Ao longo das duas últimas décadas, os coronavírus, especificamente o COVID-19, têm estado

amplamente associados a surtos de doenças no leste da Ásia e no Oriente Médio. Duas síndromes
respiratórias agudas graves, SARS (Síndrome Respiratória Aguda Grave) e MERS (Síndrome
Respiratória do Oriente Médio), surgiram em 2002 e 2012, respectivamente. Recentemente, um
novo coronavírus, chamado SARS-CoV-2, que causa a doença COVID-19, emergiu no final de
2019, representando uma ameaça global à saúde, resultando em uma pandemia contínua que afeta
muitas pessoas em diferentes países.
Profissionais de saúde em todo o mundo estão atualmente fazendo esforços para controlar a
disseminação contínua da doença causada pelo novo coronavírus, inicialmente denominada 2019-
nCoV, que foi identificado pela primeira vez em Wuhan, na província de Hubei, na China, em 12 de
dezembro de 2019. Em 11 de fevereiro de 2020, a Organização Mundial da Saúde (OMS)
oficialmente nomeou a doença atual associada ao vírus como COVID-19, causada pelo SARS-CoV-
2. Acredita-se que a primeira série de pacientes estivesse ligada ao mercado de frutos do mar de
Huanan, no sul da China.
O COVID-19 faz parte da família de coronavírus, que inclui várias cepas virais que afetam uma
ampla gama de hospedeiros, com o terceiro domínio de S sobrepondo-se ao domínio 2S volátil.
Recentemente, a análise estrutural das proteínas S do COVID-19 identificou 27 mutações não
sinônimas. Seis alternativas foram encontradas no RBD (domínio de ligação a receptores) entre os
aminoácidos 357 e 528. Quatro alternativas foram identificadas no RBM (motivo de ligação a
receptores) no domínio CTD (terminal C) do domínio 1S. Importante notar que não houve
mudanças nos aminoácidos do RBM, que se liga diretamente ao receptor da enzima conversora de
angiotensina 2 (ACE2) em SARS-CoV. Atualmente, o foco principal é entender o número de
variações necessárias para a adaptação do hospedeiro. A comparação de sequências revelou 17
alterações não sinônimas entre as sequências iniciais de SARS-CoV-2 e as cepas relacionadas a
SARS-CoV. Essas mudanças são amplamente distribuídas no genoma viral, com nove alternativas
em ORFlab, oito em ORF(4, três em ORF(8, e uma em ORF(7a. Notavelmente, as mesmas
alterações não sinônimas foram encontradas em uma família, sugerindo que a evolução viral
ocorreu durante a transmissão de pessoa para pessoa. Apesar de não ocorrerem mudanças funcionais
no vírus associadas a essas adaptações, a ausência dessa proteína está ligada à virulência variável de
coronavírus devido a mudanças em sua forma e inchaço. A proteína E consiste em três domínios:
uma curta terminação aminoácida hidrofóbica, um grande domínio de membrana hidrofóbica e uma
extremidade C eficaz. A proteína SARS-CoV-2 E revela uma estrutura semelhante de aminoácidos
sem substituições.
A proteína N (nucleocapsídeo) desempenha um papel multifuncional no vírus coronavírus. Entre
muitas funções, contribui para a complexação com o genoma viral, facilita a interação da proteína
M necessária durante a montagem do vírus e aprimora a eficiência da transcrição viral. Ela possui
três domínios distintos e altamente conservados: N-terminal, região de ligação ao RNA ou região de
ligação (LKR), e C-terminal. O LKR é rico em serina e arginina, também conhecido como domínio
SR. O LKR é capaz de interagir diretamente com o ácido ribonucleico (RNA) no laboratório e é
responsável por sinais celulares. Também modifica a resposta antiviral do hospedeiro agindo como
um modificador da interferon. Atualmente, o foco está na determinação do número de mutações
necessárias para modificar a virulência de coronavírus devido às alterações na formação e inchaço.
Além das proteínas estruturais importantes, o genoma do SARS-CoV-2 possui 15 nsps (proteínas
não estruturais) de nsp1 a nsp10, de nsp12 a nsp6, e 8 proteínas acessórias (3a, 3b, 6p, 7a, 7b, 8b, 9b
e 14ORF). Cada uma dessas proteínas desempenha um papel específico na replicação do vírus. Ao
contrário das proteínas acessórias do SARS-CoV, o SARS-CoV-2 não possui a proteína 8a e possui
uma proteína 8b mais longa, bem como uma proteína 3b mais curta. Não foram identificadas
alterações nas sequências de aminoácidos das proteínas acessórias 7nsp, 13nsp, envelope, x, 6p e 8b
em comparação com sequências de outros coronavírus.

A estrutura do vírus SARS-CoV-2 foi capturada na imagem 2:

 2- SARS-CoV Figura 2 - Estrutura do Vírus

Inicialmente, a China foi o epicentro do surto da pandemia de SARS-CoV-2, onde foi relatado um
grande número de mortes relacionadas ao COVID-19, com 84.458 casos confirmados
laboratorialmente e 4.644 mortes até 13 de maio de 2020 (Figura 4). A partir de 13 de maio de 2020,
casos confirmados de SARS-CoV-2 foram relatados em mais de 210 países, excluindo a China
(Figura 3 e 4) (Relatório da OMS 114) (25, 64). O COVID-19 foi relatado em todos os continentes,
exceto na Antártica. Por várias semanas, a Itália foi o foco de atenção devido ao grande número de
casos, com 221.216 casos de infecção e 30.911 mortes. No entanto, agora os Estados Unidos têm o
maior número de casos, com 1.322.054 casos e 79.634 mortes. Atualmente, o Reino Unido tem
mais casos (2.264.671) e mortes (32.692) do que a Itália. A plataforma da web da Universidade
Johns Hopkins fornece atualizações diárias sobre estatísticas-chave do surto de COVID-19. O
COVID-19 também foi confirmado em um navio de cruzeiro chamado Princess Diamond, que
estava ancorado nas águas japonesas (porto de Yokohama), bem como em outras embarcações de
cruzeiro ao redor do mundo (239) (Figura 3). Os principais eventos do surto do vírus SARS-CoV-2,
que ocorreram desde 8 de dezembro de 2019, estão apresentados em uma linha do tempo na Figura
5.

Principais eventos do atual surto de Covid-19

Tabela 5: Linha do tempo de eventos importantes durante o surto de SARS-CoV-2 / COVID-19
A tabela de tempo descreve eventos importantes que ocorreram durante o atual surto de SARS-
CoV-2 / COVID-19, de 8 de dezembro de 2019 a 13 de maio de 2020.
Inicialmente, a China enfrentou a maior parte do ônus associado ao COVID-19, na forma de casos,
doenças e mortes (65). No entanto, com o tempo, o risco do COVID-19 se espalhou para a Europa,
especialmente para a Itália e a Espanha. Atualmente, os Estados Unidos têm o maior número de
casos confirmados.
Em outro estudo, foi descoberto que a média do número básico de reprodução (Ro) para o COVID-
19 é de 3,28, o que é significativamente maior do que a estimativa anterior da Organização Mundial
da Saúde (OMS) de 1,4 a 2,5 (77). No entanto, é difícil determinar com precisão o valor exato de
Ro devido à falta de dados suficientes. Uma Ro mais alta indica um potencial maior de
disseminação do SARS-CoV-2 em uma população suscetível.
Não é a primeira vez que a cultura culinária chinesa é criticada por ser o possível ponto de origem
da infecção por um novo coronavírus em humanos. Anteriormente, animais em mercados de
animais vivos na China foram identificados como hospedeiros intermediários para a propagação da
SARS no país (78). Muitas espécies de vida selvagem foram abrigadas como hospedeiros de
diferentes cepas de coronavírus, que têm a capacidade de superar a barreira das espécies (79). A
premissa central da cultura alimentar chinesa é que animais exóticos abatidos são considerados mais
nutritivos (5).
Após quatro meses de luta, de dezembro de 2019 a março de 2020, parece que a situação do
COVID-19 está sob controle na China. Os mercados de animais vivos foram reabertos, e as pessoas
começaram a comprar e consumir uma variedade de animais, incluindo morcegos, cães, gatos,
pássaros, escorpiões, pangolins, visons, camelos, coelhos, gambás, hamsters, sapos, peixes,
crocodilos siameses e outros (27).
Espera-se que a introdução do SARS-CoV-2 em humanos ocorra durante a exposição a um RBD
semelhante ao de SARS-CoV (17, 87, 254, 255).
Vários países emitiram recomendações para viajantes que visitam a China em relação a surtos
anteriores de coronavírus relacionados à SARS (88, 89).
Uma comparação entre o COVID-19 e o MERS-COVID revelou que a eficiência da transmissão de
SARS-CoV-2 de humano para humano era menor. Isso foi baseado na observação de que os
profissionais de saúde foram menos afetados em comparação com os surtos anteriores de
coronavírus fatais (2).
A disseminação ampla é considerada a principal causa da transmissão em massa de SARS e MERS
(90, 91). Quase metade dos casos relatados de MERS-COVID na Arábia Saudita foi secundária,
ocorrendo por meio de contato com indivíduos infectados sem sintomas ou com sintomas leves
(92). A possibilidade de eventos superdisseminadores no surto de COVID-19 não pode ser
descartada. Como o SARS e o MERS-CoV, o COVID-19 também pode afetar o trato respiratório
inferior, com sintomas mais graves (27).
O número básico de reprodução (Ro) do COVID-19 foi encontrado variando de 2,8 a 3,3 com base
em relatórios em tempo real e de 3,2 a 3,9 com base em estimativas de casos esperados (84).
O caminho a seguir argumentará que a inclusão de resultados negativos em testes de ácido nucleico
viral fecal seja uma das métricas adicionais para a alta em casos de COVID-19 confirmados
laboratorialmente (326). A pandemia de COVID-19 não apresenta novos fatores, exceto o fator
patogênico único geneticamente e outro possível reservatório. A causa e a possível consequência
futura são apenas repetições de nossas interações anteriores com vírus coronavírus letais. A única
diferença é o momento da ocorrência e a diferenciação genética do fator patogênico em questão.
Mutações no RBD de COVIDs facilitaram sua capacidade de infectar os hospedeiros mais recentes,
expandindo assim seu alcance global (85). Isso representa uma ameaça potencial para a saúde de
animais e humanos. Estudos avançados usando a reconstrução geográfica da variante original mais
provável do SARS-CoV-2, como um coronavírus de morcego semelhante ao SARS, disseminado na
família de morcegos Rhinolophidae (86).
A análise genética de 10 sequências completas do genoma do SARS-CoV-2 mostrou que elas
estavam relacionadas aos COVIDs de origem de morcego, especificamente SL-bat-COVID45ZC e
SL-bat-COVID21ZXC, que foram relatados na China em 2018 (17). Foi relatado que o SARS-CoV-
2 usa o ACE2 como receptor de entrada durante uma exposição semelhante a febre, tosse e muco
(83). Portanto, os médicos devem estar cientes da possibilidade de apresentações clínicas atípicas
para evitar a possibilidade de diagnósticos semelhantes ou superiores ao de SARS-CoV-2. Foi
descoberta a capacidade de transmissão precoce do SARS-CoV-2, apesar da moderada a alta
capacidade de transmissão (84).
Os relatórios crescentes sobre o SARS-CoV-2 em águas residuais e esgoto exigem uma investigação
mais aprofundada devido à possibilidade de transmissão fecal-oral. O SARS-CoV-2 presente em
ambientes como solo e água eventualmente acaba nas águas residuais e no lodo de estações de
tratamento (328). Portanto, é necessário reavaliar as medidas atuais de tratamento de águas
residuais e lodo de esgoto e implementar tecnologias avançadas específicas e eficazes contra o
SARS-CoV-2, devido à presença ativa do SARS-CoV-2 nas fezes. Isso permite estudar a
disseminação da infecção em uma grande população usando a ciência epidemiológica baseada em
águas residuais. Recentemente, a reação em cadeia da polimerase quantitativa de transcrição reversa
(qPCR-RT) foi usada para quantificar cópias concentradas de RNA do SARS-CoV-2 em amostras
de esgoto coletadas de estações de tratamento de esgoto (327). Os números de cópias do ácido
ribonucleico viral calculados indicam o número de indivíduos infectados.
Pessoas de todas as idades e gêneros estão expostas à infecção por COVID-19, mas os idosos com
doenças crônicas subjacentes são mais propensos a desenvolver casos graves (80). Recentemente,
foi descoberto que indivíduos assintomáticos também atuam como fonte de infecção para
indivíduos suscetíveis (81). Tanto pacientes assintomáticos quanto sintomáticos liberam
quantidades semelhantes de partículas virais, indicando que a capacidade de transmissão de
pacientes assintomáticos ou com sintomas leves é muito alta (82). Portanto, a transmissão do
SARS-CoV-2 pode ocorrer precocemente durante a infecção (82). Também foram relatadas
apresentações clínicas atípicas em casos de COVID-19, onde a única queixa relatada foi fadiga.
Esses pacientes podem não apresentar sintomas respiratórios, como febre, tosse e muco (83).
Portanto, os médicos devem estar cientes de possíveis apresentações clínicas atípicas
Em relação aos vírus emergentes conhecidos, doenças altamente patogênicas muitas vezes estão
associadas a uma menor capacidade de transmissão. Comparado a vírus emergentes como o vírus
Ebola, o vírus da gripe aviária H7N9, o SARS-CoV e o MERS-CoV, o SARS-CoV-2 tem uma
capacidade de doença relativamente menor e uma capacidade moderada de transmissão (15). A taxa
de mortalidade entre os indivíduos com COVID-19 foi calculada usando a Taxa de Fatalidade de
Infecção (IFR). A IFR foi encontrada dentro da faixa de 0,3% a 0,6%, o que pode ser comparado
com a pandemia de influenza asiática anterior de 1958-1957 (73, 277).
Vale ressaltar que a reanálise das curvas da pandemia COVID-19 do grupo inicial de casos indica
uma grande transmissão de humano para humano. Acredita-se que a exposição ao SARS-CoV-2 no
mercado de frutos do mar em Wuhan tenha originado a infecção de humano para humano, em vez
de infecção de animal para humano (74). No entanto, à luz da disseminação de doenças zoonóticas
em COVID-19, isso pode agora não apoiar completamente essa ideia (1). Após a infecção inicial,
houve observação de transmissão de humano para humano com uma taxa estimada de número
básico de reprodução (R0) variando de 2,24 a 3,58 (76). Em outro estudo, a média do número
básico de reprodução inicial (R0) foi estimada em 1,4 a 2,5 (70, 75), sugerindo que o SARS-CoV-2
pode se espalhar facilmente entre humanos, aves, peixes, crocodilos siameses e outras carnes de
animais sem medo de COVID-19. O governo chinês está incentivando as pessoas a sentirem que
podem voltar à vida normal. No entanto, isso pode ser arriscado, já que foi mencionado em
advertências que as pessoas devem evitar o contato com animais mortos vivos, pois o SARS-CoV-2
demonstrou se espalhar por meio de contato próximo com animais. Além disso, não podemos
descartar a possibilidade de novas mutações no mesmo vírus ocorrerem em animais e humanos no
mercado (284). Em janeiro de 2020, a China impôs temporariamente uma proibição de venda de
animais vivos em mercados úmidos. No entanto, agora centenas desses mercados úmidos foram
reabertos sem melhorias nas práticas de segurança alimentar e saneamento padrão (286).
Devido à densidade populacional na China e às políticas locais e internacionais de exportação de
alimentos, o mundo inteiro enfrenta o risco de COVID-19, incluindo a própria China. Mercados
úmidos de animais mortos vivos não mantêm práticas rigorosas de segurança alimentar. Manchas de
sangue fresco estão em toda parte, no chão e nas mesas, e tais hábitos alimentares podem encorajar
muitos patógenos a se adaptar, mutar e saltar a barreira das espécies. Como resultado, o mundo todo
sofre com a nova doença SARS-CoV-2, com várias sublinhagens e entradas de vírus responsáveis
por MERS-CoV e SARS-CoV (3). O vírus pertence ao grupo 2B de coronavírus (2). O
sequenciamento do genoma do SARS-CoV-2 obtido de pacientes apresentou 79,5% de semelhança
de sequência com o sequenciamento do SARS-CoV (63).
Até 13 de maio de 2020, foram relatados um total de 4.170.424 casos confirmados de COVID-19,
com 287.399 mortes em mais de 210 países afetados em todo o mundo (Relatório de Situação da
Organização Mundial da Saúde 114). A origem provável do SARS-CoV-2 e o primeiro cenário de
transmissão ainda estão sendo debatidos. A análise de árvores filogenéticas divide as perspectivas
sobre a propagação e emissão do SARS-CoV-2
Na árvore não enraizada da origem e evolução de diferentes betacoronavírus baseados na proteína
S, sequências virais foram compiladas de diferentes subgerações em grupos separados. Sequências
de SARS-CoV-2 de Wuhan e outros países mostraram uma relação próxima e apareceram em um
único grupo (Figura 1). As variantes do tipo Sarbecovirus subtipo Covid eram comuns em divisões
de árvores e se dividiam em três subgrupos: SARS-CoV-2, SL-bat-Covid (SL-Covid), e
Sarbecovirus (Figura 1). Em outros subtipos, como Merbecovirus, todas as sequências foram
agrupadas em um único conjunto, enquanto em Embebecovirus, havia diferentes espécies, incluindo
Covid respiratório de cães, vírus bovinos, vírus equinos e cepa de Covid humana (43OC), todas
agrupadas em uma massa comum. As variantes em subgenes NobeCovidirus e HibeCovidirus
estavam posicionadas separadamente das outras SARS-CoV-2 relatadas, mas compartilhavam uma
origem de morcego comum.
Cenário global atual para o vírus SARS 2 - Este novo vírus, SARS-CoV-2, pertence ao gênero
Sarbecovirus da família Orthocoronavirinae e é diferente de outros betacoronavírus.
Avaliamos a similaridade de sequências de nucleotídeos usando o programa MegAlign, onde a
similaridade entre novas variantes de SARS-CoV-2 estava dentro de 99,4% a 100% entre outras
cepas de Covid. As sequências de SARS-CoV-2 mostraram maior semelhança com o SL-bat-Covid,
com uma identidade de nucleotídeo variando de 88,12% a 89,65%. Além disso, relatórios anteriores
de SARS-CoV-2 mostraram semelhança de 70,6% a 74,9% com o SARS-CoV-2 em nível de
nucleotídeo. A semelhança de nucleotídeo foi de 55,4%, 45,5% a 47,9%, 46,2% a 46,6% e 45,0% a
46,3% para os outros quatro gêneros, HibeCovidirus, NobeCovidirus, Merbecovirus e
Embebecovirus, respectivamente. O índice de similaridade de porcentagem de cepas atuais sugere
uma relação estreita entre as variantes de SARS-CoV-2 e o SL-bat-Covid, indicando uma origem
comum. No entanto, evidências adicionais baseadas em análises genéticas completas das cepas
atuais são necessárias para tirar quaisquer conclusões, embora tenha sido confirmado que as novas
variantes de SARS-CoV-2 pertencem ao subtipo Sarbecovirus em uma variedade de
betacoronavírus. Acredita-se que seu ancestral provável seja de morcegos, onde os morcegos podem
ter desempenhado um papel importante na hospedagem dessa classe de vírus.
Proteína N - A proteína N do coronavírus tem múltiplas funções. Entre muitas funções, desempenha
um papel na formação complexa com o genoma viral, facilita a interação com a proteína M durante
a montagem do vírus e melhora a eficiência da replicação viral. A proteína N possui três domínios
distintos altamente conservados: NTD, domínio de ligação de RNA ou região de ligação (LKR) e
CTD. O NTD se liga à extremidade 3' do genoma viral, possivelmente por interações eletrostáticas,
sendo espacialmente distante em termos de comprimento e sequência. O LKR, rico em serina e
arginina, também conhecido como domínio SR, é capaz de interagir diretamente com o ácido
ribonucleico (RNA) no laboratório e está envolvido nas sinalizações celulares. Além disso, modifica
a resposta antiviral do hospedeiro, atuando como um interferon (IFN) antagonista e interferindo no
ácido ribonucleico ribossômico. Em comparação com o SARS-CoV, a proteína N da SARS-CoV-2
tem cinco mutações de aminoácidos, sendo duas na região intrinsecamente desordenada (IDR), nas
posições 25 e 26, uma na NTD (posição 103), uma no LKR (posição 217) e outra no CTD (posição
334).
Nsps e proteínas associadas - Evolução adaptativa, monitoramento cuidadoso de mutações virais
que ocorrem durante a transmissão de humano para humano justifica isso.
Proteína M - A proteína da matriz (M) é a proteína viral mais abundante na partícula viral,
conferindo-lhe a sua forma. A proteína M liga-se à cápside e atua como regulador central na
montagem da partícula do vírus da coroa. As proteínas M de diferentes coronavírus variam
amplamente na sequência de aminoácidos, mas mantêm uma estrutura geral semelhante entre
diferentes gêneros. A proteína M possui três domínios transmembranares, com um curto terminus
aminoterminal fora da partícula viral e um longo terminus carboxiterminal dentro da partícula. Em
geral, a estrutura viral é mantida por meio das interações da proteína M. É importante notar que a
proteína M do SARS-CoV-2 compartilha semelhanças com a proteína M do SARS-CoV.
Proteína E - A proteína da matriz do vírus da coroa (proteína E) é a proteína estrutural principal
mais pequena e misteriosa. Desempenha múltiplas funções na formação, montagem e libertação do
vírus. É um pequeno polipéptido integrado na membrana e age como viroporina, uma canal iônico.
A incapacitação ou a modificação desta proteína pode afetar o processo de replicação do vírus.
58, 59. No entanto, para o SARS e o MERS, o CIVEL do gato e o dromedário, respectivamente,
atuam como hospedeiros intermediários (40, 41). Os genomas dos coronavírus e os subgenomas
têm seis ORFs (31). A maioria da extremidade 5 é operada pelo b/a1ORF, que produz 16 nsps. Dois
das proteínas múltiplas, ppla e pplab, são inicialmente produzidos pelo b/a1ORF através de uma
mudança de quadro de leitura entre ORFla e b1ORF (32). A protease codificada pelo vírus divide as
proteínas múltiplas em nsps individuais (protease principal [Mpro] e protease semelhante à
quimotripsina [3CLpro] e protease semelhante à papaína [PLPS]). O SARS-CoV-2 também codifica
essas nsps, cujas funções foram recentemente elucidadas (31). Notavelmente, a diferença entre o
SARS-CoV-2 e os coronavírus com hélice alfa e folha beta reside na identificação de uma nova
proteína curta dentro do domínio 3ORF, uma proteína de seis fios codificada pelo 8ORF (31).
Os coronavírus codificam quatro proteínas estruturais principais, a espícula (S), a membrana (M), a
envoltura (E) e a nucleocapsídeo (N), que são descritas em detalhes abaixo. A proteína S do
coronavírus é uma proteína multifuncional de grande tamanho da classe I. O tamanho da proteína S
do coronavírus varia de 1160 aminoácidos (IBV, coronavírus da bronquite infecciosa das aves) a
1400 aminoácidos (FCoV, coronavírus felino) (43). Ela está localizada na superfície do vírion,
conferindo ao vírion uma aparência de coroa ou semelhante a uma coroa. Funcionalmente, é
necessária para a entrada de partículas de vírion infecciosas na célula, interagindo com diferentes
receptores celulares (44). Além disso, ela atua como um fator crucial na inflamação e na
determinação do escopo do hospedeiro (45). Vale ressaltar que a proteína S é uma das proteínas
imunogênicas essenciais dos coronavírus, capaz de estimular respostas imunológicas do hospedeiro
(45). Os domínios externos em todas as proteínas S do SARS-CoV-2 têm estruturas de domínio
semelhantes, divididos em duas subunidades, 1S e 2S (43). O primeiro, 1S, auxilia na ligação ao
receptor do hospedeiro, enquanto o segundo, 2S, representa a fusão. O 1S anterior também se divide
em dois domínios, o domínio N-terminal (NTD) e o domínio C-terminal (CTD). Ambos os
domínios funcionam como domínios de ligação a receptores e interagem eficazmente com
diferentes receptores do hospedeiro (45). O CTD do 1S possui o receptor-binding motif (RBM). Em
todas as proteínas spike de coronavírus, o 1S se projeta acima do 2S tridimensionalmente, cercado
por um envelope que contém a nucleocapsídeo viral. Os nucleocapsídeos são organizados em
espirais coronais em vírus positivos de sentido único (30). Micrografias eletrônicas revelaram uma
aparência esférica com algum grau de polimorfismo, diâmetros de virion variando de 60 a 140
nanômetros e saliências distintas de 9 a 12 nanômetros, conferindo ao vírus uma aparência de coroa
solar (3). O genoma do SARS-CoV-2 é linearmente organizado como 5'-Leader e genes, como a/b4,
a/b3, genes anexos (32). O genoma codifica polyprotein a1/b (lab) (lab/ppla) (33). O complexo de
replicação do RNA (RTC) nas cisternas de membrana dupla (DMVs) é formado por proteínas não
estruturais (nsps) codificadas por um gene poligênico (34). Em seguida, o RTC monta um conjunto
intrincado de RNAs de fita dupla sem genoma (sgRNAs) através de transcrição descontínua (35).
O caos na China causou uma pandemia global, resultando em doenças que ainda não estão sob
controle, apesar dos esforços intensivos para enfrentar esse vírus (25). Foi proposto o nome /
denominação desse vírus como SARS-CoV-2 (Síndrome Respiratória Aguda Grave Coronavírus 2)
pela Comissão Internacional de Classificação de Vírus (ICTV), que determinou que o vírus pertence
à família de coronavírus associada à Síndrome Respiratória Aguda Grave (SARS) (26). O SARS-
CoV-2 é membro da ordem Nidovirales, família Coronaviridae, subfamília Orthocoronavirinae, que
se divide em quatro gêneros, a saber, Alphacoronavirus, Betacoronavirus, Deltacoronavirus (3, 27).
Os gêneros Alphacoronavirus e Betacoronavirus originaram-se de morcegos, enquanto o
Gammacoronavirus e o Deltacoronavirus evoluíram a partir de agrupamentos de genes de aves e
porcos (24, 28, 29, 275).
Os coronavírus são vírus de RNA de sentido único positivo não segmentados, com cerca de 30
quilobases de comprimento, que possuem capuz 5'-cap e cauda de poli (A) 3' (30). O genoma do
SARS-CoV-2 tem 29891 pontos base e um conteúdo de GC de 38% (31). Esses vírus são
envolvidos por um envelope que contém proteínas estruturais (30). Com base na descrição
molecular, o SARS-CoV-2 é considerado um novo betacoronavírus pertencente ao subgênero
Sarbecoronavirus (3). Alguns outros vírus zoonóticos.Novos medicamentos direcionados e
prevenção contra mais surtos (13). Os sintomas mais comuns associados à COVID-19 são febre,
tosse, dificuldade respiratória, muco, dor de cabeça e fadiga ou dor muscular. Por outro lado, os
sintomas menos comuns no momento da admissão hospitalar incluem diarreia, tosse com
expectoração sanguinolenta e falta de ar (14). Recentemente, também se suspeitou de infecções
assintomáticas em indivíduos infectados, aumentando a complexidade das dinâmicas de transmissão
da doença COVID-19 (1). Respostas eficazes como essas requerem um conhecimento mais
aprofundado sobre o vírus, que é atualmente um novo desafio; portanto, há uma necessidade de
mais sequenciamento genético do proteína spike, com um comprimento total de 1.273 aminoácidos.
Seis dessas variantes estão na região do domínio de ligação ao receptor (RBD), e outras seis
alternativas estão na região de apoio subdominante (SD) (16). Análises genéticas revelaram que o
SARS-CoV-2 está intimamente relacionado a dois outros coronavírus relacionados à SARS
derivados de morcegos, o 45ZC-CoV e o 21ZXC-CoV (Figura 1).
Vírus Coronavírus em humanos - SARS, MERS e COVID-19
Geralmente, as infecções pelo coronavírus em humanos estão associadas a doenças respiratórias,
variando de leves a graves, com febre, inflamação severa, tosse e disfunção dos órgãos internos que
podem levar à morte (92). A maioria dos coronavírus identificados causou resfriados comuns em
humanos. No entanto, isso mudou com a identificação do vírus SARS-CoV-2, que abriu caminho
para formas graves da doença em humanos (22).
Nossa experiência anterior com a propagação de outros coronavírus, como SARS e MERS, sugere
que a maneira de transmissão do COVID-19 é principalmente de pessoa para pessoa, por contato
direto, gotículas e aerossóis (25). Estudos recentes mostraram que o vírus pode permanecer viável
por horas no ar e até dias em superfícies, tornando a contaminação do ar e o fômite desempenhando
papéis significativos na disseminação do SARS-CoV-2 (257).
A resposta imunológica contra o coronavírus é crucial para controlar e eliminar a infecção. No
entanto, respostas imunológicas não reguladas podem contribuir para a patogênese da doença,
levando a disfunção pulmonar. Compreender a interação entre os coronavírus e os sistemas
imunológicos do hospedeiro pode esclarecer uma variedade de resultados, desde resfriados comuns
até doenças graves e potencialmente fatais, como SARS e COVID-19. Atualmente, o SARS-CoV-2
é considerado um dos sete membros da família de coronavírus que afeta humanos (3), pertencendo à
mesma sublinhagem de coronavírus que causou o SARS, mas geneticamente distinto. Até 2020, seis
coronavírus eram conhecidos por afetar humanos, incluindo o HCoV-229E, HCoV-NL63, HCoV-
OC43, HCoV-HKU1, SARS-CoV e MERS-CoV. Embora o SARS-CoV e o MERS-CoV tenham
causado surtos de doenças com altas taxas de mortalidade, outros ainda são responsáveis por
infecções respiratórias superiores leves (4). No entanto, a situação mudou drasticamente com a
pandemia do COVID-19 (5).
O atual surgimento de coronavírus desenvolvidos recentemente, como o COVID-19, é o terceiro
surto de coronavírus em humanos nas últimas duas décadas (5). Não é por acaso que a doença
COVID-19 surgiu na China após a transferência de fatores patogênicos de morcegos (6). O
COVID-19 apareceu na China e se espalhou rapidamente por todo o país e para outros países.
Devido à gravidade desta pandemia e sua capacidade de se espalhar internacionalmente, a
Organização Mundial da Saúde declarou uma Emergência de Saúde Pública de Interesse
Internacional em 31 de janeiro de 2020, e em 11 de março de 2020, foi declarada uma pandemia.
Atualmente, não estamos em uma posição que nos permita tratar eficazmente o COVID-19, pois
não há vacinas aprovadas e nenhum medicamento antiviral específico para tratar a infecção por
coronavírus em humanos (9-7). A maioria dos países está agora se esforçando para evitar mais
disseminação deste vírus potencialmente mortal, implementando estratégias preventivas e de
controle.
Infecções por coronavírus em animais domésticos estão associadas a uma ampla gama de doenças.
Além do coronavírus respiratório infeccioso felino (FIPV), coronavírus entéricos (por exemplo,
coronavírus entérico bovino e coronavírus canino da hepatite infecciosa) estão predominantemente
associados a doenças gastrointestinais (10). O surgimento do COVIDs pode ser possível devido à
presença de muitos COVIDs mantidos em seu hospedeiro natural, possivelmente favorecendo a
probabilidade de recombinação genética (10). A alta diversidade genética e a capacidade de infectar
várias espécies hospedeiras são resultados de mutações de alta frequência em COVIDs, devido à
instabilidade das polimerases de RNA dependente de RNA ao lado de taxas mais altas de
recombinação homóloga do RNA viral (10, 11). A identificação da origem do SARS-CoV-2 e a
evolução da patogenicidade seriam úteis na vigilância da doença (12) e no aprimoramento das
adaptações que levaram à pandemia (104). A transmissão repetida de coronavírus entre espécies,
facilitada pela flexibilidade na utilização dos receptores, juntamente com a vantagem da mutação
adaptativa e recombinação, pode perpetuar a infecção coronavírus frequente entre morcegos,
animais e humanos (106). A causa subjacente da maioria dos coronavírus de morcegos ainda é
desconhecida, pois a maioria desses vírus não é isolada ou estudada (4). O coronavírus do ouriço
31HKU foi identificado, um vírus de betacoronavírus, de ouriços Amur na China, e os estudos
sugerem que os ouriços são reservatórios de vírus de betacoronavírus, com evidências de
recombinação (107)
As evidências científicas atuais disponíveis sobre a infecção por coronavírus indicam que a família
de dromedários árabes, bem como a fonte animal da infecção por coronavírus em humanos, é o
dromedário árabe (97). Geralmente, os dromedários árabes infectados não apresentam sinais óbvios
de infecção. Isso torna difícil identificar a infecção, apesar de haver uma grande semelhança no
sequenciamento genômico entre o novo coronavírus (SARS-CoV-2) e coronavírus semelhantes ao
SARS (99). No entanto, a análise comparativa identificou um local de divisão semelhante a furina
na proteína SARS-CoV-2 que está ausente em outros coronavírus semelhantes ao SARS (99).
Acredita-se que esse local de divisão semelhante a furina desempenhe um papel na vida do vírus e
na patogênese da doença, e pode servir como alvo terapêutico para inibidores de furina. SARS-
CoV-2 pode ser mais infeccioso do que seus predecessores devido a uma mutação de estabilidade
que ocorreu no domínio semelhante a proteases 2nsp. Da mesma forma, uma mutação
desestabilizadora perto do domínio de fosfatase das proteínas 3nsp em SARS-CoV-2 pode indicar
um mecanismo distinto em comparação com outros coronavírus (100). Embora a taxa de letalidade
(CFR) do novo coronavírus seja relativamente baixa em comparação com as taxas relatadas para o
SARS e outros coronavírus anteriores (101), resultou em mais mortes do que o SARS e o
coronavírus anterior combinados (101).
O vírus coronavírus é um exemplo proeminente de sistemas comumente usados para entender a
inflamação pulmonar associada a essa infecção (24).
Um vírus animal previamente não reconhecido como SARS é uma doença respiratória viral que
surgiu dos mercados úmidos do sul da China após a adaptação ao hospedeiro humano, permitindo
assim a transmissão entre humanos (90). O surto do SARS relatado entre 2002 e 2003 envolveu um
total de 8098 casos confirmados com um total de 774 mortes (9,6%) (93). O surto teve um impacto
significativo na região da Ásia e no Pacífico, especialmente na China continental (94). Embora a
taxa de letalidade (CFR) do SARS-CoV-2 seja menor em comparação com o SARS, a semelhança
epidemiológica com o vírus da influenza é preocupante (95, 279) e pode levar ao fracasso dos
sistemas de saúde, resultando em uma pandemia (96). MERS é outra doença respiratória relatada
pela primeira vez na Arábia Saudita em 2012 e tem uma CFR de cerca de 35% (97). A análise de
conjuntos de dados disponíveis indica que os períodos de incubação para o SARS-CoV-2, SARS-
CoV e MERS-CoV estão aproximadamente na mesma faixa. A expectativa de incubação mais longa
para o SARS-CoV-2 é de 14 dias. Portanto, os indivíduos suspeitos são isolados por 14 dias para
evitar o risco de disseminação da doença (98). Apesar da grande semelhança relatada, estudos
laboratoriais e biológicos realizados no vírus isolado sugerem que há um risco potencial de que os
vírus atualmente circulantes em morcegos possam reaparecer como infecção por SARS-CoV (101).
Conhecimento Clínico da Síndrome Respiratória Aguda Severa 2 (SARS-CoV-2) - COVID-19
A doença causada pelo SARS-CoV-2 também é conhecida como Síndrome Respiratória Aguda
Severa 2 (SARS-CoV-2) e Inflamação Pulmonar Grave (SSCP). Em comparação com o SARS-
CoV-1, responsável pela Síndrome Respiratória Aguda Severa (SARS), o SARS-CoV-2 causa uma
doença com menor gravidade, mas tem uma capacidade muito maior de se espalhar rapidamente,
como evidenciado pelo aumento rápido dos casos de COVID-19. O período de incubação do SARS-
CoV-2 foi encontrado em grupos familiares variando de 3 a 6 dias, com uma média de 6,4 dias e
variação de 2,1 a 11,1 dias. Entre os primeiros 425 pacientes afetados, a idade média foi de 59 anos,
com uma maior incidência em homens. Assim como o SARS e a Síndrome Respiratória do Oriente
Médio (MERS), a gravidade da infecção é maior em pessoas com mais de 50 anos. Os sintomas da
COVID-19 incluem febre, tosse, dores musculares ou fadiga, perda de olfato ou paladar, dor de
cabeça, sangramento nasal e diarreia. Em comparação com os pacientes afetados pelo SARS-CoV-2
em Wuhan durante as fases iniciais da epidemia, apenas sintomas leves foram observados naqueles
infectados pela transmissão de pessoa para pessoa. As tendências iniciais indicaram que as mortes
relacionadas à COVID-19 eram menores do que as observadas nas epidemias anteriores de SARS.
Atualizações obtidas de países como China, Japão, Tailândia e Coreia do Sul sugeriram que os
pacientes com COVID-19 apresentam sintomas mais leves em comparação com os pacientes com
SARS e MERS. Independentemente do tipo de coronavírus, as células imunológicas, como os
linfócitos T, localizados nas camadas abaixo da mucosa no trato respiratório entre a faringe e a
cavidade nasal, são a principal defesa contra esse vírus. A análise profunda do genoma revelou
diferenças nas sequências de aminoácidos entre o SARS-CoV-2 e outros coronavírus. Essas
variações podem ter contribuído para as diferenças nas manifestações clínicas da COVID-19. São
necessárias mais pesquisas para avaliar as diferenças potenciais na transmissão, patogenicidade e
evolução desse novo fator associado a essas mudanças nas sequências de aminoácidos. Com a atual
pandemia de COVID-19, espera-se um aumento significativo no número de estudos publicados
sobre esse novo coronavírus, conforme ocorreu com epidemias anteriores. No entanto, é desafiador
identificar os animais que podem ativamente secretar o SARS-CoV-2 e ter a capacidade de infectar
seres humanos. No entanto, o SARS-CoV-2 pode ser secretado através do leite, urina, fezes,
secreções nasais e oculares, e também pode ser encontrado em órgãos brutos. Um estudo sobre a
susceptibilidade das espécies animais à infecção por coronavírus encontrou que baleias e porcos
também são suscetíveis à infecção, indicando a possibilidade de transmissão de coronavírus entre
diferentes espécies, ao contrário dos camelos e outros animais domésticos. Após o surto de SARS
na China, foram isolados vírus semelhantes ao SARS e coronavírus de gatos civeta em mercados de
animais vivos em Guangdong, China. As cepas animais isoladas tinham uma sequência de 29
nucleotídeos ausente na maioria das cepas humanas, o que foi crucial para determinar a capacidade
de transmissão interespécies do SARS-CoV. A alta diversidade e a ampla distribuição de
coronavírus de morcegos na região, em comparação com relatórios anteriores, sugerem uma
coevolução entre hospedeiros/reservatórios. Além disso, coronavírus semelhantes ao SARS foram
encontrados em morcegos de ferradura chineses (Rhinolophus sinicus) habitantes da área. Estudos
em laboratórios e em organismos vivos revelaram poucos sintomas e transmissão mínima em
comparação com as evidências clínicas mínimas observadas na população humana em geral. Um
estudo realizado na Coreia do Sul sobre a carga viral do SARS-CoV-2 descobriu que a dinâmica do
vírus diferiu, incluindo uma carga viral significativamente maior em pacientes com COVID-19 em
comparação com o SARS, incluindo uma taxa de eliminação mais lenta. Portanto, o diagnóstico de
casos e medidas de isolamento para esse vírus requerem abordagens diferentes das empregadas no
surto de SARS. Estudos são necessários para determinar qualquer relação entre a carga viral do
SARS-CoV-2 e a capacidade de cultivo do vírus. Identificar pacientes com sintomas leves ou
assintomáticos, juntamente com a detecção de RNA viral no swab da garganta por até 5 dias,
destaca a necessidade de dados para avaliar a dinâmica de transmissão do SARS-CoV-2 e atualizar
as estratégias de triagem em clínicas. É apenas uma questão de tempo até que outro coronavírus
animal cause uma pandemia pulando a barreira das espécies. A ampliação do espectro de
hospedeiros de coronavírus ocorreu quando um novo coronavírus, denominado 1SW, foi
identificado nas amostras de fígado de baleias belugas cativas (Delphinapterus leucas).
Em comparação com as áreas encontradas em relatórios anteriores, há um desenvolvimento
conjunto entre o hospedeiro/enfermeiro. Além disso, foram encontrados coronavírus semelhantes ao
SARS disseminados na população de morcegos de ferradura chineses (Rhinolophus sinicus).
Estudos foram conduzidos em laboratórios e em organismos vivos. Houve uma falta de sintomas da
Síndrome Respiratória Aguda Grave (SARS) e nenhum sintoma de transmissão mínima dos sinais e
sintomas (82). Outro estudo, realizado na Coreia do Sul, sobre a carga viral da SARS-CoV-2,
mostrou que a dinâmica da SARS-CoV-2 varia, incluindo uma diferença significativa da SARS-
CoV (253). Essa diferença pode ser muito maior do que aquela associada à infecção pelo
coronavírus relatada anteriormente. A transmissão precoce da SARS-CoV-2 na fase viral da
infecção requer, portanto, estratégias de diagnóstico e isolamento diferentes das necessárias para
lidar com a SARS-CoV. São necessários estudos para determinar qualquer correlação entre a carga
viral da SARS-CoV-2 e a cultivabilidade do vírus. A identificação de pacientes com sintomas
mínimos ou ausentes, juntamente com a presença contínua de RNA viral no trato orofaríngeo por
até 5 dias, aponta para as necessidades de dados para avaliar a dinâmica da transmissão da SARS-
CoV-2 e atualizar as práticas de triagem clínica (82). É apenas uma questão de tempo antes que
outro coronavírus animal cause uma pandemia através da chamada barreira de espécies (287). A
amplitude do espectro do hospedeiro do coronavírus aumentou quando um novo coronavírus,
especificamente 1SW, foi identificado no tecido hepático de beluga (Delphinapterus leucas) (138).
Nas últimas décadas, muitos novos coronavírus foram identificados em diferentes espécies animais.
Esses coronavírus podem residir em morcegos sem causar doença clínica, mas estão constantemente
infectando (30). São os únicos mamíferos capazes de voo autônomo, o que lhes permite migrar a
longas distâncias, ao contrário dos mamíferos terrestres. Os morcegos estão distribuídos
globalmente e representam cerca de um quinto de todas as espécies de mamíferos (6). Isso os torna
um reservatório ideal para muitos agentes virais e também uma fonte de novos coronavírus ainda
não identificados. Tornou-se imperativo estudar a diversidade de coronavírus em grupos de
morcegos para evitar a propagação de doenças futuras que possam representar uma ameaça para a
vida selvagem e a saúde pública. Os surtos recorrentes causados por coronavírus de origem em
morcegos exigem o desenvolvimento de estratégias moleculares eficazes de vigilância do vírus
Betacoronavirus entre os animais (12), especialmente na família Rhinolophus (86). Os morcegos
chineses têm alto valor comercial e, portanto, é essencial enfocar a importância das práticas de
higiene das mãos e saneamento frequente e adequado (252-249). A pesquisa exploratória futura
deve ser conduzida sobre a transmissão fecal-oral do SARS-CoV-2, bem como sobre a vida em
situações e ambientes que facilitam essa via de transmissão robusta. A relação entre as
concentrações de ácido ribonucleico (RNA) viral nas fezes e a gravidade da doença deve ser
determinada, juntamente com a avaliação dos sintomas gastrointestinais e da capacidade de
detecção do SARS-CoV-2 nas fezes. Durante o período de incubação da COVID-19 ou nas fases de
recuperação da doença (252-249), as técnicas de coleta de amostras do trato respiratório inferior,
como a aspiração de lavagem brônquica, são ideais, em vez de amostras de swabs de garganta,
devido à alta taxa positiva nas avaliações de ácido nucleico (148). O diagnóstico da COVID-19
pode ser feito usando amostras do trato respiratório superior, coletadas por swabs de orofaringe e
nariz e swabs orofaríngeos. No entanto, essas técnicas apresentam riscos para os profissionais de
saúde devido ao contato próximo com os pacientes (152). Da mesma forma, foi relatada a infecção
de um único paciente com alta carga viral por meio da contaminação do ambiente com partículas
virais, que podem permanecer viáveis por pelo menos 3 dias e representam um risco significativo
para pacientes não infectados e profissionais de saúde (289). Recentemente, as amostras retais
produziram resultados positivos mais frequentemente do que as amostras orais em estágios tardios
da infecção (153). Portanto, os médicos devem ser cautelosos ao descarregar qualquer paciente com
COVID-19 com base em resultados negativos de swabs orais devido ao risco de transmissão fecal-
oral. Embora as cargas virais em amostras de fezes fossem menores do que as encontradas em
amostras do trato respiratório, medidas rigorosas de precaução devem ser tomadas ao lidar com
amostras de fezes de pacientes suspeitos ou com COVID-19 (151). Crianças infectadas com o
SARS-CoV-2 apresentam uma forma leve da doença
A presença do vírus SARS-CoV-2 em amostras de fezes levanta sérias preocupações de saúde
pública. Além da transmissão direta por meio de gotículas de espirro e tosse, existem outras vias,
como a excreção fecal, a contaminação ambiental e a contaminação por via oral, que contribuem
para a disseminação do SARS-CoV-2 (252-249). A excreção fecal foi documentada para a SARS-
CoV e MERS-CoV, juntamente com a capacidade de sobrevivência em situações que facilitam a
transmissão fecal-oral. Portanto, o SARS-CoV-2 tem todas as possibilidades de ser transmitido por
esse meio. A transmissão fecal-oral do SARS-CoV-2 pode ter sérias consequências, especialmente
em áreas com baixos padrões de higiene e saneamento precário, em relação à disseminação desse
vírus. O etanol e desinfetantes contendo cloro ou alvejantes são eficazes contra coronavírus (252-
249). Deve-se seguir rigorosamente as precauções ao lidar com as fezes de pacientes infectados
pelo vírus SARS-CoV-2. O tratamento e a eliminação adequada de resíduos biológicos e águas
residuais hospitalares são fundamentais. A importância da lavagem frequente e adequada das mãos e
do uso de etanol e desinfetantes contendo cloro ou alvejantes foram enfatizados. Diz-se que um
caso suspeito de infecção por COVID-19 é confirmado se as amostras do trato respiratório ou
amostras de sangue testarem positivo para o ácido nucleico do SARS-CoV-2 por PCR-RT ou por
sequenciamento genético do SARS-CoV-2 nas amostras do trato respiratório ou de sangue (80). A
recuperação do paciente é confirmada quando ambos os resultados dos swabs orais subsequentes
são negativos (153). Recentemente, o vírus foi detectado vivo na saliva autocoletada de pacientes
com COVID-19, sugerindo que a saliva pode ser usada como uma amostra não invasiva para o
diagnóstico da infecção por COVID-19 em indivíduos suspeitos (152). Também foi observado que
o teste inicial de pacientes com COVID-19 usando PCR-RT pode dar resultados negativos, mesmo
que eles tenham resultados de tomografia computadorizada torácica sugestivos de infecção.
Portanto, para o diagnóstico preciso da COVID-19, é necessária uma combinação de testes de swab
PCR-RT repetidos e tomografia computadorizada para evitar possíveis resultados falsos negativos
durante o exame (154). O teste PCR-RT é o teste mais comumente usado para diagnosticar a
COVID-19; no entanto, possui algumas limitações clínicas importantes, uma vez que não fornece
clareza sobre a progressão da doença. Gotas digitais (ddPCR) podem ser usadas para estimar a
carga viral em amostras coletadas do trato respiratório inferior.
Recentemente, 95 genomas completos das cepas do SARS-CoV-2 disponíveis no Centro Nacional
de Informações de Biotecnologia e no banco de dados GISAID foram alinhados e analisados para
estudar as variações no genoma viral (260). Todas as cepas virais mostraram alta semelhança, com
uma correspondência de 99,99% (99,91% a 100%) no nível de nucleotídeos e 99,99% (99,79% a
100%) no nível de aminoácidos. Variações gerais foram observadas em regiões ORF, com a
identificação de 13 locais diferentes em regiões la, lb, S, 3a, M, 8 e N. Foi observada uma taxa de
mutação de 30,53% (95/29) e 29,47% (28/95) em locais 8ORF (28144 nt) e a1ORF (8782 nt),
respectivamente. Devido a essas mutações seletivas, apenas algumas regiões específicas do SARS-
CoV-2 devem ser consideradas para o design de primers e investigações.
A sequência de referência do SARS-CoV-2 pode abrir caminho para o estudo da biologia molecular
e da patologia, além do desenvolvimento de diagnósticos e estratégias de prevenção e controle
apropriadas para enfrentar o SARS-CoV-2 (260). Ácidos nucleicos do SARS-CoV-2 podem ser
detectados em várias amostras, como lavado brônquico, escarro, esfregaços nasais, amostras de
biópsia das vias aéreas, swabs de garganta, fezes, sangue e urina, em diferentes níveis de
desempenho (Tabela 2) (80, 245, 246).
A carga viral foi medida para o SARS-CoV-2 usando PCR-RT quantitativo direcionado aos genes N
em swabs de garganta e amostras de escarro coletadas de pacientes com COVID-19. Os resultados
indicaram que a carga viral atingiu o pico cerca de 5 a 6 dias após o início dos sintomas, variando
de 10^4 a 10^7 cópias/mL durante esse período (151). Em outro estudo, descobriu-se que a carga
viral era maior em esfregaços nasais em comparação com os swabs de garganta em pacientes com
sintomas de COVID-19 (82). Embora inicialmente se acreditasse que a carga viral seria mais alta
em pacientes sintomáticos, indivíduos assintomáticos foram encontrados com cargas virais elevadas
(247).
Estudos recentes também têm destacado a ativa replicação do vírus nas vias aéreas superiores e a
liberação prolongada do vírus após o desaparecimento dos sintomas, incluindo a excreção viral nas
fezes. Portanto, a definição de casos atuais deve ser atualizada, junto com a reavaliação das
estratégias a serem adotadas para conter a disseminação do SARS-CoV-2 (248).
Em alguns casos, as investigações sobre a carga viral do SARS-CoV-2 têm sido úteis para orientar
medidas de precaução ao lidar com amostras específicas, como fezes. Em um estudo recente com
17 casos confirmados de infecção por SARS-CoV-2 com dados disponíveis (representando dias de 0
a 13 após o início dos sintomas), amostras de fezes de nove casos (53%; dias de 0 a 11 após o
início) foram positivas no teste de PCR-RT. Embora as cargas virais fossem menores do que aquelas
nas amostras das vias respiratórias (faixa, 550 cópias/mL a 1,21 x 10^5 cópias/mL), isso tem
implicações importantes para a biossegurança (151).
Amostras de 18 pacientes infectados com o vírus SARS-CoV-2 em Cingapura, que viajaram de
Wuhan para Cingapura, mostraram a presença de material genético viral em fezes e sangue total,
mas não em urina, por PCR-RT em tempo real (288). Além disso, foi relatada uma nova infecção
pelo SARS-CoV-2 em uma variedade de amostras clínicas, como lavagem brônquica.
O diagnóstico do SARS-CoV-2 (COVID-19) pode ser confirmado por testes de ácido ribonucleico
(RNA) usando PCR-RT em tempo real ou sequenciamento de próxima geração (148, 149, 245,
246). Atualmente, as técnicas de detecção de ácido nucleico, como o PCR-RT, são eficazes para
confirmar o diagnóstico de COVID-19 em casos clínicos (148). Muitas empresas em todo o mundo
estão atualmente focadas no desenvolvimento e comercialização de kits de detecção de ácido
nucleico específicos para o SARS-CoV-2. Muitos laboratórios também estão desenvolvendo seus
próprios PCR-RTs in-house. Um exemplo é o kit de detecção de ácido nucleico SARS-CoV-2
produzido pela Biotechnology Shuoshi, que usa PCR em tempo real (150).
Até 30 de março de 2020, a Administração de Alimentos e Medicamentos dos EUA (FDA)
concedeu 22 Autorizações de Uso de Emergência (EUAs) para uso em testes laboratoriais,
incluindo o teste abrangente de PCR-RT para detectar coronavírus beta semelhantes ao SARS e a
detecção específica do SARS-CoV-2, desenvolvida pelos Centros de Controle e Prevenção de
Doenças dos EUA (Tabela 1) (258, 259).
A sensibilidade da PCR-RT é baixa, enquanto galinhas, patos e porcos não são expostos ao SARS-
CoV-2 em absoluto (329). Da mesma forma, os serviços veterinários nacionais não detectaram
COVID-19 em tigres e leões que apresentaram sintomas respiratórios, como tosse seca e sibilância.
Acredita-se que esses animais do zoológico tenham sido infectados por um tratador assintomático
(335). O número total de casos positivos de COVID-19 em humanos está aumentando a uma taxa
elevada, criando condições ideais para a disseminação do vírus para outras espécies, como suínos.
.Há uma necessidade de mais estudos para determinar os possíveis reservatórios do SARS-CoV-2 e
as variações sazonais na circulação desses vírus em animais. A colaboração de pesquisa entre os
setores de saúde humana e animal tornou-se essencial para avaliar os potenciais fatores de risco
para a transmissão entre animais e seres humanos e identificá-los. Essa colaboração ajudará a
desenvolver estratégias eficazes para gerenciar doenças animais emergentes (12). Embora os seres
humanos tenham sido infectados, não há evidências de transmissão da infecção de gatos para
humanos e mais pesquisas são necessárias (332).
Em vez de esperar por evidências mais fortes de transmissão de animais para humanos, são
recomendadas medidas preventivas apropriadas, bem como a observância de práticas de
distanciamento social entre animais de companhia de diferentes famílias (331). A IDEXX, uma das
principais empresas de diagnóstico veterinário, realizou amplos testes de COVID-19 em amostras
coletadas de cães.
As CATs. No entanto, nenhum dos testes foi positivo (334). Em um estudo investigando a
capacidade de diferentes espécies animais de atuarem como hospedeiros intermediários para o
SARS-CoV-2, foi descoberto que tanto roedores quanto gatos podem ser infectados
experimentalmente com o vírus. Além disso, gatos infectados transmitem eficientemente a doença
para gatos ingênuos (329). A infecção por SARS-CoV-2 e a transmissão subsequente em roedores
resumem aspectos clínicos do COVID-19 em humanos. Roedores infectados também excretam o
vírus por várias vias, como saliva, secreções nasais, fezes e urina, após a infecção, tornando-os um
modelo animal ideal para estudar a transmissão (337). Testes experimentais também foram
realizados em outras espécies animais, e descobriu-se que os cães têm baixa susceptibilidade,
enquanto as aves não têm importância para esses resultados até ocorrer uma disseminação
significativa de um vírus semelhante ao SARS-CoV-2. Há um aumento constante nos relatórios de
COVID-19 em animais de companhia e selvagens ao redor do mundo. Mais estudos são necessários
para avaliar o potencial das animais, especialmente animais de companhia, como hospedeiros
eficazes que podem alterar a dinâmica da transmissão de humano para humano (330). Até agora,
dois cães de estimação (Hong Kong) e quatro gatos de estimação (um da Bélgica, um de Hong
Kong e dois dos Estados Unidos) foram testados positivos para SARS-CoV-2 (335). A Organização
Mundial de Saúde Animal (OIE) confirmou o diagnóstico de COVID-19 em cães e gatos devido à
transmissão da infecção de humanos para animais (331). A semelhança observada nas sequências
genéticas do SARS-CoV-2 entre um proprietário de animal de estimação infectado e seu cão
também sugere a transmissão de humano para animal (333). Apesar da ausência de sintomas, as
espécies de gatos devem ser consideradas um possível meio de transmissão de animais para
humanos (326). No entanto, atualmente não há relatos de transmissão do SARS-CoV-2 de gatos
para humanos. Com base nas evidências atuais, podemos concluir que os gatos são suscetíveis à
infecção por SARS-CoV-2 e podem infectar os humanos. No entanto, a taxa de sucesso do gato é de
96,7%, com genes S de 90,4%. O RBD do S protein é quase idêntico (com uma diferença de apenas
um aminoácido) entre o SARS-CoV-2 isolado do pangolim e o SARS-CoV-2 humano. Isso sugere
que os pangolins têm a capacidade de atuar como hospedeiros intermediários para o SARS-CoV-2.
(145). As interações aumentadas no contexto da mudança climática (142) são consideradas de alto
risco e são responsáveis pelo surgimento do vírus SARS. Suspeita-se que o COVID-19 tenha um
padrão de origem semelhante. Portanto, para evitar futuras pandemias de origem animal (1), são
necessários esforços coordenados abrangentes para identificar agentes patogênicos de alto risco
abrigados por grupos de animais selvagens, realizar vigilância entre pessoas expostas a eventos de
origem animal (12) e melhorar as medidas de biossegurança relacionadas ao comércio de vida
selvagem (146). Estudos de vigilância sorológica realizados em pessoas que vivem perto de
cavernas de morcegos anteriormente identificaram a confirmação sorológica de vírus relacionados a
SARS em humanos. Pessoas que vivem na interface entre a vida selvagem e os seres humanos,
especialmente em áreas rurais da China, estão regularmente expostas a coronavírus relacionados a
SARS (147). Esses resultados não terão importância até que uma análise abrangente das sequências
genômicas do RNA de SARS-CoV-2 determine que o COVID de Wuhan é um vírus recombinante
do coronavírus de morcegos e de outro coronavírus de origem desconhecida. A recombinação foi
identificada no gene spike viral, que reconhece os receptores da superfície celular. A análise
adicional do genoma, com base no uso do códon da serpente como reservatório animal mais
provável para SARS-CoV-2 (143). Ao contrário desses resultados, uma análise de genoma adicional
sugeriu que o genoma SARS-CoV-2 é 96% idêntico ao coronavírus de morcego, refletindo sua
origem em morcegos (63). O envolvimento de produtos derivados de morcegos na atual
disseminação não pode ser descartado. Os riscos associados à produção de produtos derivados de
morcegos para práticas de medicina tradicional chinesa, que envolvem o manuseio de morcegos
selvagens, representam um risco extremo para futuras pandemias de coronavírus de origem animal
(139). Além disso, o pangolim é uma espécie ameaçada de extinção que abriga uma variedade de
vírus, incluindo coronavírus (144). O vírus da coroa foi isolado do pangolim malaios (Manis
javanica) com uma alta identidade de aminoácidos com COVID-19 (100% E, 98,2% M, N 96,7%, e
RBD 90,4% S). O pangolim está envolvido na transmissão de vírus coronavírus (SARS) é uma das
espécies ameaçadas de extinção, que abriga uma variedade de vírus, incluindo coronavírus. O vírus
foi isolado do pangolim malaios (Manis javanica) com uma alta identidade de aminoácidos com o
COVID-19 (100% E, 98,2% M, N 96,7%, e RBD 90,4% S).
De alto valor comercial, uma vez que é usada na Medicina Tradicional Chinesa (MTC). Portanto,
lidar com morcegos para fins comerciais representa um grande risco de transmissão de epidemias de
coronavírus (139). Dada a possível contribuição das animais de fazenda e selvagens na infecção por
SARS-CoV-2, a Organização Mundial da Saúde recomendou, em um relatório sobre o novo
coronavírus (COVID-19), evitar contato não protegido com animais de fazenda e animais selvagens
(25). Mercados de animais vivos, como aqueles encontrados em Guangdong, China, proporcionam
um ambiente para a amplificação de coronavírus de animais e sua transmissão para novos
hospedeiros, como humanos (78). Tais mercados podem ser considerados locais importantes para a
origem de novas doenças de origem animal e têm implicações significativas para a saúde pública
em caso de surto da doença. Os morcegos são reservatórios de muitos vírus. Portanto, o papel dos
morcegos na disseminação atual não pode ser descartado (140). Em um estudo qualitativo para
avaliar fatores de risco zoonóticos entre comunidades rurais no sul da China, as interações
frequentes entre humanos e animais, juntamente com níveis baixos de biodiversidade, foram
identificadas como grandes ameaças para o surgimento de doenças zoonóticas nas comunidades
locais (141, 142). A análise completa da sequência do vírus coronavírus da Síndrome Diarreica
Aguda Suína (SADS-CoV), que causa pela primeira vez doença em leitões com inflamação
intestinal aguda, pertence ao gênero Alphacoronavirus (106). A disseminação da doença foi
associada a altas taxas de mortalidade em leitões (aproximadamente 24.693 mortes) em quatro
fazendas na China, e tem uma semelhança genômica de 95% com o vírus Hku2 dos morcegos
(134). O vírus isolado dos suínos também é altamente semelhante ao vírus isolado de morcegos do
tipo Rhinolophus, indicando uma origem dos morcegos para o vírus suíno (106, 134, 135). É
importante notar que a disseminação do SADS-CoV começou na província de Guangdong, perto do
local de origem do surto de SARS (136). Antes deste surto, não se sabia que os morcegos pularam
para os suínos através de quebras de barreiras de espécies. A próxima etapa desta transmissão não
foi bem concluída, uma vez que os suínos são considerados um caldeirão para vírus da influenza,
devido à sua capacidade de serem infectados pelo vírus da influenza humano e aviária (136). Da
mesma forma, eles podem atuar como um caldeirão para coronavírus, já que estão em contato
frequente com humanos e múltiplas espécies de vida selvagem. Além disso, suínos também foram
encontrados para serem suscetíveis a infecções por SARS humano-CoV e MERS-CoV, tornando
esse cenário plausível (109, 137). Eles também podem servir como um caldeirão para coronavírus,
já que estão em contato frequente com humanos e diversas espécies de vida selvagem. Além disso,
suínos também foram encontrados para serem suscetíveis a infecções por SARS humano-CoV e
MERS-CoV, tornando esse cenário plausível (109, 137). Da mesma forma, eles podem atuar como
um caldeirão para coronavírus, já que estão em contato frequente com humanos e múltiplas espécies
de vida selvagem. Além disso, suínos também foram encontrados para serem suscetíveis a infecções
por SARS humano-CoV e MERS-CoV, tornando esse cenário plausível (109, 137). É um sistema
(30). Os coronavírus bovinos (BoCoVs) afetam muitos mamíferos domésticos e selvagens (126). Os
coronavírus causam doenças no trato gastrointestinal e no trato respiratório (126). Além disso, as
aves também podem servir como um reservatório para coronavírus, pois elas têm contatos
frequentes tanto com humanos quanto com outras espécies da vida selvagem. Além disso, também
foi observada a susceptibilidade das aves à infecção por coronavírus bovino (BoCoV) (127). O
coronavírus da peritonite infecciosa felina (FIP) é a principal espécie de coronavírus que afeta
gatos, causando sintomas como inflamação intestinal, peritonite e doença do trato respiratório
(128). A EPI também afeta outras espécies, e o coronavírus entérico felino pertencente a diferentes
gêneros também afeta gatos, afetando o sistema digestivo e o sistema respiratório, respectivamente
(129, 130). O IBV, um vírus do gênero Gammacoronavirus, causa doenças respiratórias, urinárias e
reprodutivas em aves, com grandes perdas econômicas na indústria avícola (131, 132).
O coronavírus é uma síndrome de diarreia aguda em suínos, serpentes e várias outras espécies de
animais (20, 30, 79, 93, 124, 125, 287). Infecções por coronavírus estão associadas a diferentes
manifestações clínicas, que variam desde inflamação intestinal em bovinos e suínos até doenças
respiratórias superiores em aves e infecções respiratórias letais em humanos (30).
Entre os gêneros de coronavírus, os Alphacoronavírus e Betacoronavírus afetam principalmente
mamíferos, enquanto os Gammacoronavírus e Deltacoronavírus afetam principalmente aves, peixes
e ocasionalmente mamíferos (27, 29, 106). Vários novos coronavírus foram descobertos no passado
pertencentes ao gênero Deltacoronavírus em aves, como o vírus da coroa Wigeon 20HKU, o vírus
da coroa Bulbul 11HKU, o Coronavírus Munia 13HKU, o Coronavírus da coroa White-eye 16HKU,
o Coronavírus da coroa Night Heron 19HKU, e o Coronavírus recém-descoberto 21HKU, bem
como em suínos (Coronavírus suíno 15HKU) (6, 29).
Os vírus da gastroenterite e diarreia suína (TGEV), o vírus da epidemia de diarreia suína (PEDV) e
o vírus da encefalite e da paralisia hemaglutinante (PHEV) estão entre os coronavírus suínos. Entre
eles, TGEV e PEDV são responsáveis por causar gastroenterite e diarreia em leitões, com taxas
significativas de morbidade e mortalidade. A infecção com o vírus PHEV também causa uma
infecção intestinal, mas pode causar encefalite devido à sua capacidade de causar danos graves ao
sistema nervoso.
Além disso, em pacientes do meio da vida e idosos com doenças crônicas subjacentes,
especialmente hipertensão e diabetes, são mais suscetíveis à insuficiência respiratória e, portanto,
têm um prognóstico pior. A oferta de suporte respiratório nas fases iniciais levou a um melhor
desfecho da doença e facilitou a recuperação (18).
A síndrome da angústia respiratória aguda em COVID-19 é atribuída a tempestades celulares que
levam a uma resposta imune exagerada, desequilíbrio na rede reguladora imunológica e, finalmente,
falha de múltiplos órgãos. Além da resposta inflamatória exagerada observada em pacientes com
inflamação pulmonar por COVID-19, as células hepáticas derivadas de células endoteliais biliares
regulam a expressão do ACE2 nos tecidos hepáticos por meio de uma compensação difusiva que
pode levar a lesões hepáticas (123).
Vírus Coronavírus em Animais e Ligações Zoonóticas - Uma Breve Visão Geral
O vírus coronavírus pode causar doenças em muitos tipos de animais, tanto domésticos quanto
selvagens, assim como em humanos (23). As diferentes espécies animais afetadas pelo coronavírus
incluem cavalos, camelos, gado, suínos, cães, gatos, roedores, aves, primatas, morcegos, coelhos,
serpentes e várias outras espécies de animais selvagens (20, 30, 79, SARS ou coronavírus (120). No
entanto, houve preocupações sobre o impacto do SARS-CoV-2, que causa COVID-19, na gravidez.
Pesquisadores mencionaram a possibilidade de transmissão do novo coronavírus no útero de mães
com COVID-19 para recém-nascidos na China, com base nos níveis elevados de anticorpos IgM e
IgG e valores de citocinas no sangue obtidos de recém-nascidos logo após o parto. No entanto, a
PCR-RT falhou em confirmar a presença do material genético do SARS-CoV-2 em bebês (283).
Estudos recentes mostraram que, em alguns casos, a prematuridade e suas consequências estão
associadas ao vírus. No entanto, algumas dúvidas surgiram sobre a possibilidade de transmissão
vertical (240, 243). A infecção por COVID-19 é caracterizada por inflamação pulmonar e alguns
pacientes desenvolvem a Síndrome da Angústia Respiratória Aguda (ARDS). Os indicadores
bioquímicos no sangue, como albumina, lactato desidrogenase, proteína C reativa, linfócitos
(percentagem) e neutrófilos (percentagem), fornecem uma ideia da gravidade da doença em
pacientes com COVID-19 (121).
Durante a COVID-19, os pacientes podem experimentar um aumento no número de leucócitos e
uma diminuição nas células brancas com linfócitos (244), uma diminuição na albumina sanguínea,
um aumento na relação de lactato desidrogenase e aspartato aminotransferase e bilirrubina,
especialmente o dímero-D (117). O SARS-CoV-2 invade os alvéolos pulmonares, causando uma
inflamação grave nos pulmões, que pode ser observada em imagens de tomografia computadorizada
(TC) como múltiplas opacidades em vidro fosco nos pulmões. Essas lesões começam em um lóbulo,
mas podem se espalhar (118).
A avaliação histológica de amostras de biópsia pulmonar de pacientes com COVID-19 revelou
danos alveolares difusos e exsudatos fibróticos, além de formação de membrana hialina e
descamação de células alveolares, indicando a Síndrome da Angústia Respiratória Aguda (119).
Também foi observado que os pacientes com SARS-CoV-2 frequentemente têm linfopenia, com ou
sem anormalidades nos leucócitos (118). A gravidade da linfopenia pode fornecer informações
sobre o diagnóstico da doença, pois foi encontrada uma correlação positiva com a gravidade da
doença (118).
As mulheres grávidas são mais suscetíveis à infecção por COVID-19, que pode ter efeitos adversos
no feto, como restrição de crescimento intrauterino, aborto espontâneo, parto prematuro e
mortalidade perinatal. No entanto, a possibilidade de infecção transmitida verticalmente, ou seja, da
mãe para o feto, não foi observada durante os surtos de SARS ou MERS (120). No entanto,
amostras obtidas do trato respiratório inferior (291).
Além de todos os resultados mencionados acima, o sequenciamento e a genética desempenham um
papel crucial na identificação e confirmação do agente viral causador, bem como na criação de links
com estirpes e sequências anteriores, além de conhecer as nucleotídicas e mutações de aminoácidos
e a filogenia molecular. A rápida evolução e implementação de testes de diagnóstico para novas
doenças emergentes, como a COVID-19, apresentam desafios significativos devido à falta de
recursos e restrições logísticas associadas à disseminação da doença (155). A confirmação da
infecção por SARS-CoV-2 também pode ser feita por isolamento e cultura. Foi encontrado que o
cultivo de células epiteliais do trato respiratório humano é útil no isolamento do SARS-CoV-2 (3).
O controle efetivo da propagação da doença depende de um diagnóstico rápido. Recentemente, em
resposta ao surto de COVID-19, testes quantitativos de transcrição reversa em tempo real em uma
etapa foram desenvolvidos para detectar as regiões b1ORF e N do genoma do SARS-CoV-2 (156).
Este teste tem sido encontrado útil na detecção rápida do SARS-CoV-2. As análises baseadas em
ácido nucleico oferecem alta precisão no diagnóstico do SARS. O coronavírus é o exemplo mais
notável de um vírus que cruzou a barreira das espécies duas vezes, de animais selvagens para
humanos durante os surtos de SARS e MERS (79, 102). Também houve suspeitas de uma possível
terceira vez com o SARS-CoV-2 (COVID-19) (102). Os morcegos são reconhecidos como
hospedeiros ancestrais tanto para o SARS-CoV quanto para o MERS (103). Os morcegos também
são considerados hospedeiros reservatórios naturais para coronavírus humanos, como o HCoV-E229
e o HCoV-NL63 (104). No caso da COVID-19, existe a possibilidade de transmissão primária, seja
por meio de hospedeiros intermediários, como aconteceu com o SARS e o MERS, ou diretamente
dos morcegos (103). O modelo de aparência proposto para o SARS sugere que o SARS-CoV
emergiu de morcegos para camelo como hospedeiro intermediário e sofreu mudanças no domínio
de ligação do receptor (RBD) para melhorar a ligação ao receptor humano ACE. Proteína S
desempenha um papel importante na indução da imunidade protetora contra o SARS-CoV-2,
facilitando respostas de células T e neutralização de anticorpos (168). Nas últimas décadas, vimos
várias tentativas de desenvolver vacinas contra coronavírus humanos usando a proteína S como alvo
(168, 169). No entanto, as vacinas desenvolvidas têm uma eficácia mínima, mesmo entre cepas de
vírus intimamente relacionadas, devido à falta de proteção cruzada. Isso ocorre principalmente
devido à ampla diversidade nas variantes antigênicas do vírus (104). As contribuições das proteínas
estruturais, como a espícula (S), matriz (M), envelope pequeno (E) e proteínas nucleocapsídeo (N),
do SARS-CoV-2 para a indução da imunidade protetora foram avaliadas por expressão em vírus
recombinantes de influenza tipo 3 de quatro vias (3BHPIV). Vale ressaltar que os resultados foram
conclusivos de que a expressão de proteínas M ou E ou N sem a presença da proteína S não foi
suficiente (181). A CEPI também financiou a Moderna para desenvolver uma vacina para a
COVID-19 em parceria com o Vaccine Research Center (VRC) do National Institute of Allergy and
Infectious Diseases (NIAID), parte dos National Institutes of Health (NIH) (182). Usando a
tecnologia de plataforma de mRNA, é provável que um candidato a vacina que expressa a proteína
SARS-CoV-2 passe por testes clínicos nos próximos meses (180).
Em 16 de março de 2020, Jennifer Haller se tornou a primeira pessoa fora da China a receber uma
vacina experimental desenvolvida pela Moderna contra esse vírus pandêmico. Moderna, juntamente
com a empresa chinesa CanSino Biologics, foi a primeira equipe de pesquisa a lançar ensaios
clínicos de pequena escala para vacinas contra a COVID-19, avaliando a segurança das vacinas e
sua capacidade de estimular respostas imunológicas (296). Cientistas de todo o mundo estão
fazendo esforços incansáveis para desenvolver vacinas eficazes com imunidade protetora forte
contra a COVID-19. Candidatos a vacinas, como a vacina mRNA-1273 contra a SARS-CoV-2, a
vacina de DNA-4800INO do coronavírus e a vacina n5-AdCOVID de vírus inativado do tipo 5, são
alguns exemplos na primeira fase de ensaios clínicos, enquanto vacinas de RNA ribossômico auto-
amplificante, vacinas orais COVID-19 combinadas e vacinas de peptídeo Key-Li COVID-19 (169).
O desafio com o MERS-CoV também foi abordado, e a administração da vacina baseada no vírus
MERS-CoV em camundongos c/BALB foi encontrada para promover imunidade de longo prazo
contra o coronavírus do tipo sindrômico ascendente do Oriente Médio, caracterizada por indução de
IgG sistemática, secreção de IgA e respostas de células de memória residindo nos pulmões (177).
Abordagens imunoinformáticas foram usadas para examinar o genoma em busca de alvos potenciais
de vacina entre as diferentes cepas do MERS-CoV (178). O gene N e as epítopos de células B
potenciais para a proteína MERS-CoV E foram propostos como alvos imunogênicos que estimulam
tanto respostas de células T como respostas de anticorpos equivalentes (178, 179)
A proteína S desempenha um papel importante na estimulação da resposta imunológica protetora
contra o SARS-CoV-2, mediando as respostas das células T e neutralizando a produção de
anticorpos. Nas últimas décadas, temos visto várias tentativas de desenvolver vacinas contra os
coronavírus humanos usando a proteína S como alvo. No entanto, as vacinas desenvolvidas têm um
uso limitado, mesmo entre cepas viralmente relacionadas, devido à falta de proteção cruzada. Isso
se deve principalmente à ampla diversidade nas variantes antígenas do vírus.
Foram avaliadas as contribuições das proteínas estruturais, como a espícula (S), a matriz (M), o
envelope (E) e as proteínas nucleocapsídeo (N) do SARS-CoV-2 para induzir imunidade protetora,
expressando-as em um vírus influenza recombinante tipo 3 (3BHPIV). É importante notar que os
resultados foram conclusivos de que a expressão das proteínas M, E ou N sem a presença da
proteína S não foi eficaz.
O CEPI também financiou a Moderna para o desenvolvimento de uma vacina contra a COVID-19
em parceria com o Vaccine Research Center (VRC) do National Institute of Allergy and Infectious
Diseases (NIAID), que faz parte dos National Institutes of Health (NIH).
Usando a tecnologia de plataforma de vacina de RNA mensageiro (mRNA), é provável que um
candidato a vacina que expressa a proteína SARS-CoV-2 seja testado em ensaios clínicos nos
próximos meses.
Em 16 de março de 2020, Jennifer Haller se tornou a primeira pessoa fora da China a receber uma
vacina experimental desenvolvida pela Moderna contra esse vírus pandêmico. Moderna, junto com
a empresa chinesa CanSino Biologics, foi uma das primeiras equipes de pesquisa a lançar pequenos
ensaios clínicos de vacinas contra a COVID-19 para avaliar a segurança da vacina e sua capacidade
de induzir respostas imunológicas.
Cientistas de todo o mundo estão trabalhando duro para desenvolver vacinas eficazes com uma forte
resposta imunológica protetora contra a COVID-19. Candidatos a vacina, como mRNA-1273
SARS-CoV-2, DNA-4800INO coronavírus, e uma vacina antiviral do tipo 5 n5-AdCOVID, são
exemplos de poucos na fase inicial de ensaios clínicos. Enquanto isso, as pesquisas continuam em
andamento com candidatos de vacinas, como o RNA ribossomal amplificado, a vacina oral
composta COVID-19 e vacinas baseadas em plantas e peptídeos Key-Li COVID-19.
O desafio com o MERS-CoV também foi abordado, e uma vacina baseada no coronavírus canino
amplificado c/BALB foi encontrada para induzir imunidade de longo prazo contra o vírus do
síndrome respiratória do Oriente Médio (MERS-CoV). Esta vacina é caracterizada por estimular
IgG sistêmica, secreção de IgA e respostas de células de memória residentes nos pulmões.
Foram utilizadas abordagens de informática imunológica para examinar o genoma em busca de
possíveis alvos de vacina entre as diferentes cepas do MERS-CoV. Proteína N e epítopos B da
proteína E do MERS-CoV foram sugeridos como alvos imunológicos que estimulam tanto as
respostas das células T quanto as respostas de anticorpos equivalentes.
O esforço colaborativo de pesquisadores nos laboratórios de Rocky Mountain e na Universidade de
Oxford está focado no desenvolvimento de uma vacina direcionada ao vírus da Síndrome
Respiratória do Camelo (MERS) para combater a COVID-19. O CEPI (Coalizão para Inovações em
Preparação para Epidemias) iniciou um terceiro programa de desenvolvimento de vacinas para o
SARS-CoV-2. O CEPI tem um projeto de colaboração com a Inovio para desenvolver uma vacina
de DNA contra o coronavírus que causa a Síndrome Respiratória do Oriente Médio, visando
fortalecer a imunidade eficaz. O CEPI e a Universidade de Queen's estão projetando uma
plataforma de vacinação molecular para o MERS-CoV e outros patógenos, que pode facilitar a
identificação de antígenos pelo sistema imunológico.
O CEPI também financiou a Moderna para desenvolver um arquivo que explorasse o
direcionamento de processos de simulação dinâmica molecular e avaliasse sua interação com
principais moléculas de compatibilidade tecidual. É possível que estimulem as respostas
imunológicas.
Uma vacina conjugada pode ser projetada usando o vírus da raiva (RV) como vetor. O RV pode ser
modificado para expressar a proteína SARS-CoV-1S em sua superfície, estimulando assim a
resposta imunológica contra a SARS-CoV-1S. Vacinas baseadas em vetores virais podem estimular
uma resposta de anticorpos mais rápida e uma resposta celular mais alta em comparação com as
vacinas baseadas em partículas de grama positiva (GEM). No entanto, as GEM podem levar a uma
resposta excessiva de anticorpos em doses baixas.
Vacinas de subunidades duplas têm se tornado mais populares recentemente. Uma estratégia
promissora de vacinação direcionada ao vírus da raiva está sendo usada para desenvolver vacinas
contra doenças infecciosas emergentes. Uma vacina de subunidade dupla foi desenvolvida a partir
de partículas de vírus da raiva modificadas que expressam a SARS-CoV-1S para estimular respostas
imunológicas contra ambos, o MERS-CoV e o SARS-CoV-1. Essa vacina se mostrou protetora
contra o desafio com o MERS-CoV.
A reutilização de vacinas desenvolvidas no laboratório contra o SARS-CoV-1S no combate ao
SARS-CoV-2 está sendo investigada. A estratégia pode ser útil em cenários de surto, economizando
muito tempo, uma vez que a avaliação inicial, incluindo estudos em laboratório, já teria sido
concluída para essas candidatas a vacinas.
Estratégias de vacinas baseadas na proteína S completa, subunidades do S ou antígenos específicos
do S estão entre as candidatas mais promissoras contra os coronavírus. A unidade de ligação ao
receptor (RBD) da subunidade 1S da proteína SARS-CoV-1S demonstrou uma capacidade
excepcional de estimular anticorpos neutralizantes e pode ser usada no design de possíveis vacinas
contra o SARS-CoV-2. Portanto, estratégias de vacinação baseadas na SARS-CoV-1S completa,
subunidades do S ou antígenos específicos do S são candidatas altamente promissoras no combate
aos coronavírus.
Além disso, a reutilização de vacinas desenvolvidas contra o SARS-CoV-1S para o SARS-CoV-2
está sendo investigada, com a possibilidade de proteção cruzada sendo avaliada para o combate à
COVID-19. Essa estratégia pode ser valiosa em cenários de surto, economizando tempo, uma vez
que a avaliação inicial, incluindo estudos em laboratório, já teria sido concluída para essas
candidatas a vacinas.
Estudos adicionais são necessários para avaliar as propriedades terapêuticas desses compostos
específicos no tratamento da COVID-19.
O esforço colaborativo dos pesquisadores nos laboratórios Rocky Mountain e na Universidade de
Oxford está focado no desenvolvimento de uma vacina direcionada ao vírus da SARS-CoV-2,
responsável pela COVID-19. A aliança para Inovações de Preparação para Epidemias (CEPI)
iniciou três programas para o desenvolvimento de vacinas SARS-CoV-2. O CEPI está colaborando
com a Inovio para desenvolver uma vacina de DNA para o coronavírus causador da Síndrome
Respiratória do Oriente Médio (MERS), que pode fortalecer a imunidade eficaz. O CEPI e a
Universidade de Queensland estão desenvolvendo uma plataforma de vacina de partículas do
coronavírus (CoV) e outros patógenos, o que pode facilitar a detecção de antígenos pelo sistema
imunológico. Além disso, o CEPI financiou a Moderna para desenvolver um arquivo explorando
alvos de simulação dinâmica molecular e avaliando sua interação com as principais moléculas de
histocompatibilidade de classe I.
Vacinas baseadas em vetores virais podem ser projetadas usando o vírus da cinomose (CDV) como
vetor. O CDV pode ser modificado para expressar a proteína S do MERS-CoV na sua superfície,
estimulando assim a resposta imunológica contra o MERS-CoV. Vacinas baseadas em vetores virais
podem induzir uma resposta mais rápida de anticorpos e maior imunidade celular em comparação
com vacinas de partículas baseadas em vírus positivos de sentido único. No entanto, isso pode levar
a uma resposta muito alta de anticorpos em doses baixas. Portanto, a eficácia da resposta
imunológica humoral e celular dessas vacinas depende do vetor utilizado.
Recentemente, as vacinas duplas têm se destacado. Uma plataforma de vacina direcionada ao vírus
da cinomose tem sido usada para desenvolver vacinas contra doenças infecciosas emergentes. Uma
vacina dupla foi desenvolvida a partir de partículas do vírus da cinomose desativadas que
expressam a glicoproteína S do MERS-CoV para estimular a resposta imunológica tanto contra o
MERS-CoV quanto contra o vírus da cinomose. Camundongos vacinados com isso mostraram
proteção contra o desafio com o MERS-CoV.
No entanto, são necessárias mais análises genéticas entre o SARS-CoV-2 e diferentes cepas de
SARS-CoV e SARS-like (SL-CoV) para avaliar a reutilização potencial das vacinas contra a
COVID-19. Essa estratégia pode ser útil em cenários de surto da doença, economizando muito
tempo, uma vez que a avaliação inicial, incluindo estudos laboratoriais, já estará completa para
essas vacinas candidatas.
Estratégias de subunidades multifocais são promissoras como estratégias preventivas contra a
COVID-19 contínua. Ferramentas de imunoinformática avançadas podem ser usadas para
desenvolver vacinas de múltiplas cabeças. Mais avaliações podem ser feitas nas vacinas projetadas
usando essa técnica por meio de estudos de fusão, e se forem encontradas eficazes, podem ser
avaliadas em maior escala em modelos animais.
A identificação das epítopes que têm potencial para se tornar candidatos a vacinas é de extrema
importância para o desenvolvimento de uma vacina eficaz contra a COVID-19. A abordagem de
imunoinformática foi usada para identificar as epítopes essenciais das células T e das células B de
linfócitos T e células B contra a glicoproteína de superfície do SARS-CoV-2. Recentemente, um
pequeno número de epítopes de glicoproteína de superfície do SARS-CoV-2 foi identificado. As
epítopes selecionadas visam alvos de simulação dinâmica molecular, e, portanto, a compreensão do
desenvolvimento de uma vacina baseada na proteína S do SARS-CoV-2 pode ajudar a identificar os
potenciais candidatos para uma vacina. Assim, as estratégias de vacina baseadas na proteína S
completa, nas subunidades da proteína S ou nos epítopes específicos da proteína S parecem ser as
vacinas mais promissoras contra os coronavírus. O RBD da subunidade 1S da proteína S do SARS-
CoV-2 tem uma capacidade excepcional de estimular anticorpos neutralizantes, o que pode ser
usado para desenvolver potencialmente vacinas contra a COVID-19, seja usando proteínas
recombinantes contendo RBD ou vetores recombinantes que codificam RBD. Portanto, o uso do
alinhamento genético superior entre o SARS-CoV-2 e o SARS-CoV pode permitir a reutilização de
vacinas que se mostraram eficazes no laboratório contra o SARS-CoV para uso contra o SARS-
CoV-2. A possibilidade de proteção cruzada para a COVID-19 pode ser menor, e são necessárias
mais análises genéticas e experimentais.
Quanto às terapias, entre os compostos avaliados, o 2-amino-5-(1H-1,2,4-triazol-3-ylsulfanyl)-1-(3-
iodophenyl)-4-(2-(cyclopent-1-en-1-ylamino)thiazol-4-yl)pentan-2-ona (nomeado como iodo-4) foi
o mais eficaz. Esses compostos foram usados em estudos in silico, e a ligação molecular foi
alcançada no sítio ativo da helicase nsp13 do MERS-CoV. No entanto, são necessários mais estudos
para avaliar o potencial terapêutico desses compostos específicos recentemente identificados no
tratamento da COVID-19.
As terapias com anticorpos monoclonais (MAb) podem ser úteis na intervenção da doença em
indivíduos expostos ao coronavírus. Pacientes que se recuperaram da SARS frequentemente exibem
anticorpos neutralizantes fortes contra infecções por coronavírus. Um conjunto de MAb
direcionados às regiões específicas da proteína S do SARS-CoV-2, composto por seis grupos de
epítopos definidos, interage com o Nafamostat um potente inibidor do vírus da Síndrome
Respiratória do Oriente Médio Coronavírus e atua na prevenção da fusão da membrana. No entanto,
não possui qualquer atividade inibitória contra a infecção por SARS-CoV-2. Recentemente, vários
compostos triazólicos sintéticos foram avaliados usando ensaios de transferência de energia de
ressonância de fluorescência (FRET) para sua capacidade de inibição nos Estados Unidos, como o
Tilorone, um poderoso antagonista do vírus. Tilorone foi previamente encontrado para ter atividade
contra vírus como MERS, Marburg, Ebola e Chikungunya. Apesar de ter um amplo espectro de
atividade, foi negligenciado por muito tempo. O Tilorone é outro medicamento antiviral que pode
ter atividade contra o SARS-CoV-2. O Remdesivir, um novo medicamento nucleotídeo
representativo, mostrou eficácia no tratamento da doença por Ebola (EVD) e também foi
encontrado para inibir a replicação do SARS-CoV e MERS-CoV em sistemas de cultura de células
humanas primárias. Estudos recentes demonstraram que o Remdesivir tem atividade antiviral
superior ao Lopinavir e Ritonavir em estudos de laboratório. Além disso, estudos em camundongos
também identificaram que o tratamento com Remdesivir melhora a função pulmonar e reduz a carga
viral e as doenças pulmonares, tanto em sistemas preventivos quanto terapêuticos, comparados com
o IFN-ritonavir/lopinavir no caso da infecção por MERS-CoV. O Remdesivir também inibe várias
cepas de coronavírus, incluindo o SARS-CoV-2 humano, o coronavírus de morcego originário
(RaTG13), e o SARS-CoV pandemic. O Remdesivir é considerado o único medicamento que reduz
significativamente as doenças pulmonares. Todos esses resultados indicam que mais avaliações do
Remdesivir são necessárias para sua maior eficácia no tratamento da infecção por COVID-19 em
humanos. A ampla atividade demonstrada pelo Remdesivir ajudaria a controlar a disseminação da
doença em caso de um novo surto de coronavírus. A cloroquina é um medicamento antimalárico
conhecido por sua atividade antiviral devido à sua capacidade de prevenir a fusão das células virais
com as membranas necessárias para a fusão. Também interfere com a ligação dos receptores virais,
inibindo a ligação à glicozil terminal dos receptores celulares do SARS-CoV-2, como o ACE2. Em
um recente ensaio clínico multicêntrico realizado na China, o fosfato de cloroquina demonstrou
eficácia e segurança na terapia do pulmão inflamatório associado ao COVID-19. Este medicamento
já está incluído nas diretrizes terapêuticas do Comitê Nacional de Saúde da República Popular da
China. Ensaios clínicos iniciais com a hidroxicloroquina, outro medicamento da classe das
aminoquinolinas, produziram resultados promissores. Os pacientes com COVID-19 receberam 600
mg de hidroxicloroquina diariamente junto com azitromicina em um protocolo de braço único. Este
protocolo foi encontrado para ser promissor, mas ainda consiste em um número limitado de
pacientes, portanto, a possibilidade de viés não pode ser descartada. No entanto, em outro estudo de
caso, houve preocupações levantadas sobre a eficácia da hidroxicloroquina-azitromicina no
tratamento de pacientes com COVID-19, já que não houve efeito significativo observado. Em
alguns casos, o tratamento foi interrompido devido ao prolongamento do intervalo QT. Portanto,
mais ensaios clínicos randomizados são necessários para resolver esta questão. Ivermectina, outro
medicamento antiviral, inibe a replicação do SARS-CoV-2 no laboratório. Os resultados deste
estudo indicam que uma única terapia com este medicamento foi capaz de causar uma redução de
5000 vezes na carga de RNA viral em 48 horas em cultura de células. Uma das principais
desvantagens que limitam a utilidade clínica da ivermectina é sua capacidade de causar toxicidade
celular. No entanto, ao alterar as substâncias usadas em formulações, as propriedades
farmacocinéticas podem ser ajustadas, dando-lhes maior controle sobre a toxicidade. Com base na
simulação farmacocinética, a ivermectina pode ter benefício em uma concentração sistêmica mais
alta. As terapias antivirais variam em várias categorias de medicamentos que são rotineiramente
usados, como o Oseltamivir, um inibidor de neuraminidase, o Aciclovir, o Famciclovir, o Ribavirin,
entre outros. No entanto, eles não têm nenhum efeito sobre o COVID-19 e, portanto, não são
recomendados. O Oseltamivir, um inibidor de neuraminidase, foi investigado em hospitais chineses
para o tratamento de casos suspeitos de COVID-19, embora a eficácia comprovada contra o SARS-
CoV-2 ainda seja limitada. As evidências de atividade antiviral no laboratório para medicamentos
aprovados pela FDA foram associadas ao uso de anti-inflamatórios não esteroidais com a ocorrência
de efeitos adversos no sistema respiratório, cardíaco e vascular. Portanto, como abordagem de
precaução, é aconselhável não recomendar anti-inflamatórios não esteroidais como primeira opção
para o manejo dos sintomas de COVID-19. O uso de corticosteroides em pacientes com COVID-19
ainda é controverso e requer mais estudos clínicos randomizados. As diretrizes para o tratamento de
adultos gravemente doentes recomendam o uso de corticosteroides sistêmicos em adultos que estão
sob ventilação mecânica com síndrome do desconforto respiratório agudo. O uso geral de
corticosteroides em COVID-19 ainda não é recomendado devido a preocupações com efeitos
adversos em infecções respiratórias virais.
As medicações antivirais de amplo espectro, que foram repensadas para uso, revelaram potencial
antiviral em testes de laboratório para medicamentos aprovados pela FDA, ou seja, Ribavirin,
Penciclovir, Nitazoxanide, Nafamostat e Cloroquina, que foram comparados com Remdesivir e
Favipiravir (medicamentos antivirais de amplo espectro). Descobriu-se que o Remdesivir e a
Cloroquina são altamente eficazes contra o SARS-CoV-2 em ambiente de laboratório. O Ribavirin,
Penciclovir e Favipiravir podem não ter um efeito antiviral notável no corpo vivo contra o SARS-
CoV-2, devido à necessidade de concentrações mais elevadas desses nucleosídeos no laboratório
para reduzir a infecção viral.
Tanto o Remdesivir quanto a Cloroquina são atualmente usados em seres humanos para tratar outras
doenças, e essas drogas mais seguras podem ser exploradas para avaliar sua eficácia em pacientes
com COVID-19. Várias opções terapêuticas, como Lopinavir/Ritonavir, Cloroquina,
Hidroxicloroquina, foram propostas para a gestão clínica da COVID-19. Um estudo de acoplamento
molecular realizado na RNA-polimerase dependente de RNA (RdRp) do SARS-CoV-2, usando
várias drogas antivirais disponíveis comercialmente, descobriu que drogas como Ribavirin,
Remdesivir, Galidesivir, Tenofovir e RdRp ligam-se firmemente, sugerindo seu grande potencial
contra COVID-19.
Um medicamento antiviral de amplo espectro desenvolvido nos Estados Unidos, o Tilorone
Dihydrochloride (Tilorone), está sendo usado no tratamento de pacientes com COVID-19 que
apresentam sintomas graves, juntamente com terapia de oxigênio. Em casos em que os pacientes
progridem para insuficiência respiratória e se tornam resistentes ao tratamento com oxigênio, a
ventilação mecânica é necessária. O choque infeccioso resultante do vírus da COVID-19 pode ser
tratado por meio do suporte circulatório adequado.
Atualmente, várias categorias de medicamentos estão sendo avaliadas quanto ao seu potencial
terapêutico contra o SARS-CoV-2. Essas terapias podem ser amplamente classificadas em três
categorias: medicamentos que impedem a entrada do vírus na célula hospedeira, medicamentos que
impedem a replicação viral e a permanência dentro da célula hospedeira, e medicamentos que
reduzem a disseminação do vírus.
A resposta imune hiperativa é comumente observada em pacientes graves com COVID-19, e,
portanto, eles podem se beneficiar do tratamento anti-inflamatório apropriado. O tratamento anti-
inflamatório com drogas como glicocorticoides, inibidores de citocinas, inibidores JAK e
Cloroquina/Hidroxicloroquina só deve ser realizado após uma análise de risco/benefício em
pacientes com COVID-19. Não há estudos relacionados à aplicação de drogas anti-inflamatórias
não esteroidais (AINEs) em pacientes com COVID-19 até o momento.
Para desenvolver e produzir drogas e vacinas eficazes contra a COVID-19, são necessários meses a
anos, com avaliação adequada e aprovação por autoridades regulatórias, a fim de atender à demanda
global de doses em tempo hábil. Continuam sendo necessários esforços contínuos para identificar e
avaliar drogas viáveis e sistemas de tratamento imunológico que demonstrem eficácia contra outros
agentes virais semelhantes ao SARS-CoV-2.
Os pacientes com COVID-19 que apresentam sintomas graves atualmente seguem o tratamento
principal, que inclui ventilação mecânica, admissão em unidades de terapia intensiva (UTI) e
tratamento de suporte para alívio dos sintomas. Além disso, a resposta imunológica exagerada do
hospedeiro (tempestade de citocinas) é frequentemente observada em pacientes com COVID-19
grave. Portanto, eles podem se beneficiar do tratamento anti-inflamatório apropriado. O tratamento
anti-inflamatório com medicamentos como glicocorticoides, inibidores de citocinas, inibidores JAK
e cloroquina/hidroxicloroquina só deve ser realizado após uma análise de risco/benefício em
pacientes com COVID-19. Até o momento, não houve estudos relacionados à aplicação de
medicamentos anti-inflamatórios não esteroidais (AINEs) em pacientes com COVID-19.
Não existe atualmente um tratamento antiviral específico licenciado para as infeções por MERS e
SARS-CoV-2, e o foco principal nas configurações clínicas é reduzir os sintomas clínicos e fornecer
cuidados de apoio (186-183). Os medicamentos eficazes para o tratamento de pacientes com
COVID-19 incluem o remdesivir, o lopinavir/ritonavir isolados ou em combinação com interferon
beta, plasma convalescente e monocolonais (MAbs); no entanto, questões de eficácia e segurança
desses medicamentos exigem ensaios clínicos adicionais (187, 281).
Foi realizado um ensaio controlado do tratamento com lopinavir potencializado com ritonavir e
interferon beta 2 alfa em pacientes hospitalizados com COVID-19 (2000029308ChiCTR) (188).
Além disso, o uso de hidroxicloroquina e tocilizumabe foi sugerido e discutido por seu papel
potencial na modulação das respostas inflamatórias nos pulmões e efeito antiviral em vários estudos
de pesquisa. No entanto, não foram publicados ensaios clínicos definitivos (194, 196, 197, 261,
272).
Recentemente, um ensaio clínico em adultos com COVID-19 grave não mostrou benefício do
tratamento com ritonavir-lopinavir em relação aos cuidados padrão (273). Os esforços para
controlar a infecção por SARS-CoV-2 usam estratégias direcionadas, semelhantes às adotadas
contra a síndrome respiratória do Oriente Médio e o SARS, além de promoverem a implementação
e aprimoramento de medidas preventivas devido à natureza desconhecida desse novo vírus (36,
189).
Atualmente, o principal caminho de tratamento para pacientes gravemente afetados por SARS-CoV-
2, hospitalizados e que progrediram para insuficiência respiratória, com resistência ao tratamento
com oxigênio, é a ventilação mecânica. A gestão do choque infeccioso resultante do vírus
coronavírus da COVID-19 pode ser abordada fornecendo suporte circulatório adequado (299).
Atualmente, várias categorias de medicamentos estão sendo avaliadas quanto ao seu potencial efeito
terapêutico contra o SARS-CoV-2. As terapias que têm atividade antiviral de amplo espectro contra
o SARS-CoV-2 podem ser amplamente classificadas em três categorias: medicamentos que
impedem a entrada do vírus na célula hospedeira, medicamentos que inibem a replicação viral e a
manutenção viral dentro da célula hospedeira, e medicamentos que reduzem a disseminação do
vírus. A resposta imune hiperativa do hospedeiro é comumente observada em pacientes gravemente
doentes com COVID-19, e, portanto, o uso oportuno de terapias anti-inflamatórias pode ser
benéfico. A terapia anti-inflamatória com medicamentos como glicocorticoides, inibidores de
citocinas, inibidores de JAK e hidroxicloroquina/hidroxicloroquina só deve ser realizada após uma
análise de risco/benefício em pacientes com COVID-19 (301).
Não houve estudos relacionados à aplicação de medicamentos anti-inflamatórios não esteroidais
(AINEs) em pacientes com COVID-19. No entanto, há evidências razoáveis que associam AINEs
com o SARS, além da adoção e fortalecimento de algumas medidas preventivas devido à natureza
desconhecida deste novo vírus (36, 189).
Atualmente, a principal abordagem de tratamento para pacientes gravemente afetados por SARS-
CoV-2, hospitalizados e que progrediram para insuficiência respiratória, com resistência ao
tratamento com oxigênio, é a ventilação mecânica, além de suporte circulatório adequado (299).
Várias categorias de medicamentos estão sendo avaliadas quanto ao seu potencial efeito terapêutico
contra o SARS-CoV-2, mas mais ensaios clínicos são necessários para avaliar a segurança e eficácia
(7). Pode levar meses a anos para projetar, desenvolver e aprovar medicamentos eficazes,
tratamentos e vacinas contra a COVID-19 em escala comercial para atender à demanda global (9).
Portanto, esforços contínuos são justificados para identificar e avaliar medicamentos viáveis e
sistemas de tratamento que demonstraram eficácia comprovada no combate a outros agentes virais
semelhantes ao SARS-CoV-2.
Tratamento e Medicamentos
A identificação das regiões imunogênicas entre as subunidades e os domínios da proteína S é de
extrema importância para o desenvolvimento eficaz de uma vacina contra o coronavírus. A região
periférica C da subunidade 1S é a região imunogênica da proteína do deltacoronavírus suíno (171).
Da mesma forma, há necessidade de investigações adicionais para identificar as regiões
imunogênicas do SARS-CoV-2, a fim de facilitar o desenvolvimento da vacina. No entanto, nossos
esforços anteriores para desenvolver uma vacina global eficaz contra o SARS-CoV e o MERS-CoV,
com base na semelhança das células T, indicam a possibilidade de interações cruzadas entre
coronavírus (172). Isso pode ser alcançado por meio de metas de vacina potencialmente comuns
entre o SARS-CoV (173, 174). Portanto, é crucial entender a relação íntima entre esses vírus.
Foram relatadas ligações entre o SARS-CoV-2 e a proteína ACE2 humana (hACE2) e o
entendimento da patogênese e dos regimes farmacológicos para enfrentar vírus emergentes (163-
161, 280). Várias tentativas estão sendo feitas para projetar e desenvolver vacinas contra a infecção
por coronavírus, principalmente visando à proteína espícula. No entanto, devido à ampla
variabilidade antigênica, a proteção conferida pelas vacinas é amplamente limitada, mesmo dentro
de subtipos de cepas geneticamente relacionadas (104).
Devido à falta de tratamento antiviral eficaz e vacinas no cenário atual, precisamos confiar apenas
na implementação de medidas eficazes de controle de infecções para reduzir os riscos de
disseminação em hospitais (68). Recentemente, o futuro do SARS-CoV-2 foi identificado como a
enzima humana conversora de angiotensina 2 (hACE2), e o vírus entra principalmente na célula
hospedeira por meio de endocitose (293). Além disso, descobriu-se que os principais componentes
desempenham um papel crucial na entrada do vírus, incluindo PIKfyve, 2TPC e L cathepsin. Esses
resultados são cruciais, pois esses componentes podem funcionar como alvos para vacinas ou
terapias contra o SARS-CoV-2 (293).
A maioria das opções de tratamento e estratégias avaliadas para o SARS-CoV-2/COVID-19 é
baseada em nossas experiências anteriores no tratamento do SARS-CoV e do MERS-CoV e outras
doenças virais emergentes. Várias terapias requerem ajustes nas taxas de infecção e eventos de
transmissão em massa e pontos críticos de propagação do SARS-CoV-2/COVID-19 (104). Devido à
falta de vacinas e terapias eficazes e comerciais para o SARS-CoV anterior e o coronavírus
causador da Síndrome Respiratória do Oriente Médio (MERS-CoV), esses vírus receberam menos
atenção das empresas de biotecnologia e farmacêuticas, pois não causaram tanto caos. A ameaça
global e o pânico, como o causado pela pandemia de SARS-CoV-2 (19).
Além disso, em casos de surtos como este, a necessidade de vacinas e tratamentos/medicamentos é
válida apenas por um tempo limitado, até que o surto seja controlado. A proporção da população
afetada pelo SARS e pelo MERS foi muito menor em todo o mundo, o que não atraiu fabricantes e
produtores de medicamentos e vacinas. Portanto, quando um medicamento ou vacina eficaz é
projetado contra surtos de doenças como essa, o controle rápido e a detecção desse vírus são
essenciais (354).
O LAMP-RT funciona como um método de diagnóstico simples, rápido e altamente sensível que
não requer equipamentos avançados ou pessoal especializado (349). Foi desenvolvida uma
plataforma interativa baseada na web para rastrear o SARS-CoV-2 em tempo real (238). O teste de
ponto de atendimento (POCT) integrado ao smartphone, que é uma ferramenta de teste em papel
baseada em POCT, juntamente com o LAMP, é uma ferramenta de diagnóstico útil para detecção
muito rápida do SARS-CoV-2 em apenas 5 minutos (344).
O diagnóstico baseado no CRISPR do SHERLOCK para rápida detecção do SARS-CoV-2 também
foi desenvolvido sem a necessidade de equipamento especializado, o que é altamente útil para o
diagnóstico clínico da COVID-19 (360). Além disso, um teste de fluxo lateral baseado em CRISPR-
Cas12 foi desenvolvido para rápida detecção do SARS-CoV-2 (346). A inteligência artificial
também foi desenvolvida, usando um modelo de aprendizado profundo tridimensional, para
diagnóstico sensível e específico de COVID-19 por imagem de tomografia computadorizada (332).
Rastrear e mapear as taxas crescentes de infecção e a disseminação da comunidade, juntamente com
vacinas e tratamentos, levou ao desenvolvimento de várias estratégias terapêuticas e preventivas,
incluindo vacinas avançadas, medidas de proteção e tratamentos. (8, 104, 164, 167). Essas opções
valiosas já foram avaliadas quanto à eficácia e segurança, juntamente com várias outras pesquisas
em andamento que informarão nossa busca por terapias ideais contra a COVID-19 (7, 9, 19, 21, 36).
O principal motivo para a falta de vacinas e medicamentos terapêuticos aprovados e comerciais para
enfrentar os surtos anteriores de coronavírus, como o SARS-CoV e o MERS-CoV, foi a falta de
interesse por parte das empresas de biotecnologia e farmacêuticas, uma vez que esses vírus não
causaram tanto caos. A ameaça global e o pânico, como o causado pela pandemia de SARS-CoV-2
(19).
No entanto, em casos de surtos como este, a necessidade de vacinas e tratamentos,em relação às
medições, a técnica de ensaio imunoenzimático (ELISA) pode ser usada para detectar anticorpos
IgM-19 e IgG contra a COVID-19 como uma alternativa de alta produtividade (149). Atualmente,
não existe um conjunto de diagnóstico disponível para detectar anticorpos contra o SARS-CoV-2
(150). Foram analisados perfis de anticorpos específicos em pacientes com COVID-19 e descobriu-
se que os níveis de IgM persistem por mais de um mês, indicando uma fase prolongada de
replicação do vírus em pacientes com SARS-CoV-2. Níveis elevados de IgG foram encontrados
apenas em estágios avançados da doença. Esses resultados sugerem que os anticorpos específicos
para o SARS-CoV-2 e a COVID-19 são semelhantes (325). Esses resultados podem ser usados para
desenvolver testes de diagnóstico específicos para a COVID-19, que podem ser usados para triagem
rápida. Apesar da disponibilidade de conjuntos de testes diagnósticos que podem detectar a
sequência genética do SARS-CoV-2 (95), sua disponibilidade é motivo de preocupação, à medida
que o número de casos de COVID-19 continua a aumentar (155, 157). O principal problema
associado a esses conjuntos de diagnóstico é a proteção significativa em ratos contra o desafio letal
do coronavírus do Oriente Médio. Esses anticorpos podem desempenhar um papel crucial no
reforço das respostas celulares protetoras contra variantes emergentes da COVID-19, direcionando
as epítopes e funções apropriadas da proteína S. A capacidade neutralizante cruzada do SARS-CoV-
2 RBD por MAbs depende fortemente da semelhança entre seus próprios RBDs; portanto, os
anticorpos específicos para o SARS-CoV-2 RBD podem cruzar com os SARS-CoV-2, por exemplo,
a cepa SL-bat-CoV-1WIV (que tem oito diferenças de aminoácidos do SARS-CoV-2) mas não com
a cepa SL-bat-CoV-014SHC (que tem 24 diferenças de aminoácidos) (200). MAbs adequados para
o RBD podem ser explorados para sua eficácia contra a COVID-19 e precisam de avaliação clínica
adicional. A empresa americana Regeneron busca identificar MAbs fortes e específicos para
combater a COVID-19, sendo a opção terapêutica ideal sugerida para a SARS-CoV-2 é o composto
terapêutico composto por MAbs e o medicamento remdesivir (201). Um MAb humano, 3022CR,
foi encontrado para se ligar ao SARS-CoV-2 RBD, indicando seu potencial como agente terapêutico
de amplo alcance. Programas de triagem em larga escala podem nos ajudar a controlar a propagação
deste vírus. Devido ao atual alcance da infecção, isso representa um desafio e levará muito tempo
(226). O cenário atual requer a implementação de estratégias robustas de prevenção e controle, dada
a possibilidade de infecções hospitalares (68). É recomendável acompanhar os pacientes por
telefone no sétimo e décimo quarto dias para evitar qualquer disseminação não intencional ou
transmissão nos hospitais (312). Os dados públicos fornecidos por equipes de análise independentes
servirão como um guia sólido para orientar nosso design de intervenções contra a propagação da
COVID-19. Relatórios da imprensa e mídias sociais podem ser usados para analisar e reconstruir a
evolução da disseminação da doença. Eles podem nos ajudar a obter dados detalhados ao nível do
paciente nas fases iniciais da disseminação da doença (227). As restrições de viagem imediatas
impostas por muitos países provavelmente contribuíram significativamente para conter a
disseminação do SARS-CoV-2 em todo o mundo (89, 228). Após a disseminação da doença, foi
temporariamente proibido o comércio de vida selvagem, levando em consideração o papel potencial
das espécies de vida selvagem na origem do vírus SARS-CoV-2/COVID-19 (147). É essencial
tomar decisões permanentes e corajosas sobre o comércio de espécies de vida selvagem para evitar
o envolvimento neste surto de COVID-19, pois sua importância é significativa, uma vez que a
pressão sobre sua saúde mental afetará sua atenção, foco e capacidade de tomada de decisão.
Portanto, para controlar a propagação da COVID-19, medidas rápidas devem ser tomadas para
proteger a saúde mental dos profissionais de saúde (229). Dado o suspeita de que mamíferos vivos
vendidos nos mercados úmidos são o hospedeiro intermediário do SARS-CoV-2, é necessária uma
regulamentação mais rigorosa do comércio de animais selvagens (13). O número total de casos
confirmados de COVID-19 continua a aumentar, e a taxa de recuperação é relativamente baixa,
tornando o controle da doença difícil de alcançar. O governo chinês está fazendo esforços contínuos
para conter a doença por meio de medidas de controle e prevenção em situações de emergência.
Eles já construíram um hospital para pacientes com este vírus e estão atualmente construindo vários
outros para acomodar o aumento contínuo do número de casos (230). O combate eficaz à SARS-
CoV-2/COVID-19 exige intervenções de alto nível, como rastreamento intensivo de contatos, além
de quarentena para pessoas suspeitas de infecção e isolamento de indivíduos infectados. A
implementação rigorosa de medidas de controle e prevenção em conjunto pode controlar o número
Ro e reduzir os riscos de transmissão (228). A investigação de doenças de origem animal (usando
modelos animais apropriados) é importante para avaliar futuros riscos de pandemia. Atualmente,
não existem medicamentos ou vacinas licenciados contra o SARS-CoV-2, a COVID-19,.
Virologia
Os coronavírus são uma família de vírus que pertencem à ordem dos nidovírus, que é subdividida
em quatro gêneros principais: alfa, beta, gama e delta-coronavírus (α, β, γ e δ). Entre esses gêneros,
os tipos alfa e beta são capazes de infectar mamíferos, enquanto os outros dois tipos podem afetar
aves e também mamíferos. Os vírus da COVID-19, conhecidos como SARS-CoV-2, são
classificados como vírus beta-coronavírus. Este vírus é responsável pela síndrome respiratória
aguda grave, conhecida como COVID-19, que recebeu o nome do novo coronavírus em 2019.
A pesquisa genômica e evolutiva revelou que o vírus da COVID-19 é um vírus beta-coronavírus
que compartilha semelhanças genéticas com outros coronavírus, incluindo o SARS-CoV (Síndrome
Respiratória Aguda Grave) e o MERS-CoV (Coronavírus do Oriente Médio). O SARS-CoV-2 é a
causa da doença conhecida como COVID-19, que é uma abreviação para "Coronavírus Disease
2019". Estudos genéticos mostraram que o SARS-CoV-2 é uma subespécie do vírus SARS, mas
com algumas variações.
A região do genoma associada às proteínas de espícula (S) é reconhecida principalmente por
anticorpos neutralizantes. A proteína S em forma de espícula passou por rearranjo estrutural,
tornando mais fácil a fusão da membrana externa do vírus com a membrana da célula hospedeira.
Pesquisas recentes também revelaram que a enzima exopeptidase da membrana, conhecida como
enzima conversora de angiotensina (ECA2), atua como um receptor para o SARS-CoV-2 para a
entrada nas células humanas.
 Figura 1
Observações em Organismos Vivos e no Laboratório
Por meio de experimentos em organismos vivos e no laboratório, foi observada a presença de um
aumento no muco nasal com edema local devido ao dano à célula hospedeira, estimulando também
a produção de mediadores inflamatórios. Além disso, essas reações podem levar a espirros e
dificuldade respiratória, causando obstrução das vias aéreas e elevação da temperatura da mucosa.
Esses vírus, quando desencadeados, afetam principalmente o sistema respiratório inferior,
manifestando-se com sinais e sintomas clínicos. Além disso, o vírus também afeta as células
linfoides intestinais, células renais, células hepáticas e células T auxiliares. Além disso, o vírus
induz a morte programada das células T, levando a uma desregulação na resposta das células T e ao
colapso completo do sistema imunológico.
Métodos de Transmissão
De fato, foi reconhecido que a origem da transmissão surgiu a partir de um mercado de frutos do
mar, que tinha o costume de vender animais vivos, onde a maioria dos pacientes havia trabalhado
ou visitado. No entanto, o entendimento das potenciais vias de transmissão da COVID-19 ainda não
está completo. Além disso, mesmo que os novos pacientes não tenham sido expostos ao mercado e
ainda estejam infectados pelo vírus humano presente lá, há um aumento na disseminação da doença.
Testes Laboratoriais para COVID-19 em Casos Suspeitos em Seres Humanos
A avaliação de pacientes com COVID-19 deve depender das características clínicas, bem como dos
fatores epidemiológicos. Devem ser estabelecidos protocolos de triagem e seguidos de acordo com
o contexto original. É essencial coletar amostras e testá-las de indivíduos suspeitos. A análise das
amostras pode ser realizada por meio de testes de amplificação de ácido nucleico, como a reação em
cadeia da polimerase com transcrição reversa em tempo real (RT-PCR). Se uma região ou país não
possuir instalações para testagem de amostras, amostras de indivíduos suspeitos devem ser enviadas
para laboratórios de referência de acordo com a lista fornecida pela Organização Mundial da Saúde
(OMS).
Identificação de Agentes Causadores de Doenças
Também é recomendado examinar pacientes suspeitos de outras infecções respiratórias por meio de
testes laboratoriais, de acordo com as diretrizes locais, a fim de diferenciar principalmente de outros
vírus que incluem o vírus influenza, o vírus respiratório sincicial, vírus parainfluenza, coronavírus
humanos sazonais e adenovírus. O período médio entre o aparecimento de sintomas típicos e a
infecção é de 12,5 dias.
Diagnóstico Clínico
Os sintomas da COVID-19 permanecem muito semelhantes aos de outras doenças respiratórias
passadas, incluindo a SARS e a Síndrome Respiratória do Oriente Médio (MERS), mas há uma
série de sintomas que vão desde uma leve inflamação nasal até choque séptico. Alguns distúrbios
intestinais foram relatados com outras epidemias, mas a COVID-19 foi isenta desses sintomas.
Durante o exame clínico, observou-se uma participação unilateral ou bilateral compatível com
pneumonia viral nos pacientes, e áreas de consolidação multifocal e semelhante a vidro fosco em
pacientes hospitalizados na unidade de terapia intensiva. Os pacientes com comorbidades
apresentaram manifestações clínicas mais graves do que o esperado com epidemias anteriores. O
diagnóstico da COVID-19 inclui histórico completo de viagem e contato, juntamente com testes
laboratoriais. É preferível selecionar o teste sorológico, que pode ajudar a identificar infecções
assintomáticas; muitos testes sorológicos estão em andamento para a SARS-CoV-2.
Transmissão
Houve um aumento na disseminação desse vírus de pessoa para pessoa, com a realidade de que ele
se tornou globalmente disseminado. Isso confirma uma semelhança com epidemias anteriores,
incluindo a SARS e a MERS, de que esse vírus coronavírus tem a capacidade de transmitir a
infecção de pessoa para pessoa, levando a Organização Mundial da Saúde (OMS) a declarar
recentemente uma pandemia. Gotículas respiratórias são consideradas o principal meio de
transmissão do coronavírus. Essas gotículas podem permanecer no nariz, boca ou entrar nos
pulmões através da inalação. Atualmente, é conhecido que a transmissão da COVID-19 de pessoa
para pessoa também ocorre por meio do contato com superfícies contaminadas ou mesmo de
maneira fecal-oral. Com a conscientização atual sobre os modos de transmissão, medidas rigorosas
de precaução estão sendo recomendadas em muitos países. As taxas de transmissão, ou taxas de
infecção de pessoa para pessoa, variam de acordo com a localização e a interação com a exposição à
infecção. É importante notar que mesmo indivíduos assintomáticos ou aqueles na fase de incubação
podem atuar como transmissores do SARS-CoV-2. Com base em dados e evidências fornecidos
pelo Centro de Controle de Doenças, o período de incubação comum é de 3 a 7 dias, às vezes
estendendo-se por até duas semanas, com o surgimento dos sintomas típicos.
Reprodução Viral"
Lembre-se de que as traduções podem variar dependendo do contexto específico e das preferências
de tradução.
Reprodução Viral
O coronavírus normalmente se replica dentro do citoplasma e está intimamente ligado às
membranas celulares. A replicação viral coronavírus é acreditada em grande parte para ocorrer
dentro do citoplasma e está ligada a outras organelas celulares. Acredita-se que os coronavírus
humanos invadam as células, principalmente através de diferentes receptores. Para 229E e 43OC, é
conhecido que as proteínas N-AP (N-peptidase) e ácido siálico contendo receptores,
respectivamente, desempenham esse papel. Após a entrada do vírus na célula hospedeira e a
ocorrência do processo de remoção da cápsula, o genoma é copiado e então traduzido. A
característica distintiva da transcrição é que todos os RNAs mensageiros formam uma coleção
fechada de extremidades modelares 3; apenas partes das extremidades cinco são traduzidas. No
total, cerca de 7 RNAs mensageiros são produzidos. Os RNAs mensageiros podem ser truncados e
outros expressam a síntese de outra parte do genoma para a proteína nuclear. Na membrana celular,
essas proteínas são montadas, e o ácido ribonucleico ribossômico começa a funcionar como uma
partícula madura por meio do crescimento das membranas celulares internas.
1.º Patologia
Os coronavírus são vírus muito pequenos e se replicam predominantemente nas células epiteliais do
trato respiratório, como observado tanto in vivo quanto em laboratório."
Lembre-se de que as traduções podem variar dependendo do contexto específico e das preferências
de tradução.