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Quimica Instrumental
Quimica Instrumental
Anlise Instrumental
Elaborado por: Profa Msc. Elaine de Arruda Oliveira Coringa
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Apostila:
Anlise Instrumental
PROF ELAINE DE ARRUDA OLIVEIRA CORINGA
Bacharel e Licenciada em Qumica - UFMT
Especialista em Processamento e Controle de Qualidade de Alimentos UFLA/MG
Especialista em Planejamento Educacional UNIVERSO/RJ
Mestre em Agricultura Tropical Qumica do Solo - UFMT
CUIAB-MT
2006
SUMRIO
1. Fsica Aplicada ptica e ondulatria
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APRESENTAO
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Nos primeiros anos da Qumica, a maioria das anlises era realizada por separao dos
componentes da amostra por precipitao, extrao ou destilao. Em anlises qualitativas os
componentes separados eram identificados por sua cor, ponto de fuso ou ebulio, solubilidade, odor,
atividade tica ou seus ndices de refrao. Em anlises quantitativas, utilizava-se medidas titulomtricas
ou gravimtricas.
Ainda hoje os laboratrios empregam muitos mtodos clssicos de separao e determinao de
analitos, mas sua aplicao est diminuindo em funo dos novos mtodos instrumentais.
Devido ao desenvolvimento tecnolgico a que os processos esto sujeitos, a anlise qumica
tambm se desenvolveu e, atualmente, a maioria das anlises tanto qualitativas quanto quantitativas, so
realizadas atravs de instrumentos ou aparelhos prprios, desenvolvidos para realizar uma gama muito
grande de anlises, surgindo, ento a Anlise Instrumental.
A anlise instrumental no dispensa, entretanto, o conhecimento das anlises via mida
tradicionais (qualitativa e quantitativa), nem os fundamentos bsicos da instrumentao utilizada, visto
que o tcnico qumico no deve tornar-se um mero seguidor de receitas ou de roteiros e, muito menos,
um leitor de manuais de aparelhos.
Mtodos Convencionais de anlise qumica:
Estes mtodos no envolvem nenhum equipamento sofisticado, utilizando apenas vidrarias e
reagentes. As anlises quantitativas que utilizam os mtodos convencionais geralmente so baseadas na:
gravimetria, atravs de uma balana de preciso;
volumetria, atravs de vidrarias ou recipientes cuidadosamente calibradas.
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O mtodo instrumental:
1.2.2
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Gerao de Sinal: a maioria das medies fsicas so registros da resposta de uma substncia a um
sinal imposto. Exemplo: uma determinao da condutividade requer uma corrente eltrica e uma
medio da absoro requer um feixe de luz. Quase sempre, os sinais pticos se originam em uma
fonte, e os eltricos em um gerador.
d) Computao: sua funo a converso do sinal a uma forma til de apresentao. Por exemplo, nos
espectrofotmetros de leitura direta, as concentraes so calculadas automaticamente, usando os
dados brutos dos sinais.
e)
1.2.3
a)
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Propriedades caractersticas
Emisso da radiao
Mtodos instrumentais
Espectroscopia de emisso (raios X, UV, Vis);
fluorescncia, fosforescncia
Espectrofotometria e fotometria (UV, Vis, raios X,
IV, RMN)
Turbidimetria, nefelometria, RAMAN
Refratometria
Difrao de raios X
Polarimetria
Potenciometria
Coulometria
Amperometria, polarografia
Condutimetria
Absoro da radiao
Espalhamento da radiao
Refrao da radiao
Difrao da radiao
Rotao da radiao
Potencial eltrico
Carga eltrica
Corrente eltrica
Resistncia eltrica
1.3 INSTRUMENTOS PARA ANLISE:
Fonte de energia
(estmulo)
Lmpada de
filtro de vidro
Chama
W,
Amostra/eletrodo
de vidro
Luz do sol
Informao
analtica
Transdutor de
entrada
Feixe de luz
atenuado
Radiao
UV ou Vis
Fotoclula
ou
fototubo
Vlvula
fotomultiplicadora
Atividade do
on H
Cor
Eletrodos
vidrocalomelanos
Olho
Domnio de
dados da
informao
Corrente
eltrica
Potencial
eltrico
Potencial
eltrico
Sinal
no
nervo tico
Processador da
informao
Escala
Amplificador,
monocromador
Amplificador
Crebro
Dispositivo
de leitura de
sada
Medidor de
corrente
Unidade
digital
Unidade
digital
Resposta
visual cor
c)
d)
e)
f)
g)
h)
i)
j)
k)
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Preciso
Sensibilidade
Seletividade
Habilidade requerida do operador
Custo e disponibilidade
Limite de deteco
Faixa de concentrao
Velocidade
Facilidade e convenincia
Custo por amostra
Mtodo
de Exatido
E
E
M
M
M
M
M
E
1.6.1
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Para o uso da tcnica de curva de calibrao, vrios padres que contm concentraes do
analito exatamente conhecidas so introduzidos no instrumento e feita a leitura. Normalmente, essa leitura
corrigida para o valor obtido para o branco no instrumento. Idealmente, o branco contm todos os
componentes da amostra original, exceto o analito. Os dados resultantes so colocados num grfico com a
resposta do instrumento corrigida versus a concentrao do analito no padro.
PADRO OU SOLUO PADRO = soluo preparada em laboratrio de concentrao
exatamente conhecida da substncia que se quer analisar na amostra. Contm todos os
reagentes adicionados na amostra.
Portanto, esse mtodo consiste em preparar um grfico das leituras instrumentais em funo da
concentrao de padres, conhecido como curva de trabalho ou curva de calibrao, e contm as
concentraes dos padres na abscissa e as leituras instrumentais correspondentes na ordenada. Para ser
til, o grfico deve estender-se sobre todo o intervalo de concentraes possveis para as amostras a serem
analisadas.
Depois de preparada a curva de trabalho, localiza-se a leitura instrumental da amostra como um
ponto sobre a curva e l-se a concentrao da amostra na coordenada que representa o eixo das
concentraes.
Uma variao linear da leitura em funo da concentrao no um requisito obrigatrio para o
uso do mtodo. Uma vez preparada, a curva de trabalho pode ser usada para tantas anlises quantas se
deseje, desde que as condies experimentais no sejam modificadas. Quando a concentrao da
substncia na soluo amostra situar-se alm dos valores da faixa de linearidade, necessrio dilu-la,
efetuar nova leitura e incluir nos clculos o fator de diluio.
Este procedimento e medida, avaliao e construo do grfico usado em vrios mtodos
instrumentais. Hoje dispe-se de softwares que, alem do traado das curvas, efetuam o tratamento
estatstico dos dados, facilitando a obteno dos resultados em menor tempo (Planilha Excel).
Preparao da curva de calibrao:
Vrios padres com Concentrao conhecida da substncia que se deseja analisar so introduzidos no
instrumento e a leitura registrada.
A resposta corrigida para o valor obtido com o branco (soluo que contm todos os componentes
da amostra original, exceto a substncia desejada)
Os dados so plotados num grfico de Leitura x Cp
A curva ajustada matematicamente pelo mtodo dos mnimos quadrados (ou no Excel) e uma
equao da reta produzida: Y = ax +b, onde a Concentrao pode ser calculada diretamente pela
equao (Y = leitura e x = Concentrao da substncia na amostra)
Volume (Vp)
adicionado do padro
Volume da amostra
(Va)
Volume da amostra
(Va)
VT = Va+VP
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O sistema SI composto por unidades de medida bsicas das quais outras se derivam. Padres de
comprimento, massa e tempo so o metro (m), o quilograma (Kg) e o segundo (s), respectivamente. A
temperatura medida em kelvins (K), a quantidade de substancia em mols (mol), a corrente eltrica em
ampre (A).
Quadro 2 Unidades SI de base
[UNIDADES SI DE BASE]
GRANDEZA
comprimento
massa
tempo
corrente eltrica
temperatura termodinmica
quantidade de matria
intensidade luminosa
NOME
metro
quilograma
segundo
ampre
kelvin
mol
candela
SMBOLO
m
kg
s
A
K
mol
cd
As unidades derivadas so unidades que podem ser expressas a partir das unidades de base,
utilizando smbolos matemticos de multiplicao e de diviso. Dentre essas unidades derivadas, diversas
receberam nome especial e smbolo particular, que podem ser utilizados, por sua vez, com os smbolos de
outras unidades de base ou derivadas para expressar unidades de outras grandezas. O Quadro 3 fornece
alguns exemplos de unidades derivadas expressas diretamente a partir de unidades de base. As unidades
derivadas so obtidas por multiplicao e diviso das unidades de base.
Quadro 3 - Exemplos de unidades SI derivadas, expressas a partir das unidades de base.
[UNIDADE SI]
GRANDEZA
NOME
SMBOLO
superfcie
metro quadrado
m2
volume
velocidade
metro cbico
metro por segundo
m3
m/s
acelerao
nmero de ondas
m/s2
m-1
massa especfica
kg/m3
volume especfico
m3/kg
densidade de corrente
A/m2
A/m
mol/m3
cd/m2
(o nmero) um
1*
campo magntico
concentrao
(de quantidade de matria)
luminncia
ndice de refrao
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UNIDADE SI DERIVADA
NOME
SMBOLO
radiano (a)
rad
hertz
Hz
EXPRESSO
EM OUTRAS
UNIDADES SI
DERIVADA
ngulo plano
freqncia
fora
newton
presso, esforo
pascal
Pa
N / m2
energia, trabalho,
joule
N.m
quantidade de calor
potncia,
watt
J/s
coulomb
volt
W/A
farad
C/V
fluxo de energia
quantidade de eletricidade,
carga eltrica
diferena de potencial eltrico,
fora eletromotriz
capacidade eltrica
resistncia eltrica
ohm
V/A
siemens
A/V
weber
Wb
V.s
induo magntica
tesla
Wb / m2
indutncia
henry
Wb / A
condutncia eltrica
temperatura Celsius
fluxo luminoso
lmen
Im
cd . sr
iluminamento
lux
Ix
Im/m2
SMBOLO
FATOR
1024
yotta
21
zetta
1018
1015
1012
FATOR
10
10
10
10
10
101
PREFIXO
SMBOLO
10-1
deci
10-2
centi
exa
10-3
mili
peta
10-6
micro
tera
10-9
nano
-12
pico
-15
femto
-18
atto
-21
zepto
yocto
giga
mega
quilo
hecto
deca
M
K
H
Da
10
10
10
10
10-24
Certas unidades que no fazem parte do Sistema Internacional, porm esto amplamente
difundidas, desempenham papel to importante que necessrio conserv-las para uso geral com o
Sistema Internacional de Unidades. Elas figuram no Quadro 6 a seguir.
Quadro 6 - Unidades fora do Sistema Internacional, em uso com o Sistema Internacional
NOME SMBOLO
VALOR EM UNIDADE SI
Minuto
hora(a)
dia
grau(b)
minuto
segundo
litro
tonelada
min
h
d
l, L
t
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1 min = 60s
1 h = 60 min = 3.600s
1 d = 24 h = 86.400s
1 = (/180) rad
1 = (1/60) = (/ 10 800) rad
1 = (1/60) = (/ 648 000) rad
1 L = 1 dm3 = 10-3 m3
t = 103 kg
SMBOLO
DEFINIO
ua
eV
VALOR EM
UNIDADES SI
1 eV = 1,602 177
33 x 10-19J
1 u = 1,660 540 2
x 10-27kg
1 ua = 1,495 978
706 91 x 1011
O Quadro 8 menciona outras unidades fora do SI utilizadas de maneira corrente e com o SI, a
fim de satisfazer s necessidades no campo comercial ou jurdico, ou a interesses cientficos particulares.
Quadro 8 - Outras unidades fora do SI em uso com o Sistema Internacional
NOME
SMBOLO
(a)
Milha martima
n
angstrm
are(b)
hectare(b)
a
ha
VALOR EM UNIDADE SI
1 milha martima = 1 852m
1 milha martima por hora = (1 852/3 600)m/s
1 = 0,1 nm = 10-10 m
1 a = 1dam2= 102 m 2
1ha = 1hm2= 104 m 2
a) A milha uma unidade especial utilizada na navegao martima e area para expressar distncias.
b) Estas unidades e seus smbolos so empregados para exprimir superfcies agrrias.
O Quadro 9 fornece as relaes entre as unidade CGS e as unidades SI. O quadro menciona as
unidades CGS com nomes especiais. No campo da mecnica, o sistema de unidades CGS se baseava em 3
grandezas de base e suas unidades: o centmetro, o grama e o segundo. No campo da eletricidade e
magnetismo, as unidades foram tambm expressas em
funo dessas trs unidades de base. Como essas unidades podiam ser expressas de vrias maneiras,
vrios sistemas foram estabelecidos, como, por exemplo, o Sistema CGS Eletrosttico, o Sistema CGS
Eletromagntico e o Sistema CGS de Gauss. Nesses trs ltimos sistemas, o sistema de grandezas e o
sistema de equaes correspondentes so diferentes
daqueles que se utilizam com as unidades SI.
Quadro 9 - Unidades CGS derivadas dotadas de nomes particulares
NOME
erg
dina
poise
Stokes
gauss
SMBOLO
erg
dyn
P
St
G
VALOR EM UNIDADE SI
1 erg = 10-7J
1 dyn = 10-5N
1 P = 1 dyn.s/cm2= 0,1Pa.s
1 St = 1 cm2/s = 10-4 m 2/s
1G = 10-4 T
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PREFIXO
SMBOLO
Tera
Giga
Mega
Quilo
Hecto
Deca
Deci
Centi
Mili
Micro
Nano
pico
T
G
M
k
h
da
d
c
m
n
p
1.7.2
UNIDADES
SMBOLO
metro
metro quadrado
metro cbico
mcron
litro
grama
tonelada
segundo
erg
dina
grau Celsius
grau absoluto
caloria
bar
hora
m
m2
m3
l
g
t
s
erg
dyn
C
K
cal
bar
h
UNIDADES
SMBOLO
ampre
volt
watt
ohm
coulomb
farad
henry
hertz
poise
newton
candela (vela nova)
lux
lmen
stilb
A
V
W
C
F
H
Hz
P
N
cd
lx
lm
sb
Algarismos significativos:
1,362 x 10-4
3,111 x 10-4
4,473 x 10-4
+
0,04107 x 105
6
0,984 x 10
9,84 x 10 5
11,51 x 105
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Multiplicao e diviso:
Quando multiplicao: somam-se os expoentes da potncia de 10
Quanto diviso: subtraem-se os expoentes da potncia de 10
Arredondamento:
Para se arredondar um nmero com casas aps a vrgula:
Sendo o ltimo n maior que 5: soma-se 1 ao n. anterior a ele:
Ex: 121,7948 121,795 = 121,80 = 122,0
Sendo o ltimo n menor que 5: no modifica:
Ex.: 9,8413
9,841 = 9,84 = 9,8
sendo o ltimo n igual a 5:
Se o anterior for par no modifica
Ex.: 12,25
12,2
Se o anterior for impar soma-se 1 ao n anterior a ele.
Ex.: 12,35
12,4
1.7.3
Logaritmos e antilogaritmos:
Por exemplo:
2 o logaritmo de 100 porque 100 = 102
O logaritmo de 0,001 -3 porque 0,001 = 10-3
Para encontrar o logaritmo de um nmero com a sua calculadora, digite o nmero e aperte a funo log.
Sua calculadora tambm possui uma tecla 10x ou uma tecla antilog. Para encontrar o antilogaritmo de
um n, digite-o em sua calculadora e aperte 10x ou antilog.
Exemplos:
Log 0,001237 = -2,9076
Log 1237 = 3,0924
Log 3,2 = 0,51
1.7.4
Tipos de erros:
Erro sistemtico:
Tambm chamado de erro determinado, aparece de uma falha no projeto de um experimento ou de um
equipamento. reprodutvel se voc conduzir o experimento vrias vezes exatamente da mesma maneira.
Pode ser descoberto e corrigido, embora isso possa ser no muito fcil.
Por exemplo:
O uso de um peagmetro que foi padronizado incorretamente produz um erro sistemtico.
O uso de uma bureta no calibrada.
Erro aleatrio:
Tambm chamado de erro indeterminado, resulta de efeitos de variveis descontroladas nas medidas.
Pode ser positivo ou negativo. Ele est sempre presente, no corrigido, e a ltima limitao na
determinao de uma grandeza. Est associado leitura de escala.
Por exemplo:
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Preciso e exatido:
Exerccios:
1- Os seguintes dados de calibrao foram obtidos por um mtodo instrumental para determinao da
substncia X em soluo aquosa:
Concentrao do padro X (ppm)
0
2
6
10
14
18
Leitura instrumental
0,031
0,173
0,422
0,702
0,956
1,248
Construa a curva de calibrao para a substncia X. Duas amostras dessa substncia obtiveram leituras
iguais a 0,85 e 0,520, respectivamente. Encontre a concentrao de X nas duas amostras pela curva de
calibrao.
2- Uma amostra de 25 mL contendo Cu+2 obteve uma leitura instrumental igual a 23,6 unidades
(corrigida pelo branco). Quando foi adicionado essa soluo exatamente 0,5 mL de Cu(NO3)2 a
0,0287 M, a leitura instrumental aumentou at 37,9 unidades. Calcule a concentrao de Cu+2 na
amostra, assumindo que o sinal analtico diretamente proporcional concentrao do analito.
3- A forma reduzida do dinucleotdeo da nicotinamida adenina (NADH) uma coenzima fluorescente.
Essa substncia foi determinada em uma amostra a partir da sua curva de calibrao, onde os padres
foram:
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A partir da curva de calibrao do Zn, encontre a concentrao de Zn+2 em uma amostra cuja leitura foi
igual a 10,46%.
5- Qual a concentrao em mol/Lde NaCl quando dissolvemos 32 g do sal em gua e dilumos a 0,5 L?
6- Quantos gramas de metanol (CH3OH) esto contidos em 0,1 L de uma soluo aquosa a 1,71 mol/L
de metanol?
7- Uma soluo diluda tem densidade prxima de 1 g/mL. Suponha que a soluo contm 1 ppm de
soluto. Expresse a concentrao do soluto em g/L, g/L, g/mL e mg/L.
8- A concentrao de C20H42 na chuva de inverno de 0,2 ppb. Presumindo que a densidade da chuva
prxima de 1 g/mL calcule a concentrao molar deste composto.
9- Converta as unidades:
a) 15,5 ppm em g/L
d) 3,9 x 10-9 mg/L em g/L
b) 3,4 mg/mL em g/L
e) 2,35 g/L em %
c) 9,0 x 10-25 g/L em mg/dL f) 7,8 g/dL em g/mL
g)41,5% em g/L
h)5,6ppm em %
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2. FSICA APLICADA:
2.1 RADIAO ELETROMAGNTICA
2.1.1
a) Teoria corpuscular:
Em 1672, o fsico ingls Isaac Newton apresentou uma teoria conhecida como modelo corpuscular
da luz. Nesta teoria, a luz era considerada como um feixe de partculas emitidas por uma fonte de luz
que atingia o olho estimulando a viso e por isso foi chamada de teoria ou modelo corpuscular da luz.
b) Teoria ondulatria:
No sculo XIX, o cientista francs L. Foucault, medindo a velocidade da luz em diferentes meios
(ar/gua), verificou que a velocidade da luz era maior no ar do que na gua, contradizendo a teoria
corpuscular que considerava que a velocidade da luz na gua deveria ser maior que no ar (Newton
no tinha condies, na poca, de medir a velocidade da luz).
Na segunda metade do sculo XIX, James Clerk Maxwell, atravs da sua teoria de ondas
eletromagnticas, provou que a velocidade com que a onda eletromagntica se propagava no espao
era
igual
velocidade
da
luz,
cujo
valor
,
aproximadamente:
c = 3 x 10 8 m/s = 300 000 km/s. Assim, Maxwell estabeleceu teoricamente que: A luz uma
modalidade de energia radiante que se propaga atravs de ondas eletromagnticas.
Quinze anos aps a descoberta de Maxwell, Hertz comprovou experimentalmente a teoria
ondulatria.
c) Dualidade onda/partcula:
Definio:
Radiao eletromagntica - A luz, como verificou Maxwell, formada por ondas eletromagnticas, que
so campos eltricos e magnticos paralelos se propagando no espao. As ondas eletromagnticas tem
velocidade c = lf , onde c a velocidade da luz, l o comprimento de onda, que a distncia entre os picos,
e f a freqncia (o inverso do perodo de uma oscilao).
a) Por que vemos um objeto?
Segundo o filsofo grego Plato, nossos olhos emitiam pequenas partculas que tornavam os objetos
visveis ao atingi-los.
Atualmente, acredita-se que o objeto que envia luz para os nossos olhos. Por isso, temos dois tipos
de objetos:
Objetos luminosos ou fontes de luz: a luz gerada por eles prprios (Sol, lmpada
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acesa, chama);
Objetos iluminados: recebem luz de outros objetos (pessoas, livros, mveis, Lua, planetas);
A maioria dos corpos reflete difusamente a luz que incide sobre eles, e quando esta luz penetra em
nossos olhos, ns enxergamos o objeto.
b) A cor de um objeto:
At o sculo XVIII, a luz branca, como a luz solar, era considerada uma luz pura, constituda por
uma nica cor, sem mistura.
Isaac Newton observou experimentalmente que um feixe de luz branca ao atravessar um prisma de
vidro originava vrios feixes coloridos, e postulou que a luz branca uma mistura de todas essas
cores, e sua separao chamada disperso da luz, e o conjunto de cores formado era o espectro da
luz branca.
Quando um objeto iluminado com luz branca, ele absorve algumas cores do espectro dessa luz e
reflete outras. A cor com que o objeto visto ser determinada pelas cores que ele reflete.
Assim, um objeto de cor branca reflete todas as cores e no absorve nenhuma; o objeto de cor preta
absorve toda a luz e no envia nenhuma luz para nossos olhos; j o objeto transparente (por exemplo,
uma lmina de vidro vermelha) absorve todas as outras cores deixando a cor vermelha passar atravs
dele.
2.2 PROPRIEDADES ONDULATRIAS DA LUZ:
A luz um tipo de onda que pode se propagar no ar e no vcuo, e constitui um exemplo de ONDA
ELETROMAGNTICA, que so ondas que no necessitam de um meio material para se propagar.
Outros exemplos de onda eletromagntica so as ondas de rdio e de TV, as microondas, os raios X,
gama, infravermelhos e ultravioletas.
Todas as ondas eletromagnticas possuem a mesma velocidade de propagao no vcuo, e seu valor de
300.000 km/s (3.108 m/s), e so caracterizadas pelas grandezas: velocidade (c ou v); freqncia (f) e
comprimento de onda ()
Todas as ondas possuem trs grandezas que as caracterizam: VELOCIDADE (v ou c),
FREQUNCIA (f) e COMPRIMENTO DE ONDA (), que se relacionam entre si atravs de
uma frmula:
c=fx
A velocidade da luz varia de acordo com o meio em que ela est. Por exemplo, no vcuo ou no ar a
velocidade da luz de 300.000 Km/s.
Na gua v = 230.000 km/s
No vidro v = 200.000 km/s
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Por isso, em qualquer meio material, a luz se propaga com uma velocidade menor que a sua
velocidade de propagao no vcuo.
Quando uma onda passa de um meio para outro ela se refrata, isto , ocorre uma mudana em sua
direo de propagao:
Feixe incidente
Feixe refletido
AR
VIDRO
Feixe refratado
Isso ocorre porque a velocidade de propagao da luz nos dois meios diferente muda a direo
da propagao da luz;
Quando um feixe de luz branca atravessa um prisma de vidro, ele se refrata ao entrar e sair do prisma
(pois a velocidade de propagao da luz no ar e no vidro so diferentes), ocorrendo um desvio na
direo da propagao do feixe, sofrendo disperso, separando-se nas cores do espectro.
2.5 O ESPECTRO ELETROMAGNTICO:
Vimos que quando um feixe luminoso incide em um prisma, ele decomposto em vrios outros
feixes, devido ao fenmeno da disperso da luz. O raio luminoso, ao passar pelo prisma, sofre uma
decomposio segundo suas freqncias (ou comprimentos de onda) constituintes. Se fizermos a luz
solar passar atravs de um prisma, ela ser decomposta em vrias cores que so popularmente
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A regio ULTRAVIOLETA abrange comprimentos de onda menores que 4 x 10-4 mm, ou seja,
mais curtos que os da luz visvel e mais longo que os dos raios X. invisvel para o olho humano,
e dividida em regies denominadas UV prximo (400-300 nm), UV afastado (300-200 nm) e UV
no vcuo (200-4 nm); estes ltimos so prejudiciais, pois so absorvidos pela camada de oznio da
Terra.
Raios
gama
1
-
Raios
X
10
-
Ultravioleta
Visvel
Infravermelho
Microondas
1.800
180
-
3.800
380
-
7.800
780
0,7
-
400
0,04
Ondas de
radio
25
E=hxf
Onde: E = energia absorvida/emitida (erg ou Joule)
(equao 2)
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f= c/
E=hx c
(equao 3)
(equao 4)
Um fton de alta freqncia (f) e curto comprimento de onda () mais energtico do que um
com baixa freqncia e longo comprimento de onda. Da deduz-se que as ondas
eletromagnticas transportam energia e quanto maior for a freqncia da onda, maior ser a
energia transportada por ela.
Por exemplo: como a quantidade de energia por fton varia de um tipo de radiao a outro, cada
fton est relacionado a um determinado comprimento de onda; como o comprimento de onda
inversamente proporcional energia, um fton de luz UV, de comprimento de onda pequeno, possui
maior energia que um fton de luz infravermelha, de comprimento de onda maior.
Exerccios:
2.
3.
Calcule a freqncia em hertz, a energia em joules de um fton de raios X que tem comprimento de
onda de 2,70 .
4.
5.
6.
7.
Qual o comprimento de onda de um fton que tem trs vezes mais energia que a de um fton cujo
comprimento de onda igual a 500 nm?
8.
O iodeto de prata tem energia de ligao aproximadamente igual a 255 KJ/mol (AgI um dos
componentes dos culos de sol). Qual o comprimento de onda mais longo da luz que capaz de
quebrar as ligaes do iodeto de prata?
9.
Pgina: 22
nE4 = 15,4 J
Calcule a Energia do fton, o comprimento de onda emitido/absorvido e a freqncia associada s
transies: nE1 nE3 e nE2 nE1
10. Calcule a freqncia da radiao de 2.537 emitida pelo Hg no vcuo. A que cor do espectro
eletromagntico corresponde esta radiao?
CONVERSO DE UNIDADES:
1 ngstrom = 1 = 10-10 m = 10-8 cm
1 nanmetro = 1 nm = 10-9 m = 10-7 cm
1 micrmetro = 1 m = 10-6 m = 10-4 cm
1 eltron-volt = 1 eV = 1,602 x 10-19 J
1 Hertz = 1 Hz = 1 s-1
Pgina: 23
3. FUNDAMENTOS DA ESPECTROFOTOMETRIA
Muitos mtodos analticos quantitativos e qualitativos fazem uso da interao da energia radiante
(radiao eletromagntica = REM = luz) com a matria so chamados mtodos fotomtricos ou mtodos
ticos de anlise.
Os mtodos fotomtricos medem a quantidade de radiao de determinado comprimento de onda
que absorvida ou emitida por uma amostra lquida ou gasosa. No primeiro caso, so chamados mtodos
ticos de absoro de luz, e no segundo caso, mtodos ticos de emisso de luz.
3.1. INTERAO ENTRE A MATRIA E A ENERGIA RADIANTE:
3.1.1-
A teoria quntica, proposta por Marx Planck em 1900, procura explicar as propriedades da
radiao emitida por corpos aquecidos. A teoria foi posteriormente estendida para explicar outros
processos de emisso e absoro de luz, atravs de dois postulados importantes:
1 tomos, ons e molculas podem existir somente em certos estados discretos de energia. Quando
uma espcie altera seu estado, absorve ou emite uma quantidade de energia exatamente igual diferena
de energia entre os estados.
2 quando tomos, ons ou molculas absorvem ou emitem radiao ao efetuar uma transio de um
estado de energia para outro, a radiao de freqncia f ou de comprimento de onda est relacionada
diferena de energia entre dos dois estados pela equao:
E1 E0 = h.f = h.c
Quando um feixe de radiao atravessa um meio material slido, lquido ou gasoso certas
freqncias podem ser seletivamente absorvidas. A energia dos ftons absorvida fixada por tomos ou
molculas da amostra, que conseqentemente, sofrem excitao, passando de seu estado energtico
fundamental para estados energticos superiores. Por isso, dizemos que quando uma molcula absorve um
fton, a energia da molcula aumenta. Se
Os tomos, as molculas e os ons possuem um nmero limitado de nveis energticos
quantizados. Para que a absoro possa ocorrer, o fton excitador deve possuir uma energia apropriada (E
= h.f). Essa excitao pode ser produzida por varias formas, tais como:
a) Bombardeamento com eltrons
b) Exposio a uma corrente eltrica
c) Exposio ao calor de uma chama
d) Irradiao com um feixe de radiao eletromagntica ou fonte de luz
e) Reao qumica exotrmica.
As partculas excitadas tm uma durao relativamente curta. Aps aproximadamente 10-8
segundos, elas retornam ao estado fundamental, e a energia devolvida ou em forma de calor (mais
Pgina: 24
freqente), ou a espcie excitada sofre uma transformao qumica (reao fotoqumica) ficando a energia
retida no sistema, ou em outros casos, a radiao reemitida como fluorescncia ou fosforescncia.
Ento, quanto uma molcula emite um fton, a energia da molcula diminui.
Exemplificando:
ABSORO
EMISSO
As radiaes visvel e ultravioleta tem energia suficiente para provocar transies somente dos
eltrons da camada mais externa, ou dos eltrons de ligao. Por outro lado, as freqncias dos raios X
so mais energticas e so capazes de interagir com eltrons mais prximos do ncleo dos tomos.
3.1.2.1- Fluorescncia e fosforescncia:
So importantes processos analticos de emisso, nos quais os tomos ou molculas so
excitados por um feixe de radiao eletromagntica; ento, a emisso radiante ocorre quando as espcies
excitadas retornam ao estado fundamental. A fluorescncia ocorre mais rapidamente que a fosforescncia
e geralmente se completa aps 10-5 segundos a partir do instante da excitao. A emisso fosforescente
acontece em perodos superiores a 10-5 s, e pode permanecer ativa por minutos e at horas.
3.1.3-
Quando o eltron perde a excitao ou a energia absorvida, isto , passa de um estado energtico
mais elevado para outro menos elevado, ele emite energia sob a forma de radiao eletromagntica.
Quanto maior o salto energtico que o eltron realiza ao deslocar-se de uma rbita mais externa
para outra mais interna, maior a freqncia do fton emitido (e menor seu comprimento de onda) e
maior a energia emitida.
A radiao emitida pelos tomos excitados ao retornarem ao estado fundamental, pode ser
exibida em ESPECTROS DE EMISSO, como se fossem fotografias das transies eletrnicas dos
tomos ou molculas das espcies qumicas.
Pgina: 25
3.1.4-
SELECIONADOR
DO
COMPRIMENTO
DE ONDA
DETECTOR
AMOSTRA
Fig. 1- Diagrama dos componentes usados em mtodos analticos baseados na absoro de energia
radiante.
b) Mtodos de Emisso - baseados na emisso da energia radiante emitida por tomos, ons ou
molculas excitados. Na anlise qualitativa, se baseia na medio dos comprimentos de onda de radiao
e na anlise quantitativa, se mede a intensidade da radiao emitida.
FONTE DE ENERGIA
RADIANTE ONDE
EST INCLUIDA A
AMOSTRA
SELECIONADOR DE
COMPRIMENTO DE
ONDA
DETECTOR
Fig. 2- Diagrama dos componentes usados nos mtodos analticos baseados na emisso da energia
radiante.
Os mtodos espectromtricos abrangem um grupo de mtodos analticos baseados na
espectroscopia atmica e molecular. Espectroscopia um termo geral para a cincia que estuda a
interao de diferentes tipos de radiao com a matria.
Os mtodos espectromtricos ou fotomtricos mais amplamente utilizados fazem uso da radiao
eletromagntica, que um tipo de energia que toma diferentes formas, sendo a luz visvel e o calor
radiante as mais facilmente reconhecveis. As interaes mais sofisticadas incluem os raios gama e raios
X, bem como a radiao ultravioleta, microondas e radiofreqncia.
Os diferentes mtodos espectromtricos empregados pelos qumicos para identificao e
determinao dos elementos presentes nas varias formas de matria incluem:
Tipo de espectroscopia
Emisso de raios gama
Absoro,
emisso,
fluorescncia e difrao de raios
X
Absoro,
emisso
e
fluorescncia ultravioleta e
visvel
Absoro
infravermelha
e
Raman
Absoro de microondas
Ressonncia magntica nuclear
Pgina: 26
Intervalo de comprimento de
onda de trabalho
0,005 a 1,4
0,1 a 100
180-780 nm
Eltrons de ligao
0,78 a 300 m
0,75 a 3,75 mm
0,6 a 10 m
Rotao de molculas
Spin dos ncleos em um campo
magntico
Nuclear
Eltrons internos
4.
Pgina: 27
COLORIMETRIA E ESPECTROFOTOMETRIA DE
ABSORO NO ULTRAVIOLETA E VISVEL:
4.1. INTRODUO:
Desde que a cor foi reconhecida como uma caracterstica de certos materiais, ela tem sido
utilizada como um meio de identificao. Porm, as anlises qualitativas baseadas na colorao so
limitadas tanto em preciso como em alcance, j que se baseia no olho humano como detector da energia
radiante.
A construo de outros detectores de radiao junto com o avano da instrumentao tem
produzido uma grande extenso das tcnicas neste campo, que cobrem todo o espectro eletromagntico
desde a regio do infravermelho at o ultravioleta.
As tcnicas fotomtricas esto baseadas na capacidade que as substncias tm de interagir com
freqncias de radiao caractersticas. Como cada espcie isolada de on, tomo ou molcula exibir um
conjunto de nveis de energia definidos, absorver somente as freqncias eletromagnticas que
correspondem excitao de um nvel ao outro.
Trataremos dos mtodos analticos baseados na absoro da REM. A luz tem radiaes para as
quais a vista humana sensvel, e as ondas de comprimentos de onda diversos provocam cores diferentes.
A percepo visual das cores provocada pela absoro seletiva, por um objeto corado, de certos
comprimentos de onda da luz incidente. Os outros comprimentos de onda so refletidos ou transmitidos, e
so percebidos como a cor do objeto. Se um corpo slido opaco tem aparncia de branco, todos os
comprimentos de onda so refletidos; se o corpo parece negro, a reflexo da luz de qualquer comprimento
de onda mnima; se um corpo parece azul, so refletidos os comprimentos de onda que correspondem
cor azul, e assim sucessivamente.
A variao da cor de um sistema com a modificao da concentrao de um certo componente
a base da ANLISE COLORIMTRICA. A cor provocada pela formao de um composto corado,
resultante da adio de um reagente apropriado, ou pode ser intrnseca do constituinte analisado.
A COLORIMETRIA visa a determinao da concentrao de uma substncia pela medida da
absoro relativa da luz, tomando como referncia a absoro da substncia numa concentrao
conhecida.
Na COLORIMETRIA VISUAL usa-se como fonte a luz branca natural ou artificial. As
determinaes so feitas num instrumento chamado COLORMETRO OU COMPARADOR
DE CORES.
Quando a vista substituda por uma clula fotoeltrica (dispositivo detector de radiao) a
tcnica chamada de COLORIMETRIA FOTOELTRICA e o instrumento o
FOTOCOLORMETRO. Neste instrumento, usa-se a luz que est numa banda estreita de
comprimentos de onda, que se consegue pela passagem da luz atravs de filtros (dispositivo
selecionador de comprimento de onda), que so materiais coloridos na forma de placas de
vidro, gelatina, etc. , que s transmitem a luz numa regio espectral limitada.
Na ESPECTROFOTOMETRIA a fonte de radiao emite da regio visvel at a regio UV
(160 a 780 nm) do EEM, o que necessita de um instrumento mais complicado, e por isso,
mais caro o ESPECTROFOTMETRO.
A principal vantagem dos mtodos colorimtricos e espectrofotomtricos a de proporcionarem
um meio simples de determinar quantidades diminutas de substncias.
Pgina: 28
Cromforos:
Um grupo cromforo um grupo funcional, no conjugado com outro grupo, o qual exibe um
espectro de absoro caracterstico na regio Ultra-Violeta ou Visvel.
Um cromforo um grupo no qual, quando introduzido a um hidrocarboneto saturado, produz
um composto o qual possuem uma banda de absoro entre 180 e 1000 nm. Por exemplo, n-octano um
hidrocarboneto saturado o qual transparente nesta regio. Entretanto, se um grupo nitrila introduzido
no radical octil o composto octilnitrila produzido. O grupo nitrila classificado como um cromforo e
apresentara um espectro diferente do n-octano.
A tabela abaixo ilustra um pequeno grupo de simples cromforos com seus comprimentos de
onda mximo e absortividade molar. A absortividade molar a medida da intensidade da banda de
absoro. Como se pode observar, a intensidade de absoro de diversos cromforos varia
acentuadamente de um grupo para outro.
Pgina: 29
Luz
incidente
(Io)
A lei de Beer-Lambert:
A interao entre o feixe de luz e a soluo contida no recipiente transparente pode ser
exemplificada pela figura abaixo:
Incide 100% (I0)
emerge 30%
Soluo amostra
Fig.4- Transmisso e absoro da luz por uma soluo
Considerando um bloco de material absorvente (slido, liquido ou gasoso), um feixe paralelo de luz
monocromtica com intensidade Io incide sobre este bloco perpendicularmente superfcie. Aps passar
atravs de uma espessura b do material, que contm n tomos, ons ou molculas absorventes, sua
intensidade diminui como resultado da absoro de luz, proporcionalmente concentrao C do
material absorvente.
A absoro da luz quantificada por uma grandeza denominada ABSORBNCIA (A), onde a escala
varia de 0 a 2. A absorbncia muito importante porque ela diretamente proporcional
concentrao das espcies absorventes de luz na amostra.
A transmisso de luz quantificada pela TRANSMITNCIA (T) e sua escala varia de 0 a 100%.
c)
Pgina: 30
= a . b . Cg/L,
A = . b . Cmol/L ,
4.3.2-
onde k =
= absortividade molar.
A relao entre a luz transmitida (It) e a luz incidente (Io) chama-se TRANSMITNCIA e o
valor mximo que pode assumir 100%:
T = It / Io
Se determinada soluo no absorve energia, ento It e Io tm o mesmo valor (100%) e,
conseqentemente, T = 1. Como se usa a transmitncia percentual para evitar operaes com nmeros
decimais, T fica entre 0 e 100%.
A lei de Beer Lambert estabelece a relao entre Transmitncia (T) e Absorbncia (A):
A = - log T/100
Por esta expresso, entende-se que um valor em porcentagem de transmitncia lido na escala do
fotocolormetro pode ser facilmente transformado em absorbncia. Por ex., 20% de transmitncia
correspondem a uma absoro de 0,699.
TABELA 7 Termos e smbolos usados na equao da Lei de Beer.
Termo
Smbolo
Absorbncia
Transmitncia
Equao
A = - log T
T = (10-A) x 100
b = A / k .C
cela)
Absortividade molar (coeficiente de
absoro molar)
e A=k.b.C
= a.PM
ou
= A/b. Cmol/L
Absortividade especfica
a = /PM
ou
Pgina: 31
a = A / b. Cg/L
Exemplo:
1.
Prepara-se uma srie de solues padro contendo a espcie em estudo, a diferentes concentraes
perfeitamente conhecidas, cobrindo uma faixa conveniente de concentrao;
2.
3.
Determina-se a absorbncia (ou %T) de cada uma dessas solues padro e constri-se o grfico de
A (absorbncia) em funo de C (concentraes das solues padro), em papel milimetrado.
4.
Pode ser usado o aplicativo Excel para tabular as leituras e concentraes das solues padro. O
ajuste da reta feito pelo mtodo dos mnimos quadrados, e uma equao da reta apresentada,
facilitando o clculo da concentrao da amostra pela equao (ver capitulo 2)
4.4.2-
Esses desvios podem ser classificados como positivos ou negativos, e ocorrem quando algumas
das seguintes condies ideais para as determinaes no so respeitadas:
-
Pgina: 32
Alguns destes desvios podem ocorrer como conseqncia da maneira como as medidas de
absorbncia foram feitas ou como resultado de mudanas qumicas associadas com variaes de
concentrao. A lei de Beer bem sucedida ao descrever o comportamento da absoro de solues com
concentraes relativamente baixas (usualmente < 0,01 M).
Os desvios podem ser divididos em dois grupos: desvios qumicos e desvios devido ao
instrumento:
Desvios qumicos:
- interao qumica do soluto com reagentes de anlise ou impurezas
- alta concentrao da soluo (maior que 0,01 mol/L)
- variaes no pH
- pureza e estabilidade dos reagentes
- tempo de leitura (estabilidade qumica)
- temperatura na qual desenvolve-se a cor
Desvios devido ao instrumento:
- desgaste nos fotodetectores
- troca de lmpada por outra no correspondente
- p sobre a ampola da lmpada
- uso de filtros de outros aparelhos. Cada vez que se troca um filtro, o instrumento dever ser
recalibrado.
- Uso de tubos de vidro comum ao invs de cubetas especialmente fabricadas para o aparelho
- Perda de calibrao do comprimento de onda
- Flutuaes na fonte de radiao.
4.5. A CURVA DE ABSORO:
Para se encontrar a mxima absoro de uma substncia devemos saber qual o comprimento de
onda de luz adequado para que ela absorva mais intensamente.
Quando esse comprimento de onda que dever estar calibrado o aparelho para aquela anlise no
for disponvel, deve-se construir uma Curva de Absoro para aquela substncia que se quer determinar a
sua concentrao, da seguinte forma:
1. Prepara-se uma soluo padro da substncia a analisar
2.
Determina-se a absorbncia dessa soluo padro em vrios comprimentos de onda, dentro de uma
escala por ex. de 400 a 700 nm, onde a cada 50 nm determina-se uma absorbncia.
3.
Pgina: 33
Ex.1: considere uma soluo padro contendo 0,5 mg/mL de Hg+2 com transmitncia de 62% e
uma soluo desconhecida com 70% de transmisso, medida nas mesmas condies. Determine a
concentrao da soluo desconhecida. (Resposta = 0,37 mg/mL)
2.
3.
Faz-se a leitura da soluo problema (amostra) e localiza o valor da absorbncia da amostra no eixo y
da curva, interceptando-a para encontrar a concentrao correspondente no eixo x.
4.
5.
A curva pode ser traada em planilhas eletrnicas (Excel) que traam grficos a partir de resultados
experimentais em tabelas, e calculam a concentrao a partir das curvas de calibrao, fazendo o
ajuste da reta pelo mtodo dos mnimos quadrados, o qual d uma equao do tipo y = ax + b, usada
para calcular a concentrao da amostra.
As condies de trabalho para a construo da curva com solues padro devem ser mantidas em
relao soluo problema (seleo do mesmo comprimento de onda, cubeta, lmpada, pH,
reagentes, temperatura).
Se a curva for construda com diluio de 1:10, por exemplo, a soluo problema dever ser diluda
de 1:10.
A curva dever compreender faixas teis, ou seja, valores situados abaixo do normal, dentro do
normal e acima do normal do elemento ou substncia pesquisada.
A curva dever ser traada numa faixa de concentrao da substncia que siga a Lei de Beer,
utilizando o comprimento de onda de mxima absoro.
Pgina: 34
4.7. INSTRUMENTAO:
Espectrofotmetros em geral so instrumentos compostos por um conjunto de componentes do
seguinte tipo:
- uma fonte de radiao eletromagntica
- um conjunto de componentes pticos que levam esta radiao at a amostra
- um compartimento de amostra e um ou mais detectores que medem a intensidade de radiao.
Dependendo da finalidade e do fabricante os arranjos pticos destes instrumentos podem ser
bastante diferentes. Este texto se refere apenas aos espectrofotmetros de absoro, operando na regio
espectral do ultravioleta (UV) ( = 200/380nm - 400 nm), visvel (Vis) ( = 380/400 nm 700/800 nm)
Os componentes de um sistema fotomtrico de absoro de luz so:
Fonte de
radiao
monocromador
Recipiente da
soluo
Detector
de luz
Medidor ou
registrador
Fonte de radiao:
b) Fontes de radiao visvel - lmpada de tungstnio, constituda por um filamento de tungstnio que
se aquece mediante uma corrente contnua e emite radiao contnua na regio entre 350 e 2.500 nm.
Normalmente a regio espectral em que se pode medir os espectros a regio chamada UV-Vis
( = 200 nm a 800 nm). Normalmente a troca de uma lmpada por outra ocorre durante a varredura do
espectro de modo completamente automtico, de modo que o operador muitas vezes no toma
conhecimento do fato.
Pgina: 35
Os aparelhos que podem ser usados para selecionar regies particulares de comprimento de onda
na regio visvel e ultravioleta do espectro eletromagntico incluem o uso de:
a)
b) Monocromadores: permite isolar uma banda de comprimentos de onda mais estreita que a obtida por
um filtro, empregados para se Ter uma resoluo maior do espectro, no s no visvel, mas tambm
na regio UV. Um monocromador desdobra a radiao policromtica nos comprimentos de onda que
a formam, e separa estes comprimentos de onda em bandas. constitudo por:
uma fenda de entrada por onde penetra a radiao policromtica da fonte de luz (lmpada);
um espelho ou lente, para colimar (estreitar) o feixe admitido;
um elemento dispersor da radiao, como um prisma ou uma rede de difrao, que desdobra a
radiao nos comprimentos de onda componentes (separa a luz nos seus vrios comprimentos de
onda);
uma lente ou espelho para focar (direcionar) a radiao dispersa;
uma fenda de sada, que seleciona o comprimento de onda da radiao que ir incidir sobre a
amostra.
Tipos de elemento de disperso do monocromador:
Pgina: 36
comprimentos de onda iro incidir sobre a amostra permitindo que se determine sua absorbncia em cada
um destes comprimentos. Este conjunto de dados resulta no que se chama espectro de absoro.
Uma grade de difrao um componente ptico que contm uma srie de ranhuras, que so
justamente os elementos responsveis pela difrao. Dependendo do nmero de ranhuras por milmetro,
haver uma maior ou menor resoluo dos espectros. Instrumentos com melhor resoluo espectral tero
grades de difrao com maior nmero de ranhuras por milmetro, e, conseqentemente, este um (mas
no o nico) parmetro a ser avaliado na seleo de um instrumento.
Em pocas passadas as ranhuras eram feitas mecanicamente, porm atualmente estas so feitas
atravs de processos denominados hologrficos. Neste caso feito um depsito de uma camada muito
fina de um material sobre um substrato de vidro ou de quartzo, que , posteriormente, corrodo em certas
regies definidas por uma figura de interferncia gerando sobre este material um conjunto de vales e
topos denominados ranhuras.
A qualidade de uma grade de difrao controlada pelo nmero de ranhuras por unidade de rea
e pela preciso com que estas foram feitas.
4.7.3-
Acessrios de multi-cubetas
O acessrio de multi-cubeta ambiente ou termostatizvel consiste de dois conjuntos de seis cubetas que se
movem atravs do transportador de amostra posicionado no interior do compartimento de amostras. O
multi-cubetas possui as seguintes possibilidades:
- Utilizar campos de rotao magntica para promover agitao das cubetas.
- Utilizar aquecimento.
- Utilizar um canal de gua para controle de temperatura.
Quando conectado ao acessrio controlador de temperatura, a bomba de aquecimento pode ser
usada para transferir calor das cubetas para a gua circulante, ou transferir aquecimento da gua para a
cubeta. Usando este sistema possvel ajustar a temperatura de 10 a 100 graus Celsius.
4.7.4-
Detectores de radiao:
Pgina: 37
b) Tubo fotomultiplicador: formado por um tubo de vidro ou de quartzo sob vcuo, no qual existe um
conjunto de placas metlicas interligadas. Quando a radiao incide sobre estas placas metlicas elas
induzem uma corrente eltrica, de acordo com o que descrito pelo efeito fotoeltrico proposto por
Einstein. Em funo do fato destas placas estarem interligadas e de uma diferena de potencial eltrico
estar sendo aplicada entre elas, esta fotocorrente amplificada por um circuito eletrnico adequado, de
modo que um sinal muito baixo de corrente eltrica pode ser detectado e registrado. Pode ser considerado
um tipo de clula fotoeltrica amplificada (da ordem de 106 vezes), usada nos espectrofotmetros. mais
sensvel, mede intensidades 200 vezes mais fracas do que as medidas por uma clula fotoeltrica.Um
instrumento que se utiliza deste detector deve fazer com que comprimentos de onda individuais o atinja,
de modo que para cada um deles seja detectado um sinal de corrente, que ser transformado, segundo uma
certa escala, em um sinal de absorbncia. Deve ter ainda algum tipo de sistema que permita eliminar o
sinal de fundo, comumente chamado de background.
c) Arranjo de diodos (ou detectores do tipo fotodiodo): de modo simplificado, um arranjo de diodos
consiste em uma srie de detectores fotodiodo posicionado lado a lado em um cristal de silcio, de modo
que cada comprimento de onda difratado pela grade atinge um ponto deste arranjo, e conseqentemente
um detector. Cada diodo tem um capacitor dedicado e est conectado por um interruptor tipo transistor
para uma linha de sada comum a todos. Deste modo, a radiao que atravessa a amostra integral e
instantaneamente analisada determinando-se, portanto, a absorbncia em todos os comprimentos de onda
determinada de modo simultneo. Este tipo de instrumento bastante simplificado na sua ptica, se
comparado aos instrumentos com fotomultiplicadoras como detectores, e os espectros so obtidos mais
rapidamente, mas um instrumento com menor sensibilidade.
Assim:
4 Qualquer tipo de detector absorve a energia dos ftons que chocam contra ele e a converte em uma
quantidade mensurvel, como a impresso em chapa fotogrfica, uma corrente eltrica ou variaes
trmicas.
4
Qualquer tipo de detector deve gerar um sinal que est quantitativamente relacionado com a radiao
recebida.
Todo detector deve obedecer aos seguintes critrios:
alta sensibilidade;
curto tempo de resposta;
estabilidade a longo prazo para assegurar a exatido das respostas quantitativas;
sinal eletrnico facilmente amplificvel por qualquer instrumento de leitura;
4.7.5a)
Tipos de instrumentos:
Feixe simples:
Pgina: 38
b) Feixe duplo:
4.8. ESQUEMA
DE
COLORMETROS:
4.8.1-
FUNCIONAMENTO
DOS
ESPECTROFOTOMETROS
So instrumentos em que se utiliza o olho humano como detector e o crebro como amplificador
e como dispositivo de apresentao. A dificuldade est relacionada deteco visual, pois esta est
limitada a poucas aplicaes, por apresentar algumas desvantagens: regio espectral limitada, pouca
exatido para distinguir as intensidades das cores, alto grau de fatiga e lentido de resposta.
Dentre os tipos de fotmetros visuais temos: comparador Helige, que utiliza vrios conjuntos
de modelos de filtros de vidro, de absorbncias variveis. Para determinar a concentrao de uma
substncia desconhecida, insere-se o disco apropriado e seus filtros, e compara-se visualmente com a
amostra; ambas devem estar iluminadas pela mesma fonte. Os filtros so calibrados em termos de
concentrao para um comprimento da trajetria da cela de amostra que o instrumento contm. Quando a
cor da soluo amostra igual cor do filtro empregado, se conhece imediatamente a concentrao
aproximada. Usam-se padres de vidros coloridos para determinaes de: amnia, oxignio dissolvido,
cobre, nitratro, cloro residual em gua.
4.8.2-
Colormetro fotoeltrico:
Pgina: 39
fotocolormetros dispem de numerosos filtros, cada um dos quais transmite uma diferente poro do
espectro; a escolha do filtro depende da natureza do sistema absorvente; d-se preferncia ao filtro com
cor complementar da soluo problema.
Mecanismos de funcionamento:
4
A luz proveniente de uma fonte (ex. lmpada de tungstnio) delimitada, no percurso tico, por uma
abertura varivel (fenda); o filtro seleciona a faixa espectral desejada. Aps atravessar a cubeta
contendo a soluo amostra ou solvente (branco), a luz transmitida alcana a fotoclula; a corrente
gerada medida pelo galvanmetro, sobre uma escala de 0 a 100%.
Inicialmente, o medidor ajustado mecanicamente para leitura zero. Em seguida, o aparelho deve ser
calibrado para 100% de transmitncia, com relao ao solvente puro (branco): coloca-se o solvente
na cubeta e regula-se a 100% de T. Finalmente, coloca-se a na cubeta a soluo amostra e l-se a
transmitncia. A escala do medidor d diretamente a percentagem de transmitncia; em muitos casos,
a escala do medidor d os correspondentes valores de absorbncia.
Colormetro no visvel: lmpada de filamento de tungstnio, lente, filtro ptico, clula fotovoltaica.
Colormetro no ultravioleta: lmpada de vapor de mercrio, filtro ptico, clula fotoeltrica.
4.8.3-
Espectrofotmetros:
Espectrofotmetro para a regio visvel: projetados para operar no intervalo de de 380 a 800
nm, simples construo, de feixe nico e rede de difrao, relativamente baratos (< U$ 1.000 at
U$ 3.000), resistentes e portteis. Aplicao mais comum a anlise quantitativa. Possui fonte
de filamento de tungstnio, rede de difrao simples, clula fotoeltrica.
Pgina: 40
Mecanismo de funcionamento: a luz emitida da lmpada (2) purificada nos filtros (3) e condensada
sobre a fenda de entrada (4). O feixe de luz atravessa a fenda de entrada , refletido pelo espelho plano,
sendo condensado pelo espelho colimador sobre a rede de difrao (5), que obtm-se a varredura dos
comprimentos de onda. O feixe de luz que passa pela fenda de sada atravessa o compartimento de
amostras (7) cubeta e atinge o detector (8).
O termo colormetro geralmente restrito aos instrumentos visuais e fotoeltricos mais simples
para a regio visvel. O termo espectrofotmetro usa bandas de comprimentos de onda mais estreitos,
produzidas por um monocromador. Todas as formas devem ter certas caractersticas e componentes em
comum; alguns dos instrumentos mais simples podem omitir um ou mais itens, e a seqncia na qual a
radiao passa de um item para o outro no a mesma:
4.9 Manuseio da amostra no UV/Vis:
A amostra lida em soluo ou vapor. Existem no mercado clulas de quartzo para a
determinao de amostras em fase vapor, no ultravioleta. Estas clulas so providas de uma entrada e
sada para o gs, e algumas pemitem circulao de um liquido que mantm constante a temperatura no
interior da clula.
Para analisar amostras em soluo, retira-se alquotas e dilui sucessivamente, conforme
procedimento recomendado pelo mtodo. de mxima importncia que as cubetas estejam limpas, e
costuma-se enxagu-las vrias vezes entre uma leitura e outra. Pode ser necessrio limpar as clulas com
detergente ou cido ntrico a quente para remoo de traos de amostras anteriores.
Muitos solventes so usados na regio do UV-Vis: ciclohexano, etanol 95% e 1,4-dioxano, desde
que corretamente purificados. Outros solventes de pureza espectroscpica adequados para o UV
encontram-se atualmente no mercado. Estes solventes so classificados como de grau espectroscpico e
encontram-se livres da absoro devido a interferentes.
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compostos aromticos
produtos naturais como esterides e clorofila
corantes e vitaminas
estabilizantes e antioxidantes.
Exerccios:
1- Considere uma soluo padro contendo 0,5 mg de Me+n / mL com transmitncia igual 62%. Uma
amostra dessa substncia obteve uma transmitncia igual a 70%, medida nas mesmas condies (b =
1 cm). Calcule a concentrao do metal Men+ na amostra.
2- Voc est usando um colormetro fotoeltrico e obteve os seguintes dados:
Leitura do padro = 25%
Leitura da amostra = 18%
Concentrao do padro = 200
mg/100 ml. Calcule a concentrao da amostra.
3- Usando um colormetro fotoeltrico, a leitura da Absorbncia do padro 0,42 e a leitura da amostra
0,21. Sabendo que a concentrao do padro 150 mg/100 ml, calcule a concentrao da amostra
(em g/L).
4- Qual a absorbncia de uma soluo tendo uma transmitncia de 85% ?
5- A absorbncia de uma amostra 0,17, e a do padro 0,13. A concentrao do padro 100 g/100
ml. Qual a concentrao da amostra, em g/L?
6- Converta em absorbncia:
T (%) = 25,5 56,7 32,8 3,58 -
7- Em uma determinao de cobre, se mede uma absorbncia de 0,65. Sabe-se que existe uma
concentrao aproximada de 10-4 moles/L de um interferente com absortividade molar de 100
L/moles.cm. Sabendo que a cubeta tem uma espessura de 1 cm, calcule a absorbncia devida somente
ao cobre.
8- A absorbncia de uma soluo de concentrao igual a 2,31 x 10-5 M de X de 0,822, numa cubeta
de 1 cm. Calcule a absortividade molar de X.
9- A porcentagem de transmisso de uma soluo desconhecida 48%. Qual a concentrao desta
soluo se uma soluo padro de 100 mg/dL desta substncia tem uma leitura de T de 75%?
10- Uma soluo de 15 g/dL de nitrognio de amnia tem uma Absorbncia de 0,14. A Absorbncia de
uma amostra desconhecida de sangue 0,12. Qual a concentrao da amostra de sangue?
11- Um colormetro porttil registrou uma transmitncia de 73,6% com uma soluo do branco no
caminho ptico. A substituio do branco por uma soluo absorvente forneceu uma transmitncia de
24,9%. Calcule:
a) A absorbncia do branco e da soluo absorvente
b) A transmitncia esperada para uma soluo na qual a concentrao do absorvente seja 1/3 da soluo
da amostra original
c) A absorbncia esperada para uma soluo que apresenta duas vezes a concentrao da soluo na
amostra.
12- Uma amostra de soluo colorida que segue a Lei de Beer mostra 80% de T quando medida numa
cela de 1 cm de comprimento.
a) Calcular a % T para a soluo de concentrao 2 vezes maior na mesma cubeta.
b) Calcular a % T da soluo original quando contida numa cubeta de 0,5 cm de comprimento.
c) Se a concentrao original for de 0,005% p/v qual o valor da absortividade especfica?
13- Vrias solues padro de Y se empregam para traar uma curva de calibrao com os seguintes
dados:
Concentrao (ppm) Absorbncia
1,00
0,26
2,00
0,44
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3,00
0,54
4,00
0,61
Se uma soluo problema tem uma absorbncia de 0,50 nas mesmas condies, qual a concentrao de Y
em moles/l, sabendo que seu peso molecular 156 g/mol ?
14- Os seguintes valores de absorbncia foram obtidos e anotados para um procedimento de determinao
de concentrao de glicose:
Reagente branco: 0,1
amostra desconhecida: 0,2
soluo padro: 0,3
O valor conhecido para a soluo padro de 250 mg/100 ml. Que concentrao de glicose, em g/L, deve
ser apresentada por esta amostra?
15- Na construo da curva de calibrao para uma anlise com um colormetro fotoeltrico, obtiveram-se
os seguintes dados:
Padro n Concentrao, mg/L %T
Branco
0,00
98,0
1
1,00
77,2
2
2,00
63,5
3
3,00
50,0
4
4,00
41,3
5
5,00
33,5
6
6,00
27,9
7
7,00
23,4
8
8,00
20,3
Padro n Concentrao, mg/L %T
9
9,00
18,1
10
10,00
16,4
a)
b)
16- Uma soluo de KMnO4, 1,28x10-4 M tem uma T = 0,500 a 525 nm, em uma cela de 1 cm.
a) Que absorbncia tem essa soluo?
b) Se a concentrao fosse reduzida metade, qual seria a absorbncia e a transmitncia?
c) Que concentrao, em g/l, corresponderia a uma Transmitncia de 0,750 nesta mesma cela ? (Dados:
Massa Atmica: K = 39; Mn = 55; O = 16)
17- Descreva as diferenas entre os seguintes itens e liste as vantagens particulares de um sobre o outro:
a) lmpada de hidrognio e deutrio como fontes de radiao ultravioleta
b) filtros e monocromadores como seletores de comprimento de onda
c) clulas fotovoltaicas e clulas fotomultiplicadoras
d) espectrofotmetros e colormetros
18- O Zn (II) e o ligante L formam um complexo que absorve fortemente a 600 nm. Uma soluo deste
complexo a 1,60 x 10-4 M tem absorbncia de 0,464 em uma clula de 1 cm a 600 nm. Calcule:
a) a porcentagem de transmitncia desta soluo
b) a porcentagem de transmitncia desta soluo em uma clula de 2,5 cm
c) a absortividade molar do complexo.
19- Um procedimento comum para determinao de protena o ensaio de ligao de corante de Bradforf.
Neste mtodo, o corante liga-se protena, e a sua cor muda de marrom para azul. A intensidade da cor
azul medida pela absorbncia da luz a um comprimento de onda de 595 nm, proporcional quantidade
de protena presente:
Protena (g):
0,00
9,36
Absorbncia a 595 nm:
0,466
0,676
18,72
28,08
37,44
0,883
1,086
1,280
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20- A leitura da transmitncia de sete solues padres de metano (CH4) forneceram os dados:
CH4 (%):
0
0,062 0,122
Transmitncia (%)
97,19 81,25 28,75
0,245
0,486
0,971
19,38
9,56
4,75
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5. ESPECTROFOTOMETRIA DE ABSORO NO
INFRAVERMELHO:
1.1 INTRODUO
A espectroscopia de absoro no infravermelho umas das tcnicas analticas utilizadas em
laboratrios de pesquisa, tanto nas indstrias quanto no meio acadmico, to importante como outros
meios analticos instrumentais modernos: a espectrometria no ultravioleta, a espectrometria de absoro
atmica e a espectrometria de raios x.
Algumas das vantagens dessa tcnica so a facilidade de preparao da amostra; a possibilidade
do uso de amostras em filmes slidos, amostras lquidas e gasosas; bem como o custo, o tamanho e a
versatilidade do equipamento necessrio para as anlises. Outras tcnicas para o preparo das amostras
precisam de extrao ou calcinao, ou ainda podem demandar equipamentos muito caros. Um
espectrofotmetro de infravermelho custa menos que a metade de um aparelho de espectrometria de raios
x.
A espectrofotometria o processo instrumental de medio baseado nas propriedades de
absoro e emisso de energia eletromagntica em alguma regio do espectro eletromagntico. A poro
do espectro percebida pelo olho humano (regio visvel) est compreendida entre comprimentos de onda
de 380 nm e 780 nm e, acima desse limite, at cerca de 50.000 nm (faixa entre as regies do visvel e das
microondas), a radiao chamada infravermelha (IV). A regio do infravermelho entre 2,5 mm e 15,0
mm (2.500 nm a 15.000 nm) concentra o maior interesse dos qumicos, embora as regies do
infravermelho prximo (0,7 mm a 2,5 mm) e do infravermelho distante (14,3 mm a 50 mm) venham
angariando maior ateno, ultimamente.
Tabela 8 Regies espectrais no infravermelho
Regio
Prximo
Mdio
Distante
Mais
usada
Intervalo de comprimento de
onda () , m.
0,78 a 2,5
2,5 a 50
50 a 1.000
Aplicaes em amostras
Materiais comerciais slidos ou lquidos, misturas gasosas.
Compostos puros e misturas complexas slidas, lquidas ou gasosas,
Compostos puros slidos ou lquidos, amostras atmosfricas, espcies
puras inorgnicas ou organometlicas.
2,5 a 15
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2.2 INSTRUMENTAO:
Componentes do aparelho - Os espectrofotmetros de feixe duplo utilizados na determinao de espectros
de IV (figura 1) consistem de cinco sees principais: fonte de radiao, rea de amostras, fotmetro,
monocromador e detector.
3
espelho
Fenda
entrada
espelho
Pgina: 46
d) Monocromador: a maior parte das anlises espectroscpicas deve utilizar radiao composta por um
pequeno conjunto de comprimentos de onda, de modo a conferir ao mtodo instrumental a sensibilidade e
a seletividade necessrias, entre outras propriedades. Para isso, o equipamento utiliza um monocromador,
que dispersa a luz proveniente da fonte em diferentes comprimentos de onda. O dispositivo permite isolar
bandas de comprimento de onda geralmente muito mais estreitas que as obtida por filtros, sendo formado
por um elemento de disperso, que pode ser um prisma ou uma rede de difrao, junto com duas fendas
estreitas que servem como aberturas de entrada e de sada de radiao.
Quanto menor a largura das fendas, maior ser a resoluo obtida. Na maior parte dos
instrumentos, a largura das fendas programada de modo a aumentar quando a energia emitida pela fonte
diminui, mantendo a energia do feixe de referncia constante. Obtm-se um mximo de resoluo
usando-se as redes apenas em suas faixas de maior poder de disperso; nos instrumentos modernos de alta
resoluo, costume a utilizao de duas ou mais redes.
O monocromador tambm tem como funes principais dispersar a radiao em seus
comprimentos de onda, selecionar o comprimento de onda particular da radiao a ser transmitida ao
detector, e manter aproximadamente constante a energia no detector para todos os comprimentos de onda.
Durante a varredura, filtros so inseridos automaticamente no caminho da radiao, para eliminar toda
radiao indesejvel, inclusive as harmnicas da freqncia medida, provenientes da rede.
e) Detector: a medio da energia radiante feita atravs do detector, que utiliza o efeito trmico da
radiao para quantific-la. Aps deixar a fenda de sada do monocromador, o feixe refletido por um
espelho plano para um espelho elipsoidal, cujos focos esto na fenda de sada e no detector. Os detectores
podem ser divididos em duas classes gerais: seletivos e no seletivos. Os seletivos respondem em funo
do comprimento de onda da radiao incidente (placas fotogrficas, fotoclulas e celas de
fotocondutividade); os no seletivos, mais adequados para trabalhos espectroscpicos, respondem em
funo da energia da radiao incidente.
Os dois tipos comuns de detectores no seletivos so o termopar e o bolmetro. No caso dos
termopares, a energia radiante aquece uma das duas junes bimetlicas do dispositivo, produzindo uma
fora eletromotriz proporcional ao aquecimento. Os bolmetros baseiam-se na medida da variao da
resistncia com o aquecimento. O detector montado como um dos braos de uma ponte, de modo que a
mudana de temperatura provoca um desequilbrio no sinal atravs do circuito, que pode ser amplificado
e registrado ou, ainda, utilizado para ativar um servomecanismo para restabelecer o balano.
Como o detector recebe alternadamente o feixe de referncia e o da amostra, qualquer mudana
na intensidade da radiao devida absoro de energia detectada como um sinal diferente de zero. O
sinal assim obtido amplificado, e usado para posicionar o atenuador ptico de modo que a radiao dos
feixes de referncia e de amostra mantenham-se na mesma intensidade. A quantidade de atenuao
necessria uma medida direta da absoro pela amostra o movimento do atenuador registrado, ento,
pela pena do instrumento.
3.3 A FORMAO DO ESPECTRO:
As fontes utilizadas em equipamentos comerciais emitem radiaes com comprimentos de onda
variando entre 2,5x10-4 cm at 1,5x10-3 cm, ou seja, com nmero de onda desde 4.000 cm-1 a 200 cm-1.
Suponhamos que uma amostra possa absorver energias correspondentes aos nmeros de onda 3.100 cm-1,
1.550 cm-1, 1.080 cm-1 e 610 cm-1. A amostra, aps o preparo, colocada na posio adequada e inicia-se
a anlise. A fonte comea a irradiar a amostra e a referncia, simultaneamente, com ftons de 4.000 a 200
cm-1.
Porm, nem todos esses nmeros de onda chegam simultaneamente ao detector, pois caso isso ocorresse,
a anlise ficaria prejudicada. Essa justamente a funo da rede de difrao.
A rede de difrao responsvel pela separao da radiao (ftons) de acordo com o seu
comprimento de onda, e sua funo pode ser representada esquematicamente como na figura 2, onde se
observa que apenas ftons com 4.000 cm-1 chegam ao detector.
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Por meio de um movimento circular, a rede de difrao focaliza no detector, um a um, todos os
comprimentos de onda separadamente (4.000 cm-1, 3.999 cm-1, 3.998 cm-1 e 3.997 cm-1), e assim
sucessivamente at completar a varredura.
No detector, s incidem os ftons de 4.000 cm-1 vindos da referncia e da amostra. Como estas
no absorvem nenhum fton em 4.000 cm-1 alis, a referncia no absorve nenhum fton na faixa 4.000
cm-1 - 200 cm-1 , no ocorrer diferena de potencial no detector, nem tampouco movimento no
servomecanismo que aciona a pena do registrador. Assim, tem-se um ponto que corresponde a 0 de
absorbncia, ou 100% de transmitncia. A amostra nada absorve, transmitindo toda a radiao, como se
v na figura 4.
As redes de difrao movimentam-se continuamente. O mesmo fenmeno descrito anteriormente
acontece nos nmeros de onda 3.999 cm-1, 3.998 cm-1,..., 3.101 cm-1, porm, quando as redes de difrao
focalizam no detector 3.100 cm-1, por exemplo, algo diferente acontece, pois a amostra absorveu parte dos
ftons deste nmero de onda.
Deste modo, a intensidade de ftons que passa a amostra em 3.100 cm-1 menor que a
intensidade que passa pela referncia, o que gera uma corrente no detector que aciona o servomecanismo,
e a pena no registrador registra um pico que nada mais que o registro da parte da energia absorvida pela
amostra (figura 5).
Pode-se ver que 80% da energia com nmero de onda igual a 3.100 cm-1 foi absorvida. Com a
continuao do movimento de rotao das redes de difrao, chega-se novamente em nmeros de onda
que no puderam ser absorvidos pela amostra. Neste ponto, a corrente no detector volta a ser nula, e
retorna-se linha base do aparelho (0% de absoro). Isto se d abaixo de 3.100 cm-1. No espectrograma
da figura 6, o fenmeno retratado como um pico em 3.100 cm-1, pois a amostra absorve este nmero de
onda.
Continuando o movimento de rotao das redes de difrao at o nmero de onda 200 cm-1, o
espectro final da molcula ser semelhante ao da figura 7. Picos aparecem nos valores 1.550 cm-1, 1.080
cm-1 e 610 cm-1, onde a molcula absorve a radiao.
5.4- OS TIPOS DE VIBRAO:
Basicamente, o termo espectroscopia tem sido utilizado para designar mtodos analticos em que
se estuda a interao de radiaes eletromagnticas com molculas ou partculas. Tanto radiaes, como
molculas, porm, possuem energias caractersticas, cuja conseqncia a propriedade de uma molcula
absorver energia proveniente de uma radiao. O fenmeno, no entanto, no ocorre em todos os casos,
mas somente naqueles onde a energia do fton (outra forma de se chamar radiao) for compatvel com a
energia da vibrao molecular.
Deste modo, se um feixe de ftons com intensidade I0 incidir sobre uma amostra com molculas
que apresentam energia de vibrao incompatvel com a energia dos ftons, nenhuma energia ser
absorvida e todos os ftons passaro pela amostra, isto , o feixe I, que emerge da amostra, tem a mesma
intensidade que o feixe Io (Io = I). Por outro lado, se a energia dos ftons for compatvel com a energia
vibracional, cada molcula absorver um fton, aumentando seu movimento vibracional. Como
conseqncia, a intensidade dos ftons que deixa a amostra ser menor do que a intensidade incidente (Io
> I), pois parte dos ftons foi absorvido. Depreende-se que, quanto maior for o nmero de molculas
presente na amostra, menor ser a intensidade final, pois maior ser a chance dos ftons serem
absorvidos.
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tornaram os instrumentos mais precisos e com maior sensibilidade. Instrumentos dispersivos trabalham
razoavelmente bem. No entanto, as aplicaes constantemente exigem maior velocidade, sensibilidade e
preciso. Estes equipamentos apresentam os seguintes problemas:
Mesmo o sistema dispersivo mais simples apresenta grande nmero de partes mveis:
a) Um mecanismo de modulao ou chopping, que alterna o feixe entre a amostra e a referncia,
produzindo um sinal no detector;
b) Um complexo e preciso motor de rotao da rede de difrao, que dispersa espacialmente o feixe nas
suas freqncias individuais;
c) Para os espectrmetros convencionais de duplo feixe, um atenuador deve ser usado na referncia para
igualar a intensidade de energia entre os feixes da amostra e da referncia;
d) Controladores de fenda utilizados para determinar a resoluo. A largura da fenda tambm muda ao
longo do espectro, para manter constante a intensidade de energia atravs da fenda;
e) Trocadores de filtro que eliminam a energia indesejada;
f) Registrador analgico (e no digital) para registro do espectro nos sistemas mais antigos.
Todas essas partes esto sujeitas ao desgaste mecnico e perda de preciso com o tempo. Se qualquer
parte for danificada, o espectrmetro torna-se inopervel.
Somente um elemento de resoluo detectado de cada vez. Isto significa que o tempo requerido para
obter um espectro determinado pelo tempo que o instrumento detecta cada elemento de resoluo,
multiplicado pelo nmero de elementos de resoluo no espectro. As baixas velocidades de varredura dos
instrumentos dispersivos tornam impraticvel o monitoramento pelo espectro total de uma amostra que
sofre rpidas modificaes fsicas ou qumicas. Assim, o monitoramento cintico geralmente limitado a
uma nica banda de absoro, o que limita a extenso da informao desses experimentos.
O mecanismo de fendas que determina a resoluo bloqueia a maior parte da luz proveniente da fonte
para a obteno do espectro. A sensibilidade do sistema decresce, criando um problema para amostras
que apresentam baixa transmisso, ou para acessrios que no so opticamente eficientes. O problema
ainda maior em maiores resolues, quando as fendas so muito estreitas, permitindo a passagem de
ainda menos energia para o detector, e decrescendo a sensibilidade proporcionalmente.
No h referncia interna para a calibrao das freqncias. Cada espectro deve ser calibrado
externamente, atravs do espectro de algum material com freqncias de absoro conhecidas por
exemplo, o poliestireno ou o indeno para determinar a diferena entre a freqncia conhecida e aquela
que foi obtida. Alm disso, os erros de calibrao no so constantes ao longo do espectro, o que
significa que o espectro deve ser calibrado em diversas reas. A adio de um sistema de tratamento de
dados ao espectrmetro dispersivo permite que se armazene a curva de calibrao, que pode, ento, ser
usada para corrigir o espectro obtido.
Entretanto, a calibrao pode ser afetada por outros fatores, como a temperatura, o que implica em
correr o padro de calibrao freqentemente. Isto requer mais tempo do operador e aumenta o custo
de cada anlise.
Devido modulao do feixe infravermelho pelo chopper numa freqncia constante, contribuies da
luz espria dentro do sistema so lidas pelo detector, e causam erros nas leituras de intensidade. Por
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exemplo, pode-se encontrar luz em uma rea do espectro onde a amostra absorve inteiramente. Esta luz
espria difcil, ou quase impossvel de eliminar.
A luz espria faz com que anlises quantitativas nos instrumentos dispersivos sejam difceis. Conforme a
lei de Beer, existe uma relao linear entre a absorbncia medida e a concentrao da amostra.
Instrumentos dispersivos no so confiveis para anlises quantitativas em amostras com absorbncia
superior a 1,0 (nveis de luz abaixo de 10% de transmitncia). Como resultado, mais tempo deve ser
empregado preparando um filme mais fino ou uma amostra mais diluda para enquadrar a banda analtica
na faixa adequada de leitura. Novamente, o custo de cada anlise aumenta.
Aquecimento da amostra
Emisso da amostra
Uma amostra aquecida, como mencionado anteriormente, pode emitir radiao. Em alguns esquemas de
duplo feixe, a luz passa atravs da amostra antes de chegar ao chopper. Para esse tipo de sistema,
qualquer radiao emitida pela amostra ser lida pelo detector. Bandas de emisso so negativas em
relao s bandas normais de transmisso, mas quando ambas aparecem simultaneamente no espectro, a
interpretao pode ser dificultada.
Exerccios:
1- Explique a diferena entre a espectrofotometria no infravermelho e no ultravioleta e visvel.
2- Qual o objetivo da anlise qumica por espectrofotometria de infravermelho?
3- Como o mecanismo de deteco de substncias por esta tcnica?
4- Cite vantagens e desvantagens do mtodo, sucintamente.
5- Explique como a absoro de luz no infravermelho, baseando-se no comportamento vibracional
molecular.
6- Como se faz a anlise qualitativa de substncias no IV?
7- E a anlise quantitativa?
8- Cite os componentes do espectrofotmetros de infravermelho.