporte ativo: molcula ou on passa com ajuda deumaprotenacarregadoracom
gastodeATP.
translocao de grupo: exclusiva de bactrias, a substncia quimicamente alterada
parapassarpelamembrana.

Citoplasma:(obrigato
rio)
composto de + 80% de gua, e contm tambm protenas (enzimas), carboidratos,
lipdeoseonsinorgnicos.

A
reaNuclearounucleo
ide:(obrigato
rio)
O nucleide normalmente contm uma nica molcula longa e contnua de DNA de
dupla fita arranjado de forma circular, denominado cromossomo bacteriano. O
nucleoide no circundado por carioteca (envelope nuclear), logo, fica disperso pelo
citoplasma.

Plasm
deo:(Obrigato
rio)
Alm do cromossomo bacteriano, as bactrias frequentemente contm pequenas
molculasdeDNAdefitadupla,circulares,denominadasplasmdeos.
Essas molculas so elementos genticos estracromossmicos; isto , els no esto
conectadas aocromossomobacterianoprincipalesereplicamindependentementedo
DNAcromossmico(elescontemde5a100genes).
Podecontergenesderesistnciaaantibiticos,egenesdeproduodetoxinas.
Muitoutilizadonabiotecnologia.
Podemsertransferidosdeumabactriaparaoutra.

Ribossomo:(Obrigato
rio)
Responsvelpelasntesedeprotenas.

Incluso
es:(Na
oe
obrigato
rio)
Grnulos e outras incluses funcionam como depsito de reservas no citoplasma de
clulasprocariticas(podeserdeenxofrepolissacardeos,fosfatoinorgnico).

Endosporo:(Na
oObrigato
rio)
Quando os nutrientes essenciais se esgotam, certas bactrias forma clulas
especializadasderepousodenominadasendsporos.
Presenteempoucasbactrias,apenasgram+
So clulas altamente durveis, desidratados, resistentes ao calor, com paredes
espessas.
Soformadosporumprocessoconhecidocomoesporulao.
Amaiorpartedocitoplasmaeliminadaquandosecompletaaesporognese.
NOPROCESSODEREPRODUO.
aclulabacterianaemumaformacapazderesistiracondiesadversas.
 resistente a falta de gua, calor extremo, radiao, exposio a muitos produtos
qumicos.Elesgerminamquandoreaquecidosecolocadosemummeionutriente.
resistente a falta de gua, calor extremo, radiao, exposio a muitos produtos
qumicos.

MetabolismoBacteriano:
(conjuntodereaesanablicasecatablicasqueajudamabactriaamontarsuaclula)

FisiologiaAssimilaoreaesanablicas
BioqumicaDegradaoreaescatablicas

Fisiologia
Padronutricional:

Classiicaa
o
*fontedeenergia fotofrficos
Quimiotrficos

*fontedecarbonoautotrficos/litotrficose
heterotrficos/organotrficos

Para as bactrias autotrficas a nica fonte decarbonooCO2ouoonbicarbonatoa

partir dos quaisconseguemsintetizartodososcompostosorgnicosquenecessitam.A
maioria das bactrias Heterotrfica exigindo fontes orgnicas de carbono, sendo as
fontesmaiscomuns:carboidratos,aminocidos,lipdios,alcois,etc.

Capacidadedes
ntese

(UtilizamluzcomoFOTO autotrfica(fontedeC:CO2)
fontedeenergia) Heterotrofica(fontedeC:compostosorgnicos)

(Utilizamsubstncias
QumicascomofonteQUIMIO Autotrfico(fontedeC:CO2)
Deenergia.) Heterotrfico(fontedecarbono:compostosorgnicos)

*Assubstnciaqumicasditasacimapodemsercompostosorgnicosouinorgnicos.

Qumioheterotrfico:aceptorfinaldeeltrons:O2esemO2.
Fotoautotfico:podemounoutilizarH2OparareduzirCO2.

Nutria
o
Alm de carbono e nitrognio, asbactriasexigemumasriedeoutroselementossob
a forma decompostosinorgnicos.Algunssonecessriosemquantidadesapreciveis
(macronutrientes),enquantooutros,bastamtraos(micronutrientes).

1.Macronutrientes
(C,H,O,N,S,P) (P) importante no metabolismo energtico e na sntese de cidos
nuclicos; (S) necessrio porfazerpartedeaminocidoscomocistinaecistena,epara
sntesedevitaminas.

Carbono:50%dopesoseco;adquiridoporcompostoorgnicoouCO2.
Nitrognio: 15% do peso seco; adquirido de protenas; ons de amnia usados para
sintetizaraminocidos.

Enxofre:4%dopesoseco;utilizadoparasintetizarprotenascomS.
Fontes:onssulfato,aminocioscomS,sultifodeH.

Fsforo:4%dopesoseco;
Utilizadonasntesedecidonuclico,ATPefosfolipideosdemembrana.
Fontes:onsfosfato

Oxignio:Essencialparaometabolismodebactriasaerbicas.
letalparabactriasanaerbicas.

2.Micronutrientes (K, Ca, Mg) so cofatores para enzimas.(K)ativadordeenzimas

e regulador da presso osmtica; (Mg) ativador de enzimas extracelulares e fator
importantenasnteseeuniodasfraesribossmicas.

3.Elementostrao(Cu,Zn,Fe)soimportantesparaofuncionamentoenzimtico

4.Fatores de crecimento compostos orgnicos indispensveis a um determinado

microorganismo, mas que ele no consegue sintetizar. Tais fatores portanto, devem
estarpresentesnomeioparaqueomicroorganismosedesenvolva.
Quando um microorganismo exige um determinado fator, seu crecimento ser
limitadopelaquandidadedofatorpresentenomeio.

5.meiosdecultura
Nas condies artificiais, o crescimento debactriasconseguidopelasemeaduradas
mesmas em meios de cultura. Como as bactrias crescem em meios diferentes,
importante conhecer a fisiologia dabactriaeescolheromelhormeioparacultival.
Os meios deculturasodivididosem2grupos,meiossintticos(sabeseexatamentea
composiodomeio)emeioscomplexos.

Consistncia:lquido,slido(12%Agar)ousemislido(0,5%Agar).
Composiodosmeios:
mnimo(pobre/definido)Sabeseaexatacomposioqumicadomeio
Rico(complexo)Nosesabeaexatacomposiodomeio(temfatordecrecimento)
EnriquecedorSelquidoenriquecedor
Seletivo indicador, diferencial, indicador diferencial, e seletivo enriquecedor. o
meioquepermiteodesenvolvimentodealgunsmicroorganismoseinibedeoutros.

*indicador:comindicadordepH
*diferencial:diferenciaascolnias

Atualmentequasetodomeioindicadordiferencial,masnemtododiferencialusado
comoindicadordepH(podehaveroutrosparmetrosparadiferenciarascolnias).

Crescimentodasbacte
rias:Fatoresqueinterferem

Temperatura
Cada bactria tem um timo de temperatura para a absoro de nutrientes que est
intimamenterelacionadoaocrescimentoedesenvolvimentodasculturas.
Mesfilas: temperatura tima em 37 C (temperatura corporal) trabalharemos mais
comesta.
Temperaturatima Bactria
4C Psicrfilos
15C Psicotrficos
37C Mesfilos
60C Termfilos
90C TermfilosExtremos

PH
OsvaloresdepHemtornode7.0soosmaisadequadosparaabsorodos
nutrientes,emboraalgumasbactriasadaptadasvivammelhoresemoutrosmeios.

Acidfilos pH<6
Neutrfilos pH6a8
Alcalfilos pH>8


Pressa oOsmo tica

Mudananapressoosmticapodelevaraplasmlise,masexistembactrias
resistentes,soaschamadasHalfilas.
Portanto,a[]domeioummododefazercomquesasbactriashalfilas
sobrevivamnaquelemeio.

Tensa odeOxige nio

AsbactriastmcomportamentosdiferentesnapresenadeO2 livre,podemse
comportarde5formas:
A Aerbicosestritos:somentecrescimentoaerbico,necessidadedeoxignio.(
emumtuboascolniasdebactriascrescemnaregiodasuperfciedevidoao

contatocomoar).


B AnaerbicosFacultativos:crescimentoaerbicoeanaerbico;aumentodo
crescimentonapresenadeoxignio.(crescemaisnasuperfcie,porem
encontrasecolniasportodootubo)

C Anaerbicosestritos:somentecrescimentoanaerbico;nohcrescimentona
presenadeoxignio.

D AnaerbicosAerotolerantes:Somentecrescimentoanaerbico;ocrescimento
continuanapresenadeoxignio.

E Microaerfilos:somentecrecimentoaerbico;necessidadedeoxignioem
baixasconcentraes(tambmprecisadeCO2).

FormastxicasdoOxignio:

OxignioSinglet
muitoreativo;estpresenteemclulasfagocitrias.

Superoxidodeoxignio:(O2)
Enzimasuperxidoredutase.

nionPerxido:(O22)
Enzimas:catalase:2H2O22H2O+O2
Peroxidase:H2O2+
2H 2H2O
+

Radicalhidroxila

Reprodua
odasBacterias:

Assexuada:fissobinria/cissiparidade
Sexuada:conjugao(pili)

Curvadecrescimentobacteriano

Mtodosdequantificaodocrescimentobacteriano:

DIRETO:determinaodondeUFC/mL(unidadeformadoradecolnia)
Diluiodecimalseriada(vonmerodedepoiscorrigecomadiluio)
Neste mtodo a cultura diluda at um ponto em que a amostra dadiluioquando
semeada em meio apropriado, no apresenta crescimento. Logo, a densidade
populacionaloriginalserestimadapelaaplicaodateoriadaspropabilidades.
Espalhamentoemplaca
Adio no inoculo em meio slido; espalhamento do incuo em toda a superfcie;
crescimentodascolniassomentenasuperfciedomeio.
Pourplate
Adio do iculo em placa sem meio (1mL); adio de Agar nutriente fluido (19 mL);
misturar com agitao suave homogeinizar; o crescimento das colnias pode se dar
nasuperfciecomotambmdentrodoAgar(dependendodotipodebactria).
Filtrao
Nmeromaisprovvel
Contagemmicroscpicadireta

INDIRETO:
Turbidimetria(+turvo,+bactria)mtododeespectometria.
Atividademetablica(quantomaismaterialconsumido+bactria)

Pesoseco

Bioqu
mica(metabolismobacteriano)
Asbactriasnecessitamdeenergiapara:
biossntesedaspartesestruturaisdasclulas
snteseseenzimas,cidosnuclicos,polissacardeosefosfolipdeos.
armazenamentodenutrientes.
motilidade.

Todas estas etapas acima, so importantes para a identificao, diagnostico,

prognsticovirulnciaeteraputica.

Fermentaa
o
Decomposiodecarboidratospormicroorganismosparaobterenergia.

Porqualquervia,sempreformaocidopirvicocomointermedirio.
Via Embdem: a via mais comum para bactrias anaerbicas (forma cido ltico ou
cidomistos).
Via Entner: Mais comum para bactrias aerbicas (forma H2O pois o oxignio
aceptorfinaldeeltrons).
Via de Exoses monofosfato: uma via alternativa (hibrida) e forma H2 pelo ciclo de
Krebsoucidosmistos.

As Bactrias se diferem quanto aos tipos de carboidratosquepodemutilizaretipos

equantidadesdecidosmistosqueproduzem.

Essas diferenas de atividade enzimtica so importantes para a identificao das

diferentesespciesbacterianas.

GLICOSEdesmolasescidoPirvico


CiclodeKrebs Fermentaoltica
(respirao) simplesoumista

TiposdeFermentaa
o

Simples(homoltica):scidoltico.
Fermentao
Ltica Mista(heteroltica):Produzoutroscidostambm.
Afermentaomistasubdivididaem5tipos.

Tipo1 cidoLctico,ActicoeFrmico
Tipo2 cidoLctico,ActicoeFrmico;enzima
formease(formaCO2)>Infecocom
dor
Tipo3 cidoLctico,ActicoeFrmico;enzima
formease;enzimadecondensao
(formaacetona2cidosPirvicos
condensados+CO2)
Tipo4 cidoLctico,Actico,Frmicoe
Propinico
Tipo5 cidoLctico,Actico,FrmicoeButrico

Evidenciaa odaprodua odeenzimasbacterianas

Pesquisadesubprodutos
A INESPECFICOS
B ESPECFICOS

AINESPECFICOS
Produodecido:UtilizamosindicadoresdepH(vermelhodefenol,azulde
bromotimol,vermelhoneutro).
ProduodeGs:TubodeDurhan(mostrasetembolha),ouVASPAR(solidificase
descolarmostraqueproduziugs).

BESPECFICO
Produodeacetonacultivaemtampoforte.Seem7diasomeioficarbsico
amarelo(observamosatravsdovermelhodemetilaV M),significaquetemacetona.

Outrom todoutlizando(VogesProskauer)VPmisturaromeioaps7dias
adicionarKOHenaftol(catalizador),agitapor5minutosparaaerareobservaacor(
sehouveracetonaficarrosa).

*SeVMdernegativo()eVPpositivo(+)porquehacetonanomeio.

Pesquisadeintegridadedosubstrato
Substratodeamido;
Apsincubarcomabactriajogaselugol;SeficarroxoporquehAmidointegro;se
formarumHalosemcoremvoltadacolniabactriaproduzamilasequedegradou
oamido,logo,temseatividadebacteriana.

Pesquisadaenzimapropriamentedita

Putrefaa
o(degradaa
odeprote
nas)
Formaaminastxicas.

Lisinalisinadescarboxilase C
adaverinaFstulas
(aminatxica)

Ornitinaornitinadescarboxilase P
utrescinaSintomasAgudos

Deteca odaprodua odeenzimasdescarboxilases

Adetecoserfeitautilizandoomeiocomprpuradebromocresol.
SeomeioestiverN eutrooualcalino:acorficarprpura
Seomeioestiver cido:acorficara marela

Seformaraminastxicasficarprpura(eocontrolesemaaficaramarelo)

**ocontroleficaraamarelo,poisapequenaconcentraodeglicosepresente
consumidaeformacido.
**apresenadeaminastxicastornaomeioprpuro,poisasntesedetaisamina
deixaomeiobsicoesuperaaquantidadedecidoqueformadopeloconsumode
glicoseexistente.

Produa odeenzimasdesaminases

FenilalaninafenilalaninadesaminaseF e nilpirvico+NH3

(fenilpirvido+4ou5gotasdecloretofrricoverde)

TriptofanotriptofanodesaminaseI ndolpirvicodescarboxilaseI ndolActico

Descaboxilase

MetilIndol
(escatol)
OU

TriptofanotriptofanaseI ndol(txicoevoltil).

*OBS:apresenadeindoldeixaafitaRosa.

ProduodegasesH2 S:

CistenasulfidrasesA
lanina+H2S

*OBS:H2 Sdeixaafitadeidentificaopreta.Afitacontmcomoindicadoracetatode
chumbo,queaoentraremcontatocomoH2 Sformaumprecipitadopreto.
**OBS:asulfidrasepodeutilizarcomosubstratocistena,cistinaemetionina.

Aa osobreoutrosComposto

Ureia=Setemuraseproduzamnia(alcalinoalteraopH,txcoparaoorganismo),
omeioinicialdevesercido.

Nitrato(NO32)=Setemnitrataseproduznitrito(NO2)txico,depolimerizaoDNA;o
NO2podeserdegradadoaN2pelanitritase.
Adegradaodonitratoaconteceatravsdaaodaenzimanitratase,queleva
formaodenitrito,oqualtxicoepodelevaraalteraesnoDNA.Indentificao
atravsdaadiodereativosque,selevaremaoaparecimentodeumacolorao
vermelha,mostramquehnitrito(presenadenitratase).Seficarbege,ounotem
nitratase(nitratontegro)ouonitritofoidegradadopelanitritase,gerandoN2.Para
confirmar,adicionadoxidodezinco.Seficarvermelho,significaqueonitratoest
ntegro(semnitratase),secontinuarbege,querdizerqueonitratofoidigerido.


Citratoemalonato(cidoscarboxlicos)=Setemmalaseoucitrataseformacomo
subprodutoNaOH(usarcomoindicadoroazuldebromotimol).SeformarNaOHo
meioficarazul(anteseraverde).

Importanciadadeteca
odaprodua
odeenzimasbacterianas
Identificao
VirulnciaAoconhecerasenzimasbacterianaspodesepreveravirulnciaea
sobrevivnciadelas.
Diagnstico
TeraputicaAidentificaonospermiteinterferirdamelhormaneirano
mecanismodesobrevivnciadabactria.

FatoresdeVirule
nciabacteriana
Aportadeentradaparaasbactriasso:membranasdasmucosas,pele,via
parenteral.

DI50%=doseinfecciosapara50%dapopulao
DL50%=doseletalpara50%dapopulao

1.Adesa o
Molculasdesuperfcienopatgenoqueseunemespecificamenteareceptoresde
superfcienohospedeiro.
Glicoclice
Fmbria/Fimbrila(glicoprotena)ligaomecnica

2.Evasao
(fugaparanoserpegopelosistemaimunedohospedeiroquebuscasempreuma
homeostase)
Cpsulamecanismodeproteocontrafagcito
HidrlisedeIg

3.Invasao
invasodoepitliodohospedeiroparaointeriordaclula.
Flagelomotilidade
Enzimasparadigerirbarreirasbiolgicas(ex:colagenase;healuronidase,coagulase,e
outras)
Subprodutostxicosquedegradambarreiras(ex:aminas:cadaverina,putrescinae
tiramina;H2 S;indol;escatol,entreoutros.
Invasinas:mecanismodefagocitoseinduzidapelabactria

4.Tox
geno
Exotoxina(gram+egram)sosecretadas.Sosolveisnolquidocorporal;levam
aproduodeantitoxinas,sodenaturezaprotica.Sesubdividemem3grupos:

Grupo1=superantgenos(levamaumarespostaexacerbadadosistemaimune,
podendolevaraumchoquesptico).
Grupo2=causalesonamembranacitoplasmtica
Grupo3=temumaestruturaABcomdiferentesfunes.Ex:toxinadiftrica,toxina
botulnica,etc.

Endotoxina(paredecelulardegram)//EndotoxinaLPS(lipopolisacarideo)
Aendotoxinaumconstituintedabactria.

Ex:macrfagosingeremumabactriagramnegativa,abactriadegradadaemum
vacolo,liberandoendotoxinasqueinduzemomacrfagoaproduzirIL1,quecaina
correntesanguneaatohipotlamonocrebro,ondeinduzaproduode
prostaglandinaquereajustaotermostatocorporalproduzindofebre.

Mecanismosdeevaso:
cpsula
componentesdaparedecelular:ProtenaM(auxilianainfeco)homlogacom
algumasprotenasdonossoprpriocorpo.
variaoantignica:Bactriastemvriasseqnciadeprotenasmuitosimilares(mas
noidnticas)quedificultaoreconhecimentopelosistemaimunecasosejaa2
infecodaqueletipodebactrianohospedeiro.
Enzimas:Coagulases,quinases(degradamafibrina)usadoscomomedicamentos
anticoagulantes,hialudonidases(hidrolizamoc.hialurnico)usadonapesquisade
novasformulaesparafacilitaroacessodosmedicamentos,colagenases.
Penetraonocitoesqueletodohospedeiro.

Gene
ticaBacteriana
O Genoma Bacteriano possui um nico cromossomo, e apresenta tambm unidades
genticasacessriascomoplasmdeos.

Estrutura de um gene de procarioto: a organizao dos genes em procariotos em

operons.
OPERON: a junodevriosgenescontroladosporummesmopromotor(quepode
serforteoufraco).

Expressa
o Ge
nica o termo expresso gnica referese ao processo em que a
informaocodificadaporumdeterminadogenedecodificadoemumaprotena.

Objetivos da regulaa o da expressa o Ge nica: Nas bactrias o controle da

expresso gnica serve principalmente para permitir que as clulas se ajustem s
mudanas nutricionais no ambiente, de forma que o seu crescimento e diviso sejam
otimizados ( ou seja, controla a transcrio e a traduo de protenas para que seja
produzidosomenteoqueabactriaprecisanomomento).

Comoumaclulaspodecontrolarasprotenasqueelafaz?
controlandoquandoecomoumdeterminadogenetranscrito
selecionandoquismRNAssotraduzidos
Ativandoouinativandoseletivamenteasprotenasdepoisdasuasntese.

Diferenanainiciaodatranscrioemeucariotosebactrias:
Enquanto as bactrias contm umnicotipodeRNApolimeras,asclulaseucariticas
apresentamtrs:RNApolimeraseI,RNApolimeraseIIeRNApolimeraseIII.

A RNApolimerase bacteriana capaz de iniciar a transcrio sem o auxlio de

protenas adicionais. As RNApolimerase eucariticas requerem a ajuda de umgrande
conjuntodeprotenaschamadasfatoresgeraisdetranscrio.

Mecanismosba
sicosdaregulaa
odaexpressa
oge
nicaemprocariotos
indutveis (+): controlados positivamente pelo substrato da via metablica a que
pertencem.
repressveis (): controlados negativamente pelo produto final da via biossnttica a
que pertencem. (Ex: se uma protena repressora se liga na regio do operador, no
havertranscrio,poisaRNApolimerasenoconseguirseligar).

ExemplosdeOperon:

OperonLac
OoperonLacativadonaausnciadeglicoseepresenadelactose.
Asprotenascodificadasnestemesmooperonparticipamdeumamesmavia.
O operon lac formado por uma regio promotora, regio operadora e os genes
estruturaisZ(galactosidase),Y(permease),A(transacetilase).

Repressodooperonlacpelaglicose:
1 Quando a glicose est ausente, temse uma alta concentrao de AMPc e temse a
ativao da CAP, que se liga na extremidade 5 do promotor e iniciase a transcrio
daqueleoperon.
Ao da lactose: a lactose presente no meio, faz com que a protena repressora se
desliguedooperonlac.

2Glicosepresente(AMPc)elactoseausentenohtranscrio.
3glicosepresente(AMPc)elactosepresentehbaixatranscrio.

Operondotriptofano
Muitos operons envolvidos na biossintese de aminocidos so regulados por
atenuaodatranscrio.Ex:operondotriptofano

Quando os nveis de triptofano esto altos, o repressor se ligaaooperadorebloqueia

o promotor, impedindo a sntese de enzimas que participam da biossntese do
triptofano.

ElementosGene
ticosMo
veis:

dios:MolculadeDNAcircular(fitadupla),extracromossomal.
1.Plasm
 fagos:Vrusdebactrias.
2.Bacterio
3.TranpossonseIntegrons

Mecanismosdetransferncia:
Conjugao
Transduo
Transformao
Plasmdio de catabolismo: codifica as enzimas necessrias no catabolismo de algumas
substncias (no est no cromossomo, pois provavelmente no vai precisar dessa
maquinaria sempre, s quando no tiver muito dessa substncia no meio). Ex:
biorremediao.

1.Plasmdios:
Plasmdio conjugativo Regio TRA presente; Quanto menor o plasmdio, maior o
nmerodecpias.

Funescodificadasporplasmdios:
toxinas
adesinas
bacteriocinas(podemserisoladasparausarcomoantibitico)
resistnciaaantibiticos
metablicos

Grupos de incompatibilidade: So incompatveis se tem o mesmo sistema de

regulao e no podem ser passados os dois para cada clula filha. Cada clula filha
ficacomumdeles.

Conjugao:( bactriaprecisateraregioTRAparaserdoadora(F+)
a expresso do pillus (levadapelaregioTRA)queirseconectarcomoutrabactria
(que pode ou no ter TRA,masnessecasoestarsecomportandocomoreceptora(F)
e passa seus plasmdios pelo mecanismo crculo rolante passando uma fita simples
apenas,quedepoisseduplicanadoadoraereceptoraparavoltaraserduplafita.
**RegioTRAaultimaaatravessar.

Sempre:DOADORA>RECEPTORA
(F+)(F)


2.Bacterifagos vrusqueinfectambactrias.

Transduo: Mecanismo de transferncia de genes de uma clula bacteriana para

outramediadaporumbacterifago.

Transduo generalizada: ciclo ltico lisa a bactria e quando forma um novo fago
pode ser formado com DNA bacteriano. Neste caso, qualquer DNA pode ser
transferidoparaoutraclula.

Transduo especializada: ciclo lisognico DNA do fago incorpora alguns genes

bacterianos (genes laterais insero do DNA do fago).Osfagosseformamdentroda
clula bacteriana e saem por exciso. Neste caso somente o fragmento de DNA
adjacenteaoplasmdiotransferidoparaoutraclula.

3.Transpossons nenhummecanismoassociado
Segmentos de DNA capazes de mudar de posio dentro do genoma. Podem causar
mutao e ou a quantidade de DNA no genoma. A transferncia ocorre pela
transposase.


Integrons( nenhummecanismoassociadoaquitambm)
Unidades genticas contendo elementos de um sistema de recombinao stio
especfica. So capazes de capturar e mibilizar genes contidos em elementos mveis
chamados cassetes gnicos. Tambm tem um promotor para a expresso dos genes
doscassetes.

Componentes: gene intI, stio adjacente attI, promotor orientado para expreso do
genecassete.

Transformao:
As bactrias devem estar em um estado competente para receber o DNA de outra
bactria(raronanatureza).
A Bactria tem que ser tratada pois a membrana e o DNAtemcargaresidualnegativa
(devido aos fosfatos), portanto, tem que neutralizar a membrana (com CaCl por ex.)
para que elesnosoframrepulsoeoDNApossaentrarporporosdamembrana.Para
facilitar a entrada do DNA pela membrana, basta dar um choque trmico paraabrir
osporos.

Interaa
oMicroorganismoxhospedeiro
1. Conceitos
2. Microbiotadocorpohumano
3. Processoinfeccioso
4. Fatoresdevirulnciabacteriana

Microbiota normal do corpo humano definio: populao de microorganismos
que habitam os tecidos depessoassaudveis.Ocorpohumano/animalumambiente
favorvel para o crescimento de muitos microrganismos, pois rico em nutrientes
orgnicos e fatores de crescimento, alm de fornecer condies de pH, presso
osmtica e temperatura constante. Normalmente a microbiota normal encontrada
emregiesdocorpomaisexpostasaoambiente(ex:pele,TGI,TGU,cavidadeoral).

A presena da microbiota normal em determinadas regies depende dos seguintes

fatores: temperatura, umidade corporal, pH, fatores que impedem a ocupao ou
controlaonmerodemicrorganismos.

Alm disso, os microorganismos podem ter uma colonizao permanente (nossa

microbiota normal composta por tipos fixos de microorganismos encontrados
regularmente em determinadas reas e em determinada idade); uma colonizao
transitria (contato com o microorganismo no patognico ou potencialmente
patognicoquepodemhabitarapeleemucosasporhoras,dias,ousemanas.

A microbiota normaldocorpohumano(MNCH)podeserresponsvelporumasriede
doenaschamadasinfecesendgenas.

MNCHtemdiversasimportnciasbenficas:
produodevitaminas
proteo dos intestinos, pele e mucosas : a colonizao da superfcie das clulas
epiteliais por bactrias da microbiota normal impede a colonizao por outras mais
virulentas.
estmuloaodesenvolvimentodasdefesasimunlgicas.