ARTRI LTEX TESTE

1. FINALIDADE
Teste rpido direto em lmina para determinao qualitativa e quantitativa do
fator reumatide no soro.
2. INTRODUO
Est demonstrado que os soros de pacientes que sofrem de Artrite Reumatide
(AR) apresentam um anticorpo denominado Fator Reumatide (FR). A
deteco do FR no soro feita por meio da prova de Waaler-Rose (WR), ou
pela aglutinao de partculas de ltex. A Laborclin coloca a disposio de seus
usurios a pesquisa qualitativa e quantitativa do FR em ltex.
3. IMPORTNCIA CLNICA
A Artrite Reumatide uma doena auto-imune de evoluo lenta, que tende
cronicidade, sendo que a fase final, aps 15-20 anos de doena, caracterizase por um quadro de deformidades e limitaes de movimento (h eroso de
cartilagens, que posteriormente podem calcificar e fragmentar). O quadro
laboratorial aponta positividade em reaes inespecficas, como a
Hemossedimentao (VHS) acelerada e a positividade na Protena C-Reativa
(PCR). O valor diagnstico da reao em ltex similar ao da prova de WaalerRose (este positivo em cerca de 75% dos casos e a reao do ltex em cerca
de 85-95 % dos casos). Uma pequena parcela dos pacientes pode desenvolver
a doena sem apresentar FR no soro, bem como h casos na populao em
que se verificam ttulos baixos de FR em pacientes clinicamente normais.
Resultados falsamente positivos podem ser verificados em algumas outras
doenas do colgeno, como o LES - Lupus Eritematoso Sistmico, e outras
doenas como a sfilis e algumas doenas hepticas.
4. AMOSTRA
a- Preparo do paciente
Instruir o paciente a fazer um jejum prvio de 8-12h, de modo a evitar
fenmenos como a lipemia, que podem interferir no teste.
b- Tipos de amostra
Soro recm-coletado e separado do cogulo o mais rapidamente possvel aps
a coleta. No usar plasma.
c- Armazenamento e estabilidade
Assim que separado, manter o soro em geladeira (2-8C), e no caso de haver
necessidade em se adiar o teste, congelar a amostra (abaixo de 0oC).
d- Critrios para rejeio
Rejeitar as amostras hemolisadas, lipmicas ou que apresentem sinais de
contaminao por microrganismos.
e- Precaues e cuidados especiais
Todas as amostras devem ser manipuladas com extrema cautela, pois podem
veicular diversas doenas infecto-contagiosas (hepatite, SIDA etc.). Seu
descarte deve ser feito preferencialmente aps sua autoclavao devendo-se
evitar sua eliminao diretamente no meio ambiente. Igual cuidado se
recomenda no descarte de outros materiais como ponteiras plsticas, agulhas
e seringas.
5. INFORMAES GERAIS SOBRE O PRODUTO
a- da Registro na ANVISA: 100.970.10145.
b- Princpio de tcnica
O soro em anlise colocado em contato com um reagente que contm
partculas de ltex revestidas com Imunoglobulina G (IgG) humana
desnaturada. O FR se presente, provoca aglutinao visvel a olho nu das
partculas do ltex.
c- Reagentes
- Reagente do Ltex: contm partculas de poliestireno ltex, revestidas com
IgG humana desnaturada, suspensas em tampo glicina pH 8,2 e contendo
0,1% de azida sdica como preservativo. A sensibilidade do reativo 8,0UI/mL.
- Controle Positivo: Soro humano contendo FR em tampo glicina pH 8,2 e
contendo 0,1% de azida sdica como preservativo, pronto para uso (no
necessita diluio).
- Controle Negativo: Soro humano normal em tampo glicina pH 8,2 e contendo
0,1% de azida sdica como preservativo, pronto para uso (no necessita
diluio).
- Tampo glicina 20 vezes concentrado: soluo salina-glicina tamponada e
concentrada (contendo cloreto de sdio a 0,9%, glicina a 1% e 0,1% de azida
sdica como preservativo), que aps diluda a 1:20 apresenta um pH final 8,2.

rtulo desde que isento de contaminao qumica e microbiana. No congelar

nenhum dos componentes.
e- Precaues e cuidados especiais
- Manter os frascos sempre fechados e com os conta-gotas cheios, de maneira
a evitar o ressecamento das partculas de ltex;
- Os reagentes destinam-se ao uso diagnstico in vitro, no devendo ser
ingeridos ou entrar em contato com a pele e mucosas;
- Deve-se evitar o uso de materiais que possam contaminar os reagentes, tais
como ponteiras plsticas de micropipetadores reaproveitadas;
- Os reagentes contm azida sdica e por esta razo no devem entrar em
contato com materiais metlicos (como os presentes em alguns tipos de
tubulaes) , de modo a se evitar a formao de azidas metlicas explosivas,
devendo seu descarte ser realizado com gua em abundncia;
- Os controles so testados quanto presena de anticorpos anti-HIV e HbsAg,
porm, recomenda-se sua manipulao com a maior cautela possvel.
6. MATERIAIS E EQUIPAMENTOS NECESSRIOS (porm no includos)
- Pipetas graduadas;
- Tubos de ensaio 12x75 mm;
- gua destilada ou deionizada com condutividade inferior a 0,5 S/cm;
- Fonte de luz branca incidente;
- Lmina de vidro com fundo preto com 6 delimitaes (551017).
7. PROCEDIMENTO TCNICO
7.1 Prova qualitativa
a- Deixar os reagentes e amostras adquirirem a temperatura ambiente;
b- Adicionar uma gota da amostra (0,05mL) e uma gota dos controles positivo
e negativo (0,04mL) nas delimitaes da lmina de vidro;
c- Agitar vigorosamente o reagente Ltex (em vrtex ou batendo contra a
palma da mo 10-15 vezes), e adicionar uma gota (0,04mL) deste amostra e
controles, homogeneizando a seguir com os bastes prprios; a
homogeneizao incompleta do ltex pode ocasionar um aumento da aspereza
do reagente e induzir a resultados falsamente positivos;
d- Agitar em agitador mecnico tipo Kline ou similar (cerca de 80 a 100rpm) por
2 minutos;
e- Resultados: Analisar os resultados a olho nu (no usar microscpio) sob
uma fonte de luz branca de boa intensidade:
- O controle negativo no dever apresentar nenhuma aglutinao;
- O controle positivo dever apresentar aglutinao;
- Amostras que no apresentarem aglutinao visvel (formando ento mistura
homognea com o ltex) sero consideradas no reagentes;
- Amostras que apresentarem aglutinao visvel, sero consideradas amostras
reagentes, e devero ser submetidas prova quantitativa para ter seu ttulo
determinado.
7.2 Prova quantitativa
a- Em uma lmina de reao com 6 circunferncias marcadas, colocar 0,05 mL
de tampo glicina em cada uma;
b- Usando pipeta automtica misturar 0,05 mL de soro com a gota de tampo
em movimentos de encher e esvaziar por 5 vezes e transferir 0,05 mL desta
mistura para a prxima gota e assim sucessivamente at a Sexta gota,
desprezando os 0,05 mL desta mistura, obtendo-se assim as diluies 1:2, 1:4,
1:8, 1:16, 1:32 e 1:64 respectivamente;
c- Testar cada diluio conforme a tcnica qualitativa, sendo que a ltima
diluio que apresentar aglutinao ser considerada como ttulo da amostra.

0,05 mL

0,05 mL

0,05 mL
amostra

0,05 mL

0,05 mL

DESPREZAR

0,05 mL

0,05 mL

Tampo para uso: diluir o tampo concentrado com gua destilada ou

deionizada (com condutividade inferior a 0,5 S/cm) a 1:20 e manter em
geladeira. Aps preparado, sua estabilidade de at um ms, desde que
isento de contaminaes.
OBS: Os controles positivo, negativo e tampo glicina acompanham
apenas os produtos de cdigo 550109 e 550192.
d- Armazenamento e estabilidade
Para fins de transporte, o conjunto reagente pode permanecer at 72h em
temperatura ambiente. No laboratrio manter em geladeira (2-8C), condio
na qual o material permanecer estvel at a data de validade expressa em
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f- Resultado: Multiplicar o fator de diluio por 8,0. Exemplo:

aglutinao at a diluio 1:8 indica ttulo 1:8 equivalente a 64 UI/mL (8
x 8 = 64).
- Caso o tubo 5 ainda apresente positividade, pode-se prosseguir com
a diluio at que se determine o ttulo exato.
ATENO: Os conta-gotas do reagente ltex e dos controles
dispensam 0,04 mL (40L) por gota, mas o usurio pode a seu critrio,
visando aumentar o rendimento do material, utilizar gota de 0,020 mL
(20 L) dos controles e do reagente ltex para realizar as reaes,
medida atravs de pipetadores apropriados. Recomendamos que para
tal finalidade sejam usadas apenas ponteiras descartveis a fim de se
evitar a contaminao dos reagentes e controles.
- Precaues e cuidados especiais
- Homogeneizar corretamente o reagente do ltex antes do uso;
- Rotao muito rpida da lmina pode ocasionar ruptura das ligaes
entre os anticorpos da amostra e as partculas de ltex, ocasionando
assim resultado falsamente negativo;
- O uso de reagentes com partculas ressecadas pode simular reao
falsamente positiva;
- Recomenda-se o uso dos controles em cada bateria de testes
executada.
8. RESULTADOS
- Negativos
Reportar como:
Amostra analisada no reagente.
- Positivos
Reportar como:
Fator Reumatide: (indicar o valor em unidades) UI/mL na amostra
analisada.
- Interpretao
O diagnstico da Artrite Reumatide (AR) consiste basicamente na
avaliao dos dados clnicos do paciente, aos quais a pesquisa do fator
Reumatide agrega uma informao adicional para confirmao do
diagnstico. O Consenso de 2002 para diagnstico da AR elaborado
pela Associao Mdica Brasileira aponta dez critrios clnicos e
laboratoriais dos quais o paciente deve apresentar ao menos sete
presentes para confirmao diagnstica. Todas as amostras reagentes
devem ter seu ttulo determinado. A execuo do teste recomendada
quando do estabelecimento do diagnstico. Via de regra, quanto maior
o ttulo de FR no soro pior o prognstico de evoluo da doena. Os
casos de falsa positividade na populao em geral so de cerca de 5%
em pacientes sem sinais clnicos de doena. Cerca de 20% dos
pacientes com AR poder apresentar negatividade pesquisa de FR.

11. CARACTERSTICAS DE DESEMPENHO

A sensibilidade diagnstica 100% e a especificidade diagnstica 98,8%.
12. GARANTIA DA QUALIDADE
A Laborclin obedece ao disposto na Lei 8.078/90 - Cdigo de Defesa do
Consumidor. Para que o produto apresente seu melhor desempenho,
necessrio:
- que o usurio conhea e siga rigorosamente o presente procedimento
tcnico;
- que os materiais estejam sendo armazenados em condies adequadas;
- que os equipamentos e demais acessrios necessrios estejam em boas
condies de uso, manuteno e limpeza.
Antes de ser liberado para venda, cada lote do produto submetido a testes
especficos, que so repetidos periodicamente at a data de vencimento
expressa em rtulo. Os certificados de anlise de cada lote podem ser
obtidos junto ao site www.laborclin.com.br. Em caso de dvidas ou outras
informaes, contatar o SAC - Servio de Assessoria ao Cliente atravs do
telefone 0800-410027 ou pelo e-mail sac@laborclin.com.br. Quaisquer
problemas que inviabilizem uma boa resposta do produto, que tenham
ocorrido comprovadamente por falha da Laborclin sero resolvidos sem nus
ao cliente, conforme o disposto em lei.
13. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
1. Christian, C.L.; Mendez-Byran; Larson, D.L. Proc. Soc. Exptl. Biol. Med.,
98:820-823, 1958.
2. Friou, G.J.; Finch, C. And Detre, K.D. J. Immunol. , 80:324-329, 1958.
3. Hargreaves, M.; Richmond, M. And Morton, R. Proc. Mayo Clin., 23:25-28,
1948.
4. Holman, H.R. & Kinkel, H.G. Science, 126:163, 1957.
5. Miescher, P.A. & Strassie, R. Vox. Sang., 2:283-287, 1957.
6. Miescher, P.A.; Rothfield, N. & Miescher, A. Lupus Erythematosus, E.L.
Ed., Blakiston Co., NY, 1966.
7. Rothfield, N.F.; Phythyon, J.M.; McEwen,C. & Miescher, P. Arth. Rheum. ,
4:223-229, 1961.
8. Bennet, R.M.; Langer, B. & Molina, E.Am. J. Clin. Path., 66:743-745, 1976.
9. Chapman, J.C. Am. J. Med. Tech., 42:154-157, 1976.
10. Tuffanelli, D.L. Arch. Ferm. 106:553-566, 1972.
11. Horwitz, C.A.; Polesky, H.; Stillman, P.C.J.; Ward, G.; Henle and W.
Henle, Brit. Med. J., 591, 1973.
14. APRESENTAO
550109 ARTRI LATEX-R=2mL-KIT 50T
550192 ARTRI LATEX-R=4mL-KIT 100T
550193 ARTRI LATEX-R=4mL-FR

9. LIMITAES DO MTODO
- Alguns pacientes portadores de Lupus Eritematoso Sistmico podem
apresentar positividade ao FR;
- Resultados obtidos alm dos 2 minutos, ou com o uso de reagentes
ou amostras deteriorados (ou alterados) no devem ser considerados;
- A sensibilidade da presente metodologia (8,0 UI/mL) uma de suas
caractersticas, podendo no haver concordncia exata com produtos
similares existentes no mercado, da a importncia em se acompanhar
as anlises sempre em um mesmo laboratrio;
- Para maiores informaes sobre a ao de interferentes, sugere-se a
consulta aos textos de Tietz e Young.
10. CONTROLE DA QUALIDADE
- Materiais necessrios
Controle positivo e negativo includos no conjunto ou amostras clnicas
com ttulo conhecido (o reagente avulso no acompanhado pelos
controles).
- Periodicidade
Ao receber o conjunto, efetuar testes usando os controles que
acompanham o conjunto e amostras de referncia. Recomenda-se a
anlise dos controles que acompanham o conjunto em cada bateria de
amostras.
- Interpretao e avaliao
A funo do controle de qualidade garantir que o material usado
esteja fornecendo resultados compatveis com o desempenho
esperado. Assim, espera-se que o controle positivo apresente
aglutinao e que o controle negativo no apresente aglutinao, do
contrrio, no liberar os resultados das anlises de amostras clnicas
enquanto no forem apuradas as causas.

Dispondo-se de amostras de referncia com ttulo conhecido, pode-se

avaliar a sensibilidade do material, em periodicidade a ser estabelecida
pelo prprio laboratrio conforme seus procedimentos adotados.

Laborclin Produtos para Laboratrios Ltda

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Telefone 041 36619000- www.laborclin.com.br

Servio de Assessoria ao Cliente

SAC 0800-410027
sac@laborclin.com.br

LB 170747 Rev 15 - 06/2014

Responsvel tcnico:
Elisa Hizuru Uemura CRF/PR-4311

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