UNIVERSIDADE FEDERAL DO PIAU

CENTRO DE CINCIAS DA SADE

CURSO DE FARMCIA
DISCIPLINA: MICROBIOLOGIA CLNICA
PROFESSOR: Dr. EVALDO HIPLITO

ANTIBIOGRAMA- CSLI

TERESINA
JULHO 2016

CARLA LORENA SILVA RAMOS

PAULO TRCIO DOS SANTOS LEITE

ANTIBIOGRAMA
Tecnica destinada a determinacao da sensibilidade
bacteriana in vitro frente a agentes antimicrobianos,
tambem conhecido por Teste de Sensibilidade a
Antimicrobianos (TSA).

Teste de Sensibilidade a Antimicrobianos (TSA)

Guia na escolha da terapia reacional;
Usa microrganismo que contribua para um processo infecioso;
Garantir a eficacia antimicrobiana quando a Sensibilidade no pode
ser prevista;
Fornece dados epidemiolgicos:

-detectar e rastrear surtos

-localizar cepas resitentes

CLSI- Clinical Laboratory Standard Institute

Subcommittee on Antimicrobial Susceptibility Testing
Metodos de referncia para
suscepitiblidade antimicrobianos;

testes

de

Criterios interpretativos para os TSA;

Parmetros de controle de qualidade para os
metodos padronizados;
Atualizacao continua para otimizar a deteccao de
mecanimos de resistncia emergentes

Orgo que padroniza os testes laboratoria

CLSI- Clinical Laboratory Standard Institute

Subcommittee on Antimicrobial Susceptibility Testing

No Brasil a ANVISA recomenda que se use

o CLSI na padronizao do teste de
sensisbilidade antimicroniano.

TSA- Escolha do antimicrobiano

Nmero limitado para cada grupo bacteriano

Laboratrio
Farmacologistas
SCHI
Mdicos infectologistas

o Conhecimento prvio do perfil de susceptibilidade;

o Conhecimento de farmacocintica e farmacodinmica;
o Custo do antimicrobiano;

TSA- Escolha do antimicrobiano

Grupo A : uso rotineiro
Grupo B: s reportados se o microrganismo for resistente ao grupo A, ou
casos de intolerncia, alergia, falha teraputica
Grupo C: testar cepa endmica e surtos, infeces hospitalares, pacientes
alrgicos, microrganismos no usais
Grupo U: limitados infeco urinrias

TSA- Mtodos e Tcnicas

Convencionais:
Disco-difuso em gar (Kirby-Bauer): Qualitativo
Diluio (CIM) : Quantitativo
-Teste epsilomtrico
-Microdiluio em gar
-Macro ou microdiluio em caldo
Automatizados:
Diluio: Quantitativo ou Semi-quantitativo

Mtodo de Kirby-Bauer- Difuso em gar

-Limitaes:
Microrganismos de crescimento rpido;
Qualitativo;
No-padronizao desde mtodo para alguns antimicrobianos;
No-deteco de alguns mecanismos de resistncia;
-Vantagens:
Fcil execuo;
Reprodutibilidades;
Utilizao de reagentes de baixa custo;
Resultados de fcil interpretao clnica;
Flexibilidade quanto escolha dos antimicrobianos e a no exigncia de
equipamentos especiais;

Mtodo de Kirby-Bauer
1) Meio
Mueller-Hinton gar-(MHA)
) Baixa reprodutibilidade;
) Baixa quantidade de inibidores;
) Crescimento satisfatrio;
) Estocagem 2-8C;

*Haemophilus spp- Haemophilus Test Medium HTM

*Neisseria gonorrhoeae- GC gar Base
*Streptococcus pneumoniae- STCC (MHA +5% Sangue)

Mtodo de Kirby-Bauer
2) Disco de papel impregnados de antimicrobianos:

Guardar em freezer ou refrigerador

Uso imediato: 2-8C
Penicilina e derivados Dessecador
Prazo de validade
Deixar a T.A. por 2h antes do uso

Mtodo de Kirby-Bauer
3) Preparo do inculo:
3-5 colnias isoladas, mesma morfologia
-para microrganismo obtidos de meios seletivos:
4,5ml MHB35-37C2-4h0,5MF
-para Haemophylus spp, Neisseria spp, S.pneumoniae e microrganismos
obtidos de meios no seletivos:
4,5ml de soro fisiolgico ou MHB suspenso 0,5MF

Mtodo de Kirby-Bauer

Mtodo de Kirby-Bauer
4) Inoculao nas placas:

Dentro de 15 minutos aps ajustar a turbidez da suspenso

de inculo

Usando o Swab estril

Trs sentidos Tapete homogneo

Deixar secar com tampa entreaberta de trs a cinco

minutos (nunca mais de 15 minutos)

Mtodo de Kirby-Bauer
5) Aplicao dos discos:

Bactria pr determinada
Aplicar e pressionar o disco ( pina estril)
Aplicar no mximo 12 discos na placa de 150 mm e 5 disco na placa de 90 mm (2-3 cm)
O disco no deve ser reaplicado aps ter entrado em contato com a superfcie de gar.

Mtodo de Kirby-Bauer
6) Incubao:
Inverter a placa e incubar at 15 minutos aps aplicao dos discos
Incubao : 35-37C
18 a 24 h
Atmosfera normal
Exceo : Streptococcus spp, Haemophylus spp, Neisseria spp tenso de
CO2 (5-7%)

Mtodo de Kirby-Bauer
7) Leitura dos halos:
Superfcie escura com luz posicionada diretamente sob a placa;
Auxlio de uma rgua ou paqumetro sobre o fundo da placa;
STCC-placa aberta- crescimento, no hemlise

Mtodo de Kirby-Bauer
8) Interpretao:
Tabelas de zonas de inibio calculadas em relao a concentrao srica.
Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI)

Mtodo de Kirby-Bauer
9) Controle de Qualidade:
Semanal ou mudana de lote
Estoque de culturas

Mtodo Quantitativos

Diluio em Caldo

Macrodiluio em Tubos

Macrodiluio em Tubos

Microdiluio em Caldo

Microdiluio em Caldo

Microdiluio em gar

Microdiluio em gar

Microdiluio em gar

Teste Epsilomtrico

E-test

E-test

E-test

Mtodos Automatizados

REFERNCIAS
Recomendaes da Sociedade Brasileira de Patologia
Clnica /Medicina Laboratorial: Boas prticas em
microbiologia clinica
http://www.sbpc.org.br/upload/conteudo/Microbiologia.pdf
http://
www.anvisa.gov.br/servicosaude/manuais/clsi/clsi_OPASM2
-A8.pdf
http://www.interlabdist.com.br/dados/noticias/pdf_190.pdf

OBRIGADO!

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CURSO DE FARMCIA
DISCIPLINA: MICROBIOLOGIA CLNICA
PROFESSOR: Dr. EVALDO HIPLITO

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