Short-Term Screening of Multiple Phytogenic Compounds For Their Potencial To Modulate... en - PT

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J. Laticínios Sci. 104:4271–4289 https://

doi.org/10.3168/jds.2020-19521
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Triagem de curto prazo de múltiplos compostos fitogênicos quanto ao seu

potencial para modular o comportamento de mastigação, o perfil de
fermentação ruminal e o pH em bovinos alimentados com dietas ricas em grãos
Ezequias Castillo-López,1,2 Raul Rivera-Chacón,1,2 Sara Ricci,1,2 Renée M. Petri,1,2* N. Reisinger,3

e Q. Zebeli1,2†
1Instituto de Nutrição Animal e Compostos Funcionais de Plantas, Departamento de Animais de Fazenda e Saúde Pública Veterinária,
Universidade de Medicina Veterinária de Viena, Veterinärplatz 1, 1210 Viena, Áustria
2Laboratório Christian Doppler para Conceitos Inovadores de Saúde Intestinal da Pecuária, Veterinärplatz 1, 1210 Viena, Áustria
3Centro de Pesquisa BIOMIN, BIOMIN Holding GmbH, 3430 Tulln, Áustria
ABSTRATO 4 h de consumo de ração ad libitum sem fitogênico. Os dados

mostraram que a suplementação de raiz de angélica tendeu a
Em bovinos, o funcionamento adequado do rúmen e a digestão aumentar linearmente o tempo de ruminação imediatamente
estão intimamente ligados ao comportamento de mastigação. No após a primeira refeição quando a alimentação foi restrita
entanto, a alimentação rica em grãos prejudica a atividade (27,3, 41,9 e 42,6 ± 5,99 min para os grupos controle, baixo e
mastigatória, aumentando o risco de acidose ruminal subaguda e alto, respectivamente). A capsaicina aumentou o tempo de
disfermentação. Este estudo teve como objetivo avaliar 9 alimentação (43,6, 49,4 e 66,4 ± 4,93 min) durante o consumo,
diferentes compostos fitogênicos quanto ao seu potencial para mas não afetou os AGCC totais ruminais ou o pH ruminal
modular a atividade mastigatória, o tamanho da refeição, os ácidos médio. O óleo de alho reduziu a concentração de AGCC
graxos de cadeia curta rumino-reticulares (AGCC) e o pH durante o reticulares totais (75,7, 71,3 e 60,1 mM) e tenderam a diminuir
consumo na primeira refeição diária e logo depois em bovinos a relação acetato/propionato ruminal (2,50, 1,78 e 1,87 ± 0,177)
alimentados com grãos. dieta rica. Os tratamentos foram controle sem efeito no pH ruminal. O L-mentol afetou os AGCC
(ração total misturada sem fitogênico) ou adição de composto reticulares totais quadraticamente (76,1, 64,9 e 81,0 ± 4,22%), e
fitogênico em dose baixa ou alta. Os compostos fitogênicos e as o pH ruminal respondeu quadraticamente quando a ração foi
doses (todos em mg/kg) foram raiz de angélica (6,6 e 66), reintroduzida ad libitum (6,0, 6,3 e 6,1 ± 0,07). O óleo de menta
capsaicina (10 e 100), raiz de genciana (6,6 e 66), óleo de alho (0,3 e não afetou a mastigação ou AGCC totais durante o consumo,
3), extrato de gengibre (40 e 400) , L-mentol (6,7 e mas a dose baixa aumentou o pH ruminal (6,5, 6,7 e 6,5 ± 0,08).
67), óleo de menta (15,3 e 153), óleo de tomilho (9,4 e 94) e O óleo de tomilho tendeu a diminuir a gravidade da acidose
timol (5 e 50), para os grupos baixo e alto, respectivamente. ruminal. No geral, os compostos fitogênicos demonstraram
Antes do início do experimento de triagem, as vacas foram efeitos distintos dependentes da dose para influenciar
alimentadas até atingirem condições de acidose ruminal beneficamente o comportamento de mastigação, modular a
subaguda, confirmada com o tempo de pH ruminal <5,8 sendo fermentação e mitigar a acidose ruminal em vacas leiteiras sob
655 ± 148,2 min/d. Durante o experimento de triagem, os uma dieta desafiadora com alto teor de grãos. Palavras-chave:
tratamentos foram oferecidos em refeição controlada (2,5 kg composto fitogênico, atividade mastigatória, acidose ruminal,
de MS por 4 h) como parte da dieta diária com 65% de gado leiteiro
concentrado. Cada tratamento foi testado em 4 das 9 vacas
holandesas canuladas usando um desenho de quadrado latino
INTRODUÇÃO
incompleto. Os fluidos ruminal e reticular foram amostrados
antes e depois de cada tratamento, e os dados coletados antes O uso de dietas ricas em grãos em sistemas intensivos de
da refeição foram utilizados como covariáveis. A mastigação e produção leiteira contribuiu para aumentar a ingestão de
o pH ruminal foram monitorados durante o tratamento, energia e o nível de produção de leite do gado leiteiro. No
seguido de 2 h de restrição alimentar completa e, em seguida, entanto, uma das limitações desta abordagem é a elevada
incidência relatada de acidose ruminal (Glock e DeGroot,
Recebido em 25 de agosto de 2020.
1998; Krause e Oetzel, 2006; Aschenbach et al., 2011), que
Aceito em 5 de dezembro de 2020. tem sido considerada como um dos distúrbios digestivos
* Endereço atual: Agriculture and Agri-Food Canada, Sherbrooke mais comuns. em bovinos sob sistemas de alimentação
Research and Development Centre, 2000 College Street, Sherbrooke,
QC, Canadá J1M 0C8 intensivos (Krause e Oetzel, 2006; Nagaraja e Titgemeyer,
†Autor correspondente:Qendrim.zebeli@vetmeduni.ac.at 2007). Apesar das pesquisas realizadas
4271
Castillo-Lopez et al.: SUBSTÂNCIAS FITOGÊNICAS E FERMENTAÇÃO RUMINAL 4272
descrevendo ou tentando mitigar esta condição (Wahrmund et al., mas também após a alimentação, sugerindo um efeito duradouro
2012; Meyer et al., 2009; Humer et al., 2018), até o momento, ainda dos fitogênicos no comportamento alimentar. No entanto, a
é um grande problema de saúde (Dohme et al., 2008; Holtshausen maioria dos resultados que avaliam os seus efeitos, quer como
et al., 2008; Holtshausen et al., 2008; Holtshausen et al., 2008; al., mistura ou individualmente, na actividade de mastigação ou na
2013) causando, entre outras complicações de saúde, laminite fermentação ruminal têm sido limitados ou inconclusivos. Por
(Stock et al., 1990), erosão do epitélio ruminal (Penner et al., 2010) exemplo, Munasik et al. (2019) relataram uma redução do tempo
e diminuição na utilização de SCFA (Harmon et al., 1985; Wilson e de ruminação em cabras adultas quando suplementadas com alho
outros, 2012). em pó, mas Patra e Yu (2012) não encontraram efeito do óleo de
A acidose ruminal é geralmente caracterizada como subaguda (SARA) e aguda (Krause alho nos SCFA ruminais in vitro. Além disso, Patra et al. (2019a)
e Oetzel, 2006; Nagaraja e Titgemeyer, 2007), sendo que a SARA pode ser leve, moderada relataram que compostos lipídicos bioativos vegetais ricos em
e grave (Penner et al., 2007), dependendo da magnitude e duração da queda do pH e dos mentol aumentaram o tempo de alimentação e as visitas aos
descarrilamentos metabólicos que a acompanham. A acidose ruminal surge quando os comedouros em ovelhas, mas sem efeitos na concentração ruminal
mecanismos envolvidos na regulação do pH são perturbados. O principal mecanismo total de SCFA (Patra et al., 2019b). Consequentemente, há
regulatório que é interrompido quando o gado é alimentado com dietas ricas em grãos é necessidade de avaliar e compreender melhor os efeitos de uma
a atividade mastigatória devido ao baixo teor de fibra fisicamente eficaz. Por exemplo, variedade e dosagens mais amplas de compostos fitogênicos com
Kröger et al. (2017) relataram uma diminuição dramática do tempo total de mastigação propriedades organolépticas específicas, como amargor, acidez,
de aproximadamente 1.000 para 500 min/d ao aumentar o nível de grãos diariamente de sabor mentolado ou pungência na atividade mastigatória de vacas
0 a 65%. Entretanto a mastigação é um processo fisiológico essencial para bovinos leiteiras. Além disso, precisamos avaliar se mudanças na atividade
porque estimula a produção de tampão salivar contribui para a trituração das partículas mastigatória podem modular os AGCC ruminais e o pH em bovinos
de ração, facilita o processo de deglutição e participa da recirculação e transporte de alimentados com dietas ricas em grãos.
nutrientes (Beauchemin, 2018). Conseqüentemente, a saliva promove a saúde ruminal e a Portanto, o objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos de
eficiência da degradação de nutrientes. Assim, uma melhoria na atividade mastigatória curto prazo de 9 compostos fitogênicos únicos no consumo de
beneficiaria não apenas a produção de saliva e a regulação do pH ruminal, mas também a ração, atividade mastigatória, perfil retículo-ruminal de AGCC e
circulação de nutrientes e o perfil de fermentação. Isto é especialmente importante na pH ruminal em vacas leiteiras alimentadas com dieta rica em
alimentação rica em grãos, onde a inclusão de níveis ideais de fibra fisicamente eficaz é grãos. Nossa primeira hipótese é que as propriedades olfativas,
bastante limitada (Jiang et al., 2017; Humer et al., 2018). uma melhoria na atividade gustativas ou pungentes dos compostos fitogênicos
mastigatória beneficiaria não apenas a produção de saliva e a regulação do pH ruminal, estimularão a atividade mastigatória e o pH ruminal quando
mas também a circulação de nutrientes e o perfil de fermentação. Isto é especialmente incluídos em uma ração rica em grãos. Também levantamos a
importante na alimentação rica em grãos, onde a inclusão de níveis ideais de fibra hipótese de que os efeitos de certos compostos fitogênicos na
fisicamente eficaz é bastante limitada (Jiang et al., 2017; Humer et al., 2018). uma ruminação e no pH ruminal durarão além da primeira refeição.
melhoria na atividade mastigatória beneficiaria não apenas a produção de saliva e a
regulação do pH ruminal, mas também a circulação de nutrientes e o perfil de
fermentação. Isto é especialmente importante na alimentação rica em grãos, onde a MATERIAIS E MÉTODOS
inclusão de níveis ideais de fibra fisicamente eficaz é bastante limitada (Jiang et al., 2017;
Humer et al., 2018). Os métodos e protocolos seguidos neste experimento

Esforços para melhorar a mastigação e a mastigação foram aprovados pelo Comitê Institucional de Ética e
também foram feitos em espécies não ruminantes, incluindo Bem-Estar Animal da Universidade de Medicina
humanos. Neste contexto, os derivados fitogénicos têm sido Veterinária de Viena e pela autoridade nacional austríaca
avaliados pelo seu potencial para estimular a atividade de acordo com a lei para experimentos com animais
mastigatória e a produção de saliva devido às suas (número do protocolo: BMBWF-68.205/0003-V/3b /2019).
propriedades olfativas e gustativas (Karami-Nogourani et al.,
2011; Pinto Antunes et al., 2015; Garcia et al., 2017). ; Kono et Animais, habitação e alimentação
al., 2018). Em um estudo recente em bovinos, Kröger et al.
(2017) observaram que a suplementação de dietas com um Nove vacas holandesas não lactantes canuladas no rúmen (Bar
aditivo alimentar fitogênico influenciou positivamente o tempo Diamond, Parma, ID) (887 ± 72,4 kg) foram alojadas em grupo na
de ruminação e aumentou o número de bolos alimentares fazenda leiteira de pesquisa da Universidade de Medicina
ingeridos e o número de mastigações por bolo, resultando em Veterinária de Viena (Pottenstein, Áustria). Antes do início do
melhora do pH ruminal. Além disso, pesquisas sugeriram a experimento, as vacas foram alimentadas com uma dieta
influência de compostos fitogênicos no microbioma ruminal composta apenas de feno e, em seguida, passaram gradualmente
(Neubauer et al., 2018b) e no perfil de SCFA (Rodriguez-Prado ao longo de 1 semana para um TMR, aumentando a proporção do
et al., 2008; Tager e Krause 2011; Neubauer et al., 2018b). concentrado em aproximadamente 10% diariamente para atingir
Curiosamente, Patra et al. (2019a) relataram que os efeitos dos 65% no dia 7 (Figura 1) . No último dia de adaptação dietética (d 7),
compostos fitogênicos nos padrões alimentares foram o TMR continha (base MS) 26,25% de silagem de capim, 8,75% de
observados não apenas durante o consumo, silagem de milho, 26%
Jornal de Ciência de Laticínios Vol. 104 Nº 4, 2021

Figura 1.Depressão do pH ruminal (média diária e tempo em que o pH ruminal <5,8) pelo incremento de concentrados em cerca de 10% ao dia como parte da
transição das vacas de uma dieta baseada em forragem para uma dieta baseada em grãos antes do ensaio de triagem (n = 9; LSM ± SEM).
grão de trigo laminado e 39% de concentrado lácteo TMR com compostos fitogênicos de diversas dosagens como
peletizado (Tabela Suplementar S1,http://dx.doi.org/ parte da refeição controlada com 2,5 kg de TMR (base MS) na
10.17632/f2g9dy2s2g.1). alimentação matinal. A dieta controle (VIGARISTA) foi
Durante o experimento, as vacas foram alojadas preparado combinando 50 g de um transportador consistindo
em um freestall barn, com áreas de postura de sílica de trigo com 2,5 kg de TMR (com base na MS). Cada
individuais em cubículos profundos (2,6 x 1,25 m), e composto fitogênico foi testado em dosagem baixa (BAIXO) ou
palha foi utilizada como cama. Pedras minerais para alta dosagem (ALTO) e foi primeiro misturado em 50 g do
lamber estavam disponíveis à vontade e água estava carreador, que foi então misturado com 2,5 kg de TMR
disponível para ingestão ad libitum. A ração foi preparado (base MS) para atingir as concentrações
misturada uma vez ao dia usando um sistema de correspondentes estabelecidas para cada tratamento. As dietas
alimentação automatizado (Trioliet Triomatic T15, foram oferecidas em comedouros individuais (Insentec BV,
Oldenzaal, Holanda) e oferecida em comedouros Marknesse, Holanda) durante uma refeição matinal controlada
individuais. O consumo individual de ração foi de 4 horas (Figura 2). Os comedouros foram programados
continuamente controlado e registrado, já que os automaticamente para que as restrições alimentares e o
beliches foram equipados com balanças eletrônicas e consumo de ração fossem controlados automaticamente. Em
portas de acesso reguladas por computador (Insentec seguida, as sobras foram pesadas e descartadas.
BV, Marknesse, Holanda). Devido ao baixo teor de Especificamente, os compostos fitogênicos (BAIXO e ALTO,
umidade nos ingredientes da ração utilizados, água respectivamente) foram raiz de angélica (6,6 e 66 mg/kg),
foi adicionada à dieta durante a mistura com uma capsaicina (10 e 100 mg/kg), raiz de genciana (6,6 e 66 mg/kg),
meta de aproximadamente 46% de teor de MS. óleo de alho (0,3 e 3 mg/kg), extrato de gengibre (40 e 400 mg/
kg), L-mentol (6,7 e 67 mg/kg), óleo de menta (15,3 e 153 mg/
kg), óleo de tomilho (9,4 e 94 mg/kg) e timol (5 e 50 mg/kg).
Tratamentos e Desenho Experimental do Raiz de Angelica (Angélica arcangélica) foi obtido por secagem
Modelo de Triagem e moagem das raízes, capsaicina (pimentosp.) foi adquirido da
Sigma-Aldrich (Munique, Alemanha), raiz de genciana (Gentiana
O experimento de triagem começou depois que as vacas luteaL.) foi obtido por secagem e moagem das raízes, óleo de
atingiram 65% de concentrado na dieta e atingiram alho (Allium sativumL.) originado da destilação do óleo
condições SARA. Os tratamentos consistiram em alimentar essencial de bulbos, extrato de gengibre (Zingiber
as vacas com TMR controle sem substâncias fitogênicas ou

Figura 2.Linha do tempo representando amostragens e medições realizadas para a avaliação de cada composto fitogênico no ensaio de triagem. Este
cronograma foi precedido por 9 horas de restrição alimentar completa durante a noite para garantir o consumo da primeira refeição matinal controlada com
ou sem composto fitogênico.
oficial) foi obtido de rizomas, L-mentol (Mentha de 75–88%, dependendo das variáveis-alvo pré-testadas) com α
arvensisL.) originado da purificação do óleo essencial = 0,05 capaz de rejeitar a hipótese nulaH0, se isso fosse
de ervas, óleo de menta (Mentha arvensisL.) foi verdade. A partir daí, estabelecemos o delineamento
obtido pela destilação do óleo essencial de ervas, óleo experimental com 4 vacas por tratamento, ou seja, cada
de tomilho (Timo vulgareTimo zigisL.) foi obtido por substância em cada dosagem foi testada em 4 das 9 vacas,
destilação de óleo essencial de ervas, e o timol foi utilizando um delineamento experimental de quadrado latino
sintetizado quimicamente. Com exceção da incompleto. A alocação de tratamentos às vacas foi feita
capsaicina, os compostos fitogênicos foram aleatoriamente e garantiu que a vaca alocada consumisse
processados e fornecidos pela BIOMIN Phytogenics ambas as dosagens do fitogênico correspondente, e a
GmbH (Stadtoldendorf, Alemanha). sequência de tratamento fosse balanceada para efeitos de
Como o objetivo era rastrear diferentes substâncias e doses transferência. Cada vaca serviu como seu próprio controle, que
quanto ao seu efeito durante a primeira refeição do dia e até 6 foi medido antes e depois do tratamento. Após cada avaliação
horas depois, escolhemos um modelo de triagem sequencial do tratamento, houve um período de washout de 1 dia, no qual
para permitir a avaliação de cada tratamento em um número foi fornecida a dieta controle.
suficiente de animais, seguido por um dia de eliminação com
dieta controle . Para estimar o número de vacas por Amostragem e análises de alimentos
tratamento, realizamos análise de poder a priori utilizando o
Proc Power do SAS (versão 9.4; SAS Institute, Cary, NC) de Amostras individuais da ração oferecida às vacas foram
acordo com Castelloe (2000), e utilizando as principais variáveis coletadas nos dias de amostragem, e amostras do TMR
de mastigação como variáveis de resposta. Para as análises, foram reunidas semanalmente e analisadas quanto à
assumimos que ocorrerá uma diferença com relevância composição química. Resumidamente, as cinzas foram
biológica entre o controle e os respectivos tratamentos se o analisadas por combustão numa mufla durante a noite a
tamanho do efeitoFseria em torno de 1,0 a 1,5 para uma 580°C. A proteína bruta foi analisada pelo método Kjeldahl
variação padrão esperadaéde cerca de 0,25 a 0,30. (VDLUFA, 2012) e os extratos etéreos pelo sistema de
Informações a priori sobre o tamanho do efeitoF e variaçãoéna extração soxhlet (Extraction System B-811, Büchi, Flawil,
atividade mastigatória, as variáveis foram retiradas de dados Suíça). Os teores de FDN e FDA foram determinados com
anteriores do nosso laboratório com condições experimentais sulfito de sódio e relatados exclusivamente para cinzas
semelhantes (Kröger et al., 2017). Assim, a análise de poder residuais seguindo os métodos analíticos oficiais de
indicou várias réplicas biológicas de pelo menos 4 para um VDLUFA (2012) usando o Fiber Therm FT 12 (Gerhardt
poder estatístico (probabilidade de erro Power 1-β) de cerca de GmbH & Co. KG, Königswinter, Alemanha) com α-estável ao
80 a 85% (variando calor. amilase para análise de NDF. Conteúdo de amido

foi medido com o kit K-TSTA (Megazyme Ltd.). Os dobra é alcançada e passada, a amostra foi aspirada da
carboidratos não fibrosos foram calculados como 100 - região ventral do retículo. Amostras de líquido ruminal
(% PB +% FDN +% extrato etéreo +% cinzas). também foram coletadas manualmente do saco ventral do
A distribuição do tamanho de partícula do TMR foi medida rúmen. As amostras foram então transferidas para frascos
usando o método descrito por Kononoff et al. (2003) com um de 15 mL (Sarstedt AG and Co., Nümbrecht, Alemanha) e
Separador de Partículas Penn State modificado equipado com 3 imediatamente congeladas a -20°C até posterior análise. Ao
telas (19,0, 8,0 e 1,18 mm) e um recipiente. Usando esses final do experimento, as medidas de AGCC foram realizadas
dados, NDF fisicamente eficaz (peNDF) e fator de eficácia física conforme Qumar et al. (2016) com pequenas modificações.
(pef) foram calculados conforme descrito por Beauchemin e Resumidamente, amostras de fluido ruminal e reticular
Yang (2005). Resumidamente, o teor de FDNpe da dieta foi foram descongeladas durante a noite a 4°C e centrifugadas
determinado multiplicando o teor de FDN da dieta pelo seu a 3.220 ×gdurante 20 min a 4°C, e o sobrenadante foi
pef. O pef (variando de 0 a 1) foi calculado como a soma da utilizado para análise posterior. Posteriormente, 200 μL de
proporção de partículas retidas nas peneiras correspondentes água destilada, o padrão interno ácido 4-metilvalérico
(peneiras de 19,0 e 8,0 mm para pef >8 mm; e peneiras de 19,0, (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) e 200 μL de ácido clorídrico
8,0 e 1,18 mm para pef >8 mm; e peneiras de 19,0, 8,0 e 1,18 1,8 mol foram adicionados a 600 μL de sobrenadante. As
mm para pef pef >1,18 mm). amostras foram agitadas em vórtex e depois centrifugadas
a 20.000 ×gpor 20 minutos a 4°C. O sobrenadante límpido
Visão geral do cronograma de amostragem foi transferido para frascos de vidro para o cromatógrafo
gasoso. A análise foi realizada utilizando um aparelho GC
A visão geral esquemática para amostragem e coleta de dados é ilustrada na Figura 2. As vacas foram submetidas a 9 horas de (Shimadzu GC Plus com detector FID) equipado com uma
restrição alimentar completa durante a noite para garantir o consumo da primeira refeição controlada da manhã. Antes desta coluna capilar de 30 m × 0, 53 mm id × 0, 53 μm (Trace TR
refeição, amostras de líquido ruminal e reticular foram coletadas manualmente para análises de AGCC para serem utilizadas como Wax, Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA). O injetor e o
covariáveis nas análises de variância dos dados de fermentação ruminal. Uma vez coletadas essas amostras, as vacas tiveram acesso detector tiveram temperaturas de 170 e 220°C,
à primeira refeição controlada que consiste na porção pré-pesada de TMR (2,5 kg, base MS), seja dieta CON ou tratamentos, e as vacas respectivamente. Hélio foi utilizado como gás de arraste
foram autorizadas a consumir este CON ou TMR de tratamento por até até 4 horas. Ao final desta primeira refeição controlada, foram com vazão de 6 mL/min. As análises de SCFA de ambos os
coletadas novamente amostras de líquido ruminal e reticular para análise de AGCC. Para avaliar a influência duradoura do composto locais do retículo-rúmen foram realizadas por duas razões
fitogênico consumido na atividade de ruminação e no pH ruminal, o acesso ao alimento foi completamente restrito por 2 h. Para principais. Primeiro, o pH através de sensores é comumente
avaliar a influência duradoura do tratamento quando a ração é reintroduzida, as vacas tiveram então acesso ad libitum ao TMR fresco medido no retículo, enquanto a fermentação ocorre
sem o composto fitogênico (dieta CON sem o transportador) por mais 4 horas. Assim, durante todo o período de amostragem, a comumente no rúmen ventral. Levando em consideração as
atividade mastigatória foi avaliada com base na refeição controlada com fitogênico (0-4 h), no período de restrição alimentar completa diferenças existentes no compartimento rumino-reticular
(4-6 h) e na reintrodução do acesso ad libitum da ração ao TMR sem fitogênico. composto (6–10 h). O pH ruminal também foi em relação à fermentação (Falk et al., 2016; Neubauer et al.,
monitorado seguindo o mesmo cronograma utilizado para a atividade mastigatória. Para avaliar a influência duradoura do tratamento 2018a), decidimos realizar as medições em ambos os
quando a ração é reintroduzida, as vacas tiveram então acesso ad libitum ao TMR fresco sem o composto fitogênico (dieta CON sem o compartimentos. A segunda razão foi a aplicação do
transportador) por mais 4 horas. Assim, durante todo o período de amostragem, a atividade mastigatória foi avaliada com base na experimento de alimentação de curto prazo, no qual
refeição controlada com fitogênico (0-4 h), no período de restrição alimentar completa (4-6 h) e na reintrodução do acesso ad libitum levantamos a hipótese de que os efeitos das substâncias
da ração ao TMR sem fitogênico. composto (6–10 h). O pH ruminal também foi monitorado seguindo o mesmo cronograma utilizado testadas poderiam ser mais fortes no retículo.
para a atividade mastigatória. Para avaliar a influência duradoura do tratamento quando a ração é reintroduzida, as vacas tiveram
então acesso ad libitum ao TMR fresco sem o composto fitogênico (dieta CON sem o transportador) por mais 4 horas. Assim, durante
todo o período de amostragem, a atividade mastigatória foi avaliada com base na refeição controlada com fitogênico (0-4 h), no
Avaliação da atividade de mastigação
período de restrição alimentar completa (4-6 h) e na reintrodução do acesso ad libitum da ração ao TMR sem fitogênico. composto (6–
10 h). O pH ruminal também foi monitorado seguindo o mesmo cronograma utilizado para a atividade mastigatória. o período de Os padrões de ruminação e alimentação foram monitorados usando
restrição alimentar completa (4–6 h) e a reintrodução do acesso alimentar ad libitum ao TMR sem composto fitogênico (6–10 h). O pH cabrestos com sensor de focinheira (RumiWatch System, ITIN
ruminal também foi monitorado seguindo o mesmo cronograma utilizado para a atividade mastigatória. o período de restrição + HOCH GmbH, Fütterungstechnik, Liestal, Suíça) de acordo
alimentar completa (4–6 h) e a reintrodução do acesso alimentar ad libitum ao TMR sem composto fitogênico (6–10 h). O pH ruminal com Kröger et al. (2016). Aproximadamente 12 horas antes do
também foi monitorado seguindo o mesmo cronograma utilizado para a atividade mastigatória. início da coleta de dados, foram colocados cabrestos nas vacas
para adaptação dos animais. Os dados brutos registrados
foram transferidos através do software de interface RumiWatch
Manager (versão 2.2.0.0; Itin and Hoch GmbH, Bennwil, Suíça) e
Coleta de Líquido Ruminal e processados utilizando o software de avaliação RumiWatch
Reticular e Análise Converter, versão 0.7.3.2. Os dados da atividade de mastigação
incluíram tempo de ruminação, tempo de alimentação, tempo
Aproximadamente 12 mL de líquido reticular foram coletados total de mastigação, ruminação expressa em mastigações/min
manualmente através da cânula ruminal com seringa descartável e alimentação expressa em mastigações/min, de acordo com
de 20 mL. Para tanto, uma vez que o rumino-reticular Kröger et al. (2016).

Medição do pH Ruminal com opções normais e de plotagem. O maior erro
padrão da média é relatado para fornecer informações
O pH ruminal foi medido com sistemas de habitação sem sobre o erro padrão máximo entre as estimativas de
fio (eCow Devon Ltd., Kirkcaldy, Reino Unido) de acordo tratamento. A significância estatística foi declarada
com Neubauer et al. (2018a) e seguindo as instruções do quandoP≤ 0,05 e a tendência foi discutida seP>0,05 e
fabricante. Resumidamente, os sistemas de pH foram ≤0,10. Além disso, a análise do poder estatístico com
ativados por inserção em água morna a 35°C por 15 min, dados de algumas das principais variáveis de resposta
calibrados, a comunicação adequada com o aparelho e a foi realizada de acordo com Stroup (1999) e Kononoff e
coleta de dados foram verificadas, em seguida os sensores Hanford (2006), que apresentou um poder estatístico
foram inseridos e colocados no saco ventral do rúmen. O médio de 0,82 com α = 0,05.
sistema de pH foi preso a um fio de náilon para facilitar a
recuperação. Os dados de pH ruminal foram coletados
RESULTADOS
continuamente a cada 15 min. Para facilitar o download dos
dados de pH, os sistemas eCow foram colocados em um Dado o grande número de compostos fitogênicos
recipiente com água a 35°C por 15 min. Os dados de pH selecionados no presente estudo, os dados foram
ruminal foram resumidos calculando-se o pH máximo, resumidos em um total de 19 tabelas e 3 figuras. Portanto,
médio e mínimo, a diferença entre o pH máximo e mínimo, selecionamos as tabelas e figuras que mostram os
o tempo e a área com pH <6,2, o tempo e a área com pH principais efeitos nas variáveis avaliadas para
<6,0. O índice de acidose foi calculado de duas formas, apresentação no corpo deste manuscrito. O restante dos
calculando o tempo que o pH ruminal <6,0 por unidade de dados é apresentado como material suplementar (http://
CMS e calculando a área que o pH ruminal <6,0 por unidade dx.doi.org/10.17632/f2g9dy2s2g.1).
de CMS, conforme Khiaosa-ard et al. (2018). Durante a
transição da dieta rica em grãos, monitoramos o pH
Estabelecimento de condições SARA antes da triagem de
ruminal ao longo de cada dia e pudemos determinar a
compostos fitogênicos
gravidade da SARA desenvolvida usando um limiar de pH
de 5,8 (Zebeli et al., 2008). No entanto, durante a Um modelo de transição alimentar gradual foi utilizado
alimentação rica em grãos, devido às avaliações de curto para estabelecer as condições SARA antes de iniciar a
prazo realizadas para avaliação fitogênica, o pH ruminal triagem dos compostos fitogênicos. Os dados mostraram
provavelmente não atingiu seu nadir diário quando as que a transição das vacas da dieta baseada em forragem
medições de pH terminaram. Assim, não utilizamos os para a dieta baseada em grãos diminuiu o pH ruminal
limites de pH e tempo normalmente aplicados (Zebeli et al., médio de 6,54 para 5,93 e prolongou o tempo de duração
2008; Penner et al., 2007; Castillo-Lopez et al., 2014) para do pH <5,8 de 0 para uma média de 655 min/d (Figura 1).
determinar se as vacas apresentavam forma subaguda ou Como resultado, as vacas experimentaram condições SARA
aguda de acidose ruminal. Em vez disso, usando os limites (pH <5,8 por pelo menos 320 min/d; Zebeli et al., 2008) no
de pH de 6,0 e 6. dia 5 da transição dietética quando o concentrado na ração
atingiu 50% e o teor de amido aproximadamente 27% na
ração. o Mestre. No último dia de adaptação dietética (ou
Análise estatística seja, um dia antes do início do experimento de triagem), o
tempo em que o pH ruminal <5,8 foi de 655 ± 148,2 min/d,
Os dados coletados foram analisados com o Proc Mixed do SAS de modo que o risco de SARA foi maior.
(versão 9.4; SAS Institute) com tratamento como efeito fixo,
enquanto a vaca dentro do quadrado e corrida foram consideradas Efeitos de curto prazo de compostos fitogênicos na ingestão de
como efeitos aleatórios; os efeitos lineares e quadráticos dos alimentos, atividade de mastigação e pH ruminal
tratamentos foram avaliados pelo contraste ortogonal do SAS. Os
dados sobre AGCC ruminal e reticular antes do consumo das Quando a raiz de angélica foi suplementada (Tabela 1),
refeições foram utilizados como medidas covariáveis na ANOVA. houve uma tendência (P=0,10) aumentou o CMS durante a
Todos os dados obtidos no mesmo animal, mas em tempos refeição controlada, e o tempo de ruminação tendeu a
diferentes, foram considerados como medidas repetidas aumentar após o consumo quando a alimentação foi restrita (P
relacionadas ao tempo na análise com uma matriz de estrutura de = 0,07). Além disso, o número de mastigações por minuto
variância-covariância de primeira ordem para levar em conta a durante a ruminação aumentou (P=0,05) após o consumo
covariância que decai com o tempo. Os graus de liberdade foram quando a ração foi reintroduzida ad libitum. No entanto, o
estimados pelo método Kenward-Roger. Os dados foram tempo de alimentação tendeu a diminuir (P=0,09) neste
verificados quanto à normalidade usando o Proc univariado período. O pH ruminal médio não foi afetado durante o
seguido pelo teste de Shapiro-Wilk consumo de raiz de angélica, mas o pH ruminal mínimo

Tabela 1.Efeitos de curto prazo da suplementação com raiz de angélica sobre o consumo de ração, atividade mastigatória e pH ruminal de vacas holandesas não
lactantes avaliadas durante uma refeição controlada e após o consumo
Nível de raiz de angélica2 P-valor4
Atividade1 VIGARISTA BAIXO ALTO SEM3 eu P

Refeição controlada (4 h)
IMS, kg 2.15 2.32 2,35 0,095 0,10 0,44
Tempo de ruminação, min 34,0 42,8 38,8 10.02 0,74 0,62
Hora de comer, min 36,9 31.1 35,2 3,73 0,65 0,16
Ruminação, mastigações/min 43,6 56,0 56,8 8,57 0,29 0,58
Comer, mastigar/min 56,6 55,6 53,5 4.05 0,43 0,87
Tempo total de mastigação, 71,0 73,9 74,0 10.1 0,83 0,91
min pH ruminal médio 6,55 6,37 6,47 0,119 0,63 0,36
pH ruminal mínimo 6,37 6.06 6.15 0,151 0,29 0,27
Restrição alimentar completa (2 h)
Tempo de ruminação, min 27.3 41,9 42,6 5,99 0,07 0h30
pH ruminal médio 6,61 6,66 6,72 0,071 0,31 0,99
pH ruminal mínimo 6.41 6.41 6,56 0,133 0,44 0,67
Acesso ad libitum à dieta CON (4 h)
IMS, kg 7.23 6,56 7.22 1.06 0,99 0,61
Tempo de ruminação, min 21.6 21.6 27.3 9h45 0,68 0,81
Hora de comer, min 79,0 67,8 65,6 4,77 0,09 0,47
Ruminação, mastigações/min 35,5 56,9 58,6 8.36 0,05 0,31
min pH ruminal médio 6.29 6.12 6.26 0,083 0,77 0,18
pH ruminal mínimo 5,83 5,34 5,61 0,159 0,36 0,09
1Acesso controlado a 2,5 kg de TMR de MS por 4 h, depois nenhum acesso à ração por 2 h, antes que as vacas recebessem acesso ad libitum por 4 h a TMR fresco sem
raiz de angélica.
2CON = dieta controle preparada pela combinação de 50 g do carreador de sílica de trigo e 2,5 kg (MS) de TMR; BAIXO = 6,6 mg/kg de raiz de angélica em 2,5
kg (MS) de TMR; ALTO = 66 mg/kg de raiz de angélica em 2,5 kg (MS) de TMR.
3 O maior erro padrão da média.
4 P-valores para efeitos lineares (L) e quadráticos (Q).
O pH tendeu a responder quadraticamente quando a de mastigações por minuto durante a ruminação tendeu
ração foi reintroduzida ad libitum. Além disso, o pH a aumentar linearmente (P=0,10) após o consumo
ruminal máximo aumentou (P<0,05) após o consumo quando a ração foi reintroduzida ad libitum. Em relação
(6,77, 6,83 e 6,91 ± 0,06), e a área que tendeu ao pH ao pH ruminal, a capsaicina tendeu (P=0,08) teve efeito
ruminal <6,0 (P=0,10) para responder quadraticamente quadrático no pH máximo (6,75, 6,66 e 6,81 ± 0,094)
(17,38, 35,06 e 14,92 ± 8,048 min × pH para CON, BAIXO durante a refeição controlada, e teve efeito quadrático (P
e ALTO, respectivamente) após o consumo quando a < 0,05) no pH mínimo após o consumo (6,47, 6,22 e 6,44
ração foi oferecida ad libitum. ± 0,116) quando a alimentação era restrita.
Quando a capsaicina foi suplementada (Tabela 2), houve A suplementação com óleo de alho não afetou o
uma resposta quadrática (P<0,05) de CMS (1,98, 2,49 e 1,66 ± consumo de ração (Tabela 3). No entanto, houve uma
0,059 kg para CON, BAIXO e ALTO, respectivamente) durante a tendência (P = 0,08) para redução do tempo de ruminação,
refeição controlada, e também houve resposta quadrática do e houve resposta quadrática (P=0,05) do tempo de
tempo de ruminação (P=0,05) durante esse período (6,3, 34,2 e alimentação (70,0, 53,2 e 75,7 ± 10,57 min para CON, LOW e
15,2 ± 8,57 min). Além disso, o número de mastigações HIGH, respectivamente), bem como uma resposta
ruminantes por minuto tendeu (P=0,07) para responder quadrática (P<0,05) do número de mastigações por minuto
quadraticamente (23,1, 56,2 e 26,0 mastigações/min). O tempo durante a alimentação (65,0, 56,4 e 59,5 ± 2,16) após o
de alimentação apresentou um aumento linear (P<0,05), e o consumo quando a ração foi reintroduzida ad libitum. Além
número de mastigações por minuto durante a alimentação disso, o óleo de alho teve um efeito quadrático (P=0,05) no
tendeu a aumentar (P=0,09) durante a refeição controlada. Por pH ruminal máximo (6,71, 6,60 e 6,77 ± 0,049) durante a
outro lado, houve tendência de resposta quadrática do número refeição controlada, tendeu a ter efeito quadrático (P=0,08)
de mastigações por minuto durante a ruminação após o no pH ruminal médio (6,51, 6,38 e 6,63 ± 0,074) durante
consumo de capsaicina (P=0,06) quando a alimentação foi este período, e também tendeu a ter um efeito quadrático
restrita (36,2, 55,5 e 42,5 ± 12,33 mastigações/min), e o número no pH ruminal médio (6,60, 6,48 e 6,84 ± 0,097) após o
consumo quando a alimentação foi restrita.

A suplementação de L-mentol também não afetou o efeito quadrático (P<0,05) no pH ruminal médio (6,52,
DMI (Tabela 4). No entanto, houve uma tendência linear 6,74 e 6,53 ± 0,082) e pH mínimo (6,33, 6,62,
(P= 0,09) passar mais tempo comendo durante a refeição 6,33 ± 0,105) durante a refeição controlada.
controlada, e esse composto teve efeito quadrático (P < A suplementação com timol (Tabela 6) aumentou o DMI (
0,05) no pH ruminal médio (6,09, 6,30 e 6,10 ± 0,074 para P < 0,05) durante a refeição controlada, e o número de
CON, BAIXO e ALTO, respectivamente) após o consumo mastigações por minuto durante a ruminação tendeu a
quando a ração foi reintroduzida ad libitum. Além disso, aumentar (P=0,09). No entanto, o número de mastigações
uma resposta quadrática foi encontrada (P<0,05) no por minuto durante a alimentação tendeu a diminuir.P=
tempo em que pH <6,2 (153,7, 71,2 e 150,0 ± 25,48 min) 0,08). Já este composto teve efeito quadrático no pH
e índice de acidose (21,40, 5,98 e 13,88 ± 3,371 min/kg ruminal médio durante a refeição controlada (6,57, 6,39 e
CMS). Além disso, havia uma tendência (P= 0,07) para 6,55 ± 0,087). Quando a ração foi reintroduzida ad libitum,
uma resposta quadrática do tempo que o pH ruminal após o consumo de timol, o pH ruminal médio (6,29, 5,82 e
<6,2 (114,3, 45,0 e 101,2 ± 23,31 min) e a área que o pH 6,31 ± 0,121) apresentou resposta quadrática. Além disso, o
<6,0 tendeu (P=0,07) para responder quadraticamente tempo em que o pH ruminal <6,2 (78,7, 176,2 e 78,7 ± 31,39
com estimativas de 65,3, 20,3 e 49,4 ± 14,31 min × pH min) e a área em que o pH ruminal <6,2 (28,12, 105,04 e
após o consumo quando a ração foi reintroduzida ad 30,37 pH × min) também foram afetados quadraticamente
libitum (Figura 3A). durante esse período (para Dose CON, BAIXA e ALTA,
Vacas alimentadas com óleo de menta (Tabela 5) cuidavam ( respectivamente).
P=0,06) ter menor IMS durante a refeição controlada, mas o Suplementando raiz de genciana (Tabela Suplementar S2,
número de mastigações ruminantes por minuto tendeu ahttp://dx.doi.org/10.17632/f2g9dy2s2g.1) mostrou um vinco (P=
0,10) após o consumo quando a ração foi reintroduzida ad libitum. Além disso,
tendência o óleo quadrático
de aumento de menta tinha um de ruminação (
do tempo
P=0,10; 12,3, 43,6 e 20,1 ± 12,09 min para CON,
Mesa 2.Efeitos de curto prazo da suplementação de capsaicina sobre o consumo de ração, atividade mastigatória e pH ruminal de vacas leiteiras holandesas não
lactantes avaliadas durante uma refeição controlada e após o consumo
Nível de capsaicina2 P-valor4

IMS, kg 1,98 2,49 1,66 0,059 0,33 0,04
Tempo de ruminação, min 6.3 34,2 15.2 8,57 0,47 0,05
Hora de comer, min 43,6 49,4 66,4 4,93 0,01 0,38
Ruminação, mastigações/min 23.1 56,2 26,0 12,66 0,87 0,07
Comer, mastigar/min 60,4 55,6 53,0 3,59 0,09 0,74
Tempo total de mastigação, 71,0 73,9 74,0 10h15 0,83 0,91
pH ruminal mínimo 6,33 6.26 6,36 0,188 0,91 0,73
Tempo de ruminação, min 21.6 24,0 39,8 12.03 0,22 0,59
Ruminação, mastigações/min 36,2 55,5 42,5 12h33 0,47 0,06
pH ruminal médio 6,63 6,54 6,65 0,109 0,85 0,31
IMS, kg 7,38 7,47 7,61 1.040 0,86 0,98
Tempo de ruminação, min 26,0 14.4 26,7 9,63 0,93 0,12
Hora de comer, min 87,3 83,8 101,8 8,61 0,23 0h30
min pH ruminal médio 6.22 6.04 5,91 0,126 0,13 0,85
capsaicina.
2CON = dieta controle preparada pela combinação de 50 g do carreador de sílica de trigo e 2,5 kg (MS) de TMR; BAIXO = 10 mg/kg de capsaicina em 2,5 kg
(MS) de TMR; ALTO = 100 mg/kg de capsaicina em 2,5 kg (MS) de TMR.

Tabela 3.Efeitos de curto prazo da suplementação com óleo de alho sobre o consumo de ração, atividade mastigatória e pH ruminal de vacas leiteiras holandesas não lactantes
avaliadas durante uma refeição controlada e após o consumo
Nível de óleo de alho2 P-valor4

IMS, kg 2.20 2.02 2,35 0,070 0,14 0,11
Tempo de ruminação, min 51.2 58,2 46,5 6,74 0,63 0,29
Hora de comer, min 38,8 35,8 34,5 4,77 0,34 0,81
Comer, mastigar/min 55,4 54,5 55,6 2h00 0,90 0,49
Tempo total de mastigação, 90,0 94,1 81,1 9,95 0,54 0,51
Tempo de ruminação, min 28,4 38,2 29,4 8.12 0,92 0h30
Ruminação, mastigações/min 55,6 57.1 55,8 2,91 0,96 0,68
pH ruminal médio 6,60 6,48 6,85 0,097 0,11 0,08
pH ruminal mínimo 6.41 6.31 6,75 0,117 0,08 0,10
Consumo de ração, kg CMS 6.41 5,34 7,87 0,805 0,24 0,11
Tempo de ruminação, min 41,9 35,2 24,4 11.29 0,08 0,78
Hora de comer, min 70,4 53,2 75,7 10.57 0,59 0,05
min pH ruminal médio 6.14 5,91 6.03 0,130 0,51 0,27
óleo de alho.
2CON = dieta controle preparada pela combinação de 50 g do carreador de sílica de trigo e 2,5 kg (MS) de TMR; BAIXO = 0,3 mg/kg de óleo de alho em 2,5 kg
(MS) de TMR; ALTO = 3 mg/kg de óleo de alho em 2,5 kg (MS) de TMR.

BAIXO e ALTO, respectivamente) e tempo total de mastigação (P= não afetou o CMS, mas tendeu a diminuir o número de
0,09; 52,4, 89,0 e 60,8 ± 13,91 min) durante a refeição controlada. O mastigações ruminantes por minuto (P=0,10) durante a
consumo de ração não mudou, mas o tempo de alimentação refeição controlada com estimativas de 51,0, 46,3 e 40,0 ±
diminuiu (P<0,05) após consumo de raiz de genciana quando a 12,97 mastigações/min, e não afetou o restante das
ração foi reintroduzida ad libitum. Além disso, o número de variáveis de mastigação medidas. O óleo de tomilho
mastigações por minuto durante a ruminação respondeu também tendeu a diminuir linearmente a área com pH <6,0
quadraticamente (P=0,05) após o consumo quando a ração foi (40,25, 39,90 e 9,63 ± 11,511 min × pH para CON, BAIXO e
reintroduzida ad libitum (33,8, 57,8 e 29,3 ± 12,46 mastigações/ ALTO, respectivamente) após o consumo quando a ração foi
min). Este composto, entretanto, não apresentou efeito sobre as reintroduzida ad libitum (Figura 3B).
variáveis de pH ruminal.
Quando o extrato de gengibre foi fornecido (Tabela Suplementar Efeitos dos Compostos Fitogênicos no Ruminal
S3,http://dx.doi.org/10.17632/f2g9dy2s2g.1), DMIe perfil reticular de ácidos graxos de cadeia curta
não diferiram, mas houve uma resposta quadrática do
tempo de alimentação (P<0,05; 35,9, 28,2 e 35,7 ± 6,10 min A capsaicina (Tabela 7) teve um efeito quadrático no
para CON, LOW e HIGH, respectivamente) e número de acetato reticular (P=0,05) concentração (60,8, 57,1 e
mastigações por minuto (P=0,05; 53,9, 57,2 e 54,9 ± 1,81 62,5 ± 2,19%) e no valerato reticular (P<0,05)
mastigações/min) durante a refeição controlada. O número concentração (1,98, 2,16 e 1,79 ± 0,245%) para dose
de mastigações por minuto tendeu (P=0,10) diminuiu CON, BAIXA e ALTA, respectivamente.
linearmente após o consumo quando a ração foi oferecida O óleo de alho (Tabela 8) diminuiu (P=0,05) a
ad libitum (66,0, 62,5 e 60,3 ± 2,14 mastigações/min). concentração de acetato ruminal (60,7, 53,0 e 55,3 ±
Entretanto, a suplementação com extrato de gengibre não 1,41%) e isobutirato ruminal (P<0,05), tendeu a
apresentou efeito sobre as variáveis de pH ruminal. reduzir o isovalerato ruminal (P=0,08), tendeu a
Suplementação com óleo de tomilho (Suplementar aumentar o valerato ruminal (P=0,08) e tendeu a
Tabela S4,http://dx.doi.org/10.17632/f2g9dy2s2g.1) diminuir a proporção de acetato para propionato (P=0,07). Em

Tabela 4.Efeitos de curto prazo da suplementação de L-mentol no consumo de ração, atividade mastigatória e pH ruminal de vacas leiteiras holandesas não lactantes
Nível de L-mentol2 P-valor4

IMS, kg 1,92 1,68 1,92 0,267 0,99 0,19
Tempo de ruminação, min 40,6 40,0 28,8 11h49 0,44 0h30
Hora de comer, min 39,8 39,4 47,2 9.05 0,09 0,56
Comer, mastigar/min 54.1 52.1 57.1 2,84 0,44 0,84
pH ruminal mínimo 6.31 6h45 6,37 0,094 0,64 0h30
Tempo de ruminação, min 21.2 17.1 33,6 13,87 0,37 0,44
pH ruminal médio 6,61 6,69 6,57 0,077 0,67 0,23
IMS, kg 6h40 6,62 6,94 1.231 0,43 0,94
Tempo de ruminação, min 35,3 50,8 40,1 18,77 0,79 0,49
Hora de comer, min 80,3 59,8 74,5 9,67 0,64 0,18
Tempo total de mastigação, 115,6 102.1 114,6 18h28 0,96 0,57
min pH ruminal médio 6.09 6h30 6.10 0,074 0,93 0,03
1Acesso controlado a 2,5 kg de TMR de MS por 4 h, depois nenhum acesso à ração por 2 h, antes que as vacas recebessem acesso ad libitum por 4 h a TMR fresco sem L-
mentol.
2CON = dieta controle preparada pela combinação de 50 g do transportador de sílica de trigo e 2,5 kg (MS) de TMR; BAIXO = 6,7 mg/kg de L-mentol em 2,5 kg
(MS) de TMR; ALTO = 67 mg/kg de L-mentol em 2,5 kg (MS) de TMR.

No retículo, o óleo de alho tendeu a diminuir a e 61,2 ± 0,75%), tenderam a afetar quadraticamente (
concentração de SCFA total (P=0,06), tendia a ter (P= P = 0,08) a proporção de propionato (22,8, 22,2 e 23,5
0,10) um efeito quadrático sobre o acetato (58,3, 54,8 ± 0,36%) e teve efeito quadrático (P<0,01) na relação
e 56,1 ± 1,17%), mas aumentou a concentração de acetato/propionato ruminal (2,82, 3,00 e 2,74 ± 0,064)
propionato (P<0,05), e diminuiu a concentração de para dose CON, BAIXA e ALTA, respectivamente.
isovalerato (P=0,05), e tendeu a diminuir (P= 0,09) a
proporção de acetato para propionato. Não houve efeito da raiz de angélica no SCFA ruminal ou
O L-mentol (Tabela 9) tendeu (P=0,10) para ter um efeito reticular (Tabela Suplementar S5,http://dx.doi. org/
quadrático sobre o acetato ruminal (60,2, 61,6 e 59,7 ± 10.17632/f2g9dy2s2g.1). Raiz de genciana cuidada (P = 0,09)
0,88% para dose CON, BAIXA e ALTA, respectivamente), para aumentar a concentração ruminal total de AGCC, com
tendeu a ser linear (P=0,08) aumentam a proporção de estimativas de 77,8, 82,3 e 92,0 ± 6,00 mM, mas não afetou
propionato e tiveram um efeito quadrático na proporção de SCFA individuais (Tabela Suplementar S6). Considerando
acetato para propionato (P<0,05) no rúmen (2,77, 2,89 e que o extrato de gengibre não afetou o perfil ruminal ou
2,60 ± 0,127). No retículo, o L-mentol teve efeito quadrático reticular de SCFA (Tabela Suplementar S7). Óleo de tomilho
(P<0,05) na concentração de SCFA total (76,1, 64,9 e 81,0 ± reduzido (P<0,05) concentração de acetato reticular com
4,22 mM), tendeu (P=0,08) para ter um efeito quadrático estimativas de 61,8, 59,6 e 59,0 ± 1,06 mMpara CON, LOW e
sobre o propionato (23,9, 23,5 e 25,0 ± 0,81%), a HIGH, respectivamente, mas não afetou os outros SCFA
porcentagem de isobutirato reticular também respondeu (P (Tabela Suplementar S8). No entanto, o timol não afetou o
< 0,05) quadraticamente (1,28, 1,60 e 1,16 ± 1,118%), mas perfil ruminal ou reticular de SCFA (Tabela Suplementar S9).
reduzido (P<0,05) a proporção de acetato para propionato. Em geral, os resultados indicam apenas pequenas
diferenças entre o retículo e o rúmen em termos de
O óleo de menta (Tabela 10) teve um efeito quadrático (P proporções de SCFA para alguns dos compostos.
< 0,05) na proporção de acetato ruminal (61,6, 63,4,

O pH <5,8 foi de 503 e 655 min/d nos últimos dias de

adaptação, sugerindo que as vacas tinham um alto risco de
apresentar SARA (Zebeli et al., 2008) nos últimos 2 dias antes
de iniciar o ensaio de triagem. Assim, este estudo foi projetado
para rastrear e avaliar os efeitos de curto prazo de diferentes
substâncias fitogênicas individuais na atividade mastigatória,
consumo de refeições, perfil ruminal e reticular de AGCC e
variáveis de pH ruminal quando vacas são alimentadas com
uma dieta rica em grãos. A TMR alimentada neste estudo de
triagem com 12,9% de peNDF >8 mm e 32,8% de amido pode
ser considerada uma dieta acidogênica (Zebeli et al., 2012).
Efeitos dos compostos fitogênicos no comportamento de

mastigação e no consumo de refeições
Nossa hipótese principal afirmava que os compostos fitogênicos

estimulariam a atividade mastigatória quando introduzidos como
primeira refeição em uma dieta controlada rica em grãos por 4
horas, embora sem afetar o consumo da refeição, especialmente
quando alimentados em altas doses. Além disso, o efeito
estimulador na atividade mastigatória pode durar até 6 horas
depois, quando a alimentação é restringida ou reintroduzida ad
libitum sem o composto fitogênico. Esta hipótese foi baseada em
descobertas anteriores de Kröger et al. (2017) mostrando o efeito
positivo da suplementação com aditivos alimentares fitogênicos no
tempo de ruminação e no tempo total de mastigação ao fornecer
uma dieta rica em amido para vacas (ou seja, 32,3%) por 1 semana.
De acordo com a nossa hipótese, os resultados mostraram que
alguns dos compostos analisados aumentaram o tempo de
alimentação, o tempo de ruminação ou a taxa de mastigação,
durante ou após o consumo. Por exemplo, quando a capsaicina foi
suplementada, encontramos um aumento linear significativo no
tempo de alimentação em 13 e 52%, para BAIXO e ALTO,
respectivamente. O teste de poder estatístico a posteriori para esta
variável resultou em 0,83, aproximadamente o que esperávamos
Figura 3.Variação do pH ruminal após suplementação com L-mentol da análise a priori, e foi um poder adequado para a correta rejeição
(A) durante refeição controlada, restrição alimentar e reintrodução de da hipótese nula. Apesar do incremento no tempo de alimentação
alimentação ad libitum; e variação do pH ruminal após suplementação
observado durante o consumo de capsaicina, nenhum efeito foi
com óleo de tomilho (B) durante a refeição controlada, restrição
alimentar e reintrodução da alimentação ad libitum. CON = dieta encontrado após a primeira refeição, sugerindo uma influência
controle sem composto fitogênico; BAIXA = dose baixa de fitogênico; transitória da capsaicina na estimulação da atividade mastigatória.
ALTO = alta dose de fitogênico.
Também foi demonstrado que a capsaicina aumenta a ingestão de
ração durante o consumo, estimulando o centro neural de
DISCUSSÃO recompensa alimentar em espécies não ruminantes (Rolls, 2016), e
tem sido sugerido que aumenta a motilidade gastrointestinal pela
Devido aos seus efeitos estimuladores na secreção de saliva e no estimulação dos nervos excitatórios colinérgicos e nervos
tamponamento ruminal, que criam condições adequadas para o adrenérgicos do sistema nervoso autônomo em não ruminantes
desenvolvimento da microbiota ruminal, a mastigação é (Chen et al., 2015). Concordando, descobrimos que durante o
considerada essencial em bovinos para regular o perfil de consumo da dose baixa de capsaicina, o tempo de ruminação
fermentação ruminal e para mitigar o risco de SARA (Jiang et al., também aumentou, e as mastigações ruminantes por minuto
2017; Beauchemin, 2018). Como esperado, em nosso estudo as tenderam a aumentar após o consumo. Isto pode refletir o
vacas começaram a apresentar episódios de SARA ao alimentarem aumento do consumo de ração com esta dosagem, o que
pelo menos 50% de grãos que correspondiam a aproximadamente provavelmente
27% de amido na dieta MS. Na verdade, o tempo de duração

Tabela 5.Efeitos de curto prazo da suplementação com óleo de menta sobre o consumo de ração, atividade mastigatória e pH ruminal de vacas leiteiras holandesas não lactantes
Nível de óleo de menta2 P-valor4

IMS, kg 1,94 1,78 1,54 0,355 0,06 0,83
Tempo de ruminação, min 27.1 28,6 15.2 11.52 0,48 0,61
Hora de comer, min 41,4 33.1 34,6 6.11 0,39 0,48
Comer, mastigar/min 56,5 52,9 53.1 4,68 0,43 0,61
pH ruminal médio 6,59 6,72 6,64 0,099 0,74 0,39
IMS, kg 6,92 6,34 6,82 1.386 0,95 0,70
Tempo de ruminação, min 36,0 44,4 24,0 11h40 0,47 0,33
Hora de comer, min 81,7 63,0 74,1 12.56 0,68 0,36
Ruminação, mastigações/min 36,8 59,1 59,0 8h31 0,10 0h30
min pH ruminal médio 6.09 6.13 5,97 0,116 0,50 0,51
óleo de menta.
2CON = dieta controle preparada pela combinação de 50 g do carreador de sílica de trigo e 2,5 kg (MS) de TMR; BAIXO = 15,3 mg/kg de óleo de menta em 2,5 kg (MS) de
TMR; ALTO = 153 mg/kg de óleo de menta em 2,5 kg (MS) de TMR.
receptores de estiramento ativados responsáveis por desencadear a interação da capsaicina com componentes dietéticos específicos que
ruminação (Ash e Kay, 1959). Portanto, nossos resultados mostram que podem influenciar a palatabilidade dos alimentos.
um nível moderado de capsaicina pode exercer um modo de ação No presente experimento também observamos que durante
semelhante para a estimulação da alimentação como em espécies não o consumo de L-mentol o tempo de alimentação aumentou
ruminantes e, consequentemente, também aumentar a contração 19% com a dose elevada, o que concorda com Patra et al.
gastrointestinal e estimular a ruminação em vacas leiteiras. No entanto, (2019a), que relataram que compostos lipídicos bioativos
nossas observações contrastam os relatos de Tager e Krause (2011), vegetais ricos em mentol aumentaram o tempo de alimentação
que não encontraram nenhum efeito de 11 ppm de capsaicina no e as visitas ao comedouro em ovelhas, e que o efeito não foi
consumo de ração e uma diminuição na duração da primeira refeição atribuído apenas à presença do composto durante as horas de
após o consumo em vacas alimentadas com uma dieta com 58% de alimentação, mas também persistiu após o consumo. No
concentrado. Por outro lado, Fandiño et al. (2008) relataram que a entanto, contrastando o relatório de Patra et al. (2019a),
suplementação de 72 ppm de capsaicina em bovinos de corte descobrimos que a ruminação ou o tempo de alimentação não
aumentou o consumo de ração em 12,6% quando alimentados com foram afetados após o consumo de L-mentol, quer quando a
uma dieta composta por 90% de concentrado. Esses resultados alimentação foi restrita ou quando a alimentação foi
sugerem que o gado pode tolerar doses maiores de capsaicina antes reintroduzida ad libitum. As discrepâncias entre nossos
que o IMS seja prejudicado, como observamos ao suplementar 100 resultados e os de Patra et al. (2019a) pode ser devido aos
ppm deste composto. Este efeito possivelmente se deve a efeitos maiores valores que complementaram, e ao fato de
negativos na palatabilidade da ração, sensação de queimação ou fornecerem o composto em um horário maior do dia (07h00,
supressão de sinais orexígenos (Fattori et al., 2016). As diferenças no 11h00 e 15h00). Os resultados do presente estudo também
comportamento alimentar em vacas suplementadas com capsaicina indicam que a raiz de angélica pode aumentar o consumo de
entre este estudo e relatórios anteriores podem ser parcialmente ração durante o consumo e aumentar o tempo de ruminação
devidas a diferenças na composição da dieta, portanto, potencial em aproximadamente 55% após o consumo, quando a
alimentação é restrita.

Tabela 6.Efeitos de curto prazo da suplementação com timol sobre o consumo de ração, atividade mastigatória e pH ruminal de vacas leiteiras holandesas não lactantes
Nível de timol2 P-valor4

IMS, kg 2.06 2.16 2.29 0,061 0,03 0,88
Tempo de ruminação, min 20,5 35,6 32,9 9,89 0,19 0,27
Hora de comer, min 38,5 36,1 34,6 17h30 0,48 0,91
Ruminação, mastigações/min 30.3 57,4 57.1 21/10 0,09 0,28
Tempo total de mastigação, 59,1 71,7 67,6 7,52 0,38 0,31
pH ruminal médio 6,59 6,51 6,68 0,124 0,38 0,20
pH ruminal mínimo 6h45 6,33 6,54 0,153 0,60 0,23
Consumo de ração, kg CMS 7,75 7,90 6,74 0,546 0,18 0h30
Tempo de ruminação, min 22.3 16,0 34,0 9.18 0,15 0,09
Hora de comer, min 80,4 84,1 75,0 9,96 0,45 0,31
min pH ruminal médio 6.29 5,82 6.31 0,121 0,92 0,02
timol.
2CON = dieta controle preparada pela combinação de 50 g do carreador de sílica de trigo e 2,5 kg (MS) de TMR; BAIXO = 5 mg/kg de timol em 2,5
kg (MS) de TMR; ALTO = 50 mg/kg de timol em 2,5 kg (MS) de TMR.
Tabela 7.Efeitos de curto prazo da suplementação de capsaicina no perfil ruminal e reticular de ácidos graxos de cadeia curta de vacas leiteiras holandesas não lactantes
Nível de capsaicina1 P-valor3
Item VIGARISTA BAIXO ALTO SEM2 eu P

Rúmen
SCFA total, mM 74,2 75,2 77,8 6.19 0,66 0,90
% do total de SCFA
Acetato 59,6 59,2 60,6 1,28 0,58 0,52
Propionato 23,9 25.1 24,5 1,34 0,63 0,39
Butirato 10,5 11,0 10.2 0,58 0,70 0,37
Isobutirato 1,20 1.18 1,24 0,123 0,78 0,79
Isovalerato 1,92 1,88 2.02 0,320 0,83 0,81
Valerato 1,94 1,89 1,70 0,180 0,34 0,71
Proporção de acetato para retículo de 2,48 2.41 2,50 0,204 0,64 0,54
propionato
SCFA total, mM 76,9 69,0 79,0 7h15 0,84 0,35
% do total de SCFA
Acetato 60,8 57.1 62,5 2.19 0,48 0,05
Propionato 22,8 25,7 22.3 1,84 0,82 0,12
Butirato 10.91 11h37 9,62 0,755 0,15 0,14
Isobutirato 1,33 1,39 1,29 0,136 0,83 0,55
Isovalerato 2.22 2.14 2.22 0,295 0,98 0,81
Valerato 1,98 2.16 1,79 0,245 0,13 0,01
Proporção de acetato para propionato 2,73 2.24 2,90 0,359 0,54 0,14
1CON = dieta controle preparada pela combinação de 50 g de transportador de sílica de trigo com 2,5 kg (base MS) de TMR; BAIXO = 10 mg/kg de capsaicina misturado
com 2,5 kg de TMR (DM); ALTO = 100 mg/kg de capsaicina misturado com 2,5 kg de TMR (DM).
3P-valores para efeitos lineares (L) e quadráticos (Q).

Tabela 8.Efeitos de curto prazo da suplementação com óleo de alho sobre ácidos graxos de cadeia curta ruminais e reticulares de vacas leiteiras holandesas não lactantes
Nível de óleo de alho1 P-valor3

Rúmen
SCFA total, mM 79,3 64,4 77,3 6,81 0,82 0,17
% do total de SCFA
Acetato 60,7 53,0 55,3 1,41 0,05 0,05
Propionato 25,9 30,0 30,0 1,34 0,12 0,23
Butirato 10.61 10,72 9,56 1.142 0,48 0,62
Isobutirato 1.04 0,99 0,85 0,045 0,04 0,47
Isovalerato 1,64 1,40 1,36 0,105 0,08 0,27
Valerato 2h00 1,97 2.33 0,173 0,08 0,14
Proporção de acetato para retículo de 2,50 1,78 1,87 0,177 0,07 0,09
propionato
SCFA total, mM 75,7 71,3 60,1 4,84 0,06 0,57
% do total de SCFA
Acetato 58,3 54,8 56,1 1.17 0,24 0,10
Propionato 24,4 30,0 29,8 1,29 0,03 0,04
Butirato 10h45 9,67 10.16 0,400 0,59 0,23
Isobutiato 1,24 1.09 1.06 0,097 0,12 0,50
Isovalerato 2.06 1,57 1,51 0,180 0,05 0,31
Valerato 2,42 2,55 2.23 0,421 0,71 0,57
Proporção de acetato para propionato 2,46 1,84 1,94 0,169 0,09 0,06
1CON = dieta controle preparada pela combinação de 50 g do carreador sílica de trigo e 2,5 kg (MS) de TMR; BAIXO = 0,3 mg/kg de óleo de alho em 2,5 kg
(MS) de TMR; ALTO = 3 mg/kg de óleo de alho em 2,5 kg (MS) de TMR.

Outra descoberta interessante é que após o consumo de raiz composto na ruminação. A ruminação é um mecanismo
de angélica quando a ração foi reintroduzida ad libitum, houve essencial no gado para digerir ainda mais o alimento após
um aumento no número de mastigações ruminantes por comer. Durante este processo, a digesta é regurgitada como
minuto, indicando um efeito duradouro deste resultado de uma contração do retículo, e este é estimulado
Tabela 9.Efeitos de curto prazo da suplementação de L-mentol nos ácidos graxos de cadeia curta ruminais e reticulares de vacas leiteiras holandesas não lactantes
Nível de L-mentol1 P-valor3

Rúmen
SCFA total, mM 75,9 64,7 76,8 11h43 0,95 0,37
% do total de SCFA
Acetato 60,2 61,6 59,7 0,88 0,54 0,10
Propionato 23.2 22,8 24.2 0,65 0,08 0,09
Butirato 11.4 10.7 11.1 0,42 0,56 0,17
Isobutirato 1.12 1.17 1.03 0,069 0,26 0,15
Isovalerato 1,96 1,81 1,75 0,097 0,18 0,68
Valerato 1,89 1,77 1,79 0,166 0,45 0,60
Proporção de acetato para retículo de 2,77 2,89 2,60 0,127 0,12 0,05
propionato
SCFA total, mM 76,1 64,9 81,0 4.22 0,40 0,03
% do total de SCFA
Acetato 59,5 59,9 58,4 1.14 0,29 0,42
Propionato 23,9 23,0 25,0 0,81 0,19 0,08
Butirato 10.8 11,0 11.1 0,50 0,44 0,87
Isobutirato 1,28 1,60 1.16 0,118 0,50 0,04
Isovalerato 2.11 2.21 1,85 0,150 0,27 0,25
Valerato 2.27 2.23 2.15 0,194 0,65 0,93
Proporção de acetato para propionato 2,64 2,71 2,51 0,141 0,05 0,04
1CON = dieta controle preparada pela combinação de 50 g do carreador sílica de trigo e 2,5 kg (MS) de TMR; BAIXO = 6,7 mg/kg de L-mentol em 2,5
kg (MS) de TMR; ALTO = 67 mg/kg de L-mentol em 2,5 kg (MS) de TMR.

pela ativação de receptores no intestino anterior (Ash e Kay, com Munasik et al. (2019), que relataram redução do tempo de
1959; Leek, 1986; Brewer, 1987; Ruckebusch, 1988). Assim, é ruminação em cabras adultas quando suplementadas com alho
possível que a raiz de angélica tenha exercido efeito em pó. Nossas observações também mostraram que a
estimulador da ruminação por meio da ativação de receptores suplementação com extrato de gengibre não afetou o tempo
de tração decorrentes do incremento no consumo de ração, o de ruminação. Porém, durante o consumo da dose baixa,
que aumentou a atividade de ruminação após o consumo. houve redução do tempo de alimentação e tendência de
Outros relatórios descobriram que o ácido ferúlico, um diminuição do número de mastigações por minuto durante a
componente da raiz de angélica, pode aumentar a contração alimentação quando a ração foi reintroduzida ad libitum,
gastrointestinal e a motilidade em não ruminantes (Badary et indicando que seus princípios ativos como gingeróis e shogoal
al., 2006). No entanto, o exato mecanismo de ação da raiz de (Semwal et al., 2015) pode ter potenciais efeitos prejudiciais na
angélica no aumento da ruminação precisa ser claramente mastigação, não apenas no momento do consumo, mas
elucidado. Os efeitos positivos de alguns dos compostos também após a alimentação, sem afetar o CMS total. Esses
durante ou após o consumo na atividade de mastigação resultados contrastam com relatos de outros pesquisadores
apoiam os relatos de Kröger et al. (2017) em vacas alimentadas que sugerem que o extrato de gengibre pode ter uma ação
com dietas ricas em grãos. estimuladora na ruminação e na motilidade reticulorúmen em
Zhang et al. (2001) relataram que a alicina, um ingrediente ativo pequenos ruminantes (Mamaghani et al., 2013). A discrepância
do alho, tem propriedades hipoglicemiantes em não ruminantes, entre nossas observações e as de Mamaghani et al. (2013)
uma condição que pode desencadear a fome (Tesfaye e Seaquist, pode ser devido aos efeitos diferenciais do extrato de gengibre
2010). Contrastando esses relatos, não encontramos aumento no na estimulação da ruminação ou motilidade intestinal em
CMS ou no tempo de alimentação durante o consumo de óleo de espécies ruminantes.
alho, e o tempo de alimentação diminuiu com a dose baixa quando
a ração foi reintroduzida ad libitum. Estes relatórios sugerem Efeitos no pH Ruminal e na Fermentação Ruminal
diferenças no modo de ação do óleo de alho entre as espécies
animais. Os resultados deste ensaio também indicam que o Foi demonstrado que o aumento do comportamento
consumo de óleo de alho não tem efeito na atividade de mastigatório pela suplementação com um aditivo alimentar
mastigação durante o consumo, mas observamos uma redução no fitogênico contribui para a estabilização do pH ruminal
tempo de ruminação e no número de mastigações por minuto (Kröger et al., 2017). De acordo com nossa hipótese, alguns
após o consumo quando a ração foi reintroduzida ad libitum. Essas dos compostos influenciaram o perfil ou concentração total
descobertas concordam de AGCC reticulares e ruminais, ou pH ruminal.
Tabela 10.Efeitos de curto prazo da suplementação com óleo de menta sobre os ácidos graxos de cadeia curta ruminais e reticulares de vacas leiteiras Holandesas não lactantes
Nível de óleo de menta1 P-valor3

Rúmen
SCFA total, mM 80,6 70,1 88,3 7h45 0,45 0,14
% do total de SCFA
Acetato 61,6 63,4 61,2 0,75 0,38 0,04
Propionato 22,8 22.2 23,5 0,36 0,20 0,08
Butirato 10.7 10.4 10.3 0,54 0,37 0,73
Isobutirato 1.14 1,15 1.16 0,106 0,81 0,99
Isovalerato 1,77 1,74 1,76 0,175 0,98 0,86
Valerato 1,79 1,48 1,50 0,159 0,23 0,40
Proporção de acetato para retículo de 2,82 3h00 2,74 0,064 0,12 <0,01
propionato
SCFA total, mM 80,1 68,6 65,8 7,54 0,18 0,64
% do total de SCFA
Acetato 61,4 61,8 58,8 2,98 0,46 0,69
Propionato 23.3 21.1 26.1 1,59 0,26 0,12
Butirato 10.2 10,0 11,5 0,78 0,23 0,22
Isobutirato 13h30 1.12 1,46 0,191 0,51 0,35
Isovalerato 2.04 1,80 2.03 0,110 0,90 0,17
Valerato 1,90 1,66 2.03 0,301 0,75 0,46
Proporção de acetato para propionato 2,73 2,99 2.29 0,374 0,38 0,35
1CON = dieta controle preparada pela combinação de 50 g do carreador sílica de trigo e 2,5 kg (MS) de TMR; BAIXO = 15,3 mg/kg de óleo de menta em 2,5 kg
(MS) de TMR; ALTO = 153 mg/kg de óleo de menta em 2,5 kg (MS) de TMR.

Por exemplo, nossos resultados demonstram uma tendência à diminuição da concentração de propionato com ausência de efeitos significativos no pH ruminal durante
ruminal juntamente com uma redução na concentração reticular total de SCFA durante o consumo de ou após o consumo. Em geral, as alterações na concentração
doses baixas de L-mentol, e isso pode ter contribuído para aumentar o pH ruminal médio e diminuir o ou perfil ruminal ou reticular de SCFA observadas neste ensaio
índice de acidose ruminal após o consumo desta dosagem quando a ração foi reintroduzida ad libitum. sugerem um papel potencial de alguns dos compostos
Contrastando nossas observações, Tekippe et al. (2019) relataram que os óleos essenciais tiveram efeito fitogênicos na alteração da atividade de fermentação
mínimo sobre os AGCC ruminais, e Tager e Krause (2011) relataram que os óleos essenciais não afetaram microbiana ruminal ou na absorção e depuração de ácido.
os AGCC ruminais ou o pH ruminal. Além disso, Patra et al. (2019b) indicaram que a suplementação de Também é importante notar que as comparações diretas na
compostos lipídicos bioativos vegetais ricos em mentol não afetou a concentração ruminal total de AGCC literatura podem ser desafiadoras, devido à dependência da
em ovelhas alimentadas com feno ad libitum e 600 g/d de concentrado. Por isso, os resultados do presente dose e à qualidade do produto, bem como às influências dos
estudo sugerem o potencial de uma dose baixa de L-mentol para a modulação do pH ruminal. Da mesma animais e da dieta.
forma, nossos resultados também mostram que o óleo de tomilho, que contém p-cimeno e γ-terpineno Poucas diferenças observadas no perfil de SCFA entre o retículo e o rúmen podem ser devidas
(Pinto et al., 2020), ou doses moderadas de óleo de menta, que contém mentona e acetato de metila (Beigi a diferenças no pH, extensão da fermentação de nutrientes ou padrões de mistura entre estes
et al., 2018), têm o potencial de modular o pH ruminal durante o consumo (óleo de menta) ou após o compartimentos quando alguns dos compostos foram alimentados. Embora não tenhamos
consumo (óleo de tomilho) quando a ração é oferecida ad libitum. Estas observações apoiam ainda mais os monitorado o pH reticular, a pesquisa mostrou que o pH reticular é maior que o pH ruminal
resultados de Kröger et al. (2017) demonstrando o efeito positivo da suplementação com óleos essenciais (Neubauer et al., 2018a), e que a taxa de absorção de SCFA é influenciada pelo pH e pela massa
no pH ruminal. Por outro lado, em contraste com Patra e Yu (2012), que descobriram que a inclusão de óleo molecular de SCFA (Allen, 1997). Por exemplo, à medida que o pH diminui, a taxa de absorção
de alho não teve efeito sobre os SCFA ruminais in vitro, observamos menor acetato ruminal e tendência a aumenta a uma taxa maior à medida que a massa molecular do SCFA aumenta, o que afeta o
menor AGCC reticular total quando suplementado com óleo de alho, indicando efeito do óleo de alho na perfil do SCFA ou a concentração total. Especificamente, Allen (1997) relatou que embora o pH
modulação da fermentação ruminal. A análise de potência a posteriori para a diminuição do acetato não tenha efeito na taxa de absorção fracionada de acetato, as taxas de absorção de propionato e
ruminal apresentou valor de 0,70; assim, embora relativamente inferior ao esperado, houve poder butirato aumentam à medida que o pH diminui. Neste contexto, comparado com o rúmen, um pH
estatístico suficiente para detectar um efeito significativo para esta suplementação fitogênica. As alterações reticular possivelmente maior pode ter resultado em menor taxa de absorção de propionato,
nos AGCC possivelmente refletem mudanças na atividade microbiana ou na taxa de depuração de ácido no aumentando sua proporção, como observado para L-mentol ou óleo de menta quando altas
reticulorúmen. O aumento do propionato reticular quando a ração foi reintroduzida ad libitum sugere um doses foram fornecidas. Por outro lado, possíveis diferentes padrões de mistura entre o rúmen e
efeito benéfico do óleo de alho na utilização de energia, dada a propriedade glicogênica do propionato em o retículo podem afetar o perfil dos SCFA. A mistura da digesta expõe os SCFA ao epitélio,
ruminantes. A análise de potência a posteriori para a diminuição do acetato ruminal apresentou valor de influenciando assim a absorção (Allen, 1997). Além disso, acreditamos que as diferenças na
0,70; assim, embora relativamente inferior ao esperado, houve poder estatístico suficiente para detectar extensão da fermentação entre os nutrientes podem influenciar o perfil dos SCFA. Por exemplo,
um efeito significativo para esta suplementação fitogênica. As alterações nos AGCC possivelmente refletem uma maior taxa de fermentação de fibras no rúmen levaria a maiores proporções de acetato.
mudanças na atividade microbiana ou na taxa de depuração de ácido no reticulorúmen. O aumento do possíveis diferentes padrões de mistura entre o rúmen e o retículo podem afetar o perfil de SCFA.
propionato reticular quando a ração foi reintroduzida ad libitum sugere um efeito benéfico do óleo de alho A mistura da digesta expõe os SCFA ao epitélio, influenciando assim a absorção (Allen, 1997).
na utilização de energia, dada a propriedade glicogênica do propionato em ruminantes. A análise de Além disso, acreditamos que as diferenças na extensão da fermentação entre os nutrientes
potência a posteriori para a diminuição do acetato ruminal apresentou valor de 0,70; assim, embora podem influenciar o perfil dos SCFA. Por exemplo, uma maior taxa de fermentação de fibras no
relativamente inferior ao esperado, houve poder estatístico suficiente para detectar um efeito significativo rúmen levaria a maiores proporções de acetato. possíveis diferentes padrões de mistura entre o
para esta suplementação fitogênica. As alterações nos AGCC possivelmente refletem mudanças na rúmen e o retículo podem afetar o perfil de SCFA. A mistura da digesta expõe os SCFA ao epitélio,
atividade microbiana ou na taxa de depuração de ácido no reticulorúmen. O aumento do propionato influenciando assim a absorção (Allen, 1997). Além disso, acreditamos que as diferenças na
reticular quando a ração foi reintroduzida ad libitum sugere um efeito benéfico do óleo de alho na extensão da fermentação entre os nutrientes podem influenciar o perfil dos SCFA. Por exemplo,
utilização de energia, dada a propriedade glicogênica do propionato em ruminantes. As alterações nos uma maior taxa de fermentação de fibras no rúmen levaria a maiores proporções de acetato.
AGCC possivelmente refletem mudanças na atividade microbiana ou na taxa de depuração de ácido no
reticulorúmen. O aumento do propionato reticular quando a ração foi reintroduzida ad libitum sugere um
efeito benéfico do óleo de alho na utilização de energia, dada a propriedade glicogênica do propionato em No geral, poderia ser possível que o efeito estimulador de
ruminantes. As alterações nos AGCC possivelmente refletem mudanças na atividade microbiana ou na taxa alguns dos compostos na atividade de mastigação não fosse
de depuração de ácido no reticulorúmen. O aumento do propionato reticular quando a ração foi grande o suficiente para influenciar a concentração ruminal de
reintroduzida ad libitum sugere um efeito benéfico do óleo de alho na utilização de energia, dada a SCFA e modular o pH, e que fatores de influência além da
propriedade glicogênica do propionato em ruminantes. atividade de ruminação pudessem desempenhar um papel na
Nossos achados também indicam que baixas doses de modulação do pH ruminal em vacas alimentadas com um
suplementação de capsaicina diminuíram a proporção de acetato aditivo alimentar fitogênico (Kröger et al., 2017). No entanto,
reticular, embora nenhum efeito na concentração total de SCFA estes compostos têm o potencial de contribuir para diminuir o
ruminal ou reticular tenha sido encontrado. Esta observação risco e os efeitos negativos da acidose ruminal, uma condição
contrasta os relatos de Rodriguez-Prado et al. (2008), que que continua a receber atenção dada a sua associação com
descobriram que a suplementação de 0,5 g/d de capsaicina em endotoxemia (Glock e DeGroot, 1998), abcessos hepáticos
novilhas de corte alimentadas com uma ração concentrada de 90% (Nagaraja et al., 1999) e laminite (Brent, 1976; Stock et al., 1990)
tendeu a aumentar o total de SCFA ruminal. No entanto, este efeito em bovinos. Embora não tenhamos avaliado o mecanismo de
foi parcialmente atribuído ao aumento da ingestão de carboidratos ação dos compostos fitogênicos, especulamos que essas
fermentáveis. A falta de efeito da capsaicina na concentração substâncias exerceram efeitos olfativos, gustativos, pungentes
ruminal total de SCFA neste estudo concorda ou mediados por receptores.

estimulação da alimentação e ruminação (Simitzis et al., 2008; AGCC no retículo e o pH ruminal foram modulados por baixas
Patra et al., 2019a) e possivelmente influenciou a atividade de doses de L-mentol, óleo de menta e óleo de tomilho. No geral,
fermentação microbiana ou a eliminação de ácido do rúmen. este estudo demonstrou que a maioria dos compostos
fitogênicos apresentou um efeito de curto prazo na mastigação
Os resultados desta pesquisa apresentam pontos fortes e específica e nas variáveis ruminais, sugerindo seu potencial
algumas limitações. A vantagem da abordagem de rastreio para modular os AGCC ou o pH ruminal durante ou após o
in vivo de curto prazo é a sua natureza exploratória num consumo.
modelo de alimentação SARA já estabelecido. Isto permitiu-
nos identificar produtos que se destacam por afetarem AGRADECIMENTOS
uma ou várias variáveis de interesse quando são
alimentados numa refeição, e se e por quanto tempo esses Agradecemos ao pessoal da fazenda leiteira de
efeitos perduram após essa refeição. Além disso, os Vetmeduni Viena pela ajuda. A assistência de Sabine Leiner,
resultados deste estudo de triagem podem ser usados Suchitra Sharma, Anita Dockner e Arife Sener na análise de
como base para pesquisas futuras para avaliar potenciais amostras e suporte no laboratório é muito apreciada.
efeitos sinérgicos provenientes de uma combinação de Agradecemos também a Thomas Enzinger, Anna
alguns dos compostos em concentrações específicas como Kaltenegger, Felipe Penagos-Tabares e Mubarik Mahmood
uma estratégia potencial para modular o comportamento (Vetmeduni Viena) pela ajuda na amostragem. Esta
de mastigação, mitigar a acidificação ruminal e melhorar a pesquisa foi apoiada pelo Ministério Federal Austríaco para
fermentação ruminal. em vacas leiteiras que consomem Assuntos Digitais e Econômicos e pela Fundação Nacional
rações com alto teor de grãos. Por outro lado, apesar de de Pesquisa, Tecnologia e Desenvolvimento. A Biomin
mostrar poder suficiente para muitas das variáveis GmbH apoia financeiramente o Laboratório Christian
testadas, este experimento foi projetado para rastrear e Doppler para Conceitos Inovadores de Saúde Intestinal da
avaliar apenas os efeitos de curto prazo de substâncias Pecuária. Os autores não declararam quaisquer conflitos de
fitogênicas. Embora este modelo tenha permitido a interesse.
avaliação de substâncias alimentares durante a refeição e
até 6 horas após a refeição, e restringido potenciais
substâncias promissoras, os efeitos observados podem não REFERÊNCIAS
ser indicativos de efeitos a longo prazo e precisarão de
Allen, MS 1997. Relação entre produção de ácido de fermentação
confirmação em estudos futuros. Mais importante ainda, no rúmen e a necessidade de fibra fisicamente eficaz. J.
este estudo de rastreio permitiu a comparação de muitas Laticínios Sci. 80:1447–1462.https://doi.org/10.3168/jds.S0022
combinações de tratamento in vivo. Os resultados obtidos - 0302(97)76074-0.
Aschenbach, JR, GB Penner, F. Stumpff e G. Gäbel. 2011. Ru-
ajudaram a discriminar o modo de ação entre esses simpósio de nutrição minante: Papel da absorção de ácidos
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ruminal. Especificamente, o tempo de alimentação foi aumentado (Mentha × piperita L.) submetidas a diferentes métodos de secagem. Internacional J.
pela capsaicina, o tempo de ruminação tendeu a aumentar após o Proposta Alimentar 21:267–276.https://doi.org/10.1080/10942912.2018
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Short-Term Screening of Multiple Phytogenic Compounds For Their Potencial To Modulate... en - PT

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J. Laticínios Sci. 104:4271–4289 https://

Triagem de curto prazo de múltiplos compostos fitogênicos quanto ao seu

Ezequias Castillo-López,1,2 Raul Rivera-Chacón,1,2 Sara Ricci,1,2 Renée M. Petri,1,2* N. Reisinger,3

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Nível de raiz de angélica2 P-valor4

Atividade1 VIGARISTA BAIXO ALTO SEM3 eu P

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Nível de capsaicina2 P-valor4

Atividade1 VIGARISTA BAIXO ALTO SEM3 eu P

Jornal de Ciência de Laticínios Vol. 104 Nº 4, 2021

Nível de óleo de alho2 P-valor4

Atividade1 VIGARISTA BAIXO ALTO SEM3 eu P

(MS) de TMR; ALTO = 3 mg/kg de óleo de alho em 2,5 kg (MS) de TMR.

Jornal de Ciência de Laticínios Vol. 104 Nº 4, 2021

Nível de L-mentol2 P-valor4

Atividade1 VIGARISTA BAIXO ALTO SEM3 eu P

(MS) de TMR; ALTO = 67 mg/kg de L-mentol em 2,5 kg (MS) de TMR.

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Nível de óleo de menta2 P-valor4

Atividade1 VIGARISTA BAIXO ALTO SEM3 eu P

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Nível de timol2 P-valor4

Atividade1 VIGARISTA BAIXO ALTO SEM3 eu P

Nível de capsaicina1 P-valor3

Item VIGARISTA BAIXO ALTO SEM2 eu P

Jornal de Ciência de Laticínios Vol. 104 Nº 4, 2021

Nível de óleo de alho1 P-valor3

Item VIGARISTA BAIXO ALTO SEM2 eu P

(MS) de TMR; ALTO = 3 mg/kg de óleo de alho em 2,5 kg (MS) de TMR.

Nível de L-mentol1 P-valor3

Item VIGARISTA BAIXO ALTO SEM2 eu P

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Nível de óleo de menta1 P-valor3

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