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PROJETO DE PESQUISA

PROJETO DE PESQUISA - PRORROGAÇÃO

ATUAÇÃO DO SISTEMA PROTEOLÍTICO UBIQUITINA


PROTEASSOMA NO MÚSCULO ESQUELÉTICO DE RATOS
SÉPTICOS SEDENTÁRIOS E TREINADOS
NPP2015020002557
CARLA WERLANG COELHO | CPF: 665.168.979-72
carla.coelho@udesc.br

Recebido em 06/06/2017

01. Identificação

Título do projeto
ATUAÇÃO DO SISTEMA PROTEOLÍTICO UBIQUITINA PROTEASSOMA NO MÚSCULO
ESQUELÉTICO DE RATOS SÉPTICOS SEDENTÁRIOS E TREINADOS

Centro ao qual o projeto será vinculado


Centro de Ciências Tecnológicas - CCT

Curso de graduação
Não

O projeto será vinculado a um curso de pós-graduação?


Não

O projeto será vinculado a um grupo de pesquisa?


Fisiologia e Bioquímica do Exercício

02. Prazo de execução

Início previsto do projeto Conclusão prevista do projeto


Ano Mês Ano Mês
2017 Agosto 2019 Agosto

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ATUAÇÃO DO SISTEMA PROTEOLÍTICO UBIQUITINA PROTEASSOMA NO MÚSCULO ESQUELÉTICO DE RATOS SÉPTICOS
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03. Coordenação

Coordenador do projeto CPF do coordenador do projeto


CARLA WERLANG COELHO 665.168.979-72

E-mail do coordenador do projeto Titulação do coordenador do projeto


carla.coelho@udesc.br Doutorado

Carga horária
10h

04. Equipe

05. Cronograma

Etapa 1 Início Fim


Análises bioquímicas de metabolismo energético anaeróbico 08/2017 07/2018
Serão realizadas análises da enzimas relacionadas ao metabolismo anaeróbico (ATP-
CP e Glicólise).
a

Etapa 2 Início Fim


Análises bioquímicas do metabolismo energético aeróbico 08/2018 07/2019
Serão realizadas análises de enzimas do ciclo de Krebs e cadeia de transporte de
elétrons.

06. Área do conhecimento

Educação Física (Área)


Ciências da Saúde (Grande área)

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07. Descrição

Resumo
Sepse é a resposta inflamatória sistêmica secundária a um processo infeccioso de alta incidência
e elevada mortalidade. A miopatia esquelética, causada pela sepse, gera atrofia muscular e
fraqueza generalizada que estão relacionadas a disfunção mitocondrial, produção exacerbada de
espécies reativas de oxigênio (ERO) e aumento da degradação protéica. A hipótese que será
testada nesse projeto é que no modelo de sepse grave, há aumento da atividade do sistema
proteolítico ubiquitina proteassoma (UP) no músculo esquelético, promovendo atrofia e fraqueza
muscular, e que o condicionamento físico prévio a sepse poderia amenizar os efeitos dessa
enfermidade sobre a miopatia esquelética . O objetivo será avaliar a atividade do sistema
proteolítico UP no músculo equelético em modelo experimental de sepse grave e os efeitos do
treinamento físico (TF) prévio sobre esse sistema de degradação. Os experimentos serão
realizados em ratos Wistar, inicialmente distribuídos em dois grupos: Não-Treinado e Treinado. O
grupo Treinado será submetido a protocolo de TF, de predominância aeróbica, com duração de
oito semanas, em esteira rolante (60 minutos, 5 dias por semana, a 60% da velocidade máxima
encontrada em teste de esforço máximo). Ao final do protocolo, o grupo Não-Treinado será
dividido em grupo Sham (falsa cirurgia) e CLP (indução da sepse por ligação e punção cecal); e o
grupo Treinado da mesma maneira: ShamT e CLPT, totalizando quatro grupos experimentais. Os
quatro grupos serão submetidos aos procedimentos cirúrgicos e após dois dias sacrificados
sendo coletado sangue e retirados os músculos: sóleo, plantar e diafragma para as devidas
análises. A atividade do sistema de degradação protéica UP será avaliada através da expressão
gênica e da expressão protéica das E3 ligases MURF-1, Atrogin-1 e E3a, e a deubiquitinase USP
28. A expressão gênica será avaliada por RT- PCR utilizando primers específicos e Sybr Green
Master Mix. A expressão protéica será avaliada através da técnica de Western Blotting utilizando
anticorpos primários e secundários.

Palavras-chave
Treinamento físico, miopatia esquelética, sistema de degradação protéica, sepse, Biologia
Molecular

08. Referências bibliográficas

1. Adhihetty, P. J., I. Irrcher, et al. (2003). "Plasticity of skeletal muscle mitochondria in response to
contractile activity." Exp Physiol 88(1): 99-107.

2. and perforation." Intensive Care Med 29(10): 1782-9.

3. Angus, D. C., W. T. Linde-Zwirble, et al. (2001). "Epidemiology of severe sepsis in the United
States: analysis of incidence, outcome, and associated costs of care." Crit Care Med 29(7): 1303-
10.

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4. Bassel-Duby, R. and E. N. Olson (2006). "Signaling pathways in skeletal muscle remodeling."
Annu Rev Biochem 75:19-37.

5. Bednarik, J., P. Vondracek, et al. (2005). "Risk factors for critical illness polyneuromyopathy." J
Neurol 252(3):343-51.

6. Bone, R. C., R. A. Balk, et al. (1992). "Definitions for sepsis and organ failure and guidelines for
the use of innovative therapies in sepsis. The ACCP/SCCM Consensus Conference Committee.
American College of Chest Physicians/Society of Critical

7. Boveris, A. and A. Navarro (2008). "Systemic and mitochondrial adaptive responses to moderate
exercise in rodents." Free Radic Biol Med 44(2): 224-9.

8. Callahan,L. A. and G. S. Supinski (2009). "Sepsis-induced myopathy." Crit Care Med 37(10
Suppl): S354-67.

9. Cankayali, I., Y. H.Dogan, et al. (2007). "Neuromuscular deterioration in the early stage of sepsis
in rats." Crit Care 11(1): R1.

10. Chen, H. I.,S. Y. Hsieh, et al. (2007). "Exercise training attenuates septic responses in conscious
rats." Med Sci Sports Exerc 39(3): 435-42.

11. Chiolero, R., J. P. Revelly, et al. (1997). "Energy metabolism in sepsis and injury." Nutrition 13(9
Suppl): 45S-51S.

12. Coakley, J. H., K. Nagendran, et al. (1998). "Patterns of neurophysiological abnormality in


prolonged critical illness." Intensive Care Med 24(8): 801-7.

13. Crespo, C. J., M. R. Palmieri, et al. (2002). "The relationship of physical activity and body weight
with all-cause mortality: results from the Puerto Rico Heart Health Program." Ann Epidemiol 12(8):
543-52.

14. Dal-Pizzol, F., C. Ritter, et al. (2010). "Oxidative mechanisms of brain dysfunction during sepsis."
Neurochem Res 35(1): 1-12.

15. de Araujo, C. C., J. D. Silva, et al. (2012). "Regular and moderate exercise before experimental
sepsis reduces the risk of lung and distal organ injury." J Appl Physiol.

16. DeBlieux, P. M., K. H. McDonough, et al. (1989). "Exercise training attenuates the myocardial
dysfunction induced by endotoxin." J Appl Physiol 66(6): 2805-10.

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4
17. Deem, S. (2006)."Intensive-care-unit-acquired muscle weakness." Respir Care 51(9): 1042-52;
discussion 1052-3.

18. Deem, S., C. M. Lee, et al. (2003). "Acquired neuromuscular disorders in the intensive care unit."
Am J Respir Crit Care Med 168(7): 735-9.

19. De Jonghe, B., T. Sharshar, et al. (2002). "Paresis acquired in the intensive care unit: a
prospective multicenter study." Jama 288(22): 2859-67.

20. de Letter, M. A., P. I. Schmitz, et al. (2001). "Risk factors for the development of polyneuropathy
and myopathy in critically ill patients." Crit Care Med 29(12): 2281-6.

21. Du, J., X. Wang, et al. (2004). "Activation of caspase-3 is an initial step triggering accelerated
muscle proteolysis in catabolic conditions." J Clin Invest 113(1): 115-23.

22. Ebisui, C., T. Tsujinaka, et al. (1995). "Interleukin-6 induces proteolysis by activating intracellular
proteases (cathepsins B and L, proteasome) in C2C12 myotubes." Clin Sci (Lond) 89(4): 431-9.

23. Eikermann, M., G. Koch, et al. (2006). "Muscle force and fatigue in patients with sepsis and
multiorgan failure." Intensive Care Med 32(2): 251-9.

24. Friedman, G., E. Silva, et al. (1998). "Has the mortality of septic shock changed with time." Crit
Care Med 26(12): 2078-86.

25. Frost, et al. (2007). "Regulation of muscle protein synthesis during sepsis and inflammation." Am J
Physiol Endocrinol Metab 293(2): E453-9.

26. Garnacho-Montero, J., J. Madrazo-Osuna, et al. (2001). "Critical illness polyneuropathy: risk
factors and clinical consequences. A cohort study in septic patients." Intensive Care Med 27(8):
1288-96.

27. Gerovasili, V., K. Stefanidis, et al. (2009). "Electrical muscle stimulation preserves the muscle
mass of critically ill patients: a randomized study." Crit Care 13(5): R161.

28. Giannesini, B., M. Izquierdo, et al. (2008)."Endotoxemia does not limit energy supply in exercising
rat skeletal muscle." Muscle Nerve 37(4): 496-504.

29. Hasselgren, P. O., M. J. Menconi, et al. (2005). "Novel aspects on the regulation of muscle
wasting in sepsis." Int J Biochem Cell Biol 37(10): 2156-68.

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5
30. Hood, D. A. (2001). "Invited Review: contractile activity-induced mitochondrial biogenesis in
skeletal muscle." J Appl Physiol 90(3): 1137-57.

31. Hood, D. A. (2009). "Mechanisms of exercise-induced mitochondrial biogenesis in skeletal


muscle." Appl Physiol Nutr Metab 34(3): 465-72

32. Hood, D. A. and A. Saleem (2007). "Exercise-induced mitochondrial biogenesis in skeletal


muscle." Nutr Metab Cardiovasc Dis 17(5): 332-7.

33. Huang, J. and N. E. Forsberg (1998). "Role of calpain in skeletal-muscle protein degradation."
Proc Natl Acad Sci U S A 95(21): 12100-5.

34. Klaude, M., K. Fredriksson, et al. (2007). "Proteasome proteolytic activity in skeletal muscle is
increased in patients with sepsis." Clin Sci (Lond) 112(9): 499-506.

35. Klaude, M., M. Mori, et al. (2012). "Protein metabolism and gene expression in skeletal muscle of
critically ill patients with sepsis." Clin Sci (Lond) 122(3): 133-42.

36. Kraemer, W. J. and N. A. Ratamess (2004). "Fundamentals of resistance training: progression and
exercise prescription." Med Sci Sports Exerc 36(4): 674-88. Lang, C.H., R. A.

37. Levy, M. M., M. P. Fink, et al. (2003). "2001 SCCM/ESICM/ACCP/ATS/SIS International Sepsis
Definitions Conference." Intensive Care Med 29(4): 530-8.

38. Linke, A., V. Adams, et al. (2005). "Antioxidative effects of exercise training in patients with chronic
heart failure: increase in radical scavenger enzyme activity inskeletal muscle." Circulation 111(14):
1763-70.

39. Maitra, S. R., M. M. Wojnar, et al. (2000). "Alterations in tissue glucose uptake during the
hyperglycemic and hypoglycemic phases of sepsis." Shock 13(5): 379-85.

40. Martin, G. S., D. M. Mannino, et al. (2003). "The epidemiology of sepsis in the United States from
1979 through 2000." N Engl J Med 348(16): 1546-54.

41. Mitch, W. E. and A. L. Goldberg (1996). "Mechanisms of muscle wasting. The role of the ubiquitin-
proteasome pathway." N Engl J Med 335(25): 1897-905.

42. Noble, E. G., K. J. Milne, et al. (2008). "Heat shock proteins and exercise: a primer." Appl Physiol
Nutr Metab 33(5): 1050-65.

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43. Oguma, Y., H. D. Sesso, et al. (2002). "Physical activity and all cause mortality in women: a
review of the evidence." Br J Sports Med 36(3): 162-72.

44. Poulsen, J. B., K. Moller, et al. (2011). "Effect of transcutaneous electrical muscle stimulation on
muscle volume in patients with septic shock." Crit Care Med 39(3): 456-61.

45. Powers, S. K. and M. J. Jackson (2008). "Exercise-induced oxidative stress: cellular mechanisms
and impact on muscle force production." Physiol Rev 88(4): 1243-76.

46. Radak, Z., H. Y. Chung, et al. (2005). "Exercise and hormesis: oxidative stressrelated adaptation
for successful aging." Biogerontology 6(1): 71-5.

47. Reid, M. B. (2001). "Invited Review: redox modulation of skeletal muscle contraction: what we
know and what we don't." J Appl Physiol 90(2): 724-31.

48. Ritter, C., M. Andrades, et al. (2003). "Oxidative parameters and mortality in sepsis induced by
cecal ligation

49. Salvemini, D. and S. Cuzzocrea (2002). "Oxidative stress in septic shock and disseminated
intravascular coagulation." Free Radic Biol Med 33(9): 1173-85.

50. Schefold, J. C., J. Bierbrauer, et al. (2010). "Intensive care unit-acquired weakness (ICUAW) and
muscle wasting in critically ill patients with severe sepsis and septic shock." J Cachexia
Sarcopenia Muscle 1(2): 147-157.

51. Sen, C. K. (2001). "Antioxidants in exercise nutrition." Sports Med 31(13): 891-908.

52. Silva, E., A. Pedro Mde, et al. (2004). "Brazilian Sepsis Epidemiological Study (BASES study)."
Crit Care 8(4): R251-60.

53. Silva, L. A., C. A. Pinho, et al. (2009). "Physical exercise increases mitochondrial function and
reduces oxidative damage in skeletal muscle." Eur J Appl Physiol 105(6): 861-7.

54. Smith, M. A. and M. B. Reid (2006)."Redox modulation of contractile function in respiratory and
limb skeletal muscle." Respir Physiol Neurobiol 151(2-3): 229-41.

55. Sogayar, A. M., F. R. Machado, et al. (2008). "A multicentre, prospective study to evaluate costs
of septic patients in Brazilian intensive care units." harmacoeconomics 26(5): 425-34.

56. Spitzer, A. R., T. Giancarlo, et al. (1992). "Neuromuscular causes of prolonged ventilator
dependency." Muscle Nerve 15(6): 682-6.

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57. Starkie, R., S. R. Ostrowski, et al. (2003). "Exercise and IL-6 infusion inhibit endotoxin-induced
TNF-alpha production in humans." Faseb

58. Stevens, R. D., S. A. Marshall, et al. (2009). "A framework for diagnosing and classifying intensive
care unit-acquired weakness." Crit Care Med 37(10 Suppl): S299-308.

59. Vary, T. C. and S. R. Kimball (1992)."Sepsis-induced changes in protein synthesis: differential


effects on fast- and slow-twitch muscles." Am J Physiol 262(6 Pt 1): C1513-9.

60. Voisin, L., D. Breuille, et al. (1996). "Muscle wasting in a rat model of long-lasting sepsis results
from the activation of lysosomal, Ca2+ -activated, and ubiquitinproteasome proteolytic pathways."
J Clin Invest 97(7): 1610-7.

61. Zhang, H., A. S. Slutsky, et al. (2000). "Oxygen free radicals in ARDS, septic shock and organ
dysfunction." Intensive Care Med 26(4): 474-6.

09. Anexos

Justificativa de Prorrogação Extensão Tamanho


Justificativa para Prorrogação do Projeto.doc doc 40 KB

Projeto de Pesquisa - Prorrogação Extensão Tamanho


projeto_de_pesquisa_novo_2013_Carla[1].pdf.pdf pdf 133 KB

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