INSTITUTO SUPERIOR DE CIÊNCIAS E TECNOLOGIA DE MOÇAMBIQUE

Diagnóstico Molecular
Discentes

Atalia
Macandja
Aissa António
Erica Nhamazane
Naiza Timbana
Iranete gonzoga
Sheimin Alibhaii
Riana Samuel
Wira Bambo
 Objectivos

Gerais
 Estudar o diagnóstico molecular
Específicos
 Definir diagnóstico molecular
 Breve historial do Diagnóstico molecular
 Explicar as técnicas utilizadas no
diagnóstico molecular
 Nomear os alvos de interesse do
diagnóstico molecular
 Citar a aplicação do diagnóstico molecular
 Citar as vantagens do diagnóstico
molecular
 Introdução

Diagnóstico molecular é uma tecnica de biologia molecular utilizada de diferentes formas,

no sentido mais amplo pode ser definido como o conjunto de métodos utilizados em
laboratório com o intuito de analisar amostras em prol da investigação das moleculas do
organismo, estando estas presentes nos tecidos, orgãos e fluídos corporais.
O diagnóstico é parte fundamental para o tratamento de uma doença, pois é através dele que
é possível identificar qual é o melhor procedimento a ser tomado. Os avanços no campo da
biologia molecular permitiram o emprego de métodos mais sensíveis e rápidos na
identificação de doenças genéticas, que são de grande valia no diagnóstico clínico.
Breve historial do diagnóstico molecular

Tudo teve inicio na década de 50 com a descoberta do DNA por watson e trickson e a partir
dai, ocorreu um avanço considerável na área devido as pesquisas profundas, evolução da
tecnologia e descobertas na área de medicina e o avanço da engenharia ajudou de certa forma
no fabrico de equipamentos potentes para o estudo das moleculas.
Após o projecto Genoma Humano (onde todos os nossos genes foram descodificados), o
diagnostico molecular tornou-se imprescindível em diversas áreas da medicina e é assim até
hoje.
Como fazer o Diagnóstico Molecular

A escolha do teste ou metodologia adotada para a realização dos exames se dá no sentido de

escolher a que melhor se adequa a investigação, que te traga um resultado confiável e
informativo o suficiente para auxílio diagnóstico.
Os testes de biologia molecular, podem ser realizados com qualquer amostra solicitada pelo
médico desde que estejam devidamente validados com o proposto pelos órgãos de saúde,
podendo ser, saliva, sangue, plasma, medula, entre outros, na maior parte dos testes genéticos,
sangue ou saliva
Técnicas de diagnóstico molecular

As tecnologias aplicadas vão desde uma simples reacção em cadeia polimerase (PCR) até o
sequenciamento de nova geração (NGS). Estes métodos de diagnóstico são confiáveis, rapidos,
muito sensíveis e com melhor reproducibilidade .
PCR
A PCR é agora uma técnica comum e frequentemente indispensável “ é a mãe de todas
tecnicas de biologia molecular” usada em laboratórios clínicos e de pesquisa para uma
ampla variedade de aplicações, estas incluem a clonagem de DNA para sequenciação,
clonagem e manipulação de genes, mutagênese de genes; construção de filogenias baseadas
em DNA ou análise funcional de genes, diagnóstico e monitoramento de doenças
infecciosas e/ou hereditárias, amplificação do DNA, análise de impressões digitais (muito
usada na ciência forense e teste de parentesco) e detecção de patógenos em testes de ácido
nucleico para o diagnóstico de doenças infecciosas. A grande maioria dos métodos de PCR
dependem do ciclo térmico, que envolve a exposição dos reagentes a ciclos de aquecimento
e resfriamento repetidos, permitindo diferentes reações dependentes especificamente da
temperatura
NGS

É uma metodologia que consegue avaliar milhares de genes ao mesmo tempo, fazendo assim
que haja um ganho em termo de tempo. O sequenciamento de nova geração (NGS – Next
Generation Sequencing) representa um novo princípio de sequenciamento, pois permite a
análise de amostras heterogêneas e através dessa técnica é possível uma ampla gama de
aplicações como o rápido sequenciamento de genomas, a investigação profunda de regiões de
interesse, a descoberta de variantes de DNA, RNA e sítios de “splice”, a quantificação do
mRNA para análise de expressão gênica, a análise de padrões de metilação ou de interações
proteína-DNA, além do estudo da diversidade microbiana em humanos ou no meio ambiente.
Alvo de interesse

Os alvos de interesse podem ser patógenos causadores de infeçcões e doenças e o matérial do

próprio indivíduo para verificação de alteraçcões ou mutações genéticas.
Para estas análises é preciso escolher o tipo adequado de amostra biológica.
Onde é feito o Diagnóstico Molecular

Os testes moleculares são necessariamente utilizados em instituições de pesquisa e hospitais de

referência, clínicas, intituições privadas e laboratórios de apoios.
Em mocanbique o dignostico molecular e feito em hospitais, clinicas e instituicoes privadas e
comumente usam a tecnica da
Este laboratorios tratam se de infraestruturas com tecnologia e novas valencias para o pais pois
nelas seram realizadas testagem de antibioticos aos agentes microbianos, detectar os genes
correspondentes a resistencias verififcadas em laboratorios clinico normal , dignostico molecular de
doencas virais com risco de bioseguranca, diagnosticar agentes que sejam na base de material
genetico sendo, infeccoes virais bacterianas e fungicas.
Os laboratorios foram devidamente equipados com termocicladores, centrifugadoras, incubadoras de
CO2, geleiras para conservacao das estripes, microscopios, capina para o processamento entre outros
materiais. Para alem de testes a serem feitos alguns laboratoriosserviram de campo de estagio e
pesquisas para estudantes.
Aplicaçoes do Diagnóstico molecular

Diagnóstico molecular tem sido utilizado como uma

das maneiras de mapear a presença de
microrganismos ou moleculas alvo no material
genético, ou seja, investigação de patógenos, de
genes de resistência a antibióticos, doenças
hereditárias ou ainda mutações e alterações genéticas.
Identificação de doenças hematológicas, como trombofilia;

Identificação de mutações relacionadas à leucemia;

Alterações moleculares que indiquem a ocorrência de câncer;

Nas doenças genéticas raras, cardiovasculares

Na saúde sexual e reprodutiva da mulher;

Determinação do sexo do bebê através do exame de sangue;

Identificação de infecções respiratórias e identificação de agentes, como Influenza A, B e C, Coronavírus;

 Na medicina personalizada em testes genéticos como Intolerância à lactose e ao glúte

As técnicas moleculares também são utilizadas para avaliar as respostas aos tratamentos
oferecidos, principalmente em pacientes com câncer, sendo um dos métodos mais eficazes
para a indicação de evolução ou remissão da doença.
Vantagens do Diagnóstico Molecular

Existem diversas vantagens em relação ao uso diagnóstico molécular quando comparado com outras
metodologias muitos utilizados ainda hoje, dentre elas as seguintes:
 O diagnóstico molecular apresenta altíssima sensibilidade e especificidade na investigação do alvo de
interesse, ou seja, gera resultados mais precisos;
 Permite maior reprodutibilidade em termos de custos;
 Apresenta altíssima apresentação, além de reduzir o tempo de análise e liberação de resultados, visto
ser comumente rápida ;
 Esta tecnica também é utilizada para avaliar as respostas aos tratamentos oferecidos, principalmente em
pacientes com câncer.
 Permite maior reprodutividade dos ensaios, contando com protocolos praticos e kits de fácil utilização
 É importante na subdivisão de doenças em grupos de mais agressivas a menos o que auxilia ao médico
em prever o curso da doença.