ANDROLOGIA VETERINRIA E BIOTECNOLOGIA DA REPRODUO

Sumrio
Anatomia funcional do sistema genital masculino Bolsa escrotal, Testculos Ductos eferentes, Epiddimos, Canal deferente Cordo espermtico, Glndulas acessrias Pnis Diferenciao sexual Semiologia do sistema genital masculino Exame androlgico Patologias do aparelho reprodutor masculino Infertilidade, libido Patologias do smen Patologias de bolsa escrotal, de testculos Epididimite Espermatocistite, prostatite, hiperplasia prosttica Pnis e prepcio Inseminao artificial Tecnologia do smen preservao do smen Biotecnologia da transferncia de embrio Reproduo em pequenos animais Concluso Bibliografia Consultada pg. 03 pg. 03 pg. 06 pg. 07 pg. 08 pg. 12 pg. 20 pg. 20 pg. 26 pg. 26 pg. 27 pg. 33 pg. 38 pg. 39 pg. 40 pg. 41 pg. 47 pg. 51 pg. 57 pg. 64 pg. 65 2

Anatomia Funcional do Sistema Genital Masculino

O aparelho genital masculino composto por testculos, bolsa escrotal, epiddimo, ducto deferente, uretra plvica, glndulas sexuais acessrias e pnis.

Bolsa Escrotal
Sua forma e posio variam com a espcie: no bovino, a posio da bolsa escrotal ingnal, no eqino e no co intermediria e no suno e gato perineal. composta por: Pele: fina, sem gordura subcutnea e geralmente sem plos (exceto nos bovinos europeus). Rica em glndulas sudorparas, principalmente o garanho (cavalo). Tnica dartos: tecido muscular liso, colgeno e conjuntivo. um prolongamento do peritnio. Divide o testculo em duas lojas (partes), formando um sulco externamente na pele. Tnica vaginal: tem papel importante na termorregulao. Msculo cremaster: apenas na parte dorsal da bolsa, tambm tem papel importante na termorregulao, aproximando ou afastando os testculos do corpo. Parte dele se insere na tnica dartos e na vaginal.

A temperatura testicular deve estar 4 ou 5C abaixo da corprea, para que ocorra a espermatognese e a maturao dos espermatozides. Os tecidos da bolsa escrotal devem ser muito elsticos, para suportarem a distenso e aproximao do corpo pelo cremaster. Algumas patologias comprometem essa elasticidade, levando o animal a esterilidade.

Testculos
So as gnadas masculinas, onde se formam os espermatozides. o rgo primrio da reproduo. Suas funes so a produo de gametas masculinos e produo de hormnios. composto por: Tnica albugnea: tecido fibro-muscular (conjuntivo e colgeno) muito vascularizado. Reveste os testculos. Nos plos a tnica albugnea se condensa (sendo composta apenas de tecido conjuntivo) e penetra no testculo, servindo de sustentao para os tbulos seminferos, formando no centro o mediastino testicular (exceto no cavalo, onde no to aparente), dividindo o testculo ao meio. Do mediastino saem trabculas que dividem o testculo em lobos. Parnquima testicular: tbulos seminferos e tecido intersticial. Os tbulos seminferos so constitudos por tecido conjuntivo. Clulas de Leydig: localizadas no tecido intersticial. So produtoras de testosterona. 3

Clulas de Sertoli: As clulas de Sertoli so grandes e possuem invaginaes em sua parede. As clulas da linhagem espermiognica e os espermatozides ficam inseridos nestas invaginaes. Encaixam-se (as clulas de Sertoli) umas nas outras por ligaes juncionais. Fazem uma barreira hematotesticular, para proteger os espermatozides contra bactrias que podem chegar atravs do sangue, que passa logo abaixo, pelo tecido conjuntivo. o Suas funes so: Sustentao e proteo das clulas da linhagem espermtica; Nutrio dos gametas; Formao de barreira testicular; Fagocitose de gametas danificados e restos celulares; Secreo da protena de ligao com andrognio (PLA ou ABP); Secreo de estrognio; Secreo de inibina. Secreo de MIF no desenvolvimento embrionrio.

Produz PLA (ou ABP em ingls), que consiste em uma protena que faz ligao com o andrognio (testosterona). O acmulo de espermatozides no epiddimo envia um impulso para o hipotlamo, que por sua vez envia impulso para a clula de Sertoli produzir inibina. A inibina cai na corrente sangnea, chega ao hipotlamo que envia impulsos para a hipfise parar de produzir FSH e LH. O FSH age dentro dos tbulos seminferos, estimulando a clula de Sertoli a produzir ABP e a espermatognese - a fase de espermatocitognese, que vai de espermatognia a espermtide, j a fase de espermiognese (de espermtide a espermatozide) estimulada pelo ICSH (hormnio estimulante das clulas intersticiais o LH, mas recebe este nome nos machos) e pela testosterona. O LH (ICSH) estimula as clulas intersticiais (de Leydig) a produzirem testosterona. Essas clulas se localizam fora do tbulo seminfero, no interstcio. A testosterona tem peso molecular baixo e no consegue passar sozinha para dentro do tbulo seminfero. A ABP passa do tbulo para o interstcio, se liga a testosterona, aumentando seu peso molecular e passam para dentro do tbulo. A espermatognese s ocorre em presena da testosterona. A testosterona se auto-regula. Quando est em grande quantidade promove feedback negativo com o hipotlamo e a hipfise, para liberar menos ICSH. Quando est em pouca quantidade, estimula a liberar mais. A prolactina tambm estimula as clulas de Leydig. Clulas da linhagem espermtica: espermatognia, espermatcito I e II, espermtide e espermatozide.

1. Espermatognias tm origem fetal, mas s se desenvolvem (amadurecem) na puberdade. Se dividem mitoticamente originando novas espermatognias. Parte dessas novas espermatognias param de sofrer mitose e se diferenciam, originando os 4

espermatcitos I. A outra parte espermatognias (que so 2n).

continua

originando

(sendo

fonte)

novas

2. Espermatcitos I ou Cito I sofrem meiose, originando as cito II. Essa meiose reducional, passam de 2n para n (metade dos cromossomos). A cito I ainda 2n, as cito II que sero n. 3. Espermatcitos II ou Cito II so n. Sofrem nova meiose, mas dessa vez no reducional e sim equacional, originando as espermtides (n). 4. Espermtides sofrem citomorfose e originam os espermatozides. O processo todo se chama Espermatognese. O processo final (a citomorfose) chamado de Espermiognese. Observao: tempo de formao dos espermatozides: de espermatognia at espermatozide: aproximadamente 60 a 70 dias. Se o animal sofrer algum tipo de traumatismo nos testculos (ex: coice que leva a orquite) poder ficar infrtil por algum perodo. Tratar o animal e depois de recuperado aguardar por 70 dias para fazer novo exame de fertilidade. Caso de inflamao de bolsa escrotal (e no de orquite, que inflamao do testculo) trata-se com antiinflamatrio e a produo do smen pode at ficar diminuda, mas o animal no fica infrtil. Pode-se tratar com cartilagem de peixe (mega 3), pois os AGVs participam da formao da membrana plasmtica dos espermatozides. Observao: Hidrocele (acmulo de plasma entre as tnicas vaginal e parietal da albugnea) nos bovinos leva a infertilidade, mas no eqino no (s em casos muito graves). A origem fetal dos testculos igual a dos ovrios: caudal ao rim, na cavidade abdominal. Os testculos migram at a bolsa escrotal com o auxlio de um tecido gelatinoso, que s existe no feto, chamado Gubernculo. Os testculos ficam na borda do anel inguinal profundo e, por uma diferena de presso (grande na cavidade abdominal e pequena na bolsa escrotal) causada por exerccio fsico do animal, saem caindo na bolsa escrotal. O gubernculo regride e fica ligado a cauda do epiddimo formando o ligamento da cauda do epiddimo. As estruturas que nutrem e inervam o testculo descem junto com ele, formando o Cordo ou Funculo Espermtico. Estas estruturas so: Artria Testicular e Veia Testicular (que se enovelam formando o Plexo Pampiniforme), Plexo Nervoso Testicular, Linftico Testicular, Ducto Deferente, Tnica Vaginal Visceral, Msculo Cremaster. O plexo pampiniforme tem a funo de resfriar o sangue que sai do corpo para o testculo, e de reaquecer o sangue que est voltando para o corpo (j que ele sofre um resfriamento em torno de 4C por estar fora da cavidade abdominal). Conforme o sangue arterial vai chegando ao testculo, vai sendo resfriado pelo sangue venoso, que est voltando. Da mesma forma, quando o sangue venoso vai chegando ao corpo sofre reaquecimento pelo arterial. 5

Pode acontecer de os testculos no descerem, quando isso acontece o animal chamado de criptorquida, ou roncolho. Observao: Uma ultra-sonografia testicular normal produz imagem montona (toda por igual). Se houver alguma diferenciao porque est alterado. Pode-se fazer puno aspirativa no lobo testicular, coletando tbulos seminferos para bipsia (faz-se um esfregao). Os testculos se posicionam de acordo com a bolsa escrotal: Vertical e entre as coxas: poligstricos. Horizontal e entre as coxas: eqdeos. Oblquo e perineal: sunos.

O peso tambm varia de acordo com a espcie: Touro: 200 a 500g. Garanho: 200 a 300g. Carneiro: 200 a 400g. Varro: 250 a 300g. Co: 7 a 15g.

Ductos eferentes
So os responsveis pela conexo dos testculos (rede testis) com os epiddimos. Os tbulos seminferos desembocam nos tbulos retos, que formam a rede testicular (rede testis), desembocando nos tbulos eferentes, que se unem formando um nico tubo todo enovelado, que o epiddimo.

Epiddimos
So formados pela tnica albugnea, tecido conjuntivo e ducto epididimrio. Dividem-se em cabea, corpo e cauda. possvel palp-lo diferenciando-se as partes, menos a cabea que mais difcil. Na cauda se consegue palpar o gubernculo (resqucio embrionrio). Se houver rotao de testculo pode-se perceber na palpao pela localizao da cauda. Dependendo da gravidade pode-se retornar o testculo posio normal com a palpao. Suas funes so:

Transporte espermtico dentro dos testculos: na cabea a impulso feita pela presso lquida e pela contrao da musculatura lisa da tnica albugnea. Pelo corpo e at a cauda feita pela contrao da musculatura da tnica albugnea e por movimentos ciliares. Concentrao: ocorre absoro de lquidos, aumentando a concentrao dos espermatozides. Maturao: ocorre retirada da gota protoplasmtica proximal (resqucio do citoplasma da espermatognia) ao longo do trajeto, sofrendo movimentao pelo espermatozide, indo da cabea (proximal) cauda (distal) e desaparecendo. O no desaparecimento desta gota leva a m formao de espermatozides. Secreo: anti-aglutininas (para evitar que os espermatozides se aglutinem, o que dificultaria seu transporte e locomoo) e gliceril-fosforil-colina (fonte de energia). Armazenamento de espermatozides: ocorre na cauda do epiddimo. Absoro seletiva: ao de espermifagos, que fazem fagocitose de espermatozides defeituosos.

Canal deferente
um prolongamento do epiddimo, tendo a mesma estrutura. Em algumas espcies o canal deferente sofre uma dilatao em sua poro final formando a Ampola. Ces e gatos no possuem essa ampola. Sua funo transportar os espermatozides da cauda do epiddimo at a uretra plvica, onde se abre em um orifcio (stio ejaculador), localizado no culiculus seminalis.

Cordo espermtico
Localiza-se dentro da bolsa escrotal, mas externo ao testculo. Composto por vrias estruturas: Msculo cremaster; Vasos (artria e veia espermtica ou testicular, linfticos); Nervos; Canal deferente; Tecido conjuntivo; Tnica vaginal.

Como j dito anteriormente, o enovelamento da artria e da veia espermtica forma o plexo pampiniforme. Suas funes so: Termo-regulao testicular (cremster e plexo-pampiniforme). 7

Nutrio do testculo e epiddimo (vasos sangneos). Sustentao do testculo e epiddimo na bolsa escrotal. Escoamento dos espermatozides atravs do canal deferente.

Glndulas Acessrias
Glndulas Vesiculares ou Vesculas Seminais o co e o gato no possuem. um rgo duplo, cilndrico, lobulado (no eqino tem forma de saco) e de cada lbulo sai um ducto que desgua no ducto excretor principal, o qual penetra na musculatura da uretra plvica e funde-se com a ampola no stio ejaculador. Em processos inflamatrios (vesiculite) pode-se perder essa lobulao. responsvel pelo aumento de 50% do volume do smen, pelo fornecimento de nutrientes para o metabolismo espermtico e por um sistema tampo para os espermatozides. Quando normal quase impossvel de palpar, apenas quando h anormalidades se consegue com mais facilidade. Para diagnstico preciso s com ultra-sonografia. Prstata rgo nico, presente em todas as espcies domsticas. Divide-se em corpo e disseminada (envolvendo a uretra). O co s tem o corpo da prstata, que exerce a funo de todas as glndulas. O corpo da prstata lobulado e se encontra sobre a uretra plvica, enquanto a prstata disseminada fica inserida na musculatura da uretra plvica, envolvendo-a, na qual se abre atravs de vrios orifcios (sendo dois no co e no gato). Sua funo de adicionar volume ao smen e neutralizar o pH cido da uretra (bicarbonatos e citratos), fazendo uma limpeza prvia para a passagem dos espermatozides. Possui importncia clnica maior no co. avaliada por ultrasonografia. Bulbo Uretral um rgo duplo, de forma ovide (exceto no suno, onde cilndrico). No ruminante encontra-se sob o msculo squio-cavernoso. O co no tem. Sua funo semelhante da prstata, liberando um primeiro lquido (geralmente sem espermatozides), fazendo uma limpeza do canal uretral. Difcil de sensibilizar na palpao. Observao: Transporte de espermatozides no trato genital masculino: tbulos seminferos tbulos retos rede testis canais eferentes ducto epididimrio cauda do epiddimo canal deferente pnis.

Pnis
Divide-se em corpo e glande. Composto por: 8

Tnica albugnea. Corpo cavernoso do pnis (trabculas de tecido conjuntivo e colgeno, com sistema intenso de vasos). Corpo cavernoso da uretra.

Possui dois tipos: Fibro-elstico pequena capacidade de distenso (ruminantes e sunos). Rico em tecido ertil aumenta muito de tamanho (eqideos). Podem ter duas formas: Em S ruminantes. Retilneo demais espcies.

Suas funes so: Cpula. Eliminao do smen. Eliminao da urina.

Ao ejacular, a funo do pnis depositar o smen no canal vaginal, de preferncia dentro do tero ou o mais prximo possvel dele. Para isso ele precisa estar ereto. Esta intumescncia ocorre graas a um mecanismo dos vasos sangneos que irrigam o pnis: o fluxo sangneo vindo da artria aumenta e o que sai pela veia diminui, aumentando o volume sangneo nos corpos cavernosos, o que causa a intumescncia do pnis. No processo contrrio (detumescncia) diminui o fluxo vindo da artria e aumenta o das veias. Os corpos cavernosos podem ser musculares ou fibroelsticos. Os musculares (musculocavernosos) aumentam mais de volume do que os fibroelsticos, pois possuem mais espao. So encontrados em eqinos, ces e gatos. O fibroelstico ocorre em ruminantes e sunos. O corpo cavernoso se origina de dois pilares que saem do osso coxal. Na unio dos dois pilares (que se unem para formar o corpo cavernoso) h a formao de um septo, que se desfaz ao longo do corpo cavernoso. A uretra passa abaixo do corpo cavernoso e envolta por um tecido esponjoso, tambm ertil, chamado de corpo esponjoso da uretra. Se origina entre os dois pilares no osso coxal. Em sua origem (poro caudal), possui uma dilatao chamada de Bulbo do Pnis. Possui outra dilatao, cranial, que forma a glande do pnis. Possui dois msculos importantes: Msculo squio Cavernoso (sai do squio do coxal e cobre os pilares) e o Msculo Bulbo Esponjoso. Ambos, quando contraem, aumentam o volume sangneo na regio cranial do pnis, aumentando a rigidez nessa regio, o que facilita e auxilia a penetrao do pnis na vagina. Outro msculo, o Msculo Retrator do Pnis, que sai da regio caudal (vrtebras caudais), faz a retrao do pnis ps-coito para dentro do prepcio. O que faz ele sair do prepcio o aumento de volume. 9

Nos animais com corpo cavernoso fibroelstico, onde no h muito aumento de volume, o pnis dobrado. Quando enrijece ele estica, se desdobrando, e sai do prepcio. Essa dobra em forma de S (possuindo na verdade duas dobras) e chamada de S peniano ou Flexura Sigmide. O msculo retrator, neste caso, se fixa na segunda dobra, a mais cranial. A glande varivel de acordo com a espcie: O touro possui uma pequena cicatriz na glande, pois quando jovem possui o pnis soldado ao prepcio (por um ligamento), se descolando ao tornar-se adulto. Bode e carneiro possuem um prolongamento (2 a 3cm) da uretra (apndice vermiforme), que sofre vrias tores no momento da ejaculao, lanando smen por toda a crvix. O eqino possui uma discreta projeo da uretra formando o Processo Uretral e uma pequena depresso denominada de fossa uretral. O processo uretral facilita a ejaculao intra-uterina, pois se encaixa na crvix. O co apresenta duas regies: pars bulbalis e pars distalis. Na ejaculao (lenta) e com a ereo, a pars bulbalis aumenta de tamanho e volume. Seu corpo cavernoso ossificado formando o Osso Peniano (mas no se ossifica na raiz), localizado no corpo e no pice do pnis. A glande recobre o corpo do pnis e forma um bulbo (que s termina de intumescer dentro da vagina). a glande que aumenta de volume, pois o corpo cavernoso j est duro, pois ossificado. Como o bulbo s termina de aumentar de volume dentro da vagina, aps a cpula o pnis fica preso na vagina, at que o sangue no bulbo seja drenado e ele retorne a seu volume original. O gato urina para trs, pela posio de seu pnis. Ele possui mais corpo cavernoso caudalmente, o que faz com que, ao intumescer, ele se projete para frente. Seu pnis possui espculos (60 espinhos de cada lado), que servem para estimular a vagina da gata para que ela ovule. Esses espculos chegam a machuc-la e at a fazem sangrar, mas a gata s ovula por estimulao. O sangue liberado na vagina da gata melhora o pH local, aumentando a viabilidade dos espermatozides. Os ovinos e caprinos possuem um processo filiforme, que um prolongamento da uretra. O pnis do suno (cachao) em espiral, no mesmo formato da crvix da fmea.

Prepcio
Dupla invaginao da pele, com estrutura simples: apresenta um orifcio distal (stio prepucial). O prepcio forma duas dobras, onde podem se acumular restos de urina, muco e sujeira. Deve ser limpo com gua para evitar doenas, mas sem exagero (no usar sabo nem antibacterianos), pois desenvolve uma flora normal que acaba por proteger o local de outros microrganismos patognicos. No suno, alm das dobras, ainda existe um divertculo prepucial, sem funo conhecida. 10

O Bos taurus possui prepcio curto, enquanto o Bos indicus possui prepcio longo e pedunculoso. Essa caracterstica desvalorizou essas raas no Brasil, e os que continuaram a utiliz-las procuraram selecionar os animais visando no valorizar essa caracterstica, pois levava muitas leses no prepcio (arrastava no cho, em cercas e arames), gerando balanopostite, postite, etc. Bezerros urinam com o pnis dentro do prepcio, pois esto aderidos por um ligamento. Aps a puberdade se descolam deste ligamento e passam a expor o pnis (da a cicatriz). Observao: Com a cpula ocorre estmulo da glande e do pnis, que levam ao estmulo do hipotlamo e neuro-hipfise, liberando ocitocina. A ocitocina provoca a contrao da musculatura lisa da cauda do epiddimo e o peristaltismo do canal deferente, levando os espermatozides para o culliculis seminalis (onde se encontram as glndulas vesiculares). As glndulas acessrias se contraem e lanam o plasma (secrees) no culliculis. O smen (plasma + espermatozides) sai pela uretra peniana em jato, sendo depositado na vagina ou no tero da fmea.

Caso Clnico:
Um eqino sofreu um coice no testculo e lesou os vasos seminferos, caindo espermatozides na corrente sangnea. Com isso o organismo desenvolveu anticorpos contra os espermatozides, tornando o cavalo infrtil. Para resolver o problema, em poca de cobrio, medicavam o animal com doses macias de corticides para deprimir seu sistema imune e conseguir coletar esperma. Neste caso, isolava-se o animal para evitar que contrasse doenas.

Diferenciao Sexual Embriologia do sistema genital

A diferenciao sexual embrionria passa por trs fases. A primeira onde se desenvolvem os rgo sexuais primrios; a segunda onde forma-se o sistema genital tubular; e a terceira, onde origina-se a genitlia externa. rgos sexuais primrios: ovrios e testculos (ambos derivam da crista genital). Sistema genital tubular: tubas uterinas, tero e vagina anterior (fmeas); ductos eferentes e deferentes e tbulos seminferos (machos). Derivam dos ductos mesonfricos (ducto de Wolf machos) e paramesonfricos (ducto de Mller fmeas) embrionrios.

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Genitlia externa: vulva, vestbulo, vagina posterior e clitris (fmeas); pnis e bolsa escrotal (machos). Derivados do seio urogenital, pregas urogenitais e tubrculo (ou boto) genital. O tubrculo genital pode ser visto no ultra-som possui o formato de dois riscos e hiperecico ao cordo umbilical. Para fazer a sexagem fetal identificar a posio do tubrculo: - Macho: prximo ao cordo umbilical. - Fmea: prximo aos membros plvicos (regio ingnal). O macho s ser verdadeiramente macho se passar pelas trs fases de diferenciao sexual sem problemas. Caso contrrio poder nascer hermafrodita ou pseudohermafrodita. Isso ocorre porque normalmente o desenvolvimento do embrio seguiria para a formao de uma fmea. Para formar um macho, necessrio que vrias etapas da formao embrionria sofram estmulo ou inibio, de acordo com hormnios e substncias que so secretados pelo cromossoma Y e posteriormente pelo testculo. Erros nestas etapas faro com que o embrio sofra m-formao em suas caractersticas sexuais, como veremos mais detalhadamente a seguir. Observao: Hermafrodita verdadeiro: apresenta uma ou ambas as gnadas com tecido ovariano. Pseudo-hermafrodita: apresenta gnada de um s sexo e genitlia do sexo oposto ou de ambos.

Sexo gentico
formado no momento da fecundao. Todo vulo X. Os espermatozides podem ser X ou Y. Ao fecundar o vulo, o macho define o sexo do feto, de acordo com o espermatozide que fecundar esse vulo (se X ou Y). O pH da vagina pode estimular o espermatozide X ou o Y, dependendo da ambientao de cada um este pH. O espermatozide (sptz) Y mais leve e veloz que o sptz X, que por ser maior mais lento. Em compensao, o sptz X mais resistente e dura mais que o Y. Dependendo do momento da cpula (se antes ou aps a ovulao) favorece-se mais a formao de machos ou de fmeas: como o Y chega primeiro ao local da fecundao, se a cpula ocorrer no momento ou aps a ovulao, favorecer a formao de um macho; mas como o X mais resistente, se a cpula ocorrer antes da ovulao, favorecer a formao de uma fmea, pois provavelmente os sptzs Y j tero morrido quando ocorrer a ovulao. Observao: Pode-se centrifugar o smem e selecionar os mais pesados (ou os mais leves) de acordo com a preferncia por macho ou fmea os sptzs X se depositaro no

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fundo. Existe uma mquina (Sephandex) que separa os sptzs por peso molecular, tendo apenas 1% de erro. Complemento cromossmico masculino: 44 autossomos e 2 cromossomos sexuais (X e Y), ativos nas clulas germinativas. Complemento cromossmico feminino: 44 autossomos e 2 cromossomos sexuais (X e X) ativos nas clulas germinativas. XO: fentipo feminino com gnadas defeituosas. A diferenciao dos ductos genitais e da genitlia externa do padro feminino requer apenas um cromossomo X, j que o natural o desenvolvimento de fmea. Alm disso, o segundo X inativado cedo em todos os tecidos extragondicos.

Fatores formadores de testculo

Sem o cromossoma Y o embrio no desenvolve testculo nem padro genital masculino. Naturalmente, o embrio desenvolveria ovrios, mas na presena de um cromossomo Y este processo natural interrompido e forma-se testculos. Fator determinante de testculo (TDF): localizado na poro distal do cromossoma Y (brao curto). Este fator codifica uma protena que se fixa s molculas de DNA. o responsvel pela expresso do gene Y que formar o testculo. HY (antgeno de histocompatibilidade): presente na superfcie de todas as clulas masculinas, exceto nas clulas germinativas diplides. Impede transplante de tecido de machos para fmeas. Obs: experimentos com camundongos comprovaram que introduzindo o antgeno HY na gnada indiferenciada ela evolua para testculo. O DNA do cromossoma Y no suficiente para completar a masculinidade do embrio. Sem o TDF e o HY as transformaes embrionrias necessrias para que o embrio se desenvolva por completo em macho no ocorrem. A virilizao dos ductos genitais e da genitlia externa depende de receptores para andrgenos (testosterona).

Desenvolvimento gonadal (sexo gonadal)

- Controle gentico (XX ou XY). - Clulas germinativas primordiais se diferenciam no blastocisto de cinco dias de idade.

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- As gnadas originam-se de um espessamento da regio mdia do mesonfron, chamada de crista genital (prximo ao rim). - Durante as 5 primeiras semanas de gestao as gnadas se desenvolvem em padres sexualmente indistinguveis ainda no sofrem diferenciao. Aps as 5 semanas as clulas germinativas da gnada migram ou para a regio cortical (fmea) ou para a regio medular (macho). - A fase gonadal s se confirma (se macho ou fmea) aps 70 a 90 dias de formao. A partir de ento comea a haver produo hormonal (testosterona) at ento no foi necessrio para formar as estruturas (diferenciao sexual fenotpica).

Desenvolvimento do ovrio incio com 9 semanas

- Aos 22 24 dias clulas germinativas presentes dentro do endoderma do saco vitelnico. Ainda gnada indiferenciada. - Migrao de clulas germinativas primordiais do endoderma do saco vitelnico para a crista genital: Clulas germinativas primordiais (ainda indiferenciadas). Iro originar: Ovognias ovcitos; Espermatognias espermatozides. - Gnada indiferenciada (cortical e medular) composta por: epitlio celmico; clulas do estroma mesenquimal; clulas germinativas. - As clulas germinativas primordiais povoam os cordes sexuais que se formam na regio cortical das gnadas embrionrias. A partir de ento j uma gnada diferenciada, ou seja, feminina. H predomnio do crtex no ovrio, enquanto a medular regride. No ovrio diferenciado h produo de estrognio. - Os cordes sexuais se formam a partir da proliferao de clulas do epitlio celmico da crista germinal (tambm chamado epitlio germinal). - Na fmea no so formadas coneces entre os ocitos (vulos) e os tbulos que se transformaro em ovidutos (derivados dos Ductos de Mller). - Os ocitos liberados atravs da ovulao so captados pelas fmbrias para dentro do oviduto.

Cordes sexuais Mesnquima da crista genital Folculo

Clulas foliculares (da granulosa) envolvem o ocito Clulas da Teca Ocito, clulas da granulosa e da Teca 14

Desenvolvimento do testculo tambm na nona semana

- At a quinta semana, o desenvolvimento se d da mesma forma que na fmea, pois at ento as gnadas so indiferenciadas. - A partir da quinta semana: clulas germinativas primordiais migram para a crista genital e povoam os cordes sexuais que se formam de uma invaginao da superfcie epitelial (celmico) se invaginam para dentro da regio medular. - Com 6 a 7 semanas aps, os cordes sexuais originam as clulas de Sertoli. - As clulas de Leydig se originam do mesnquima da crista genital, com 8 a 9 semanas. - Os tbulos seminferos comeam a se formar quando as clulas de Sertoli cercam as clulas germinativas. - Reconhecimento do testculo diferenciado: secreo de testosterona. - A medular do testculo anatomicamente dominante, enquanto a crtex regride. - A invaginao dos cordes sexuais continua para dentro da regio medular da gnada embrionria, onde se conecta com cordes medulares dos mesonefros (rins primitivos). - O ducto dos mesonefros (Ducto de Wolff) transforma-se em epiddimo, vasos deferentes e uretra. O que permite que os gametas masculinos sejam deslocados atravs de um sistema tubular fechado.

Sexo genital (fenotpico)

At este momento do desenvolvimento fetal, a diferenciao sexual no requer ao hormonal. Ou seja, para diferenciao da gnada, no necessrio a ao de nenhum hormnio. Mas para diferenciao dos demais rgos sexuais (ductos genitais e genitlia externa masculina) a influncia hormonal fundamental. Na ausncia desta ao hormonal (testosterona) de origem gonadal, o formato destes rgos ser o feminino. Ainda no estgio indiferenciado (entre a terceira e a stima semanas) h o desenvolvimento de dois ductos genitais em cada lado: Ductos de Mller e de Wolff. No macho, a partir da nona semana, h o crescimento dos ductos de Wolff, atravs do estmulo da testosterona, e a regresso dos de Mller, pela ao do MIF. Com o surgimento das clulas de Sertoli se inicia a produo de MIF (fator de inibio Mlleriano) ou AMH. A regresso dos ductos de Mller (que formaria os rgos sexuais femininos) ocorre com 7 a 8 semanas. Tambm responsvel pela organizao dos tbulos seminferos nos testculos e pela descida destes pelo canal inguinal.

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Se um macho nascer com rgos femininos, significa que houve deficincia na produo de MIF pelas clulas de Sertoli. O ducto de Wolff forma: Epiddimo, Canal Deferente, Vesculas Seminais e Canal Ejaculador. Em fmeas, pela ausncia de produo de testosterona, ocorre a regresso dos ductos de Wolff e o desenvolvimento dos ductos de Mller. O desenvolvimento se inicia entre 10 a 11 semanas, e no requer nenhum hormnio ovariano. Os ductos de Mller originam as Trompas de Falpio (tubas uterinas), tero, Crvix e Vagina Posterior. O desenvolvimento est completo com 18 a 20 semanas. - Funes dos hormnios esterides: (andrgenos) diferenciao sexual, estmulo dos caracteres secundrios, espermiognese, so responsveis pela descida dos testculos, libido, ereo e ejaculao, funo anabolizante e funcionamento do epiddimo. Observao: o mecanismo de ao dos hormnios proticos atravs de receptores de membrana especficos no rgo alvo. O mecanismo de ao dos hormnios esterides se d no citoplasma da clula, com a unio hormnio x receptor.

Genitlia externa se inicia com 9 a 10 semanas.

No macho, a testosterona deve ser secretada para a circulao do feto e convertida a Diidrotestosterona, auxiliada pela enzima 5-redutase. A diidrotestosterona responsvel pelo desenvolvimento da genitlia externa masculina. Na ausncia dela, no se desenvolve o pnis, nem a bolsa escrotal.

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Esquema de diferenciao sexual

Remanescentes embrionrios Tubrculo genital Proeminncia genital Pregas uretrais Seio urogenital

Glande Bolsa escrotal Uretra peniana Prstata

Clitris Grandes lbios Pequenos lbios Vagina inferior

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Anormalidades da diferenciao sexual

Por algum problema durante a formao embrionria, seja por deficincia hormonal, cromossomial, etc., podem surgir alteraes na diferenciao sexual. As mais comuns so: Sndrome de Turner (humanos) tambm pode ocorrer em animais.

Estado gentico Gnada

XO Estria fibrosa, com baixa produo de estrognio (no tem caracterstica de ovrio normal)

Ducto Mlleriano Ducto Wolffiano Genitlia externa

Desenvolvido Regredido (normal em fmeas) Feminina (estatura baixa, mamas ausentes ou rudimentares)

Sntese de testosterona deficiente

Estado gentico Gnada Ducto Mlleriano Ducto Wolffiano Genitlia externa

XY Testculo Regredido (normal em machos) Parcialmente regredido Feminina e masculina

5-redutase deficiente

Estado gentico Gnada

XY Testculo

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Ducto Mlleriano Ducto Wolffiano Genitlia externa

Regredido Desenvolvido Feminina e masculina (falta da diidrotestosterona)

Sndrome de Klinefelter (humanos) nos animais tambm existe, mas com outras denominaes.

Estado gentico Gnada Ducto Mlleriano Ducto Wolffiano Genitlia externa

XXY Testculo Regredido Desenvolvido Masculina

O aparelho reprodutor pequeno, tem alta estatura, apresenta magreza, no tem libido e sub-frtil ou infrtil.

Estudo dirigido / Casos clnicos

1. Um mdico veterinrio foi chamado a uma fazenda para examinar alguns animais. Dentre estes animais foi observada uma fmea com agenesia ovariana bilateral e outra com hipoplasia ovariana, um macho com agenesia de epiddimo e outro com presena de pnis e clitris. Pergunta-se: Qual a deficincia / problema com estes animais, respectivamente? R: Na primeira fmea (agenesia ovariana), pode ser um caso de fmea com gentipo XY, que na formao embrionria teve deficincia de TDF e/ou HY. A segunda fmea (hipoplasia ovariana) pode ser uma fmea com gentipo XO, que por conseqncia teve m formao ovariana. O macho com agenesia de epiddimo provavelmente teve deficincia na produo de testosterona pelas clulas de Leydig, pois a testosterona quem estimula a diferenciao dos ductos de Wolff, formando entre outras estruturas o epiddimo.

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O macho com pnis e clitris deve ter tido deficincia de MIF, pelas clulas de Sertoli, no inibindo o ducto de Mller que acaba se desenvolvendo tambm.

2.

Um garanho foi examinado pelo veterinrio e observou-se ausncia de ambos os testculos na bolsa escrotal. Pergunta-se: O que provavelmente ocorreu com este animal? R: Provavelmente um criptorquida bilateral, pois se fosse agenesia dos testculos ou deficincia de 5-redutase no haveria produo de testosterona nem de diidrotestosterona, portanto no haveria formao normal do pnis. Ao coletar smen do animal, espera-se encontrar espermatozides? R: Provavelmente no, pois a espermatognese depende de temperatura mais baixa que a corprea (4 a 5C) para ocorrer. Em relao libido, o que se espera observar (normal ou alterada)? R: Normal, pois a produo de testosterona normal.

Semiologia do Sistema Genital Masculino

Indicaes - Seleo e comercializao de reprodutores: verifica-se caractersticas morfolgicas e qualidade de smen. Essa seleo tambm voltada para exposies, melhoramento gentico (avalia-se a eficincia reprodutiva). - Avaliao do potencial reprodutivo: a avaliao deve ser feita antes, durante e aps a estao de monta. - Diagnstico de sub ou infertilidade: se as fmeas no esto prenhando, verificar se o problema com o macho. - Diagnstico de ocorrncia de puberdade: se o macho j est apto a cobrir. - Preservao de smen in vitro: resfriado ou congelado (biotecnologia da reproduo).

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Exame androlgico
O exame androlgico ir avaliar a capacidade reprodutiva do animal e fornecer um laudo. Deve-se ter muito cuidado com armaes sobre a propriedade do animal, pois pode-se usar o laudo fornecido pelo mdico veterinrio para obter algum tipo de vantagem (fraude). Para evitar esse tipo de problema, deve-se preencher o documento com todas as informaes de identificao possveis. Quando o animal demonstrar estar inapto para reproduo no momento do exame, no laudo deve-se colocar a validade do exame para 60 dias, pois se o quadro for reversvel este ser o tempo mdio que levar para j estar novamente apto (dependendo do problema). Identificao: - Proprietrio e propriedade: todas as referncias nome e endereo do proprietrio e da propriedade, e-mail, telefones, fax. - Animal: nome, raa, idade, pelagem, nmero de registro (se registrado em alguma associao se possvel anexar cpia do registro), peso (se no houver balana, o peso aproximado), resenha (descritiva e grfica), filiao, marcas (de registro, da associao, da propriedade), foto. Exame clnico: - Anamnese: coletar informaes sobre alimentao, manejo, vermifugao, como seu comportamento com as fmeas, libido, qual foi o resultado de cobries anteriores, etc. - Exame clnico geral: em estao e locomoo. Se for eqino de sela v-lo montado ( uma boa forma de verificar sua ndole). Examinar mucosas, auscultao, flexo de locomotores (sistema msculo-esqueltico), cascos, etc. - Exame do sistema genital: cuidado com a aproximao (deve-se conter o animal), principalmente com os de raas mais sangneas. A aproximao deve ser feita pelo lado esquerdo (pois o lado onde feita a doma e a monta, portanto o animal est mais acostumado). Neste exame examina-se: Escroto: existncia de leses, mobilidade (deve ter mobilidade), sensibilidade (no deve apresentar), espessura, temperatura (mais baixa que a da mo, em torno de 34C) e presena de aderncias (se existirem significa que j houve leso anterior). Testculos: se ambos esto na bolsa escrotal, forma, presena de papilomas, simetria, consistncia, mobilidade, sensibilidade, temperatura, posio (varia de acordo com a espcie), tamanho (tambm varivel com a espcie) e biometria testicular (muito usada em touros mensurao de tamanho, largura, peso, etc.). Assimetria testicular pode ser indicativa de degenerao anterior ou atual. Ver histrico do animal. 21

Epiddimos: so palpveis. Verificar corpo, cabea e cauda, tenso, forma, simetria, tamanho, etc. Cordes espermticos: tm em torno de 3mm de espessura (mensurar com ultra-som). Se estiver muito grosso ou com algumas estriaes (varizes) pode ser derrame causado por alguma leso. Deve apresentar mobilidade. Prepcio: verificar presena de parasitos, leses. Pnis: estimular o animal com a presena de uma fmea, ou com acepram, para que ele exponha o pnis. S se deve fazer palpao de pnis em caso de necessidade (aps o membro estar relaxado, se possvel aps a monta). Uma indicao para a palpao a presena de sangue no esperma. Genitlia interna: examinada com o auxlio do ultra-som, mas tambm deve-se fazer palpao.

Observao: ces tm muito problema de prstata, portanto deve-se examin-la com o ultra-som.

Comportamento sexual e ndole:

Comportamento sexual: diante de uma fmea em cio o animal deve demonstrar: Libido: sinais de interesse, excitao pela fmea (resultando na cpula). Mensurar no laudo o grau de libido de acordo com as reaes do animal diante da fmea. Fases da cpula: excitao (sinal de Fleming levantar o beio para sentir os feromnios, tentando manter o cheiro por mais tempo na narina), aproximao, corte, ereo, monta (verificar se ele j monta com o pnis em ereo: no deve ficar subindo e descendo vrias vezes na gua, no mximo duas vezes o desperdcio de energia pode levar a perda do interesse), intromisso, movimentos copulatrios, ejaculao, desmonta e eplogo. ndole: temperamento na presena de animais e/ou do homem. Pode ser linftico, dcil ou violento. O macho no deve ser agressivo nem conosco nem com a fmea (principalmente). Tabela: a tabela abaixo pode ser usada como parmetro para classificar o comportamento sexual do macho:

Pontuao 0 1 2

Atitude Sem interesse sexual Identificao da fmea em cio Olfao e perseguio insistente 22

3 4 5 6 7 8 9 10

Tentativa de monta sem salto, com mugido/relincho, deslocamento e masturbao Tentativa de monta sem salto, com pnis exposto Tentativa de monta com salto, sem pnis exposto Duas ou mais tentativas de monta, com salto, sem pnis exposto Tentativa de monta com salto, pnis exposto, mas sem introduo Duas ou mais tentativas de monta com salto e pnis exposto sem introduo Monta com servio completo Duas ou mais montas com servio completo

De 0 a 3: questionvel; de 4 a 6: bom; de 7 a 8: muito bom; de 9 a 10: excelente. O coito em bovinos muito rpido, em eqinos um pouco mais demorado. Em eqinos pode-se sentir a ejaculao palpando a base do pnis durante a cpula. Em bovinos no, pois muito rpido. Espermograma: o ideal faz-lo em poca de monta, quando o animal est sendo usado, pois animais que esto muito tempo sem cobrir ficam com esperma acumulado. Se for fazer o exame fora de poca de cobertura, tentar faz-lo dar ao menos duas montas antes do dia do exame, para que seja feita a coleta da produo normal do animal. - Coleta de smen: antes de proceder a coleta (e aps) deve-se fazer a higiene do pnis com gua morna. Caso haja muita sujidade pode-se usar um sabo neutro. Jamais use anti-spticos, pois eliminam a flora local e pode abrir um foco de infeco. A coleta pode ser feita atravs de: Vagina artificial: o mtodo mais utilizado e mais fidedigno, usado para garanho, touro, bode, carneiro. Obtm o volume normal com caractersticas de smen normais. Deve ser aquecida a 42C (a gua que fica internamente) para simular o ambiente vaginal da fmea. Eletro-ejaculador: estimula as glndulas anexas, sendo mais usado em touros com dificuldade em montar (ex: problemas locomotores, idade avanada). Mo enluvada: estimulao manual. Mais usada em ces e sunos. Usase com copo coletor. Camisa de Vnus: usada em garanhes que no aceitam a vagina artificial. No muito utilizada, pois um mtodo que tem muita sujidade. 23

Massagem da ampola: tambm um mtodo manual. No muito utilizado, pois o resultado ruim. Estimulao farmacolgica: cloridrato de imipramizina; 2mg/kg/PV estimula glndulas anexas e expe o pnis (ejaculao rpida). Coletar em um copo coletor. 10 minutos depois, aplicar xilazina para relaxar o animal. A quantidade no ideal, mas em alguns casos o nico mtodo a ser usado. mais usada em garanhes muito nervosos que no aceitam toque do tcnico, nem vagina artificial.

- Caractersticas de cpula e ejaculao: Touro, carneiro, bode: coito rpido e ejaculao intra-vaginal. Garanho, varro, co: coito lento e ejaculao intra-uterina em 3 fraes: No garanho a 1 frao aquosa, a 2 o smen e a 3 um gel (produzido pelas glndulas vesiculares). Na tecnologia do smen (coleta) separa-se essas fraes para anlise individual. No varro a 1 frao aquosa, a 2 leitosa e a 3 viscosa (produzida pelas glndulas bulbo-uretrais). No co a 1 e a 3 fraes so aquosas e a 2 leitosa (o co s tem a prstata). - Caractersticas fsicas do ejaculado: o espermograma consiste em exames imediatos e mediatos: Imediatos: exames macro e microscpicos, feitos no ato da coleta, pois dependem dos espermatozides estarem vivos. Macroscpicos:
1. Volume em ml (copo coletor com marcao). No garanho mensurar o volume sem o gel (na vagina artificial se usa um filtro que retm esse gel). 2. 3.

Cor: acinzentado, esbranquiado (co), marfim ou amarelado. Aparncia: aquosa ou leitosa relacionada densidade e concentrao.

4. pH (papel indicador): deve tender a neutro (no um exame importante pouco usado). 5.

Odor: Sui generis. Pode ser alterado pela urina ou presena de sangue.

Microscpico: coloca-se uma gota de smen entre lmina e lamnula aquecidas (por placa aquecedora), evitando alterao no exame. No microscpio observar:

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1. Turbilhonamento: movimento de massa dos espermatozides em forma de ondas (usado em ruminantes). Classifica-se de 0 a 5.

Motilidade: porcentagem de espermatozides com movimento progressivo (para frente). uma avaliao subjetiva, classificando de 0 a 100%. Ideal acima de 70%.
2.

Vigor: intensidade (fora e velocidade) com que os espermatozides atravessam o campo visual. Classifica-se de 0 a 5. Deve ser maior ou igual a 3.
3. 4. Porcentagem de vivos: conta-se 100 clulas no esfregao de smen recm corado com eosina citrato ou eosina nigrosina (objetiva de 40x), no qual apenas as clulas mortas ou parcialmente mortas ficam coradas.

Mediato: exame microscpico feito posteriormente a coleta, pois no depende dos espermatozides estarem vivos.
1. Concentrao: nmero de espermatozides por unidade de volume (mm ou cm). Coloca-se uma gota de smen diluda em 19 gotas de gua destilada aquecida e homogeneza-se. Usa-se a cmara de Neubauer. Conta-se os espermatozides do retculo central da cmara, contando 5 quadrados (os em diagonal). Escolha um L do quadrado e conte apenas os espermatozides que estiverem no centro do quadrado mais os que estiverem com a cabea neste L.

http://www.cnpgc.embrapa.br/publicacoes/doc/doc51/08anexo89.html
2. Patologias do smen: verificao e classificao de anormalidades nos espermatozides.

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- Caractersticas morfolgicas dos espermatozides: Preparao mida: quando o smen est muito concentrado, o ideal dilu-lo (com diluente prprio 1:1) para fazer o exame microscpico. Devese deixar o smen com aspecto leitoso, trbido e homogeneizar a diluio. Esfregaos corados: o esfregao feito de forma diferente do esfregao sangneo neste puxa-se a lmina com a gota, espalhando-a sobre a lmina, ao invs de empurrar, como no sangneo. Os mtodos de colorao usados so: Karras ( o mais usado) amarelo metacromo e azul vitria; e Karras modificado (por Papas 98) rosa bengala 1 min, tanino (fixador) 1 min, azul vitria 30 min. Aps a colorao visualizar em objetiva de 100 x em imerso (com leo de cedro). Teste de estresse presso osmtica: verifica a integridade da membrana dos espermatozides. Os espermatozides que apresentarem cauda reta so inviveis, pois a gua entrou pela membrana e saiu. Os de cauda dobrada (em vrgula) esto normais, pois tencionam sobre a presso osmtica, resistindo a ela.

Patologias do Aparelho Reprodutor Masculino

Introduo O animal frtil aquele que, solto a campo, ao cobrir um nmero X de fmeas (eqinos 20 e bovinos 25) deve prenhar mais de 80% delas. O animal com problemas de fertilidade pode ser classificado como: Sub-frtil: est com seu potencial de fertilizao baixo (prenhou menos de 80% das fmeas), ou seu espermograma detectou mais de 30% de espermatozides defeituosos. Pode ser uma fase momentnea, mas que com tratamento adequado retorne a normalidade. Por isso importante que se faa novo exame androlgico aps um certo tempo. Infrtil: no atual momento se encontra incapaz de fecundar a fmea. Estril: totalmente infrtil (para sempre), incapaz de produzir espermatozides viveis. Pode ser de nascena ou adquirido. A infertilidade pode ser classificada como: Impotentia Coeundi: Incapacidade de copular. O animal no consegue montar. O problema no aparelho genital, podendo ter sido causado por trauma (coices), infeco, dor, etc.

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Impotentia Generandi: Incapacidade de fecundar. O problema com os espermatozides, por patologia espermtica, que pode ser causada por stress, alta temperatura, viagens, competies, etc.

Condies que diminuem a libido Maturidade, idade, experincia: com o passar dos anos o animal pode perder a libido. Algumas raas podem ser mais tardias do que outras, em mostrar interesse pela monta. Manejo: se o tratador costuma bater no animal para lev-lo para a cpula, ele ir associar a dor cpula e perder a libido. Trabalho sexual exagerado, mudana de ambiente, dor, desconforto, cansao, presena de pessoas ou de touros dominantes. At mesmo o parasitismo e superalimentao ou dieta pobre em energia e protena podem retardar a manifestao da libido em touros jovens. O calor pode interagir na capacidade de monta. A pneumovagina tambm pode provocar a ausncia de ejaculao, pela falta de contato entre a glande e a mucosa vaginal. Dor: disfuno dos membros locomotores, gua que escoiceia, qualquer associao da monta com dor ir alterar a libido.

Falha em copular - Falha de ereo. - Drenagem venosa anormal do corpo cavernoso do pnis. - Ocluso dos canais longitudinais do pnis. - Ruptura do corpo cavernoso. - Leses no prepcio, fimose, parafimose, necrose do pnis, balanopostite, neoplasias: dependendo do problema leva a amputao parcial ou total do pnis.

Condies que causam falha na ejaculao

- Dor localizada: peritonite localizada, leso nos membros posteriores, artrite, dor peniana, prostatite, inflamao das vesculas seminais. - Reflexo da ejaculao diminudo: leso nervosa. Leso neural entre a glande do pnis e a coluna vertebral (estrangulamento do pnis com leso do nervo sensorial dorsal do pnis, compresso do nervo espinhal por exostose aumento do espaamento entre dois ossos, neste caso duas vrtebras).

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Condies que causam falha na fertilizao

Normalmente caracterizada por anomalias no testculo, epiddimo e glndulas acessrias. Ocorrem antes da ejaculao, prejudicando a chegada dos espermatozides e a prpria ejaculao. - Testculo e epiddimo: criptorquidismo, degenerao testicular, orquite, epididimite, hipoplasia testicular, neoplasias, aplasias dos ductos mesonfricos (Wolff comprometem a formao das estruturas tubulares do aparelho masculino). - Glndulas acessrias: infeco da glndula vesicular, hiperplasia prosttica, prostatite, tumor prosttico, atrofia prosttica. O diagnstico envolve informaes sobre manejo reprodutivo utilizado, poca do ano (fotoperodo), exame da genitlia externa (e exame clnico completo verificar presena de dor em algum rgo ou membro), avaliao do smen (volume e qualidade) e avaliao das guas (se estiver tudo bem com o macho). Este critrio deve ser seguido para que se determine a origem do problema (se do macho ou das fmeas).

Patologias do smen (segundo Blom, 1983)

Os espermatozides podem apresentar defeitos mais importantes (maiores) e menos importantes (menores). At 10% de espermatozides com defeitos maiores e at 20% de defeitos menores so aceitveis no espermograma, totalizando 30% de defeitos. Acima disso o animal considerado sub frtil. O espermatozide se divide em cabea, colo e cauda. A cabea, que constitui o maior volume do espermatozide, consiste no ncleo, onde o material gentico est concentrado. Os dois teros anteriores do ncleo esto cobertos pelo acrossoma, que limitado por uma membrana contendo enzimas com a funo de facilitar a penetrao do espermatozide no vulo. A cauda responsvel pela motilidade do espermatozide e na rea intermediria da cauda encontramos os produtores de energia celular (mitocndrias). Eles vivem em mdia 24 horas no trato genital feminino, porm alguns espermatozides so capazes de fecundar o vulo aps trs dias.

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Fonte: arquivo pessoal Existem dois tipos de espermatozides normais. Um deles contm o cromossomo X (responsvel pela formao de um ser do sexo feminino) e o outro contm o cromossomo Y (responsvel pela formao de um ser do sexo masculino). Existem os anormais com problemas cromossmicos e os com problemas morfolgicos. Durante a meiose das clulas, alguns erros podem acontecer gerando uma anomalia cromossmica. Se este espermatozide fecundar o ocito, ir formar um embrio com defeitos genticos. Os espermatozides necessitam sofrer modificaes funcionais e estruturais para serem capazes de fertilizar os ocitos. O conjunto destas transformaes definido como capacitao espermtica. Durante essa capacitao podem ocorrer problemas, gerando espermatozides com defeitos morfolgicos. Os raios X, reaes alrgicas intensas e certos agentes antiespermatognicos so os principais responsveis por alteraes morfolgicas patognicas, e os espermatozides com anormalidades morfolgicas geralmente so incapazes de fecundar o vulo. Defeitos de acrossoma impedem a fecundao e geralmente so de origem gentica (a m formao destes causada por informao gentica e transmitida de pai para filho). Para visualizar as patologias de acrossoma deve-se usar colorao. Defeitos de cauda geralmente ocorrem ps-formao do espermatozide, podendo ocorrer por hidrocele, orquite, etc., ou seja, no so genticos. 29

- Defeitos maiores: a maioria dos defeitos de cabea e acrossoma. - Defeitos menores: a maioria dos defeitos de cauda. (Ver exemplos de ambos nas figuras abaixo e ficha de espermograma seguir)

http://www.cnpgc.embrapa.br/publicacoes/doc/doc51/08anexo89.html

30

http://www.cnpgc.embrapa.br/publicacoes/doc/doc51/08anexo89.html

31

32

http://www.cnpgc.embrapa.br/publicacoes/doc/doc51/08anexo89.html

Espermograma
Animal: Raa: Proprietrio: Mtodo de coleta: Libido: (+; ++; +++) Idade: Pelagem:

Caractersticas Fsico-qumicas
Volume: Motilidade (>70): Concentrao (>200): (ml) (%) (milhes/ml) Vigor: Material estranho: pH (6,5 a 7,0): (0 - 5) (+; ++)

Caractersticas Morfolgicas
% de vivos aps colorao: Tcnica utilizada: Defeitos Maiores Acrossoma: Gota citoplasmtica proximal: Formas teratolgicas: Cabea estreita na base: Cabea piriforme: Cabea com contorno anormal: Cabea pequena anormal: Cabea isolada patolgica: Cabea com pouch formation: Subdesenvolvidos: 33 Defeitos Menores Cabea isolada normal: Cab. gigante, curta, larga e peq. normal: Cabea delgada: Acrossoma desprendido: Gota citoplasmtica distal: Abaxial, retroaxial, obliqua: Cauda dobrada: Cauda enrolada: Outros:

Pea intermediria: Cauda fortemente dobrada/enrolada: Cauda enrolada na cabea: Pseudogota: Defeitos maiores: Defeitos menores: Total:

Outros Elementos Medusa: Clulas epiteliais: Hemcias: Clulas primordiais: Clulas gigantes: Leuccitos:

Local / data:

Veterinrio responsvel:

Observao: As 6 causas de infertilidade em fmeas causadas por machos so as descritas anteriormente:

1. Problemas 2. Diminuio 3. Falha 4. Falha 5. Falha

de infertilidade, sub-fertilidade ou esterilidade. da libido.

em copular. na ejaculao. na fertilizao. do smen.

6. Patologias

As demais causas de infertilidade em fmeas ocorrem por fatores ligados a elas, como estresse, m nutrio, cistos uterinos, doenas, etc. A morte embrionria pode ocorrer por abortamento (aps 40 dias de vida embrionria) ou absoro (antes de completar 40 dias da fecundao pois ainda no se completou a fixao do feto), que ocorre por inviabilidade de vida embrionria, devido a alguns dos fatores citados.

Patologias de bolsa escrotal

A bolsa escrotal se divide em pele e tnicas. 34

Pele: camada mais externa. As patologias mais comuns so: Dermatite escrotal: ectoparasitas, substncias qumicas (plantas txicas e outras substncias). Varicose: ou varicocele. Dilatao das veias que irrigam a pele. Tumores: mastocitoma, melanoma, carcinoma. Tnica vaginal: possui duas camadas (parietal e visceral): Hidrocele: acmulo de plasma entre os folhetos parietal e visceral. Comum em cavalos da raa Mangalarga Marchador. Em eqinos no determina infertilidade (apenas em casos mais graves), mas em bovinos sim. Quilocele: acmulo de linfa na tnica vaginal. Hematocele: acmulo de sangue na tnica vaginal. Vaginalite: inflamao da tnica vaginal. Pode ocorrer por trauma, mas geralmente ocorre por migrao de larva de Strongylus.

Patologias em testculos: so as patologias mais comuns

Os testculos (gnadas ainda indiferenciadas) so formados prximos aos rins e quando diferenciados migram para a bolsa escrotal estimulados pelo TDF e MIF. Migram pela cavidade abdominal, entram pelo anel ingnal interno, passam pelo canal ingnal e atravs do anel ingnal externo chegam a bolsa escrotal. Ao contrrio do que se pensa, bovinos e eqinos j nascem com os testculos na bolsa escrotal. O que ocorre que o anel ingnal externo grande e ainda no se fechou (o anel ingnal interno se fecha antes do nascimento e o externo aps a puberdade), permitindo que o testculo fique se recolhendo para o canal ingnal. Aps a puberdade esse recolhimento fica impedido pelo fechamento do anel ingnal externo e os testculos ficam permanentemente na bolsa escrotal. Criptorquidismo: falha na migrao de um ou ambos os testculos para dentro da bolsa escrotal. diferente de monorquida, onde o animal tem apenas um testculo, que pode estar na bolsa escrotal ou na cavidade abdominal. O outro no foi formado (agenesia unilateral de testculo). Uni ou bilateral: unilateral quando um dos testculos desce para a bolsa escrotal, mas o outro fica retido na cavidade abdominal ou no canal ingnal Reteno no abdome ou no canal ingnal: quando fica retido no abdome, porque na migrao ele no passou pelo anel ingnal interno. Neste caso s ser removido com cirurgia. Se estiver no canal ingnal, pode-se estimular sua descida com aplicao de hormnios, antes que atinja a puberdade (antes que se feche o anel ingnal). De qualquer forma, esse animal no deve ser usado na reproduo, pois o criptorquidismo transmissvel geneticamente. 35

Caractersticas: debilidade (oligospermia) ou ausncia (azospermia) de espermatognese no testculo retido. A secreo de testosterona normal, levando a uma libido normal. As clulas de Sertoli so muito mais frgeis que as de Leydig, sendo as primeiras a sofrerem com algum tipo de leso ou alterao (neste caso a temperatura corprea). J as de Leydig, por serem mais resistentes, permanecem produzindo testosterona normalmente, enquanto a espermatognese fica comprometida. Diagnstico: palpao, dosagem hormonal, ultra-sonografia. Para detectar se o animal criptorquida ou tem agenesia, faz-se a ultra-sonografia, mas esta pode no ser conclusiva (casos de animais obesos, por exemplo). Se no for possvel, fazer a dosagem hormonal:
1.

Coleta de sangue.

2. Aplicao hormonal: 3.000 UI de HCG (gonadotrofina corinica humana retirada de mulheres gestantes) EV.

Nova coleta de sangue aps 40 minutos: se o animal no possuir testculo, a dosagem ser a mesma que a encontrada na primeira coleta. Se tiver os testculos retidos, haver aumento na dosagem da segunda coleta.
3.

Indicao: castrao removendo ambos os testculos, pois o que estiver na cavidade abdominal poder originar uma neoplasia, principalmente em eqinos e em ces. A tendncia do testculo retido atrofiar e fibrosar. Caso esteja aumentando de tamanho provavelmente uma neoplasia, quase sempre maligna (mais comum o sertolioma).

Degenerao testicular
Degenerao dos tbulos seminferos (clulas de Sertoli e linhagem espermtica). Pode ser reversvel ou irreversvel, uni ou bilateral, dependendo da causa e do tempo que o processo degenerativo est instalado. As causas podem ser: Alteraes de temperatura: criptorquidismo (a primeira coisa que ocorre a degenerao testicular e depois comea a fibrosar), hrnia inguino-escrotal, dermatite escrotal, edema, larvas de parasitas, toro do cordo, viroses (brucelose - a mais comum, herpes vrus). Txicas: plantas txicas, substncias qumicas, metais pesados, radiao. Distrbios endcrinos: anabolizantes, tumores de adeno-hipfise e adrenal, tumor de clulas de Sertoli. Desestabilizam o sistema endcrino. Infeces bacterianas e virais: arterite viral eqina, IBR (infeco bovina respiratria patologia viral). Os sinais so: 36

Alterao da consistncia testicular. Infertilidade e oligospermia: 4 a 8 semanas aps a causa. Volume do ejaculado: normal, mas pode ter alterao (praticamente imperceptvel). Motilidade e concentrao: diminuem. Patologias de smen: aumentam m formaes de cabea (cabea destacada, etc.). Casos severos: aspermia, permanente perda de tbulos seminferos, fibrose e calcificao. O lquido prosttico se mostra normal, pois as glndulas acessrias esto normais. Se chegar a esta fase no h mais recuperao, sendo indicada a castrao.

Mtodos de diagnstico
- Histrico. - Inspeo. - Exame de smen. - Ultra-sonografia: a imagem de um testculo normal hipoecica (cinza). No incio da degenerao, a imagem se mostra mais anecica (enegrecida), mas com a evoluo da fibrose, em casos de degenerao mais avanados, a imagem fica hiperecica (esbranquiada). - Bipsia testicular: observar: leso na membrana basal dos tbulos seminferos, leso das espermatognias, mineralizao, fibrose, hiperplasia das clulas de Leydig. Observao: CAAF Citologia Aspirativa por Agulha Fina (30 x 7). Consiste em aspirao/puno de testculo para bipsia. Introduz-se a agulha de forma perpendicular, aspirando clulas do parnquima testicular (Sertoli e linhagem espermtica - nos tbulos seminferos). Geralmente se usa esta tcnica quando h suspeita de degenerao testicular. O contedo fica na agulha e depositado na lmina. A degenerao testicular adquirida e no hereditria, portanto no transmite o problema para a prole. A hipoplasia gentica, sendo transmissvel aos descendentes. raro, mas pode ocorrer degenerao testicular intra-uterina. Para diferenciar uma da outra, s com bipsia testicular. O tratamento da degenerao consiste em tratar sua causa. - Hipoplasia testicular: sempre bilateral (diferente de degenerao, que pode ser unilateral).

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A hipoplasia testicular o incompleto desenvolvimento do epitlio germinativo dos tbulos seminferos, devido ao inadequado nmero ou ausncia de clulas germinativas (gametas) levando a deficincia na formao dos gametas. A hipoplasia varia de gravidade de acordo com o grau de leso do epitlio, podendo ser parcial ou total. Mas com o tempo, o grau de leso do epitlio da hipoplasia parcial aumenta, se tornando total, e o animal pra de produzir espermatozides por completo. Etiologia: ocorre durante a vida fetal e leva a alterao do caritipo. Ocorre por infeces transplacentrias, intoxicao da gua durante o perodo de gestao, deficincias hormonais, interrupo da migrao testicular, anormalidades de caritipo, nutrio pobre, deficincia de zinco, afeces vasculares do testculo, antiinflamatrios hormonais. Caracterstica: hereditrio, causada por um gene autossmico recessivo de penetrncia incompleta. a teoria mais aceita atualmente (gentico + hereditrio). - Libido: normal, pois no afeta as clulas de Leydig. - Testculo diminudo de tamanho: flcido. - Smen: o volume pode estar normal ou diminudo. H diminuio na motilidade e concentrao dos espermatozides, no turbilhonamento (movimento em massa), aumentam as patologias de smen (principalmente defeitos de cabea, cabea de medusa, acrossoma, GCP gota citoplasmtica proximal). Se for parcial, inicia com oligospermia. Quando atinge a totalidade, aspermia. Diagnstico: - Histrico (anamnese): saber se recente ou no (ajuda a diferenciar de degenerao), se sub-fertil ou infrtil, se pai ou me eram sub-frteis. - Inspeo: tamanho do testculo diminudo devido a ausncia de desenvolvimento (atrofia aps o desenvolvimento, devido a diversos fatores, entra em regresso, diminuio do nmero e/ou tamanho de clulas). - Palpao: se tem consistncia semelhante ao testculo normal (firme). Se estiver flcido est degenerando, depois vai ficando endurecido (fibrose). - Exame de smen: aspermia ou oligospermia (dependendo do grau da hipoplasia). - Histologia: bipsia aspirativa (com seringa: causa menos leso por ser menos invasiva e agressiva que a inciso que pode levar a contaminao). Observa-se reduo da linhagem seminal, epitlio germinativo com mitoses e meioses escassas ou ausentes, tbulos hipoplsicos, membrana basal espessada cercada por depsitos de colgeno, presena de clulas multinucleadas, picnose (clulas anucleadas o ncleo se solta do interior da clula). As vezes h diferena de tamanho entre os dois testculos, mas ambos so hipoplsicos. O maior ir diminuir de tamanho com o tempo. As clulas germinativas no iro se desenvolver em nenhum dos dois testculos. O macho transmite a hipoplasia tanto para filhos machos quanto para fmeas. O macho hipoplsico sempre ser infrtil ou sub-frtil nos primeiros anos de vida reprodutiva e ficam estreis logo depois. 38

As vezes aparentemente os testculos tm tamanho normal e o proprietrio no faz exame androlgico e espermograma, no diagnosticando a hipoplasia. Este animal cobre fmeas nos 2 ou 3 primeiros anos de vida reprodutiva, prenha algumas, mas provavelmente metade ou menos que a metade, com este ndice diminuindo a cada ano. No 4 ano no prenha mais nenhuma. Com isso o proprietrio jogou fora anos de produo, pois os animais produzidos por estas cruzas sero hipoplsicos. Tratamento: orquiectomia bilateral. No tem tratamento. Orquite: Inflamao do testculo (um ou ambos) Pode ser uni ou bilateral. A inflamao leva ao aumento de temperatura local, podendo acometer o testculo vizinho (e interferir na espermatognese). As causas podem ser: - Traumticas: coices, cercas. - Bacterianas, virais, parasitrias: Brucella sp., Mycobacterium tuberculosis, Actinomyces pyogenes, ciclo errtico do Strongylus. Podem levar a degenerao testicular posterior. - Auto-imune. - Via de infeco: hematgena, podendo tambm ocorrer a infeco por via urinria ascendente. Geralmente associada a epididimite (so muito prximos). Dificilmente tem-se uma orquite sem epididimite. - Caractersticas: Fase aguda: inflamao, hiperemia, edema, calor, aumento de tamanho, dor e febre. Fase crnica: diminuio do tamanho (pela fibrose), fibrose, aderncia da tnica e escroto. Pode ocorrer formao de abscesso. Pode causar degenerao testicular do testculo no afetado (por causa do calor devese colocar gelo). Smen: diminui motilidade e concentrao, aumento de patologias, presena de leuccitos no smen (processo inflamatrio uma pequena quantidade normal). - Tratamento: AINEs (Cataflam, Voltarem), hidroterapia (ducha com gua gelada 2x ao dia), gelo (triturado age melhor prepara-se uma bolsa com gelo e amarra no animal), antibiticos (se for de origem bacteriana). Se a orquite estiver progredindo, orquiectomia uni ou bilateral. O mdico veterinrio deve acompanhar para verificar se deve-se ou no remover o testculo afetado para no comprometer o outro.

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- Prognstico: reservado. Depender da causa e da progresso do processo. Epididimite: a patologia de epiddimo mais comum (cistos e neoplasias so raros). A inflamao do epiddimo pode ocorrer de forma primria ou secundria a orquite infecciosa. Pode ser uni (sub-fertilidade) ou bilateral (infertilidade). Etiologia: infecciosa (Brucella ovis pode infectar bovinos tambm, causando orquite e epididimite), traumtica (principalmente coices). Tanto a orquite quanto a epididimite podem levar a degenerao testicular (por causa da alta temperatura). Sinais: calor, dor e edema. Sintomas: obstruo do ducto epididimrio, perda da funo (transporte dos espermatozides), reduo ou perda da fertilidade (degenerao testicular). Diagnstico: histrico e anamnese, exame androlgico (leva a diminuio da concentrao espermtica, da motilidade, aumento das patologias de cauda e presena de clulas inflamatrias). Tratamento: AINEs (corticides apenas em inflamaes muito agudas e graves), antibitico. Pode levar a degenerao testicular. Prognstico: reservado, dependendo do caso.

Espermatocistite: inflamao das glndulas vesiculares. Geralmente causada por microrganismos. Etiologia: Brucella abortus, Proteus, Klebsiella, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus, Staphylococcus, E. coli, Corynebacterium renale, IBR (vias ascendente: trato urinrio a uretra est em contato com o meio externo; ou descendente: linftica e hematgena). Caractersticas: dor a monta (se o animal sentir dor na monta e no apresentar nenhuma alterao externa ao exame, suspeitar de glndulas acessrias), diminuio da motilidade, aumento de pH, presena de neutrfilos no ejaculado, hemospermia (sangue no smen, oriundo de inflamao de prstata, vescula seminal ou uretra). Diagnstico: palpao retal e ultra-sonografia (usa-se a bexiga como guia, referncia). Cultura e antibiograma do smen (se possvel far, pois h muitas cepas resistentes). Tratamento: Gentamicina 4mg/kg 7 a 10 dias. o antibitico mais utilizado, pois a maioria dos patgenos sensvel a ele, mas pode-se usar outro, de largo espectro. No cobrir as fmeas para evitar contaminao.

Prostatite: inflamao da prstata. Geralmente associada a hiperplasia prosttica. Comum em ces e rara nas demais espcies.

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Caractersticas: presena de leuccitos, sangue e bactrias na urina. Dor abdominal e constipao. O aumento da prstata leva a compresso da uretra, acumula urina (meio de cultura para bactrias). Diagnstico: palpao (sempre retal, mesmo em pequenos) e ultra-sonografia. Tratamento: antibitico e AINEs.

Hiperplasia prosttica: sempre benigna, leva ao aumento homogneo da prstata (a neoplasia leva a um aumento no homogneo). Comum em ces e rara nas demais espcies. 5 em cada 7 ces acima de 8 anos apresentam hiperplasia de prstata. uma patologia andrgeno dependente (alterao da testosterona). Caractersticas: aumento prosttico e aumento da sensibilidade. Dor abdominal e constipao. Dificuldade de mico. Diagnstico: palpao retal e ultra-sonografia. Tratamento: Raveron (extrato prosttico humano), fitoterpicos.

Pnis e Prepcio
Inflamao do pnis: balanite. Inflamao do prepcio: postite. Balanopostite: ambos. Causa dor, aumento do esmegma, reteno do pnis, edema, odor anormal, relutncia ao montar e ejacular. Pode ser por origem viral, bacteriana, protozoria, parasitria, injria ou neoplasia. - Viral: herpes vrus eqino tipo 3 (exantema coital). - Bacteriana: geralmente secundria a infeco viral, Streptococcus, Klebsiella, Pseudomonas, Taylorella equigenitalis (metrite contagiosa eqina). - Protozoria: Trypanosoma equiperdum (durina), transmitida pelo coito (mal do coito). - Parasitria: Habronema sp. - Traumtica: coice, vagina artificial, cauda da gua. Diagnstico: clnico (impresso visual), bipsia para identificar o agente. Tratamento: anti-sptico, higienizar, AINEs, antibitico (se bacteriana), repouso sexual. Em caso de habronemose, pode ser feita a remoo cirrgica da leso. Neoplasias mais comuns: papiloma escamoso (benigno), carcinoma das clulas escamosas, melanoma, sarcoide (benigno comum em eqinos e confunde-se com habronema). Para identificar faz-se bipsia.

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Inseminao Artificial
Conceito Deposio mecnica do smen no aparelho genital da fmea. Compreende as seguintes operaes: - Coleta do smen. - Manipulao do smen; - Inoculao da dose de smen no aparelho genital feminino, visando a fecundao. Histrico - 1322 Os rabes utilizaram o mtodo em eqinos. Um Sheik rabe desejava fecundar suas guas com o garanho de uma tribo rival, mas o chefe da tal tribo no permitia. Na calada da noite, homens enviados por esse sheik foram at a tribo rival e levaram uma fmea no cio. Quando o garanho foi cobri-la, desviaram o pnis e o fizeram ejacular em uma esponja. Retornaram tribo, espremeram a esponja na vagina da gua e ela emprenhou. Esse relato existe, mas no se pode comprovar sua veracidade. - 1779 Foi feita a primeira inseminao artificial como tal, em uma cadela (Spallanzani). - 1912 Os russos deram carter de grande escala a inseminao. - 1930 Desenvolvimento da vagina artificial (russos). - 1940 Foi introduzida no Brasil. - 1960 Expanso com a criao das empresas de inseminao particulares. A inseminao foi a maior descoberta dentro do campo da veterinria e aumentou a produo de alimentos (carne, leite e derivados). Vantagens e limitaes - Vantagens: - Acelera o processo de melhoramento gentico. - Proporciona o armazenamento de smen de animais comprovados por tempo indeterminado (teste de prognie). - Ajuda a evitar a consanginidade.

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- Facilita a estao de monta com uma s coleta pode-se inseminar vrias fmeas. - Permite a estocagem e transporte de material gentico resfriamento e congelamento. - Favorece o uso de reprodutores impossibilitados de realizar a cpula doenas locomotoras. - Auxilia o controle de doenas sexualmente transmissveis. - Permite o uso de smen de animais que perderam a capacidade reprodutiva ou que morreram smen congelado armazenado. - Aumenta a taxa de prenhez em animais sub-frteis. - Diminui as injrias causadas durante a cpula. - Permite o uso de animais mais idosos. - Desvantagens: - O uso intensivo de determinado reprodutor traz problemas de consanginidade tem ocorrido nas raas Gir e Nelore. - Necessita de mo de obra treinada. - Necessita de acompanhamento tcnico.

Inseminao artificial (IA) nas diferentes espcies

Bovinos: o alto interesse econmico, associado as caractersticas do smen desta espcie (alta concentrao e adaptabilidade ao congelamento), fazem com que a tcnica de conservao de smen e de inseminao artificial seja a mais desenvolvida. Eqinos: a inseminao no to difundida quanto em bovinos devido as restries de associaes e criadores, alm de a eficincia na congelao do smen de eqinos ser baixa (muita perda na qualidade). Sunos: o varro fornece baixa concentrao de smen, as tcnicas de conservao no so muito satisfatrias e no h grande interesse econmico. Ces: atualmente tm aumentado o nmero de pesquisas com estes animais. Possuem baixa concentrao do smen e dificuldades na manipulao do ciclo estral com hormnios.

Implantao do programa de IA
Para implantar um programa de IA em uma propriedade, necessrio seguir os seguintes passos: - Promover uma seleo zootcnica dos animais a serem inseminados. 43

- Fazer um levantamento sanitrio e ginecolgico destes animais: separar as fmeas gestantes das no gestantes. - Orientar a aquisio de se smen de centrais idneas. - Indicar o treinamento de mo de obra. - Implantar um rigoroso esquema de controle e identificao de cio. - Eliminar o touro da propriedade. - Promover a correo da nutrio. - Ter assistncia veterinria peridica.

Deteco de cio
- Vaca: durao do ciclo 21 dias. Estro 12 a 16 horas. -Caractersticas: - Deixa ser montada por outras vacas ( a mais importante). - Monta em outras vacas. - Filamento mucoso pela vulva. - Mico e mugidos freqentes. - Edema de vulva. - Mudana de comportamento. gua: durao do ciclo 21 dias. Estro 5 a 6 dias. Diestro 15 dias. Caractersticas: - Fica parada. - Everte o clitris. - Libera muco e/ou urina. - Eleva e coloca a cauda para o lado. - Edema de vulva. - Aceita a monta. Mtodos de deteco de cio:

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Visual: 2 x ao dia (manh e tarde). Rufio: 2 tipos: Machos tratados cirurgicamente (vasotomia, deferentectomia, desvio lateral, desvio ventral, aderncia de pnis e penectomia) ou Fmeas androgenizadas ( mais caro, pois h necessidade de manuteno do medicamento de 20 em 20 dias propionato de testosterona). Exame do aparelho reprodutor: palpao retal, ultra-sonografia

Esquema de inseminao (Chimball)

Vaca: mtodo retrovaginal intracervical mdio (onde ocorre a deposio do smen). gua: a deposio se d no corpo do tero. - Momento ideal para inseminar - O mais prximo possvel da ovulao (2h antes ou 2h depois). - Possvel: 12h antes ou aps a ovulao. - A IA feita antes ou aps a ovulao costumam ter taxa de fertilizao igual, mas a maior taxa de mortalidade embrionria ocorre em inseminaes feitas ps-ovulao (constatao feita por trabalhos cientficos). O momento ideal para a inseminao em vacas entre 18 e 24 horas aps o incio do cio. Deve-se levar em conta o tempo de sobrevivncia dos gametas: - Ocito 10 horas. - Sptz 30 horas. A ovulao nas vacas ocorre no metaestro (18 a 24h aps o incio do cio). A capacitao espermtica leva 6 horas. Portanto, vacas que entram no cio pela manh devem ser inseminadas tarde, e as que entram no cio tarde devem ser inseminadas na manh do dia seguinte.

Coleta de smen
Deve-se seguir os seguintes passos: - Escolher bem o local da coleta deve ser um local tranqilo, arejado, que no estresse o animal e no oferea riscos de acidentes (verificar o piso, a higiene), limpo, plano, ensolarado (evita que haja umidade ou mofo no local). Cho de terra ou de areia no so aconselhveis, (pois levantam poeira e esta pode causar infeco). 45

- Preparao do macho: Limpeza do garanho (lavar o pnis com gua e secar). - Preparao da vagina artificial: Existem vrios tamanhos e vaginas adaptadas, cada uma prpria para uma raa. - Preparao da fmea ou manequim: conteno da gua. - Coleta. - Smen: - In natura: usa-se em seguida a coleta, sem fazer diluio. Possui tempo de vida curto. - Fresco: com diluidor (proporo de 1:1). - Resfriado: com diluidor (proporo de 2:1) e mantido em temperatura de 5C ( o ideal). Na rotina costuma se usar em isopor com gelo reciclvel (o usado para conservar vacinas), mas a temperatura no a ideal, devendo estar aproximadamente 12/13C, o que aceitvel. - Congelado: com diluidor (proporo de 3:1). Usa-se nitrognio lquido (geralmente acondiciona-se em palhetas). Smen fresco deve conter no mnimo 150 milhes de espermatozides por dose (norma do Ministrio da Agricultura). De acordo com a concentrao coletada dividemse as doses. Smen congelado deve conter 250 milhes de espermatozides por dose, pois a perda na descongelao maior. O diluidor aumenta a viabilidade (vigor e mobilidade) dos espermatozides. Quando se resfria ou congela deve-se aumentar a quantidade de diluidor 2:1, ou 3:1. Lembrar que a fresco 1:1. O smen resfriado fornece maior fertilidade se utilizado at 24h. No Equitaner (prprio para armazenar smen resfriado, mantendo a temperatura de 5C) se mantm por 48h, mas ainda assim a taxa de fertilidade maior se usado at 24hrs. Ao colocar o smen (que est em temperatura ambiente) neste equipamento, a temperatura comea a cair de forma gradual at atingir 5C e se mantm. Observao: o smen bovino se adapta melhor aos diluidores para congelamento que o smen do eqino. Por isso quase no se usa smen congelado de eqino, s se usa para armazenar fora da estao de monta. Durante a estao, usa-se o smen resfriado. O smen congelado de bovino tem a viabilidade de 70 a 80%. O de eqino de 50% em mdia . 46

Materiais usados para IA

- Maleta de inseminao artificial: Deve conter: a. O smen que ser utilizado. b. Luvas de palpao. c. Pipetas. d. Seringa de 20ml. - Material para smen resfriado ou congelado: 1. Banho-maria ou isopor com gua a 37C. 2. Botijo. 3. Bainha (protetor do aplicador ele reveste o aplicador usar e jogar fora). 4. Aplicadores (para palheta funciona como uma seringa). 5. Termmetro para medir a temperatura da gua. 6. Cortador de palheta ou tesoura (a palheta vem lacrada e envasada). - Tipos de embalagens de smen para congelar: Pellets bolinhas do tamanho de um gro de feijo Ampolas de vidro 0,8cm. Minitubos so de plstico Alemanha 0,3cm. Palheta fina plstico, 0,25cm. Macrotubo 4ml. Palheta mdia plstico 0,54cm, a mais usada atualmente Frana. Cada embalagem possui tempo e temperatura de descongelao prprios.

- Avaliao de rotina de smen em laboratrio Material a 37C. Filtragem do gel. Avaliao macro e microscpica. Adio do diluidor 1:1, 2:1, 3:1. Espectrofotmetro coloca-se 1 gota de smen e ele d a concentrao.

- Smen fresco Vol. 60 a 150ml. Cor branco acinzentado. 47

pH 7,2 Motilidade maior ou igual a 70% Vigor maior ou igual a 3. Concentrao 150 x 10. Patologias menos que 30%.

- Smen congelado Nem todos os garanhes apresentam smen congelvel. Podem apresentar baixo rendimento por coleta (10 a 15 doses). Necessidade de rigoroso controle folicular (inseminar o mais prximo possvel da ovulao). Em bovinos a mdia de 500 doses com uma taxa de prenhez muito mais alta que em eqinos (que de apenas 20 a 30 %). - Dose para inseminao Bovinos: 12 milhes. Ces: 200ml. Sunos: 2 bilhes. Eqinos: 150 a 500 milhes de espermatozides com motilidade progressiva. Na cobertura natural so 5 bilhes (a dose toda). 100 milhes no recomendada (leva a queda na taxa de prenhez).

- Procedimento para inseminao Em vacas usa-se a palpao retal para guiar a pipeta at o corpo do tero. Sente-se a crvix e a passagem da pipeta. Em guas introduz-se a mo juntamente com a pipeta na vagina, para proteger a mucosa. Introduz a pipeta at o corpo do tero.

Tecnologia do Smen preservao do smen

Diluidores de Smen Existe diferena entre diluidor e conservador, apesar de na rotina de usar o termo diluidor para ambos. Devem ser misturados ao smen coletado 2 a 5 minutos psejaculao. 48

Diluidor: aumenta o volume do smen. Ex: Soro Ringer. Apenas aumenta o volume, no conserva. Conservador: quando o lquido diluidor alm de aumentar o volume oferece ambiente favorvel a manuteno da vitalidade dos espermatozides. Os agentes que compreendem os bons meios diluidores devem apresentar as seguintes funes: - Subministrar nutrientes como fonte de energia: geralmente a base de acares (glicose, sacarose). importante o conhecimento da bioqumica do smen (que se atualiza a cada dia, com diversas pesquisas) para adequar a fonte de energia espcie. - Proteo contra o efeito prejudicial do resfriamento rpido: lipoprotenas (leite e gema). A membrana plasmtica dos sptz possui lipoprotenas, portanto as lipoprotenas do leite e da gema protegem essas membranas dos efeitos do resfriamento (choque). O leite mais usado para resfriamento e a gema para congelamento. O ovo deve ser fresco. Hoje em dia j no mais necessrio fabricar o diluidor, pois se compra pronto por um preo bem acessvel. - Inibio do crescimento bacteriano: antibiticos, como penicilina, amikacina (o mais usado), gentamicina. - Subministrar um tampo para prevenir mudanas prejudiciais no pH: neutralizam os metablitos. - Manuteno da presso osmtica apropriada e equilbrio eletrnico: evitar a troca de ons. Ex: bicarbonato. - Aumentar o volume do smen. Classificao dos diluidores Obedecendo as regras descritas por Mac Pherson (1966). Diluidores qumicos: funo de aumentar o volume do ejaculado. O tipo apresentado pela soluo isotnica de cloreto de sdio. Diluidores base de ovo: como exemplo temos o diluidor padro, a soluo tampo de citrato de sdio e gema de ovo, ou soluo de fosfatos e gema de ovo. Diluidores contendo gelatina: a gelatina contm aminocidos. Foi preconizado por Milovanovo. Nestes diluidores, a gelatina associada a fosfato-gema comprovou a presena de aminocidos, como por exemplo a glicina, que favorvel a conservao do smen. Diluidores base de leite em p: maior facilidade no preparo e menor custo. Usa-se preferencialmente o leite desnatado, com adio de glicerol. Para o smen resfriado preconizado este tipo de diluidor. Diluidores base de sucos vegetais: como exemplo temos cenoura, gua de coco, com ou sem adio de gema de ovo. 49

Diluidores com CO2: inclui os lquidos saturados com CO2. So pouco usados. Diluidores para smen congelado: qualquer diluidor que se adicione glicerol (que um excelente crioprotetor). O glicerol acima de certa concentrao tem efeito txico para os espermatozides, mas na concentrao usada em diluidores no causa problemas. Mac Pherson considera um ltimo grupo, qualificados para uso experimental, que ainda no h disponibilidade no mercado (esto sendo usados apenas sob pesquisa), que so o sangue integral, soro sangneo, albume de ovo, secrees de glndulas anexas e solues de acar.

Observao: Quando o smen vai ser congelado, primeiro resfria-se para depois congelar. Portanto usa-se dois diluidores: um para resfriar e outro para congelar. Dentre as substncias que podem ser empregadas na constituio dos diluidoresconservadores, destacam-se as seguintes: Citrato de sdio: atua como tampo e como regulador do equilbrio osmtico no smen para congelamento, impedindo o rpido ingresso do glicerol no espermatozide. Gema de ovo: protege o espermatozide do choque trmico, mediante a lecitina (protena contida na gema). Tem efeito energtico, mediante a glicose. Leite: protege o espermatozide do choque trmico, mediante a casena (mas que desnatura se fervida). Glicerol: protege o espermatozide do choque trmico em temperaturas abaixo de 0C. desidratante e estimula o consumo de oxignio. Dimetilsulfxido (DMSO): possui um efeito desidratante sobre o espemermatozide (usado para congelar). Fosfatos: como o citrato, possuem efeito tampo no smen. Glicdios: substncias no eletrolticas. Sacarose, lactose, rafinose. Atuam na membrana celular, impedindo o rpido ingresso do glicerol, mantendo assim o equilbrio osmtico. EDTA (tetracetato de etilenodiamina): evita a aglutinao dos espermatozides, principalmente em smen eqino centrifugado. bacteriosttico e inativador da membrana. Plasma seminal: inativador de acrosina. Antibiticos: protetores contra microorganismos contaminantes. Sulfas: so redutoras do metabolismo e agentes antimicrobianos. Gelatina: possui o aminocido glicina, que um timo conservador. Produz bom aporte nutritivo. CO2: promotor de anabiose. Amilase, B-Glucuronidase: efeito capacitante.

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Observao: O ideal testar vrios diluidores at encontrar um que se adapte bem ao smen do animal que est sendo o doador (caso a espcie ou raa no tenha um diluidor de eleio, ou o animal em questo no tenha se adaptado a este). Deve-se analisar o smen ao coletar e depois de adicionar o diluidor. Caso o smen coletado esteja normal, mas ao adicionar o diluidor os espermatozides se apresentem com cauda enrolada, significa que houve alterao no pH (desequilbrio osmtico).

Conservao do smen
- Obteno do smen visando condies mximas de pureza, equilbrio trmico e osmtico. - Eliminao das secrees secundrias: centrifugao (despreza o sobrenadante e fica com o depositado). - Adio de lquidos conservadores: no depositado. - Diminuio da atividade dos espermatozides.

Transporte do smen
Smen refrigerado: devidamente protegido por envoltrios e mantidos em justaposio ao recipiente com gelo (equitaner ou isopor). Geralmente leva-se no prprio saco coletor (com a ponta amarrada para evitar vazamentos), devendose embrulh-lo com papel toalha, colocar em um copinho e depois no isopor. No deixar que o gelo encoste no copinho. Smen congelado: em recipientes especiais (botijes), depois de envasados em ampolas, em palhetas ou concentrado em pellets.

Processamento do smen
- Congelamento Fluxograma: - Na coleta, todo o material que ter contato com o smen deve estar a 37C. - Faz-se a avaliao do smen. - Procede-se o clculo do volume de diluidor a ser acondicionado (de acordo com a concentrao coletada).

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N. de doses = Volume coletado x Motilidade x Concentrao x % de morte N. de espermatozides por dose N. de espermatozides por dose: - Em bovinos 10 x 10 - 20 x 10 de espermatozides. - Em caninos 100 a 400 milhes de espermatozides. - Diluio do smen: usa-se metade do volume total calculado, pois primeiro ir resfriar para depois congelar. - Resfriar gradativamente a 5C (leva em torno de duas horas) no equitaner. - Adiciona-se o restante do diluidor acrescido do crioprotetor (glicerol). - Repouso de 4 a 6 horas na geladeira. Esta etapa pode ou no ser feita, mas fornece maior estabilidade. - Envasar o smen em palhetas. - Colocar o smen envasado a 5cm de altura no vapor de nitrognio por 20 minutos (a temperatura que chega a palheta de -78C). - Vira-se a bandeja onde esto acondicionadas as palhetas e mergulha-as no nitrognio (temperatura de -196C). As doses (espermatozides) so acondicionadas de trs formas: - Palhetas de cloreto de polivinil contendo 0,25 (fina) a 0,54ml (mdia) de smen diludo: para eqinos usa-se 4 palhetas por aplicao, por gua (para compensar a perda que ocorre com a descongelao). - Ampolas de vidro com capacidade para 0,5 a 1ml. - Palhetas de 0,1 a 0,2ml: era mais usada para ces, mas atualmente as mais usadas so seringas j prontas, com o smen. - Palhetas de macrotubos (1 a 2ml): seria ideal para eqinos, mas no h aplicadores compatveis.

Biotecnologia da transferncia de embries

Vantagens da transferncia de embries

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- Incremento da influncia materna no rebanho: obteno de mais de um potro por gua por ano. - Obteno de gestao de guas idosas e sub-frteis. - Obteno de potro de guas muito jovens (que ainda no possuem estrutura para manter a gestao). - Coleta de embries de guas atletas (que no podem gestar em determinadas pocas do ano, pois esto em trabalho de pista). O mtodo GIFT uma tcnica que coleta (por aspirao) o vulo do folculo ovulatrio em guas. Este mtodo usado em guas com problemas de gestao (que apresentam inviabilidade para gestar). Faz-se a inseminao in-vitro no laboratrio. Em vacas faz-se aplicao de hormnios anlogos que promovam a superovulao. Dessa forma coleta-se vrios vulos por vez. S deve-se fazer transferncia de embrio (coleta de vulo) em guas que tenham qualidades genticas e morfolgicas superiores a mdia do padro racial, pois a inteno o melhoramento gentico. A gua doadora deve: estar bem nutrida; ter caractersticas genticas muito boas; deve ter sanidade fsica e estar com a vacinao em dia. - Mtodos de transferncia: Mtodo cirrgico: realizao de cirurgia pelo flanco inciso no tero e introduz-se o embrio, coletado da doadora, por sonda. Os ndices de prenhez eram altos (85%), mas o custo era elevado e com o tempo (vrias cirurgias) invibializava a receptora. Essa tcnica no se usa mais. Mtodo no cirrgico: utilizao de cateter atravs da crvix. Tcnica infinitamente superior a cirrgica, pois alm de no efetuar a cirurgia (riscos obtidos com essa tcnica), no tem ps-operatrio, mais barata, mais simples e tem bons resultados. A tcnica padronizada e o embrio depositado no tero.

Instalaes e procedimentos - Laboratrio. - Sala de lavagem e esterilizao do material. - Sala de manipulao do embrio. - rea de conteno e higienizao das guas: a lavagem das fmeas deve ser feita antes e fora da sala de manipulao. - rea de transferncia:

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- Ter uma janela fundamental, pois se o local for muito quente, o embrio vai se enrugando (sofre desidratao). - O local no deve ter poeira. - Seleo do garanho: - Alto perfil gentico. - Avaliao do smen. - Inseminao artificial com o smen fresco, preferencialmente, pois a taxa de fertilidade maior. - Utilizao de smen refrigerado taxa de fertilidade menor que a fresco, mas maior que congelado. - Manejo de guas doadoras: Seleo: - Histria reprodutiva - Idade - Custo o produto desta fmea ira cobrir o custo da transferncia? Avaliao: Exame genital (palpao retal, ultra-som, especulo), avalia-se: - Vulva, ovrios, crvix, tero (USG). - Citologia e Bipsia (suspeita de algum problema reprodutivo). - Avaliar os ovrios, verificar se h folculo. A ovulao contada como dia zero. - Controle do cio e ovulao: - Manuteno de 3 receptores para uma doadora. - Anestro iluminao artificial para estimular a ovulao. - Perodo transicional (entre diestro e estro). - Ciclo normal sincronizao de cio (hormonioterapia). - Manejo das receptoras: - Vacinao e quarentena. - Alimentao. 54

- Iluminao artificial. - Palpao retal, citologia, bipsia, ultra-som. - Deteco de cio (esperar 2 ciclos normais): Faz-se a padronizao (sincronizao de cio) da doadora com as receptoras, que devem estar ovulando 3 dias antes ou 3 dias depois da doadora. O ideal que a doadora ovule 1 ou 2 dias antes da receptora, ou seja, doadora no D7 e receptora no D5 ou D6, pois no D5 ela ainda ir comear a fazer o reconhecimento do embrio e conseqentemente da gestao. H na literatura relatos e trabalhos publicados de que trabalhando desta forma as confirmaes de gestao so bem maiores (principalmente quando a transferncia ocorre no D6 da receptora). - Metodologia de transferncia de embries: - Conteno e higienizao da doadora. - Colheita do embrio com 7 dias (6 a 8 ). - Localizao e manipulao do embrio. - Transferncia do embrio para gua receptora. - Material usado: -A crvix deve ser aberta com o dedo. -Seringa 20ml. -Sonda ou cateter uterino para eqinos. -Soluo ringer com lactato ou PBS. -Placa de Petri. -Filtro para reter o embrio (75 micras). -Seringa de insulina. -Tom cat (aspira o embrio). -Palheta de smen. -Ovulador. -Filtro (membrana de esterilizao a campo). -Soluo de manuteno do embrio. -Luvas estreis e luvas de palpao.

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- Etapas: A primeira etapa a fertilizao da doadora (ou por inseminao ou por monta natural). A segunda etapa o lavado uterino, onde ocorre a retirada do embrio da doadora (lavado e manipulao). A ltima etapa a inovulao, que deposio do embrio dentro do aparelho reprodutor da gua receptora. Lavado uterino: o lavado uterino feito entre 6,5 a 8,5 dias do embrio. Acima de 9 dias o embrio pode romper facilmente. - Tcnica de colheita: Preparo da doadora. Conteno. Higienizao da genitlia: lavar com gua e sabo, depois com uma soluo de iodo (ou outro antissptico), secar com uma gaze ou papel toalha. Ligar a cauda. Introduzir o cateter para efetuar o lavado (sonda). Colocar a luva, lubrificar com KY. O cateter introduzido com palma da mo, at encontrar a crvix (o cateter deve atravessar a crvix, portanto deve-se abrir um pouco a crvix com o dedo indicador, pois ela deve estar um pouco fechada). O gift deve ser fixado na crvix (inflar o balozinho). Na gua o balo deve ficar bem na crvix e na vaca deve-se direcionar o lavado para o corno uterino onde ocorreu a gestao, pois na vaca o embrio se fixa no corno do lado onde ocorreu a ovulao. Na gua isso no ocorre, pois embrio tem mais motilidade e com isso pode-se fixar em qualquer um dos lados. Devese introduzir o soro de uma s vez, sem permitir retorno. 70% dos embries vm no primeiro lavado e os outros 30% vm entre o 2 e o 3 lavados. O mximo que se faz so trs lavados. O filtro nunca deve ficar seco, (deve ficar com pelo menos 2 dedos de soro), porque o embrio pode colabar no filtro e morrer. comum no lavado o lquido estar com clulas de descamao.

- Material utilizado para localizao do embrio: Tubo falcon, de 3,5ml de meio (HAM). Palhetas. Uma seringa de insulina com um adaptador (para adaptar as palhetas). Meio de manuteno do embrio (HAM F10 com BSA da Nutricel). 56

Uma seringa e uma agulha. Placa de Petri (para facilitar a colocao do embrio). Coloca-se a placa de Petri em uma lupa (microscpio) e deposita-se todo o contedo do filtro na placa. Se aparecer uma espuma no filtro, pega-se uma seringa, enche-a com o soro ringer com lactato e lava-se com presso (leve) de forma que a espuma caia na placa de Petri, ento procura-se o embrio.

No se deve usar soro fisiolgico, pois hipertnico e pode matar o embrio.

Classificao do embrio, quanto fase do desenvolvimento embrionrio

- Em eqinos: mrula compacta. blastocisto-inicial. blastocisto-expandido: comea a haver blastocele, que um espao vazio.

- Em bovinos: mrulas em estgio inicial. mrula. blastocisto.

Em eqinos no se v mrulas em estgio inicial. Dificilmente se v uma mrula compacta, normalmente j se v como blastocisto.

O embrio
- Qualidade do embrio: Grau 1 e grau 2 so os que devem ser usados. O grau 3 at pode ser usado. O grau 4 e grau 5 devem ser desprezados.

Grau 1 Excelente. Embrio ideal, com clula de tamanho, cor e textura uniforme. Grau 2 Bem, com poucas imperfeies. 57

Grau 3 Regular, problemas definidos. Grau 4 Pobre, problemas severos. Grau 5 No fertilizado ou morto.

- Preparo da placa para lavagem do embrio: Pega-se outra placa de Petri e coloca-se vrias gotinhas do meio de manuteno do embrio (10 gotinhas, uma ao lado da outra sem ter contato). Coloca-se o embrio na primeira gotinha, depois passa para a segunda e assim sucessivamente at a ltima gota, com isso o embrio vai ficar limpo. O embrio aspirado com a palheta acoplada a seringa e uma placa deve estar ao lado da outra. - Transferncia para placa de manuteno Coloca em uma placa de Petri 3 gotas de meio de manuteno e coloca o embrio na primeira gota e o deixa aguardando. Quando chegar a hora de usar, coloca-o embrio na terceira gota e usa o embrio. Outra tcnica colocar o embrio depois de limpo no tubo falcon. Coloca o nome da doadora e deixa o tubo de p, pronto. aconselhvel deixar o embrio descansando no meio de manuteno. Dentro do tubo falcon o embrio fica no meio de manuteno. - Seleo das guas receptoras: A receptora deve estar sincronizada com a doadora. O ideal que a receptora ovule um ou dois dias depois da doadora. Devem ter o tero sadio, trgido, tubular, sem histrico de patologias. - Envase do embrio: feito com uma pipeta. Primeiro pega-se um pouco de meio de manuteno, em seguida puxa-se um pouco de ar e depois o embrio. Puxa-se ar novamente e pega-se meio de manuteno de novo. O embrio ficar no meio de duas bolhas de ar. Depois que o embrio j estiver dentro da pipeta, coloca-se uma camisa sanitria. Depois que introduzir na vagina, a camisa ir proteger a pipeta. Na entrada da crvix, fora-se a pipeta e rompe-se a camisa, com isso evita contaminao com as secrees

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da vagina. Joga-se o embrio no meio do corpo uterino, se for na vaca, no corno onde est o ovrio com corpo lteo. Cinco a sete dias aps, faz-se o ultra-som e o diagnstico da prenhez. - Manejo reprodutivo: Controle folicular eficiente, obrigatoriamente a cada 24 horas (palpar). Coberturas ou inseminao artificial no momento apropriado: importante ser pr-ovulatria e eventualmente ps-ovulatria. Manejo ps-colheita: controlar condies uterinas de forma a fazer uma limpeza no prximo ciclo.

Reproduo em pequenos animais

Bases fisiolgicas do aparelho reprodutor feminino de cadelas - Anatomia: 2 ovrios 2 tubas uterinas 1 tero do tipo bicornual 1 crvix Vagina, vulva, clitris

- Ciclo estral:

Puberdade: de 6 a 12 meses. Intervalo interestral 5 a 12 meses. Referenciada como uma espcie monostrica estacional

Raas menores costumam entrar na puberdade primeiro que as raas grandes e as fmeas primeiro que os machos. Fmeas de raas pequenas com 1 ano j podem cruzar (j tem maturidade).

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H casos slips steps, que so fmeas que entram em cio de 2 em 2 meses, no conseguem levar a gestao diante (mas no tem cistos ovarianos o que poderia ser a causa do problema) e devem ser retiradas da reproduo. A raa Basenji a nica que cicla apenas uma vez ao ano. A fmea ovula no Pico de LH. Aps a ovulao h queda de estrognio e aumento de progesterona.

- Ovulao: Ocorre de maneira sincrnica entre 24 a 72hrs aps o pico de LH. Ovula ocito primrio. Maturao ocorre no oviduto (particularidade da espcie canina).

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- Gestao: 58 a 63 dias.

Ciclo estral
Observao: Metaestro subseqente ao estro. Diestro fase que j possui progesterona. Na cadela no se deve usar como sinnimo, pois as clulas da granulosa produzem progesterona antes do corpo lteo formado. - Proestro: Durao mdia 7 a10 dias; Edema de vulva; Descarga vaginal hemorrgica; 61 Proestro. Estro: nesta fase j h progesterona atuando. Metaestro/Diestro: muitos autores no classificam como o mesmo perodo (por j haver progesterona atuando no estro). Anestro: quiescncia.

- Estro: -

Atrao do macho; A fmea no se deixa montar; Secreo de progesterona.

Durao mdia de 9 dias; Edema vulvar; Diminuio da descarga vaginal (algumas continuam sangrando e j esto no cio); Aceitao do macho aceita brincadeiras, a corte e a monta; Pico de LH; Declnio do estrgeno; Aumento de progesterona

Observao: A inexperincia do macho ou da fmea, pode ser indicativo de inseminao. Vrios fatores devem ser levados em conta, como por exemplo: experincia; o local onde ocorrer cpula; o piso (se for escorregadio, atrapalha a monta); platia. - Metaestro: 75 dias. No mais receptiva ao macho. Nvel de progesterona se mantm elevado mesmo se no ocorrer prenhez (portanto no se pode levar em conta o exame de dosagem de progesterona para confirmar prenhez nesta espcie).

Para identificar o perodo, faz-se a citologia vaginal: metaestro (vrios tipos celulares), estro (clulas superficiais). - Anestro: 125 dias, Quiescncia do trato reprodutivo e eixo hipofisrio-hipotalmico, Induo uterina completa

Colpocitologia
- Clulas do epitlio vaginal: 62

Clulas basais (P) arredondadas. Relao ncleo-citoplasma maior (ncleo grande). Clulas parabasais (P) ovais, tambm com ncleo grande. Clulas intermedirias (I) irregulares, ncleo menor. Sofrem ao hormonal. Quando se encontram dobradas (forma de envelope) significa ao estrognica. Clulas superficiais (S) Hiperquetatinizadas (mortas). anucleadas ou com ncleo picntico.

As clulas basais e parabasais so chamadas de profundas (P). Deve-se sempre avaliar a relao ncleo citoplasma para identificar os tipos celulares. O ideal em uma inseminao em ces acompanhar todo o ciclo da fmea, desde o anestro fazendo coleta mensal para citologia. Sempre avaliar a relao ncleocitoplasma. Ex: Contagem de 100 clulas P- 10% I- 10% S- 80% No exemplo acima significa que houve cobertura no perodo frtil (80% de clulas superficiais e presena de sptz). Caso no seja uma cobrio assistida e haja suspeita de cobertura, faz-se a confirmao com a citologia. Se o proprietrio no quiser que a fmea tenha filhotes pode-se induzir o aborto. - Outras clulas: 63 Bactria- Neutrfilo- Sptz- ++

Clulas de metaestro (classificada dessa forma porque foram encontradas primeiramente nesta fase, apesar de serem encontradas tambm em outras fases). uma clula com um neutrfilo dentro. Eritrcitos, Neutrfilos. Clulas espumosas, clulas intermedirias com presena de vacolos no citoplasma.

Observao: Flora de Doberline em primatas e mulheres, muitas bactrias e neutrfilos so encontradas, mas normal.

Alteraes na citologia vaginal nas diferentes do ciclo

No proestro: predominncia de clulas superficiais (80%), numerosas hemcias (descarga vaginal) e alguns neutrfilos. A lmina no proestro uma lmina suja, com muitos tipos celulares, bactrias, muco. No estro: predominncia de clulas superficiais e intermedirias (80 a 100%). No se encontram outras clulas. A lmina no estro limpa, com ausncia de bactrias e tipos celulares. No metaestro: predominncia de clulas intermedirias e parabasais, superficiais (20%), hemcias, neutrfilos, clulas do metaestro e espumosas. No anestro: predominncia de clulas intermedirias e parabasais, esfregao pobre em clulas superficiais, hemcias, e raros neutrfilos.

Na citologia, avaliar a presena de: Bactrias Fragmentos celulares Clulas endometriais Clulas neoplsicas Sptz

Tcnica para efetuar o esfregao: Usar lmina fosca para escrever o nome do animal. 64

Lamnula se o corante for para Papanicolaou. Blsamo do Canad: para colar a lamnula na lmina. Pote de transporte. Espculo: pode ou no ser usado em fmeas muito peludas facilita a no contaminao por plos. Usar o swab: introduzi-lo com a mo na vagina, inclinado para cima at sentir uma leve presso da parede interna da vagina. Coleta-se neste local. Rotacionar o swab na lmina: preparar no mnimo duas lminas.

Colorao da lmina: Whright-Giensa Diff-quick (pantico)- cora todas as clulas, o mais usado na rotina. Novo azul de metileno- no cora eritrcitos Papanicolau- so 5 corantes usados melhor para identificar patologias. Pantico: bateria de trs corantes. Mergulha a lmina em cada um, aguardando escorrer entre um e outro.

Ciclos anormais Anestro persistente: primrio (nunca entrou no cio); secundrio (j ciclou e no cicla mais: pode ser por carncia nutricional, afetiva - separao dos donos).

Anestro persistente primrio: Diagnstico: eliminar a possibilidade de ovariectomia prvia, ou a possibilidade de ter ciclado desapercebidamente pelos donos. Se tiver menos de 24 meses pode ser pr-pbere. Anestro persistente secundrio: Geralmente por alterao no eixo hipotlamo-hipfise-ovariano. Senilidade (maior de 6 a 8 anos). A raa Basenji cicla uma vez ao ano. 65

Stress severo. Tratamento com progesterona ou andrgenos.

Outras alteraes: Intervalos de interestros diminudos. Intervalos de interestros aumentados. Cio silencioso. Estro diminudo.

Patologias mais observadas

Vaginites Prolapso vaginal (edema vaginal cadelas exclusivamente durante perodos de estimulao estrognica - fazer histerectomia). Tipo1= identificado apenas com palpao vaginal Tipo2= pode progetar a vulva Tipo3= envolve a circunferncia Diferenciar de TVT - imprint e colorao. Hiperplasia endometrial cstica- ao da progesterona. Piometra. Cistos foliculares - clulas da granulosa que secretam estrognio: Proestro e estro prolongados.

Cistos luteinizantes - no atingem o pico de LH (liberao insuficiente durante o estro).

Concluso
O contedo desta apostila pretendeu informar ao estudante como proceder para avaliar a capacidade reprodutiva do reprodutor masculino, conhecer suas principais patologias, como diagnostic-las e trat-las, bem como implantar, orientar e manter um programa de inseminao artificial em uma propriedade. de fundamental importncia para propriedades que tem parte de seus lucros voltada para a reproduo de seus animais que mantenha um controle sobre a capacidade reprodutivas dos mesmos, portanto imprescindvel o controle androlgico dos reprodutores por um mdico veterinrio capacitado para isso.

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Bibliografia Consultada

ALLEN, W. E. Fertility and Obstetrics in horse. EUA: Blackwell Scientific Publications, 1988. HAFEZ, E.S.E.; B; HAFEZ. Reproduo Animal. 4 ed. So Paulo: Manole, 1995. MANUAL para exame androlgico e avaliao de smen animal, convnio MA/CBRA, n 021/1997. MARTINS, A.V.; KALIL, C.F. de M.C. Aulas ministradas durante curso de graduao em Medicina Veterinria na UNIFESO. Terespolis, 2006. MC KINNON, C H. Equine Reproduction. EUA: Lea & Febiger, 1993. MIES FILHO, A. Reproduo dos animais domsticos e Inseminao Artificial. Vol. I e II, 4 ed. Porto Alegre: Sulina, 1975. VALE FILHO, V.R. A evoluo da andrologia veterinria no Brasil e no mundo. Cad. Tec. Vet. Zootec., n.35, p.7-14, 2001.

Obs: As figuras esquemticas contidas no trabalho so de prpria autoria.

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