Biofisica CESAD

Biofsica para Bilogos
Carla Maria Lins de Vasconcelos Eduardo Antnio Conde Garcia
So Cristvo/SE 2009

Elaborao de Contedo Carla Maria Lins de Vasconcelos Eduardo Antnio Conde Garcia
Projeto Grfico e Capa Hermeson Alves de Menezes Diagramao Luclio do Nascimento Freitas Ilustrao Luzileide Silva Santos
Copyright 2009, Universidade Federal de Sergipe / CESAD. Nenhuma parte deste material poder ser reproduzida, transmitida e gravada por qualquer meio eletrnico, mecnico, por fotocpia e outros, sem a prvia autorizao por escrito da UFS.
FICHA CATALOGRFICA PRODUZIDA PELA BIBLIOTECA CENTRAL UNIVERSIDADE FEDERAL DE SERGIPE

Vasconcelos, Carla Maria Lins de. Biofsica para bilogos / Carla Maria Lins de Vasconcelos e Eduardo Antnio Conde Garcia -- So Cristvo: Universidade Federal de Sergipe, CESAD, 2009. 1. Biofsica. 2. Eletroforese. 3. Efeitos biolgicos I. Garcia Eduardo Antnio Conde. II. Ttulo. CDU 577.3
asconcelos e Universidade
V331b
Presidente da Repblica Luiz Incio Lula da Silva Ministro da Educao Fernando Haddad Secretrio de Educao a Distncia Carlos Eduardo Bielschowsky Reitor Josu Modesto dos Passos Subrinho Vice-Reitor Angelo Roberto Antoniolli
Chefe de Gabinete Ednalva Freire Caetano Coordenador Geral da UAB/UFS Diretor do CESAD Itamar Freitas Vice-coordenador da UAB/UFS Vice-diretor do CESAD Fbio Alves dos Santos Coordenador do Curso de Licenciatura em Cincias Biolgicas Silmara de Moraes Pantaleo
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NCLEO DE MATERIAL DIDTICO

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UNIVERSIDADE FEDERAL DE SERGIPE Cidade Universitria Prof. Jos Alosio de Campos Av. Marechal Rondon, s/n - Jardim Rosa Elze CEP 49100-000 - So Cristvo - SE Fone(79) 2105 - 6600 - Fax(79) 2105- 6474
Sumrio
AULA 1 Biofsica das membranas biolgicas ................................................. 07 AULA 2 Potencial de membrana e potencial de ao .................................... 27 AULA 3 Biofsica da viso .............................................................................. 47 AULA 4 Biofsica da audio .......................................................................... 63 AULA 5 Eletroforese ...................................................................................... 79 AULA 6 Biofsica das radiaes ionizantes .................................................... 97 AULA 7 Interao da radiao com a matria ............................................... 117 AULA 8 Efeitos biolgicos das radiaes ionizantes ................................... 127
Aula
BIOFSICA DAS MEMBRANAS BIOLGICAS
META
Discutir as principais propriedades biofsicas das membranas biolgicas e o conhecer o mecanismo de transporte de solutos atravs da membrana.
OBJETIVOS
Ao final desta aula, o aluno dever: descrever e esquematizar os principais modelos estruturais da membrana plasmtica; descrever a composio qumica da membrana plasmtica; compreender a importncia da fluidez para a membrana e os fatores que influenciam a fluidez; discutir os tipos de transportes de solutos atravs da membrana plasmtica e seus transportadores; relacionar as diferenas entre um transporte mediado por canal e carreador; e conhecer o mecanismo de transporte mediado pela Bomba de Na+/K+ e sua importncia para a clula.
PR-REQUISITOS
Antes de iniciar o estudo da biofsica das membranas biolgicas, faa uma leitura sobre a estrutura da membrana plasmtica em um livro de Biologia Celular.
Modelo de membrana plasmtica desenvolvido por alunos do ensino mdio (Fonte: http://doracyfreire12.blogspot.com).
INTRODUO
A membrana celular, tambm chamada de membrana plasmtica, membrana citoplasmtica ou plasmalema o envoltrio que toda clula possui. Os compartimentos internos, as organelas, tambm so envoltas por uma membrana. Ela define os limites da clula e, com isso, mantm as diferenas de composio entre os meios intracelular e extracelular. A espessura varia e, geralmente, est entre 6 a 9 nm. Como tem dimenses pequenas, somente possvel visualiz-las atravs de um microscpio eletrnico. Elas so constitudas basicamente de protenas, lipdios e carboidratos. A membrana, por separar os meios intra e extracelular, seleciona as substncias que devem passar, ou no, pela membrana. Essas substncias podem ser transportadas sem gasto de energia (transporte passivo) ou com gasto de energia (transporte ativo). Neste captulo discutiremos a evoluo dos modelos de membrana at chegar no modelo mais aceito, algumas propriedades fsicas da membrana e como se processa o transporte de pequenas molculas atravs da membrana celular.
(Fonte: http://1.bp.blogspot.com).
Biofsica das membranas biolgicas
Aula
BIOFSICA DAS MEMBRANAS BIOLGICAS

Cada clula envolvida por uma membrana plasmtica que a separa do meio extracelular. A membrana plasmtica serve como uma barreira de permeabilidade que permite com que a clula mantenha a composio citoplasmtica diferente da composio do fluido extracelular. A membrana contm enzimas, receptores e antgenos importantes na interao com hormnios, agentes reguladores e tambm com outras clulas (Berne & Levy, 2008, p.3). Alm disso, muitas protenas formam canais ou carreadores na membrana para permitir o transporte de substncias atravs da membrana.
EVOLUO DOS MODELOS DE MEMBRANA

Desde o incio do sculo XX, diversos modelos moleculares foram propostos para a membrana plasmtica: 1. Gorter & Grendel (1925) Esses pesquisadores propuseram o primeiro modelo estrutural para a membrana biolgica. Trabalhando com eritrcitos, eles conseguiram isolar os lipdios da membrana utilizando um solvente orgnico. Eles verificaram que os lipdios extrados, quando espalhados sobre uma superfcie aquosa, ocupavam uma rea duas vezes maior do que a superfcie do eritrcito. Tal observao levou a hiptese de uma membrana formada por uma dupla camada de lipdios, com as extremidades apolares voltadas para os meios intra e extracelular, enquanto as extremidades polares estariam voltadas para o interior da membrana (Fig. 1). Os lpidos das membranas so molculas longas e anfipticas: possuem uma extremidade hidroflica (polar) e, portanto, solvel em gua, e outra hidrfbica (apolar), insolvel em gua.
Figura 1. Modelo de membrana celular proposto por Gorter & Grendel (1925).
2. Danielli & Davson (1935) Nesse modelo, a membrana seria formada pela bicamada lipdica com a participao de protenas na membrana celular. Essas protenas estariam situadas completamente fora da bicamada lipdica, em ambas as faces da membrana, tanto citoplasmtica quanto no-citoplasmtica (Fig. 2). A membrana seria composta por 40 a 50 % de protenas e 50 a 60 % de lipdios.
Figura 2. Modelo de membrana celular proposto por Danielli & Davson (1935).
3. Robertson (1957-1959) Props um modelo de membrana formada pela bicamada de lipdios revestida por protenas globulares situadas completamente fora da bicamada lipdica (Conde-Garcia, 1998, p.5). 4. Stein & Danielli (1956) - O modelo admitia a presena de poros hidroflicos formados por protenas atravessando toda a extenso da bicamada lipdica. Esse poro foi idealizado para justificar a comunicao da clula com o meio externo (Fig. 3).
Figura 3. Modelo de membrana celular proposto por Stein & Danielli (1956).
5. Lucy & Glauert (1964) Eles propuseram que a membrana da clula seria formada por micelas lipdicas (arranjo esfrico de lipdios). Em ambas as faces da membrana, ela estaria recoberta por protenas (Fig. 4).
Figura 4. Modelo de membrana celular proposto por Lucy & Glauert (1964) (Conde-Garcia, 1998, p.5).
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6. Benson (1966) idealizou um modelo de membrana formada por uma matriz de protenas onde os lipdios estariam mergulhados nessa matriz protica (Fig. 5A). 7. Lenard & Singer (1966) sugeriram um modelo de membrana formada por uma dupla camada descontnua de lipdeos no qual as protenas estariam fixadas (Fig. 5B).
B)
A)
Figura 5. Modelos de membrana celular proposto por Benson (A) e Lenard & Singer (B) (CondeGarcia, 1998, p.5).
8. Singer & Nicolson (1972) - O atual Modelo para as membranas celulares o do mosaico fluido proposto por Singer & Nicolson, em 1972. Os cientistas postularam a existncia de um mosaico de molculas proticas colocadas em uma camada fluida de lipdios. Com o advento do microscpio electrnico tornou-se possvel visualizar diretamente a estrutura da membrana, revelando uma estrutura tri-lamelar, consistindo em duas camadas eletrodensas separadas por uma eletrotranslcida. Neste modelo, os lipdios esto organizados com suas cadeias apolares voltados para o interior da membrana, enquanto as cabeas polares ficam voltadas para o meio extracelular ou citoplasmtico. Essas duas camadas lipdicas esto associadas devido interao das cadeias hidrofbicas. As protenas foram classificadas como extrnsecas ou perifrica (protena de superfcie) ou intrnsecas ou integrais (atravessam toda a espessura da membrana). As protenas extrnsecas poderiam ser externa (voltada para o meio extracelular) ou interna (voltada para o meio intracelular). A protena externa poderia atuar como receptor de membrana e a interna como enzima. A protena intrnseca teria a funo no transporte de solutos ou poderia exercer tambm as mesmas funes de uma protena extrnseca. Alm dos lipdios e protenas, a membrana seria revestida, na sua monocamada externa, por carboidratos (glicoprotenas ou glicolipdios). Essa camada chamada de glicoclice e tem a funo de reconhecimento celular (Fig. 6).
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Figura 6. Modelo de membrana celular proposto por Singer & Nicolson (1972).
PARMETROS ELTRICOS DA MEMBRANA CELULAR

1. Rigidez dieltrica da membrana. Existe entre o citosol e o meio extracelular uma diferena de potencial eltrico, que varia entre -60 a -90 mV. Isso significa dizer que o citosol mais negativo em relao ao meio extracelular. Levando em considerao a pequena espessura da membrana (70 angstrom), a diferena de potencial existente cria um campo eltrico muito alto no interior da membrana. Para uma membrana de 100 angstrom e uma diferena de voltagem de 100 mV entre os meios intra e extracelular, o campo eltrico no interior da membrana seria altssimo, de aproximadamente 10.000.000 V/m (Conde-Garcia, 1998, p.8). Obs. O ngstrm () uma medida de comprimento que se relaciona com o metro atravs da relao: 1 = 10-10 m. Ele faz parte da SI (Sistema Internacional de Unidades) e foi criada por um fsico sueco Anders Jonas ngstrm. O uso do ngstrm se mostrou necessrio para medir distncias menores que a nanmetro (10-9 m). 2. Capacitncia da membrana. A membrana celular separa os meios intra e extracelular, dois meios condutores. Por isso, a membrana atua como um capacitor, que armazena cargas eltricas. A capacitncia da membrana de 1 mF/cm2 (Aires, 2008, p.24). A capacitncia (C) medida pelo quociente da quantidade de carga (Q) armazenada pela diferena de potencial ou voltagem (V) que existe entre os dois lados da membrana. Pelo Sistema Internacional de Unidade (SI), um capacitor tem a capacitncia de um Farad (F) quando um Coulomb de carga causa uma diferena de potencial de um Volt (V) entre as membranas. Q C = V
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3. Resistncia das membranas. As membranas celulares apresentam elevada resistncia eltrica em torno de 1.000 a 8.000 W.cm2 (Conde-Garcia, 1998, p.9).
COMPOSIO DA MEMBRANA CELULAR

As molculas lipdicas constituem 50 % da massa da maioria das membranas de clulas animais, sendo o restante, constitudo de protenas. As molculas lipdicas so anfipticas, pois possuem uma extremidade hidroflica ou polar (solvel em meio aquoso) e uma extremidade hidrofbica ou no-polar (insolvel em gua). Os trs principais grupos de lipdios da membrana so os fosfolipdios, o colesterol e os glicolipdios. Os fosfolipdios so os mais abundantes (fosfatidilcolina, fosfatidilserina, fosfatidiletanolamina, esfingomielina, fosfatidilinositol) e possuem uma cabea polar e duas caudas de hidrocarboneto hidrofbicas (caudas de cido graxo). As caudas podem apresentar diferenas no comprimento (14 a 24 tomos de carbono) e geralmente uma insaturada, ou seja, apresenta uma dupla ligao cis. Essa dupla ligao promove uma flexo na cauda de lipdio (Fig. 7). Tanto o comprimento da cauda quanto a presena da dupla ligao influi na fluidez da membrana.
Figura 7. Molcula de fosfolipdio. Fosfatidilcolina, representada esquematicamente (esquerda) e modelo espacial (esquerda). A flexo ocasionada pela dupla ligao. (Fonte: http:// html.rincondelvago.com).
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As molculas de colesterol apresentam uma cabea polar (grupamento hidroxila) e, a sua regio hidrofbica possui anis de esterides e uma cauda de cido graxo (Fig. 8). Os anis do colesterol imobilizam a primeira poro da cadeia de cido graxo do fosfolipdio adjacente. Dessa forma, ele torna a bicamada lipdica menos sujeita a deformaes (menor fluidez), e assim, diminui a permeabilidade da membrana.
Figura 8. Representao da molcula de colesterol interposta entre os fosfolipdios de membrana (Fonte: http://www.ar.geocities.com).
A BICAMADA LIPDICA UM FLUIDO BIDIMENSIONAL

A membrana plasmtica no uma estrutura esttica, os lipdios movem-se proporcionando uma fluidez membrana. Dentro da membrana, os lipdios podem realizar 04 tipos de movimentos (Fig. 9): a) Flip-Flop - o movimento de passagem de um lipdio de uma monocamada para outra. Esse movimento ocorre raramente, aproximadamente 45 dias para cada lipdio realizar uma mudana de monocamada. Esse fato se deve a baixa afinidade da cabea polar com as caudas de cido graxo, dificultando a passagem da cabea polar (hidroflica) dentro da regio apolar (hidrofbica) da bicamada lipdica (Alberts et al., 2004). b) Difuso lateral os lipdios movem-se lateralmente ao longo da extenso da camada.
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c) Rotao - Eles movem-se ao longo do seu prprio eixo, em um movimento rotacional. d) Flexo Movimento das caudas hidrofbicas dos lipdios.
Figura 9. Tipos de movimentos possveis realizados pelos fosfolipdios em uma bicamada lipdica (Alberts et al., 2004).
FLUIDEZ DE MEMBRANA PLASMTICA

A fluidez da membrana controlada por diversos fatores fsicos e qumicos. a) A temperatura influencia na fluidez: quanto mais alta ou baixa, mais ou menos fluida ser a membrana, respectivamente. b) O nmero de duplas ligaes nas caudas hidrofbicas dos lipdios tambm influencia a fluidez: quanto maior o nmero de insaturaes, mais fluida a membrana. A insaturao promove uma flexo na cauda do lipdio mantendo os lipdios vizinhos afastados. c) Tambm a concentrao de colesterol influencia na fluidez: quanto mais colesterol, menos fluida. O colesterol, por ser menor e mais rgido, interage mais fortemente com os lipdios adjacentes, diminuindo sua capacidade de movimentao. d) Tamanho da cauda do lipdio: quanto mais curta a cauda do fosfolipdio mais intensa ser a flexo da cauda e, portanto, maior a fluidez da membrana.
A MEMBRANA PLASMTICA ASSIMTRICA

As monocamadas externa e interna da membrana so assimtricas, tanto na composio de lipdios como de protenas. A monocamada ex15
terna da membrana dos eritrcitos possui uma concentrao maior de fosfatidilcolina e esfingomielina, enquanto na monocamada interna predominam o fosfatidiletanolamina e a fosfatidilserina.
TRANSPORTE TRANSMEMBRANA
Existem vrias formas atravs das quais as diversas substncias podem atravessar a membrana celular. As principais e mais bem conhecidas so:
DIFUSO SIMPLES
Neste tipo de transporte, a substncia passa do meio extracelular para o meio intracelular (ou vice-versa) diretamente atravs da bicamada lipdica. A substncia transportada do meio mais concentrado para o meio menos concentrado, em decorrncia ao movimento aleatrio das partculas devido a uma energia cintica da prpria matria. No h gasto de ATP intracelular nem participao de protenas carreadoras. Nesse transporte, a molcula se dissolve na bicamada lipdica, atravessa a membrana plasmtica at alcanar o equilbrio dentro e fora da clula (Cooper, 1997). Geralmente molculas hidrofbicas ou lipossolveis so transportadas por difuso simples (Ex.: O2, CO2, N2, cidos graxos, benzeno). Quanto menor o tamanho da partcula e maior a lipossolubilidade maior ser a velocidade do transporte. As molculas polares pequenas e sem carga, tais como H2O, uria e glicerol so capazes de se difundir atravs da membrana (Fig. 10). A gua atravessa a membrana facilmente por possuir um baixo peso molecular (18 daltons) e uma alta energia cintica.
DIFUSO FACILITADA
Esse tipo de transporte tambm ocorre do meio mais concentrado para o menos concentrado (transporte passivo) s que mediado por protenas transportadoras. Essas protenas so integrais e multipasso, ou seja, atravessam a membrana vrias vezes. Elas apresentam mltiplas -hlices atravessando a bica-
Figura 10. Transporte de solutos atravs da bicamada lipdica (Alberts et al., 2004).
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mada lipdica (Fig. 11). As substncias transportadas por difuso facilitada no possuem afinidade com a bicamada lipdica. Geralmente as molculas polares e grandes sem carga (glicose ou sacarose) e os ons (Na+, K+, Ca++, Cle H+) so transportados por difuso facilitada (Fig. 10).
A)
B)
Figura 11. Protena integral com apenas uma nica -hlice transmembranar (A, unipasso) e protena integral com mltiplas -hlices transmembranar (B, multipasso). A protena B atravessa a membrana 14 vezes (Cooper, 2000).
A difuso facilitada pode ser mediada por uma protena carreadora ou por uma protena canal.
DIFUSO FACILITADA MEDIADA POR CARREADOR

As protenas carreadoras apresentam stios de ligao para o soluto a ser transportado. Aps a ligao do soluto protena carreadora, ela sofre mudana conformacional permitindo a passagem do soluto por dentro da protena para o outro lado da membrana. Os carreadores geralmente transportam acares, aminocidos e nucleotdeos. De acordo com o nmero de molculas transportadas e o sentido do transporte, o transporte pode ser classificado em: uniporte, simporte e antiporte (Fig. 12).
Figura 12. Classificao dos carreadores de membrana: uniporte, simporte ou antiporte (Alberts et al., 2004).
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a) Uniporte uma protena carreadora que transporta uma nica molcula no mesmo sentido. Ex. carreador da glicose (transporta a glicose do meio extracelular para o intracelular). b) Simporte - uma protena carreadora que transporta dois solutos diferentes no mesmo sentido. Geralmente, um transporte acoplado entre uma molcula e um on. Exemplo: Protena transportadora de Na+ e glicose. Ela possui dois stios receptores para a fixao de ambas substncias situados na face externa da membrana celular. Tanto o Na+ quanto glicose so transportados para dentro da clula. O transporte da glicose ocorre de meio menos concentrado para o mais concentrado e s ocorre graas ao transporte simultneo do sdio, que acontece do meio mais concentrado para o menos concentrado (http://www.biofisica.ufsc.br). c) Antiporte - uma protena carreadora que transporta dois solutos diferentes em sentidos contrrios. Ex. Trocador Na+/Ca++.
DIFUSO FACILITADA MEDIADA POR CANAL

Diferente da protena carreadora, a protena canal transporta o soluto ou on sem se fixar ao soluto, ou seja, os canais no apresentam stios de ligao para a molcula a ser transportada. O fluxo de ons pelo canal passivo, movido pela concentrao, pelo movimento trmico e pela diferena de potencial eltrico na membrana celular. Os canais inicos so seletivos, ou seja, as dimenses pequenas do poro foram a interao dos ons com resduos de aminocidos da protena-canal, e por essas interaes, os canais tornam-se seletivos (Cassola, 2000). Uma protena canal sofre mudanas estruturais podendo apresentar dois estados conformacionais possveis: um com o poro aberto e outro com o poro fechado (Fig. 12). O canal aberto permite a passagem do on, do meio mais concentrado para o meio menos concentrado, enquanto que, o canal fechado no permite a passagem do on. Os canais so compostos por portes ou comportas que controlam a passagem de ons pelo canal (Fig. 13). O canal de sdio formado por duas subunidades proticas, chamadas de e . A subunidade a possui 4 domnios (I, II, III e IV) inseridos na membrana celular Figura 13. Representao dos canais de Na+ e K+ mostrando o (Fig. 14). Cada domnio formado por 6 transporte dos ons e as alteraes conformacionais das comporsegmentos transmembranar (S1-S6), ou tas abrindo ou fechando os canais (Fonte: www.ceunes.ufes.br).
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seja, 6 hlices mergulhadas na membrana. Os grupamentos amino (NH2) e carboxil (COOH) da protena esto voltados para o interior da clula (Conde-Garcia, 1998, p. 38). O segmento S4 atua como o sensor de voltagem do canal. O sensor de voltagem capaz de reconhecer a voltagem de clula e comandar a abertura ou fechamento do canal.
Figura 14. Estrutura do canal de sdio (A) mostrando os 4 domnios (I, II, III e IV) formados, cada um, de 6 segmentos transmembranar (S1 a S6) que se arranjam para formar o poro (B). (Fonte: http://www.pharyngula.com).
Como as comportas dos canais so controladas? Podem ser controladas de 3 formas bsicas: a) Voltagem os canais que dependem da voltagem da clula para se abrir so chamados de canais operados por voltagem (VOC). (Fig. 15).
Figura 15. Representao das diferentes formas de ativao de um canal inico de membrana
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Exemplo: Canal de Na+ dependente de voltagem. Esse canal um pouco mais complexo por possuir duas comportas: a) comporta de ativao, localizada prxima extremidade externa do canal e b) comporta de inativao, localizada prxima extremidade interna do canal (Fig. 16). Esse canal apresenta trs estados possveis: aberto, fechado e inativado. 1) No potencial de repouso da clula, em 90 mV, a comporta de ativao fica fechada, no h entrada de sdio na clula (estado fechado). Por outro lado, a comporta de inativao est aberta (Fig. 16A). 2) Entre -70 e -50 mV, a comporta de ativao sofre mudana conformacional, abrindo o canal (estado aberto ou ativado) (Fig. 16B). 3) O aumento da voltagem que abre a comporta de ativao tambm fecha a comporta de inativao (estado inativado) (Fig. 16C). O canal s volta para o estado fechado quando a voltagem da clula estiver prxima de 90 mV. C) B) A)
Figura 16. Caracterstica do canal de Na+ operado por voltagem mostrando a ativao e inativao do canal de acordo com o potencial de membrana (Guyton, 2000, p.53, modificado por Vasconcelos, 2009).
b) Mediador qumico os canais em que a abertura da comporta depende da ligao de uma substncia qumica ao canal so chamados de canais operados por ligante (LOC). (Fig. 15). Exemplo: canal de potssio dependente de ATP (adenosina trifosfato). Esse canal se mantm fechado na presena de ATP (Conde-Garcia, 1998, p. 34). (Fig. 15). c) Ativao mecnica - so canais em que a abertura da comporta depende de uma tenso mecnica aplicada membrana, tal como, vibrao, mudana do volume ou da forma celular, acelerao, entre outros (Conde-Garcia-Aoveros, 1997). Uma animao de canal inico, transporte passivo e ativo, para melhor exemplificao, pode ser conferida no site : http://biologyanimations.blogspot.com/search/label/transport%20animation. L, clique em transport animation.
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TRANSPORTE ATIVO
No transporte ativo, o soluto transportado do meio menos concentrado para o mais concentrado. Para tanto, h consumo de ATP intracelular para transportar o soluto. As protenas carreadoras que realizam este transporte so denominadas de bomba. Exemplo: Bomba de Sdio e Potssio - transporta 3 ons Na+ para o meio extracelular e 2 ons K+ potssio para o meio intracelular, consumindo uma molcula de ATP. Ambos os ons so transportados de um meio menos concentrado para um mais concentrado do mesmo on. uma protena formada por 2 subunidades, a com uma massa relativa de 112.000 daltons (10 hlices) e a com uma massa de 35.000 daltons (1 hlice). A bomba Na+/K+ tambm uma enzima (ATPase) que hidrolisa ATP, com a liberao de ADP e a transferncia de grupo fosfato prpria bomba. a subunidade que tem atividade ATPase e, nela, esto situados os stios de ligao para os ons Na+ e K+ (Fig. 17).
Figura 17. Representao estrutural da Bomba de Na+ e K+ mostrando as 2 subunidades, a com 10 hlices e a com 1 hlice.
Sequncia de bombeamento da bomba de Na+/K+: a bomba de Na /K+, na conformao I, expe os stios de ligao para o Na+. Ela fixa 3 Na+ no interior da clula ativando a enzima ATPase. A ATPase hidroliza a molcula de ATP liberando ADP e Pi (fosfato inorgnico). O Pi transferido para a bomba e, com isso, ela passa para a conformao II. Nessa conformao, o Na + bombeado para o meio extracelular (de maior concentrao) e ela fixa 2 ons K+. A ligao do K + protena promove uma desfosforilao da bomba, ou seja, liberao do Pi. A desfosforilao faz com que a protena volte para a conformao I, bombeando os ons K + para o meio intracelular. Essa sequncia pode ser vista na Fig. 18.
+
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Figura 18. Sequncia de transporte da bomba de Na+/K+. (Fonte: http://fajerpc.magnet.fsu.edu).
IMPORTNCIAS DA BOMBA DE NA+/K+

a) Ela eletrognica, ou seja, cria uma diferena de potencial eltrico entre o citosol e o meio extracelular. Isso se deve ao fato dela bombear para o meio externo mais ctions (3 ons Na+) do que para o meio interno (2 ons K+). Dessa forma, a bomba contribui para que a clula fique mais negativa do que o meio extracelular. A diferena de potencial gerada pela bomba de apenas -4 mV (Fig. 19).
Figura 19. A bomba de Na+/K+ ATPase eletrognica
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b) Ela cria um gradiente de concentrao. A maioria das clulas animais mantm uma elevada concentrao de K+ (140 mM) e baixa concentrao de Na+ (14 mM) no citosol. No meio extracelular, a concentrao de Na+ mantida alta (142 mM) enquanto que a concentrao de K+ mantida baixa (4 mM). Essa diferena de concentrao de Na+ e K+ entre o citosol e o meio extracelular se deve ao trabalho da bomba de Na +/K+. A manuteno desse gradiente importante para manter o potencial de repouso da clula (Aires, 2008, p.128; Guyton, 2006, p.51). c) Ela controla o volume hdrico da clula. Por bombear mais ctions (Na+) para o meio extracelular e pelo fato de a membrana apresentar baixa permeabilidade ao Na+, no potencial de repouso, o Na+ bombeado para o exterior da clula, no retorna rapidamente para citosol. Ficando no meio extracelular, o Na+ cria um gradiente osmtico favorvel a sada da gua da clula. Dessa forma, a bomba de Na+/K+ ajuda a manter o volume de gua constante no citosol. Voc quer v uma animao da bomba de Na+/K+? Consulte o site: http://www.wiley.com/legacy/college/boyer/0470003790/animations/ membrane_transport/membrane_transport.swf. Exemplo: Bomba de clcio. uma protena que possui 10 hlices e dois stios receptores para o on clcio. Essas bombas so encontradas tanto na membrana plasmtica quanto na membrana do retculo sarcoplamstico (RS). A bomba de Ca++ de membrana promove o efluxo de clcio (do meio intracelular para o meio extracelular), enquanto que a bomba do RS bombeia o clcio do citosol para o interior do retculo. Elas usam a energia libertada na hidrlise do ATP.
ATIVIDADES
Descreva o experimento que descobriu a existncia da Bomba de Na+ e K+ e que era um transporte dependente de ATP.
COMENTRIO SOBRE AS ATIVIDADES

O experimento foi realizado por Hodgkin & Keynes (1955) em axnio gigante de lula utilizando ons Na+ radioativos. A descoberta que era um transporte dependente de ATP surgiu com uso de 2 substncias: o dinitrofenol (DNP) e o cianeto (CN). Voc poderia ler sobre esses experimentos no livro de Biofsica do autor Conde-Garcia, 1998. Nas pginas 10 e 11 voc encontrar a descrio do experimento.
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CONCLUSO
Como vimos no decorrer desta aula a membrana plasmtica exerce vrias funes importantes para a clula. A membrana composta por trs tipos bsicos de molculas lipdios, protenas e carboidratos que trabalham de forma integrada mais com funes distintas. Alm de separar o citoplasma do meio extracelular, ela funciona como barreira fsica, e realiza o transporte de solutos atravs de protenas transportadoras. Alguns solutos apresentam afinidade com a membrana e so transportados diretamente pela bicamada lipdica. Por ser o componente celular mais externo e possuir protenas receptoras, a membrana tem a capacidade de reconhecer outras clulas e diversos tipos de molculas, tais como drogas e hormnios.
RESUMO
A membrana celular formada por uma dupla camada de lipdios dispostos com as pores polares voltadas para os meios intra e extracelular e as caudas hidrofbicas voltadas para o interior da membrana. As protenas que compem a membrana so classificadas como integrais, ou seja, atravessam toda a extenso da membrana ou perifricas que so as protenas localizadas ou na monocamada interna ou externa da membrana. Os carboidratos tambm so encontrados na membrana especificamente na sua monocamada externa. A membrana um fluido bidimensional, com assimetria entre as monocamadas internas e externas. So fatores que diminuem a fluidez da membrana: ausncia da dupla ligao cis na cauda do fosfolipdio, cadeias longas de cido graxo, presena do colesterol e baixa temperatura. Os lipdios de membrana podem realizar 4 movimentos: flip-flop, difuso lateral, rotao e flexo das caudas. O transporte de pequenos solutos pela membrana pode ser feito de forma passiva (sem gasto de energia) ou de forma ativa (com gasto de energia). Molculas hidrofbicas e molculas hidroflicas pequenas e sem carga eltrica so transportadas pela membrana por difuso simples, ou seja, diretamente pela bicamada lipdica. Por outro lado, as molculas hidroflicas grandes e sem carga eltrica so transportadas por difuso facilitada. Esta difuso pode ser mediada por uma protena canal ou carreador. Os carreadores so classificados em uniporte, simporte ou antiporte a depender do sentido do transporte e do nmero de molculas transportadas. Tanto a difuso simples quanto a facilitada so transportes passivos, ou seja, o soluto transportado do meio de maior concentrao para o de menor concentrao. O transporte ativo mediado por protenas carreadoras, chamadas de bombas, no qual
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o soluto ser transportado de um meio de menor concentrao para um de maior concentrao, com gasto de ATP. A bomba de Na+/K+ uma protena carreadora que transporta 3 ons Na+ para o meio extracelular e 2 ons K+ para o meio intracelular. Com este transporte a bomba cria diferenas de concentrao e cargas entre o citosol e o meio extracelular. Alm disso, a bomba tem uma importncia fundamental no controle hdrico da clula e ajuda a restabelecer as concentraes originais de sdio e potssio aps um potencial de ao.
ATIVIDADES
1. Explique 3 fatores que podem aumentar a fluidez da membrana? 2. Descreva os movimentos possveis realizados pelos lipdios. 3. Qual a diferena principal no transporte realizado por um canal e por um carreador? 4. Descreva o ciclo de bombeamento da bomba de Na+/K+. 5. Como a bomba de Na+/K+ controla o volume hdrico da clula?
PRXIMA AULA
Agora que voc aprendeu a estrutura da membrana plasmtica e os principais mecanismos de transporte realizados por ela, vamos estudar, na prxima aula, a formao do potencial de repouso da clula, assim como, o potencial de ao gerado pelas clulas excitveis.
REFERNCIAS
AIRES, M. M. Fisiologia. 3 ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2008. ALBERTS, B.; JOHNSON, A.; P. Biologia Molecular da Clula, Ed. ArtMed, 2004. BERNE, R.M.; Levy, M.N. Physiology, 7 ed. Ed. Mosby Year Book, 2008. CASSOLA, A.C. Atualizao em fisiologia e fisiopatologia renal: canais inicos nas clulas do epitlio tubular renal. J Bras Nefrol, p. 176-180, 2000. COOPER, G.M. The cell. A molecular approach. Ed. AMS press, 1997. CONDE-GARCIA, E.A.C. Biofsica. Ed. Savier, 1998. http://www.biofisica.ufsc.br CONDE-GARCIA-AOVEROS, J.; COREY, D.P. The molecules of mechanosensation. Annual Review of Neuroscience, p. 567-594, 1997.
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GUYTON, A.C.; HALL, J.E. Tratado de fisiologia mdica, 11 ed. Ed. Elsevier, 2006. http://www.ar.geocities.com/moni2201/membrana_celular.htm http://www.biofisica.ufsc.br http://www.ceunes.ufes.br http://www.pharyngula.com/index/science/2004 http://www.wiley.com/legacy/college/boyer/0470003790/animations/ membrane_transport/membrane_transport.swf.
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POTENCIAL DE MEMBRANA E POTENCIAL DE AO
META
Apresentar os potenciais de membrana celular, gerados tanto em repouso quanto durante a atividade, em clulas nervosas e musculares.
OBJETIVOS
Ao final desta aula, o aluno dever: descrever o mecanismo do potencial de repouso, assim como, os fatores responsveis em gerar esse potencial; aprender como calcular o potencial de difuso quando a membrana permevel a um ou a diferentes ons; relacionar as fases do potencial de ao com o movimento de ons atravs da membrana plasmtica; e diferenciar o potencial de repouso de uma clula nervosa e muscular.
PR-REQUISITOS
Para um bom entendimento desta aula preciso que voc j tenha estudado o captulo 1 deste livro. L voc aprender a estrutura e a composio da membrana plasmtica, e como feito o transporte de solutos atravs dela.
Axnio ativo (Fonte: http://thumbs.dreamstime.com).
INTRODUO
Atravs da membrana plasmtica de todas as clulas vivas do corpo humano existem potenciais eltricos, ou seja, uma diferena de voltagem entre os meios intra e extracelular. O interior das clulas mais negativo em relao ao meio extracelular. Esse potencial negativo dentro da clula se deve ao fluxo de diferentes ons atravs da membrana e tambm a ao da bomba de Na+/K+. Algumas clulas do corpo humano so excitveis, tais como as clulas nervosas e musculares. Essas clulas so capazes de deflagrar potenciais de ao, que so variaes bruscas do potencial de repouso cuja forma depende do tecido estimulado. Atravs do potencial de ao, as clulas transmitem informaes de uma clula outra e, nos msculos, d incio ao mecanismo da contrao muscular. Nos nervos, por outro lado, eles transmitem informaes tteis, dolorosas, trmicas, entre outras.
Neurnio da cobertura superior do crebro. Para poder transmitir o impulso nervoso, os neurnios contm os dentritos (uma srie de ramificaes que mantm contato com outras clulas para receber a informao) (Fonte: http://diariodebiologia.com).
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Potencial de membrana e potencial de ao
Aula
O POTENCIAL DE REPOUSO
O potencial de repouso de uma clula tem sua origem em dois mecanismos simples: 1) difuso de ons atravs da membrana (Na+ e K+) e, 2) uma pequena contribuio da bomba de Na+/K+. O potencial de repouso de uma clula nervosa, quando no est transmitindo um impulso eltrico, de aproximadamente 90 mV. Isso significa dizer que o potencial dentro da clula 90 mV mais negativo do que o meio extracelular. Nesta aula, discutiremos os mecanismos responsveis por essa eletronegatividade existente no interior da clula em condio de repouso, ou seja, quando ela no est transmitindo impulsos eltricos ao logo de sua membrana.
POTENCIAIS ELTRICOS DE MEMBRANA RESULTANTES DA DIFUSO DE ONS

Ns vimos na primeira aula que a bomba de Na+/K+ responsvel pelo gradiente de concentrao de Na+ e K+ atravs da membrana. A Tabela 1 mostra as concentraes de Na+, K+, Cl- e Ca++ no interior e exterior de uma clula em repouso. Tabela 1. Concentraes inicas nos meios intra e extracelular em uma clula hipottica on Interior da clula Exterior da clula Na+ 14 mM 142 mM + K 140 mM 4 mM Cl5 mM 120 mM ++ -4 Ca 10 mM 2 mM Como podemos observar, a concentrao de K+ no meio intracelular mais alta do que no meio extracelular. Considerando uma membrana permevel somente ao K+, haver uma grande difuso destes ons para o exterior da clula que se faz do meio mais concentrado, para o menos concentrado. Como o K+ um on de carga positiva (ction), medida que ele se difunde para o exterior da clula, transporta carga positiva para este meio, que vai ficando eletropositivo em relao ao meio intracelular. Com isso, criada uma diferena de potencial eltrico entre os meios intra e extracelular. A eletropositividade gerada no exterior da clula vai dificultar a difuso de mais K+ para fora dela. Como o meio interno tornou-se negativo, este potencial vai favorecer a difuso de K+ em sentido contrrio, gerando um fluxo eltrico do meio extra para o intracelular (Conde-Garcia, 1998, p.15; Guyton, 2006, p.49).
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A diferena de potencial eltrico entre as duas faces de membrana que impede a difuso de um determinado on chamada de potencial de equilbrio do on ou potencial de Nernst. A equao de Nernst permite que seja calculado o potencial de equilbrio de um on. Para utilizar essa equao deve-se admitir que o potencial no meio extracelular zero, que a membrana permevel apenas a um nico on e ainda preciso conhecer as concentraes interna e externa do on. O potencial calculado, em mV, se refere ao potencial dentro da clula. Vejamos a equao usada para calcular potencial de equilbrio de um on univalente (valncia 1), tal como o Na+ e K+: Equao 1: [ s ]e Vs = 61,5 log (mV) [ s ]i Onde: Vs- a voltagem intracelular produzida por um on s, considerando o meio extracelular com potencial nulo [ s ]e concentrao externa do on s [ s ]i concentrao interna do on s
Vejamos abaixo o clculo do potencial de equilbrio quando o on s o Na+. Usaremos as concentraes informadas na Tabela 1. 142 VNa+ = 61,5 log 14 VNa+ = 61,5 log 10,14 VNa+ = 61,5 (1,006) VNa+ = + 61,8 mV Que concluso voc pode obter com este resultado? Se o on Na+ fosse o nico on a se difundir pela membrana e suas concentraes se mantivessem como foi especificado, ento o potencial de repouso da clula seria positivo e valeria 61,8 mV. Como o potencial de repouso normal tem um valor aproximado de 90 mV, conclui-se que a difuso de Na+ pela membrana no deve ser importante para a gerao do potencial de repouso. 1. Agora calcule o potencial de equilbrio para o on K+. As concentraes deste on voc encontrar na Tabela 1. Comentrio: Voc chegou ao valor de 94,96 mV ? Ento, parabns !!! Se no conseguiu obter este valor, refaa o mtodo de clculo e tambm observe se no cometeu erro ao processar as operaes matemticas. Veja que o resultado do potencial de equilbrio do K+ deve ser negativo, uma
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vez que a difuso deste on se faz do meio intracelular para o meio extracelular, deixando aquele meio mais eletronegativo. 2. Agora calcule o potencial de equilbrio para o on Cl . As concentraes tambm esto na Tabela 1. Agora, como o Cl- um on negativo (nion) a equao de Nernst ficar na forma: Equao 2: [Cl-]e VCl- = - 61,5 log (mV) [Cl-]i Comentrio: Voc encontrou o valor 84,88 mV? Parabns !!! Se no alcanou este valor, ento refaa o mtodo de clculo e veja se no cometeu erro ao processar as operaes matemticas. Veja que o resultado do potencial de equilbrio para o on Cl- tambm deve ser negativo, uma vez que ele um nion e que sua difuso - se faz do meio extracelular para o meio intracelular. 3. Agora calcule o potencial de equilbrio para o on Ca++. As concentraes tambm esto na Tabela 1. O Ca++ um on com valncia +2, assim a equao ser: Equao 3: [Ca++]e VCa++ = 30,75 log (mV) [Ca++]i Comentrio: Voc encontrou o valor +132,25 mV? Parabns !!! Se no alcanou este valor, ento refaa o mtodo de clculo e veja se no cometeu erro ao processar as operaes matemticas. Veja que o resultado do potencial de equilbrio para o on Ca++ deve ser positivo, uma vez que a difuso desse ction se faz do meio extracelular para o meio intracelular. 4. Por que entre os ons para os quais a membrana permevel, o K+ o que tem maior influncia sobre a gerao do potencial de repouso da clula? Comentrio: para que voc possa responder a esta questo preciso que estude os experimentos feitos por Hodgkin & Horowicz (1959) que esto mostrados nas Figs. 1.16 e 1.17 do livro BIOFISICA de Conde-Garcia (1998).
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Como foi dito, a equao de Nernst somente usada quando a membrana permevel a apenas um nico on. Quando vrios ons puderem atravess-la, o potencial de membrana depender dos seguintes fatores: a) concentraes dos ons nos meios intra e extracelular b) permeabilidade (P) da membrana para cada on A equao que permite o clculo deste potencial, considerando a membrana ser permevel apenas aos ons univalentes Na+ e K+, conhecida como equao de Goldman-Hodgkin-Katz: Equao 4 V = 61,5 log PNa+ . [Na+]e . + PK+ .[K+] e (mV) PNa+ . [Na+]i + PK+ .[K+]i
A membrana da clula nervosa, durante o repouso, 100 vezes mais permevel ao potssio do que ao sdio. Dessa forma, a PK+ = 100 e ao PNa+ = 1. 5. Agora voc vai substituir os valores de concentrao e permeabilidade na Eq. 4 e vai calcular o potencial intracelular que uma clula adquire quando permevel, ao mesmo tempo, ao Na+ e ao K+. Comentrio: Como a membrana, em repouso, muito mais permevel ao potssio do que ao sdio, de se esperar que a difuso do potssio contribua mais para o potencial de repouso que a difuso do sdio. Sendo assim, o potencial intracelular resultante gerado pelos 2 ons deve ser negativo e prximo ao valor do potencial de equilbrio do potssio. O valor calculado pela equao de Goldman-Hodgkin-Katz deve ser aproximadamente 86 mV. Voc encontrou isto? Parabns !!! Se no chegou a este valor, ento refaa o mtodo de clculo e veja se no cometeu erro ao processar as operaes matemticas. Vale ressaltar que a difuso de Na+ e K+, em condio de repouso, feita atravs de um canal de vazamento de Na+ e K+. Esse canal permite que os ons citados atravessem a membrana celular saindo do meio mais concentrado para o menos concentrado. O fluxo de potssio maior do que de sdio porque a permeabilidade destes ons maior (Fig. 20).
Figura 20. Canal de vazamento de Na+ e K+. Por esse canal acontece sada de potssio e entrada de sdio.
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CONTRIBUIO DA BOMBA DE NA+/K+ PARA O POTENCIAL DE REPOUSO

A bomba de Na+/K+ d uma contribuio adicional para o potencial de repouso negativo da clula. Isso se deve ao fato de a bomba transportar 3 ons Na+ para fora da clula e apenas 2 ons K+ para o interior dela. Com isso, a cada ciclo de bombeamento, a clula perde uma carga positiva, gerando um potencial negativo no meio intracelular. Clculos mostram que bomba Na+/K+ responsvel pela gerao de 4 mV do valor total do potencial de repouso. Levando em considerao que este potencial de 90 mV, podemos perceber que a bomba contribui pouco para o potencial de repouso final. Podemos concluir que a difuso simultnea de Na+ e K+ atravs da membrana produz um potencial de membrana de cerca de -86 mV, grande parte determinada pela sada (efluxo) de potssio da clula. E que a bomba de Na+/K+ contribui com um potencial de -4 mV. Os dois mecanismos juntos, a difuso de Na+ e K+ pelos canais inicos e o trabalho da bomba de Na+/K+, criam um potencial final de -90 mV.
POTENCIAL DE AO NA CLULA NERVOSA

As informaes nervosas so transmitidas por meio de potenciais de ao. Este evento eltrico corresponde variao rpida do potencial de repouso da clula. A clula sai do seu potencial de repouso (negativo) e passa para um potencial intracelular positivo, para, logo em seguida, retornar ao potencial de repouso (negativo) inicial. Para que a clula fique positiva, ou seja, para que seja gerado um potencial de ao, preciso que ocorra um influxo de cargas positivas na clula. Por outro lado, para que ela retome o seu estado de repouso, preciso que ocorra a sada de cargas positivas. A Fig. 21 mostra uma representao grfica de um potencial de ao de clula nervosa. Este potencial apresenta as fases que esto descritas abaixo: a) Fase de repouso corresponde ao potencial de repouso da membrana. Nesta fase, diz-se que a clula est polarizada, por apresentar uma diferena de potencial entre os lados da membrana sendo o seu interior negativo. Na Fig. 21 observa-se que este potencial de -90 mV. b) Fase de despolarizao nesta fase o potencial de repouso torna-se menos negativo em relao ao que possua no estado de repouso. O potencial intracelular aumenta de -90 mV, ultrapassando a voltagem de 0 mV e tornando-se positivo. Isto somente ocorrer se houver um estmulo eltrico que eleve o potencial da membrana at a voltagem limiar. Esta volta33
gem est situada a cerca de 20 mV acima do potencial de repouso. Assim, se o potencial de repouso de 90 mV, o limiar se encontrar em torno de 70 mV. Quando a voltagem limiar alcanada, ocorre uma intensa reduo da resistncia da membrana (Conde-Garcia, 1998, p.26) devido abertura dos canais de Na+ operados por voltagem. A abertura destes canais promove a entrada de Na+ e consequente aumento da voltagem da clula, fator que estimula a abertura de novos canais de Na+. Com isso a clula entra em um ciclo de feedback positivo (Guyton, 2006, p.56). Quando a clula sofre despolarizao e sua voltagem ultrapassa 0 mV, ou seja, quando ocorre inverso do potencial de membrana, diz-se que aconteceu o overshoot (Fig. 21). O overshoot se deve a um grande influxo de ons Na+ na clula.
Figura 21. Representao grfica de um potencial de ao de uma clula nervosa mostrando as suas diferentes fases.
Para comprovar a existncia do overshoot, Hodgkin & Katz (1949) realizaram um experimento com axnio gigante de lula (Fig. 22) registrando o potencial de ao (Conde-Garcia, 1998, p.21) em 3 situaes: 1. axnio mergulhado em gua do mar contendo concentrao normal de Na+ (curva 1). 2. axnio mergulhado em gua do mar contendo concentrao de Na+ reduzida para 33 % (curva 2). 3. axnio mergulhado em gua do mar contendo concentrao normal de Na+ (curva 3). Com a reduo do Na+ extracelular (curva 2) foi observada uma reduo da amplitude do potencial de ao, abolindo o fenmeno do overshoot, bem como uma reduo da taxa de despolarizao deste sinal eltrico. Com isso, pde-se concluir que o overshoot se deve entrada de sdio na clula. Quando a concentrao de Na+ no meio extracelular foi restaurada, o potencial de ao voltou a apresentar a amplitude que possua no controle (curva 3) (Conde-Garcia, 1998, p.21).
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Figura 22. Influncia da concentrao extracelular do sdio sobre o potencial de ao de axnio gigante de lula (Conde-Garcia, 1998, p.21).
O advento da tcnica de voltage clamp, em 1949, permitiu conhecer as correntes inicas que so responsveis por cada fase do potencial de ao. A tcnica consiste em manter a voltagem da clula fixada em valores determinados e ento medir as correntes que atravessam a membrana plasmtica. A Fig. 23 mostra o registro das correntes inicas medidas em 3 situaes: A) axnio mergulhado em gua do mar contendo concentrao normal de Na+; B) axnio mergulhado em gua do mar contendo cloreto de colina para substituir o cloreto de sdio na soluo externa; C) axnio mergulhado em gua do mar contendo concentrao normal de Na+ Esta figura mostra registros que foram obtidos com o patch clamp. Em cima, est o protocolo de pulso eltrico aplicado clula. Observe que inicialmente aplicou-se um pulso de corrente despolarizante elevando o potencial da membrana de 50 mV para +10 mV. Esse pulso permitiu a abertura dos canais inicos e o registro de suas correntes. Em A, podem ser observadas trs correntes: 1) corrente de sada resultante da descarga do capacitor de membrana, 2) corrente de entrada e 3) corrente de sada. Em B, na presena de colina, observa-se que a corrente 2 desapareceu. Pode-se concluir que a corrente de entrada era decorrente do influxo de ons Na+. Em C, as correntes foram restauradas.
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Figura 23. Registro das correntes inicas em axnio gigante de lula. No painel superior, est o protocolo de pulsos aplicado clula (Conde-Garcia, 1998, p.22).
O mesmo aumento de voltagem que ativa o canal de Na+ operado por voltagem e permite que a clula despolarize, inativa o canal de Na+. Na primeira aula vimos que este canal pode apresentar 3 estados conformacionais: 1) ativado (permite o difuso de Na+), inativado (no permite a difuso de Na+) e 3) fechado (no permite a difuso de Na+). Qual a diferena entre um canal de Na+ inativado e fechado? O canal fechado capaz de se abrir quando a clula recebe um estmulo e o canal inativado no se abre sem que a clula esteja repolarizada ou prxima do estado de repouso. Portanto, logo aps a ativao do canal de Na+, ocorre a inativao impedindo que mais ons Na+ entrem na clula. Nesse momento, a clula inicia a repolarizao. c) Fase de repolarizao na clula nervosa, aproximadamente um milissegundo aps a despolarizao, a membrana torna-se muito permevel aos ons K+. Os canais por onde passam este on ativado quando a voltagem da clula aumenta de -90 mV a 0 mV. A condutncia da membrana ao K+ aumenta lentamente. Como a abertura deste canal lenta, considera-se que ele est realmente aberto quando o canal de Na+ j est fechado. Como o K+ est mais concentrado dentro da clula, ocorre um efluxo deste on para o meio extracelular fazendo com que a clula recupere o
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seu potencial de repouso negativo. A bomba de sdio e potssio trabalha para manter constantes as concentraes de Na+ e K+ nos meios intra e extracelular, fazendo com que a clula se torne apta a responder com um novo potencial de ao. d) Fase de hiperpolarizao Essa fase pode aparecer em algumas clulas durante o processo de repolarizao celular. Na hiperpolarizao, a clula atinge voltagens mais negativas do que o potencial de repouso inicial. Isso ocorre devido a uma grande permeabilidade da clula aos ons potssio, o que provoca um grande efluxo deste on. Esse fenmeno dura apenas milsimos de segundo e logo depois a clula recupera o seu potencial de repouso normal.
CONDUTNCIA DA MEMBRANA AO NA+ E K+

A Fig. 24 mostra um potencial de ao de axnio gigante de lula e as variaes de condutncia da membrana aos ons Na+ e K+. Segundo Hodgkin & Huxley (1952), o aumento da condutncia da membrana ao Na+ coincide com a fase de despolarizao da clula. Nota-se que a condutncia ao Na+ aumenta rapidamente e, logo depois, decresce. Isso se deve a inativao dos canais de Na+. Por outro lado, a fase de repolarizao se deve a um aumento da condutncia da membrana aos ons K+.Com isso, ocorre uma sada excessiva de K+ da clula fazendo com que ela hiperpolarize (Conde-Garcia, 1998, p.23).
Figura 24. Potencial de ao de axnio gigante de lula (linha tracejada) e as variaes de condutncia da membrana aos ons Na+ e K+. (Fonte: http://www.psy.jhu.edu).
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PROPAGAO DO POTENCIAL DE AO
No repouso, o interior do neurnio est eletronegativo devido ao efluxo de ons K+ e ao trabalho da bomba de Na+/K+, como discutido anteriormente (Fig. 25). Quando a clula estimulada e o limiar de estimulao alcanado, ocorre abertura de canais de Na+ o que promove a entrada deste ction tornando a clula carregada positivamente. O aumento da voltagem estimula a abertura de novos canais de Na+ da membrana. A corrente despolarizante, transportada pelo Na+, se propaga em ambas as direes ao longo do axnio. Portanto, uma membrana excitvel no se propaga em nica direo a partir do ponto estimulado. Aps a passagem do potencial de ao por uma regio da membrana, os canais de Na+ abertos se fecham enquanto que os canais de K+ se abrem, promovendo a repolarizao e o restabelecimento do potencial de repouso. A onda eltrica assim formada conhecida como impulso nervoso ou muscular.
Figura 25. Propagao do potencial de ao ao longo de uma clula nervosa (Fonte: http://www.passeiweb.com).
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PRINCPIO DO TUDO OU NADA

A partir do momento em que, num ambiente adequado, uma clula despolariza e o seu limiar de estimulao alcanado, o potencial de ao inevitvel. Se este limiar no for atingido, ou seja, se o influxo de sdio no for suficientemente forte para despolarizar adequadamente a clula ento no ocorrer o potencial de ao. Por isto, o processo de produo deste potencial conhecido como sendo um fenmeno do tipo tudo ou nada e se aplica a qualquer clula excitvel (Guyton, 2006, p.56).
VELOCIDADE DE PROPAGAO DO POTENCIAL DE AO

A velocidade de propagao do potencial de ao em clulas nervosas de 0,25 m/s em fibras amielnicas e de 100 m/s naquelas mielinizadas. A mielina funciona como um isolante eltrico e constituda por lipdios. Nas fibras mielinizadas, a membrana axnica somente est exposta nos ndulos de Ranvier (procure conhecer o que so tais ndulos) e como eles esto separados por uma distncia relativamente grande o potencial de ao nestas fibras salta de ndulo para ndulo ao invs de propagar-se de forma contnua, isto , ponto-a-ponto (Guyton, 2006, p.56).
POTENCIAL DE AO DA CLULA CARDACA

O comportamento eltrico do corao tem sido estudado com o auxlio de microeletrodos de vidro cuja ponta, por ser diminuta, pode perfurar a membrana celular sem alterar significativamente o funcionamento normal dos cardiomicitos. No msculo cardaco, trs tipos de potenciais de ao podem ser observados: 1) potencial de ao rpido ou completo, o que apresenta uma fase de despolarizao ampla e de desenvolvimento rpido e que caracterstico dos potenciais de ao das clulas atrias, ventriculares, feixe de His e fibras de Purkinje, 2) potencial de ao lento ou incompleto, os que se despolarizam com baixa taxa de variao de voltagem e possuem pequena amplitude e potencial de repouso inconstante ocorrendo nesta fase uma despolarizao diastlica lenta. Estas respostas eltricas, chamadas de lentas, apresentam-se, caracteristicamente, nos ndulos sinusal e atrioventricular (Mendez, 1982; Conde-Garcia, 1998, p.28) e, finalmente, 3) potencial de ao de transio. Estes tm um potencial de repouso constante, mas o componente rpido que gera a fase de despolarizao no completamente desenvolvido e, por isso, a amplitude do potencial de ao produzida pelo componente lento que est associado ao plat desses potenciais. O potencial de ao de uma clula cardaca apresenta 4 fases, como pode ser visto na Fig. 26 que mostra um potencial de ao completo.
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Figura 26. Fases do potencial de ao de uma clula cardaca (Conde-Garcia, 1998, p.28).
Fase 0 (despolarizao). Quando a diferena de potencial entre os lados da membrana de uma clula miocrdica atrial ou ventricular atinge o potencial limiar, os canais rpidos de sdio, inicialmente, fechados, comeam a abrir-se rapidamente permitindo que este on se mova do meio externo, onde est mais concentrado, para o meio intracelular. Essa rpida difuso de Na+ promove uma despolarizao rpida e o potencial eltrico do interior da clula acaba por inverter sua polaridade, deixando de ser negativo (fase de repouso) para se tornar positivo (fase 0). A passagem do sdio pela membrana das clulas se d atravs dos canais rpidos de Na+, que so protenas formadoras de poros e cuja configurao estrutural depende essencialmente da diferena de potencial eltrico a ela aplicada. O influxo de Na+ limitado pela prpria despolarizao celular, pois, neste tipo de canal, ocorre o processo de inativao. Fase 1 (repolarizao incompleta). Durante esta fase, acontece uma repolarizao parcial da clula devido ao efluxo de K+ atravs dos canais Kto e ao influxo de Cl-. O canal Kto (transient outward) um canal de ativao transitria. ativado na fase 0 do potencial de ao mas, logo em seguida, sofre inativao. A sada de ons K+ por esse canal promove uma leve diminuio do potencial de membrana, mas no permite a completa repolarizao da clula. Fase 2 (plat). a fase em que a clula permanece despolarizada. Ocorre influxo de Na+ e Ca++ que passam pelos canais lentos de Ca++ (canal de clcio tipo-L) existentes na membrana celular. A voltagem limiar para a abertura destes canais est em torno de 40 a 50 mV. Durante essa fase, tambm h uma diminuio da condutncia global da membrana ao K+, permitindo que a clula mantenha-se despolarizada. Fase 3 (repolarizao). Nesta fase, a condutncia global ao K+ retoma o seu valor original e, como o interior da clula est positivo em relao ao exterior, h um rpido efluxo de K+, transferindo carga positi-
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va para fora da clula e permitindo assim que o potencial negativo intracelular seja novamente restabelecido. A este processo chamase de repolarizao. Durante esta fase, ocorre a abertura de vrios tipos de canais de potssio (Hoffman; Cranefield, 1993; Conde-Garcia, 1998, p.28). - Canal tipo K1 (inward rectifier) na fase de repouso a condutncia do canal K1 est alta. Com a despolarizao da clula, a condutncia deste canal diminui no permitindo que o K+ saia da clula. Isso permite que a clula se mantenha despolarizada, ou seja, sua voltagem permanea constante formando assim um plat na resposta eltrica da clula. Quando a condutncia desses canais volta a aumentar a clula inicia o seu processo de repolarizao (Conde-Garcia, 1998, p.31). - Canal tipo K (delayed rectifier) a condutncia deste canal, baixa durante o repouso, aumenta progressivamente a partir do incio da despolarizao da clula (fase 0). A condutncia torna-se mxima no final da fase 2, fazendo com que o efluxo de ons K+ por esse canal contribua para a repolarizao celular. Fase 4 (repouso). Aps completado o processo de repolarizao, a clula recupera o seu potencial de repouso negativo. A Fig. 27 mostra as variaes da condutncia da membrana aos ons + Na , K+ e Ca++ em clula cardaca. Nota-se que quando a clula cardaca inicia o seu processo de despolarizao, fase 0, ocorre um aumento sbito da condutncia da membrana ao Na+. Entretanto, como o canal logo se inativa, a condutncia diminui. Na fase de plat, a condutncia da membrana ao Na+ est ligeiramente aumentada. Isso se deve a entrada de Na+ pelos canais lentos de Ca++. Por outro lado, com a despolarizao celular a condutncia da membrana ao K+ diminui. Como foi dito, o impedimento para que o K+ saia da clula contribui para mant-la em plat. A condutncia da membrana ao K+ volta a aumentar no final da fase 2 o que ir favorecer a repolarizao da micito cardaco. A condutncia da membrana ao Ca++ somente aumenta na fase de plat. Apesar do pequeno aumento de condutncia, a grande diferena de concentrao de Ca++ entre as duas faces da membrana permite um Figura 27. Potencial de ao de uma clula cardaca (A) e grande influxo desse on na clula (Conde- variaes da condutncia da membrana aos ons Na+, K+ e Ca++(B) (Conde-Garcia, 1998, p.29). Garcia, 1998, p.29).
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POTENCIAL DE AO LENTO
As clulas marcapasso apresentam potenciais de ao com fase 0 caracterizada por uma taxa de despolarizao muito baixa (< 50 V/s), bem como por uma ausncia das fases 1 e 2 (Fig. 28). As clulas sinusais so auto-excitveis em virtude de apresentarem uma fase 4 instvel. Nela ocorre uma despolarizao diastlica lenta (DDL), tambm conhecida como potencial marcapasso. Segundo Lipsius et al. (2001), a DDL produzida por vrios fatores, entre eles: 1) diminuio progressiva da condutncia da membrana ao K+; 2) aumento do influxo de Na + atravs dos canais funny, que so ativados pela hiperpolarizao da clula; 3) aumento do influxo de Ca +2 atravs dos canais tipo-L e tipo-T, e 4) aumento da corrente de entrada por meio do trocador Na +/Ca +2. Esta despolarizao lenta progride at que seja alcanado o potencial limiar quando, ento, o nmero de canais de Na+ e de Ca+2 abertos, por unidade de rea da membrana, supera o nmero desses canais que esto fechados, levando uma corrente despolarizante para o interior das clulas (fase 0). Em seguida, aps um plat incompleto, a condutncia global da membrana ao K+ cresce permitindo a sua sada da clula, produzindo a repolarizao. Este fenmeno se desenvolve mais lentamente do que a despolarizao (Carvalho et al., 1999).
Figura 28. Potencial de ao de clula marcapasso (Fonte: http://www.virtual.epm.br).
A frequncia com que as clulas marcapasso geram potencias de ao depende de vrios fatores, tais como: 1) taxa de variao da despolarizao, pois quanto maior a inclinao, menor ser o tempo
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para que o potencial limiar seja atingido e, consequentemente, maior ser a frequncia de produo dos potenciais de ao; 2) nvel do potencial limiar, pois quanto mais prximo estiver do potencial diastlico mximo, maior ser a frequncia do marcapasso e 3) nvel do potencial diastlico mximo, pois quanto mais hiperpolarizada, menor ser a frequncia do marcapasso (West, 1972; Cranefield, 1975; Katz, 1977). O corao inervado tanto pelo sistema simptico, quanto pelo parassimptico, e esses nervos desempenham um importante papel na regulao da frequncia do marcapasso. Sob estimulao vagal, h aumento na liberao tissular de acetilcolina, o que leva abertura de canais de K +, hiperpolarizando a clula e tornando a DDL mais lenta e, consequentemente, reduzindo a taxa de potenciais de ao gerados pelo marcapasso. Inversamente, a estimulao simptica produz a liberao de catecolaminas nos terminais ps-sinpticos, o que estimula a abertura de canais de Na+ e Ca+2, acelerando a DDL, apressando a despolarizao das clulas e, por conseguinte, aumentando a frequncia do marcapasso (Carvalho et al., 1999)
CONCLUSO
Podemos concluir que o fluxo de ons atravs da membrana plasmtica determina o seu potencial de repouso e o seu potencial de ao. O potencial de repouso negativo se deve, principalmente, a sada de potssio das clulas atravs dos canais de vazamento e ao trabalho da bomba de Na+/K+. Durante o potencial de ao, o influxo de Na+ promove a despolarizao celular, enquanto que o efluxo K+ promove a sua repolarizao. O potencial de ao em clula cardaca envolve a participao do on clcio. Este entra na clula na fase 2 do potencial de ao e, a sua entrada, ir disparar a liberao subsequente de clcio estocado no retculo sarcoplasmtico. O aumento do clcio livre no citoplasma ir favorecer a contrao muscular. O potencial de ao de clulas marcapasso tem como caracterstica principal a despolarizao diastlica lenta, no qual a clula despolariza progressivamente at alcanar o limiar de estimulao. A frequncia de disparo destas clulas ir determinar a frequncia cardaca do indivduo.
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RESUMO
No potencial de repouso, o interior do neurnio est eletronegativo em relao ao meio extracelular. Esta eletronegatividade se deve principalmente a sada de K+ da clula atravs dos canais de vazamento e ao trabalho da bomba de Na+/K+. Durante o potencial de ao a clula passa a ficar mais permevel ao Na+, que passa a entrar na clula atravs dos canais dependentes de voltagem permitindo que a clula despolarize. Logo em seguida, a membrana torna-se permevel ao K+ deixando sair este on, repolarizando e recuperando o seu estado de repouso. Em clula muscular cardaca, o Na+ tambm on responsvel pela despolarizao enquanto que o K+ pela repolarizao. Entretanto, o potencial mais complexo com influxo de clcio, na fase 2, essencial para disparar o mecanismo de contrao muscular. A clula marcapasso, apresenta um potencial de repouso (fase 4) instvel conhecida como despolarizao diastlica lenta (DDL). Nesta fase, a clula despolariza lentamente at alcanar o limiar de estimulao com consequente abertura de canais de Na+ e Ca++, ons responsveis pela despolarizao. A repolarizao acontece por sada de K+. A DDL acontece pelo somatrio de vrias correntes de entrada (Na+, Ca++) e a no sada de K+.
PRXIMA AULA
Na prxima aula estudaremos a biofsica da viso.
REFERNCIAS
CARVALHO, A. C. C.; et al. Eletrofisiologia do Corao. In. Fisiologia. Ed. AIRES, M. M. 2 ed, Rio de Janeiro, Ed. Guanabara Koogan, 1999. CONDE-GARCIA, E. A. C. Biofsica. Ed. Savier, 1998. CRANEFIELD, P.F. The conduction of cardiac impulse. Futura Publishing Company, New York, 1975. GUYTON, A. C.; HALL, J. E. Tratado de fisiologia mdica, Ed. Elsevier, 11 ed, 2006. HOFFMAN, B. F.; CRANEFIELD, P.F. In: Physiology. 3 ed. Ed. Berne, R. M. e Levy, M. N., 1993. KATZ, A. M. Physiology of the heart. Raven Press, 1977. LIPSIUS, S. L.; HUSER, J.; BLATTER, L. A. Intracellular Ca2+ release sparks atrial pacemaker activity. News in Physiological Sciences, p. 101-106, 2001.
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MENDEZ, C. Characteristics of impulse propagation in the mammalian atrioventricular node. In: Normal and abnormal conduction in the heart. Ed. Paes de Carvalho, A; Hoffman, BF e Libearman, M. New York, p. 363, 1982. WEST, T. C. Electrophysiology of the sinoatrial node. In: Electrical phenomena in the heart. Ed. De Mello, W. C. Academic press, 1972. www.biol.sc.edu/~vogt/courses/neuro/ap-image.jpg http://www.psy.jhu.edu/~fortune/Courses/systems/exams/exam1/f5_06.jpg http://www.passeiweb.com/na_ponta_lingua/sala_de_aula/biologia/ imagens/impulso_nervoso.jpg
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BIOFSICA DA VISO
META
Compreender o mecanismo sensorial responsvel pela formao da viso, assim como algumas patologias que afetam este processo.
OBJETIVOS
Ao final desta aula, o aluno dever: descrever a anatomia do globo ocular; descrever a ris e o papel da pupila na viso; descrever o processo de acomodao do cristalino; descrever o papel da retina na formao da imagem; descrever a cadeia das reaes que fazem a ativao da rodopsina pela luz; e compreender as principais ametropias do olho e as suas correes.
PR-REQUISITOS
Para entender esta aula preciso revisar a anatomia do globo ocular.
Olho (Fonte: http://www.gettyimages.com).
INTRODUO
O globo ocular um sensor poderosssimo. Juntamente com o crebro, capta as imagens que desvendam o mundo exterior com todas as suas formas, relevos, cores e movimentos. As suas lentes, crnea e cristalino, permitem que olho seja capaz de focalizar objetos situados distantes ou bem prximo a nossa face. Podemos visualizar objetos na penumbra ou no claro. Muitos comparam o funcionamento do olho com aquele das mquinas fotogrficas, porm a versatilidade do olho muito superior. Quando focalizamos um objeto, os raios luminosos penetram na crnea, atravessam o humor aquoso, entram pelo orifcio da ris, a pupila, atravessam o cristalino e o corpo vtreo chegando finalmente na retina. Nela, a imagem do objeto se forma invertida e menor. Entretanto, nosso crebro interpreta corretamente o que estamos vendo.
A Retina uma membrana sensorial que recebe os raios luminosos. responsvel pela formao de imagens e transformao da luz captada em sinais eltricos que sero enviados ao crebro. (Fonte: opticaatlantis.blogspot.com).
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ANATOMIA DO GLOBO OCULAR

O globo ocular apresenta aproximadamente 24 mm de dimetro e est encapsulado quase totalmente por uma membrana de cor branca chamada de esclertica ou esclera (Fig. 29).
Figura 29. Representao esquemtica das estruturas do globo ocular. (Fonte: http://pt.wikipedia.org).
A poro posterior do globo ocular formada por trs membranas ou tnicas. De fora para dentro elas so: 1. Esclertica Tambm chamada esclera ela uma membrana rgida formada por fibras colgenas e elsticas cuja a funo manter o formato globoso do olho. Nesta membrana esto inseridos as fibras de 6 msculos extra-oculares que controlam os movimentos do globo ocular. Os msculos so: oblquo maior, oblquo menor, reto interno, reto externo, reto superior e reto inferior (Conde-Garcia, 1998, p.252, Aires, 2008, p.253). 2. Coride Localiza-se anteriormente esclertica e apresenta-se intensamente pigmentada, pois rica em melanina. Assim, ela contribui para formar, dentro do globo ocular, uma cmara escura, diminuindo o ndice de reflexo da luz na retina. Pela coride cursam numerosas artrias e veias e, com isso, ela se torna responsvel pela nutrio das clulas da retina chamadas de fotoreceptores, que so de dois tipos: os cones e os bastonetes.
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3. Retina localizada anteriormente coride, sendo a mais interna. Ela formada por 10 camadas (Conde-Garcia, 1998, p.254): 1. Epitlio pigmentado 2. Camada de fotoreceptores 3. Membrana limitante externa 4. Camada nuclear externa 5. Camada plexiforme externa 6. Camada nuclear interna 7. Camada plexiforme interna 8. Camada de clulas ganglionares 9. Camada de fibras pticas 10. Membrana limitante interna Funcionalmente a retina dividida em duas regies a retina perifrica com predominncia de bastonetes e a retina central formada pela fvea. A fvea contm apenas cones e permite que a luz atinja os fotorreceptores sem passar pelas demais camadas da retina, maximizando a acuidade visual. Os cones e os bastonetes so neurnios que fazem sinapses com as clulas bipolares que, por sua vez, fazem sinapses com as clulas ganglionares. Estes neurnios convergem para a poro posterior do olho e formam o nervo ptico responsvel pela propagao do impulso eltrico ao crebro. A regio da retina de onde sai o nervo ptico e passam a artria central da retina e a veia central da retina, responsveis pela nutrio do globo ocular, chamada de ponto cego. Portanto, nessa regio no existem nem cones nem bastonetes e uma imagem que se forme sobre ela no pode ser visualizada. Para comprovao da existncia do ponto cego voc pode fazer o teste da Fig. 30. Como se faz este teste? Tampe seu olho direito e olhe no ponto do lado direito (o crculo) da figura com o seu olho esquerdo. Permanea olhando o crculo, enquanto, lentamente movimenta-se mais perto ou mais longe da figura. Voc descobrir o ponto cego na sua viso quando a cruz no for visualizada.
Figura 30 Teste para comprovar a existncia do ponto cego na retina
Na retina formam-se as imagens reais dos objetos observados pelo globo ocular. A imagem formada na retina invertida e menor. Cones - so os cones as clulas capazes de distinguir cores. H trs tipos de cones: um que se excita com luz vermelha, outro com luz verde e o terceiro, com luz azul. A imagem fornecida pelos cones mais ntida e
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mais detalhada. Alm disso, so clulas que operam melhor em ambientes iluminados (viso fotpica). Bastonetes so clulas que no detectam luz colorida e no formam viso detalhada. Operam melhor em ambiente com baixa luminosidade (viso escotpica), ou seja, so clulas mais sensveis luz. noite, a nossa viso depende principalmente da ativao dos bastonetes. Crnea A crnea uma membrana transparente que, na poro anterior do olho, d continuidade esclera. Ela atua como uma lente convergente. Sua estrutura no vascularizada e sua inervao desprovida de bainha de mielina, o que garante a sua total transparncia. A crnea, juntamente com o cristalino, converge a luz para a formao da imagem na retina. Humor aquoso O humor aquoso o segundo meio transparente de olho. Ele est logo atrs da crnea. Este fluido est contido na cmara anterior do olho que se situa entre a crnea e o cristalino. produzido pelo epitlio do corpo ciliar. Quando o corpo ciliar produz o humor aquoso, esse lquido eliminado na cmara posterior do olho e depois passa para a cmara anterior. O humor aquoso reabsorvido para as veias, atravs do canal de Schlemm que se situa no corpo ciliar (Fig. 31). O humor aquoso tem na sua composio, cloretos, glicose, CO2, aminocidos, cido lctico, uria, protenas, cido ascrbico, fsforo inorgnico, cido ctrico e cido rico (Conde-Garcia, 1998, p.251). Ele tem funo de fornecer a maior parte dos metablitos necessrios s clulas da crnea e do cristalino. O volume do humor aquoso (cerca de 0,22 mL) deve ser mantido constante para que a presso intra-ocular seja menor do que 22 mmHg.
Figura 31. Produo do humor aquoso pelo corpo ciliar mostrando o fluxo do humor passando da cmara posterior para a cmara anterior onde vai ser drenado pelo canal de Schlemm (Fonte: http://www.merck.com).
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ris uma membrana de cor variada localizada entre o humor aquoso e o cristalino. Na sua estrutura, possui msculos que lhe do mobilidade para alterar o dimetro do seu orifcio, a pupila. O msculo dilatador da pupila, comandado pelo sistema simptico, promove aumento da pupila. Este ato chamado de midrase. O msculo esfncter pupilar, inervado pelo sistema parassimptico, quando ativado, promove a diminuio do dimetro pupilar, evento que se conhece como miose. O dimetro da pupila no ser humano varia de 1,5 a 8 mm. Com isso, ela pode controlar a entrada de luz no globo ocular. Em um ambiente muito iluminado, a pupila entra em miose para diminuir a entrada da luz no olho e em um ambiente pouco iluminado, a pupila ela se torna midritica, a fim de captar mais luz (Tabela 1). Outro fator importante que altera o dimetro da pupila, a distncia em que o objeto visualizado se encontra do olho. Ao focalizar um objeto prximo, a pupila entra em miose, enquanto que para os objetos distantes, ela entra em midrase. A Tabela 1 ilustra alguns fatores que podem alterar o dimetro da pupila. Tabela 1. Condies que promovem variao do dimetro pupilar
(Fonte: Conde-Garcia, 1998, p. 250).
Cristalino tambm um meio transparente do olho. Ele se comporta como uma lente convergente do tipo biconvexa, ou seja, suas faces so convexas. Esta lente convergente focaliza a luz captada pelo globo ocular a fim de formar as imagens sobre a retina. O cristalino sofre um mecanismo conhecido como acomodao visual distncia, alterando o seu poder de convergncia para focalizar sobre a retina, a imagem de objetos situados em diversas distncias (Fig. 32). A forma do cristalino alterada pelo msculo ciliar. Esse msculo tem fibras radiais e fibras circulares. Graas ao processo de acomodao do cristalino distncia, um olho normal pode focalizar objetos que esto perto ou longe. - Viso de objetos prximos Na viso de objetos situados prximos ao olho, os raios de luz que penetram nele formam um pincel divergente. Para que suas imagens se formem sobre a retina e a pessoa consiga enxergar com nitidez e detalhes, preciso que o cristalino se adapte, aumentando sua convergncia o que o torna mais esfrico. Isso possvel pela contrao do msculo ciliar. - Viso de objetos distantes Na viso de objetos distantes, os raios de luz que penetram no olho formam um feixe paralelo. Para que suas
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imagens se formem na retina e com isso sejam vistas com nitidez e detalhes, preciso que o cristalino diminua a sua convergncia, tornando-se mais delgado. Isso possvel pelo relaxamento do msculo ciliar.
Figura 32. Acomodao visual do cristalino de acordo com a distncia do objeto (Fonte: www.editorasaraiva.com.br).
Humor vtreo O humor vtreo um fluido gelatinoso e transparente que preenche a cmara situada entre o cristalino e a retina. Na sua composio qumica encontramos nitrognio, mucoprotena, albumina, globulina, peptona, glicose e zinco (Conde-Garcia, 1998, p.251). A produo e a eliminao deste fluido bem menor do que a do humor aquoso. A sua consistncia gelatinosa ajuda a manter o formato globoso do olho.
FENMENOS PTICOS
O que acontece quando um feixe luminoso encontra a superfcie de separao entre dois meios opticamente diferentes? Neste caso, pode ocorrer reflexo, refrao ou absoro da luz (Fig. 33). Examinando a questo de forma acurada, os trs fenmenos sempre acontecem, porm quase sempre h predominncia de um deles (Ramalho et al., 1999, p.212). - Reflexo Acontece em superfcies polidas. Os raios de luz de luz que se propagam no meio 1 e incidem sobre a superfcie, retornam ao meio original. - Refrao Acontece quando raios de luz que se propagam no meio 1 incidem sobre uma superfcie transparente S e, depois de atravess-la, passam a se propagar num outro meio 2. - Absoro - Acontece quando os raios de luz que incidem sobre uma superfcie so por ela absorvidos, transformando-se em calor. Desta forma, no so gerados nem raios refletidos, nem refratados.
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Figura 33. Fenmenos de reflexo, refrao e absoro da luz ao incidir sobre uma superfcie S (Ramalho et al., 1999, p.212).
A luz branca emitida pelo Sol ou por lmpadas incandescente especiais, constituda por uma grande variedade de cores, isto , de luzes monocromticas. A luz branca, assim, contm radiaes com comprimento de onda que vo de 400 a 750 nm. Esta faixa do espectro eletromagntico o olho humano pode enxergar. Agrupando-se as cores pode-se dizer que o espectro visvel composto por 7 cores (cores do arco-ris): violeta, anil, azul, verde, amarelo, laranja e vermelho. A Fig. 34 mostra um feixe de luz branca incidindo sobre um prisma. Ao atravesslo, a luz se decompe e surgem muitas cores. A decomposio da luz branca est associada diferena de velocidade de propagao dos raios luminosos num determinado meio transparente. No cu, o rcoris se forma quando a luz branca do Sol decomposta ao atravessar as gotculas de gua contidas em nuvens de chuva (Ramalho et al., 1999, p.213). Os experimentos mostram que, quando a luz branca incide num prisma transparente, a luz que sofre menor desvio a vermelha (maior comprimento de onda) e a que sofre maior desvio a violeta (menor comprimento de onda). Esses prismas so usados no espectofotmetros para decompor a luz branca proveniente de uma lmpada, permitindo assim que o comprimento de onda para anlise de uma determinada soluo seja escolhido.
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Figura 34. Decomposio da luz branca do Sol por um prisma triangular (Fonte: http://www.mundofisico.joinville.udesc.br).
LENTES
Quanto ao comportamento ptico uma lente por ser classificada em convergente ou divergente. Ela convergente quando raios paralelos que nela incidem so refratam passando por um ponto nico chamado de foco. Diferentemente, os raios que incidem numa lente divergente saem dela afastando-se uns dos outros. Apenas o prolongamento deles que convergem para um foco virtual.
FORMAO DA IMAGEM NO GLOBO OCULAR

Quando olhamos um objeto, os raios luminosos dele provenientes atravessam a nossa crnea, o humor aquoso, passam pela pupila, pelo cristalino e pelo humor vtreo, chegando finalmente retina. Nela, a imagem do objeto se forma invertida e menor. Neste percurso, a luz atravessa meios de densidades diferentes e sofre refraes. Refrao a mudana de trajetria do raio luminoso ao passar de um meio para outro. No olho, a luz sofre 4 refraes, a saber: ar-crnea, crnea-humor aquoso, humor aquoso-cristalino, cristalino-humor vtreo (Conde-Garcia, 1998, p.261): Por que a refrao ocorre? A refrao ocorre porque h mudana na velocidade de propagao da luz quando ela passa de um meio para outro de ndice de refrao diferente. Imagine uma linha imaginria dividindo o globo ocular na metade, ou seja, passando no centro das lentes crnea e cristalino. Essa linha chamada de eixo ptico do olho. Entretanto, no neste eixo onde se formam as imagens na retina. A fvea est num eixo chamado de eixo visual e nela onde se forma a imagem do objeto que se est observando. O eixo visual une a fvea ao centro do cristalino (Fig. 35).
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Figura 35- Ilustrao do globo ocular mostrando os eixo visual (linha tracejada) e o eixo ptico (linha contnua).
PIGMENTOS VISUAIS E FOTOTRANSDUO

O processo de transformao da energia fsica da luz (eletromagntica) em potenciais eltricos envolve uma etapa qumica com a participao de fotopigmentos dos cones e bastonetes (Aires, 2008, p.259). Os fotorreceptores (cones e bastonetes) de todos os vertebrados respondem luz por causa dos pigmentos visuais que possuem. Eles se encontram mergulhados na bicamada lipdica dos cones e nos discos membranosos dos bastonetes. Os bastonetes contm o pigmento rodopsina e so responsveis pela viso em ambiente de baixa luminosidade. Os cones contm 3 diferentes tipos de opsinas. Uma com maior sensibilidade para o azul, outra que sensvel ao verde e outra com sensibilidade para a cor vermelha. Na ausncia de luz, os canais de Na+ e Ca++ localizados na membrana do bastonete esto abertos. A corrente de entrada destes dois ctions mantm a clula despolarizada. Como consequncia desta despolarizao, os bastonetes no escuro esto liberando constantemente neurotrans-
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missores inibitrios (glutamato), bloqueando assim a transmisso de sinais luminosos para os neurnios de segunda ordem. Quando a luz penetra no olho, ela ativa um pigmento sensvel a luz, a rodopsina. A rodopsina uma protena de 40.000 daltons apresentando 7 segmentos transmembranares. formada pela juno do 11-cis-retinal com a escotopsina. O 11-cis-retinal um derivado da vitamina A. A falta dessa vitamina pode causar cegueira noturna. A rodopsina quando exposta luz se decompe, provocando uma alterao fsica da poro 11-cisretinal de forma a alter-la para transretinal. A rodopsina ativada chamada de metarrodopsina II que, por sua vez, ativa uma protena G especial chamada de transducina. Esta protena tem 3 subunidades denominadas , e , e quando a sua subunidade a est ligada ao GDP (guanidina difosfato) ela se apresenta inativa. Quando fosforilada, subunidade a libera o GDP e fixa o GTP (guanidina trifosfato) separando-se das outras subunidades, passando para estado ativo. A subunidade da transducina ligada ao GTP ativa a enzima fosfodiesterase que catalisar a hidrlise do GMPc (guanidina monofosfato cclica) em GMP (guanidina monofosfato). A diminuio dos nveis intracelulares de GMPc fecha os canais de Na+, fazendo com o bastonete hiperpolarize, isto , fique com o seu citoplasma mais negativo. Este fenmeno se chama de hiperpolarizao. Quando o bastonete hipepolariza, ele deixa de liberar o neurotransmissor inibitrio glutamato. Com isto, a clula bipolar a ele ligado transmite para os neurnios de segunda ordem, os sinais eltricos produzidos pela excitao luminosa, permitindo que a informao luminosa chegue ao crebro (Aires, 2008, p. 262). Quanto mais ftons de luz so absorvidos pela rodopsina mais canais de Na+ se fecham e menos neurotransmissor liberado (Fig. 36).
Figura 36. Mecanismo de ativao da rodopsina pela luz (Fonte: http://www.unizar.es).
O crebro humano tem reas especficas, localizadas na regio occipital, que recebem e decodificam as mensagens captadas pelos olhos, transformando-as no que chamamos de viso.
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PATOLOGIAS DO GLOBO OCULAR

Em um olho emtrope ou normal as imagens so formadas corretamente na retina, portanto, a viso ntida. Quando isso no ocorre, dizemos que o olho apresenta uma ametropia, isto , h um defeito na viso. Dentre esses defeitos destacam-se a miopia, a hipermetropia, o astigmatismo, o estrabismo e a presbiopia. Muitos outros quadros patolgicos ainda existem. Para citar uns poucos, podemos lembrar do glaucoma, daltonismo, catarata e conjuntivite. Miopia - Na miopia a formao da imagem ocorre antes da retina, porque o olho anormalmente longo ou o cristalino apresenta-se excessivamente convergente. A consequncia disso dificuldade de focalizar objetos distantes, ou seja, os mopes enxergam mal os objetos que esto longe. A correo da miopia se faz com o uso de lentes (culos ou lentes de contato) divergentes. Atualmente, j h correo cirrgica para a miopia (Fig. 37a).
Figura 37a. Representao esquemtica do processo de formao da imagem em um olho com miopia. (Fonte: http://www.colegiosaofrancisco.com.br).
Hipermetropia - Na hipermetropia a formao da imagem ocorre, teoricamente, atrs da retina, porque o olho curto demais ou o cristalino apresenta-se com convergncia diminuda. A consequncia disso a dificuldade de focalizar objetos prximos ou seja, os hipermtropes enxergam mal objetos prximos. Este defeito pode ser corrigido com lentes convergentes (Fig. 37b).
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Figura 37b. Representao esquemtica do processo de formao da imagem em um olho com hipermetropia. (Fonte: http: www.colegiosaofrancisco.com.br).
Astigmatismo - O astigmatismo consiste em uma irregularidade na curvatura da crnea e mais raramente, do cristalino. Em consequncia, o olho no capaz de distinguir nitidamente linhas verticais e horizontais. Para as pessoas que sofrem de astigmatismo, os objetos prximos ou distantes ficam distorcidos. As imagens ficam embaadas porque alguns dos raios de luz so focalizados e outros no (Robortella, 1984). O uso de lentes cilndricas corrige o astigmatismo (Heneine, 2006, p.316). Presbiopia - A presbiopia costuma ocorrer a medida que uma pessoa envelhece e conhecida popularmente como vista cansada. Com a idade, o cristalino vai perdendo a sua elasticidade. Com isto, o msculo ciliar no consegue fazer com que o cristalino modifique a sua forma de modo a se adaptar para objetos distantes ou prximos. Este processo progressivo e se acentua com o aumento da idade, mas normalmente se estabiliza ao redor dos 60 anos. Uma lente convergente corrige o defeito, fazendo com que objetos prximos sejam vistos com nitidez (Robortella, 1984). Catarata - A catarata uma leso ocular que torna opaco o cristalino. Com isso, os raios de luz no conseguem atravess-lo e, assim, no alcanam a retina para formar a imagem, comprometendo a viso. As causas mais frequentes so: 1. Ao das radiaes ionizantes que provocam desnaturao das protenas que compe o cristalino. 2. Acmulo de clcio no cristalino, opacificando a lente. 3. Diabetes
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4. Uso sistemtico colrios que contm corticides, 5. Inflamaes intra-oculares 6. Traumatismos Geralmente a catarata acomete indivduos acima de 50 de idade. Entretanto, nos trs primeiros meses de gestao se a me contrair rubola ou toxoplamose, a criana pode nascer com catarata. O nico tratamento para catarata o cirrgico que tem o objetivo de substituir o cristalino danificado por uma lente artificial que recuperar a funo perdida. Glaucoma uma doena que ocorre pela elevao da presso intraocular (> 22 mmHg). O glaucoma pode ter duas causas: produo excessiva de humor aquoso ou dificuldade de drenagem pelo canal de Schlemm. Ambas as causas, aumentam o volume do humor aquoso aumentando a presso intra-ocular. Este aumento de presso pode provocar: a) leses no nervo ptico e, como o nervo que conduz a informao ao crebro essa leso pode levar cegueira permanente. b) dificuldade de irrigao sangunea das clulas de retina levando a destruio dos fotorreceptores, levando tambm a cegueira permanente. O glaucoma tem tratamento com uso de colrios, medicamentos orais, cirurgia a laser, cirurgias convencionais ou uma combinao desses mtodos. O propsito do tratamento manter a presso intra-ocular em nveis baixos. Estrabismo - O estrabismo um termo usado em casos de desalinhamento dos eixos visuais (desvio dos olhos) que est associado a um desequilbrio do funcionamento dos msculos extra-oculares. O estrabismo ocorre entre 2 e 4 % da populao, afeta igualmente homens e mulheres e pode ser hereditrio ou no.
CONCLUSO
O olho humano possui clulas fotossenssveis que respondem a uma estreita faixa do espectro eletromagntico, a luz visvel. A luz, antes de chegar na retina, deve atravessar sucessivamente 4 meios transparentes: crnea, humor aquoso, cristalino e humor vtreo. Na retina, a luz ativa os pigmentos visuais dos cones (iodopsinas) e dos bastonetes (rodopsinas), promovendo o fechamento de canais inicos e a hiperpolarizao dos neurnios visuais. Com isso, no h liberao de neurotransmissores inibitrios e a informao pode chegar ao crebro.
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Biofsica da Viso
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RESUMO
A luz visvel captada pelo globo ocular atinge a crnea que atua como uma lente, convergindo a luz para o interior do globo ocular. Essa luz atravessa o humor aquoso e entra pelo orifcio da ris, a pupila. Duas situaes principais alteram o dimetro da pupila: distncia do objeto e intensidade de luz do ambiente. Na viso de objetos prximos ou em ambiente claro, a pupila diminui o seu orifcio (miose) e na viso de objetos distantes ou em ambiente escuro, a pupila se dilata (midrase). Depois de passar pela pupila, a luz atinge o cristalino que sofre acomodao de acordo com a distncia do objeto. Ao tentarmos focalizar um objeto prximo o cristalino fica mais convergente (mais esfrico) e ao focalizar um objeto distante o cristalino tem a sua convergncia diminuda (mais delgado). Este mecanismo permite um indivduo focalizar a imagem na retina e enxergar com nitidez os objetos. Depois do cristalino, a luz atravessa o humor vtreo e, finalmente, chega retina. na retina que esto os neurnios sensveis luz, os cones e bastonetes. No escuro, estas clulas esto constantemente despolarizadas, em virtude de ter na suas membranas canais inicos de sdio e clcio que esto abertos permitindo a entrada destes dois ctions na clula. Quando a luz chega na retina ocorre a ativao de fotopigmentos (rodopsinas e iodopsinas) que levam diminuio dos nveis intracelulares de GMPc promovendo o fechamento destes canais e levando a hiperpolarizao destes neurnios. A hiperpolarizao inibe a liberao do glutamato, o que resulta em desinibio do neurnio bipolar liberando a transmisso dos sinais luminosos para o crebro.
ATIVIDADES
1. Explique o processo de acomodao do cristalino.

O processo de acomodao do cristalino se refere a sua alterao de geometria ou poder de convergncia de acordo com a distncia em que o objeto se encontra do globo ocular. Explique as modificaes sofridas pelo cristalino na viso de perto e de longe.
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2. Explique a alterao do dimetro pupilar de acordo com a luminosidade do ambiente e distncia do objeto.

Comentrio: tanto a distncia do objeto quanto a quantidade de luz do ambiente alteram o dimetro pupilar. Explique como a pupila est no claro e escuro e quando voc tenta focalizar um objeto prximo ou distante do globo ocular. No esquea de explicar, em cada situao, os msculos e nervos envolvidos em cada processo. 3. Para sedimentar a nossa aula de viso voc poderia assistir vdeos sobre o sentido da viso. Acesse o site: http://www.youtube.com/ watch?v=CR0_ZldQjKQ&feature=related
PRXIMA AULA
Na prxima aula ns estudaremos outro sentido do corpo humano, a audio.
REFERNCIAS
AIRES, M. M. Fisiologia. 3 ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2008. CONDE-GARCIA, E. A. C. Biofsica. Ed. Savier, 1998. HENEINE, F. H. Biofsica Bsica. Ed. Atheneu, 2006. RAMALHO, F.; FERRARO, N. G., SOARES, P. A. T. Os fundamentos da fsica 2. Termologia, ptica e Ondas. Ed. Moderna, 1999. ROBORTELLA, A. ptica Geomtrica, v. 4, Ed. tica, 1984. http://pt.wikipedia.org/wiki/Humor_v%C3%ADtreo http://www.merck.com/mmpe/print/sec09/ch103/ch103a.html www.editorasaraiva.com.br
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BIOFSICA DA AUDIO
META
Compreender o mecanismo sensorial responsvel pela formao da audio humana, assim como, algumas patologias que afetam este processo.
OBJETIVOS
Ao final desta aula, o aluno dever: descrever a anatomia do aparelho auditivo; descrever a funo biofsica do ouvido externo, mdio e interno; descrever o processo de amplificao do som no ouvido mdio; descrever como a energia mecnica do som transformada em eltrica no ouvido interno; compreender o mecanismo de percepo e anlise do som; e compreender alguns tipos de surdez
PR-REQUISITOS
Para entender esta aula preciso de um conhecimento prvio de anatomia do aparelho auditivo.
Aparelho auditivo (Fonte: http://www.gettyimages.com).
INTRODUO
O ouvido humano possui trs funes distintas: a audio, o equilbrio corporal e orientao espacial do indivduo. Neste captulo, daremos nfase ao sentido da audio. Ouvir um dos cinco sentidos do corpo humano e para que uma pessoa escute, uma gama considervel de eventos precisam acontecer. Um som audvel para ser produzido, precisa se propagar em um dado meio para que chegue ao seu aparelho auditivo. Este deve funcionar e transmitir as informaes do som (frequncia, amplitude, timbre, localizao da fonte sonora) para o nervo auditivo. Este ltimo, por sua vez, deve conduzir tais informaes, via clulas auditivas, para o crtex cerebral que interpretar os impulsos eltricos. Todas estas etapas constituem a audio. um longo caminho que perpassa muitos fenmenos fsicos. Neste captulo, aprenderemos o trajeto do som pelos ouvidos externo, mdio e interno, aprenderemos as vrias transformaes de energia que o som sofre neste percurso, como acontece a amplificao das ondas sonoras captadas e tambm o controle desta amplificao. Veremos o mecanismo de controle da presso dentro do ouvido mdio e alguns tipos de surdez e suas respectivas causas.
A vibrao do som atinge a membrana do tmpano que funciona como se fosse uma membrana de um tambor super sensvel. Estas vibraes fazem a membrana timpnica vibrar (Fonte: http://sentidos5espsmm.blogspot.com).
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CONCEITOS BSICOS
O som um tipo de energia mecnica decorrente da transmisso de energia de partculas de ar em vibrao. A altura do som depende da frequncia da onda sonora e expressa em Hertz (Hz). O Hz corresponde ao nmero de ciclos por segundo. Por exemplo, uma onda sonora de 300 Hz equivale a 300 ciclos ou oscilaes por segundo. De acordo com a frequncia, o som pode ser definido como grave, mdio ou agudo. Sons de baixa frequncia so graves e de alta frequncia so agudos. O ouvido humano capaz de detectar sons com frequncia entre 16 Hz a 17.000 Hz (Conde-Garcia, 1998, p.118). Nossos ouvidos no tm a capacidade de perceber sons com frequncias abaixo de 16 Hz (infra-sons) ou frequncias acima de 17.000 Hz (ultra-sons). O timbre uma qualidade do som que depende do somatrio das muitas frequncias que o compem. A intensidade sonora corresponde amplitude de vibrao de uma onda sonora. De acordo com a intensidade, o som pode ser fraco (pequena amplitude) ou forte (grande amplitude). A unidade de intensidade o decibel. O ouvido humano capaz de detectar sons na faixa de 0 a 120 decibis. Acima de 120 dB, o som pode induzir uma sensao dolorosa.
APARELHO AUDITIVO
O ouvido humano pode ser subdividido em ouvido externo, mdio e interno (Fig. 38).
Figura 38. Aparelho auditivo humano mostrando o ouvido externo, mdio e interno (Fonte: http://www.prof2000.pt).
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OUVIDO EXTERNO
O ouvido externo formado por duas estruturas, o pavilho auricular ou orelha e canal auditivo externo. A orelha apresenta formas e tamanhos variados. Apenas os mamferos possuem pavilho auricular. Os morcegos e baleias emitem e captam ultra-sons e infra-sons, respectivamente. Essas ondas sonoras podem ser refletidas pelos objetos, permitindo que estes animais localizem a posio dos objetos sua volta. O pavilho auricular tem a funo de captar as ondas sonoras e direcion-las para o meato acstico. Entretanto, grande parte dos sons audveis refletido no pavilho auricular, pois ela menor que a maioria dos comprimentos de onda dos sons (Menezes et al, 2005). O pavilho tambm auxilia na localizao da fonte sonora. O meato acstico externo possui um comprimento de aproximadamente 2 a 3 cm, est preenchido por ar e sua extremidade interna fechada pela membrana timpnica. Sua funo transferir o som captado pela orelha at o ouvido mdio.
OUVIDO MDIO
O ouvido mdio est incrustado numa cavidade ssea. Ele preenchido por ar atmosfrico e comunica-se com a nasofaringe atravs da trompa de Eustquio. formado pela membrana timpnica ou tmpano, uma cadeia de ossculos, trompa de Eustquio e pelos msculos tensor do tmpano e estapdio. Tmpano uma membrana que delimita o ouvido externo do ouvido mdio. Possui uma colorao perolada e com formato de um cone ou funil cujo vrtice est ligeiramente voltado para dentro do ouvido mdio. Apresenta uma espessura de 1 mm e um dimetro de 64 mm2 (Fig. 39).
Figura 39. Fotografia da membrana timpnica vista pelo ouvido mdio. Observe que o tmpano tem com perolada e uma forma de funil (Fonte: http://www.actaorl.com.br).
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O tmpano apresenta 4 regies (Conde-Garcia, 1998, p.119): 1- Umbo corresponde ao vrtice do funil. 2- Stria mallearis a regio do tmpano que faz contato direto com o primeiro ossculo da cadeia auditiva, o martelo. Esse contato cria um aspecto de cicatriz no tmpano. 3- Poro flcida regio flcida do tmpano tambm chamada de membrana de Scharapnell. Esta regio circunda a stria mallearis, ou seja, o local de ligao do martelo. 4- Poro tensa refere-se s bordas do tmpano (Fig. 40).
Figura 40. Anatomia do tmpano vista pelo meato acstico externo. F, poro flcida; S, stria mallearis; U, umbo e T, poro tensa (Conde-Garcia, 1998, p. 119).
PADRO DE VIBRAO DO TMPANO

Grande parte da energia da onda sonora captada pelo pavilho auricular e conduzida pelo meato acstico externo transferida para o tmpano. Com o impacto das ondas sonoras, o tmpano vibra. O padro de vibrao do tmpano bastante complexo e depende da frequncia e da intensidade do som recebido. Para frequncias baixas, o tmpano vibra como um corpo quase rgido e para frequncias maiores do que 2.400 Hz o padro de vibrao segmentar. Vibrando segmentarmente, o tmpano pode reduzir a sua rea de vibrao para 60 a 75% de sua rea total.
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Vibrando menos, o tmpano transfere menos energia ao martelo, primeiro ossculo da cadeia auditiva (Conde-Garcia, 1998, p.123). Ns vimos que o ouvido humano capaz de detectar sons com intensidade entre 0 a 120 decibis. Um som de 0 dB (praticamente o silncio) j capaz de vibrar o tmpano. O deslocamento do tmpano para este som de 1,1 x 10-11 m, isto corresponde a um deslocamento de 1/10 do dimetro do tomo de hidrognio. Para um som de 120 dB (limiar mximo da audio) a vibrao do tmpano na ordem de 1,1 x 10-5 m, o que corresponde a 1/100 do milmetro (Heneine, 2006, p. 329). Ossculos o ouvido mdio possui em seu interior 3 ossculos (Fig. 41): - Martelo conectado internamente ao tmpano, o martelo pesa aproximadamente 20 mg e formado por uma cabea, uma apfise longa, uma apfise curta e um brao (Conde-Garcia, 2008, p. 120). - Bigorna est situada entre o martelo e estribo, pesa cerca de 27 mg e formado por um ramo curto e outro longo. - Estribo o ltimo ossculo da cadeia auditiva e est em contato com a cclea atravs da janela oval. O estribo pesa cerca de 2,5 mg e formado por uma cabea, um ramo e uma base.
Figura 41. Cadeia de ossculos mostrando o sistema de alavanca constitudo pela bigorna (1), estribo (2) e martelo (3) (www.jewishhospital.org).
Estes ossculos esto conectados e formam uma alavanca tendo um papel importante na transmisso das vibraes sonoras desde a membrana timpnica at a base do estribo. A alavanca, formada pelos ossculos, promove um ganho mecnico de 1,3 vez, ou seja, a presso exercida pelo estribo sobre a janela oval (pertence ao ouvido interno) 1,3 vez ou 30 % maior do que aquela aplicada pelo tmpano sobre o primeiro ossculo, o martelo. Outro ganho mecnico promovido pela relao entre a superfcie da rea da membrana timpnica (64 mm2) e da janela oval (3,2 mm2). A rea da janela oval de aproximadamente 13 a 16 vezes menor do que
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a rea da janela oval. O ganho global promovido pelo ouvido mdio calculado multiplicando-se o ganho da alavanca 1,3 pela relao entre as reas das duas membranas. Considerando que a relao entre as reas das duas membranas de 13 vezes, o ganho total (Gt) ser: Gt = 1,3 x 13 = 16,9 vezes Considerando que a relao entre as reas das duas membranas de 16 vezes, o ganho total (Gt) ser: Gt = 1,3 x 16 = 20,8 vezes Podemos concluir que a amplificao global promovida pelo ouvido mdio pode chegar at 21 vezes, o que corresponde a um ganho de 27 a 35 dB. Sem este mecanismo de amplificao do som haveria uma perda auditiva de aproximadamente 30 dB. O ganho mecnico fundamental para que as ondas sonoras captadas pelo pavilho auricular consigam chegar ao ouvido interno e ativar as clulas sensoriais que iro transmitir as informaes ao crebro. Entretanto, existe uma grande barreira propagao do som. Quando um som propagado pelo meio areo (ouvido mdio) atinge a interface com o meio lquido (ouvido interno), a maior parte de sua energia sonora (99,9 %) sofre reflexo em funo da diferena de densidade entre esses dois meios (ar e gua). Apenas 0,1 % sofre refrao e consegue passar para o ouvido interno (Aires, 2006, p. 285). Outra perda de energia sonora acontece quando o som se propaga pelo ar. No ar, o som sofre um fenmeno de amortecimento, ou seja, a intensidade do som diminui medida que o som se afasta da fonte emissora. O amortecimento do som acontece tanto no ouvido externo, quanto no interno. Trompa de Eustquio - um conduto que comunica o ouvido mdio ao nasofaringe. O equilbrio entre a presso atmosfrica e a do ar contido no ouvido mdio dada pela trompa de Eustquio. Esse equilbrio indispensvel para que a unidade tmpano-ossicular vibre sem obstculos. Este canal se encontra fechado sob a ao do palato. Durante a deglutio ou bocejo ocorre a abertura
ATIVIDADES
Ser que h perda total da audio na ausncia de ossculos e do tmpano?

Quando no se tem nem a cadeia de ossculos nem a membrana timpnica, as ondas sonoras chegam at a cclea pela janela oval atravs do ar ou vibrando diretamente a janela redonda. Com isso, ocorre uma diminuio de cerca de 15 a 20 decibis na sensibilidade auditio, em virtude da falta da transmisso ossicular.
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da trompa de Eustquio e equalizao das presses entre os ouvidos mdio e externo. Algumas situaes alteram a presso dentro do ouvido mdio: 1. Mergulho quando o indivduo mergulha a presso externa aumenta. Com isso, a presso dentro do ouvido mdio fica inferior presso externa. Esta presso negativa dentro do ouvido mdio traciona a membrana timpnica para dentro do ouvido mdio. 2. Obstruo da trompa de Eustquio em situaes de inflamao com obstruo da trompa o ar, contido dentro do ouvido mdio, absorvido e a presso dentro desta cavidade fica menor do que a presso atmosfrica. Isto empurra o tmpano para dentro do ouvido mdio. Em caso de obstruo crnica da trompa de Eustquio pode-se colocar um tubo de ventilao no tmpano. Este tubo um microcapilar, que perfura a membrana e iguala as presses entre os ouvidos externo e mdio. 3. Altitude em grandes altitudes, por exemplo durante uma viagem em avio com cabine no-pressurizada, a presso atmosfrica reduzida, empurrando o tmpano para o meato acstico externo. Para igualar as presses entre as duas faces da membrana timpnica recomendado bocejar ou mastigar chiclete, condies que abrem a trompa de Eustquio. As trs situaes explicadas acima tensionam o tmpano. Este, por no vibrar corretamente, promove a perda da acuidade auditiva. Quando a diferena presso entre os dois lados da membrana timpnica alcana valores entre -60 a -80 mmHg inicia-se a sensao dolorosa. Uma diferena de presso entre -100 a -150 mmHg pode levar a ruptura do tmpano. Quando o tmpano sofre ruptura o indivduo escuta intenso acompanhado de dor, nuseas, desmaio e choque (Conde-Garcia, 1998, p. 125). Msculos tensor do tmpano e estapdio - quando um rudo muito intenso atinge o tmpano sua amplificao pelo ouvido mdio pode danificar o ouvido interno. Para prevenir isto existem dois msculos o tensor do tmpano e o estapdio que, quando se contraem, aumentam a rigidez dos ossculos deformando o tmpano e a janela oval para dentro do ouvido mdio (Menezes et al., 2005) e reduzindo a quantidade de energia que transportada para a janela oval.
OUVIDO INTERNO A CCLEA

A cclea, do grego caracol, constitui o labirinto anterior. um rgo de cerca de 9 mm de dimetro e 35 mm de comprimento, do tamanho de uma ervilha, com estrutura cnica, espiralada, composta por trs tubos paralelos que se afilam da base para o pice (Heneine, 2006, p. 330,
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Menezes et al., 2005). A base da cclea corresponde abertura do caracol, mais larga do que o pice, que corresponde extremidade final da cclea. A Fig. 42 mostra uma viso esquemtica da cclea desenrolada. Duas membranas dividem a cclea em trs tubos, a membrana de Reissner e a membrana basilar. Os tubos so chamados de rampas ou escalas. So 3 rampas: 1. Rampa vestibular: a mais superior, est acima da membrana de Reissner. 2. Rampa mdia ou coclear: uma rampa situada entre as membranas de Reissner e basilar. 3. Rampa timpnica: a rampa inferior, situada abaixo da membrana basilar.
Figura 42. Esquema da cclea desenrolada |(Fonte: http://www.eumus.edu.uy).
As rampas vestibular e timpnica comunicam-se entre si atravs do helicotrema, um pequeno orifcio situado no pice da cclea. Na base da cclea encontram-se 2 janelas ocludas por membrana, a janela oval situada na rampa vestibular e a janela redonda situada na rampa timpnica (Fig. 42). Estas janelas permitem a comunicao entre os ouvidos mdio e interno. Diferente do ouvido mdio, o ouvido interno preenchido por lquidos. So dois lquidos, 1) a perilinfa, que preenche as rampas perifricas tanto a vestibular quanto a timpnica, e 2) a endolinfa, que preenche a rampa mdia. Estes lquidos no se misturam. A composio qumica da perilinfa similar ao do liquor com uma concentrao duas vezes maior em protena. J a endolinfa tem uma composio qumica semelhante do citoplasma de uma clula, pois rica em potssio (CondeGarcia, 1998, p.121). Situado sobre a membrana basilar, encontra-se uma estrutura altamente complexa, o rgo de Corti (Fig. 43). Este rgo formado essencialmente por clulas ciliadas interna e externa e por clulas de sustentao, tais como clulas de Hensen, Claudius e falangeais (Aires, 2006,
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p.296). As clulas ciliadas esto dispostas em fileiras que se estendem por toda a cclea, desde a base at o pice. Existe apenas uma fileira de clulas ciliadas internas (cerca de 3.400 clulas) e duas ou mais fileiras de clulas ciliadas externas (cerca de 12.000 clulas). O nervo auditivo formado pelos neurnios que esto em sinapse com as clulas ciliadas internas e externas. A membrana tectorial uma estrutura fibrosa posicionada sobre o rgo de Corti (Fig. 44).
Figura 43. Seco transversal da cclea mostrando o rgo de corti apoiado em cima da membrana basilar (Fonte: http: www.eumus.edu.uy).
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Figura 44. Anatomia do rgo de Corti. T, membrana tectorial; INT, clulas ciliadas internas; EXT, clulas ciliadas externas; L, lmina reticular; TE, tnel externo; TI, tnel interno, H, clulas de Hensen; F, clulas falangeais; EN, espao de Nuel; C, clulas de Claudius (Conde-Garcia, 1998, p.121).
O estribo, o terceiro ossculo da cadeia auditiva, est posicionado em cima da janela oval. O que acontece quando o estribo vibra a janela oval? O som propagado pelos ouvidos externo e mdio faz vibrar o estribo e, consequentemente, a janela oval situada na rampa vestibular. A vibrao da janela oval desloca a perilinfa contida na rampa vestibular gerando um pulso hidrulico que se propaga da base ao pice da cclea. Como a membrana de Reissner muito fina, a vibrao da perilinfa passada para a endolinfa da rampa mdia. Esse pulso de propaga at o helicotrema e passa para a rampa timpnica onde o pulso hidrulico vai se propagar do pice at a base da cclea, comprimindo a janela redonda. A gerao e a propagao do pulso hidrulico dentro da cclea s possvel devido elasticidade da janela redonda (Conde-Garcia, 1998, p.125). A diferena de presso entre as rampas superior e inferior promove uma vibrao da membrana basilar em uma direo perpendicular ao seu plano. Esse movimento perpendicular da membrana basilar faz a membrana tectorial se movimentar em uma direo longitudinal (Fig. 45). Ao deslizar, a membrana tectorial comprime os clios das clulas ciliadas internas e externas. Com isso, elas so ativadas com consequente liberao de neurotransmissores. O principal neurotransmissor liberado o glutamato. A liberao de glutamato despolariza os neurnios que esto em sinapse com as clulas ciliadas propagando o impulso eltrico ao crebro.
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Figura 45. Movimento perpendicular da membrana basilar (MB) em relao membrana tectorial (MT) (Conde-Garcia, 1998, p.125).
A regio do crebro responsvel pela audio o complexo olivar superior, localizado no lbulo temporal. Como o ser humano capaz de perceber e detectar sons de frequncias diferentes? Ou seja, como possvel distinguir entre sons agudos ou graves? Estudos revelaram que a cclea apresenta regies definidas para detectar sons de diferentes frequncias. Os sons de alta frequncia atingem regies prximas da base da cclea, frequncias intermedirias atingem distncias intermedirias e frequncias baixas causam ativao mxima da membrana basilar prximo ao fim da cclea, no pice. atravs dos diferentes locais que so estimuladas dentro da cclea que detectamos quais so as frequncias sonoras que estamos recebendo. A Fig. 46 mostra diversas regies da cclea sendo ativadas por sons de diferentes frequncias.
Figura 46. Representao da cclea desenrolada (esquerda) e enrolada (direita) mostrando as regies que so ativadas de acordo com a frequncia sonora. O nmeros representam a frequncia do som em KHz (Conde-Garcia, 1998, p. 128).
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Como o ser humano capaz de determinar a intensidade do som? Sons de alta intensidade promovem mais vibraes da membrana basilar e, consequentemente, mais clulas ciliadas so ativadas. H tanto um aumento do ritmo de excitao das terminaes nervosas quanto da transmisso do sinal eltrico por muitas fibras nervosas e no por poucas fibras. Outro fato importante que as clulas ciliadas externas no so estimuladas de forma significativa quando o som no de alta intensidade. Isto pode informar ao crebro que o som intenso.
TRANSMISSO DO SOM AT O OUVIDO INTERNO

O som pode chegar ao ouvido interno por 3 vias: Cadeia de ossculos por essa via, a onda sonora vibra o tmpano, a cadeia de ossculos (martelo, bigorna e estribo) e a janela oval, que pertence cclea. Por essa via, ocorre a amplificao do som, como j foi visto anteriormente. Via area o som pode se propagar pelo ar contido nos ouvidos externo e mdio e vibrar diretamente as janelas oval e redonda. Entretanto, grande parte da energia do som perdida por reflexo do som na passagem do ar do ouvido mdio para o lquido do ouvido interno. Via ssea (ossos do crnio) a som tambm pode chegar ao ouvido interno atravs dos ossos do crnio. Neste caso, o som no alcanar o ouvido interno quando ele vem se propagando pelo ar devido a grande perda de energia do som ao atingir o tecido sseo. Essa via s tem importncia quando um diapaso em vibrao encostado no crnio. Desta forma, o som pode se propagar pelas estruturas sseas e alcanar o ouvido interno.
TIPOS DE SURDEZ
Existem trs tipos de surdez: 1. Surdez de conduo neste tipo de surdez h um impedimento na propagao do som atravs dos ouvidos externo e mdio. Geralmente este tipo de surdez parcial. Podemos citar como exemplos de surdez de conduo: - Ausncia do pavilho auricular; - Acmulo de cera no meato acstico externo; - Espessamento do tmpano; - Secrees purulentas no ouvido mdio; - Ruptura do tmpano; - Quebra dos ossculos; - Otosclerose enrijecimento da cadeia de ossculos;
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2. Surdez sensorineural este tipo de surdez acomete o ouvido interno ou o nervo auditivo. Neste tipo de surdez ocorre um aumento do limiar de excitabilidade para produzir a excitao das clulas sensrias da audio. So causas de surdez sensorineural: - Exposio a sons de alta intensidade; Os danos audio devido exposio permanente em ambientes ruidosos so cumulativos e irreversveis. Exposio a altos nveis de rudo uma das maiores causas da surdez permanente. - Uso de antibiticos ototxicos (garamicina, kanamicina ou estreptomicina) - Estas drogas promovem destruio das clulas ciliadas do rgo de Corti, levando a uma surdez irreversvel. - Processos inflamatrios; - Rubola, toxoplasmose, meningite; - Tumores benignos ou malignos na cclea; 3. Surdez central a surdez central acontece quando h leso do complexo olivar superior, regio do crebro responsvel pela audio. So causas possveis deste tipo de surdez: - Traumatismo craniano; - Tumores benignos ou malignos no crebro; - Acidente vascular cerebral na regio responsvel pela audio.
CONCLUSO
Como vimos nesta aula, o aparelho auditivo um rgo sensorial que no tem s a funo de captar as ondas sonoras e formar a audio. Os nossos ouvidos tm mais duas funes, a de manter o equilbrio corporal, funo realizada pelos canais semicirculares e a funo de orientao espacial (deteco de movimento, noo de distncia) do indivduo, funo realizada por outra estrutura do ouvido interno, o vestbulo. Qual destas 3 funes a mais importante? difcil responder esta pergunta. O que vem logo na nossa mente a funo auditiva. Entretanto, sem a audio um ser humano pode ter uma vida quase normal. Ele pode se comunicar com outros indivduos atravs da linguagem dos sinais. Por outro lado, sem o equilbrio no possvel sentar ou ficar em p. Atravs da audio captamos as ondas sonoras provenientes do meio ambiente, interpretamos o seu contedo e, com isso, conseguimos nos relacionar com o meio ambiente e com outros indivduos. Vale ressaltar que a fala est intimamente relacionada com a audio, pois ouvindo que aprendemos a falar.
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Aula
RESUMO
Cada parte do ouvido tem uma funo especfica para permitir que as ondas sonoras sejam captadas, conduzidas at o ouvido interno e transformadas em sinal eltrico para que possam ser interpretadas pelo crebro. Basicamente ocorre o seguinte: o ouvido externo serve para captar as ondas sonoras e conduzi-las pelo meato acstico externo. No ouvido mdio ocorre a amplificao das ondas sonoras e a transformao da energia sonora em vibraes de membranas e ossculos. Estas vibraes sero transformadas em energia hidrulica com a vibrao do estribo sobre a janela oval. O ouvido interno transforma a energia hidrulica das linfas contidas dentro da cclea em impulsos nervosos que podem ser transmitidos ao crebro. Alm disso, o ouvido capaz de manter constante a presso no interior do ouvido mdio, funo esta realizada pela trompa de Eustquio. O ouvido humano capaz de perceber ondas sonoras de frequncias diferentes de forma simultnea. Isto s possvel devido cclea possuir regies especficas para detectar ondas sonoras de frequncias diferentes. Este mecanismo no possvel na viso, ou seja, o olho humano no capaz de detectar vrias cores (diferentes frequncias ou comprimento de ondas) simultaneamente chegando ao globo ocular.
ATIVIDADES
1. Como informao complementar assista um vdeo sobre audio. s acessar o site: http://www.youtube.com/watch?v=kC2IoapWEJM
PRXIMA AULA
Na prxima aula voc ter a oportunidade de conhecer um mtodo biofsico de estudo que emprega conceitos de eletricidade para realizar a separao de substncias carregadas eletricamente, tal como as protenas, lipdios, DNA, etc. Este mtodo a eletroforese, amplamente usada na pesquisa e em laboratrios de anlises clnicas, com fins diagnsticos.
REFERNCIAS
AIRES, M. M. Fisiologia. 3 ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2008. CONDE-GARCIA, E. A. C. Biofsica. Ed. Savier, 1998. HENEINE, F. H. Biofsica Bsica. Ed. Atheneu, 2006. MENEZES, P. L., NETO, S. C., MOTTA, M. A. Biofsica da Audio. Ed. Lovise, 2005.
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Aula
ELETROFORESE
META
Ao final desta aula o aluno dever dominar o princpio bsico da eletroforese, os fatores que influenciam a migrao eletrofortica, assim como, conhecer os diferentes tipos de eletroforese.
OBJETIVOS
Ao final desta aula, o aluno dever: conhecer o princpio de separao de protenas usando o campo eltrico; conhecer os principais tipos de eletroforese; e conhecer os mtodos eletroforticos para determinao do peso molecular e do ponto isoeltrico de uma protena
PR-REQUISITOS
Para entender esta aula o aluno precisar de um conhecimento prvio de: noes bsicas de campo eltrico; bioqumica de protena; pH e tampes.
O gel de acrilamida usado para separar protenas. As protenas so transferidas a uma membrana e detectadas ento com um anticorpo (Fonte: http://www.molecularstation.com).
INTRODUO
A eletroforese uma tcnica analtica de separao de misturas de substncias carregadas eletricamente, utilizando para isto um campo eltrico. Alm de separar substncias com carga eltrica, ela pode ser usada na caracterizao de uma molcula, tal como determinar a massa relativa e o seu ponto isoeltrico. Em anlises clnicas, esta tcnica tem grande valor diagnstico uma vez que possvel determinar a concentrao de substncias no soro humano. Atualmente, esta tcnica vem sendo largamente usada em vrios ramos da Biologia, Medicina Humana e Veterinria: anlises clnicas, bioqumica, gentica molecular, pesquisa, entre outros. O campo de aplicao desta tcnica vasto e isto se deve principalmente a simplificao da aparelhagem utilizada e tambm da disponibilidade de meios de suportes altamente purificados, o que veio a diminuir o tempo gasto no processo de separao.
Equipamento de eletroforese em gel (Fonte: http://pt.wikipedia).
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Eletroforese
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ELETROFORESE
A eletroforese uma tcnica biofsica de anlise baseada na migrao diferencial de compostos carregados eletricamente quando submetidos a um campo eltrico. A principal fora motriz para o movimento das partculas carregadas em um campo eltrico a diferena de potencial aplicada entre os eletrodos. O eletrodo positivo (nodo) atrai nions (ons negativos) e o eletrodo negativo (ctodo) atrai ctions (ons positivos). Consequentemente, quanto maior a intensidade da voltagem aplicada, maior ser a velocidade com que as cargas se dirigem ao polo de sinal oposto. Entretanto, se a voltagem utilizada for muito alta pode gerar muito calor e ressecar o suporte, alm de poder desnaturar as partculas que esto sendo submetidas separao (Heneine, 1995, p. 33). As molculas carregadas eletricamente migram para o polo de carga oposta quando submetidas a um campo eltrico. S h migrao eletrofortica ou mobilidade eletrofortica se a partcula possuir carga eltrica livre, seja ela negativa ou positiva. Frente ao campo eltrico, os nions migram para o polo positivo e os ctions migram para o polo negativo. Uma partcula eletricamente neutra no possui mobilidade eletrofortica. A migrao eletrofortica regida por 2 leis de Coulomb: 1. migrao qualitativa as partculas migram para o polo de sinal contrrio. Como foi explicado anteriormente, os ctions migram para o polo negativo (ctodo) e os nions migram para o polo positivo (nodo). Na Fig. 47 a mistura foi aplicada no centro do campo eltrico como indicado pela seta. Como podemos ver mistura constituda de 3 partculas, uma neutra, uma positiva e uma negativa. A neutra no tem mobilidade sob ao do campo eltrico e permanece no ponto de aplicao (centro), a positiva migra para o polo (-) e a negativa migra para o polo (+). Desta forma, possvel atravs da eletroforese separar partculas de cargas diferentes. Vale ressaltar, que quando a amostra apresenta uma heterogeneidade em carga eltrica, a aplicao deve ser no centro do suporte.
Figura 47. Migrao qualitativa de partculas eletricamente carregadas sob a ao de um campo eltrico. Observe que as partculas migram para o polo de sinal contrrio.
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2. migrao quantitativa a velocidade de migrao eletrofortica depende da quantidade ou densidade de cargas da partcula. Desta forma, quanto mais carregada estiver uma partcula, ou seja, quanto maior a densidade de carga dela, maior ser a velocidade de migrao em um campo eltrico. A Fig. 48 mostra um exemplo representativo de uma migrao quantitativa de uma mistura de 3 partculas carregadas negativamente. Nota-se que como a amostra negativa o ponto de aplicao fica mais prximo do polo negativo e ai elas migram todas para o polo positivo. A molcula com maior densidade de carga ter um maior deslocamento quando sob a ao de um campo eltrico. Se a mistura fosse composta por partculas positivas, a aplicao da amostra seria no polo positivo (Heneine, 2006, p.192).
Figura 48. Migrao quantitativa de trs molculas carregadas negativamente. Podemos observar que a partcula que migrou mais apresenta uma maior quantidade de cargas.
A velocidade com que uma partcula se movimenta no campo eltrico no depende somente da sua quantidade de cargas ou da diferena de potencial aplicada entre os eletrodos, mais tambm da massa relativa da molcula. O tamanho da macromolcula ou massa relativa tambm influencia de forma decisiva na sua velocidade de migrao. Quanto maior a massa relativa de uma partcula menor ser a sua velocidade de migrao em direo ao polo de sinal contrrio. At aqui vimos que 3 fatores importantes podem influenciar na velocidade de migrao de uma partcula em campo eltrico. Estes fatores so: 1. Quantidade de carga eltrica de uma partcula quanto maior a densidade de cargas maior a velocidade de migrao; 2. Massa relativa da partcula - quanto maior o tamanho da partcula menor a velocidade de migrao; 3. Diferena de potencial eltrico quanto maior a diferena de potencial (ddp), entre os eletrodos, maior a velocidade de migrao. As protenas so molculas que apresentam grupamento cido (COO-) e grupamento bsico (NH3+). As protenas so molculas anfotricas, ou seja, em soluo ou suspenso, as protenas podem apresentar-se com carga positiva, negativa ou neutra. O pH (potencial hidrogeninico) altera a carga de uma protena. Cada protena apresenta um ponto isoeltrico (pI) especfico. O que pI? o pH em que a protena se encontra eletri-
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Eletroforese
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camente neutra e, consequentemente, a mobilidade em campo eltrico nulo. Se o pI da protena for igual ao pH da soluo, a protena apresentase neutra. Se o pI da protena for menor do que o pH do meio (meio bsico) a protena apresenta-se negativa. E se o pI da protena for maior do que o pH do meio (meio cido) a protena apresenta-se positiva. A protena fica positiva quando apresenta maior nmero de grupos NH3+. Isto ocorre em pH cido, uma vez que os grupos COO sero neutralizados pelo excesso de prtons (H+) do meio e, consequentemente, haver excesso de grupos NH3+. Em pH bsico, as partculas ficam carregadas negativamente, isto , com maior nmero de grupos COO-, pela neutralizao dos grupos NH3+ pelas hidroxilas (OH-) presentes no meio bsico. Se o pH do meio for igual ao pI da protena, as partculas ficam neutras, ou seja, as cargas positivas sero iguais s cargas negativas (mesma quantidade de grupos COO- e NH3+) (Heneine, 2006, p.192). Exemplo: a albumina apresenta um pI fixo de 4,7. Vamos ver como o pH do meio influencia na carga eltrica desta protena (Tabela 1). Tabela 1. Alterao da carga eltrica da albumina variando-se o pH do meio
O pH da soluo tambm influencia na quantidade de cargas da protena. Quanto maior a diferena entre o pI e o pH do meio maior a densidade de cargas da partcula. Ou seja, quanto maior a diferena de entre os valores de pI e pH, mais carga a molcula ter e, consequentemente, maior ser sua movimentao em um campo eltrico. Exemplo: Duas protenas A e B com pI de 4,0 e 6,0, respectivamente, so submetidas a uma eletroforese com um pH igual a 8,0. Como ambas apresentam um pI menor do que o pH do meio elas vo possuir carga negativa, ou seja, o meio est bsico e elas vo se comportar como cidos. Qual destas 2 protenas tem maior quantidade de cargas? A quantidade de cargas no pode ser igual uma vez que elas apresentam pontos isoeltricos diferentes. A protena que estiver mais cida ou a que estiver mais distante do pH estar mais carregada eletricamente. Entre as protenas A e B, a protena A com o pI de 4,0 a mais cida ou a mais negativa. Sob ao do campo eltrico, ela vai migrar com maior velocidade.
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A soluo tampo determina qual a carga da protena (positiva, negativa ou neutra) e tambm determina a quantidade de carga da protena.
MATERIAL USADO EM ELETROFORESE

1. Fonte de energia existem vrios tipos e modelos de fontes usadas em eletroforese. As fontes de energia contm um regulador de voltagem e outro de intensidade e um interruptor para ligar e desligar. A corrente eltrica que chega nas tomadas alternada e no serve para a separao de partculas. Para se obter a separao preciso ter corrente contnua, cujo sentido invarivel: um polo sempre positivo e o outro negativo. A fonte usada em eletroforese tem essa funo de fornecer corrente contnua (Heneine, 1995, p.28). 2. Cuba eletrofortica a cuba eletrofortica consiste em um cmara com uma divisria central. Apresenta um formato retangular e tamanho variado. Os eletrodos (ctodo e nodo) esto de cada lado da cuba e podem ser de platina, carvo ou cobre. A cuba possui uma ponte para adaptar o suporte usado para aplicao da mistura que se deseja separar. 3. Suportes o suporte o local onde se aplica a amostra a ser analisada. Ele pode ser slido (papel, acetato de celulose) ou semi-slido (gel de gar, gel de agarose, gel de poliacrilamida). Os suportes so adaptados na cuba eletrofortica com as duas extremidades do suporte mergulhados na soluo tampo. 4. Aplicadores A amostra a ser separada eletroforeticamente deve ser aplicada no suporte com o auxlio de aplicadores. Os aplicadores podem ser seringas, micropipetas, capilares de vidro ou aplicadores especficos para eletroforese. Vale ressaltar que para fazer a separao de uma mistura deve ser aplicado um volume determinado da amostra. 5. Soluo tampo a cuba eletrofortica preenchida com soluo tampo com igual volume de cada lado. A soluo tampo uma soluo composta por um cido fraco e o sal deste cido ou uma base fraca e o sal desta base. O tampo uma soluo que tem a capacidade de resistir a variaes de pH, mesmo aps a adio de pequenas quantidades de cidos ou bases. Alm de manter o pH constante, a soluo tampo uma soluo condutora de corrente eltrica. O tampo tambm ajuda a manter o ambiente com uma atmosfera mida, isto evita o ressecamento do suporte decorrente do calor gerado pela passagem de corrente eltrica pelo suporte. Para evitar o aquecimento, recomenda-se usar tampo gelado ou cmara dotada de sistema de resfriamento. Alm disso, recomendado trabalhar com voltagens baixas para que ocorra uma pequena passagem de corrente eltrica atravs do suporte e, consequentemente, produo de pouco calor.
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Eletroforese
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Resumindo as funes do tampo na cuba eletrofortica: a) Conduzir corrente eltrica; b) Manter o pH constante; c) Fornecer a concentrao de ons adequada; d Manter a umidade dentro da cmara; e) Repor o lquido evaporado no suporte (Heneine, 1995, p.32). 6. Corantes O corante usado para revelar as molculas que foram fracionadas. O corante especfico para a cada molcula (protena, lipdio, etc.). 7. Densitmetro Aps a separao das fraes, elas podem ser quantificadas, ou seja, possvel determinar a concentrao de cada frao. O densitmetro um aparelho que permite a dosagem das fraes de forma direta. Uma luz monocromtica, produzida pelo aparelho, atravessa cada frao e a quantidade de luz absorvida por ela determinada. No final, o densitmetro fornece os valores relativos (% do total) e absolutos (g/dL) de cada frao separada atravs da eletroforese. 8. Espectrofotmetro Se o laboratrio no dispe de um densitmetro, possvel determinar a absoro de luz usando um espectrofotmetro, aparelho bastante usado nas dosagens bioqumicas. Neste caso, cada frao deve ser cortada do suporte e eluda (removida) com um solvente apropriado, colocada em uma cubeta e feita a leitura da absoro de luz no espectrofotmetro.
TIPOS DE ELETROFORESE
A eletroforese pode ser feita sem suporte (eletroforese livre) ou com o uso de suportes.
ELETROFORESE SEM SUPORTE OU LIVRE

A eletroforese livre foi desenvolvida por Arne Tiselius, em 1937. A cuba eletrofortica tem um formato de um tubo em forma de U (Fig. 49). Este tubo preenchido com uma soluo tampo com um determinado pH. A mistura protica a ser fracionada adicionada no tampo. Aplica-se uma diferena de potencial entre os eletrodos e as protenas migram, na soluo, para o polo de sinal contrrio. No final, formam-se duas frentes de protenas, as negativas no polo positivo e as positivas no polo negativo. Esta tcnica est em desuso.
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Figura 49. Representao da eletroforese livre ou sem suporte. A cuba tem um formato de U e as protenas esto dissolvidas no tampo.
ELETROFORESE COM SUPORTE

A eletroforese em suporte foi inventada por um brasileiro chamado Paulo Koenig, em 1937. Ele trabalhava no Instituto Butantan, em So Paulo, e usou o papel como suporte para separar protenas de venenos ofdicos (Heneine, 1995, p. 23). Nos suportes, as amostras so aplicadas e so separadas em fraes ou bandas no prprio suporte. Apresenta algumas vantagens em relao eletroforese sem suporte: pequeno volume de amostra (0,5 a 2 ml) a ser aplicado no suporte e separaes mais ntidas. O material a ser examinado aplicado no suporte, no centro ou nas extremidades a depender da carga da amostra. Depois, a corrente eltrica ligada em uma determinada voltagem e as partculas migraro para o polo de sinal contrrio, numa velocidade caracterstica. No fim da corrida eletrofortica, cada componente nitidamente separado dos outros. Os suportes podem ser slidos (papel, acetato de celulose) ou semislidos (gel de gar, agarose, amido e gel de poliacrilamida). A eletroforese pode ser feita em posio horizontal ou vertical. A Fig. 50 mostra uma eletroforese realizada em sistema horizontal. Os suportes slidos ou semi-slidos podem ser usados em sistema horizontal e o princpio de separao baseado na diferena de cargas entre os
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Eletroforese
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componentes. A eletroforese vertical usa suporte semi-slido e o princpio de separao est baseado tanto na carga quanto na massa dos componentes (Fig. 51).
Figura 50. Eletroforese horizontal. (a) cuba eletrofortica com aplicao da amostra no centro do suporte slido. (b) perfil eletrofortico com as fraes separadas.
Figura 51. Eletroforese em gel vertical. A amostra aplicada nas canaletas posicionadas no topo do gel. A corrida eletrofortica ocorre de forma descendente, do ctodo para o nodo.
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SUPORTES SLIDOS
Os suportes slidos permitem a separao de acordo com a carga eltrica das partculas, ou seja, molculas de mesma carga ou mesmo pI no so separadas neste tipo de suporte.
ELETROFORESE EM PAPEL
O primeiro suporte utilizado em eletroforese foi o papel de filtro (Fig. 50). O papel deve ser umedecido no mesmo tampo usado na cuba eletrofortica e conectado com as extremidades imersas na soluo tampo. A amostra pode ser aplicada no centro do suporte (amostra com diferentes cargas) ou na extremidade do papel. Quando a amostra negativa aplica-se no polo negativo e quando a amostra positiva aplica-se no polo positivo.
ELETROFORESE EM ACETATO DE CELULOSE

O suporte de acetato de celulose substituiu o papel e com algumas vantagens. A principal vantagem que o acetato de celulose, aps a corrida eletrofortica, revelao e secagem, fica transparente, apenas com as fraes coradas. A transparncia do suporte permite a leitura automatizada das fraes no densitmetro, diferentemente do papel, que opaco (branco) e no permite a passagem da luz. um suporte de escolha em laboratrios de anlises clnica pelo baixo custo, facilidade e rapidez na execuo.
ATIVIDADES
Uma mistura contendo 5 protenas (A, B, C, D e E) de pI 4.5, 6.0, 5.5, 7.0 e 4.5, respectivamente, foram submetidas a uma eletroforese em suporte slido usando um tampo de pH 6.0. Qual vai ser a ordem de separao e o ponto de aplicao?

Em pH 6.0, teremos protenas negativas, positivas e neutras. Ento, o ponto de aplicao deve ser no centro do suporte, como indicado com uma seta. As protenas com o pI menor do que o pH possuem carga negativa, as que possuem pI maior do que o pH possuem carga positiva e as que apresentam o pI igual ao pH so neutras. Desta forma, a protena B (pI 6.0) est neutra e no migrar em campo eltrico. As protenas A, C e E esto eletronegativas neste pH e iro migrar para o
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Eletroforese
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polo positivo. Como as protenas A e E possuem o mesmo pI, no se separam porque apresentam a mesma mobilidade eletrofortica. A protena D positiva e migrar para o polo negativo. Veja, na figura abaixo, como ficaria separada a mistura de protenas em suporte slido.
Faa voc este exerccio: uma mistura contendo 5 protenas (A, B, C, D e E) de pI 5.0, 8.5, 7.5, 7.0 e 8,5, respectivamente, foram submetidas a uma eletroforese em suporte slido usando um tampo de pH 9.0. Qual vai ser a ordem de separao e o ponto de aplicao?
SUPORTES SEMI-SLIDOS (GEL)

O suporte em gel promoveu um grande avano na eficincia de separao das fraes submetidas eletroforese. Isto se deve ao fato do gel ser um polmero com poros que permite a separao das partculas no somente pela carga mais tambm pela massa relativa. O gel dificulta a migrao das partculas de massa grande e facilita a migrao de partculas de massa pequena. Para isto, preciso variar o tamanho dos poros do gel de acordo com a faixa de massa relativa.
ATIVIDADES
Como seria a separao da mistura abaixo, em suporte em gel usando um tampo 9,0?
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Comentrio: em pH 9.0, todas as protenas esto com o pI menor do que o pH. Portanto, esto com carga negativa. A aplicao deve ser feita na extremidade do suporte voltada para o polo negativo. Todas as protenas iro migrar para o polo positivo. A protena mais carregada eletricamente ir migrar mais rpido. Qual protena est mais carregada? Aquela que estiver com um pI mais distante do pH do meio. A protena A est mais carregada eletricamente e ir migrar mais em campo eltrico. As protenas B e E apresentam o mesmo pI mais com massas diferentes. A protena B como menos pesada do que a protena E e , portanto, ir migrar mais.
ELETROFORESE EM GEL DE POLIACRILAMIDA COM SDS

Um outro tipo de eletroforese aquela feita em presena de SDS (dodecil sulfato de sdio). O SDS um detergente negativo que rompe todas as ligaes covalentes da protena que perde sua conformao tridimensional e se desenrola. O SDS liga-se as protenas formando um complexo de carga negativa (Fig. 52). As protenas quando tratadas com o SDS adquirem carga negativa e a separao ocorre baseada apenas na diferena de massa relativa entre elas. Neste sistema as protenas de menor massa relativa migram com maior velocidade.
Figura 52. Ligao entre uma protena nativa e o SDS (dodecil sulfato de sdio). O SDS forma um complexo de carga negativa com a protena.
A eletroforese em gel na presena de SDS um mtodo bastante usado para o clculo do peso molecular das protenas. possvel determinar a massa de uma protena atravs da comparao com protenas de massa conhecida (protenas padro). No gel, reservada uma canaleta para aplicao das protenas de massa relativa conhecida e em uma segunda canaleta aplica-se a protena de massa desconhecida (Fig. 53). Depois da corrida eletrofortica mede-se, com o auxlio de uma rgua, a migrao
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Eletroforese
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das protenas padro e da desconhecida. Depois, constri-se uma curva padro que representa a mobilidade eletrofortica de cada protena padro frente ao logaritmo do peso molecular. Com isto obtm-se uma reta que pode ser utilizada para determinar a massa relativa de uma protena que se quer estudar.
Figura 53. Eletroforese em gel de poliacrilamida com SDS. Painel (a), na canaleta 1 foram aplicadas as protenas padro de massa relativa (Mr) e na canaleta 2 foi aplicada a protena desconhecida. Painel (b) grfico para clculo da massa relativa da protena desconhecida.
ELETROFORESE EM GEL DE POLIACRILAMIDA COM SDS E BETA-MERCAPTOETANOL

Quando se quer verificar se uma dada protena formada por mais de uma subunidade, ou seja, mais de uma cadeia polipeptdica, trata-se a protena com SDS para que ela adquira carga negativa e adiciona-se o beta-mercaptoetanol. Esta substncia rompe ponte dissulfeto da protena (S-S) e dissocia as subunidades. Se uma protena tratada com beta-mercaptoetanol submetida eletroforese e nela so visualizadas 2 bandas separadas, significa que a protena constituda por 2 subunidades proticas unidas por ponte dissulfeto. Alm disso, possvel determinar a massa de cada subunidade atravs de sua migrao relativa. A Fig. 54 mostra uma eletroforese em gel de poliacrilamida em que as protenas foram tratadas com SDS e beta-mercaptoetanol.
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Figura 54. Eletroforese em gel de poliacrilamida com SDS. (A) cuba eletrofortica vertical, (B) protenas A-B e C foram tratadas com SDS e beta-mercaptoetanol e submetidas eletroforese. A protena A-B formada por duas subunidades (2 bandas) e a protena C tem uma nica subunidade (1 banda).
FOCALIZAO ISOELTRICA OU ELETROFOCALIZAO

A Focalizao Isoeltrica ou Eletrofocalizao uma tcnica eletrofortica usada para determinar o ponto isoeltrico (pI) de uma protena. Ao longo do gel estabelecido um gradiente de pH atravs da distribuio de uma mistura de cidos e bases orgnicos mediante o campo eltrico. Quando uma mistura protica aplicada no gel, cada protena migra para o polo de sinal contrrio e ela para de migrar quando fica eletricamente neutra. Isto acontece quando o pI da protena igual ao pH do gel. Para saber o pI da protena, s verificar o pH em que ela estacionou. A Fig. 55 mostra uma protena submetida a uma eletrofocalizao para determinao do seu ponto isoeltrico.
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Eletroforese
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Figura 55. Focalizao isoeltrica usada para determinao do pI de uma protena. Em pH baixo (4,0) a protena est carregada positivamente e em pH alto (10,0) a protena est carregada negativamente. Em campo eltrico, estas protenas migram para o polo de sinal contrrio e fica estacionria em pH 6,5. O pI da protena 6,5.
APLICAO DA ELETROFORESE ELETROFORESE DE PROTENAS SRICAS (PROTEINOGRAMA)

A eletroforese utilizada de rotina no laboratrio de anlises clnicas para separar e quantificar as protenas do soro humano. Quando o soro humano submetido a uma eletroforese em suporte slido usando um sistema horizontal possvel visualizar 5 classes de protenas. So elas: albumina, alfa 1-globulina (1), alfa 2-globulina (2), beta-globulina () e gama-globulina (). O soro humano o sobrenadante (fase lquida) obtido aps a centrifugao do sangue coletado sem o uso de anticoagulante. A eletroforese de protena tambm pode ser feita usando o plasma humano. O plasma o sobrenadante (fase lquida) obtido aps a centrifugao do sangue coletado com anticoagulante. A eletroforese de plasma revela a presena de 6 fraes, incluindo agora o fibrinognio. As protenas presentes no plasma so: albumina, alfa 1-globulina, alfa 2-globulina, betaglobulina, fibrinognio e gama-globulina. As protenas sricas apresentam uma faixa de pI entre 4,7 e 8,3. Desta forma, utilizado na corrida eletrofortica um tampo de pH acima de 8,3 para que todas as protenas fiquem carregadas negativamente. A aplicao , ento, no polo negativo. A albumina apresenta o pI menor igual a 4,7. Ento, a albumina ir migrar mais rpido em campo eltrico. A
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gama-globulina apresenta o pI mais alto igual a 8,3 e ir migrar menos. A Fig. 56 mostra um perfil eletrofortico das protenas sricas. A aplicao do soro foi feita no polo negativo (seta), uma vez que, as protenas esto negativas em pH acima de 8,3. O grfico, acima das bandas separadas, representa a leitura da absoro de luz feita pelo densitmetro. Este aparelho fornece o valor relativo (%) de cada protena. Sabendo-se a concentrao de protenas totais (PT) no sangue do paciente possvel, atravs de uma regra de trs simples, determinar a concentrao (g/dL) de cada protena. Observe, na Fig. 56, que a concentrao de protena total foi de 7,0 g/dL, o que corresponde a 100 %. Sabendo-se esta relao, calcula-se a concentrao de cada frao. Podemos observar que a protena mais concentrada no soro normal a albumina (3,99 g/dL) e a menos concentrada a a1-globulina (5,9 g/dL). Algumas condies patolgicas alteram a concentrao destas protenas e, por isso, este exame solicitado para auxiliar no diagnstico de algumas patologias.
Figura 56. Perfil eletrofortico de soro sanguneo normal. Os valores relativos (%) e absolutos (g/ dL) das protenas sricas podem ser vistos. A sete indica o ponto de aplicao (Heneine, 1995, p.97).
CONCLUSO
A eletroforese foi inventada por Arne Tiselius, em 1937 com o objetivo de separar partculas orgnicas. No mesmo ano, Paulo Koenig no Brasil introduziu a eletroforese com suporte e que at hoje largamente usada. A eletroforese consiste em um mtodo laboratorial com o objetivo de separar fraes de protenas, enzimas, lipdios, hemoglobina, DNA e RNA. A tcnica fundamentada na separao de partculas que apresentam cargas eltricas em um determinado pH. Para isso, usada uma cuba
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eletrofortica com duas cmaras preenchidas com soluo tampo e onde esto o eletrodo positivo e o negativo. Entre as cmaras ajusta-se o suporte slido ou semi-slido. As amostras a serem analisadas so aplicadas no suporte escolhido. Terminada a corrida eletrofortica, o suporte deve ser corado com corantes especficos de acordo com a amostra. Por ltimo elas so quantificadas usando a tcnica manual de eluio ou por mtodo automatizado usando a densitometria. A eletroforese constitui hoje uma tcnica de uso na rotina laboratorial de fundamental importncia no diagnstico de algumas doenas, tais como hemoglobinopatias, talassemias, mieloma mltiplo, alm de aplicao em lipidogramas, biologia molecular e enzimopatias.
RESUMO
A eletroforese uma tcnica que emprega o campo eltrico na separao de componentes eletricamente carregados. Em campo eltrico, as partculas migram para o eletrodo de sinal contrrio e quanto maior a densidade de cargas da partcula e quanto maior a diferena de potencial eltrico aplicado entre os dois eletrodos (ctodo e nodo) maior ser a mobilidade eletrofortica. Por outro lado, quanto maior a massa relativa da partcula menor a velocidade de migrao. Existem 2 tipos de eletroforese: sem suporte e com suporte. A eletroforese sem suporte est em desuso. Os suportes usados podem ser slidos ou semi-slidos e a corrida eletrofortica pode ser feita na horizontal ou vertical. A eletroforese em sistema horizontal separa as partculas de acordo com a carga eltrica. J a eletroforese com suporte slido na vertical, separa tanto pela carga eltrica quanto pela massa relativa sendo, portanto, mais eficiente no nmero de fraes obtidas. A eletroforese em gel com SDS separa as protenas apenas pela massa relativa e, por isto, esta tcnica usada para determinar a massa relativa das substncias. O uso de beta-mercaptoetanol permite identificar se uma determinada protena apresenta ou no mais de uma subunidade. A focalizao isoeltrica um tipo de eletroforese que utiliza um gel com um gradiente de pH que permite conhecer o ponto isoeltrico de uma protena.
PRXIMA AULA
Na prxima aula iniciaremos um estudo sobre a biofsica das radiaes ionizantes. Neste captulo iremos conhecer as propriedades fsicas de algumas radiaes ionizantes.
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REFERNCIAS
HENEINE, I. F. Biofsica Bsica. Ed. Atheneu, 2006. HENEINE, I. F. Eletroforese em Medicina. Um texto para a prtica mdica. Da metodologia ao resultado. Ed. Lemi S.A. 1995. NAOUM, P. C. Eletroforese, tcnicas e interpretao. 2. ed. v. 1, So Paulo: Editora Santos, 1999. SILVA-JNIOR, J. G. Eletroforese de protenas. Guia terico-prtico. Ed. Intercincia, 2001.
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Aula
BIOFSICA DAS RADIAES IONIZANTES
META
Apresentar os principais fenmenos da radioatividade e as propriedades fsicas das radiaes ionizantes.
OBJETIVOS
Ao final desta aula, o aluno dever: descrever o que radioatividade; diferenciar radiao corpuscular e eletromagntica; diferenciar radiao ionizante e no-ionizante; definir tempo de meia-vida; e explicar por diagramas as diferentes formas de emisses radioativas.
PR-REQUISITOS
Pr-requisito: Para o bom entendimento desta aula interessante para o aluno fazer uma reviso da estrutura e representao dos tomos.
Aparelho emissor de radiao gama. Tcnica da radioterapia utilizada no tratamento de cncer da mama (Fonte: http://novastecnologiassaude.blogspot.com).
INTRODUO
Neste captulo abordaremos as propriedades biofsicas de algumas radiaes ionizantes usadas na Biologia e na Medicina. Sero introduzidos alguns conceitos bsicos sobre a radioatividade, assim como, os principais tipos de emisses radioativas pelo ncleo de tomos instveis. O conhecimento fsico destas propriedades de fundamental importncia para o entendimento de como acontece a interao da radiao com a matria, dos seus efeitos biolgicos e dos procedimentos bsicos de proteo radiolgica especficos para cada tipo de radiao. Vale salientar que nenhum indivduo ou profissional deve estar exposto radiao sem que seja necessrio ou que tenha conhecimento dos riscos radiolgicos associados quela exposio.
Colete de proteo ionizante (Fonte: http://www.cefetsc.edu.br).
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Biofsica das radiaes ionizantes
Aula
BIOFSICA DAS RADIAES IONIZANTES RADIOATIVIDADE

As radiaes foram descobertas acidentalmente atravs da observao de que um minrio de urnio era capaz de sensibilizar (escurecer) um filme fotogrfico. Outros elementos, tais como o rdio e o polnio, tambm emitiam radiaes capazes de sensibilizar filmes fotogrficos. Os tomos que apresentavam esta propriedade foram chamados de radioativos sendo estes elementos denominados de radionucldeos. Os tomos estveis no emitem radiao. Os instveis apresentam excesso de energia nuclear e tendem a perder esta energia de forma espontnea, em busca de uma maior estabilidade energtica. Esta energia perdida pode ser na forma de emisso de partcula ou de onda eletromagntica (Fig. 57).
Figura 57. Emisso de radiao em forma de partcula ( ou ) ou em forma de radiao eletromagntica (g) por ncleos instveis (radioativos) (Cardoso et al., 2009, p.5).
Podemos, ento, classificar a radiao emitida por ncleos instveis em dois tipos: 1. radiao corpuscular - energia emitida pelo ncleo do tomo na forma de partcula dotada de massa. A radiao corpuscular pode ou no transportar carga eltrica. So exemplos de radiao corpuscular as partculas alfa (), beta positiva (+), beta negativa (+), nutron (n), entre outras (Okuno, 2007, p.13). 2. radiao eletromagntica - so ftons de origem nuclear tambm conhecidos como radiao gama () e que apresentam caractersticas eltricas e magnticas e se propagam com uma velocidade de 300.000 km/s.
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Tais radiaes no apresentam massa nem carga eltrica e podem se propagar no vcuo. A eletrosfera dos tomos tambm pode emitir radiaes eletromagnticas quando um eltron se desexcita, isto , quando o eltron que absorveu energia e mudou de orbital, retorna ao seu orbital de origem. Entre os ftons produzidos neste processo esto as ondas de rdio, ondas de televiso, micro-ondas, infravermelho, visvel, ultravioleta e raios X. Contudo, no se deve confundir estas radiaes eletromagnticas com aquelas de origem nuclear (radiaes gama). Por que alguns ncleos so estveis e no emitem radiao, enquanto outros so instveis e podem apresentar vrios tipos de emisso? - No ncleo atmico atuam duas foras, a eltrica (repulso) e a nuclear (atrao). Estas foras diminuem de intensidade quando a distncia entre as partculas aumenta. A fora nuclear se enfraquece muito mais rapidamente com a distncia do que a fora eltrica. Quando o ncleo contm excesso de prtons e nutrons, a distncia entre estas partculas diminui e a repulso eltrica comea a vencer a atrao da fora nuclear tambm chamada de fora forte. As foras no ncleo comeam a ficar desbalanceadas fazendo com que o ncleo atmico perca energia para encontrar uma situao de maior estabilidade. Assim, eles se tornam radioativos (Cardoso & Barroso, 2009, p.2). A radioatividade de um tomo instvel diminui com o passar do tempo. Essa diminuio de atividade chamada de decaimento nuclear. Quando um tomo sofre decaimento ele perde energia do seu ncleo. Com isto ele pode sofrer uma transmutao ou uma desexcitao. Na transmutao existe uma variao do nmero de prtons e/ou de nutrons do ncleo e o elemento se transforma noutro elemento. Assim, o fenmeno conhecido como desintegrao radioativa acaba por produzir a transmutao do elemento. Quando um tomo emite radiao corpuscular (, +, -) sempre ocorre uma transmutao do seu ncleo. Quanto maior a instabilidade do ncleo mais rapidamente ele decair por emisso de radiao. Aps a emisso, o ncleo adquire maior estabilidade energtica. Os ncleos que apresentam a mesma quantidade de prtons e nutrons e tm nmero atmico (Z) menor do que 20, so bastante estveis. Um exemplo de um tomo estvel (no-radioativo) o nitrognio-14. Este elemento tem 7 prtons e 7 nutrons. A relao entre prtons e nutrons 1. Por outro lado, o carbono-14 um elemento instvel, possuindo apenas 6 prtons e 8 nutrons. Os ncleos com massa atmica acima de 20 apresentam uma quantidade relativamente maior de nutrons. Este excesso torna o tomo instvel (Conde-Garcia, 1998, p.302). Quanto maior for a instabilidade nuclear, menor ser o tempo de meia-vida do tomo.
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Tempo de meia-vida (t1/2) o tempo requerido para que metade dos tomos radioativos de uma amostra sofra decaimento. Aps um tempo de meia-vida, a energia da amostra radioativa reduz-se metade da energia inicial. Um radionucldeo com meia-vida longa decai mais lentamente do que aquele que tem meia-vida curta (Okuno, 1982, p.42) O Curie (Ci) uma unidade de atividade radioativa e corresponde a 3,7 x 1010 dps (desintegraes por segundo). Esta atividade equivale aproximadamente quantidade de desintegrao produzida por 1 grama de 226Ra. Uma outra unidade usada para medir a atividade de uma amostra o Becquerel (Bq) que equivale a 1 dps. Assim, 1 Ci = 3,7 x 1010 Bq (Okuno, 2007, p.24). O iodo-131 possui um t1/2 de 8 dias. O que isto significa? Significa que neste intervalo de tempo a energia da amostra de iodo ser a metade da energia inicial. Considerando uma amostra de iodo com uma atividade inicial de 1000 Ci, ento a cada 8 dias a sua atividade reduz-se metade. Assim, para no primeiro intervalo de tempo igual a um t1/2 a atividade cair para 500 Ci, no segundo t1/2 ela ser de 250 Ci, no terceiro de 125 Ci, no quarto 62,5 Ci e assim sucessivamente. Isso significa que, para cada tempo de meia-vida, a atividade reduzida metade da anterior, at atingir um valor insignificante que no pode mais ser detectada (Cardoso, 2009, p.9). Cada elemento radioativo possui um t1/2 caracterstico. A Tabela 1 mostra o tempo de meia-vida de alguns radionucldeos. Tabela 1. Meia-vida fsica (t1/2) de alguns radionucldeos
(Fonte: Heneine, 2006, p.345; Conde-Garcia, 1998, p. 305).
O decaimento dos radionucldeos segue uma lei exponencial, ou seja, a energia decai exponencialmente com o tempo. Existe uma maneira matemtica de se calcular a atividade de uma amostra radioativa num dado instante. Para isso, preciso saber o tempo de meia-vida deste elemento e a atividade da amostra no tempo zero (Ao) ou a atividade desta amostra
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num dado tempo t qualquer (At). A Eq. 1 mostra como calcular a atividade de uma amostra radioativa:
Exerccio: Um paciente recebeu 3,5 mCi de I131, por via oral, para realizar uma cintilografia de pesquisa de refluxo esofgico. Considerando que o elemento tem uma t1/2 de 8 dias, qual a atividade deste material 72 horas aps a administrao do iodo? Comentrio: Voc precisar de uma calculadora cientfica para fazer este clculo. Devemos converter o tempo, que est em horas, para dias. Ento, 72 horas equivale a 3 dias. O t ser de 3 dias. Vamos substituir os valores, fornecidos no exerccio, na Eq. 1. A = 3,5 x e-0,693/8 x 3 A = 3,5 x e-0,086 x 3 A = 3,5 x e-0,259 A = 3,5 x 0,7711 A = 2,69 mCi Resposta = Aps 3 dias, o 131I ter sua a atividade diminuda e igual a 2,69 mCi.
ATIVIDADES
Um frmaco marcado com 125I (t = 60 dias) foi injetado em um camundongo, por via endovenosa, com a finalidade de investigar a sua metabolizao. Aps 10 dias, este elemento tinha uma atividade de 1.200 mCi. Quanto foi a atividade do iodo administrada no animal?

Neste exerccio, voc ir calcular a atividade inicial (Ao) do iodo. Voc dever encontrar um valor de aproximadamente 1.348 mCi. Se voc no encontrou este valor refaa seus clculos.
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As radiaes podem ainda ser classificadas como ionizantes ou noionizantes. As radiaes ionizantes promovem ionizao do tomo que ela interage (tomo-alvo) enquanto que a radiao no-ionizante promove a excitao do tomo-alvo. 1. Ionizao a ionizao acontece quando a radiao transfere para o eltron, parte ou toda a sua energia, e este eltron ejetado (arrancado) do tomo (Fig. 58). O tomo, ao perder eltrons, se transforma em um on positivo. Na ionizao, ocorre a formao de par inico (on positivo e eltron negativo). Os eltrons ejetados na ionizao saem do tomo com energia cintica (velocidade) podendo provocar ionizao de outros tomos (ionizao secundria). O espao vazio deixado pelo eltron que foi ejetado pela radiao chamado de vacncia. O preenchimento desta vacncia ocorre, espontaneamente, por eltrons de orbitais mais externos.
Figura 58. Ionizao do tomo pela radiao (Fonte: http://www.fas.org).
2. Excitao esse fenmeno acontece quando a radiao transfere para o eltron parte de sua energia. Ao absorver a energia da radiao, o eltron passa de um orbital mais interno (menor energia) para um orbital mais externo (maior energia) (Fig. 59). Logo depois, o eltron retorna para a sua camada de origem perdendo energia na forma de radiao eletromagntica.
Figura 59. Excitao do tomo pela radiao (Fonte: www.fas.org).
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DESCOBERTA DAS RADIAES CORPUSCULARES E ELETROMAGNTICAS

As radiaes foram descobertas em 1899 por Rutherford. No experimento, uma amostra de urnio-226 foi colocada em um recipiente de chumbo e submetida a um campo eltrico (Fig. 60). O feixe de radiao aps passar pelo campo eltrico formado por dois eletrodos, o ctodo (negativo) e nodo (positivo) incidia em um filme fotogrfico posicionado na parte superior. Aps revelar o filme fotogrfico, Rutherford observou que a radiao, emitida pelo urnio, tinha formado trs manchas escuras no filme. A radiao que sofreu desvio para o polo negativo deveria ser um feixe energtico de partculas positivas denominadas de partculas alfa (). A radiao que sofreu desvio para o polo positivo deveria, ento, ser um feixe energtico de partculas negativas denominadas partculas betas (). A partcula beta como bem mais leve do que a alfa sofreu um maior desvio no campo eltrico. A radiao que no sofreu desvio pelo campo eltrico, chamada de radiao gama (), foi descoberta 1 ano depois por Curie e Villard (1900). A radiao gama se trata de uma radiao eletromagntica sem carga eltrica e, por isso, no sofreu influncia do campo eltrico.
Figura 60. Descobertas das radiaes corpusculares ( e - ) e eletromagntica ( ). (www.cnen.com.br, modificado por Vasconcelos, C.M.L.)
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ENERGIA DAS RADIAES

As emisses radioativas (, , e raio X) possuem alta energia. Essa energia geralmente medida em eltron Volt (eV). O eV representa a energia cintica final que um eltron adquire quando acelerado entre dois pontos cuja a diferena de potencial (ddp) de 1 volt (Heneine, 2006, p.343). Imagine dois pontos A e B com uma ddp de 1 Volt (Fig. 61). O eltron est no ponto A e, frente a esta diferena de potencial, ele ser acelerado e quando atingir o ponto B ter uma energia cintica de 1 eV.
Figura 61. Energia cintica do eltron submetida a uma diferena de potencial de 1 Volt (Heneine, 2006, p.343).
PARTCULA ALFA ()
A radiao uma partcula formada por 2 prtons e 2 nutrons, portanto, uma partcula possui uma massa atmica (A) igual a 4 e um nmero atmico (Z) igual a 2. A partcula tem massa e nmero atmico semelhante ao tomo do hlio (He) (Heneine, 2006, p.341). Os elementos radiativos emissores de partcula so tomos mais pesados com um nmero atmico maior do que 82 (Knoche, 1991, p.31, Conde-Garcia, 1998, p.306), tais como urnio, trio, rdio, plutnio, polnio, etc. Quando um tomo emite uma partcula a d origem a um elemento filho com uma massa diminuda em 4 unidades e um nmero atmico diminudo em 2 unidades. Se aps a emisso de uma partcula o tomo continuar instvel, com excesso de energia, pode haver emisso de radiao gama. As equaes 2 e 3 mostram, respectivamente, a equao geral do decaimento e um exemplo do decaimento do rdio-226.
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A Fig. 62 mostra uma forma de representar um decaimento por emisso . O elemento emissor o polnio-214, a meia-vida fsica deste elemento de 1,64 x 10-4 s e a energia total para ocorrer a transmutao de 7,833 MeV. Podemos observar, no esquema, que o Po-214, em 99,9 % dos casos, emite uma partcula 1 com energia de 7,686 MeV e, ento, transforma-se em chumbo-210. Em 0,01 % dos casos, o polnio-214 emite uma partcula 2 com energia inferior, igual a 6,904 MeV. Esta partcula, como tem energia menor, no consegue retirar toda energia acumulada no ncleo, que fica em estado excitado. Desta forma, o tomo emite radiao gama e se transforma em chumbo-210. Quando h emisso de partcula positiva, a seta que representa o decaimento, apontada para baixo e para a esquerda . E na emisso gama, como ela no tem carga, o decaimento representado com uma seta para baixo .
Figura 62. Diagrama do decaimento do elemento polnio-214 por emisso alfa (Conde-Garcia, 1998, p.306).
A partcula , por apresentar grande massa, se propaga de forma retilnea no ar. Ao se propagar, ela promove ionizao dos tomos do ar promovendo ejeo de vrios eltrons. A sua trajetria retilnea e os eltrons ejetados, chamados de raios delta (ramificaes que partem da trajetria da partcula ), podem ser vistos em cmara de bolhas de Wilson (Fig. 63).
Figura 63. Trajetria retilnea de uma partcula alfa na cmara de bolhas de Wilson. As ramificaes observadas ao longo da sua trajetria so eltrons ejetados pela radiao alfa. Estes eltrons so chamados de raios delta (Conde-Garcia, 1998, p.306).
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A partcula uma radiao altamente ionizante. Uma partcula perde 33 eV de energia por ionizao. Desta forma, uma partcula emitida pelo rdio-226, com uma energia cintica de 4,8 MeV, produz 145.000 ionizaes antes de parar. Entretanto, a ionizao, promovida por ela, no constante ao longo da sua trajetria (Okuno et al., 1986, p.08). Como isto acontece? Uma partcula , ao se propagar tem sua velocidade diminuda por transferncia de energia para os tomos do meio. Ento, no incio de sua trajetria, como a velocidade de propagao alta, ela interage menos com os tomos do meio e, consequentemente, ioniza menos. medida que a velocidade de propagao diminui, aumenta o nmero de interaes com o meio, aumenta o nmero de ionizao. No final de sua trajetria, quando sua velocidade de propagao baixa, a partcula absorve 2 eltrons e se transforma em um tomo de hlio. O Straggling mostra o nmero de pares inicos (ionizao) produzidos pela partcula em funo da distncia percorrida por ela (Fig. 64).
Figura 64. Nmero de pares inicos (ionizao) formados pela partcula a em funo da distncia percorrida no ar em centmetros (Conde-Garcia, 1998, p. 307).
O alcance de uma partcula , distncia percorrida antes de parar, muito pequena e depende do meio de propagao e da energia da radiao. Por exemplo, uma partcula a com energia igual a 5 MeV tem um alcance de 3,5 cm no ar e 2,06 x 10-3 cm no alumnio. A Fig. 65 mostra a distncia percorrida no ar por partculas em funo da sua energia. Pode-se observar que quanto maior a energia da partcula maior a distncia percorrida por ela.
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Figura 65. Distncia percorrida pela partcula alfa (cm) em funo de sua energia em MeV (Conde-Garcia, 1998, p. 307).
Como o alcance pequeno, a partcula pode ser facilmente blindada com uma folha de papel (Fig. 66). Mesmo sem blindagem, a partcula no consegue atravessar a pele humana.
Figura 66. Blindagem da partcula alfa por uma folha de papel.
PARTCULA BETA ()
A radiao beta, por ser uma partcula dotada de massa, classificada como um tipo de radiao corpuscular. Ela tem massa pequena, similar ao do eltron, e pode ser negativa (-, ngatron ou eltron) ou positiva (+, psitron ou anti-eltron). Os tomos radioativos emissores de partcula apresentam uma massa intermediria, geralmente possuem nme-
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ro atmico menor de 84. Por ser uma partcula leve, a trajetria de uma partcula tortuosa (Fig. 67).
Figura 67. Trajetria tortuosa de uma partcula beta negativa vista em cmara de bolhas de Wilson (Conde-Garcia, 1998, p. 309).
EMISSO Para aumentar a estabilidade de ncleos que tm excesso de nutrons, ocorre a transformao de nutron em prton com emisso de partcula - pelo ncleo do tomo. O elemento filho, originado deste decaimento, apresenta a mesma massa do elemento pai, mas o nmero atmico aumentado em uma unidade. Na converso de nutron em prton, liberado o antineutrino ( ). O antineutrino no possui nem carga eltrica nem massa. As equaes 4 e 5 mostram, respectivamente, a equao geral do decaimento - e um exemplo do decaimento do carbono-14.
A Fig. 68 exemplifica um diagrama de decaimento por emisso -. O elemento emissor o carbono14, a meia-vida fsica deste elemento de 5.730 anos e a energia total para ocorrer a transmutao de 0,156 MeV. Podemos observar, no esquema, que o carbono-14, em 100 % dos casos, emite uma partcula - com energia de 0,156 MeV e, ento, transforma-se em nitrognio-14. Como a partcula - retirou toda a energia do ncleo, no houve emisso de radiao gama. Quando h emisso de partcula negativa, a seta que representa o decaimento, apontada para baixo e para a direita .
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Figura 68. Decaimento do carbono-14 por emisso de partcula beta negativa (Conde-Garcia, 1998, p.309).
EMISSO +
Ocorre emisso + quando um ncleo tem excesso de prtons em seu interior e, portanto, deficincia de nutrons. Para aumentar a estabilidade do ncleo, ocorre a transformao de um prtron em um nutron com emisso de partcula + pelo ncleo do tomo. O elemento filho, originado deste decaimento, apresenta a mesma massa do elemento pai, mas o nmero atmico diminudo em uma unidade. Na converso de prton em nutron, liberado o neutrino. As equaes 6 e 7 mostram, respectivamente, a equao geral do decaimento + e um exemplo do decaimento do sdio-22.
A Fig. 69 exemplifica um diagrama de um decaimento por emisso . O elemento emissor o sdio-22, a meia-vida fsica deste elemento de 2.605 anos e a energia total para ocorrer a transmutao de 2,842 MeV. Podemos observar, no esquema, que o sdio-22, em 90% dos casos, emite uma partcula 1+ com energia de 0,545 MeV seguido de emisso gama e, ento, se transforma em Ne-22. Em apenas 0,06 % dos casos, o Na-22 emite uma partcula 2+ com energia de 1,82 MeV. Tambm pode acontecer, em 10% do tempo do decaimento, captura de eltrons.
+
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Figura 69. Diagrama do decaimento do elemento sdio-22 por emisso de partcula beta positiva (Conde-Garcia, 1998, p. 311).
Por ser uma partcula muito leve, o alcance da partcula beta maior do que a da partcula alfa, na ordem de metros no ar. Por exemplo, uma partcula beta emitida pelo P-32 com uma energia de 1,71 MeV tem um alcance de aproximadamente 700 cm no ar (www.butantan.gov.br/reagentes/radioprotecao.ppt). O papel no consegue blindar a partcula beta sendo necessrio, ento, um material de maior densidade para blindar esta radiao. A Fig. 70 mostra que a partcula beta pode ser blindada por uma placa de alumnio.
Figura 70. Blindagem da partcula beta por uma placa de alumnio.
CAPTURA DE ELTRONS OU CAPTURA K

A captura de eltrons ocorre quando o ncleo do tomo possui excesso de prtons, ou seja, excesso de carga positiva. Para aumentar a estabilidade nuclear, o ncleo passa a capturar eltrons, geralmente da camada K (Fig 71-1). O eltron, ao entrar no ncleo, sofre fuso com
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um prton que se transforma em nutron (Eq. 8). Com isto, ocorre diminuio do nmero de prtons do tomo-filho sem alterao na massa atmica (Eq. 9).
A captura eletrnica considerada uma variao do decaimento + porque a converso de prton em nutron ocorre da mesma forma (Knoche, 1991, p.46). Em 90 % dos casos ocorre captura de eltrons da camada K, 10 % da camada L e 1 % da camada M. O ncleo emite um neutrino e radiao (Fig. 71-2)(Conde-Garcia, 1998, p.311; Heneine, 2006, p. 342). A captura de eltrons para o interior do ncleo deixa a eletrosfera com espaos vazios, chamados de vacncia. O preenchimento destas vacncias ocorre por eltrons de orbitais mais externos. Na passagem do eltron de uma camada mais externa para uma mais interna (fenmeno da desexcitao) ocorre perda de energia na forma de raios X caractersticos (Fig 71-3). Os raios X s so emitidos quando a vacncia est situada nas camadas K e L. A energia do raio X produzido pode, ao se propagar, ser absorvida por outro eltron orbital, podendo este eltron ser ejetado do tomo. O eltron quando ejetado devido a absoro interna do raio X, chamado eltron Auger (pronuncia -zei) (Conde-Garcia, 1998, p.311; Knoche, 1991, p.48).
Figura 71. Fenmeno da captura de eltrons ou captura K.
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TRANSIO ISOMRICA
Os ismeros so tomos com a mesma massa atmica e o mesmo nmero atmico, mas com contedo de energia diferente. Desta forma, existem dois tipos de ismeros, o estvel e o metaestvel. O ismero metaestvel possui excesso de energia nuclear e perde energia na forma de radiao gama, dando origem ao ismero estvel. A letra m ao lado da massa atmica do ismero indica que ele est no estado metaestvel. Assim, o 137mBa se refere ao estado metaestvel do ismero 137Ba (Fig. 72). A transio isomrica corresponde a um processo de desexcitao do ncleo metaestvel e a meia-vida do ismero pode variar entre 10-14 s a muitos anos (Knoche, 1991, p.49). Neste tipo de decaimento no ocorre a transmutao nuclear, ou seja, os tomos pai e filho possuem a mesma massa atmica e o mesmo nmero atmico (Eq. 10).
Fig. 72. Transio isomrica do elemento Brio-137.
CAPTURA ISOMRICA
Vimos anteriormente que os ismeros metaestveis emitem radiao . A energia da radiao pode ser absorvida por eltrons orbitais, que sero ejetados do tomo. O preenchimento das vacncias por eltrons mais externos (rearranjo orbital) pode resultar em emisso de raio X orbital. Estes eltrons ejetados so tambm chamados de eltrons Auger. O fenmeno da captura isomrica ocorre, frequentemente, associada transio isomrica.
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RADIAO GAMA
A radiao gama uma radiao eletromagntica de comprimento de onda muito pequeno (< 1 ). A radiao gama simbolizada por , tem origem nuclear, diferente dos raios X que tem origem na eletrosfera do tomo. Na emisso gama no h alterao do nmero de prtons e nutrons no ncleo do tomo. A emisso gama reduz a energia nuclear, conferindo mais estabilidade ao ncleo. Neste processo geralmente ocorre emisso gama. A radiao gama somente pode ocorrer durante uma transio isomrica ou aps um decaimento alfa, beta ou uma captura de eltron orbital. Por ter um comprimento de onda pequeno, a radiao gama muito penetrante. Isso acontece por ela no ser partcula, mas sim onda eletromagntica, alm do fato de ela no possuir carga eltrica. O poder de ionizao desta radiao inferior ao das partculas alfa e beta e depende da energia da radiao. Esta radiao pode ser blindada usando-se placa de chumbo ou de concreto. O quadro abaixo resume as principais propriedades fsicas das radiaes alfa, beta e gama.
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Aula
CONCLUSO
Podemos concluir que os tomos radioativos podem emitir espontaneamente radiaes na forma de partcula ou na forma de onda eletromagntica. As radiaes corpusculares por apresentarem massa so mais ionizantes do que as radiaes eletromagnticas. Por outro lado, as radiaes eletromagnticas so mais penetrantes e, por isso, so mais difceis de serem blindadas. Desta forma, de extrema importncia o conhecimento sobre as propriedades fsicas das radiaes ionizantes para poder entender como elas interagem com a matria dando surgimento aos efeitos biolgicos. A partir dos estudos fsicos sobre as radiaes ionizantes foi possvel conhecer melhor como os seus efeitos biolgicos se processam no indivduo irradiado e, desta forma, estabelecer normas mais rigorosas de proteo radiolgica. Os elementos radioativos podem induzir cncer e so perigosos quando expostos no meio ambiente sem os devidos cuidados. Eles so a causa das preocupaes nos acidentes nucleares e nos artefatos atmicos. No entanto, devemos tambm nos lembrar que se a radiao for usada de forma adequada, obedecendo aos critrios de radioproteo, muitos podem ser os benefcios por ela produzidos. A radiao aplicada Medicina auxilia no diagnstico de muitas doenas e no tratamento e cura do cncer e uma importante fonte de energia.
RESUMO
O tomo com ncleo instvel, em busca de uma maior estabilidade energtica, emite de forma espontnea radiao corpuscular (, +, -, n) e/ou radiao eletromagntica (). Estas radiaes podem, ao interagir com o tomo-alvo, promover efeitos fsicos, ionizao ou a excitao. Este efeito fsico pode evoluir, consequentemente, para um efeito biolgico. As radiaes , +, - e so emitidas pelo ncleo do tomo e so consideradas potencialmente ionizantes. A partcula a mais ionizante seguido da radiao e depois da . Em contrapartida, comparando as 3 radiaes, a partcula a que apresenta um menor poder de penetrao na matria. Vimos tambm que a emisso de radiao corpuscular altera o nmero atmico do tomo e, consequentemente, est acompanhada de uma transmutao nuclear. A emisso de radiao , por outro lado, no promove alterao nuclear. Apesar da partcula ser a mais ionizante ela pode ser facilmente blindada com uma simples folha de papel. As radiaes e podem ser blindadas com alumnio e chumbo, respectivamente.
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PRXIMA AULA
Na prxima aula conheceremos como as radiaes abordadas neste captulo interagem com o tomo-alvo.
REFERNCIAS
CARDOSO, E. M.; et al. Radioatividade. Apostila Educativa. Comisso Nacional de Energia Nuclear, CNEN. CONDE-GARCIA, E. A. C. Biofsica. Ed. Savier, 1998. HENEINE, I. F. Biofsica Bsica. Ed. Atheneu, 2006. KNOCHE, H. W. Radioisotopic methods for biological and medical research. Ed. Oxford University Press, 1991. OKUNO, E. Radiao. Efeitos, riscos e benefcios. Ed. Harbra, 2007. OKUNO, E.; CALDAS, I. L.; CHOW, C. Fsica para cincias biolgicas e biomdicas. Ed. Harbra, 1986. CARDOSO, S. C.; BARROSO, M. F. Rpida introduo fsica das radiaes. Unidade 3. http://omnis.if.ufrj.br/~marta/cederj/radiacoes/ fr-unidade3.pdf www.butantan.gov.br/reagentes/radioprotecao.ppt www.cnen.com.br
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Aula
INTERAO DA RADIAO COM A MATRIA
META
Neta aula o aluno aprender os mecanismos envolvidos quando a radiao eletromagntica ou corpuscular interage com a matria. Os conceitos contidos nesta aula sero importantes para a compreenso dos fenmenos biolgicos induzidos pela radiao.
OBJETIVOS
Ao final desta aula, o aluno dever: apresentar os efeitos da interao da radiao com a matria; apresentar os efeitos da interao das radiaes + e - com a meteria; e apresentar os efeitos da interao das radiaes ou X com a matria.
PR-REQUISITOS
Para o entendimento desta aula preciso dominar os conhecimentos contidos na aula de biofsica das radiaes ionizantes (aula nmero 06).
O espao possui uma grande quantidade de radiao. A Lua esta exposta a tempestades solares que originam fluxo de partculas carregadas ionicamente. Em astronautas veteranos pode ser detectado algum dos sintomas a exposio radiao como fadiga, alterao sanguinea e glaucoma (Fonte: http://intra.cef.pt).
INTRODUO
Nesta aula abordaremos o que acontece, ao nvel de tomo, quando a radiao interage com a matria. A radiao tanto pode interagir com os eltrons do tomo, quanto com o seu ncleo. E o efeito que vai ser produzido depender do fato de a interao ter sido com o eltron ou com o ncleo do tomo. Depender tambm da quantidade de energia absorvida pela matria e do tipo de radiao incidente (eletromagntica ou corpuscular). Os efeitos que abordaremos, neste captulo, so fsicos. Como consequncia deles ocorrem os efeitos qumicos, bioqumicos e, finalmente, os biolgicos. Os efeitos biolgicos sero discutidos no prximo captulo.
O primeiro acelerador de partculas (ciclotron) desenvolvido por Ernest O. Lawrence, em 1929 (Fonte: novastecnologiassaude.blogspot.com).
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Interao da radiao com a matria e efeitos biolgicos das radiaes ionizantes
Aula
EFEITOS DA RADIAO
Ns vimos no captulo anterior que o ncleo dos tomos radioativos podem emitir radiao corpuscular e/ou eletromagntica e estas radiaes podem interagir com a matria produzindo dois fenmenos principais, a excitao e a ionizao. Os efeitos que a radiao produz no tomo-alvo depende basicamente de 3 fatores: do tipo de radiao (, +, - ou ), da energia da radiao e do tomo-alvo que est absorvendo a energia da radiao. A radiao tanto pode interagir com o ncleo do tomo quanto com os eltrons. Entretanto, como os eltrons so mais numerosos, existe uma maior probabilidade de interao da radiao com eles (Knoche, 1991, p.79). Quando recebem energia das radiaes incidentes, os eltrons podem ser arrancados do tomo (ionizao) ou, simplesmente, podem mudar de orbital (excitao).
INTERAO DAS RADIAES IONIZANTES COM A MATRIA

INTERAO -MATRIA Na interao da partcula alfa com a matria podem acontecer tanto ionizao quanto a excitao dos tomos. Excitao A radiao uma partcula de carga eltrica positiva. Ento, quando ela se aproxima do eltron do tomo-alvo, a partcula exerce uma atrao que desloca o eltron de seu orbital para um outro de energia maior. Ou seja, o eltron absorve a energia da radiao e passa de uma camada mais interna para outra mais externa. Esse fenmeno conhecido como excitao. A cada interao da partcula com os eltrons ela perde parte de sua energia cintica. Aps a interao, a partcula continua se propagando no meio com uma velocidade ligeiramente menor e ir interagir com outros eltrons at que toda a sua energia seja dissipada (Knoche, 1991, p.80). Ionizao No processo de ionizao, a radiao transfere uma quantidade maior de energia para o eltron que , ento, arrancado do tomo. Este eltron arrancado se move com uma velocidade baixa quando comparado a alta velocidade de propagao da partcula . Esta diferena de velocidade, entre o eltron e a partcula , impede que haja combinao entre eles. A energia cintica da partcula diminui por dois motivos: pela energia fornecida para romper a ligao entre o ncleo e o eltron e, pela energia fornecida ao prprio eltron para que ele seja ejetado.
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O eltron ejetado (eltron primrio) pode, por sua vez, causar uma ionizao adicional em outros tomos pelos quais ele interage. O eltron arrancado pelo eltron primrio chamado de eltron secundrio e a ionizao promovida por ele denominada de ionizao secundria. A ionizao primria aquela promovida pela interao da radiao nuclear com a matria. Para a partcula , cerca de 60-80 % da ionizao induzida por ela se deve ao processo de ionizao secundria (Knoche, 1991, p. 81).
INTERAO --MATRIA
A partcula -, tambm chamada de ngatron, causa ionizao e excitao do tomo por um processo muito similar ao descrito para a partcula . Alm destes dois processos, a radiao - pode ainda promover um fenmeno de Bremsstrahlung. O ngatron apresenta a mesma carga do eltron. Ento, o fenmeno de atrao eletrosttica promovido pela partcula no se aplica partcula -. O deslocamento de eltrons promovido pela partcula -, acontece por repulso eletrosttica. A quantidade de energia necessria para ejetar os eltrons praticamente igual para as partculas - e a. Entretanto, mais eltrons secundrios so formados pela interao --matria quando comparado partcula . Cerca de 70-80 % o total da ionizao devido aos eltrons secundrios produzidos. Existe uma grande diferena na energia transferida na coliso entre duas partculas de mesma massa (2 eltrons) e na coliso entre partculas de massa diferentes ( e eltron). Como uma partcula 7.000 vezes mais pesada do que o eltron, a interao entre elas no promove mudana na direo de propagao da partcula alfa. Entretanto, a coliso entre um eltron primrio e um eltron do meio absorvedor (ambos com mesma massa) deve mudar, de forma significativa, a direo de propagao de ambos os eltrons. A cada interao, o eltron primrio mudar a sua trajetria. A coliso de um eltron primrio com um ncleo atmico, tambm pode promover grande desvio na trajetria do eltron ou mesmo a sua absoro pelo ncleo (Knoche, 1991, p. 84). Como os eltrons (primrio e o secundrio) tm a mesma massa e mesma carga, algumas de suas colises resultam em eltrons secundrios com energia cintica maior do que a do eltron primrio. Bremsstrahlung uma palavra alem que significa quebra da radiao e se refere emisso de radiao eletromagntica quando partculas carregadas e dotadas de alta velocidade sofrem desvio de trajetria devido interao com ncleos de tomos pesados. A alta velocidade dos radiaes corpusculares no favorece interao delas com eltrons situados na eletrosfera de um tomo prximo. Isto porque o tempo de interao entre eles pequeno. Assim, a grande velocidade um fator que
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Aula
dificulta a ionizao ou a excitao da matria pela qual passa a radiao primitiva. Partculas carregadas, tais como os eltrons, emitem radiao quando so submetidas a uma acelerao ou desacelerao. Os eltrons, em alta velocidade, podem ser atrados para o ncleo do tomo-alvo. Estes eltrons (ou partcula -), ao se aproximarem do ncleo sofrem um desvio da sua trajetria e, com isso, eles perdem energia emitindo radiaes eletromagnticas com variados comprimentos de onda, inclusive na faixa dos raios X (Fig. 73). Nas ampolas, os raios X so produzidos pelo bombardeio de um metal pesado, tal como o tungstnio, por feixe de eltrons que se propagam em alta velocidade. Esta produo se deve ao bremsstrahlung, bem como desexcitao da eletrosfera, envolvendo os orbitais K e L.
Figura 73. Emisso de raios X pelo processo de bremsstrahlung (Fonte: www.ndt-ed.org).
INTERAO +-MATRIA
Em virtude das partculas + e - possurem carga oposta pode ocorrer atrao eletrosttica entre elas. Quando isto se d, ambas sofre aniquilao. Na aniquilao as duas partculas so convertidas em dois ftons de radiao eletromagntica, cujo comprimento de onda prximo aos raios X. Cada fton gerado tem uma energia de 0,51 MeV.
INTERAO DAS RADIAES X E COM A MATRIA

As radiaes gama e X so ondas eletromagnticas. A primeira tem origem nuclear, enquanto que a segunda est relacionada com a eletrosfera. Ambas no possuem carga nem massa. Quando interagem com a matria, podem ocorrer 5 fenmenos diferentes: espalhamento coerente, efeito fotoeltrico, efeito Compton, produo de par e fotodesintegrao. a) Espalhamento coerente No espalhamento coerente o eltron absorve no todo ou em parte a energia da radiao X ou gama incidente e sofre
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excitao, ou seja, passa para um orbital mais energtico ou mais externo (Fig. 74). Logo em seguida, o eltron retorna ao seu orbital de origem, perdendo a energia recebida na forma de um fton de raios X que se propaga numa nova trajetria (Conde-Garcia, 1998, p.282).
Figura 74. Fenmeno de espalhamento coerente (Fonte: http://www.ndt-ed.org).
b) Efeito fotoeltrico - Neste efeito, a radiao gama ou X totalmente absorvida por um eltron orbital resultando em sua ejeo para fora do tomo e deixando o tomo ionizado (Fig. 75). Este eltron chamado de fotoeltron e como possui grande energia cintica pode causar ionizao secundria. Subsequentemente, outro eltron de uma camada mais externa ocupar a vacncia deste eltron arrancado. Nesta passagem, o eltron pode perder energia na forma de raios X, se o preenchimento da vacncia for nas camadas K ou L. J o preenchimento de camadas superiores libera desde luz ultravioleta, visvel, infravermelho ou calor. Este efeito acontece quando a radiao tem baixa energia, menor do que 1 MeV (Heneine, 2006, p.347, Okuno, 2007, p.18).
Figura 75. Efeito fotoeltrico promovido pela radiao ou X em um tomo absorvedor (Fonte: http://www.ndt-ed.org).
c) Efeito Compton - Neste efeito, a radiao gama ou X parcialmente absorvida por um eltron orbital resultando tambm em sua ejeo do tomo (Fig. 76). Este eltron ejetado chamado de eltron Compton. Como o eltron absorveu parte da energia incidente, a radiao continu-
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Aula
ar se propagando s que com menor energia e com nova trajetria. Durante o seu percurso pela matria a radiao poder continuar produzindo novas ionizaes. Geralmente, a radiao absorvida por eltrons mais externos. Tambm os eltrons Compton podem produzir ionizao e excitao de outros tomos. Este efeito acontece quando a radiao tem energia superior a 1 MeV (Knoche, 1991, p.90; Heneine, 2006, p.347, Okuno, 2007, p.18).
Figura 76. Efeito Compton promovido pela radiao ou X em um tomo absorvedor (Fonte: http://www.ndt-ed.org).
d) Produo de par Neste fenmeno (Fig. 77), a radiao ao interagir com o ncleo nas vizinhanas deste tomo forma um par de partculas beta, sendo uma + e outra -. A radiao original desaparece e produz estas duas partculas gastando para gerar suas massas 0,51 MeV para cada uma delas. Alm disto, ela ter que ter energia suficiente para, alm de criar massa, dotar as partculas formadas de energia cintica de modo a que elas possam se afastar uma da outra. Assim, necessrio que a radiao original tenha energia superior a 1,02 MeV. As partculas beta geradas dissipam sua energia por ionizao, excitao, bremsstrahlung ou por aniquilao (+).
Figura 77. Produo de par (Fonte: http://www.ndt-ed.org).
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e) Fotodesintegrao Neste fenmeno ocorre a captura da radiao pelo ncleo do tomo absorvedor (Fig. 78). O ncleo ao absorver uma grande quantidade de energia (entre 5 a 15 MeV) da radiao sofre desintegrao, emitindo prtons, nutrons, partcula (2 prtons e 2 nutrons) ou at mesmo um grupo de partculas (Conde-Garcia, 1998, p.284).
Figura 78. Fenmeno da fotodesintegrao por interao da radiao com o ncleo do tomo (Fonte: http://www.ndt-ed.org).
CONCLUSO
Podemos concluir que a radiao pode transferir parte ou toda a sua energia para o tomo-alvo podendo acontecer, excitao ou ionizao do tomo, emisso de raios X (bremssrahlung), aniquilao de partculas, espalhamento coerente, efeito fotoeltrico, efeito Compton, produo de par e fotodesintegrao. A ocorrncia de um efeito ou outro vai depender se radiao interagiu com o ncleo atmico ou com os eltrons, da energia da radiao incidente, do tipo de radiao e do tomo-alvo. Aps a interao da radiao com a matria pode ocorrer uma leso que , inicialmente, molecular e evolui para alteraes qumicas e bioqumicas. Destes eventos, aparecem os resultados biolgicos que abordaremos no prximo captulo.
RESUMO
A radiao , ao interagir com o meio produz dois fenmenos principais, ionizao e excitao. Na ionizao, o eltron absorve energia da radiao e arrancado do tomo. Na excitao, o eltron tambm absorve energia da radiao, s que em menor quantidade e transferido para um orbital mais externo. O eltron ejetado pela radiao chamado de eltron primrio. O eltron primrio pode interagir com outros eltrons podendo causar ejeo de outros eletrons que sero chamados de secun-
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Aula
drios. A partcula + tambm pode produzir ionizao ou excitao do tomo por processo similar. Alm disso, esta partcula pode ser atrada para perto do ncleo do tomo e sofrer um desvio perdendo energia na forma de raios X (fenmeno de bremsstrahlung). Na interao + com a matria alm dos fenmenos de excitao e ionizao pode ocorre a aniquilao de partculas. Neste fenmeno, h o choque entre uma partcula + e - de cargas contrrias, elas so aniquiladas (desaparecem) e ocorre emisso de dois ftons de radiao eletromagntica com a energia igual a da partcula beta. Na interao da radiao eletromagntica com a matria podem ocorrer 5 tipos de interaes: espalhamento coerente, efeito fotoeltrico, efeito Compton, produo de par e fotodesintegrao. Se vai acontecer um fenmeno ou outro depende se a radiao vai interagir com o eltron ou com o ncleo e da quantidade de energia da radiao.
ATIVIDADES
1. Diferencie excitao e ionizao do tomo. 2. Como so gerados dos raios X no fenmeno de bremsstrahlung? 3. Descreva a aniquilao de partculas. 4. Diferencie os efeitos fotoeltrico e Compton. 5. O que pode acontecer quando a radiao eletromagntica interage com o ncleo de tomo?

1. Estes efeitos ocorrem por interao da radiao com os eltrons do tomo-alvo. O eltron, ao absorver a energia da radiao pode ser excitado ou ionizado. 2. Neste fenmeno o raio X produzido quando o eltron ou a partcula beta negativa passa prximo ao ncleo. 3. Ocorre quando duas partculas betas de cargas opostas se chocam. 4. Existem diferenas no que diz respeito energia da radiao incidente se alta ou baixa, se o eltron absorve toda ou parte da energia da radiao e se aps a interao se a radiao acaba ou continua se propagando. 5. Voc deve explicar os fenmenos de produo de par e a fotodesintegrao.
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PRXIMA AULA
Na prxima aula estudaremos a sequncia de eventos que levam aos efeitos biolgicos das radiaes ionizantes.
REFERNCIAS
CONDE-GARCIA, E. A. C. Biofsica. Ed. Savier, 1998. HENEINE, I. F. Biofsica Bsica. Ed. Atheneu, 2006. KNOCHE, H. W. Radioisotopic methods for biological and medical research. Ed. Oxford University Press, 1991. OKUNO, E. Radiao. Efeitos, riscos e benefcios. Ed. Harbra, 2007. OKUNO, E.; CALDAS, I. L.; CHOW, C. Fsica para cincias biolgicas e biomdicas. Ed. Harbra, 1986.
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Aula
EFEITOS BIOLGICOS DAS RADIAES IONIZANTES
META
Conhecimento dos efeitos biolgicos das radiaes ionizantes.
OBJETIVOS
Ao final desta aula, o aluno dever: conhecer o mecanismo de ao das radiaes; diferenciar efeitos diretos e indiretos; diferenciar efeitos agudos e tardios; diferenciar efeitos somticos e hereditrios; diferenciar efeitos estocsticos e no-estocsticos; e conhecer as formas da sndrome aguda das radiaes.
PR-REQUISITOS
O domnio desta aula depende dos conhecimentos abordados nos captulos 6 e 7.
Os raios alfa so os mais fracos e podem ser bloqueados por papel. Os raios beta atravessam o papel, mas no uma folha de alumnio. Os raios gama passam pelos dois, mas no atravessam um bloco de chumbo (Fonte: www.gettyimages.com).
INTRODUO
O nosso organismo formado por molculas, tais como gua, protenas, lipdios, DNA, RNA, glicose, etc., e elas so formadas por tomos, tais como carbono, hidrognio, oxignio e nitrognio. Ns vimos, no captulo anterior, que a interao da radiao com a matria acontece com o tomo, podendo interagir com o seu ncleo atmico ou com os seus eltrons. Desta forma, quando um indivduo irradiado, ou seja, quando a radiao atravessa o seu corpo, os eltrons que sero arrancados pela radiao fazem parte dos tomos do seu organismo. Um aspecto importante que devemos levar em considerao o fato de a radiao atravessar o nosso corpo e no sentimos absolutamente nada. Ningum sente dor ao fazer uma radiografia. A ausncia de dor no significa que a radiao inofensiva e que no produz efeito biolgico. Quando um ser vivo irradiado, recebe energia da radiao. Os tomos do corpo irradiado absorvem essa energia e d-se incio a uma srie de eventos fsicos, qumicos e biolgicos que sero sumariamente abordados neste captulo.
Os danos biolgicos causados pela radiao comeam em conseqncia das interaes ionizantes com os tomos formadores das clulas (Fonte: www.m9.com.br)
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Efeitos biolgicos das radiaes ionizantes
Aula
EFEITOS BIOLGICOS DAS RADIAES

O efeito biolgico da radiao est relacionado com a capacidade de ela provocar ionizao na matria com a qual interage, isto , com sua capacidade de arrancar eltrons da matria, criando ons. A eficincia para produzir ionizao, como j foi visto, diferente para os tipos de radiao, obedecendo seguinte ordem decrescente: > > . A transformao de uma molcula vital (protena, gua, DNA, etc.) pela ao da radiao pode levar a consequncias graves na clula, uma vez que, para viver, ela necessita do correto funcionamento de muitas molculas. Quando um ser vivo irradiado, parte da energia radiao absorvida pelos tomos do ser irradiado. Com isto, torna-se inevitvel que acontea o efeito fsico da radiao que consiste em ionizao ou excitao de tomos. Estes efeitos acontecem com uma durao muito pequena, na ordem de quatrilionsimo de segundo (Okuno, 2007, p.42). Eles somente so evitados com o uso de blindagens apropriadas para cada tipo de radiao. Como consequncia do efeito fsico, acaba ocorrendo um efeito fsico-qumico. No efeito fsico-qumico ocorre a produo de ons pela radiao, formao de radicais livres e ruptura de ligaes qumicas das molculas. Este efeito acontece tambm muito rapidamente aps a interao da radiao com a matria. Segundo Okuno (2007), este estgio acontece em, aproximadamente, um milionsimo de segundo. Depois do efeito fsicoqumico aparece o efeito bioqumico. Neste efeito, os radicais livres e ons formados pela radiao, como so espcies bastante reativas, passam a se ligar com molculas vitais do nosso corpo, tais como protenas, enzimas, DNA, RNA, etc. Por ltimo, acontece o efeito biolgico no qual acontecem as alteraes morfolgicas e funcionais na clula e os seus efeitos podem ser clinicamente observados (Okuno, 2007, p.43). O mecanismo de interao da radiao com a clula pode ser de dois tipos: 1) do tipo direto, no qual a radiao interage diretamente com alguma molcula vital do nosso organismo tal como o DNA, protena ou 2) do tipo indireto, no qual a radiao interage com a molcula da gua promovendo a formao de radicais livres e estes, por sua vez, afetam o DNA ou protenas. Como a gua constitui cerca de 70 % das nossas clulas, o efeito indireto tem maior probabilidade de acontecer. Radilise da gua uma modificao estrutural na molcula da gua promovida pela radiao. Constitui um importante processo na interao das radiaes ionizantes com o tecido. Os primeiros ons formados pela interao da radiao com a gua so: H2O+ e e-. Depois de 10-8 segundos, so formados outras espcies tais como: H2, H2O2, OH- e tambm radicais livres da gua H, OH. Como o on hidrognio uma espcie reativa, ele se combina, em soluo aquosa, com gua formando o on hidrnio (H3O+). Os quadros abaixo mostram algumas reaes que acontecem no
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processo de radilise da gua. Na presena de oxignio a formao de perxido de hidrognio (H2O2) aumenta devido formao de radical hidroperxido (HO2). Segundo Conde-Garcia (1998, p.326) o H2O2 pode difundir-se no nosso corpo alcanando grandes distncias, ao contrrio dos radicais livres que, por serem muito reativos, se combinam rapidamente com alguma molcula e permanecem no local onde foram produzidos.
A clula apresenta mecanismos de defesa para remover ou neutralizar os ons e os radicais livres. Por exemplo, as enzimas catalase e peroxidases so capazes de remover os radicais perxidos formados pela radiao. A enzima superxido dismutase, conhecida como SOD, elimina os radicais superxidos. Alm das enzimas, as vitaminas C e E tambm podem agir neutralizando os radicais livres. Se a clula conseguir neutralizar os radicais livres formados pela radiao, o efeito qumico no evoluir para efeito biolgico e os pequenos efeitos no chegam a tornar-se visveis. Entretanto, caso a dose de radiao recebida por um indivduo seja alta, a formao de radicais livres ser mais intensa e h grande chance de a clula no conseguir neutralizar todos os radicais livres formados. Aps
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Aula
um certo intervalo de tempo, aparecem as leses a nvel celular ou a nvel do organismo.
CARACTERSTICAS GERAIS DOS EFEITOS BIOLGICOS DAS RADIAES

1. Especificidade Os efeitos biolgicos verificados em um paciente irradiado ou contaminado no so especficos da radiao, ou seja, outros agentes fsicos ou qumicos podem produzir os mesmos efeitos. Por exemplo, um indivduo que se submete a uma radioterapia pode ter queda de cabelo. Este efeito s visto em pacientes submetidos radioterapia? No. Outros agentes podem produzir queda de cabelo. A quimioterapia tambm pode induzir este mesmo efeito. Uma exposio radiao na pele pode induzir queimaduras. S a radiao queima? No. O fogo e um cido tambm podem queimar sua pele. Podemos, ento, verificar que os sinais e sintomas observados em pacientes expostos radiao so inespecficos. E claro que isto dificulta o diagnstico. Agora se o paciente irradiado apresenta mais de um sinal ou sintoma decorrente da radiao, isto facilitar o diagnstico. 2. Tempo de latncia o tempo de latncia o tempo de decorre entre a exposio radiao e o aparecimento visvel dos danos biolgicos. Este tempo depende da dose de radiao recebida, ou seja, quanto maior a dose de exposio menor ser o tempo de latncia. Imagine uma situao em que o indivduo entrou em contato com uma fonte radioativa e depois de 5 dias apresentou vmitos e diarria severos. Qual o tempo de latncia? Cinco dias. Baseado no tempo de latncia os efeitos das radiaes so classificados em agudos ou tardios (crnicos). - efeito agudo - apresenta um tempo de latncia curto. Geralmente, os efeitos aparecem com um tempo de latncia de 2 meses. Podem aparecer em decorrncia de uma exposio a uma dose alta de radiao em um intervalo de tempo muito curto. - efeito tardio ou crnico so considerados tardios os efeitos que se manifestam no indivduo aps 3 meses da exposio radiao (CondeGarcia, 1998, p.329). Podem aparecer decorrente de uma exposio de dose baixas por um longo tempo (Ex. radiologista, que recebe doses baixas de radiao diariamente no seu trabalho durante muitos anos) ou podem aparecer decorrente de uma dose alta com um tempo de exposio pequeno (Ex. indivduo envolvido em um acidente radioativo, recebeu uma alta dose de radiao, sobreviveu aos efeitos agudos, mas manifestou um efeito crnico aps meses ou anos da exposio.
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3. Reversibilidade Ns vimos que o nosso organismo tem mecanismos de defesa contra a radiao. Este mecanismo consiste, principalmente, na remoo e neutralizao dos ons e radicais livres formados pela radiao. Desta forma, os efeitos biolgicos podem ser reversveis. No caso da necrose e do cncer os efeitos so irreversveis. Por que? Uma clula cancergena nunca volta a ser uma clula saudvel e a necrose o estado de morte de um tecido ou parte dele em um organismo vivo, uma condio tambm irreversvel. 4. Dose limiar certos efeitos biolgicos somente se manifestam se o indivduo receber uma dose de radiao acima de um valor determinado, acima de um limiar. Por exemplo, para um indivduo apresentar vmitos e diarria necessrio que ele se exponha a uma dose de 6 Sv de radiao. Para este tipo de efeito (vmitos e diarria) existe um limiar de dose j conhecido para o efeito se manifestar. Existem alguns efeitos biolgicos provocados pela radiao que no apresentam dose limiar. O que significa a unidade Sv (Sievert)? uma unidade de dose equivalente e o seu sub-mltiplo o milisievert (mSv). Para termos uma noo da dose equivalente, a Comisso Internacional de Proteo Radiolgica estabeleceu que o limite mximo permissvel para os indivduos do pblico de 1 mSv ao ano (Okuno, 2007, p.38). H = D. Q. N onde : H a dose equivalente (Sv) D a dose absorvida (Gy) Q um fator de qualidade da radiao N outro fator que leva em considerao o tipo de tecido que est absorvendo a radiao. A dose de radiao absorvida a energia total absorvida por unidade de massa. No SI (Sistema Internacional) a unidade para dose de radiao absorvida o Gray (Gy) e corresponde absoro de um Joule por quilograma de tecido vivo atingido. 1 Gy = 1 J/kg = 1 Sv O efeito que uma determinada radiao pode provocar em um indivduo depende da dose absorvida por ele e do tipo de radiao a que foi exposto (alfa, beta ou gama). A radiao altamente ionizante, enquanto as radiaes beta e gama so menos ionizantes. Desta forma foi criado o fator de qualidade (Q) que corresponde a uma constante que
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Aula
depende do tipo de radiao absorvida. O Q das radiaes e 1 e da radiao 20. 5) Transmissibilidade os efeitos decorrentes da radiao podem ser classificados em efeitos somticos e efeitos hereditrios. Os somticos so os efeitos que ocorrem em clulas somticas (no reprodutoras) e se manifestam no indivduo irradiado no sendo possvel ser transmissvel aos descendentes. Por exemplo, uma queimadura na mo pela radiao que evoluiu para uma necrose seguida de amputao do membro. Apenas o indivduo que foi irradiado que sofreu os efeitos da radiao. Este efeito somtico jamais ser observado nos seus descendentes. O efeito s transmissvel ou hereditrio aos descendentes, ou seja, passa de gerao a gerao, quando as clulas sexuais (vulo ou espermatozide) forem irradiadas e usadas na concepo. Estes efeitos so chamados de hereditrios. A maior parte das alteraes causadas pela radiao somtico, ou seja, no transmissvel. Isto se deve ao fato do nosso organismo ser formado por um nmero bem maior de clulas somticas quando comparado s clulas sexuais. Aps os acidentes de Hiroxima e Nagasqui, no foi detectado nenhum aumento de anormalidades genticas nos descendentes de indivduos irradiados (Okuno, 2007, p.47). 6) Radiossensibilidade O nosso corpo formado por tecidos constitudos de clulas diferenciadas e clulas indiferenciadas. O que uma clula indiferenciada? Considera-se clula indiferenciada aquela que ainda no tem uma funo definida no embrio ou no orgasmo. Durante o processo de diferenciao as clulas assumem as funes que iro realizar. O nosso organismo formado, na sua grande maioria, de clulas diferenciadas que apresentam baixa taxa de diviso. So exemplos de clulas diferenciadas as dos tecidos sseo, muscular, fgado, rins, pulmes e corao. As clulas nervosas tambm so clulas diferenciadas com baixa capacidade de diviso. As clulas que se dividem muito pouco acumulam leses na molcula de DNA. Algumas dessas mutaes no comprometem as funes vitais da clula e, conseqentemente, do rgo. Podemos concluir que quanto maior o grau de diferenciao celular, menor a taxa de diviso celular e menor sero as possibilidades de morte celular induzida pela radiao. Clulas diferenciadas so mais radiorresistentes. As clulas indiferenciadas, por sua vez, apresentam uma alta taxa de diviso e, por isso, so mais sensveis ao das radiaes ionizantes. Quanto menor a diferenciao celular maior a probabilidade de induo de morte por ao das radiaes ionizantes. O feto apresenta uma intensa proliferao celular sendo extremamente vulnervel ao das radiaes ionizantes (www.cnen.gov.br). Na Dinamarca, quando o feto ou embrio recebe uma dose de radiao acima de 0,1 Gy, o aborto recomendado para evitar que a criana nasa com
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leucemia, malformaes fsica ou mental (Okuno, 2007, p.48). As clulas da medula ssea - responsveis pela formao das clulas sanguneas (glbulos brancos, glbulos vermelhos e plaquetas) -, os vulos e espermatozides e as clulas das camadas mais internas dos tecidos de recobrimento (pele, vilosidades intestinais, de glndulas) so muito vulnerveis ao das radiaes ionizantes por apresentarem uma alta taxa de diviso celular. Em funo do grau de diferenciao celular uma clula pode apresentar maior ou menor sensibilidade frente s radiaes. Bergoni & Tribondeau (1906) descreveram as primeiras observaes dos estudos sobre a sensibilidade das clulas s radiaes ionizantes. Eles relataram que a radiossensibilidade das clulas diretamente proporcional a sua atividade mittica e inversamente proporcional ao seu grau de diferenciao. Isto significa dizer que as clulas com grande poder de diviso clulas so as mais sensveis e as mais diferenciadas, isto , aquelas com menor habilidade em sofrer mitose, so mais resistentes radiao. Os efeitos biolgicos das radiaes ionizantes podem ser classificados em estocsticos e no-estocsticos. Os efeitos estocsticos so efeitos que se manifestam no indivduo irradiado e no apresentam dose limiar. O efeito clinicamente observvel apenas quando a dose da radiao for maior do que este limiar. Na curva dose-resposta (Fig. 79), nota-se que os efeitos estocsticos se iniciam na origem 0 do grfico, o que mostra que no h um limiar de dose para eles. Qualquer dose de radiao, mesmo muito pequena, pode resultar em efeito estocstico. Entretanto, quanto maior a dose maior a probabilidade de ocorrncia.
Figura 79. Efeito estocstico (curva A) e no-estocstico (curva B) das radiaes.
Para minimizar a probabilidade de ocorrncia de efeitos estocsticos, a proteo radiolgica deve ser empregada de tal forma que a dose de
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Aula
radiao seja a mais baixa possvel. Os efeitos estocsticos como a carcinognese e danos genticos so os mais importantes. Os efeitos no-estocsticos so efeitos que s se manifestam no indivduo irradiado acima de um determinado limiar de dose (Fig. 79). Desta forma, a dose deve exceder um valor mnimo para que os efeitos sejam observados (Knoche, 1991, p. 319). A intensidade da resposta aumenta com o aumento da dose e uma curva sigmide observada. A Tabela 1 mostra exemplos de efeitos no-estocsticos. Tabela 1. Exemplos de efeitos no-estocsticos
SNDROME AGUDA DA RADIAO

A sndrome aguda da radiao caracteriza-se por um conjunto de sinais e sintomas apresentados pelo paciente que recebeu uma dose elevada de radiao em um curto intervalo de tempo. Como a dose recebida foi elevada, o indivduo apresentar efeitos agudos que so aqueles que se manifestam em um perodo de latncia de horas ou dias. Ns vimos que as clulas apresentam resistncias diferentes quando submetidas s radiaes ionizantes. Conhecendo-se a dose recebida pelo indivduo possvel prever qual ser o sistema biolgico afetado. claro que doses mais baixas de radiao vo afetar os rgos mais sensveis e as doses mais altas afetaro todos os rgos, inclusive os mais resistentes. Desta forma, como a medula ssea radiossensvel, ela sofrer primeiro aps uma irradiao. Em doses superiores a 2 Sv o indivduo apresentar os efeitos hematopoticos da sndrome aguda da radiao. Com a medula ssea danificada pela radiao, a produo das clulas sanguneas ficar comprometida. Tem-se diminuio do nmero de plaquetas, fato a que se chama de plaquetopenia. Como as plaquetas so importantes na coagulao sangunea, a diminuio destas clulas pode induzir o aparecimento de hemorragia e sangramentos. Tem-se tambm diminuio dos glbulos brancos ou leuccitos, fenmeno conhecido como leucopenia. Como so
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clulas de defesa, a leucopenia deixa o indivduo vulnervel infeces bacterianas ou virais. Nesta fase, recomenda-se o isolamento do paciente e o uso de mscaras. Alm da plaquetopenia e leucopenia, ocorre tambm anemia que corresponde a uma reduo no nmero de glbulos vermelhos ou hemcia. De acordo com a gravidade do paciente recomenda-se fazer transfuso sangunea ou transfuso com concentrado de plaquetas ou de hemcias. Doses maiores que 6 Sv podem danificar os sistemas menos sensveis radiao tal como o sistema do trato gastrointestinal (TGI). O tecido de revestimento do TGI formado por vrias camadas celulares. Nelas, as clulas mais internas so responsveis pela reposio das clulas das camadas mais externas. Como as clulas das camadas mais externas so mais diferenciadas, elas morrem quando so irradiadas e acabam sendo eliminadas por descamao. Quando a radiao atinge as camadas mais internas, as clulas a localizadas morrem, e o efeito final se manifesta na forma de ulceraes intestinais que geralmente no cicatrizam. Esta fase conhecida como sndrome gastrointestinal e o indivduo apresenta diarria e vmitos persistentes. Como h perda de lquidos e eletrlitos importante hidratar este paciente com soro fisiolgico por via endovenosa. Na sndrome cerebral, observada em dose acima de 20 Sv, as clulas do sistema nervoso so danificadas pela radiao e o indivduo apresenta desorientao, convulses e choque. Segundo Conde-Garcia (1998) a gravidade da sndrome aguda da radiao depende da dose de radiao recebida, da extenso da rea irradiada, do rgo irradiado, da resposta biolgica do indivduo e da presena ou no de fatores radiossensibilizadores.
CONCLUSO
Logo aps a descoberta das radiaes ionizantes, ficou claro que as radiaes ionizantes poderiam danificar os tecidos biolgicos. Inicialmente, foi verificado que a exposio de um indivduo radiao poderia causar danos pele (queimaduras) e queda de cabelo em pacientes submetidos radioterapia. Entretanto, devemos ressaltar o lado benfico do uso correto da radiao. A radiao pode, entre outras aplicaes, ser usada para fins diagnsticos (obteno de imagens do corpo humano) e radioterpicas (tratamento do cncer). Desta forma, de suma importncia estudar os efeitos biolgicos promovidos pelas radiaes ionizantes, de modo a contribuir para minimizar os seus efeitos deletrios e maximizar os benefcios do seu uso.
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Aula
RESUMO
Os efeitos biolgicos das radiaes so decorrentes da interao da radiao com os eltrons do tomo absorvedor. Nesta interao, inicialmente, as radiaes promovem um efeito fsico que consiste em excitao ou ionizao do tomo. Seguindo-se a este, iniciam-se os efeitos fsico-qumicos, bioqumicos e biolgicos. A radiao pode interagir de forma direta atingindo alguma molcula vital do organismo (DNA) ou de forma indireta, atravs da radilise da gua. Os efeitos biolgicos das radiaes ionizantes no so especficos das radiaes, podem apresentar um tempo de latncia para se manifestar clinicamente, podem ser reversveis ou no a depender se o organismo ou no capaz de reparar os danos induzidos pela radiao. Alguns efeitos biolgicos somente se manifestam acima de uma dose limiar de radiao. Os efeitos biolgicos so classificados em agudo (quando aparecem em at 2 meses) ou tardio (acima de 2 meses), somtico (atingem as clulas somticas) ou hereditrio (atingem os gametas e so transmitidos aos descendentes), estocstico (sem dose limiar) ou no-estocstico (exigem dose limiar). A sndrome aguda das radiaes apresenta as formas hematopotica, gastrointestinal e cerebral e s observada em doses elevadas de radiao ou em caso de um acidente envolvendo material radioativo.
REFERNCIAS
CONDE-GARCIA, E. A. C. Biofsica. Ed. Savier, 1998. HENEINE, I. F. Biofsica Bsica. Ed. Atheneu, 2006. KNOCHE, H. W. Radioisotopic methods for biological and medical research. Ed. Oxford University Press, 1991. OKUNO, E. Radiao. Efeitos, riscos e benefcios. Ed. Harbra, 2007. OKUNO, E.; CALDAS, I. L.; CHOW, C. Fsica para cincias biolgicas e biomdicas. Ed. Harbra, 1986. www.cnen.gov.br
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