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ETEST PARA DETERMINAO DE CIM DE ANTIBITICOS USO Etest uma tcnica quantitativa para determinao de sensibilidade antimicrobiana tanto

to de bactrias aerbias no fastidiosas Gram negativas e Gram positivas (ex: Enterobacteriaceae, Pseudomonas, Staphylococcus e Enterococcus species) como bactrias fastidiosas como bactrias anaerbias estritas, N.gonorrhoeae, S.pneumoniae, Streptococcus e Haemophilus species. O sistema compreende um gradiente de antibitico pr-definido que usado para determinar a concentrao inibitria mnima (CIM) em mcg/ml de antibiticos contra bactrias em gar utilizando incubao overnight. SUMRIO E EXPLICAES Mtodos habituais de Testes de Sensibilidade Antimicrobiana (TSA) so baseados tanto em tcnicas de diluio como difuso. Testes de diluio baseados em diluies seriadas de antibiticos em caldo ou agar fornecem uma estimativa de CIM. O valor da CIM a concentrao mnima inibitria de um dado antimicrobiano que, sob condies experimentais definidas, inibe o crescimento de uma bactria. O valor da CIM o critrio de referncia para definir a sensibilidade de determinado microrganismo. Princpios Etest baseado numa combinao dos conceitos de testes de diluio e difuso. Como os mtodos de CIM, o Etest quantifica diretamente a sensibilidade antimicrobiana. Mesmo sendo processado como teste de difuso em disco, o Etest difere do mtodo disco convencional pelo uso de um gradiente pr-formado e estvel de antimicrobiano. O Etest consiste numa fita plstica fina, inerte e no porosa de 5mm largura e 50mm de comprimento. Um lado da fita marcado com uma escala de leitura de CIM em mcg/ml. Um cdigo de letras designa a identidade do antibitico. Um gradiente exponencial pr-definido do antibitico seco e estabilizado mobilizado no outro lado da fita, com uma concentrao mxima em "a" e mnima em "b" como descrito na Fig. 1. O gradiente reflete uma faixa contnua de concentrao, que varia de 0.016 a 256 mcg/ml ou 0.002 a 32 mcg/ml, dependendo do antibitico. Esta faixa corresponde a 15 diluies num mtodo convencional de CIM. Quando uma fita de Etest aplicada numa placa de agar inoculado, h uma liberao imediata do antibitico da fita para o agar. Aps incubao, quando o crescimento bacteriano se torna visvel, uma elipse de inibio simtrica ao redor da fita visualizada.

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PROBAC DO BRASIL Produtos Bacteriolgicos Ltda. Rua Jaguaribe, 35 Sta.Ceclia - So Paulo SP - CEP: 01224-001 Fone: 55 11 3222-4777 - Fax: 55 11 3223-8368 CNPJ 45.597.176/0001-00 - Insc. Est. 110.485.842.111 Site: www.probac.com.br E-mail: probac@probac.com.br

REAGENTES As fitas de Etest vem em embalagens com 10 compartimentos selados individualmente, contendo 3 ou 10 unidades em cada um; cada conjunto contm 30 ou 100 fitas de um antibitico. Agente Amicacina Amoxacilina Amoxacilina/c.clavulnico (2/1) Ampicilina Ampicilina/sulbactam (2/1) Azitromicina Aztreonam Bacitracina Benzilpenicilina (alto e baixo nvel) Cefaclor Cefepime (alto e baixo nvel) Cefixima Cefoperazone/sulbactam (2/1) Cefotaxime (alto e baixo nvel) Cefotetan Cefotetan + Cloxacilina Cefoxitina Cefoxitina + Cloxacilina Cefpirome Cefpodoxima Ceftazidime Ceftizoxima Cdigo AK AC XL AM AB AZ AT BA PG CF PM IX CPS CT CN CN FX CN CR PX TZ CZ Apresentao 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas
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Agente

Cdigo

Apresentao

Ceftriaxone (alto e baixo nvel) Cefuroxima Cefalotina Cloranfenicol Ciprofloxacina Claritromicina Clindamicina Colistina Daptomicina Doxyciclina Enrofloxacina Ertapenem Eritromicina Fosfomicina cido fusidico Gatifloxacina Gemifloxacina Gentamicina (alto e baixo nvel) Grepafloxacina Imipenem Kanamicina Levofloxacina Linezolid Meropenem Metronidazol Minociclina Moxifloxacina Mupirocina cido naldixico Netilmicina Nitrofurantona Norfloxacina Ofloxacina Oxacilina Piperacilina Piperacilina/tazobactam (4g/ml) Polimixina B Quinopristina/dalfopristina Rifampicina Spectinomicina Streptomicina Sulbactam

TX XM CE CL CI CH CM CO DPC DC EF ETP EM FM FU GA GEM GM GP IP KM LE LZ MP MZ MC MX UM NA NC NI NX OF OX PP PTc PO RP RI SC SM SUL

30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas
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Agente Sulfametoxazol Teicoplanina Temocilina Tetraciclina Ticarcilina/c. clavulnico Tigeciclina Tobramicina (alto e baixo nvel) Trimetoprim Trimetoprim/sulfametoxazol (1/19) Trovafloxacina Vancomicina Etambutol Etionamida Isoniazida

Cdigo SX TP TMO TC TLc TGC TM TR TS TV VA EB ET IZ

Apresentao 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas 30 ou 100 fitas

ARMAZENAMENTO Todas as embalagens devem ser conservadas a - 20C at a data de validade. As fitas de Etest da embalagem aberta devem ser armazenadas em lugar seco ou tubo com dessecante a - 20C. As fitas armazenadas e manuseadas corretamente podem ser usadas ate a data de validade. O nmero do lote e a data de validade esto impressos na embalagem. Armazene apenas um nico tipo de antibitico por tubo de armazenamento. Previna que a umidade penetre no interior ou se forme entre as embalagens e tubos de armazenamento. As fitas de Etest devem ser mantidas secas. MANUSEIO Remover as fitas do freezer e aguardar aproximadamente 30 minutos para que atinjam a temperatura ambiente. A gua de condensao da superfcie externa deve ser totalmente evaporada antes da abertura. Inspecione a embalagem e os tubos de armazenamento e no use as fitas caso estas estes estejam danificadas. No corte entre os compartimentos dos blisters. Para abrir a embalagem original, cortar na linha pontilhada. Usar pina para retirar a fita da embalagem e colocar sobre a placa. No tocar a parte da fita com o gradiente, somente a parte marcada com a letra E. Mantenha as fitas na bandeja do aplicador do Etest ou no interior de uma placa de Petri estril e seca at o momento da aplicao no meio de cultura. PRECAUES E CUIDADOS .Etest deve ser utilizado somente para diagnstico "in vitro". .Embora o procedimento do Etest seja simples de realizar, a interpretao do teste deve ser supervisionada por pessoal treinado em tcnicas de teste de sensibilidade. .Tcnicas asspticas devem ser observadas sempre que se manipular espcimes, alm de esterilizar placas aps o uso, antes de descartar.

PROCEDIMENTO - Material fornecido: .30 ou 100 fitas de Etest de um antibitico. .1 manual de instruo.
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- Materiais necessrios: Placas com meio apropriado e profundidade de 4.0 0.5 mm. Salina estril (NaCl 0.85% ) ou caldo adequado para preparao do inculo. Alas estreis, swabs, tubos de ensaio, pipetas, pina, placas, tesoura. Padro 0.5 Mc Farland de turvao e escala de Mc Farland. Estufa 35C, jarra e geradores (anaerobiose e capnofilia). Cepas padro. Tubos com dessecante para guardar as fitas restantes. Referncias tcnicas Etest: www.abbiodisk.com Meio Deve ser utilizada placa com agar de 4.0 0.5mm de profundidade e pH 7,2-7,4. O meio e os suplementos dependem da espcie bacteriana a ser testada (vide CLSI vigente). Preparo do Inculo Para o preparo do inculo seguir as orientaes do CLSI vigente. Homogeneizar bem as colnias isoladas a partir de uma placa de 24 horas em caldo adequado para encontrar a turvao adequada comparando com a escala de McFarland. Para microrganismos fastidiosos como pneumococos, estreptococos, gonococos, anaerbios e haemophilus, use a suspenso preparada em caldo dentro de 15 minutos. Inoculao Mergulhe o swab estril na suspenso do inculo e remova o excesso pressionando o swab contra a parede do tubo.Remova mais quando for semear em placa de 90mm e menos quando for semear em placa de 150mm. Cuidadosamente semeie em trs direes, girando a placa aproximadamente 90 graus a cada passo. Aguardar 10-15 minutos para que o excesso de umidade seja absorvido e ento s com a superfcie completamente seca aplique as fitas de Etest. Notas: 1. Se esta etapa for realizada corretamente, haver um crescimento confluente. 2. O padro de turvao da escala de McFarland no garante uma correta contagem de UFC/ml de clulas viveis (veja Controle de Qualidade). Aplicao Abra a embalagem do Etest como descrito no MANUSEIO. Com o auxlio de uma pina remova o nmero de fitas de Etest e coloque-as em uma superfcie limpa e seca, por exemplo, em uma placa de Petri ou em na bandeja do aplicador do Etest (fig. 2). Em placas de 150mm coloque de 4-5 fitas e 1-2 fitas em placas de 90mm, conforme as figuras 4a e 4b. Observar que a escala numrica est na face superior, e no em contato com o agar. Colocar a fita com a concentrao mxima na periferia da placa; pressione a fita no agar para evitar formao de bolhas. Uma vez aplicada no agar, a posio da fita no pode ser modificada.

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Fig. 2: Uso do aplicador

Fig. 3: Aplicao da fita

4 a 6 diferentes fitas ETEST podem ser aplicadas em placa de 150mm como mostra a fig. 4A. Para determinao nica de CIM, uma a duas fitas ETEST podem ser usadas em placa de 90mm (fig. 4B). Para organismos mais sensveis, use menos fitas por placa.

Figura 4a: Modelo para 6 fitas por placa de 150mm

Figura4b: Placa 90 mm/2fitas

Incubao As placas devem ser incubada em posio invertida e em pilhas de no mximo 5. A temperatura e atmosfera de incubao devem ser timas para a bactria e a combinao bactria/antibitico a ser estudada. As recomendaes do CLSI vigente podem ser seguidas: . Aerbios no exigentes e anaerbios facultativos: 35C/ 16-208 h/ atmosfera normal. .Bactrias exigentes como Haemophilus influenzae, Streptococcus spp e S.pneumoniae: 35C / 20-24h / 5% CO2, se necessrio para crescimento. . Bactrias anaerbias: 35C / 24-48-72 h/ anaerobiose (80-85% N2, 5-10% CO2, 10% H2). O perodo de incubao depender das caractersticas de crescimento da bactria em estudo. .MRSA/MRSE: 35 C/ 24 horas completas/ atmosfera normal para determinaes de CIM de meticilina e oxacilina com espcies de Staphylococcus. Staphylococus coagulase negativos podem requerer 48 h de incubao. MRSA/MRSE deve ser testado em Agar Mueller Hinton suplementado com 2% NaCl. Notas: 1. Sempre consulte o ltimo Manual Tcnico do Etest para recomendaes. 2. Quando utilizar outros meios para o teste garantir que os resultados esto dentro das especificaes.
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3. Para drogas como os macroldeos que possuem sua atividade afetada pelas mudanas de pH, resultados da incubao em CO 2 podem ser diferentes da incubao em ar ambiente. INTERPRETAO DOS RESULTADOS Leitura da CIM Aps incubao, quando h crescimento visvel, ler o valor de CIM no ponto de interseco entre o halo e a fita de Etest.Quando houver crescimento ao longo da fita, por exemplo, nenhuma inibio elptica vista, a CIM deve ser reportada como > que o mximo valor da escala. Quando a inibio elptica est abaixo da fita, por exemplo, a zona de inibio no intersecciona com a fita, a CIM deve ser reportada como o < valor que o mnimo valor da escala. Para drogas bactericidas, como os beta-lactmicos, sempre leia a CIM onde h completa inibio de todo o crescimento, incluindo nuvens, microcolnias e colnias isoladas. Incline a placa e/ou use uma lente ampliadora para examinar os pontos de interseco especialmente com pneumococos, estreptococos, enterococos, fusobacteria, Acinetobacter e Stenotrophomonas spp. Para as drogas bacteriostticas, por exemplo, trimetoprim/sulfametoxazol, leia as interseces difusas na inibio, inibio de 80%, isto , o primeiro ponto da inibio significativa como observado a olho n. Se houver padres duvidosos de inibio de crescimento, consultar as figuras do guia de leitura deste manual. No leia placas com cultura mista ou com crescimentos muito fracos ou densos, o teste deve ser repetido. Interpretao de categorias de sensibilidade Sendo os valores de CIM do Etest diretamente proporcionais aos valores de referncia CLSI de diluio, os pontos de definio da CIM CLSI so adequados para categorizar a sensibilidade. Como outros mtodos de CIM inteiramente quantitativos, o Etest permite o laboratrio de relatar o valor CIM especfico junto com a categoria de sensibilidade. O Etest gera os valores CIM de uma escala contnua e pode dar resultados dentro entre diluies convencionais. Um valor de Etest CIM que caia entre diluies deve ser arredondado at o valor superior seguinte antes da interpretao.

Por exemplo: Se na CIM da Ampicilina (g/ml) os pontos de corte so: S I R 8 16 32 Uma CIM no Etest de 16 g/ml reportada como intermediria (I) enquanto uma de 24 g/ml arredonda para 32 g/ml e reportada como resistente (R). CONTROLE DE QUALIDADE A fim verificar o desempenho de Etest com o respeito qualidade dos reagentes, dos meios, do inculo e do procedimento usados, teste cepas apropriadas do controle de qualidade, por exemplo, de acordo com CLSI ou suas recomendaes nacionais de TSA, como esboado no item PROCEDIMENTO. Os reagentes e teste so satisfatrios se os valores CIM obtiverem resultados dentro das especificaes de controle da qualidade fornecidas. Os resultados de
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pacientes no devem ser relatados se os resultados do controle de qualidade estiverem fora dos intervalos indicados. A freqncia do teste de controle de qualidade deve ser estabelecida pelo laboratrio individualmente. Os guias dos testes de susceptibilidade so fornecidos pelo CLSI vigente nas sries M7, M11 e M100. Realize contagens regulares para verificar que a densidade da suspenso do inculo est correta nos termos de UFC/ml de clulas viveis. Por exemplo, dilua a suspenso 1:1000 do inculo e subcultive 1 l nos meios recomendados. Um inculo aceitvel deve dar aproximadamente 100 a 500 colnias, isto 1 a 5x10 8 UFC/ml. Recorde que os padres de turbidez da escala de McFarland no garantem contagens corretas de colnias e clulas viveis. VALORES PREVISTOS Os nveis antibiticos para as diferentes populaes das bactrias so previsveis devido ao desenvolvimento progressivo da resistncia. Assim, o laboratrio deve usar os valores CIM previstos dos diferentes antibiticos para as cepas do controle de qualidade para assegurar que os procedimentos do teste esto satisfatrios e os resultados clnicos obtidos so razoavelmente exatos. CARACTERSTICAS DO DESEMPENHO As caractersticas de desempenho do Etest foram estabelecidas com avaliaes comparativas em locais clnicos externos e em teste in house. Estes estudos mostraram que os valores de CIM do Etest correlacionam com as referncias do CLSI dos mtodos da diluio em agar ou em caldo, dependendo do organismo testado. O Etest considerado estar estatisticamente de acordo com o procedimento de referncia do CLSI quando os valores MIC de ambos os mtodos mostram valor 90% dentro da diluio 1. A base de dados da referncia de Etest compreende mais de 3000 referncias cientficas que demonstraram a equivalncia substancial entre Etest e mtodos da diluio da referncia para uma variedade larga de grupos do organismo. OBSERVAES IMPORTANTES 1. O desempenho satisfatrio foi estabelecido para uma variedade larga dos organismos incluindo os listados no item Incubao, de acordo com as recomendaes especificadas. 2. Ocasionalmente, determinadas combinaes de bactria/antibitico podem dar resultados incomuns. O critrio do ponto da interseco da CIM pode ser difcil nestes casos, particularmente para pessoal inexperiente. Entretanto, os indivduos podem ser treinados com o uso regular de cepas de controle de qualidade, o uso de guias da leitura de Etest e as comparaes dos resultados das leituras feitas por pessoal experiente ajudam a conseguir uma avaliao correta CIM. 3. O Etest tem boa correlao com testes de diluio em agar. Para determinados organismos, as correlaes foram mostradas com a microdiluio em caldo quando a referncia da diluio em agar ausente. 4. Como em todos os mtodos de teste de sensibilidade, os resultados obtidos com Etest so valores "in vitro" e indicam a sensibilidade do organismo apenas in vitro. O uso dos resultados para guiar a terapia deve ser deve ser de responsabilidade do mdico, baseando esta escolha na histria e no conhecimento particular do paciente, na farmacologia e farmacocintica do antibitico e na experincia clnica do tratamento das infeces causadas pelo patgeno bacteriano com o antibitico considerado. 5. Para detalhes das limitaes interpretativas especficas e/ou de limitaes no uso clnico de um antibitico em vrias situaes teraputicas, consulte s notas de rodap nas tabelas de interpretaes padres de CIM originais do CLSI vigente (M7, M11 e M100) e/ou em originais de seu grupo nacional da referncia de TSA.
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REFERNCIAS 1. Bolmstrm, A., Arvidson, S., Ericsson, M. and Karlsson, . A Novel Technique for Direct Quantification of Antimicrobial Susceptibility of Microorganisms. ICAAC, poster 1209, Los Angeles, 1988. 2. Baker, C. N., Stocker, S. A., Culver, D. H. and Thornsberry, C. Compari son of the Etest to Agar Dilution, Broth Microdilution, and Agar Diffusion Susceptibility Testing Techniques by Using a Special Challenge Set of Bacteria. Journal of Clinical Microbiology, vol. 29, no. 3, p. 533-538, March 1991. 3. Brown, D. F. J. and Brown, L. Evaluation of the Etest, a novel method of quantifying antimicrobial activity. Journal of Antimicrobial Chem otherapy, vol. 27, p. 185-190, 1991. 4. Jorgensen, J. H., Ferraro M. J., McElmeel M. L., Spargo J.,Swenson J. M. and Tenover F. C. Detection of penicillin and extended spectrum cephalosporin resistance among S. pneumoniae clinical isolates using Etest. Journal of Clinical Microbiology, vol. 32, p. 159-163, January 1994. 5. Citron D. M., Ostovari M. I., Karlsson . and Goldstein E. J. C. Evaluation of Etest for susceptibility testing of anaerobic bacteria. Journal of Clinical Microbiology, vol. 29, no. 10., p. 2197-2203, October, 1991. 6. Sanchez M. L., and Jones R. N. Etest, an antimicrobial susceptibility testing method with broad clinical and epidemiological application. The Antimicrobic Newsletter, vol. 8, no. 1, January 1993. 7. Schulz J. E. and Sahm D. F. Reliability of the Etest for detection of ampicillin, vancomycin, and high-level aminoglycoside resistance in Enterococcus spp. Journal of Clinical Microbiology. vol. 31. no. 12, p. 3336-3339, December 1993. 8. Baker C. N., Huang M. B., and Tenover F. C. Optimizing testing of methicillin resistant Staphylococcus spp. Diagnostic Microbiology and Infectious Diseases, vol. 19, no. 3, p. 167170, July 1994. 9. Tenover F. C., Baker C.N., Swenson J.M. Evaluation of commercial methods for determining antimicrobial susceptibility of S. pneumoniae. Journal of Clinical Microbiology, vol. 34, no. 1, p. 10, 14, 1996. 10. Rosenblatt J. E. and Gustafson D. R. Evaluation of the Etest for susceptibility testing of anaerobic bacteria. Diagnostic Microbiology and Infectious Diseases vol. 22, no. 3, p. 279-284, 1995. Nota: Inmeras referncias (>3000) esto disponveis na internet. BIBLIOGRAFIA 1. FDA Draft, Review Criteria for Assessment of Antimicrobial Susceptibility Testing Devices. Food and Drug Administration, Division of Clinical Laboratory Devices, May 1991, revised March 2000. 2. Lorian, V. Antibiotics in Laboratory Medicine. 6th edition, 2001. Williams & Wilkins, USA. 3. Murray, P.R., Baron, E.J., Pfaller, M.A., Tenover, F.C. and Yolken, R.H. Manual of Clinical Microbiology, 9th edition,ASM Press, 2001. 4. NCCLS, 2000. Methods for dilution antimicrobial susceptibility tests for bacteria that grow aerobically. 5th edition, Approved Standard, M7-A5, vol. 20, no. 2. 5. NCCLS, 2001. Methods for dilution antimicrobial susceptibility tests of anaerobic bacteria. 5th edition, Approved Standard, M11-A5, vol. 21, no. 2. 6. NCCLS Performance standards for antimicrobial susceptibility testing. M100 series-latest annual edition.

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GUIA DE LEITURA EFEITOS RELACIONADOS AOS MICRORGANISMOS

Fig5.

Fig6.

Fig7.

Fig5. Procure por microcolnias quando testar enterococcos. CIM 4 mcg/ml. Fig6. Ignore o vu produzido pelas espcies de Proteus. CIM 0.064 mcg/ml. Fig7. Leia todas as colnias isoladas quando nas elipses de clindamicina para anaerbios. CIM 16mcg/ml.

Fig8

Fig9

Fig10

Fig8. Incline a placa para visualizar colnias puntiformes e nuvem de microcolnias, especialmente para enterococos, pneunococo, fusobacteria, Acinetobacter e Stenotrophomonas spp.CIM 1 mcg/ml Fig9. Efeitos paradoxais do inibio em CIM baixa com recrescimento em CIM mais elevada. CIM > 256 mcg/ml

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Fig10. Pesquise atentamente nos pnemococos os pontos de interseco nos beta-lactmicos visualizando todas as microcolnias e nuvens. CIM 2 mcg/ml

Fig11

Fig12

Fig13

Fig11. Subpopulao resistente de pneumococo. CIM > 32 mcg/ml Fig12. Ignore a hemlise e leia onde o crescimento inibido. CIM 0,032 mcg/ml Fig13. Arraste em subpopulaes de estafilococos resistentes a glicopeptdeos resistentes. CIM 12 mcg/ml EFEITOS RELACIONADO S DROGAS

Fig14

Fig15

Fig16

Fig14. Drogas bactericidas como os aminoglicosdeos do elipses claras. CIM 0,064 mcg/ml Fig15. Drogas bacteristticas como trim/sulfa podem dar zonas difusas. CIM 3 mcg/ml Fig16. Inibidores de -lactamases com atividade intrnseca, por ex. e.g. tazobactam, podem ter extender a elipse abaixo da CIM. Extrapole a curvatura superior em direo fita para obter o resultado. CIM 0.75 mcg/ml

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EFEITOS RELACIONADOS AOS MECANISMOS DE RESISTNCIAS

Fig17

Fig18

Fig19

Fig17. Para beta-lactmicos leia onde a subpopulao resistente est completamente inibida. CIM >32 mcg/ml Fig18. Colnias isoladas no interior da elipse representam subpopulaes resistentes, por exemplo, MRSA. CIM >256 mcg/ml Fig19. O Alongamento da elipse resitncia induzvel dos macroldeos Extrapole a elipse em direo fita para determinar a CIM (a) 0.38 mcg/ml; se as colnias aparecerem na extremidade superior, leia o valor mais elevado (b) CIM > 256 g/ml. EFEITOS DA TCNICA E MANUSEIO

Fig20

Fig21

Fig22

Fig20. Ponto de interseco entre dois valores de CIM. Leia o valor imediatamente acima. CIM 0,19 mcg/ml Fig21. Pontos de interseco diferentes em cada lado da fita. Leia o valor mais alto (CIM 0.5 mcg/ml). Se a diferena for maior do que uma diluio, repita o teste. Fig22. Ignore a fina linha de crescimento na borda da fita. CIM 0.25 mcg/ml .
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