1.DEFINIÇÃO- Técnica 2. INTRODUÇÃO A realização 3.AMOSTRA - 1Tipo de amostra
destinada à determinação da do antibiograma e sua Colônias puras de bactérias gram- sensibilidade interpretação não é positivas ou gram negativas.Colônias bacteriana in vitro frente a provenientes de cultivo bacteriano uma tarefa fácil, por suas agentes antimicrobianos, recente de 18 a 24 horas, isoladas a também conhecido por Teste de limitações e principalmente partir de meios de Sensibilidade a pela crescente descoberta de cultura não seletivos. Antimicrobianos (TSA). novos mecanismos de resistência, o que exige cada vez mais atualização e treinamento dos profissionais.
3.1.Armazenamento e 3.2.Critério para rejeição. As 4.MATERIAIS E EQUIPAMENTOS
estabilidade amostras que já ultrapassaram o NECESSÁRIOS As amostras mantem-se prazo máximo de (NÃO FORNECIDOS) viáveis para a execução das estabilidade devem ser rejeitadas - Estufa bacteriológica (códigos 570700 para a análise, ou 570701); análises até cerca de 24 horas devendo ser repicadas em meio - Alças bacteriológicas em platina ou de cultivo em meio não apropriado, e usadas descartáveis seletivo. Além deste prazo, colônias recentes. Outro cuidado (códigos 570659, 570660 e 570657); deve-se fazer novo repique importante consiste - Agar Mueller Hinton em placas da cepa, cultivar por mais 24 em verificar a pureza do inóculo, 90X15mm (código horas em meio não e na dúvida, sugere-se 540145) ou 140X15mm (código seletivo para depois proceder o repique da cepa. Em caso de 542518); ao exame. contaminação, deve-se - Tubo com escala 0,5 Mac Farland ou reisolar o micro-organismo a ser tubidímetro; testado para evitar - Solução salina estéril (NaCl 0,85%); erros na medição dos halos. - Termômetro de máxima e mínima para controle da estufa; - Swabs estéreis para espalhamento da suspensão; - Tabelas com os valores esperados de halos inibitórios; - Bico de Bunsen. 5. PROCEDIMENTO b- Suspender as colônias em c- Embeber um swab estéril na TÉCNICO solução salina estéril suspensão bacteriana, (NaCl 0,85%) até se obter uma comprimindo-o contra as paredes do Retirar as placas e os frascos turvação compatível tubo para tirar o com os discos da com o grau 0,5 da escala Mac excesso da suspensão, e semear em geladeira cerca de 20-30 minutos Farland (1x106 UFC/mL). seguida de forma para que adquiram a Para este passo deve ser utilizado suave em todas direções na placa (cinco temperatura ambiente antes da um tubo aferido na direções), execução da prova. escala 0,5 de Mac Farland como procurando abranger toda a superfície; comparativo (solicite d- Aguardar (não mais que 15 minutos) a a- Com uma alça bacteriológica ao seu vendedor) ou um superfície do em platina devidamente turbidímetro. agar secar; flambada e resfriada, tocar na colônia recente (18-24h); e- Com auxílio de uma pinça g-Resultados: flambada e resfriada, Com o auxílio de uma régua, colocar os monodiscos ou paquímetro ou dispositivo multidiscos, sobre a semelhante, medir o diâmetro superfície do meio inoculado, dos halos inibitórios de exercendo uma leve cada disco, e consultar uma pressão com a ponta da pinça tabela apropriada para para uma boa adesão determinar se a bactéria em dos discos; análise é sensível, intermediário ou resistente ao f- Incubar a placa com os discos antimicrobiano testado. em estufa bacteriológica a 36 oC por 18 a 24 horas;