LABORATÓRIO DA ÁREA DE SAÚDE

Procedimento Operacional Padrão Código: 007 POP

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1. OBJETIVOS
O VDRL (Veneral Disease Research Laboratory) é um teste não
treponêmico que utiliza como antígeno a cardiolipina, que não é especifico para
os anrígenos do Treponema pallidum, mas apresenta-se elevado na síflis. O
VDRL é uma reação de floculação, apresentando alta sensibilidade e baixa
especificidade. A sensibilidade varia de acordo com a fase da sífilis.
É um teste semiquantitativo cujas titulações são obtidas através de diluições
seriadas do soro, sendo o título final a última diluição apresentar reatividade no
teste.

2. RESPONSABILIDADES
Fica a responsabilidade do teste de VDRL;
• Biomédico responsável;
• Docente;
• Estagiário biomédico;
• Técnico auxiliar;
• Alunos;

3. MATERIAIS / EQUIPAMENTOS
• Hit para determinação de VDRL;
• Placa de Kline;
• Homogeneizador de Kline ou agitador ajustável a 180 r.p.m.;
• Amostras de soro;
• Pipetas automáticas;
• Ponteiras;
• Relógio ou crônometro;
• Microscópio (com objetiva de 10X e 100X);
• Solução Salina (0,9% NaCl);
• Luvas descartáveis;
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4. PROCEDIMENTO
4.1 AMOSTRA
Utilizar amostras de soro ou plasma fresco colhido em EDTA. As amostras
de soro devem ser armazenadas entre 2 a 8°C estável 5 dias e congeladas em
temperaturas abaixo de -20°C por até 6 semanas.

4.2 PROCEDIMENTO
4.2.1. QUALITATIVO
− Pipetar 50µl da amostra ou dos controles em uma cavidade da placa
escavada (placa de Kline)
− Dispensar 20µl da suspensão antigênica sobre a amostra. Não é
necessário misturar os dois componentes.
− Colocar a placa em um agitador mecânico e agitar durante 4 minutos por
180 r.p.m
− Imediatamente após 4 minutos e imediatamente observar ao
microscópio na objetiva de 10X, comparando o resultado da amostra
com os obtidos para os controles positivo e negativo.

4.2.2. SEMI-QUANTITATIVO
− Prepara diluições seriadas do soro, ½, ¼, 1/8, 1/16, 1/32 e, tubos de
ensaio utilizando solução salina (0,90%).
− Adicionar 0,1 mL de solução salina em cada tubo.
− Transferir para o 1° tubo 0,1 mL da amostra que apresentou teste
qualitativo positivo.
− Misturar e transferir 0,1mL do 1° tubo para o 2° tubo, misturar e transferir
0,1mL do 2° para o 3° tubo e assim sucessivamente para até o 5° tubo.
− Obtêm-se diluições ½, ¼, 1/8, 1/6, 1/32.
− Pipetar 50µl das diluições em cada cavidade da placa escavada (placa
de Kline).
− Dispensar 20µl da suspensão antigênica sobre a amostra. Não é
necessário misturar os dois componentes.
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− Colocar a placa em um agitador mecânico e agitar durante durante 4

minutos a 180 r.p.m.
− Imediatamente após 4 minutos, observar o resultado ao microscópio
utilizando o aumento de 100x, comparando o resultado da amostra com
os obtidos para os controles positivo e negativo.
− Será considerado como título a maior diluição da amostra que
apresentar aglutinação microscópica. Se a aglutinação estiver presente
até /32, continuar as diluições a partir do 5° tubo e prosseguir com o
teste.

4.3. RESULTADOS E INTERPRETAÇÃO

4.3.1. TESTE QUALITATIVO
• Reativo: agregados médios e grandes.
• Reativo Fraco: agregados finos dispersos.
• Não Reativo: ausência de agregados, aspecto homogêneo.

4.3.2 TESTE SEMI-QUANTITATIVO

O título corresponde à última diluição que apresenta um resultado
positivo.
Os controles Positivo e Negativo devem ser analisados em cada
conjunto de testes.

*Se os resultados obtidos para os controles forem divergentes, os

resultados das demais amostras devem ser considerados inválidos.
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5. CONTROLE DE QUALIDADE
A utilização dos controles Negativo e Positivo em todos os conjuntos de teste é
fundamental para a verificação do desempenho do sistema.

LIMITAÇÕES DO TESTE

6. LIMITAÇÕES DO TESTE
A utilização de outras amostras, além de soro ou plasma colhido em EDTA,
não está validada pelo teste.

Efeito Prozona: a amostra com título de 1/128 foi testada com o reagente VDRL
e não foi verificado efeito prozona.
Resultado Falso Negativo pode ocorrer na síflis secundária (1% a 2%)
devido ao excesso de anticorpos (efeito prozona). Para evitar está ocorrência,
recomenda-se testar as amostras sem diluir e diluídas 1:8.

ARMAZENAMENTO E ESTABILIDADE DOS REAGENTES

7. ARMAZENAMENTO E ESTABILIDADE DOS REAGENTES

➢ Armazenar entre 2 a 8°C.

➢ Não congelar os reagentes, pois pode causar danos irreversíveis.

➢ Durante o manuseio, estão sujeitos a contaminações de natureza

química e microbiana que podem provocar redução da estabilidade.
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8. PREPARO DOS REAGENTES

O kit de teste de VRDL fornece os reagentes pronto para uso.

9. CUIDADOS E PRECAUÇÕES COM O USO DOS REAGENTES

Cuidados a se tomar com o uso dos reagentes são:
✓ Cuidados de biossegurança na manipulação dos reagentes e das
amostras dos pacientes;
✓ Utilizar as técnicas adequadas de laboratório;
✓ Utilizar as ponteiras para evitar contaminação do desempenho dos
reagentes;
✓ Todos os reagentes devem ser imediatamente fechados após a
utilização;
✓ O kit deve estra à temperatura ambiente (20 a 25°C) para realização do
teste;
✓ Deve-se tomar cuidado para evitar a ingestão e no caso de contato com
os olhos, lavar imediatamente com grande quantidade de água e
procurar auxílio médico;

ABREVIAÇÕES

10. ABREVIAÇÕES
VDRL - Veneral Disease Research Laboratory
r.p.m. – Rotações por minuto
µl - Microlitros
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BIBLIOGRAFIA

11. BIBLIOGRAFIA
https://labtest.com.br/wp-content/uploads/2016/09/VDRL_119_Port.pdf

Elaboração Aprovação e liberação

Nome: Izadora M. C. de Almeida Dias Nome: Cristiane
Cargo: Estudante / Discente Cargo: Professor
Data: 29/11/2023 Data:29/11/2023
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