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Manual Prtico de
Anlise de gua
Braslia, 2009
Copyright 2004
Fundao Nacional de Sade (Funasa)
Ministrio da Sade
Editor
Assessoria de Comunicao e Educao em Sade
Ncleo de Editorao e Mdias de Rede/Ascom/Presi/Funasa/MS
Setor de Autarquias Sul, Quadra 4, Bl. N, 2 andar - Ala Norte
70.070-040 - Braslia/DF
Distribuio e Informao
Departamento de Engenharia de Sade Pblica (Densp)
Setor de Autarquias Sul, Quadra 4, Bl. N, 6 Andar Ala Sul
Telefone: 0XX61 3314-6262 - 3314-6380
70.070-040 - Braslia/DF
Tiragem
2.000 exemplares
Impresso no Brasil
Printed in Brazil
Apresentao
Conceito:
Origem parasitria
Disenteria amebiana Entamoeba histolytica
Gastroenterites Girdia lmblia
Cryptosporidium
Fonte: Opas, 1999
Tubos de ensaio
a) colocar o tubo de Durhan na posio invertida dentro do
tubo de ensaio;
b) tampar o tubo de ensaio com um chumao de algodo
em rama.
Frascos de coleta
a) colocar duas gotas (0,1 ml) de Tiossulfato de Sdio a 10%
dentro do frasco;
Pipetas
a) colocar um pequeno chumao de algodo no bocal da
pipeta;
b) envolv-la em papel-alumnio ou papel-madeira.
Meios de cultura
a) caldo lactosado;
b) caldo lactosado verde brilhante Bile a 2%;
c) caldo EC;
d) Plate Count Agar
Meio EC
a) pesar 37 gramas do meio desidratado e dissolver em 1000
ml de gua destilada;
gua de diluio
Soluo 1
Fases do procedimento
Coliformes totais
Material necessrio:
a) tubo de ensaio.
b) estante para tubo de ensaio.
c) tubo de Durhan.
d) pipeta graduada de 10 ml.
e) pipeta graduada de 1 ml.
f) bico de Bunsen ou lamparina a lcool.
g) caldo lactosado de concentrao dupla.
h) caldo lactosado de concentrao simples.
i) caldo lactosado verde brilhante Bile a 2%.
j) gua de diluio.
k) ala de platina com cabo de Kolle.
l) estufa bacteriolgica.
Teste presuntivo
Fases do teste
Inocular em CL ou CLT e
inocular por 24 2 hs a 35
0,50C
Exemplo:
a) nos 5 tubos da diluio 1:1, obtiveram-se 3 tubos positi-
vos;
b) nos 5 tubos da diluio 1:10, obtiveram-se 2 tubos posi-
tivos;
c) nos 5 tubos da diluio 1:100, obteve-se 1 tubo positi-
vo;
d) formou-se, portanto, a combinao 3-2-1;
e) determina-se o N.M.P consultando a tabela 1.
Se no quiser trabalhar com 15 tubos para determinar o
NMP fazer apenas 5 tubos na diluio 1:1 (10 ml do meio de
cultura + 10 ml da amostra) e calcular o NMP consultando
a tabela 2.
0-0-0 <2 - -
0-0-1 2 1.0 10
0-1-0 2 1.0 10
0-2-0 4 1.0 13
1-0-0 2 1.0 11
1-0-1 4 1.0 15
1-1-0 4 1.0 15
1-1-1 6 2.0 18
1-2-0 6 2.0 18
2-0-0 4 1.0 17
2-0-1 7 2.0 20
2-1-0 7 2.0 21
2-1-1 9 3.0 24
2-2-0 9 3.0 25
2-3-0 12 5.0 29
3-0-0 8 3.0 24
3-0-1 11 4.0 29
3-1-0 11 4.0 29
3-1-1 14 6.0 35
3-2-0 14 6.0 35
3-2-1 17 7.0 40
4-0-0 13 5.0 38
4-0-1 17 7.0 45
4-1-0 17 7.0 46
4-1-1 21 9.0 55
4-1-2 22 12 63
4-2-0 26 9.0 56
4-2-1 26 12 65
4-3-0 27 12 67
4-3-1 33 15 77
4-4-0 34 16 80
5-0-0 23 9 86
5-0-1 30 10 110
5-0-2 40 20 140
5-1-0 30 10 120
5-1-1 50 20 150
5-1-2 60 30 180
5-2-0 50 20 170
5-2-1 70 30 210
5-2-2 90 40 250
5-3-0 80 30 250
5-3-1 110 40 300
5-3-2 140 60 360
5-3-3 170 80 410
5-4-0 130 50 390
5-4-1 170 70 480
5-4-2 220 100 560
5-4-3 280 120 690
5-4-4 350 160 820
Limites
Combinao
NMP/100 mL
de positivos
Inferior Superior
Limites
Combinao
NMP/100 mL
de positivos
Inferior Superior
Coliformes termotolerantes
Material necessrio:
Bactrias heterotrficas
Material necessrio
a) placa de Petri;
b) pipeta graduada;
c) bico de Bunsen ou lamparina a lcool;
d) plate count agar;
Execuo do ensaio
Notas:
a) antes de iniciar os exames, desinfetar a bancada do labo-
ratrio usando uma soluo de lcool etlico a 70% ou
outro desinfetante que no deixe resduo;
b) todas as amostras a serem examinadas devem ser homo-
geneizadas pelo menos 25 vezes;
c) no esquecer de flambar a boca dos tubos de ensaio contendo
meios de cultura, antes de us-los;
Coliformes totais
Material necessrio:
Execuo do ensaio
Material necessrio:
Tcnica
Coliformes termotolerantes
Material necessrio
Material necessrio:
Tcnica
Teste de presena/ausncia
Material necessrio:
Execuo do ensaio
Mtodo de determinao
Material necessrio:
Tcnica
Clculo:
Fluxograma da anlise
Mtodo de determinao
Material necessrio:
a) bureta de 50 ml;
b) frasco Erlenmeyer de 250 ml;
c) pipeta volumtrica de 100 ml;
d) rolha de borracha;
e) hidrxido de sdio 0,02N;
f) fenolftalena.
Tcnica
Clculo
Onde:
Fc = fator de correo.
Onde:
Cloretos
Geralmente os cloretos esto presentes em guas brutas e
tratadas em concentraes que podem variar de pequenos
traos at centenas de mg/l. Esto presentes na forma de
cloretos de sdio, clcio e magnsio. A gua do mar possui
concentrao elevada de cloretos que est em torno de
26.000 mg/l. Concentraes altas de cloretos podem restringir
o uso da gua em razo do sabor que eles conferem e pelo
efeito laxativo que eles podem provocar. A portaria n
518/2004 do Ministrio da Sade estabelece o teor de 250
mg/l como o valor mximo permitido para gua potvel. Os
mtodos convencionais de tratamento de gua no removem
cloretos. A sua remoo pode ser feita por desmineralizao
(deionizao) ou evaporao.
Material necessrio:
a) bureta de 50 ml;
b) becker de 250 ml;
c) frasco Erlenmeyer de 250 ml;
d) medidor de pH;
e) proveta de 100 ml;
f) soluo padro de nitrato de prata 0,0141N;
g) soluo indicadora de cromato de potssio K2CrO4;
h) hidrxido de sdio 1N;
i) cido sulfrico 1N;
j) cloreto de sdio 0,0141 N.
Tcnica
(A - B) x N x 35.45
mg/l Cl = _____________________
ml da amostra
Onde:
N = normalidade do titulante;
Mtodo de determinao
Material necessrio:
a) bureta de 50 ml;
b) pipeta volumtrica de 25 ml;
Tcnica
ml de EDTA x 1000 x Fc
Dureza Total em mg/lCaCO3 = ______________________
ml de amostra
Fluxograma da anlise
Material necessrio:
a) potencimetro;
b) cubetas;
c) frasco lavador;
d) papel absorvente;
e) solues tampo de pH conhecido;
Tcnica
a) ligar o aparelho e esperar a sua estabilizao;
b) lavar os eletrodos com gua destilada e enxug-los com
papel absorvente;
c) calibrar o aparelho com as solues padro (pH 4 7
ou 9);
Manual Prtico de Anlise de gua 49
d) lavar novamente os eletrodos com gua destilada e
enxug-los;
e) introduzir os eletrodos na amostra a ser examinada e
fazer a leitura;
f) lavar novamente e deix-los imersos em gua destilada;
g) desligar o aparelho.
Fluxograma do teste
Anlises colorimtricas
Comparao visual
Material necessrio:
a) comparador colorimtrico;
b) cubetas de vidro ou de acrlico;
c) DPD para cloro livre em cpsula;
Tcnica
Cor
A cor da gua proveniente da matria orgnica como,
por exemplo, substncias hmicas, taninos e tambm por
metais como o ferro e o mangans e resduos industriais
fortemente coloridos. A cor, em sistemas pblicos de
abastecimento de gua, esteticamente indesejvel. A sua
medida de fundamental importncia, visto que gua de cor
elevada provoca a sua rejeio por parte do consumidor e
o leva a procurar outras fontes de suprimento muitas vezes
inseguras.
Mtodo de determinao
Material necessrio:
Tcnica
Resultado
Alumnio
O teste de alumnio indicado para estaes de tratamento
onde o sulfato de alumnio usado como coagulante.
Em pH cido:
+
Al(OH)3 [ H ] Al + nH2O
+++
Em pH bsico:
-
Al(OH)3 [OH ] AlO3 + nH2O
---
Mtodo de determinao
A determinao do alumnio pode ser feita atravs dos
mtodos de Absoro Atmica, Eriocromo Cianina R
utilizando um fotmetro de filtro ou espectrofotmetro e
tambm pelo mtodo de Comparao Visual, utilizando-se
tubos de Nessler.
Material necessrio
a) tubo de Nessler forma alta, de 50 ml;
b) pipeta graduada de 1 ml;
c) pipeta graduada de 5 ml;
d) pipeta graduada de 10 ml;
e) suporte para tubos de Nessler.
Reagentes
a) cido sulfrico (H2SO4) 0,02N;
b) reagente tampo de acetato de sdio;
c) eriocromo cianina-R - (corante);
d) soluo de trabalho do corante.
Tcnica
Resultado
O resultado expresso em mg/l de alumnio.
Observao: Neste mtodo no necessrio preparar o branco
da amostra e ele tambm no recomendado para
amostras que contm cor e turbidez porque pode
levar a erros considerveis.
Material necessrio
a) tubo de Nessler forma alta, de 50 ml;
b) pipeta graduada de 1 ml;
c) pipeta graduada de 5 ml;
d) pipeta graduada de 10 ml;
e) suporte para tubos de Nessler.
Reagentes:
a) cido sulfrico 0,02N;
b) reagente tampo de acetato de sdio;
c) eriocromo cianina-R - (corante);
d) soluo de trabalho do corante;
e) soluo-padro de alumnio (1 ml = 5 g Al).
ml da soluo- Volume de
g Al/ml mg/l Al
padro amostra
0,0 0,0 25 0,0
0,5 2,5 25 0,1
1,0 5,0 25 0,2
1,5 7,5 25 0,3
2,0 10,0 25 0,4
2,5 12,5 25 0,5
Mtodo Nefelomtrico
Material necessrio:
a) turbidmetro com nefelmetro;
b) clulas de amostras de vidro incolor (quartzo),
Reagentes:
gua isenta de turbidez:
a) passar gua destilada atravs de um filtro de membrana
de 0,02 m de porosidade. Enxaguar o frasco de coleta
pelo menos duas vezes com gua filtrada e desprezar
os primeiros 200 ml;
Soluo I
C
Onde:
UTN = Unidade de Turbidez Nefelomtrica;
A = Turbidez da amostra diluda;
B = Volume da diluio (ml);
C = Volume da amostra tomado para a diluio.
20 x (40 + 10)
10
Temperatura
A temperatura est relacionada com o aumento do consumo
de gua, com a fluoretao, com a solubilidade e ionizao
das substncias coagulantes, com a mudana do pH, com
a desinfeco, etc.
Material necessrio:
a) termmetro;
b) becker de 250 ml.
Tcnica
Reagentes:
-
a) soluo padro de fluoretos (1ml = 10 gF );
b) reagente Scott-Sanchis;
c) arsenito de sdio (0,5%).
Destilao da amostra
Anlise
Temperatura - - -
imediata
Vidro ou Proteger
Turbidez 200 24h
Polietileno da luz
Cloro Vidro ou Anlise
500 30min/2h
Residual polietileno imediata
Anlise
pH 200 -
imediata
Material necessrio:
10 5 7 3 4
15 7 10 4 6
20 9 14 5 8
25 12 17 7 10
30 14 20 8 12
40 18 27 10 15
50 25 34 13 19
Fonte: Tcnicas de Abastecimento e Tratamento de gua - vol.
II/Cetesb SP
* se no houver alcalinidade natural.
Mtodo de determinao
Ensaio do mrmore
Material necessrio:
Reagente
Carbonato de clcio
Tcnica
Concluso
Material necessrio:
Reagentes:
Tcnica
Clculo
(A-B) x N x 35,45
% de cloro =
P x 10
onde:
Material necessrio:
a) bureta de 50 ml;
b) frasco Erlenmeyer de 250 ml;
c) pipeta graduada de 1 ml;
d) pipeta volumtrica de 10 ml.
Clculo
1
Normalidade =
ml de tiossulfato consumido
Padronizao da soluo
Colocar 50 ml de uma soluo de carbonato de sdio 0,02
N em um frasco Erlenmeyer de 250 ml e adicionar 4 gotas
do indicador metilorange. Titular com H2SO4 0,02N at a
viragem do indicador para leve colorao avermelhada.
Anotar o volume do cido gasto.
N = NV/ V
onde:
Indicador metilorange
Pesar 0,100 gramas de metilorange e dissolver em 200 ml
de gua destilada.
Fenolftaleina
a) dissolver 1 grama de fenolftalena em um pouco de gua
destilada e diluir a 200 ml.
b) adicionar gotas de NaOH 0,02 N at o aparecimento de
leve colorao cor-de-rosa.
Fc NaOH 0,02N =
ml de NaOH
Fenolftaleina
a) dissolver 1 grama de fenolftalena em um pouco de gua
destilada e diluir a 200 ml;
b) adicionar gotas de NaOH 0,02N at o aparecimento de
leve colorao cor-de-rosa.
onde:
Fc = Fator de correo.
Soluo-padro de clcio
25
Fc =
Vp
onde:
Fc = Fator de Correo;
Reagente tampo
Mistura cida
Arsenito de sdio
Regra 1
Quando o volume consumido de soluo a titular for igual
ao volume da soluo-padro tomado para a titulao,
significa que aquela est exata. Ex.: 10 ml de HCl 0,1N foram
consumidos para titular 10 ml de Na2CO3 0,1N.
Regra 3
No caso em que o volume da soluo a titular for maior do
que o da soluo padro, significa que a soluo a titular
encontra-se mais diluda. Nesse caso, calcula-se o fator de
correo da seguinte forma:
Exemplo: 10,5 ml de uma soluo de HCl 0,1N foram consumidos
para titular 10 ml de uma soluo padro de Carbonato
de Sdio.
Aplicando-se a seguinte equao, temos:
10,5 : 10 :: 1 : x
Efetuando-se os clculos temos:
10 = 10,5x
x = 10/10,5
x = 0,9524
Logo o Fator de correo da soluo 0,9524.
Procedimento de lavagem
Equipamentos
a) autoclave vertical, capacidade para 18, 24, 48 ou 72
litros, 110/220 volts;
b) estufa para cultura bacteriolgica, com termostato regu-
lvel na faixa de 30 a 65 C, tamanho 45x45x40 cm de
largura, profundidade e altura, respectivamente, equipada
com bandeja regulvel para trs posies;
c) balana analtica, eltrica, capacidade para 160 g, sensibili-
dade de 1/100 mg, cinco casas decimais, 110/220 volts;
d) balana de preciso, com dupla escala, pesagem mxima
200 gramas, sensibilidade de 0,1 g;
e) destilador de gua, capacidade para 2 litros/hora, 110/220
volts;
f) banho-maria capacidade para 50 tubos de ensaio, com ter-
mostato regulvel na faixa de 35 a 65 C, 110/220 volts;
Materiais diversos
a) ala de platina calibrada com 3 mm de dimetro;
b) cabo de Kolle para ala de platina;
c) algodo em rama para bacteriologia;
d) lpis dermogrfico;
e) caldo lactosado, desidratado, embalagem de 100 ou 500
gramas;
f) caldo lactosado, verde brilhante bile a 2%, desidratado,
embalagem de 100 ou 500 gramas;
g) Meio (m ENDO MF), para coli total, embalagem de 100
ou 500 gramas;
h) Meio (m FC Broth), para coli fecal, embalagem de 100
ou 500 gramas;
i) prpura de bromocresol, embalagem de 5 gramas;
Portaria
Portaria n 518, de 25 de maro de 2004
(DOU n 59 de 26 de maro de 2004, Seo 1
Captulo I
Das disposies preliminares
Captulo III
Dos deveres e das responsabilidades
Seo I
Do nvel federal
Seo II
Do nvel estadual e Distrito Federal
Seo III
Do nvel municipal
Seo IV
Do responsvel pela operao de sistema
e/ou soluo alternativa
Parmetro VMP(1)
gua para consumo humano (2)
pH
A cada duas
Superficial
horas
CLR (1) (Conforme 3 do artigo 18)
Subterrneo Dirias
(Semanal
Cianotoxinas Superficial conforme 5 - - -
do artigo 18)
Demais Superficial
parmetros (3) ou Semestral Semestral (3) Semestral (3) Semestral (3)
Subterrneo
20.000 a
< 5.000 5.000 a
250.000 > 250.000 hab
hab 20.000 hab
hab
105 + (1 para
30 + (1
1 para cada 5.000 hab.)
Coliformes totais para cada
10 cada Mximo de
2.000
500 hab 1.000
hab.)
Nota: na sada de cada unidade de tratamento devem ser coletadas,
no mnimo, 2 (duas) amostra semanais, recomendando-se
a coleta de, pelo menos, 4 (quatro) amostras semanais.
Captulo VI
Das exigncias aplicveis aos sistemas e solues
alternativas de abastecimento de gua
Captulo VII
Das penalidades
Material necessrio
a) frasco de vidro cor mbar de 100 ml.
b) garrafa de van Dorn ou Similar.
c) soluo de lugol (fixador).
Local da coleta
a) ponto de captao (tomada dgua);
b) amostras de superfcie;
c) amostras de vrias profundidades (estratificadas).
Tcnica
Amostra de superfcie
Amostras de profundidade
Frao Particulada
Material necessrio
a) frasco de plstico;
b) filtro de fibra de vidro;
c) conjunto de filtrao;
d) garrafa de van Dorn ou similar.
Tcnica
a) coletar 1 litro de gua bruta a 10 cm da superfcie ou
na profundidade do ponto de captao de gua;
b) filtrar a amostra utilizando quantos filtros forem neces-
srios;
Frao dissolvida
a) coletar 1 litro de gua bruta a 10 cm da superfcie ou
na profundidade do ponto de captao de gua;
b) filtrar a amostra utilizando quantos filtros forem neces-
srios;
c) recolher a poro filtrada em um frasco plstico;
d) refrigerar ou congelar a poro filtrada;
e) enviar para o laboratrio, em caixa de isopor, infor-
mando a origem da amostra, local e data da coleta.
Elaborao
Marinaldo da Silva Valente/Core/AM/Funasa
Colaboradores
Osman de Oliveira Lira/Core/PE/Funasa
Nilce Bazzoli/Core/MG/Funasa
Jlio Csar Reis da Silva/Core/MA/Funasa
Raimundo Rodrigues dos Santos Filho/Core/MA/Funasa
Miguel Crisstomo Leite Brito/Densp/Funasa
Coordenao
Maria Fernanda Bittencourt/Densp/Funasa
Reviso tcnica
Felizana M.M. da S. Palhano
Girlene Rodrigues Leite
Vilma Ramos Feitosa/Densp/Funasa
Marinaldo da Silva Valente/Core-Am/Funasa
Reviso da 3 Edio
Aristeu de Oliveira Junior/Densp/Funasa
Ilustrao
Leonardo Ribeiro da Silva Terra /Ascom / Presi /Funasa
Projeto grfico e capa
Glacia Elizabeth de Oliveira/Ascom/Presi/Funasa
Diagramao
Maria Clia de Souza/Ascom/Presi/Funasa
Reviso Ortogrfica e Gramatical da 1 e 2 Edio
Olinda Myrtes Bayma S. Melo Ascom/Presi/Funasa/MS
Reviso Ortogrfica e Gramatical da 3 Edio
Leila Santos Ascom/Presi/Funasa/MS
Reviso bibliogrfica
Raquel Machado Santos/Ascom/Presi/Funasa
Manual Prtico de Anlise de gua 141