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MICRORGANISMOS GENETICAMENTE MODIFICADOS E SUA RELAO COM

O AUMENTO NA PRODUO DE BIOCOMBUSTVEIS


Graziela Barbosa Paludo1
1

Mestranda em Agroenergia pela Universidade Federal do Tocantins (UFT), Palmas,


Tocantins, Brasil. e-mail: grazi.paludo@mail.uft.edu.br
Recebido em: 12/04/2014 Aprovado em: 27/05/2014 Publicado em: 01/07/2014

RESUMO
A preocupao com a disponibilidade de combustveis fsseis vem se acentuando,
em toda parte surgem questes sobre a oferta de energia no futuro. A demanda por
matrias-primas alternativas para combustveis e produtos qumicos tem crescido,
impulsionado pelo alto preo do petrleo e esforos para reduzir as emisses
lquidas de dixido de carbono e outros gases de efeito estufa. Os biocombustveis
constituem recursos com baixa toxicidade, biodegradveis e renovveis, e esto
associados a vantagens ambientais uma vez que permitem a reduo das emisses
de gases nocivos ao planeta e no panorama atual, representam uma alternativa
energtica cada vez mais explorada. Atualmente, a biomassa vista como a
principal fonte para atender a demanda mundial de energia primria. Nesta
perspectiva, a aposta no uso de microrganismos para melhorar a produo de
biocombustveis apresenta-se como uma realidade cada vez mais significativa e em
franco desenvolvimento.
PALAVRAS-CHAVES: Biomassa. Energia, Gentica
GENETICALLY MODIFIED MICROORGANISMS AND THEIR RELATIONSHIP
WITH THE INCREASE IN PRODUCTION OF BIOFUELS
ABSTRACT
Concern about the availability of fossil fuels has been increasing everywhere
questions arise about the energy supply in the future. The demand for alternative raw
materials for fuels and chemicals has grown, driven by high oil prices and efforts to
reduce net emissions of carbon dioxide and other greenhouse gases. Biofuels are
resources with low toxicity, biodegradable and renewable, and are associated with
environmental advantages since they allow the reduction of emissions of noxious
gases and in the current scenario, representing an alternative energy increasingly
exploited. Currently, biomass is seen as a major source to meet the global demand
for primary energy. In this perspective, the focus on the use of microorganisms to
improve biofuel production presents itself as an increasingly more significant and
rapidly developing.
KEYWORDS: Biomass. Genetics. Energy.
INTRODUO
As crescentes preocupaes sobre a reduo da disponibilidade dos
combustveis fsseis, juntamente com os problemas ambientais resultantes da sua
explorao, produo e utilizao, tm estimulado a investigao cientfica de forma
a desenvolver e melhorar a produo de biocombustveis a partir de recursos
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renovveis. Os problemas ambientais relacionados com a emisso de gases


decorrente do uso de combustveis fsseis tm impulsionado pesquisas no sentido
de desenvolvimento de combustveis alternativos (COLLA et al., 2012).
As mudanas climticas e a elevao das cotaes do petrleo aliadas s
necessidades estratgicas de produo de energia tm motivado uma corrida sem
precedentes produo de combustveis alternativos, preferencialmente de fontes
renovveis de energia, como a biomassa (BUCKERIDEG et a.l, 2010). Existem
diferentes rotas para converter a energia da biomassa em fluxo de energia final
desejado, quer seja na forma de calor, combustvel ou energia eltrica (SEABRA,
2008). Assim, abrem-se oportunidades para o desenvolvimento de uma indstria
baseada em matrias-primas renovveis. Alm dos biocombustveis j conhecidos,
um fluxo de inovaes em desenvolvimento pode estar lanando as bases de uma
indstria integrada de explorao da biomassa (COUTINHO &; BONTEMPO, 2010).
A civilizao da biomassa permite produzir no s alimentos para o homem,
mas tambm forragem para os animais, materiais de construo, adubos verdes,
biocombustveis, matrias-primas industriais (fibras, plsticos etc.), frmacos e
cosmticos. H um espectro amplo de produtos derivados da biomassa e
potencializados pelo uso de biotecnologias nas duas pontas do progresso: para
aumentar a produtividade da biomassa e para ampliar o espectro dos produtos dela
derivado (IGNACY SACHS, 2005).
Ainda que atualmente os nicos biocombustveis produzidos em grande
escala sejam o etanol e o biodiesel, diferentes classes de molculas possuem
propriedades desejveis para este fim e algumas so passveis de produo por via
microbiana. Outras, embora no sejam normalmente sintetizadas por
microrganismos podem vir a s-lo atravs do uso de ferramentas biotecnolgicas. A
produo de biodiesel tem sido citada como uma das possveis aplicaes das
lipases (ANTCZAK et al., 2009).
Os microrganismos convertem biomassa em produtos qumicos que podem
ser utilizados como biocombustveis, esta produo de combustvel no , no
entanto, recente, pois a fermentao e a destilao de lcool so feitas h muito
tempo pelo homem. A modificao gentica de bactrias e outros microrganismos
consistem na manipulao de genes, isto , no isolamento, manipulao e
introduo de DNA, com o intuito de exprimir outro (s) gene (s). O objetivo principal
, pois a introduo de novas caractersticas que levem a um aumento de
produtividade.
So conhecidos vrios casos de manipulao gentica de
microrganismos (bactrias e cianobactrias) na produo de biocombustveis.
(ANTUNES et al., 2011).
Este artigo tem o objetivo de apresentar uma reviso relacionada s ultimas
pesquisas que tratam de inovao de microrganismos geneticamente modificados
para produo de biocombustveis. Este se justifica pela crescente preocupao com
a reduo da disponibilidade dos combustveis fsseis, somado aos problemas
ambientais ocasionados pela sua utilizao, o que deve estimular a investigao
cientfica de forma a desenvolver e melhorar a sntese de biocombustveis a partir de
recursos renovveis.
A metodologia utilizada para realizao deste trabalho foi baseada em
pesquisa bibliogrfica, para isso foram consultados diversos peridicos e artigos
cientficos que tratam da questo de inovao na transformao da biomassa por
microrganismos em fontes renovveis de energia, levantando assim informaes
pertinentes ao objetivo proposto. A abordagem da pesquisa realizada foi do tipo
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exploratrio, descritivo e explicativo, visando exteriorizar a relevncia dos estudos no


que se refere aos desafios e perspectivas da produo de biocombustveis a partir
de microrganismo geneticamente modificados.
BIOCOMBUSTVEIS OBTIDOS A PARTIR DE MICRORGANISMOS
Inmeros tipos de biomassa podem ser identificados como fontes alternativas
para a produo de energias limpas. Essa biomassa pode ser derivada de
biorresduos, como por exemplo, sobras de alimentos, resduos municipais e
agrcolas; podem tambm ser provenientes de culturas energticas comestveis e
no comestveis; de plantas aquticas consideradas fontes de bio-leo, entre outros
(SOUZA, et al. Citado por SINGH & GU, 2010).
Os microrganismos transformam biomassa em produtos qumicos que podem
ser utilizados como biocombustveis nos transportes. (COLLA et al., 2012). O
metano produzido por digesto anaerbia de resduos orgnicos. O seu uso como
combustvel limitado, sendo usado na produo combinada de calor e eletricidade.
O etanol produzido por processo fermentativo, sendo aplicado como combustvel
(ANTUNES et al., 2011).
Entretanto, vem surgindo uma nova tecnologia, o desenvolvimento de novos
processos ou biotecnologia para a produo de hidrognio e leo de algas. O biohidrognio usado em clulas de combustvel de hidrognio para gerar eletricidade.
A produo corrente est limitada pelo custo dos reatores necessrios para a
sntese fotoqumica, e tambm pela baixa produtividade da fermentao anaerbia
(COSTA, 2012). Os leos provenientes de microalgas so considerados uma
tecnologia nova. Cerca de 40% da massa de algumas microalgas leo que pode
ser extrado e usado com biodiesel (CHISTI, 2007).
A seguinte descrio de diferentes formas de se obter biocombustveis
direcionada para metodologias que envolvem fermentao por microrganismos,
nomeadamente bactrias e leveduras. De acordo com ANTONI et al. (2007),
qualquer processo de fermentao microbiana requer uma fonte de energia para
alimentar os microrganismos, que obtida a partir de biomassa na forma de
acares.
O Hidrognio, o metano e o etanol so trs exemplos de produtos que podem
ser obtidos, como biocombustveis, a partir da fermentao realizada por
microrganismos, os mesmos sero mencionados ao longo do texto. Mas alm
desses descritos, salienta-se ainda o papel do n-butanol, do metanol e biodiesel
(ster monoalquil de cidos graxos obtido de leos vegetais) na produo de
energias limpas (ANTUNES et al., 2011).
HIDROGNIO
O hidrognio o elemento mais abundante do universo. De maneira geral no
encontrado na natureza em sua forma molecular, por isso necessita de mtodos
especficos de produo (SANTOS, 2009). O hidrognio ganhou ateno devido ao
seu potencial como uma alternativa sustentvel para os mtodos convencionais de
produo de H2, sendo que em seu processo no tem como produto CO2, um dos
gases do efeito estufa (DAS, 2008). Ainda o hidrognio como combustvel tem o
potencial de reduzir a dependncia de combustveis fsseis, podendo ser queimado
em motores combusto ou usado em clulas a combustvel para produzir
eletricidade diretamente e o nico subproduto da "queima" do hidrognio a gua
(ROSSI, 2012).
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As formas tradicionais de produo de hidrognio apresentam balano


energtico desfavorvel uma vez que para a gerao de hidrognio via eletrlise
consumido de 4,5 a 5 kw/h/m3 (COSTA, 2012). O hidrognio pode ser
biologicamente produzido a partir de microrganismos como algas ou cianobactrias
atravs de fotlise da gua, bactrias fotossintticas, atravs de fermentao na
ausncia de luz, organismos anaerbios bactrias acidognicas ou a partir de
substratos orgnicos. Este processo tem tambm a vantagem de reduzir a massa de
resduos orgnicos. Altos rendimentos de hidrognio podem ser conseguidos
usando bactrias termfilas, como por exemplo, Caldicellulosiruptor saccharolyticus
ou Thermotoga elfii. (FURINGO et al, 2009)
Nas fermentaes anaerbias comum presena de hidrognio, esse
subproduto poder ser interessante na fermentao industrial em larga-escala.
Entretanto, a produo de bio-hidrognio por microrganismos ainda no est
desenvolvida numa tecnologia que seja economicamente sustentvel, o que
corresponde a um atraso na expectativa depositada neste gs. A produo biolgica
a partir de biomassa renovvel, que o tornaria uma fonte de energia primria
sustentvel, ainda necessita de mais pesquisa e desenvolvimento (NASCIMBENI,
2013).
A produo de bio-hidrognio pode ser encarada como uma boa alternativa
para fornecer uma fonte de energia econmica, no poluente e com uma boa
relao custo benefcio, porm ainda no foi desenvolvida a tecnologia que a torne
vivel (INPI, 2011).
METANO (BIOGS)
O biogs uma mistura gasosa produzida a partir da decomposio
anaerbica de materiais orgnicos, composta primariamente de metano e dixido de
carbono, com pequenas quantidades de cido sulfdrico e amnia. Traos de
hidrognio, nitrognio, monxido de carbono, carboidratos saturados ou
halogenados e oxignio esto ocasionalmente presentes no biogs. Geralmente, a
mistura gasosa saturada com vapor de gua e pode conter material particulado e
compostos orgnicos com silcio (siloxanas). A composio e o contedo energtico
do biogs podem variar de acordo com o material orgnico e o processo atravs do
qual o mesmo produzido (ZANETTE, 2009).
As fbricas de biogs produzem gs metano de uma forma sustentada,
juntamente com dixido de carbono, a partir de biomassa. A vantagem do processo
de biogs a possibilidade de utilizar os constituintes polissacardeos da biomassa
para a produo de energia (por exemplo, energia eltrica e calor) em complexos
industriais relativamente pequenos.
Alternativamente, o gs pode ser comprimido depois da purificao e
enriquecido, sendo depois usado como combustvel na combusto de motores ou
carros. A grande vantagem dessa tecnologia ser amiga do ambiente, que inclui o
potencial para uma completa reciclagem de minerais, nutrientes e material fibroso. A
biomassa que poder usada como substrato muito diversificada, variando entre
estrume, restos animais e vegetais e resduos domsticos.
O biogs pode ser usado para a gerao de energias eltrica, trmica e
mecnica. A principal inteno no uso do biogs substituir os gases de origem
mineral como o GLP (Gs Liquefeito de Petrleo), usado como gs de cozinha, GN
(Gs Natural) usado em equipamentos domsticos e GNV (Gs Natural Veicular). O
biogs pode ser empregado nos mais variados tipos de produtos, como em foges
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domsticos, lampies, motores de combusto interna (automveis), geladeiras,


chocadeiras, secadores de gros ou secadores diversos e aquecimento e balano
calorfico (ROYA et al. 2011).
ETANOL
Etanol um biocombustvel lquido derivado de biomassa renovvel, que tem
como principal componente o lcool etlico, que pode ser utilizado, diretamente ou
mediante alteraes, em motores a combusto interna com ignio por centelha, em
outras formas de gerao de energia ou em indstria petroqumica, podendo ser
obtido por rotas tecnolgicas distintas, conforme especificado em regulamento
(BRASIL, 2011).
O etanol ou lcool etlico uma substncia com frmula molecular C2H6O.
Este apresenta algumas diferenas importantes em relao aos combustveis
convencionais derivados de petrleo, sendo a principal delas o elevado teor de
oxignio, que constitui cerca de 35% em massa do etanol. As caractersticas do
etanol possibilitam a combusto mais limpa e o melhor desempenho dos motores, o
que contribui para reduzir as emisses poluidoras, mesmo quando misturado
gasolina. Nesses casos, comporta-se como um verdadeiro aditivo para o
combustvel normal, melhorando suas propriedades (BNDES, 2008). Ainda de
acordo com a mesma fonte, o bioetanol vem sendo produzido pela hidrlise e
fermentao de materiais lignocelulsicos desde o fim do sculo XIX, mas somente
nos ltimos 20 anos essa tecnologia tem sido proposta para atender o mercado de
combustveis.
As tecnologias para a obteno de bioetanol com base em materiais
lignocelulsicos envolvem a hidrlise dos polissacardeos da biomassa em acares
fermentescveis e sua posterior fermentao para a produo do bioetanol. Para
executar essa tarefa, a hidrlise utiliza tecnologias complexas e multifsicas, com
base no uso de rotas cidas e/ou enzimticas para a separao dos acares e
remoo da lignina.
A fermentao de bioetanol o processo microbiano realizado em maior
escala. A produo industrial de etanol usa como regra geral, melao de cana-deacar ou amido hidrolisado enzimaticamente (proveniente do milho) e fermentao
descontnua com Saccharomyces cerevisiae para produo de etanol. Esse
processo tem como subprodutos CO2 e pequenas quantidades de metanol e glicerol,
e o etanol resultante para uso direto como combustvel (isto , no necessita de
qualquer tratamento adicional). A fermentao de acares, presentes em biomassa
celulsica, um processo realizado pela maioria das bactrias, sendo Zymomonas
mobilis uma das espcies que possibilita maior rendimento na produo de etanol
por fermentao. A fermentao biolgica de etanol a partir de melao uma
tecnologia j considerada madura, enquanto que a utilizao de substratos no
alimentares, como os resduos celulsicos, um processo em desenvolvimento.
A maior produo de etanol que se produz na atualidade o de primeira
gerao, obtido a partir da fermentao do caldo da cana. No entanto, as pesquisas
atuais no esto voltadas mais para a sacarose da cana, mas para a celulose,
presente no bagao e na palha da cana. O processo de produo do etanol a partir
da celulose consiste na quebra da celulose, o acar que compe a parede celular
das plantas. Em tese, qualquer planta poderia ser usada para produzir etanol
combustvel, de galhos cados grama, passando por algas e palha seca
(BELLINGHINI, 2010).
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CIANOBACTRIAS GENETICAMENTE MODIFICADAS


A produo de biodiesel a partir de algas tem sido proposta como uma das
formas mais eficientes de produzir biocombustveis, porque muitas algas possuem
uma alta produtividade lipdica que facilmente pode ser convertida em energia e que
quando comparada com a produo de etanol celulsico mais vivel em termos de
quantidade produzida. Muitas cianobactrias e algas tm ainda a capacidade de
produzir hidrognio, o que pode ser considerado uma forma indireta de reciclar o
CO2. A produtividade mdia de biodiesel de microalgas em um sistema de produo
com bom desempenho de 1 105 litros por hectare ano (CHISTI, 2008).
Investigadores da Universidade da Califrnia modificaram geneticamente uma
cianobactria para que essa possa consumir dixido de carbono atravs da
fotossntese e libere como produto o isobutanol, esse tem sido visto como uma
promissora alternativa na substituio da gasolina, em vista de seu potencial. Este
processo tem duas vantagens frente meta global de alcanar uma economia
sustentvel, que utilize energia limpa. Em primeiro lugar, uma forma de reciclar
dixido de carbono, reduzindo assim as emisses de gases de efeito de estufa. Em
segundo lugar, usar a energia solar para converter o dixido de carbono em um
combustvel lquido para abastecer automveis, podendo para isso utilizar a
infraestrutura j existente para estocagem e distribuio do produto (ATSUMI et al.
2009).
Usando a cianobactria Synechoccus elongatus, estes investigadores
aumentaram, geneticamente, a quantidade da enzima responsvel por fixar o
dixido de carbono. Seria particularmente interessante instalar uma fbrica produtora
de biocombustvel, com base nestas cianobactrias geneticamente modificadas,
perto de uma fbrica que emita dixido de carbono, como por exemplo, uma central
termoeltrica. Isto permitiria que o gs de efeito estufa fosse capturado e reciclado
diretamente em combustvel lquido (ATSUMI et al. 2009).
Uma equipe de investigao da Universidade do Arizona numa abordagem
diferente da comumente utilizada para o aproveitamento das qualidades atribudas
para as cianobactrias fotossintticas, visando produo de energia. O grupo de
pesquisa usou genes de um bacterifago (microrganismo que ataca bactrias) para
programar as cianobactrias a se autodestrurem, permitindo a recuperao de
gorduras ricas em energia, e dos seus subprodutos, os biocombustveis. Segundo
LIU (2011), as cianobactrias so fceis de manipular geneticamente, e tm um
grande rendimento para os biocombustveis, sendo capazes de substituir a gasolina.
Mas, para a realizao deste potencial, necessrio fazer a colheita das
gorduras, o que atualmente exige uma srie de reaes qumicas bastante
onerosas. A fim de que as cianobactrias possam libertar com maior facilidade os
cidos graxos contidos em seu interior, os pesquisadores inseriram nas
cianobactrias genes de bacterifagos. Estes genes so responsveis pela
dissoluo das membranas, facilitando assim a libertao dos cidos graxos (LIU et
al. 2011).
Biodiesel de microalgas deve ser competitivo com o petrleo de origem fssil
e sua competitividade depender principalmente do custo de produo da biomassa
de algas. Uma maneira de abordar a questo da competitividade estimar o preo
ou o custo de produo da biomassa procedente do cultivo de algas com um
determinado teor de leo bruto e comparar com o preo de aquisio do petrleo
(CHISTI, 2008).
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A literatura sugere que, atualmente, a biomassa de microalgas pode ser


produzida por cerca de trs mil dlares por tonelada (CHISTI, 2007). O que no
torna vivel a sua utilizao quando comparada aos combustveis de origem fssil.
Portanto, o preo de produo da biomassa precisa diminuir, e isso s ocorrer
atravs de avanos em tecnologia de produo e melhoramento gentico de algas,
para transformar a produo de biodiesel a partir de microalgas uma opo vivel.
E, alm disso, segundo o mesmo autor nenhuma parte do biodiesel produzido
comercialmente a partir de leo de soja nos EUA e leo de canola na Europa pode
competir com diesel derivado de petrleo sem os crditos fiscais, crditos de
carbono e outros subsdios semelhantes que recebe (CHISTI, 2007).
Na Figura 1 pode-se ver como funciona um processo de produo de leo de
microalgas para produo de biodiesel.

FIGURA 1: Fluxograma de produo de biodiesel atravs de algas


Fonte: Adaptado a partir dos dados de CHISTI, 2008.
Para a produo de biomassa deve ser fornecida a cultura de microalgas:
gua, nutrientes inorgnicos, dixido de carbono e luz. Na fase de recuperao da
biomassa, as clulas em suspenso no caldo esto separadas da gua residual e
dos nutrientes, que so ento reciclados para serem reutilizados na fase de
produo de biomassa. A biomassa recuperada utilizada para extrao do leo de
algas, que ser convertido em biodiesel num processo separado (CHISTI, 2008).
Os resduos gerados da produo de leo a partir de algas podem ser ainda
usados como alimento para animais e outros produtos de valor agregado. A maior
parte da biomassa sofre digesto anaerbica, o que produz biogs que pode ser
utilizado para gerar eletricidade. Os efluentes do digestor anaerbico so usados
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como um fertilizante e so ricos em nutrientes e, como a gua de irrigao. A maior


parte da energia gerada a partir do biogs pode ser consumida no prprio processo
de produo de biomassa e qualquer excesso de energia pode ser vendido a
companhias energticas. As emisses de dixido de carbono geradas durante a
produo de energia so reutilizadas para alimentar o processo de produo de
biomassa (CHISTI, 2007).
BACTRIAS GENETICAMENTE MODIFICADAS
Cientistas americanos incorporaram no DNA (cido desoxirribonucleico) da
bactria Escherichia coli genes que lhe permite sintetizar enzimas que processam a
celulose, transformando-a em acares, que por sua vez so usados para produzir
biocombustvel de forma direta. Investigadores da Universidade da Califrnia
desenvolveram um processo alternativo para obter combustvel biolgico recorrendo
a Escherichia coli (STEEN et al. 2010).
Numa primeira fase os investigadores clonaram genes de duas espcies de
bactrias que ocorrem no solo e no sistema digestivo de animais herbvoros que so
responsveis pela produo de enzimas que processam a celulose oriunda de
biomassa vegetal. Aps adicionaram sequncias de aminocidos capazes de induzir
a secreo dessas enzimas pelas bactrias testadas, estas sequncias ento foram
importadas para o DNA de E. coli. Dessa forma a nova E. coli. modificada passa a
ter o mesmo desempenho e especificidade das bactrias clonadas passando a
processar a celulose e transformado essa em acares (STEEN et al. 2010).
Numa segunda fase, de acordo com o lder da equipe Incorporamos genes
que permitem produzir steres de biodiesel de cidos graxos e etanol (STEEN et al.
2010). Com essa alterao possvel que as bactrias fabriquem biocombustvel
que podem ser diretamente usado. Adicionalmente, o biocombustvel produzido
excretado pelas bactrias, migrando para a superfcie do recipiente que esta sendo
utilizado como reator de produo, dessa forma o mesmo pode ser coletado, sem
necessidade de recorrer destilao ou a qualquer outro tipo de purificao (STEEN
et al. 2010).
Uma equipe de pesquisadores da Universidade da Califrnia modificou
bactrias para produo de um biocombustvel, com as mesmas funes do que a
gasolina. Enquanto microrganismos produzem esse biocombustvel em uma baixa
taxa, essa nova bactria geneticamente modificada tem uma produo cerca de dez
vezes superior quanto comparada a microrganismos sem essa modificao. Uma
das espcies que produz naturalmente essa substancia qumica chamada n-butanol
ou butanol normal, proposta como um substituto para a gasolina so as bactrias do
gnero Clostridium (BOND-WATTS et al. 2011).
BOND-WATS (2011), e equipe introduziram esta mesma via metablica em
bactrias do gnero E.coli, por esse microrganismo ser considerado como mais fcil
de ser geneticamente modificado. Segundo BOND-WATS (2011), esta nova E. coli
modificada geneticamente produz cerca de 5 g/l de n-butanol, praticamente o
mesmo que Clostridium. Ao todo, foram inseridos genes de Clostridium
acetobutylicum, Treponema denticola e Ralstonia eutrophus em E. coli. (BONDWATTS et al. 2011).
LEVEDURAS GENETICAMENTE MODIFICADAS
A produo de bioetanol realizada comumente por fermentao por uma
levedura chamada Saccharomyces cerevisiae, a mesma levedura usada h muitos
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sculos para fermentar a massas e bebidas alcolicas. Embora essa espcie seja
bastante eficiente em transformar glicose em lcool, ela no consegue digerir outros
tipos de acar, como a xilose (acar presente na madeira). Isso se torna um
problema para a utilizao e fermentao de alguns tipos de biomassa, como
madeira e cascas de plantas, pois grande parte do produto da fermentao da
celulose presente nesses materiais acaba sendo desperdiada. Outro elemento que
limita o uso dessa matria-prima o cido actico, produto ou coproduto gerado na
transformao da biomassa em acar. Essa substncia txica para a levedura e
diminui sua eficincia na produo de etanol (KIM et al. 2010).
KIM (2010) e equipe anunciaram a criao de um novo tipo de levedura que
produz com maior eficincia o chamado etanol de segunda gerao, aquele feito a
partir da celulose da biomassa vegetal. A espcie modificada em laboratrio capaz
de gerar lcool a partir de substncias que no eram toleradas por esse tipo de
micro-organismo, gerando mais combustvel a partir da mesma quantidade de
material. A pesquisa, descrita na revista especializada Nature Communications,
pode dar um novo impulso fabricao de lcool com o bagao da cana-de-acar
e outras fontes lignocelulsicas (KIM et al., 2010).
KIM et al., (2010) observando a incapacidade da Sacharomyces cerevisiae
de converter o amido em glicose desenvolveram uma linhagem capaz de sacarificar
o amido, produzindo glicose para produzir etanol. Para isso foram utilizados dois
outros microorganismos, Aspergillus awamori e Debaromyces occidentalis. Do A.
awamori foram retirados os genes que sintetizam a glico-amilase (capaz de degradar
amido), e do D. occidentalis os genes que sintetizam a -amilase. Desta forma,
obtiveram um resultado satisfatrio, para essa comprovao foi utilizada uma cepa
de s. cerevisiae industrial e outra da nova linhagem, ambas foram colocadas em um
meio contendo 20% de amido solvel, e os resultados foram contundentes a
linhagem industrial produziu 0% de etanol enquanto que a nova linhagem produziu
89,8% de etanol (KIM et al., 2010). Esses resultados demostram que a insero de
genes, com caractersticas desejadas faa com que a produo de etanol seja
aumentada em quase 90%, reduzindo assim os custos de produo atravs do
aumento de produtividade.
Os pesquisadores YONG-SU JIN (2013) e equipe da Universidade de Illinois,
nos Estados Unidos, foram capazes de resolver os dois problemas em laboratrio ao
manipular o metabolismo da S. cerevisiae: alm da glicose, a levedura modificada
tambm consegue digerir a xilose e o cido actico, transformando as duas
substncias em etanol, e dessa forma com uma alimentao mais variada e
completa o microrganismo vive mais e produz mais combustvel. "Ns introduzimos
os caminhos metablicos para o consumo de xilose e acetato de outros
microrganismos nessa levedura" (YONG-SU JIN, 2013). De acordo com os
resultados obtidos com testes laboratoriais, a cepa criada pelos cientistas pode ser
usada com as mesmas tcnicas tradicionais empregadas na produo de bioetanol
de segunda gerao, mas com uma eficincia maior. O pesquisador afirma ainda
que:
A quantidade de produo de etanol do acar ser a mesma, mas nossa
levedura modificada ser capaz de converter o acetato da hidrlise
celulsica em etanol tambm. Portanto, nossa levedura pode produzir mais
etanol do que as cepas existentes (YONG-SU JIN, 2013, p. 4).

Ele ressalta que ainda necessrio aperfeioar a capacidade de consumo de


cido actico antes de pensar em comercializar a levedura modificada. Outra
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questo que deve ser analisada se o fungo artificial vai apresentar os mesmos
resultados obtidos em experimentos controlados realizados em laboratrio em uma
planta industrial real (YONG-SU JIN, 2013).
A manipulao da levedura S. cerevisiae, tambm, tem sido realizada no
Brasil, onde a competio entre as indstrias energtica e alimentcia pela cana-deacar s faz crescer a necessidade pelo etanol de segunda gerao. Segundo
Joo Ricardo da EMATER-DF em entrevista ao Correio Brasiliense: "Tambm
trabalhamos para fazer a levedura que fermenta xilose e seja forte contra compostos
txicos. Esse estudo est um passo frente por tambm usar o composto txico
para produzir etanol" (CORREIO BRAZILIENSE, 2013).
Essa , na verdade, a mais recente de vrias pesquisas que tentam adaptar a
S. cerevisiae fermentao de celulose, um material que sempre foi indigesto para
essa espcie. H outros tipos de organismos que se do muito bem com os
acares do bagao de cana, mas nenhum deles demonstrou o mesmo
desempenho ou a mesma resistncia em produzir etanol em escala industrial. Para
vencer esse impasse, os pesquisadores procuram unir as duas habilidades em um
s microrganismo, uma tarefa que depende da delicada manipulao do
comportamento de uma espcie viva. Outro problema apontado pelo especialista
para o aproveitamento da celulose na produo de combustvel que a forma de
fermentao de etanol no Brasil feita a cu aberto, uma condio inadequada para
a manipulao de micro-organismos modificados em laboratrio. Um grande volume
de investimentos necessrio a fim de adaptar esse modelo s leveduras especiais
(CORREIO BRAZILIENSE, 2013).
A Embrapa prev que as primeiras usinas especializadas no processamento
da biomassa lignocelulsica comecem a funcionar a partir de 2015, por iniciativas
privadas (CORREIO BRAZILIENSE, 2013).
A espcie de fungos Mucor Circinelloides um promissor candidato
produo de etanol diretamente a partir de material lignocelulsico, pois fermenta
tanto pentoses quanto hexoses; produz celulases - endo--glucanase,
celobiohidrolase, -glucosidase, Xilanase e -xilosidase. Os pesquisadores TAKANO
E HOSHINO (2012), realizaram uma pesquisa com o objetivo selecionar dois fungos
de alto desempenho (cepas de M. circinelloides) tanto para secreo de celulases
quanto para fermentao de etanol, e avaliar os dois sistemas possveis: converso
direta da palha de arroz e um sistema de co-culturas para converso. TAKANO &
HOSHINO (2012) utilizaram M. Circinelloides tanto para a expresso de celulases
quanto para a produo de etanol, foram estudadas 11 cepas. Buscou-se o
desenvolvimento de sacarificao e fermentao simultneas usando apenas fungos
pertencem Zygomycetes, especialmente M.circinelloides. M. circinelloides NBRC
5398 que podem segregar uma grande quantidade de celulases para obter acares
fermentescveis de palha de arroz e circinelloides M. NBRC 4572 que pode
fermentar glicose e xilose em alto rendimento, estes foram selecionados entre as
cepas da biblioteca de fungos. Com a co-cultura dessas duas cepas, foi produzido
1,28 g de etanol por litro, aps 96 horas de fermentao utilizando palha de arroz
como substrato. Para aumentar o rendimento de etanol, usando o proceso de
fermentao e sacarificao simultneos, proposto com o sistema de co-cultura, a
secreo de celulases por M. circinelloides NBRC 5398 ou outras estirpes deve ser
ainda melhorada.
YANASE et al. (2010) desenvolveram uma pesquisa objetivando construir
uma linhagem recombinante de Kluyveromyces marxianus que
produza ENCICLOPDIA BIOSFERA, Centro Cientfico Conhecer - Goinia, v.10, n.18; p. 2218

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glicosidase e endoglucanase na superfcie da clula capaz de converter -glicano


(material celulsico) em etanol a 50C. Para isso f oram utilizados alguns
microrganismo para a bioengenharia. Do Aspergillus aculeatus foi obtido o gene de
expresso da -glicosidase e do Trichoderma reesei, o gene de expresso da
endoglucanase. A produtividade de etanol pelo organismo geneticamente modificado
foi testada em vrias temperaturas. Neste trabalho foi demonstrado que a linhagem
de levedura recombinante K. marxianus expressando os genes EG (endoglucanase)
e BGL (glucosidase) foi capaz de produzir etanol (fermentar) em altas temperaturas
a partir de material celulsico ( -glucano). E mais recentemente foi criada a
bactria, conhecida como ALK2, pode fermentar todos os acares presentes na
biomassa, a 50 C, e trata-se de uma bactria termo flica e anaerbica. Os
cientistas, liderados por Joe Shaw e Lee Lynd, do Dartmouth College, nos EUA,
modificaram geneticamente a bactria para que ela produzisse mais e melhor o
etanol. Deu certo: alm do alto rendimento, no fim o etanol foi praticamente o nico
produto gerado pela bactria (YANASE et al. 2010).
NOVAS ENZIMAS
Recentes avanos em enzimas para a converso de biomassa celulsica em
acares trouxe o etanol a partir de celulose ou da biomassa vegetal beira da
realidade comercial. Um nmero de potencial de indstrias j anunciaram planos
para comear a construo de biorrefinarias de processamento de celulose. Um
desafio para a indstria de biomassa celulsica a emergente ser a forma de
produzir, colher, armazenar e entregar grandes quantidades de matria-prima para
biorrefinarias de uma maneira econmica e ambientalmente sustentvel. O
desenvolvimento de microrganismos geneticamente melhorados (GEMS) e enzimas
industriais especializadas - tm melhorado muito a eficincia da produo de etanol.
A biotecnologia industrial tambm produziu uma srie de novos polmeros de base
biolgica, plsticos e txteis (MATTHEW et al., 2009).
O Brasil tambm tem investido nessa tecnologia com a construo da primeira
usina de etanol celulsico em escala comercial do Pas, com previso de
inaugurao no incio de 2014, sediada no Estado de Alagoas, esta representa um
grande avano para o Brasil porque o coloca entre os pases que j tem planos
concretos de utilizao dessa tecnologia, a usina, do grupo GraalBio, ter
capacidade de produo considervel, 82 milhes de litros/ano e meta para at 2020
de produzir 1 bilho de litros/ano (UNICA, 2013). Segundo UNICA (2013) para
acelerar o desenvolvimento em escala comercial do etanol de segunda gerao,
produzido a partir da palha e do bagao da cana-de-acar, o Banco Nacional do
Desenvolvimento Econmico e Social (BNDES) abriu uma linha de crdito em 2012,
que vem sendo utilizada por diversas empresas ativas no desenvolvimento de
tecnologias para a produo de biocombustveis de segunda gerao, como
Abengoa e DuPont.
Vrios desafios tecnolgicos para a produo de etanol celulsico comercial
ainda permanecem. Estimativas atuais do Departamento de Energia dos Estados
Unidos estimam o custo de produo de etanol celulsico em dois trs dolares por
galo. A eficincia do sistema depende ainda de melhorias nos setores de coleta,
transporte e armazenamento de biomassa celulsica e em tecnologias de prtratamento mais eficientes, para melhorar a receptividade de biomassa para a
atuao da enzima celulase. Nesse contexto h ainda espao para melhorias em
coquetis enzimticos de celulase e organismos de fermentao mais eficazes para
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converter pentoses e hexoses (acares complexos presentes na biomassa


celulsica) em acares facilmente fermeteciveis e isso somente podem ser
conquistados com a insero de microrganismos geneticamnete modificados
(MATTHEW et al., 2009).
ZUNIGA (2010) desenvolveu uma pesquisa que utilizou o bagao de cana
para a produo de celulases especficas por meio de fermentao em estado slido
com o microrganismo Aspergillus niger. Essas celulases produzidas permitiram
converses de 15% de etanol. A aplicabilidade deste coquetel enzimtico poder
proporcionar um crescimento sustentvel na produo de bioetanol.
A empresa Novozymes, desenvolveu as enzimas batizadas de Cellic CTec2
(celulase) e a Cellic HTec2 (hemicelulase), que podem liberar os acares contidos
na palha de milho, restos de madeira e bagao de cana-de- acar, por exemplo.
So protenas especializadas em catlise biolgica. Desta forma encontra-se na
hidrlise da celulose, uma alternativa para uma maior produo, sem que seja
necessrio interferir bruscamente no equilbrio ecolgico, alm de utilizar como
matria-prima os resduos da fabricao convencional do etanol. A recentemente
criada bactria, conhecida como ALK2, pode fermentar todos os acares presentes
na biomassa, a 50C, e trata-se de uma bactria ter moflica e anaerbica. Os
cientistas, liderados por Joe Shaw e Lee Lynd, do Dartmouth College, nos EUA,
modificaram geneticamente a bactria para que ela produzisse mais e melhor o
etanol. Deu certo: alm do alto rendimento, no fim o etanol foi praticamente o nico
produto gerado pela bactria. O que comprova a necessidade de investimentos para
que possam ser obtidos resultados promissores (BRENT & MATTHEW, 2009).
O Etanol celulsico no tem quase nenhuma emisso de gases com efeito de
aquecimento climtico, porque o dixido de carbono capturado no cultivo das plantas
aproximadamente igual ao das emisses produzidas enquanto queimado num
motor. Sendo assim, seria uma forma energtica eficiente e no to poluidora quanto
s formas de energia que so utilizadas atualmente (VIAN, 2011).
CONVERSO DIRETA DA ENERGIA SOLAR EM COMBUSTVEL LQUIDO,
USANDO MICRORGANISMOS FOTOSSINTTICOS
A energia solar captada e transformada em energia qumica pelo processo
de fotossntese. Todas as plantas realizam a fotossntese, mas elas diferem na
forma de armazenamento dessa energia em forma de biomassa. Algumas plantas
produzem amido ou glicose, outras celulose, ou leos. Todas as formas so fontes
de biocombustveis, assim como os leos produzidos por microalgas. A produo
pode ser obtida por processo qumico ou biolgico ou pela combinao de ambos
(XUEFENG, 2010). A converso direta da energia solar em combustvel lquido,
usando microrganismos fotossintticos uma alternativa atraente para substituir os
combustveis fsseis. Existem vrias vantagens em usar organismos como
microalgas e cianobactrias. Entre elas destacam-se a sua maior taxa de
crescimento em relao s plantas, e sua capacidade de prosperar em reas que
no podem suportar a agricultura, dessa forma podem proporcionar uma forma de
resolver o conflito potencial entre o uso da terra para a produo de alimentos ou
para produo de biocombustveis (MACHADO & ATSUMI, 2012).
Ainda de acordo com o mesmo autor, o sistema microbiano mais eficiente
na trasnformao da energia solar em biocombustveis. Alm do mais as
cianobactrias so mais tolerantes a introduo de novos genes, ou seja, a
modificaes genticas. A converso direta de dixido de carbono para
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biocombustveis atravs das cianobactrias podem melhorar significativamente a


eficincia da produo de biocombustveis (XUEFENG, 2010). Segundo XUEFENG
(2010), a Algenol Biocombustveis Inc. desenvolveu uma tecnologia inovadora com
cianobactrias e produziu etanol a uma taxa de 6000 gales/ha/ano. Em contraste,
ao rendimento anual de etanol de milho de 321 gales/ha/ano, com cana de
acar 727 gales/ha/ano e de palha de milho 290 580 gales/ha/ano. evidente
que a produo de etanol, a partir de cianobactrias significativamente mais
eficiente do que o etanol produzido a partir de matrias-primas vegetais. Esta nova
tecnologia faz muito a diferena na produo de biocombustveis, e no se limita a
produo de etanol, se estende a outros combustveis alternativos.
A produo de biocombustveis atravs do sistema biolgico resulta num
combustvel bem prximo das caractersticas dos combustveis fsseis, o que
proporciona melhor adaptao aos motores existentes e menores trabalho de refino.
A utilizao de cianobactrias para produzir produtos qumicos valiosos ainda est
em fase inicial de explorao, h um longo caminho a percorrer (MACHADO &
ATSUMI, 2012).
CONSIDERAES FINAIS
Os combustveis originados de biomassa tm sido usados pela humanidade
ao longo dos tempos. A maioria reporta a lcoois produzidos a partir da fermentao
de substncias como amido, acares e leos de plantas. Atualmente, com o
aumento dos preos e com a crescente instabilidade poltica que ocorre nos pases
produtores de petrleo, o uso de biocombustveis de origem biolgica vem ganhando
preponderncia.
A importncia dos microrganismos na produo destes biocombustveis est
cada vez mais sendo reconhecida. Os biocombustveis produzidos a partir de
biomassa renovvel so fonte de energia sustentvel com o maior potencial para a
produo de CO2 neutro. Elas podem ser facilmente aplicadas gradualmente para
complementar combustvel fssil. Os biocombustveis podem ser produzidos a partir
de biomassa por microrganismo, bem como uma mistura de ambos os mtodos
tcnicos de produo qumica/biolgica.
A produo de biocombustveis ter de incluir a biomassa de plantas inteiras,
gramneas e resduos agroindustriais para alcanar maior produtividade. Isso
contribuir para reduzir a concorrncia com a produo de alimentos e para a
conservao da natureza, visto que menores reas sero necessrias para um
aumento de produo. Biocombustveis microbianos tem grande potencial de
desenvolvimento em etapas do processo, tais como pr-tratamento, fermentao,
separao do substrato, acoplamento de energia e outros. Pesquisas biolgicas
tero de contribuir para a melhoria da produo de biocombustveis, para a criao
de usinas de energia chamadas de biorrefinarias, de hidrlise enzimtica, de
fermentao especializada em materiais lignocelulsicos e tratamento de resduos e
isso somente ser possvel com a utilizao de microrganismos geneticamente
modificados que possuem especificidade para atuar na biomassa vegetal, fonte de
energia proposta e disponvel em substituio aos combustveis de origem fssil.

ENCICLOPDIA BIOSFERA, Centro Cientfico Conhecer - Goinia, v.10, n.18; p. 2221

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