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Academia Estadual de Segurana Pblica do Cear AESP|CE

Curso de Formao Profissional Para Ingresso no Cargo de Perito Legista de 1 Classe da


Percia Forense do Estado do Cear - PEFOCE
BIOLOGIA E BIOQUMICA FORENSE

Academia Estadual de Segurana Pblica do Cear AESP|CE


Curso de Formao Profissional Para Ingresso no Cargo de Perito Legista de 1 Classe da
Percia Forense do Estado do Cear - PEFOCE
BIOLOGIA E BIOQUMICA FORENSE

SECRETARIA DA SEGURANA PBLICA E DEFESA SOCIAL - SSPDS


DELCI Carlos TEIXEIRA
SECRETRIO DA SSPDS
PERCIA FORENSE DO CEAR
MAXIMIANO Leite Barbosa Chaves
PERITO GERAL DA PERCIA FORENSE DO ESTADO DO CEAR
ACADEMIA ESTADUAL DE SEGURANA PBLICA DO CEAR AESP|CE
Jos Herlnio DUTRA Cel PM
DIRETOR-GERAL DA AESP|CE
ELIANA Maria Torres Gondim - DPC
SECRETRIA EXECUTIVA DA AESP|CE
DOUGLAS Afonso Rodrigues da Silva Ten Cel PM
COORDENADOR GERAL DE ENSINO DA AESP|CE
Amarlio LOPES Rebouas TC BM
COORDENADOR PEDAGGICO
NEYLA Adriano de Santana
ORIENTADORA DA CLULA DE EDUCAO DISTNCIA DA AESP|CE

CURSO DE FORMAO PROFISSIONAL PARA INGRESSO NO CARGO DE PERITO LEGISTA DE 1 CLASSE


DA PERCIA FORENSE DO ESTADO DO CEAR - PEFOCE
DISCIPLINA
BIOLOGIA E BIOQUMICA FORENSE
CONTEUDISTA
Jos Newton Benevides S Junior
Atualizada por: Telma Maria Melo Nazareth
REVISO DE COERNCIA DIDTICA
Erika Maria da Silva Pereira
Francisco Jos Amaral Lima
Jorgeana Reis da Silva
Luciana Canito Austregsilo de Amorim
Luciana Moreira da Silva
Renata Teixeira de Azevedo
FORMATAO
JOELSON Pimentel da Silva Sd PM
2015

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BIOLOGIA E BIOQUMICA FORENSE

SUMRIO
1. INTRODUO ............................................................................................................................................................4
2. FUNDAMENTOS DE BIOLOGIA CELULAR DE INTERESSE FORENSE ............................................................................4
3. FUNDAMENTOS DA BIOLOGIA MOLECULAR FORENSE .............................................................................................6
POLIMORFISMO DE CADEIAS DE DNA ......................................................................................................................6
DNA MITOCONDRIAL ................................................................................................................................................7
CROMOSSOMO Y ......................................................................................................................................................8
4. ANLISES BIOLGICAS FORENSES ............................................................................................................................8
SANGUE ....................................................................................................................................................................8
TESTES PRESUNTIVOS OU DE ORIENTAO PARA DETECO DE SANGUE..............................................................9
TESTES DE CERTEZA OU CONFIRMATRIOS PARA DETECO DE SANGUE............................................................10
TIPAGEM SANGUNEA COM FINALIDADE FORENSE ...............................................................................................10
SMEN HUMANO ...................................................................................................................................................12
5. CADEIA DE CUSTDIA E PRESERVAO DA AMOSTRA BIOLGICA ........................................................................14
INDCIO, VESTGIO E EVIDNCIA .............................................................................................................................14
CADEIA DE CUSTDIA.............................................................................................................................................15
6. COLETA, ACONDICIONAMENTO, CONSERVAO E TRANSPORTE DE AMOSTRAS BIOLGICAS .............................15
7. NOES DE BIOSSEGURANA ................................................................................................................................17
BIBLIOGRAFIA .............................................................................................................................................................18

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BIOLOGIA E BIOQUMICA FORENSE

BIOLOGIA E BIOQUMICA FORENSE


1. INTRODUO
A anlise dos vestgios de origem biolgica atrelados a fatos delituosos feita, pelo ramo da
criminalstica, conhecido como Biologia Forense. Seu principal objetivo confirmar se realmente so amostras
biolgicas (ex. sangue ou outros fludos corporais) e se possvel, obter dados suficientes que possam identificar o
autor do delito ou comprovar seu vnculo ao fato criminoso, auxiliando assim nas investigaes criminais.
Dentre os principais vestgios analisados por este ramo, podemos citar o sangue, o esperma, os fios de
cabelos, os insetos, os vegetais, entre outros.
Como se observa, existe uma grande variedade de vestgios que podem ser coletados em locais de
crimes e que so objetos de estudo da Biologia Forense. A biologia aplicada s anlises criminais uma atividade
multidisciplinar, sendo assim, subdividida em diferentes reas de pesquisa, das quais podemos citar a Bioqumica
Forense, a Hematologia Forense, a Botnica Forense, a Entomologia Forense, a Gentica Forense, etc.
A Bioqumica Forense utiliza tcnicas bioqumicas e ensaios para auxiliar nas investigaes criminais.
A Hematologia Forense estuda os tipos de manchas de sangue, salpicos e gotas, com intuito de fornecer
informaes para subsidiar os processos criminais.
A Botnica Forense visa o estudo de plantas, sementes ou de qualquer outro tipo de amostra vegetal
para fins forense, enquanto que a Entomologia Forense estuda os insetos e outros artrpodes com finalidade
criminal.
A Gentica Forense considerada um dos segmentos mais inovadores e precisos da Biologia Forense na
atualidade, sendo responsvel pela anlise do material gentico encontrado em materiais de origem biolgica
ligados a questes criminais.
2. FUNDAMENTOS DE BIOLOGIA CELULAR DE INTERESSE FORENSE
A clula a unidade morfolgica e funcional bsica dos organismos vivos, possuindo a capacidade de se
diferenciar e de interagir entre si para melhor desempenhar suas funes.
O conjunto de clulas semelhantes, unidas com a finalidade de desempenhar uma funo especfica,
recebe o nome de tecidos. A juno de vrios tecidos recebe o nome de rgos, que por sua vez so
denominados de sistemas, os quais unidos formam um organismo.
Dentre os tecidos existentes no organismo humano, o sangue um dos que mais chama ateno na
prtica forense, visto que ele o tipo de vestgio mais encontrado em locais de crimes violentos com homicdios,
suicdios e agresses fsicas.
O sangue um tecido fludo formado por uma massa heterognea de clulas diferenciadas (glbulos
brancos, glbulos vermelhos e plaquetas) que se encontram suspensas em uma fase lquida denominada de
plasma. Ele esta envolvido em vrias funes vitais ao organismo, dentre elas: transporte de gases, defesa do
organismo, coagulao, veiculao de nutrientes para os diversos tecidos, regulao trmica, regulao hdrica,
manuteno do equilbrio cido-bsico e inico.
A frao plasmtica corresponde a, aproximadamente, 55% do volume sanguneo, enquanto que os 45%
restantes correspondem frao celular.
A gua constitui a maior parte (92%) do volume do plasma, enquanto que as protenas e outros
componentes orgnicos e inorgnicos, respondem pelos 8% restantes. 2
A poro celular composta por glbulos vermelhos (eritrcitos), por glbulos brancos (leuccitos) e
pelas plaquetas, sendo que os o eritrcitos so maioria em quantidade e em volume.
A proporo entre o volume de sangue e a massa corprea de um indivduo de, aproximadamente,
62,4ml/kg para homens e de 61,9ml/kg para mulheres. Com base nesses dados pode-se estipular que um homem
adulto com massa corprea de 75Kg e uma mulher adulta com 60kg, apresentam um volume total de sangue
aproximado de 4.680ml e 3.714ml, respectivamente.2
Dentre as principais protenas encontradas no plasma sanguneo, destacam-se a albumina, as
imunoglobulinas, o fibrinognio, as protenas do sistema complemento, as lipoprotenas e os fatores da
coagulao do sangue.

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Em condies normais, o plasma tem viscosidade 1,2 vezes maior que a da gua. A temperatura
influencia na viscosidade de um lquido, onde a cada grau centgrado que diminui a viscosidade aumenta cerca de
2%.
O sangue total apresenta uma viscosidade que varia entre 2,0 a 15,0 vezes a da gua. A quantidade de
clulas suspensas no plasma, bem como a quantidade de protenas ou de outras substncias que o compe
influenciam diretamente nesta variao de viscosidade.
As plaquetas sanguneas ou trombcitos so fragmentos celulares anucleados que so formados na
medula ssea. A sua principal funo a formao de cogulos, participando do processo
de coagulao sangunea.
Os glbulos vermelhos ou eritrcitos so as clulas em maior quantidade no sangue total, sendo esta
frao de grande interesse nas prticas forenses, devido suas propriedades especficas.
Os eritrcitos so discos bicncavos que medem cerca de 7 e apresentam excesso de membrana
citoplasmtica, transportando em seu interior uma macromolcula denominada de hemoglobina. Sua principal
funo de prover, transportar e liberar o oxignio a todos os tecidos do organismo.
A hemoglobina, principal contedo do eritrcito, uma macromolcula composta por uma frao
proteica, composta por quatro cadeias de protenas (duas alfa e duas beta), conhecida como globina, e por uma
poro que contm o on ferro, denominada de grupo heme (um grupo por cadeia, totalizando quatro grupos por
molcula de hemoglobina).

Figura: Representao esquemtica da hemoglobina.

Figura: Grupo heme.


Os leuccitos, ou glbulos brancos, fazem parte do sistema imunolgico do organismo. Tem como
principal funo o combate e a eliminao de microrganismos e estruturas qumicas estranhas ao organismo por
meio de sua captura ou da produo de anticorpos, sejam eles patognicos ou no.
Os anticorpos so glicoprotenas solveis, tambm chamadas de imunoglobulinas, e podem variar
substancialmente numa gama de stios de ligao a antgenos possveis. Constitudas por duas cadeias pesadas (H)
e duas cadeias leves (L). Os anticorpos marcam antgenos estranhos, neutralizam toxinas e ativam efetores
imunolgicos: complemento, mastcitos, etc., tambm so utilizados na clnica e na pesquisa cientfica como
instrumentos de diagnstico.
O antgeno toda estrutura capaz de reagir com clulas do sistema imune ou de interagir com um
anticorpo sintetizado contra si prprio. O antgeno pode ser capaz de ativar o sistema imune e induzir a produo
de anticorpos, ou seja, apresentar imunogenicidade.

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Os anticorpos se ligam aos antgenos atravs de uma ligao reversvel formando um complexo
antgeno-anticorpo. Esta interao feita atravs de foras no-covalentes, tais como pontes de hidrognio,
atrao eletrosttica e foras de Van der Waals, havendo um equilbrio dinmico entre o antgeno dissociado, o
anticorpo e o complexo antgeno-anticorpo. 3
3. FUNDAMENTOS DA BIOLOGIA MOLECULAR FORENSE
O avano das tcnicas de biologia molecular na rea de gentica humana propiciaram conhecimentos
suficientes para viabilizar a determinao do perfil gentico de cada individuo, traando assim uma espcie de
impresso digital molecular individual.
Os processos utilizados para a identificao humana tm como objetivo primordial descobrir
caractersticas peculiares de cada indivduo, assim os diferenciando dos demais. Essa identificao pode ser til
tanto para fins cveis quanto para fins forenses.
Segundo Bonaccorso1 a anlise de materiais biolgicos para a identificao de um ser humano, em
especial nos casos forenses, teve incio em meados do sculo XX, com a utilizao dos grupos sanguneos ABO
para vincular suspeitos evidncias encontradas em locais de crime ou para identificar pessoas. Outras duas fases
subsequentes da evoluo das anlises de materiais biolgicos para fins forenses foram: utilizao de um
complexo de histocompatilidade existente nas superfcies dos leuccitos, mais conhecidos como HLA (Human
Leukocyte Antigen), os quais apresentam um grande poder discriminatrio da individualidade gentica, em 1954,
e a descoberta de regies de microssatlites existentes no material gentico humano, criando uma espcie de
impresses digitais de DNA (cido desoxirribunuclico), atravs de um artigo publicado na revista Nature, em
1985, por JEFFREYS et al.
A identificao humana atravs da anlise do DNA nuclear tem-se mostrado uma das tcnicas mais
inovadoras e precisas da atualidade, com aplicabilidade nas mais diversas reas. Na rea cvel, comumente
utilizada para estabelecer vnculos de paternidade ou de parentesco. J na rea criminal pode ser utilizada de
vrias maneiras, como para estabelecer uma conexo entre os suspeitos e a cenas de crimes, comprovar ou
excluir a autoria de um ato delituoso e identificar restos humanos, dentre outros.
O DNA nuclear humano constitudo pela combinao de quatro tipos diferentes de nucleotdeos. Cada
nucleotdeo composto por trs componentes: um grupo fosfato, um acar e uma base nitrogenada, as quais
podem ser pricas (adenina e guanina) ou pirimdicas (citosina e timina).
O DNA formado por duas cadeias de polinucleotdeos que formam entre si uma dupla hlice, com as
bases nitrogenadas na poro interna da cadeia e o esqueleto de acar-fosfato na poro externa da molcula,
ligadas transversalmente atravs de pontes de hidrognio. Sua estrutura contm cerca de 3x109 pares de bases
de nucleotdeos, sendo encontrado no interior do ncleo celular. 2

Figura: Estrutura do DNA.

POLIMORFISMO DE CADEIAS DE DNA


Cada ser humano apresenta caractersticas fsicas e fenotpicas individuais, sendo este o princpio da
identificao atravs do DNA. Porm, muitas regies da molcula de DNA so comuns a todos os indivduos,
como por exemplo, as que so responsveis pela produo de enzimas e outras protenas comuns aos seres da
espcie humana.

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O DNA apresenta algumas regies polimrficas que so consideradas s impresses digitais


moleculares dos indivduos. Os polimorfismos existentes no DNA humano podem ser divididos em polimorfismos
de comprimento (STR e VNTR) e polimorfismos de sequncia (mutaes pontuais na sequencia de nucleotdeos,
atravs de inseres, adies ou delees).
Os polimorfismos de comprimento incluem regies especficas do DNA onde ocorre o aparecimento de
sequncias repetitivas de nucleotdeos. Estas regies podem ser chamadas de microssatlites (STR - short
tandem repeats ou repeties curtas in tandem) e de minissatlites (VNTR - variable number of tandem repeats
ou nmero varivel de repeties in tandem), dependendo da quantidade de bases que se repetem.
A diversidade nestas regies est no nmero de repeties de uma dada sequncia de bases, que nos
STRs pode ser de 1 a 4 pares de bases e nos VNTRs de 10 a 100 pares de bases. Sendo assim, devido
quantidade de repeties presentes, cada indivduo ter um tamanho diferente para a regio do DNA que contm
um dado STR ou VNTR. Com isso, o alelo vai representar cada possibilidade de tamanho (ou de nmero de
repeties) que pode ser encontrada.
Um dos marcadores mais utilizados hoje em dia o STR (Short Tandem Repeat). Os STRs
(microssatlites) so regies repetitivas do DNA que so obtidas por meio da tcnica de reao em cadeia de
polimerase, ou PCR (Polymerase Chain Reaction), sendo possvel por meio dessa tcnica realizar a tipagem do
DNA com quantidades mnimas de amostras, tais como, em fios de cabelo, manchas de sangue, entre outras.
DNA MITOCONDRIAL
As clulas apresentam tambm molculas independentes de DNA extranuclear, com tamanho
consideravelmente inferior ao DNA nuclear, sendo encontrados no interior de organelas citoplasmticas
denominadas de mitocndrias. Este tipo de DNA denominado DNA mitocondrial (DNAmt).
Em situaes onde a anlise de DNA nuclear de amostras biolgicas no pode ser feita, seja por motivo
de degradao da molcula de DNA ou por motivo de sua real ausncia no material disponvel, ainda existem
outras metodologias em que a anlise do material gentico do indivduo pode ser feita com eficcia, como o
caso da anlise do DNA mitocondrial (DNAmt).
Uma clula eucaritica contm entre 250 e 1.000 mitocndrias, quantidade essa que varia de acordo
com a espcie, tipo e funo celular. Cada mitocndria contm entre 2 a 10 molculas de DNA, perfazendo um
total aproximado de 500 a 10.000 molculas de DNA mitocondrial por clula.
O genoma mitocondrial humano foi completamente sequenciado em 1981, por Anderson e
colaboradores, e reavaliado em 1999 por Andrews e colaboradores, sofrendo algumas modificaes e recebendo
a denominao de CRS (Cambridge Reference Sequence). A molcula de DNAmt composta por 16.569
nucleotdeos e apresenta-se como uma dupla fita circular, anti-paralelas e complementares. formada por uma
fita pesada (Higth H), a qual possui maior quantidade de purinas (Adenina e Guanina) em sua composio, e
uma fita leve (Low L) que apresenta maior quantidade de pirimidinas (Tiamina e Citosina). Contm 37 (trinta e
sete) genes, dos quais: 13 (treze) so genes que codificam protenas envolvidas na fosforilao oxidativa; 22 (vinte
e dois) so genes que codificam RNAs transportadores e 02 (dois) codificam RNAs ribossomais (Fig. 3). Todos eles
encontram-se envolvidos na produo de adenosina trifosfato (ATP), uma molcula fundamental para o
metabolismo energtico.
Diferente do DNA nuclear, que tem origem paterna e materna, o DNA mitocondrial de origem
exclusivamente materna, sendo haplide e no ocorrendo a recombinao entre os genomas mitocondriais
provenientes dos progenitores. Devido a falta de histonas e de um sistema eficiente de reparo, a taxa de mutao
do DNAmt cerca de dez vezes superior ao DNA nuclear.
Enquanto que o DNA nuclear apresenta um perfil de identidade nico a cada indivduo, o DNA
mitocondrial comum a todos os indivduos parentes de linhagem materna, sendo tambm importantes em
estudos de linhagens familiares.
A prtica forense baseia-se na utilizao de tcnicas cientficas aplicadas a busca de evidncias as quais
esto atreladas a um processo criminal.
Algumas caractersticas peculiares ao DNAmt o tornam um marcador gentico de grande interesse na
rea forense.
Sua estrutura circular e pequena, composta apenas 16.569 pb, bem como a sua localizao no interior
das mitocndrias, tornam a molcula mais resistente degradao por ao fsica, qumica e at biolgica.

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Sua quantidade disponvel tambm um ponto importante para as anlises, visto que o DNAmt
apresenta uma grande quantidade de molculas disponveis para servir de molde de amplificao por PCR,
tornando maior a probabilidade da obteno de sequncias nucleotdicas em amostras escassas.
Em grandes desastres como incndios, exploses, queda de avies e outros, quando mais difcil
identificar os corpos, analisa-se o DNAmt e compara-se com sequncias obtidas de possveis irmos ou
ascendentes maternos.
Em casos de identificao de restos humanos, o DNAmt pode ser til quando familiares por via materna
podem doar uma amostra de referncia, para comparar diretamente o DNAmt da amostra questionada
(BUDOWLE & BROWN, 2001). Esta anlise torna-se possvel devido o DNAmt ser monoclonal de origem materna,
onde todos os familiares de linhagem materna herdam o mesmo tipo de DNAmt, excetuando-se em casos de
mutaes (trocas, delees ou inseres) que podem ocorrer peculiarmente em alguns indivduos.
Devido a esta caracterstica tambm pode o DNAmt ser utilizado para um teste de comprovao de
maternidade quando no se tem o pai para que seja procedida a comparao dos STRs.
A utilizao da tcnica de anlise de DNAmt para fins forenses reservada para tecidos escassos e
antigos, onde no haja condies da extrao do DNA nuclear, como o caso de ossos, cabelos e dentes. 7
O fato da tcnica da anlise do DNAmt ser dispendiosa, exigir tecnologia qualificada e ser pouco
informativa, sua utilizao no usual nos laboratrios forenses.
Uma das principais limitaes das anlises forenses de DNA mitocondrial o restrito poder de
discriminao do indivduo, devido ocorrncia de hapltipos comuns na populao. Este fato foi demonstrado
em pesquisas realizadas com DNAmt de norte-americanos caucasianos, onde foi detectado a incidncia de perfis
comuns na populao estudada.
CROMOSSOMO Y
Embora o estudo do cromossomo Y no possibilite a identificao individual, ele pode oferecer
informaes valiosas sobre a origem parental masculina, visto que ele transmitido exclusivamente do pai para
os descentes do sexo masculino.
A anlise de algumas regies existentes no cromossomo Y tem sido utilizada para elucidar casos de
estupro onde se tem mistura de material gentico e para realizar testes de paternidade em casos onde o material
de referncia da me no est disponvel.
O cromossomo Y apresenta trs regies distintas, onde duas pequenas regies so homlogas ao
cromossomo X e uma regio que exclusiva do cromossomo Y, no havendo possibilidade de recombinao
desta regio com o cromossomo X, sendo esta passada diretamente de pai para filhos do sexo masculino sem
sofrer qualquer tipo de alterao.
Raros so os casos de mutaes nesta regio do cromossomo Y, porm podem ocorrer. Porm pode-se
considerar que os indivduos masculinos da mesma famlia apresentam o mesmo padro de DNA nesta regio,
diferindo dos padres apresentados por indivduos masculinos de famlias no geneticamente relacionadas.
4. ANLISES BIOLGICAS FORENSES
Dos tipos de materiais biolgicos mais comumente analisados nos laboratrios de Biologia Forense, dois
tipos de fludos humanos merecem uma ateno em especial: o sangue e o smen humano.
SANGUE
O sangue um dos vestgios encontrados com maior frequncia em locais de crimes violentos.
Para que este vestgio seja vinculado a um fato delituoso faz necessrio antes de tudo, confirmar se
realmente se trata de sangue, em caso positivo, se esse sangue humano ou no e, finalmente, de qual forma
este sangue est relacionado ao crime.
Para a identificao preliminar de sangue so utilizados, no meio forense, reagentes que possuem uma
boa sensibilidade para essa finalidade e que, por sua vez, no possam influenciar no resultado de exames
posteriores. Estes testes so conhecidos como testes presuntivos para deteco de sangue.

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TESTES PRESUNTIVOS OU DE ORIENTAO PARA DETECO DE SANGUE


Os testes presuntivos para deteco de sangue tem como princpio uma reao de oxidao de uma
substncia (indicador) por um agente oxidante, catalisada na presena de sangue. Segundo SAWAYA e ROLIM1, o
grupo heme da hemoglobina atua sobre o perxido de hidrognio adicionado, liberando o oxignio necessrio
para oxidar o indicador utilizado, resultando em um composto colorido e na emisso de luminescncia.
Dentre os testes presuntivos para deteco de sangue podemos citar o reagente de Kastle-Meyer
(fenolftalena), o teste de Adler Ascarelli (benzidina) e o mais conhecido nas prticas forense, o Luminol.
FENOLFTALENA (REAGENTE DE KASTLE MEYER)
O reagente de Kastle-Meyer constitudo por uma mistura de fenolftalena, de hidrxido de sdio, de
p de zinco metlico e de gua destilada.
O oxignio liberado pela reao entre a hemoglobina presente nas hemcias e o perxido de hidrognio
promover a formao de uma colorao rosada da fenolftalena, evidenciando a presena de sangue na amostra
analisada.
Este mtodo sensvel, porm no muito especfico, pois a presena de sais de ferro, de cobre, suco
gstrico ou qualquer outra substncia capaz de decompor a molcula de H2O2 em gua e oxignio podem
ocasionar resultados falso-positivos.
BENZIDINA (TESTE DE ADLER-ASCARELLI)
O reagente de benzidina uma mistura de benzidina cristalizada, de cido actico glacial e de perxido
de hidrognio.
A suposta mancha de sangue macerada em gua destilada ou em cido actico glacial. Duas gotas do
macerado so colocadas em um tubo de ensaio e misturadas a duas gotas do reagente recentemente preparado.
O oxignio formado durante a reao ir oxidar a benzidina, sendo esta reao perceptvel, sob o ponto
de vista experimental, com o aparecimento da colorao azul da soluo.
Pesquisas indicam que manchas de sangue previamente analisadas por benzidina tm os resultados de
testes posteriores prejudicados, pois a benzidina pode degradar o DNA das manchas de sangue e inibir testes
imunolgicos.
LUMINOL
O luminol um composto que, sob determinadas condies, pode fazer parte de uma reao
quimiluminescente, ou seja, emitir luz atravs de uma reao qumica. utilizado para deteco de possveis
manchas latentes de sangue, ou seja, manchas de sangue que no podem ser visualizadas a olho nu.

Figura: Molcula do Luminol.


Para ser utilizado, o luminol, que se apresenta em forma de p, misturado basicamente gua e a
perxido de hidrognio, porm para que a reao ocorra se faz necessria a presena de um catalisador redox. No
caso especfico o on ferro, contido no grupo heme da hemoglobina, atua como esse catalizador, gerando a
emisso de uma fluorescncia visvel ao olho humano.
Trata-se de um teste com alta sensibilidade, mesmo em locais com azulejos, pisos cermicos ou de
madeira, os quais tenham sido lavados. J a sua, especificidade muito baixa, pois gera resultados falso-positivos
com diversas substncias, como por exemplo: metais (cobre, ferro e outros), produtos base de cloro
(hipoclorito) e outros oxidantes.
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A interferncia do hipoclorito merece um destaque, pois a luminescncia gerada pelo hipoclorito


presente em saneantes emitida em comprimento de onda diferente da luminescncia emitida pela
hemoglobina, com caracterstica e tempo de durao desigual da luminescncia gerada por manchas de sangue.
Outro ponto a favor do luminol que a reao qumica produzida por ele no afeta a cadeia de DNA,
permitindo assim que os testes posteriores com intuito de obter perfis genticos no sejam prejudicados,
viabilizando o reconhecimento dos criminosos ou das vtimas.
TESTES DE CERTEZA OU CONFIRMATRIOS PARA DETECO DE SANGUE
Apesar dos testes presuntivo utilizados com a finalidade de detectar a possvel presena de sangue em
amostras apresentarem uma boa sensibilidade, eles so pouco especficos e bastante suscetveis a ao de vrios
interferentes que podem ocasionar o aparecimento de resultados falso-positivos.
Aps a utilizao destes testes e com a obteno de resultados positivos, devem ser procedidos exames
adicionais que tenham uma maior especificidade para confirmar se a amostra analisada realmente contm
sangue.
Dentre as tcnicas para confirmao da presena de elementos prprios do sangue, existem tcnicas
histolgicas, como a microscopia, que busca a visualizao de hemcias em amostras, de forma direta ou atravs
da utilizao de corantes especficos.
TESTES IMUNOCROMATOGRFICOS
Atualmente o teste mais utilizado na prtica forense para deteco de sangue baseia-se em uma reao
antgeno-anticorpo, onde so utilizados anticorpos hemoglobina anti-humano para se ligarem a hemoglobina
humana presente ou no na amostra a ser analisada.
Trata-se de um teste imunocromatogrfico qualitativo, onde anticorpos hemoglobina anti-humanos so
pr-impregnados em uma determinada regio de uma membrana/tira, a qual apresenta tambm em uma de suas
extremidades uma pequena almofada contendo os demais reagentes necessrio para que ocorra a reao.
A soluo proveniente da macerao da amostra move-se cromatograficamente atravs da tira,
ocasionando a formao do complexo de anticorpos com a hemoglobina humana, que visualizado atravs do
aparecimento de uma linha colorida.
Em relao a custo/beneficio o teste imunocromatogrfico uma boa escolha, pois um teste de fcil
execuo, de fcil interpretao, capaz de detectar a presena de hemoglobina humana em solues que tenham
concentraes relativamente baixas (em torno de 40ng/ml, dependendo do fabricante do teste) e no sofre
reao cruzada com hemoglobina de outras espcies, nos garantindo se tratar que a amostra de sangue analisada
ou no de origem humana.
Por se tratar de um teste baseado em reaes entre antgenos e anticorpos, amostras que contenha
excesso de antgenos devem ser diludas para evitar o efeito hook, podendo aparecer resultados falso negativos.
TIPAGEM SANGUNEA COM FINALIDADE FORENSE
Uma caracterstica importante dos eritrcitos que eles possuem em suas membranas vrias molculas
com propriedades antignicas, ou seja, capazes de induzirem a produo de anticorpos.
Essas molculas foram descritas pela primeira vez em 1901, por Landsteiner, que identificou os
antgenos A e B do sistema ABO, usando uma tcnica de aglutinao de hemcias, quando estas eram colocadas
em contato com o plasma de indivduos diferentes. Em 1940, foi descoberto por Landstein e Wiener o fator
sanguneo Rh, atravs de experimentos com hemcias de macacos Rhesus inoculados em coelhos. Os indivduos
portadores do antgeno D so considerados Rh-positivos, enquanto que os Rh-negativos no apresentam o
antgeno D.

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Antgenos nas hemcias


(tipagem direta)
A
B
AeB
-

Tipo Sanguneo
A
B
AB
O

Anticorpos no plasma ou soro


(tipagem reversa)
Anti B
Anti A
Anti A e Anti B

A determinao do grupo sanguneo tem sido utilizada na prtica forense em casos de excluso de
paternidade que estejam vinculados a circunstncias criminais.
Por ser um teste simples e de preo acessvel considerado um teste de triagem, porm este teste
serve somente para excluso de paternidade, ficando a incluso de paternidade vinculada a um teste mais
especfico, com o caso do exame de DNA.
DETERMINAO GENOTPICA DO SISTEMA ABO
A herana gentica dos grupos sanguneos determinada por uma srie de alelos mltiplos, sendo os
alelos IA e IB co-dominantes e o gene i recessivo.
Ao relembrarmos alguns conceitos bsicos de gentica, inferimos que genes alelos so aqueles que se
emparelham no mesmo locus, em cromossomos homlogos, ou seja, cromossomos iguais entre si, que juntos
formam um par. O par de genes alelos responsvel por cada caractere transmitido. Cada um dos pares contm
um gene de origem materna e outro de origem paterna. Assim, gentipo o conjunto de genes herdados dos
progenitores e fentipo a caracterstica individual determinada pelo gentipo.
A tabela abaixo mostra as relaes genotpicas e fenotpicas, referentes ao sistema ABO.
Fentipos
Grupo A
Grupo B
Grupo AB
Grupo O

Gentipos
IA IA ; IA i
IB IB ; IB i
IA IB
ii

INVESTIGAO DE PATERNIDADE ATRAVS DE TIPAGEM SANGUNEA


A partir da determinao dos grupos sanguneos da me, do filho e do suposto pai, possvel excluir a
paternidade, porm no possvel a incluso da mesma.
Como exemplo prtico, podemos analisar a seguinte situao: a me apresenta o grupo sanguneo A,
o filho o grupo B e o suposto pai o grupo O.

Me
Suposto Pai
Filho
Me x Suposto Pai

Fentipos
Grupo A
Grupo O
Grupo B
Grupos A ou O

Gentipos Possveis
IA IA ou IA i
ii
B B
I I ou IB i
IA IA ; IA i ou ii

Neste caso a paternidade est excluda, pois os grupos A (da me) e O (do pai), apresentam,
respectivamente, os seguintes gentipos IA IA ou IA i (grupo A) e ii (grupo O), sendo que a correlao
genotpica dos dois s pode gerar descendentes dos grupos A e O, e nunca do grupo B.
J em outro caso, onde a me apresenta o grupo sanguneo A, o filho o grupo O e o suposto pai o
grupo B, no se pode excluir e nem incluir a paternidade, tendo por base a correlao entre os gentipos
apresentados pelos envolvidos.

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Me
Suposto Pai
Filho
Me x Suposto
Pai

Fentipos
Grupo A
Grupo B
Grupo O

Gentipos Possveis
IA IA ou IA i
IB IB ou IB i
ii

Grupos A; B; AB ou O

IA IA; IA i; IB IB; IB i; IA IB; ii

Neste caso no se pode excluir a paternidade, pois os grupos A (da me) e B (do pai), apresentam,
respectivamente, os seguintes gentipos IA IA ou IA i (grupo A) e IB IB ou IB i (grupo B), sendo que a
correlao genotpica dos dois pode gerar descendentes dos grupos A, B, AB ou O.
SMEN HUMANO
O smen humano outro tipo de fludo biolgico comumente analisado nos laboratrios forenses. Sua
presena est diretamente vinculada ocorrncia de crimes de natureza sexual, podendo as amostras ser
coletadas diretamente das vtimas, ou analisadas a partir de manchas deixadas em suportes diversos, como em
vestes, peas ntimas, toalhas e assento de veculos e at em pedaos de papel.
O Cdigo Penal Brasileiro (CPB) de 1940 definia os crimes de estupro e atentado violento ao pudor na
redao dos artigos 213 e 214 (j revogados) da seguinte forma:
Art. 213. Constranger mulher, a conjuno carnal mediante violncia ou grave ameaa.
Art. 214. Constranger algum, mediante violncia ou grave ameaa, a praticar ou permitir que com ele
se pratique ato libidinoso diverso da conjuno carnal.
Em 07 de agosto de 2009, a Lei n. 12.015/2009 ampliou o conceito de estupro descrito anteriormente
no CPB, unificando esses dois artigos da seguinte forma:
Art. 213. Constranger algum, mediante violncia ou grave ameaa, a ter conjuno carnal ou a praticar
ou permitir que com ele se pratique outro ato libidinoso.
De acordo com o jurista Cezar Roberto Bitencourt: Estupro, na linguagem do Cdigo Penal de 1940, era
o constrangimento de mulher a conjuno carnal, mediante violncia ou grave ameaa..., as mudanas
contempladas pela Lei n. 12.015/2009 reuniu os antigos crimes de estupro (art. 213) e atentado violento ao
pudor (art. 214), para unific-los em um conceito mais abrangente de estupro..., a partir desse diploma legal,
passamos a ter duas espcies distintas de estupro, quais sejam: a) constranger algum conjuno carnal; b)
constranger prtica de atos libidinosos diversos.
Assim, anteriormente a esta lei, o crime de estupro era caracterizado pela prtica da conjuno carnal,
que ocorre atravs da introduo do genital masculino na cavidade vaginal, desta forma somente pessoas do sexo
feminino eram passveis de serem estupradas, visto que o prprio art. 213 do Cdigo Penal, j revogado, era claro
ao citar: Constranger a mulher conjuno carnal, mediante violncia ou grave ameaa....
Com a nova redao do art. 213, o estupro passa a ser definido como: Constranger algum... a ter
conjuno carnal ou a praticar ou permitir que com ele se pratique outro ato libidinoso..., assim o crime de
estupro no fica mais restrito a pessoas do sexo feminino, podendo atos libidinosos contra pessoas do sexo
masculino tambm serem caracterizados como estupro.
Conforme cita o jurista Eugnio Pacelli de Oliveira: ...a materialidade do delito e/ou a extenso de suas
consequncias devero ser objeto de prova pericial, a ser realizada diretamente sobre o objeto material do crime,
o corpo de delito, ou, no mais podendo s-lo, pelo desaparecimento inevitvel do vestgio, de modo indireto.
Nos casos de crimes sexuais o exame direto procedido pelo mdico legista, que atua diretamente
sobre o corpo de delito, coletando amostras para serem posteriormente analisadas em laboratrio de forma
indireta.

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Os materiais coletados para anlise so, geralmente, amostras de contedo vaginal, anal e/ou oral,
sendo a coleta procedida com o auxlio de swabs estreis. As amostras coletadas so enviadas, com a maior
brevidade possvel, ao laboratrio de biologia forense, onde sero submetidas aos mtodos analticos que tem
por objetivo detectar a presena de esperma (smen) humano nas mesmas.
O smen ou esperma humano um lquido orgnico, de aspecto esbranquiado e viscoso, composto por
espermatozoides contidos no plasma seminal. O plasma seminal formado por diversas substncias orgnicas e
inorgnicas provenientes da vescula seminal, da prstata e das glndulas bulbo uretrais. Sua principal funo
de propiciar um ambiente seguro e nutritivo para os espermatozoides durante seu trajeto at o momento da
fecundao.
As clulas espermticas humanas so gametas masculinos produzidos no interior dos testculos e
liberados em grande quantidade durante a ejaculao.

Figura: Foto esquemtica de um espermatozoide.


A pesquisa de esperma humano em amostras forenses constituda por duas fases distintas: A pesquisa
de espermatozoides (microscopia) e a deteco de componentes especficos do esperma (protenas especficas).
A constatao da presena de clulas reprodutivas masculinas (espermatozoides) nas amostras
recebidas para anlise feita com o auxlio de microscpios ticos. Esta anlise pode ser feita a fresco, sem a
utilizao de corantes, ou ainda com o auxlio de corantes que facilitam a visualizao dos espermatozoides.
Na analise microscpica direta, ou a fresco, o material suspenso em soluo fisiolgica ou em gua
destilada e lida no microscpio atravs de um aumento de 40x, no havendo diferena entre a colorao dos
espermatozoides e das demais estruturas celulares. Este mtodo prtico e rpido, sendo perfeitamente possvel
a visualizao das clulas espermticas, quando presentes.
Uma das coloraes mais utilizadas em laboratrios forenses para a anlise microscpica a colorao
de Christmas Tree, onde o material submetido fixao em lmina e corado com reagentes especficos, onde a
cabea e outros nucleoplasmas do espermatozoide se colorem em vermelho com variaes de rosa, enquanto
que sua calda e o material citoplasmtico das clulas se colorem em verde.
Para complementar a anlise microscpica, a amostra submetida a testes na tentativa de se constatar
a presena de algumas protenas que constituem o smen masculino. Estes testes so de grande importncia em
casos onde, por algum motivo, no so visualizados espermatozoides na analise microscpica, seja pelo fato de
no ter havido ejaculao no interior das cavidades, ou em casos onde a quantidade de espermatozoides nfima
ou inexistente, ou seja, em indivduos oligoosprmicos ou azoosprmicos.
A Fosfatase cida Prosttica (FAP) uma enzima produzida pela prstata e que compe o plasma
seminal. A FAP foi utilizada na tentativa de deteco de smen humano em amostras forenses, pois a mesma
encontra-se em nveis elevados no esperma. Porm, foi constatado que interferentes presentes em outros
materiais biolgicos e, at mesmo, em alimentos e outros componentes orgnicos, indicaram que a atividade de
FAP no exclusiva de material biolgico, existindo assim a possibilidade de se obter resultados falsos-positivos
durante as anlises para deteco da presena de esperma humano.5
O Antgeno Prosttico Especfico (PSA) uma glicoprotena produzida na prstata e secretada em nveis
elevados no smen masculino. Sua funo biolgica no plasma seminal de efetuar a clivagem de protenas
responsveis pela gelificao do smen, o deixando mais fludo e assim aumentando a motilidade dos
espermatozoides.

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Conforme cita SAWAYA e ROLIM1: A presena de PSA no esperma em concentraes milhes de vezes
maiores que no soro de homens a caracterizou como um marcador valioso, j testado e validado pela
comunidade forense... os nveis de PSA existentes nos fludos extraprostticos no interferem na investigao de
esperma em percias criminais e que os cientistas forenses podem, desse modo, determinar com confiana a
presena de esperma em manchas e swabs, atravs de testes de PSA... .
O exame de deteco do PSA pode ser procedido atravs de diversas metodologias de imunensaios,
como o ELISA, a quimioluminescncia e a imunocromatografia.
Os testes de ELISA e de quimioluminescncia so imunoensaios muito sensveis e capazes de quantificar
o PSA encontrado nas amostras analisadas, porm so testes relativamente caros e demorados.
O teste imunocromatogrfico qualitativo o mais utilizado nas prticas forenses, visto que um teste
de fcil execuo, com obteno rpida de resultados, de fcil interpretao e capaz de detectar a presena de
PSA em quantidades superiores a 4ng/ml (dependendo do fabricante do teste), apresentando assim uma boa
sensibilidade.
Este teste baseia-se em uma reao antgeno-anticorpo e tem uma membrana de nitrocelulose como
suporte, onde ao se adicionar a amostra que contm PSA ser formado um complexo do PSA com o anticorpo
anti-PSA, o qual migrar cromatograficamente pela membrana e se ligar ento a anticorpos pr-impregnados na
regio teste, dando origem assim a uma linha colorida visvel nos resultados positivos. 11
5. CADEIA DE CUSTDIA E PRESERVAO DA AMOSTRA BIOLGICA
A percia em local de crime um processo que visa o registro da cena conforme encontrada pela
primeira vez. O papel da percia forense comea no local de crime com o levantamento do local, o
reconhecimento e a coleta de elementos materiais relevantes ao caso, que sero encaminhados para os exames
periciais laboratoriais, com intuito de obteno de provas materiais. 1
Conforme o jurista Eugnio Pacelli de Oliveira2: A prova pericial, antes de qualquer outra considerao
uma prova tcnica, na medida em que pretende certificar a existncia de fatos cuja certeza, somente seria
possvel a partir de conhecimentos especficos... A prova pericial se faz por meio da elaborao de laudo
tcnico....
INDCIO, VESTGIO E EVIDNCIA
No meio forense, trs conceitos bsicos so importantes para o entendimento das amostras em seu
contexto legal, so eles: o vestgio, a evidncia e o indcio.
Segundo Alberi Espindula, estes conceitos so definidos da seguinte forma:
Vestgio todo objeto ou material bruto constatado e/ou recolhido em um local de crime para anlise
posterior, ou seja, tudo o que encontramos no local do crime que, depois de estudado e interpretado pelos
peritos, possa vir a se transformar individualmente ou associado a outros - em prova.
Evidncia o vestgio depois de feitas as devidas anlises, onde se constata tcnica e cientificamente a
sua relao com o crime.
J Indcio uma expresso, utilizada no meio jurdico, que significa cada uma das informaes (periciais
ou no) relacionadas com o crime. Tecnicamente os termos vestgio e evidncia so usados no mbito pericial, no
entanto, tais informaes recebem a denominao de indcios, quando tratados na fase processual.
O caput do artigo 239 do Cdigo de Processo Penal Brasileiro define indcio como sendo: considera-se
indcio a circunstncia conhecida e provada, que, tendo relao com o fato, autorize, por induo, concluir-se a
existncia de outra ou outras circunstncias. Segundo esta definio legal tanto elementos materiais, como os
provenientes de procedimentos periciais, como outros de natureza subjetiva podem ser considerados indcios.

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CADEIA DE CUSTDIA
Na prtica forense todos os materiais coletados para anlise, sejam eles oriundos de um local de crime
ou coletados diretamente de vtimas ou suspeitos, devem ser devidamente identificados e catalogados, com a
finalidade de manter a sua integridade e seu valor legal como prova material em um processo criminal. Para isto
faz-se necessrio que todo seu trajeto, desde sua coleta at a sua apresentao em um tribunal, seja
minuciosamente registrada, garantindo assim a sua idoneidade e a rastreabilidade de todas as etapas de anlises
e de trajeto que a mesma sofreu, sendo esta metodologia conhecida no meio criminal como cadeia de custdia.
Segundo Reis, A.B.4, a cadeia de custdia pode ser definida como uma cadeia de procedimentos
sistemticos com o propsito de dar maior garantia, segurana e confiabilidade ao material recolhido em um local
de crime, ou seja, refere-se sequncia histrica de todos os indivduos que manipularam a evidncia de um
crime visando resguard-la, constituindo-se em um mecanismo de preservao das evidncias desde o seu
acondicionamento inicial, transporte e encaminhamento para exame complementar ou definitivo.
MARINHO, G.V. define cadeia de custdia como: um conjunto de procedimentos tcnicos e cientficos
que iro oferecer conhecimento aos operadores do direito se aquela prova que est no tribunal e que representa
a materialidade de um fato pretrito foi tratada com o necessrio rigor tcnico e cientfico desde a sua origem. o
meio de garantir a autenticidade e a integridade das amostras desde o isolamento do local do fato, da coleta, do
encaminhamento ao laboratrio, armazenamento no interior do laboratrio, anlise e devoluo.
Sobre a responsabilidade da manuteno da cadeia de custdia na rea forense continuamos citando
MARINHO, G.V.5, O Estado tambm no tem apenas o dever de preservar a integridade e idoneidade da prova,
mas, tambm de mostrar a histria da prova, ou seja, a sua origem, sua natureza, como foi coletada, hora e data
de cada ato, como foi acondicionada, transportada, armazenada e analisada com registro de todos os atos
integrante da cadeia de custdia. Desse modo, podemos dizer que a prova fora produzida de forma transparente e
com qualidade, permitindo assegurar a memria de todas as fases. Os destinos da vtima e do ru dependem do
resultado do trabalho realizado pelo perito oficial no que tange a materialidade de um fato pretrito que deixa
vestgios, por essa razo, qualquer desconfiana na qualidade da prova poder ser analisada aps o rastreamento
dos procedimentos de cadeia de custdia.
Portanto a eficcia e a garantia de todos os procedimentos realizados durante uma anlise pericial
podem ser questionadas legalmente caso no haja o devido cuidado com o minucioso registro de todas as etapas
a que a prova material tenha sido submetida, desde sua coleta at sua guarda aps a devida anlise, podendo ser
o laudo final desconsiderado como prova judicial, prejudicando assim a evidenciao da verdade cientfica to
buscada pelos processos periciais forenses.
6. COLETA, ACONDICIONAMENTO, CONSERVAO E TRANSPORTE DE AMOSTRAS BIOLGICAS
O resultado de uma anlise pericial bem sucedida no depende somente da habilidade do perito de
laboratrio responsvel pelo exame tcnico, da especificidade e/ou sensibilidade dos equipamentos utilizados ou
das metodologias empregadas durante o procedimento pericial.
A coleta, o acondicionamento e o transporte dos materiais a serem analisados so etapas determinantes
para o sucesso de uma anlise pericial, visto que, caso mal executadas comprometero todas as etapas que sero
realizadas posteriormente.
Amostras de origem biolgicas como sangue, urina, esperma, cabelos e pele (dentre outras) so
bastante suscetveis degradao pela ao qumica, fsica e at mesma biolgica, caso haja alguma falha em uma
destas etapas, principalmente na fase de acondicionamento.
Variaes bruscas de temperatura e/ou exposio prolongada das amostras a temperaturas elevadas so
exemplos de fatores fsicos que podem ocasionar a degradao do material biolgico coletado para anlise, seja
por ao direta (degradao do material gentico, evaporao do material, etc) ou por propiciar um meio
adequado para a proliferao de microrganismos (fungos ou bactrias) que iro consumir as amostras as
inviabilizando para anlises (degradao biolgica).
Vrios documentos nacionais e internacionais foram criados com a inteno de criar normas de
procedimentos para os profissionais forenses atuarem de forma padronizada durante os processos de coleta,
acondicionamento e transporte de amostras biolgicas encontradas em locais de crime.
Dentre eles faremos citaes sobre o manual de Conscientizao sobre o local de crime e as evidncias
materiais em especial para pessoal no-forense.
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Este manual foi redigido pela Seo Cientfica do escritrio das Naes Unidas sobre drogas e crimes, no
ano de 2010, e teve como objetivo principal a conscientizao sobre a importncia das boas prticas no exame
pericial do local de crime, bem como da natureza e relevncia da evidncia material, abrangendo questes que
vo desde o primeiro contato com o local do crime at a entrega das amostras coletadas ao laboratrio forense.
Em relao ao processo de identificao, coleta e preservao de evidncias encontradas em locais de
crime, o manual cita o seguinte texto:
Reconhecimento, coleta e preservao da evidncia material so as partes fundamentais do trabalho no
exame pericial do local de crime. Visa localizar e identificar um nmero mximo de elementos
potencialmente relevantes, e selecionar mtodos apropriados de coleta e de acondicionamento para
preservar a integridade da evidncia material.
Localizar e identificar evidncias materiais em locais de crime, bem como identificar potenciais evidncias
ausentes muito desafiador e muito mais difcil e exigente do que possa parecer queles que no esto
familiarizados com o exame pericial de local de crime. A evidncia material mais importante e relevante
pode no estar bvia ou diretamente visvel a olho nu. A confeco de uma lista completa de passos para o
reconhecimento de evidncias materiais em locais de crime no possvel.
Tipicamente, o reconhecimento de evidncias materiais inicia-se pela observao do local de crime. Com
base em observaes iniciais e levando em considerao o contexto do caso, os cenrios possveis, a
natureza do incidente, bem como as caractersticas das superfcies que podem conter potenciais evidncias
materiais, deve ser implementada uma estratgia de pesquisa flexvel e metdica. Isto inclui a pesquisa a
olho nu e com lentes de aumento, mas tambm a utilizao de vrias fontes portteis de luz (ex., lanternas).
Mtodos de testes preliminares podem ter de ser realizados para detectar elementos materiais, como, por
exemplo, o uso de p para ressaltar impresses papilares no local de crime ou o uso de produtos qumicos
para visualizar traos de sangue.
Uma vez que a evidncia reconhecida, so utilizados mtodos apropriados de coleta (por exemplo, fitas
adesivas, pinas, cotonetes) e de acondicionamento adequado (por exemplo, sacos ou caixas de coleta,
invlucros ou embalagens para objetos cortantes etc.). Cada evidncia material etiquetada e lacrada
seguindo-se requisitos determinados por regras locais. Prioridades na coleta da evidncia material devem
ser requeridas para evitar perdas desnecessrias ou degradao das evidncias. A documentao uma
parte integrante do processo de coleta, incluindo a localizao precisa da evidncia material antes de ser
manipulada e recolhida.
Selecionar o que relevante o desafio das fases de reconhecimento e de coleta, e torna-se mais eficiente
e efetiva quando ocorre no local, onde as potenciais evidncias esto no contexto em que foram produzidas.
No entanto, sob condies difceis, talvez seja prefervel coletar a maior quantidade possvel de evidncias e
selecion-las em uma fase posterior da investigao. Reconhecimento e coleta desses materiais exigem
experincia e extenso treinamento. Tambm requerem uma boa compreenso do que pode ser feito em
vrios tipos de evidncias materiais em um laboratrio forense, bem como as informaes que podem ser
obtidas.
Como parte do processo de coleta, em muitos casos, como naqueles realizados em escombros de incndio,
so necessrias amostras do solo e do subsolo. Em situaes em que as evidncias materiais podem ser de
grandes propores, a coleta por amostragem pode ser realizada, como por exemplo, em grandes
apreenses de drogas. Atividades de amostragem requerem experincia e treinamento.
Finalmente, reconhecido que, em quase todos os casos, tais elementos materiais desaparecem e no so
coletados. O devido cuidado no reconhecimento e na coleta de evidncias de interesse forense contribui
para diminuir esse fator.
J em relao s etapas de transporte, armazenamento e apresentao das amostras ao laboratrio forense,
transcrevemos do manual os textos abaixo:
Esta ltima fase do processo do exame pericial forense do local de crime objetiva selecionar os meios de
transporte e armazenamento apropriados para o tipo de evidncia material de forma a assegurar a
integridade do material enviado ao laboratrio.
Uma vez que a evidncia material coletada, a deciso de realizar exames laboratoriais complementares
tem que ser tomada. Elementos mais provveis de fornecer informaes investigao e/ou aqueles com
maior probabilidade de oferecer bons resultados analticos normalmente so encaminhados ao laboratrio
forense com prioridade. O imediato envolvimento da equipe laboratorial facilita estas decises.
Uma vez resolvido, o transporte para o laboratrio ou para um local de armazenamento intermedirio,
anteriormente anlise dos elementos materiais recolhidos, um passo fundamental. Condies
adequadas, como, por exemplo, um local fresco e seco, munido de sistema de segurana e com controle de
acesso so caractersticas essenciais de condies de transporte e armazenamento. Tambm os custos,
distncia, a durao e eventual incompatibilidade entre algumas evidncias materiais e alguns meios de
transporte so aspectos a serem considerados na escolha da forma de transferncia e armazenagem das
evidncias. A transferncia de alguns tipos de evidncia, por exemplo, drogas e armas de fogo, pode
tambm exigir procedimentos determinados por regulamentaes locais.

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importante documentar os procedimentos de transporte, de armazenamento e de transferncia de


responsabilidades das evidncias materiais para o laboratrio. Um recibo normalmente emitido para todas
as evidncias encaminhadas ao laboratrio.
As evidncias forenses podero ser mantidas sob custdia por muitos anos, por exemplo, at que o caso
seja julgado e todos os recursos processuais esgotados. Nestas situaes, uma poltica de armazenamento
de longo prazo para as evidncias materiais importante e deve ser elaborada e publicada, caso no exista.

7. NOES DE BIOSSEGURANA
As atividades exercidas nos laboratrios forenses geralmente envolvem o manuseio de materiais de
origens diversas, que vo desde amostras biolgicas a reagentes qumicos.
Durante o manuseio de amostras ou de reagentes no interior de unidades forenses alguns cuidados
especficos devem ser observados para que dois princpios bsicos de segurana sejam mantidos: o primeiro a
segurana do indivduo que manuseia as amostras e o segundo a segurana da amostra analisada.
A segurana do indivduo dar-se principalmente atravs da utilizao de materiais e metodologias
adequadas para cada tipo de anlise a ser procedida, evitando assim que o mesmo possa sofrer danos em sua
integridade fsica. Um das principais formas de contaminao do indivduo em um ambiente laboratorial ocorre
com a utilizao de reagentes qumicos nocivos sade ou com o manuseio incorreto de amostras biolgicas
potencialmente infecciosas.
A amostra submetida anlise pericial, por tratar-se de uma prova material vinculada a um delito, deve
ter sua integridade assegurada antes, durante e aps sua anlise. Sua manipulao deve ser feita de forma
bastante cuidadosa para minimizar ao mximo a possibilidade de contaminao da mesma por fatores externos,
evitando o possvel comprometimento dos resultados finais obtidos ou em casos extremos a inviabilizao da
prpria percia.
Visando prevenir estes tipos de contaminaes devemos conhecer e seguir rigorosamente critrios de
biossegurana.
A primeira lei criada no Brasil diretamente para normatizar condutas de biossegurana foi Lei n.
8.974, em 1995, a qual foi regulamentada pelo Decreto n. 1.752. A partir desta lei foi criada a Comisso Tcnica
Nacional de Biossegurana (CTNBio), vinculada Secretaria Executiva do Ministrio da Cincia e Tecnologia.
Mastroeni, M.F.1, refere-se aos procedimentos de biossegurana ou segurana biolgica, da seguinte
forma: a aplicao do conhecimento, tcnicas e equipamentos com a finalidade de prevenir a exposio do
trabalhador, laboratrio e ambiente a agentes potencialmente infecciosos ou biorisco.
De acordo com os conceitos de biossegurana, risco pode ser definido como uma condio especfica
que apresenta potencial para causar danos ao indivduo, ao ambiente ou ao prprio objeto de anlise.
A Portaria do Ministrio do Trabalho, n. 3.214, de 08/06/78,2 classifica os riscos da seguinte forma:
Riscos de Acidentes - Qualquer fator que coloque o trabalhador em situao de perigo e possa afetar
sua integridade, bem estar fsico e moral. So exemplos de risco de acidente: as mquinas e equipamentos sem
proteo, probabilidade de incndio e exploso, arranjo fsico inadequado, armazenamento inadequado, etc.
Riscos Ergonmicos - Qualquer fator que possa interferir nas caractersticas psicofisiolgicas do
trabalhador causando desconforto ou afetando sua sade. So exemplos de risco ergonmico: o levantamento e
transporte manual de peso, o ritmo excessivo de trabalho, a monotonia, a repetitividade, a responsabilidade
excessiva, a postura inadequada de trabalho, etc.
Riscos Fsicos - Consideram-se agentes de risco fsico as diversas formas de energia a que possam
estar expostos os trabalhadores, tais como: rudo, vibraes, presses anormais, temperaturas extremas,
radiaes ionizantes, etc.
Riscos Qumicos - Consideram-se agentes de risco qumico as substncias, compostas ou produtos
que possam penetrar no organismo pela via respiratria, nas formas de poeiras, fumos, nvoas, neblinas, gases
ou vapores, ou que, pela natureza da atividade de exposio, possam ter contato ou ser absorvido pelo
organismo atravs da pele ou por ingesto.
Riscos Biolgicos: Consideram-se agentes de risco biolgico as bactrias, fungos, parasitos entre
outros.

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Para que os agentes com potencial contaminante possam ser manipulados de forma segura, um dos
mecanismos de conteno de grande importncia a utilizao de equipamentos de proteo individual e
coletiva (EPI e EPC).
Os equipamentos de proteo individual (EPI) visam manter a integridade fsica do trabalhador, o
protegendo de contaminaes. Eles so de uso individual, ou seja, no so projetados para serem compartilhados
por vrias pessoas, dadas condies de segurana e higiene. Dentre os vrios tipos de EPIs, os mais comuns so
mascaras, toucas, aventais, calados, luvas, culos de proteo, etc.
Os equipamentos de proteo coletiva (EPC) so destinados proteo do ambiente e da integridade
de um grupo que ocupa uma determinada rea. So exemplos de EPCS as cabines de segurana qumica (capelas
com exausto, etc), chuveiro de emergncia, lava-olhos, equipamentos de combate a incndios, etc.
Em relao aos tipos de resduos produzidos em laboratrios, a RDC n. 306, de 07 de dezembro de
2004, da ANVISA,3 que dispe sobre o gerenciamento de resduos oriundos de servios de sade, classifica os
tipos de resduos nos seguintes grupos:
GRUPO A
GRUPO B
GRUPO C
GRUPO D
GRUPO E

Resduos com a possvel presena de agentes biolgicos que, por suas caractersticas, podem
apresentar risco de infeco.
Resduos qumicos que apresentam risco sade ou ao meio ambiente.
Rejeitos radioativos ou contaminados com radionucldeos.
Resduos que no apresentem risco biolgico, qumico ou radiolgico sade.
Materiais perfurocortantes ou escarificantes.

Os cuidados relativos ao manuseio, transporte e armazenamento de um resduo so norteados de


acordo com a sua classificao.
Objetivando minimizar os riscos e facilitar a disposio final dos resduos que apresentem potencial
contaminante, os mesmos devem ser submetidos a processos e tcnicas de tratamento que consigam alterar seu
carter ou sua composio.
Os mtodos mais comuns utilizados so a esterilizao, a desinfeco qumica e a incinerao.
A esterilizao consiste na utilizao de mtodos fsicos ou qumicos com o intuito de degradar possveis
bactrias, esporos, fungos ou vrus presentes no resduo a ser tratado. A autoclavao um exemplo de um
processo de esterilizao.
A desinfeo qumica propicia o tratamento do resduo potencialmente infectante atravs da utilizao
de substncias qumicas, que variam de acordo com a resistncia do microrganismo existente no material a ser
tratado. As substncias mais utilizadas durante este processo so os aldedos, compostos a base de cloro e
compostos fenlicos.
A incinerao um processo de oxidao que ocorre a elevada temperatura que reduz o resduo
orgnico e combustveis a material inorgnico. E um processo destinado a resduos que no podem ser
reutilizados, reciclados ou depositados em aterros sanitrios.

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