Manual de Genetica Medica (2007) PDF

Manual de gentica mdica
Autor(es):
Regateiro, Fernando J.
Publicado por:
Imprensa da Universidade de Coimbra
URL
persistente:
URI:http://hdl.handle.net/10316.2/3178;
URI:http://hdl.handle.net/10316.2/3178
DOI:
DOI:http://dx.doi.org/10.14195/978-989-26-0436-7
Accessed :
10-Feb-2015 12:51:42
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pombalina.uc.pt
digitalis.uc.pt
M a n u a l
d e
Gentica
Mdica
FERNANDO
J.
REGATEIRO
COIMBRA 2007
(Pgina deixada propositadamente em branco)
TTULO
Manual de Gentica Mdica

1. Edio 2003
1. Reimpresso 2004
2. Reimpresso 2007
AUTOR
Fernando J. Regateiro
COORDENAO EDITORIAL

CONCEPO GRFICA
Antnio Barros
DIAGRAMAS E PAGINAO
Victor Hugo Fernandes

EXECUO GRFICA
SerSilito Maia
ISBN
972-8704-12-7
ISBN DIGITAL
978-989-26-0436-7
DOI
http://dx.doi.org/10.14195/978-989-26-0436-7
DEPSITO LEGAL
202426/03
2003, IMPRENSA DA UNIVERSIDADE DE COIMBRA
OBRA PUBLICADA
COM O
PATROCNIO EXCLUSIVO
DE:
M a n u a l
d e
Gentica
Mdica
FERNANDO
J.
REGATEIRO
COIMBRA 2007
PREFCIO
Se recordarmos que o nmero exacto de cromossomas na espcie

humana apenas foi estabelecido em 1956 e que, ainda assim, o Genoma
Humano j foi quase integralmente sequenciado, perceptvel a velocidade
a que o conhecimento cientfico tem evoludo no domnio da Gentica.
Contudo, a especificidade deste progresso torna frequentemente difcil e
demorada a sua transduo em conhecimento beneficente para o doente ou
para quem esteja em risco.
Pela esperana que os avanos cientficos da Gentica representam para
quem sofre, o confronto com a novidade e as suas aplicaes reais ou
hipotticas j faz parte do quotidiano dos mdicos e demais profissionais de
sade. Os doentes e os cidados em geral esperam, particularmente do
mdico, respostas que enquadrem as suas expectativas ou que serenem as
suas inquietudes. Contudo, e dada a vastido e a complexidade dos
progressos da Gentica, apenas uma lgica e uma capacidade crtica assentes
em conhecimentos fundamentais podero responder s questes mais
frequentes e necessidade de aprender ao longo da vida.
Neste enquadramento, pareceu til elaborar um manual de Gentica
Mdica. No elenco de temas seleccionados, foram includos os que melhor
sustentam o raciocnio em bases genticas, dando-lhes um cariz objectivo e
uma formulao didctica. Para cada tema, foi seleccionada a informao
essencial para a percepo dos conceitos e a construo dos conhecimentos
fundamentais. A experincia acumulada com a leccionao nas licenciaturas
em Medicina e em Medicina Dentria da Faculdade de Medicina de Coimbra
e em cursos de ps-graduao, mestrado e doutoramento foi determinante
para as escolhas realizadas.
VI
Na gnese deste trabalho, encontra-se o exemplo dos mestres cujo

talento e dedicao levaram elaborao de textos e livros de que o autor
pde desfrutar enquanto estudante. Est tambm o exemplo do Prof. Doutor
Agostinho Almeida Santos, como regente da disciplina de Gentica Mdica
e responsvel pela equipa pedaggica que o autor teve o privilgio de
integrar, pela ateno e incentivo que sempre deu preparao de textos
de apoio para os alunos. E ainda o exemplo dos seus colegas docentes da
Faculdade de Medicina de Coimbra que continuam a deixar nos livros que
publicam e nos textos que disponibilizam todo um saber e uma reflexo
generosamente postos ao servio da educao mdica, fazendo da edio
de livros de cincia mdica, uma tradio da nossa Escola. O esforo de
aprendizagem a que se obrigam os seus alunos dos cursos pr-graduados e
ps-graduados constituiu tambm um forte estmulo para verter, neste
manual, a sua vivncia lectiva e experincia pegaggica.
Houve, da parte do autor, a preocupao constante de expurgar o texto
de erros conceptuais graves e de omisses grosseiras, para o que pde contar
com as sugestes e a esclarecida ajuda de uma pleiade de colegas que
procederam correco dos originais e reviso das provas, no todo ou em
parte. Contudo, a responsabilidade pelos erros ou omisses presentes, apenas
ao autor dever ser atribuda. Neste esforo de correco e de reviso, deseja
agradecer, penhoradamente, os valiosssimos contributos da Profa Doutora
Tice Anastcio de Macedo, dos Profes Doutores Agostinho de Almeida Santos,
Vasco Bairos, Srgio Castedo, Jorge Saraiva, Victor Rodrigues e Joaquim Sousa
Barros, das Dras Teresa Almeida Santos e Henriqueta Alexandra Coimbra e dos
Dres Manuel Lemos e Antnio Martinho. Um elevado agradecimento, pelos
contributos iconogrficos, tambm devido aos Profes Doutores Agostinho
Almeida Santos, Jlio Leite e Jorge Saraiva, Dra Teresa Almeida Santos e
aos Dres Manuel Lemos e Antnio Martinho. A apresentao da obra devida
ao primor do conceito esttico do Senhor Antnio Barros e a qualidade dos
diagramas e da paginao proficincia do Senhor Victor Hugo Fernandes.
A ambos, o autor testemunha profundo agradecimento. No seio da Imprensa
da Universidade tem o autor encontrado tcnicos e funcionrios com um superior sentido de dever e de dedicao merecedor de todo o reconhecimento.
Sincera gratido ainda devida aos Laboratrios ATRAL, pela generosidade
do apoio financeiro concedido.
Que este livro promova o conhecimento da Gentica Mdica e, atravs
dele, o respeito pela dignidade humana e pela diferena!
NDICE
PREFCIO ....................................................................................................
ABREVIATURAS .............................................................................................
XVII
...............................
Mendelismo ................................................................................
Bases cromossmicas da Gentica ..............................................
Bases moleculares da Gentica ...................................................
Prmios Nobel na rea da Gentica............................................
1
1
3
4
7
CAPTULO II. BASES CELULARES E MOLECULARES DA HEREDITARIEDADE ..............
Conceito de molcula informacional...........................................

Demonstrao da capacidade informacional do DNA .................
Pries como molculas informacionais........................................
Estrutura do DNA .......................................................................
Genes e genoma ........................................................................
Genoma mitocondrial..................................................................
Replicao do DNA .....................................................................
Replicao dos vrus de RNA ......................................................
Transcrio do DNA ....................................................................
Traduo do RNA mensageiro.....................................................
9
9
10
13
14
19
21
22
24
24
26
...........................................
Introduo ..................................................................................
Regulao da expresso gnica a nvel da replicao do DNA ...
Regulao da expresso gnica a nvel da transcrio ................
Regulao epigentica da transcrio .........................................
Processamento do RNAhn ..........................................................
Regulao da expresso gnica a nvel da traduo ...................
Regulao da expresso gnica a nvel da ps-traduo ............
Retrorregulao como mecanismo modelador da expresso gnica..
29
29
31
32
35
36
38
38
40
CAPTULO I. HISTRIA E DESENVOLVIMENTO DA GENTICA
1.
2.
3.
4.
1.
1.1.
1.2.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
CAPTULO III. REGULAO DA EXPRESSO GNICA
1.
2.
3.
3.1.
3.2.
4.
5.
6.
VII
CAPTULO IV. DIVERSIDADE HUMANA. MUTAES. REPARAO DO DNA .............
1.
1.1.
1.1.1.
1.1.2.
1.1.3.
2.
2.1.
2.1.1.
2.1.2.
2.1.3.
2.1.4.
2.1.5.
2.1.6.
2.2.
2.3.
3.
3.1.
3.2.
3.3.
3.4.
Diversidade humana....................................................................
Bases genticas da diversidade ...................................................
Contributo dos cromossomas .....................................................
Contributo do polialelismo..........................................................
Contributo dos polimorfismos de DNA ......................................
Mutaes do DNA ......................................................................
Tipos e locais das mutaes .......................................................
Mutaes pontuais......................................................................
Mutaes pontuais por substituio de uma base ......................
Mutaes por deleo ou insero de uma ou mais bases ........
Mutaes dinmicas....................................................................
Mutaes por fuso de genes ....................................................
Nomenclatura das mutaes ......................................................
Consequncias das mutaes .....................................................
Natureza das mutaes ..............................................................
Reparao do DNA .....................................................................
Reparao por exciso de uma base...........................................
Reparao por exciso de nucletidos ........................................
Reparao de erros de emparelhamento.....................................
Reparao de quebras da cadeia de DNA...................................
CAPTULO V. MTODOS DE ESTUDO DO GENOMA HUMANO ..............................
VIII
1.
2.
3.
3.1.
3.2.
3.3.
3.4.
4.
4.1.
5.
6.
7.
8.
Introduo ..................................................................................
Estudos de associao.................................................................
Estudos de ligao gnica...........................................................
RFLPs ..........................................................................................
VNTRs .........................................................................................
Limitaes dos estudos de ligao gnica...................................
Distncias genticas ....................................................................
Recombinao e clonagem de DNA............................................
Procedimentos para clonagem de DNA ......................................
Reaco de polimerizao em cadeia..........................................
Sequenciao do DNA ................................................................
Mapeamento fsico do genoma ..................................................
Microarrays .............................................................................
CAPTULO VI. HISTRIA FAMILIAR. HEREDOGRAMA ...........................................
1.
2.
2.1.
2.2.
Introduo ..................................................................................
Como elaborar uma histria clnica em Gentica........................
Recolha de dados sobre o propositus .........................................
Recolha de dados sobre a histria familiar..................................
41
41
42
42
43
44
46
49
50
50
52
52
53
54
55
57
60
61
62
63
65
67
67
68
70
71
74
75
76
78
80
84
87
89
91
93
93
94
94
95
2.3.
3.
3.1.
3.2.
3.3.
3.4.
Exame objectivo e meios complementares de diagnstico.......... 97

Heredograma .............................................................................. 98
Normas para a elaborao de um heredograma......................... 98
Indicaes para a elaborao de um heredograma..................... 102
Informaes que se podem obter de um heredograma.............. 102
Dificuldades na elaborao e interpretao de um heredograma.. 103
CAPTULO VII. TIPOS DE HEREDITARIEDADE ......................................................

1.
Introduo ..................................................................................
2.
Conceitos fundamentais para compreender a hereditariedade ...
3.
Critrios para identificao e excluso das situaes hereditrias
4.
Hereditariedade mendeliana........................................................
4.1.
Hereditariedade autossmica dominante.....................................
4.1.1. Sndroma de Marfan...................................................................
4.2.
Hereditariedade autossmica recessiva........................................
4.2.1. Fibrose qustica............................................................................
4.3.
Hereditariedade recessiva ligada ao cromossoma X ....................
4.3.1. Distrofia muscular de Duchenne .................................................
4.4.
Hereditariedade dominante ligada ao cromossoma X .................
4.5.
Hereditariedade ligada ao cromossoma Y ...................................
4.6.
Dificuldades de identificao das condies hereditrias ............
4.6.1. Mutaes letais ...........................................................................
4.6.2. Mutaes de novo ..................................................................
4.6.3. Mosaicismo gonadal ...................................................................
4.6.4. Polialelismo .................................................................................
4.6.5. Heterogeneidade gnica .............................................................
4.6.6. Pleiotropismo ..............................................................................
4.6.7. Penetrncia incompleta ...............................................................
4.6.8. Expressividade varivel ................................................................
4.6.9. Epistasia ......................................................................................
4.6.10. Influncia do sexo.......................................................................
4.6.11. Limitao ao sexo .......................................................................
4.6.12. Fenocpias ..................................................................................
4.6.13. Teratogneos...............................................................................
4.6.14. Paternidade extraconjugal...........................................................
5.
Hereditariedade no-mendeliana.................................................
5.1.
Hereditariedade polignica..........................................................
5.2.
Hereditariedade multifactorial .....................................................
5.2.1. Introduo ..................................................................................
5.2.2. Mtodos de estudo da hereditariedade multifactorial.................
5.2.2.1. Estudos populacionais.................................................................
5.2.2.2. Estudos de famlias .....................................................................
5.2.2.3. Estudos em crianas adoptadas ..................................................
105
105
107
109
111
111
114
114
117
119
122
123
124
125
125
126
127
127
128
130
131
132
134
135
135
135
136
136
137
137
138
138
139
140
141
141
IX
5.2.2.4. Estudos de gmeos e hereditabilidade........................................

5.2.3. Critrios para identificao das condies multifactoriais ...........
5.2.4. Factores que influenciam a recorrncia de condies
multifactoriais .............................................................................
5.2.5. Exemplos de patologia de natureza multifactorial.......................
5.2.5.1. Alcoolismo ..................................................................................
5.2.5.2. Atraso mental .............................................................................
5.2.5.3. Cancro ........................................................................................
5.2.5.4. Diabetes mellitus.........................................................................
5.2.5.5. Doena de Alzheimer..................................................................
5.2.5.6. Doena cardaca coronria ..........................................................
5.2.5.7. Doenas psiquitricas ..................................................................
5.2.5.8. Hipertenso arterial.....................................................................
5.2.5.9. Obesidade...................................................................................
5.3.
Hereditariedade mitocondrial ......................................................
5.4.
Imprinting genmico...............................................................
5.5.
Digenismo ..................................................................................
5.6.
Dissomia uniparental ..................................................................
5.7.
Mutaes dinmicas e antecipao.............................................
5.7.1. Sndroma do X-frgil...................................................................
142
144
CAPTULO VIII. GENTICA DE POPULAES .......................................................
167
167
169
170
171
174
176
176
177
1.
2.
3.
3.1.
4.
5.
5.1.
5.2.
5.3.
5.4.
X
5.5.
5.6.
5.7.
Introduo...................................................................................
Frequncia allica e genotpica....................................................
Equilbrio de Hardy-Weinberg.......................................................
Factores que afectam o equilbrio de Hardy-Weinberg ...............
Consanguinidade e endocruzamento .........................................
Exemplos prticos .......................................................................
Determinao da frequncia allica ............................................
Determinao da frequncia genotpica......................................
Determinao da frequncia allica, por conhecimento da
frequncia genotpica .................................................................
Aplicao do equilbrio de Hardy-Weinberg a condies
autossmicas recessivas ..............................................................
Aplicao do equilbrio de Hardy-Weinberg a genes
ligados ao cromossoma X ...........................................................
Efeitos da consanguinidade nas frequncias genotpicas ............
Clculos de consanguinidade e endocruzamento .......................
178
178
179
180
181
................................................................. 187
Introduo .................................................................................. 187
Risco absoluto e risco relativo..................................................... 188
CAPTULO IX. CLCULOS DE RISCO
1.
2.
145
147
147
148
149
149
150
151
152
153
154
155
157
160
161
162
163
3.
4.
5.
6.
7.
7.1.
7.2.
7.3.
7.4.
7.5.
7.6.
7.6.1.
7.6.2.
Risco emprico.............................................................................
Comunicao do risco ................................................................
Clculo de probabilidades: excluso e independncia
dos acontecimentos ....................................................................
O risco gentico em casos de casamentos consanguneos .........
Exemplos prticos de riscos genticos ........................................
Mutaes de novo ..................................................................
Mosaicismo gonadal ...................................................................
Hereditariedade mitocondrial ......................................................
Hereditariedade multifactorial .....................................................
Hereditariedade mendeliana........................................................
Clculo de risco pelo teorema de Bayes .....................................
Aplicao do teorema de Bayes numa condio recessiva
ligada ao X .................................................................................
Aplicao do teorema de Bayes numa condio autossmica
dominante de penetrncia incompleta........................................
CAPTULO X. ERROS INATOS DO METABOLISMO. FARMACOGENTICA. ECOGENTICA.
1.
2.
2.1.
2.2.
3.
3.1.
3.1.1.
3.1.2.
3.1.3.
3.2.
3.3.
3.4.
3.5.
3.6.
3.7.
3.8.
4.
4.1.
4.1.1.
4.1.2.
4.1.3.
4.1.4.
4.1.5.
4.1.6.
4.1.7.
Introduo...................................................................................
Erros inatos do metabolismo.......................................................
Fenilcetonria..............................................................................
Doena de Gaucher ....................................................................
Farmacogentica .........................................................................
Enzimas de metabolismo de genotxicos ...................................
Citocromo oxidase P450 .............................................................
Glutationa S-transferases ............................................................
N-acetiltransferases .....................................................................
Deficincia da G6PD e reaces adversas ...................................
Sensibilidade succinilcolina.......................................................
Metabolismo da isoniazida .........................................................
Hipertermia maligna....................................................................
Porfiria aguda intermitente .........................................................
Acatalsia....................................................................................
Perspectivas futuras.....................................................................
Ecogentica ................................................................................
Dieta e hbitos alimentares ........................................................
lcool e alcoolismo.....................................................................
Hipercolesterolmia familiar ........................................................
Favismo e deficincia em G6PD ..................................................
Dieta lctea e hipolactasia ..........................................................
Intolerncia hereditria frutose ................................................
Galactosmia ..............................................................................
Suplemento alimentar de ferro e hemocromatose ......................
189
190
192
193
194
194
195
196
196
197
200
200
202
203
203
204
206
209
210
212
213
215
216
216
217
218
218
219
219
220
220
222
222
223
224
225
225
226
227
XI
4.1.8.
4.2.
4.2.1.
4.2.2.
Deficincia em cido flico e defeitos do tubo neural................

Poluentes ambientais ..................................................................
Fumo e poeiras e deficincia em 1-antitripsina .......................
Insecticidas .................................................................................
227
228
228
229
CAPTULO XI. DIVISO CELULAR .....................................................................
231
231
232
235
237
239
1.
2.
3.
4.
5.
Introduo ..................................................................................
Ciclo celular ................................................................................
Mitose ........................................................................................
Controlo do ciclo celular.............................................................
Meiose ........................................................................................
CAPTULO XII. CARITIPO HUMANO ................................................................
1.
2.
3.
4.
5.
5.1.
6.
6.1.
6.2.
6.3.
7.
8.
9.
Introduo ..................................................................................
Caritipo humano.......................................................................
Indicaes para o estudo do caritipo ........................................
Mtodos de estudo dos cromossomas........................................
Bandeamento cromossmico.......................................................
Padres de bandas .....................................................................
Citogentica molecular ...............................................................
FISH ............................................................................................
Hibridao genmica comparativa ..............................................
PCR in situ ..................................................................................
Caritipo de tecidos tumorais .....................................................
Acrnimos e smbolos usados em citogentica ...........................
Exemplos de caritipos ...............................................................
CAPTULO XIII. ALTERAES CROMOSSMICAS NUMRICAS E ESTRUTURAIS .........
XII
1.
2.
2.1.
2.2.
3.
3.1.
3.2.
3.3.
3.4.
3.5.
Introduo ..................................................................................
Alteraes numricas ..................................................................
Poliploidia ...................................................................................
Aneuploidia.................................................................................
Alteraes estruturais..................................................................
Delees .....................................................................................
Duplicaes.................................................................................
Isocromossoma ...........................................................................
Inverses .....................................................................................
Translocaes ..............................................................................
243
243
244
247
248
249
250
251
252
254
254
255
256
258
263
263
264
265
265
268
270
273
274
275
276
CAPTULO XIV. CROMOSSOMOPATIAS ..............................................................
1.
2.
2.1.
2.2.
2.3.
2.4.
3.
3.1.
3.2.
4.
4.1.
4.2.
5.
5.1.
5.2.
5.3.
6.
6.1.
6.2.
6.3.
7.
8.
Introduo ..................................................................................
Trissomia 21 (sndroma de Down)...............................................
Aspectos clnicos .........................................................................
Alteraes cromossmicas ..........................................................
Risco de recorrncia e aconselhamento ......................................
Rastreio no soro materno durante o perodo fetal .....................
Trissomia 18 (sndroma de Edwards) ...........................................
Aspectos citogenticos e aconselhamento ..................................
Trissomia 13 (sndroma de Patau) ...............................................
Aspectos citogenticos e aconselhamento ..................................
Sndroma de Turner ....................................................................
Aspectos citogenticos e risco de recorrncia .............................
Tratamento .................................................................................
Sndroma de Klinefelter ..............................................................
Aspectos citogenticos................................................................
Tratamento .................................................................................
Trissomia XYY .............................................................................
Trissomia XXX .............................................................................
CAPTULO XV. GENTICA DO DESENVOLVIMENTO ..............................................
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
16.1.
16.2.
Introduo...................................................................................
Desenvolvimento embrionrio e fetal..........................................
Genes hometicos.......................................................................
Determinao e diferenciao embrionria e fetal ......................
Mola hidatiforme ........................................................................
Determinao sexual ...................................................................
Lionizao ...................................................................................
Gemelaridade .............................................................................
Clonagem ...................................................................................
Diferenciao gonadal ................................................................
Desenvolvimento sexual masculino .............................................
Desenvolvimento sexual feminino ...............................................
Genes envolvidos na diferenciao gonadal e sexual..................
Tipos de sexo..............................................................................
Hermafroditismo verdadeiro ........................................................
Pseudo-hermafroditismo..............................................................
Pseudo-hermafroditismo feminino...............................................
Pseudo-hermafroditismo masculino.............................................
281
281
283
284
287
289
292
294
294
295
296
297
298
298
299
301
301
302
303
304
304
305
305
307
307
310
314
316
317
318
319
321
323
326
326
328
330
330
332
333
333
335
XIII
CAPTULO XVI. ANOMALIAS CONGNITAS ........................................................
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
Introduo...................................................................................
Malformaes .............................................................................
Associao ..................................................................................
Sequncias ..................................................................................
Disrupes ..................................................................................
Deformaes...............................................................................
Displasias ....................................................................................
Malformaes congnitas de causa multifactorial.......................
Malformaes de causa monognica ..........................................
Malformaes de causa cromossmica .......................................
Malformaes devidas a doenas maternas ...............................
Sndromas malformativas de causa teratognica ........................
CAPTULO XVII. GENES DE REGULAO DA PROLIFERAO CELULAR.

APOPTOSE. SENESCNCIA ................................................................
1.
1.1.
1.1.1.
1.1.2.
1.1.3.
1.2.
1.3.
1.3.1.
1.3.2.
1.3.3.
1.4.
1.5.
2.
3.
4.
4.1.
4.2.
XIV
Genes de regulao da proliferao celular ................................

Protooncogenes e oncogenes .....................................................
Factores de crescimento e receptores de membrana...................
Transduo intracelular de sinais.................................................
Factores de transcrio nucleares................................................
Oncogenes .................................................................................
Antioncogenes ou genes de supresso tumoral..........................
Gene RB......................................................................................
Gene TP53..................................................................................
Gene PTEN..................................................................................
Genes de reparao do DNA ......................................................
Genes de metabolismo de genotxicos ......................................
Regulao da proliferao celular normal e neoplsica...............
Apoptose ....................................................................................
Senescncia ................................................................................
O limite proliferativo de Hayflick.................................................
Progerias .....................................................................................
351
351
352
353
353
354
355
357
360
362
364
364
365
366
369
371
371
374
..................................................................
Introduo ..................................................................................
O cancro como doena de genes ...............................................
O dilogo entre o genoma e o meio ambiente ..........................
Consulta de Gentica Tumoral ...................................................
Finalidades da consulta de Gentica Tumoral .............................
Critrios para acesso a uma consulta de Gentica Tumoral ........
Testes predizentes de susceptibilidade para o cancro..................
377
377
378
379
381
381
382
383
CAPTULO XVIII. GENES E CANCRO
1.
2.
3.
4.
4.1.
4.2.
4.3.
337
337
338
340
340
341
341
342
342
343
344
345
345
4.4.
4.5.
5.
5.1.
5.2.
5.3.
Seguimento dos consulentes ......................................................

Declarao de Consentimento Informado ...................................
Cancro hereditrio ......................................................................
Polipose clica familiar................................................................
Cancro da mama ........................................................................
Sndroma de Lynch e carcinoma colorrectal ................................
384
386
387
387
390
393
CAPTULO XIX. TERAPIA GNICA .....................................................................
Introduo ..................................................................................
Bases genticas para a terapia gnica.........................................
Critrios de seleco das doenas para terapia gnica ...............
Abordagens para terapia gnica .................................................
Terapia gnica somtica ..............................................................
Terapia gnica germinal ..............................................................
Terapia gnica ex vivo .............................................................
Terapia gnica in situ ..................................................................
Terapia gnica in vivo .............................................................
Mtodos para terapia gnica ......................................................
Lipossomas .................................................................................
Mtodos biolgicos.....................................................................
Retrovrus....................................................................................
Adenovrus .................................................................................
Vrus adeno-associados ...............................................................
Vrus herpes ................................................................................
Modulao da expresso gnica .................................................
Recombinao homloga............................................................
Quimeraplastia ............................................................................
Exemplos de terapia gnica ........................................................
Imunodeficincia severa por dfice de adenosina desaminase ....
Fibrose qustica............................................................................
Tratamento do cancro.................................................................
Hipercolesterolmia familiar ........................................................
Terapia gnica de doenas agudas..............................................
397
397
398
400
400
400
401
401
402
403
403
404
404
404
407
408
408
409
411
411
412
412
413
414
415
415
..................................................
Introduo ..................................................................................
Etapas do aconselhamento gentico...........................................
Indicaes para o aconselhamento gentico...............................
Regras bsicas para o aconselhamento gentico ........................
417
417
418
418
419
1.
2.
3.
4.
4.1.
4.2.
4.3.
4.4.
4.5.
5.
5.1.
5.2.
5.2.1.
5.2.2.
5.2.3.
5.2.4.
5.3.
5.4.
5.5.
6.
6.1.
6.2.
6.3.
6.4.
6.5.
CAPTULO XX. ACONSELHAMENTO GENTICO
1.
2.
3.
4.
XV
5.
6.
7.
7.1.
7.2.
7.3.
7.4.
7.5.
O diagnstico gentico como suporte do aconselhamento.........

Opes e seguimento .................................................................
Momentos para o diagnstico e o aconselhamento gentico.....
Aconselhamento gentico pr-matrimonial.................................
Aconselhamento gentico pr-concepcional ...............................
Diagnstico e aconselhamento gentico pr-implantatrio.........
Diagnstico e aconselhamento gentico pr-natal......................
Diagnstico e aconselhamento gentico ps-natal .....................
421
422
423
423
424
425
427
428
CAPTULO XXI. TICA EM GENTICA ................................................................
431
431
432
432
434
434
435
435
437
438
440
442
1.
2.
2.1.
2.2.
2.3.
2.4.
2.5.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
9.1.
9.1.1.
9.2.
9.3.
9.4.
Introduo ..................................................................................
Princpios ticos...........................................................................
Autonomia e vulnerabilidade ......................................................
Beneficncia................................................................................
No-maleficncia.........................................................................
Justia .........................................................................................
Confidencialidade .......................................................................
A vida humana, do embrio ao ser adulto .................................
Questes associadas clonagem somtica .................................
A descoberta do genoma humano e o eugenismo.................
A questo da normalidade luz da Gentica.........................
A questo das doenas graves e de expresso tardia
luz da Gentica .......................................................................
Questes associadas terapia gnica .........................................
Questes associadas aos testes genticos ...................................
Testes genticos pr-sintomticos ou predizentes .......................
Benefcios e malefcios dos testes genticos predizentes ............
Testes genticos em crianas ......................................................
Testes genticos pr-natais .........................................................
Testes genticos pr-implantatrios ............................................
CAPTULO XXII. GLOSSRIO
XVI
........................................................................... 455
BILBLIOGRAFIA .............................................................................................
NDICE REMISSIVO
443
444
446
446
448
449
450
451
483
........................................................................................ 489
A B R E V I AT U R A S
A
ADA
APC
BAC
bp
C
cDNA
CYP450
ddNTP
DMD
DNA
dNTP
DPI
DPN
ESTs
FAP
FCU
FISH
G
G6PD
GSTs
HNPCC
LDLs
LTR
MMR
ORFs
PCR
Adenina
Adenosina desaminase
adenomatosis polyposis coli
Cromossoma artificial de bactria
Par de bases
Citosina
DNA complementar
Citocromo P450
Di-desoxinucletido
Distrofia muscular de Duchenne
cido desoxirribonucleico
Desoxinucletido
Diagnstico pr-implantatrio
Diagnstico pr-natal
Expressed sequence tags
Polipose clica familiar (de familiar adenomatosis polyposis)
Fenilcetonria
Hibridao in situ com sonda fluorescente
Guanina
Desidrogenase da glicose-6-fosfato
Glutationa S-transferases
Carcinoma colorrectal hereditrio no-poliptico
Lipoprotenas de baixa densidade
Long terminal repeat
Mismatch repair
Open reading frames
Reaco de polimerizao em cadeia
XVII
RFLPs
RNA
RNAhn
RNAm
RNAr
RNAt
RR
SCE
SNP
SSCP
STS
T
U
VNTR
YAC
XVIII
Polimorfismos do comprimento de fragmentos de restrio

cido ribonucleico
RNA heterogneo
RNA mensageiro
RNA ribossmico
RNA de transferncia
Risco relativo
Sister chromatid exchange
Polimorfismo de nucletido nico
Polimorfismo conformacional de cadeia nica
Sequence-tagged site
Timina
Uracilo
Sequncias repetitivas em nmero varivel
Cromossoma artificial de levedura
CAPTULO I
HISTRIA E DESENVOLVIMENTO DA GENTICA
1. M ENDELISMO
O termo Gentica (Genetics) foi proposto, pela primeira vez, em 1905,
por William Bateson para englobar os conceitos de hereditariedade e de
varincia. Etimologicamente, este termo est associado ideia de gerar.
Na abrangncia do seu significado couberam e cabem ainda convices sobre
aspectos de natureza hereditria vindas desde a antiguidade, descritas para
a espcie humana e para outros seres vivos. Esta ordem de ideias ilustrada
pelos heredogramas alusivos transmisso de caractersticas das crinas dos
cavalos, produzidos pelos habitantes da Caldeia, na Babilnia, h cerca de
6.000 anos, pela percepo da transmisso dos caracteres ao longo das
geraes dos seres vivos reveladas pelas semelhanas entre progenitores e
descendente ou pela repetio de uma determinada doena em vrios
membros de uma famlia. O entendimento emprico da hereditariedade,
anteriormente referido, reflecte-se nas determinaes expressas no Talmude
(livro de registo de leis e tradies do povo judeu) relativamente iseno
da circunciso nos familiares em risco para a hemofilia, mas tambm em
antigas leis de proibio dos casamentos entre familiares prximos, ou na
correlao estabelecida por trabalho de Bemiss em 1857 entre os casamentos
consanguneos e o aumento de frequncia de surdez congnita. Tambm a
literatura deu expresso quele entendimento, como em Shakespeare ao dizer
que quando vaca e toiro, nveos de leite so, / Jamais daro vitelo preto
de carvo.
Os primeiros fundamentos cientficos da Gentica devem-se a Gregor

Mendel, que viveu entre 1822 e 1884. Anteriormente, havia a ideia de que
os caracteres dos progenitores se misturavam na descendncia, como
acontece com a estatura ou a pigmentao cutnea, ainda que esta viso
no explicasse situaes descontnuas (v.g., hemofilia).
Mendel foi monge do mosteiro de Brno (uma cidade da actual Repblica
Checa), onde realizou as suas experincias com ervilheiras de jardim.
Os resultados das suas observaes foram publicados em 1865. Mendel
designou os elementos celulares responsveis pela transmisso da informao
entre as geraes como factores e definiu a natureza dominante e recessiva
dos caracteres. Pelas suas descries, possvel verificar como estabeleceu
que os alelos de cada par se separam um do outro durante a meiose,
recebendo cada gmeta apenas um dos alelos (1 lei de Mendel, law of
segregation).
Para as suas experincias, Mendel escolheu fentipos determinados por
um nico gene (donde a designao de hereditariedade mendeliana como
sinnimo de hereditariedade monognica). Por sua vez, os genes encontravam-se em cromossomas diferentes ou to distantes que no estavam em
ligao gnica. Pde assim verificar a segregao independente e deduzir que
a transmisso de um gene no influencia a probabilidade de transmisso de
outro gene (2 lei de Mendel, law of independent assortment).
Os resultados de Mendel ficaram no esquecimento, sem que fosse
possvel imaginar a sua importncia, at virem a ser publicados de novo por
Bateson, em 1901, a data que marcou o incio da Gentica Mdica.
Darwin, um contemporneo de Mendel, descreveu em 1859, a sua teoria
da evoluo. Tambm contemporneo de Mendel e primo de Darwin, Francis
Galton estudou a influncia da hereditariedade na determinao de traos
humanos, recorrendo sobretudo a gmeos.
J no princpio do sculo XX, em 1902, Garrod percebeu que a
alcaptonria uma condio hereditria devida a alteraes num nico gene,
de natureza autossmica recessiva, o que constituiu a descrio da primeira
anomalia humana monognica. Tambm a Garrod se deve a designao de
erros inatos do metabolismo para caracterizar esta e outras situaes
monognicas.
Como nota, refira-se que hoje so conhecidas diversas condies que
contrariam as leis de Mendel, como sejam a no observncia da 1 lei nas
condies de hemizigotia no sexo masculino, para os genes localizados no

cromossoma X. Quando h ligao gnica, diferentes pares de alelos tambm
no obedecem lei da segregao independente. As leis de Mendel no se
cumprem igualmente para os genes localizados nas mitocndrias, quando h
imprinting genmico, quando h expressividade gnica varivel, quando
ocorre interaco entre os produtos codificados por diferentes genes ou por
alelos diferentes de um mesmo gene, ou ainda por aco do meio a nvel
da expresso gnica.
2. BASES CROMOSSMICAS DA GENTICA

Em 1866, John Langdon Down descreveu clinicamente a condio que
veio a ficar conhecida como sndroma de Down. No entanto, as primeiras
imagens dos cromossomas humanos, embora sem o nome actual, seriam
apenas registadas em 1882, a partir da observao de mitoses de clulas
tumorais por Walther Flemming. A designao cromossomas foi escolhida
por Waldeyer, em 1888. A proposta de localizao de elementos responsveis
pela hereditariedade nos cromossomas, foi prevista por Roux, de Vries e
Weissmann, tambm nesta dcada de 80.
Em 1903, de forma independente, Sutton e Boveri, estabeleceram que
os factores de Mendel envolvidos na transmisso das caractersticas
hereditrias se localizam nos cromossomas, assentando as bases que explicam
as leis de Mendel no comportamento dos cromossomas durante a meiose.
J anteriormente, em 1868, Haeckel identificara o ncleo como a sede dos
factores hereditrios.
Em 1909, Johannsen utiliza o termo gene para referir a unidade bsica
da hereditariedade.
Em 1914, Theodor Boveri enuncia a teoria cromossmica do cancro
quando escreve in every normal cell there is a specific arrangement for
inhibiting, which allows the process of division to begin only when the
inhibition has been overcome by a special stimulus. To assume the presence
of definite chromosomes which inhibit division... cells of tumours with
unlimited growth would arise if those inhibiting chromosomes were
eliminated....
Em 1923, foi identificado o cromossoma Y. Painter descreve a

espermatognese no homem e o sexo cromossmico baseado nos
cromossomas XY. Apenas em 1990, viria a ser identificado o gene SRY.
A cromatina sexual, conhecida como cromatina de Barr, deve o seu nome
a Barr, um dos autores envolvidos na sua descrio, em 1949, em estudos
realizados em neurnios de gata.
A descrio do nmero de 46 cromossomas, como o complemento
normal na espcie humana, data de 1956, em artigo da revista Hereditas por
Tjio e Levan, o mesmo tendo feito Ford e Hamerton na revista Nature, no
mesmo ano.
Em 1959, Lejeune e colaboradores estabeleceram a associao entre a
presena de um cromossoma 21 supranumerrio e a existncia de sndroma
de Down.
A possibilidade de induzir mitoses em linfcitos circulantes por
estimulao com fitohemaglutinina foi descrita por Nowell, em 1960.
Em 1976, Yunis introduz a alta resoluo em citogentica por estudo de
bandeamento cromossmico em clulas em profase ou em pr-metafase.
A hibridao in situ com sondas fluorescentes (FISH, fluorescent in
situ hybridisation) foi desenvolvida por volta de 1985.
3. BASES MOLECULARES DA GENTICA
Em 1867, Miescher isolou uma substncia acdica a partir de leuccitos

do ps, a que chamou nuclena. Deste termo derivou a designao cido
nucleico.
Em 1944, Avery, Macleod e McCarty, na sequncia do estudo do factor
responsvel pela transformao de pneumococos no patognicos em
patognicos, demonstraram que o cido desoxirribonucleico (DNA) a
molcula com capacidade informacional capaz de transmitir a informao
entre geraes.
Watson e Crick, descreveram a estrutura em dupla hlice do DNA, em
1953, o que veio a constituir a base da gentica molecular.
Em 1966, Nirenberg, Ochoa e Khorana descreveram o cdigo gentico.
Em 1968, Donohue protagonizou o primeiro mapeamento de um gene
humano, com a localizao do gene autossmico responsvel pelo tipo

sanguneo Duffy, no cromossoma 1.
Cerca de 1970, Werner Arber, Daniel Nathans e Hamilton Smith,
descobriram as enzimas de restrio e a sua aplicao a problemas de
gentica molecular.
Edwin Southern, em 1975, descreveu o mtodo que ficou com o seu
nome (Southern blot), destinado a evidenciar, atravs de sondas, a presena
de fragmentos de DNA obtidos por aco de enzimas de restrio.
Em 1977, foram apresentadas metodologias para a sequenciao de DNA
por Sanger e por Maxam e Gilbert.
No mesmo ano de 1977, foi descrita a clonagem do primeiro gene
humano (o gene da somatotrofina corinica), por J. Shine e co-autores, em
artigo publicado na revista Nature.
Em 1978 descrito o primeiro RFLP (restriction fragment length
polymorphism) por Kan e Dozy, como marcador de ligao gnica.
Em 1983, J. Dausset estabelece o Centro de Estudos do Polimorfismo
Humano (CEPH) em Paris, constitudo por um painel de DNA de famlias, para
permitir o mapeamento gentico por ligao gnica. Trata-se de amostras de
DNA de famlias alargadas, contemplando elementos de trs geraes
sucessivas e um nmero elevado de membros (os quatro avs, dois filhos e
pelo menos oito netos), uma exigncia essencial a considerar nas famlias,
para serem possveis os estudos por RFLPs.
A descrio da reaco de polimerizao em cadeia (PCR, de polymerase
chain reaction) data de 1986, quando foi descrita por Mullis, Faloona e
Scharf.
A primeira proposta para lanamento do Projecto do Genoma Humano
nos Estados Unidos da Amrica, surge em 1985, acabando por iniciar a sua
actividade em 1990, tendo como objectivos: o mapeamento do genoma
humano, a sequenciao dos cerca de 3x10 9 pares de bases (bp) (1) ,
o mapeamento e a sequenciao do genoma de outros organismos, o
desenvolvimento de tecnologia para anlise de DNA e o estudo das
implicaes ticas, legais e sociais decorrentes do conhecimento do genoma.
(1)
No momento actual, com o que se conhece da sequenciao do Genoma Humano e fazendo

a analogia com um dicionrio, em que cada palavra corresponda a um gene ou a uma determinada
sequncia de DNA no codificante, encontrar-se-iam quatro grupos de palavras: um grupo para que
se conhece a posio no dicionrio e o significado da palavra, um grupo para que se conhece a
posio mas no se sabe o significado, um grupo de palavras mal escritas (a que pode faltar uma
Previamente, em 1988, fora criada, na Sua, a Organizao para o Genoma

Humano (HUGO, Human Genome Organization) como resultado da
vontade de cientistas de 14 pases, para coordenar trabalhos de investigao
na rea do estudo do genoma humano.
Em 1994, a Agncia Americana FDA aprovou a comercializao do
primeiro organismo geneticamente modificado como alimento o tomate
FLAVR SAVR - afirmando que to seguro como os tomates obtidos
convencionalmente. Estes tomates, depois de maduros e colhidos, no
amolecem durante bastante tempo, ao contrrio do que acontece com as
espcies de tomates no recombinantes.
A 24 de Setembro de 2003, o total de entradas no catlogo de genes
humanos e de doenas genticas de Victor McKusick (OMIM, Online
Mendelian Inheritance in Man, http://www.ncbi.nlm.nih.gov/omim/) era de
14768, das quais 13844 de natureza autossmica, 821 ligadas ao cromossoma
X, 43 ligadas ao cromossoma Y e 60 mitocondriais. O total de genes mapeados
em cromossomas humanos, era de 8783, com um nmero mximo de 835
loci para o cromossoma 1 e um mnimo de 35 loci para o cromossoma Y.
letra) e, finalmente, espaos do dicionrio para os quais se presume que haver uma palavra para o
ocupar embora no seja conhecida!
Por outro lado, o Genoma Humano no patrimnio de um nico homem. O total da informao
gentica da espcie humana encontra-se dispersa por mltiplos seres humanos, havendo uma grande
parte que se repete em cada homem. H mesmo uma parte em tudo idntica a sequncias que se
encontram em outras espcies. Assim, o programa do Genoma Humano optou por fazer a
sequnciao a partir de um pool de DNA obtido de 30 pessoas de diferentes etnias, numa tarefa
que poder custar algo como trs bilies de dlares! Como fases deste processo, salientam-se:
1. o mapeamento cromossmico, ou seja, a identificao de marcadores moleculares que
permitem uma localizao aproximada e rpida dos genes (estes marcadores so como marcos
quilomtricos em relao aos quais se referencia um acidente, sem pormenorizar os metros,
ou como as entradas de um dicionrio que permitem identificar a pgina em que est uma
palavra antes de a localizar);
2. a diviso dos cromossomas em fragmentos de DNA com extremos comuns;
3. a sequenciao destes fragmentos;
4. a reconstituio da ordem das bases nos cromossomas, recorrendo sobreposio das regies
comuns dos extremos dos fragmentos;
5. a comparao das sequncias entre diversos genes, entre indivduos ou mesmo entre espcies!
As fases um e dois j foram realizadas. As restantes encontram-se em diversas etapas de
concretizao para diferentes regies do genoma, havendo inclusive, alguns cromossomas humanos
j integralmente sequenciados.
O anncio pela Celera Genomics, em 2001, de que atingira a penltima fase da sequenciao
do genoma humano, no explicitou que se tratava do genoma de um nico indivduo, que os pontos
quatro e cinco ainda no tinham sido inteiramente cumpridos e que havia o risco de aparecerem
hiatos quando a juno dos fragmentos sequenciados fosse feita, como acontecera com a sequenciao
de animais com genoma muito menos complexo do que o do homem.
4. PRMIOS NOBEL NA REA DA GENTICA

Na lista de prmios Nobel atribudos em Medicina ou Fisiologia, desde
1901 at actualidade, existe uma percentagem significativa respeitante ao
domnio cientfico da Gentica, o que pode ajudar a compreender a
importncia desta cincia para a Medicina. Na listagem seguinte, esto
indicados o ano, os laureados e o mbito das suas descobertas:
2002 Sidney Brenner, Robert Horovitz e John Sulston pelas suas
descobertas sobre a regulao gentica da organognese e da
morte celular programada (apoptose);
1997 Stanley B. Prusiner, pela sua descoberta dos pries;
1995 Edward B. Lewis, Christiane Nusslein-Volhard e Eric F. Wieschaus
pelas suas descobertas respeitantes ao controlo gentico do
desenvolvimento embrionrio precoce;
1993 Richard J. Roberts e Philip A. Sharp, pelas suas descobertas, de
forma independente, dos genes split;
1989 J. Michael Bishop e Harold F. Varmus, pela descoberta da origem
celular dos oncogenes retrovirais;
1987 Susumu Tonegawa, pela sua descoberta do princpio gentico
que explica a diversidade dos anticorpos;
1985 Michael Brown e Joseph Goldstein, pelas suas descobertas
relativas aos receptores celulares na hipercolesterolmia familiar;
1983 Barbara Mclintock, pela descoberta dos elementos genticos
mveis;
1980 Baruj Benacerraf, Jean Dausset e George D. Snell, pelas suas
descobertas relacionadas com estruturas da superfcie celular,
geneticamente determinadas, que regulam as reaces imunolgicas;
1978 Werner Arber, Daniel Nathans e Hamilton O. Smith, pela descoberta das enzimas de restrio e a sua aplicao a problemas de
gentica molecular;
1975 David Baltimore, Renato Dulbecco e Howard M. Temin, pelas
suas descobertas relativas interaco entre os vrus tumorais
e o material gentico da clula;
1969 Max Delbruck, Alfred D. Hershey e Salvador E. Luria pelas suas
descobertas respeitantes aos mecanismos de replicao e
estrutura gentica dos vrus;
1968 Robert W. Holley, Hara G. Khorana e Marshal W. Nirenberg, pela

sua interpretao do cdigo gentico e a sua funo na sntese
proteica;
1965 Franois Jacob, Andr Lwoff e Jacques Monod, pelas suas
descobertas relativas ao controlo gentico da sntese de enzimas
e vrus;
1962 Francis H. C. Crick, James D. Watson e Maurice H. F. Wilkins,
pelas suas descobertas relativas estrutura molecular dos cidos
nucleicos e o seu significado para a transferncia de informao
no material vivo;
1959 Severo Ochoa e Arthur Kornberg, pela sua descoberta dos
mecanismos envolvidos na sntese biolgica do cido
ribonucleico (RNA) e do DNA;
1958 George W. Beadle e Edward L. Tatum, pela sua descoberta de
que os genes actuam regulando acontecimentos qumicos
definidos e Joshua Lederberg pela suas descobertas relativas
recombinao gentica e organizao do material gentico das
bactrias;
1933 Thomas H. Morgan, pelas suas descobertas relativas ao papel
desempenhado pelos cromossomas na hereditariedade.
Pelos seus reflexos no progresso da Gentica refira-se ainda a atribuio,
em 1980, do prmio Nobel da Qumica a F. Sanger e a W. Gilbert, pela
descoberta de metodologias para a sequenciao do DNA. Mais recentemente, em 1983, K. Mullis recebeu a mesma distino, tambm em Qumica,
pela descoberta da PCR.
CAPTULO II
BASES CELULARES E MOLECULARES DA HEREDITARIEDADE
1. CONCEITO DE MOLCULA INFORMACIONAL

A transcrio dos primeiros genes, nas fases iniciais do desenvolvimento
de um novo ser pluricelular, parece depender de molculas celulares herdadas
com as clulas germinais, lado a lado com o DNA. Experincias feitas em ovos
de rs, baseadas na transplantao de ncleos, mostraram que se o ncleo
do ovo de uma espcie for transplantado para um ovo de outra espcie
previamente enucleado, o ovo resultante no apresenta evoluo para um
ser adulto. Contudo, se a transplantao do ncleo se processar para um ovo
enucleado da mesma espcie, possvel o desenvolvimento normal at
forma adulta. Estas experincias parecem demonstrar que o DNA do ovo, para
entrar em aco, necessita de molculas reguladoras localizadas no
citoplasma, cuja aco sobre determinadas sequncias do DNA vai permitir
a sua transcrio. Do que se acaba de descrever, tambm se infere que,
embora o DNA (ou em alternativa o RNA em algumas espcies) seja a
molcula informacional por excelncia, no pode ser vista de um modo
restrito como a nica molcula transmissora de informao. O conceito de
molcula informacional tem igualmente de contemplar outras molculas que
ocorram nas clulas germinais de uma forma no ao acaso e que
desempenhem funes cruciais no desenvolvimento precoce das espcies em
que ocorrem.
O DNA o suporte informacional da vida mais comummente encontrado.
Conjuga em si a capacidade para se replicar e para codificar protenas.
No entanto, em termos de evoluo molecular, o RNA, como molcula

informacional, ser anterior ao DNA. De facto, para haver continuidade da
vida tem de ocorrer duplicao do material gentico, o que s possvel por
meio de actividade enzimtica, condio que pode ser cumprida pelo RNA(1).
Posteriormente, o RNA ter mediado a informao para a produo de
enzimas proteicas, cada vez mais complexas e com mais potencialidades
enzimticas que o RNA, em virtude das possibilidades de combinao
oferecidas pelos vinte aminocidos, comparativamente com as possibilidades
oferecidas pelos quatro nucletidos. provvel que, em dado momento, se
tenha formado uma transcriptase inversa, o que ter permitido a formao
de DNA. Produzida a molcula de DNA, a sua maior estabilidade
fundamentada na conformao em dupla hlice, ter permitido um
armazenamento mais fiel da informao gentica e oferecido desse modo
mais vantagens biolgicas. Estas razes t-la-o estabelecido como repsito
da informao gentica na grande maioria dos seres vivos, j que atravs
da informao gentica transmitida ao longo das geraes e da sua expresso
como protenas que as clulas exibem as suas caractersticas e funes.
1.1. DEMONSTRAO DA CAPACIDADE INFORMACIONAL DO DNA
10
A capacidade informacional do DNA foi demonstrada por Griffith em

1928, numa srie de experincias de transformao bacteriana, feitas com
pneumococos (Fig. II.1). O pneumococo habitualmente envolvido por uma
cpsula viscosa e brilhante, de natureza polissacardea, que lhe confere
patogenicidade pneumococo S. Os mutantes que no apresentam aquela
cpsula no so patognicos e designam-se por pneumococos R. Nestas
experincias verificou-se que os ratinhos injectados com pneumococos S vivos morriam (Fig. II.1-A), comparativamente com os ratinhos injectados com
pneumococos S mortos pelo calor (Fig. II.1-B), ou com pneumococos R vivos
(Fig. II.1-C) que se mantinham vivos. Contudo, quando os ratinhos eram
injectados com uma mistura de pneumococos R vivos e pneumococos S
mortos (Fig. II.1-D), verificou-se que morriam e que no sangue dos ratinhos
(1)
A molcula de RNA, para alm de molcula informacional com capacidade para replicar e
para codificar e promover a formao de sequncias de aminocidos, pode ainda provocar splicing
sobre si prprio e funcionar como suporte estrutural nos ribossomas.
mortos se encontravam pneumococos S vivos. Algum componente dos

pneumococos S mortos tinha capacidade para transformar os pneumococos
R em formas patognicas.
Em 1944, Avery et al. demonstraram que o DNA encontrado no extracto
dos pneumococos S mortos era o componente envolvido na transformao
dos pneumococos R em formas patognicas, por ter a informao gentica
e a capacidade para transformar os pneumococos R em formas patognicas.
Basearam a demonstrao na inactivao diferencial das protenas por uma
protease e do DNA por uma desoxirribonuclease. Quando o DNA era
inactivado, no havia transformao patognica dos pneumococos R em
formas patognicas.
Pneumococos
da estirpe S vivos
Pneumococos
da estirpe S mortos pelo calor
injeco
morto
injeco
vivo
Pneumococos
da estirpe R vivos
Pneumococos da estirpe S mortos pelo

calor + Pneumococos da estirpe R vivos
injeco
vivo
injeco
morto
Fig. II.1 Ilustrao das experincias de transformao bacteriana demonstrativas da capacidade

informacional do DNA.
11
12
As experincias de conjugao bacteriana realizadas com E. coli tambm

demonstraram a capacidade informacional do DNA. As clulas que contm
um plasmdeo designado factor F so designadas como dadoras e as que no
contm o factor F so receptoras. Pela conjugao, o factor F transita da
clula dadora para a receptora e esta adquire caractersticas das clulas
dadoras. Idntica demonstrao da capacidade informacional do DNA, foi
conseguida com a transmisso de genes da resistncia bacteriana a um
antibitico ou antibiticos por codificao de enzimas que os inactivam, aps
conjugao entre bactrias resistentes e no resistentes com passagem de
plasmdeos contendo os genes que conferem essa resistncia. Os elementos
genticos mveis antes referidos so designados por transposes e
permitem o rearranjo gentico de loci no homlogos.
A transduo foi outro mecanismo utilizado para demonstrar a
capacidade informacional do DNA. Baseia-se na passagem de informao de
um bacterifago para uma bactria, no caso presente, da passagem de DNA
virusal previamente marcado com fsforo radioactivo para a bactria.
Aps a transduo e a separao em diferentes fraces do invlucro proteico
dos bacterifagos e das bactrias, foi registada radioactividade na fraco
bacteriana, mas no na fraco dos invlucros proteicos. Sabendo-se que o
DNA incorpora fsforo (e no as protenas) e que o DNA introduzido dentro
das clulas pelos bacteriofgos, a radioctividade presente nas clulas
devida ao DNA que infectou as clulas. Subsequentemente, os vrus
multiplicaram-se no interior das clulas e ocorreu destruio das bactrias e
libertao de bacteriofgos, o que evidenciou a transmisso da informao
pelo DNA.
Nos seres eucariotas, a demonstrao de que o DNA era igualmente o
material gentico informativo, foi inicialmente obtida com experincias de
transfeo. Assim, a adio de extractos de DNA a uma cultura celular
provocou o aparecimento de clulas com capacidade para produzir novas
protenas nessa cultura, o que foi entendido como sendo devido
incorporao de alguns fragmentos novos de DNA, originrios de outra
espcie, no genoma das clulas em cultura. A microinjeco provou
igualmente a capacidade informacional do DNA, quando possibilitou a
aquisio de capacidade para produo de um determinada protena, por
clulas inicialmente deficientes para essa produo, aps microinjeco de
fragmentos de DNA correspondentes a genes codificadores da protena em
causa (v.g., fibroblastos com deficincia para a produo de timidinacinase,

adquirem esta capacidade aps transfeo com o fragmento de DNA
correspondente ao gene). Para alm da aquisio da capacidade em falta, a
informao transmitida s clulas filhas resultantes da diviso mittica das
clulas transfectadas.
Na fase actual da evoluo dos seres vivos, a forma de vida representada
pelo vrus apresenta espcies com um genoma constitudo por DNA ou RNA.
No prprio genoma humano encontram-se sequncias de DNA virusal
resultantes de infeces ocorridas no passado da evoluo do homem.
H ainda organismos mais pequenos capazes de transmitir informao,
como os virides e os pries. Os virides so pequenas molculas de RNA
circular, monocatenar, com cerca de 300 nucletidos.
1.2. PRIES COMO MOLCULAS INFORMACIONAIS

Em relao aos pries (1), no tem sido possvel identificar qualquer
sequncia de DNA ou de RNA, sendo o seu constituinte principal uma
glicoprotena de 28.000 daltons. A forma normal da glicoprotena expressa
na espcie humana e em outras espcies, no sendo conhecida a sua funo.
codificada pelo gene PrP.
A protena PrP anormal quando ingerida pelo homem conduz mutao
da protena PrP expressa no indivduo na forma normal e provoca doena dos
pries. As molculas PrP normais so assim transformadas em partculas
infecciosas. No homem, existe uma forma hereditria rara de doena dos
pries. Nestes casos, o gene PrP encontra-se mutado.
Como agentes infecciosos, os pries provocam encefalopatia
espongiforme no homem e em outros mamferos. Observa-se morte dos
neurnios, com perda da coordenao motora, demncia ou insnia
gravssima. A sobrevivncia, aps o aparecimento dos sintomas, no se
estende habitualmente, para alm de ano e meio. A doena de Creutzfeld-Jakob (descrita em associao com a transplantao de crnea e a
(1)
Os pries so resistentes a agentes fsicos como a radiao penetrante ou a temperatura

elevada, bem como s nucleases ou formamida. So sensveis a agentes como as proteases, o SDS
ou o fenol.
13
administrao de hormona de crescimento obtida de hipfises de cadveres),

o kuru humano (associado a canibalismo de tecido cerebral) e a doena das
vacas loucas como variante da doena de Creutzfeld-Jakob (comummente
associada a consumo de produtos de origem bovina infectados) so doenas
provocadas por pries.
2. ESTRUTURA DO DNA
A estrutura do DNA foi descrita em 1953 por Watson e Crick, como
resultado da integrao de mltiplos conhecimentos que sistematizaram na
construo de um modelo que era demasiado belo para no ser verdade,
como afirmou James Watson no seu livro A Dupla Hlice.
O DNA formado por duas cadeias helicoidais constitudas por
nucletidos que se enrolam volta de um eixo comum, com orientaes
opostas (antiparalelas), com as bases nucleotdicas dispostas para o interior
da hlice (Fig. II.2). Cada nucletido constitudo por uma base, uma
molcula de desoxirribose e uma molcula de fosfato (Fig. II.3). As bases
podem ser pricas, a adenina (A) e a guanina (G), ou pirimdicas, a citosina
(C) e a timina (T) (Tabela II.1). Os diferentes nucletidos usados para a sntese
da cadeia de DNA so os cidos adenlico (a base a adenina), timidlico (a
base a timina), citidlico (a base a citosina) e guanlico (a base a guanina).
Ao longo das cadeias de DNA distribuem-se as sequncias de bases
correspondentes aos cerca de 30.000 a 40.000 genes codificadores da
informao hereditria que se calcula que sejam utilizados pela espcie
humana durante a ontognese de cada indivduo.
14
Tabela II.1. Bases e nucletidos usados para a sntese do DNA e do RNA

BASES
BASES
Nuclesidos
Nucletidos
PURINAS
RNA
DNA
RNA
DNA
PIRIMIDINAS
ADENINA
GUANINA
CITOSINA
TIMINA/URACILO (RNA)
Adenosina
Desoxiadenosina
Adenilato
Desoxiadenilato
Guanosina
Desoxiguanosina
Guanilato
Desoxiguanilato
Citidina
Desoxicitidina
Citidilato
Desoxicitidilato
Uridina
Desoxitimidina
Uridilato
Timidilato
A T
C
C
T
A
A
T
C G
T A
A
G
T
C
A
A T
Fig. II.2 Dupla hlice da cadeia de DNA.
15
O esqueleto de cada hlice formado pelas ligaes longitudinais entre

o acar de um nucletido e o fosfato do nucletido seguinte, atravs dos
tomos de carbono 5' e 3' da molcula de desoxirribose (Fig. II.3). Os nucletidos tm polaridade, o que indicado, para cada cadeia, pela notao 5'3'.
3
OH
5
P
CH2
Desoxirribose
C
Pontes de hidrognio
Desoxirribose
CH2
P
P
O
CH2
Pontes de hidrognio
T
O
CH2
P
P
O
CH2
C
O
CH2
P
P
O
CH2
C
O
CH2
P
P
O
CH2
A
O
CH2
P
16
OH
Fig. II.3 Estrutura do DNA. As duas cadeias de DNA esto dispostas em sentido oposto: a cadeia
sense na direco 53 e a cadeia antisense na direco 35. A espinha dorsal do DNA
constituda por duas cadeias de molculas de desoxirribose e fosfato. desoxirribose ligam-se as
bases nucleotdicas adenina (A), timina (T), citosina (C) e guanina (G). O emparelhamento das bases
ocorre entre A-T e C-G. Entre A e T estabelecem-se duas pontes de hidrognio e entre C e G
estabelecem-se trs pontes de hidrognio.
As bases de uma hlice emparelham de modo complementar com as bases

da outra hlice, de modo que em frente a uma adenina fica sempre uma
timina e em frente a uma citosina fica sempre uma guanina, ligadas por
pontes de hidrognio, sendo duas entre A e T e trs entre C e G (Fig. II.3).
As pontes de hidrognio constituem as principais foras de ligao das duas
cadeias de DNA de uma dupla hlice. Os fragmentos da dupla hlice que
contm uma maior quantidade de pares de bases G-C so mais estveis do
que os fragmentos em que predominam os pares de bases A-T.
Numa cadeia de DNA, o nmero de bases A e T igual, bem como o
nmero de bases C e G. No entanto, a proporo de pares AT e CG varivel
para espcies diferentes. Na espcie humana, o valor mdio de 39%, para
o par CG.
As ligaes de hidrognio estabelecidas entre as bases do DNA podem
ser destrudas (desnaturao do DNA). O aquecimento do DNA, a
temperaturas da ordem dos 95 o centgrados, conduz desnaturao.
A desnaturao verifica-se tambm em meio com pH bastante cido (pH<3)
ou bastante alcalino (pH>10). Aps desnaturao por elevao da
temperatura, o abaixamento da temperatura (para valores da ordem de
50-60 centgrados) permite que as duas cadeias estabeleam de novo pontes de hidrognio de um modo complementar, entre as mesmas bases.
O restabelecimento das pontes de hidrognio aps desnaturao verifica-se
tambm para cadeias curtas (com cerca de 15 bp).
Os conhecimentos relativos desnaturao e renaturao do DNA tm
permitido desenvolver diversos tipos de aplicaes baseadas na hibridao
entre cadeias monocatenares complementares de DNA. A deteco de
RFLPs, a hibridao in situ e a PCR so as metodologias mais visveis como
aplicaes.
Na clula viva, a dupla hlice de DNA, na forma solvel, enrola-se
habitualmente para a direita, numa forma designada por DNA-B. Contudo,
em condies experimentais particulares, nomeadamente na presena de
elevadas concentraes de sais, a dupla hlice de DNA pode ocorrer com
enrolamento para a esquerda, na forma designada por DNA-Z. Esta forma
de DNA parece tambm ocorrer em condies de concentrao normal de
sais, quando os resduos citosina se encontram metilados em regies ricas
em CpG.
17
18
As molculas de DNA so muito pouco espessas, com cerca de 20 Angstroms. Em comparao, so muito longas: o cromossoma gigante da Drosophila melanogaster chega a ter 2,1 cm e, no seu conjunto, o total do DNA
de uma clula humana diplide mede 2 99 cm de comprimento.
As
molculas longas e delgadas do DNA podem-se apresentar com configurao
linear, circular ou em superenrolamento. Nesta ltima forma, a dupla hlice
sofre um segundo enrolamento.
Durante um ciclo celular, desde o incio da profase at metafase, as
molculas de DNA sofrem condensaes sucessivas dentro do ncleo das
clulas. Este processo ocorre de um modo ordenado e funcional, participando
nele as protenas histnicas e algumas das protenas no histnicas, como a
nucleoplasmina.
As protenas histnicas so cinco (H1, H2A, H2B, H3 e H4). As protenas
histnicas e mltiplas protenas no histnicas, das quais a polimerase do RNA
uma das mais importantes, encontram-se associadas ao DNA. Algum RNA
tambm se encontra associado ao DNA. Neste conjunto, designado por
cromatina, o DNA representa sensivelmente um tero da massa total.
A associao do DNA com as histonas feita em unidades designadas
por nucleossomas constitudos por 146 bp enroladas no exterior de um
octmero formado por duas histonas de cada tipo (H 2A , H 2B, H 3 e H 4 ),
localizando-se a histona H1 no exterior. Os nucleossomas esto ligados entre si por DNA. A cadeia constituda pelos nucleossomas ligados por DNA,
numa segunda fase de condensao da cromatina, forma arranjos helicoidais
com seis nucleossomas em cada volta, originando as fibras de 30 nm.
Subsequentemente ao arranjo helicoidal, a cromatina sofre nova condensao,
por novo enrolamento, atingindo o DNA o seu mximo de condensao nos
cromossomas metafsicos (cromossomas, ou seja, corpos que coram).
O grau de compactao do DNA linear, devido formao dos nucleossomas
de seis vezes. Com a formao das fibras de 30 nm, a compactao de
36 vezes. A compactao atinge um grau superior a 100.000 vezes nos
cromossomas metafsicos.
Num ncleo interfsico, h zonas com um nvel elevado de condensao
da cromatina. A cromatina com estas caractersticas designa-se por
heterocromatina. Na maior parte do ncleo, a cromatina apresenta-se pouco
condensada, designando-se por eucromatina. nas regies de eucromatina
que se localiza a generalidade dos genes acessveis transcrio.
3. GENES E GENOMA
O genoma de um organismo ou vrus diz respeito totalidade do seu
complemento gentico. Nos vrus e nos organismos unicelulares o genoma
corresponde ao total de sequncias nucleotdicas presentes, enquanto que
nos organismos pluricelulares, o genoma diz respeito ao total de sequncias
nucleotdicas presentes numa das clulas nucleadas do organismo.
H genomas constitudos por um nmero reduzido de nucletidos como
o genoma de E. coli com 4,64 106 bp, em comparao com o genoma
diplide humano com cerca de 6 109 bp. Contudo, o nmero de pares de
bases de um organismo vivo no se articula directamente com a sua
complexidade e/ou tamanho, sendo exemplo desta condio o caso das
tulipas que transportam no genoma de cada clula cerca de dez vezes mais
DNA do que as clulas humanas, semelhana, alis, do que se observa em
muitas outras espcies vegetais (v.g., a Fritillaria assyriaca transporta um
genoma com 120.000 Mb).
O genoma humano tem uma componente nuclear e uma componente
mitocondrial. O genoma nuclear encontra-se nos 23 pares de cromossomas
presentes no ovo ou zigoto. O genoma mitocondrial encontra-se nas
mitocndrias do ovo. Cada clula nucleada do corpo humano (cerca de 1014
clulas num indivduo adulto) possui a totalidade do genoma humano.
O genoma haplide humano presente nos gmetas constitudo por
cerca de 3 109 bp. Sendo o homem um ser diplide, o nmero de pares de
bases de 2 3 109. Uma parte do genoma diz respeito aos cerca de 30.000
a 40.000 genes da espcie humana.
Em mdia, um gene constitudo por 1 104 bp. No entanto, h genes
que podem ascender a 2,3 106 bp e serem constitudos por mais de 70
exes, como o gene da distrofina. Realce-se que o seu RNAm, com 14 kb,
resulta da transcrio de menos de 1% do total do gene. No extremo
oposto, encontram-se genes de reduzidas dimenses como o gene SRY, com
700 bp e apresentando apenas um nico exo na sua constituio. Os genes
dos seres vivos que se dividem e crescem muito rapidamente, como as
leveduras e as eubactrias, perderam os intres, que se mantm nos genes
ancestrais.
19
Um gene define-se como uma sequncia da cadeia nucleotdica de DNA

portadora de informao biolgica, com capacidade para ser expressa sob a
forma de uma molcula de RNA e/ou protena. As extenses de DNA que
no correspondem a genes so designadas por DNA intergnico, em que
abundam sequncias repetitivas. Algumas sequncias intergnicas estveis,
resultantes de alteraes em genes ancestrais por duplicao, perda de grelha
de leitura ou de codes stop, so designadas por pseudogenes. Podem ser
transcritas, mas no so traduzidas. Calcula-se que haja cerca de 20.000
pseudogenes na espcie humana, tendo sido identificados 384 no
cromossoma 21.
Na espcie humana foram identificados 1077 blocos de genes
duplicados, pelo que de admitir que a perda dos alelos de alguns loci no
tenha o efeito de anular integralmente a produo de determinada protena.
Este conhecimento deve ser aplicado aos estudos de knock-out em
experimentao animal e ao cuidado a ter com as ilaes decorrentes dos
resultados: a anulao dos alelos de um locus, pode ser contrariada pela
existncia de duplicao no genoma.
Num gene h sequncias designadas por exes e sequncias designadas
por intres (Figs. II.6 e III.3). Os exes so transcritos em RNA heterogneo
(RNAhn) e posteriormente traduzidos em protenas. O seu tamanho pode
variar, sendo o exo 15 do gene APC (adenomatosis polyposis coli), com
6.500 bp, o mais longo at hoje descrito. Em mdia, os exes contm cerca
de 50 codes e os intres so muito mais extensos, com alguns a ultrapassarem as 10 kb. Os intres so transcritos no RNAhn, mas as suas sequncias
so posteriormente excisadas durante o splicing do RNAhn (Fig. II.6).
No total, apenas cerca de 3% a 5% das sequncias de DNA
correspondem aos exes e so, por isso, codificadoras. A grande maioria dos
genes codifica polipeptdeos. Alguns codificam molculas de RNA funcionais
20
(v.g., RNA de transferncia, RNA ribossmico, pequenas molculas de RNA

nuclear e de RNA citoplasmtico e ribozimas).
A sequncia de um gene pode conter, em si mesma, regies que
se expressam como genes independentes, de que exemplo o gene NF1.
Este gene est localizado no brao longo do cromossoma 17 (17q11.2), sendo
constitudo por 350 kb de DNA genmico e 59 exes. Pode dar origem
transcrio de duas molculas de RNA, uma com 11 kb e outra com 13 kb.
Por outro lado, partes da sua sequncia correspondem tambm a trs

pequenos genes embebidos no intro 27
codificados pela sequncia
antisense. Dois dos genes so predominantemente especficos de tecidos

linfides e o outro estar envolvido na mielinizao. Outro exemplo
oferecido pelo gene MTS1, tambm conhecido como CDNK2A, ao codificar
duas protenas diferentes, em funo da sequncia promotora utilizada. Um
promotor leva transcrio dos exes 1, 2 e 3 que codificam a protena
p16INK4A, enquanto que o outro promotor leva transcrio dos exes 1 ,
2 e 3 e a uma grelha de leitura diferente que conduzem produo da
protena p19ARF. Desta forma, so produzidas duas protenas diferentes, com
funes diferentes, embora ambas actuem a nvel da regulao do ciclo
celular.
4. GENOMA MITOCONDRIAL
O genoma mitocondrial tem origem exclusivamente materna. O seu
DNA uma molcula com 16.569 bp, bicatenar e circular, que no est
sujeita a crossing-over. A maioria das mitocndrias contm entre 5 e 10
cpias do cromossoma mitocondrial. O DNA mitocondrial no contm
intres e no est complexado com protenas histnicas. Quatro dos codes
tm especificaes diferentes das que se encontram para o cdigo gentico
do DNA nuclear.
Treze dos 37 genes presentes no DNA mitocondrial codificam enzimas
envolvidas na cadeia respiratria necessria para a fosforilao oxidativa e
produo de ATP e os restantes codificam RNAt e RNAr.
O DNA mitocondrial sofre mutaes ao longo da vida de um indivduo,
nomeadamente sob a forma de delees e mutaes pontuais, que tm sido
relacionadas com o processo de envelhecimento e alteraes degenerativas.
Para alm da identificao de mutaes associadas a doenas
mitocondriais, o estudo do genoma mitocondrial tem-se ainda revelado de
particular interesse no mbito mdico-legal, no esclarecimento de dvidas de
natureza histrica, como a ascendncia de determinadas personalidades, e
na caracterizao da evoluo humana.
21
5. REPLICAO DO DNA
22
A replicao do DNA crucial para a vida ao permitir a duplicao do

genoma, com a consequente multiplicao dos organismos unicelulares e o
crescimento dos organismos pluricelulares. A complementaridade (A-T, C-G)
do emparelhamento das bases do DNA, o fundamento da capacidade de
auto-replicao do DNA.
Para alm da complementaridade, a replicao tambm semiconservativa, na medida em que uma das cadeias da dupla hlice serve de
modelo para a replicao e fica como constituinte da nova dupla cadeia.
Para que se inicie a replicao do DNA, necessrio que, por aco da
enzima helicase, a dupla hlice de DNA seja desenrolada e sejam desfeitas
as ligaes de hidrognio que ligam as bases complementares entre as duas
cadeias de DNA (Fig. II.4). Este fenmeno inicia-se em regies ricas em pares
de bases A-T que, devido menor estabilidade das ligaes de hidrognio
estabelecidas entre si, facilitam o afastamento das cadeias. O afastamento
das cadeias de DNA, num determinado ponto da dupla hlice, d lugar a uma
forquilha de replicao. As forquilhas de replicao formam-se, simultneamente, em diversos pontos da dupla hlice de DNA, constituindo-se assim
mltiplas unidades de replicao independentes. Nas forquilhas de replicao,
por aco de uma polimerase designada primase, geram-se pequenas
sequncias de RNA complementares para sequncias das duas cadeias de
DNA a serem replicadas. A partir de cada uma destas sequncias de RNA,
por aco da polimerase I do DNA, inicia-se a replicao das cadeias originais
de DNA.
O crescimento das cadeias novas de DNA tem de ocorrer na direco
5'3', dado que a polimerase do DNA apenas consegue adicionar nucletidos
ao topo da cadeia que contenha um grupo 3-OH. Esta exigncia permite que
a cadeia nova que tem como modelo a cadeia original de DNA com
orientao 3'5' seja sintetizada com orientao 5'3', em contnuo
(Fig. II.4). Contudo, para a cadeia nova que tem como modelo a cadeia original com orientao 5'3' a sntese com orientao 5'3' s possvel se
for iniciada mais tardiamente, em sentido oposto, para sucessivas seces da
cadeia modelo (Fig. II.4). Formam-se, deste modo, vrios fragmentos que tm
a designao de fragmentos de Okazaki. Posteriormente, so unidos uns aos
outros para formarem uma cadeia contnua, por aco de uma ligase.
T
Helicase
A
T
G
C
A
C
G
polimerase
do
DNA
G
3
C
C
C
A
A
5
23
Fig. II.4 Replicao do DNA. A helicase separa as cadeias complementares de uma dupla cadeia de
DNA em fase de replicao. Por aco da polimerase do DNA e por complementaridade, tendo como
modelos as cadeias monocatenares originais, formam-se duas novas cadeias de DNA.
6. REPLICAO DOS VRUS DE RNA

No que respeita aos vrus de RNA, a replicao assenta na sua capacidade
para codificar a transcriptase inversa. Mediante a aco desta polimerase, forma-se uma cadeia de DNA complementar (cDNA) a partir do seu RNA, razo pela
qual este tipo de vrus se designa por retrovrus. Esta cadeia simples de DNA serve
de molde para a formao de uma cadeia de DNA complementar, originando-se assim um fragmento bicatenar de DNA, que pode ser integrado no genoma
da clula hospedeira. Uma vez integrado, replicado conjuntamente com o DNA
da clula. Quando aquela poro de DNA transcrita, formam-se RNA virusal e
protenas virusais que se organizam em novos retrovrus.
7. TRANSCRIO DO DNA
24
A transcrio do DNA diz respeito ao processo pelo qual a clula sintetiza

RNA a partir do modelo proporcionado pelo DNA. A transcrio do RNA
feita de um modo complementar, como a replicao do DNA. No RNA, em
lugar do nucletido de timina utilizado o nucletido de uracilo e a
desoxirribose substituda por ribose.
H vrios tipos de RNA: o RNA ribossmico (RNAr), que representa cerca
de 80% do RNA celular, o RNA de transferncia (RNAt), que representa 15%,
o RNA mensageiro (RNAm), que representa cerca de 5%. Nas clulas
eucariotas, h ainda a produo de pequenas molculas de RNA nuclear que
participam na juno dos exes de RNA, e pequenas molculas de RNA
citoplsmico que participam na sinalizao de protenas sintetizadas. Para a
sntese dos diferentes tipos de RNA, a clula utiliza diversas polimerases: a
polimerase I para a sntese do RNAr, a polimerase II para o RNAhn e a
polimerase III para o RNAt, o RNA nuclear e o RNA citoplasmtico.
A ordem dos codes num gene conhecida como grelha de leitura
(reading frame). O fragmento com a ordem de codes codificadores
designa-se por cadeia sense e a cadeia complementar a cadeia
antisense (Fig. II.5). Na cadeia sense os codes esto alinhados na
direco 5'3' correspondente ao cdigo gentico. Na cadeia antisense
os codes esto alinhados na direco 3'5'. A parte do gene que codifica
a protena designa-se como open reading frame (ORF).
DNA
5
G
C
A
A
G
Cadeia G
sense A
C
T
A
A
A
3
Transcrio
RNAm
Traduo
Protena
3
C
G
T
T
C
Cadeia
C
T antisense
G
A
T
T
T
G
C
A
A
G
G
A
C
U
A
A
A
Alanina
Arginina
Treonina
Lisina
Fig. II.5 Sequncia de acontecimentos que conduzem do DNA protena. A direco da transcrio
53. A cadeia usada como modelo para obteno do RNAm a cadeia antisense. Cada conjunto
de trs bases constitui um codo. Na sua grande maioria, os codes correspondem a um aminocido.
A protena formada durante a traduo tem uma sequncia de aminocidos que respeita a sequncia
dos codes do RNAm.
Para que na sequncia de tripletos do RNAhn haja reproduo da informao gentica presente na cadeia sense do gene, necessrio que a
transcrio ocorra tomando como modelo a cadeia de DNA antisense, por
adio de bases complementares (Fig. II.6). No RNAhn esto presentes as
sequncias correspondentes aos exes e aos intres.
Ainda dentro do ncleo, ocorre o splicing do RNAhn, pelo qual so
excisados os intres e reorganizado os exes (Fig. II.6). Apenas a partir dos
exes, forma-se o RNA mensageiro (RNAm). A remoo dos intres durante
o splicing ocorre por aco de pequenas ribonucleioprotenas nucleares
(snRNPs ou snurps) constitudas por molculas de RNA (ribozimas)
associadas a protenas. O processo de splicing depende da presena de
sequncias especficas dadoras e de sequncias aceitadoras, localizadas
nos limites entre os intres e os exes.
O splicing a ltima parte do processamento do RNAhn dentro do ncleo,
de forma a ser produzido o RNAm. Previamente, ocorre o cap que consiste
na adio de um resduo de 7-metilguanosina ligado ao terminal 5 do RNA por
uma ligao fosfato e a adio de cerca de 150 a 200 adenosinas poli(A) tail.
25
TRANSCRIO
RNAhn C
Polimerase II
Local de
poliadenilao
5
Cadeia antisense de DNA
Ex
In
Ex
In
Ex
In
Ex
Cadeia sense de DNA
In
Splicing
do RNAm
RNAm
In
In
Ex
Ex
Ex
Ex
Poli A
Ex
Ex
Ex
Ex
Poli A
Ncleo
3
Citoplasma
Ribossoma
TRADUO
RNAm
Ex
Ex
Ex
Ex
Poli A
Polipeptdeo
Fig. II.6 Esquema ilustrativo da transcrio do DNA em RNA, do splicing do RNAhn e da traduo
do RNAm em protena. Ex exes; In intres.
26
8. TRADUO DO RNA MENSAGEIRO

O produto final dos genes constitudo pelas protenas sintetizadas a
partir do RNAm, por mecanismos bioqumicos complexos designados por
traduo. A traduo do RNAm envolve a aco dos vrios RNAs e de dezenas
de polipeptdeos no ambiente proporcionado pelos ribossomas.
Cada sequncia de trs bases do RNAm designa-se por codo. Assim,

havendo quatro bases disponveis, podem ocorrer sessenta e quatro codes
diferentes (43). Uma vez que na sntese das protenas esto envolvidos apenas
20 aminocidos, h aminocidos que so codificados por mais do que um
codo, dando assim origem a um cdigo degenerado. De facto, h 61
codes que especificam para aminocidos e trs (TGA, TAG e TAA) que
determinam a paragem da sntese da cadeia polipeptdica (codes stop)
(Fig. II.7). Contudo, essa degenerescncia acarreta vantagens biolgicas, pois
minimiza o efeito deletrio das mutaes e permite variar a composio das
bases do DNA, dentro de uma gama alargada, sem alterar a sequncia das
protenas por ele codificadas.
O cdigo gentico constitudo pelos tripletos de nucletidos que
determinam cada um dos aminocidos quase universal, no sentido de que
os mesmos codes especificam os mesmos aminocidos em todos os
organismos vivos. Apenas a nvel mitocondrial, h quatro codes que so
interpretados de modo diferente do cdigo gentico nuclear (AGA e AGG
que so intrepretados na mitocndria como codo stop em vez de especificarem para arginina, AUA como codo para metionina em vez de isoleucina
e UGA como codo para triptofano em vez de codo stop). Tambm h
algumas diferenas no cdigo gentico de algumas espcies que se ramificaram muito precocemente na evoluo dos eucariotas, como os ciliados.
U
P U
R
I
M
E C
I
R
A
A
B
A
S
E G
SEGUNDA BASE
C
A
U
Tirosina
Cistena
Tirosina
Cistena
C
Codostop Codostop A T
Codostop Triptofano G E
Fenilalanina
Fenilalanina
Leucina
Leucina
Serina
Serina
Serina
Serina
Leucina
Leucina
Leucina
Leucina
Prolina
Prolina
Prolina
Prolina
Histidina
Histidina
Glutamina
Glutamina
Arginina
Arginina
Arginina
Arginina
Isoleucina
Isoleucina
Isoleucina
Metionina
Treonina
Treonina
Treonina
Treonina
Asparagina
Asparagina
Lisina
Lisina
Serina
Serina
Arginina
Arginina
Valina
Valina
Valina
Valina
Alanina
Alanina
Alanina
Alanina
Ac. asprtico
Ac. asprtico
Ac. glutmico
Ac. glutmico
Glicina
Glicina
Glicina
Glicina
U
C
A
G
U
C
A
G
U
C
A
G
R
C
E
I
R
A
B
A
S
E
Fig. II.7 Codes de RNA e sua correspondncia em termos de aminocidos. Note-se a

degenerescncia do cdigo gentico.
27
Ao nvel dos ribossomas, a cada tripleto de bases do RNAm constituindo

um codo, vai-se ligar, por complementaridade, o anticodo o tripleto de
um RNAt que, por sua vez, transporta um aminocido determinado.
Devido complementaridade das bases na ligao entre o codo e o
anticodo, a sequncia dos aminocidos, que se vo unindo por ligaes
peptdicas para formar o polipptido, traduz a sequncia inicialmente
codificada pelos codes da sequncia sense do gene (Fig. II.5). A ordem
dos aminocidos numa protena responsvel pela sua estrutura tridimensional e pela sua actividade bioqumica.
Pelas razes anteriormente expostas, haver cerca de 100.000 a 150.000
protenas diferentes, apesar de se calcular que o nmero de genes na espcie
humana seja da ordem dos 30.000 a 40.000.
pela aco das protenas, pela interaco entre estas e ainda pela
interaco entre as protenas e o meio ambiente que se estabelece a
linguagem da vida.
28
CAPTULO III
REGULAO DA EXPRESSO GNICA
1. INTRODUO
A regulao da expresso gnica ocorre no contexto de uma rede
complexa de interaces gnicas, de interaces entre os genes e o meio e
de efeitos pleiotrpicos. Por sua vez, um mesmo resultado funcional pode
ser originado por agentes diferentes mas igualmente envolvidos na rede de
interaces e uma mesma protena pode ter diversas funes (v.g., a polimerase do DNA, pode funcionar como polimerase, mas tambm como exonuclease 3-5 (revisor de provas) ou como ligase). Um gene pode originar
mais do que um RNAm e, consequentemente, mais do que uma protena.
Como exemplo de interaco gnica refira-se o efeito modificador sobre
a penetrncia do gene BRCA1 mutado quando determinado alelo raro do
locus HRAS1 est presente num indivduo, acarretando um aumento de risco
para cancro do ovrio 2,1 vezes superior ao de portadores da mutao e de
alelos comuns para aquele locus.
A penetrncia de uma mutao pode, ela prpria, ser modificada, como
ocorre com o aumento do nmero de unidades repetitivas CAG localizadas
no exo 1 do gene que codifica o receptor de androgneos ao provocar uma
diminuio da resposta aos androgneos. Nas mulheres com um alelo que
contenha, pelo menos, 28, 29 ou 30 unidades repetitivas CAG no gene do
receptor dos androgneos e mutaes em BRCA1, o cancro da mama
manifesta-se mais precocemente, respectivamente, 0,8, 1,8 e 6,3 anos, em
comparao com as mulheres com alelos com tamanho normal. Este efeito
29
30
parece dever-se ao facto de a protena BRCA1 interagir fisicamente e de ser

um co-activador do promotor do gene do receptor para androgneos.
Por outro lado, a normalidade da expresso gnica no pode ser
olhada de uma forma absoluta e linear. Devem ser consideradas nesta
avaliao as variveis relativas quantidade, qualidade, ao tempo de
ocorrncia (o momento) e ao lugar.
No que respeita quantidade, aparente que uma clula em que um
gene se apresente com um nmero de cpias superior ao normal (v.g., por
presso de seleco ou por erro na disjuno durante a diviso mittica),
passa a codificar um maior nmero de cpias de RNAm e, subsequentemente,
um excesso de protena que pode afectar o equlbrio funcional e conduzir a
comportamentos celulares anormais. Uma reduo do nmero de cpias ou
a ausncia de qualquer cpia do gene pode igualmente conduzir a anomalias
a nvel celular por reduo ou falta do produto codificado. Estas condies
resultam do efeito de dosagem gnica. So exemplos de alteraes que levam
a aumento do efeito de dosagem gnica, as trissomias, a amplificao gnica,
ou as translocaes em que um gene passa a ficar sob a influncia de uma
regio reguladora muito activa. As monossomias ou as delees gnicas so
exemplos de alteraes que conduzem a reduo do efeito de dosagem gnica.
A qualidade do produto codificado por um gene, pode ser modificada
de uma forma fisiolgica por splicing alternativo, ou por uma mutao que
no afecte a viabilidade da clula nem a transcrio do gene em causa.
A varivel tempo aparente na expresso sequencial, ao longo da
evoluo ontogentica, de diversos genes com funes idnticas, que esto
activos em determinadas fases e quiescentes noutras fases. Como exemplo,
refira-se a expresso sequencial dos genes das hemoglobinas.
Para ilustrar a varivel lugar sejam lembradas as experincias que
demonstraram a regresso do fentipo tumorignico observada quando
clulas de teratocarcinoma so inseridas no ambiente de um blastocisto,
dependendo a reverso do fentipo tumorignico do lugar em que so
inseridas, para alm da quantidade de clulas transferidas.
No mbito patolgico, o desenvolvimento da generalidade das neoplasias
e de um nmero considervel de doenas no neoplsicas est associado a
alteraes da expresso gnica.
De uma forma geral, a regulao da expresso gnica ocorre a diversos nveis:
DNA, transcrio em RNA, processamento do RNA, traduo e ps-traduo (Fig. III.1).
DNA
RNAhn
RNAm
Protena
Protena
Modificao
da protena
Modificao
da protena
Fig. III.1 Nveis de regulao da expresso gnica, em termos de localizao nos compartimentos
intracelulares ou no meio extracelular.
2. REGULAO DA EXPRESSO GNICA A NVEL DA REPLICAO DO DNA

Entre os factores que influenciam a expresso gnica a nvel do DNA
(Fig. III.2), incluem-se os genes reguladores e os factores que interferem no
incio da replicao do DNA como as protenas histnicas e as protenas no
histnicas, bem como as primases, as enzimas iniciadoras da replicao e a
polimerase do DNA, de entre as mais de vinte protenas diferentes que
intervm de um modo coordenado na replicao.
Por vezes, ocorre um aumento do nmero de cpias de um determinado
gene, tendo por base a amplificao gnica, o que se traduz em aumento
significativo da expresso. A reduo da expresso gnica tambm se pode
observar, quando h perda de um alelo ou dos dois alelos presentes num
locus. Os rearranjos do DNA tambm podem intervir na regulao da
expresso gnica, seja de modo quantitativo, seja de modo qualitativo.
A regulao da replicao articula-se com o desenvolvimento do ciclo
celular. Pode tambm conduzir paragem do processo de replicao quando
estiverem presentes agresses do DNA que sejam passveis de reparao.
A protena TP53 como vigilante do genoma tem um papel crucial nesta
deciso. Se estiver alterada a sua funo, a paragem da replicao pode
31
no ocorrer e as cadeias de DNA a distribuir pelas clulas filhas reproduzem

alteraes da sequncia do DNA que podem originar perturbaes da
regulao da proliferao celular.
DNA
Transcrio
do DNA
Aco de genes reguladores

Amplificao gnica
Rearranjos do DNA
Replicao do DNA
Actividade da polimerase do RNA

Estrutura da cromatina
Factores de transcrio
Metilao do DNA
Velocidade de iniciao
Velocidade de sntese do RNA
RNAhn
Processamento
do RNAhn
Degradao do RNA
Poliadenilao do RNA
Splicing
RNAm
Traduo
do RNAm
Acessibilidade do codo AUG ao ribossoma

Disponibilidade dos ribossomas
Disponibilidade do RNAt
Estabilidade do RNAm
Velocidade da sntese do polipeptdeo
Protena (funcional ou no funcional)
Ps-traduo
Clivagem por proteases

Disponibilidade de outras protenas ou ies
Organizao em oligmeros
Fosforilao
Glicosilao
Molcula
funcional
Fig. III.2 Nveis e mecanismos de regulao da expresso gnica.
32
3. REGULAO DA EXPRESSO GNICA A NVEL DA TRANSCRIO

Os mecanismos subjacentes converso de um gene quiescente num
locus transcrito activamente, constituem um problema central da biologia
molecular dos seres eucariotas superiores, uma vez que a transcrio o nvel
mais importante para a regulao da expresso gnica. Entre os factores que

influenciam a transcrio (Fig. III.2) contam-se a actividade da polimerase do
RNA, a estrutura da cromatina, os factores de transcrio, a metilao do
DNA, a velocidade de iniciao e a velocidade de sntese do RNA. A nvel da
cromatina, verificam-se modificaes da sua sensibilidade s nucleases, em
regies prximas ou nos locais em que se inicia a transcrio activa de genes.
A regulao da transcrio de um determinado gene, nos seres eucariotas
superiores, envolve sequncias promotoras e sequncias intensificadoras (Fig. III.3).
A sequncia promotora est localizada imediatamente antes do ponto em que
se inicia a transcrio. A sequncia intensificadora pode-se localizar antes da
sequncia promotora distncia de algumas quilobases (2kb ou mais), a seguir
ao gene (no sentido em que se processa a transcrio), interposta no prprio
gene ou ainda na cadeia de DNA complementar do gene em causa.
Um promotor tpico apresenta, numa zona prxima da sequncia a ser
transcrita, uma regio rica em bases adenina e timina, a sequncia TATAAT,
(TATA box), cuja funo determinar o local preciso de incio da transcrio
e a cadeia que serve de modelo, pela ligao nessa regio da polimerase do
RNA (Fig. III.3). Outra regio do promotor, um pouco mais afastada do incio
da transcrio, apresenta um conjunto de sequncias designadas por
elementos promotores de montante (UPEs, upstream promotor elements),
em que se encontram sequncias de bases caractersticas, como CAAT e
outras. A funo dos UPEs controlar a velocidade de transcrio, regulando
a frequncia da sua iniciao. A fora do promotor da transcrio
determinada pelo nmero e pelo tipo de UPEs.
UPEs
CAAT
100-200 bp
S. intensificadora
2000 bp
-100 bp
S. promotora
R.
iniciadora
TA TA
R. codificadora
EX INT EX INT EX ST
20-30 bp
R. reguladora
+1
Fig. III.3 Gene e estruturas associadas transcrio. O quadrado escuro assinala o local de ligao
da polimerase II do RNA. Na regio reguladora, as zonas ponteadas dizem respeito a sequncias que
no se relacionam com a expresso do gene. UPEs elementos promotores de montante; bp pares
de bases; EX exes; INT intres; ST sequncia terminal. A extenso dos elementos representados
no obedece a escala.
33
A sequncia intensificadora da transcrio aumenta a velocidade de

transcrio, controlada de um modo basal pela sequncia promotora,
aumentando o nmero de molculas de polimerase do RNA que se movem
ao longo do gene, promovendo a sua transcrio.
H dois tipos de sequncias intensificadoras: as que respondem a
alteraes do meio ambiente (induzveis) e as que so activadas apenas em
momentos especficos durante o desenvolvimento do organismo, ou somente
em tecidos especficos (intensificadores especficos de tecido ou do perodo
de desenvolvimento). De entre os factores capazes de actuar sobre os
intensificadores induzveis, destacam-se os factores de crescimento e as
hormonas esterides. O gene do interfero e o oncogene FOS so alguns
exemplos de genes com intensificadores induzveis associados. De entre as
sequncias intensificadoras especficas para tecidos e dependentes do perodo
de desenvolvimento, a melhor caracterizada est associada aos genes das
imunoglobulinas.
A especificidade dos intensificadores est relacionada com a
disponibilidade, no local e no tempo, de determinadas protenas, designadas
factores de transcrio. Os factores de transcrio tambm actuam sobre as
sequncias promotoras. Esta aco dos factores de transcrio sobre as
sequncias promotora e intensificadora poder explicar como as sequncias
intensificadoras exercem a sua aco sobre a sequncia promotora, embora
localizadas distncia. Um modelo plausvel para este mecanismo sugere que
os factores de transcrio, ao ligarem-se s duas sequncias promotora e
intensificadora, promovem a sua aproximao merc da excluso do DNA
interposto, pela formao de uma ansa. A ligao da polimerase do RNA ao
promotor providenciada pela ligao dos factores de transcrio s
sequncias reguladoras do gene, no se verificando na ausncia desses
factores. Por aco dos factores de transcrio tem lugar o desenrolamento
34
local da cadeia de DNA, o que torna a cadeia que serve de modelo acessvel
transcrio. A transcrio processa-se ao longo do gene, na direco 35,
para os exes e para os intres, at que a polimerase do RNA encontre a
sequncia que assinala o fim da transcrio e se dissocia do DNA, com
subsequente libertao da cadeia de RNA sintetizada.
A especificidade dos factores de transcrio poder estar na origem da
especificidade de algumas infeces virusais para determinadas clulas ou
tecidos de uma espcie animal ou para determinada espcie animal, cujos

factores de transcrio se liguem aos elementos regulares dos genes virusais,
permitindo a sua transcrio.
H outras sequncias de DNA denominadas silenciadoras, cuja funo
reprimir a transcrio, quando ficam sob a influncia de factores especficos,
exercendo um controlo negativo da transcrio, o que tambm constitui um
aspecto importante da especificidade tecidular da induo da expresso
gnica. Aparentemente, os estmulos indutores da transcrio causam a
remoo do factor proteico inibidor, permitindo que o factor de transcrio
positivo se ligue aos elementos reguladores da transcrio.
3.1. REGULAO EPIGENTICA DA TRANSCRIO

A metilao das bases citosina e a alterao da estrutura da cromatina
constituem outras formas importantes de modificar o DNA e, dessa forma,
influenciar a expresso gnica de uma forma estvel. Estas modificaes so
de natureza epigentica j que no se baseiam na alterao da sequncia
do DNA. Mecanismos como a diferenciao celular, a lionizao e o imprinting so de natureza epigentica. Em relao a alguns genes verifica-se inclusive que o imprinting ocorre apenas em algumas fases do
desenvolvimento ou apenas em alguns tecidos do organismo, fazendo deste
mecanismo uma forma muito fina de regulao da expresso gnica.
O grau de metilao das bases citosina (5-metilcitosinas) das regies
promotoras de genes que esto a ser transcritos (locais CpG, em que p
significa a ligao fosfodiester 3'-5' entre C e G) influencia a transcrio.
A hipometilao corresponde a um estado em que a transcrio activa,
enquanto que a hipermetilao corresponde inibio da transcrio.
A metilao , assim, um mecanismo epigentico envolvido na diferenciao
celular, no controlo da proliferao celular e na transformao neoplsica.
Factores ambientais como os folatos, a colina, a metionina e a vitamina B12
promovem a hipermetilao, enquanto que o etanol e os hidrocarbonetos
aromticos promovem a hipometilao.
A metilao das citosinas pode funcionar como um mecanismo
mutagnico espontneo, j que as molculas de 5-metilcitosina podem
desaminar e sofrer mutao para timina. Efectivamente, mais de um tero
35
de todas as mutaes pontuais responsveis por doenas humanas tm

origem na alterao de CpG para TpG.
A metilao das bases citosina poder interferir ao nvel da transcrio
na ligao dos factores de transcrio do DNA. Um mesmo gene pode
apresentar diferentes nveis de metilao em diferentes clulas de um ser
pluricelular, consoante esse gene esteja ou no a ser transcrito, apresentando
hipermetilao nas clulas cuja diferenciao no implica a sua transcrio.
Logo aps a replicao do DNA, o padro de metilao da nova cadeia
objecto de manuteno cuidada pela clula, dado que no se encontra
metilada. Assim, pouco tempo aps a replicao, esta cadeia metilada por
aco de uma metiltransferase de manuteno que adiciona os radicais metilo
aos locais CpG da cadeia recm-sintetizada correspondentes aos locais
metiladas na cadeia de DNA que serviu de modelo replicao.
Como consequncia da regulao epigentica refira-se o que ocorre
com o gene WT1, que na forma mutada est associado ao tumor de Wilms.
Na espcie humana, este gene apresenta uma expresso bi-allica no rim e
uma expresso monoallica de origem materna no crebro e na placenta,
devido metilao do outro alelo.
Relativamente alterao da estrutura da cromatina, deve-se ter presente
o efeito da poli-ADP ribosilao das histonas. As protenas histnicas H1, H2B
e lamina B, uma vez ribosiladas, perdem a afinidade para o DNA, devido
carga altamente negativa dos polmeros de ADP-ribose. Assim, este processo
pode constituir uma forma relativamente simples de desfazer a ordem mais
elevada da organizao da cromatina, de modo a facilitar o acesso dos
factores de transcrio s sequncias reguladoras da expresso gnica.
3.2. PROCESSAMENTO DO RNAHN

36
A forma como se opera o processamento do RNAhn tambm se reflecte

na regulao da expresso gnica, em relao com a degradao, a
poliadenilao e o splicing (Fig. III.2). Este processo consiste na introduo
de alteraes da sequncia original dos exes. Desta forma, a clula pode
gerar diferentes RNAm a partir de um nico gene e, consequentemente,
produzir diferentes protenas. O splicing alternativo veio demonstrar que
o dogma um gene, uma protena no defensvel como verdade absoluta.
Nos actuais cerca de 11.000 RNAm conhecidos, cerca de 2,4% resultam

de splicing alternativo. No entanto, estudos realizados por alinhamento
com ESTs (expressed sequence tags) sugerem que cerca de 60% dos genes
humanos podero evidenciar splicing alternativo, uma das razes para a
complexidade da expresso gnica no homem.
Entre outros genes em que foi identificado splicing alternativo,
incluem-se o protooncogene KIT, o gene NF1 (cujas formas mutadas se
associam a neurofibromatose), o gene AT (cujas formas mutadas originam
ataxia telangiectasia quando em homozigotia), o gene WT1 e o gene BCLX.
O gene WT1 tem dois locais de splicing alternativo, pelo que pode originar
quatro protenas que diferem pela sua especificidade de ligao ao DNA e
pelas funes reguladoras. O protooncogene BCLX origina por splicing
alternativo duas protenas com propriedades diferentes: BCLXL que mimetiza
a protena BCL2 e inibe a apoptose e BCLXS, uma variante mais curta que
funciona como um inibidor dominante de BCL2, induzindo, por isso, a
apoptose. A glicosilase do DNA (uracil DNA glicosilase) transita para o ncleo
ou para as mitocndrias em funo do splicing alternativo.
Ao splicing alternativo pode-se associar o recurso pela clula a
promotores alternativos, como ocorre com o gene SF1 (factor esteroidognico). Deste gene, podem ser codificadas as protenas SF1 e ELP.
O papel dos intres no claro, apesar do seu envolvimento no splicing dos exes e na formao de diversos RNAm a partir de um nico RNAhn,
por splicing alternativo. No entanto, para a maioria dos intres no se tem
encontrado qualquer funo, tendo sido demonstrado que um gene pode
funcionar normalmente aps exciso de um intro. Pequenas inseres ou
delees ocorridas num intro geralmente no comprometem a funo do
gene, embora as mutaes que atinjam as sequncias dos intres envolvidas
no splicing tenham repercusses na organizao final do RNAm. H ainda
a possibilidade de os intres serem vestgios de genomas virusais que tero
infectado as clulas, ou de genes antigos actualmente no funcionais.
A expresso gnica baseada em vrios exes e no splicing poder ser,
ainda, uma forma de facilitar a evoluo.
37
4. REGULAO DA EXPRESSO GNICA A NVEL DA TRADUO

A eficcia da traduo do RNAm influenciada pela acessibilidade do
codo AUG ao ribossoma, a disponibilidade dos ribossomas, a disponibilidade
do RNAt, a estabilidade do RNAm e a velocidade da sntese de cada molcula
polipeptdica (Fig. III.2). O controlo da expresso gnica pela estabilidade do
RNAm foi verificado no processo de sntese da tubulina, em que se observou
uma diminuio do nmero de molculas de RNAm em correlao com um
aumento do nmero de dmeros de tubulina.
A fosforilao da protena EIF-2, ao traduzir-se na represso do incio da
traduo constitui uma das formas de regulao a este nvel. Na verdade, na
condio fosforilada, no ocorre a ligao de uma molcula de GTP
molcula EIF-2, uma condio necessria para que esta molcula providencie
o transporte do RNAt iniciador para a unidade menor do ribossoma. Alis,
o grau de fosforilao das protenas constitui uma das formas mais comuns
de regulao ps-traduo da expresso gnica.
5. REGULAO DA EXPRESSO GNICA A NVEL DA PS-TRADUO
38
A nvel da ps-traduo do produto de codificao de um gene, a

regulao pode ser operada pela clivagem das protenas por proteases, pela
disponibilidade de outras protenas ou ies, pela eventual organizao em
oligmeros, bem como pelo grau de fosforilao ou de glicosilao
(Fig. III.2). Na verdade, um polipeptdeo pode no ser funcional na forma em
que produzido a nvel ribossmico, como ocorre com o pepsinognio ou a
pr-insulina, sendo necessria a sua clivagem prvia para que a molcula
possa actuar. Por outro lado, a clivagem depende de enzimas presentes no
ambiente em que se encontra o produto. A modificao da estrutura de um
polipeptdeo pode ainda ocorrer por aco de proteases que levem sua ciso
em diferentes locais, de modo a originar molculas com actividade diferente
em funo do local em que se opera a ciso. Quando o produto codificado
por um gene entra na constituio de molculas complexas em que os
polipeptdeos se associem a ies metlicos, a sua actividade depende da
disponibilidade dos ies. o caso da hemoglobina, em que pode haver
deficincia devida a falta de ferro, para uma capacidade normal de sntese

proteica.
A forma como as molculas se organizam aps a traduo tambm pode
influenciar a expresso funcional, sendo necessrio conhecer a forma como
actuam as protenas para interpretar os efeitos de alteraes observadas a
nvel gnico. O produto codificado por um gene pode actuar de uma forma
monomrica ou associar-se a outras molculas polipeptdicas iguais ou
diferentes. Nos caso em que se formam oligmeros, embora haja a produo
inicial de um nmero equivalente de monmeros normais e de monmeros
com mutao ainda que no dominante, a capacidade funcional dos oligmeros que incorporam monmeros mutados afectada, havendo uma perda
de funo bastante mais acentuada do que a que se observa para idnticas
condies de heterozigotia, quando a molcula funcional um monmero.
Como exemplos de organizao dimrica, refira-se a molcula funcional
que resulta da expresso do gene APC. As protenas G so exemplos de
heterotrmeros (molculas constitudas por trs subunidades diferentes) em
cuja constituio entram elementos G (de um grupo de 16 subunidades ),
elementos (de um grupo de cinco subunidades) e elementos (de um grupo
de sete subunidades). O colagneo outro exemplo de um trmero
constitudo por duas molculas idnticas codificadas por um gene e uma
terceira molcula codificada por outro gene, que se organizaram numa tripla
hlice. Como organizao funcional em que entram quatro subunidades
idnticas (tetrmeros), refira-se a dos polipeptdeos codificados pelo antioncogene TP53.
O grau de fosforilao das protenas, a nvel da serina, da treonina e da
tirosina, pode influenciar a sua actividade, como se verifica com a protena
p105RB codificada pelo gene RB. Trata-se de uma forma de regulao fina,
mediada por um balano entre a actividade das proteinacinases (envolvidas
na fosforilao) e a actividade das fosfatases (com capacidade para
removerem os fosfatos). A fosforilao da protena inibe a formao de
complexos com protenas especficas, deixando-as livres. Tratando-se da
complexao de factores de transcrio como a protena E2F, a manuteno
na forma livre vai possibilitar a sua ligao regio reguladora dos genes alvo
e a promoo da sua expresso. Pelo contrrio, no estado no fosforilado,
observa-se a formao de complexos com a protena alvo, o que inibe a sua
aco.
39
Tambm a formao de pontes dissulfeto, a hidroxilao, a metilao,

ou a ribosilao das protenas so formas de modificar a capacidade funcional
das protenas e, consequentemente, de regular a expresso gnica.
6. RETRORREGULAO COMO MECANISMO MODELADOR DA EXPRESSO GNICA
40
Grande parte do conhecimento que temos da regulao da expresso

gnica resulta dos estudos pioneiros de Jacob e Monod, realizados em E. coli.
O modelo de regulao proposto por estes dois prmios Nobel foi descrito
em 1961. Segundo este modelo, a sequncia operadora tem uma localizao
adjacente aos genes estruturais e controla a sua transcrio. A sequncia
promotora da transcrio serve para a ligao da polimerase do RNA e
consequente incio da transcrio. Na ausncia de substncia indutora, por
exemplo a lactose para os genes estruturais associados ao seu metabolismo,
o gene repressor transcrito e a protena repressora resultante da traduo
do seu RNAm liga-se sequncia operadora. Esta ligao de alta
especificidade e interfere com a ligao da polimerase do RNA sequncia
promotora, originando, como consequncia, a escassez de molculas de
RNAm transcritas a partir dos genes estruturais. Na presena de indutor no
meio de cultura das E. coli, forma-se um complexo entre a protena repressora
e o indutor. A aco da protena repressora sobre a sequncia operadora
assim inibida e, nestas condies, a polimerase do RNA liga-se sequncia
promotora, com a consequente transcrio dos genes estruturais e a sntese
de um grande nmero de molculas da enzima codificada por estes genes.
A nvel humano, so exemplos de retroregulao como mecanismo
modelador da expresso gnica:
a manuteno dos nveis intracelulares de colesterol por retroregulao
mediada pelo colesterol livre, atravs da sntese de receptores das LDLs,
bem como da reduo da velocidade de sntese de colesterol endgeno
de novo;
a manuteno dos nveis de insulina por processamento da pr-insulina
mediada por uma protease, como resultado da velocidade maior ou
menor com que se processa a clivagem da pr-insulina sob a influncia
da glicmia.
CAPTULO IV
DIVERSIDADE HUMANA. MUTAES. REPARAO DO DNA
1. DIVERSIDADE HUMANA
A diversidade dos seres vivos no parece assentar apenas no nmero de genes
presentes em cada espcie, ou no aparecimento de novos genes com o emergir
de novas espcies. Em particular, o aumento de complexidade de uns seres vivos
em relao a outros ter muito a ver com a seleco de formas mais sofisticadas
de regulao da expresso gnica e com a duplicao de genes j existentes.
Como factores mais significativos da diversidade humana encontram-se
as mutaes. A recombinao gentica que implique genes de diferentes loci
e a imigrao desde que possibilite a adio de novos alelos ao fundo gnico
original so tambm causas de diversidade.
A diversidade humana resulta do efeito aditivo dos genes e das suas
mutaes, da interaco entre as alteraes genticas devidas a mutaes,
da capacidade de adaptao ao meio (fsico e relacional humano) e da
seleco decorrente de doenas.
Ao longo do genoma, h regies com variabilidade maior ou menor em
relao a um valor mdio, havendo loci como os do sistema de histocompatibilidade HLA, em que se observa a mais elevada variabilidade entre os indivduos.
As variaes subjacentes diversidade podem ser contnuas ou descontnuas.
As variaes contnuas esto associadas expresso de vrios genes (poligenia)
em conjugao com a aco do meio ambiente (v.g., estatura). Nestes casos h
adio dos efeitos parcelares de cada gene, sem fenmeno de dominncia
gnica, nem interaco gnica. Pelo contrrio, as variaes descontnuas
permitem uma classificao em classes e so de causa monognica.
41
Entre os genomas de dois seres humanos, as diferenas so apenas de cerca

de 1 bp por cada 1250 bp, o que permite inferir uma elevada identidade genmica.
1.1. BASES GENTICAS DA DIVERSIDADE

1.1.1. CONTRIBUTO DOS CROMOSSOMAS
Aps ocorrer replicao (na meiose), os cromossomas homlogos de cada

par juntam-se e ocorre o crossing-over, com troca de material entre si,
normalmente numa, duas ou trs regies (Fig. IV.1). Em cada meiose humana
h cerca de 50 crossing-overs. Contudo, os locais em que ocorre crossing--over no so constantes, pelo que um mesmo par de cromossomas
pode originar cromossomas com informao diferente em clulas diferentes
(v.g., um cromossoma 2 herdado do pai, pode ter alguma informao
gentica diferente em dois gmetas do mesmo indivduo).
A
A1
A1
A3
A1
A1
A1
A3
A1
B1
B2
B1
B2
B1
B2
B1
B2
A1
A1
A3
A1
A1
A3
A1
A1
B1
B2
B1
B1
B1
B2
B1
B2
42
Fig. IV.1 Demonstrao da forma como o crossing-over contraria a ligao gnica. A na ausncia
de crossing-over, os dois loci so ocupados pelos mesmos alelos no progenitor e nos gmetas;
B quando ocorre crossing-over, h recombinao dos alelos, com aparecimento de novas
combinaes nos gmetas (a combinao dos alelos A3,B2 no estava presente antes da meiose).
Durante a formao do fuso, na metafase da meiose, os dois

cromossomas de cada par de homlogos ligam-se a fibras do fuso: um a
fibras de um dos plos da clula e o outro a fibras do outro plo da clula.
No entanto, no h qualquer selectividade. Assim, o homlogo de origem
paterna do par 1 pode ligar-se s fibras de um dos plos e o homlogo de
origem paterna do par 2 pode ligar-se s fibras do outro plo ou do mesmo.
Trata-se de uma distribuio ao acaso que est na base da segregao
independente que fundamenta a 2 lei de Mendel e permite que haja
recombinao do complemento cromossmico das clulas filhas por mistura
de cromossomas de origem paterna e materna, com a probabilidade de se
formarem 2 23 (8.388.608) combinaes diferentes nos gmetas. Sendo
idntica a probabilidade de se formar um nmero igual de gmetas diferentes
no outro membro do casal, o nmero possvel de zigotos diferentes que se
podem originar por fecundao de um ovcito por um espermatozide de
(223)2, ou seja, algo mais do que 70 trilies de possibilidades diferentes.
Para comparao das ordens de grandeza envolvidas, refira-se que o nmero
actual de seres humanos apenas de cerca de 6 bilies!
diversidade resultante da segregao independente, junta-se a que
advm do crossing-over durante a meiose e do polialelismo que se descreve
seguidamente. No seu conjunto, considerando apenas um crossing-over por
cada par de homlogos de cromossomas e que as diferenas entre o contedo
allico paterno e materno so da ordem de 10%, chega-se concluso de
que podero ser produzidos mais do que 6 1043 zigotos diferentes na espcie
humana. O nmero assim obtido maior do que o nmero total de seres
humanos que tero existido, desde sempre, face da Terra, o que demonstrativo da unicidade de cada ser humano, no plano estrito da combinao
nica de informao gentica, a nvel nuclear. No entanto, os valores
anteriores no contaram com o contributo dos polimorfismos e das mutaes.
1.1.2. CONTRIBUTO DO POLIALELISMO
O polialelismo outra das causas da diversidade. Para cada locus de um

indivduo, h dois alelos, ou seja, duas formas alternativas de um gene (com
excepo da hemizigotia para o cromossoma X no sexo masculino e da
maioria dos genes do cromossoma Y). Contudo, numa populao podem
existir mltiplos alelos em competio por um mesmo locus, como ocorre,
43
por exemplo com os alelos do grupo sanguneo ABO ou com os genes HLA
do sistema major de histocompatibilidade. Em relao ao genes HLA, a grande
variabilidade allica est na base das razes porque difcil encontrar
compatibilidade entre dadores e receptores de rgos para transplantao
(v.g., HLA-A com 266 alelos, HLA-B com 511 alelos, HLA-C com 128 alelos,
HLA-DRB com 397 alelos).
As leis de Mendel permitem mltiplas combinaes de pares de alelos
(gentipos) para um determinado locus, em indivduos diferentes, de
acordo com a frmula x = [n(n+1)]/2, em que x o nmero de gentipos e
n representa o nmero de alelos alternativos para o locus em causa.
Os dois alelos presentes num locus podem-se encontrar em homozigotia
ou em heterozigotia. Uma medida da variabilidade gentica numa populao
dada pela frequncia de indivduos heterozigticos para um determinado
locus. Quanto maior for a frequncia de um nico alelo em comparao com
os outros alelos que concorrem para um mesmo locus, menor a frequncia
de heterozigotos. Se numa populao houver vrios alelos para um locus, com
frequncias semelhantes, a frequncia de heterozigotos ser elevada.
1.1.3. CONTRIBUTO DOS POLIMORFISMOS DE DNA
44
Quando as formas alternativas de um gene ou de uma sequncia

intergnica, tm uma frequncia igual ou superior a 1% numa populao,
so designadas como polimorfismos de DNA. Os polimorfismos so
considerados variaes normais numa populao, pelo que nenhuma das
formas afecta significativamente o seu portador. No que respeita aos genes,
cerca de um tero apresenta sequncias polimrficas.
Designam-se como variaes raras, as formas alternativas de um gene
ou de uma sequncia intergnica cuja frequncia inferior a 1%.
Os polimorfismos de DNA so herdados de uma forma mendeliana e so
fonte de grande diversidade interindividual. As mutaes que ocorrem em
DNA intergnico (no codificante), por no estarem habitualmente associadas
a presso de seleco, esto na base de um maior polimorfismo observado
nestas regies do genoma. As sequncias de DNA codificadoras em que
ocorram mutaes sinnimas ou mutaes missense que no afectem de
modo significativo a funo da protena tambm podem ser mantidas numa
populao como polimorfismos.
Por vezes, os polimorfismos so to extensos que se traduzem em

diferenas do comprimento dos cromossomas (heteromorfismos).
Os polimorfismos de DNA podem ser RFLPs, VNTRs (variable number
of tandem repeats) ou SNPs (single nucleotide polymorphisms).
Os RFLPs so fragmentos de DNA de diversos tamanhos, observveis aps
digesto do DNA por enzimas de restrio (Fig. V.1).
Os VNTRs so polimorfismos de comprimento, que resultam da repetio
sequencial de um mesmo conjunto de bases. As sequncias de bases que se
repetem podem ser minissatlites ou microssatlites (Fig. IV.2). A designao
minissatlites devida sua localizao numa camada de sedimentao de
menor densidade, prxima da camada principal de DNA, quando o DNA
genmico sujeito a ultracentrifugao em gradiente de densidade de cloreto
de csio, aps restrio enzimtica. Nos minissatlites, as unidades repetitivas
tm habitualmente um comprimento entre 9 e 70 bp. Estes polimorfismos
evidenciam heterozigotia em cerca de 70% das pessoas.
Minissatlites
Alelo 1
ATCCAATATCGGCATCC
ATCCAATATCGGCATCC
ATCCAATATCGGCATCC
Alelo 2
ATCCAATATCGGCATCC
ATCCAATATCGGCATCC
ATCCAATATCGGCATCC
ATCCAATATCGGCATCC
ATCCAATATCGGCATCC
ATCCAATATCGGCATCC
Microssatlites
A. STRs
Alelo 1
ATCG
ATCG
ATCG
ATCG
ATCG
ATCG
ATCG
ATCG
Alelo 2
ATCG
ATCG
ATCG
ATCG
ATCG
ATCG
ATCG
ATCG
ATCG
ATCG
ATCG
ATCG
ATCG
ATCG
ATCG
ATCG
ATCG
CA
CA
CA
CA
CA
CA
CA
B. Sequncias (CA) n
Alelo 1
CA
CA
CA
CA
CA
CA
CA
CA
CA
CA
Alelo 2
CA
CA
CA
CA
CA
CA
CA
CA
CA
CA
Fig. IV.2 VNTRs. Esquema demonstrativo da constituio dos minissatlites e dos microssatlites.
A seta indica o ponto em que actua a enzima de restrio para deteco dos minissatlites e o local
de ligao dos primers para deteco dos microssatlites.
45
Por centrifugao, detecta-se ainda uma camada correspondente a

sequncias polimrficas designadas microssatlites, em que as unidades
repetitivas so constitudas por sequncias com 2 a 4 bp. Os microssatlites
encontram-se dispersos sobretudo por regies no codificantes do genoma
e so particularmente susceptveis para erros de replicao. Dentro dos
microssatlites, as unidades repetitivas podem ser trinucleotdicas ou
tetranucleotdicas, originando extenses de DNA designadas por STRs (short
tandem repeats), ou serem dinucleotdicas, a maioria das vezes sequncias
(CA)n.
As sequncias STRs encontram-se distribudas pelo genoma humano
normal em mdia entre cada 150 a 500 kb. Apresentam elevada variabilidade
do nmero de unidades repetitivas.
As sequncias polimrficas (CA)n resultam da repetio em srie de
unidades repetitivas dinucleotdicas CA:GT, constitudas por um nmero
varivel de unidades (entre 10 a 60 cpias) e que aparecem no genoma entre
30.000 e 50.000 vezes. A variabilidade do nmero de unidades repetitivas
bastante elevada, encontrando-se diferenas polimrficas em cerca de 70%
dos casos, entre cromossomas homlogos.
Os SNPs so polimorfismos que assentam na mutao de um nico
nucletido. Para serem considerados como polimorfismos devem ter uma
frequncia igual ou superior a 1% na populao. No genoma humano haver
cerca de 12 a 16 milhes de SNPs. Os SNPs parecem ser responsveis pela
maior parte da variabilidade gentica humana interindividual (v.g., memria,
habilidades, criatividade, coordenao motora). Nesta variabilidade, inclui-se
ainda a diversidade de respostas individuais a uma mesma teraputica
farmacolgica.
46
2. MUTAES DO DNA
As mutaes definem-se como alteraes permanentes provocadas na
sequncia de DNA. A taxa de mutao define o nmero de mutaes/gene/
gerao (sendo a gerao a unidade de tempo).
As taxas de mutao na espcie humana so calculadas a partir da
incidncia das mutaes de novo de natureza dominante. Reflectem a
probabilidade de ocorrncia de uma alterao grave num gene e no a

totalidade das mutaes que um gene ou o genoma podem sofrer. Apenas
evidenciam as mutaes que se expressam. Nesta perspectiva, so assumidos
como pressupostos a penetrncia completa e a ausncia de heterogeneidade.
As fenocpias devem ser excludas.
As taxas de mutao na espcie humana variam consoante os genes.
A nvel do DNA nuclear, so tipicamente, da ordem de 10 -4 a 10 -6 por
gmeta. A neurofibromatose tipo I uma das doenas com uma maior taxa
de mutao de novo, da ordem de 10 -4. Para a acondroplasia a taxa
calculada da ordem de 10-5. O gene da coreia de Huntington tem uma das
mais baixas taxas, com um valor inferior a 10-6 por gmeta.
A taxa de mutao do DNA mitocondrial 5 a 10 vezes mais alta do
que a que observada no DNA nuclear, dando origem a mltiplos
polimorfismos com frequncias diversas em diferentes populaes (v.g., entre as populaes de diferentes continentes). As mutaes podem ocorrer por
substituio de bases ou por rearranjos (delees e/ou inseres). A elevada
taxa de mutao do DNA mitocondrial poder resultar da combinao de uma
capacidade de reparao do DNA menos eficientes do que a nvel nuclear e
de um ambiente altamente mutagnico resultante da produo de radicais
livres durante a respirao.
A probabilidade de ocorrncia de uma mutao num gene depende de
factores intrnsecos (mutaes espontneas) e de factores extrnsecos
(mutaes induzidas). As mutaes induzidas ocorrem, normalmente, com
uma frequncia muito mais elevada do que as mutaes espontneas.
As alteraes do DNA podem tambm decorrer de erros de replicao.
Relativamente aos factores intrnsecos ao DNA, subjacentes s diferentes
taxas de mutao observadas para genes diferentes, indicam-se:
a extenso do gene, sendo que, quanto maior a extenso, maior
a probabilidade de ocorrncia de uma mutao;
o nmero e a extenso dos intres, pela maior probabilidade de erro
durante o splicing;
o tipo de bases presente nas posies ocupadas por bases pricas
(adenina ou guanina) pode ocorrer depurinao do DNA, ficando um
lugar apurnico por perda de uma base prica, quando h interrupo
da ligao glicosdica entre a base e a desoxirribose; nas regies de
47
DNA com maior percentagem de bases citosina haver uma maior

probabilidade de ocorrncia de mutaes por desaminao da forma
5-metilcitosina em timina;
a presena de sequncias repetitivas, nomeadamente de tripletos
devido possibilidade de expanso do nmero de tripletos presente
(v.g., na sndroma do X-frgil, em relao com o aumento do nmero
de tripletos CGG).
Os factores extrnsecos ao DNA que provocam mutaes designam-se
mutagneos. Nestes factores, incluem-se os agentes ambientais de natureza
qumica e de natureza fsica.
Como exemplos da aco de agentes qumicos, refira-se a incorporao
no DNA de anlogos das bases normalmente encontradas (v.g., 5-bromouracilo que um anlogo da timina e que causa transies de bases, ou
2-aminopurina que um anlogo da adenina e que pode provocar transies
ao poder emparelhar com citosina). Refira-se tambm o efeito da proflavina
e dos corantes de acridina que, como molculas que se intercalam na cadeia
nucleotdica, podem provocar mutaes frameshift. Os carcinogneos
qumicos podem provocar metilao (reparada directamente pela enzima O6metilguanina-DNA metiltransferase) ou modificaes covalentes do DNA que
originam aductos (reparadas pelas enzimas de exciso). Os aductos podem
tambm ser provocados por espcies livres de oxignio.
Para alm destes agentes qumicos, h centenas de outras molculas
mutagnicas como o benzeno, o formaldedo, os agentes alquilantes (v.g.,
etilmetanosulfonato, nitrosoguanidina), o nitrito de sdio, o cloreto de vinilo
ou a aflatoxina B1 (gera locais apurnicos).
Nos agentes de natureza fsica contam-se as radiaes ionizantes (raios
X, radiao , partculas e e neutres) associadas a troca de bases ou a
48
quebra da dupla cadeia de DNA, e as radiaes no ionizantes, como a

radiao ultra-violeta, capazes de provocar ligaes covalentes entre bases
pirimdicas adjacentes (v.g., dmeros de timidina).
A agresso oxidativa do DNA por radicais livres gerados durante os
processos biolgicos, uma reduzida capacidade para o metabolismo de
genotxicos ou para a reparao do DNA (seja durante a replicao, seja aps
agresso), constituem outros tantos factores mutagnicos.
2.1. TIPOS E LOCAIS DAS MUTAES

As mutaes podem ser muito extensas e visveis por microscopia de luz,
implicando alteraes do nmero de cromossomas (v.g., alterao da ploidia,
ganho ou perda de um cromossoma) ou da estrutura dos cromossomas (v.g.,
translocaes, delees, inverses), ou podem ser de menor dimenso
(mutaes gnicas). A nvel do gene podem-se traduzir em deleo parcial
ou integral de um gene, em duplicao ou insero de um gene, ou ainda
em alteraes de um ou mais codes ou de uma ou mais bases. Quando est
envolvida uma nica base, designam-se como mutaes pontuais.
Quanto ao local, as mutaes podem ocorrer em regies gnicas
codificadoras (exes) ou em regies no codificadoras (intres, regies
flanqueadoras em posio 5 em que se encontram sequncias reguladoras
da expresso gnica, sequncias flanqueadoras em posio 3, bem como em
locais das extensas regies intergnicas).
As mutaes que ocorrem em exes alteram o RNAm e, na maioria das
vezes, a composio em aminocidos das protenas. As mutaes em regies
no codificadoras, habitualmente, no afectam a composio das protenas
em aminocidos. Mesmo as mutaes que ocorrem em exes podem no
afectar a sequncia de aminocidos das protenas, sobretudo se ocorrerem
no terceiro nucletido de cada codo, o que, na maioria das vezes, no altera
o aminocido, devido degenerescncia do cdigo gentico (ver Fig. II.7).
Refira-se, no entanto, que as mutaes em regies no codificadoras
tambm podem afectar a expresso gnica. exemplo, uma mutao do
primeiro intro do gene da globina que, ao provocar splicing anormal,
origina nveis reduzidos de RNAm para esta globina, com aco patognica
traduzida em talassmia . So tambm exemplos de mutaes patognicas
as que ocorrem nas regies no codificadoras dos genes da globina
correspondentes regio promotora em 5, com consequente reduo dos
nveis de transcrio, e mutaes na sequncia de poliadenilao em 3, com
consequente transporte anormal do RNAm para o citoplasma e igualmente
reduo da produo da protena.
49
2.1.1. MUTAES PONTUAIS
As mutaes pontuais podem resultar da substituio de uma base por

outra, ou da insero ou deleo de uma nica base. Se uma purina for
substituda por outra purina (v.g., AG), ou uma pirimidina por outra
pirimidina (v.g., CT), a mutao designada como transio. Se uma purina
for substituda por uma pirimidina ou vice-versa, a alterao designada
como transverso. As transies so mutaes mais comuns do que as
transverses, nomeadamente a transio CT bastante frequente.
Frequentemente, a transio CT deve-se desaminao da base citosina
metilada (5-metilcitosina), o que origina timina, cabendo lembrar que a
metilao da citosina um mecanismo importante no processo de regulao
da expresso do DNA. O facto de a desaminao das bases citosina metiladas
ser um mecanismo de mutao frequente explica a reduo da frequncia
das sequncias nucleotdicas CpG no genoma dos vertebrados.
2.1.2. MUTAES PONTUAIS POR SUBSTITUIO DE UMA BASE
50
As mutaes pontuais que resultam da substituio de uma nica base

podem funcionar como mutaes sinnimas, mutaes missense ou
mutaes nonsense (Tabela IV.1).
As mutaes sinnimas, ou silenciosas, so responsveis por cerca de
25% das mutaes pontuais. So mutaes pontuais que resultam da
substituio de uma base nucleotdica, em posio que no altera a
codificao para o aminocido em questo, embora altere o codo. So
exemplos de mutaes sinnimas pontuais a alterao do codo UCU
para UCC, UCA, UCG, sem que se altere a codificao para serina, ou a
alterao do codo CGU para CGC, CGA ou CGG, mantendo-se a
codificao para arginina. Contudo, a presena de um codo alternativo
para um mesmo aminocido pode interferir com a preciso e a velocidade
da transcrio de RNAm e com a velocidade e a preciso da traduo
devido a reduzida disponibilidade de molculas de RNA de transferncia
especficas.
As mutaes missense ocorrem por substituio de uma base
nucleotdica de forma que o codo resultante codifica um aminocido
diferente. As consequncias patognicas deste tipo de mutao pontual
podem ser moderadas ou graves, tendo em considerao a intensidade

com que afecta a actividade funcional da protena que o gene codifica.
Um exemplo de mutao missense pontual consiste na alterao do codo
seis do RNAm produzido a partir do gene da globina mutado, de GAG para
GUG. Esta alterao provoca a substituio do aminocido glutamina por
valina, o que tem um efeito patognico, ao traduzir-se em drepanocitose.
A alterao de apenas um aminocido altera a hemoglobina adulta normal
(Hb A) para hemoglobina S (Hb S).
Tabela IV.1. Demonstrao do efeito de diversos tipos de mutao, por analogia com as
alteraes na frase Mel com po boa cr do
TIPO DE MUTAO
Missense
Nonsense
Frameshift
Deleo
Mutao dinmica
(expanso)
NMERO DE BASES
RESULTADO
1 (pontual)
1 (stop)
1 (Deleo)
1 (Insero)
3 bases
Repetio de tripletos
(codes)
MEL COM PO BOA DR DO

MEL COM
MEL COM (P) OB OAC RD O
MEL COM PM OBO AC RD O
MEL COM ( ) BOA CR DO
MEL COM PO BOA BOA BOA BOA
BOA BOA BOA BOA CR DO
Nota: Cada conjunto de trs letras corresponde a um codo.
As mutaes nonsense resultam de alteraes pontuais do DNA que

convertem um codo que codifica para um aminocido em codo stop no
RNA (UAA, UAG, UGA). A designao nonsense deve-se ao facto de o
codo no especificar para nenhum aminocido. No momento da traduo
do RNAm, a presena de um codo stop, em posio anormal, gera o sinal que os mecanismos de traduo interpretam como se estivesse completa
a traduo da protena. Nestas condies, forma-se uma protena truncada,
por paragem prematura da traduo. Se a mutao for proximal (em relao
ao extremo 5 do gene), o polipptido traduzido no ter actividade funcional
e ser rapidamente degradado. Se for mais distal (prxima do extremo 3)
pode ser relativamente estvel e ter actividade funcional.
Pode acontecer que uma mutao transforme um codo stop em
codo codificador de um aminocido. Neste caso, durante a traduo do
RNAm, forma-se um polipptido mais longo do que o normal. Um exemplo
dado pela produo de hemoglobina Constant Spring, em que uma
51
mutao do gene da globina transforma o codo stop UAA, da posio

142, em codo CAA, codificador para o aminocido glutamina. Como resultado,
a globina mais longa e os portadores desenvolvem talassmia .
2.1.3. MUTAES POR DELEO OU INSERO DE UMA OU MAIS BASES
52
As delees ou inseres de um ou mais codes no alteram a grelha

de leitura do RNAm, mas originam protenas em que faltam, ou se encontram
em excesso, um ou mais aminocidos, consoante o caso. As consequncias
da falta ou do excesso destes aminocidos na protena tm a ver com a sua
localizao e com a intensidade com que afectam a funo da protena.
Quando as delees ou as inseres dizem respeito a um nmero de
nucletidos que no mltiplo de trs, a mutao origina uma alterao da
grelha de leitura (mutao frameshift) (Tabela IV.1). Assim, a reorganizao
da sequncia de nucletidos do DNA codificador em tripletos vai dar origem
a um nova sequncia de codes diferentes, sem relao com a sequncia de
codes original. Consequentemente, a composio em aminocidos da
protena codificada diferente, a partir do local em que ocorreu a mutao,
sem relao com a sequncia codificadora original.
Frequentemente, o novo reagrupamento dos nucletidos em codes
origina, a breve trecho, um codo stop que vai interromper prematuramente a formao da protena.
As sequncias de DNA causadoras de mutaes frameshift por
insero, podem resultar de transposes (jumping genes). Estes elementos
mveis do genoma tm capacidade para se replicarem e para produzirem
mltiplas cpias de si mesmos. As cpias podem, posteriormente, inserir-se
noutros locais do genoma. Se a sequncia inserida no for um mltiplo de
trs, vai alterar a grelha de leitura. Por outro lado, podem ainda interferir
com a transcrio do gene em que se inserem. Entre as situaes de doena
atribudas insero de transposes encontram-se casos familiares de cancro
da mama e de polipose clica e casos de hemofilia.
2.1.4. MUTAES DINMICAS
As mutaes dinmicas consistem na expanso do nmero de unidades

repetitivas tipicamente constitudas por tripletos (v.g., CAG), presentes num
determinado gene ou na sua vizinhana (Tabela IV.1). Em condies normais,

um indivduo portador de um nmero reduzido de tripletos repetidos
sequencialmente. A expanso repetitiva do nmero de tripletos presentes no
progenitor ocorre durante a meiose, durante as fases precoces do
desenvolvimento fetal devido a instabilidade mittica ps-zigtica, ou ainda
durante as duas fases. A transmisso das expanses correspondentes s
mutaes dinmicas pode ocorrer por via paterna e materna como na distrofia
miotnica, apenas por via materna como na sndroma do X-frgil, ou por via
paterna como acontece quase sempre na forma juvenil da coreia de
Huntington.
At um certo nmero de unidades repetitivas, a expanso no afecta a
expresso normal do fentipo, designando-se esta fase como de pr-mutao.
O nmero de unidades repetitivas no se mantm constante durante o
processo de transmisso entre as geraes podendo aumentar ou diminuir.
A partir de uma determinado nmero de tripletos, que varia consoante as
doenas, observa-se um efeito patognico em relao com essa expanso.
2.1.5. MUTAES POR FUSO DE GENES
As mutaes por fuso de genes constituem uma importante fonte de

variabilidade gentica, pela possibilidade de o gene de fuso resultante se
poder expressar como uma protena com uma nova funo ou um aumento
de funo.
Podem tambm ocorrer efeitos deletrios devidos a genes de fuso.
Um exemplo consiste na alterao qualitativa subjacente ao desenvolvimento
da leucemia mielide crnica. Neste caso, ocorre uma translocao
t(9;22)(q34;q11) que origina a transposio do protooncogene ABL do
cromossoma 9 para o cromossoma 22 onde se recombina com a regio BCR.
A sequncia hbrida BCR-ABL resultante produz uma protena de fuso com
actividade tirosinacinase aumentada. Outro exemplo consiste nas perturbaes
de viso para as cores vermelha e verde que resultam do crossing-over
assimtrico entre os genes contguos do cromossoma X (Xq28) responsveis
pela codificao das opsinas associadas viso da cor vermelha e das opsinas
associadas viso da cor verde. Quando h emparelhamento assimtrico dos
dois cromossomas X, formam-se genes hbridos, por recombinao de partes
das sequncias codificadoras de cada tipo de genes. As anomalias de viso
53
do vermelho e do verde presentes habitualmente em indivduos do sexo

masculino, dependem da extenso da alterao das opsinas respectivas.
2.1.6. NOMENCLATURA DAS MUTAES
54
A posio de uma mutao dever ser identificada com base na

numerao dos nucletidos da sequncia do cDNA ou em alternativa, de
acordo com a numerao dos aminocidos codificados.
Para a numerao dos nucletidos, o primeiro nucletido (+1)
corresponde adenina do codo de iniciao ATG. A contagem dos nucletidos no sentido 3 representa-se por +2, +3, +4, e assim sucessivamente.
A contagem no sentido 5 representa-se por -1, -2, -3, e assim sucessivamente. A substituio de um nucletido representa-se pelo nmero do
nucletido seguido da substituio (v.g., 1224T>G corresponde substituio
do nucletido timina por uma guanina na posio 1224). Uma deleo
representada pela abreviatura del colocada aps o nmero do nucletido
(v.g., 894delT corresponde deleo de uma timina na posio 894;
894-896del ou 894-896delTGA corresponde a uma deleo de 3 nucletidos,
que podero ser discriminados, com incio na posio 894). A indicao de
uma insero feita de forma semelhante, utilizando a abreviatura ins (v.g.,
1126-1127insA corresponde insero de uma adenina entre as posies
1126 e 1127). Quando as alteraes se localizam em intres, referenciado
o nmero do nucletido do respectivo intro (v.g., IVS3 +1G>T, para a
substituio de uma guanina por uma timina no primeiro nucletido do
terceiro intro (IVS, de intervening sequence)). Mais frequentemente, a
alterao referenciada em relao ao exo mais prximo (v.g., 821 +1G>T
em que o nucletido 821 o ltimo do exo precedente, ou 822 -2A>C em
que o nucletido 822 o primeiro nucletido do exo seguinte).
Em relao sequncia de aminocidos, o primeiro codo corresponde
ao codo de iniciao, que codifica a metionina. Pode ser utilizada a representao dos aminocidos pelo cdigo de uma ou de trs letras. Quando ocorre
substituio, o nmero do codo separa o aminocido normal do novo
aminocido (v.g., R120C ou Arg120Cys corresponde substituio de uma
arginina por uma cistena no codo 120; R120X ou Arg120Stop corresponde
substituio de uma arginina por um codo de terminao). As delees e
as inseres de aminocidos representam-se de forma anloga (v.g., F508del
corresponde deleo de uma fenilalanina no codo 508; D58-59ins

corresponde insero de um aspartato entre os codes 58 e 59).
Para alm destas designaes, h outras para mutaes mais complexas.
Atravs da Internet, possvel aceder a bases de registo de mutaes
conhecidas (v.g., http://www.uwcm.ac.uk/uwcm/mg/hgmd0.html).
2.2. CONSEQUNCIAS DAS MUTAES

A caracterizao da patogenicidade de uma mutao demonstrada
quando segrega com a doena em famlias, quando rara na populao geral
(inferior a 1%) e quando tm um efeito funcional na protena resultante.
A gravidade das consequncias das mutaes depende das alteraes
que provocam a nvel da capacidade funcional da protena que codificam (em
relao com o local do gene em que ocorrem e com o tipo de aminocido
que substitudo) e do impacto dessa funo no organismo no seu todo.
Algumas mutaes no acarretam grandes problemas (v.g., daltonismo e
incapacidade para distinguir entre vermelho/verde, amarelo/azul, todas as
cores/cinzento). Outras mutaes acarretam doenas graves (v.g., fibrose
qustica, fenilcetonria (FCU), coreia de Huntington, distrofia muscular de
Duchenne (DMD), algumas formas de cancro).
Pode acontecer que mutaes diferentes num mesmo gene originem
fentipos patolgicos diferentes. Um exemplo dado pelas mutaes do gene
da distrofina, das quais pode resultar a DMD ou a distrofia muscular de
Becker.
Uma mutao pode afectar apenas uma funo ou, por outro lado,
provocar a alterao de diversas funes ou estruturas do organismo, o que
traduz um efeito pleiotrpico.
No que respeita aos efeitos das mutaes, podem ser deletrias, neutras
ou benficas. Nas mutaes deletrias, os efeitos em termos individuais e de
descendncia, tm a ver com a penetrncia (completa/incompleta, precoce/
tardia) e com a expressividade. As mutaes deletrias esto sujeitas presso
de seleco, sendo eliminadas da espcie as que criam desvantagem
biolgica. Nas mutaes neutras, o portador no afectado, e nas mutaes
benficas, h vantagem para o seu portador, directamente em termos de
capacidade reprodutiva ou por melhor adaptao ao meio. Assim, os alelos
55
que concedem vantagem, tendem a ser mais frequentes nas populaes em

que este efeito se observa.
Uma mutao por deleo de uma base, aparentemente neutra, como
a que se encontra no gene que codifica o receptor CCR5 presente na
superfcie dos linfcitos T helper, passa a ser um benefcio muito
importante para os indivduos portadores da mutao que sejam infectados
pelo retrovrus HIV. Para que os vrus HIV infectem os linfcitos necessitam
de se ligar a este receptor e ao receptor de membrana CD4. Quando a
mutao est presente em homozigotia, as molculas CCR5 no migram para
a superfcie das clulas, pelo que no se verifica a infeco dos linfcitos,
ao contrrio do que ocorre quando as molculas CCR5 so normais. Trata-se de uma condio em que indivduos deficientes (cerca de 1% a 2%
dos caucasianos residentes nos Estados Unidos) tm vantagem biolgica,
comparativamente com indivduos normais. Na ausncia de infeco, no
h comprometimento das defesas imunolgicas e os indivduos, embora sejam
seropositivos, no desenvolvem SIDA (sndroma de imunodeficincia
adquirida), pelo que no so doentes. Nos indivduos heterozigticos observa-se um desenvolvimento mais lento da SIDA, comparativamente com os
indivduos homozigticos para o alelo normal.
As mutaes neutras e as mutaes benficas incluem-se entre os
mecanismos responsveis pela enorme diversidade humana.
As mutaes que no afectam de forma sensvel a capacidade
reprodutiva (v.g., mutaes de expresso tardia) podem ocorrer em vrios
membros de uma famlia desde longa data, sendo herdadas de gerao em
gerao, atravs das clulas germinais. Nos indivduos com origem num ovo
portador da mutao, todas as clulas nucleadas do organismo so
portadoras da mutao (inclusive as clulas da linha germinal), designando-se esta condio como constitucional.
56
Ocasionalmente, uma mutao pode ocorrer de novo num membro

de uma famlia, a nvel dos gmetas, do ovo, das primeiras fases do
desenvolvimento embrionrio, em etapas mais avanadas do desenvolvimento
embrionrio ou fetal, ou mesmo aps o nascimento. Se os gmetas forem
portadores da mutao de novo e esta originar uma doena ou anomalia,
sem afectar significativamente a capacidade reprodutiva, inicia-se assim a
instalao na famlia em causa, j referida.
Contudo, uma mutao de novo pode ser um letal gentico ou seja,

pode no permitir a reproduo, embora sem afectar a sobrevivncia do seu
portador (o que, em termos genticos, equivale morte daquele genoma,
dada a impossibilidade de se reproduzir). Aplica-se um raciocnio idntico s
mutao letais nos primeiros anos de vida. Nas duas circunstncias anteriores,
o aparecimento de novos casos de doena, apenas se verifica por mutao
de novo, sendo a frequncia da doena aproximadamente igual taxa de
mutao do gene em causa, se no houver aumento da mortalidade pr-natal
associada mutao. Por vezes, uma mutao letal in utero para um dos
sexos, pelo que s nascem indivduos do sexo oposto e que se apresentam
na famlia como os nicos com eventuais anomalias associadas mutao.
Quando uma mutao ocorre numa fase do desenvolvimento ontognico
posterior determinao celular que origina as clulas germinais (clulas
precursoras dos ovcitos e dos espermatozides) e no atinge estas clulas,
a mutao no se transmite descendncia. uma mutao somtica que,
naquela famlia, afecta apenas o indivduo em causa e origina uma eventual
condio espordica de doena (v.g., as mutaes somticas responsveis
pelos casos espordicos de cancro).
As mutaes somticas podem ser letais e levar morte da clula ou
permitir a sua diviso, instalando-se no genoma das clulas filhas. E embora
as clulas possuam mecanismos de reparao das leses do DNA, quando a
quantidade das mutaes grande ou quando ocorrem em organismos em
que haja deficincia para proceder a essas reparaes, as alteraes no so
reparadas e instalam-se nas clulas descendentes.
2.3. NATUREZA DAS MUTAES

As mutaes de um gene podem ser de natureza dominante, recessiva
ou dominante negativa. Nas mutaes dominantes h expresso fenotpica
em heterozigotia, independentemente do mecanismo subjacente, enquanto
que nas mutaes recessivas apenas ocorre expresso do fentipo em
homozigotia para a mutao.
A natureza dominante de uma mutao pode ser devida a um ganho
de funo, a aquisio de nova funo ou produo de uma protena
mutada com efeito txico (Tabela IV.2). O ganho de funo pode ocorrer por
57
efeito de dosagem gnica (trissomias, duplicao gnica), ou por aumento

da actividade enzimtica (v.g., aumento da actividade tirosinacinase nas
mutaes do protooncogene RET associadas a carcinoma medular da tiride).
Como exemplo de uma condio em que a mutao se traduz em aquisio
de novas funes com um padro dominante, refiram-se as mutaes da 1antitripsina que convertem a sua actividade inibidora sobre a elastase, em
actividade inibidora sobre a trombina com consequentes perturbaes
hemorrgicas graves. As alteraes gnicas que conduzem produo de
uma protena mutada com efeito txico tm como exemplo o que ocorre com
a polineuropatia amiloidtica familiar, em que a transtirretina mutada tem
uma maior resistncia protelise, o que conduz a multimerizao e
acumulao de fibrilhas dentro das clulas.
Tabela IV.2. Formas de manifestao das mutaes dominantes
FORMAS DE MANIFESTAO
1. Ganho de funo:
por efeito de dosagem gnica;
por aumento de actividade enzimtica.
2. Aquisio de nova funo
3. Protena mutada com efeito txico
58
A natureza recessiva de uma mutao est associada a perda de funo

motivada por uma mutao que conduza inactivao fsica ou funcional
de um gene. Como resultado, e se foi afectado apenas um alelo de um locus autossmico (condio heterozigtica), faltam 50% da quantidade de
protena codificada em condies de homozigotia para o alelo normal.
Habitualmente, no h consequncias patognicas significativas, desde que
o efeito de dosagem gnica no se verifique para os produtos do locus em
causa. Se os dois alelos sofreram mutao, h ausncia completa da protena
codificada e instalam-se as consequncias patolgicas correspondentes.
Nos casos de haplo-insuficincia, embora haja heterozigotia (Aa), com
perda de funo de um alelo e produo de 50% de protena normal pelo
outro alelo, o facto de a quantidade de protena produzida no ser suficiente
para manter a funo normal, vai expressar-se como condio dominante.
Um exemplo de haplo-insuficincia encontra-se na mutao de um dos alelos
do locus que codifica os receptores das lipoprotenas de baixo peso molecu-
lar (LDLs) que est subjacente a uma condio de hipercolesterolmia familiar de natureza autossmica dominante. Na presena de heterozigotia, a
concen-trao de colesterol circulante duplica e o risco para doena coronria
cardaca aumenta significativamente. Idntica condio se verifica para a
porfiria aguda intermitente, uma vez que a funo normal apenas se expressa
quando os dois alelos so normais, correspondendo a heterozigotia a uma falha
de funo.
As condies dominantes negativas tambm resultam de uma mutao
de natureza no dominante num dos alelos. O gentipo presente
heterozigtico (Aa). Nestes casos, h 50% de protena normal e 50% de
protena mutada, em termos de monmeros produzidos. A protena mutada,
isoladamente, no provoca expresso de fentipo anormal. Contudo, se o
produto do gene actuar como complexos multimricos, a percentagem de
molculas com actividade funcional pode ser muito reduzida. Assim, se o
complexo for dimrico apenas 25% dos dmeros so constitudos
exclusivamente por monmeros no mutados, o que pode equivaler a 75%
de reduo da actividade em vez de 50% no caso de a actividade funcional
Tetrmeros
locus p53
(mutado)
protena mutada
50%
locus p53
(normal)
protena normal
59
50%
Apenas 1/16 normal

CR #17
Fig. IV.3 Esquema do funcionamento da dominncia negativa para uma condio de heterozigotia
para o locus do gene TP53.
ser exercida directamente pelos monmeros. Se o complexo for tetramrico,

apenas 1/16 dos tetrmeros constitudo exclusivamente por quatro
monmeros normais, o que poder equivaler perda de mais de 90% da
actividade funcional. A protena antioncognica TP53 um exemplo de uma
molcula que forma complexos funcionais tetramricos (Fig. IV.3).
3. REPARAO DO DNA
60
Apesar da complexidade da replicao, a fidelidade com que o DNA

replicado em cada ciclo celular notvel, verificando-se uma taxa de erro por
par de bases inferior a 10-9.
A estabilidade do DNA assegurada pela regulao do ciclo celular que
conduz sua paragem nos pontos de restrio quando h leses do DNA,
para que tenha lugar a reparao. Este facto implica que haja protenas com
capacidade para reconhecerem as leses do genoma e para repararem essas
leses ou as assinalarem para que outras protenas procedam sua reparao.
A eficincia da reparao do DNA no igual ao longo do genoma,
sendo mais eficaz junto dos genes que esto a ser transcritos e, em particular, nas cadeias que esto a ser transcritas.
Se as mutaes no forem reparadas, ou se as clulas no pararem de
se dividir ou no morrerem, as alteraes acumuladas no DNA sero
reproduzidas durante a replicao do DNA e constituir-se- um clone celular
com a mutao, eventualmente tumorignico. Por isso, foram seleccionados
mecanismos variados para manter a integridade do genoma (Tabela IV.3), de
modo a que o ciclo celular seja suspenso nos pontos de restrio quando o
DNA est lesado e actuem as enzimas de reparao.
Um dos primeiros mecanismos celulares para manter a integridade do
genoma consiste na capacidade discriminativa da polimerase do DNA em
relao ao emparelhamento correcto ou incorrecto das bases durante a
replicao da cadeia complementar, em parte devido ao facto da polimerase
I possuir um domnio com actividade enzimtica de exonuclease, pela qual
elimina bases mal emparelhadas.
H ainda um mecanismo de reparao directa capaz de remover dmeros
de pirimidina (dmeros de timidina ou de citidina). As enzimas envolvidas so
fotoliases activadas pela luz visvel, com capacidade para desfazerem as duplas
ligaes que originam os dmeros. Estas enzimas foram identificadas em

bactrias, em microorganismos eucariotas e em plantas.
Outros mecanismos de reparao, baseam-se na exciso de bases ou de
nucletidos. A reparao pode ocorrer por exciso de uma base (BER, base
excision repair) ou por exciso de uma sequncia monocatenar que inclua
o nucletido (NER, nucleotide excision repair).
Tabela IV.3. Mecanismos para manter a integridade do genoma

MECANISMOS
1. Discriminao pela polimerase do DNA

2. Reparao directa
3. Reparao por exciso:
de uma base (BER);
de nucletidos (NER);
aps reconhecimento de erros de replicao (MMR).
4. Por recombinao
Quando a alterao resulta de um erro de emparelhamento, em que no

h qualquer anomalia qumica, intervm protenas de reconhecimento do erro
e, posteriormente, desenvolve-se o processo de exciso do fragmento
monocatenar que inclui o nucletido mal emparelhado. Os erros de emparelhamento tendem a ocorrer em regies dos cromossomas com microsatlites
(pequenas sequncias repetitivas de DNA).
Quando as leses do DNA se traduzem em quebras da dupla cadeia, a
reparao feita por recombinao do DNA.
3.1. REPARAO POR EXCISO DE UMA BASE

Na BER, removida a base alterada por aco de uma glicosilase, o que
origina um local apurnico ou apirimidnico semelhante ao que se forma na
agresso pelo calor (Fig. IV.4). As glicosilases tm capacidade para remover
do DNA, por exemplo, o uracilo que se forma pela desaminao da citosina
(por remoo do grupo NH2), bem como bases alquiladas. Segue-se a
interveno de uma endonuclease que corta as ligaes fosfodiester e de uma
fosfodiesterase que remove o nucletido sem a respectiva base.
61
Desta interveno resulta um hiato monocatenar na dupla cadeia de

DNA. A 5'-3' DNA polimerase refaz a dupla cadeia e a DNA ligase repe as
ligaes longitudinais do nucletido. O processo BER est tambm envolvido
na reparao de leses espontneas apurnicas ou apirimidnicas.
A
met
C
Glicosilase
T
G
A
Endonuclease
T
G
DNA polimerase
DNA ligase
Fig. IV.4 Reparao de leses do DNA por exciso de uma base.
3.2. REPARAO POR EXCISO DE NUCLETIDOS
62
O processo NER activado face presena de agresses mais extensas

de uma das cadeias do DNA, sob a forma de crosslinks intracatenares,
formao de aductos qumicos (em que as bases so modificadas pela ligao
de grupos qumicos grandes) e tambm de dmeros de timidina. Comea pela
actividade de uma exonuclease que executa dois cortes na cadeia de DNA
em que se encontram os nucletidos a excisar (Fig. IV.5).
Na espcie humana, os cortes na cadeia de DNA delimitam um
fragmento, com 24 a 29 nucletidos, que inclui os nucletidos a excisar.
O fragmento removido e, a partir da cadeia monocatenar ntegra,
replicado o fragmento monocatenar complementar em falta, por aco da
polimerase epsilon do DNA. um processo que requer cerca de 30 protenas,
em que se incluem as que se encontram alteradas no xeroderma
pigmentosum. Estas protenas actuam como molculas heteromricas
complexas que podem agrupar sete subunidades.
Exonuclease
5
Fig. IV.5 Reparao de leses do DNA por exciso de nucletidos.
3.3. REPARAO DE ERROS DE EMPARELHAMENTO

Durante a replicao do DNA podem ocorrer erros de emparelhamento
(mismatch), por incorporao de um nucletido errado pela DNA, por
polimerase ou por insero/deleo de sequncias resultante de um desvio
das cadeias durante a sntese de sequncias repetitivas ou durante fenmenos
de recombinao. A sua deteco e reparao requerem a interveno de
protenas com capacidade para procederem reviso de provas (protenas
abreviadamente designadas por MMR, de mismatch repair), no sentido de
detectarem falhas da complementaridade A-T, C-G entre as duas cadeias e
de excisarem pequenos fragmentos monocatenares de DNA. O estudo da
instabilidade gentica em bactrias com taxas elevadas de mutaes
espontneas e no homem em tumores da sndroma HNPCC levaram
identificao de genes que codificam as protenas envolvidas, no homem
designados por: MLH1, MSH2, PMS1, PMS2, MSH6, MSH3 e MLH3.
Os genes de reparao de mismatch actuam em sequncia: (1) reconhecimento do erro de emparelhamento; (2) recrutamento de factores adicionais
do sistema MMR; (3) identificao da cadeia anmala recm-sintetizada e
exciso de uma sequncia de DNA com 1-2 kb em que se inclui o local com
o erro de emparelhamento; (4) ressntese da cadeia excisada.
63
Este complexo sistema participa tambm noutras funes celulares como

a reparao por exciso de nucletidos acoplada transcrio de dmeros de
pirimidina induzidos pela radiao UV, na constituio das sinapses para o
crossing-over e, provavelmente, tambm no desencadear da apoptose na
sequncia da reparao de aductos de DNA provocados por carcinogneos
qumicos, em associao com a protena TP53.
A falncia do sistema MMR origina instabilidade gentica e considerada
como uma importante via da carcinognese. Os tumores associados a
mutaes dos genes que codificam as protenas MMR caracterizam-se por
elevadas taxas de mutaes de microssatlites, designadas por instabilidade
de microssatlites (MI) e de mutaes pontuais. Na ausncia de um
mecanismo eficaz de reparao do DNA, a dimenso dos alelos de cada
microssatlite pode variar em relao com a dimenso original, o que pode
ser constatado analisando o DNA tumoral em comparao com DNA
constitucional (Fig. IV.6).
64
Fig. IV.6 Deteco de erros de replicao em tumores espordicos do clon. Foi utilizada a sonda
D9S171. T Bandas obtidas com DNA extrado de tecido tumoral; N Bandas obtidas com DNA
extrado de tecido normal para controlo. Observa-se uma menor extenso da migrao electrofortica
do DNA tumoral, comparativamente com a do DNA controlo, devido a aumento de comprimento
dos fragmentos.
Os indivduos heterozigticos para mutaes patognicas de genes do

sistema MMR tm uma maior susceptibilidade para o desenvolvimento de
tumores (v.g., tumores do espectro da sndroma HNPCC). A aquisio do
fentipo tumoral s ocorre, no entanto, nas clulas em que o segundo alelo
do gene tambm inactivado.
A falncia do sistema MMR, evidenciada pelo fenmeno de MI, pode
tambm surgir em tumores espordicos, mas parece associar-se a inactivao
dos genes MMR por metilao e no por mutao.
3.4. REPARAO DE QUEBRAS DA CADEIA DE DNA

As leses do DNA provocadas por agentes genotxicos como os radicais
livres de oxignio, as radiaes ionizantes ou os agentes alquilantes podem
ocorrer como quebras numa das cadeias de DNA. Estas quebras surgem
tambm como resultado da inciso enzimtica do DNA.
Na Tabela IV.4 esto indicadas algumas doenas em que se observa
instabilidade cromossmica resultante de deficincia da reparao do DNA.
Indicam-se tambm a sua frequncia, a deficincia presente e as respectivas
caractersticas.
Tabela IV.4. Doenas devidas a deficincia de reparao do DNA
DOENA
Anemia
de Fanconi
FREQUNCIA DEFICINCIA
CARACTERSTICAS
1/360.000 Exciso
Hereditariedade autossmica recessiva, pancitopenia

progressiva (dos 5 aos 10 anos), pigmentao cutnea,
malformaes congnitas (rdio), baixa estatura, risco
aumentado para leucemia no linfoctica aguda,
carcinomas hepatocelular e de clulas escamosas.
Ataxia
1/40.000 Paragem do Hereditariedade autossmica recessiva, ataxia cerebelosa
telangiectasia
ciclo celular na infncia, telangiectasias, aumento da sensibilidade
aos Raios X, aumento de risco para leucemias e linfomas
antes dos 16 anos e carcinomas em idade posterior.
Sndroma
Muito rara Ligase
Hereditariedade autossmica recessiva, baixo peso ao
de Bloom
do DNA
nascer, baixa estatura, rash da face, aumento das SCE,
aumento de risco para leucemias e linfomas antes dos
25 anos e para carcinomas em idade posterior.
Xeroderma
1/250.000 Exciso
Hereditariedade autossmica recessiva elevada
Pigmentosum
sensibilidade aos UV, cancros mltiplos da pele, escaras
da crnea.
Sndroma
1/200
Reparao
Hereditariedade autossmica dominante, risco aumentado
HNPCC
de
para carcinoma colorrectal, do endomtrio, do ovrio,
mismatch do estmago, das vias biliares e das vias urinrias.
HNPCC Carcinoma colorrectal hereditrio no-poliptico; SCE sister chromatid exchange
65
A deteco das quebras numa cadeia de DNA feita pela enzima

polimerase da poli (ADP-ribose), cuja actividade aumenta mais de 500 vezes
na presena das quebras. O aumento de actividade desta enzima conduz
produo de um polmero de ADP-ribose e vai desencadear os mecanismos
de morte da clula por necrose ou por apoptose, ou de reparao das leses
do DNA.
Quando as leses do DNA se traduzem em fracturas da dupla cadeia,
entra em aco a reparao por recombinao. Nestes casos, h um risco
elevado para a ocorrncia de alteraes gnicas.
66
CAPTULO V
MTODOS DE ESTUDO DO GENOMA HUMANO
1. INTRODUO
Os desafios postos pelo estudo do genoma humano constituram-se num
estmulo poderoso para a imaginao dos cientistas, tendo levado ao
estabelecimento de mltiplas formas de abordagem. Foi um extenso trajecto,
vencido em poucas dezenas de anos, o que permitiu passar da observao
da expresso fenotpica aos estudos cromossmicos e moleculares e conhecer,
actualmente, a sequncia das bases nucleotdicas do genoma humano em
quase toda a sua extenso.
O DNA pode ser extrado de quaisquer clulas nucleadas de um
organismo, embora a forma mais corrente de obter DNA seja a partir de
leuccitos do sangue perifrico. Os mtodos de isolamento do DNA so
diversificados e os protocolos esto bem estabelecidos. H, inclusivamente,
equipamentos automatizados para isolamento do DNA.
Quando se pede o estudo molecular de determinada patologia,
essencial que se fornea informao adequada sobre as alteraes fenotpicas
ou funcionais encontradas, de modo a orientar para o gene ou genes em
causa, ou que se indique o gene pretendido, fazendo acompanhar o pedido
de uma histria clnica cuidadosa. As indicaes respeitantes origem
populacional do indivduo em causa tambm podem facilitar o estudo, j que
h grupos populacionais em que determinadas mutaes so mais frequentes
do que noutros.
67
Para se ter uma ideia comparativa das dimenses em causa, quando se

pretende realizar o estudo do genoma, faa-se equivaler, por escala, a
extenso de DNA do genoma haplide humano, com cerca de um metro de
comprimento e 3 109 bp, ao dimetro da Terra (12.756km). A observao
citogentica apenas permite detectar alteraes de comprimento iguais ou
superiores a 4 10 6 bp (limite de resoluo do estudo citogentico dos
cromossomas). Na escala antes proposta, este nmero de pares de bases
corresponde, aproximadamente, a 17km. O gene da DMD, com 2,3 106 bp
e conhecido como o maior dos genes humanos at agora identificados,
corresponde a cerca de 9km. Est, por isso, abaixo do limite de resoluo e,
se estiver ausente, a sua falta no ser detectada por citogentica. Porm,
o tamanho mdio dos genes humanos bastante menor, da ordem dos 104
bp, o que corresponde a 40m e um gene pequeno como o da globina (com
cerca de 103 bp) corresponde a 4m. Esta comparao mostra como podem
estar ausentes mltiplos genes ou podem ter sido inseridas longas extenses
de DNA sem que o estudo citogentico evidencie estas alteraes. Alerta
ainda para a inutilidade do recurso citogentica convencional ou mesmo
de alta resoluo quando se trata de doenas monognicas.
O conhecimento do genoma tem vindo a ser alcanado por mltiplas
vias, de que so exemplo os estudos de associao, os estudos de ligao
gnica, a recombinao e a clonagem do DNA, a PCR e a sequenciao, para
alm dos estudos citogenticos clssicos e da citogentica molecular.
2. ESTUDOS DE ASSOCIAO
Os estudos de associao baseiam-se na deteco da expresso de um
68
determinado marcador fenotpico como indicativo da presena de um gene

herdado em associao e responsvel pela expresso de um determinado
trao ou caracter. Esta abordagem de natureza indirecta. O marcador
associado a um elevado risco para uma doena no o responsvel pela
doena. O que se compara a incidncia de um polimorfismo marcador na
populao de indivduos afectados por uma determinada doena, com a
incidncia do mesmo marcador numa populao controlo. Se detectada
uma diferena significativa, esta diferena considerada como indicador de

associao positiva ou negativa.
Os estudos de associao tm vantagem sobre os estudos de ligao
gnica, uma vez que podem ser realizados em conjuntos de indivduos sem
relao de parentesco, seja para os doentes seja para os controlos, e podem
ainda detectar efeitos genticos que os estudos de ligao gnica no podem
detectar. Contudo, dever haver cuidado na comparabilidade dos grupos de
doentes e de controlo, considerando que as frequncias allicas esto sujeitas
a grande variao. Por outro lado, a taxa de mutao do alelo estudado e
do presumvel locus de susceptibilidade para a doena deve ser baixa ou
conhecida. H ainda vantagem em estudar loci que codifiquem protenas que
possam estar eventualmente relacionadas com a doena.
Nos resultados dos estudos de associao, podem-se encontrar duas
possibilidades, atravs do clculo do odds ratio (OR)(1) e respectivo intervalo
de confiana (IC):
a frequncia do alelo estudado no difere significativamente entre o
grupo de doentes e o grupo controlo (IC englobando a unidade);
a frequncia do alelo difere significativamente entre as duas populaes
(IC no englobando a unidade).
Veja-se, a ttulo de exemplo, como o clculo do risco relativo (RR) evidencia, numa populao, a associao entre a presena do alelo polimrfico HLAB27 (pertencente ao sistema de histocompatibilidade HLA) e a ocorrncia de
espondilartrite anquilosante. Assim, se numa populao de doentes com
espondilartrite anquilosante houver 210 indivduos portadores do alelo
HLA-B27 e 19 no portadores (Tabela V.1) e numa amostra da populao
geral em que se encontram os doentes houver 42 portadores daquele alelo
e 361 no portadores, o valor do risco relativo ser a razo entre o quociente
de 210/42 e o quociente de 19/361, ou seja 95. Este valor significa que os
indivduos portadores do alelo HLA-B27 tm uma probabilidade 95 vezes
maior de desenvolver espondilartrite anquilosante em comparao com os
indivduos que so portadores de outro dos alelos que concorrem para o locus
HLA-B.
(1)
O OR uma estimativa do risco relativo, nos estudos caso-controlo.
69
Tabela V.1. Valores absolutos para a presena (+) e ausncia () do alelo HLA-B27
encontrados numa populao de doentes com espondilartrite anquilosante
e numa populao controlo
Doentes
Controlos
HLA-B27 (+)
HLA-B27 ()
210
42
19
361
Um valor de associao como o encontrado para a espondilartrite anquilosante excepcional, em comparao com os valores relativamente baixos
observados habitualmente para doenas multifactoriais. Os valores baixos
poder-se-o dever ao reduzido contributo do locus estudado comparativamente com outros loci e com o meio ambiente ou a desequilbrio de ligao.
Os alelos do sistema HLA foram tambm usados para estudos de
associao relativos diabetes mellitus tipo 1. Nestes estudos foi encontrada
associao com esta doena em 95% dos doentes de origem caucasiana
portadores dos alelos de histocompatibilidade HLA-DR3 ou HLA-DR4, comparativamente com a sua frequncia combinada de 50% na populao geral.
Para a doena de Alzheimer de expresso tardia foi tambm detectada
uma associao forte com a expresso do alelo APOE*4 da apolipoprotena E.
Esta forma da apoliprotena apresenta uma prevalncia de 40% nos indivduos
com doena de Alzheimer, comparativamente com uma prevalncia de 12%
numa populao controlo com idade mdia idntica dos doentes.
O recurso aos grupos sanguneos para estudos de associao, embora
tenham sido os primeiros a serem usados, permitiram apenas evidenciar uma
associao bastante frgil entre a presena do grupo sanguneo A e uma
maior prevalncia de cancro gstrico.
Os SNPs tambm se encontram entre os marcadores polimrficos que
podem ser usados para estudos de associao.
70
3. ESTUDOS DE LIGAO GNICA

Os estudos de ligao gnica permitem identificar a presena de alelos
que podem ser herdados em conjunto com um polimorfismo de DNA que
funcione como marcador, pela proximidade entre ambos. Constituem uma
forma indirecta de estudar o genoma. Podem ser baseados em marcadores

polimrficos que ocorram em sequncias de DNA codificadoras (v.g., grupos
sanguneos, sistema HLA, enzimas), ou em marcadores polimrficos de DNA
resultantes de variaes a nvel de sequncias no codificadoras, sem
qualquer efeito patognico relevante. Os polimorfismos que se localizam em
regies codificadoras podem ser detectados pelo estudo do polimorfismo
das protenas.
Para os estudos de ligao gnica podem ser usados os RFLPs, os VNTRs
e os SNPs. Os polimorfismo do DNA so informativos quando evidenciam
heterozigotia (diferena entre as sequncias estudadas de um par de cromossomas homlogos).
3.1. RFLPS
Os estudos de ligao gnica baseados em RFLPs desenvolveram-se a
partir de 1978, com a observao de que a restrio enzimtica do DNA
genmico humano por endonucleases de origem bacteriana originava
fragmentos polimrficos provocados por mutaes germinais que alteram a
sequncia reconhecida por enzimas de restrio.
Os RFLPs so transmitidos hereditariamente de forma mendeliana
codominante podendo, por isso, ser usados como marcadores polimrficos.
Para a deteco de RFLPs pode ser usada a metodologia de Southern
blotting, descrita em 1975 por Edmund Southern. Aps restrio enzimtica,
os fragmentos de DNA genmico so sujeitos a electroforese em gel e
posteriormente transferidos para um suporte slido de nitrocelulose por
arrastamento por capilaridade. Aps hibridao com sondas especficas, este
processo possibilita a identificao, entre os milhares de fragmentos de
restrio obtidos, de sequncias bem determinadas (Fig. V.1).
O recurso a enzimas de restrio pode diferenciar dois cromossomas
homlogos quando a regio polimrfica estudada exibe um padro de
restrio diferente para um par enzima de restrio/sonda de hibridao, o
que equivale a serem informativos. Os RFLPs so seleccionados de modo que
o padro de bandas em estudo permita determinar o trajecto dos
cromossomas com origem em diferentes indivduos de uma famlia (Fig. V.2).
71
AA
BB
A
kb
6.0
4.0
2.0
+
AA
AB
BB
Fig. V.1 Anlise de fragmentos de restrio de polimorfismos de comprimento (RFLPs). Uma mutao
pontual do alelo B (seta) gerou um local de clivagem polimrfico que origina RFLPs. AA gentipo
homozigtico para o alelo em ligao, tipo selvagem; AB gentipo heterozigtico devido
presena de uma cpia do alelo selvagem herdada do pai e de uma cpia do alelo com a mutao
polimrfica herdada da me; BB gentipo homozigtico para o alelo mutado presente na me.
O DNA foi extrado, fragmentado com uma enzima de restrio, submetido a electroforese em gel e
seguidamente a Southern blotting e sujeito a hibridao com uma sonda especfica para a sequncia
marcadora polimrfica, marcada com um produto radioactivo. No lado esquerdo est indicado o
peso molecular dos fragmentos de DNA em kb.
kb
7.6
72
6.8
Fig. V.2 Deteco, por RFLPs, de heterozigotia e de homozigotia para alelos normais e para alelos
mutados associados a uma doena ou caracter. Os progenitores so ambos heterozigticos, portadores
de um alelo mutado com 6,8 kb e um alelo normal com 7,6 kb. O primeiro filho herdou o alelo
mutado do pai e o alelo mutado da me pelo que homozigtico e doente. O diagnstico pr-natal
realizado durante a gravidez em curso, mostrou que o segundo filho ser homozigtico para o alelo
normal de 7,6 kb e que, por isso, tem elevada probabilidade de no ser doente.
Assim, se o padro obtido com um determinado marcador se encontra em

ligao com indivduos doentes, quando se usam as mesmas condies para
um familiar e o padro se repete, poder-se- afirmar, mesmo na ausncia de
doena, que h uma elevada probabilidade de o gene causador da doena
estar presente. Pela presena do marcador, pode-se assim predizer, de forma
indirecta, a eventual ocorrncia ou ausncia da doena no futuro, pela ligao
do marcador ao gene com a mutao patognica.
Com o desenvolvimento da reaco de polimerizao em cadeia (PCR),
foi possvel conjugar esta tcnica com a restrio enzimtica, quando o
fragmento amplificado permite a obteno de RFLPs devido presena de
uma sequncia de restrio para uma determinada endonuclease (Fig. V.3).
+
M
6
73
Fig. V.3 Electroforese de uma amostra de DNA obtida por PCR, seguida de restrio enzimtica
(PCR/RFLP). Por este processo, tambm possvel detectar o gentipo de um indivduo para uma
determinada mutao que afecte um local de restrio especfico para a endonuclease utilizada.
Quando a mutao est presente, perde-se a sequncia reconhecida pela enzima e o fragmento no
clivado, como ocorre para os dois alelos na coluna 6 e nas colunas 2 e 3 para um dos alelos.
Na ausncia de mutao, os alelos so clivados em dois fragmentos menores, como acontece para os
dois alelos nas colunas 1, 4 e 5 e para um dos alelos nas colunas 2 e 3. M coluna em que migrou uma
amostra de DNA constituda por fragmentos de comprimento conhecido, para servirem de padro.
A seta indica a direco da migrao electrofortica, do plo negativo () para o plo positivo (+).
Os RFLPs tm sido usados extensivamente em diversos campos da

investigao bsica, para estudar a evoluo das espcies, para mapeamento
gentico, em medicina forense para identificao de paternidades e para
identificao de indivduos, bem como na prtica clnica atravs da deteco
indirecta de mutaes por estudos de ligao gentica.
3.2. VNTRS
74
Os VNTRs representam outra forma de polimorfismo tambm usada em

estudos de ligao gnica. A grande variabilidade interindividual do nmero
de unidades repetitivas est na base do seu polimorfismo e torna-os mais
facilmente informativos do que os RFLPs (Fig. IV.2). O recurso aos VNTRS
possibilita realizar o fingerprinting do DNA de um indivduo, dada a sua
natureza nica e especfica em termos prticos, sobretudo se se
caracterizarem diversos VNTRs de um mesmo indivduo.
Os estudos de ligao gnica baseados em VNTRs partem da amplificao
das sequncias repetitivas polimrficas por PCR, com o recurso a primers
complementares para as sequncias nucleotdicas que flanqueiam a regio
repetitiva (Fig. IV.2). A marcao de um dos primers com um fluorocromo
permite que os produtos amplificados sejam detectados aps electroforese.
As sequncias STRs (Fig. IV.2) constituem, presentemente, os marcadores
polimrficos de excelncia para a realizao de estudos de ligao gnica,
j que associam um muito elevado polimorfismo a um tamanho que torna
fcil a diferenciao directa dos polimorfismos por visualizao com luz
ultravioleta, aps electroforese e colorao do gel com brometo de etdio,
ou por anlise dos fragmentos em sequenciador automtico (Fig. V.4).
As sequncias (CA)n so tambm altamente polimrficas (Fig. IV.2), o que
permite identificar, em cerca de 70% dos casos e com recurso a um nico
marcador, qual dos cromossomas homlogos do progenitor foi herdado por
um descendente.
Dadora
Doente
Sangue perifrico
8 M aps TMO
Medula
8 M aps TMO
Medula
10 M aps TMO
Fig. V.4 Anlise de fragmentos STRs, em sequenciador automtico para seguimento de transplantao
de medula ssea (TMO), por leucemia linfoblstica aguda. A dadora das clulas da medula que
foram transplantadas irm da doente.
Inicialmente, o DNA foi sujeito a PCR com primers que delimitam a sequncia STR a estudar. Um
dos primers foi marcado com fluorocromo. Os produtos de amplificao foram caracterizados
por anlise em sequenciador automtico. Para o STR estudado, designado como VWA, verifica-se
que a dadora heterozigtica, sendo portadora de um marcador com 16 unidades repetitivas e
outro com 17. A doente tambm heterozigtica, sendo portadora de um marcador com 17
unidades repetitivas e outro com 18. A informatividade presente permite verificar que 8 meses
aps TMO, no sangue perifrico da doente apenas existem em circulao clulas oriundas das
clulas precursoras transplantadas, uma vez que no se detecta o STR com 18 unidades inicialmente
presente na doente. No entanto, a nvel da medula ssea, j patente, por esta altura, a proliferao
de clulas da doente, correspondente a uma recidiva da leucemia, traduzida na presena do STR
com 18 unidades repetitivas. Dois meses mais tarde, o pico correspondente a este STR maior, por
invaso das clulas leucmicas e o pico correspondente ao STR com 16 unidades (clulas da dadora)
est em regresso.
75
3.3. LIMITAES DOS ESTUDOS DE LIGAO GNICA

Uma das limitaes dos estudos de ligao gnica prende-se com a
necessidade de haver um doente na famlia j que, sem um doente, os
estudos de ligao gnica no podem ser realizados. Por isso, os resultados
observados numa famlia no podem ser transferidos para outra, uma vez
que o mesmo marcador pode estar em ligao com outro alelo, com o mesmo
alelo na forma normal ou com diferentes mutaes patognicas ou no.
No que respeita aos RFLPs, na grande maioria das vezes tm apenas um
local de restrio ou seja duas formas alternativas (uma forma com o local
de restrio e outra forma sem o local de restrio), o que uma limitao
sria dado que, no mximo, apenas 50% da populao heterozigtica.
Na ausncia de heterozigotia, o facto de as sequncias serem iguais (ambas
com local de restrio, ou sem local de restrio) torna-as no informativas
para estudos de ligao gnica, pelo que no possvel saber, num
descendente, se o cromossoma herdado ou no o cromossoma portador
de determinada mutao patognica. Assim, quando um doente homozigtico para os RFLPs estudados, o polimorfismo no informativo, no sendo
possvel esclarecer os filhos sobre a presena ou ausncia do alelo responsvel
pela sua condio.
Os problemas relacionados com a informatividade esto praticamente
ultrapassados com o recurso a alelos constitudos por sequncias de DNA em
que se encontra uma elevada variabilidade do nmero de unidades
nucleotdicas constituintes e, consequentemente, com elevado polimorfismo.
Outras dificuldades resultam da heterogeneidade gnica, ou de uma
distncia gentica grande entre o polimorfismo marcador e o gene em
ligao. Nos casos em que est presente a heterogeneidade, a identificao
de ligao gnica pode no traduzir a presena de alterao a nvel do locus em ligao, uma vez que o fentipo pode estar a ser determinado por
outro gene distante ou localizado noutro cromossoma.
3.4. DISTNCIAS GENTICAS

76
Dois traos ou caracteres esto em ligao gnica quando os genes que

os determinam se encontram em loci prximos, num mesmo cromossoma e,
por isso, so herdados em conjunto. Se estiverem bastante afastados, podem
no ser herdados em conjunto, devido ao crossing-over. Poder-se-, por
isso, definir a probabilidade de recombinao entre dois loci de um mesmo
cromossoma, sendo esta varivel designada por fraco de recombinao
( ). A fraco de recombinao pode variar entre 0 e 50%. Se os dois loci
esto muito prximos, a probabilidade de recombinao pode ser zero ou

muito prxima de zero. Se se encontram afastados, a probabilidade de
recombinao elevada, podendo mesmo ocorrer segregao independente
quando a distncia bastante grande ou os loci esto em cromossomas
diferentes. Quando h segregao independente, = 1/2, o que equivale ao
valor mximo para esta varivel, acima do qual no possvel uma
interpretao biolgica.
A fraco de recombinao traduz a distncia gentica entre dois loci.
Nesta perspectiva, foi definida a unidade de recombinao meitica,
designada por centimorgan (cM). Esta unidade traduz uma distncia gentica
correspondente probabilidade de 1% de dois loci sofrerem recombinao
durante a meiose.
O logaritmo na base 10 da probabilidade de existir ligao, sobre a
probabilidade de no existir designa-se por lod score. Considera-se um
valor de +3 (possibilidade de 1.000:1) como prova de ligao gnica e um
valor de -2 como indicador de no ligao.
Em relao a dois genes em ligao, a frequncia com que o crossing-over ocorre entre eles deduzida pela proporo de descendentes com
recombinao, nascidos de casais portadores de genes em ligao.
A fraco de recombinao uma distncia gentica e no uma distncia
fsica, embora se possa indicar como valor fsico mdio para 1 cM, a distncia
correspondente a 1 Mb (1.000 kb). Esta distncia gentica tambm no
linear. A fraco de recombinao , em mdia, maior na mulher do que no
homem, para a maior parte dos cromossomas, embora haja regies
cromossmicas em que se observa o contrrio. Ao longo dos cromossomas
tambm diverge, havendo regies, como os telmeros, com uma elevada
fraco de recombinao e os centrmeros com uma fraco de
recombinao baixa.
O mapeamento gentico do DNA tem a ver com a identificao de locais
de restrio especficos para determinadas enzimas, a que esto associados
marcadores que funcionam como sinaleiros que segmentam o genoma e
ajudam a delimitar regies em funo da distncia em cM. Dito de outra
forma, um mapa de polimorfismos de ligao gnica, consiste numa
sequncia de marcadores polimrficos de DNA distribudos ao longo de cada
cromossoma, a partir das frequncias de recombinao de uns em relao
aos outros. A localizao dos genes referida a locais de restrio.
77
4. RECOMBINAO E CLONAGEM DE DNA

A tecnologia do DNA recombinante abrange a clonagem e a anlise do
DNA. A recombinao e a clonagem constituem a base do estudo molecular do genoma.
A recombinao de DNA um mecanismo que permite que dois
fragmentos de DNA bicatenar se liguem um ao outro. Este mecanismo
habitualmente preciso, no ocorrendo insero ou deleo de bases
nucleotdicas. A clonagem do DNA consiste na obteno de mltiplas cpias
idnticas de DNA a partir de uma sequncia especfica.
Os estudos de ligao gnica, como na fibrose qustica, a correlao da
doena com anomalias nos cromossomas humanos, como na DMD, a
utilizao de sondas de DNA obtidas de genes homlogos de animais para
estudos em seres humanos, a deduo das sequncias possveis para o DNA
a partir da protena, so exemplos de mtodos a que se pode recorrer para
clonar genes humanos.
O processo de identificao e isolamento de sequncias especficas de
DNA diferente, consoante se conhece ou no o produto proteico
responsvel por um caracter ou por uma doena. Quando a protena
conhecida, o procedimento designado por clonagem funcional (Fig. V.5).
Clonagem funcional
Clonagem posicional
(A funo do gene
determinada antes da sua
identificao e mapeamento)
(O mapeamento do gene
precede a sua identificao
e o conhecimento da funo)
Doena (ou caracter)
Doena
Funo
Mapeamento
Gene
Gene
Mapeamento
Funo
78
Fig. V.5 Sequncia de acontecimentos da clonagem funcional e da clonagem posicional. Na clonagem

funcional a etapa final o mapeamento do gene. Na clonagem posicional, a etapa final a
determinao da funo.
A identificao do gene que codifica o factor VIII da coagulao foi

conseguida por este processo, a partir do conhecimento da protena alterada
envolvida na hemofilia. A composio da protena em aminocidos
determinada e so deduzidas as sequncias de DNA que podero codificar
a protena, tendo em considerao que a degenerescncia do cdigo gentico
permite que alguns aminocidos possam ser codificados por diversos codes
e que, por isso, haver diversas alternativas como provveis sequncias de
DNA codificador para uma protena. As sequncias oligonucleotdicas
codificadas podero ser usadas como sondas para isolar o gene a partir de
uma livraria de DNA, ou para proceder a hibridao in situ, possibilitando a
localizao cromossmica do gene que codifica a protena. Quando uma
sequncia oligonucleotdica tem mais de 17 nucletidos corresponde
habitualmente a uma nica hiptese recombinatria de bases do DNA e, por
isso, ser especfica para uma nica sequncia do genoma.
Quando o produto proteico no conhecido, o procedimento utilizado
designado por clonagem posicional ou gentica inversa (Fig. V.5).
Ao contrrio do procedimento tradicional, este processo possibilita a
clonagem e o estudo dos genes antes de se conhecer a protena alterada
responsvel por uma doena ou caracter. A primeira etapa consiste na
localizao cromossmica do gene a clonar e, preferencialmente, do locus
ocupado pelo gene, recorrendo aos processos de mapeamento. O objectivo
reduzir a extenso de DNA em que, com grande probabilidade, se encontra
o gene envolvido. Entre diversos recursos podem ser utilizados a associao
de uma alterao cromossmica com a doena, ou mltiplos marcadores
polimrficos de DNA em famlias em que a doena ocorre, com o objectivo
de encontrar um ou mais marcadores em ligao gnica com a doena, como
aconteceu com a coreia de Huntington. A partir do momento em que se
estabelece ligao gnica com um marcador polimrfico, possvel proceder
ao mapeamento gentico e ao mapeamento fsico do locus. Aps a
localizao, podem ser obtidos clones genmicos que correspondam regio
do gene a identificar. A partir do RNAm codificado pelo fragmento de DNA
genmico obtido um cDNA e a sua sequncia determinada.
Seguidamente, so deduzidas as possveis sequncias polipeptdicas e
comparadas com sequncias previamente conhecidas. Finalmente, a protena
codificada produzida por meio de vectores de expresso.
79
4.1. PROCEDIMENTOS PARA CLONAGEM DE DNA

Para clonar um segmento do genoma necessrio ter uma sequncia
de DNA bicatenar. Quando se parte de RNA, este convertido em cDNA,
mediante uma transcriptase inversa.
O primeiro passo para clonar DNA por meio de recombinao gentica
consiste na sua fragmentao por uma enzima de restrio seleccionada em
funo do tamanho dos fragmentos que se deseja obter (Fig. V.6). Estas
enzimas so produzidas por algumas bactrias para clivarem o DNA estranho
e, dessa forma, se protegerem da invaso por microorganismos, nomeadamente bacterifagos. As enzimas de restrio fragmentam o DNA sempre que
2. Fragmentos de DNA
1. DNA
Clivagem com
enzima de restrio
Fragmento de
DNA para clonar
Fragmento
para clonar
Insero do fragmento
de DNA num plasmdeo
3. Plasmdeo
recombinante
80
Plasmdeo
Bactria
4. Bactria
recombinante
Fig. V.6 Passos para a clonagem de um fragmento de DNA genmico por recombinao com o
DNA de um plasmdeo e obteno de uma bactria recombinante.
reconhecem determinadas sequncias especficas que variam habitualmente

entre quatro e oito bases. Uma enzima que reconhece uma sequncia
nucleotdica de quatro bases corta o DNA, em mdia, cada 256 bases
(44 bases, uma vez que so quatro as bases que podem entrar na sequncia
de DNA). As enzimas que reconhecem uma sequncia de seis bases cortam
o DNA, em mdia, uma vez em cada 4096 bases (46 bases). Para enzimas
que reconhecem sequncias de oito pares de bases, os locais especficos so
mais raros, encontrando-se, em mdia, uma vez em cada 48 bases. Contudo,
a distribuio das sequncias no DNA irregular e os fragmentos originados
por uma enzima so, por isso, de tamanho bastante diverso.
Por outro lado, deve ser escolhida uma enzima que origine fragmentos
de DNA em que os topos sejam monocatenares de modo a permitir a sua
ligao, por complementaridade, ao DNA do vector com que os fragmentos
vo ser recombinados. Assim, so habitualmente seleccionadas enzimas de
restrio do tipo II que reconhecem sequncias palindrmicas, ou seja,
extenses de DNA com eixo de simetria por conterem a mesma sequncia
5'3' nas duas cadeias complementares (v.g. 5GAATTC3'/3CTTAAG5', para
a enzima EcoRI) (Fig. V.7).
C
T
T
A
A
G
G
Local de
A clivagem
A
T
T
C
C
T
T
A
A
G
G
A
A
T
T
C
A
A
T
T
C
G
C
T
T
A
A
C
T
T
A
A
G
G
A
A
T
T
C
C
T
T
A
A
G
G
A
A
T
T
C
C
T
T
A
A
G
G
A
A
T
T
C
81
5
A
Fig. V.7 Clonagem de DNA genmico. A A enzima de restrio seleccionada actua nos locais que
especificamente reconhece (sequncia palindrmica 5GAATC3/3CTTAAG5) e origina mltiplos
fragmentos. B Um dos fragmentos de DNA. C Um plasmdeo aberto com a mesma enzima de
restrio usada para a clivagem do DNA. D O fragmento B de DNA insere-se no plasmdeo, originandose um plasmdeo recombinante.
82
A enzima e o vector devem ser seleccionados em conjunto, pois o vector deve possuir a sequncia de restrio reconhecida pela mesma enzima
que usada para fragmentar o DNA (Fig. V.7). Por outro lado, deve ter a
capacidade necessria para albergar fragmentos de DNA com o tamanho dos
que so originados pela restrio do DNA a recombinar. A utilizao da
mesma enzima permite obter topos monocatenares complementares para os
topos originados no DNA a recombinar e, desse modo, por meio de uma
ligase, originar DNA recombinante pela insero de um fragmento de DNA
em cada vector.
H diferentes vectores disponveis para clonar DNA, com capacidades
diferentes, de modo a poderem inserir fragmentos de DNA de tamanho
diverso. Os plasmdeos so usados para clonar fragmentos de DNA com um
tamanho mdio de 4 kb, os fagos podem albergar fragmentos de DNA com
cerca de 20 kb e os cosmdeos fragmentos com cerca de 40 kb. Fragmentos
maiores at cerca de 350 kb podem ser inseridos em BACs (bacterial artificial chromosomes). Para fragmentos de DNA ainda maiores, podendo atingir
1,5 Mb, recorre-se a YACs (yeast artificial chromosomes). Os vectores de
grande capacidade, nomeadamente os BACs, tm sido de extraordinrio valor
para proceder ao mapeamento do genoma.
Os vectores recombinantes so individualmente amplificados atravs da
sua multiplicao numa clula eucariota hospedeira (v.g., E. coli). A introduo
dos vectores recombinantes nas clulas hospedeiras (e dos vectores da
suspenso que no incorporaram um fragmento de DNA) facilitada pela
permeabilizao da membrana celular (v.g., por meio de sais de clcio) e
origina a transformao das clulas hospedeiras. Na verdade, a transformao origina um organismo transgnico (Fig. V.6).
Uma vez que nem todas as clulas hospedeiras so transformadas, a
suspenso celular resultante consiste numa mistura de clulas transformadas (por
vectores recombinantes ou por vectores no recombinantes) e de clulas no
transformadas. A sua multiplicao processa-se em meio de cultura adequado.
A seleco das clulas transformadas possvel por resistncia diferencial
a antibiticos, proporcionada pela incluso dos recombinantes. Na realidade,
os vectores so produtos de engenharia gentica em que foram incluidos
genes de resistncia a dois antibiticos. Um dos genes (v.g., de resistncia
penicilina) usado para seleccionar as clulas transformadas contra as clulas
no transformadas, j que estas ltimas morrem aps adio do antibitico
ao meio de cultura e as transformadas, tornadas resistentes pelo incluso de

vectores (sejam ou no recombinantes) sobrevivem. O outro gene de
resistncia a antibiticos (v.g., de resistncia tetraciclina) serve para
seleccionar os clones celulares que tenham includo um vector recombinante,
contra um vector no recombinante. Isto possvel porque o arranjo do vector
feito de modo a que a restrio enzimtica do DNA do vector corte a cadeia
a nvel do gene de resistncia. Se houver insero de DNA com formao de
um recombinante, o gene de resistncia inactivado pela interposio do
fragmento de DNA. Consequentemente, os clones transformados por vectores
recombinantes morrem na presena de tetraciclina e so seleccionados. Pelo
contrrio, as clulas hospedeiras transformadas por vectores no
recombinantes possuem o gene de resistncia ao antibitico e sobrevivem.
Os clones celulares sem resistncia tetraciclina so recuperados e as clulas
multiplicadas e guardadas.
Quando usado DNA genmico, uma grande parte do genoma (embora
habitualmente menos de 50%) ficar sob a forma de muitos milhares de
molculas recombinantes em bactrias transformadas, cada bactria com um
recombinante distinto, constituindo-se assim uma livraria de DNA genmico.
Podem tambm ser construdas livrarias especficas para um cromossoma,
aps separao individual dos cromossomas, por meio de um separador
celular automtico que permite isolar os cromossomas em funo do seu
contedo em DNA usando a fluorescncia como fonte de luz. A partir de RNA
mensageiro, ainda possvel construir livrarias de cDNA correspondentes ao
DNA codificador representado nos exes. A partir da cadeia simples obtida
sintetizada a cadeia complementar por meio de uma polimerase do DNA,
de modo a ficarem disponveis cadeias bicatenares de DNA passveis de serem
clonadas. Quando conhecida a sequncia da protena podero ser sintetizadas as possveis sequncias de DNA codificador, tendo em considerao a
degenerescncia do cdigo gentico, e produzidos recombinantes.
A existncia de uma livraria de DNA fornece-nos um meio de acesso a
grandes quantidades de um determinado fragmento de DNA, bastando para
isso pr um clone bacteriano em cultura e aguardar pela sua multiplicao
e pela replicao do recombinante includo. A forma mais comum de
identificar os fragmentos de DNA clonados consiste na hibridao com uma
sonda conhecida de DNA complementar que funciona como marcador.
83
5. REACO DE POLIMERIZAO EM CADEIA
84
A PCR foi descrita por Kary Mullis, em 1985. Esta metodologia baseia-se
na amplificao exponencial selectiva de uma pequena quantidade de cpias
de DNA ou mesmo dos 5 a 10pg de DNA de uma nica clula (Fig. V.8).
Para executar uma PCR necessrio dispor de DNA (ou RNA que
previamente convertido em cDNA que vai servir de modelo para a replicao,
de primers ou seja de sequncias oligonucleotdicas (com cerca de 20 bp)
complementares para as sequncias que na direco 5'3' e 3'5' flanqueiam
a regio a amplificar e que servem para iniciar a polimerizao, de uma
polimerase do DNA estvel a temperaturas da ordem dos 94 C (Taq DNA
polimerase) obtida a partir de uma bactria termfila (Thermus aquaticus), dos
quatro nucletidos que integram o DNA e de um termociclador para permita
fazer variar de uma forma rigorosa o tempo e a temperatura ao longo das trs
etapas em que se desenvolve um ciclo de amplificao.
Cada ciclo completo de amplificao consiste na desnaturao da dupla
cadeia de DNA a uma temperatura prxima da ebulio de modo a obter
cadeias monocatenares, ligao dos primers e replicao da cadeia modelo
por extenso dos primers mediada pela polimerase (Fig. V.8). As temperaturas a que se processam as diferentes fases de uma PCR e as condies da
soluo em que se desenvolve devem ser adaptadas consoante as utilizaes.
O nmero de ciclos vai determinar a quantidade de DNA obtido por replicao
da sequncia especificamente amplificada.
A especificidade da PCR dada pelos primers. Por isso, no
necessrio isolar o DNA que se pretende amplificar, ainda que se encontre
misturado com DNA de outras espcies. O DNA pode ser obtido de mltiplas
fontes. Assim, possvel obter DNA a partir de amostras de mmias egpcias
com milhares de anos, de manchas de sangue seco encontradas em tecido
ou em papel, de tecidos fixados e includos em parafina, para alm do DNA
genmico, adequadamente purificado.
Quando a quantidade de DNA inicial muito pequena, a amplificao
feita em duas etapas. Numa primeira etapa, a regio de interesse
amplificada com um primeiro par de primers. Na segunda fase da
amplificao o DNA obtido amplificado com um segundo par de primers que delimita uma regio para amplificao menos extensa do que a
primeira. A este procedimento foi dado o nome de nested PCR.
Amostra inicial: uma cpia de DNA bicatenar

5
3
G C C T T C G C C AA C C A C T C C G
G C C T C GGAAGAG C AGGA T T T
C GGAAG C GG T T GG T GAGG C
C GGAG C C T T C T C G T C C T AAA
5
Etapa 1: Desnaturao do DNA (94C, 1 min)
3
5
Etapa 2: Hibridao dos primers (60C, 30 sec)
3
5
Etapa 3: Extenso dos primers (72C, 2 min)
3
5
5
3
5
Um ciclo de amplificao: duas cpias de DNA bicatenar
n ciclos de amplificao
Rendimento final: 2n cpias de DNA bicatenar (teoricamente)

Fig. V.8 Etapas da reaco de polimerizao em cadeia (PCR).
A visualizao dos produtos amplificados habitualmente feita aps

electroforese e posterior colorao do gel com brometo de etdio, um corante
fluorescente por exposio a uma fonte de luz ultravioleta, que se intercala
entre as bases do DNA.
85
86
Entre as vantagens oferecidas pela PCR contam-se: a possibilidade de

amplificar determinadas sequncias de DNA definidas pela hibridao dos
primers a partir de quantidades muito reduzidas de DNA, inclusive de DNA
de uma nica clula; a possibilidade de estudar sequncias de DNA muito
fragmentado em condies inviveis para a clonagem por mtodos
convencionais; a deteco directa de mutaes pelo tamanho dos fragmentos
amplificados sem recurso a hibridao ou a melhoria da observao de
mutaes aps hibridao com sondas especficas comparativamente com o
resultado obtido quando a hibridao feita com DNA no amplificado; a
utilizao do DNA amplificado para sequenciao.
A sensibilidade da PCR permite detectar alteraes do DNA de clulas cuja
distribuio num tecido ou suspenso celular seja muito baixa, o que torna esta
metodologia muito til, particularmente no controlo da eficcia dos tratamentos
citostticos e na monitorizao das remisses. A deteco de clulas dum feto
masculino em circulao no sangue materno, ainda que numa concentrao
menor do que uma por cada 70.000 clulas maternas, pode tambm ser
efectuada por PCR em idades gestacionais to precoces como as nove semanas
e os resultados usados para diagnstico pr-natal (DPN).
A necessidade de conhecer a sequncia de DNA a amplificar para que possam
ser sintetizados primers especficos para flanquear a regio a amplificar, constitui
uma das limitaes da metodologia. Tambm constituem desvantagens da PCR,
a relativa facilidade com que ocorre contaminao da amostra por DNA estranho,
a incorporao errnea de bases durante a replicao com uma frequncia
aproximada de um em cada 2 104 nucletidos incorporados, a limitada extenso
da sequncia que possvel amplificar, a amplificao inespecfica e os falsos
negativos que pode originar, por ausncia de amplificao, quando est presente
uma deleo extensa da cadeia de DNA que abranja a regio a estudar.
A PCR tem um vasto campo de aplicaes clnicas, entre as quais avultam
a deteco de polimorfismos, de mutaes pontuais, de infeco por microorganismos bacterianos ou virusais antes da exteriorizao patolgica da sua
presena, de doena residual mnima aps tratamento citosttico de neoplasias hematolgicas, o DPN, ou o diagnstico pr-implantatrio (DPI). A
investigao forense recorre PCR, particularmente quando a quantidade de
material biolgico de um suspeito muito escassa e essencial a amplificao
prvia para obter quantidades de DNA que possibilitem, por exemplo, o
estudo de polimorfismos como os STRs. A investigao fundamental e a
caracterizao do genoma humano e de outras espcies, mesmo em termos

de caracterizao molecular da evoluo das espcies, tm igualmente na PCR
um recurso poderoso.
6. SEQUENCIAO DO DNA
A sequenciao do DNA permite determinar a ordem pela qual as bases
constituem um fragmento de DNA. Os fragmentos de DNA sujeitos a
sequenciao podem ser obtidos por PCR ou por clonagem. Neste ltimo
caso, aps replicao de um nmero suficiente de vectores recombinantes
por multiplicao do organismo hospedeiro em cultura, os recombinantes so
isolados por centrifugao e o fragmento de DNA clonado no vector
separado do DNA do vector por electroforese, aps restrio com a mesma
enzima utilizada para a sua insero.
Inicialmente, foram descritos dois mtodos diferentes para sequenciar o
DNA: um delineado por Maxam e Gilbert e outro por Sanger. Os dois mtodos
exigem uma electroforese com capacidade para diferenciar fragmentos de
DNA em que o tamanho diverge apenas por uma base.
O mtodo de Maxam e Gilbert baseado na degradao das bases do
DNA de um modo especfico por reagentes qumicos. Aps a marcao da
cadeia bicatenar de DNA numa extremidade (v.g., com 32 P), o DNA
desnaturado e as cadeias monocatenares separadas. So preparadas quatro
amostras de DNA e, em cada amostra, uma ou duas das quatro bases
degradada quimicamente em alguns locais da cadeia. Seguidamente, por
meio de piperidina, o DNA partido pelos locais onde as bases foram
destrudas. Esta fractura ocorre ao longo da sequncia, nos locais
correspondentes s bases que aleatoriamente foram degradadas. produzido
assim um conjunto de fragmentos de DNA de comprimento diverso em
funo da distncia entre o topo marcado e a base degradada pela qual foi
quebrada a sequncia. A electroforese do produto de cada reaco em
colunas adjacentes permite separar os fragmentos por tamanho, em cada
coluna, e deduzir a sequncia de bases do fragmento de DNA.
O mtodo de Sanger de natureza enzimtica e parte tambm de DNA
monocatenar. A partir de um primer iniciador da replicao, esta
87
promovida por extenso do primer mediada por uma polimerase do DNA.

Os desoxinucletidos (dNTPs) de adenina, guanina, citosina e timina so
sequencialmente adicionados pela ordem determinada pela cadeia de DNA
modelo. Sucessivamente, vo-se estabelecendo as ligaes fosfodiester ao
longo da cadeia, entre os dNTPs adicionados. Em cada uma das quatro
solues de reaco, alm dos quatro dNTPs, um dos quais marcado, existe
um di-desoxinucletido (ddNTP) diferente que compete com o correspondente
dNTP e aleatoriamente adicionado pela enzima ao polmero de DNA em
extenso, em vez de um dNTP. Quando um ddNTP adicionado, inibida a
possibilidade de estabelecer a ligao fosfodiester com um dNTP subsequente.
Assim, a extenso do primer termina, originando-se, desse modo,
fragmentos de DNA de comprimento diverso. Aps a electroforese possvel
deduzir, a partir do tamanho dos fragmentos, a sequncia das bases que
compem o fragmento de DNA analisado.
O mtodo automtico de sequenciao do DNA tambm se baseia na
terminao da replicao por um ddNTP. No entanto, cada ddNTP marcado
com um fluorocromo diferente e a electroforese feita em tubo capilar. Num
determinado ponto do capilar incide um feixe laser que excita os fluorocromos
e provoca a emisso de fluorescencncia com um determinado comprimento
de onda, em funo do fluorocromo encontrado. Cada nucletido assim
identificado pela cr que emite, por exemplo, o verde para a adenina, o
amarelo para a guanina, o azul para a citosina e o vermelho para a timina.
Os dados so tratados por software adequado, de modo a indicarem a
ordem pela qual se encontram no fragmento de DNA original (Fig. V.9).
A
88
Fig. V.9 Sequenciao automtica do DNA. O DNA foi obtido de sangue perifrico. A sucesso de
picos, lida da esquerda para a direita, corresponde ordem das bases nucleotdicas. Cada cor corresponde
a uma das bases. A posio S (seta) corresponde ao local da mutao. Na posio da terceira base do
codo ocorreu uma mutao, com substituio de uma guanina por uma citosina TGCTGG).
7. MAPEAMENTO FSICO DO GENOMA

Os estudos de ligao gnica e o mapeamento gentico da resultante
tm sido auxiliares preciosos para o mapeamento fsico do genoma. O mapeamento fsico do genoma permite a localizao cromossmica dos genes e a
determinao de distncias fsicas.
Entre os recursos para mapeamento fsico de baixa resoluo conta-se
a relao entre alteraes cromossmicas especficas consistentemente
associadas a uma doena ou caracter (v.g., delees, translocaes,
duplicaes). Como exemplo, refira-se a observao consistente (embora rara)
de uma deleo associada a retinoblastoma que permitiu localizar o gene
supressor tumoral RB no cromossoma 13.
A hibridao in situ constitui outro mtodo para identificar o locus
cromossmico correspondente a uma determinada sequncia de DNA
previamente clonada. Baseia-se na complementaridade de bases que rege a
organizao do DNA. Para isso, o DNA dos cromossomas de um esfregao
metafsico e o DNA da sonda so transformados em sequncias
monocatenares atravs da desnaturao e posteriormente postos em contacto
em condies de hibridao. Desse modo, a sonda de DNA vai hibridar com
a sequncia cromossmica complementar. Como a sonda previamente
marcada (v.g., com um fluorocromo), o local de ligao torna-se visvel, o que
permite identificar especificamente o local do cromossoma em que se localiza
o gene ou a sequncia no codificadora em causa. Usando sondas com
marcaes diferentes, o limite de resoluo entre duas sequncias de DNA
de cerca de 1-2 Mb para cromossomas metafsicos e de 50 a 100 kb para
cromossomas interfsicos.
A hibridao de clulas somticas tambm pode ser usada como recurso
para o mapeamento fsico do genoma. Consiste na fuso de clulas humanas
com clulas de ratinho. Aps algumas passagens em cultura, os hbridos
conservam apenas um nmero restrito de cromossomas humanos, de uma
forma estvel ao longo das divises celulares. Os cromossomas presentes em
cada clone podem ser identificados citogeneticamente. No seu conjunto, um
painel de clulas hbridas pode conter todos os cromossomas humanos,
permitindo determinar, por exemplo, qual o cromossoma que codifica uma
determinada protena diferente da protena correspondente do ratinho,
restringindo assim a um cromossoma o campo de anlise para mapeamento.
89
A clonagem posicional, j referida, outra das abordagens utilizadas.

Na maioria das vezes, parte de uma localizao por mapeamento gentico.
Uma vez estabelecido o mapeamento do genoma humano e a sua
sequenciao, possvel perspectivar e aplicar outras abordagens para a
localizao fsica de genes, ainda no identificados. As formas mais comuns
assentam na deteco de homologias entre sequncias nucleotdicas em
diversas espcies (o que no se adequa bem a genes de evoluo acelerada
como os genes associados especiao, os genes da determinao sexual e
os genes envolvidos da fecundao) e no recurso a sequncias de RNAm.
Uma das estratgias consiste no recurso a ESTs. So sequncias curtas
de cDNA com algumas centenas de pares de bases, obtidas a partir de
fragmentos de RNA mensageiro e que correspondem a genes expressos.
O seu nmero superior ao nmero de genes. Como correspondem a genes
expressos, o alinhamento da sua sequncia com a sequncia do genoma
humano pode levar identificao da localizao cromossmica do gene.
A procura de loci ortlogos outra das estratgias de identificao de
genes. Os loci ortlogos so sequncia de DNA relacionadas com um gene
noutra espcie. A sua procura pode ser realizada em DNA, em RNA ou em
protenas. Conhecendo a sequncia do gene numa espcie animal, procuramse os nveis de homologia entre essa sequncia e diversas regies do genoma
da espcie humana. Este processo pode, assim, sugerir a localizao
cromossmica do locus ortlogo no homem, atravs da maior homologia
encontrada entre as sequncias nucleotdicas das duas espcies.
A localizao de genes na sequncia nucleotdica do genoma humano
pode ainda passar pelo recurso aos genes parlogos, ou seja a membros de
uma famlia de genes que derivam de um gene inicial por duplicao, seguida
de divergncia. Neste processo, conhece-se um dos genes ou uma protena
na espcie humana. Pela procura de homologia, pode-se chegar localizao
90
cromossmica de um gene, atravs da maior identidade encontrada entre a

protena conhecida ou a sequncia nucleotdica conhecida e as sequncias
comparadas.
As sequncias STS (sequence tagged sites) so regies nicas de DNA
para as quais esto disponveis pares de primers que permitem a realizao
de PCR para estas sequncias. Estas sequncias podem tambm ser usadas
como marcadores para o mapeamento do DNA ou para a localizao de
genes, particularmente na clonagem posicional. O gene BRCA2 associado a

cancro da mama quando est mutado, foi localizado por meio de um
marcador STS para o cromossoma 13.
O recurso a STSs, como marcadores, permitiu organizar, em 1995, o
primeiro mapa fsico do genoma humano.
H ainda programas de computador desenhados para identificar ORFs
e que, ao fazerem o rastreio da sequncia de DNA at agora publicada para
o genoma, sugerem que determinadas regies podem corresponder a genes.
No entanto, a grande desproporo na espcie humana entre a extenso dos
exes e a extenso dos intres, cria grande rudo de fundo, o que torna
os resultados obtidos pouco precisos.
8. MICROARRAYS
A tecnologia de microarrays ou de microchips recorre hibridao
para detectar uma mutao entre milhares de fragmentos de DNA ou a
expresso de um determinado gene.
Na placa de suporte, em largos milhares de pontos separados e bem
identificados (50.000 a 100.000, ou mais), esto adsorvidas sondas de DNA
com cerca de 20 bp, destinadas a detectar a presena de eventuais mutaes
patognicas em determinados genes ou partes de genes, ou noutras
sequncias em estudo. O DNA genmico fragmentado com enzimas de
restrio, os fragmentos so marcados com um fluorocromo, desnaturados
e passados pela placa. Quando a sequncia de um fragmento
complementar para a sonda localizada num determinado lugar da placa
verifica-se hibridao. Os demais fragmentos so arrastados pela soluo de
lavagem. Os fragmentos de DNA que hibridarem podem ser, seguidamente,
estudados por sequenciao e os resultados comparados com a sequncia
considerada normal na espcie humana ou na espcie viva em causa.
Para detectar anomalias de expresso, o RNAm de dois ou mais tecidos
extrado e produzido cDNA por meio de transcriptase inversa, procedendo-se de forma a que os cDNAs fiquem marcados com um fluorocromo.
Ao fazer-se passar a soluo com os cDNAs marcados atravs da placa de
91
ensaio, haver hibridao destes com os cDNAs complementares que se

encontram adsorvidos na placa. Para cada par molcula fluorescente/gene,
possvel quantificar a expresso por medio da intensidade de
fluorescncia.
92
CAPTULO VI
HISTRIA FAMILIAR. HEREDOGRAMA
1. INTRODUO
Em Gentica Mdica, e semelhana de outras reas da prtica clnica, haver
que responder s seguintes questes, para cumprir as regras das boas prticas:
o que est em causa, face a uma anomalia ou doena, para chegar
etiopatogenia e para deduzir formas de preveno e de tratamento;
o que est errado e que pode dificultar o diagnstico;
qual o curso da situao, para poder chegar ao prognstico e para
antecipar o que vai acontecer a outros membros da famlia e mesmo
a filhos em gestao;
que solues existem, para poder lidar com a situao (v.g., tratamento,
preveno).
Entre os procedimentos que sustentam as boas prticas, inclui-se uma
histria clnica cuidadosa, com particular incidncia na sua vertente familiar.
Na investigao da natureza hereditria de uma condio, a histria familiar
(e no o gene) constitui a unidade fundamental.
A par da recolha da histria familiar, dever ser elaborado um heredograma, de forma cuidadosa. Estes recursos so indispensveis para estabelecer
ou para excluir a natureza hereditria de uma doena ou caracter.
A partir de uma histria familiar possvel:
sustentar intervenes dirigidas para o diagnstico pr-sintomtico de
uma doena gentica e planear actuaes teraputicas precoces
93
destinadas a impedir o desenvolvimento da doena (v.g., polipose clica

familiar (FAP), hipercolesterolmia familiar, FCU);
fazer preveno, atravs do aconselhamento gentico;
fazer diagnsticos mais correctos;
estabelecer prognsticos mais precisos e ter informao mais
pormenorizada sobre a evoluo da doena;
compreender melhor a natureza de uma determinada doena.
2. COMO ELABORAR UMA HISTRIA CLNICA EM GENTICA
94
Durante a recolha de uma histria clnica em Gentica fundamental

saber ouvir o entrevistado (em Gentica, o propositus e os familiares). Desse
modo, com algumas perguntas dirigidas em funo da patologia presente e
palavras ou expresses de incentivo, ser possvel obter do indivduo
entrevistado as informaes e os detalhes relevantes para a situao em
estudo, procedendo a uma avaliao crtica das informaes e do diagnstico que, por vezes, sugerido.
De pouco poder valer a sabedoria, se tivermos pressa, pois a pressa
a maior inimiga da competncia!
No processo de recolha de informaes sobre a famlia, o Mdico de
Famlia deve ser considerado uma pea chave, devendo ser um dos primeiros
contactos a concretizar. Uma vez informado sobre os objectivos do estudo,
os dados registados nos seus ficheiros ao longo dos anos e mesmo o seu
conhecimento pessoal dos membros da famlia podero constituir um auxiliar
precioso para a caracterizao da situao. Alm disso, a localizao dos
indivduos a entrevistar, o modo de os contactar e mesmo a colaborao na
eventual recolha de amostras de sangue podero constituir outras vantagens
da interaco com o Mdico de Famlia.
2.1. RECOLHA DE DADOS SOBRE O PROPOSITUS

Relativamente ao propositus, deve ser registada a raa, o grupo tnico,
nome, sobrenome, sexo, nome de solteira nos indivduos do sexo feminino,
data de realizao do interrogatrio, data do nascimento ou idade actual,

local de nascimento, data de aparecimento do caracter ou dos primeiros
sintomas em caso de doena, histria obsttrica e perinatal.
No que concerne histria obsttrica e perinatal devem ser registados:
a durao da gravidez;
a ocorrncia de doenas maternas causadoras de embriopatias como
as infeces por citomegalovrus, a sifilis, a toxoplasmose ou a rubola;
a histria e a data de exposio a agentes teratognicos conhecidos
como a hidantona, o cool, os anticoagulantes ou os retinides;
a tomada de outros medicamentos durante a gravidez e a respectiva
administrao;
a exposio a produtos mutagnicos ou radiaes ionizantes;
a existncia de alteraes metablicas maternas (v.g., FCU, diabetes);
a data de aparecimento dos primeiros movimentos fetais;
a existncia de oligomnios ou de hidrmnios;
o curso do trabalho de parto;
o comportamento do recm-nascido nos primeiros minutos aps o nascimento.
O mdico deve estar alertado para eventuais sentimentos de culpa que
os pais possam evidenciar, relativamente tomada de medicamentos durante
a gravidez e que podero no ter qualquer relao com uma eventual
alterao congnita observada.
2.2. RECOLHA DE DADOS SOBRE A HISTRIA FAMILIAR

A elaborao da histria familiar (a partir dos dados obtidos na consulta
do propositus) no implica custos significativos, simples e eficiente,
permitindo obter dados relativos a um nmero elevado de membros da
famlia. No entanto, ao assentar na descrio do propositus, enferma da
subjectividade que inerente interpretao que cada pessoa faz dos factos
e das limitaes que decorram do seu conhecimento da famlia. Por outro
lado, a preciso do relato , por norma, progressivamente menor medida
que se ascende atravs das geraes e se reduz o grau de parentesco.
Esta subjectividade poder-se- traduzir em diagnstico incorrecto e conduzir
a concluses no adequadas situao presente na famlia.
95
96
Relativamente histria familiar, devem ser recolhidas informaes

relevantes para a situao, pelo menos em relao aos familiares em primeiro
grau (com 50% de identidade gnica): pais, irmos e filhos do propositus.
A data da colheita dos dados de cada indivduo deve ser registada. O interrogatrio deve contemplar os seguintes aspectos:
idade dos progenitores na altura da gravidez (a idade materna
avanada pode estar relacionada com a ocorrncia de algumas
trissomias por no-disjuno, enquanto que a idade paterna avanada
pode estar associada a mutaes de natureza dominante, como a
sndroma de Marfan, a acondroplasia ou a sndroma de Apert);
deve ser registada a data, a idade de falecimento e a causa de morte
dos membros da famlia j falecidos;
deve ser inquirida a eventual presena de um trao igual ou semelhante
ao do propositus nos familiares;
deve tambm ser investigada, nos familiares, a presena eventual de
traos que ocorram em associao com a situao do propositus,
embora ausentes neste, o que implica que o mdico conhea as
diversas manifestaes da doena em causa;
a presena de outros traos de natureza hereditria nos familiares,
ainda que no sejam caractersticos da doena do propositus, devem
tambm ser procurados, o que poder permitir a identificao de
outras situaes hereditrias na famlia;
a ocorrncia de doena pouco frequente em algum familiar bem como o
eventual falecimento devido a doena rara, devem tambm ser procurados;
a investigao de casamentos consanguneos na famlia deve ser uma
preocupao sempre presente e, particularmente, nas doenas raras de
natureza recessiva (em caso de uma resposta no conclusiva, verificar
se existem sobrenomes comuns isonimia e inventariar a origem,
em termos de etnia, de regio ou de cidade, quer do propositus quer
da sua famlia);
embora a deteco de filhos resultantes de uma relao extra-conjugal
possa constituir uma tarefa difcil, justifica-se uma inventariao cuidada,
devido importncia que a sua existncia pode ter para a compreenso
do aparecimento de determinados fentipos numa famlia;
igualmente importante a procura, nos membros da famlia, de
doenas comuns com uma componente hereditria, embora diferentes
da situao presente no propositus, uma vez que permitir oferecer

tratamento ou instituir medidas preventivas (v.g., hipertenso arterial,
doena das artrias coronrias, ocorrncia de cancro em idades jovens,
morte prematura seja qual for a causa);
deve ser registada qualquer doena ou alterao de que haja
conhecimento na famlia;
deve tambm ser investigada na famlia a eventual ocorrncia de
abortos de repetio e, se possvel, a caracterizao dos produtos de
abortamento.
Os dados obtidos pelo interrogatrio dos membros da famlia devem
constar de registo adequado com total respeito pela privacidade. Os aspectos
mais relevantes devem ser apresentados em heredograma claro e conciso, o
qual constitui o principal mtodo de estudo de uma doena hereditria.
Em utilizaes posteriores dos dados registados, deve estar presente que a
expresso de determinadas patologias pode ser tardia e que o fentipo
registado se pode ter alterado, pelo que poder ser necessria uma nova
observao do doente.
2.3. EXAME OBJECTIVO E MEIOS COMPLEMENTARES DE DIAGNSTICO

O interrogatrio do propositus e dos elementos da famlia que
apresentem traos relevantes para a caracterizao da situao do propositus, ou de outras situaes presentes na famlia, deve ser complementado
por um exame objectivo detalhado em que sejam anotados todos os aspectos
considerados relevantes. O exame objectivo deve ser metdico e dirigido
sequencialmente a todas as partes do corpo. O registo de dados quantitativos
obtidos por mensurao (v.g., altura, dimetro da cabea, distncia
interpupilar) e dos dermatoglifos e das pregas palmares deve ser rigoroso.
Devem tambm ser feitos registos fotogrficos e em vdeo para permitir
documentar a situao e para avaliar a evoluo.
Os meios complementares de diagnstico (v.g., estudos bioqumicos,
caritipo, estudos moleculares, exames analticos ou radiolgicos especficos)
devem ser utilizados criteriosamente, em funo da patologia presente e das
indicaes e limitaes especficas e nunca como exames de rotina.
97
3. HEREDOGRAMA
O heredograma constitui a melhor forma de proceder ao registo grfico
dos membros de uma famlia, das suas relaes de parentesco e dos dados
mais relevantes respeitantes a cada membro, com preciso e de modo
inteligvel para futuros utilizadores de um arquivo clnico. Habitualmente, a
elaborao de um heredograma comea com as informaes dadas pelo
propositus(1). Deve ser registado o mximo de geraes. No entanto, e dado
que uma gerao humana corresponde, em mdia, a um perodo de 30 anos,
habitualmente, reduzido o nmero de geraes para as quais possvel
recolher dados de forma relativamente fidedigna.
A famlia o utenslio mais precioso para o geneticista. Quanto maior
for a famlia e maiores as fratrias (conjunto de filhos de um casal) mais
informao se pode recolher do estudo de uma famlia (v.g., modo de
transmisso de determinada doena ou caracter, clculo de riscos de
recorrncia). Em conjunto, a histria familiar e o heredograma constituem
tambm a base do diagnstico de condies hereditrias.
Embora os familiares do propositus procurem normalmente colaborar, um
ou outro membro da famlia pode no fornecer as informaes mais correctas
ou da forma mais completa, seja de uma forma involuntria porque a
memria o atraioa ou porque desconhece realmente a histria dos seus
antepassados como ocorre frequentemente nas famlias de emigrantes, seja
de modo voluntrio porque h interesse em ocultar dados considerados
desagradveis ou inconvenientes.
3.1. NORMAS PARA A ELABORAO DE UM HEREDOGRAMA
98
A elaborao de um heredograma deve ocorrer no contexto do registo

da histria familiar e deve reflectir os dados que a histria familiar considere
relevantes e que sejam passveis de registo grfico. Os dados de um
heredograma e da histria familiar subjacente devem ser verificados sempre
que possvel, seja pelo cruzamento de informaes fornecidas por diversos
membros da famlia, seja recorrendo ao Mdico de Famlia e a informao
acumulada em arquivos clnicos hospitalares.
(1) O propositus, ou probando, consiste no indivduo que atrai a ateno do mdico para a necessidade
de fazer o estudo da famlia e de elaborar o heredograma. Aplica-se a designao propositus se o indivduo
do sexo masculino; se for do sexo feminino, designa-se por proposita; havendo vrios elementos, designam-se, respectivamente, por propositi ou propositae, se forem do sexo masculino ou do sexo feminino.
Um heredograma, para cumprir devidamente as suas finalidades:

deve ser claro, informativo e conciso;
devem estar representados todos os indivduos da famlia incluindo os
normais, anormais, abortos e nados-mortos;
o propositus deve ser identificado com uma seta (assinala o membro
da famlia que foi identificado em primeiro lugar com a doena em
causa ou que solicitou a informao);
em cada gerao os smbolos correspondentes a cada indivduo devem
ficar ao mesmo nvel e desenhados pela ordem de nascimentos, da
esquerda para a direita (do mais velho para o mais novo);
o lado paterno coloca-se de preferncia esquerda e o lado materno direita;
esquerda do diagrama indicam-se as geraes com um nmero
romano, sendo a primeira gerao a mais ancestral; dentro de cada
gerao a ordem de nascimento (da esquerda para a direita) indicada
com um nmero rabe (um indivduo referenciado indicando, em
primeiro lugar, a gerao a que pertence seguida do nmero relativo
sua posio nessa gerao (v.g., V.2);
deve-se proceder a um registo anexo em que constem os dados
relativos a cada membro da famlia includo no heredograma (nome,
sobrenome, apelidos, endereo, nome e endereo do mdico de famlia
contactado, aspectos clnicos que incluam os menores sinais e
sintomas), bem como detalhes individuais relativamente, por exemplo,
ao processo reprodutivo (v.g., abortos, morte neonatal, interrupes de
gravidez, adopes), sem esquecer o grupo tnico (h grupos
populacionais em que a prevalncia de determinadas doenas
consideravelmente superior observada na populao humana em
geral, como o caso da doena de Gaucher em Ashkenazi);
deve ser usada simbologia comummente aceite (Fig. VI.1), embora haja,
por vezes, necessidade de recorrer a novos smbolos que devem ser
devidamente legendados;
um smbolo pode ser subdividido em vrios segmentos para representar
dois ou mais caracteres ou doenas presentes num membro da famlia;
quando existem dados relativos a informao molecular (v.g., RFLPs),
estes so representados dentro de barras colocadas por baixo do
smbolo do indivduo a que dizem respeito; um heredograma assim
enriquecido permite traar o trajecto de um fentipo mas tambm de
um determinado cromossoma.
99
Propositus
Indivduo do sexo masculino, no afectado
Indivduo do sexo feminino, no afectado
Indivduo de sexo desconhecido
?
Nmero de indivduos desconhecido sem indicao do sexo
Trs indivduos normais do sexo feminino indicados colectivamente
Cinco indivduos normais do sexo masculino indicados colectivamente
Quatro indivduos normais de ambos os sexos indicados colectivamente

Indivduo do sexo masculino falecido
Indivduo do sexo masculino com anlise cromossmica normal
Indivduo do sexo feminino afectado
Indivduo do sexo masculino examinado; no apresenta a doena
Indivduo do sexo feminino no examinado; provvel que tenha a doena do
propositus
Indivduo do sexo masculino heterozigoto para um alelo autossmico recessivo
Indivduo do sexo feminino heterozigoto (portador) para um gene recessivo ligado
ao X
Viveu menos de um dia
Nado-morto
100
Indivduo do sexo feminino com doena hereditria diferente da apresentada pela

proposita
Gravidez em curso
Aborto espontneo
Interrupo voluntria de gravidez (IVG) de feto do sexo feminino afectado
Fig. VI.1 Smbolos mais comummente usados na elaborao de heredogramas. (continua)
Unio ilegtima
ou
Casamento
Dois casamentos de um mesmo indivduo e um divrcio
Casamento entre consanguneos
Casal sem descendentes
Infertilidade
Fratria (conjunto de filhos de um casal)
Gmeos monozigticos
Gmeos dizigticos
Gmeos de zigotia desconhecida
Indivduo adoptado pela famlia
Indivduo dado para adopo
Gentipo correspondente a loci polimrficos

1
2
3
4
1
2
2
4
Fig. VI.1 (continuao) Smbolos mais comummente usados na elaborao de heredogramas.
101
3.2. INDICAES PARA A ELABORAO DE UM HEREDOGRAMA

Um heredograma deve ser elaborado:
como apoio ao aconselhamento gentico;
quando um propositus apresente alteraes fenotpicas que se tenham
verificado em antepassados, ou quando o seu fentipo passvel de
ser causado por uma alterao cromossmica ou gnica herdada de
um dos progenitores, ainda que com um fentipo normal (v.g.,
translocao equilibrada);
nas situaes em que se suspeite que um indivduo tem uma doena
transmissvel de forma hereditria (v.g., cancro familiar, hemofilia);
perante alteraes fenotpicas verificadas em descendentes de
indivduos consanguneos.
3.3. INFORMAES QUE SE PODEM OBTER DE UM HEREDOGRAMA

Para alm de um registo, um heredograma um recurso analtico
precioso na avaliao das condies de natureza hereditria, a partir do qual
se pode:
analisar a distribuio de um fentipo e verificar se tem origem em
transmisso hereditria ou se de ocorrncia fortuita, em funo da
presena ou ausncia de um padro caracterstico;
determinar o tipo de transmisso hereditria subjacente expresso
de determinado fentipo (dominante, recessivo, ligado ao X, ligado ao
Y, imprinting, mitocondrial);
estabelecer o diagnstico de uma afeco hereditria com
caractersticas passveis de confuso com outra patologia; uma vez
102
determinado o padro de transmisso hereditria dentro de uma

famlia, ser possvel verificar se ele corresponde ao modo de
transmisso descrito para a afeco em causa;
conhecer quais os membros de uma famlia que apresentam
determinada afeco hereditria e calcular o risco de recorrncia para
outros elementos da mesma famlia, como apoio ao aconselhamento
gentico;
correlacionar as caractersticas de um propositus com a ocorrncia de

casamento consanguneo, determinando a eventual relao da
consanguinidade com o fentipo;
avanar para a localizao e identificao de genes (estudos de ligao
gnica).
3.4. DIFICULDADES NA ELABORAO E INTERPRETAO DE UM HEREDOGRAMA

Entre os problemas sentidos durante a elaborao de um heredograma
e na sua interpretao, incluem-se:
a aco voluntria de um membro ou membros da famlia no sentido
de no esclarecerem condies que os envergonham (v.g., atraso
mental, ilegitimidade);
o desconhecimento das condies pelas quais um determinado
elemento passou a fazer parte da famlia (v.g., adopo);
o no exclarecimento dos casos em que apenas um dos progenitores
contribui com gmetas para gerar o filho (v.g., recurso a esperma de
dador, ilegitimidade) ou em que nenhum dos progenitores contribuiu
com gmetas para gerar o filho (v.g., procriao medicamente assistida
resultante de ddiva de ovcitos e de esperma);
o desconhecimento dos factos que ocorreram em relao aos membros
da famlia para alm da 2 ou 3 gerao e, quantas vezes, mesmo
dentro da mesma gerao, quando os membros da famlia vivem em
regies distantes e/ou no convivem regularmente;
a dificuldade em comprovar o tipo de patologia ou de anomalia
presente, seja por no colaborao da famlia, seja, inclusive, por
negao de autorizao para serem realizados os estudos necessrios
ou a sua inventariao;
a morte precoce de alguns membros da famlia antes da idade em que
a doena presente habitualmente se expressa;
o reduzido tamanho de algumas famlias.
103
CAPTULO VII
TIPOS DE HEREDITARIEDADE
1. INTRODUO
No espectro de distribuio etiolgica das doenas, as causas
francamente ambientais localizam-se num dos extremos (v.g., infeces,
deficincias alimentares) e as causas francamente genticas no outro extremo
(v.g., condies devidas a alteraes cromossmicas ou gnicas). Numa regio
intermdia do espectro distribuem-se as alteraes em que os factores so
parcialmente ambientais e parcialmente devidas expresso de vrios genes
(Fig. VII.1).
Na realidade, a grande maioria das caractersticas fenotpicas de um ser
humano no depende da expresso de um s gene. Quando analisamos
expresses fenotpicas como a inteligncia, o comportamento ou a estatura,
entre outras, estamos face ao resultado da codificao dos genes e da
interaco entre os produtos dos genes e o meio. Entre o meio ambiente
e os cerca de 30.000 a 40.000 genes implicados na formao do fentipo
de um indivduo adulto estabelece-se um dilogo que pode influenciar, por
vezes de um modo muito significativo, o resultado da codificao gnica,
mesmo quando devida a um s gene.
Assim, a determinao de um caracter ou doena pode ser monognica
quando devida a um nico gene ou polignica quando devida a diversos
genes. Designam-se como multifactoriais, os caracteres ou doenas que
resultam da interaco entre as protenas codificadas por diversos genes e
factores ambientais.
105
Factores ambientais
Factores genticos
Fig. VII.1 Interpenetrao dos factores ambientais e dos factores genticos na determinao de
caracteres de natureza multifactorial.
Os diferentes tipos de alteraes de natureza gentica encontram-se

discriminados na Tabela VII.1.
Tabela VII.1. Prevalncia das doenas de natureza gentica em nados vivos

TIPO DE ALTERAO
% DE CASOS
Cromossmicas
Monognicas
Multifactoriais:
Malformaes congnitas
Doenas crnicas do adulto
Mitocondriais
Alteraes genticas em clulas somticas
0,6 %
1,4 %
0,6 %
5%
Raras
25 %
Adaptado de Connor e Fergunson-Smith (1993).
As caractersticas que diferenciam uma doena gentica dos outros tipos

de doenas encontram-se sistematizadas na Tabela VII.2.
106
Tabela VII.2. Caractersticas das doenas genticas
CARACTERSTICAS
1.
2.
3.
4.
Geralmente, possvel prever o risco de recorrncia

Para algumas, j vivel a realizao de testes predizentes
Numa populao, a frequncia caracterstica, embora varivel entre populaes
possvel antecipar a possibilidade de terapia gnica
Adaptado de Lewis (2003).
Quer nos casos monognicos, quer nos casos polignicos, o fentipo

pode resultar unicamente do efeito da alterao gentica ou da interaco
entre os produtos gnicos e factores ambientais. A condio monognica
responsvel pela DMD no depende de factores ambientais para se expressar,
enquanto que a condio monognica responsvel pela FCU, para se
expressar, requer a ingesto de fenilalanina em doses mais elevadas do que
a capacidade metablica do indivduo afectado permite metabolizar.
2. CONCEITOS FUNDAMENTAIS PARA COMPREENDER A HEREDITARIEDADE

Diz-se que uma situao de natureza gentica quando depende da
expresso de um gene ou genes para se manifestar, o que no sinnimo
de hereditrio. A alterao gentica responsvel por uma doena pode ocorrer
aps o nascimento, como na grande maioria das neoplasias.
A identificao de uma situao como familiar implica que tenha uma
maior frequncia numa famlia, comparativamente com a populao geral.
Contudo, tal facto no sinnimo de natureza gentica, no sentido
hereditrio. Uma ocupao profissional tradicionalmente assumida ao longo
de diversas geraes de uma famlia pode mimetizar um padro de
distribuio de uma determinada doena pelos membros da famlia que se
assemelhe a um padro de transmisso hereditria (v.g., cancro do escroto
em limpa-chamins, na ausncia de condies de higiene).
Tambm a designao de uma situao como congnita no implica uma
determinao gentica, mas to s que est presente no momento do
nascimento. Cerca de 2-3% dos recm-nascidos apresentam uma anomalia
congnita relevante.
As condies de natureza hereditria de expresso tardia, embora
determinadas geneticamente no momento do nascimento, no esto
presentes fenotipicamente.
Apenas uma parte das situaes herdadas pelos membros de uma famlia
puramente gentica. De facto, alm de partilharem genes idnticos, os
membros de uma famlia tendem, pelo menos temporariamente, a localizar-se num meio ambiente comum, a adoptar idnticos hbitos sociais,
alimentares e culturais, factores que podem, de um modo independente ou
107
por interaco com os genes influenciar o aparecimento de um agregao

familiar para determinadas patologias. Em tais condies, poder ser
mimetizada uma condio hereditria.
Para compreender a hereditariedade, ainda necessrio ter presente que
as regies equivalentes de cada par de cromossomas homlogos comportam
sequncias equivalentes (no caso de sequncias codificadoras, comportam
alelos cujos produtos tm a mesma funo quando no esto mutados).
As duas posies homlogas de um par de cromossomas constituem um
locus. Cada locus ocupado por dois alelos, ou seja, duas formas alternativas
de um gene (uma que foi herdada do pai e outra que foi herdada da me).
Quando os dois alelos so idnticos, diz-se que h homozigotia; quando
so diferentes (um pode ter uma mutao e o outro no), diz-se que h
heterozigotia para o locus em causa. Para os loci do cromossoma X, verifica-se hemizigotia nos indivduos do sexo masculino, com excepo das regies
pseudo-autossmicas. Na hemizigotia, um locus s comporta um alelo, j que
s est presente uma cpia do cromossoma.
O gentipo consiste na combinao de alelos de um determinado locus
(Fig. VII.2) enquanto que o fentipo corresponde expresso de determinado
gentipo.
108
A
Fig. VII.2 Tipos de gentipos. Num determinado locus (representado entre as duas linhas paralelas),
podem ocorrer duas cpias iguais de um gene (gentipo homozigtico para um alelo normal), um
alelo normal e um alelo mutado (heterozigotia), ou duas cpias iguais e mutadas do gene (homozigotia
para um alelo mutado). A cruz representa a mutao.
3. CRITRIOS PARA IDENTIFICAO E EXCLUSO DAS SITUAES HEREDITRIAS

Suspeita-se que um caracter ou doena resulta da influncia de factores
genticos de natureza hereditria quando h agregao familiar. No entanto,
na anlise da agregao familiar dever-se- ter presente que os progenitores
transmitem a informao gentica mas tambm o ambiente. Assim,
necessrio ter presente critrios para uma identificao adequada dos casos
em que os factores hereditrios esto presentes, j que, nestas condies, o
risco de recorrncia maior para os familiares de indivduos afectados em
comparao com o risco para elementos da populao no aparentados.
Na avaliao das situaes com o objectivo de definir a existncia de
agregao familiar, pode-se recorrer ao registo da histria familiar atravs de
um questionrio presencial feito ao propositus, ao estudo familiar procedendo
a entrevistas presenciais dos familiares do propositus e/ou ainda ao envio de
um questionrio escrito aos familiares para obter informaes que completem
a histria familiar.
Para considerar uma condio como hereditria, devem ser ponderados
os seguintes critrios:
a existncia de propores definidas na ocorrncia de um caracter ou
doena nos indivduos com ascendncia comum, aps excluso das
causas ambientais;
a ausncia do caracter ou doena nos membros da famlia que no
tm ascendncia comum (v.g., esposa no consangunea);
uma idade de aparecimento e um curso da situao caractersticos, na
ausncia de factores desencadeantes conhecidos;
uma maior concordncia entre gmeos monozigticos do que entre
gmeos dizigticos;
um fentipo caracterstico do propositus associado a uma anomalia
cromossmica ou gnica, aliada ou no a histria familiar de ocorrncia
de alteraes semelhantes.
Aps a identificao de uma condio como sendo de natureza
hereditria, a diferenciao do tipo de hereditariedade pode necessitar do
estudo de um nmero elevado de famlias.
109
Em contraposio, a natureza no hereditria de uma condio poder

ser afirmada quando se observar:
ausncia de incidncia familiar;
maior concordncia entre gmeos criados juntos do que entre gmeos
criados em ambientes diferentes;
oscilaes amplas da frequncia do caracter ou doena ao longo das
geraes, como sinal de causas epidmicas;
modificao da frequncia do caracter aps migrao da populao.
A propsito dos critrios de excluso, refira-se que uma histria familiar que no evidencie uma condio hereditria pode ser enganadora.
Frequentemente, uma criana com uma doena gentica ou uma
malformao o nico membro afectado numa famlia, devido a uma taxa
de recorrncia em geral baixa para as anomalias comuns de causa multifactorial (entre 2% e 10%). Para as alteraes com um padro hereditrio
mendeliano, o risco de recorrncia muito mais elevado. Contudo, como as
fratrias so habitualmente pequenas as percentagens esperadas podem no
ser encontradas. Por outro lado, fentipos correspondentes a situaes
autossmicas dominantes podem ocorrer apenas num dos descendentes de
uma famlia devido a uma mutao de novo e no por herana de um gene
mutado, presente num dos pais.
As condies de natureza hereditria podem ser classificadas como
mendelianas (monognicas) e no mendelianas. Dentro das condies
mendelianas, e tendo presente que um trao ou doena monognica nem
sempre segue os princpios da gentica mendeliana como foram descritos por
Mendel, existem as formas autossmicas dominantes, autossmicas recessivas,
recessivas ligada ao cromossoma X, dominantes ligadas ao cromossoma X e
110
de hereditariedade holndrica ou ligada ao Y. Dentro das condies no

mendelianas incluem-se a hereditariedade polignica, a hereditariedade multifactorial, a hereditariedade mitocondrial, o imprinting genmico, o
digenismo, a dissomia uniparental e as mutaes dinmicas.
4. HEREDITARIEDADE MENDELIANA
4.1. HEREDITARIEDADE AUTOSSMICA DOMINANTE
Os genes relacionados com condies de hereditariedade autossmica
dominante localizam-se num dos 22 pares de cromossomas autossmicos.
Na Tabela VII.3 esto indicados alguns exemplos de condies com
hereditariedade autossmica dominante.
Tabela VII.3. Exemplos de condies de natureza autossmica dominante
EXEMPLOS DE CONDIES
Acondroplasia
Cancro da mama hereditrio
Coreia de Huntington
Distrofia miotnica
Doena poliqustica renal do adulto
Esferocitose congnita
Hipercalcmia hipocalcirica
Hipercolesterolmia familiar
Neurofibromatose tipo I
Polidactilia
Polineuropatia amiloidtica familiar
Polipose clica familiar
Porfiria aguda intermitente
Sndroma de Apert
Sndroma de Marfan
Para explicar os casos de dominncia, considere-se um gene com duas

formas allicas: o alelo D, como forma mutada dominante, e o alelo d, como
forma normal do gene. Nos casos de dominncia, como ocorre para o alelo
mutante na coreia de Huntington, o fentipo determinado pelo gentipo
heterozigtico (Dd) igual ao fentipo determinado pelo gentipo homozigtico
para a forma mutada do alelo (DD). Na dominncia incompleta (v.g.,
hipercolesterolmia familiar), a presena do gentipo heterozigtico Dd origina
um efeito fenotpico intermdio entre a homozigotia para a mutao dominante
DD e a homozigotia para a forma normal do alelo dd, sendo possvel diferenciar
os efeitos fenotpicos dos dois gentipos devido a uma expresso mais acentuada
da condio homozigtica. Refira-se, no entanto, que os gentipos
homozigticos para as mutaes dominantes so to raras que difcil classificar
as mutaes como dominantes ou dominantes incompletas.
111
Os traos de natureza dominante (quando em heterozigotia) so menos

severos e com incio de expresso mais tardio, comparativamente com as
manifestaes de uma condio homozigtica recessiva. As manifestaes
fenotpicas de homozigotia para uma mutao dominante so habitualmente
muito graves, embora haja casos de coreia de Huntington, em que as
manifestaes fenotpicas so idnticas em heterozigotia e em homozigotia
para o alelo mutado.
Na co-dominncia, o fentipo correspondente ao gentipo heterozigtico
Dd exprime caractersticas prprias de DD e de dd. O sistema ABO um
exemplo de co-dominncia dos alelos. Os grupos sanguneos do sistema ABO
so determinados pelos antignios de superfcie dos glbulos vermelhos
resultantes da expresso dos diferentes pares de alelos que se podem
constituir em cada indivduo por combinao dos alelos A, B e O.
Nos casos de hereditariedade autossmica dominante estar habitualmente presente um gentipo heterozigtico (Dd). A partir deste gentipo,
por segregao meitica podem-se formar gmetas haplides D ou d para
o locus em causa. O outro membro do casal ser habitualmente homozigtico
para o alelo normal (dd) produzindo gmetas haplides com o alelo d.
Recorrendo a uma tabela de Punnett (Tabela VII.4) verifica-se que a
probabilidade de ocorrncia de gentipos diplides heterozigticos (Dd) na
descendncia de 1 em 2 (50%) e de gentipos homozigticos (dd)
tambm de 1 em 2 (50%). Uma tabela de Punnett permite indicar o
contributo de cada progenitor para a formao dos gentipos possveis.
Na parte superior da tabela indicam-se os dois alelos de determinado locus
e os gmetas passveis de se formarem num dos progenitores e esquerda
da tabela indicam-se os dois alelos do locus homlogo do outro progenitor
e os respectivos gmetas. Nos quadrados centrais indicam-se os gentipos
que podem ocorrer, tendo em conta as possibilidades combi-natrias entre
os gmetas de cada progenitor.
112
Tabela VII.4. Hereditariedade autossmica dominante. Gentipos Dd e dd
Progenitor normal (Dd)
Gmetas
D (p=0,5)
d (p=0,5)
Progenitor normal (dd)
Gmetas
d (p=0,5)
d (p=0,5)
Dd (p=0,25)
Dd (p=0,25)
dd (p=0,25)
dd (p=0,25)
A proporo de indivduos afectados na descendncia de um casal ser

diferente se um dos progenitores for homozigtico (DD) para o alelo mutado,
condio em que a probabilidade de ter um filho com o caracter ou doena
(gentipo Dd) de 1 em 1 (100%). Se ocorrer o casamento de dois indivduos
heterozigticos para o alelo mutado (Dd) haver a probabilidade de 3 em 4
(75%) de ter descendentes com o caracter ou doena (Dd ou DD) e de
1 em 4 (25%) de ter um descendente normal (dd).
A hereditariedade autossmia dominante (Fig. VII.3) reconhecida pelos
seguintes critrios:
os dois sexos so afectados;
quer os indivduos do sexo masculino quer os do sexo feminino
transmitem a doena e em igual proporo;
deve-se observar, pelo menos uma vez, a transmisso entre indivduos
do sexo masculino;
a doena ou caracter manifesta-se em heterozigotia;
transmite-se de um modo vertical, no saltando habitualmente
nenhuma gerao, encontrando-se, por isso, em geraes sucessivas
nas famlias afectadas;
um indivduo com a doena ou caracter tem sempre um dos
progenitores doente, a no ser que se tenha verificado uma mutao
de novo;
os filhos normais de um indivduo com o caracter ou doena tero,
por sua vez, todos os seus filhos saudveis, se casarem com um
indivduo saudvel.
I
1
113
II
2
III
1
Fig. VII.3 Heredograma caracterstico de uma condio hereditria autossmica dominante.
4.1.1. SNDROMA DE MARFAN
A sndroma de Marfan um exemplo de uma condio autossmica

dominante. Tem uma frequncia de 1 para 10.000 habitantes, sem
significativas variaes dependentes do sexo ou das etnias. Resulta do efeito
pleiotrpico da mutao do gene FBN1 localizado em 15q21.1, que codifica
a fibrilina, uma protena elstica do tecido conjuntivo. Cerca de 25% dos
casos so devidos a mutaes de novo, pelo que surgem em famlias em
que no h histria familiar desta sndroma.
As manifestaes major incluem o aneurisma dissecante e ruptura da
aorta ascendente por fragilidade do tecido conjuntivo, prolapso da vlvula
mitral, anomalias esquelticas e subluxao do cristalino. Os portadores da
mutao so habitualmente magros e altos, com escoliose, os membros
inferiores e superiores so bastante compridos e os dedos das mos so finos
e compridos (aracnodactilia). As articulaes so excessivamente laxas e
observam-se mltiplas estrias cutneas.
Os portadores desta sndroma devem ser submetidos a vigilncia mdica
peridica a nvel ocular e, sobretudo, para deteco precoce da dilatao da
aorta de forma a poder ser feita a correco cirrgica atempada. O uso de
medicamentos -bloqueantes pode atrasar a dilatao da aorta. O diagnstico
pr-sintomtico pode ser feito pela pesquisa da mutao do gene FBN1, nos
membros de uma famlia que se encontrem em risco.
4.2. HEREDITARIEDADE AUTOSSMICA RECESSIVA
114
A hereditariedade autossmica recessiva tambm se refere transmisso

de doenas ou caracteres associados a genes localizados num dos
cromossomas autossmicos. Na Tabela VII.5, esto indicados alguns exemplos
de doenas autossmicas recessivas.
Para exemplificar as condies recessivas, considere-se um locus em que
a homozigotia para o alelo normal seja representada por AA e a condio
homozigtica para o alelo recessivo por aa. A natureza recessiva de uma
mutao traduz-se por perda de funo do alelo mutado, ou seja, o alelo
no se exprime. Em heterozigotia (Aa) conserva-se 50% da actividade por
expresso do alelo normal, o que frequentemente suficiente para assegurar
a funo do gene. Na grande maioria das situaes, a mutao apenas se

torna aparente quando os dois alelos mutados se conjugam num gentipo
homozigtico recessivo aa, como acontece com mltiplos genes envolvidos
no metabolismo (v.g., galactosmia, FCU).
Tabela VII.5. Exemplos de condies de natureza autossmica recessiva

EXEMPLOS DE CONDIES
Albinismo
Alcaptonria
Doena de Gaucher
Doena de Tay-Sachs
Drepanocitose
Fenilcetonria
Fibrose qustica
Galactosmia
Sndroma de Hurler
Talassmia
Embora os heterozigotos sejam habitualmente normais em termos

clnicos, podem ter manifestaes clnicas, como acontece na anemia de
clulas falciformes para o fentipo HbA/HbS, quando se verifica uma
acentuada baixa da presso parcial de oxignio atmosfrico e se desenvolvem
manifestaes ocasionais de doena como microenfartes e hematria.
A deteco bioqumica de heterozigotos frequentemente possvel, em particular quando est em causa a produo de uma enzima, j que a
determinao da actividade enzimtica , muitas vezes, a base dos testes de
deteco de portadores (Aa).
Por vezes, as mutaes recessivas a nvel molecular ou celular, em que
a mutao de um alelo equivale a perda de funo, podem produzir, a nvel
familiar, um padro de transmisso hereditria dominante. O exemplo mais
conhecido constitudo pelas mutaes no gene RB, em relao ao qual a
presena do gentipo heterozigtico cria uma elevada susceptibilidade para
desenvolver retinoblastoma nas crianas durante os primeiros anos de vida.
Contudo, o retinoblastoma no ocorre devido a heterozigotia constitucional
(Aa, ou seja RB+/RB-) que se encontra em todas as clulas do organismo de
um heterozigoto, mas sim devido possibilidade de numa ou mais clulas
115
da retina se verificar perda de heterozigotia por uma mutao recessiva que

inactiva o nico alelo normal e origina, nessa clula, um gentipo aa ou seja
Rb-/Rb- (Fig. XVII.6). O desenvolvimento de retinoblastoma s ocorre durante
os primeiros 5-7 anos de vida, j que a partir desta data deixa de haver
proliferao das clulas retinianas. A probabilidade prxima de 90% de
ocorrer uma mutao, pelo menos numa das clulas da retina nos
heterozigotos das famlias com retinoblastoma hereditrio, origina assim um
padro hereditrio autossmico dominante com elevada penetrncia.
A hereditariedade autossmica recessiva (Fig. VII.4) caracteriza-se de
acordo com os seguintes critrios:
os dois sexos so afectados e transmitem a doena em igual proporo;
a hereditariedade do tipo horizontal, isto , os casos aparecem
todos na mesma gerao, habitualmente numa nica fratria;
a taxa de consanguinidade dos pais de crianas afectadas habitualmente mais elevada do que na populao geral.
Para um indivduo com uma doena autossmica recessiva rara, a regra
consiste em a doena no estar presente nos progenitores ou ancestrais mais
distantes, nem nos colaterais.
I
1
II
1
116
III
1
IV
1
Fig. VII.4 Heredograma caracterstico de uma condio hereditria autossmica recessiva. As duas
linhas paralelas a ligarem os indivduos III-2 e III-3 representam um casamento consanguneo, de que
resultou um filho com fibrose qustica, uma doena autossmica recessiva.
Quanto mais rara for a doena na populao geral, maior a probabilidade de existncia de consanguinidade entre os progenitores de um propositus. Nestas condies, deve ser realizada uma histria familiar com particular ateno a este aspecto. A presena de consanguinidade implica,
frequentemente, que haja pelo menos um ancestral comum. Um alelo
autossmico com uma mutao recessiva pode, por isso, ter sido herdado
por dois membros da famlia que sero heterozigticos e fenotipicamente
normais. Se casarem entre si, cada descendente tem um risco de 1 em 4 de
ser homozigtico para a mutao, de 2 em 4 de ser heterozigtico e de
1 em 4 de ser homozigtico para o alelo normal, conforme discriminado na
Tabela VII.6. Entre os descendentes sem manifestaes da doena, a
probabilidade de serem heterozigotos de 2 em 3.
Tabela VII.6. Hereditariedade autossmica recessiva. Gentipos Aa e Aa

Progenitor normal (Aa)
Gmetas
A (p=0,5)
a (p=0,5)
Progenitor normal (Aa)
Gmetas
A (p=0,5)
a (p=0,5)
AA (p=0,25)
Aa (p=0,25)
Aa (p=0,25)
aa (p=0,25)
A proporo de doentes e no doentes descendentes de um casamento

entre um heterozigoto (Aa) e um homozigoto doente (aa) de 1 para 1.
Os descendentes de um casamento entre um homozigoto doente e um
homozigoto normal sero todos fenotipicamente normais, embora
heterozigotos. Se o casamento ocorrer entre dois homozigotos doentes, s
nascero filhos doentes.
Os riscos de recorrncia so idnticos, para cada gravidez dentro de um casal.
4.2.1. FIBROSE QUSTICA
A fibrose qustica uma doena autossmica recessiva letal, com uma

frequncia em Portugal de cerca de 1 em 4.000 recm-nascidos e uma
frequncia de heterozigotos de 1 em 32. No entanto, a frequncia de doentes
varia entre as populaes, sendo menor nos povos orientais e de 1 em 1.700
entre os negros dos Estados Unidos.
117
A doena provocada por deficincia dos transportadores de cloro da

membrana celular, por mutaes do gene codificador CFTR localizado em
7q31.2. So conhecidos mais de 800 alelos com mutaes associadas fibrose qustica e cerca de 100 variantes allicas polimrficas. A mutao mais
frequentemente observada no norte da Europa, e tambm em Portugal com
uma frequncia de 55,5%, consiste na deleo de trs bases correspondentes
ao aminocido 508 (F508del). A frequncia desta mutao decresce
progressivamente do norte para o sul da Europa, encontrando-se em 2/3 dos
doentes caucasianos do Reino Unido e em menos de 1/3 dos doentes rabes
ou turcos.
Na fibrose qustica, o cloro no sai das clulas e a gua passa para dentro
das clulas, provocando a acumulao de muco espesso e seco em alguns
rgos como o pulmo ou o pncreas. A morte ocorre por insuficincia
respiratria em mais de 95% dos casos, como consequncia da acumulao
de muco espesso, inflamao crnica e infeces bacterianas persistentes.
A gravidade da sintomatologia nos homozigotos contrasta com a
ausncia de sintomas nos portadores (heterozigotos). Os sintomas resultam,
sobretudo, das consequncias do mau funcionamento dos canais de cloro a
nvel do revestimento epitelial do pulmo, sendo varivel em funo da
mutao presente. A mutao F508del est associada a espessura anormal
do muco, com dificuldades respiratrias acentuadas e infeces frequentes
e graves a nvel pulmonar, bem como insuficincia pancretica e dificuldade
de aumento do peso.
Quando ocorre o casamento de um heterozigoto conhecido com um
caucasiano, e face elevada frequncia da mutao F508del nos caucasianos,
est indicado o estudo molecular desta mutao no cnjuge do portador, para
apoiar o aconselhamento gentico, ainda que no tenha histria familiar de
fibrose qustica. Nestas condies, a ausncia desta mutao permite indicar
118
um risco baixo para ocorrncia de fibrose qustica em descendentes do casal.

Nos fetos em que seja detectada hiperecogenicidade intestinal no
segundo trimestre da gravidez, o risco para fibrose qustica ser cerca de 120
vezes maior do que nas gravidezes em geral.
4.3. HEREDITARIEDADE RECESSIVA LIGADA AO CROMOSSOMA X

A hereditariedade recessiva ligada ao X diz respeito a caracteres ou doenas
determinados por genes localizados no cromossoma X. Na Tabela VII.7 esto
indicadas algumas condies de natureza hereditria recessiva ligada ao X.
Tabela VII.7. Exemplos de condies de natureza hereditria recessiva ligada ao X

EXEMPLOS DE CONDIES
Agamaglobulinmia
Daltonismo
Deficincia em G6PD
Deficincia imunolgica grave combinada
Diabetes inspida nefrognica
Distrofia muscular de Becker
Distrofia muscular de Duchenne
Hemofilia A e B
Ictiose
Sndroma de Hunter
G6PD desidrogenase da glicose-6-fosfato
Nas mulheres h dois cromossomas X. Como raro haver homozigotia para

os loci do cromossoma X, as doenas hereditrias recessivas ligadas ao cromossoma
X exprimem-se, habitualmente, apenas nos indivduos do sexo masculino devido
hemizigotia, com excepo das anomalias associadas s regies pseudo-autossmicas. A presena de hemizigotia no sexo masculino implica que uma
mutao recessiva num gene ligado ao cromossoma X se expresse a nvel
fenotpico, o que corresponde a uma condio designada por pseudo-dominncia.
Nos casos de mutao em genes ligados ao X, em que possvel
estabelecer a diferena entre a falta parcial e a falta completa do produto
codificado (v.g., deficincia em G6PD), podem ser definidos trs fentipos nas
mulheres: um fentipo correspondente presena dos dois alelos normais,
outro intermdio associado a heterozigotia e um terceiro correspondente
presena dos dois alelos mutados. A probabilidade de ocorrncia desta ltima
condio, em casamentos ao acaso, igual ao quadrado da frequncia da
doena no sexo masculino. Nos indivduos do sexo masculino, apenas se
identificam dois fentipos: um correspondente a hemizigotia para o alelo
normal e o outro correspondente a ausncia de produto devido a mutao
do nico alelo presente no sexo masculino.
119
As caractersticas da hereditariedade recessiva ligada ao X (Fig. VII.5)

permitem descrev-la como oblqua. Obedece aos seguintes critrios:
os homens so, quase sempre, os nicos afectados;
a transmisso do alelo mutado aos filhos de um casal verifica-se atravs
de mulheres portadoras no afectadas;
a transmisso de uma mutao entre indivduos do sexo masculino no
observada em geraes sucessivas, mas um alelo mutado causador
de doena numa gerao, pode ser transmitido a um neto passando
por uma filha portadora obrigatria.
I
1
II
1
III
1
IV
1
V
1
Fig. VII.5 Heredograma caracterstico de uma condio hereditria recessiva ligada ao cromossoma X.
120
Os descendentes de homens doentes por mutao localizada no

cromossoma X (gentipo XmY) casados com mulheres normais e homozigticas so normais, apesar de todas as filhas serem portadoras, por receberem do pai, obrigatoriamente, o gonossoma X com a mutao (Tabela VII.8).
Na descendncia do casamento de um homem normal com uma mulher
portadora (gentipo XmX), todas as filhas sero normais (metade das quais
portadoras) e metade dos filhos ser afectada (Tabela VII.9). Na descendncia
do casamento de um homem doente com uma mulher portadora, metade
dos descendentes ser normal e metade ser afectada (sexo masculino e sexo
feminino).
Tabela VII.8. Hereditariedade recessiva ligada ao X. Gentipos XmY e XX
Xm
Progenitor feminino (XX)
Gmetas
X
X
(p=0,5)
(p=0,5)
Progenitor masculino (XmY)

Gmetas
(p=0,5)
Y
(p=0,5)
XmX (p=0,25)
XmX (p=0,25)
XY (p=0,25)
XY (p=0,25)
Tabela VII.9. Hereditariedade recessiva ligada ao X. Gentipos XY e XmX
X
Progenitor feminino (XmX)
Gmetas
Xm (p=0,5)
X
(p=0,5)
Progenitor masculino (XY)

Gmetas
(p=0,5)
Y
(p=0,5)
XmX (p=0,25)
XX (p=0,25)
XmY (p=0,25)
XY (p=0,25)
Para alm da situao j referida, em que as mulheres podem ser

afectadas por uma doena recessiva ligada ao X, a ocorrncia de mulheres
doentes pode ainda observar-se quando se verifique lionizao assimtrica
que conduza a que um nmero de clulas superior a 50% tenha o
cromossoma normal inactivado, em descendentes de um casal em que a
mulher seja portadora e case com um homem normal em que tenha ocorrido
uma neomutao no cromossoma X, ou ainda em casos de monossomia
completa ou parcial do cromossoma X (v.g., sndroma de Turner) em que o
cromossoma herdado seja o portador da mutao recessiva.
Nas doenas recessivas ligadas ao X, as manifestaes decorrentes da
heterozigotia presente nas mulheres, so mais acentuadas do que as
manifestaes observadas em heterozigotia nas doenas autossmicas
recessivas. Na realidade, nas doenas autossmicas recessivas todas a clulas
produzem 50% da protena normal, enquanto que nos casos ligados ao
cromossoma X, nos homens no h produo quando est presente o
cromossoma com o alelo mutado e nas mulheres heterozigticas h um
cromossoma com o alelo normal e outro com o alelo mutado. Contudo, como
a lionizao inactiva aleatoriamente um dos cromossomas em cada clula,
encontram-se 50% das clulas que produzem a quantidade de protena
esperada e 50% das clulas que no produzem protena e esto em
condies idnticas s clulas do homem hemizigtico para a mutao.
121
No caso da deficincia em G6PD, verifica-se, assim, que quando h contacto

com os factores desencadeantes de hemlise (v.g., algumas drogas como a
primaquina, infeces, ingesto de favas) h manifestaes da doena
embora de uma forma menos grave do que no sexo masculino.
4.3.1. DISTROFIA MUSCULAR DE DUCHENNE
122
A DMD um exemplo de doena recessiva ligada ao X. a distrofia

muscular mais frequente. Habitualmente s ocorre em indivduos do sexo
masculino, com uma frequncia de 1 em 3.000 recm-nascidos do sexo
masculino. Entre as mulheres, 1 em 1.500 portadora.
Na DMD h, habitualmente, ausncia de distrofina, uma protena que
entra na formao das fibras musculares. O gene DMD que codifica esta
protena est localizado em Xp21. Cerca de 2/3 das mutaes encontradas
so delees, sendo a maioria dos restantes casos devida a diversas mutaes
pontuais. As neomutaes so responsveis por 1/3 dos casos de doena,
sendo os restantes 2/3 resultantes da transmisso de um alelo mutado
presente na me heterozigtica.
As manifestaes da doena tm incio por volta dos 3 a 5 anos de idade.
So detectveis nveis elevados da creatinacinase srica, alis presentes desde
os primeiros dias de vida. As crianas tm dificuldade em se pr de p, em
subir escadas e em correr. Observa-se tambm pseudohipertrofia dos
msculos da barriga da perna. A fraqueza muscular tem incio na cintura
plvica e estende-se progressivamente aos msculos mais perifricos. Em cerca
de 25% dos casos h um ligeiro atraso mental. A incapacidade para a marcha
e a necessidade de usar uma cadeira de rodas habitual cerca dos 10 a 12
anos. A morte ocorre antes dos 20 anos de idade, para a maioria dos
doentes.
Face a um caso de DMD, necessrio esclarecer se a me portadora,
ou se est presente uma mutao de novo. A condio de portadora
obrigatria pode ser afirmada quando os estudos moleculares identificam uma
mutao patognica no gene DMD, ou ento por uma histria familiar
convincente (se tiver dois filhos afectados, ou um filho e um irmo afectados)
a que se podem associar valores elevados da creatinacinase circulante na me.
Sendo a me portadora obrigatria, o risco de recorrncia numa nova
gravidez, de 50% para os descendentes do sexo masculino.
4.4. HEREDITARIEDADE DOMINANTE LIGADA AO CROMOSSOMA X

A hereditariedade dominante ligada ao X inclui condies determinadas
por alelos localizados em loci do cromossoma X, com mutaes dominantes.
um tipo de hereditariedade pouco frequente, de que esto indicados alguns
exemplos na Tabela VII.10.
Tabela VII.10. Exemplos de condies de natureza hereditria dominante ligada ao X

EXEMPLOS DE CONDIES
Amelognese imperfeita
Hipertricose generalizada congnita
Incontinentia pigmenti
Raquitismo vitamino-resistente
Sndroma de Rett
Sndroma orofaciodigital tipo I
Manifesta-se nas mulheres heterozigticas (XdX) e homozigticas (XdXd)

e nos homens hemizigticos (XdY). A presena de um nico alelo mutado
no sexo feminino (heterozigotia) est associada a menor severidade do que
no sexo masculino, uma vez que apenas metade das clulas exprimem o alelo
mutado devido lionizao.
A hereditariedade dominante ligada ao X apresenta as seguintes
caractersticas (Tabela VII.11, Tabela VII.12 e Fig. VII.6):
um homem doente transmite a doena a todas as suas filhas, enquanto
que os seus filhos sero todos normais;
uma mulher doente heterozigtica que case com um homem normal
transmite a doena a 50% da descendncia, independentemente do
sexo;
uma mulher homozigtica transmite a doena a todos os seus
descendentes;
nas famlias h um maior nmero de mulheres afectadas comparativamente com o nmero de homens afectados.
123
Tabela VII.11. Hereditariedade dominante ligada ao X. Gentipos XdY e XX
Xd
Gmetas
X
X
Progenitor masculino (XdY)

Gmetas
(p=0,5)
Y
(p=0,5)
XdX (p=0,25)
XdX (p=0,25)
(p=0,5)
(p=0,5)
XY (p=0,25)
XY (p=0,25)
Tabela VII.12. Hereditariedade dominante ligada ao X. Gentipos XY e XdX

Progenitor masculino (XY)
Gmetas
(p=0,5)
Y
(p=0,5)
X
Progenitor feminino (XdX)
Gmetas
Xd
X
XdX (p=0,25)
XX (p=0,25)
(p=0,5)
(p=0,5)
XdY (p=0,25)
XY (p=0,25)
I
1
II
2
III
1
Fig. VII.6 Heredograma caracterstico de uma condio hereditria dominante ligada ao cromossoma X.
4.5. HEREDITARIEDADE LIGADA AO CROMOSSOMA Y
124
A hereditariedade ligada ao cromossoma Y tambm toma a designao

de hereditariedade holndrica. Os genes ligados ao cromossoma Y so em
pequeno nmero (v.g., gene SRY, gene MIC2).
A hereditariedade holndrica apresenta as seguintes caractersticas
(Tabela VII.13 e Fig. VII.7):
s os homens portadores da mutao no cromossoma Y (Yd) exprimem
e transmitem o gene, que se manifesta sempre;
todos os filhos do sexo masculino de um homem afectado recebem o
alelo existente no cromossoma Yd (paterno);
em condies normais de disjuno cromossmica e na ausncia de
recombinao anormal, nenhuma filha portadora.
Tabela VII.13. Hereditariedade ligada ao Y. Gentipos XYd e XX
X
Gmetas
X
X
Progenitor masculino (XYd)

Gmetas
(p=0,5)
Yd (p=0,5)
XYd (p=0,25)
XYd (p=0,25)
XX (p=0,25)
XX (p=0,25)
(p=0,5)
(p=0,5)
I
1
II
1
III
1
Fig. VII.7 Heredograma caracterstico de uma condio hereditria ligada ao cromossoma Y.
4.6. DIFICULDADES DE IDENTIFICAO DAS CONDIES HEREDITRIAS

Os caracteres ou doenas determinados de uma forma mendeliana permitem
habitualmente uma fcil identificao do tipo de hereditariedade presente e o
clculo de probabilidades em termos de risco para outros membros da famlia
seguindo a tabela de Punnett e o conhecimento do grau de penetrncia.
Contudo, h diversas variveis que dificultam a identificao da natureza
mendeliana de um caracter ou doena: mutaes letais, mutaes de novo,
mosaicismo gonadal, polialelismo, heterogeneidade gnica, pleiotropismo,
penetrncia incompleta, expressividade varivel, epistasia, influncia do sexo,
limitao ao sexo, fenocpias, teratogneos, paternidade extraconjugal.
125
4.6.1. MUTAES LETAIS
So designadas como mutaes letais, as alteraes gnicas que so

letais in utero e as que, possibilitando o nascimento, no permitem que o
indivduo afectado se reproduza. Os casos de mutaes do cromossoma X
letais in utero para o sexo masculino so aparentes por apenas existirem
doentes do sexo feminino, por as mulheres doentes serem descendentes de

progenitoras doentes, por haver excesso de abortos do sexo masculino e por
se observar uma reduo da proporo de filhos do sexo masculino,
habitualmente saudveis. Quando os descendentes do sexo masculino so
doentes tm um caritipo 47,XXY. Com este caritipo, anulada a hemizigotia
para o cromossoma X com a mutao (46, XY).
A mutao dominante associada ao tipo II da osteogenesis imperfecta
letal no perodo perinatal, sendo, por isso, devida a neomutao em todos
os casos de doena.
A incontinentia pigmenti tipo II, uma condio dominante ligada ao X
(Xq28), letal em homozigotia. Habitualmente, apenas letal in utero e
conduz a aborto espontneo para conceptus do sexo masculino
(hemizigticos) que tenham herdado da me (heterozigota e doente) o
cromossoma X com o alelo mutado. De igual modo, tambm so letais in
utero para o sexo masculino, a sndroma de Rett, a sndroma orofaciodigital
tipo I e a sndroma de Goltz (sndroma da hipoplasia drmica focal).
A DMD, no sendo letal in utero, , habitualmente, um letal gentico para
os indivduos do sexo masculino, por, em regra, no permitir a sua reproduo.
4.6.2. MUTAES DE NOVO
126
H condies de natureza autossmica dominante e condies recessivas

ligadas ao X em que as mutaes de novo so bastante frequentes (v.g.,
em 80% dos casos de acondroplasia, em 50% dos casos de neurofibromatose
tipo I). A doena ou caracter no est presente no progenitor e estabelecese nas geraes subsequentes, quando no torna invivel a reproduo do
indivduo portador. Para o primeiro indivduo afectado, a ausncia de histria
familiar no permite caracterizar com segurana a situao como hereditria
nem qual o tipo de hereditariedade. Nas gravidezes em que o progenitor
masculino tem idade avanada, o principal factor de risco resulta de mutaes
de novo transmitidas pelo gmeta masculino.
Quando uma mutao de novo ocorre durante a gametognese,
muito provvel que apenas um dos descendentes exprima o fentipo
correspondente, sendo negligencivel o risco de recorrncia em gestaes
subsequentes. Quando a mutao de novo ocorre numa fase precoce da
embriognese das clulas germinais, pode-se formar um mosaicismo gonadal.
Os progenitores no apresentam o fentipo dos descendentes.
Uma histria clnica bem elaborada que permita distinguir entre uma
condio herdada e uma condio originada por mutao de novo, pode
ser a chave para realizar o clculo relativo ao risco de recorrncia.
A identificao do tipo de hereditariedade associado patologia presente
tambm essencial para indicar o risco em relao descendncia do indivduo
afectado.
4.6.3. MOSAICISMO GONADAL
O mosaicismo diz respeito presena num indivduo de clulas com

diferente constituio gentica, oriundas de um mesmo ovo. No mosaicismo
gonadal, h mltiplas espermatognias ou ovcitos com a mutao, a par
de clulas germinais sem a mutao. Sendo um mosaico gonadal, o gene
mutado pode ser transmitido a vrios descendentes. Habitualmente, a
mutao no se expressa no portador de mosaicismo gonadal, por a mutao
no estar presente na generalidade das clulas somticas.
A presena de mosaicismo gonadal foi demonstrada em casos como a
osteogenesis imperfecta tipo II, a hemofilia, a DMD, a esclerose tuberosa e
a acondroplasia.
4.6.4.POLIALELISMO
O facto de um gene poder apresentar diversas formas alternativas numa

populao, em nmero muito superior s duas posies de um locus, permite
que ocorram, para o mesmo locus, diversos gentipos em diferentes
indivduos. So exemplos desta condio, os alelos A1, A2, B e 0 do sistema
ABO, responsvel pelos grupos sanguneos AB0, ou os mltiplos alelos
conhecidos para os genes HLA do sistema major de histocompatibilidade.
Os diversos alelos encontram-se na populao, com frequncias diversas.
As diferentes combinaes de alelos podem originar, por vezes, dificuldades
de correlao entre o gentipo e o fentipo. Esta dificuldade poder ser
particularmente sentida quando existem diversas formas de alelos mutados
cuja expresso influencia significativamente o fentipo (v.g., a diferente
severidade e o atingimento diferencial de rgos na fibrose qustica para
diferentes mutaes (diferentes alelos) do gene CFTR, ou a diferente
profundidade do atraso mental na FCU em funo dos alelos presentes).
127
As dificuldades sentidas para se encontrarem rgos para transplantao

(v.g., do rim) que respeitem as identidades allicas mnimas entre dador e
receptor, de forma a reduzir o risco de rejeio, assentam no elevado
polimorfismo do sistema HLA de histocompatibilidade.
4.6.5. HETEROGENEIDADE GNICA
128
Nos casos de heterogeneidade gnica, observam-se fentipos

clinicamente idnticos provocados pela expresso de genes diversos.
As mutaes localizam-se em diferentes loci, mas a expresso clnica no
diferencivel.
Como exemplo, refira-se a FCU, em que a elevao da fenilalaninmia
pode estar associada, na grande maioria das vezes, a deficincia da enzima
fenilalanina hidroxilase. No entanto, pode tambm ter origem, num reduzido
nmero de casos, na deficincia da enzima pteridina reductase ou na sntese
deficiente da biopterina. So enzimas codificadas por genes diferentes, mas
qualquer deles, quando mutado, pode originar FCU.
Refira-se tambm a heterogeneidade observada para a osteogenesis
imperfecta. A tripla hlice do colagnio constituda por duas cadeias 1 e
por uma cadeia 2, sendo as subunidades da cadeia 1 codificadas pelo gene
COL1A1 localizado no cromossoma 17 e a cadeia 2 pelo gene COL1A2
localizado no cromossoma 7. A mesma doena pode ser observada em duas
famlias distintas, encontrando-se numa famlia a mutao no gene COL1A1
e na outra no gene COL1A2.
Tambm o desenvolvimento de carcinoma colorrectal hereditrio no-poliptico foi associado a mutaes em qualquer dos genes seguintes: MSH2
(2p16), MLH1 (3p), PMS1 (2q31-q33) ou PMS2 (7p22).
A doena de Charcot-Marie-Tooth, uma neuropatia perifrica hereditria,
outro exemplo em que as mutaes em diversos genes originaram, inclusive, diferentes formas de hereditariedade. Nesta doena, a condio
autossmica recessiva (frequncia de 1:70.000), a mais grave, seguida da
forma dominante ligada ao X (1:28.000) e da forma autossmica dominante
(1:3000) como a menos grave.
Um outro exemplo de heterogeneidade gnica dado pela surdez.
Dos casos de etiologia desconhecida, 40% a 60% so de natureza
autossmica recessiva, 20% a 25% de natureza autossmica dominante, 2%
ligados ao X e 20% a 30% de causa ambiental ou multifactorial.

Em casamentos entre surdos-mudos autossmicos recessivos, 5% a 14% dos
filhos tm surdez congnita e os restantes tm audio normal. Pelas regras
da hereditariedade mendeliana, esperar-se-ia que na descendncia de um
casal de indivduos afectados por uma condio autossmica recessiva, todos
os descendentes fossem afectados. O nascimento de filhos com audio
normal demonstra que h vrios genes responsveis pela surdez, quando em
homozigotia para uma mutao recessiva. Partindo de dois loci homozigticos
recessivos, um em cada progenitor surdo, os descendentes sero
heterozigticos para os loci e, por isso, com audio normal (Fig VII.8).
A heterogeneidade pode ocorrer para um mesmo locus, sob a forma de
heterogeneidade allica. Nestes casos, um fentipo ou um fentipo muito
semelhante determinado, de um modo independente, pelos diferentes
alelos que podem ocorrer num mesmo locus. A possibilidade de ocorrerem
diversas formas allicas mutadas num mesmo locus, torna possvel a
ocorrncia de heterozigotos compostos. Estas combinaes podem influenciar
em maior ou menor grau a severidade do fentipo.
129
Fig. VII.8 Heterogeneidade gnica. Os dois progenitores so afectados devido a homozigotia recessiva
para genes diferentes. Os descendentes do casamento entre eles no sero afectados, embora todos
sejam heterozigticos para os dois loci em causa.
A heterogeneidade pode conduzir a erro de diagnstico como acontece

com a homocistinria em que mimetizada a sndroma de Marfan. Na homocistinria observa-se estatura elevada, alteraes esquelticas (escoliose,
deformaes da parte anterior do peito) e luxao do cristalino. No entanto,
a nvel cardiovascular, em vez do prolapso da vlvula mitral e da dilatao
da aorta ascendente presentes na sndroma de Marfan, existem complicaes
trombticas. Por outro lado, h homocistina na urina. O tipo de hereditariedade autossmica recessiva, enquanto que na sndroma de Marfan
autossmica dominante.
O reconhecimento da heterogeneidade allica importante em termos
de prognstico, de tratamento adequado e de aconselhamento gentico.
Cada forma de hereditariedade requer aconselhamento especfico, pelo que
o reconhecimento da heterogeneidade e a identificao do tipo de hereditariedade so essenciais, embora o diagnstico laboratorial seja habitualmente
demorado e dispendioso.
4.6.6. PLEIOTROPISMO
No pleitropismo, a mutao de um nico gene tem reflexos na expresso

de vrios fentipos, pelo facto de uma nica protena actuar em diversos
rgos do corpo humano. Um exemplo do efeito pleiotrpico observa-se na
neurofibromatose tipo I. Sendo uma mutao monognica e de natureza
autossmica dominante, est na origem de manchas de caf com leite,
hamartomas da ris, gliomas do nervo ptico e do quiasma, neurinomas do
nervo acstico, meningiomas, para alm de outras alteraes menos
frequentes como o atraso mental, convulses, macrocefalia ou escoliose.
Outro exemplo dado pelas mutaes do gene FBN1 associadas
sndroma de Marfan. As mutaes, ao afectarem a produo da fibrilina, uma
130
protena constitutiva do tecido conjuntivo com participao em mltiplos

tecidos, tm consequncias a nvel ocular, cardiovascular e esqueltico.
Tambm na porfiria aguda intermitente, uma das variedades de porfirias
de natureza autossmica dominante, se regista um efeito pleiotrpico das
mutaes do gene, que se traduzem em dor abdominal, obstipao, febre,
astenia, urinas vermelho-escuras, insnia, cefaleias, e mesmo delrio,
convulses e estupor.
O reconhecimento do pleiotropismo pode permitir que, a partir de uma

manifestao, ainda que minor, pertencente ao espectro de efeitos
conhecidos de uma mutao, seja possvel a identificao de um portador
dessa mutao ou se suspeite de anomalias internas graves que exijam
interveno mdica.
4.6.7. PENETRNCIA INCOMPLETA
A penetrncia de um alelo uma condio de tudo-ou-nada e tem a

ver com a frequncia da expresso de um alelo numa populao. Um alelo
est presente e expresso ou no expresso.
A penetrncia de um alelo dada pela proporo de indivduos com
manifestao da doena ou caracter, num determinado universo de indivduos
portadores do alelo mutado. A penetrncia completa quando um alelo se
exprime em 100% dos portadores e incompleta se apenas uma parte dos
portadores de um alelo evidencia a sua expresso. Um alelo no penetrante
quando no se exprime num indivduo heterozigtico (identificado por estudo
molecular ou heredogrfico).
A penetrncia incompleta no afecta a transmisso do alelo mutado do
portador descendncia e a sua possvel expresso em descendentes.
frequente nas doenas autossmicas dominantes. A polidactilia e o retinoblastoma so exemplos de anomalias em que as mutaes que as determinam
tm penetrncia incompleta.
A penetrncia pode ser precoce ou tardia, quando se considera a idade
mdia com que os indivduos exprimem o alelo em causa. A penetrncia
tardia reduz a seleco natural conduzindo a um aumento da frequncia da
doena na populao, enquanto que a penetrncia precoce, quando conduz
morte antes da puberdade ou inibe ou dificulta a reproduo, reduz a
frequncia do alelo mutado na populao. Quando a mutao produz um
alelo letal, a frequncia da doena na populao igual taxa de mutao
do gene em causa. A coreia de Huntington ou a FAP constituem exemplos
de doenas de manifestao tardia por penetrncia tardia e completa.
A penetrncia pode ser influenciada pela presena de outros genes e por
factores ambientais. Pode, por isso, variar entre diversas famlias.
A porfiria aguda intermitente um exemplo da forma como os factores
ambientais podem influenciar a penetrncia. As manifestaes da porfiria so
131
habitualmente desencadeadas aps a puberdade, quando so ingeridas

determinadas substncias como o fenobarbital ou sulfonamidas, entre cerca
de 60 frmacos que podem desencadear porfiria. Os factores de risco para
as manifestaes intestinais e neurolgicas incluem mesmo o consumo de
lcool e as alteraes hormonais da puberdade e/ou do ciclo menstrual.
Na ausncia de factores desencadeantes, no h penetrncia do gene, pelo
que a expresso (penetrncia) intermitente. Mais de 90% dos indivduos
que herdam a deficincia enzimtica para este tipo de porfiria mantm-se
sem manifestaes clnicas.
Outra doena em que os factores ambientais so os responsveis pela
penetrncia de um gene mutado encontra-se em casos de surdez induzidos
por aminoglicosdeos. Se a mutao A1555G do DNA mitocondrial estiver
presente, a administrao de aminoglicosdeos desencadeia o aparecimento
de surdez. Na presena da mesma mutao, se no houver exposio ao factor desencadeante, no haver penetrncia. Da mesma forma, a presena de
homozigotia recessiva para a mutao associada a FCU apenas desencadeia
o fentipo caracterstico se houver uma alimentao normal que leve
ingesto de fenilalanina nas quantidades habituais para a espcie humana.
A nvel oncolgico, os efeitos ambientais tambm podem influenciar a
penetrncia de um gene, como pode acontecer com formas mutadas do gene
BRCA1. As mulheres portadoras de formas mutadas e patognicas deste
gene, ao contactarem com estrogneos ou com molculas que mimetizam
os estrogneos, como os pesticidas, vo ter um aumento de risco para cancro
da mama, o que equivale a dizer que se verifica um aumento da penetrncia
das formas mutadas do gene BRCA1.
4.6.8. EXPRESSIVIDADE VARIVEL
132
Nem sempre possvel estabelecer uma relao directa entre gentipo

e fentipo, devido a variao da expressividade de um gene, ainda que haja
penetrncia completa. A expressividade refere-se intensidade (severidade)
com que um gene expresso: pode variar desde uma forma fruste at uma
forma grave, em termos do fentipo observado em diversos membros de
uma famlia, portadores da mesma mutao de um gene. Na neurofibromatose tipo I, a expressividade varivel ao ponto de um progenitor com
manifestaes frustes que no permitem a sua deteco clnica, poder
transmitir o alelo mutado a um descendente e neste haver uma expresso

grave da mutao.
A expressividade varivel poder dever-se ao efeito de genes
modificadores cujos produtos interajam com os produtos dos alelos mutados,
a heterogeneidade allica, ou ainda a factores ambientais. A existncia de
genes modificadores surge como uma das justificaes para as diferenas de
expresso de uma mesma mutao quando presente em diferentes famlias.
A interaco gnica na determinao de um fentipo pode ser exemplificada
pela melhoria que o fentipo da anemia de clulas falciformes por mutao do
gene da -globina pode sofrer, mesmo quando em homozigotia (HbS/HbS), se
houver um aumento de expresso dos genes da -globina com produo de
nveis significativos de hemoglobina fetal (HbF). Nestas condies, a anemia de
clulas falciformes pode no ser clinicamente relevante.
Nos casos de heterogeneidade allica, pode acontecer que as diferentes
mutaes de um gene originem mesmo patologias diversas e no s variaes
de intensidade de uma entidade nosolgica. Mutaes a nvel do gene da
-globina podem originar -talassmia, anemia de clulas falciformes e meta-hemoglobinmia. Diferentes mutaes do gene FGFR2 (receptor para o factor
de crescimento fibroblstico) podem originar trs diferentes sndromas com
craniosinostose: sndroma de Pfeiffer, sndroma de Crouzon e sndroma de
Jackson-Weiss. A nvel do gene FGFR3, mutaes diferentes podem originar
acondroplasia ou displasia tanatofrica, sendo esta ltima sempre letal no
perodo neonatal. tambm o caso do gene AR que codifica o receptor para
os androgneos, localizado no cromossoma X. Foram identificadas diversas
mutaes que afectam a capacidade de ligao dos androgneos ao receptor
com consequente desenvolvimento da sndroma de feminizao testicular.
Contudo, no mesmo gene AR, foi identificada uma expanso do tripleto CAG,
no primeiro exo, que origina atrofia muscular espinhobulbar.
Uma mutao especfica de um alelo pode ainda originar fentipos
diferentes como resultado da presena de polimorfismos localizados no
mesmo alelo, embora noutro codo. A mutao que substitui o cido
asprtico por arginina no codo 178 (Asp178Asn) do gene PRNP localizado
no cromossoma 20, est associada, em algumas famlias, a doena de
Creutzfeld-Jakob hereditria e noutras a insnia familiar mortal. A expresso
de fentipos diversos como consequncia de uma nica mutao implica a
influncia de outros factores. Para o gene PRNP foram descritos polimorfismos
133
para o codo 129, sem associao directa a qualquer doena, que podem
originar a codificao de metionina/metionina (em 37% dos casos),
metionina/valina (em 51% dos casos) e valina/valina (em 12% dos casos).
Contudo, se um alelo do gene PRNP transporta a mutao Asp178Asn e um
polimorfismo para a valina o fentipo patolgico a doena de Creutzfeld-Jakob; se a mesma mutao Asp178Asn se combina no mesmo alelo com
o polimorfismo para a metionina, o fentipo o da insnia familiar mortal.
Em termos de efeito de factores ambientais refira-se a variabilidade do
fentipo associado a mutao no gene que codifica a fenilalanina hidroxilase,
a causa mais frequente de FCU. Na condio homozigtica recessiva as
manifestaes da doena (microcefalia, convulses, atraso mental) so
desencadeadas por uma alimentao normal. No entanto, um indivduo
homozigtico recessivo a quem for administrada uma dieta que contenha
apenas a fenilalanina indispensvel, como aminocido essencial, no
desenvolve os sintomas da FCU.
As mutaes dinmicas podem igualmente justificar a expressividade
varivel, devido instabilidade mutacional observada entre diversos membros
de uma famlia com consequente variabilidade do comprimento das
sequncias repetitivas e do seu reflexo no fentipo.
4.6.9. EPISTASIA
134
A epistasia consiste na interaco dos produtos de diferentes alelos

localizados em diferentes loci para a expresso de um determinado fentipo.
uma forma de interferir com a expresso de um gene e com a penetrncia.
Como exemplo refira-se a ausncia de expresso dos grupos sanguneos
ABO quando h homozigotia recessiva para o locus H (gene FUT1 que codifica
a enzima fucosiltransferase). A ligao dos antignios A ou B superfcie dos
glbulos vermelhos depende da presena de uma glicoprotena especfica de
superfcie. A adio do acar depende da aco enzimtica de uma molcula
codificada pelo alelo H. Se o indvduo for homozigtico (HH) ou
heterozigtico (Hh) a glicoprotena de superfcie produzida e estabelecem-se os grupos sanguneos. Os indivduos homozigticos recessivos para este
locus (hh) sero todos fenotipicamente do grupo O, pois no tero
superfcie dos glbulos vermelhos nem o antignio A, nem o antignio B.
Contudo, podero ser genotipicamente AA, AO, BB, BO ou AB.
4.6.10. INFLUNCIA DO SEXO
Independentemente de um alelo ser transmitido ligado aos cromossomas

sexuais ou aos autossomas, h caracteres cuja expresso influenciada pelo
sexo. Nestes casos, o mesmo alelo exprime-se como dominante em indivduos
de um sexo e como recessivo nos indivduos do outro sexo. Como exemplo,
refira-se o alelo da calvcie que dominante no sexo masculino e recessivo
no sexo feminino. Uma mulher calva dever ser homozigtica recessiva.
Uma condio influenciada pelo sexo difere do imprinting, uma vez
que, no imprinting, a expresso do gene depende do sexo do progenitor
que transmite o gene descendncia e no do sexo do seu portador.
4.6.11. LIMITAO AO SEXO
Por vezes, a expresso de um fentipo limitada a determinado sexo

embora os alelos que especificam os caracteres possam ser transmitidos pelos
indivduos do sexo em que no se exprimem. Como exemplos, refiram-se o
desenvolvimento mamrio na mulher, o desenvolvimento da barba no homem
e a puberdade precoce familiar de natureza autossmica dominante no sexo
masculino por mutao do receptor da hormona luteinizante.
4.6.12. FENOCPIAS
H a noo de que a expresso de um fentipo devida a uma

determinada mutao a nvel de um gene. Contudo, um fentipo que
mimetiza a expresso de um gentipo pode ser produzido por aco de
factores ambientais, independentemente de uma alterao gnica especfica.
Se este mecanismo ocorrer em diversos membros de uma famlia, pode ser
imitada uma condio hereditria.
A microcefalia, com uma incidncia de 1 em 10.000 recm-nascidos,
pode ter origem gentica (autossmica dominante, autossmica recessiva,
multifactorial) mas tambm pode ser espordica, causada por factores no
genticos. Nos descendentes de mes fenilcetonricas que no controlem os
nveis de fenilalanina durante a gravidez, encontra-se microcefalia ainda que
o recm-nascido seja heterozigtico, condio que no afectaria o fentipo.
135
A microcefalia devida ao ambiente fetal decorrente de hiperfenilalaninmia

materna. Trata-se de uma fenocpia devida ao efeito teratognico da
hiperfenilalaninmia.
A microcefalia, como fenocpia, pode ter outras causas como seja a
ingesto de lcool em excesso pela me, durante a gravidez. Neste caso,
aparece integrada nas manifestaes da sndroma fetal alcolica.
4.6.13. TERATOGNEOS
Um teratogneo uma substncia ou agente externo ao genoma do

embrio ou do feto que provoca um defeito no seu organismo durante o
desenvolvimento intra-uterino. Os teratogneos originam um padro
caracterstico de defeitos embora haja um espectro de intensidade desde
formas severas a formas mais suaves, o que poder depender da fase da
gravidez em que ocorreu a exposio e da dose do teratogneo. Podem
simular uma situao gentica produzindo fenocpias.
Os teratogneos podem ser de natureza infecciosa (v.g., rubola,
citomegalovrus, toxoplasmose), fsica (v.g., radiao), qumica (v.g., lcool,
chumbo), medicamentosa (v.g., citostticos, alguns anti-epilpticos e
antibiticos, cido retinico), ou de natureza metablica materna (v.g., diabetes, FCU).
4.6.14. PATERNIDADE EXTRACONJUGAL
A paternidade devida a relaes extraconjugais no conhecidas poder

tambm contribuir para dificultar a identificao da natureza hereditria de
uma doena ou caracter. Um descendente de um casal que apresente um
fentipo sugestivo de uma determinada doena com um tipo de
136
hereditariedade conhecido e que no se encontra nos progenitores ou na

famlia, pode fazer pensar que a doena estar presente num dos
progenitores de uma forma fruste ou que tem penetrncia incompleta, que
uma mutao de novo ou um mosaico gonadal e induzir em erro no
aconselhamento para futuras gravidezes. Poder ainda ser interpretada como
uma fenocpia, mesmo estando associada a uma causa gentica especfica
e hereditria transmissvel descendncia do propositus.
5. HEREDITARIEDADE NO-MENDELIANA
5.1. HEREDITARIEDADE POLIGNICA
Nos casos em que um fentipo resulta do efeito parcial e aditivo de
mltiplos genes de uma forma independente do meio ambiente, em que cada
um tem um contributo minor, sem interaco entre si, o mecanismo
hereditrio subjacente designado como polignico. Nestes casos, no h
dominncia nem recessividade.
As condies polignicas originam uma variao contnua da expresso
fenotpica que se apresenta como uma curva normal (curva de Gauss), ao
contrrio das condies monognicas em que as frequncias encontradas
permitem desenhar uma curva bimodal ou mesmo trimodal. Na curva bimodal, o maior pico de frequncia corresponde soma de homozigticos para o
alelo normal com os heterozigticos por no ser possvel a sua distino
fenotpica, e o segundo pico aos homozigticos recessivos. Na curva trimodal,
o primeiro pico corresponde aos homozigticos para o alelo normal, o segundo
pico aos heterozigticos, e o terceiro pico aos homozigticos recessivos.
As impresses digitais so tradicionalmente indicadas como exemplo de
hereditariedade polignica. No entanto, entre dois gmeos verdadeiros, e
apesar de possuirem um genoma idntico, as impresses digitais no so
integralmente iguais, o que se poder dever ao diferente efeito da presso
que cada um exerce com os dedos contra a parede do saco amnitico durante o perodo da sua formao, entre as 6 e as 13 semanas. Ser, por isso,
uma condio multifactorial. Tambm a indicao da cor da pele como
estritamente polignica, no considera o efeito que uma exposio
continuada luz solar exerce sobre o escurecimento da pele. Desta forma,
sendo um fentipo resultante da aco aditiva de diversos genes e de um
factor ambiental, estar tambm em causa um mecanismo multifactorial.
A cor da pele conduziu construo sociolgica das raas. Caber, a
este propsito referir que a componente gentica ter resultado da
confluncia dos efeitos de mltiplos genes, cuja presena representa
vantagem biolgica. No entanto, em termos de nmero de melancitos, ou
seja, das clulas responsveis pela produo da melanina, as diferenas so
mnimas entre as diferentes raas. Apenas a quantidade de melanina e a sua
distribuio so diferentes.
137
A altura de uma pessoa, pelo envolvimento de mltiplos genes e de

factores ambientais, surge tambm como um caracter de natureza multifactorial. Uma alimentao pobre afecta significativamente o desenvolvimento
do fentipo.
Como exemplo de uma condio puramente polignica, talvez se possa
indicar a cor dos olhos. Trata-se de um caracter devido quantidade de
melanina que as clulas da ris produzem.
5.2. HEREDITARIEDADE MULTIFACTORIAL

5.2.1. INTRODUO
138
Os caracteres ou doenas que resultam do efeito aditivo dos produtos

codificados por vrios genes e da interaco entre os produtos gnicos e o
meio ambiente designam-se por multifactoriais. Nas condies multifactoriais,
no se encontra um gene que actue de uma forma saliente. No meio
ambiente incluem-se as influncias de natureza fsica, qumica ou biolgica
exercidas in tero ou aps o nascimento, ou seja, todos os factores de
natureza no gentica que influenciam o fentipo (aspectos geogrficos e
climticos, dieta, hbitos sociais, condies scio-econmicas, educao,
doenas).
A conjugao diferenciada dos factores ambientais e genticos associados
a uma condio multifactorial, nos membros de uma populao, determina
a susceptibilidade maior ou menor de cada indivduo para desenvolver a
doena ou caracter em causa (liability). Geram-se assim variantes fenotpicas
com diferentes frequncias na populao que se distribuem de forma a
originar uma curva de Gauss (curva de distribuio normal) (Fig VII.9).
Na populao geral, possvel delimitar a linha que, direita da curva,
estabelece o limiar a partir do qual os indivduos tm uma expresso
do caracter considerada anormal ou h manifestao de doena.
A percentagem assim definida, indica a prevalncia na populao em causa.
Quando a curva diz respeito distribuio das frequncias encontradas em
familiares de portadores da mesma condio multifactorial, na mesma
populao e nas mesmas condies ambientais, se estiver presente uma
componente hereditria, a curva desloca-se para a direita (Fig VII.9).
Familiares de
indivduos afectados
% de
indivduos
limiar
Populao geral
Indivduos afectados
na populao geral
Acrscimo de
indivduos afectados
Variantes fenotpicas (liability)
Fig. VII.9 Distribuio normal (Gaussiana) de uma condio multifactorial, no que respeita populao
geral e para familiares de indivduos afectados. A negro indica-se a fraco da populao geral
afectada. Para a subpopulao de familiares de indivduos afectados, h um deslocamento da curva
para a direita, pelo que h um maior nmero de indivduos delimitado pelo limiar anteriormente
definido, que corresponde soma da rea a cinzento escuro com a rea a negro determinada para a
populao geral. Esta rea a cinzento escuro corresponde ao efeito da hereditariedade.
Assim, o limiar definido para a populao geral vai abranger uma maior
percentagem de indivduos afectados, dado haver um acrscimo de casos
resultantes do peso dos factores hereditrios, que se soma percentagem
de indivduos afectados na populao geral.
5.2.2. MTODOS DE ESTUDO DA HEREDITARIEDADE MULTIFACTORIAL
As facilidades que a gentica molecular veio trazer ao estudo das

doenas monognicas no se fizeram sentir nas doenas multifactoriais. Por
isso, continuam a ser relevantes as abordagens indirectas como os estudos
populacionais, os estudos de concordncia em membros de famlias, em
crianas adoptadas e em gmeos, e os estudos de associao e de ligao
gnica. O estudo directo de mutaes tem tido pouco sucesso, devido ao
elevado nmero de genes habitualmente envolvido.
139
No essencial, os estudos procuram avaliar o peso que os factores

ambientais e os factores genticos exercem sobre o fentipo. A caracterizao
do peso dos factores genticos permite avaliar a hereditabilidade de uma
condio.
Os problemas que a gentica molecular evidencia na abordagem das
doenas multifactoriais esto associados:
a falta de especificidade diagnstica;
existncia de heterogeneidade gnica;
a penetrncia e expressividade variveis;
variabilidade da idade de incio da doena;
existncia de casos de natureza no gentica;
ao desconhecimento do efeito modificador devido ao ambiente;
cautela a ter na transferncia dos conhecimentos obtidos numa
populao para outra populao, em que podem ser diferentes a
etiologia e a incidncia.
5.2.2.1. ESTUDOS POPULACIONAIS
140
Os estudos populacionais avaliam a prevalncia dos gentipos de

susceptibilidade para uma doena ou caracter numa determinada populao,
os factores de risco das mutaes somticas e germinais e, atravs dos
estudos de associao, a relao entre os alelos de diferentes loci e o risco
de doena na referida populao.
As diferenas de frequncia entre diferentes populaes, para uma
determinada doena ou caracter, podero ter a ver com factores genticos
ou com factores ambientais. A separao entre factores genticos e factores
ambientais pode ser feita por estudos comparativos das frequncias de um
caracter ou doena numa populao original donde so extradas subpopulaes emigrantes, na populao de acolhimento e nas subpopulaes.
Os estudos podem ser elucidativos se se observarem frequncias diferentes
entre a populao original e a populao de acolhimento.
Assim, quando a frequncia na subpopulao emigrante se mantm, tal
facto sugere que os factores genticos so mais importantes do que os
factores ambientais. Contudo, quando a frequncia na subpopulao evolui
e passa a apresentar valores prximos dos que se encontram para a populao
de acolhimento, este resultado indica que h uma preponderncia dos

factores ambientais na determinao do fentipo.
5.2.2.2. ESTUDOS DE FAMLIAS
Os estudos de famlias desenvolvem-se a partir da constatao de que

determinado caracter ou doena tem uma frequncia maior entre os membros
de uma determinada famlia, comparativamente com a frequncia observada
na populao geral. Por sua vez, o grau de parentesco afecta o risco para a
ocorrncia da condio em causa, sendo maior para os familiares mais
prximos.
Os estudos de famlias avaliam a presena de agregao familiar e
permitem distinguir se a agregao causada por factores ambientais ou por
factores genticos, desde que seja possvel isolar os factores ambientais.
Permitem ainda caracterizar os modos de transmisso, atravs das anlises
de segregao e de linkage. A anlise de segregao um mtodo
estatstico pelo qual so testados todos os tipos de hereditariedade que se
adequem s condies recolhidas e em estudo.
Assim, a constatao de uma maior frequncia para determinado caracter
ou doena nos membros de uma famlia, comparativamente com a populao
geral, evidencia susceptibilidade para o fentipo em causa na famlia.
Quando os membros de uma famlia partilham o mesmo meio ambiente,
a comparao da frequncia de um caracter ou doena nos elementos da
famlia relacionados pela ascendncia, com a sua frequncia em outros
membros da famlia sem ascendncia comum (v.g., esposas) reala o efeito
ambiental, se as frequncias forem idnticas. Contudo, este tipo de estudo
salientar os factores genticos, se a frequncia for maior nos familiares
relacionados por ascendncia, em comparao com a frequncia nos
membros da famlia sem ascendncia comum. A determinao da proporo
de indivduos afectados em funo do grau de parentesco permite estabelecer
o risco emprico de recorrncia.
5.2.2.3. ESTUDOS EM CRIANAS ADOPTADAS
Quando um indivduo adoptado por algum que no seja seu familiar, passa a partilhar um ambiente comum com os pais adoptivos mas no
141
os genes. Em relao aos seus pais biolgicos partilha os genes mas no o

ambiente. Desta forma, as eventuais semelhanas fenotpicas que se
desenvolvam em relao aos pais adoptivos sero fruto do ambiente e as
semelhanas com os pais biolgicos sero fruto dos genes.
Quando h concordncia fenotpica entre os membros da famlia de
adopo e os filhos adoptivos, embora seja reduzida a identidade gnica, os
estudos de adopo permitem isolar o efeito ambiental como o factor que
partilham e que ser a causa da concordncia encontrada. Em sentido
contrrio, quando h concordncia fenotpica entre pais e filhos biolgicos,
na ausncia de partilha do ambiente, possvel isolar os factores genticos
como causa da concordncia.
5.2.2.4. ESTUDOS DE GMEOS E HEREDITABILIDADE
142
Em relao aos estudos de gmeos, devem ser considerados em separado

os gmeos verdadeiros (monozigticos, com 100% de identidade gnica
inicial e um ambiente embrionrio e fetal comum) e os falsos gmeos
(dizigticos, com 50% de identidade gnica e um ambiente embrionrio e
fetal comum). O efeito do ambiente e dos genes sobre o fentipo, aps o
nascimento, pode ser analisado quando os gmeos so separados e criados
em ambientes diferentes (v.g., devido a adopo). assim possvel definir
o grau de concordncia para um determinado trao ou doena, pela
proporo de pares de gmeos em que h coincidncia na expresso
fenotpica nos dois gmeos, em relao ao total de pares de gmeos
observados. H concordncia quando um caracter ou doena partilhado ou
no partilhado pelo par de gmeos e discordncia quando um dos membros
do par de gmeos exprime o fentipo em causa e o outro no o exprime.
Entre gmeos monozigticos (Tabela VII.14), a concordncia de 100%
para condies monognicas de penetrncia completa, em que o ambiente
no interfira na expresso, sejam elas dominantes ou recessivas. Mesmo que
os gmeos tenham sido separados e vivam em ambientes diferentes, tal facto
no afecta a concordncia. Para falsos gmeos e para condies de
penetrncia completa, a concordncia ser de 50% nos casos autossmicos
dominantes e de 25% nos casos autossmicos recessivos. Nos caracteres
influenciados pelo sexo, os pares de gmeos dizigticos devem ser do mesmo
sexo para que o estudo possa ser realizado.
Tabela VII.14. Concordncia entre gmeos, em funo do tipo de hereditariedade presente

e de gmeos
Tipo de gmeos
Monozigticos
Dizigticos
Tipo de hereditariedade
Autossmica dominante
Autossmica recessiva
Multifactorial
100%
100%
40%-60%
50%
25%
4%-8%
Para condies multifactoriais (Tabela VII.14), a concordncia entre

gmeos monozigticos ser menor do que os 100% antes referidos, dada a
confluncia de factores ambientais com factores genticos, na determinao
do fentipo. Ainda assim, haver maior concordncia entre gmeos
monozigticos do que entre gmeos dizigticos, se os factores genticos
forem preponderantes. A concordncia ser aproximada para gmeos
monozigticos e para gmeos dizigticos se os factores preponderantes forem
ambientais e forem partilhados, e for muito reduzida ou nula a influncia dos
factores genticos (v.g., uma infeco epidmica como o sarampo ou a rubola).
A partir dos valores da concordncia encontrada (no caso dos gmeos,
os valores da concordncia para os pares de gmeos verdadeiros e para os
pares de gmeos falsos) possvel determinar a hereditabilidade (h) de um
trao ou doena. A hereditabilidade reflecte a percentagem de efeito
fenotpico devido componente gentica numa condio multifactorial.
O valor da hereditabilidade igual ao dobro da diferena entre os valores
encontrados para os gmeos verdadeiros (Cmz) e para os falsos gmeos (Cdz),
ou seja, h = 2 (Cmz - Cdz). Quando os traos ou doenas so fortemente
determinados por factores genticos, o valor de Cmz aproxima-se de 1 e o
valor de Cdz aproxima-se de 0,5, pelo que h ser prximo de 1. Pelo contrrio,
medida que a diferena entre os valores de concordncia se reduz, o valor
de h aproxima-se de 0.
Embora os valores da hereditabilidade (Tabela VII.15) devam ser
considerados como especficos para uma determinada populao, comum
encontrar-se sobreposio de resultados entre populaes diversas.
143
Tabela VII.15. Hereditabilidade (h) de diversos traos ou doenas multifactoriais

TRAO OU DOENA
h (*)
Altura
Dermatoglifos
Asma
Estenose do piloro
Esquizofrenia
Espondilartrite anquilopoitica
Hipertenso essencial
Anencefalia e espinha bfida
Fenda labial ou do palato
Luxao congnita da anca
Alcoolismo
Enfarte do miocrdio (mulheres)
P boto
Inteligncia (em geral)
Carcter extrovertido
Esclerose mltipla
Interesses vocacionais
Desempenho escolar
lcera pptica
Enfarte do miocrdio (homens)
Boa memria
Sarampo
Morte por infeco
1,0
0,92
0,80
0,75
0,70-0,85
0,70
0,62
0,60-0,78
0,60-0,76
0,60
0,60
0,60
0,58-0,68
0,52
0,51
0,50
0,42
0,38
0,37
0,26
0,2
0,16
()
(*) Os valores foram recolhidos de diversas fontes referidas na bibliografia

() Cmz = 8; Cdz = 9
5.2.3. CRITRIOS PARA IDENTIFICAO DAS CONDIES MULTIFACTORIAIS
144
So quatro os critrios que permitem identificar a hereditariedade multifactorial:

concordncia entre gmeos quando o valor da concordncia para um
determinado caracter ou doena entre gmeos monozigticos maior
do que 4 vezes o valor encontrado entre gmeos dizigticos (embora
uma diferena menor no exclua a natureza multifactorial);
quando a frequncia de indivduos afectados 2,5 vezes maior na
descendncia de casais em que um dos membros tem um determinado
caracter ou doena e o outro normal, comparativamente com a
frequncia observada na descendncia de casais em que os dois membros
so normais (uma frequncia inferior no exclui a natureza multifactorial);
quando se verifica inverso, em funo do sexo, dos valores da
frequncia da doena ou caracter nos familiares de indivduos

afectados, quando agrupados para o mesmo grau de parentesco;
assim, a frequncia do caracter ou doena maior entre os
descendentes de indivduos do sexo menos afectado do que a que se
verifica entre os descendentes de indivduos afectados pertencentes ao
sexo em que mais frequente (ver Tabela VII.16, a propsito da
estenose hipertrfica do piloro);
quando o aumento da frequncia de um determinado caracter ou
doena ligeiro em consequncia do endocruzamento, embora se deva
ter em considerao, nestes casos, que pode estar em causa a hereditariedade dominante com penetrncia incompleta baixa e no a
hereditariedade multifactorial.
Tabela VII.16. Frequncia da estenose hipertrfica do piloro em familiares de indivduos
afectados (sexo masculino/ sexo feminino)
Indivduo Masculino
afectado Feminino
Irmo
RISCO DE RECORRNCIA EM FAMILIARES (%)

Irm
Filho
Filha Sobrinho Sobrinha Primo
Prima
2,17
10,89
2,07
8,91
0,29
0,29
6,42
22,95
2,55
11,48
2,16
6,67
0,47
1,28
0,57
0,81
Adaptado de Vogel e Motulsky (1997).
5.2.4. FACTORES QUE INFLUENCIAM A RECORRNCIA DE CONDIES MULTIFACTORIAIS
O clculo do risco de recorrncia em familiares de indivduos afectados,

no que respeita a caracteres ou doenas multifactoriais, de natureza emprica.
O que se determina a influncia da componente gentica (hereditabilidade)
no desenvolvimento do caracter ou doena, traduzida na probabilidade de
recorrncia, a partir da sua prevalncia numa determinada populao.
Para uma mesma condio multifactorial, o risco emprico de recorrncia no
constante quando se comparam sub-populaes expostas a condies
ambientais diversas. Como exemplo, refira-se o risco de recorrncia para defeitos
do tubo neural num casal com um filho afectado, a quem foi proporcionada a
ingesto de um suplemento de cido flico mulher umas semanas antes de
engravidar e durante a gravidez. Nestas condies, o risco de recorrncia,
inicialmente de 3%, vai ser diminudo em 50% a 70%, como consequncia da
modificao das condies ambientais (mantendo-se idntico o peso gentico).
145
O aumento do risco de recorrncia de uma condio multifactorial

depende:
da severidade da doena (v.g., o risco para doena de Hirschsprung
maior em irmos de doentes com uma grande extenso de intestino
afectada, comparativamente com os casos em que est atingida uma
curta extenso; o risco de recorrncia para lbio leporino/fenda palatina
num segundo filho maior quando o irmo afectado tem lbio lbio
leporino/fenda palatina bilateral, com um risco de 5,7%, em
comparao com o risco que se observa nos casos unilaterais, em que
o risco de 4,2%);
da precocidade do aparecimento dos casos de doena (v.g., no cancro
do clon o risco para a populao geral de cerca de 1,2%; contudo,
para os indivduos com um familiar em primeiro grau afectado, o risco
de 2,2% se o diagnstico feito a partir dos 55 anos e de 6,5%
quando a neoplasia se manifesta antes dos 45 anos);
do incremento do grau de parentesco em relao ao indivduo atingido
(Tabela VII.17), uma vez que quanto mais elevada a consaguinidade,
maior a percentagem de genes em comum (no entanto, para familiares
em segundo grau o risco reduzido e, para graus de parentesco mais
baixos do que segundo grau, o risco raramente significativo);
Tabela VII.17. Risco de recorrncia para lbio leporino/fenda palatina, em funo do grau
de parentesco com o indivduo afectado
146
PARENTESCO (em relao ao indivduo afectado)
RISCO
Gmeo monozigtico
Irmo
Irmo (dois irmos afectados)
Filho
Filho (pai e irmo afectados)
Primo
Controlo (populao geral)
40%
4,0%
10%
4,2%
10%
0,3%
0,1%
do nmero de pessoas afectadas numa famlia (v.g., o risco de

recorrncia para lbio leporino/fenda palatina, numa segunda gravidez,
de 4,2% quando h um filho prvio afectado e de 10% quando,
para alm de um filho, h tambm um dos pais afectado) (Tabela VII.17);
do sexo do familiar afectado quando a incidncia diferente em cada

sexo, j que o risco maior para o familiar de um indivduo afectado
pertencente ao sexo em que a doena ou caracter mais raro (v.g.,
na estenose hipertrfica do piloro (Tabela VII.16), em que a incidncia
cinco vezes maior nos homens (0,5%) do que nas mulheres (0,1%),
o risco maior para os descendentes de uma mulher afectada);
da prevalncia (p) da doena na populao, sendo o risco mximo de
recorrncia, para um familiar em primeiro grau (irmos e filhos) de um
doente, um valor prximo da raz quadrada da prevalncia na
populao geral (p1/2), para familiares em segundo grau de p3/4 e para
familiares em terceiro grau de p7/8;
da hereditabilidade presente na condio em causa, a que se associa
o peso maior ou menor da componente gentica (Tabela VII.15).
A hereditabilidade definida em relao variao fenotpica para um
grupo de indivduos e no para um gene ou genes, pelo que pode ser
afectada pelo ambiente. Na determinao da hereditabilidade no so
identificados os genes nem o seu nmero, o seu modo de transmisso
hereditria ou como actuam.
5.2.5. EXEMPLOS DE PATOLOGIA DE NATUREZA MULTIFACTORIAL
5.2.5.1. ALCOOLISMO
Cerca de 3% a 5% dos membros da populao masculina so alcolicos

em comparao com 0,1% a 1% da populao feminina. O lcool uma
substncia comprovadamente teratognica que pode provocar, quando
ingerida durante a gravidez, anomalias congnitas, perturbaes da
aprendizagem e perturbaes do comportamento. Pode mesmo provocar o
aparecimento da sndroma fetal alcolica.
Os estudos realizados com gmeos evidenciam uma componente
gentica no alcoolismo, sendo a concordncia ligeiramente maior entre
gmeos monozigticos do que entre gmeos dizigticos. Para os gmeos
monozigticos do sexo masculino, h uma concordncia de cerca de 40% e
para os dizigticos de cerca de 25%. No sexo feminino, a concordncia para
147
os gmeos monozigticos de cerca de 30%, sendo praticamente idntica para

os dizigticos. No mesmo sentido apontam os estudos de adopo, a partir
dos quais se deduz que nos filhos de pais biolgicos alcolicos, a incidncia
do alcoolismo 2-3 vezes maior. Um familiar em primeiro grau de um indivduo
alcolico tem um risco de vir a ser alcolico igual ou superior a 25%, se for
do sexo masculino, e de 5% a 10%, se for do sexo feminino.
5.2.5.2. ATRASO MENTAL
O atraso mental avaliado em funo da adequao idade dos nveis

de desenvolvimento mental, de aprendizagem e de ajustamento social. Atinge
cerca de 2% a 3% da populao geral. O atraso mental grave inclui
indivduos com QI menor do que 50 e encontra-se em cerca de 0,4% da
populao. Para um QI entre 50 e 70, considera-se haver um atraso mental
moderado, presente em cerca de 2% a 3% da populao.
As causas de atraso mental so muito variadas, destacando-se, como as
mais frequentes entre as causas genticas, a trissomia 21, como a primeira
causa, e a sndroma do X-frgil, como a segunda. A sndroma do X-frgil
a causa mais comum entre as condies hereditrias.
As causas de atraso mental podem apresentar padres hereditrios
autossmicos dominantes, autossmicos recessivos, ligados ao X ou
multifactoriais, ou terem um carcter espordico, adquirido no perodo pr-natal (v.g, infeco por rubola ou toxoplasmose), no perodo peri-natal (v.g.,
asfixia, traumatismo ou hipoglicmia), ou no perodo ps-natal (v.g., acidente
vascular cerebral, meningite, convulses).
Nos casos isolados de atraso mental idioptico severo, o risco de
recorrncia para um irmo de um doente (do sexo masculino ou do sexo
148
feminino) de 4% e para uma irm de 2%. Se numa fratria houver dois

irmos com atraso mental severo (independentemente do sexo) o risco de
recorrncia para um irmo ou irm de 25%. Quando os dois pais so
afectados por atraso mental severo idioptico, o risco para os descendentes
de 50%. No entanto, se apenas um dos pais for afectado, o risco de
10%, subindo para 20%, se apenas um dos pais for afectado e houver um
irmo do propositus tambm afectado.
5.2.5.3. CANCRO
Para alm dos genes, os factores ambientais tm tambm um papel

significativo na gnese e desenvolvimento do cancro, o que o torna um
exemplo de doena multifactorial.
Por vezes, possvel definir um padro claro de transmiso hereditria
de natureza dominante (quase sempre de penetrncia incompleta) ou
recessiva, embora o mais frequente seja a existncia de mutaes que criam
aumento da susceptibilidade, desenvolvendo-se o cancro por aco de
factores ambientais desencadeantes, como sejam os componentes do fumo
do tabaco, poluentes ambientais ou aditivos alimentares. Da considerao do
papel do ambiente, se podem deduzir atitudes e comportamentos dirigidos
para a diminuio da incidncia do cancro, de que se destacam: uma
alimentao rica em fibras, em que abundem alimentos frescos e frutas e que
seja pobre em gorduras, a no ingesto de lcool ou a sua ingesto em baixas
quantidades, o combate obesidade, a absteno de fumar, a prtica regular de exerccio fsico, a proteco contra a exposio luz solar, a proteco
contra poluentes ambientais ou profissionais.
5.2.5.4. DIABETES MELLITUS
A diabetes atinge cerca de 5% a 10% da populao adulta dos pases

ocidentais. Caracteriza-se pela presena de hiperglicmia e um dfice relativo
ou ausncia de produo de insulina. Entre as consequncias da diabetes
contam-se a retinopatia e a cegueira, a insuficincia renal, a neuropatia, ou
os problemas vasculares que podem conduzir a amputao. H dois tipos de
diabetes: a diabetes tipo 1 e a diabetes tipo 2.
A diabetes tipo 1 representa cerca de 10% dos casos de diabetes,
insulino-dependente em termos de sobrevivncia e aparece caracteristicamente
na infncia e em adultos jovens. Resulta da destruio das clulas dos ilhus
de Langerhans do pncreas, onde produzida a insulina. Os doentes so
magros e propensos a desenvolver cetose.
Entre gmeos monozigticos, a concordncia inferior a 50% (entre
30% e 40%) e entre gmeos dizigticos de 6%. Ainda que a diferena
da frequncia da diabetes tipo 1 nos dois sexos seja pouco acentuada, o risco
para os filhos claramente diferente consoante o sexo do progenitor
149
afectado: se a me for diabtica, o risco para os filhos de 1% a 3%; se

for o pai, o risco de 4% a 6%.
Entre irmos heterozigticos para os alelos de histocompatibilidade
HLA-DR3 ou HLA-DR4 (alelos em associao com a diabetes tipo 1), o risco
de recorrncia de 19%, quando um deles tem diabetes insulino-dependente. Comparativamente, o risco de recorrncia entre irmos de 6% e o
risco na populao geral de 0,3% a 0,5%. Se houver um irmo e outro
familiar em primeiro grau afectados, o risco de recorrncia de 17%.
A diabetes tipo 2, tambm designada no insulino-dependente,
caracterstica do perodo mdio da vida (na maioria das vezes, a partir dos
40 anos), e corresponde a cerca de 90% dos diabticos. Habitualmente,
observa-se excesso de peso e possvel controlar os nveis de glicmia com
dieta e/ou antidiabticos orais, embora, por vezes, seja necessrio recorrer
adminis-trao de insulina.
Entre gmeos monozigticos com diabetes tipo 2, a concordncia quase
de 100%, comparativamente com 10% em gmeos dizigticos. Entre irmos
e entre pais e filhos o risco de 5% a 10%, sendo o risco de recorrncia para
a tolerncia anormal glicose de 15% a 25%. Se houver um irmo e outro
familiar em primeiro grau afectados, o risco de recorrncia de 20%.
At 5% dos casos de diabetes tipo 2 so de natureza autossmica
dominante e de manifestao precoce, em idades inferiores aos 25 anos.
O gene que codifica a enzima glicocinase, localizado em 7p, o mais
frequentemente alterado neste tipo de diabetes. A glicocinase est envolvida
na metabolizao da glicose em glicose-6-fosfato.
Os factores ambientais tm um papel importante como factores de risco,
como fica patente pelo papel da obesidade e por estudos realizados em
comunidades migrantes em que se observou confluncia das frequncias, em
relao comunidade de acolhimento.
150
5.2.5.5. DOENA DE ALZHEIMER
A doena de Alzheimer a demncia mais frequente da velhice. Cerca

de 5% dos indivduos com mais de 65 anos desenvolvem esta doena.
Caracteriza-se por uma perda progressiva da capacidade intelectual devida
a degenerescncia neuronal, pela deposio de placas de amilide e de
agregrados neurofibrilhares. A morte ocorre, habitualmente, por infeco.
A presena do alelo APOE*4 do gene da apolipoprotena E consitui um factor de risco para doena de Alzheimer de manifestao tardia. Em
contraposio, a presena do alelo APOE*2 tem um efeito protector.
Cerca de 5% a 10% dos casos de doena de Alzheimer tm expresso
hereditria de natureza autossmica dominante. Os casos familiares
manifestam-se, com mais frequncia, entre os 40 e os 50 anos, ou seja, mais
precocemente do que os espordicos. Por outro lado, os casos familiares so
habitualmente mais graves do que os espordicos e o risco de recorrncia
para familiares em primeiro grau de indivduos afectados prximo de 50%.
Em cerca de metade do casos de manifestao precoce esto presentes
mutaes nos genes PSEN1 ou PSEN2 envolvidos no processamento ps-traduo da protena precursora da amilide, ou mutaes do gene APP que
codifica a protena precursora da amilide.
A concordncia entre gmeos verdadeiros de cerca de 60%. O risco
de recorrncia para familiares em primeiro grau de um indivduo com doena
de Alzheimer depende da idade de aparecimento da doena e do nmero
de doentes. Se um indivduo desenvolve sintomas da doena em idade superior a 65 anos, o risco para um irmo de 2%, mas se o incio da doena
antes dos 65 anos, o risco varia entre 4% e 12%. Se houver um irmo e
um dos pais afectados em idade superior aos 65 anos, o risco varia entre 4%
e 5%, mas se a idade de aparecimento da doena num dos pais e no irmo
for antes dos 65 anos, o risco mais elevado, entre 16% e 22%.
5.2.5.6. DOENA CARDACA CORONRIA
A doena cardaca coronria tem como principal causa a aterosclerose.

Como factores de risco destacam-se a idade avanada, o sexo masculino, a
hipertenso, a hipercolesterolmia, o stress, a obesidade, o sedentarismo,
baixos nveis sricos das lipoprotenas de alta densidade, altos nveis sricos
de lipoprotenas de baixa densidade, os hbitos tabgicos e a existncia de
um ou mais familiares em primeiro grau afectados. O risco decresce com uma
dieta pobre em gorduras saturadas e com a prtica de exerccio fsico.
Registe-se que a existncia de um familiar em primeiro grau com enfarte
do miocrdio constitui um factor de risco mais seguro do que os outros sendo
o risco duas a sete vezes maior do que o registado para indivduos sem
histria familiar. O risco para doena cardaca coronria aumenta tambm
151
com o incremento do nmero de indivduos afectados na famlia, quando o

familiar afectado do sexo feminino, j que esta condio mais rara neste
sexo, e quando a idade de aparecimento relativamente precoce (<55 anos)
no familiar afectado. Para indivduos do sexo masculino com idades
compreendidas entre os 20 e os 39 anos com um familiar em primeiro grau
com doena cardaca coronria antes dos 55 anos, o risco para a ocorrncia
desta doena aumenta trs vezes e se houver dois familiares em primeiro grau
com a doena, o risco aumenta 13 vezes.
Nos casos de doena cardaca coronria antes dos 60 anos, h uma maior
concordncia entre gmeos verdadeiros comparativamente com falsos gmeos,
permitindo a definio de um grau de hereditabilidade superior a 50%.
A hipercolesterolmia familiar responsvel por cerca de 10% a 20%
dos casos de doena cardaca coronria precoce. A percentagem de indivduos
com doena isqumica cardaca entre os 40 e os 49 anos de 51% para os
homens e de 12% para as mulheres. Contudo, para as idades compreendidas
entre os 60-69 anos, a percentagem de 100% para os homens e de 74%
para as mulheres. As diferentes percentagens registadas no homem e na
mulher evidenciam a interveno de factores adicionais no desenvolvimento
da doena, para alm de uma natureza autossmica dominante.
5.2.5.7. DOENAS PSIQUITRICAS
152
As duas doenas psiquitricas mais frequentes so a doena afectiva

bipolar (doena manaco-depressiva) e a esquizofrenia. Num indivduo da
populao geral dos pases desenvolvidos, que no tenha nenhum familiar
afectado com doena afectiva bipolar, o risco para esta doena de 2% a
3%. Para a esquizofrenia, em idnticas condies, o risco de 1%.
Na doena bipolar, os estudos de adopo evidenciaram que o risco est
relacionado com a condio verificada nos pais biolgicos e no nos pais
adoptivos. O risco para familiares em primeiro grau de um indivduo afectado
situa-se em 13% entre irmos e 15% entre pai e filho. Quando os dois pais
so afectados, o risco para um filho de 50%. Se houver um pai e um irmo
afectados o risco de cerca de 20%. Entre gmeos monozigticos o risco
de recorrncia de 70% e entre gmeos dizigticos de 20%. Entre tios e
sobrinhos e avs e netos o risco de recorrncia de cerca de 5% e entre
primos direitos de cerca de 2% a 3%. Na indicao do risco deve ser tida
em considerao a idade de aparecimento da doena no familiar. Assim, para

familiares em primeiro grau de um doente em que a doena ocorreu antes
dos 40 anos, o risco aumenta para um valor de cerca de 20%. Quando a
doena bipolar ocorreu em idade superior a 40 anos o risco desce para 10%.
Na esquizofrenia ocorre uma perda da capacidade para organizar o
pensamento e a percepo que conduz a um afastamento progressivo da
realidade. Os estudos de adopo mostraram que o risco para desenvolver
esquizofrenia em indivduos adoptados est prximo do valor esperado a
partir da condio observada nos seus pais biolgicos, mas no nos seus pais
adoptivos. O risco para familiares em primeiro grau de um indivduo afectado
situa-se nos 9% entre irmos e em 13% para os filhos com um dos pais
afectado. O risco aumenta quando h mais do que um familiar afectado.
Quando os dois pais so afectados, o risco para um filho de 45%.
Se houver um pai e um irmo afectados o risco de cerca de 15%.
Entre gmeos monozigticos, a concordncia prxima de 50% e entre
gmeos dizigticos de 15%. Entre tios e sobrinhos e avs e netos o risco
de recorrncia de cerca de 3% e entre primos direitos de cerca de 2%.
Estes riscos so considerados para familiares de doentes com idades jovens,
reduzindo-se o risco para as idades mais avanadas.
5.2.5.8. HIPERTENSO ARTERIAL
A hipertenso arterial um dos factores de risco para a doena coronria

cardaca, para os acidentes vasculares cerebrais e para a doena renal. Apenas
em 5% a 10% dos casos de hipertenso se encontra uma causa, sendo a
grande maioria de natureza essencial. As situaes de causa conhecida
comeam habitualmente em idade jovem, comparativamente com a
hipertenso essencial que tem incio normalmente na idade mdia da vida.
A doena renal a causa mais frequente de hipertenso no essencial.
A prevalncia da hipertenso em indivduos americanos de raa negra de
38%, comparativamente com 29% na raa branca.
A hereditabilidade calculada a partir de estudos feitos em gmeos indica
um valor de 0,6. H algumas dezenas de genes especficos (entre 20 a 50)
envolvidos na hipertenso arterial, entre os quais o que codifica o
angiotensinognio. Os factores de risco de natureza ambiental so a ingesto
elevada de sdio, uma dieta rica em gordura, a ingesto de lcool, o stress,
153
a falta de exerccio fsico e a obesidade. A idade, o sexo masculino, a raa

negra e a existncia de familiares com hipertenso arterial so outros factores
de risco que devem ser considerados. Relativamente idade, refira-se que
a percentagem de indivduos hipertensos sobe at 40% nas idades
compreendidas entre os 75 e os 79 anos.
O risco para a hipertenso arterial essencial varia com o grau de
parentesco, o sexo e o nmero de indivduos afectados na famlia. Quando
os dois pais so normotensos, o risco para um filho ser hipertenso de 4%.
Contudo, quando um dos pais hipertenso, o risco varia entre 8% e 28%
e quando os dois pais so hipertensos o risco varia entre 25% e 45%.
Os factores ambientais parecem ter um efeito major no desencadear da
hipertenso essencial, conforme os resultados de estudos realizados em migrantes.
5.2.5.9. OBESIDADE
154
Considera-se que h obesidade quando o peso corporal excede em 20%

o limite superior dos valores considerados normais. Pode tambm considerar-se que h obesidade quando o ndice de massa corporal (IMC) superior a
30 kg/m2. O IMC igual ao quociente entre o peso corporal (em kilogramas)
e a altura ao quadrado (em metros).
A obesidade um factor de risco para diversas doenas, em que se
incluem a doena cardaca coronria, os acidentes vasculares cerebrais e a
diabetes tipo 2.
Entre os mltiplos genes que tm sido relacionados com o desenvolvimento de obesidade encontra-se o que codifica a leptina. A leptina uma
hormona produzida pelo tecido adiposo, por efeito da saciedade. Actua no
hipotlamo, onde se localizam os centros da saciedade e da fome. Um dos
mecanismos possveis, embora raro, subjacente ao desenvolvimento de
obesidade no homem, poder estar associado a insensibilidade dos receptores
para a leptina. Desta forma, por anulao da retrorregulao mediada pela
leptina produzida pelos adipcitos hipertrofiados ou hiperplsicos, no seria
inibido o apetite.
A obesidade apresenta uma hereditabilidade que pode atingir valores da
ordem de 70% a 80%, o que demonstra que a componente gentica exerce
um papel significativo no aumento do IMC.
5.3. HEREDITARIEDADE MITOCONDRIAL

A hereditariedade mitocondrial assenta na informao gentica transmitida
pelo DNA mitocondrial. Associadas ao DNA mitocondrial de uma clula podem
encontrar-se duas condies: homoplasmia e heteroplasmia.
A homoplasmia
traduz a presena de identidade do DNA mitocondrial numa clula, seja normal ou mutado, enquanto que a heteroplasmia designa a condio em que
coexistem DNA mitocondrial normal e DNA mitocondrial mutado numa clula.
Nos casos de heteroplasmia, durante as divises sucessivas a partir de uma
clula nica, podem formar-se, aparentemente ao acaso, diferentes linhas
celulares em relao ao contedo em DNA mitocondrial, ou ainda linhas apenas
com DNA mutado ou com DNA normal.
As mutaes do DNA mitocondrial desempenham um papel significativo
no desenvolvimento de doenas crnicas degenerativas, particularmente em
rgos que requerem elevados nveis de energia como o crebro, o msculo
estriado esqueltico e o msculo estriado cardaco. As manifestaes clnicas
resultam de uma reduo acentuada da produo de energia mitocondrial,
como consequncia de um aumento da percentagem de molculas de DNA
mitocondrial mutadas.
So exemplos de doenas provocadas por mutaes a nvel do DNA
mitocondrial, a encefalomiopatia mitocondrial familiar (doena que cursa com
epilepsia mioclnica, miopatia e, por vezes, com surdez, demncia, ataxia,
hipoventilao e cardiomiopatia) ou a neuropatia ptica hereditria de Leber.
A neuropatia ptica hereditria de Leber devida a alteraes das protenas
envolvidas na cadeia de transporte de electres. O primeiro sintoma a
aparecer a perda da viso central, a que se segue o aparecimento de
escotoma central. Desenvolve-se, habitualmente, entre os 20 e os 30 anos,
embora haja casos que ocorrem desde a infncia e outros em idades mais
avanadas. A perda da viso observa-se para os dois olhos em simultneo.
A proporo de indivduos do sexo masculino afectados em relao aos
indivduos do sexo feminino de 4:1.
Na hereditariedade mitocondrial distinguem-se as seguintes caractersticas
(Fig VII.10):
a doena transmitida sempre por via materna;
na descendncia de uma mulher doente, os homens e as mulheres so
doentes;
155
um homem afectado tem descendncia saudvel;

pode-se observar heterogeneidade nos indivduos afectados (devido a
heteroplasmia);
os rgos so afectados de forma diversa em funo do tecido
preponderante.
Nos casos em que h heteroplasmia numa mulher afectada, no
possvel prever o que acontece na descendncia j que um descendente pode
herdar mitocndrias normais ou mitocndrias com a mutao ou ainda uma
mistura dos dois tipos em propores variveis. A expressividade pode assim
variar entre irmos, devido a mutaes de severidade diversa, em diferentes
genes. Por outro lado, a severidade tem ainda a ver com a percentagem de
mitocndrias com mutaes que ocorrem em cada rgo, com a percentagem
de clulas com mitocndrias mutadas (v.g., uma elevada percentagem de
clulas nervosas com mitocndrias mutadas) e com o reflexo das deficincias
provocadas nesses rgos para o fentipo doente. As condies de
homoplasmia para as mutaes no sero compatveis com o desenvolvimento embrionrio.
A natureza materna da transmisso hereditria do DNA mitocondrial
deve-se ao facto de as mitocndrias de origem paterna serem eliminadas aps
a penetrao do espermatozide no ovcito. Por outro lado, no citoplasma
de um ovcito humano existem cerca de 100.000 mitocndrias, enquanto
que um espermatozide contm cerca de 100 mitocndrias.
156
II
III
IV
Fig. VII.10 Heredograma caracterstico de hereditariedade mitocondrial, com homoplasmia.
5.4. IMPRINTING GENMICO

De acordo com os conceitos clssicos da gentica mendeliana, um gene
comporta-se do mesmo modo, independentemente do sexo do progenitor
atravs do qual foi herdado pelo descendente. No entanto, apesar deste
conceito continuar a ser verdadeiro para muitos caracteres genticos, calculase que haver cerca de 1% dos genes humanos cuja expresso no
independente do sexo do progenitor, estando sujeitos a imprinting
genmico. O imprinting consiste numa modificao epigentica da
expresso gnica, de natureza reversvel, que inibe a expresso de um alelo
em geraes sucessivas, em funo do sexo do progenitor que o transmite.
Cria haploidia funcional localizada a um locus.
A inibio da expresso gnica, a nvel da transcrio, devida ligao
de um radical metilo a bases citosina, na regio reguladora do gene. Os genes
que sofrem imprinting evidenciam, caracteristicamente, regies ricas em
C-G com metilao diferenciada. A metilao ocorre durante a gametognese
(Fig VII.11) e mantm-se estvel durante as divises mitticas, atingindo
apenas algumas regies cromossmicas especficas.
Designa-se por imprinting materno o processo em que a inactivao
de um alelo resulta da sua passagem por um progenitor do sexo feminino e
imprinting paterno se a inactivao ocorre no progenitor masculino.
Um alelo inactivado por imprinting paterno (Fig VII.12), transmitido
pelo pai aos descendentes do sexo masculino e do sexo feminino numa forma
inactivada. Na gerao seguinte, continua inactivado nos descendentes dos
indivduos do sexo masculino e deixa de estar inactivado e passa a ser
transcrito nos descendentes dos indivduos do sexo feminino. Acontece o
oposto no imprinting materno (Fig VII.13).
Embora a transmisso dos alelos sujeitos a imprinting obedea s leis
de Mendel, a sua expresso fenotpica no mendeliana. O fentipo pode
ser afectado em termos de expressividade, idade de incio ou natureza dos
sintomas.
157
I
1
2
M
II
2
M
III
1
3
M
IV
1
4
M
158
10
Fig. VII.11 Esquema ilustrativo da segregao cromossmica e expresso fenotpica dos alelos de
um locus sujeito a imprinting materno. A mutao de natureza autossmica dominante.
A inactivao do alelo mutado, por metilao, est assinalada pelo pequeno quadrado a negro anexo
ao local da mutao (X). M cromossoma de origem materna na gerao II.
II
III
IV
Fig. VII.12 Heredograma caracterstico de hereditariedade sujeita a imprinting paterno.
II
III
IV
Fig. VII.13 Heredograma caracterstico de hereditariedade sujeita a imprinting materno.
159
Pode acontecer que o imprinting de um determinado gene se verifique

apenas em alguns tecidos do organismo, ou que a sua expresso seja mono-allica em alguns tecidos e bi-allica em outros tecidos do mesmo indivduo.
Pode ainda acontecer que o imprinting de determinados genes se verifique
apenas durante algumas fases do desenvolvimento. Como exemplos refiram-se
o gene IGF2 que apresenta imprinting materno em mltiplos tecidos,

embora tenha expresso bi-allica em rgos como o crebro e o fgado
adulto, ou o gene WT1 (associado ao tumor de Wilms quando mutado) com
imprinting paterno presente em clulas da placenta e do crebro, mas com
expresso bi-allica no rim. O gene PEG1/MEST apresenta imprinting
materno no tecido fetal e expresso bi-allica no sangue dos indivduos
adultos.
O primeiro exemplo de imprinting genmico foi descrito para a
inactivao exclusiva do cromossoma X paterno na trofoectoderme
embrionria. A mola hidatiforme completa poder tambm ser devida a imprinting em loci de um complemento cromossmico de origem
exclusivamente paterna.
So exemplos de doenas em que foi identificado imprinting
genmico, as sndromas de Angelman, de Pradder-Willi e de BeckwithWiedeman, a distrofia miotnica, a coreia de Huntington, o retinoblastoma,
o tumor de Wilms, a leucemia mielide crnica e a diabetes juvenil.
O imprinting genmico pode estar subjacente ao aumento da
frequncia de determinados tipos de cancro na criana, como o retinoblastoma, o rabdomiossarcoma, o tumor de Wilms ou o osteossarcoma. Nestes
casos, a inactivao de um dos alelos de um locus antioncognico seria
herdado, j inactivado por imprinting, atravs do espermatozide ou do
ovcito. A inactivao ou perda do alelo funcional restante ocorreria
posteriormente, conduzindo a homozigotia recessiva sob o ponto de vista
funcional.
5.5. DIGENISMO
160
O digenismo diz respeito s condies em que um fentipo

determinado por mutaes em dois alelos localizados em loci que no esto
em ligao. A doena no se exprime quando apenas um dos alelos mutados
est presente. Como exemplo refira-se uma das formas de retinite pigmentar
em que o fentipo se desenvolve se um indivduo tiver herdado uma mutao
no gene RDS localizado em 6p e uma mutao no gene ROM localizado em
11q. Os dois progenitores no tm a doena.
5.6. DISSOMIA UNIPARENTAL

A dissomia uniparental uma forma muito rara de hereditariedade.
Pode ocorrer como heterodissomia ou como isodissomia. Na heterodissomia
uniparental, o complemento cromossmico diplide constitudo por um par
de cromossomas homlogos que provm de um mesmo progenitor. A sua
ocorrncia dever-se- a no-disjuno na primeira diviso da meiose.
Na isodissomia uniparental, o par cromossmico em causa tem igualmente
origem num nico progenitor, mas resulta da duplicao de um dos
cromossomas do par de homlogos. A isodissomia dever-se- a no-disjuno
na segunda diviso da meiose. Alm dos mecanismos expostos baseados em
erros ocorridos na meiose ainda necessrio, para que no ocorra trissomia,
que haja perda do cromossoma oriundo do progenitor que contribuiria apenas
com um cromossoma. Se um dos gmetas for nulissmico por no-disjuno
para um determinado cromossoma, a fecundao por um gmeta haplide
normal dar origem a um zigoto monossmico para o cromossoma envolvido
o qual, por duplicao, poder originar isodissomia uniparental. Se um
gmeta normal for fecundado por um gmeta nulissmico e houver no-disjuno subsequente tambm se originar isodissomia. Um mosaico
constitudo por clulas diplides normais e clulas com isodissomia pode ter
origem se uma clula do embrio perder um cromossoma e houver duplicao
do cromossoma restante.
Cerca de 20% a 30% dos casos de sndroma de Prader-Willi so devidos
a heterodissomia uniparental materna para o cromossoma 15. A heterodissomia uniparental paterna para o cromossoma 15 responsvel por casos
de sndroma de Angelman. H ainda casos de sndroma de Beckwith-Wiedeman em que est em causa isodissomia uniparental paterna para o
cromossoma 11 com origem ps-zigtica. Uma condio de isodissomia uniparental parece tambm estar subjacente a dois casos raros de fibrose qustica
em que apenas um dos progenitores era heterozigtico para a mutao e
houve lugar a um descendente homozigtico doente.
A influncia do sexo do progenitor na regulao da expresso de alguns
genes implica que, para o desenvolvimento normal de um novo ser, possa
no bastar um genoma diplide quando ocorre heterodissomia ou
issodissomia uniparental. Se houver heterodissomia ou isodissomia uniparental
161
para genes que sofrem imprinting podem-se desenvolver doenas por falta
de expresso de um gene que o imprinting tenha tornado inactivo ou
porque h expresso de dois alelos idnticos mutados porque no ocorreu
imprinting.
5.7. MUTAES DINMICAS E ANTECIPAO.

As mutaes dinmicas consistem na expanso do nmero de unidades
repetitivas, tipicamente constitudas por tripletos (v.g., CAG), presentes num
determinado gene ou na sua vizinhana. Em condies normais, um indivduo
portador de um nmero reduzido de tripletos repetidos sequencialmente.
A expanso repetitiva do nmero de tripletos presentes no progenitor ocorre
durante a meiose, durante as fases precoces do desenvolvimento fetal devido
a instabilidade mittica ps-zigtica, ou ainda durante as duas fases.
A transmisso das expanses correspondentes s mutaes dinmicas pode
ocorrer por via paterna ou materna como na distrofia miotnica, apenas por
via materna como na sndroma do X-frgil, ou por via paterna como acontece
quase sempre na forma juvenil da coreia de Huntington.
Tabela VII.18. Exemplos de doenas em que foram identificadas mutaes dinmicas, por
aumento do nmero de tripletos
Frequncia
Gene
Locus
Codo
N de codes
162
Antecipao
Hered
Expanso
FRAXA
HD
DM1
SBMA
SCA1
DRPLA
1/2.000
FMR1
Xq27.3
CGG/ncod
n:6-54
p:55-200
m:>200
Sim
Ligada ao X
mat
1/10.000
IT15
4p16.3
CAG/cod
n:6-26
p:27-35
m:>36
Sim (6%)
AD
pat
1/8.000
DMPK
19q13.2-q13.3
CTG/ncod
n:5-37
p:28-50
m:>50
Sim
AD
mat+pat
1/50.000
SBMA
Xq21
CAG/cod
n:<35
1/20.000
SCA1
6p22-23
CAG/cod
n:6-38
B37
12p
CAG/cod
n:7-23
m:40-52
m:39-83
X-Rec
pat/pred
AD
DMJ
MJD
14q32.1
CAG/cod
n:12-39
m:53-88 m:62-86
Sim
AD
AD
pat+mat(*)
pat
FRAXA: X-frgil; HD: coreia de Huntington; DM1: distrofia miotnica tipo 1; SBMA: atrofia muscular espinhobulbar
(doena de Kennedy); SCA1: atrofia espinhocerebelosa tipo 1; DRPLA: atrofia dentatorrubropalidoluisiana; DMJ:
doena de Machado-Joseph; n: nmero normal de codes; p: nmero de codes correspondente a pr-mutao;
m: nmero de codes associado a doena; Hered: tipo de hereditariedade; ncod: localizao da expanso em
sequncia no codificadora; cod: localizao da expanso em sequncia codificadora; X-Rec: recessiva ligada ao
X; AD: autossmica dominante; pat: a expanso do nmero de codes ocorre no
sexo masculino; mat: a expanso do nmero de codes ocorre no sexo feminino; pred: predominante.
(*) Os pais transmitem maiores expanses e maiores contraces do que as mes.
At um certo nmero de unidades repetitivas, a expanso no afecta a

expresso normal do fentipo, designando-se esta fase como de pr-mutao.
O nmero de unidades repetitivas no se mantm constante durante o
processo de transmisso entre as geraes podendo aumentar ou diminuir.
A partir de uma determinado nmero de tripletos, que varia consoante as
doenas, observa-se um efeito patognico em relao com essa expanso.
A antecipao um fenmeno associado s mutaes dinmicas.
Consiste no aumento de gravidade da expresso de um determinado alelo
numa famlia, em geraes sucessivas. A idade de manifestao da doena
pode tambm ser antecipada ao longo das geraes. Na Tabela VII.18 esto
apresentadas diversas doenas devidas a mutaes dinmicas.
5.7.1. SNDROMA DO X-FRGIL
A sndroma do X-frgil a segunda causa de atraso mental de natureza

gentica, logo a seguir sndroma de Down. No entanto, como causa de atraso
mental, tem maior importncia do que a sndroma de Down devido ao maior
nmero de pessoas em risco e possibilidade de evitar estas situaes
recorrendo a aconselhamento gentico e a DPN. Assim, deve ser rastreada a
presena de X-frgil, em todos os indivduos com atraso mental.
mais frequente no sexo masculino do que no sexo feminino, com uma
frequncia, respectivamente, de 1 para 1.250 e de 1 para 1.650 a 5.000.
Nos homens, a presena da mutao acompanhada de atraso mental,
enquanto que nas mulheres portadoras de um cromossoma X com mutao,
o atraso mental menos grave, havendo 20% a 30% dos casos com
manifestaes discretas e apenas 1% com manifestaes moderadas.
A diferena de intensidade das manifestaes habitualmente observadas entre
homens e mulheres, deve-se ao facto de o homem ser portador de um nico
cromossoma X e de a mulher possuir dois cromossomas X, sendo um deles,
em geral, normal.
A sndroma do X-frgil causada por mutao do gene FMR1, localizado
em Xq27.3. O gene FMR1 constitudo por 17 exes, originando diversos
RNAm por splicing alternativo e, consequentemente, diversas isoformas de
protenas. Na regio 5 do gene, no traduzida, encontra-se uma sequncia
polimrfica por variao do nmero de unidades repetitivas CGG. O nmero
163
normal de tripletos varia entre 6 e 54. Entre a normalidade e a mutao, h um

estdio intermdio designado pr-mutao, durante o qual se encontra uma
expanso do nmero de tripletos CGG para alm do limite normal, mas ainda
inferior ao nmero correspondente a mutao (Tabela VII.18). Na condio
mutada, o gene FMR1 est hipermetilado, pelo que no h transcrio.
O estudo citogentico continua a ser o primeiro mtodo de diagnstico
da sndroma do X-frgil. Em clulas cultivadas em meio de cultura pobre em
cido flico ou timidina, encontra-se um stio frgil no cromossoma X.
Esta alterao detectada apenas em 10% a 40% das clulas, por razes
que no se conhecem. A percentagem varia com a idade e com a inteligncia
do portador.
A existncia de pr-mutao torna a condio muito instvel, sobretudo
na mulher. O nmero de tripletos CGG aumenta, habitualmente, em geraes
sucessivas. O risco de haver uma expanso conducente a mutao, durante
as meioses de uma mulher com pr-mutao, depende do nmero de
unidades repetitivas presentes. Entre 61 e 70 unidades repetitivas, o risco para
a mutao de 16%. Para pr-mutaes maternas com 71 a 80 codes CGG
repetidos, o risco de 70%. Nos casos em que a pr-mutao tem mais de
80 CGG, o risco de mutao praticamente de 100%.
Os doentes com sndroma do X-frgil (Fig VII.14) apresentam, em adultos,
uma face longa e estreita com prognatismo, orelhas grandes, macroorquidia,
164
Fig. VII.14 Indivduo do sexo masculino com

sndroma do X-frgil. patente o tamanho
aumentado dos pavilhes auriculares.
atraso mental moderado a severo com tendncia para um discurso repetitivo,

hiperactividade, dificuldades de aprendizagem e um risco acrescido para
autismo.
Embora ligada ao cromossoma X, a hereditariedade no tem caractersticas mendelianas (Fig VII.15). Na descendncia de um homem portador de
pr-mutao, os homens so normais e as mulheres so todas portadoras de
pr-mutao. A expanso do nmero de tripletos pode ocorrer durante a
meiose das mulheres constitucionalmente portadoras de uma pr-mutao.
A extenso da expanso no constante entre os descendentes atingidos.
Assim, mesmo os indivduos que herdam a mutao, podem apresentar
sintomatologia varivel, consoante o nmero de tripletos. Quanto maior o
nmero de tripletos, mais graves so as manifestaes e mais precocemente
se expressam.
A me normal de um indivduo do sexo masculino afectado portadora
obrigatria de um cromossoma X com pr-mutao, o que pode ser
comprovado por estudo citogentico. Nestas condies, 40% a 50% dos
descendentes do sexo masculino evidenciaro sndroma do X-frgil. Nas
descendentes portadoras do cromossoma com o stio frgil, cerca de 80%
tero atraso mental discreto.
74/12
18
II
III
12/18
80
18
150/7
85/18
130
18/7
12
250/7
18/7
112/18
315
280
30/12
165
IV
125/13
13
12
120/30
Pr-mutao
Mutao
12/18 Exemplo do nmero de unidades repetitivas no par de alelos
Fig. VII.15 Heredograma de um caso de sndroma de X-frgil, com indicao da variao interindividual
do nmero de codes CGG (v.g., 12/18 e 280), associada natureza dinmica da mutao.
A penetrncia da mutao no completa nos homens, havendo cerca

de 20% com a mutao que no expressam as caractersticas da sndroma
do X-frgil. Embora os doentes no tenham capacidade reprodutiva, os
portadores da mutao que no desenvolvem a sndroma podem-se
reproduzir. Transmitem assim a mutao a todas as filhas, sendo todos os
filhos normais.
166
CAPTULO VIII
GENTICA DE POPULAES
1. INTRODUO
A gentica de populaes estuda a frequncia com que ocorrem os
genes normais ou anormais numa populao, estabelecendo as diferenas
quantitativas da sua frequncia. Trata-se de uma rea da Gentica dedicada
ao estudo da variabilidade gentica hereditria e das formas como
influenciada ao longo das geraes e em funo dos factores ambientais.
Entre as aplicaes da gentica de populaes contam-se o clculo da
frequncia de portadores de alelos recessivos, a deteco de desequilbrios
de ligao gnica ou a anlise de questes relacionadas com a evoluo
humana. A evoluo pode, por esta via, ser entendida como consequncia
da alterao da frequncia de determinados gentipos e do aparecimento e
expanso de novos gentipos decorrentes de mutaes que conferem
vantagem biolgica aos seus portadores. A variabilidade das frequncias
allicas para diferentes grupos tnicos est associada a significativas diferenas
da incidncia de determinadas patologias humanas em funo da sub-populao em causa (Tabela VIII.1).
Os estudos de gentica de populaes so mais simples quando se
referem a um trao ou caracter cuja transmisso se rege pelas leis de Mendel.
Contudo, muitos dos caracteres mais importantes ou mais interessantes
dependem de vrios genes que frequentemente interagem com outros genes
e com o meio ambiente.
167
Tabela VIII.1. Exemplos de sub-populaes com aumento da frequncia para patologias

de natureza gentica hereditria
POPULAO
Bacia do Mediterrneo
(gregos, italianos)
Brancos sul-africanos
Chineses
Escandinavos
Europeus (Norte da Europa)
Japoneses
Negros (frica)
PATOLOGIA
Deficincia em G6PD
Talassmia
Febre mediterrnea familiar
Homozigotia para a hipercolesterolmia familiar
Deficincia em G6PD
Deficincia em lactase do adulto
Talassmia
Deficincia em 1-antitripsina
Fibrose qustica
Acatalasmia
Drepanocitose
Deficincia em G6PD
Em gentica de populaes usa-se a designao tronco para indicar a

pessoa de quem descendem os indivduos consanguneos. Uma linha consiste
na sequncia de passos que liga um indivduo ao seu consanguneo, passando
pelo ancestral comum. A linha que une dois descendentes e um ancestral
comum no intervalo de uma gerao tem dois passos: um passo do
descendente ao ancestral e outro do ancestral ao outro descendente. O termo
grau uma medida de distncia entre duas pessoas consanguneas. Para o
Direito Cannico, um grau corresponde a uma gerao e para o Direito Civil
portugus um grau corresponde a um passo. Assim, a consanguinidade entre dois irmos de primeiro grau para o Direito Cannico e de segundo grau
para o Direito Civil, e entre primos direitos , respectivamente, de segundo
grau e de quarto grau. Fala-se de consanguinidade completa a que dada
por um tronco comum representado por um casal e de consanguinidade
168
incompleta quando o antepassado considerado tronco se casou duas ou mais

vezes sendo, por isso, o nico ancestral comum para duas ou mais pessoas.
Numa famlia, designam-se por familiares prximos, os membros com
familiares em comum at ao grau de bisavs. Designam-se como casamentos
consanguneos os que ocorrem entre familiares prximos.
2. FREQUNCIA ALLICA E GENOTPICA

Se for possvel examinar o contedo allico de uma populao inteira,
relativamente a um determinado caracter, poder-se- determinar quantos
elementos da populao tm duas cpias do mesmo alelo num locus de um
determinado par de cromossomas, quantos tm s uma cpia e quantos no
tm nenhuma cpia. Para dois ou mais alelos responsveis por um caracter
a razo encontrada entre o nmero total de cpias de um determinado alelo
e o nmero total de alelos determinado na populaco considerada, indica a
frequncia relativa ou proporo com que o alelo estudado ocorre nessa
populao. Habitualmente, os estudos da frequncia de um alelo numa
populao so feitos em amostras representativas dessa populao. A soma
das frequncia de todos os alelos que concorrem para um locus igual a
um (v.g., pA + qa = 1, no caso de dois alelos).
Quando o nmero de loci for maior que um, o nmero de gentipos
ser xn, sendo x o nmero possvel de gentipos para cada locus, conforme
o nmero de alelos, e n o nmero de loci implicados.
Um dos modos de detectar a variedade de alelos baseia-se em estudos
electroforticos do fentipo (a protena, v.g., enzima esterase-2). Esta enzima
codificada por vrios alelos que coexistem numa determinada populao.
Em cada indivduo s ocorrem dois alelos (ou s um alelo em duplicado, na
forma homozigtica). Embora o produto de qualquer dos alelos seja a enzima
esterase-2, a sequncia de aminocidos resultante de cada um dos alelos no
exactamente igual, ainda que essa diferena no afecte a funo. Assim,
possvel diferenciar o produto de cada alelo analisando a sua migrao em
estudos electroforticos e, desse modo, agrupar os indivduos em funo do
par de alelos de que so portadores, entre os diversos pares de alelos que
podem resultar das combinaes de alelos possveis. Seguidamente, pode ser
determinada a frequncia de cada alelo na populao estudada.
Nem sempre possvel determinar a frequncia de uma alelo a partir da
sua expresso fenotpica, seja pela deteco directa da protena, seja pela
determinao da sua actividade enzimtica. As frequncias determinadas a
partir da actividade enzimtica podem ser influenciadas por factores
metablicos ou externos. Por isso, cada vez mais se recorre genotipagem
por estudos moleculares do DNA, frequentemente atravs de mtodos que
aliam a PCR e a determinao de RFLPs.
169
3. EQUILBRIO DE HARDY-WEINBERG
A frequncia de dois alelos presentes numa populao tende a manter-se constante ao longo das geraes. Assim, se dois alelos A e a se
encontrarem numa grande populao, respectivamente com a frequncia p
e q, qualquer que esta seja (e sendo A e a os nicos alelos para o locus em
causa, p + q = 1), aps uma gerao com acasalamento ao acaso, os trs
gentipos AA, Aa e aa encontram-se em equilbrio nas propores relativas
p2 (para o gentipo AA), 2pq (para o gentipo Aa) e q2 (para o gentipo aa)
(Tabela VIII.2). O equilbrio anterior designado como equilbrio de Hardy-Weinberg. A soma das frequncias genotpicas correspondentes aos trs nicos
gentipos que concorrem para o locus em causa igual a 1 (p2 + 2pq + q2 = 1).
Tabela VIII.2. Frequncias genotpicas para um locus para que concorrem os alelos A e a
Gmetas maternos
A (p)
a (q)
Gmetas paternos
170
A (p)
a (q)
AA (p2)
Aa (pq)
Aa (pq)
aa (q2)
Este equilbrio mantm-se de gerao em gerao (equilbrio gentico),

desde que os cruzamentos sejam ao acaso (panmixia), as frequncias allicas
sejam iguais no sexo masculino e no sexo feminino e no haja uma alterao
da frequncia dos genes na populao por migrao, mutao ou seleco.
Nestas condies, desde que se trate dos alelos de um s locus autossmico
(sejam dois ou mais alelos), o equilbrio verifica-se ao fim de uma gerao.
Para um locus ligado ao cromossoma X, o equilbrio s atingido ao fim de
vrias geraes. Para dois loci, o nmero de geraes necessrias para ser atingido
o equilbrio pode ser muito maior, o que depende da fraco de recombinao.
A frequncia de heterozigotos maior para 3 alelos do que para 2 alelos,
quando referidos a um s locus. Numa populao, os heterozigotos so muito
mais frequentes do que os homozigotos, para a forma recessiva do gene.
Quanto maior for o nmero de alelos e mais prximas as suas frequncias,
tanto maior ser o nmero de heterozigotos e consequentemente a
variabilidade gnica.
Nos indivduos do sexo feminino, com dois cromosomas X, a frequncia

dos alelos ligados ao cromossoma X segue os mesmos princpios que foram
enunciados para os autossomas, considerando o acasalamento ao acaso.
Nos individuos do sexo masculino, s com um cromossoma X, a frequncia
genotpica dos alelos ligados ao cromossoma X igual frequncia do alelo
no sexo masculino.
3.1. FACTORES QUE AFECTAM O EQUILBRIO DE HARDY-WEINBERG

A) Migrao O fenmeno da migrao diz respeito ao movimento de
grupos de individuos, mais ou menos numerosos, que chegam a uma regio
e se misturam com a populao autctone. A entrada de uma determinada
percentagem de genes numa populao altera a frequncia gnica verificada
antes da migrao.
Desde que os indivduos que saiem ou entram numa populao no
sejam sujeitos a seleco prvia e o seu nmero no seja significativo
relativamente ao nmero de elementos dessa populao, mantm-se o
equilbrio de Hardy-Weinberg na populao de origem.
B) Mutao Diz respeito ao aparecimento de um gene novo numa
populao e constitui a fonte de variao gentica nessa populao. A taxa
de mutao por gerao na espcie humana varia consoante os genes, entre 1/10.000 na neurofibromatose at menos de 1/1.000.000 na coreia de
Huntington, tomando exemplos de valores relativos populao da Europa
Ocidental.
C) Seleco Refere-se seleco de um alelo ou alelos, em detrimento
de outro alelo cuja ocorrncia num indivduo reduza a sua capacidade para
procriar. Em termos matemticos traduz-se na probabilidade que um gene
mutado tem de passar gerao seguinte, em comparao com a
probabilidade do gene normal. Os mecanismos de seleco so mltiplos,
podendo ser naturais ou artificiais e incluindo mesmo factores sociais e o
equilbrio psicolgico. Exercem-se em qualquer das etapas do desenvolvimento do indivduo desde a concepo at vida adulta. Pode contudo
acontecer que um gene mutado no diminua a capacidade do indivduo para
resistir s presses do meio que o rodeia. Um exemplo bem conhecido o
da drepanocitose, provocada pela ocorrncia de hemoglobina S (HbS).
171
Na forma homozigtica para o gene recessivo, a sobrevivncia difcil, devido

acentuada anemia verificada. Contudo, na forma heterozigtica, o grau de
anemia moderada no acarreta problemas significativos. Por outro lado, a
ocorrncia de HbS na forma heterozigtica dificulta o desenvolvimento do
paludismo nos indivduos que a possuem, uma vez que os glbulos vermelhos
infectados pelo agente do paludismo plasmodium falciparum so
eliminados mais facilmente da circulao por fagocitose, o que no se passa
com os indivduos com Hb normal. Nas regies em que o paludismo
endmico, os indivduos heterozigticos para a HbS tm vantagem, em
termos de sobrevivncia, quando comparados com os indivduos com
hemoglobina normal. Nestas condies o equilbrio de Hardy-Weinberg no
se verifica. Perante a seleco do gentipo heterozigtico, a sua frequncia
de facto mais elevada nas regies com paludismo, quando comparada com
regies sem paludismo, no se verificando nas regies paldicas um equilbrio
de Hardy-Weinberg para este gene, idntico ao existente na populao geral.
D) Equilbrio entre seleco e mutao Um gene mutado que confira
vantagem ao seu portador no processo de seleco natural, acabar por se
instalar na populao. Contudo, a situao mais frequente consiste na
ocorrncia de genes recessivos e desfavorveis em consequncia de mutao.
Numa populao h sempre genes deletrios que ocorrem por mutao e que
no foram ainda eliminados. A frequncia de um determinado alelo o
resultado do equilbrio estabelecido entre a eliminao dos alelos mutados
desfavorveis, pelos mecanismos de seleco natural, e a sua ocorrncia de
novo provocada pela taxa de mutao. A velocidade de eliminao de um
alelo mutado depende da sua natureza. Se a mutao originar um gene
dominante deletrio que cause a morte ao seu portador antes da idade
reprodutiva, ser eliminado na mesma gerao em que ocorre. Se o alelo
resultante no interferir significativamente na capacidade biolgica, o
172
equilbrio entre mutao e seleco atingido pela ocorrncia de

homozigotos, o que pode demorar dezenas de geraes a ocorrer, em
condies de acasalamento ao acaso. Este equilbrio entre seleco e mutao
pode, contudo, ser afectado quando um gene recessivo, desfavorvel em
condies normais, confira vantagem ao seu portador na forma
heterozigtica, perante condies de seleco especficas, como o caso
anteriormente descrito para o par HbS/paludismo.
Por interveno mdica, h trs formas de alterar a frequncia dos alelos

de uma populao:
Por identificao dos portadores de alelos associados a doenas
recessivas e subsequente aconselhamento, para que no haja lugar a
acasalamento entre si, evitando deste modo o aparecimento da doena
provocada por homozigotia para a forma mutada do gene;
Por realizao de DPN e interrupo voluntria de gravidez, nos casos
em que seja identificada uma condio homozigtica, ou hemizigtica
para as doenas ligadas ao cromossoma X, de modo a modificar a
prevalncia da doena e a frequncia dos alelos mutados;
Por tratamento mdico de situaes que seriam fatais ou incapacitantes, permitindo, deste modo, a passagem dos seus mtodos
descendncia.
E) Deriva gentica Diz respeito fixao de alelos que ocorrem numa
populao pequena, de tal modo que muitos alelos teoricamente possveis,
considerando uma grande populao, nunca ocorrem nessa populao a
partir de determinado momento, facto que tanto mais importante quanto
mais reduzida for a populao. Ao fim de algumas geraes a constituio
gnica dessa populao pode divergir consideravelmente da populao geral,
por ausncia de alelos que deixaram de ocorrer nessa populao. Se numa
populao h 3 alelos, A, B e C, para um caracter, e C raro, pode acontecer
que em determinado momento e por simples acaso, o alelo C no seja
transmitido a nenhum descendente do grupo, por ser muito raro. Nas geraes
seguintes o gene no ocorre.
A deriva gentica tem-se verificado para vrios caracteres, sendo os
grupos sanguneos ABO um exemplo em que os estudos abundam.
Uma situao que favorece a ocorrncia de deriva gentica verifica-se nos
isolados populacionais, constitudos por pequenas populaes isoladas, em
que os membros da comunidade no se acasalam fora do grupo por razes
geogrficas, polticas, culturais ou religiosas. Nestas condies, alm da deriva
gentica tambm ocorrem coeficientes mais elevados de consanguinidade.
F) Acasalamento por escolha Ocorre quando os acasalamentos so feitos
dentro de grupos organizados pelo fentipo (cor da pele, altura, inteligncia,
etc.). Os fentipos semelhantes tendem a ter gentipo semelhante. Este tipo
de acasalamento aumenta a proporo de homozigotos na populao.
173
G) Endogomia Assentando o equilbrio de Hardy-Weinberg na panmixia

ou acasalamento ao acaso, a endogamia uma das formas de contrariar tal
equilbrio. Na endogamia, caracterizada por acasalamentos entre
consanguneos, a frequncia de homozigotos maior do que a esperada.
Tal facto particularmente relevante quando se repercute na homozigotia
para genes recessivos que reduzem a aptido biolgica dos indivduos em que
tal se verifique.
4. CONSANGUINIDADE E ENDOCRUZAMENTO
174
Entre indivduos consanguneos definem-se o coeficiente de

consanguinidade e o coeficiente de endocruzamento. O coeficiente de
consanguinidade, tambm chamado coeficiente de parentesco ou de
coancestralidade, define a probabilidade que h de duas pessoas terem em
comum, num determinado locus, um gene idntico, herdado de um ancestral comum. De um modo mais geral, o coeficiente de consanguinidade
refere-se percentagem de genes que, entre consanguneos, so idnticos
por ascendncia comum: 50% de genes em comum entre irmos e entre pais
e filhos, 25% entre tio/sobrinho, 12,5% entre primos.
O risco gentico decorrente de consanguinidade de considerar para
descendentes de casais consanguneos, mas no para descendentes de casais
em que um dos progenitores descendente de um casal consanguneo e o
outro porgenitor um indivduo no aparentado. O casamento de dois irmos
com duas irms no um caso de consanguinidade, embora o casamento
entre filhos destes casais represente um risco gentico acrescido para os seus
descendentes, comparativamente com o risco registado entre primos.
Para calcular o coeficiente de consanguinidade contam-se as linhas que
ligam os dois indivduos atravs de cada ancestral comum e os passos de cada
linha. O nmero de linhas representa-se por k e o nmero de passos por n.
Estes valores entram depois na frmula de clculo do coeficiente de
consanguinidade (r, de relationship), que se obtm pelo somatrio das
fraces correspondentes a cada uma das linhas que ligam os dois indivduos.
O valor de r indica a proporo de genes que em dois indivduos so idnticos
por terem sido herdados de um ascendente comum.
r=
k
[(1/2)n]
i=1
Na contagem de passos para genes que so transmitidos no cromossoma
X, o passo entre pai e filha no contado; a probabilidade de passagem deste
gene s filhas igual a 1, uma vez que s tm um cromossoma X, e esse
cromossoma tem de ser transmitido ao descendente para que este seja do
sexo feminino. Para genes ligados ao cromossoma Y no h que contar
passos. Dois indivduos do sexo masculino ligados entre si por uma linha de
indivduos do sexo masculino, que no tenha sido quebrada em nenhum dos
passos por um indivduo afastado, do mesmo sexo, tm o mesmo
cromossoma Y e o coeficiente 1. Se tiver entrado um outro elemento do
sexo masculino ou 1 ou 0.
Diz-se que h endocruzamento quando os acasalamentos so feitos entre
indivduos mais relacionados pelo gentipo do que se fossem escolhidos ao
acaso entre a populao. Nestas condies, define-se o coeficiente de
endocruzamento, F, como a proporo de loci para os quais um indivduo
homozigtico por descendncia ou, de outra forma, a probabilidade que
existe de os dois alelos de um locus serem idnticos num descendente de
um acasalamento consanguneo. Este valor 1/2 do coeficiente de
consanguinidade dos pais do indivduo considerado.
F = 1/2
k
[(1/2)n], ou seja, F = 1/2 r
i=1
Para genes ligados ao cromossoma X, o coeficiente de endocruzamento

zero entre os descendentes de irmos do sexo masculino, uma vez que no
herdaram os genes presentes no cromossoma X do seu ancestral.
Quando o coeficiente de endocruzamento zero, como acontece com
o acasalamento ao acaso, a frequncia genotpica observada para
determinado locus igual esperada pelo equilbrio de Hardy-Weinberg.
O aumento do coeficiente de endocruzamento traduz-se na reduo da
frequncia de heterozigotos numa populao. No limite, se o endocruzamento for completo (F = 1), a frequncia de heterozigotos zero, sendo a
populao constituda apenas por homozigotos. Assim, nos filhos de casais
175
consanguneos, as frequncias genotpicas que se determinem pelo princpio

de Hardy-Weinberg para um locus so afectadas pelo factor de
endocruzamento F multiplicado pelas frequncias de p e q (Fpq). Nestas
condies, frequncia dos gentipos homozigticos p2 e q2 adicionada
a parcela Fpq (p2+Fpq; q2+Fpq) e frequncia de heterozigticos 2pq
subtrado o valor de 2Fpq (2pq-2Fpq). O efeito da consanguinidade
particularmente evidente na frequncia genotpica dos heterozigticos.
O coeficiente de endocruzamento til para prever a probabilidade que
h de um filho de consanguneos ser homozigoto para um gene recessivo,
quando se sabe que um antepassado comum dos pais portador desse gene.
Tambm til para calcular a probabilidade relativa de ocorrncia de doenas
em acasalamentos de parentes muito prximos.
Nos casos de casais consanguneos, a probabilidade de um filho herdar
as duas cpias de um gene com a mutao maior do que na populao
geral, uma vez que descendem de um antepassado comum e podem ter
herdado desse antepassado o mesmo gene com a mutao. As consequncias
podem ser dramticas (a todos os ttulos) nos casos de incesto, em que o
risco de alteraes graves que incluem o atraso mental e a epilepsia cerca
de 40 vezes maior do que na populao geral.
O casamento consanguneo entre primos direitos acrescenta um risco
para anomalias congnitas na descendncia de cerca de 2%, aos cerca de
3% observados na populao geral. Habitualmente, esto em causa
condies recessivas, como algumas formas de atraso mental, de surdez e
de cegueira, a fibrose qustica, doenas metablicas, drepanocitose ou
talassmia major.
5. EXEMPLOS PRTICOS
176
5.1. DETERMINAO DA FREQUNCIA ALLICA

Tomando como exemplo uma populao constituda por 400 indivduos,
em que 105 tm homozigotia para o alelo A, 200 tm homozigotia para o
alelo a e 95 so heterozigotos Aa, qual a frequncia relativa dos dois alelos
nesta amostra de populao?
Alelo A: 2 l05 + 1 95 = 305

Alelo a: 2 200 + 1 95 = 495.
Designando por p a frequncia dos alelos e sendo, neste caso, a soma
do nmero de alelos A e a igual a 800, as respectivas frequncias sero:
pA = 305/800 = 0,38
qa = 495/800 = 0,62
A soma das frequncia de todos os alelos que concorrem para um locus igual a um, pelo que:
pA + qa = 0,38 + 0,62 = 1
5.2. DETERMINAO DA FREQUNCIA GENOTPICA

Consideremos os alelos autossmicos A e a para um locus. Se os alelos
A e a se encontram na populao com a frequncia pA e qa, os espermatozides e os vulos contm-nos nessa mesma frequncia. Num acasalamento
ao acaso constituir-se-o os gentipos AA, Aa e aa (Tabela VIII.2).
Ao gentipo AA corresponde a frequncia p 2 , ao gentipo Aa a
frequncia 2pq e ao gentipo aa a frequncia q2.
No caso de uma populao de 1.000 indivduos, em que a frequncia
do alelo A de 0,9 e a do alelo a de 0,1, a frequncia de 0,81 para o
gentipo homozigtico AA, de 0,01 para o gentipo homozigtico aa e de
0,18 para o gentipo heterozigtico Aa (Tabela VIII.3).
O clculo do nmero de indivduos com cada tipo de gentipo obtmse multiplicando o nmero total de indivduos estudados pela frequncia
determinada para cada gentipo. Assim, o gentipo AA encontra-se em 810
elementos (1.000 0,81), o gentipo aa em 10 (1.000 0,01) e o gentipo
heterozigtico Aa em 180 (1.000 0,18).
Tabela VIII.3. Frequncia dos gentipos
A (0,9)
a (0,1)
A (0,9)
a (0,1)
AA (0,81)
Aa (0,09)
Aa (0,09)
aa (0,01)
177
Para trs alelos A, B e C, com as frequncias pA, pB e pC, a frequncia

dos gentipos ser p2A + p2B + p2C + 2pApB + 2pApC + 2pBpC.
5.3. DETERMINAO
DA FREQUNCIA ALLICA, POR CONHECIMENTO DA FREQUNCIA
GENOTPICA
Quando se conhece a frequncia genotpica, pode-se deduzir a

frequncia allica. Assim, se numa populao, num determinado locus
ocorrerem as formas allicas A e a, e as frequncias genotpicas de AA, Aa
e aa forem, respectivamente, 0,84, 0,15 e 0,01, a frequncia do alelo A ser
igual soma da frequncia do gentipo homozigtico AA mais metade da
frequncia do gentipo Aa, ou seja p(A) = 0,915. De igual modo, a frequncia
do alelo a ser igual soma da frequncia do gentipo aa mais metade da
frequncia do gentipo Aa , ou seja q(a) = 0,085. A soma de p(A) + q(a)
igual a 1.
Para o caso de haver mltiplos alelos, a frequncia de cada alelo ser
igual soma da frequncia do seu gentipo homozigtico mais metade da
frequncia de cada um dos gentipos heterozigticos em que o alelo em
causa se encontre.
5.4. APLICAO
DO EQUILBRIO DE
HARDY-WEINBERG
A CONDIES AUTOSSMICAS
RECESSIVAS
Uma das aplicaes mais importantes do equilbrio de Hardy-Weinberg

consiste na determinao da frequncia de portadores de uma mutao
autossmica recessiva, a partir da frequncia de doentes na populao geral
178
(v.g., fibrose qustica).

A fibrose qustica tem uma frequncia de doentes em nados-vivos de
1/2.500). provocada pela homozigotia para um alelo recessivo, que
designaremos por a. Ao dizer-se que a frequncia de recm-nascidos doentes
de 1/2.500, significa que se encontra um indivduo com o gentipo
homozigtico aa em cada 2.500 indivduos da populao geral. Pelo equilbrio
de Hardy-Weinberg, possvel determinar a frequncia do alelo recessivo.
q2a = 1/2.500, ou seja, qa = 1/50

tambm possvel determinar a frequncia do alelo dominante. A soma
das frequncias do alelo dominante, que designaremos por A, com a do alelo
recessivo igual a um. Assim,
pA + qa = 1
pA = 1 - qa, ou seja, 1-1/50 = 49/50.
Numa populao em que os acasalamentos sejam feitos ao acaso e no
haja factores que perturbem o equilbrio de Hardy-Weinberg, ainda possvel
calcular a frequncia de indivduos heterozigticos para o gene mutado da
fibrose qustica, a partir dos valores previamente encontrados.
2pAqa, ou seja, 2 49/50 1/50
1:25
5.5. APLICAO DO EQUILBRIO DE HARDY-WEINBERG A GENES LIGADOS AO CROMOSSOMA X

Considere-se, como exemplo, a hemofilia A determinada por um alelo
recessivo ligado ao X, com uma frequncia de 1/10.000 nos indivduos do
sexo masculino (doentes na forma hemizigtica). A frequncia do alelo na
populao masculina corresponde frequncia do alelo na populao geral.
A frequncia do alelo normal (p) e do alelo mutado (q) idntica no sexo
masculino e no sexo feminino. Na populao geral, cerca de 2/3 dos alelos
com mutaes recessivas ligadas ao X encontram-se nas mulheres e 1/3 nos
homens, uma vez que as mulheres tm dois cromossomas X e os homens
apenas um.
Nos indivduos do sexo feminino, os heterozigotos sero portadores e
os homozigotos sero doentes. Se a frequncia do caracter nos indivduos
do sexo masculino for qa, a frequncia do caracter na populao feminina
ser qa qa. Nestas condies, e para a hemofilia antes referida, nos
indivduos do sexo feminino com um caritipo 46,XX haver um doente em
cada cem milhes, ou seja,
qa qa = 1/10.000 1/10.000 = 1/100.000.000
179
Quando est presente uma mutao dominante localizada num alelo

ligado ao cromossoma X e sendo, por exemplo, de 1/10.000 a frequncia
de mulheres afectadas, possvel determinar a frequncia do alelo mutado,
de homens afectados e de mulheres heterozigticas e homozigticas.
Designem-se por D o alelo mutado e por d a forma normal do alelo.
O nmero de homens afectados ser igual a metade do nmero
encontrado para as mulheres, dado que tm apenas um cromossoma X, em
vez dos dois cromossomas X presentes nas mulheres, ou seja 1/20.000.
Por sua vez, a frequncia do alelo mutado (qD) na populao, ser igual
frequncia de homens doentes.
A frequncia de mulheres afectadas igual soma do nmero de
mulheres heterozigticas para o alelo mutado (gentipo Dd, cuja frequncia
2pdqD), com o nmero de mulheres homozigticas para a forma mutada
do gene (gentipo DD, cuja frequncia q2D). No entanto, o valor de q2D
desprezvel (1/20.000) 2 . Assim, a frequncia de mulheres doentes
aproximadamente igual ao nmero de mulheres heterozigticas.
5.6. EFEITOS DA CONSANGUINIDADE NAS FREQUNCIAS GENOTPICAS

A frequncia de uma doena autossmica recessiva de 1/10.000
indivduos da populao geral. Qual a frequncia da doena nos descendentes
de um casal de primos em primeiro grau?
Calcule-se a frequncia do alelo normal p e do alelo recessivo q.
q2 = 10.000, ou seja, q = 1/100
p + q = 1, pelo que p = 1 - 1/100 = 99/100
180
A frequncia do gentipo homozigtico q2 adicionada da parcela Fpq.

O valor de F (coeficiente de endocruzamento) para os descendentes de primos
direitos de 1/16. Assim, a frequncia de homozigticos recessivos devido
influncia do endocruzamento ser sete vezes superior.
q2+ Fpq = 1/10.000 + 1/16 99/100 1/100
ou seja,
1/10.000 + 6/10.000 = 7/10.000
Comparativamente com o grande aumento da frequncia de homozigotos recessivos, o aumento dos homozigotos normais insignificante (cerca
de 0,06%).
p2+ Fpq = (99/100)2 + 1/16 99/100 1/100
ou seja,
9801/10.000 + 6/10.000 = 9807/10.000
A reduo de heterozigotos , ainda assim, aparente, com um valor de
cerca de 6%.
2pq - 2Fpq = 2 x 99/100 1/100 - 2 1/16 99/100 1/100
ou seja,
198/10.000 - 12/10.000 = 186/10.000
5.7. CLCULOS DE CONSANGUINIDADE E ENDOCRUZAMENTO

Subjacente ao clculo dos coeficientes de consanguinidade e de
endocruzamento, dever-se- ter presente que a probabilidade de um alelo
presente num determinado locus de um dos progenitores, ser transmitido a
um filho de 1/2, pela aritmtica da meiose, e de ser transmitido a um neto
de 1/2 1/2 = 1/4. O mesmo raciocnio se aplica para as geraes seguintes.
Na Tabela VIII.4 esto indicados os coeficientes de consaguinidade e de
endocruzamento para diversos nveis de parentesco, bem como o risco para
doenas autossmicas recessivas na descendncia dos casais consanguneos
com o parentesco considerado.
Tabela VIII.4. Coeficientes de consanguinidade e endocruzamento

em funo do parentesco
PARENTESCO
RISCO AR
Irmos
Meios-irmos
Tio-sobrinha, ou tia-sobrinho
Primos em 1 grau
Segundos primos
1/2
1/4
1/4
1/8
1/32
1/4
1/8
1/8
1/16
1/64
1/8
1/16
1/16
1/32
1/128
r coeficiente de consanguinidade;
F coeficiente de endocruzamento;
RISCO AR risco para doenas autossmicas recessivas na descendncia.
181
Para calcular a consanguinidade entre pai e filha (Fig. VIII.1), conta-se

uma linha (k = 1) e um passo (n = 1). O coeficiente de consanguinidade
de 1/2 (h 50% de identidade gnica).
Fig. VIII.1 Consanguinidade entre um pai e uma filha. Entre o pai e a filha conta-se um passo (n=1).
O coeficiente de consanguinidade 1/2 (h 50% de identidade gnica).
Para a consanguinidade entre irmos (Fig. VIII.2), o nmero de passos

de dois (n = 2) para cada uma das linhas (k = 2) que os ligam, uma atravs
do pai e outra atravs da me;. Assim, r ser igual a (1/2)2 + (1/2)2, ou seja,
1/2. Por sua vez, F ser igual a 1/2 r, ou seja, 1/4.
182
Fig. VIII. 2 Consanguinidade entre irmos. O nmero de passos entre irmos de dois para cada
uma das duas linhas que os ligam, uma atravs do pai e outra atravs da me (k = 2; n = 2;
r = (1/2)2+(1/2)2 = 1/2. F = 1/2 r = 1/4).
Quando o clculo de consanguinidade diz respeito ao parentesco entre

um tio e uma sobrinha (Fig. VIII.3), existem trs passos (n = 3) para cada uma
das duas linhas (k = 2) que os ligam atravs dos antepassados comuns.
Neste caso, r ser igual a (1/2)3 + (1/2)3, ou seja 1/4 e F ser igual a 1/2 r,
ou seja 1/8.
Fig. VIII. 3 Consanguinidade entre um tio e uma sobrinha. Existem trs passos para cada uma das
duas linhas que os ligam atravs dos antepassados comuns (k = 2; n = 3; r = (1/2)3+(1/2)3 = 1/4.
F = 1/2 r = 1/8).
Nos casos de consanguinidade entre primos com dois avs em comum

(Fig. VIII.4), h duas linhas que ligam os primos (k = 2), cada uma com quatro
passos (n = 4). Assim, r ser igual a 1/8, como resultado da soma de (1/2)4
com (1/2)4. Por sua vez, sendo F igual a 1/2 r, ter um valor de 1/16.
Fig. VIII. 4 Consanguinidade entre primos com dois avs em comum. H duas linhas que ligam estes
primos (k = 2; n = 4; r = (1/2)4+(1/2)4 = 1/8. F = 1/2 r = 1/16).
Se a consanguinidade disser respeito a primos com um nico av em

comum (Fig. VIII.5), h apenas uma linha a ligar os dois primos (k = 1), sendo
de quatro o nmero de passos (n = 4). Assim, r ser igual a (1/2)4, ou seja,
1/16. Para F, o valor ser de 1/32.
183
Fig. VIII. 5 Consanguinidade entre primos, apenas com o av em comum. H apenas uma linha a
ligar os dois primos (k = 1; n = 4; r = (1/2)4 = 1/16. F = 1/2 r = 1/32).
Na famlia representada na Figura VIII.6, encontram-se dois casais

consanguneos. Para calcular o coeficiente de consanguinidade entre os
membros da famlia indicados por IV-3 e IV-4, identificam-se os troncos
comuns a ambos e as linhas e os passos correspondentes. Encontram-se
quatro linhas (k = 4), duas com seis passos (n = 6) e as outras duas com
quatro passos (n = 4), pelo que r ser igual a (1/2)6 + (1/2)6 + (1/2)4 + (1/2)4,
ou seja 5/32).
I
1
II
1
III
1
184
IV
1
V
1
Fig. VIII. 6 Heredograma em que se encontram dois casais consanguneos. Para calcular o coeficiente
de consanguinidade presente entre IV-3 e IV-4 identificam-se os troncos comuns a ambos e as linhas
e os passos correspondentes (r = (1/2)6+(1/2)6+(1/2)4+(1/2)4, ou seja 5/32).
Se se tratar da consanguinidade entre os filhos dos casamentos entre os

membros de dois pares de irmos (Fig. VIII.7), r ter um valor de 1/4, comparativamente com o valor de 1/8, para primos direitos.
Fig. VIII. 7 Consanguinidade observada para os filhos dos casamentos entre os membros de dois
pares de irmos. No caso presente, o coeficiente de consaguinidade de 1/4, comparativamente
com o coeficiente de consanguinidade para primos direitos que de 1/8.
Para os filhos dos casamentos entre os membros de um par de irms gmeas

verdadeiras e de um par de irmos (Fig. VIII.8), o valor de r ser de 3/8,
comparativamente com o valor de 1/8, para primos direitos.
Na verdade, uma vez que h identidade gentica entre irmos gmeos
monozigticos, para efeito deste tipo de clculos, comportam-se como uma
nica entidade gentica.
185
Fig. VIII. 8 Consanguinidade observada para os filhos dos casamentos entre os membros de um par
de irms gmeas verdadeiras e de um par de irmos. No caso presente, o coeficiente de consanguinidade de 3/8, comparativamente com o coeficiente de consanguinidade para primos direitos que de 1/8.
CAPTULO IX
CLCULOS DE RISCO
1. INTRODUO
O risco gentico diz respeito probabilidade de o descendente ou
descendentes de um casal serem afectados por uma anomalia de natureza
hereditria, devido presena de um determinado gene ou conjunto de genes.
A sua percepo tem uma componente objectiva e uma componente subjectiva.
A determinao do risco assenta numa histria familiar detalhada, com
elaborao de um heredograma o mais completo possvel, na determinao
do tipo de hereditariedade subjacente e num diagnstico preciso. Se a
hereditariedade for mendeliana, a indicao do risco de recorrncia num
membro de uma famlia no oferece habitualmente problemas, ressalvadas
as condies j previamente indicadas que dificultam a identificao do tipo
de hereditariedade. Contudo, nas condies multifactoriais os recursos da
gentica para apoiar o clculo de risco continuam a ser pouco satisfatrios,
dada a necessidade de recorrer a riscos empricos. Relativamente s causas
cromossmicas, a sua associao a condies hereditrias relativamente rara.
A determinao e a comunicao do risco gentico deve ter em conta
as consequncias para a pessoa em risco e para a famlia em termos do mal
(ou prejuzo) que esse conhecimento pode acarretar, bem como da carga
emocional para o indivduo em causa e para a famlia.
O risco gentico poder aumentar de uma forma progressiva, embora
lenta, com a melhoria dos cuidados mdicos, na medida em que estes
permitam que indivduos com anomalias hereditrias possam atingir a idade
187
reprodutiva e originar descendentes, o que dificilmente aconteceria na

ausncia de tratamento mdico. A terapia gnica somtica ter um efeito
semelhante, j que no corrige a anomalia a nvel das clulas germinais.
Por vezes, observa-se uma agregao familiar para uma doena, sem
possibilidade de definir um padro de hereditariedade. Neste casos, o risco para
uma determinada doena maior entre os familiares de um indivduo com essa
doena do que na populao controlo. Diz-se que h uma histria familiar
positiva, quando a proporo de casos de doena com um familiar afectado
maior do que a proporo encontrada num grupo controlo adequado.
2. RISCO ABSOLUTO E RISCO RELATIVO
188
O risco absoluto e o risco relativo para um consulente, bem como o risco

de recorrncia para outros membros da famlia devem ser apresentados e
explicados at que se tornem bem compreendidos. Habitualmente, quando
se fala em risco de recorrncia pretende-se caracterizar a probabilidade de
uma determinada condio voltar a ocorrer em prxima gravidez, num filho
gerado pelo mesmo casal, ou dentro de uma mesma famlia.
O risco absoluto traduz a probabilidade dos consulentes virem a ter
uma determinada doena num determinado perodo de tempo, por aco
de um determinado factor de risco especfico. A indicao do risco relativo
(RR) destina-se a tornar claro o aumento de risco para um consulente
pertencente a um sub-grupo da populao geral que partilhe, por exemplo,
determinado ambiente profissional, uma mesma origem tnica ou uma
idade semelhante, em relao ao risco geral observado quando se considera
a populao total.
Em gentica mendeliana, o RR traduz a variao da frequncia com que
uma determinada doena ou caracter pode ocorrer nos indivduos portadores
de determinada alterao gentica, em comparao com os indivduos que
no so portadores dessa alterao. Especificamente, o RR devido presena
de um gentipo dado pelo quociente entre a probabilidade de ocorrncia
de determinada doena ou carcter devido presena do gentipo
predisponente e a probabilidade de ocorrncia da mesma condio nos
indivduos da populao sem aquele gentipo.
Um RR inferior a um, para desenvolver doena associada a um gentipo,

indica que o risco para a doena menor nos portadores do gentipo em
causa do que nos elementos da populao que no sejam portadores desse
gentipo (tem um efeito protector). Quando o RR maior do que um, o risco
para desenvolver a doena ou caracter maior nos portadores do gentipo
do que nos no portadores.
Por exemplo, se numa subpopulao de mulheres portadoras de uma
determinada mutao do gene BRCA1, o risco cumulativo para cancro da
mama durante a vida for de 85% e o risco na populao geral for de 10%,
o RR para uma mulher da subpopulao considerada ser o quociente entre
85% e 10%, ou seja 8,5, o que equivale a dizer que a presena da mutao
numa mulher implica um aumento de RR de 8,5 vezes, em relao a uma
mulher que no seja portadora da mutao em causa.
3. RISCO EMPRICO
Em mltiplas condies genticas, apenas possvel determinar o risco
emprico, como ocorre na maioria dos casos de natureza multifactorial, em
que as causas genticas e os mecanismos que as originam no so
suficientemente bem conhecidos ou no so conhecidos. Tambm nas causas
cromossmicas e mesmo nas causas mendelianas, o risco indicado
frequentemente emprico.
O risco emprico para uma condio calculado a partir de estudos
populacionais extensos pela constatao da tendncia para a recorrncia da
anomalia nas famlias em que h um indivduo atingido. Trata-se de uma
estimativa baseada em dados observados, mais do que em bases tericas.
Os valores dos riscos empricos so habitualmente de confiana, desde
que os dados que serviram de base sua determinao tenham sido
recolhidos em indivduos seleccionados sem enviesamentos e que o
consulente em causa faa parte da mesma populao ou de uma populao
com idnticas caractersticas. Na verdade, o risco emprico para desenvolver
uma determinada condio pode apresentar variaes regionais, sendo
possvel definir zonas com maior incidncia do que outras. As variaes
189
podem tambm verificar-se ao longo do tempo, como aconteceu com a

reduo do risco para defeitos do tubo neural, nos pases em que houve
generalizao da tomada de cido flico durante a gravidez.
Por outro lado, o risco emprico para novos descendentes de um casal
no se mantm igual ao da populao geral, quando entre os anteriores filhos
desse casal j ocorreu a condio em causa (alterao do risco de recorrncia).
O risco ainda influenciado pela presena de casos idnticos noutros
familiares prximos e no apenas em irmos e, frequentemente, tambm pela
idade de aparecimento da condio.
4. COMUNICAO DO RISCO
190
As opes e formas de comunicao do risco gentico devero ter

em considerao o que o mdico conhece sobre o seu consulente,
nomeadamente no que respeita ao perfil educacional, scio-econmico e
psicolgico.
A percepo individual do risco diversa, pelo que se dever estar
preparado para a sua indicao em termos quantitativos precisos ou
aproximados (v.g., pequeno, mdio, elevado). O valor que se transmite ao
consulente , habitualmente, uma probabilidade de ocorrncia, ou seja o
nmero de vezes que um determinado acontecimento pode ocorrer num
nmero elevado de possibilidades. Convencionalmente, as probabilidades
designam-se de modo decimal (entre zero e um), sendo que o zero
corresponde probabilidade nula de ocorrncia do acontecimento (caracter
ou doena) e um corresponde probabilidade de o acontecimento se
verificar sempre. Se um acontecimento se observa uma vez em cinco
possibilidades de ocorrncia, tal facto designa-se como uma probabilidade
de 0,2. Nestas condies e para o mesmo acontecimento, a probabilidade
de no ocorrer de quatro vezes em cinco, ou seja de 0,8. Naturalmente
que a soma da probabilidade de ocorrncia (0,2) com a probabilidade de
no ocorrncia (0,8) igual a um. H outros modos de indicar as
probabilidades a que se pode recorrer para tornar mais clara a explicao
do seu significado, em funo da capacidade de compreenso dos
consulentes (Tabela IX.1).
Tabela IX.1. Modos equivalentes de indicar riscos durante o aconselhamento gentico

PROBABILIDADE
DECIMAL (0-1)
PERCENTAGEM (%)
FRACO
ODDS
Ocorrncia: 1 em 5
No-ocorrncia: 4 em 5
0,2
0,8
20%
80%
1/5
4/5
1 para 4
4 para 1
Para alm da quantidade do risco, a deciso do consulente assenta

tambm na qualidade do risco, ou seja nas consequncias (peso) em
termos de gravidade das alteraes se vier a ter a doena, na experincia
prvia em relao afeco em causa, na existncia ou ausncia de medidas
correctivas, na disponibilidade de diagnstico precoce ou de preveno, na
idade em que as pessoas so afectadas e no nmero de pessoas atingidas
na famlia. A qualidade do risco o factor que mais conta na deciso sobre
as opes reprodutivas.
Um risco de recorrncia elevado, ainda que seja de natureza autossmica
dominante, mas que no interfira significativamente com uma existncia
normal (v.g. a hipodontia ou a polidactilia), ou que tenha soluo teraputica
como a fenda labial, raramente ser considerado um problema. No entanto,
uma condio como o defeito do tubo neural, numa populao em que o
risco de recorrncia seja de 3% quando j h um descendente afectado,
habitualmente motivo de sria preocupao.
Para alm das indicaes quantitativas sobre o risco gentico, h ainda
modos qualitativos de indicar o risco de recorncia, conforme sintetizado na
Tabela IX.2 para condies monognicas, cromossmicas e multifactoriais.
H erros de interpretao da informao sobre riscos que por serem
muito comuns merecem referncia. Um destes erros diz respeito, por
exemplo, informao do risco de um em cinco para determinada doena.
191
Tabela IX.2. Risco de recorrncia em funo do tipo de anomalia gentica presente
TIPO DE ANOMALIA
RISCO DE
RECORRNCIA
Alteraes cromossmicas
Doenas mendelianas
Doenas multifactoriais
Baixo
Alto
Baixo
EXCEPES
Translocaes equilibradas
Neomutaes
Mltiplos casos na famlia, severidade dos sintomas,
precocidade, proximidade do grau de parentesco,
presena no sexo menos afectado.
comum ser entendido como se o nascimento de um indivduo

afectado numa fratria signifique que os prximos quatro irmos no correm
o mesmo risco de serem afectados. essencial esclarecer que o risco indicado
se refere a cada gravidez, inclusive recorrendo analogia com o lanamento
de uma moeda, em termos de igual probabilidade de sair cara ou coroa
de cada vez que se lana a moeda!
Quando da indicao do risco ainda necessrio informar o consulente
sobre o risco de cerca de 3% de ocorrncia de uma malformao congnita
ou doena de causa gentica que uma gravidez na populao geral
representa, independentemente de riscos acrescidos de causa hereditria. Este
valor pode ajudar a relativizar valores de risco de recorrncia de causa
hereditria relativamente baixos.
5. CLCULO DE PROBABILIDADES: EXCLUSO E INDEPENDNCIA DOS ACONTECIMENTOS

Na perspectiva do clculo de probabilidades para a ocorrncia de um
caracter ou doena, necessrio esclarecer, face a duas possibilidades, se uma
exclui a outra ou se so independentes.
A ocorrncia de uma possibilidade pode excluir a outra, como acontece
com uma gravidez: o embrio ou do sexo masculino ou do sexo feminino.
A probabilidade de ser do sexo masculino de 1 em 2 ou seja de 1/2, e h
idntica probabilidade de ser do sexo feminino, ou seja tambm de 1/2.
A probabilidade do descendente ser do sexo masculino ou do sexo feminino
igual a um, o que equivale soma da probabilidade de ocorrncia de cada
acontecimento: (1/2+1/2=1).
192
Em termos gerais, nas condies mutuamente exclusivas, a soma do risco

para a ocorrncia com a soma do risco para a no ocorrncia igual a um.
Numa gravidez em que os dois progenitores sejam heterozigotos para uma
mutao autossmica recessiva e o estado de portador no implique doena,
verifica-se igualmente uma condio mutuamente exclusiva: o filho ou
doente ou normal. Sendo de 1/4 o risco de ser doente, ser de 3/4 a
probabilidade de ser saudvel. A soma igual a um.
No entanto, as duas possibilidades podem ser independentes como

acontece em relao ao risco de doena para dois descendentes de um
doente com uma condio mendeliana autossmica dominante, em duas
gravidezes sucessivas. Para cada gravidez, a possibilidade de transmitir o alelo
normal ou o alelo mutado presentes num determinado locus mutuamente
exclusiva. No entanto, os acontecimentos que, na primeira gravidez, levam
segregao do alelo normal ou do alelo mutado no vo afectar o que
acontece numa gravidez subsequente, j que so factos independentes.
Assim, se numa primeira gravidez, o risco de transmitir o alelo mutado e de
ter um filho doente de 1/2, tal probabilidade de 1/2 mantm-se numa
segunda gravidez. A probabilidade de ter os dois filhos doentes igual ao
produto da probabilidade presente em cada uma das gravidezes, ou seja de
1/4: (1/2 1/2=1/4).
Os clculos de independncia dos acontecimentos tambm se aplicam
para a segregao independente de alelos localizados em cromossomas
diferentes.
6. O RISCO GENTICO EM CASOS DE CASAMENTOS CONSANGUNEOS

Cada indivduo portador, em mdia, de um gene deletrio para uma
doena recessiva grave mas compatvel com a vida, para alm de 2 a 6
mutaes recessivas letais. As mutaes letais sero responsveis por abortos
espontneos e nados-mortos quando ocorrem em homozigotia. No entanto,
a mutao compatvel com a vida originar doena grave em homozigotia
recessiva num descendente, sendo a maior ou menor probabilidade de
ocorrncia dependente do coeficiente de consanguinidade presente entre os
progenitores.
Os membros de um casal so consanguneos quando tm um ancestral
comum que seja no mximo bisav. O acasalamento entre familiares em
primeiro grau (pai-filha; me-filho; irmo-irm) designado incesto, uma
condio em que a percentagem de genes idnticos de 50%. A proporo
de genes idnticos diminui com a distncia em relao ao tronco comum,
sendo de 1/8 entre primos direitos e de 1/32 entre segundos primos.
193
Os casamentos consanguneos implicam um aumento de risco para

doenas de natureza autossmica recessiva ou multifactorial, pelo que o risco
no idntico para diferentes populaes. No casamento entre primos
direitos, o risco de anomalias genticas severas cerca de duas vezes maior
do que na populao geral. A mortalidade para os descendentes de primos
direitos tambm est aumentada. No seu conjunto, o risco acrescido
decorrente do aumento de anomalias severas ou mortalidade de cerca de
3%. Assim, os filhos do casamento entre primos direitos tm um risco para
anomalias genticas severas ou morte que aproximadamente o dobro do
risco que se verifica na populao geral. Para a descendncia de casamentos
entre segundos primos e mesmo do primo direito de um indivduo com um
descendente deste, no aparente um aumento significativo de risco para
anomalias genticas severas ou mortalidade.
Contudo, as consequncias so dramticas (a todos os ttulos) nos casos
de incesto, em que o risco para morte ou anomalias graves, regista um
aumento da ordem dos 30% (cerca de 1/3 da descendncia afectada) em
relao populao geral. A elevada prevalncia de atraso mental em
descendentes de incesto, ao poder ocorrer tambm na ausncia de anomalias
fsicas, contribui para que, globalmente, haja cerca de 50% de descendentes
com algum tipo de afeco devida a este grau de consanguinidade.
A existncia de incesto pode ser suspeitada mesmo sem conhecimento
real dos factos e sem estudo dos progenitores de uma criana (v.g., uma
criana em processo de adopo), pelo estudo da percentagem de
polimorfismos (v.g., minissatlites) para os quais se detecta homozigotia.
7. EXEMPLOS PRTICOS DE RISCOS GENTICOS

194
7.1. MUTAES DE NOVO

Para a caracterizao de uma condio gentica presente num
descendente de um casal, como decorrente de uma mutao herdada ou de
uma mutao de novo, essencial a realizao de uma histria familiar
cuidadosa. A identificao do tipo de hereditariedade importante, sobretudo
nos casos de natureza autossmica dominante ou recessiva ligada ao X.
A indicao do risco de recorrncia em prximas gravidezes dentro do mesmo

casal, depende do tipo de hereditariedade presente. Se no houver referncia
a uma condio idntica na histria familiar e for percebido que se trata de
uma mutao de novo, o risco de recorrncia para uma nova gravidez ser
idntico ao da populao geral, desde que as clulas germinais restantes no
sejam portadoras da mutao. No entanto, o risco de recorrncia deve ser
analisado em funo da doena presente.
7.2. MOSAICISMO GONADAL

Face ao nascimento de um descendente afectado por uma condio de
transmisso habitualmente hereditria, ausente nos progenitores ou na
famlia, existe uma possibilidade forte de a causa ser atribuda a uma mutao
de novo, sendo difcil de estabelecer o diagnstico diferencial em relao
a mosaicismo gonadal como causa, antes de ocorrer um segundo nascimento
com a mesma afeco. No entanto, em casos de mutaes autossmicas
dominantes e recessivas ligadas ao X, a probabilidade de se tratar de
mosaicismo gonadal real.
Como exemplo de uma condio recessiva ligada ao cromossoma X, em
que o mosaicismo gonadal aparenta ser relativamente frequente, refira-se a
DMD. Quando esta doena ocorre num filho de uma mulher em que a
mutao est ausente nas clulas somticas, h uma probabilidade de 60%
de ser uma mutao de novo e de 40% de haver mosaicismo gonadal.
Para uma prxima gestao, o risco de recorrncia de 10%, percentagem
que se obtm multiplicando a probabilidade de haver mosaicismo na me
(40%) pela probabilidade de o embrio ser do sexo masculino (1/2) e pela
probabilidade de a me transmitir o cromossoma X com a mutao (1/2).
O mosaicismo gonadal pode tambm estar subjacente ao nascimento de
dois ou mais descendentes afectados por uma condio autossmica
dominante, sendo os pais saudveis, o que pode gerar confuso no que
respeita ao tipo de transmisso hereditria presente, ao sugerir uma natureza
recessiva para a condio. No caso de o portador de mosaicismo ser do sexo
masculino, se o gene j tiver sido identificado, a presena da mutao poder
ser estudada numa amostra de esperma e a percentagem de clulas germinais
portadoras da mutao pode ser caracterizada.
195
O risco de recorrncia indicado para o mosaicismo gonadal de natureza

emprica, dependendo da percentagem de clulas germinais com a mutao.
No entanto, mesmo que o mosaicismo tenha uma elevada probabilidade de
estar presente, pela existncia de dois filhos com uma doena autossmica
dominante num mesmo casal, o risco efectivo de recorrncia em nova
gravidez pode, ainda assim, variar entre um valor muito baixo se o acaso tiver
levado a que dois raros gmetas mutados tenham sido seleccionados de entre
a grande maioria sem mutao, e 50% de risco se o acaso tiver seleccionado
dois gmetas no mutados oriundos de uma populao de gmetas em que
metade tenha a mutao e metade no tenha a mutao.
7.3. HEREDITARIEDADE MITOCONDRIAL

Em situaes de hereditariedade mitocondrial, a sua identificao permite
excluir o risco para os descendentes de indivduos do sexo masculino, quer
sejam ou no afectados. No entanto, para os descendentes de indivduos do
sexo feminino afectados em que esteja presente heteroplasmia, muito difcil
estimar o risco gentico para os descendentes, no havendo regra que
possibilite indicar a percentagem de descendentes que sero afectados.
Num indivduo com heteroplasmia, seja homem ou mulher, tambm no h
possibilidade de estabelecer uma correlao definitiva entre a proporo de
mitocndrias com a mutao no sangue perifrico e a severidade de uma
determinada doena dado que no tecido envolvido na doena, a percentagem
de mitocndrias com a mutao pode ser diferente da que encontrada no
sangue perifrico. Esta incerteza estende-se avaliao de resultados obtido
a este respeito por estudo pr-natal.
196
7.4. HEREDITARIEDADE MULTIFACTORIAL

Na maior parte dos casos, o risco de recorrncia para uma doena multifactorial inferior a 5%, sendo varivel de uma doena para outra e entre
famlias diferentes. O risco influenciado por parmetros como o grau de
parentesco em relao ao indivduo afectado, a severidade da doena, o
nmero de familiares afectados, o sexo do indivduo afectado (maior risco
se ocorre em indivduo do sexo em que a doena mais rara), a precocidade

das manifestaes e a hereditabilidade.
Para algumas condies multifactoriais, existem tabelas com a indicao
de riscos empricos para o desenvolvimento da doena e para o risco de
recorrncia. Para outras condies, poder-se- recorrer Tabela IX.3, para
clculo do risco de recorrncia, inserindo como variveis a frequncia da
condio na populao a que pertence o indivduo afectado, a hereditabilidade, o nmero de progenitores afectados e o nmero de filhos afectados
num casal.
Tabela IX.3. Clculo de risco de recorrncia em condies multifactoriais

PROGENITORES AFECTADOS
0,1
h (%)
80
50
20
80
50
20
FILHOS AFECTADOS
0
1
2
FILHOS AFECTADOS
0
1
2
FILHOS AFECTADOS
0
1
2
1,0
1,0
1,0
0,1
0,1
0,1
6,5
3,9
2,0
2,5
1,0
0,3
14,2
8,4
3,3
8,2
3,2
0,7
8,3
4,3
2,0
2,9
1,0
0,3
18,5
9,3
3,3
9,8
3,4
0,7
27,8
15,1
4,8
17,9
6,9
1,3
40,9
14,6
3,7
31,7
6,6
0,8
46,6
20,6
5,3
37,4
10,9
1,4
51,6
26,3
7,1
42,4
15,3
2,3
Adaptado de: P.S. Harper (1993). p frequncia na populao; h hereditabilidade.
7.5. HEREDITARIEDADE MENDELIANA

Os clculos de risco quando assentam em hereditariedade monognica
so simples de realizar, sendo possvel estabelecer os riscos genticos de
modo bem definido (ver Figs. IX.1 e IX.2, para hereditariedade autossmica
recessiva).
J no to fcil, por exemplo, em casos de hereditariedade autossmica
dominante de penetrncia incompleta, em que o grau de penetrncia pode
variar entre diferentes populaes, como ocorre com as mutaes do gene
BRCA1. Neste gene, foram encontradas mutaes com uma penetrncia de
cerca de 86% durante a vida, em mulheres judias pertencentes a famlias da
Europa de Leste, comparativamente com uma penetrncia de 45% em
mulheres de outras etnias.
197
I
1/2
II
1/2
1/2
1/2
III
1
2
1/2
1/2
IV
1
Fig. IX.1 Risco para doena num descendente de um casal consanguneo, devida a homozigotia
recessiva para um alelo mutado presente num antepassado comum. O antepassado I-1 heterozigoto
para uma mutao recessiva (x). O risco de o casal da gerao III ter um filho doente de 1/64.
Este valor o produto das probabilidades de o alelo mutado ser herdado pelos indivduos II-2 e II-3,
de ser transmitido por eles aos respectivos filhos (III-1 e III-2) e ainda de ser transmitido por estes
filha (IV-1). Entre progenitor e descendente, a probabilidade do alelo mutado ser transmitido de
1/2. O risco idntico se o alelo mutado estiver presente em I-2.
I
1
II
1/2
1/4
III
1/8
IV
1/16
198
1/32
Fig. IX.2 Risco para doena num descendente de um casal de segundos primos, em que o homem
tem uma doena autossmica recessiva. A me (III-2) do doente (IV-1) portadora obrigatria, pelo
que a probabilidade de a sua me (II-2) ser portadora de 1/2. A probabilidade de II-3 (irm de II-2)
ser portadora de 1/4 e a probabilidade de o seu filho (III-3) ser portador de 1/8. Assim, a
probabilidade de IV-2 (filha de III-3) ser portadora de 1/16. Um filho do casamento entre IV-1 e
IV-2 tem um risco de 1/32 de ser doente 1 1/16 1/2=1/32).
Nos clculos de risco para uma mutao dominante de penetrncia

incompleta, deve ser tido em considerao o valor de penetrncia calculada
para a populao em causa. Num descendente de um indivduo com uma
doena com este tipo de hereditariedade, e na ausncia de confirmao da
condio de portador ou de no portador no descendente, o risco de
recorrncia igual a metade do risco estimado para o progenitor (tem a
probabilidade de 50% de herdar o alelo mutado e de 50% de herdar o alelo
normal). Contudo, se houver uma penetrncia de 86%, como a que foi
anteriormente indicada para o cancro da mama em mulheres judias, o risco
para uma descendente de uma mulher doente ser de 43% (produto de 50%
pelo valor da penetrncia). Desta forma, haver 7% de heterozigotos que,
sendo normais, se juntam aos 50% de descendentes normais que herdam o
alelo normal e que so homozigotos para o alelo normal. Pelas regras da
hereditariedade autossmica dominante espera-se que, na descendncia de
um indivduo normal, no haja indivduos afectados. Contudo, na descendncia dos 57% de indivduos normais, os 7% de heterozigotos (7/57)
concedem risco para a doena nos descendentes, com uma probabilidade
igual ao produto de 7/57 1/2 86%, ou seja, cerca de 5%.
Nos casos de hereditariedade dominante ligada ao X, em que esteja
presente uma mutao letal in tero em homozigotia ou em hemizigotia no
sexo masculino (v.g., incontinentia pigmenti tipo II), alteram-se as propores
esperadas entre doentes e saudveis e entre descendentes do sexo masculino
e do sexo feminino. Assim, a proporo entre o sexo feminino e o sexo
masculino de 2 para 1 (2/3 de mulheres para 1/3 de homens), dado que
metade das gestaes respeitantes a embries do sexo masculino termina em
aborto espontneo, por estar presente a mutao. Entre os nascituros e
adultos apenas sero afectados descendentes do sexo feminino na razo
esperada de 1 em 2. Nos casos de incontinentia pigmenti tipo II, para alm
da alterao das propores esperadas, o aconselhamento gentico ainda
afectado pela circunstncia de estar presente, na maioria das vezes, uma
mutao de novo. Sendo as mes saudveis, estes casos podero ser
confundidos com incontinentia pigmenti tipo I. Contudo, o tipo I resulta de
um rearranjo a nvel de Xp11 e no tem carcter familiar.
De igual modo, dever-se- ter particular ateno nos clculos de risco
quando est presente heterogeneidade gnica, como ilustrado na Fig. VII.8,
a propsito da surdez originada por mutaes autossmicas recessivas.
199
7.6. CLCULO DE RISCO PELO TEOREMA DE BAYES

O clculo de risco em casos mendelianos pode ser dificultado quando
esto presentes situaes como a penetrncia incompleta, a heterogeneidade,
a expressividade varivel ou a manifestao tardia. Nestes casos, o clculo
de risco recorrendo ao teorema de Bayes permite uma maior preciso e
adequao situao familiar, para indicao do risco de recorrncia, em
termos de probabilidades. Para realizar este clculo, utilizada informao
condicional que modifica o valor do risco observado a priori, recolhida a partir
da histria familiar como seja a idade de aparecimento da doena, a
penetrncia, ou o nmero de descendentes no afectados. Naturalmente que
os conhecimentos que decorrem da sequenciao do genoma humano iro
permitir, cada vez mais, que os dados utilizados para aconselhamento sejam
objectivos, com abandono progressivo dos clculos probabilsticos sobre a
possvel presena ou ausncia da mutao patognica num determinado
indivduo. Os estudos directos do genoma permitem afirmar, em concreto,
se uma mutao est presente ou ausente.
7.6.1. APLICAO DO TEOREMA DE BAYES NUMA CONDIO RECESSIVA LIGADA AO X
200
A figura IX.3 o heredograma de uma famlia em que est presente uma

forma mutada do gene ligado ao cromossoma X que codifica o factor VIII
anti-hemoflico. Os indivduos do sexo masculino que herdam o alelo mutado
tm hemofilia A. A questo diz respeito probabilidade de a mulher
assinalada por III-6 ser heterozigtica para o alelo mutado. A sua me (II-5)
tem dois irmos e um filho afectados, o que evidencia que portadora
obrigatria. Deste modo, sendo um caso de hereditariedade recessiva ligada
ao X, a probabilidade de III-6 ter herdado o alelo mutado de 50% e,
obviamente, a probabilidade de no o ter herdado tambm de 50%.
Contudo, quando se constata que III-6 tem 4 filhos do sexo masculino sem
hemofilia (IV-1, IV-2, IV-3 e IV-4), intuitivo pensar que a probabilidade de
no ter herdado a mutao dever ser maior do que a probabilidade de a
ter herdado. Ou seja, a informao respeitante aos seus filhos condiciona a
probabilidade calculada inicialmente para III-6.
Nestas condies, o teorema de Bayes permite determinar, quantitativamente, a probabilidade de III-6 ser heterozigtica ou no ser heterozigtica
para a mutao recessiva.
I
1
II
1
III
1
IV
Doente com hemofilia A
Fig. IX.3 Heredograma de uma famlia em que est presente uma forma mutada do gene que
codifica o factor VIII anti-hemoflico.
A probabilidade a priori de III-6 ser heterozigtica de 1/2 e a de no

ser heterozigtica tambm de 1/2.
Para a condio heterozigtica, a probabilidade condicionada de ter
quatro filhos saudveis igual a 1/16 (produto de 1/2x1/2x1/2x1/2, sendo
1/2 a probabilidade de, sendo heterozigtica, no transmitir a mutao, em
cada gravidez). Para o condio de no heterozigtica, a probabilidade
condicionada para os quatro filhos serem saudveis igual a um.
A partir dos valores anteriores determina-se a probabilidade conjunta de
1/32 e de 1/2, respectivamente para a condio heterozigtica e de no
heterozigtica, como produto do valor da probabilidade a priori pelo da
probabilidade condicionada.
Seguidamente, o teorema de Bayes permite calcular a probabilidade a
posteriori de III.6 ser heterozigtica e de no ser heterozigtica, em
conformidade com os clculos explicitados na Tabela IX.4. Assim, a
probabilidade a posteriori de III.6 ser heterozigtica de 1/17, um valor bem
inferior probabilidade a priori de 1/2, se a existncia dos quatro filhos
saudveis no for ponderada. A probabilidade a posteriori de III.6 no ser
heterozigtica de 16/17, bem maior do que o valor de 1/2 inicialmente
determinado sem ter em considerao os quatro filhos saudveis.
201
Os valores finais obtidos atravs do teorema de Bayes, sustentam a

intuio que, pelo simples exame do heredograma (Fig. IX.3), alertava para
uma baixa probabilidade de III.6 ser heterozigtica.
Tabela IX.4. Clculo de probabilidades pelo teorema de Bayes,

para uma condio recessiva ligada ao X
PROBABILIDADE
A priori
Condicionada
Conjunta
A posteriori
III.6 HETEROZIGTICA
1/2
1/16
1/2x1/16 = 1/32
1/32/(1/32+1/2) = 1/17
III.6 NO PORTADORA
1/2
1
1/2x1 = 1/2
1/2/(1/32+1/2) = 16/17
7.6.2. APLICAO DO TEOREMA DE BAYES NUMA CONDIO AUTOSSMICA DOMINANTE DE

PENETRNCIA INCOMPLETA
Considere-se, como exerccio, uma mutao autossmica dominante de

expresso precoce (antes dos 10 anos de idade do seu portador) e com
penetrncia incompleta igual a 50% (apenas metade dos portadores so
afectados). Nestas condies, qual ser a probabilidade de um indivduo
saudvel, com 30 anos de idade, vir a ter um filho doente, sabendo-se que
o seu pai teve manifestaes da doena aos 18 anos.
Pelo clculo de Bayes (Tabela IX.5), verifica-se que a probabilidade de o
propositus ser heterozigtico de 1/3. Assim, a probabilidade de ter um filho
doente ser igual a 1/3x1/2x1/2=1/12, sendo que o segundo factor (1/2)
corresponde probabilidade de transmitir o alelo mutado se for heterozigtico
e o terceiro factor (1/2) corresponde ao valor da penetrncia (50%).
202
Tabela IX.5. Clculo de probabilidades pelo teorema de Bayes,
para uma condio autossmica dominante, de penetrncia incompleta
PROBABILIDADE
A priori
Condicionada
Conjunta
A posteriori
HETEROZIGTICO
1/2
1-1/2 (1/2 a penetrncia)
1/2x (1-1/2) = 1/4
1/4/(1/4+1/2) = 1/3
NO HETEROZIGTICO
1/2
1
1/2x1 = 1/2
1/2/(1/4+1/2) = 2/3
CAPTULO X
ERROS INATOS DO METABOLISMO. FARMACOGENTICA. ECOGENTICA
1. INTRODUO
O fentipo o resultado da interaco entre os produtos codificados
pelos genes e mltiplos factores ambientais. Este aspecto particularmente
relevante para os caracteres e as anomalias de natureza multifactorial, embora
se tenham identificado diversas situaes de natureza monognica (com
penetrncia condicionada) em que o fentipo doente apenas surge pela
interaco entre a alterao gnica e factores ambientais (v.g., FCU, porfiria
aguda intermitente, favismo). A prpria temperatura pode influenciar a
expresso gnica como se observa na epidermlise bolhosa, uma condio
autossmica dominante cuja expresso fenotpica depende da subida da
temperatura, no se manifestando para baixas temperaturas. Na interaco
dos genes com o meio particularmente evidente a variabilidade inter-individual, inter-tnica e inter-racial na resposta a factores ambientais ou
administrao de frmacos.
Para se compreenderem alguns aspectos da interaco dos produtos
codificados pelos genes com factores ambientais e os seus reflexos a nvel
fenotpico sero abordadas, neste captulo, condies tradicionalmente
estudadas sob a designao de erros inatos do metabolismo ou
metabolopatias. No entanto, independentemente do trao comum que resulta
de serem devidas a erros inatos (traduzidos em perturbaes de vias
metablicas se forem enzimas do metabolismo ou ao nvel de outras funes
se forem protenas estruturais ou funcionais sem interveno em processos
203
metablicos) foi feito um enquadramento diverso para melhorar a

racionalizao da interveno preventiva e/ou teraputica. Valorizou-se, por
isso, o processo que conduz reaco adversa. Os casos em que a reaco
adversa resulta da administrao de substncias com fins medicamentosos
foram includos na farmacogentica. Os casos em que a resposta individual
adversa condicionada pela exposio a factores ambientais sem objectivos
farmacolgicos (v.g., a dieta alimentar) foram agrupados na ecogentica.
As condies abordadas como erros inatos do metabolismo poderiam ser
integradas na ecogentica, dada a preponderncia dos factores ambientais
e a possibilidade de condicionar ou mesmo de eliminar o aparecimento de
doena pela manipulao da exposio ambiental, em sentido lato, ou da
dieta alimentar, em particular. No entanto, foi mantida uma abordagem
autnoma de alguns erros inatos de metabolismo, por serem demonstrativos
da forma como se desenvolvem as doenas do metabolismo.
2. ERROS INATOS DO METABOLISMO
204
Os erros inatos do metabolismo, ou metabolopatias, consistem num extenso

grupo de perturbaes hereditrias causadas por mutaes em genes que
codificam enzimas envolvidas em vias metablicas. A designao histrica de
erro inato do metabolismo respeita a opo inicial do mdico ingls Archibald
Garrod que em primeiro lugar se referiu a estas alteraes e as descreveu.
Garrod verificou que, nos doentes com alcaptonria, era aparente um
bloqueio numa das etapas metablicas com excreo de um produto anormal
na urina que a tornava escura. Por outro lado, observou ainda que estas
alteraes eram mais frequentes em descendentes de casais consanguneos
e que os casos se encontravam habitualmente entre os membros de uma
fratria, sem que os pais ou outros elementos da famlia evidenciassem
qualquer alterao. O comportamento da alcaptonria foi interpretado por
Garrod em 1902 como sendo tradutor da natureza autossmica recessiva
desta anomalia, o que constituiu a primeira descrio na espcie humana de
uma anomalia com este tipo de hereditariedade. Apenas em 1958 foi
identificada a causa como sendo a deficincia em oxidase do cido
homogentsico a nvel heptico.
Na verdade, a maioria das metabolopatias de natureza autossmica e,

em menor nmero de vezes, recessiva ligada ao cromossoma X. A condio
autossmica dominante observa-se muito raramente.
Nas metabolopatias est em causa, muito frequentemente, a deficincia
ou ausncia de uma enzima por mutao ocorrida no gene respectivo.
As alteraes gnicas podem-se traduzir:
na ausncia de protena ou na produo de pequenas quantidades, seja
devido ao aparecimento de um codo stop na regio proximal do
gene, a alteraes do splicing ou a instabilidade do RNAm;
na produo de uma enzima anormal com pouca ou nenhuma
actividade em relao ao substracto.
A ausncia ou a reduo significativa da actividade de uma enzima ou
de outro tipo de molcula, pode originar bloqueios metablicos e alteraes
patolgicas (Figs. X.1 e X.2) por:
acumulao do precursor no metabolizado, a montante, o que pode
exercer um efeito txico em concentraes elevadas ou acumular-se
no interior de alguns organelos;
A
TM
E1
B
D
E2
C
E
205
Fig. X.1 Patogenia dos erros inatos do metabolismo. O produto A entra para a clula por aco de um
transportador de membrana ou por ligao a um receptor (Tm). Se houver bloqueio a este nvel, ocorrer
acumulao do produto no exterior das clulas. Dentro das clulas, o produto A metabolizado,
originando os produtos intermedirios B e C, respectivamente por aco das enzimas E1 e E2.
Na ausncia de produto final C, pode falhar o mecanismo de feed-back que regula a actividade da
enzima E1. Na ausncia de metabolismo, o produto A acumula-se nas clulas e podero ser activadas
vias alternativas com consequente produo de metablitos txicos intermedirios (D) ou finais (E).
Dieta
1
Dieta
Fenilalanina
Tirosina
Dopa
3
Enz1
Melanina
Enz2
Enz3
cido
Fenilpirvico
cido
Homogentsico
Tiroxina
(Alcaptona)
4
cido
cido
Fenilactico Fenil-lctico
Enz4
cido
Acetoactico
CO2 + H2O
Fig. X.2 Metabolismo da fenilalanina e bloqueios metablicos. O bloqueio na posio 1, por ausncia
de fenilalanina hidroxilase (Enz1) d origem fenilcetonria. A activao da via alternativa origina
cido fenilpirvico e, subsequentemente, os cidos fenilactico e fenil-lctico. Se o bloqueio ocorre
na posio 2, por deficincia da enzima tirosinase (Enz2) ocorre albinismo oculo-cutneo. A ausncia
da enzima desalogenase (Enz3) origina hipotiroidismo congnito, por deficincia da hormona tiroxina.
A falta da enzima oxidase do cido homogentsico (Enz4) origina alcaptonria. A referncia Dieta inclui
a comparticipao da degradao dos tecidos para o fornecimento do aminocido essencial fenilalanina.
deficincia de molculas resultantes do metabolismo que funcionem

como substratos de reaces subsequentes ou sejam produtos finais;
perturbao de mecanismos de regulao do metabolismo por feed-back;
produo de molculas txicas originadas pela activao de vias metablicas alternativas.
206
2.1. FENILCETONRIA
A FCU um exemplo paradigmtico dos erros inatos do metabolismo e
de susceptibilidade gentica para um agente ambiental. Tem uma prevalncia
de cerca de 1/12.500 recm-nascidos em Portugal. devida, na grande
maioria das vezes, a homozigotia recessiva ou heterozigotia composta para
o locus que codifica a enzima heptica fenilalanina hidroxilase localizado em
12q22-q24.1. J foram identificadas mais de 300 mutaes a nvel deste

gene. As mutaes influenciam de forma diversa a actividade enzimtica e
tm, por isso, consequncias diferentes em termos da gravidade dos sintomas,
nomeadamente do atraso mental que pode variar de profundo a praticamente
inexistente. Na verdade, da combinao de alelos presentes num indivduo
podem resultar quatro fentipos para a FCU: a FCU clssica com atraso
mental profundo; a FCU moderada; a FCU suave; e uma forma em que a
excreo urinria de fenilalanina a nica manifestao fenotpica.
A FCU heterognea. Os sintomas podem resultar, em casos muito raros
(1x10-6), de deficincia das enzimas dihidropteridina reductase ou dihidrobiopterina sintetase, duas enzimas envolvidas na sntese da tetrahidrobiopterina. Esta molcula um co-factor da fenilalanina hidroxilase e participa
tambm na hidroxilao da tirosina e do triptofano a nvel do crebro. Nestes
casos, os valores da fenilalanina hidroxilase so normais, mas h
hiperfenilalaninmia e atraso mental. A manipulao da dieta no que respeita
ao controlo dos valores da fenilalaninmia no efectiva em termos de
preveno dos sintomas da FCU.
As crianas com FCU no manifestam quaisquer sintomas ao nascer,
devido proteco concedida pela enzima de origem materna na vida intra--uterina. Contudo, ao fim de algumas semanas apresentam vmitos,
eczemas e convulses. A urina e o suor destas crianas evidenciam um cheiro
caracterstico com origem nos produtos do metabolismo alternativo da
fenilalanina. A fenilalaninmia pode atingir valores 10 vezes superiores aos
valores normais. O atraso mental desenvolve-se rapidamente e, com o avanar
da idade, comea a observar-se microcefalia.
As manifestaes da FCU so devidas ao efeito txico das concentraes
elevadas da fenilalaninmia e presena dos metabolitos txicos originados
pelo metabolismo alternativo da fenilalanina (Fig. X.2). A toxicidade traduz-se em dfice da mielinizao e do desenvolvimento do crebro.
Por outro lado, o bloqueio enzimtico subjacente FCU vai afectar a
produo de melanina (Fig. X.2), pelo que os indivduos com FCU podem
apresentar, por vezes, a pele e os olhos mais claros do que os seus irmos.
A forma mais comum de detectar a FCU decorre da realizao do rastreio
sistemtico dos recm-nascidos, que alguns pases estabeleceram a partir de
1961 e que deu os primeiros passos em Portugal, em 1972. A partir de uma
207
gota de sangue recolhida em papel mata-borro, preferencialmente a partir

do 4 dia aps o nascimento, realizado o teste de inibio do crescimento
bacteriano de Guthrie. A amostra de sangue colhida na maternidade ou
no Centro de Sade e, posteriormente, enviada pelos pais do recm-nascido
para o Instituto de Gentica Mdica Jacinto de Magalhes sediado no Porto.
Na mesma amostra tambm realizado o rastreio do hipotiroidismo
congnito, com uma prevalncia de 1/3.700 recm-nascidos em Portugal.
A deteco da FCU deve ser realizada nos primeiros dias de vida e deve
ser iniciada uma alimentao adequada, pobre em fenilalanina, durante o
primeiro ms de vida, para prevenir o desenvolvimento do atraso mental.
Os valores da fenilalaninmia devem ser mantidos entre 2mg/dl e 6mg/dl, de
modo a evitar o excesso de fenilalanina e providenciar as concentraes
necessrias deste aminocido essencial.
Actualmente, recomenda-se a restrio alimentar da fenilalanina durante
toda a vida, com manuteno dos valores da fenilalaninmia dentro dos
parmetros antes indicados e, de forma muito estrita, pelo menos at aos
oito anos de idade. Na FCU, a dieta deve ser estendida aos edulcorantes
artificiais (aspartame) que so tambm metabolizados para fenilalanina.
A necessidade de restrio alimentar em fenilalanina e o doseamento da
fenilalaninmia particularmente aguda nas mulheres com FCU que desejem
engravidar. Nestes casos o controlo deve ser iniciado algumas semanas antes
de engravidar e durante toda a gravidez para evitar o desenvolvimento de
fetopatia devida hiperfenilalaninmia. Esta fetopatia pode traduzir-se em
anomalias congnitas diversas que englobam o microcefalia, anomalias do
desenvolvimento do SNC que se viro a traduzir em atraso mental,
cardiopatias congnitas e baixo peso.
O filho de uma mulher com FCU tem a probabilidade de 1 em 110 de
ser doente(1). Contudo, as manifestaes da fetopatia devida FCU da me
208
so independentes da condio heterozigtica do filho e dependem apenas

do aco txica da hiper-fenilalaninmia transmitida pelo ambiente materno.
(1) A probabilidade de 1/110 o produto da probabilidade (igual a 1) de o descendente herdar

um alelo mutado da me, pela probabilidade (igual a 1/110) de herdar um alelo mutado oriundo do
pai (desde que este pertena populao geral). O valor de 1/110 obtm-se pela multiplicao de
1/55 (valor aproximado da frequncia de heterozigticos na populao geral) por 1/2 (probabilidade
de um heterozigoto transmitir o alelo mutado a um descendente).
2.2. DOENA DE GAUCHER

A doena de Gaucher uma esfingolipidose, rara na populao geral,
mas com uma frequncia de 1/600 nos judeus Ashkenazi (da Europa do leste).
O gene est localizado em 1q21. uma condio de natureza autossmica
recessiva que decorre da deficincia da enzima glicocerebrosidase
(glicosilceramida -glicosidase). Na gnese da deficincia enzimtica podem-se encontrar diversas mutaes. A deficincia traduz-se em actividade
cataltica reduzida e alguma instabilidade da protena.
Os sintomas tm origem na acumulao de glicosilceramida nos
lisossomas dos macrfagos. Na medula ssea observam-se formas celulares
tpicas designadas clulas de Gaucher.
H trs formas de doena de Gaucher: o tipo adulto, que representa
cerca de 80% dos casos, o tipo infantil com cerca de 15% dos casos e uma
forma juvenil. O tipo adulto pode iniciar a sua expresso nos ltimos anos
da infncia e comummente na adolescncia. Cursa com atraso de crescimento, episdios de febre, dores das articulaes, do tronco e dos membros
(dores sseas), tendncia para fracturas, hepatoesplenomeglia, hiperesplenismo e anemia ligeira. Quando o incio tardio, a sobrevivncia no
afectada. No tipo infantil, os sintomas so precoces: entre os trs e os seis
meses verifica-se que as crianas no aumentam de peso e desenvolvem
hepatoesplenomeglia e pelos seis meses h deteriorao do sistema nervoso
central e pneumonias repetidas. Em mdia, a morte ocorre no segundo ano
de vida. A forma juvenil tem um envolvimento do sistema nervoso central
mais tardio, por volta dos 4-8 anos. A morte ocorre, em mdia, aos doze
anos.
Recentemente, foi ensaiado um tratamento baseado na administrao
da enzima em falta que, embora dispendioso, se mostrou efectivo no tipo
adulto da doena de Gaucher.
209
3. FARMACOGENTICA
210
O termo farmacogentica foi introduzido por Vogel, em 1959. Aborda

a influncia de determinados genes na variao da resposta a frmacos
usados para fins teraputicos. Quando os polimorfismos esto presentes em
loci que codificam enzimas envolvidas no metabolismo de agentes
teraputicos e a actividade enzimtica diversa em funo do polimorfismo
presente, podem observar-se variaes significativas da actividade fisiolgica
do produto usado, determinadas geneticamente. Para alm de procurar
caracterizar e explicar as causas genticas da susceptibilidade para respostas
adversas face s substncias medicamentosas, a farmacogentica procura
ainda evitar a ocorrncia deste tipo de respostas. A melhor forma de evitar
as consequncias adversas evitar a administrao do frmaco ao indivduo
com susceptibilidade e aos familiares.
No metabolismo das molculas usadas para fins teraputicos pode estar
envolvido um nico gene codificador da enzima envolvida, ainda que
frequentemente de natureza polimrfica, ou podem estar envolvidos diversos
genes. Nos casos determinados de forma monognica uma populao poder
ser subdividida em dois grupos: um correspondente aos metabolizadores
activos em que se encontra homozigotia para a forma normal do gene ou
heterozigotia; um grupo de menor dimenso que engloba os indivduos com
deficincia acentuada para o metabolismo devido a homozigotia recessiva.
Por vezes, possvel identificar trs grupos correspondentes, respectivamente,
aos homozigotos para a forma normal do gene, aos heterozigotos e aos
homozigotos recessivos (distribuio trimodal). Quando esto envolvidos
diversos genes observa-se uma distribuio normal traduzida numa curva de
Gauss.
As respostas adversas a agentes teraputicos (Tabela X.1) podem afectar
indivduos portadores de mutaes a nvel de genes envolvidos na codificao
de enzimas ligadas a processos metablicos, indivduos saudveis portadores
de polimorfismos genticos em loci que codificam enzimas igualmente ligadas
a processos metablicos e indivduos portadores de formas de genes que
codificam protenas estruturais e funcionais sem actividade enzimtica.
Na investigao da susceptibilidade para determinados frmacos, de
modo a prevenir reaces adversas, a histria familiar pode ser um recurso
precioso.
Tabela X.1. Exemplos de reaces adversas a agentes teraputicos

ENZIMA/PROTENA
HEREDITARIEDADE
Primaquina,
sulfonamidas,
nitrofurantona
FRMACO
G6PD
(deficincia)
Recessiva
ligada ao X
Xq28
Caucasianos:
Urinas escuras,
rara excepto
ictercia, anemia
Mediterrnicos
Africanos:10%
Succinilcolina
Colinesterase
(deficincia)
Autossmica
recessiva
3q26.1
-q26.2
1/2.000
Apneia
prolongada
Isoniazida
NAT2
(acetilador lento)
Autossmica
recessiva
8p22
acetiladores
lentos: 64%
Neuropatia
perifrica
Isoniazida
NAT2
(acetilador rpido)
Autossmica
dominante
8p22
acetiladores
rpidos: 36%
Reduo do efeito;
toxicidade heptica
Halotano +
succinilcolina
Mutao receptor
rianodina
(s vezes)
Autossmica:
dominante (50%);
recessiva (20%)
19q13.1
1/20.000
Hipertermia
maligna
Fenobarbital,
sulfonamidas
Uroporfirinogneo I
Autossmica
sintetase (deficincia) dominante
11q23-qter
1/10.000-1/20.000
Porfiria aguda
intermitente
Perxido de
hidrogneo
Catalase
(deficincia)
Autossmica
recessiva
11p13
1/25-1/250.000 Acatalasia:
lceras bucais
Nortriptilina,
fenformina,
Debrisoquina
CYP2D6 (metabolizador lento)
Autossmica
recessiva
22q11.2-qter 5/100
Biotransformao
deficiente;
toxicidade
Mitocondrial
(por via materna)
mtDNA
Surdez
Aminoglicosdeos Fraco mitocondrial

12SrRNA
LOCUS
PREVALNCIA
1/10.000
(talvez maior)
MANIFESTAES
Da interaco dos frmacos com as enzimas envolvidas no seu

metabolismo podem, por vezes, ocorrer efeitos adversos que se traduzem:
em reduzida aco do frmaco com ausncia do efeito teraputico
esperado (v.g., nos acetiladores rpidos o metabolismo intenso da
isoniazida leva a uma baixa da sua concentrao srica e a um efeito
tuberculosttico reduzido, ainda que se usem doses mdias
habitualmente eficazes; na amplificao do gene da diidrofolato reductase, o metabolismo acelerado do metotrexato conduz anulao da
aco teraputica);
numa resposta fisiolgica exagerada (v.g., a deficincia em
colinesterases predispe para apneia prolongadas aps administrao
de succinilcolina);
num aumento de efeitos colaterais (v.g., nos acetiladores lentos, h
aumento dos efeitos colaterais da isoniazida como a neuropatia
perifrica, mesmo para doses mdias; a deficincia em diidropirimi-dina
desidrogenase predispe para a toxicidade do 5-fluorouracilo);
211
no desencadeamento ou precipitao de efeitos caractersticos de

doenas geneticamente determinadas (v.g., a hemlise da porfiria
aguda intermitente desencadeada apenas quando h administrao
de alguns frmacos como o fenobarbital ou sulfonamidas; a
hipertermia maligna surge apenas quando administrado halotano e
succinilcolina, devido presena de uma forma mutada do receptor
da rianodina).
3.1. ENZIMAS DE METABOLISMO DE GENOTXICOS

No metabolismo de frmacos e de genotxicos ambientais, a variabilidade gentica pode afectar a severidade e a frequncia com que uma
determinada doena ou reaco adversa ocorre numa populao. H, contudo, outras variveis que devem ser consideradas como sejam a idade, o
sexo, o estado de nutrio e os hbitos alimentares, o estilo de vida e a
eventual existncia de doena prvia.
Entre os intervenientes no processo metablico dos genotxicos e dos
frmacos salientam-se as enzimas que hidroxilam as molculas para promover
a sua excreo e as enzimas de conjugao (Fig. X.3).
As enzimas da fase I como o citocromo oxidase metabolizam vrias
substncias qumicas em produtos intermedirios reactivos, algumas vezes
carcinognicos como os epxidos (Fig. X.4). Esta situao ocorre com os
hidrocarbonetos aromticos policclicos ou as N-nitrosaminas, de entre os
muitos carcinogneos presentes no fumo do tabaco, e que requerem
metabolismo intermedirio antes de exercerem a sua aco carcinognica.
Na fase II intervm enzimas como as glutationas S-transferases e as
212
N-acetiltransferases que catalizam, por conjugao, a desintoxicao de

produtos intermedirios genotxicos originados na fase I (Fig. X.3).
Um dos objectivos dos estudos destas enzimas em associao com a
ocorrncia de determinadas manifestaes adversas ou doenas, consiste em
determinar a constelao de gentipos mais favorvel para a proteco de
um indivduo face a determinado factor ambiental e a que aumenta a sua
susceptibilidade.
Genotxico
P450 (activao)
Fase I
Leso do DNA
(mutao)
Metabolito
GSTs, NAT2
(conjugao, acetilao)
Fase II
Molculas hidrossolveis
Excreo
Fig. X.3 Fases do metabolismo de um genotxico.
Benzo(a)pireno
(pr-carcinogneo)
P450 (activao)
BP-OH
BP-7,8-DIOL
P450 (activao)
BP-7,8-DIOL-9,10-EPOXIDO
Conjugao com glutationa
Ligao ao DNA
Excreo
Mutaes-protooncogenes
e/ou antioncogenes
Cancro
Fig. X.4 Metabolismo do benzo(a)pireno e cancro.
213
3.1.1. CITOCROMO OXIDASE P450
Nos mamferos, o sistema do citocromo P450 (CYP450) uma superfamlia multignica complexa constituda por 10 famlias (num nico organismo
exprimem-se mais de 30 genes CYP450). O nmero elevado de isoenzimas
da superfamlia do CYP450 ter resultado da enorme quantidade de

compostos qumicos diversos a que os mamferos esto expostos, nomeadamente atravs da alimentao, e que tm de ser metabolizados e/ou
eliminados para proteger o organismo. Quase todas as famlias de enzimas
do CYP450 mantm a capacidade de incorporar um tomo de oxignio
molecular no substracto, tornando a molcula mais hidroflica, o que facilita
o seu posterior metabolismo e excreo. Contudo, a oxidao mediada pelo
CYP450, a nvel dos tomos de carbono pode formar epxidos, e a nvel do
azoto e dos tomos de enxofre pode originar produtos txicos e mutagnicos.
Alm das reaces adversas de toxicidade devidas acumulao de
alguns frmacos por metabolismo deficiente, observadas em metabolizadores
lentos aps ingesto de quantidades posolgicas mdias, a falta de
metabolizao pode ser responsvel pela falta de resposta teraputica quando
a forma activa do frmaco resulta do seu metabolismo, como acontece com
a ciclofosfamida ou a procarbazina.
O metabolismo de substncias estranhas como mecanismo de desintoxicao de toxinas e carcinogneos ambientais mediado, por exemplo pela
debrisoquina hidroxilase codificada pelo gene CYP2D6, poder ainda originar
molculas carcinognicas (Fig. X.5). Algumas nitrosaminas especficas do fumo
do tabaco so substractos para a debrisoquina hidroxilase que, ao serem
metabolizados, podem produzir metabolitos mutagnicos.
214
CYP2D6
CYP2D6
CYP2D6
CYP2D6
Gene activo
Gene activo
Gene inactivo
Gene inactivo
Carcinogneo
Pr-carcinogneo
Carcinogneo
Pr-carcinogneo
Inactivao
Metabolismo
Excreo
Carcinogneo
Acumulao
Acumulao
(activo)
(inactivo)
Risco
Proteco
Proteco
Risco
Fig. X.5 Diagrama demonstrativo das possveis correlaes entre exposio a carcinogneos ou
pr-carcinogneos, estatuto genotpico para o gene CYP2D6 que codifica a debrisoquina hidroxilase
e risco para o cancro.
Em relao susceptibilidade para o cancro, no indiferente o tipo de

gentipo presente num indivduo, podendo este facto justificar diferenas
interindividuais por exposio a uma mesma substncia (Fig. X.5). Assim, um
fentipo metabolizador activo vantajoso nos indivduos que contactam com
substncias carcinognicas (v.g., nitrosureias) que so metabolizadas e
excretadas numa forma no carcinognica, mas torna-se contraproducente
quando os indivduos contactam com molculas procarcinognicas (v.g.,
benzo(a)pireno) que, aps a hidroxilao, originam molculas carcinognicas.
Para os indivduos que contactam com este ltimo grupo de molculas, o
fentipo metabolizador activo poder estar relacionado com maior
susceptibilidade para determinada forma de cancro e o fentipo metabolizador lento ser uma forma vantajosa j que evitar a produo de molculas
carcinognicas (Fig. X.5). Passar-se- o contrrio se o contacto ocorrer com
uma substncia carcinognica que a metabolizao inactiva e excretada
nessa forma. Nestes indivduos, o fentipo metabolizador lento desvantajoso.
3.1.2. GLUTATIONA S-TRANSFERASES
As enzimas da fase II do metabolismo, como as glutationa S-transferases

(GSTs), catalizam, por conjugao, a desintoxicao de intermedirios
genotxicos originados na fase I (Figs. X.3 e X.4). So enzimas homodimricas
ou heterodimricas que se encontram em diversas espcies e esto presentes
em todos os rgos humanos, embora as suas concentraes sejam diferentes
de tecido para tecido.
As GSTs catalizam a conjugao da glutationa reduzida (GSH) com uma
grande variedade de compostos electroflicos, tornando-os solveis em gua,
entre os quais carcinogneos e drogas citotxicas, prevenindo, deste modo,
a ligao destes compostos ao DNA.
Nos mamferos, as GSTs so codificadas por uma famlia de genes que
compreende quatro classes citoslicas designadas por alfa, mu, pi e theta e
uma microssomal designada mic. A classe mu das GSTs engloba os genes
GSTM1, GSTM2, GSTM3 e GSTM4. O gene GSTM1 ocupa um locus no brao
curto do cromossoma 1 (1p13), para o qual concorrem trs formas allicas
designadas por GSTM1*0, GSTM1*A e GSTM1*B. O gentipo homozigtico
GSTM1*0/GSTM1*0 devido a deleo gnica responsvel pelo fentipo
null, correspondente a ausncia de actividade da enzima que codifica.
215
O gentipo GSTM1 null o mais frequente em vrias populaes.

As frequncias genotpicas podem divergir entre regies, seja pelo processo
de povoamento, pela agregao tnica ou por aco de factores ambientais
selectivos para determinado gentipo.
Foi demonstrado que os fumadores com fentipo null tm um risco
aumentado para desenvolverem cancro do pulmo, embora as concluses no
sejam consensuais. Os resultados contraditrios so frequentes nos estudos
da ecogentica dirigidos para a oncognese, j que frequentemente a
seleco das amostras da populao e as metodologias utilizadas para
caracterizar os polimorfismos so diferentes, a que se associa a variabilidade
interindividual e interpopulacional.
3.1.3. N-ACETILTRANSFERASES
216
As N-acetiltransferases tambm intervm na fase II do metabolismo

(Fig. X.3). So responsveis pela acetilao de grupos amino, hidroxil e sulfidril
de mltiplos compostos, em que se inclui um nmero elevado de arilaminas
carcinognicas.
O locus NAT, localizado em 8p22, compreende dois genes funcionais
NAT1 e NAT2 e um pseudogene designado NATP. O gene NAT2 o mais
frequente. reconhecido como o responsvel pela variao interindividual na
velocidade de acetilao tendo sido descritos vrios alelos. Quando o gentipo
homozigtico ou heterozigtico para alelos que codificam enzimas
funcionais constitui-se um fentipo acetilador rpido. Pelo contrrio, se o
gentipo homozigtico recessivo, observa-se um fentipo acetilador lento.
Em Portugal, cerca de 64% dos indivduos so acetiladores rpidos e os
restantes 36% so acetiladores lentos. A frequncia de acetiladores lentos e
rpidos varia quando se comparam diversas populaes ou grupos tnicos
(v.g., nos orientais, a frequncia de acetiladores lentos de cerca de 10%,
comparativamente com um valor mdio de 50% nos europeus).
3.2 DEFICINCIA DA G6PD E REACES ADVERSAS

O gene da G6PD est localizado em Xq28. bastante polimrfico,
havendo alguns alelos que codificam enzimas com actividade deficiente ou
mesmo nula. A deficincia em G6PD a deficincia enzimtica hereditria

mais comum. rara nos caucasianos, excepto na bacia do Mediterrneo,
onde cerca de 35% dos indivduos do sexo masculino apresentam uma
reduo da actividade enzimtica para 0% a 5%. Entre os indivduos de raa
negra do sexo masculino, atinge cerca de 20%, com uma actividade
enzimtica reduzida a cerca de 10% a 20%. De uma forma pouco intensa,
atinge 1% a 2% das mulheres negras.
A elevada frequncia com que se encontra o polimorfismo responsvel
pela deficincia ser devida vantagem selectiva resultante da resistncia
infeco pelo Plasmodium falciparum (malria) quando em heterozigotia.
A actividade deste gene importante para manter a integridade da membrana dos glbulos vermelhos, sobretudo quando ocorre exposio a agentes
oxidantes.
Nos portadores de deficincia para a G6PD h produtos medicamentosos que originam reaces adversas, como a primaquina e outras
8-aminoquinolonas usadas para tratar a malria, sulfonas, sulfonamidas, a
nitrofurantona, a fenacetina, anlogos da vitamina K. O uso da primaquina
pode originar, aps 2-3 dias de administrao, urinas escuras e baixa da
concentrao dos glbulos vermelhos e da hemoglobina devido hemlise
provocada por uma produo deficiente de NADPH. Nos casos mais graves
h urinas quase negras, fraqueza, dores abdominais, dores do dorso e
ictercia. A gravidade da anemia est relacionada com o menor ou maior grau
de deficncia da enzima. Estas mutaes que apenas se manifestam quando
os seus portadores contactam com determinadas substncias designam-se
mutaes condicionais.
3.3. SENSIBILIDADE SUCCINILCOLINA

A colinesterase srica (pseudocolinesterase) a enzima responsvel pelo
metabolismo, por hidrlise, da succinilcolina (suxametnio). Este frmaco
usado na anestesia para provocar o relaxamento muscular. Na ausncia de
colinesterase srica, a succinilcolina no inactivada em poucos minutos
como normalmente, e observa-se apneia prolongada.
A deficincia para a succinilcolina parece compaginar-se com uma
transmisso de natureza autossmica recessiva. possvel definir uma curva
217
trimodal, ocorrendo a condio homozigtica recessiva para a colinesterase

em 1/2.000 pessoas e a heterozigotia em cerca de 3% a 4% dos indivduos.
O gene est localizado em 3q26.1-q26.2 e evidencia heterogeneidade allica
acentuada.
3.4. METABOLISMO DA ISONIAZIDA

A isoniazida um frmaco utilizado como tuberculosttico.
O metabolismo da isoniazida processa-se por acetilao mediada pela enzima
N-acetiltransferase.
Nos indivduos acetiladores rpidos a eliminao da isoniazida varia entre alguns minutos e cerca de duas horas, enquanto que nos acetiladores
lentos se pode estender at 7-8 horas. Os indivduos acetiladores lentos,
devido persistncia de concentraes sricas elevadas durante um perodo
mais longo do que o esperado, tm uma maior probabilidade de
desenvolverem efeitos adversos resultantes da administrao de doses mdias
de isoniazida, de que se salienta uma polinevrite muito dolorosa das mos,
dos ps e das extremidades. Nos acetiladores rpidos as concentraes sricas
baixam rapidamente e, para alm da reduo do efeito teraputico, h um
risco elevado de toxicidade heptica, quando associada rifampicina,
observado nos japoneses e nos chineses.
3.5. HIPERTERMIA MALIGNA
218
A hipertermia maligna tem uma prevalncia de 1/20.000 pessoas sujeitas

a anestesia. cerca de trs vezes mais elevada nas crianas, comparativamente com os adultos. Embora evidencie caractersticas de heterogeneidade,
tem sido possvel identificar um padro autossmico dominante no seu modo
de transmisso. Um dos genes j identificado (gene do receptor da rianodina)
est localizado em 19q13.1-q13.2. Outros loci associados a hipertermia
maligna encontram-se em 17q11.2-q24 e 3q13.1.
A hipertermia maligna habitualmente desencadeada pela inalao de
halotano, sobretudo quando o relaxamento muscular foi obtido com
administrao de succinilcolina. Os sintomas parecem ter origem numa
perturbao dos canais de clcio. Esta perturbao origina um aumento

exagerado da concentrao de clcio ionizado no sarcoplasma, de que
resultam os sintomas respectivos. As crises caracterizam-se por febre elevada
podendo atingir 42,3 C, rigidez muscular, taquipneia e taquicardia, acidose
respiratria e metablica, cianose, edema cerebral e coma. A febre tem de
ser combatida energicamente e deve ser administrado dantroleno. Aps uma
crise, h sinais de rabdomilise, elevada concentrao srica da creatinacinase,
mioglubinria e insuficincia renal crnica. A mortalidade atingia cerca de
60 % dos casos antes do uso do dantroleno, tendo baixado para cerca de
10%. Nos sobreviventes, verificam-se danos graves a nvel cerebral e renal.
3.6. PORFIRIA AGUDA INTERMITENTE

A porfiria aguda intermitente uma doena de natureza autossmica
dominante resultante da deficincia de uroporfirinogneo I sintetase, uma
enzima envolvida na sntese do grupo heme. As crises cursam com dor abdominal, obstipao e perturbaes psiquitricas. Contudo, para que as crises de porfiria aguda intermitente se iniciem, h necessidade de contactar
com factores desencadeantes como o fenobarbital ou as sulfonamidas, duas
substncias usadas para fins teraputicos. Assim, embora seja uma doena
de natureza autossmica dominante, a penetrncia do gene depende do
contacto com o agente desencadeante.
3.7. ACATALSIA
A acatalsia uma situao rara que tem origem na deficincia em
catalase, uma enzima que degrada o perxido de hidrogneo. Entre a
populao japonesa, h uma frequncia aumentada para esta condio. A
transmisso de natureza autossmica recessiva e o gene localiza-se em
11p13.5-11p13.6. Caracteriza-se pelo desenvolvimento de lceras extensas
na cavidade bucal, devidas produo de perxido de hidrogneo por
bactrias (sobretudo os estreptococos hemolticos). As manifestaes spticas
orais atingem apenas metade dos portadores da deficincia.
219
Nos indivduos com acatalsia, mesmo em efraces ligeiras da mucosa

bucal, a produo de perxido de hidrogneo que no inactivado pela
catalase vai converter a hemoglobina em metahemoglobina. A anxia conduz
necrose dos tecidos envolventes da efraco inicial e formao de lceras
spticas extensas.
Nos indivduos em que os sintomas se exprimem em idades jovens, antes
dos 10 anos, pode-se desenvolver infeco dos maxilares e queda dos dentes.
A extraco de todos os dentes constitui, frequentemente, o tratamento para
esta doena, com a consequente cicatrizao das lceras.
3.8. PERSPECTIVAS FUTURAS

O avano do conhecimento no mbito da farmacogentica permite
antever a possibilidade de a prescrio de medicamentos vir a ser feita de
forma personalizada, recorrendo genotipagem por SNPs. Poder ainda
contribuir para o desenho e desenvolvimento de novas molculas com
finalidades teraputicas.
4. ECOGENTICA
A designao ecogentica foi usada pela primeira vez por Brewer em
1971. o ramo da Gentica que estuda a variabilidade das respostas
individuais geneticamente determinadas a agentes ambientais, procurando
identificar as razes e as consequncias dessa variabilidade perante um
mesmo agente. As diferenas interindividuais so devidas aos polimorfismos
220
genticos e a alelos mutantes raros.

Os factores ambientais so agentes primordiais na seleco dos
indivduos. Nestes factores incluem-se os produtos alimentares, os poluentes
ambientais, os txicos produzidos por fungos, bem como variados agentes
fsicos, qumicos e infecciosos. Os organismos desenvolveram sistemas
enzimticos polimrficos que procuram eliminar os efeitos txicos e corrigir
os efeitos mutagnicos dos factores ambientais (Tabela X.2).
Tabela X.2. Associaes entre factores ambientais, susceptibilidade gentica e doena

FACTOR AMBIENTAL
GENE DE SUSCEPTIBILIDADE
Ingesto de lcool
Colesterol
ADH, ALDH
Receptor das LDLs
Ingesto de favas, plen, naftaleno

Ingesto de leite
Ingesto de fructose
Galactose
G6PD
Lactase
Aldolase B
Galactose 1-fosfato
uridiltransferase
Associao a HLA-A3 e -B7
Polignica
1-antitripsina
Paraoxonase
Suplemento de ferro no po
Deficincia em cido flico
Fumo e poeiras
Paratio
DOENA/SINTOMAS
Alcoolismo
Xantomas, xantelasmas, aterosclerose,
enfarte do miocrdio precoce
Favismo, anemia hemoltica
Hipolactasia: intolerncia lactose
Intolerncia fructose
Cataratas, atraso mental, cirrose
Hemocromatose
Defeito do tubo neural
DPOC
Intoxicao
DPOC doena pulmonar obstrutiva crnica.
A frequncia dos polimorfismos genticos humanos evidencia uma

grande variabilidade, quando se comparam diversas populaes, no que
respeita a variveis como a localizao geogrfica e a etnia. Esta variabilidade
tradutora da adaptao ao meio e conflui na combinao dos alelos que,
ao longo das geraes, se constituiram no fundo gentico mais favorvel para
os membros de uma determinada populao poderem lidar com os factores
ambientais, em condies que assegurassem a melhor capacidade biolgica
para a reproduo.
Face a um determinado factor ambiental, os membros de uma populao
podem estar em equilbrio, em equilbrio condicional apresentando
susceptibilidade acrescida para desenvolverem doena ou serem
hipersusceptveis. Os indivduos com hipersusceptibilidade tm uma elevada
probabilidade de desenvolverem doena (em comparao com os outros
grupos populacionais), para exposies ambientais curtas e de baixa
intensidade a substncias txicas ou poluentes ambientais. Na determinao
dos resultados observados para o par indivduo/meio interagem factores:
que aumentem a concentrao de substncias biologicamente activas
no local activo;
que aumentem a reaco de substncias qumicas com as molculas
alvo no organismo e que originem uma resposta;
que promovam o desenrolar da srie de etapas que medeiam entre o
incio da reaco orgnica e as manifestaes de doena.
221
Com este enquadramento e os meios e conhecimentos adequados, ser

possvel identificar os membros de uma populao com susceptibilidade
aumentada para determinada doena, quando so submetidos a um
determinado factor ambiental. Sendo a maioria das doenas comuns o resultado
da interaco entre factores ambientais ou factores genticos, oferece-se, assim,
ao mdico e ao epidemiologista, a possibilidade de actuar a nvel dos factores
ambientais e dos factores genticos, ou de ambos. Mesmo para algumas
condies monognicas possvel uma aco eficaz na preveno de doenas
actuando a nvel ambiental, como sucede com a FCU ou a galactosmia.
4.1. DIETA E HBITOS ALIMENTARES

4.1.1. LCOOL E ALCOOLISMO
222
No alcoolismo, os factores psicossociais parecem ser mais frequentes do

que os factores genticos. Os estudos inter-tnicos mostraram que os efeitos
desagradveis subsequentes ingesto de lcool so mais frequentes em
orientais, quando comparados com caucasianos, o que resulta de uma maior
acumulao de acetaldedo.
O acetaldedo o produto do metabolismo do lcool, a nvel heptico,
por aco da enzima desidrogenase alcolica (ADH). A ADH uma enzima
dimrica resultante da combinao de subunidades codificadas por trs genes
diferentes localizados em 4q21-24, ADH1 que codifica a subunidade e
expressa sobretudo nas fases precoces da vida fetal, ADH2 que codifica a
subunidade e ADH3 que codifica a subunidade .
O gene ADH2 pode apresentar uma forma variante, resultante de uma
mutao, que codifica uma subunidade 2 com uma actividade cataltica
muito maior do que a subunidade tpica.
A frequncia do alelo variante de ADH2 difere entre diversas etnias e povos,
indo de 5% a 10% para os ingleses, at mais de 85% nos japoneses, chineses
e outros povos com antepassados mongolides. Desta forma, compreende-se que
a velocidade com que os portadores da forma variante procedem ao metabolismo
do lcool para acetaldedo seja muito mais rpida do que as que se verificam
em portadores da forma allica tpica, dada a maior percentagem de dmeros
heterozigticos e homozigticos para 2 que produzem.
A desidrogenase do acetaldedo (ALDH) uma enzima homotetramrica

responsvel pelo metabolismo do acetaldedo em acetato que dar finalmente
CO2 e gua. A ALDH1 localiza-se no citoplasma e a ALDH2 nas mitocndrias.
Os estudos da actividade enzimtica da desidrogenase do acetaldedo,
realizados em orientais, mostraram o carcter polimrfico da ALDH2. Cerca
de 45% da populao chinesa (e uma frequncia que varia de 8% a 45%
nas populaes de ascendncia mongolide) no apresentam a isoenzima
ALDH2. Nos indivduos com esta deficincia (detectada sobretudo em orientais
e ndios da Amrica do Sul e ausente nos caucasianos e nos negros), uma
dose normal de lcool produz uma concentrao sangunea elevada de
acetaldedo, com o consequente rubor, disforia, elevao da temperatura da
pele, desconforto abdominal, fraqueza muscular, vertigens, elevao do ritmo
cardaco. Nesta perspectiva, a deficincia para esta forma da desidrogenase
do acetaldedo constitui um fentipo protector contra o alcoolismo, uma
verdadeira base gentica para nunca ingerir lcool.
4.1.2. HIPERCOLESTEROLMIA FAMILIAR
A hipercolesterolmia familiar tem uma prevalncia na populao geral

de 1/500 indivduos, sendo responsvel por cerca de 5% dos enfartes do
miocrdio verificados antes dos 60 anos de idade. devida a uma mutao
autossmica dominante a nvel do gene localizado em 19p13.1-p13.3 que
codifica o receptor de membrana para as LDLs. Foram descritas cerca de 150
mutaes diferentes, em que se incluem delees, inseres e mutaes
pontuais missense, nonsense e frameshift.
As LDLs transportam cerca de 70% do colesterol total do plasma sob a
forma de ster. A ligao das LDLs aos receptores da membrana
citoplasmtica leva sua endocitose, com remoo do colesterol da circulao
perifrica e posterior libertao de colesterol livre dentro das clulas.
O excesso de LDLs removido pelo fgado e excretado pela blis, aps
metabolizao.
Na condio heterozigtica, o nmero de receptores das LDLs nas clulas
dificulta a entrada do colesterol para dentro das clulas, e conduz sua
acumulao srica. Valores da ordem de 350 mg/dl (entre 270-550 mg/dl)
devem fazer suspeitar de hipercolesterolmia familiar, bem como a existncia
de xantomas nos tendes, em particular no tendo de Aquiles e nos
223
extensores das mos, de xantelasmas e de arcus corneae, visveis em cerca

de metade dos portadores da mutao a partir da terceira dcada da vida.
Habitualmente, no se observa obesidade. Em 50% dos homens heterozigticos, o enfarte do miocrdio ocorre em mdia cerca dos 50 anos e nas
mulheres cerca dos 60 anos. A manipulao da dieta para reduzir a ingesto
de colesterol baixa a sua concentrao plasmtica cerca de 10%-15%,
devendo uma maior reduo ser procurada com frmacos adequados (v.g.,
inibidores da 3-hidroxi-3-metilglutaril-CoA reductase) e acompanhada de um
estilo de vida saudvel com exerccio fsico regular.
A homozigotia para a mutao da hipercolesterolmia familiar rara (da
ordem de um por milho). Na subpopulao branca da frica do Sul, h uma
frequncia aumentada de indivduos com homozigotia. Nestes casos, os
valores do colesterol plasmtico podem atingir valores entre 600-1.200
mg/dl, mesmo na infncia, os xantomas so visveis antes dos 10 anos,
desenvolve-se estenose da vlvula artica por deposio de colesterol nas
valvas e ocorre doena coronria e enfarte do miocrdio em criana ou na
adolescncia. A morte por enfarte do miocrdio ocorre, em mdia, antes dos
30 anos de idade. A manipulao da dieta tem muito pouco significado na
reduo da concentrao do colesterol plasmtico, ficando como recurso
medicamentoso de eficcia limitada a administrao de frmacos que baixam
o colesterol plasmtico.
4.1.3. FAVISMO E DEFICINCIA EM G6PD
224
No que respeita deficncia em G6PD, podem-se verificar manifestaes

adversas em portadores expostos a componentes ambientais como a ingesto
de favas ou a inalao do respectivo plen, o naftaleno, o trinitrotolueno,
ou ainda uma infeco (sendo a mais comum a pneumonia bacteriana).
As manifestaes de favismo podem ocorrer, por vezes, com a ingesto
de uma nica fava. So sentidas ao fim de 5 a 24 horas, sob a forma de
mal-estar, febre, arrepios, palidez, dores de cabea, tonturas, vmitos e dores
lombares. As urinas escuras e a ictercia surgem ao fim de cerca de 24 horas.
Quando ocorre exposio ao plen, os sintomas podem ser visveis ao fim
de alguns instantes.
Face s diferentes presses de seleco ambiental, o polimorfismo para
a deficncia em G6PD comporta-se como um polimorfismo equilibrado
(a populao pode manter os vrios gentipos em propores estveis): concede vantagem quando em heterozigotia, como acontece com a proteco
contra o Plasmodium falciparum (malria) e desvantajoso em hemizigotia
ou homozogotia devido anemia hemoltica que provoca quando o portador
contacta com algum dos produtos ambientais referidos acima.
4.1.4. DIETA LCTEA E HIPOLACTASIA
A lactase a enzima que metaboliza o dissacardeo lactose e o

transforma nos monossacardeos glicose e galactose. codificada por um
gene localizado em 2q. A deficncia desta enzima uma situao rara nas
crianas, sendo devida a uma condio gentica de natureza autossmica
recessiva. A remoo da lactose da alimentao faz regredir os sintomas que
consistem em flatuncia, clicas abdominais, diarreia e irritao perianal.
Foi tambm identificada uma deficincia em lactase com incio na idade
adulta e, igualmente, de natureza autossmica recessiva, tendo o gene sido
localizado em 3q22-q26. A alterao poder dever-se a um processo de
regulao ps-traduo, uma vez que a enzima dos indivduos com baixa
actividade parece ser idntica enzima dos que tm uma actividade normal
para a lactase. O desenvolvimento dos sintomas verifica-se com a ingesto
de leite. A frequncia desta anomalia baixa nas reas geogrficas em que
o leite e os seus derivados constituem uma componente importante da
alimentao e mais elevada nas reas em que o recurso a este tipo de
alimentos pouco frequente.
4.1.5. INTOLERNCIA HEREDITRIA FRUTOSE
A intolerncia hereditria frutose uma condio autossmica recessiva

com uma frequncia na populao geral de cerca de 1/20.000. Deve-se a uma
mutao no gene que codifica a aldolase B, cujo locus se encontra em
9q21.3-q22.2. A actividade da aldolase B reduz-se a menos de 10% e a fructose-1-fosfato no metabolizada no fgado em D-gliceraldedo e fosfato de
di-hidroxiacetona.
Os sintomas de intolerncia fructose variam em funo da idade em
que foi introduzida na dieta e da quantidade ingerida. Na criana
desenvolvem-se vmitos, hepatomeglia, hiperbilirrubinmia, edemas e
225
convulses. As crianas de idade mais avanada, os jovens e os adultos

apresentam dores abdominais, vmitos, palidez, suores e, por vezes, coma
hipoglicmico que pode ser fatal.
Para alm da fructose, outros constituintes da dieta alimentar como a
sucrose tm idntico efeito (o metabolismo da sucrose origina fructose e
glicose). A sucrose e a fructose encontram-se numa grande diversidade de
alimentos (v.g., frutos, vegetais, doces, nozes, mel). A manipulao da dieta
em tempo til, de modo a evitar a ingesto de fructose, permite um bom
prognstico, com recuperao heptica e renal e sem sequelas neurolgicas.
4.1.6. GALACTOSMIA
A galactosmia heterognea. Pode ocorrer por deficincia numa de trs

enzimas envolvidas no metabolismo da galactose, sendo a mais frequente,
a galactose-1-fosfato uridiltransferase. A deficincia enzimtica no permite
o metabolismo da galactose em glicose. uma condio autossmica
recessiva que se manifesta quando h homozigotia. Tem uma prevalncia de
1/35.000 a 1/60.000. A alterao gentica est localizada em 9p13.
Durante a segunda semana de vida, os recm-nascidos com esta
deficincia apresentam-se sem aumento de peso, com vmitos, letargia,
ictercia e grande susceptibilidade para infeces por E. coli. O diagnstico
precoce da afeco, confirmado pela determinao da actividade enzimtica,
essencial para evitar o desenvolvimento de atraso mental severo, convulses,
cataratas e cegueira, cirrose e perturbao da funo renal. Nas crianas com
cataratas, a galactosmia deve ser uma das possibilidades a equacionar no
diagnstico diferencial. possvel a realizao de rastreio neo-natal pela
realizao do teste de Paigen (idntico ao teste de Guthrie para a FCU).
226
O tratamento consiste na eliminao do leite comum da dieta e o recurso

a um substituto sem galactose nem lactose, que se encontra disponvel no
mercado produzido base de hidrolizados de casena e de soja. Quando o
tratamento precoce, verifica-se desaparecimento dos sintomas. Contudo,
mesmo com tratamento adequado, nas crianas observa-se dificuldades de
aprendizagem e da fala e nas mulheres verifica-se quase sempre a falncia
ovrica.
4.1.7. SUPLEMENTO ALIMENTAR DE FERRO E HEMOCROMATOSE
Nos doentes com hemocromatose h uma maior absoro de ferro a

nvel do duodeno em comparao com a populao geral, para iguais nveis
de ingesto na dieta. Os sintomas consistem em dores articulares, aumento
da pigmentao da pele, fraqueza e mal-estar. Com o tempo, o aumento de
absoro acompanhado pela formao de depsitos intracelulares anormais
de ferro no fgado, corao, pncreas, glndulas endcrinas e articulaes.
O efeito txico verifica-se quando o contedo de ferro no corpo ultrapassa
as 15 gramas. Surge assim cirrose e, por vezes, carcinoma hepatocelular,
falncia cardaca e disrritmias, diabetes, melanodermia, amenorreia, perda da
lbido e artrite.
A hemocromatose uma doena gentica autossmica recessiva
frequente, com uma distribuio generalizada a todo o mundo e uma
prevalncia entre os caucasianos de 2-5/1.000. A localizao do gene em
6p21.3 foi definida pela ligao gnica ao alelo A3 do sistema HLA, em
relao ao qual foi determinada uma frequncia de recombinao menor do
que 1%.
A condio heterozigtica para o gene da hemocromatose, presente com
uma frequncia de cerca de 1/10, no provoca doena, conferindo mesmo
vantagem ao proporcionar uma maior absoro de ferro. Nas mulheres, a
condio homozigtica ser particularmente favorvel para compensar as
necessidades acrescidas de ferro decorrentes da gravidez, embora seja
desfavorvel para o homem.
Em pases como a Sucia em que adicionado ferro ao po, como
suplemento para combater a deficincia de ferro nas crianas e grvidas,
podem ser originados casos de hemocromatose mais cedo e mais graves nos
homens com homozigotia. No entanto, e numa perspectiva de sade pblica,
o risco acrescido para esta doena compensado pelos benefcios esperados.
227
4.1.8. DEFICINCIA EM CIDO FLICO E DEFEITOS DO TUBO NEURAL
Quando o tubo neural no se fecha completamente durante a quarta

semana do desenvolvimento embrionrio, originam-se defeitos do tubo neural. Os defeitos podem-se localizar na regio ceflica do embrio originando
anencefalia (em cerca de 40% dos casos) ou encefalocelo (5% dos casos),
ou na medula espinhal dando origem a espinha bfida (em 55% dos casos).
Em cerca de 80% dos indivduos com espinha bfida encontra-se tambm
hidrocefalia. Geneticamente, trata-se de uma condio multifactorial.
Quando na descendncia de um casal h um elemento com defeito do
tubo neural, o risco de recorrncia numa nova gestao de 3%, sendo que
o risco para a populao geral , nos Estados Unidos, de 1/1.000. A ingesto
diria de 0,4 mg de cido flico antes e durante a gravidez reduz em cerca
de 70% o risco de recorrncia de defeitos do tubo neural.
Saliente-se, contudo, que os valores da prevalncia e da recorrncia
podem variar entre diversas regies (e mesmo ao longo do tempo) em funo
das sub-populaes presentes e da dieta alimentar. Foi referido que os
indivduos com ascendncia celta tm um risco mais elevado,
comparativamente com os restantes membros da populao em que se
incluem. Os conhecimentos actuais recomendam que, como suplemento da
dieta, as mulheres em idade reprodutiva que planeiem engravidar, devero
tomar 0,4 mg de cido flico por dia.
4.2. POLUENTES AMBIENTAIS

4.2.1. FUMO E POEIRAS E DEFICINCIA EM 1-ANTITRIPSINA
228
A deficincia em 1-antitripsina tem uma prevalncia de 1/7.000

indivduos do Norte da Europa e de 1/3.000 em escandinavos. de natureza
autossmica recessiva. Tem origem em mutaes num locus que se encontra
em 14q32.1.
A 1-antitripsina um inibidor de proteases. Pode ocorrer uma
deficincia severa desta protena quando o locus apresenta homozigotia para
uma forma mutada do gene. Nestas condies, o risco de desenvolvimento
de enfisema pulmonar cerca de 30 vezes superior ao que observado na
populao geral. Para os indivduos heterozigticos que fumem e estejam
expostos a poluentes ambientais, h tambm um risco elevado de virem a
sofrer de doena pulmonar obstrutiva crnica. A susceptibilidade para as
doenas pulmonares devida aos baixos nveis sricos desta enzima que no
inactivam a elastase libertada pelos neutrfilos e permitem assim que aquela
destrua a elastina do parnquima pulmonar.
4.2.2. INSECTICIDAS
O paratio um dos componentes dos insecticidas usados na agricultura

e na indstria. inerte enquanto no oxidado no retculo endoplasmtico
do fgado e transformado em paraoxo. O paraoxo um composto
organofosforado com actividade anti-colinesterase. A nvel plasmtico,
hidrolizado por uma esterase, a paraoxonase, que o converte em p-nitrofenol.
Os dois alelos que codificam a paraoxonase so polimrficos e originam dois
fentipos enzimticos, um com actividade elevada e outro com baixa
actividade. A baixa actividade comporta-se como um caracter autossmico
recessivo.
Nos indivduos com reduzida actividade da enzima paraoxonase podero
ocorrer manifestaes de intoxicao pelo paratio, para nveis de exposio
que no provocam efeitos adversos visveis nos indivduos com actividade
enzimtica elevada.
229
CAPTULO XI
DIVISO CELULAR
1. INTRODUO
A diviso celular pode ocorrer por mitose ou por meiose. A mitose ocorre
nas clulas somticas e origina duas clulas-filhas idnticas. A meiose ocorre
nas clulas germinais presentes nas gnadas masculinas e femininas, dando
origem aos gmetas. Quase todos os gens envolvidos no controlo da mitose
(v.g., formao do fuso, replicao do DNA, segregao dos cromossomas),
esto tambm envolvidos no controlo da meiose.
A mitose est na base da proliferao celular, ou seja, do processo que
conduz a um aumento do nmero de clulas resultante de ciclos de diviso
celular completos. Em condies normais, os factores extracelulares determinam
o momento em que uma clula quiescente (em G0) entra em diviso celular e
tambm quando uma clula que est em fase G1 continua em ciclo celular
ou entra em quiescncia. Aps a entrada em fase S, os acontecimentos prprios
do ciclo celular que levam diviso da clula em duas clulas-filhas tornam-se, em grande parte, independentes dos factores extracelulares e passam a
depender de controlos activados a partir do interior da clula.
No estado normal, o comportamento das clulas regulado pela
programao gentica prpria de cada clula, mas tambm por um espectro
alargado de factores extracelulares, como sejam a natureza dos componentes
fsicos e qumicos do meio envolvente das clulas, a interaco entre as clulas
e entre as clulas e a matriz extracelular, a expresso de molculas de adeso
e a presena de factores de crescimento no meio envolvente.
231
O controlo do ciclo celular fundamentalmente idntico em todos os

seres eucariotas, desde a levedura ao homem. Genes humanos implicados
na diviso celular so semelhantes aos genes da levedura, o que traduz o
seu papel fundamental para os processos biolgicos e justifica a sua
consequente manuteno ao longo da evoluo.
2. CICLO CELULAR
232
Um ciclo celular engloba um perodo longo, designado por interfase, e

uma componente de curta durao correspondente a cerca de 10% do tempo
que dura um ciclo celular, designada por mitose (perodo M). O tempo que
demora um ciclo celular varia entre as clulas do embrio, do feto e do
perodo ps-natal. Sendo curto antes do nascimento, torna-se mais longo
aps o nascimento. Por outro lado, a durao de um ciclo celular completo
e dos perodos que o constituem tambm so variveis quando se comparam
clulas de diferentes tecidos e, para um mesmo tecido, em diferentes perodos
do desenvolvimento. Em tecidos com diferenciao terminal, as clulas no
se dividem (v.g., clulas nervosas). Noutros rgos, como o fgado, podem
ocorrer divises, se houver uma reduo do volume do rgo.
Quando h leso de um tecido, o ritmo proliferativo celular tambm se acelera
de forma a promover a reparao da leso, aps o que as clulas precursoras das
formas diferenciadas passam a dividir-se ao ritmo a que se dividiam antes da leso.
Tipicamente, o ciclo celular demora entre 10 e 30 horas, nos mamferos.
Um ciclo celular constitudo pelos perodos G1, S, G2 e M. Os perodos
S, G2 e M, em conjunto, requerem um perodo relativamente fixo de cerca
de 10 horas. A durao de G1 bastante varivel (Fig. XI.1).
O perodo G1 inicia-se logo aps o fim da fase M. Na fase G1 so sintetizados
diversos componentes celulares como membranas, organelos e ribossomas, que
praticamente duplicam o tamanho da clula. H ainda uma importante sntese de
protenas, entre as quais as enzimas housekeeping necessrias para a
subsequente replicao do DNA (v.g., timidinacinase, timidilatosintetase, diidrofolato
reductase). As histonas so sintetizadas na fase de transio entre G1 e S, sendo
a sua sntese utilizada frequentemente como indicador de entrada em fase S.
Neste perodo de sntese intensa de protenas, as clulas so muito sensveis
presena de inibidores da sntese proteica (v.g., puromicina).
Quando as clulas permanecem longo tempo em G1, sem avanarem

para a fase subsequente do ciclo, designam-se por clulas em G0, ou
quiescentes. Como exemplo da variabilidade de G1 refira-se que nas clulas
do fgado pode ter uma extenso de anos, em comparao com o que se
verifica nas clulas da medula ssea em que a fase G1 tem uma durao de
cerca de 20 horas e nas fases mais precoces das clulas embrionrias em que
a fase G1 est praticamente ausente (Fig. XI.1).
A deciso de uma clula permanecer em G0 ou entrar em diviso
depende de factores extracelulares (v.g., condies nutritivas) e celulares (v.g.,
tamanho celular suficiente para originar duas clulas). Na fase G0, as clulas
diminuem de tamanho, as protenas e o RNA degradados no so
rapidamente substitudos, a sntese de macromolculas mais lenta, a
actividade das enzimas e do transporte transmembranar so baixos e os
ribossomas raramente se apresentam como polissomas.
Na fase S ocorre a replicao complementar e semiconservativa do DNA.
O incio da fase S depende de factores citoplasmticos. O citoplasma de uma clula
em fase S induz a replicao do DNA do ncleo de uma clula no proliferativa.
G2
M
G1 (curta durao)
G1 (longa durao)
G1 (muito longa durao)
G0 (quiescncia)
Fig. XI.1 Ciclo celular e variabilidade da durao da fase G1.
233
Num cromossoma, h regies que replicam mais precocemente, como

os genes housekeeping e genes que replicam mais tardiamente, como as
regies centromricas de heterocromatina. Os cromossomas X inactivados por
lionizao so os ltimos a completar a replicao.
No fim da fase S, a quantidade de DNA de 4n, ou seja, o dobro da
quantidade normal da espcie humana que, sendo diplide, de 2n (Fig. XI.2).
As duas cpias de cada cromossoma ficam ligadas pelo centrmero (Fig. XI.3).
A durao desta fase corresponde a cerca de um tero da durao do ciclo celular.
A fase G2 pr-mittica, subsequente replicao do DNA. Durante esta
fase ocorre a sntese de RNA e de protenas.
G2
4N
S
2N
G1
M
G1 (ou G0)
Durao das fases
Fig. XI.2 Fases do ciclo celular. 2N nmero diplide de cromossomas; 4N nmero de cromossomas
no final da fase S.
Cromtides
Centrmero
234
Cromossoma
Cromossoma
aps replicao
Fig. XI.3 Esquema comparativo de um cromossoma antes e aps replicao.
3. MITOSE
A mitose tem uma durao curta, entre 30 e 180 minutos, e corresponde
fase em que a clula se divide em duas clulas-filhas, cada uma com uma
constituio cromossmica idntica da clula-me. Embora o processo
se desenrole em contnuo, foram diferenciados quatro estdios na mitose
profase, metafase, anafase e telofase. Durante a metafase, a sntese
proteca est reduzida ao mnimo e a sntese de RNA apenas ocorre no incio
da profase e no fim da telofase.
No incio da profase, os cromossomas duplicados na fase S comeam a
condensar-se e no final desta fase j possvel identificar, por microscopia
de luz, as duas cromtides-irms que constituem cada cromossoma. Tambm
durante a profase, os centrolos dividem-se e cada parte migra para os plos
da clula e tem lugar a formao do fuso. No final da profase, a membrana
nuclear e os nuclolos desaparecem.
Durante a profase, pode ocorrer recombinao homloga, ou seja, trocas
de fragmentos cromossmicos entre segmentos equivalentes das cromtides
irms (SCE, de sister chromatid exchange) (Fig. XI.4). Dado que correspondem a sequncias idnticas, estas trocas no tm consequncias, em termos
de informao gentica, para as clulas que resultam da diviso mittica.
A extenso e o nmero destas trocas varivel entre os cromossomas e
apenas podem ser detectadas se as clulas em diviso forem sujeitas a
procedimentos laboratoriais especficos. Estes procedimentos consistem em
adicionar bromodeoxiuridina (BrdU) ao meio de cultura. A BrdU, como
anlogo da timidina, vai ser incorporada no DNA durante a replicao do
DNA. A diferenciao que concede cromtide-filha em que est
incorporada, em termos de fluorescncia ou de colorao, em comparao
com a outra cromtide, permite detectar os locais em que houve trocas, pela
descontinuidade de colorao que se observa ao longo das duas cromtidesirms. O estudo de SCE pode ser til para detectar condies que estejam a
agredir seriamente o DNA. Nestes casos, o nmero de SCE observado por
mitose ser significativamente superior ao seu valor basal.
Durante a metafase, os cromossomas atingem o mximo de condensao
e so facilmente visveis por microscopia de luz (Fig. XI.5). o perodo mais
235
propcio para realizar o estudo citogentico. Os cromossomas organizam-se

na placa equatorial e ligam-se aos microtbulos do fuso pelo centrmero.
Se a ligao entre o centrmero de um par de cromtides e os microtbulos
no ocorrer, a migrao dos cromossomas ser afectada subsequentemente.
Na anafase, os centrmeros dividem-se e as cromtides-irms de cada
par separam-se e iniciam a migrao para plos opostos do fuso, como
cromossomas. A migrao normal dos cromossomas depende da diviso do
centrmero e da ausncia de perturbao no processo de despolimerizao
dos microtbulos. Se ocorrerem anomalias a estes nveis, o nmero normal
de 46 cromossomas, caracterstico da espcie humana, pode no se
reconstituir nas clulas-filhas.
236
Fig. XI.4 Placa metafsica em que as setas indicam algumas das sister chromatid exchanges presentes.
Fig. XI.5 Placa metafsica, aps bandeamento.
A telofase comea quando os cromossomas atingem o plo do fuso.

Seguidamente, inicia-se a descondensao da cromatina, reconstituem-se a
membrana nuclear e os nuclolos e tem lugar a citocinese (diviso do
citoplasma). Formam-se, assim, duas clulas-filhas, em que, normalmente, o
contedo cromossmico idntico ao contedo da clula que lhes deu
origem.
4. CONTROLO DO CICLO CELULAR

Na fase G1 ocorre o principal controlo do ciclo celular, bem como da
diferenciao celular. A transio entre a fase G1 e a fase S regulada a nvel
do ponto de restrio R1. Ultrapassado este ponto de restrio, o
controlo dos processos subsequentes principalmente intracelular. Na fase
S existe outro ponto de restrio designado por R2. Na parte final de G2,
est ainda descrito um ponto de restrio R3 que regula a entrada em
mitose (Fig. XI.6).
237
R3
R2
G2
S
R1
G1
G0
G1
G0
Fig. XI.6 Distribuio dos pontos de restrio R1, R2 e R3 ao longo do ciclo celular.
Os trs pontos de restrio R1, R2 e R3 requerem, para a sua

ultrapassagem, a convergncia de condies especficas, e so objecto de uma
regulao muito fina. A sua existncia observa-se noutras espcies alm da
humana, inclusive na levedura, espcie em que foram pela primeira vez
descritos.
A ultrapassagem dos pontos de restrio regulada por protenas
especficas designadas por ciclinas:
ciclinas G1, cuja aco permite a ultrapassagem do ponto de restrio
R1, localizado na parte final de G1;
ciclinas S, que actua no ponto de restrio R2, localizado na fase S;
ciclinas G2, que permitem ultrapassar o ponto de restrio R3,
localizado na transio G2/M.
238
Uma deciso essencial ocorre tambm na transio das clulas de G0

para G1, uma vez que permite que clulas quiescentes entrem em ciclo.
Em clulas em G0, sujeitas a um estmulo extracelular, ocorre a activao de
genes de activao precoce, cuja transcrio se verifica alguns minutos aps
a estimulao por factores de crescimento, sem prvia sntese proteica.
No grupo dos genes de activao precoce encontram-se os protooncogenes
FOS e JUN.
Alm das ciclinas, so ainda elementos-chave, no complexo processo que
o ciclo celular, as protenas p34 CDK. Estas protenas funcionam como
proteinacinases, quando em ligao com uma ciclina.
As ciclinas acumulam-se e destriem-se ao longo do ciclo celular, em

pontos definidos deste. Pelo contrrio, a concentrao de p34CDK mantm-se constante ao longo do ciclo celular.
A necessidade de formao de um complexo entre uma ciclina e a
protena p34CDK para que esta tenha actividade de cinase, e a distribuio
crtica desta actividade de um modo dependente do aumento da
concentrao de ciclinas especficas de determinadas fases do ciclo, sugerem
um papel relevante na progresso do ciclo celular para este complexo, em
relao com a ultrapassagem dos pontos de restrio.
5. MEIOSE
A meiose um processo de diviso celular em que, na sequncia de uma
nica replicao de DNA, se verificam dois ciclos de diviso do material
gentico e de diviso celular que terminam na formao dos gmetas.
A primeira diviso da meiose reducional e a segunda diviso equacional.
Os gmetas so clulas com um nmero haplide de cromossomas (n), ou
seja 23 cromossomas, comparativamente com o nmero diplide de
cromossomas (2n), ou seja 46 cromossomas, presente nas clulas somticas.
A primeira diviso da meiose tem uma profase complexa dividida em
cinco estdios: leptteno, zigteno, paquteno, diplteno e diacinese.
No estdio de leptteno, os cromossomas constitudos por duas
cromtides comeam a sua condensao.
Segue-se o estdio de zigteno, em que os cromossomas homlogos
emparelham e estabelecem pontos de contacto (sinapses) entre os dois
cromossomas de cada par (Fig. XI.7). Enquanto que o emparelhamento dos
pares de cromossomas de 1 a 22 se estende em toda a sua extenso, entre
os cromossomas X e Y apenas se verifica emparelhamento e recombinao
de DNA nas regies pseudo-autossmicas: no cromossoma Y a regio
telomrica PAR1 do brao curto e a regio telomrica PAR2 do brao longo;
no cromossoma X, as regies equivalentes. Nas regies pseudo-autossmicas
esto localizados genes envolvidos no crescimento.
239
1 diviso da meiose
(reducional)
2 diviso da meiose
(equacional)
Fig. XI.7 Fases da meiose e produo de clulas haplides. O esquema regista os acontecimentos
relativos a um par de cromossomas homlogos.
240
Aps o estdio de zigteno, os pares de cromossomas homlogos

evoluem para o paquteno caracterizado por uma elevada condensao e
troca de material cromossmico entre regies de DNA homlogas (crossing-over). A troca de informao durante o crossing-over, entre os cromossomas homlogos paternos e maternos de um indivduo, permite o aparecimento de novas combinaes nos cromossomas que vo ser transmitidos
descendncia atravs dos gmetas.
Aps o estdio de paquteno segue-se o diplteno em que se inicia a
separao dos cromossomas homlogos, ficando apenas ligados pelas pontes de quiasma (chiasmata), correspondentes aos locais em que ocorreu
crossing-over.
Tabela XI.1. Diferenas entre a mitose e a meiose

MITOSE
MEIOSE
Ocorre em todas as clulas somticas durante

toda a vida (com excepo das clulas que
entram em diferenciao funcional terminal)
Ocorre nas clulas germinais das gnadas: no

homem a partir da puberdade; na mulher
durante a vida intrauterina e entre a menarca
e a menopausa
Envolve um ciclo de replicao do DNA e uma

diviso celular
Envolve um ciclo de replicao do DNA e duas

divises celulares
Na telofase, as cromtides separam-se
Na telofase da 1 diviso, as cromtides mantm-se unidas pelo centrmero; apenas se separam

na telofase da 2 diviso
Inclui apenas uma diviso equacional
Inclui uma 1 diviso reducional e uma 2 diviso

equacional
Origina duas clulas-filhas, geneticamente

idnticas, cada uma com 2n cromossomas
Origina quatro clulas-filhas, cada uma com n

cromossomas; as clulas filhas so diferentes
devido recombinao gentica e segregao
independente dos homlogos
A recombinao gentica excepcional, pelo

que os cromossomas das clulas-filhas mantm
a mesma informao gentica
A recombinao gentica atravs do crossing-over a regra, pelo que se altera a informao

gentica para um mesmo cromossoma
Finalmente, na diacinese, os pares de cromossomas homlogos separam-se e os cromossomas atingem o mximo de condensao. A primeira diviso
da meiose prossegue com a metafase, a anafase e a telofase.
No final da primeira diviso da meiose, as duas clulas-filhas so portadoras
de 23 cromossomas, cada um constitudo por duas cromtides (Fig. XI.7).
A segregao dos cromossomas homlogos paterno e materno de cada par
independente da segregao dos cromossomas dos demais pares de homlogos.
A segunda diviso da meiose um processo de diviso equacional
idntico ao que foi descrito para a mitose. Ocorre separao das duas
cromtides e a formao de quatro clulas haplides por diviso das duas
clulas-filhas geradas durante a primeira diviso. Cada clula portadora de
23 cromossomas (Fig. XI.7).
A meiose assegura a reproduo sexuada das espcies em que se verifica,
ao possibilitar que as clulas dos descendentes de um casal sejam diplides como
as dos seus progenitores. Na ausncia de meiose, o ovo ou zigoto formado por
fecundao de um ovcito por um espermatozide teria 92 cromossomas, ou
seja uma tetraploidia, o que torna invivel o produto de concepo.
Quando se verificam anomalias durante a meiose podem resultar
embries poliplides ou aneuplides, podendo as aneuploidias ser ou no
compatveis com a vida, em funo dos cromossomas envolvidos.
241
CAPTULO XII
CARITIPO HUMANO
1. INTRODUO
O nmero de cromossomas e a sua morfologia so caractersticos de
cada espcie, podendo variar desde um cromossoma nico, como ocorre em
vrus e bactrias, at centenas em algumas plantas ou animais. Em 1956,
ficou estabelecido o nmero exacto de cromossomas da espcie humana e
em 1959 foi, pela primeira vez, correlacionada uma anomalia do caritipo
com patologia a presena de um cromossoma 21 supranumerrio (trissomia
21) foi associada ocorrncia de sndroma de Down.
Em 1960, dois avanos vieram revolucionar a citogentica o desenvolvimento de metodologias eficazes e reproduzveis para cultura de sangue
perifrico e a descoberta da fitohemaglutinina como mitognio para os
linfcitos. Em 1970, foi registado mais um novo e extraordinrio avano, em
particular para a citogentica tumoral, com a descrio das tcnicas do
bandeamento, a que se vieram juntar, em 1976, as tcnicas que possibilitam
a obteno de caritipos com bandeamento de alta resoluo.
O estudo das caractersticas dos cromossomas e das suas anomalias
constitui o objectivo da citogentica. As metodologias citogenticas tm como
finalidade parar a diviso celular em metafase ou prometafase e visualizar os
cromossomas atravs de microscopia de luz. Os pares de cromtides
observados resultam da condensao dos cromossomas duplicados durante
a fase S do ciclo celular.
243
2. CARITIPO HUMANO
A espcie humana tem um nmero diplide de cromossomas constitudo
por 46 cromossomas agrupados em 23 pares. Os cromossomas dividem-se
em autossomas (22 pares de cromossomas homlogos numerados de 1 a 22
por ordem decrescente de comprimento, embora o 22 seja maior do que o
21) e heterocromossomas ou cromossomas sexuais (cromossomas X e Y).
Os cromossomas X e Y so bastante diferentes, no que respeita sua
extenso e aos genes que possuem (Fig. XII.1).
Devido a variaes heteromrficas, os cromossomas homlogos podem
apresentar aumento ou diminuio do comprimento. Os heteromorfismos so
observveis por microscopia de luz e resultam de variaes da extenso de
regies de heterocromatina constitutiva presentes em indivduos da mesma
espcie. Como exemplo, refira-se a variabilidade heteromrfica da regio
distal do brao longo do cromossoma Y, de tal modo que este cromossoma
pode aparecer com uma extenso menor do que a do cromossoma 21 ou
maior do que a do cromossoma 18. Outras variaes heteromrficas
frequentes encontram-se nos satlites dos cromossomas acrocntricos 13, 14
15, 21 e 22, e nas regies centromricas dos cromossomas 1, 9 e 16.
244
Fig. XII.1 Esquema comparativo dos cromossomas X e Y, em metafase.
O centrmero (constrio cromossmica constituda por heterocromatina,

pela qual as cromtides esto ligadas) divide um cromossoma em brao longo
(q, de queue) e brao curto (p, de petit) (Fig. XII.2). A anteceder a letra
que simboliza o brao indica-se o nmero do cromossoma (v.g., 1q para
designar o brao longo do cromossoma 1). As extremidades dos cromossomas
designam-se telmeros.
A posio do centrmero num cromossoma permite classificar os
cromossomas em metacntricos quando o centrmero est aproximadamente
no meio do cromossoma, de tal modo que os braos tm um comprimento
quase igual (cromossomas 1,3,16, 19 e 20), submetacntricos se o
centrmero se situa entre o meio do cromossoma e uma das extremidades,
embora distante desta (cromossomas 2, 4-12, 17, 18 e X), acrocntricos se
o centrmero se encontra perto da extremidade, de modo que um dos braos
muito curto (cromossomas 13-15, 21,22 e Y) (Fig. XII.3). As formas
cromossmicas em que o centrmero est localizado numa das extremidades
designam-se por telocntricas e no se encontram normalmente na espcie
humana.
Telmero
Brao
curto
(p)
Centrmero
Eucromatina
Brao
longo
(q)
Heterocromatina
Telmero
Fig. XII.2 Esquema de um cromossoma aps bandeamento.
245
Recorrendo aos parmetros tamanho, posio do centrmero e presena

ou ausncia de satlites, possvel distribuir os cromossomas em sete grupos
designados pelas primeiras letras do alfabeto (de A a G). A proposta inicial
de distribuio dos cromossomas em funo do tamanho foi feita por Patau
em 1960. Assim, os cromossomas distribuem-se por (Fig. XII.3):
grupo A, inclui os grandes cromossomas metacntricos 1 e 3 (o
cromossoma 1 o maior dos cromossomas, com cerca de 10 m) e o
grande submetacntrico 2;
grupo B, inclui os grandes submetacntricos 4 e 5, dificilmente
individualizveis pelo tamanho;
grupo C, oferece as maiores dificuldades de identificao individual e
engloba os mdios submetacntricos (6,7,8,9,10,11,12); o cromossoma
X inclui-se tambm neste grupo devido s semelhanas com os
cromossomas maiores;
grupo D, engloba os cromossomas acrocntricos de tamanho mdio,
com satlites (13,14,15);
grupo E, junta os pequenos cromossomas 16,17 e 18, sendo o
cromossoma 16 metacntrico e os cromossomas 17 e 18 submetacntricos;
grupo F, inclui os pequenos metacntricos 19 e 20;
grupo G, inclui os pequenos acrocntricos 21 e 22, com satlites
e NORs (nucleolus organizer regions) e, por semelhana, o
cromossoma Y, embora este no tenha satlites nem NORs.
A indicao do nmero de cromossomas e dos cromossomas sexuais
(46,XY no sexo masculino e 46,XX no sexo feminino) designado por
caritipo. O caritipo permite tambm registar as aberraes cromossmicas
eventualmente observadas. O nmero de cromossomas seguido de vrgula
246
a primeira indicao do caritipo. O complemento cromossmico sexual

indicado de seguida. As eventuais alteraes observadas, utilizando
simbologia comummente aceite, so indicadas subsequentemente.
A apresentao sistematizada do conjunto dos cromossomas observados
numa placa metafsica ou pr-metafsica de acordo com as dimenses, a
morfologia e o padro de bandas, constitui o cariograma, embora a
designao mais comum seja caritipo.
13
14
15
19
20
21
22
10
11
12
16
17
18
Fig. XII.3 Caritipo humano normal com bandeamento, de um indivduo do sexo masculino (46,XY),
obtido a partir de linfcitos de sangue perifrico.
A nomenclatura dos cromossomas humanos obedece a critrios

uniformizados. Uma Comisso Permanente de Nomenclatura em Citogentica
Humana actualiza regularmente a terminologia e publica um relatrio
abreviadamente designado por ISCN (International System for Human Cytogenetic Nomenclature). A ltima actualizao do ISCN data de 1995.
3. INDICAES PARA O ESTUDO DO CARITIPO

O pedido de um caritipo deve respeitar os limites de resoluo da
microscopia de luz. Assim, alteraes genticas que envolvam menos de
4x10 6 bp, no so detectadas em estudos citogenticos baseados
exclusivamente na observao morfolgica. Na verdade, quando a patologia
presente est associada a alteraes gnicas, o caritipo convencional ou de
alta resoluo no contribuem para o esclarecimento da situao.
247
O pedido de um caritipo deve especificar a razo que determinou o seu

pedido e ser sempre acompanhado por uma histria clnica cuidada. So
indicaes para o pedido de um caritipo:
quando se suspeita de uma anomalia cromossmica;
em estudos familiares, quando est presente um rearranjo cromossmico
estrutural conhecido (v.g., translocao equilibrada);
na presena de anomalias congnitas mltiplas e/ou atraso de crescimento ou atraso mental;
quando esto presentes alteraes da diferenciao sexual;
quando h histria de abortos de repetio;
quando se verifica amenorreia primria ou menopausa precoce;
para apoiar o DPN, em casos de gravidez em idade avanada ou quando
se suspeite de alteraes cromossmicas;
quando se regista atraso mental com incidncia familiar em indivduos
do sexo masculino;
em neoplasias hematolgicas.
4. MTODOS DE ESTUDO DOS CROMOSSOMAS
248
Para realizar um estudo citogentico, podem ser utilizadas clulas

provenientes de diversos tecidos, como os linfcitos do sangue perifrico,
clulas de descamao de mucosas, fibroblastos obtidos por bipsia da pele
ou clulas da medula ssea. Para DPN, pode recorrer-se s clulas do lquido
amnitico, ao sangue do cordo umbilical ou aos fibroblastos das vilosidades
corinicas. Aps a morte, e durante vrios dias, as clulas do tecido
cartilagneo continuam vivas e a possibilitar o estudo do caritipo.
Os linfcitos do sangue perifrico so as clulas mais frequentemente
usadas para obteno de um caritipo. Recolhe-se cerca de 1 ml de sangue
venoso perifrico utilizando heparina como anticoagulante (500 UI de
heparina/1ml de sangue). O sangue diludo em meio de cultura adequado
e adicionada fitohemaglutinina. A adio da fitohemaglutinina, como
mitognio, essencial para estimular a proliferao dos linfcitos. A cultura
decorre durante 72 horas a 37 C. Quando se usam clulas da medula ssea,
no necessria a adio de mitognio nem proceder a uma cultura de
72 horas, uma vez que as clulas esto em proliferao. Na fase subsequente,

adiciona-se um produto antimicrotubular (colchicina ou colcemida), que se
deixa actuar cerca de uma hora, para que as clulas em diviso celular
interrompam o ciclo em metafase. Para obter caritipos de alta resoluo a
diviso celular parada em prometafase, para que os cromossomas estejam
menos condensados. A disperso dos cromossomas dentro do ncleo feita
suspendendo as clulas numa soluo hipotnica de KCl a 0,075 M.
Seguidamente, procede-se fixao com uma mistura de etanol e cido
actico nas propores de 3:1. A suspenso de clulas em fixador usada
para obter placas metafsicas (ou prometafsicas) deixando cair uma gota
sobre uma lmina de vidro. O processo de colorao pode ser variado
consoante os objectivos do estudo. As lminas podem ainda ser usadas para
desenvolver estudos que combinem a citogentica com mtodos moleculares
como a hibridao in situ, a hibridao genmica comparativa ou a PCR in situ.
Quando as clulas para estudo citogentico tem origem nas vilosidades
corinicas, o tempo de cultura pode variar entre um e 10 dias. Se forem
obtidas por amniocentese, o tempo de cultura varia entre sete e 15 dias.
5. BANDEAMENTO CROMOSSMICO
Os mtodos citogenticos convencionais permitem detectar alteraes
numricas dos cromossomas e alteraes estruturais que impliquem
modificao do tamanho dos braos dos cromossomas que estejam acima do
limiar de resoluo da microscopia de luz. Em 1970, Caspersson verificou que
cada cromossoma produz um padro de bandas especfico e estvel por
tcnicas adequadas, o que conduziu em 1971, num congresso internacional
em Paris, adopo das bandas para identificar cada cromossoma e as
alteraes estruturais que estejam dentro dos limites de resoluo da
microscopia de luz (Fig. XII.3). As tcnicas de bandeamento citogentico
definem bandas com colorao mais clara ou mais escura ou diferente
intensidade de fluorescncia, devido a descontinuidade na afinidade para a
colorao. Uma banda difere da banda adjacente devido composio de
bases nucleotdicas, ao tempo do ciclo em que ocorre a replicao,
conformao da cromatina e ao nmero de genes e de sequncias repetitivas.
249
As bandas permitem dividir um cromossoma metafsico em mltiplos

segmentos especficos, o que conduz sua identificao precisa e
observao de alteraes indetectveis pela avaliao do tamanho e do
comprimento dos braos. Os braos so divididos em regies tomando como
marcos o centrmero, o telmero e bandas caractersticas. A numerao das
regies (e das demais sub-divises dos braos) feita sequencialmente a partir
do centrmero para o telmero (v.g., Xp1, Xp2; Xq1, Xq2). Cada regio
subdivide-se, por sua vez, em bandas (v.g., Xq21 (que se l: Xq dois um),
Xq22, Xq23, Xq24, Xq25, Xq26, Xq27, Xq28). Uma banda utilizada para
assinalar o incio de uma regio constitui, por definio, a primeira banda
dessa regio.
O nmero de bandas observadas depende do estado de condensao
dos cromossomas. Nos cromossomas metafsicos, por mtodos citogenticos
convencionais, este nmero pode atingir as 450-550 bandas, enquanto que
nas preparaes de cromossomas prometafsicos, devido sua menor
condensao, o nmero de bandas de cerca de 800, permitindo a obteno
de caritipos de alta resoluo. Nestes cromossomas, possvel subdividir as
bandas em sub-bandas (v.g., Xq21.1, Xq21.2, Xq21.3) e estas em sub-sub-bandas (v.g., Xq21.31, Xq21.32, Xq21.33).
O bandeamento cromossmico, apesar de permitir uma localizao mais
precisa das alteraes estruturais um mtodo grosseiro quando as alteraes
so a nvel gnico. Considerando a resoluo de 800 bandas, por
cariotipagem de alta resoluo, e a existncia de 30.000 a 40.000 genes na
espcie humana, verifica-se que, em termos mdios, cada banda corresponde
a 50 genes. Sendo o tamanho mdio dos genes humanos de aproximadamente 104 bp, a deleo ou insero de algumas dezenas de genes pode no
ser detectada por estudo citogentico.
250
5.1. PADRES DE BANDAS

O padro de bandas de um cromossoma depende da tcnica usada e
do corante (Ex.: GTG - refere-se a bandas G, obtidas por tratamento com
tripsina (T), seguido de colorao com Giemsa (G). Foram definidos diferentes
tipos de bandas consoante os procedimentos de colorao utilizados.
As bandas G constituem o bandeamento standard. So produzidas por

digesto com tripsina e posterior colorao com Giemsa. As bandas escuras
alternam com bandas claras (Fig. XII.2). As bandas escuras parecem incluir
poucos genes comparativamente com as bandas claras, ser ricas em
nucletidos A-T e replicar tardiamente na segunda metade da fase S do ciclo
celular. As bandas claras contm a maioria dos genes.
As bandas Q foram as primeiras bandas a serem observadas. So bandas
detectadas por microscopia de fluorescncia, aps colorao com quinacrina.
Correspondem s bandas G descritas previamente pelo que a intensidade de
fluorescncia corresponde riqueza em AT.
As bandas C so produzidas pela colorao da heterocromatina constitutiva
com Giemsa, aps desnaturao com hidrxido de brio. Correspondem a DNA
altamente repetitivo que replica mais tardiamente durante a fase S do ciclo.
A heterocromatina constitutiva engloba as regies de cromatina condensada
pericentromricas e as regies de heterocromatina C dos cromossomas 1, 9,
16 e do brao longo do cromossoma Y, com heterocromatina constitutiva.
Este tipo de heterocromatina encontra-se em regies idnticas nos
cromossomas homlogos, de uma forma permanente e em todas as clulas.
As bandas N ou NOR englobam regies relacionadas com os organizadores nucleolares, ou sejam, as hastes dos cromossomas acrocntricos
(13, 14, 15, 21 e 22). Coram com nitrato de prata devido natureza
argentafim das protenas presentes.
As bandas R so obtidas por desnaturao com o calor antes da
colorao com Giemsa e so o inverso das bandas G ou Q: as bandas G
(escuras) so claras e as bandas G (claras) so escuras. As bandas escuras ou
fluorescentes so ricas em nucletidos C-G.
As bandas T esto localizadas nos telmeros e representam um subgrupo
das bandas R.
251
6. CITOGENTICA MOLECULAR
Actualmente, a citogentica inclui mtodos derivados dos conhecimentos
da biologia molecular. Por hibridao in situ com sondas especficas para
determinadas sequncias do genoma, possvel a localizao de regies dos
cromossomas ao nvel do gene ou de molculas de RNA at ao limite de

20 cpias de mRNA por clula. Assim, os mtodos moleculares tm vindo
a possibilitar ir alm do estudo de cromossomas metafsicos e detectar
anomalias cromossmicas em clulas interfsicas, particularmente quando
est em causa a deteco de alteraes numricas dos cromossomas.
Tm permitido ainda recorrer a cortes histolgicos de tecidos fixados e
includos em parafina, para detectar a presena de genes alterados, como
os oncogenes.
6.1. FISH
252
Na hibridao in situ, recorre-se a sondas de DNA especficas para

localizar determinada sequncia do genoma. Para que ocorra hibridao
necessrio que, previamente, se proceda desnaturao do DNA celular, aps
preparao dos esfregaos nas lminas. Quando a sonda marcada com
biotina, a presena ou ausncia da sequncia estudada detectada
recorrendo afinidade desta molcula pela avidina previamente marcada com
um fluorocromo. No caso da marcao ter sido feita com digoxigenina,
recorre-se a um anticorpo especfico, tambm marcado com uma molcula
fluorescente.
A hibridao in situ pode ainda ser feita com sondas de DNA directamente
marcadas com um fluorocromo (Fig. XII.4). Pode ser usada uma nica sonda,
ou serem usadas diversas sondas, cada uma marcada com um fluorocromo
diferente, tomando esta ltima tcnica a designao de FISH multiplex.
O poder de resoluo da FISH limitado a cerca de 2 a 3 Mb, em
cromossomas metafsicos. Contudo, em cromossomas interfsicos, a resoluo
possvel para valores acima de 50 kb. Se os cromossomas interfsicos forem
tratados de forma a libertar as fibras cromossmicas das molculas proteicas
associadas, o limiar de resoluo pode melhorar at valores da ordem de 5 kb.
Este ltimo procedimento designado como fiber FISH.
Com base na FISH, surgiu a colorao fluorescente de todos os cromossomas de uma placa metafsica, dando a cada cromossoma um espectro de
cores diferente. Esta tcnica, designada cariotipagem espectral, recorre a uma
combinao de sondas de DNA especficas para os diversos cromossomas,
marcadas com diferentes fluorocromos.
Fig. XII.4 Imagem de FISH obtida com sondas centromricas. Cada ponto luminoso corresponde a
um dos cromossomas do par de homlogos identificados pela sonda especfica.
As tcnicas de FISH podem ser usadas para detectar, por exemplo, a

deleo de um locus autossmico especfico, em clulas interfsicas. Neste caso,
em vez de dois pontos fluorescentes correspondentes aos dois alelos de um
gentipo, haver apenas um ponto. tambm muito til, para deteco rpida
de alteraes numricas dos cromossomas em clulas interfsicas, recorrendo
a sondas centromricas (Tabela XII.1). Com FISH multiplex e cariotipagem
espectral possvel detectar rearranjos cromossmicos complexos.
Tabela XII.1. Comparao entre os estudos por citogentica e por FISH

CITOGENTICA
Assenta em cultura celular

Clulas em metafase
Resultados ao fim de 12 a 15 dias, em mdia
Anlise cromossmica completa, numrica e
estrutural
FISH
Pode recorrer a clulas interfsicas ou mesmo

a ncleos de tecidos includos em parafina
Sondas de DNA marcadas com um fluorocromo
Resultados ao fim de 2 a 3 dias, o que permite
reduzir a ansiedade
Cromossomopatias numricas, microdelees,
translocaes especficas. Implica estudo
citogentico quando h alteraes
253
6.2. HIBRIDAO GENMICA COMPARATIVA

Na hibridao genmica comparativa, no necessrio que as clulas
do doente estejam em diviso. A tcnica assenta na hibridao competitiva
de uma mistura equimolecular de dois tipos de DNA marcados com
fluorocromos diferentes: o DNA do doente marcado, por exemplo, com um
fluorocromo verde e um DNA sem anomalias marcado com outra molcula
fluorescente (v.g., vermelho). A mistura aplicada sobre uma lmina com um
esfregao de cromossomas metafsicos normais, em condies de hibridao
in situ. Os dois DNA marcados competem, durante a hibridao, em toda a
extenso dos cromossomas metafsicos. Na ausncia de anomalias no DNA
do doente, as quantidades so iguais e a cr obtida uma mistura de verde
e vermelho, ou seja, os cromossomas coram todos de amarelo. Se o doente
for portador de trissomia ou de trissomia parcial, a quantidade de DNA
correspondente ser maior do que no DNA controlo. Neste caso, o
cromossoma ou a regio cromossmica em causa apresentar uma colorao
verde. Se no doente houver monossomia para todo um cromossoma ou uma
parte de um cromossoma, haver dfice de DNA com cor verde para a
hibridao competitiva e o cromossoma ou a regio cromossmica em causa
aparecer com colorao vermelha.
A hibridao genmica comparativa permite detectar delees ou
duplicaes de regies cromossmicas especficas. No detecta anomalias
estruturais equilibradas como as translocaes recprocas, inverses ou
inseres.
6.3. PCR IN SITU
254
Na PCR in situ, o procedimento semelhante ao que ocorre para amplificar

uma sequncia de DNA em soluo, com a diferena de que realizado na
superfcie da lmina. Para alm dos primers especficos para a sequncia de
DNA ou RNA a localizar e dos reagentes prprios para PCR, um dos nucletidos
adicionados marcado com biotina para posterior deteco do local onde se
iro acumular os fragmentos de DNA, se houver amplificao.
Com a PCR in situ tem sido possvel detectar, por exemplo, DNA viral
ou proviral, rearranjos do DNA e translocaes.
7. CARITIPO DE TECIDOS TUMORAIS

A citogentica dos tumores slidos apenas muito recentemente conheceu
desenvolvimentos significativos e uma expanso e importncia assinalveis
sobretudo a nvel diagnstico, uma vez ultrapassadas as dificuldades verificadas
na cultura das clulas. Tambm recentemente, a introduo de metodologias
moleculares, como a hibridao in situ e mesmo a PCR in situ, em combinao
com a citogentica, vieram possibilitar novas oportunidades para aprofundar
o conhecimento das alteraes genticas a nvel da clula neoplsica.
Devido fcil exequibilidade das tcnicas citogenticas conducentes
observao de alteraes cromossmicas em neoplasias hematolgicas, foi
possvel assinalar em diversos tipos destas neoplasias, correlaes com interesse clnico entre as alteraes citogenticas e o diagnstico ou o prognstico.
A translocao t(9;22)(q34;q11) que origina o cromossoma Filadlfia (Ph+),
presente em mais de 90% dos doentes com leucemia mielide crnica,
constituiu, em 1960, a primeira descrio de uma aberrao cromossmica
especificamente associada a uma neoplasia humana. tambm exemplo das
importantes alteraes citogenticas em neoplasias humanas do foro
hematolgico, a translocao equilibrada t(15;17)(q22;q11-12) presente em
mais de 90% dos doentes com leucemia mieloblstica aguda (M3).
As alteraes citogenticas associadas ao desenvolvimento de cancro
distribuem-se de um modo preferencial por diferentes cromossomas, regies
e bandas, provavelmente em relao com a presena, nessas regies, de
genes envolvidos na regulao da proliferao celular. Estas alteraes
cromossmicas podem ser primrias ou secundrias. Podem ainda apresentar-se como rudo citogentico.
As alteraes cromossmicas primrias ocorrem nas fases precoces do
desenvolvimento do tumor, esto geralmente ligadas sua gnese, so
habitualmente nicas e associam-se de uma forma especfica a um
determinado tipo de tumor como etapa essencial do seu desenvolvimento.
Refira-se, no entanto, que a identificao citogentica de uma aberrao
primria no implica que tenha sido obrigatoriamente a primeira mutao
envolvida na gnese de uma neoplasia, uma vez que podero ter ocorrido
previamente alteraes tumorignicas a nvel submicroscpico.
255
As alteraes cromossmicas secundrias so observadas numa fase mais

tardia do desenvolvimento do tumor, so frequentemente mltiplas e coexistem
com as alteraes primrias j presentes. Ainda que sem especificidade de
tumor, as alteraes secundrias no ocorrem ao acaso, podendo mesmo
estar relacionadas com o comportamento biolgico do tumor, em termos de
capacidade invasiva, de metastizao e de resposta teraputica. A sua
ocorrncia parece estar dependente das alteraes primrias presentes e do
tipo de tumor. Nas fases avanadas da evoluo tumoral, podem dominar
inteiramente o aspecto do caritipo.
O rudo citogentico encontra-se sobretudo em tumores slidos e
caracteriza-se por uma extrema variabilidade dos aspectos citogenticos, sem
predominncia de qualquer tipo de alterao.
8. ACRNIMOS E SMBOLOS USADOS EM CITOGENTICA
256
ace
add
b
cen
chi
cs
ct
ctb
ctg
del
der
dic
dir
Fragmento acntrico (sem centrmero)

Material cromossmico adicional de origem desconhecida
Quebra
Centrmero
Quimera
Cromossoma
Cromtide
Quebra em cromtide
Hiato (gap) em cromtide
Deleo
Cromossoma derivado
Cromossoma dicntrico (com dois centrmeros)
Directo; sem alterao de orientao das bandas relativamente
ao centrmero
dmin Double minutes, microcromossomas
dup Duplicao cromossmica
end Endoreduplicao
f
Fragmento
fra Stio cromossmico frgil
g
h
hsr
i
ins
inv
ish
mar
mat
mos
p
pat
Ph
pcc
pvz
q
qr
r
rea
rec
rob
s
sce
t
tan
ter
pter
qter
tr
upd
v(var)
:
::
;
Hiato (gap); regies cromossmicas no coradas ou muito

pouco coradas
Regies heteromrficas (1q, 9q e 16q)
Regio de colorao homognea
Isocromossoma
Insero
Inverso da posio das bandas relativamente ao centrmero
hibridao in situ
Cromossoma marcador (de origem indeterminada)
Origem materna
Mosaico
Brao curto de um cromossoma
Origem paterna
Cromossoma Filadlfia
Condensao cromossmica prematura
Pulverizao cromossmica
Brao longo de um cromossoma
Quadrirradial
Cromossoma em anel (ring)
Rearranjo
Cromossoma recombinante
Translocao robertsoniana
Satlite
Troca entre cromtides-irms (sister chromatid exchange)
Translocao
Translocao em tandem
Parte terminal de um cromossoma (telmero)
topo do brao curto
topo do brao longo
Trirradial
Dissomia uniparental
Cromossoma variante ou heteromrfico
Indica de... at...
Indica um ponto de quebra na descrio pelo sistema detalhado
Indica um ponto de quebra e reunio pelo sistema detalhado
Separa cromossomas ou partes de cromossomas diferentes
envolvidos em rearranjos estruturais
257
/
?
[]
+
*
,
Separa os diferentes caritipos identificados em mosaicos ou em

quimeras
Incerteza sobre a identidade do cromossoma ou da banda
indicada a seguir
N de clulas em cada linha celular
Quando colocado antes do nmero de um cromossoma ou da
letra correspondente a um grupo de cromossomas autossmicos
(1...22; ABCDEFG), indica que o caritipo apresenta mais uma
cpia completa desse cromossoma (Ex.: +21, significa que o
caritipo apresenta trs cpias do cromossoma 21). Quando
colocado aps o nmero (ou letra) correspondente a um
cromossoma, indica que esse cromossoma apresenta aumento de
uma parte do seu material (v.g., 46,XX,16q+, indica que o brao
longo do cromossoma 16 tem mais material gentico que a cpia
normal).
Quando colocado antes do nmero de um cromossoma ou da
letra correspondente a um grupo de cromossomas, indica a
ausncia de um cromossoma (Ex.: 45,XX,-11, indica um caritipo
45,XX, com um cromossoma 11 a menos). Quando colocado
aps o nmero ou letra correspondente ao cromossoma, indica
perda de parte desse cromossoma (v.g., 46,XY,5p-, indica perda
de parte do brao curto do cromossoma 5).
Asterisco. usado como um sinal de multiplicao na descrio
de cromossomas variantes ou heteromrficos.
Vrgula. Separa o nmero de cromossomas de um caritipo da
representao dos heterocromossomas (46,XX ou 46,XY). Separa
tambm os heterocromossomas da representao de anomalias
do caritipo, devido a alteraes do nmero ou da estrutura (v.g.,
47,XY,+21 ou 47,XX,+mar)
258
9. EXEMPLOS DE CARITIPOS
46,XX 46 cromossomas, caritipo normal do sexo feminino.
46,XY 46 cromossomas, caritipo normal do sexo masculino.
46,XY,9qh+ indivduo normal do sexo masculino, com material

cromossmico adicional na regio heterocromtica do brao longo
do cromossoma 9. Quando h deleo de material cromossmico
numa regio heterocromtica, esta ser indicada como h- (v.g.,
46,XY,Yqh-).
47,XXX 47 cromossomas, trissomia para o cromossoma X.
47,XXY 47 cromossomas, trissomia provocada pela existncia de um
cromossoma X supranumerrio (sndroma de Klinefelter).
45,X 45 cromossomas, monossomia provocada pela ausncia de um
cromossoma X (sndroma de Turner).
45,X/46,XX Mosaico constitudo por clulas monossmicas para o
cromossoma X e clulas normais com dois cromossomas X.
45,XY,-21 45 cromossomas, devido a ausncia de um cromossoma 21.
47,XY,+21 47 cromossomas, trissomia autossmica provocada por um
cromossoma 21 supranumerrio (sndroma de Down, devido a
trissomia livre).
46,XY,+mar caritipo com 46 cromossomas, apresentando um
cromossoma extra no identificado.
69,XXY Triploidia
92,XXXX Tetraploidia
Cromossoma em anel:
46,XY,r(13)(p11q34) ou 46,XY,r(13)(::p11q34::) Caritipo com 46
cromossomas, sendo o cromossoma 13 em anel, resultante da unio dos
pontos de quebra do brao curto (regio 1, banda 1) e do brao longo (regio
3, banda 4); os fragmentos distais, relativamente aos pontos de quebra, so
perdidos.
Deleo intersticial:
46,XX,del(3)(p12p14) ou 46,XX,del(3)(pterp14::p12qter) Deleo
intersticial, com pontos de quebra no brao curto do cromossoma 3, a nvel
da regio 1, banda 2 e da regio 1, banda 4, com perda do material
cromossmico localizado entre os dois pontos de quebra e reunio dos topos.
encontrada frequentemente como a nica alterao presente em carcinomas da mama.
259
Deleo terminal:
46,XY,del(9)(p13) ou 46,XY,del(9)(qterp13:) Caritipo com 46
cromossomas, em que um cromossoma 9 sofreu uma quebra a nvel da regio
1, banda 3, do brao curto, com perda do material cromossmico entre
p13pter. uma das alteraes estruturais observadas nos melanomas malignos.
Dicntrico:
45,XY,dic(9;12)(p11;p11) ou 45,XY,dic(9;12)(9qter9p11::12p1112qter)
Caritipo com 45 cromossomas, resultante da fuso do cromossoma 9 com
o 12, aps quebra a nvel dos braos curtos de cada cromossoma, perda dos
fragmentos oriundos dos braos curtos e fuso pelos pontos de quebra, com
manuteno dos dois centrmeros (dicntrico). Presente em casos de leucemia
linfoblstica aguda com melhor prognstico quando comparados com outras
alteraes citogenticas.
Duplicao:
46,XY,dup(2)(p12p22) ou dup(2)(pterp12::p22qter) Caritipo, em
que o segmento compreendido entre 2p12 e 2p22 foi duplicado. Se o
fragmento duplicado mantm a mesma orientao das bandas, relativamente
ao centrmero, pode-se escrever: 46,XY,dir dup(2)(p12p22). Se o fragmento
inverte a posio das bandas relativamente ao centrmero, escreve-se:
46,XY,inv dup(2)(p22p12).
Insero no mesmo cromossoma:
46,XX,ins(1)(q22p13p32) Traduz a insero de um fragmento do
cromossoma 1, no mesmo cromossoma. Ocorreram trs pontos de quebra: o
fragmento localizado entre os pontos de quebra 1p13 e 1p32 foi inserido na
banda 1q22, mantendo a orientao das bandas relativamente ao centrmero.
260
Insero noutro cromossoma:

46,XY,ins(2;1)(p21;q21q31)(1) Traduz a insero directa do fragmento
cromossmico delimitado pelas bandas 1q21 e 1q31, na banda p21 do
(1) Na insero, indica-se em primeiro lugar o cromossoma que recebe e em ltimo o que d,
independentemente do seu nmero, ao contrrio da notao usada para outros rearranjos em que
se indica em primeiro lugar o cromossoma com o nmero mais baixo. Os cromossomas sexuais so
tambm indicados em primeiro lugar.
cromossoma 2. Se o fragmento 1q211q31 for inserido com inverso da

posio das bandas em relao ao centrmero, a descrio do caritipo ser:
46,XY,inv ins(2;1)(p21;q31q21).
Inverso paracntrica:
46,XY,inv(10)(q11q21) ou inv(10)(pterq11::q21q11::q21qter)
Inverso paracntrica no cromossoma 10, com pontos de quebra em 10q11
e 10q21. a alterao citogentica mais caracterstica do carcinoma papilar
da tiride.
Inverso pericntrica:
46,XY,inv(16)(p13q22) ou 46,XY,inv(16)(pterp13::q22p13::q22qter)
Inverso pericntrica localizada no cromossoma 10. O fragmento localizado
entre os pontos de quebra 16p13 e 16q22 (inclui o centrmero) rodou 180 .
Esta inverso especfica da leucemia mieloblstica aguda M4, com eosinofilia.
Isocromossoma:
46,X,i(X)(q10) ou 46,X,i(X)(qterq10::q10qter) Um dos cromossomas
X constitudo por dois braos longos, estando ausentes os braos curtos.
46,XY,i(12)(p10) ou 46,XY,i(12)(pterp10::p10pter) isocromossoma
do brao curto do cromossoma 12 (presente em 80% dos tumores de clulas
germinais do testculo).
Stio frgil:
46,XY,fra(X)(q27) indivduo do sexo masculino com um stio frgil na
banda q27 (presente na sndroma do X-frgil).
Translocao recproca:
46,XY,t(9;22)(q34;q11) ou 46,XY,t(9;22)(9pter9q34::22q1122qter;
22pter22q11::9q349qter) Caritipo com 46 cromossomas, resultante de
translocao recproca de fragmentos entre o cromossoma 9 (quebra na
regio q3, banda 4; o fragmento translocado vai desde o ponto de quebra
at qter) e o cromossoma 22 (quebra na regio q1, banda 1; o fragmento
translocado vai desde o ponto de quebra at qter). Alterao citogentica
observada em cerca de 85% dos doentes na fase crnica da leucemia
mielide crnica.
261
Translocao robertsoniana:
45,XY,der(14;21)(q10;q10) ou 45,XY,der(14;21)(14qter14q10::21q10
21qter) Caritipo com 45 cromossomas, resultante de translocao por
fuso cntrica ou robertsoniana; os braos curtos so perdidos e os braos
longos dos cromossomas 14 e 21 fundem-se pelo centrmero. Caritipo com
translocao equilibrada. Em descendentes pode originar sndroma de Down.
262
CAPTULO XIII
ALTERAES CROMOSSMICAS NUMRICAS E ESTRUTURAIS
1. INTRODUO
As alteraes cromossmicas podem ser de natureza numrica ou
estrutural. Ao considerar estas alteraes, deve ser tido em conta o efeito
de dosagem gnica. Nas alteraes numricas, as consequncias so diversas
em funo do tamanho do cromossoma envolvido, do facto de ser um
autossoma ou um heterocromossoma e de ser um aumento ou uma
diminuio do nmero. Nas alteraes estruturais, a extenso em causa e a
regio alterada influenciam tambm os efeitos fenotpicos.
No que respeita dosagem gnica, saliente-se a natureza quantitativa
deste factor na etiologia das anomalias, j que no h alterao gnica
estrutural e produo de protenas qualitativamente diferentes. Assim, numa
trissomia, h aumento da concentrao do produto codificado pelos genes,
comparativamente com a concentrao do produto na condio euplide e,
nestas condies, o excesso de alguns desses produtos proteicos tem
consequncias patolgicas.
O efeito de dosagem gnica pode-se manifestar de diversas formas,
como sejam:
anomalias do desenvolvimento embrionrio, como foi demonstrado
para a expresso aumentada ou ectpica do gene hox em ratinhos,
levando a anomalias esquelticas e de outros rgos;
anomalias a nvel da adeso celular, com potenciais reflexos no
desenvolvimento de anomalias da morfognese (v.g., um aumento de
263
50% da concentrao das molculas de adeso das clulas neuronais

(N-CAM) traduz-se num aumento de quatro vezes da adeso celular);
perturbao da funo de molculas multimricas, como acontece com
as alteraes quantitativas que desequilibram a igual proporo das
subunidades e da hemoglobina e conduzem ocorrncia de
talassmias (v.g., talassmia minor por deleo de dois dos quatro
genes da globina );
desregulao da proliferao celular por aumento do nmero de
receptores e/ou de ligandos (v.g., a presena de uma cpia supranumerria do gene da eritropoietina em ratinhos transgnicos induz
o desenvolvimento de policitmia);
desregulao da proliferao celular por aumento do nmero de cpias
de molculas que funcionam como factores de transcrio, como
acontece no linfoma de Burkitt em associao com amplificao do
gene MYC.
2. ALTERAES NUMRICAS
264
A presena de um complemento cromossmico normal designa-se

euploidia e corresponde a 46 cromossomas na espcie humana, ou seja, um
nmero diplide de cromossomas (2n).
Podem ocorrer situaes de diploidia em que o complemento de 46
cromossomas tem origem exclusivamente no progenitor do sexo masculino,
uma condio designada por diandria, ou no progenitor do sexo feminino,
sendo esta condio designada como diginia.
Os casos de diandria (com homozigotia para todos os loci) resultam de
degenerescncia do pr-ncleo feminino e diploidizao do pr-ncleo
masculino. Em 96% dos casos, tm um caritipo 46,XX, j que um embrio
46,YY morre nas primeiras fases. A dispermia tambm pode justificar um
complemento cromossmico exclusivamente paterno em ovcito com perda
dos cromossomas maternos.
Quando duas ou mais linhas celulares provenientes de um nico zigoto
esto presentes num indivduo, a condio designa-se mosaico. O gentipo
pode ser o mesmo, embora epigeneticamente modificado, como acontece
no sexo feminino com os dois cromossomas X, aps a lionizao. Contudo,

o gentipo ou o caritipo pode ser diferente, como resultado de mutao
ou no-disjuno cromossmica.
De ocorrncia muito rara, as quimeras correspondem a casos em que
num indivduo se encontram clulas provenientes de dois zigotos diferentes.
Pode mesmo acontecer que uma linha celular seja 46,XY e a outra 46,XX, o
que conduz a uma diferenciao sexual anormal.
Na dissomia uniparental, um dos pares de cromossomas homlogos de
um complemento diplide tem origem num mesmo progenitor.
2.1. POLIPLOIDIA
A alterao numrica em que o nmero de cromossomas mltiplo de
n, mas diferente de 2n, designa-se poliploidia (v.g., 3n triploidia, 4n
tetraploidia). Os zigotos poliplides do origem a situaes de anasarca com
placentas volumosas e so letais precocemente, na fase embrionria ou fetal.
Excepcionalmente, o feto pode desenvolver-se at ao perodo peri-natal,
ocorrendo a morte aps alguns dias de sobrevivncia. Estes recm-nascidos
apresentam anomalias na generalidade dos rgos. A maioria das triploidias
ocorre devido fecundao de um ovcito por dois espermatozides
haplides e so responsveis por cerca de um sexto de todos os abortos
espontneos. Outras causas residem na fecundao de um ovcito diplide
por ausncia de reduo meitica, na no eliminao de um globo polar, ou
na fecundao por espermatozide diplide.
2.2. ANEUPLOIDIA
Se o nmero de cromossomas difere de 2n por um ou mais cromossomas,
sem ser mltiplo de n, a condio designa-se aneuploidia: monossomia
quando h falta de um cromossoma, trissomia ou tetrassomia quando h,
respectivamente, um ou dois cromossomas adicionais. Quando a diminuio
ou aumento de material cromossmico diz apenas respeito a uma parte de
um cromossoma designa-se, respectivamente, monossomia ou trissomia
parcial. Cerca de 50% dos abortos espontneos so causados por aneuploidias.
265
A aneuploidia pode resultar de no-disjuno meitica ou mittica, ou

de anomalias da mitose, como o atraso de migrao de um cromossoma para
o plo do fuso (lagging). No sexo masculino (Fig. XIII.1), quando ocorre a
no-disjuno na primeira diviso da meiose, num espermatcito tipo I,
origina dois espermatozides com duas cpias de um cromossoma e dois
espermatozides em que h um cromossoma a menos; quando ocorre na
segunda diviso da meiose, num espermatcito tipo II, origina um espermatozide com duas cpias de um cromossoma, um espermatozide com um
cromossoma a menos e dois espermatozides com o nmero normal de
cromossomas. No sexo feminino, a no-disjuno meitica pode originar um
ovcito com duas cpias de um cromossoma ou com um cromossoma a menos.
As monossomias completas originam alteraes de tal gravidade nos
embries que param o seu desenvolvimento. Embora haja referncia a casos
excepcionais de sobrevivncia de indivduos com monossomia 21, a monossomia
45,X a nica compatvel com a vida, sendo responsvel pela sndroma de
Turner. As observaes comparativas entre as consequncias de uma perda de
material cromossmico e do ganho de material cromossmico indicam que as
perdas tm consequncias mais graves do que os ganhos (comparem-se as
consequncias fenotpicas de uma trissomia com uma monossomia).
266
Fig. XIII.1 Esquema ilustrativo da no-disjuno durante a meiose no sexo masculino.

A no-disjuno durante a primeira diviso; B no-disjuno durante a segunda diviso.
A trissomia autossmica mais frequente nos recm-nascidos a trissomia

21 (47,XX,+21, ou 47,XY,+21), responsvel pela sndroma de Down
(Fig. XIII.2), seguida da trissomia 18 (sndroma de Edwards) e da trissomia
13 (sndroma de Patau). A gravidade das trissomias autossmicas est em
relao directa com o tamanho dos cromossomas envolvidos.
As aneuploidias dos heterocromossomas so menos severas do que as
aneuploidias autossmicas. Podem, teoricamente, ocorrer como 45,Y, 45,X,
47,XXX, 47,XXY, 47,XYY. A trissomia 47,XXY pode ter origem em no-disjuno
ocorrida na primeira ou na segunda diviso da ovognese ou na primeira diviso
da espermatognese. A trissomia 47,XYY resulta de no-disjuno ocorrida na
segunda diviso da meiose paterna. A monossomia 45,Y no compatvel com
a vida, devido ausncia dos genes presentes no cromossoma X. A monossomia
45,X compatvel com a vida, uma vez que, funcionalmente, faltam apenas os
genes correspondentes aos que no so inactivados num dos cromossomas X
de um caritipo normal 46,XX. A menor severidade das trissomias heterocromossmicas, seja na trissomia 47,XXY (sndroma de Klinefelter), seja na
trissomia 47,XXX, deve-se lionizao, ao reduzir as consequncias que
resultariam do efeito de dosagem gnica provocado pelo excesso de informao
devido ao aumento do nmero de cromossomas X. Podem ainda encontrar-se
polissomias do cromossoma X (48,XXXY; 48,XXXX; 49,XXXXY), condies em
que ocorre igualmente lionizao dos cromossomas X supranumerrios.
Na sndroma 47,XYY, a reduzida dimenso do cromossoma Y e o reduzido
nmero de genes que comporta limitam os efeitos de dosagem gnica.
267
Fig. XIII.2 Deteco de trissomia 21 por FISH. Em A, numa clula euplide, a sonda centromrica
apenas detecta dois cromossomas 21, enquanto que em B, se encontram trs pontos fluorescentes
correspondentes a trissomia para o cromossoma 21.
A no-disjuno mittica origina um mosaico. Os efeitos de um mosaico

so diversos, consoante a no-disjuno ocorra numa fase precoce do
desenvolvimento embrionrio, numa fase mais tardia ou mesmo num
organismo adulto. Se a no-disjuno ocorre na primeira diviso do ovo, uma
das clulas-filhas do embrio de duas clulas ter 2n+1 cromossomas e a
outra ter 2n-1 cromossomas, o que poder originar um embrio com todas
as clulas aneuplides se a aneuploidia for compatvel com a proliferao
celular, facto que depende dos cromossomas envolvidos. Se a no-disjuno
ocorre numa das clulas de um embrio de duas clulas, enquanto a clula
que se divide normalmente origina duas clulas filhas euplides, a outra clula
originar uma clula-filha trissmica e uma clula-filha monossmica.
O embrio resultante ser um mosaico constitudo por clulas euplides e
clulas aneuplides. Se a no-disjuno ocorrer numa fase mais avanada do
desenvolvimento embrionrio, a percentagem de clulas trissmicas no
embrio e no indivduo adulto pode ser de tal modo reduzida que no afecte
negativamente o fentipo.
Um mosaico com clulas euplides e clulas aneuplides (2n/2n-1) pode
tambm constituir-se quando ocorre atraso na migrao de um cromossoma
aps separao das cromtides filhas e no envolvido no ncleo quando
reconstruda a membrana nuclear. A perda de um cromossoma supranumerrio no embrio resultante de um ovo trissmico, dando uma linha
celular euplide a par de clulas triplides, constitui outra das formas de se
originar mosaicismo. Na maioria das vezes, o mosaicismo associado a
sndroma de Down, obedece a este ltimo mecanismo.
3. ALTERAES ESTRUTURAIS
268
As alteraes estruturais (delees, cromossoma em anel, duplicaes,

isocromossoma, inverses, translocaes, inseres) resultam de uma quebra
ou quebras num cromossoma e subsequente rearranjo diferente. A identificao
das alteraes estruturais beneficiou com o recurso a estudos citogenticos com
bandeamento, em particular com o bandeamento de alta resoluo.
Os rearranjos cromossmicos podem ser equilibrados e no-equilibrados.
No primeiro caso, no h perda ou ganho de material cromossmico em
quantidade ou qualidade que se reflicta em consequncias patolgicas,

enquanto que nos casos no-equilibrados h uma quantidade de material
cromossmico anormal a que se associa, habitualmente, um fentipo
anormal. Os portadores de rearranjos equilibrados presentes nas clulas
germinais podem ter descendentes com manifestaes patolgicas devido a
dosagem gnica anormal, por defeito ou por excesso, originada por formao
de gmetas com complemento cromossmico desequilibrado.
Para que ocorra uma alterao estrutural de um cromossoma necessrio
que haja pelo menos uma quebra cromossmica. As quebras dos cromossomas
podem ocorrer espontaneamente ou serem provocadas por agentes qumicos
ou fsicos como a radiao ionizante. Quando a quebra antecede a fase S do
ciclo e no ocorre reparao da alterao decorrente da quebra, a alterao
replicada passando a estar presente nas duas cromtides. Se a quebra se verifica
aps a fase S, apenas uma cromtide apresenta as consequncias da quebra.
Normalmente, as quebras cromossmicas so reparadas por enzimas que
restabelecem a continuidade do DNA. Contudo, quando a quantidade de
quebras muito grande por exposio anmala a agressores do genoma
como as radiaes ou as substncias radiomimticas, ou quando o indivduo
tem deficiente capacidade de reparao do DNA, pode no ocorrer o
restitutio ad integrum da sequncia cromossmica. Nestas condies,
podem perder-se fragmentos cromossmicos (deleo) ou haver lugar a um
rearranjo intra- ou intercromossmico.
As quebras cromossmicas podem ocorrer a nvel do centrmero ou dos
braos do cromossoma. A quebra transversal do centrmero separa os dois
braos curtos e os dois braos longos das cromtides, originando um
isocromossoma dos braos curtos e um isocromossoma dos braos longos.
As quebras no centromricas, a nvel dos braos, podem ser nicas ou
mltiplas. No caso de uma quebra nica, a partir de um cromossoma vai-se
originar um fragmento acntrico e um fragmento com centrmero.
Na mitose, o fragmento acntrico no se liga ao fuso e durante a anafase
no migra para os plos da clula acabando por se perder. O fragmento com
centrmero migra inserido no fuso. Se h duas quebras num cromossoma,
estas podem ocorrer no mesmo brao ou uma em cada brao englobando
o centrmero entre elas. As delees intersticiais, as inverses pericentromricas e as inseres intercalares so exemplos de alteraes estruturais que
resultam de quebras duplas.
269
Os retrotransposes so elementos mveis com capacidade para produzir

DNA a partir de sequncias de RNA por meio da transcriptase inversa e para
inserir as sequncias ao acaso num cromossoma. Desta forma, podem causar
crossing-over assimtrico e, consequentemente, delees e duplicaes
passveis de afectar a funo dos genes. Estas alteraes podem tambm
ocorrer por insero de sequncias repetitivas num gene, o que pode originar
emparelhamento meitico assimtrico e crossing-over assimtrico.
De uma forma sistematizada, as alteraes estruturais dos cromossomas
podem ser intracromossmicas e intercromossmicas. As alteraes intracromossmicas incluem as delees terminais e as delees intersticiais, o
cromossoma em anel, o isocromossoma, as inverses paracntricas e
pericntricas. Nas alteraes intercromossmicas incluem-se as inseres, as
translocaes recprocas e as translocaes robertsonianas.
Numa populao, a frequncia de anomalias clnicas devidas a alteraes
estruturais dos cromossomas menor do que a frequncia de anomalias devidas
a alteraes numricas. No entanto, em termos de recorrncia numa famlia, a
presena de uma alterao estrutural num indivduo normal heterozigtico (v.g.,
para uma translocao ou inverso) muito mais grave devido elevada frequncia
com que ocorre segregao aberrante de cromossomas, o que se traduz em risco
de recorrncia de anomalias fenotpicas clinicamente relevantes em vrios
indivduos da famlia, por duplicao ou perda de material cromossmico.
3.1. DELEES
270
Uma deleo consiste na perda de um fragmento acntrico de um

cromossoma dando origem a uma condio de monossomia parcial. O estudo
das delees foi muito til para a localizao de genes.
Se a extenso da deleo for menor do que 4x106 bp, no ser detectada
por microscopia de luz. As pequenas delees cromossmicas visveis por
microscopia de luz associada a mtodos de bandeamento, ou por estudos
moleculares como o FISH, so designadas como microdelees.
As delees podem ser terminais, como consequncia de uma quebra
do cromossoma, ou intersticiais, quando ocorrem duas quebras num
cromossoma e se perde o fragmento cromossmico localizado entre as
quebras (Fig. XIII.3). Se houver crossing-over assimtrico, pode ocorrer
deleo num cromossoma e duplicao no outro.
Deleo terminal
Deleo intersticial
Fig. XIII.3 Esquema ilustrativo das delees terminal e intersticial.
A deleo terminal de parte do brao curto do cromossoma 5 (46,XY,

del(5p)) associada sndroma do grito do gato foi a primeira anomalia
estrutural no equilibrada a ser descrita. Nesta sndroma, com uma frequncia
de 1/50.000 recm-nascidos, para alm do som caracterstico que lembra o
miar de um gato, produzido sobretudo nos dois primeiros anos de vida,
encontra-se atraso mental severo e do desenvolvimento, microcefalia,
alteraes faciais (face redonda) e doenas cardacas congnitas nas crianas
afectadas. A sobrevivncia at idade adulta rara.
Outros exemplos de sndromas provocadas por delees intersticiais
consistem nas sndromas de Angelman e de Prader-Willi (microdeleo
15q11-q13 detectada em cerca de 50% dos doentes por citogentica e em
mais cerca de 20% por estudos moleculares).
A sndroma de Prader-Willi caracteriza-se, no perodo neonatal, por
hipotonia muscular severa, dificuldade de mamar e hipogonadismo. A partir
do segundo ano de vida observa-se hiperfagia e obesidade. Os doentes tm
ainda atraso mental suave a moderado, perturbaes do comportamento,
olhos em amndoa, frontal proeminente, estreitamento do dimetro
bitemporal e mos e ps pequenos.
Na sndroma de Angelman observa-se atraso mental e motor severos,
hipotonia, movimentos aos arrances (jerky movements), riso paroxstico
desadequado, microcefalia, mandbula larga e boca aberta.
271
Na sndroma de Prader-Willi, a deleo ocorre no cromossoma herdado

do pai, enquanto que na sndroma de Angelman a deleo exclusivamente
encontrada no cromossoma de origem materna. Quando na sndroma de
Prader-Willi no est presente a deleo, verifica-se dissomia uniparental
materna. A associao entre dissomia e a existncia da sndroma indica a
presena de imprinting em genes localizadas na regio 15q11-q13.
A inactivao destes genes (por deleo ou imprinting) ser a responsvel
pelas alteraes observadas nesta sndroma.
Quando ocorre uma quebra cromossmica em cada um dos braos de
um cromossoma que envolve a perda dos telmeros, pode ocorrer a fuso
dos topos adesivos e originar-se um cromossoma em anel (v.g., 46,X,r(X))
(Fig. XIII.4). A perda de um cromossoma em anel frequente, originando
monossomia de algumas clulas e consequente mosaicismo. Na sndroma do
olho de gato encontra-se um cromossoma 22 em anel excedentrio
(47,XY,r(22)), o que causa apndices e/ou depresses pr-auriculares como
alterao mais frequente, pupilas verticais, atraso mental ligeiro a moderado,
anomalias cardacas e do tracto urinrio e nus imperfurado.
O risco de recorrncia de uma deleo negligencivel, a no ser que
esteja presente um rearranjo cromossmico num dos progenitores. Por esta
razo, na presena de um descendente com esta alterao estrutural, deve
ser realizado um caritipo aos pais para se realizar o aconselhamento gentico.
2
1
272
2 1
2 1
Cromossoma em anel
Fig. XIII.4 Esquema ilustrativo da formao do cromossoma em anel.
3.2. DUPLICAES
Uma duplicao consiste na existncia de duas cpias de um segmento
de um cromossoma (Fig. XIII.5). Se a estas duas cpias se adicionar a cpia
do outro cromossoma homlogo verifica-se que uma duplicao origina uma
trissomia parcial.
3
3
Duplicao
Fig. XIII.5 Esquema ilustrativo da duplicao de uma regio cromossmica.
O efeito fenotpico de um duplicao depende da extenso de material

cromossmico envolvido, no que se refere ao nmero de genes e ao nmero
de cpias. As duplicaes parciais tm consequncias menos graves do que
as delees parciais.
As duplicaes cromossmicas podem ocorrer na descendncia de um
indivduo com uma translocao recproca. Pela segregao meitica, um gmeta
pode herdar duas regies cromossmicas homlogas, uma no cromossoma
adequado e na posio original e a regio homloga supranumerria sujeita a
translocao e veiculada pelo cromossoma hospedeiro. O crossing-over
assimtrico durante a meiose tambm pode originar duplicao.
O risco de recorrncia baixo a no ser que esteja presente um rearranjo
(inverso ou translocao) num dos progenitores.
273
3.3. ISOCROMOSSOMA
No isocromossoma, o material dos dois braos tem uma constituio
igual, como uma imagem em espelho a partir do centrmero (Fig. XIII.6).
O outro brao perde-se.
2 2
11
11
2 2
2
3
Isocromossoma
Fig. XIII.6 Esquema ilustrativo da formao de isocromossomas.
274
Um dos mecanismos que est na origem dos isocromossomas consiste

na diviso transversal do centrmero na mitose ou na meiose, separando as
duas cpias dos braos curtos para um lado e as duas cpias dos braos
longos para outro. A translocao robertsoniana entre os braos longos de
cromossomas acrocntricos homlogos (v.g., translocao entre os dois
cromossomas 21) tambm origina imagens de isocromossoma.
O isocromossoma dos autossomas no acrocntricos letal devido
extensa deleo de material que origina (todo o material de um dos braos).
No entanto, o isocromossoma dos braos longos dos cromossomas acrocntricos no provoca alteraes fenotpicas visveis, na condio equilibrada (v.g.,
45,XY,i(21q)). O isocromossoma X compatvel com a vida. O mais frequente
o isocromossoma do brao longo do cromossoma X associado a sndroma
de Turner (45,X,i(Xq)).
O risco de trissomia para os descendentes de um progenitor com
isocromossoma dos braos longos de um autossoma acrocntrico de 100%.
Todos os gmetas produzidos sero nulissmicas (o que conduz a monomia
autossmica que letal) ou dissmicos (o que conduz a trissomia).
3.4. INVERSES
As inverses cromossmicas so relativamente frequentes, calculando-se
a sua frequncia em cerca de uma por cada 1.000 indivduos. Podem ser
encontradas como neo-mutaes ou serem herdadas ao longo de diversas
geraes de uma famlia.
Nas inverses, no h perda nem ganho de material cromossmico.
Ocorrem, quando se produzem duas quebras num cromossoma seguidas de
rotao de 180 do fragmento cromossmico delimitado pelas quebras.
Consequentemente, altera-se a ordem dos genes no cromossoma (ou das
bandas, quando citogeneticamente detectveis).
As inverses podem ser paracntricas ou pericntricas, sendo as
pericntricas as mais frequentes. Nas inverses paracntricas (Fig. XIII.7), as
duas quebras ocorrem num mesmo brao do cromossoma. Desta forma, o
rearranjo cromossmico no implica alterao da posio do centrmero, nem
da morfologia do cromossoma, embora se altere a sequncia de bandas no
segmento invertido. Nas inverses pericntricas (Fig. XIII.7), h uma quebra
em cada brao de um cromossoma, ficando o centrmero includo no
fragmento sujeito a inverso. Assim, habitual observar-se uma alterao
morfolgica bem aparente, inclusive da posio do centrmero.
2
2
Inverso paracntrica
Inverso pericntrica
Fig. XIII.7 Esquema ilustrativo das inverses paracntrica e pericntrica.
275
Embora as inverses no estejam associadas a alteraes patolgicas

significativas para os seus portadores, o risco de alteraes cromossmicas
na descendncia elevado, por produo de gmetas com desequilbrio
cromossmico. Uma vez que o emparelhamento de homlogos durante a
profase I da meiose implica alinhamento perfeito entre segmentos homlogos,
necessrio que ocorra looping da regio cromossmica com a inverso.
Assim, nas inverses paracntricas, se ocorrer crossing-over podem ser
produzidos cromossomas com recombinaes instveis sob a forma de
dicntricos com duplicaes e delees ou acntricos curtos que se perdem
em divises celulares subsequentes. Na descendncia, habitualmente s se
encontram os cromossomas normais ou com inverso equilibrada, dando
origem a crianas normais, dada a instabilidade das formas cromossmicas
anormais.
Nos casos de inverses pericntricas, forma-se igualmente looping,
mas o crossing-over leva produo de cromossomas com duplicaes e
delees nas regies cromossmicas distais em relao aos dois pontos de
quebra. Os efeitos fenotpicos na descendncia dependem do tamanho das
duplicaes e das delees e do cromossoma envolvido. Naturalmente que,
quanto mais prximos dos telmeros forem os pontos de quebra, maior a
probabilidade de sobrevivncia do feto, dada a menor extenso das alteraes
cromossmicas.
Nos casais em que um dos membros tem uma inverso pericntrica
podem ocorrer abortos espontneos devido a duplicaes e delees extensas
ou ainda o nascimento de crianas com alteraes fenotpicas associadas a
pequenas delees e duplicaes. A inverso pericntrica do cromossoma 1
tem sido encontrada em casos de perturbao severa da espermatognese.
Como excepo, refira-se que a inverso pericnctrica do cromssoma 9,
inv 9(p11q12), no origina alteraes fenotpicas na descendncia.
276
3.5. TRANSLOCAES
As translocaes fazem parte das alteraes cromossmicas mais
frequentes na espcie humana. Consistem na troca ou recombinao de
partes de cromossomas no homlogos. Habitualmente, no h perda de
material cromosmico ou a perda de modo que no afecta o fentipo do
indivduo portador de uma forma equilibrada de translocao. Podem-se

identificar trs tipos de translocao: recproca, robertsoniana e insercional.
Nas translocaes recprocas verifica-se o intercmbio de dois fragmentos
cromossmicos localizados em posio distal em relao a quebra ocorrida
nos braos de dois cromossomas no homlogos (Fig. XIII.8). Qualquer
cromossoma pode estar envolvido bem como qualquer dos braos.
No indivduo em que ocorre, estabelece-se um rearranjo equilibrado. Embora
a morfologia dos cromossomas derivados seja diferente da dos cromossomas
iniciais, geralmente no h efeitos fenotpicos desde que a quebra no afecte
a estrutura de nenhum gene. No entanto, a segregao meitica pode
originar gmetas com contedo cromossmico no-equilibrado responsvel
por alteraes fenotpicas em descendentes. Durante o emparelhamento
meitico formam-se geralmente quadrivalentes com segregao
cromossmica anormal durante a meiose. Por isso, registam-se infertilidade
e abortos repetidos nos indivduos portadores de translocao e os
descendentes podem ser afectados por trissomia parcial ou monossomia
parcial a que se associa habitualmente um fentipo com malformaes
congnitas mltiplas.
Para as translocaes recprocas compatveis com nascituros viveis, o
risco de recorrncia de portadores raramente superior a 20% a 30%, sendo
habitualmente menor. Quando as alteraes so extensas, o risco de
recorrncia mais baixo devido morte do embrio ou do feto e ao aborto
subsequente.
A translocao robertsoniana tem uma frequncia de cerca de um em
cada 500 indivduos. Ocorre entre cromossomas acrocntricos (13, 14 e 15,
21 e 22), seja entre os diversos cromossomas ou entre homlogos.
Na translocao robertsoniana, a quebra ocorre no centrmero ou
prxima deste nas sequncias repetitivas do brao curto (Fig. XIII.8).
Os fragmentos acntricos correspondentes aos braos curtos perdem-se em
subsequentes divises celulares e os braos longos dos dois cromossomas
fundem-se pelos topos originados pela quebra e originam uma nova forma
de cromossoma. Numa condio equilibrada, o caritipo ser 45,XX ou XY
com a translocao respectiva (v.g., a translocao mais frequente
45,XY,t(13q14q) ou a translocao 45,XX,t(14q21q).
O portador de uma translocao equilibrada tem um fentipo normal,
277
2
Translocao recproca
2
1
1
1
Translocao robertsoniana
Fig. XIII.8 Esquema ilustrativo das translocaes recproca e robertsoniana.
278
dado que nos braos curtos apenas se localizam heterocromatina constitutiva

e genes ribossomais cuja falta no se faz sentir porque os outros acrocntricos
tambm possuem este tipo de genes.
Nos indivduos com translocao robertsoniana equilibrada entre
cromossomas acrocntricos homlogos (v.g., 21;21 ou 13;13), todos os
gmetas produzidos so cromossomicamente anormais.
Na translocao insercional um fragmento cromossmico muda de local
dentro de um mesmo cromossoma ou entre cromossomas diferentes (Figs.
XIII.9 e XIII.10). Para que se verifique entre dois cromossomas necessrio
que ocorram trs pontos de quebra: dois num cromossoma para libertarem
um fragmento e uma terceira quebra noutro cromossoma que, ao abrir a
sequncia, permite a insero do fragmento translocado. Nestas condies,
h um risco elevado, da ordem dos 50%, de a descendncia ter anomalias.
13
14
15
19
20
21
22
10
11
12
16
17
18
279
Fig. XIII.9 Translocao. Caritipo 46,XX,t (1q;7q). A Placa metafsica aps bandeamento.
B Caritipo correspondente placa metafsica. Para melhor identificao dos cromossomas e das
anomalias presentes, os cromossomas foram emparelhados com a respectiva representao
esquemtica com bandeamento. Entre um dos cromossomas 7 e um dos cromossomas 1, observa-se
a translocao de um fragmento distal do brao longo.
Fig. XIII.10 Translocao detectada por FISH. Observa-se a translocao de um fragmento de um

cromossoma corado pela rodamina (vermelho) para um cromossoma de outro par que foi corado
com fluorescncia (verde).
280
CAPTULO XIV
CROMOSSOMOPATIAS
1. INTRODUO
As cromossomopatias dizem respeito a fentipos patolgicos determinados por alteraes cromossmicas numricas ou estruturais. Esto
geralmente associadas a malformaes congnitas mltiplas e a atraso mental. Em conjunto, as cromossomopatias so a causa de aproximadamente
metade dos abortos espontneos, sendo que estes ocorrem em cerca de 20%
das gravidezes conhecidas. Entre as alteraes cromossmicas mais frequentemente encontradas nos abortos espontneos contam-se as trissomias, em
cerca de 50% dos casos, e as monossomias X, em 20%. Nos recm-nascidos,
a prevalncia das cromossomopatias ronda os 0,6%.
As cromossomopatias dividem-se em autossmicas quando ocorrem em
algum dos cromossomas dos pares 1 a 22 e heterocromossmicas quando
dizem respeito a alteraes do cromossoma X ou Y (Tabela XIV.1).
Tabela XIV.1. Cromossomopatias mais frequentes

AUTOSSOMOPATIAS
Trissomia 21
(sndroma de Down)
Trissomia 18
(sndroma de Edwards)
Trissomia 13
(sndroma de Patau)
FREQUNCIA
1/660 RN
1/8.000 RN
1/10.000 RN
HETEROCROMOSSOMOPATIAS
FREQUNCIA
Monossomia X
(sndroma de Turner)
Trissomia XXY
(sndroma de Klinefelter)
Trissomia XXX
1/2.500 RN
sexo feminino
1/600 RN
sexo masculino
1/1.000 RN
sexo feminino
1/1.000 RN
sexo masculino
Trissomia XYY
RN Recm-nascidos.
281
As cromossomopatias autossmicas mais comuns em recm-nascidos so

a trissomia 21 (sndroma de Down), a trissomia 18 (sndroma de Edwards) e
a trissomia 13 (sndroma de Patau). No que respeita s cromossomopatias dos
heterocromossomas, as mais comuns so a monossomia X (sndroma de
Turner), a trissomia XXY (sndroma de Klinefelter), a trissomia XXX (sndroma
da super-fmea) e a trissomia XYY (sndroma do super-macho). Resultam
de no-disjuno meitica, na primeira ou na segunda diviso.
Tabela XIV.2. Ovos resultantes de no-disjuno meitica dos heterocromossomas no sexo

feminino (1 ou 2 diviso)
Sexo masculino (normal)

Gmetas X
Gmetas Y
Sexo feminino
(no-disjuno)
Gmetas
Gmetas XX
45, X
47, XXX
45, Y
47, XXY
No sexo feminino (Tabela XIV.2), o nmero de cromossomas X supranumerrios ou em falta nos gmetas independente do facto de a no-disjuno ter lugar na primeira ou na segunda diviso da meiose. No entanto,
quando a no-disjuno ocorre na primeira diviso, os dois cromossomas X
presentes em cada gmeta feminino so portadores das diferenas que se
encontram em cromossomas homlogos, em comparao com a identidade
completa dos cromossomas X quando a no-disjuno ocorre na segunda
diviso. Neste ltimo caso, os dois cromossomas do gmeta feminino resultam
de um par de cromtides.
No sexo masculino, as consequncias so diferentes, consoante a no-disjuno tenha lugar na primeira ou na segunda diviso da meiose, no que
282
respeita aos cromossomas X ou Y supranumerrios ou em falta. Quando

ocorre na primeira diviso da meiose (Tabela XIV.3), originam-se gmetas
masculinos XY e gmetas nulissmicos. Por fecundao de um ovcito
haplide normal podem-se originar embries com trissomia XXY ou com
monossomia X. Quando a no-disjuno ocorre na segunda diviso da meiose
(Tabela XIV.4), originam-se gmetas XX e YY que, aps fecundarem ovcitos
normais, originam embries com trissomia XXX ou com trissomia XYY.

masculino (1 diviso)
Sexo masculino (no-disjuno)

Gmetas XY
Gmetas
Sexo feminino
(normal)
Gmetas X
Gmetas X
47, XXY
47, XXY
45, X
45, X

masculino (2 diviso)
Sexo masculino (no-disjuno)
Gmetas XX
Gmetas YY
Sexo feminino
(normal)
Gmetas X
Gmetas X
47, XXX
47, XXX
47, XYY
47, XYY
2. TRISSOMIA 21 (SNDROMA DE DOWN)

A descrio clnica da trissomia 21 foi feita, pela primeira vez em 1866,
por John Langdon Down, razo pela qual tambm conhecida como
sndroma de Down. Em 1909, Shuttleworth estabeleceu a relao entre o
avano da idade materna e um aumento de risco para sndroma de Down.
Em 1959, Lejeune e colaboradores verificaram a associao entre a presena
de um cromossoma 21 supranumerrio e a ocorrncia desta sndroma.
A trissomia 21 a aneuploidia mais frequente numa populao, com
uma prevalncia de cerca de 1/660 recm-nascidos. Esta prevalncia
atingida em mulheres com gravidezes a termo a partir dos 31 anos,
aumentando de uma forma progressiva e muito significativa com o avano
da idade materna (Tabela XIV.6). Comparando diferentes raas humanas,
regies geogrficas e grupos sociais, no se verificam diferenas significativas
da incidncia.
Cerca de 0,5% dos embries tm trissomia 21. No entanto, a sua incidncia
maior no momento da fecundao do que ao nascer, calculando-se que cerca
de 70% dos embries com trissomia 21 abortem espontaneamente.
283
2.1. ASPECTOS CLNICOS

Sendo a trissomia 21, uma condio sindromtica com possibilidade de
se expressar por uma multiplicidade de anomalias, dever-se- salientar que
nenhuma das anomalias fsicas est presente em 100% dos doentes, que as
mesmas caractersticas se podem observar em diversas patologias com
organizao sindromtica diversa (Tabela XIV.5) e que, algumas das
caractersticas podem mesmo encontrar-se em indivduos normais.
Os recm-nascidos apresentam hipotonia muscular como manifestao
mais frequente, laxido articular e excesso de pele na parte posterior do
pescoo em 80% dos casos. Os reflexos esto diminudos em 85% das
situaes. A pele tem um aspecto caracterstico designado por cutis
marmorata, podendo ainda observar-se cianose dos dedos e dos lbios em
relao com a existncia de cardiopatia.
Tabela XIV.5. Autossomopatias: prevalncia e manifestaes clnicas

SNDROMAS
284
PREVALNCIA
MANIFESTAES CLNICAS
Sndroma
de Down
Trissomia 21
1/660
recm-nascidos
Sndroma
de Edwards
Trissomia 18
1/8.000
recm-nascidos
Sndroma
de Patau
Trissomia 13
1/10.000
recm-nascidos
Recm-nascido com hipotonia, excesso de pele na nuca, reflexos de

Moro diminudos, hiperflexibilidade das articulaes, face redonda
com perfil achatado, braquicefalia, orelhas malformadas, fendas
palpebrais oblquas para cima e para fora, epicantus, nariz pequeno
e achatado, boca aberta e protuso da lngua, palato alto, estreito e
arqueado, prega palmar nica, mos curtas e grossas, clinodactilia do
5 dedo da mo, baixa estatura, atraso mental, cardiopatia congnita,
atresia duodenal, susceptibilidade aumentada para infeces respiratrias
e leucemia.
Recm-nascido com hipotonia, seguida de hipertonia. Occipital
proeminente, dolicocefalia, orelhas malformadas e de implantao
baixa, boca pequena, micrognatia, esterno curto, dedos da mo em
flexo com cavalgamento do 2 dedo sobre o 3 e do 5 sobre o 4,
unhas hipoplsicas, p boto, calcanhar proeminente, onfalocelo,
cardiopatia congnita. Atraso mental grave, atraso de crescimento.
Sobrevivncia rara para alm dos 6 meses.
Holoprosencefalia, microcefalia, microftalmia, coloboma da ris, defeitos
do couro cabeludo, orelhas malformadas, fenda labial e/ou palatina
bilateral, polidactilia ps-axial das mos e dos ps, unhas hiperconvexas,
malformaes orgnicas mltiplas. Crescimento deficiente. Sobrevivncia
rara para alm dos 6 meses.
O choro do recm-nascido lembra o miar de um gato, devido a
hipoplasia da laringe, atenuando-se as semelhanas ao longo dos
primeiros meses. Microcefalia, face em lua-cheia, hipertelorismo,
epicantus, fenda palpebral inclinada para fora e para baixo, micrognatia,
malformaes cardacas congnitas, atraso mental severo, dificuldade
em aumentar de peso. A sobrevivncia at idade adulta rara.
1/50.000
Sndroma
recmdo miar do
-nascidos
gato (cri-du
chat)
46, XY, 5p- ou
46, XX, 5p-
A cabea tendencialmente pequena e oval, evidenciando braquicefalia

(alongamento do dimetro bi-parietal), e achatamento do occipital, as orelhas
so pequenas, com lobos pequenos ou ausentes. A face arredondada, com
perfil achatado em 90% dos casos, e as fendas palpebrais so oblquas para
cima e para fora em 80% dos casos, sendo frequente a presena de prega
no epicantus (Fig. XIV.1). Na ris, observam-se manchas de Brushfield, ou seja,
um ponteado de cr esbranquiada por falta de pigmentao. O nariz
pequeno e achatado. A boca apresenta-se aberta e frequente a protruso
da lngua (Fig. XIV.1). H ainda hipoplasia do maxilar inferior e o palato
alto, estreito e muito arqueado.
285
Fig. XIV.1 Imagens de um indivduo do sexo masculino com trissomia 21 por no-disjuno
(47,XY,+21), em diversas etapas da vida. A Aos 7 meses de idade; B Aos dois anos de idade;
C Aos 3 anos de idade; D Aos 12 anos de idade.
286
As mos so grossas e curtas, observa-se prega palmar nica unilateral

ou bilateral em 45% dos casos (uma situao que ocorre em 2% a 5% dos
indivduos normais, como o caso representado na Fig. XIV.2), os dedos so
curtos e observa-se hipoplasia da falange mdia do 5 dedo em 60% dos
doentes. tambm frequente a presena de clinodactilia do 5 dedo da mo.
Os ps so curtos e h um aumento do espao entre o 1 e o 2 dedos.
A displasia da pelvis est presente em 70% dos casos.
A cardiopatia congnita est presente em 40% a 60% dos casos.
A atrsia duodenal tambm uma anomalia frequente.
O atraso mental observa-se em todos os doentes, sendo uma das
manifestaes major na sndroma de Down. Nos doentes adultos, o QI mdio
de 24. A voz gutural e h dificuldade na articulao das palavras.
As crianas com trissomia 21 so amigveis e gostam de msica.
O crescimento das crianas com trissomia 21 lento, originando baixa
estatura, e a maturao ssea retardada. A laxido dos ligamentos e a hipotonia
associam-se s malformaes osteo-articulares, nomeadamente a luxao
recidivante da rtula e da anca. O estrabismo observado em cerca de 20%
dos doentes, para alm de outras anomalias oculares (v.g., cataratas, glaucoma).
A susceptibilidade para infeces respiratrias est aumentada e o risco para
desenvolver leucemia aguda prximo de 1% (10 a 20 vezes superior prevalncia
na populao geral, sendo a leucemia megacarioctica aguda a mais frequente).
A quase totalidade dos doentes com sndroma de Down que vivem para
alm dos 40 anos desenvolve manifestaes de doena de Alzheimer.
Este facto poder dever-se ao efeito de dosagem gnica devida trissomia
para o gene APP que codifica a protena precursora da amilide e est
localizado no cromossoma 21. A mutao deste gene est associada a casos
familiares de doena de Alzheimer.
A esperana de vida dos doentes menor do que na populao geral.
Para algumas das alteraes, a sobrevivncia depende da gravidade das leses
e da possibilidade de as reparar cirurgicamente, nomeadamente a nvel
cardaco, bem como do sucesso que os recursos actuais j permitem atingir
em termos de antibioterapia e de tratamento das leucemias.
Com o conhecimento do genoma, em particular do cromossoma 21 e das
funes e modo de actuar das protenas codificadas pelos genes localizados
neste cromossoma, possvel antever formas de interveno que possam
contrariar as deficincias de desenvolvimento, como sejam o atraso mental.
Fig. XIV.2 Mo de um indivduo normal, em que evidente uma prega palmar nica, unilateral.
2.2. ALTERAES CROMOSSMICAS

A confirmao do diagnstico implica sempre um estudo citogentico.
Cerca de 93% a 95% dos casos de sndroma de Down so devidos presena de um cromossoma 21 supranumerrio num dos gmetas (trissomia
livre), originado por no-disjuno meitica (caritipo 47,XX,+21 ou 47,XY,+21)
(Fig. XIV.3).
O cromossoma supranumerrio de origem materna em cerca de 90% dos
casos, ocorrendo a no-disjuno na 1 diviso da meiose em 75% das vezes
(em associao com uma diminuio da taxa de recombinao meitica).
Nos restantes 25%, ocorre na 2 diviso da meiose, no parecendo haver relao
com a taxa de recombinao meitica. A idade materna influencia significativamente a ocorrncia de no-disjuno (Tabela XIV.6). Em cerca de 5% a 7% dos
casos, o cromossoma 21 supranumerrio tem origem em no-disjuno durante
a meiose paterna. As anomalias durante a mitose so responsveis pela
ocorrncia do cromossoma supranumerrio, em 3% a 5% das trissomias 21.
287
13
14
15
19
20
21
10
11
12
16
17
18
22
Fig. XIV.3 Caritipo com bandeamento obtido a partir de clulas do lquido amnitico de um feto
do sexo masculino com trissomia 21 (47,XY,+21).
Tabela XIV.6. Idade materna e risco para sndroma de Down
288
IDADE (anos)
RISCO
IDADE (anos)
RISCO
15
20
25
26
27
28
29
30
31
32
33
34
35
36
1/1578
1/1528
1/1351
1/1286
1/1208
1/1119
1/1018
1/909
1/796
1/683
1/574
1/474
1/384
1/307
37
38
39
40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
50
1/242
1/189
1/146
1/112
1/85
1/65
1/49
1/37
1/28
1/21
1/15
1/11
1/8
1/6
Adaptado de: Cuckle et al., (1987). Br J Obstet Gynaecol, 94:387-402.
As translocaes robertsonianas esto presentes em cerca de 3% a 4%

das situaes de sndroma de Down, sendo translocaes de novo em 2%
a 3% (quase sempre de origem materna) e em 1% a 2% translocaes
herdadas de um dos progenitores em que se encontram de uma forma
equilibrada. Ocorrem geralmente entre um cromossoma 21 e um dos
cromossomas 13, 14 ou 15 (v.g., caritipo 46,XY, t(14;21) ou 46,XX, t(14;21)),
entre um cromossoma 21 e um cromossoma 22 (caritipo 46,XY, t(21;22) ou
46,XX, t(21;22)), ou ainda entre os dois cromossomas 21 (caritipo 46,XY,
t(21;21) ou 46,XX, t(21;21)). No h qualquer efeito da idade da me na
ocorrncia de translocao. A translocao de novo ocorre, provavelmente,
antes do crossing-over da 1 diviso da meiose.
O mosaicismo um acontecimento ps-zigtico (caritipo 47,XY,+21/
46,XY ou 47,XX,+21/46,XX). responsvel por cerca de 2,5% dos casos de
sndroma de Down. A origem mais comum de mosaicismo consiste na perda
do cromossoma 21 supranumerrio em algumas clulas de um embrio
inicialmente trissmico. Pode tambm ser devido a no-disjuno mittica de
um embrio que, partida, era cromossomicamente normal.
Na maioria dos casos de mosaicismo, as manifestaes da sndroma de
Down so clinicamente mais frustes do que nos casos em que a etiologia
de outra natureza, dada a presena de clulas normais e de clulas trissmicas.
A maior ou menor gravidade dos sintomas depende da percentagem de clulas
trissmicas, o que se interliga com o momento do desenvolvimento embrionrio
em que ocorreu a no-disjuno mittica. Se o desenvolvimento do mosaicismo
fr tardio pode, inclusive, verificar-se apenas em algum tecidos.
A partir de alguns casos de trissomia parcial do cromossoma 21, foi
definida uma regio crtica localizada entre 21q22.2 e 21q22.3, para a qual
a ocorrncia de trs cpias num indivduo ser responsvel pelas alteraes
fenotpicas, devido ao efeito de dosagem gnica.
289
2.3. RISCO DE RECORRNCIA E ACONSELHAMENTO

O risco de recorrncia para sndroma de Down, ou seja a probabilidade
de uma mulher voltar a ter um filho com a mesma condio em prxima
gravidez gerada dentro do mesmo casal, deve ser objecto de anlise especfica
para cada caso, tendo em considerao os factores etiolgicos.
290
Durante o aconselhamento gentico, o casal dever ser esclarecido sobre

os mecanismos subjacentes ao desenvolvimento da sndroma de Down, os
aspectos fenotpicos, o risco de incidncia para diversas idades maternas, os
mtodos de rastreio e de diagnstico disponveis e os riscos inerentes sua
prtica, bem como o risco de recorrncia quando tenha havido uma trissomia
21 na descendncia do casal, ou haja uma condio de portador de
translocao equilibrada num dos progenitores.
A amniocentese, para colheita de clulas destinadas realizao de
caritipo fetal e de lquido amnitico, habitualmente realizada s 15
semanas de gestao, embora possa ter lugar entre a 12 e a 14 semanas.
A bipsia das vilosidades permite obter clulas para estudo citogentico entre
a 9 e a 12 semanas de gestao. Para a deteco de alteraes numricas
dos cromossomas suficiente o estudo das clulas fetais por processos como
a FISH, mais rpidos do que a cariotipagem.
Em termos de risco para ocorrncia de trissomia livre em funo da idade
da mulher no momento do parto, devem ser tidos em considerao os valores
empricos enunciados no Tabela XIV.6, em que se correlaciona a idade materna
com o risco para ter um descendente com trissomia por no-disjuno. At cerca
dos 30 anos, o risco reduzido, situando-se abaixo de 1/1.000 recm-nascidos.
Nos casos de trissomia livre, no est indicada a realizao de caritipo
nos pais. Nestes casos, o risco de recorrncia para uma nova gravidez inferior a 1%, numa mulher at aos 35 anos, o que se poder dever a uma
hipottica predisposio para no-disjuno. A partir dos 35 anos o risco
muito semelhante ao indicado na Tabela XIV.6 para a populao geral.
Os indivduos do sexo masculino com trissomia 21 so estreis devido a
bloqueio da espermatognese durante a meiose. Quanto s mulheres com
trissomia 21, podem esporadicamente ter filhos.
Se houver uma translocao num descendente, obrigatrio o estudo
citogentico dos progenitores. Na ausncia de translocao em qualquer dos
progenitores, o risco de recorrncia dentro do casal inferior a 1%, j que
se trata de uma mutao de novo.
Nos casos em que se identifica uma translocao equilibrada num dos
progenitores, aps o nascimento de um filho com sndroma de Down, h risco
acrescido em subsequentes gravidezes dentro do casal. Est tambm indicado
fazer a pesquisa da alterao em familiares do membro do casal portador
da translocao equilibrada.
Teoricamente, um indivduo portador de uma translocao robertsoniana

equilibrada entre o cromossoma 21 e um cromossoma do grupo D (13, 14
ou 15) ou entre o cromossoma 21 e o cromossoma 22, pode gerar um tero
dos seus descendentes com sndroma de Down por trissomia 21 (v.g.,
46,XX,t(14q;21q), um tero de indivduos normais, embora portadores da
translocao equilibrada, e outro tero com um complemento cromossmico
normal (Fig. XIV.4). A possibilidade correspondente a monossomia para o
cromossoma 21 provoca aborto precoce. Contudo, o risco bem menor do
que o valor teoricamente enunciado, devido a aborto precoce. O sexo do
portador da translocao influencia o risco. Assim, ser de 2,5% se o
portador da translocao for o pai e de 10% a 15% se for a me. Quando
a translocao t(21;21), o risco de 100%, ou seja, todos os descendentes
tero sndroma de Down. Nos casos de translocao recproca envolvendo
os dois cromossomas 21, o risco de recorrncia de 10%.
Se h mosaicismo no descendente de um casal, devido a no-disjuno
meitica ou mittica, no h qualquer alterao cromossmica nos
progenitores. O risco de recorrncia para irmos do doente inferior a 1%.
A presena de mosaicismo gonadal num dos progenitores tambm pode
originar trissomia num descendente, com a agravante de ser responsvel por
um acrscimo do risco de recorrncia em outros membros da fratria.
Quando num casal h recorrncia da trissomia 21 livre, sendo os dois
membros do casal normais, dever-se- considerar a possibilidade de um deles
ser portador de mosaicismo gonadal (e eventualmente de outros tecidos).
Alis, o mosaicismo pode ser responsvel pela presena de algumas das
manifestaes fenotpicas da sndroma de Down, como a prega palmar nica,
em indivduos com inteligncia normal.
A indicao da amniocentese como mtodo de rastreio da sndroma de
Down em grvidas com 35 anos ou mais, apenas detecta cerca de 20% dos
casos, uma vez que este o valor aproximado da percentagem de casos
desta sndroma que ocorrem nestas idades, em relao ao total de casos entre
os recm-nascidos. Na verdade, a maioria regista-se em idades de gravidez
mais precoces, por ser nas idades mais precoces que ocorre a grande maioria
das gravidezes, ainda que o risco para sndroma de Down seja menor (Tabela
XIV.6).
291
Translocao equilibrada
Caritipo: 45,XX,t(14,21)
14 14q+21q
Normal
Caritipo: 46,XY
21
14
14
21
21
Gametognese
F1
F2
F3
F4
M1
M2
M3
46,XX
ou
46,XY
45,XX
ou
465,XY
46,XX,t(14,21)
ou
46,XY,t(14,21)
45,XX,t(14,21)
ou
45,XY,t(14,21)
(Fentipo normal)
(Letal)
(Sndroma de Down)
(Fentipo normal)
M4
Fig. XIV.4 Diagrama ilustrativo da formao de gmetas femininos (F1-F4) e masculinos (M1-M4) e
de possveis caritipos resultantes da sua conjugao, na presena de uma translocao equilibrada
t(14,21) no progenitor feminino.
292
2.4. RASTREIO NO SORO MATERNO DURANTE O PERODO FETAL

A necessidade de realizar estudos de rastreio para a trissomia 21 em
perdos da gravidez em que a amniocentese introduziria um risco de
abortamento muito superior ao risco para esta trissomia, conduziu ao
aperfeioamento de protocolos de rastreio baseados em doseamentos no soro

materno e na ecografia. Assim, o rastreio pode ser realizado durante o
primeiro trimestre de uma gravidez, entre a 10 e a 13 semana, embora
preferencialmente durante a 12 semana, pelo doseamento no soro materno
da PAPP-A (pregnancy associated plasma protein A), cuja concentrao se
encontra diminuda na trissomia 21, e pelo doseamento da fraco livre da
-hCG, cuja concentrao se encontra aumentada, em conjugao com os
resultados da medio ecogrfica da translucncia da nuca, que se encontra
aumentada nos casos de trissomia 21, por acumulao de lquido.
A computao dos dados obtidos permite calcular um valor de risco para
trissomia 21. Em funo do risco determinado poder estar indicada a
realizao de amniocentese e do subsequente estudo citogentico. Desta
forma, chega a ser possvel detectar cerca de 80% dos casos de trissomia 21.
No 2 trimestre de uma gravidez, tambm possvel realizar o rastreio
da trissomia 21 por mtodos no invasivos, recorrendo ao doseamento no
soro materno, preferencialmente colhido entre a 15 e a 16 semana, da
-fetoprotena, do estriol livre, da fraco livre da subunidade da gonadotrofina corinica ( -hCG livre) e da inibina A. A realizao conjunta destes
estudos (Tabela XIV.7) e a computao dos valores encontrados em conjunto
com outros parmetros como a idade permitem determinar o risco para
trissomia 21. Em funo do risco, poder estar indicada a realizao da
amniocentese, sendo possvel, quando o limiar de risco considerado de
1/380, detectar at 85% dos casos de trissomia 21, com uma percentagem
de falsos positivos de cerca de 1%.
Tabela XIV.7. Mtodos de rastreio de cromossomopatias

MOLCULA ANALISADA
SNDROMA
INIBINA A
-FETOPROTENA
-hCG LIVRE
ESTRIOL
Trissomia 21
(2 trimestre)
Aumento
(soro materno)
Aumento
(soro materno e
lquido amnitico)
Diminuio
(soro materno e
lquido amnitico)
Diminuio
(soro materno)
Trissomia 18
Trissomia 13
Diminuio
(soro materno e
lquido amnitico)
Diminuio
(soro materno)
Sem alterao
(lquido amnitico)
Diminuio
(soro materno)
Sem alterao
Sem alterao
Diminuio
293
3. TRISSOMIA 18 (SNDROMA DE EDWARDS)

A trissomia 18, ou sndroma de Edwards foi descrita pela primeira vez
em 1960. Ocupa o segundo lugar em termos de frequncia das malformaes
mltiplas mais comuns. A prevalncia da sndroma de Edwards de 1/8.000
recm-nascidos. No entanto, este valor representa apenas 5% dos fetos com
trissomia 18, j que cerca de 95% dos fetos abortam espontaneamente.
A frequncia desta sndroma trs vezes maior em recm-nascidos do sexo
feminino, comparativamente com os do sexo masculino (3:1). Metade dos
recm-nascidos morre durante a primeira semana de vida, sendo a
sobrevivncia rara para alm do ano de idade, devido gravidade e
multiplicidade das malformaes e incapacidade para se desenvolverem.
Os que sobrevivem para alm do ano de idade, numa percentagem entre 5%
e 10%, correspondem a crianas com atraso mental grave e com
incapacidade para andar sem apoios.
294
Durante a gravidez, frequente detectar-se poliidrmnios, placenta

pequena e, por vezes, uma artria umbilical nica. H geralmente atraso de
crescimento intra-uterino, movimentos fetais hipocinticos e podem ser
identificadas malformaes.
Os recm-nascidos evidenciam atraso de crescimento e hipotonia muscular seguida de hipertonia aps o perodo neonatal. A resposta aos estmulos
sonoros fraca e o choro igualmente fraco. Podem apresentar episdios
de apneia. A capacidade de suco fraca o que pode obrigar ao recurso a
uma sonda nasogstrica para proceder alimentao.
A pele redundante. O occipital proeminente, a sutura metpica est
aberta e h dolicocefalia (reduo do dimetro biparietal). As orelhas so
malformadas e de implantao baixa, as fendas palpebrais curtas, h
micrognatia, boca pequena com lbio superior curto e palato muito arqueado.
Podem ocorrer quistos bilaterais do plexo corideu.
Os dedos das mos encontram-se em flexo com cavalgamento do 2
sobre o 3 e do 5 sobre o 4, as unhas so hipoplsicas e pode haver
sindactilia. No p, destaca-se o calcanhar proeminente.
O pescoo fino e o esterno curto e com um reduzido nmero de

pontos de ossificao, as costelas e as clavculas so hipoplsicas, por vezes
com fragmentao. Na parede abdominal podem-se observar eventraes ou
hrnias inguinais ou umbilicais e diastasi recti devido a defeitos da musculatura.
A nvel dos rgos genitais observa-se criptorquidia no sexo masculino
e hipertrofia do clitris e dos grandes lbios no sexo feminino. Os ovrios
so hipoplsicos.
As malformaes orgnicas so mltiplas, salientando-se as cardiopatias
congnitas (sobretudo septais) e as malformaes gastrintestinais (v.g., m
rotao do clon, pncreas ectpico) mas tambm a segmentao anormal
dos pulmes, o rim ectpico e o rim em ferradura.
3.2. ASPECTOS CITOGENTICOS E ACONSELHAMENTO

A trissomia 18 causada, na grande maioria dos casos, pela presena
de um cromossoma 18 supranumerrio originado maioritariamente por nodisjuno meitica (Fig. XIV.5). A idade materna avanada est associada a
maior incidncia desta trissomia na descendncia.
A trissomia parcial do brao curto do cromossoma 18 e a trissomia parcial
do brao longo do cromossoma 18 podem tambm ocorrer. Nos casos de trissomia
do brao curto, as consequncias fenotpicas no so especficas e o atraso mental pode ser moderado ou inexistente. Comparativamente, as trissomias parciais
que envolvam todo o brao longo acarretam consequncias idnticas s descritas
para a trissomia livre. As trissomias para uma parte do brao longo so, em parte,
idnticas s que foram descritas para a trissomia livre ou so incaractersticas.
A translocao e o mosaicismo so tambm possveis como causa
etiolgica, embora rara. Nos casos de mosaicismo, a gravidade das
implicaes fenotpicas depende da percentagem de clulas trissmicas.
Nos casos de trissomia livre, o risco de recorrncia para futuras gravidezes
de cerca de 1% e no necessrio realizar estudo citogentico nos
progenitores. Nos casos em que encontrada uma translocao no recm-nascido, necessrio realizar o estudo citogentico nos pais, para despistar
a eventual presena de uma translocao equilibrada num dos progenitores.
A presena de translocao equilibrada implica um elevado risco de
recorrncia para futuros descendentes do portador da translocao.
295
13
14
15
19
20
21
22
10
11
12
16
17
18
Fig. XIV.5 Caritipo com bandeamento, obtido a partir de sangue do cordo umbilical de um recm-nascido do sexo masculino com trissomia 18 (47,XY,+18).
4. TRISSOMIA 13 (SNDROMA DE PATAU)

A trissomia 13, ou sndroma de Patau, foi descrita em 1960. Tem uma
296
prevalncia prxima de 1/10.000 recm-nascidos. No perodo intra-uterino,

a mortalidade muito elevada. A ecografia fetal cuidadosa pode evidenciar
anomalias do crebro, da face (malformaes do nariz, fendas, anoftalmia
ou sinoftalmia), dos membros (polidactilia), cardiopatias congnitas,
malformaes renais (hidronefrose, hipoplasia) e onfalocelo. Para alm dos
6 meses de vida, apenas sobrevivem cerca de 3%, sendo muito raro o
desenvolvimento at idade adulta. O atraso mental muito profundo.

Os aspectos fenotpicos mais caractersticos dos recm-nascidos consistem
em polidactilia ps-axial (dos dedos das mos ou dos ps) em combinao
com microcefalia, anomalias oculares, lbio leporino em 2/3 dos casos,
geralmente acompanhado de fenda esfenopalatina, e anomalias cardacas
e/ou renais. Os defeitos do couro cabeludo esto presentes em cerca de 50%
dos casos.
A holoprosencefalia a malformao mais grave da trissomia 13, estando
presente em 66% dos casos. Consiste numa falha da segmentao do crebro
embrionrio anterior na linha mdia (sagital) que afecta a formao dos
hemisfrios cerebrais, da segmentao transversal afectando a formao do
telencfalo e do diencfalo e da segmentao horizontal com perturbao
da formao dos bolbos pticos e olfactivos. A holoprosencefalia pode dar
origem a um crebro alobar (sem separao dos hemisfrios cerebrais e com
um nico ventrculo), hemilobar ou lobar. Uma das manifestaes mais graves
a ciclopia. Uma das manifestaes menos graves da holoprosencefalia
consiste na presena de um nico dente incisivo superior e um discreto
hipertelorismo.
Entre as malformaes severas do SNC pode-se encontrar ainda
hipoplasia do cerebelo, agenesia do corpo caloso, arrinencefalia (ausncia dos
tractos e dos bolbos olfactivos) e hidrocefalia. A surdez e a cegueira so
frequentes. Observam-se ainda convulses epilticas e dificuldades na
alimentao.
Para alm destas alteraes, h outras malformaes mltiplas e graves,
de que se salientam o alargamento da sutura sagital e das fontanelas, as
orelhas malformadas de implantao baixa e com apndices auriculares e a
displasia retiniana. So tambm frequentes, a criptorquidia no sexo masculino,
as malformaes cardacas em 80% dos casos, as malformaes gastrintestinais e renais. Na pele so frequentes os hemangiomas sobretudo na
fronte e os j referidos defeitos do couro cabeludo na regio parieto-occipital. Os dedos esto em flexo permanente e, em 60% dos casos, h prega
palmar nica.
297
4.2. Aspectos citogenticos e aconselhamento

Em aproximadamente 3/4 dos casos h trissomia livre, tendo o
cromossoma supranumerrio origem em no-disjuno meitica, maioritariamente na me (cerca de 90% dos casos). Em 20% dos casos est presente
uma translocao robertsoniana entre os cromossomas do grupo D, na
maioria das vezes t(13q;14q). Metade dos casos de translocao resulta de
mutao de novo e a outra metade herdada, na maioria das vezes da me.
Quando no for possvel realizar o estudo citogentico em nados-mortos
com aparncia de trissomia 13, e se observe pelo menos polidactilia e fenda
esfenopalatina, deve ser feito o caritipo aos pais para verificar se algum dos
progenitores portador de uma translocao equilibrada que envolva o
cromossoma 13.
Para uma mulher jovem com um filho com trissomia 13 livre, o risco de
recorrncia de cerca de 1%, sendo que para as mulheres com idade mais
avanada dever ser adicionado ao risco de 1%, o risco decorrente da idade
materna. Est indicada a realizao de estudo citogentico pr-natal. No caso
de um dos progenitores ser portador de uma translocao t(13q;14q), o risco
de recorrncia a indicar tambm de 1%.
5. SNDROMA DE TURNER
298
A sndroma de Turner foi descrita por este autor em 1938, em indivduos

do sexo feminino tendo como alteraes caractersticas a baixa estatura,
infantilismo sexual e amenorreia primria. A prevalncia da sndroma de
Turner de cerca de 1/2.500 recm-nascidos do sexo feminino.
Uma das causas mais frequentes a monossomia X, correspondente a
um caritipo 45,X. Os embries e os fetos com este caritipo tm uma
viabilidade muito reduzida devido a aborto espontneo, calculando-se que
menos de 1% sobrevivam at ao parto. Nos casos em que o aborto ocorre
mais precocemente, mais provvel a presena de uma monossomia em que
o cromossoma X presente de origem paterna, enquanto que nos abortos
tardios (do segundo trimestre da gravidez), mais provvel encontrar um
nico cromossoma X de origem materna.

Durante o desenvolvimento fetal, frequente a ocorrncia de hidrpsia
e de higromas qusticos na regio cervical, por excesso de acumulao de
lquido. O pterigium coli presente ao nascer (pele redundante a sugerir
asas, no ngulo do pescoo com os ombros) est relacionado com a
existncia de higroma.
Ao nascer, observa-se um pescoo curto, implantao baixa do cabelo
(em 2/3 dos casos), orelhas tambm de implantao baixa, pterigium coli
e linfedema das mos, dos ps e dos dedos dos ps, o que acarreta hipoplasia
das unhas. O linfedema das extremidades desaparece durante os primeiros
anos de vida.
No desenvolvimento ps-natal regista-se atraso de crescimento e ausncia
de pulo de crescimento na adolescncia, o que conduz a uma acentuada
baixa da estatura, com uma altura mdia de 130 a 140 centmetros, sobretudo
devida a membros inferiores curtos. A baixa estatura originada, muito
possivelmente, por haploinsuficincia devida presena de uma nica cpia
do gene SHOX localizado na regio pseudoautossmica do cromossoma X.
Outras caractersticas presentes em cerca de 50% dos casos so o cubitus
valgus (antebrao mais inclinado para fora do que o brao), o encurtamento do
4 e do 5 metacarpos, o trax em escudo e um afastamento dos mamilos
maior do que o esperado (Fig. XIV.6). comum observar nevos pigmentados.
Na sndroma de Turner, podem ainda ocorrer algumas anomalias viscerais
graves como a coarctao da aorta em cerca de 10% dos casos, o rim em
ferradura e a duplicao ureteral. A hipertenso arterial est presente em
27% dos casos, havendo tambm maior incidncia de otite mdia, tiroidite
autoimune, diabetes mellitus na idade adulta, doena de Crohn e hemorragias
gastrintestinais.
O grau de inteligncia est dentro dos limites normais, apesar de haver
um dfice quando se procede comparao com irmos. Pode ocorrer algum
atraso da fala e dificuldades de aprendizagem. Observa-se uma perturbao
da percepo espacial e o comportamento social frequentemente afectado,
de modo significativo, quando o cromossoma X presente de origem materna.
Quando o cromossoma X presente de origem paterna, o comportamento
social muito semelhante ao de uma mulher normal. Este facto poder dever-se a imprinting ligado ao cromossoma X, para os genes em causa.
299
300
Fig. XIV.6 Imagens de uma mulher com sndroma de Turner (45,X): A visvel o pterigium coli, o
trax em escudo, o afastamento dos mamilos maior do que o habitual, o fraco desenvolvimento
mamrio, a reduzida quantidade de plos pbicos, os membros inferiores curtos (a altura inferior a
150 cm); B Pterigium coli; C Implantao baixa dos cabelos na nuca; D Trax em escudo,
afastamento dos mamilos, fraco desenvolvimento mamrio.
H ainda amenorreia primria (ausncia de menarca), esterilidade e falta

de desenvolvimento dos caracteres sexuais secundrios (Fig. XIV.6).
A disgenesia gonadal uma constante, o que se traduz na presena de
gnadas em fita reduzidas a tecido conjuntivo sem folculos ovricos,
devido a degenerescncia dos folculos primordiais durante o perodo pr-natal e perinatal. A ausncia de folculos ovricos devido a degenerescncia dos
ovcitos, com incio pela 15 semana de gestao, e a consequente ausncia
de produo de estrogneos e progesterona na idade em que normalmente
ocorre a puberdade, explicam algumas das manifestaes fenotpicas, como a
amenorreia primria, a esterilidade e a ausncia de desenvolvimento dos
caracteres sexuais secundrios (infantilismo sexual) presentes num fentipo
feminino. Os nveis sricos de gonadotrofinas so elevados.
Em algumas mulheres com sndroma de Turner, sobretudo quando est
presente mosaicismo 45,X/46,XX, podem-se observar menarca e menstruaes durante alguns meses ou anos, sendo a menopausa de ocorrncia
precoce. Ocasionalmente, foram registadas gravidezes.
5.2. ASPECTOS CITOGENTICOS E RISCO DE RECORRNCIA

Na sndroma de Turner, em cerca de 55% dos casos est presente uma
monossomia do cromossoma X, correspondente a um caritipo 45,X. A no-disjuno envolvida nesta sndroma no apresenta relao com a idade
materna. Em 80% dos casos, o cromossoma presente de origem materna,
pelo que a causa ser a no-disjuno meitica paterna.
Para alm da monossomia 45,X, a sndroma de Turner pode tambm
dever-se a mosaicismo 45,X/46,XX, a mosaicismo 45,X/46,XY em 5% dos
casos, a isocromossoma do brao longo do cromossoma X, 46,X,i(Xq), a
isocromossoma do brao curto do cromossoma X, 46,X,i(Xp), a cromossoma
X em anel, 46,X,r(X), e ainda a outras alteraes estruturais como delees
de um dos braos do cromossoma X, 46,X,del(Xq) ou 46,X,del(Xp). Nos casos
de isocromossoma para o brao longo do cromossoma X, as manifestaes
fenotpicas so idnticas s que se observam em mulheres 45,X.
A probabilidade de recorrncia da sndroma de Turner muito reduzida.
5.3. TRATAMENTO
Os pais de crianas portadoras de sndroma de Turner e as prprias
doentes devem ser esclarecidos sobre a sua condio e sobre a necessidade
301
de um tratamento hormonal adequado. O diagnstico clnico precoce e a sua

caracterizao citogentica so importantes para desencadear o tratamento
de forma atempada.
Entre as aces teraputicas inclui-se a administrao de hormona do
crescimento para que a criana cresa mais do que o esperado. Noutro
sentido, a administrao de ciclos de tratamentos com estrogneos e
progesterona, com incio na idade da puberdade, permite o desenvolvimento
normal de caracteres sexuais secundrios.
Nos casos em que haja pterigium coli (Fig. XIV.6), pregas epicnticas
ou outras anomalias fsicas proeminentes, dever ser considerada a realizao
de cirurgia plstica antes da idade escolar (ter em considerao o aumento
de susceptibilidade para a formao de quelide durante a cicatrizao).
Dado o risco de desenvolvimento de coarctao da aorta, deve ser
realizado um ecocardiograma de trs em trs anos.
Quando o mosaicismo envolve a presena do cromossoma Y (45,X/
46,XY), ou um fragmento do cromossoma Y, existe um risco elevado de
desenvolvimento de gonadoblastoma, pelo que est aconselhada a
laparoscopia exploradora e a remoo cirrgica das gnadas durante a
infncia. A existncia de sinais de masculinizao dos genitais deve alertar
para este tipo de mosaico e para a necessidade da sua caracterizao.
6. SNDROMA DE KLINEFELTER
302
A trissomia 47,XXY foi inicialmente descrita por Klinefelter, em 1942.

uma aneuploidia com uma prevalncia aproximada de 1/600 recm-nascidos
do sexo masculino. Resulta da presena de um cromossoma X supranumerrio
num indivduo com fentipo masculino, devido a no-disjuno num dos
progenitores (Tabelas XIV.2, XIV.3 e XIV.4). A no-disjuno causadora desta
sndroma tem lugar na me ou no pai, em propores aproximadamente
iguais. H alguma relao com a idade materna, embora no seja to
aparente como para as demais trissomias.
Caber referir que em polissomias X mais extensas do que a que ocorre
na sndroma de Klinefelter (v.g., 48,XXXY; 49,XXXXY), medida que o
nmero de cromossomas X aumenta, se vai acentuando a reduo da
capacidade intelectual e surgem tambm malformaes cardiovasculares,

sseas e da face.

Como aspectos clnicos que alertam para o diagnstico de sndroma de
Klinefelter salientam-se o hipogonadismo, a microorquidia, a esterilidade por
azoospermia, a ginecomastia (30% dos casos), a aparncia eunucide e a
elevao dos valores sricos das gonadotrofinas FSH e LH e marcada reduo
dos nveis de testoterona. No entanto, vrios dos parmetros anteriores
podem no estar presentes. Alis, muitos dos indivduos com esta sndroma
no so diagnosticados. Por isso, a afirmao de uma condio como
sndroma de Klinefelter dever assentar em hipogonadismo masculino
associado a um caritipo 47,XXY.
Na sndroma de Klinefelter, a diferenciao dos canais de Wolf normal, bem como da genitlia externa. Ao nascer, os testculos aparentam um
tamanho e uma consistncia normais e, pelo menos at puberdade, podem-se encontrar clulas da linha espermatognica. No adulto, a regra a
presena de microrquidia traduzida num comprimento dos testculos entre 1
a 2 centmetros, comparativamente com 3,5 a 4,5 centmetros nos indivduos
normais. A degenerescncia dos tbulos seminferos ocorre durante a infncia
e bem manifesta na puberdade. Frequentemente, a severidade das
alteraes observadas nos tbulos seminferos diversa, em diferentes cortes
histolgicos e mesmo num mesmo corte. Alguns tbulos podem apresentar
apenas uma ligeira diminuio do dimetro e um nmero elevado de clulas
de Sertoli e outros podem-se apresentar completamente hialinizados.
Em alguns tbulos, embora raros, podem-se encontrar algumas clulas da linha
espermatognica, pelo que, excepcionalmente, os doentes podem produzir
espermatozides maduros, estando descritos casos de indivduos frteis,
nomeadamente jovens, quando est presente mosaicismo 46,XY/47,XXY.
As clulas intersticiais de Leydig apresentam hiperplasia.
Para alm dos aspectos j enunciados, refira-se ainda a elevada estatura
sobretudo devida ao comprimento dos membros inferiores. A clinodactilia est
presente em 25% dos casos. No h atraso mental, embora a inteligncia
tenda a ser mais reduzida do que em irmos. As dificuldades de
303
aprendizagem, sobretudo para a leitura, so frequentes e h uma maior

susceptibilidade para problemas comportamentais em condies de stress e
para a depresso. A auto-imagem dos doentes com sndroma de Klinefelter
deficiente, sentem-se frustrados com facilidade e a capacidade para a relao
interpessoal fraca. Apesar do fentipo masculino, h, frequentemente, um
fraco crescimento da barba. O pnis habitualmente de tamanho normal.
A lbido est diminuda, embora possa haver ereces, coito e ejaculaes nos
portadores desta sndroma. Na generalidade dos casos, h esterilidade.
Entre os homens saudveis, com esterilidade inexplicada nas consultas de
Gentica, cerca de 10% tem hipogonadismo por sndroma de Klinefelter.
H um risco acrescido para cancro da mama nos indivduos adultos e
para tumores de clulas germinais, bem como para osteoporose e doenas
autoimunes.
6.2. ASPECTOS CITOGENTICOS

A trissomia 47,XXY est presente em cerca de 85% dos casos de
sndroma de Klinefelter. O mosaicismo 46,XY/47,XXY ocupa quase por inteiro
os restantes 15% de casos, embora tenham sido encontrados outros mosaicos
mais raros, como o 46,XX/47,XXY ou o 46,XX/46,XY/47,XXY.
6.3. TRATAMENTO
304
O atraso na fala e os problemas de linguagem e de aprendizagem podem

exigir cuidados mdicos e educativos suplementares.
Na altura da puberdade, os portadores de sndroma de Klinefelter
devem ser esclarecidos sobre a sua condio e sobre as consequncias que
da advm. A administrao de um suplemento de testosterona, com incio
na puberdade, melhora significativamente as questes comportamentais,
de auto-imagem e de lbido, fazendo com que os doentes se sintam bem.
Dada a eventual hipertrofia da prstata como efeito secundrio da administrao de testosterona, est indicado fazer a vigilncia clnica deste rgo a
partir dos 30 anos de idade.
Quando a ginecomastia significativa pode estar indicada a cirurgia
plstica.
7. TRISSOMIA XYY
A trissomia XYY tem uma prevalncia aproximada de 1/1.000 recm-nascidos do sexo masculino. A origem do cromossoma Y supranumerrio
resulta de no-disjuno meitica paterna (Tabela XIV.4).
Na trissomia XYY, em geral no h manifestaes significativas a nvel
do fentipo, sendo a estatura maior do que a mdia para a populao, como
o dado mais saliente. A confirmao diagnstica feita pelo caritipo.
Os portadores desta trissomia tendem a apresentar fraco desenvolvimento da musculatura peitoral e da cintura escapular e uma deficiente
coordenao motora dos movimentos finos. O tamanho dos dentes, pode
estar aumentado. Na adolescncia, h acne nodulocstico severo.
A capacidade intelectual est dentro dos parmetros normais, embora
possa estar ligeiramente diminuda em relao a irmos, observando-se
algumas dificuldades de aprendizagem, sobretudo a nvel da linguagem.
O comportamento agressivo no um problema habitual.
Os portadores de trissomia XYY so maioritariamente frteis, no
havendo risco significativo de ter filhos com esta trissomia. Ocasionalmente,
pode-se observar criptorquidia, reduo do tamanho do pnis ou hipospadias.
8. TRISSOMIA XXX
A trissomia XXX tem uma prevalncia de cerca de 1/1.000 recm-nascidos do sexo feminino. A maioria dos casos tem origem em nodisjuno materna (Tabela XIV.2), verificando-se aumento da incidncia com
o avano da idade materna.
As manifestaes fenotpicas so pouco aparentes, podendo observar-se hipertelorismo e anomalias esquelticas. A inteligncia est dentro das
variaes normais, embora possa haver um ligeiro dfice comparativamente
com irmos. Frequentemente, h problemas com a linguagem verbal,
havendo tambm, com frequncia, necessidade de apoios educativos
acrescidos. A fertilidade no afectada e a transmisso de um cromossoma
supranumerrio a um descendente improvvel.
305
CAPTULO XV
GENTICA DO DESENVOLVIMENTO
1. INTRODUO
As semelhanas moleculares encontradas entre indivduos de espcies
diferentes so hoje um dado adquirido. Tais resultados levantam questes
relacionadas com a filognese. Segundo Haeckel, a ontognese recapitula a
filognese, o que pode ser provado pela expresso fenotpica, durante a
ontognese, de caractersticas pertencentes a formas ancestrais. Como que
isto possvel? Monod afirma que o genoma do zigoto o repositrio de
todo o passado filogentico dos antepassados que o produziram. De facto,
no genoma de espcies filogeneticamente muito distantes, foram encontradas
sequncias de DNA altamente conservadas.
O desenvolvimento dos seres eucariotas superiores baseia-se na utilizao
de diferentes genes, cujos produtos condicionam o aparecimento de
diferentes fentipos. Pode, contudo, afirmar-se que um novo ser pluricelular
superior como o homem existe quando, na clula resultante da juno dos
gmetas masculino e feminino, entram em funcionamento os mecanismos
de replicao do seu DNA, com a consequente diviso celular. No sendo
claro o que pe em aco os primeiros genes, pensa-se, contudo, que a
transcrio sucessiva de diferentes genes determinada por uma rede
reguladora, provavelmente mediada por RNA e/ou por protenas, que actuam
em cascata, e na qual os produtos dos genes inicialmente transcritos
determinam quais os genes a serem expressos na fase seguinte do
desenvolvimento e assim sucessivamente at ao fentipo adulto.
307
308
O conjunto de acontecimentos que medeiam entre uma vida humana

unicelular sob a forma de ovo ou zigoto e um ser humano adulto designa-se, globalmente, como desenvolvimento ontognico. Este processo inicia-se
com a fecundao de um ovcito por um espermatozide e a reactivao do
processo meitico ovocitrio (suspenso na metafase da segunda diviso da
meiose), que conduz libertao do segundo glbulo polar. Subsequentemente, os dois pr-ncleos masculino e feminino fundem-se, restaurando o
complemento cromossmico diplide da espcie humana e forma-se o ovo
ou zigoto.
No processo que origina uma nova vida, h um contributo assimtrico
entre o pai e a me. Assim, a me a nica responsvel pela transmisso
da informao gentica mediada pelas mitocndrias, dado que estas tm
origem exclusivamente feminina. O RNA e as protenas presentes no
citoplasma do ovo so tambm de origem materna. Aps a fecundao, a
me a responsvel pela alimentao do embrio e, mais tarde, do feto, mas
tambm pela exposio a factores ambientais eventualmente teratognicos
ou mutagnicos.
A identidade gnica em relao ao DNA nuclear do ovo diplide vai-se
manter ao longo do desenvolvimento e durante a vida, para as cerca de 1014
clulas nucleadas de um ser humano adulto. So excepes, os linfcitos B
maduros em que h recombinao somtica das sequncias de DNA que
codificam as cadeias das imunoglobulinas, os gmetas devido reduo
haplide do seu complemento cromossmico e as clulas do organismo em
que ocorram mutaes.
Havendo identidade gnica para as clulas do embrio, a aquisio das
capacidades funcionais e morfolgicas diversificadas dos cerca de 200 tipos
de clulas diferentes de um ser humano ocorre por expresso diferenciada
dos genes em termos temporais e espaciais. Assim, desde muito cedo,
observa-se diferenciao em tecidos e rgos. Durante o perodo que medeia
entre a fecundao e as oito semanas de desenvolvimento, o ser humano
em desenvolvimento designa-se por embrio. Aps as oito semanas e at ao
nascimento, designa-se por feto.
Como factores determinantes do desenvolvimento embrionrio salientam-se o momento em que determinados genes so expressos, o lugar do
embrio em que so expressos, a sequncia pela qual so expressos (cascata
de acontecimentos), a quantidade e a qualidade das protenas expressas.
Por razes ticas e metodolgicas, o estudo do desenvolvimento humano

no pode ser objecto de procedimentos experimentais em embries e fetos
humanos. Assim, o conhecimento adquirido tem sido gerado de forma
indirecta, em grande parte pelo estudo de anomalias congnitas em
correlao com anomalias genticas espontneas ou resultantes da exposio
eventual a agentes ambientais ou hormonais, do estudo do desenvolvimento
de outros seres vivos filogeneticamente diversos e da experimentao animal
em modelos concebidos para reproduzirem condies semelhantes s que
esto implicadas em processos normais ou patognicos observados na espcie
humana.
Os estudos comparativos do desenvolvimento de diversas espcies
animais permitem sustentar que h mltiplos mecanismos e factores comuns,
mesmo entre espcies filogeneticamente muito distantes. Para alguns genes
associados ao desenvolvimento do homem foi identificada uma elevada
homologia estrutural e funcional em relao a espcies to distantes como
a mosca Drosophila (500 milhes de anos) ou o ratinho (60 milhes de anos).
Um exemplo dramtico vem de estudos realizados com o gene Pax6 do
ratinho que, quando implantado em lugar anmalo do embrio da mosca
induz a formao de um olho ectpico. As alteraes do gene humano PAX6,
homlogo do gene Pax6 do ratinho e do gene eyeless da Drosophila, tambm
tm reflexos a nvel ocular na espcie humana com ocorrncia de aniridia
(ausncia da ris) e de cataratas.
Os genes envolvidos nos processos da embriognese actuam de diversas
formas, sendo a mais comum a expresso de factores de transcrio. Assim,
a expresso de um gene vai influenciar a expresso de uma segunda ordem
de genes e os produtos proteicos codificados por estes iro influenciar a
expresso de uma terceira ordem de genes. Outro grupo de genes est
envolvido na codificao de receptores de membrana para factores originados
em clulas vizinhas (factores parcrinos). Os factores parcrinos (v.g., factores
de crescimento como o FGF ou o TGF ) resultam da expresso de outro
grupo de genes envolvidos na induo da determinao de clulas vizinhas.
Tm sido tambm identificadas molculas qumicas que funcionam como
factores morfogenticos, de que exemplo o cido retinico na formao
dos dedos (o cido retinico teratognico, quando administrado durante
a gravidez).
309
2. DESENVOLVIMENTO EMBRIONRIO E FETAL

O ovo ou zigoto resulta da fecundao de um ovcito por um espermatozide. A fecundao reconstitui o nmero diplide de cromossomas da
espcie humana.
O ovo ou zigoto humano uma clula com capacidade para se dividir.
No prazo de cerca de 24 horas aps a fecundao, o ovo duplica a
informao gentica, por replicao do DNA, e divide-se em duas clulas
idnticas designadas blastmeros. Seguidamente, cada blastmero origina
dois blastmeros tambm idnticos, pelo que o embrio fica com quatro
clulas idnticas. As divises mitticas vo continuar nestes quatro
blastmeros e, sucessivamente, em cada nova clula (Fig. XV.1). As primeiras
divises do embrio so controladas por RNA e/ou protenas presentes no
citoplasma do ovcito. No entanto, cedo comea a expresso de genes
embrionrios.
As divises dos blastmeros ocorrem medida que o embrio se
desloca ao longo da trompa de Falpio, em direco ao tero. Na fase de
12 a 16 clulas, com os blastmeros compactados uns contra os outros, o
embrio tem a forma de uma amora, pelo que se designa mrula. Passaram,
at este momento, cerca de quatro dias aps a fecundao. Nesta altura,
a mrula chega cavidade uterina, mantendo-se, em contnuo, a
multiplicao celular.
Pelo quinto dia surgem espaos ocupados por lquido entre os
blastmeros, constituindo-se o blastocisto. A curto prazo, as clulas do
blastocisto vo organizar-se em dois grupos celulares, sendo assim visveis,
pela primeira vez, aspectos de diferenciao celular. Forma-se uma camada
externa de clulas designada trofoblasto, destinada a diferenciar-se na parte
fetal da placenta e uma parte interna designada massa celular interna ou
310
embrioblasto. Das clulas do embrioblasto vo derivar as estruturas do ser

humano na sua vida intrauterina e extrauterina.
O blastocisto mantm-se livre na cavidade uterina, em mdia at ao
6-7 dias aps a fecundao, nutrindo-se a partir das secrees uterinas.
Findo este perodo, ocorre a nidao, ou seja a implantao do embrio no
endomtrio. Para o desenvolvimento da nidao concorrem as clulas do
trofoblasto que se diferenciam em citotrofoblasto e sinciciotrofoblasto.
Na altura da nidao, o sinciciotrofoblasto j produz uma hormona

designada gonadotrofina corinica humana que, atravs da circulao materna, vai influenciar a manuteno do endomtrio e o desenvolvimento da
gravidez. possvel dosear os nveis desta hormona no sangue materno, o
que est na base da deteco precoce de gravidez. No entanto, desde a fase
de embrio de oito clulas que h produo de gonadotrofina corinica, em
quantidades que no permitem a sua deteco no sangue perifrico, ainda
que detectvel in vitro.
311
Fig. XV.1 A - Ovcito em metafase II ( visvel um globo polar); B - Espermatozides humanos fixados
e posteriormente corados com Giemsa; C - Zigoto, em que se observam dois proncleos em aposio
e dois globos polares no espao peri-vitelino; D - Embrio humano de duas clulas; E - Embrio humano
de oito clulas; F - Embrio humano com cinco dias em que o blastocelo j est em formao.
312
A nidao completa-se pelo fim da 2 semana aps a fecundao. Durante a segunda semana, enquanto decorre a implantao do blastocisto, a
massa celular interna ou embrioblasto diferencia-se em duas camadas designadas
epiblasto e hipoblasto, constitudo-se assim o disco embrionrio bilaminar.
Tambm durante a 2 semana, entre o 8 e o 9 dia, forma-se a cavidade
amnitica, um espao entre a massa celular interna e as clulas do citotrofoblasto.
No incio da 3 semana tem lugar a gastrulao caracterizada pela
diferenciao da mesoderme e a consequente formao do disco embrionrio trilaminar constitudo por ectoderme (adjacente cavidade amnitica), mesoderme
e endoderme. Os trs folhetos tm origem nas clulas do epiblasto. A partir destes
trs folhetos, desenvolvem-se todas as estruturas do corpo humano.
Durante a 3 semana comeam a desenvolver-se os esboos primordiais do
sistema nervoso central. Cerca do meio da 4 semana, os bordos das pregas
neurais, ento existentes como primrdios do sistema nervoso, vo-se fundir e
originar o tubo neural. A partir do tubo neural, vai formar-se o sistema nervoso
central.
A 3 semana do desenvolvimento embrionrio caracteriza-se por ter incio
a morfognese, ou seja o desenvolvimento das formas do corpo humano.
Pelo fim da 3 semana comea a formao dos smitos que ho-de originar a
maior parte do esqueleto axial, da musculatura do tronco e dos membros e a
derme. Tem ainda lugar, o incio da diferenciao do sistema cardiovascular, com
diferenciao de um corao tubular. Os batimentos cardacos registam-se ao fim
de 21-22 dias de desenvolvimento embrionrio. Posteriormente, entre a 4 e a
7 semanas vai ocorrer a formao das quatro cavidades cardacas.
Durante a 4 semana, as clulas germinais primordiais, localizadas na parede
posterior do saco vitelino, migram para as cristas genitais que atingem pelo fim da
5 semana. Nesta altura so cerca de 1.000 a 2.000 clulas germinais. Por vezes,
durante a migrao, h clulas germinais que se fixam de forma anormal em tecidos
extra-gonadais. Posteriormente, embora raramente, podem originar teratomas.
No final da 4 semana, aparecem os esboos dos membros, do ouvido
interno e do cristalino. Durante a 4 semana tem tambm incio a formao do
tubo digestivo.
O decurso da 4 semana um tempo muito crtico no que respeita ao
efeito de agentes teratognicos e ao desenvolvimento de anomalias
congnitas graves, dada a fase crucial de evoluo em que se encontram os
diversos rgos.
Pela 6 semana so visveis os esboos dos dedos. A separao dos dedos

ocorre pelo fim da 8 semana.
Tabela XV.1. Etapas mais significativas do desenvolvimento intra-uterino

TEMPO
(aps a fecundao)
24 horas
4 dias
5 dias
6-7 dias
2 semana
12 dias
Fim da 2 semana
14 a 16 dias
16 dias
3 semana
3 semana
Fim da 3 semana
21-22 dias
Meio da 4 semana
4 a 8 semanas
4 a 7 semanas
6 semana
7 semana
8 semana
Final da 8 semana
Alm da 8 semana
9 a 12 semanas
10 semana
12 semana
14 semana
17 a 20 semanas
26 semana
38 semana
TIPO DE OCORRNCIA EMBRIONRIA OU FETAL
1 diviso do ovo (embrio com dois blastmeros)

Mrula (12-16 blastmeros), chegada cavidade uterina
Blastocisto (cavidade entre as clulas; diferenciao celular em trofoblasto
e massa celular interna)
Diferenciao do trofoblasto em citotrofoblasto e sinciciotrofoblasto.
Nidao.
Sinciciotrofoblasto produz gonadotrofina corinica humana
A massa celular interna diferencia-se em epiblasto e hipoblasto. Clulas
do epiblasto migram para o espao do hipoblasto e substituem estas clulas
Constitui-se o disco embrionrio bilaminar (ectoderme e endoderme).
Embrio com 0,2mm
Termina a nidao
Gastrulao (forma-se a linha primitiva; clulas da ectoderme migram para o
espao entre a ectoderme e a endoderme e constitui-se a mesoderme; constituise o disco embrionrio trilaminar). Embrio com 1mm
O embrio constitudo por cerca de 5.000 clulas
Incio da morfognese
Esboos primordiais do sistema nervoso central
Formao dos smitos. Incio da diferenciao do sistema cardiovascular
(corao tubular)
Primeiros batimentos cardacos
Tubo neural
Organognese. Tempo muito crtico em termos teratognicos.
Migrao das clulas germinais para a crista genital (chegada pelo fim da
5 semana). Esboos dos membros, do ouvido interno, do cristalino. Incio
de formao do tubo digestivo
Formao das quatro cavidades cardacas
Esboos dos dedos
Diferenciao gonadal masculina ou feminina
Separao dos dedos. Movimentos dos membros com objectivos. Plpebras
Forma humana. Embrio com 4cm
Feto
Formao de urina
Fuso do palato
Ossificao. Diferenciao genital externa
Movimentos oculares
Me comea a sentir os movimentos do feto
Maturidade respiratria que possibilita a sobrevivncia ps-parto
Tempo de gestao completo. Feto com 50cm
Nota: Convencionalmente, o tempo de gravidez conta-se a partir do primeiro dia da ltima menstruao antes
da concepo. Este facto implica que se atribua uma durao prxima de 40 semanas a uma gestao normal.
313
Durante a 8 semana, os membros comeam a ter movimentos com

objectivos determinados. No final da 8 semana, so visveis as plpebras.
Nesta altura, o embrio apresenta uma forma humana muito clara e j esto
em desenvolvimento os principais sistemas orgnicos, embora com uma
actividade funcional reduzida.
A partir da 8 semana o ser humano em desenvolvimento designa-se por feto.
A formao de urina comea entre a 9 e a 12 semana, sendo excretada
para o lquido amnitico. O feto deglute e reabsorve parte do lquido
amnitico.
A ossificao comea cerca das 12 semanas. H movimentos oculares por
volta das 14 semanas. Entre as 17 e as 20 semanas de gestao, a me
comea a sentir os movimentos do feto.
s 24 semanas, h clulas pulmonares (pneumcitos tipo II) com
capacidade para sintetizar surfactante e comeam a formar-se os sacos
alveolares. s 26 semanas, os pulmes tm maturidade suficiente para
permitir a sobrevivncia se ocorrer parto prematuro, uma vez que permitem
a respirao. No entanto, o desenvolvimento pulmonar vai continuar at cerca
dos 8 anos, sendo que cerca de 95% dos alvolos pulmonares se
desenvolvem aps o nascimento. A nvel do sistema nervoso central, a
maturao tambm suficiente para regular o ritmo respiratrio e controlar
a temperatura corporal.
Ao fim de 38 semanas, o tempo de gestao est terminado.
3. GENES HOMETICOS
314
O desenvolvimento embrionrio e fetal processa-se segundo os eixos

dorso-ventral, antero-posterior e esquerdo-direito. O estabelecimento dos
eixos mediado pela expresso de genes.
No desenvolvimento do eixo antero-posterior est envolvido um cluster de genes que codifica factores de transcrio com uma regio comum,
altamente conservada ao longo da evoluo filogentica, designada
homeobox ou sequncia homeo. Uma das constataes notveis,
verificada nas sequncias homeo, foi a sua semelhana entre espcies to
distintas como a mosca, o ratinho e o homem. Esta semelhana parece indicar
que os genes com sequncias homeo desempenham um papel idntico nas

diferentes espcies, o que, por sua vez, implica que espcies diferentes
tenham um processo semelhante de controlo gnico do desenvolvimento.
As sequncias homeo presentes nos genes com homeoboxes tm uma
extenso de cerca de 180 bp e codificam sequncias polipeptdicas de 60
aminocidos. As protenas com estas sequncias aparecem envolvidas no controlo
da ontognese nas suas componentes temporal e espacial. Os produtos dos
genes com homeoboxes ocorrem precocemente no decurso do desenvolvimento embrionrio, o que sugestivo da sua relao com o controlo da
embriognese. Presumivelmente, controlam a hierarquia da expresso de
determinados genes funcionando como factores de transcrio, de modo a
permitirem que as partes de um organismo se desenvolvam no lugar adequado.
Os genes hometicos humanos designam-se como genes HOX.
Agrupam-se em quatro famlias: HOX-A, HOX-B, HOX-C e HOX-D, localizados
respectivamente nos cromossomas 7p, 17q, 12q e 2q. Cada famlia
constituda por uma srie de genes parlogos numerados por ordem
crescente. A expresso dos genes HOX de uma famlia obedece a orientao
temporal e espacial. Ocorre de forma sequencial, pela ordem que se
encontram no cromossoma.
Assim, e como exemplo da actuao dos genes HOX registe-se a
formao dos dedos, em que esto envolvidos os genes 9 a 13 da famlia
HOX-D (Fig. XV.2). A expresso do gene D9 na mesoderme terminal do
membro determina a formao do 1 dedo. No territrio do 2 dedo, a
expresso de D9 necessria para que haja expresso de D10 e a
consequente formao do 2 dedo. No territrio do 3 dedo, a expresso
prvia de D9 e D10 induz a expresso de D11 e a formao do 3 dedo. Pela
mesma lgica, na formao do 4 dedo esto envolvidos os genes D9 a D12
e na formao do 5 dedo, os genes D9 a D13.
315
Direco da ordem de expresso
D13
5
D12
D11
D10
D9
3
Fig. XV.2 Genes D9 a D13, da famlia HOX-D, envolvidos na formao dos dedos. A sua expresso
temporal e espacialmente orientada.
No desenvolvimento dos membros est envolvido o gene C6 da famlia

HOX-C, na formao dos arcos farngeos esto envolvidos genes da famlia
HOX-B, e a especificao dos smitos controlada pela combinao de genes
HOX.
No estabelecimento dos eixos dorso-ventral e esquerda-direita, o gene
SHH surge como um dos intervenientes (gene humano equivalente ao gene
Sonic hedgehog, abreviadamente designado shh). O gene SHH parece estar
envolvido no desenvolvimento de sistema nervoso central. Assim, quando o
gene SHH est mutado pode ocorrer holoprosencefalia ou haver apenas
manifestaes frustes da presena da mutao traduzidas na presena de um
dente incisivo nico, na linha mdia do maxilar superior.
As mutaes a nvel dos genes hometicos podem afectar de um modo
intenso o desenvolvimento do fentipo, como se verificou na mosca Drosophila melanogaster com desenvolvimento de rgos em lugares anmalos,
como seja uma pata no lugar de uma antena, ou de uma antena a partir da
boca. Na espcie humana, as manifestaes da sndroma de DiGeorge
resultam de uma mutao num gene com sequncias homeo, o que se
traduz em ausncia de timo, de glndulas paratiroideias e de anomalias de
desenvolvimento da boca, da garganta, do nariz e das orelhas. A existncia
de alteraes do gene HOX-C6 uma das causas de anomalias congnitas
dos membros, que se traduz em ausncia de um membro ou de todos os
membros (amelia).
4. DETERMINAO E DIFERENCIAO EMBRIONRIA E FETAL
316
A hierarquia da expresso gnica e a inactivao de genes previamente

expressos conduz restrio das clulas do embrio e sua determinao e
diferenciao. Assim, num embrio de ratinho de oito clulas, todas as clulas
so ainda totipotentes (podem originar qualquer clula diferenciada do
embrio e os anexos embrionrios, ou mesmo outro organismo). Na mrula
de 16 clulas, algumas ainda continuam totipotentes. Contudo, com a
formao do blastocisto, ocorre a restrio do primeiro grupo de clulas.
As clulas da massa celular interna so pluripotentes, no sentido de poderem
dar origem a qualquer clula do embrio, e as clulas externas do blastocisto
passam a estar comprometidas no sentido de originarem o trofoblasto
extra-embrionrio, sem possibilidade de originarem clulas do embrio.

Em fases subsequentes, as clulas da massa celular interna sofrem
determinaes que vo fixando o seu destino e restringindo cada vez mais
o seu potencial. Como exemplo, refira-se o que se passa com a ectoderme
do embrio. A natureza multipotente das clulas da ectoderme traduz-se na
sua capacidade para originar as estruturas centrais e perifricas do sistema
nervoso, as clulas pigmentares, a crnea, o cristalino, a ris, a retina, o ouvido
interno, a epiderme, o cabelo, os plos, as glndulas mamrias e as glndulas
da pele. No entanto, a diferenciao da ectoderme nestes diferentes tipos
de clulas passa por um primeiro nvel de determinao, pelo qual as clulas
originam subgrupos de clulas ainda multipotentes, como as clulas
neuroepiteliais. Em relao s clulas neuroepiteliais, um nvel subsequente
de determinao restringe ainda mais o seu potencial, fazendo-as evoluir para
clulas progenitoras dos neurnios e para clulas multipotentes progenitoras
das clulas da glia. As clulas progenitoras da glia, aps um nvel final de
determinao, originam os grupos de clulas progenitoras dos
oligodendrcitos, dos astrcitos e das clulas radiais.
A seguir determinao, ocorre a diferenciao celular, um processo que
resulta da expresso de genes responsveis pela aquisio da morfologia e
da funo caractersticas das clulas. Como consequncia destes processos
formam-se no organismo humano mais de duzentos tipos diferentes de
clulas.
5. MOLA HIDATIFORME
Nos casos de mola hidatiforme h um desenvolvimento anmalo durante
a gravidez. H dois tipos de mola: a mola hidatiforme completa e a mola
hidatiforme parcial.
A mola hidatiforme completa tem na sua origem uma condio de
diandria, em que os cromossomas so todos de origem paterna e as
mitocndrias de origem materna. uma condio rara, com uma frequncia
de 1/2.000 gravidezes. Caracteriza-se por hiperplasia extensa do trofoblasto,
vilosidades corinicas edemaciadas, ausncia de desenvolvimento fetal, nveis
muito elevados de gonadotrofina corinica (hCG), sofrimento materno du-
317
rante a gravidez com vmitos, pr-eclampsia at s 20 semanas e aborto

espontneo. Est ainda associada a malignizao do trofoblasto.
A ocorrncia de mola hidatiforme devida a diandria contraria o conceito
da gentica clssica que sustenta que a expresso dos genes independente
do sexo do progenitor a partir do qual herdado. Por outro lado, refora a
importncia do imprinting nas perturbaes do desenvolvimento
embrionrio quando o complemento cromossoma do ovo uniparental.
As molas hidatiformes parciais so fequentemente devidas a triploidia,
com dois complementos cromossmicos paternos (por dispermia ou
endoreduplicao) e um materno. Este tipo de mola caracteriza-se por
hiperplasia focal do trofoblasto, alteraes de algumas vilosidades e o feto
raramente sobrevive.
Nos casos de mola hidatiforme completa, h um risco de recorrncia de
1%, para uma nova gravidez
6. DETERMINAO SEXUAL
318
A espcie humana dimrfica, uma vez que os dois sexos so

fenotipicamente distintos. O dimorfismo est tambm presente a nvel dos
cromossomas sexuais. O sexo cromossmico de um embrio determinado
no momento da fecundao do ovcito. Se um ovcito 23,X fecundado
por um espermatozide 23,X origina-se um embrio em que o sexo
cromossmico feminino, ou seja 46,XX. Se um ovcito 23,X fecundado
por um espermatozide 23,Y, origina-se um embrio em que o sexo
cromossmico masculino, ou seja 46,XY (Fig. XV.3).
Em embries com um complemento cromossmico X anormal, o nmero
de cromossomas no parece afectar a determinao sexual. Desde que esteja
presente um cromossoma Y normal ou, melhor, desde que esteja presente o
gene SRY, o embrio ter uma diferenciao sexual masculina.
Num embrio 46,XX, na ausncia de cromossoma Y ou do gene SRY,
haver diferenciao sexual feminina. Contudo, a presena de apenas um
cromossoma X afecta o normal desenvolvimento gonadal para ovrio, ainda
que no interfira com a migrao das clulas germinais para as cristas
genitais.
Espermatcito I (46, XY)
1 diviso
da meiose
Espermatcito II (23, X)
Espermatcito II (23, Y)
2 diviso
da meiose
Espermtide
Espermtide
Espermtide
Espermtide
Originam espermatozides 23, X
Originam espermatozides 23, Y
ovcito 23,X
ovcito 23,X
ovo 46, XX
ovo 46, XY
Fig. XV.3 Fases da espermatognese e determinao do sexo cromossmico.
319
7. LIONIZAO
Nas fases precoces do desenvolvimento embrionrio, ao 16 dia de vida
do embrio, um dos cromossomas X das mulheres 46,XX inactivado nas
clulas somticas, mediante um fenmeno descrito por Mary Lyon em 1961
e, por isso, designado lionizao. Nas mulheres com mais do que dois
320
cromossomas X apenas um no inactivado. Nos indvduos do sexo

masculino com mais do que um cromossoma X, verifica-se igualmente
lionizao dos cromossomas X excedentrios. Assim, a lionizao funciona
como um mecanismo de regulao da dosagem gnica restringindo a um
cromossoma X a disponibilidade funcional para codificao, com excepo
das pequenas regies pseudo-autossmicas, seja no homem ou na mulher.
Doutro modo, haveria o dobro dos alelos disponveis na mulher quando
comparada com a hemizigotia masculina.
A lionizao ocorre ao acaso em cada clula, para um dos dois
cromossomas X. A partir da, todas as clulas descendentes de uma
determinada clula apresentam o mesmo cromossoma X inactivado. Apenas
na gametognese, o padro de inactivao desfeito. Desta forma, uma
mulher um mosaico de clulas em que cerca de 50% tm inactivado o
cromossoma X com origem paterna e as restantes tm inactivado o
cromossoma X materno. Sendo a inactivao feita ao acaso, uma mulher
heterozigtica para uma mutao recessiva ligada ao X ter metade das
clulas em que o cromossoma inactivado contm o alelo com a mutao e
que exprimiro o alelo normal e outra metade que tendo inactivado o alelo
normal e sendo o outro alelo mutado correspondem funcionalmente a uma
condio de homozigotia recessiva.
Por vezes, a inactivao no feita ao acaso e a percentagem de clulas
com um dos cromossomas X inactivado maior do que a percentagem de
clulas com o cromossoma X homlogo. Nos casos de incontinentia pigmenti,
observa-se, durante a primeira semana de vida dos recm-nascidos do sexo
feminino portadores da mutao, uma reaco inflamatria cutnea que
poder representar a morte de clulas em que o cromossoma X mutado no
sofreu inactivao e que seriam substitudas por clulas com o cromossoma
normal no inactivado. Este facto poder traduzir a no inactivao do
cromossoma X ao acaso em doentes com incontinentia pigmenti conforme
j foi observado. A lionizao assimtrica tambm parece ocorrer em mulheres
portadoras de delees num cromossoma X. Nestes casos, o cromossoma X
com alteraes estruturais objecto de inactivao preferencial.
Em contraposio, quando est presente uma translocao de material
gentico entre um cromossoma X e um autossoma, ocorre inactivao
preferencial do cromossoma X normal. Esta preferncia poder ter, como
finalidade, evitar que o autossoma que alberga o fragmento do cromossoma
X translocado seja inactivado, o que originaria uma monossomia autossmica

funcional e, como monossomia autossmica, incompatvel com a viabilidade
do embrio.
A quase totalidade dos genes do cromossoma X que sofre lionizao est
inactivada, com excepo dos genes localizados nas regies pseudo-autossmicas e raros genes ao longo do cromossoma. A inactivao ocorre
por aco do gene XIST que apenas transcrito no cromossoma inactivado.
O gene XIST codifica uma molcula de RNA que se liga ao cromossoma e
que desencadeia a inactivao.
O mecanismo molecular subjacente lionizao a metilao de bases
citosina. A inactivao de um dos cromossomas conduz a um estado de
condensao da cromatina designado por heterocromatina funcional.
Caracteriza-se por variar em diferentes tipos de clulas e durante a fase
precoce do desenvolvimento embrionrio. O cromossoma inactivado de
replicao tardia na fase S do ciclo mittico.
Por microscopia de luz, os cromossomas X inactivados podem ser
observados em ncleos de clulas interfsicas (v.g., em cerca de 30% das
clulas de revestimento da mucosa bucal), como uma pequena massa de
cromatina intensamente corada, designada cromatina de Barr. Nos neutrfilos
de um esfregao de sangue de uma mulher, o cromossoma X inactivado
apresenta a forma de baqueta de tambor, numa pequena percentagem de
clulas.
8. GEMELARIDADE
Os gmeos podem ser verdadeiros (monozigticos ou idnticos) ou falsos
(dizigticos ou no-idnticos). Os casos de gmeos verdadeiros tm uma
incidncia por gravidez prxima de 0,4%. Os falsos gmeos ocorrem em cerca
de 0,6% das gravidezes. A frequncia com que ocorrem gravidezes gemelares
dizigticas apresenta variaes quando so comparados diferentes grupos
populacionais. A gemelaridade mais rara nas populaes asiticas, com uma
incidncia de 2 a 7 casos por mil nascimentos, e mais frequente nos povos
negros de frica, com uma incidncia de 45 a 50 casos por mil nascimentos.
321
322
Os gmeos monozigticos resultam de um nico ovo ou zigoto inicial,

pelo que tm, partida, 100% de identidade gnica. No perodo ps-zigtico
podem ocorrer mutaes ou anomalias da diviso mittica que conduzam ao
aparecimento de linhas celulares diferentes entre os irmos gmeos.
H diferentes tipos de gmeos monozigticos consoante o momento em
que ocorre a separao dos blastmeros. Assim, quando a separao muito
precoce, entre o estdio de embrio de duas clulas e o estdio de mrula
(antes da diferenciao das clulas do trofoblasto), os dois embries assim
formados implantam-se de forma autnoma no endomtrio, originando uma
placentao bicorial biamnitica cada gmeo tem a sua placenta e o seu
saco amnitico.
Se a diviso do embrio mais tardia, entre o 3 e o 7 dia do desenvolvimento, na fase de blastocisto (aps a diferenciao das clulas do
trofoblasto), verifica-se a diviso da massa celular interna em dois grupos de
clulas. Formam-se, assim, gmeos monozigticos com uma placenta comum,
mas cada um com o seu saco amnitico, ou seja, uma gravidez monocorial
biamnitica. Os gmeos oriundos da diviso das clulas da massa celular
interna, na fase de blastocisto, so os mais frequentes.
Se a diviso ocorre aps a primeira semana, os gmeos partilharo uma
placenta e um saco amnitico comuns gravidez monocorial e monoamnitica, o que uma situao rara, com uma frequncia inferior a 1% dos
gmeos monozigticos.
Quando a diviso do embrio ocorre para alm das duas semanas de
desenvolvimento, formam-se gmeos siameses(1). Partilham a mesma placenta
e o mesmo saco amnitico. Quanto mais tardia for a diviso, maior a extenso
das partes do corpo ligadas entre si, podendo chegar partilha comum de
rgos.
Os falsos gmeos resultam da fecundao de dois ovcitos, cada um por
um espermatozide. Os dois ovos so diferentes e desenvolvem-se
simultaneamente durante uma nica gravidez, cada um com o seu saco
corinico e a sua placenta (por vezes, se a implantao dos embries for
muito prxima uma da outra, as placentas podem-se fundir numa s, o
mesmo ocorrendo com os sacos corinicos, ainda assim, ficando cada um
(1) A designao gmeos siameses resulta da descrio de um par de gmeos que, em 1811,
nasceram em Siam (anterior nome da actual Tailndia), ligados por uma faixa de tecido.
com o seu saco amnitico). Por isso, e semelhana do que se verifica entre dois irmos com diferentes idades, h 50% de identidade gnica. Podem
ser, inclusive, de sexos diferentes.
Nos factores de risco para a ocorrncia de gmeos dizigticos incluemse uma histria familiar de gemelaridade, o uso de frmacos indutores da
ovulao (v.g., clomifeno) e a idade materna avanada. Para os gmeos
monozigticos no aparente uma predisposio hereditria, no se
verificando aumento de risco para gemelaridade, por haver um caso na
famlia.
9. CLONAGEM
A clonagem o processo pelo qual se reproduzem molculas, clulas ou
organismos iguais entre si e a um exemplar nico inicial. A clonagem humana
compreende o conjunto de procedimentos destinados a obter seres humanos
geneticamente idnticos uns aos outros, no que respeita, pelo menos, ao
contedo de genes localizados no ncleo.
A clonagem pode passar pela diviso das clulas de um embrio
enquanto se mantiverem totipotenciais ou pluripotenciais (clonagem
embrionria), ou pela transplantao do ncleo diplide de uma clula
somtica de um indivduo para o citoplasma de um ovcito ou de um ovo
previamente enucleado (clonagem somtica).
A clonagem embrionria consiste na obteno de embries
geneticamente idnticos, por separao das clulas totipotenciais de um
embrio. Pode ocorrer de forma espontnea, como acontece com os gmeos
verdadeiros (monozigticos). Em algumas espcies animais, de alto valor
comercial, esto estabelecidas metodologias para a clonagem embrionria,
de modo a conseguir o desenvolvimento de vrios embries, a partir de um
embrio original. Entre os animais assim desenvolvidos, a diversidade gentica
apenas poder ocorrer se houver heteroplasmia mitocondrial no ovo, com
partilha assimtrica das mitocndrias pelas clulas resultantes da sua diviso,
e/ou acumulao de mutaes ps-embrionrias.
A clonagem somtica tem tambm vindo a ser ensaiada. Trata-se da
obteno de embries geneticamente idnticos no que respeita ao DNA
323
nuclear, por transplantao do ncleo diplide de uma clula somtica de um

indivduo para o citoplasma de um ovcito previamente enucleado (Fig. XIV.4).
Em 1975 foi descrita a obteno de girinos transplantando ncleos de
queratincitos de um animal adulto para o citoplasma de um ovo enucleado
de uma r da mesma espcie. Contudo, apenas a 27 de Fevereiro de 1997,
foi relatado por Wilmut e Campbell a clonagem de um animal de maior porte
a ovelha Dolly, a partir de clulas de um ancestral adulto. No incio
de 2003, a ovelha Dolly foi abatida, devido severidade das doenas que
a afectavam.
A parte mais significativa e original do procedimento que conduziu
clonagem da ovelha Dolly consistiu na criao de condies que tero
possibilitado a regresso da expresso do DNA das clulas adultas a uma
forma inactiva semelhante que se observa nos espermatozides ou nos
ovcitos, por reduo da concentrao do soro de 10% para 0,5% no meio
de cultura em que as clulas foram mantidas em proliferao. Desta forma,
as clulas tero sido conduzidas quiescncia prpria do estdio Go do ciclo
celular. Aparentemente, as clulas tero apagado as marcas da sua
passagem por uma forma diferenciada da mama do organismo adulto de que
foram recolhidas, por inactivao dos genes responsveis pelo fentipo
funcional adulto. As clulas ter-se-o tornado assim totipotentes ou seja sem
sinais moleculares de determinao ou diferenciao.
O ncleo de uma destas clulas somticas, uma vez transplantado para
o citoplasma de um ovcito previamente enucleado, permite que o ovo assim
obtido tenha o nmero normal de cromossomas da espcie. Seguidamente,
por aco das protenas e do RNA acumulados no citoplasma ovocitrio,
iniciaram-se as mitoses, sem expresso gnica durante as primeiras trs
divises. Durante estas divises, o DNA ter sido reprogramado pelas
protenas do citoplasma ovocitrio. Assim, a abertura da caixa de Pandora
324
correspondente expresso gnica sequencial no processo ontognico de um

ser vivo, desde os genes iniciais at aos genes da diferenciao celular, ter
ocorrido de forma idntica que se observaria se naquela clula se
encontrasse o ncleo do ovo e no de uma clula adulta. As chaves
utilizadas foram as protenas informacionais citoplasmticas ovocitrias
seleccionadas evolutivamente pelo sexo feminino e os acontecimentos
embrionrios e a sua sequncia tero sido, por isso, respeitados.
Ovcito
Clula adulta
Embrio clonado
Fig. XV.4 Esquema dos procedimentos utilizados para clonagem somtica. Do ovcito retirado o ncleo
haplide e, no seu lugar, implantado um ncleo diplide recolhido de uma clula somtica adulta.
Na clonagem de clulas somticas, a identidade gentica nuclear do

embrio clonado igual de todas as clulas do indivduo de quem foi obtido
o ncleo transplantado, ressalvadas eventuais mutaes nucleares e/ou
diferenas do DNA mitocondrial presentes no citoplasma do ovcito utilizado.
Poder-se- obter apenas um clone ou poder-se-o produzir milhares de clones
com a mesma informao nuclear do dador dos ncleos.
Os embries obtidos por clonagem somtica podem ser utilizados para
fins reprodutivos (clonagem reprodutiva) ou para fins teraputicos
(clonagem teraputica). A clonagem reprodutiva consiste na obteno
de embries e na sua implantao intra-uterina para se virem a desenvolver
como fetos e originarem novos indivduos. Os embries para clonagem
teraputica so obtidos da mesma forma e posteriormente desenvolvidos
in vitro at fase de blastocisto (sem implantao intra-uterina). Da massa
celular interna dos blastocistos, so colhidas clulas pluripotentes para serem
usadas para fins teraputicos, eventualmente aps a induo especfica da
diferenciao no tipo de clulas ou tecidos necessrios para o tratamento.
325
10. DIFERENCIAO GONADAL

Se a evidncia recolhida de estudos em ratinhos for compatvel com o
que acontece no homem, as clulas germinais primordiais podem resultar de
uma diferenciao muito precoce. Na verdade, foi possvel demonstrar
naquela espcie animal que no epiblasto j possvel identificar clulas
germinais primordiais. Este facto deve ser realado quando se pensa em
mosaicismo gonadal.
Durante a migrao desde a parede posterior do saco vitelino para as
cristas genitais, as clulas germinais so sensveis aco mitognica do factor
Steel, pelo que se verifica proliferao celular.
Embora a determinao sexual ocorra no momento da fecundao, a
diferenciao gondica masculina ou feminina apenas visvel cerca da
7 semana de desenvolvimento embrionrio. Enquanto as gnadas forem
indiferenciadas, potencialmente, h a possibilidade de um embrio evoluir
fenotipicamente para o sexo masculino ou para o sexo feminino. Se o
embrio for 46,XY, originam-se testculos com tubos seminferos, clulas
intersticiais de Leydig e clulas de Sertoli, independentemente da presena
de clulas germinais viveis (Fig. XV.5). Se for 46,XX, constitui-se um ovrio,
para o que essencial a presena de clulas germinais viveis. Se as clulas
germinais no migrarem at crista genital ou se degenerarem, como na
monossomia 45,X, constituem-se apenas formas vestigiais das gnadas
(gnadas em fita).
No ratinho, foi demonstrada a expresso do gene Sox9 nas cristas
genitais, tanto em embries do sexo masculino como do sexo feminino.
No entanto, a antecipar a diferenciao gonadal masculina h um aumento
da expresso do gene Sox9 e a antecipar a diferenciao gonadal feminina
observa-se uma diminuio da sua expresso.
326
11. DESENVOLVIMENTO SEXUAL MASCULINO

A presena de um cromossoma Y determinante para que o esboo
gonadal evolua para testculo e, consequentemente, se desenvolva um
embrio fenotipicamente do sexo masculino. Contudo, mais do que a
presena do cromossoma Y, essencial a presena do gene SRY. Ao factor

de transcrio codificado pelo gene SRY atribuda a funo de iniciador de
um processo que se continua atravs da expresso de outros genes envolvidos
na diferenciao gonadal (Fig. XV.5).
Nos embries 46,XY, as clulas intersticiais de Leydig, que entretanto se
diferenciaram no testculo, produzem androgneos (testosterona e
androstenediona) entre a 9 e a 14 semanas de desenvolvimento
embrionrio. Seguidamente, ocorre uma involuo destas clulas e apenas
na puberdade volta a haver produo de androgneos pelas clulas de Leydig. As molculas de testosterona ligam-se a receptores citoplasmticos,
funcionando estes complexos como factores de transcrio que actuam sobre
sequncias intensificadoras activadoras da expresso de genes responsveis
pela diferenciao dos canais de Wolff em epiddimo, vesculas seminais e
canal deferente.
Gnada indiferenciada
SRY
DAX1
+
Genes de diferenciao
masculina (v.g., SOX9)
DAX1
Ovrio
Ausncia de
hormona
anti-mulleriana
Ausncia de
testosterona
Testculo
Ausncia
de diidro-testosterona
Clulas de
Sertoli
Clulas de
Leydig
5-alfa-reductase
Diferenciao da Regresso dos

genitlia interna canais de Wolff
(canais de Mller)
Trompas
tero
Parte superior
da vagina
Testosterona
Diferenciao da
genitlia externa
Hormona
anti-mulleriana
Clitris
Pequenos lbios
Grandes lbios
Regresso dos Diferenciao da

canais de Mller genitlia interna
(canais de Wolff)
Epiddimo
Canal deferente
Vesculas seminais
Diidro-testosterona
Diferenciao
da genitlia
externa
Pnis
Escroto
Prstata
Fig. XV.5 Diagrama dos passos e dos acontecimentos subjacentes diferenciao ovrica e testicular
e diferenciao sexual masculina e feminina.
327
A partir da testosterona forma-se diidrotestosterona por aco da enzima

5-alfa-reductase. Esta enzima produzida pelos primrdios da genitlia externa.
A partir da 12 semana, possvel distinguir morfologicamente um feto como
do sexo masculino ou do sexo feminino. Por aco da diidrotestosterona, h
diferenciao do pnis a partir do tubrculo genital, do escroto por fuso mdia
das protuberncias genitais e da prstata a partir do epitlio uretral.
Com a diferenciao testicular ocorre tambm a diferenciao de clulas
de Sertoli e, pela 8 semana de gestao, a produo da hormona anti-mulleriana por estas clulas. A hormona anti-mulleriana provoca a
regresso dos canais de Mller.
Num embrio 46,XX, em que, anormalmente, se encontre o gene SRY
haver uma diferenciao masculina idntica que se observa na sndroma
de Klinefelter. A presena do gene SRY num cromossoma X pode dever-se a
emparelhamento meitico assimtrico. De facto, o gene SRY localiza-se no
brao curto do cromossoma Y, em posio muito prxima da regio pseudoautossmica. Quando ocorre emparelhamento assimtrico, a regio pseudoautossmica do cromossoma Y e uma parte adjacente do seu brao longo
correspondente ao locus SRY emparelham com a regio telomrica do
cromossoma X envolvida na recombinao meitica. Assim, durante o crossing-over, o gene SRY pode passar para o cromossoma X, originando-se um
gmeta 23,X, portador do gene SRY e um gmeta 23,Y sem gene SRY. O ovo
resultante da fecundao de um ovcito 23,X por um espermatozide 23,X
portador do gene SRY, dar origem a um embrio 46,XX, contendo no seu
genoma uma cpia do gene SRY. Este embrio ter um desenvolvimento
sexual interno e externo masculino, embora seja citogeneticamente feminino.
12. DESENVOLVIMENTO SEXUAL FEMININO

328
No embrio do sexo feminino 46,XX, pela ausncia do gene SRY, vai

ocorrer a diferenciao das gnadas primitivas em ovrio e formao de
ovognias a partir das clulas germinais primordiais (Fig. XV.5). No princpio
do quarto ms de gestao, as ovognias iniciam a primeira diviso da meiose
que pra ainda na profase I, na fase de diplteno (ovcitos tipo I). Aps a
puberdade, em cada ciclo menstrual, a meiose reactivada em alguns
ovcitos. O processo meitico evolui at metafase da segunda diviso e

suspenso de novo. Aps a ovulao, se ocorrer fecundao do ovcito,
completa-se a segunda diviso da meiose.
No embrio do sexo feminino, na ausncia de androgneos (embora haja
receptores citoplasmticos para os androgneos) e de hormona anti-mulleriana, ocorre a regresso dos canais de Wolff e desenvolvem-se os
canais de Mller dando origem s trompas, ao tero e parte superior da
vagina (Fig. XV.5). Dos primrdios dos rgos genitais externos, originam-se
os grandes lbios a partir das protuberncias genitais, os pequenos lbios a
partir das pregas genitais e o clitris a partir do tubrculo genital.
Em embries 46,XY, em que o gene SRY tenha uma mutao que iniba a
sua aco, a diferenciao tambm feminina, embora haja fraco
desenvolvimento dos caracteres sexuais secundrios e as gnadas se apresentem
em fita, uma condio semelhante que se observa na sndroma de Turner.
Ocasionalmente, um embrio 46,XY pode no exprimir receptores para
os androgneos, por mutao do gene AR. Nestes casos, h testculos e
produo de testosterona, mas a impossibilidade de se formarem os
complexos que funcionam como factores de transcrio associados
expresso dos genes responsveis pela diferenciao genital masculina,
permite que os rgos genitais externos do embrio se desenvolvam como
no sexo feminino. Esta condio, de natureza recessiva ligada ao X,
caracterizada pela insensibilidade aos androgneos, classicamente conhecida
como sndroma de feminizao testicular, embora actualmente se designe
como sndroma de insensibilidade aos androgneos. O fentipo feminino
e a orientao psicosexual tambm feminina. Contudo, h ausncia de
trompas de Falpio e de tero. A vagina curta e termina em fundo de saco.
A genitlia externa feminina e normal. A esterilidade uma constante.
Habitualmente, o diagnstico feito devido a amenorreia primria ou
por hrnia inguinal em que se encontra um testculo no canal inguinal.
Os testculos tambm se podem encontrar nos grandes lbios.
O desenvolvimento dos caracteres sexuais secundrios na puberdade
reduzido no que respeita pilosidade axilo-pbica, embora haja desenvolvimento mamrio. Como tratamento dever-se- fazer estrogenoterapia de
substituio para desenvolver caracteres sexuais secundrios e para prevenir
a osteoporose. Os testculos devem ser removidos cirurgicamente, devido ao
risco elevado de malignizao.
329
13. GENES ENVOLVIDOS NA DIFERENCIAO GONADAL E SEXUAL

O gene SRY desempenha um papel central na determinao sexual
masculina. Trata-se de um gene que codifica uma protena que funciona
como factor de transcrio, pertencente classe de protenas com alta
mobilidade (grupo HMG, high-mobility group) caracterizadas pela sua
capacidade para dobrarem o DNA, atravs do seu lugar especfico de
ligao ao DNA. Ao dobrarem o DNA, as protenas HMG podero
proporcionar a interveno de sequncias intensificadoras distantes do gene
alvo. Podero tambm pr sequncias silenciadoras em aco, de forma a
inibirem a transcrio de genes. Assim, o produto do gene SRY o iniciador
de uma cascata de acontecimentos que passa pela expresso sucessiva de
diferentes genes e que conduz diferenciao sexual masculina do embrio.
H indicaes de que a cascata de acontecimentos observada no sexo
masculino se inicia devido inibio da expresso do gene DAX-1 pelo factor de transcrio codificado pelo gene SRY. Na ausncia do gene SRY,
observada em embries 46,XX, a expresso de gene DAX-1 conduz inibio
da expresso dos genes envolvidos na diferenciao masculina e o embrio
tem uma diferenciao sexual feminina.
O gene SRY poder ser o causador da activao da expresso do gene
SOX9, que, por sua vez, iria influenciar a diferenciao das cristas genitais
em testculo, no sexo masculino. Mutaes observadas neste gene esto
associadas a diferenciao sexual feminina em embries 46,XY e, devido
aco pleiotrpica da protena que codifica (regula tambm a condrognese
e a expresso do gene COL2A1 do colagneo) a sua mutao provoca
tambm o aparecimento de malformaes sseas sob a forma de displasia
campomlica.
330
14. TIPOS DE SEXO

Para se compreenderem as ambiguidades sexuais caber referir as
diferentes formas de definir o sexo individual: cromossmico, gondico, genital, somtico, psicolgico, social e legal.
O sexo cromossmico baseia-se na constituio cromossmica do

indivduo como resultado da determinao sexual que ocorre no momento
da fecundao. Pode ser 46,XX ou 46,XY.
O sexo gondico tem a ver com a presena de testculos nos embries
46,XY, por diferenciao dos esboos gonadais primordiais mediada pela
expresso do gene SRY (ou nos embries 46,XX que sejam portadores do
gene SRY), ou de ovrios nos embries 46,XX.
O sexo genital masculino resulta da diferenciao dos canais de Wolff
em epiddimo, vesculas seminais e canal deferente. O sexo genital feminino
resulta da diferenciao dos canais de Mller em trompas, tero e parte
superior da vagina. A definio do sexo genital inclui tambm as estruturas
anatmicas resultantes da diferenciao dos esboos embrionrios da genitlia
externa em pnis, escroto e prstata no sexo masculino ou em clitris,
grandes lbios e pequenos lbios no sexo feminino. Para que ocorra a
diferenciao genital masculina essencial que tenha havido diferenciao
testicular, que se verifique a produo de testosterona e que esta actue sobre
as clulas alvo, bem como o metabolismo da testosterona em diidrotestosterona. As alteraes do equilbrio hormonal podem perturbar o normal
desenvolvimento dos rgos genitais, conduzindo a ambiguidades sexuais.
O sexo somtico definido em funo dos caracteres sexuais
secundrios. O seu desenvolvimento inicia-se com a puberdade. No sexo
masculino, a puberdade tem lugar cerca dos 12 a 13 anos, no ambiente
hormonal determinado pelo aumento da produo de androgneos.
Comporta o crescimento dos testculos e do pnis, o incio da actividade
prosttica e da produo de espermatozides, o crescimento do sistema piloso
axilo-pbico e da barba, a mudana de voz para tom mais grave, a
acentuao do desenvolvimento da cintura escapular. No sexo feminino, a
puberdade tem incio mais precocemente do que no sexo masculino, em
mdia cerca dos 11 anos. Manifesta-se atravs do crescimento mamrio e
da pigmentao das aurolas mamrias, o desenvolvimento do sistema piloso
axilo-pbico (com morfologia pbica feminina), o desenvolvimento dos
genitais internos e externos, a acentuao da cintura plvica e a menarca
(incio dos ciclos menstruais).
O sexo psicolgico tem a ver com a auto-imagem. A identidade de cada
indivduo forma-se nos primeiros anos de vida, conduzindo auto-identificao de cada indivduo como sendo do sexo masculino ou do sexo feminino.
331
O sexo social diz respeito ao sexo que a sociedade atribui a cada

indivduo.
O sexo legal baseia-se nos dados registados nos documentos legais de
identificao de cada indivduo, no que tem a ver com o sexo.
15. HERMAFRODITISMO VERDADEIRO
332
O hermafroditismo verdadeiro uma situao bastante rara de

ambiguidade sexual. mais frequente na raa negra, na frica Central.
A origem do hermafroditismo verdadeiro tem sido atribuda existncia
de quimerismo 46,XX/46,XY, de mosaicos dos cromossomas sexuais, de
translocaes entre o cromossoma Y e o cromossoma X ou entre o
cromossoma Y e um autossoma, e a mutaes de genes autossmicos.
Tm sido referidos casos familiares de hermafroditismo verdadeiro.
Citogeneticamente, verifica-se que cerca de 60% dos casos tm um caritipo
46,XX, podendo tambm ocorrer caritipos 46,XX/46,XY, 46,XY/47,XXY ou
46,XX/47,XXY, entre outros.
Clinicamente, deve suspeitar-se de hermafroditismo verdadeiro face a
ambiguidade dos genitais e presena de uma gnada nas formaes lbioescrotais. A presena de tecido ovrico e testicular confirmada por estudo
histolgico condio essencial para fazer o diagnstico de hermafroditismo
verdadeiro. No diagnstico diferencial, deve ser excluda a possibilidade de
pseudo-hermafroditismo.
No hermafroditismo verdadeiro o tecido ovrico e o tecido testicular
podem-se encontrar numa mesma gnada (ovotestis) ou em gnadas opostas.
A sua classificao baseia-se no tipo de gnada e na sua localizao.
Pode, por isso, ser unilateral, bilateral ou alterno. O tipo unilateral pode ser
completo ou incompleto. O tecido gonadal pode-se localizar no ovrio, na
regio inguinal ou nas estruturas lbio-escrotais.
Durante o exame fsico, encontram-se genitais externos habitualmente
ambguos, em cerca de dois teros dos casos identificados como do sexo
masculino e com hipospdias. A fuso mdia dos esboos lbio-escrotais
incompleta, h geralmente criptorquidia e hrnia inguinal em cerca de metade
dos casos, podendo a hrnia conter uma gnada ou o tero.
Em termos de genitais internos, na maioria dos casos encontra-se um

ovotestis associado a trompa em metade dos casos. A diferenciao dos
canais de Wolff ou de Mller depende da gnada anexa. A existncia de um
ovrio leva diferenciao de uma trompa do mesmo lado, e a diferenciao
de um testculo conduz diferenciao de um canal deferente.
Na puberdade, frequente o desenvolvimento mamrio, com ocorrncia
de menstruaes em metade dos casos. Pode ocorrer hematria cclica
associada s menstruaes. Os valores para as concentraes da FSH e LH
podem ser prximos dos valores normais, levando ao funcionamento ovrico.
Podem ocorrer ovulaes e inclusive gravidezes a termo em hermafroditas
verdadeiros 46,XX, aps remoo dos testculos. A espermatognese tem sido
raramente referida, dada a natureza disgentica dos testculos.
O tipo de interveno mdica depende da idade do indivduo e da sua
orientao psicosexual, passando habitualmente por uma correco cirrgica
com reconstruo adequada dos genitais externos correspondentes
orientao psico-sexual e pela exrese cirrgica das estruturas do sexo oposto.
A acentuao dos caracteres sexuais secundrias prprios do sexo somtico
reconstrudo (masculino ou feminino) pode necessitar da administrao da
correspondente teraputica hormonal substitutiva.
Face possibilidade de ocorrer cancro da mama e das gnadas deve
haver a necessria vigilncia.
16. PSEUDO-HERMAFRODITISMO
O pseudo-hermafroditismo uma ambiguidade sexual que pode resultar
de perturbaes da diferenciao sexual, de causa gentica ou ambiental.
O pseudo-hermafroditismo pode ser feminino ou masculino.
333
16.1. PSEUDO-HERMAFRODITISMO FEMININO

No pseudo-hermafroditismo feminino encontra-se um caritipo 46,XX.
Habitualmente, os ovrios e as estruturas derivadas dos canais de Mller tm
um desenvolvimento normal. A ambiguidade sexual fica assim a dever-se a
334
virilizao dos rgos genitais externos com hipertrofia do clitris, fuso

parcial dos grandes lbios e localizao anormal do orifcio uretral.
A etiologia pode ser gentica, de modo a conduzir a perturbaes da
sntese dos esterides pela suprarrenal, como na hiperplasia congnita da
suprarrenal. De forma bastante rara, pode ser devido ao efeito teratognico
de concentraes elevadas de androgneos, resultantes da sua produo por
um tumor do ovrio (v.g., arrenoblastoma) ou da administrao de
testosterona ou de progestativos de sntese durante a gravidez.
A hiperplasia congnita da suprarrenal a causa mais frequente de
pseudo-hermafroditismo feminino. de natureza autossmica recessiva.
Resulta de uma sntese deficiente do cortisol, com consequente hipersecreo
de ACTH, por falta de retrorregulao negativa pelo cortisol. A hipersecreo
de ACTH provoca hiperplasia do cortex da glndula suprarrenal. Entre as
enzimas para as quais se pode encontrar deficincia contam-se a
21-hidroxilase, a 3 -hidroxi-desidrogenase e a 11 -hidroxilase.
A deficincia de 21-hidroxilase a causa mais frequente de ambiguidade
sexual em recm-nascidos. A hipersecreo de ACTH conduz a um aumento
da actividade do cortex suprarrenal com produo anormalmente elevada de
precursores de esterides, a partir dos quais so sintetizados androgneos.
Esta secreo pode-se verificar a partir do 3 ms de gravidez dado que, por
esta altura, as glndulas suprarrenais j tm diferenciao funcional. O aumento
da concentrao de androgneos neste perodo do desenvolvimento fetal vai
provocar a virilizao dos genitais externos de fetos cromossomicamente 46,XX,
com hipertrofia do clitris, fuso dos esboos lbio-escrotais e deslocao do
orifcio uretral para uma localizao prxima da que se observa no sexo
masculino. Pode ainda observar-se hiperpigmentao do escroto e das aurolas
mamrias, no momento do nascimento, por aco estimulante da ACTH sobre
os melancitos, sinal que deve ser valorizado em recm-nascidos com genitlia
externa masculina normal, no sentido de pensar em deficincia enzimtica
congnita que afecte a sntese do cortisol, de forma a fazer o diagnstico da
situao no perodo perinatal. Se o diagnstico no feito nesta altura, apenas
cerca dos dois anos haver manifestaes fenotpicas sugestivas com
crescimento de pelos pbicos e crescimento acelerado.
Devido sua insensibilidade aos androgneos, o desenvolvimento dos
ovrios, a partir dos esboos gonadais e dos rgos genitais internos, a partir
dos canais de Mller, no afectado.
O tratamento baseia-se na administrao de corticosterides e na

correco cirrgica da virilizao dos genitais externos em idade precoce (se
possvel at aos 18 meses), para que haja um adequado desenvolvimento
psico-sexual feminino, em funo do sexo cromossmico, gondico e genital.
16.2. PSEUDO-HERMAFRODITISMO MASCULINO

Os casos de pseudo-hermafroditismo masculino caracterizam-se pela
presena de um caritipo 46,XY e por uma deficiente virilizao dos rgos
genitais externos, embora os testculos estejam presentes. Podem resultar de
insuficiente produo de androgneos pelos testculos fetais devido a
deficincia de enzimas envolvidas na sua sntese, ou de insensibilidade aos
androgneos a nvel dos esboos sexuais embrionrios. Quando h
insuficiente produo de androgneos por bloqueio da sua sntese, a criana
tem um fentipo aparentemente feminino. Contudo, e como habitual na
altura da puberdade, as glndulas suprarrenais comeam a produzir alguma
testosterona, pelo que se observa masculinizao, com desenvolvimento de
caracteres sexuais secundrios masculinos. O clitris tem um desenvolvimento
significativo, podendo assemelhar-se a um pnis.
A insensibilidade perifrica aos androgneos a causa mais comum de
pseudo-hermafroditismo masculino. responsvel pela sndroma de
feminizao testicular completa (tambm designada como sndroma de Morris). Os indivduos com esta sndroma tm um caritipo 46,XY e testculos
bilaterais de tamanho normal com localizao intra-abdominal, no canal inguinal ou nos grandes lbios. A genitlia externa feminina na altura do
nascimento, a vagina curta e em fundo de saco e h ausncia de
desenvolvimento dos rgos genitais internos com origem nos canais de
Muller devido produo de hormona anti-mulleriana pelos testculos.
Em cerca de 50% dos casos, observa-se hrnia inguinal. H hiperplasia das
clulas intersticiais de Leydig e nveis sricos elevados de LH. Os valores de
testosterona circulante apresentam valores compatveis com a funo testicular normal no sexo masculino. Na puberdade, h desenvolvimento dos
caracteres sexuais secundrios femininos, com desenvolvimento mamrio e
crescimento dos grandes lbios, embora o sistema piloso axilo-pbico seja
335
escasso ou ausente. Contudo, no ocorre menarca, por ausncia de genitais

internos.
A sndroma de feminizao testicular completa tem como etiologia, em
60 a 70% dos casos, a ausncia de receptores para os androgneos, nos
rgos alvo. Nos restantes casos, embora os receptores estejam presentes,
as manifestaes so idnticas s que se observam na sua ausncia, pelo que
deve haver uma deficincia a jusante, na via de aco dos androgneos.
Por vezes, pode ocorrer uma insensibilidade parcial aos androgneos, de
modo a permitir aumento do clitris e fuso lbio-escrotal, em indivduos que
partilham os demais aspectos fenotpicos presentes na insensibilidade
completa. Estes casos designam-se como sndroma de feminizao testicular
incompleta. provvel que, nestes casos, haja uma reduo da quantidade
ou da qualidade dos receptores para os androgneos.
A sndroma de feminizao testicular completa e a sndroma de
feminizao testicular incompleta tm um tipo de hereditariedade recessiva
ligada ao cromossoma X.
Para a sndroma de feminizao testicular completa e tambm para a
incompleta o gene respectivo foi localizado em Xq11. A forma incompleta
deve-se a mutaes geralmente do tipo missense que no inactivam
completamente a funo do receptor, enquanto que nas formas completas
h mutaes do tipo nonsense ou frameshift com consequncias mais
graves.
336
CAPTULO XVI
ANOMALIAS CONGNITAS
1. INTRODUO
As anomalias congnitas so alteraes estruturais ou funcionais decorrentes
de perturbaes do desenvolvimento fsico (anomalias da morfognese) presentes
ou j determinadas in utero ou no momento do nascimento, que no sejam
originadas por traumatismos durante o parto. As anomalias congnitas podem no
ser diagnosticadas ao nascer, em funo da localizao e/ou da traduo funcional.
O risco na populao geral para o nascimento de uma criana com uma
anomalia congnita relevante, diagnosticada nos primeiros dias de vida, de
cerca de 3%. Naturalmente que, em condies especficas de exposio a
agentes ambientais teratognicos, o risco maior.
Face a uma anomalia congnita, devem ser feitos os estudos necessrios
para determinar a etiologia e, a partir do conhecimento desta, o prognstico,
a teraputica, o risco de recorrncia e os meios disponveis para eventual DPN.
Se as anomalias forem detectadas num nado-morto, devem ser feitos os
estudos necessrios para a determinao do diagnstico etiolgico das
anomalias, de forma a servirem para aconselhamento gentico, preferencialmente pr-concepcional, dentro do casal ou da famlia. Este estudo est
sobretudo indicado em fetos abortados com menos de 20 semanas quando,
dentro do casal, houve um aborto espontneo em gravidez anterior, um
nado-morto ou um recm-nascido com anomalias congnitas, bem como em
nados-mortos e em crianas que morram durante o perodo neonatal de
causa desconhecida ou que aparentem atraso de crescimento intra-uterino.
337
As anomalias congnitas dividem-se em anomalias congnitas major

(presentes, em cerca de 3% dos recm-nascidos) e anomalias congnitas minor
(presentes em cerca de 15% dos recm-nascidos). As anomalias congnitas major
so defeitos estruturais com relevncia mdica ou esttica, enquanto que as
anomalias congnitas minor no tm relevncia mdica ou esttica (Tabela XVI.1).
Quanto maior for o nmero de anomalias congnitas minor presentes num
recm-nascido, maior a probabilidade de haver tambm uma anomalia
congnita major. Em cerca de 20% dos casos com mltiplas anomalias congnitas
minor, observam-se, concomitantemente, anomalias congnitas major.
Tabela XVI.1. Exemplos de anomalias congnitas minor
EXEMPLOS DE ANOMALIAS
Apndices pr-auriculares
Clinodactilia do 5 dedo
Coloboma
Fossetas labiais
Fossetas pr-auriculares
Hrnia umbilical
Hidrocelo
Mamilos supranumerrios
Pregas epicnticas
Prega palmar nica (siamesa)
Sindactilia por tecidos moles
vula bfida
Em funo do mecanismo de origem, as anomalias congnitas

classificam-se como malformaes, disrupes, deformaes, displasias,
sequncias ou associaes.
Em funo da quantidade de anomalias observadas, as anomalias
congnitas podem ser nicas ou mltiplas.
338
2. MALFORMAES
Uma malformao um defeito morfolgico ou estrutural de um rgo,
parte de um rgo ou de uma regio do organismo, que resulta de um erro
primrio (intrnseco) e precoce do desenvolvimento embrionrio. Quanto mais
precocemente, durante a organognese, ocorrer o erro causador da
malformao, mais graves e complexas so as consequncias (Tabela XVI.2).
Para erros que ocorram antes dos 23 dias de desenvolvimento embrionrio,

so raras as malformaes que se podem observar, dada a sua gravidade.
As malformaes tm, frequentemente, um risco de recorrncia significativo.
Tabela XVI.2. Correlao entre algumas anomalias congnitas e o momento da gestao
antes do qual deve ocorrer o erro
ANOMALIA
IDADE GESTACIONAL
Holoprosencefalia
Anencefalia
Meningomielocelo
Lbio leporino
Defeitos do septo interventricular
Sindactilia
Atrsia duodenal
Onfalocelo
Fenda palatina
Hipospdias
Criptorquidia
23 dia
26 dia
28 dia
6 semanas
6 semanas
6 semanas
7-8 semanas
10 semanas
10 semanas
12 semanas
7-9 meses
Adaptado de Cohen MM (1997).
Na maioria das vezes, as malformaes congnitas major so de etiologia

desconhecida (cerca de 60% dos casos), seguindo-se as causas multifactoriais
(20%). Outras causas menos frequentes so as condies monognicas (7,5%),
as cromossomopatias (6%), as doenas maternas (3%) as infeces
congnitas (2%) e a exposio a teratogneos (1,5%).
Os rgos mais frequentemente atingidos por malformaes congnitas major
so, em primeiro lugar, o crebro com uma prevalncia de 1% nos recm-nascidos
(v.g., defeitos do tubo neural, holoprosencefalia, macrocefalia, microcefalia),
seguido do corao com 0,8% (v.g., defeitos do septo interventricular, persistncia
do canal arterial, defeitos do septo interauricular, tetralogia de Fallot), dos rins e
vias urinrias com 0,4% (v.g., agenesia renal bilateral, rim poliqustico infantil ou
do adulto, hipospdias) e dos membros com 0,2% (v.g., aplasia do radial, amelia,
focomelia, artrogripose, sindactilia, polidactilia).
As malformaes congnitas podem ser nicas (na sua maioria de
etiologia polignica ou multifactorial) ou mltiplas (de origem cromossmica,
teratognica, monognica ou desconhecida). As anomalias mltiplas
observadas desenvolvem-se independentemente umas das outras, embora a
causa seja comum (v.g., anomalias observadas numa cromossomopatia, na
rubola ou por aco dos retinides). As anomalias nicas representam a
grande maioria das malformaes congnitas (cerca de 70% dos casos).
339
Quando um determinado grupo de anomalias primrias que ocorrem

num indivduo se constituem em padro que se repete em diversos indivduos
e que se pensa estarem relacionadas patogenicamente, a condio designa-se como sndroma polimalformativa (v.g., sndroma de Down, sndroma de
Klinefelter, sndroma de Marfan). A etiologia frequentemente nica e
conhecida (cromossmica, gnica ou teratognica), embora haja muitas
sndromas de causa desconhecida. As sndromas so uma manifestao de
pleiotropia. Em nmero de vrios milhares, as sndromas polimalformativas
constituem o objecto de estudo da dismorfologia.
3. ASSOCIAO
Por vezes, verifica-se uma tendncia para que um grupo de malformaes ocorra, concomitantemente, num mesmo indivduo, com uma
frequncia maior do que seria de esperar smente pelo acaso, e que se repete
em dois ou mais indivduos. Trata-se de uma associao. No essencial difere
da sndroma por no se encontrar uma explicao plausvel, ou seja, uma
relao causa/efeito. Habitualmente, no tem a ver com uma anomalia de
natureza gentica, tendo, por isso, um risco baixo de recorrncia.
Uma associao designa-se, frequentemente, pelo acrnimo constitudo
pelas primeiras letras das palavras que traduzem as anomalias observadas
(v.g., CHARGE: colobomas, heart defects, atresia choanae, mental retardation, growth retardation, ear anomalies; VATER: vertebral defects, anal atresia,
tracheo-esophageal fistula, renal defects, radial limb dysplasia).
340
4. SEQUNCIAS
Designam-se como sequncias, as condies em que duas ou mais
anomalias congnitas, funcionais ou estruturais, se estabelecem uma aps a
outra, secundariamente a uma anomalia inicial nica. A anomalia inicial pode
ser uma malformao, uma disrupo ou uma deformao.
Na sequncia de Potter, a agenesia renal bilateral ou a obstruo devida

a valvas uretrais origina oligomnios por deficincia de produo de urina,
o que provoca deformaes fetais secundrias e hipoplasia pulmonar com
dificuldade respiratria e morte. A causa habitualmente espordica, com
um risco de recorrncia de 1% a 3%.
5. DISRUPES
A disrupo um defeito morfolgico ou estrutural de um rgo, parte
de um orgo ou de uma regio importante do organismo, resultante de
paragem ou de interferncia num processo de desenvolvimento que era
originalmente (intrinsecamente) normal.
As disrupes ocorrem em cerca de 1% a 2% dos recm-nascidos.
Surgem numa fase intermdia do desenvolvimento, podendo atingir a fase
embrionria ou a fase fetal, pelo que tambm podem ser designadas por
malformaes secundrias ou extrnsecas. Os factores extrnsecos envolvidos
podem ser uma infeco, isqumia, radiao, agresses teratognicas, ou
traumatismo. O risco de mortalidade perinatal elevado.
As disrupes so habitualmente espordicas, embora factores
hereditrios possam predispor para o seu desenvolvimento, pelo que o risco
de recorrncia reduzido.
So exemplos de disrupo, a anoftalmia por irradiao, as amputaes
dos membros devidas a bridas amniticas, ou a ausncia do plo ceflico por
falta de oxigenao.
6. DEFORMAES
341
As deformaes so alteraes da forma ou da posio de partes do

organismo causadas por foras mecnicas anormais exercidas durante um
perodo longo (v.g., luxao congnita da anca, p boto, assimetria mandibular, plagiocefalia). Estas foras podem ser intrnsecas ao feto (v.g., defeitos do
tecido conjuntivo, p boto por miopatia) ou extrnsecas a ele (v.g., p equino
por oligomnios, gravidez mltipla, malformao uterina).
As deformaes surgem, habitualmente, numa fase tardia do desenvolvimento fetal. Podem aparecer no perodo pr-natal ou na vida extra-uterina.
A razo mais comum para a ocorrncia de deformaes a falta de
movimento do feto, seja devida a causas mecnicas (v.g., anomalias uterinas,
gemelaridade, apresentao fetal anormal), a malformaes (v.g., agenesia
renal, espinha bfida) ou a deficincias funcionais (v.g., perturbaes
neurolgicas ou musculares, defeitos do tecido conjuntivo).
Cerca de 2% dos recm-nascidos apresentam deformaes, sendo
mltiplas em cerca de 30% dos casos. Em mais de 90% dos casos, observa-se regresso, seja espontaneamente ou aps interveno mdica de execuo
simples (v.g., luxao congnita da anca).
7. DISPLASIAS
As displasias consistem num defeito primrio que envolve uma
organizao anormal das clulas nos tecidos, ou dos tecidos numa
determinada estrutura (v.g., displasia ssea, displasia ectodrmica). So
atingidas as diversas partes do corpo em que os tecidos envolvidos esto
presentes. A maioria das displasias inclui-se entre as anomalias congnitas
de causa monognica, pelo que tem uma elevado risco de recorrncia numa
famlia.
8. MALFORMAES CONGNITAS DE CAUSA MULTIFACTORIAL

342
A natureza multifactorial destas malformaes implica factores genticos

e factores ambientais no seu desenvolvimento. A maioria das malformaes
congnitas nicas a nvel cerebral, do corao e dos rins e vias urinrias tem
etiologia multifactorial.
Para a maioria dos casos de malformaes de causa multifactorial, o risco
de recorrncia da ordem de 2% a 5%.
Nas malformaes de etiologia multifactorial (Tabela XVI.3), importante

identificar os factores ambientais envolvidos, para intervir no sentido de
afastar os factores de risco ou para implantar medidas preventivas.
Um exemplo da utilidade deste conhecimento, dado pelo contributo que
a administrao de um suplemento de cido flico durante a gravidez tem
vindo a dar para a reduo da incidncia dos defeitos do tubo neural.
A interveno no que respeita aos factores genticos muito limitada, logo
partida, pela falta de metodologias laboratoriais para a sua identificao.
Tabela XVI.3. Exemplos de malformaes congnitas nicas, de natureza multifactorial

EXEMPLOS DE MALFORMAES
Agenesia renal
Anencefalia
Defeitos do septo interauricular
Defeitos do septo interventricular
Disgenesia renal
Encefalocelo
Espinha bfida
Estenose hipertrfica do piloro
Fenda labial e/ou palatina
Hipospdias
Luxao congnita da anca
P boto
Persistncia do canal arterial
Tetralogia de Fallot
9. MALFORMAES DE CAUSA MONOGNICA

As alteraes monognicas podem originar anomalias congnitas nicas
ou mltiplas (Tabela XVI.4). A identificao do tipo de hereditariedade
monognica presente e a determinao do risco de recorrncia que lhes
inerente e que elevado, so relevantes para o aconselhamento gentico.
O risco de recorrncia para as condies autossmicas recessivas ou recessivas
ligadas ao X, de 25%. Para as condies autossmicas dominantes, o risco
de recorrncia de 50%.
343
Tabela XVI.4. Exemplos de malformaes com etiologia monognica

ANOMALIAS NICAS
Rim poliqustico infantil

Aniridia*
Braquidactilia*
Ectrodactilia*
Megalencefalia*
Microcefalia*
Microftalmia*
Polidactilia*
Hidrocefalia*
HEREDITARIEDADE
AR
AD
AD
AD
AD
AD ou AR
AD ou AR
AD
XR
SNDROMAS POLIMALFORMATIVAS
Meckel (microcefalia, encefalocelo, fenda palatina, polidactilia

ps-axial, rins poliqusticos)
Apert (craniosinostose, sindactilia ssea dos dedos 2 a 5)
Crouzon (craniosinostose, hipoplasia da face mdia, proptose
ocular, surdez de conduo)
HEREDITARIEDADE
AR
AD (mutao do gene FGFR2)
AD (mutaes de novo em 25%
dos casos)
AR autossmica recessiva; AD autossmica dominante; XR ligada ao X.

(*) A hereditariedade monognica referida a causa destas anomalias numa percentagem varivel de casos.
10. MALFORMAES DE CAUSA CROMOSSMICA
344
Nas anomalias congnitas em que estejam envolvidas aneuploidias

completas ou parciais dos cromossomas autossmicos, encontram-se
habitualmente atraso de desenvolvimento intra-uterino e ps-natal,
malformaes mltiplas e atraso mental. No seu conjunto e na maioria dos
casos, as mltiplas anomalias presentes num indivduo permitem fazer o
diagnstico.
A identificao das alteraes cromossmicas pode ser feita por
citogentica clssica (v.g., trissomias 21, 18 ou 13), ou exigir estudos citogenticos de alta resoluo quando so microdelees. Por vezes, as
microdelees apenas so detectveis por FISH (v.g., sndroma de Di George,
por deleo em 22q11-2).
O risco de recorrncia de cerca de 1% para as trissomias livres, entre 5% e 15% para as translocaes robertsonianas equilibradas entre
diferentes cromossomas, e de 100% quando um progenitor tem uma
translocao robertsoniana equilibrada do cromossoma envolvido na trissomia
(v.g., t(21,21)).
11. MALFORMAES DEVIDAS A DOENAS MATERNAS

A diabetes mellitus um exemplo de doena metablica materna que
provoca aumento de risco de doena na descendncia, traduzido em
malformaes do sistema nervoso central (microcefalia, anencefalia,
holoprosencefalia, espinha bfida), anomalias do ouvido, cardiopatias
congnitas, artria umbilical nica, malformaes das costelas e/ou da coluna
vertebral, malformaes gastro-intestinais e genito-urinrias, agenesia do
sagrado, hipoplasia femoral e sirenomlia. O risco para a ocorrncia de
malformaes 2-3 vezes mais elevado, em comparao com a populao
geral. No entanto, se os valores da glicmia forem mantidos dentro da
normalidade, o risco para anomalias congnitas reduzido.
De igual modo, o controlo da fenilalaninmia antes de engravidar e
durante a gravidez, em mulheres com FCU, evita o aumento de risco para o
desenvolvimento de anomalias na descendncia (aborto, microcefalia, atraso
mental, atraso de desenvolvimento intra-uterino e cardiopatias congnitas).
Na ausncia deste controlo e de valores de fenilalaninmia >20 mg/dl, o risco
para atraso mental prximo de 100%.
As infecces maternas durante a gravidez tambm podem provocar malformaes no embrio ou no feto, se os agentes infecciosos envolvidos forem teratognicos (v.g., citomegalovrus, herpes, rubola, sfilis, toxoplasmose, varicela).
12. SNDROMAS MALFORMATIVAS DE CAUSA TERATOGNICA

Um teratogneo (a palavra incorpora a raz grega teras que significa
monstro) define-se como um agente capaz de provocar anomalias congnitas
da forma ou da funo, por perturbao do desenvolvimento normal do embrio
e/ou do feto. A sua aco pode ocorrer por interferncia com a proliferao
celular conduzindo a hiperplasia, hipoplasia ou assimetrias do crescimento, por
provocao directa de morte celular ou por perturbao da diferenciao celular
durante a morfognese. Trata-se de processos disruptivos que atingem habitualmente diversos tecidos no embrio ou no feto. As consequncias podem-se
traduzir em morte do embrio ou do feto, malformaes ou anomalias
estruturais, atraso de crescimento, ou deficincias funcionais.
345
Na ausncia de exposio ao teratogneo em causa, no h risco de

recorrncia em nova gravidez dentro do casal.
A teratognese pode ser devida a agentes infecciosos transmitidos durante uma infeco materna, existncia de doenas metablicas na me,
ingesto de determinadas substncias txicas, ou ainda tomada de
substncias com fins teraputicos (Tabela XVI.5).
No que respeita ao efeito teratognico de algumas substncias, o estudo
prvio em determinados animais pode no demonstrar efeitos teratognicos:
a talidomida no teratognica no rato nem no ratinho, embora o seja no
homem, no macaco e em coelhos. Alis, foram os estudos laboratoriais
realizados em macacos nos EUA e a observao de anomalias atribudas
sua administrao que evitaram que, neste pas, tambm ocorressem os
efeitos teratognicos provocados pela talidomida. Calcula-se que o nmero
de crianas que nasceram entre 1958 e 1963, com anomalias devidas
ingesto da talidomida durante a gravidez, ascenda a mais de 10.000!
Tabela XVI.5. Exemplos de teratogneos, do perodo crtico para actuao

e das anomalias observadas
TERATOGNEOS
PERODO CRTICO
cido retinico >15 dias aps a

concepo
346
ANOMALIAS OBSERVADAS
Aborto espontneo, ausncia de membros, anomalias

cardacas, anomalias do sistema nervoso (v.g., hidrocefalia),
microtia, anomalias oculares, micrognatia
<12 semanas (para
Sndroma fetal alcolica: atraso de desenvolvimento intralcool
(actualmente, a dismorfias craniofaciais, uterina e ps-natal, dificuldade de aprendizagem ou
anomalias do SNC e
microcefalia, atraso mental, facies tpico com fendas
condio
cardacas)
palpebrais pequenas, epicantus, hipoplasia da face mdia,
teratognica
mais importante) >24 semanas (para baixo nariz curto, philtrum longo e liso, lbio superior fino, fenda
peso ao nascer e atraso palatina (15%), anomalias cardacas.
de desenvolvimento
Androgneos
>10 semanas
Masculinizao da genitlia externa no sexo feminino
Citomegalovrus 1 trimestre. A infeco 5% de risco. Atraso de crescimento, aumento da
congnita mais
mortalidade neonatal, microcefalia, calcificao
frequente (1% a 2% periventricular (SNC), atraso mental, coriorretinite, surdez,
dos recm-nascidos)
convulses, hepatomeglia
Cloroquina
Surdez, coriorretinite
Cocana
2 e 3 trimestre
Aborto espontneo, nados-mortos, parto prematuro, baixo peso
ao nascer, cardiopatias, anomalias dos membros. Nos sobreviventes:
maior distraco e maior incapacidade de concentrao
Malformaes uterinas, do colo e do epitlio vaginal,
Dietilstilbestrol <12 semanas
anomalias testiculares, aumento de risco para
adenocarcinoma da vagina e cancro do testculo
Estreptomicina 3 trimestre
Surdez
Fluconazol (em 1 trimestre
Defeitos craneofaciais e dos membros
altas doses
endovenosas)
TERATOGNEOS
PERODO CRTICO
ANOMALIAS OBSERVADAS
Fumo do tabaco Ao longo da gravidez Aumento de risco para abortamento, nados-mortos,

prematuridade, aumento da mortalidade perinatal, baixo
peso ao nascer
Herpes simplex Antes das 20 semanas Aborto quando ocorre durante o 1 trimestre da gravidez.
(mais frequenteAumento da mortalidade fetal, coriorretinite, microcefalia,
mente o vrus tipo
anencefalia, microftalmia, atraso mental, convulses
II do que o tipo I)
Herpes zoster Entre o 3-4 ms de Risco <10% para anomalias graves. Atraso de desenvolvigravidez
mento, microcefalia, microftalmia, cataratas, atrofia cortical,
coriorretinite, fraqueza ou paralisia muscular, hipoplasia
dos membros inferiores, leses cutneas
1 trimestre
Risco de 10% para anomalias. Sndroma fetal hidantonica:
Hidantona
atraso de crescimento intra-uterino e ps-natal, microcefalia,
atraso mental, fenda labial e/ou palatina (1% a 2% de
risco), nariz curto, ptose palpebral, estrabismo, boca grande,
pescoo curto, anomalias cardacas, hipoplasia das unhas
e falanges distais
Fases precoces da
Microcefalia, microftalmia, perturbaes da migrao
Hipertermia
neuronal, atraso mental
(febre materna, gravidez
calor exterior)
<8 semanas
Cardiopatias
Ltio
Radiaes
3-15 semanas de
Morte do embrio, microcefalia, anomalias oculares, atraso
ionizantes
gravidez
de desenvolvimento, atraso mental, mutaes, carcino(sobretudo em
gnese. Para doses 2 rads, o risco muito baixo em
doses altas)
qualquer fase da gravidez
1 ms: 50% de risco
Atraso de crescimento intra-uterino, atraso mental,
Rubola
para malformaes; 2 microcefalia, hidrocefalia, cataratas, microftalmia,
ms: 20%; 3 ms: 6%: coriorretinite, glaucoma, surdez neurosensorial, cardiopatias,
4 e 5 meses: 1% e 2% trombocitopenia, ostelise metafisria
Sfilis
>4 ms
Aborto, nados-mortos, sfilis congnita. Hidrocefalia, surdez
(treponema
neurosensorial, cegueira, atraso mental, leses cutneas, nariz
pallidum)
em sela de montar, rinite, ostete. Metade dos recm-nascidos
infectados apenas apresentam sintomas aos 3 meses
Talidomida
34-50 dia da
Defeitos dos membros desde hipoplasia dos dedos a
gravidez, a contar do focomelia dos quatro membros, cardiopatias, anomalias
incio da ltima
do ouvido, microftalmia, hemangiomas faciais, cegueira,
menstruao
fenda labial e/ou palatina, anomalias orgnicas (causa de
morte em cerca de 40% dos casos)
Tetraciclinas
2 e 3 trimestres
Colorao dos dentes, hipoplasia do esmalte
Toxoplasmose
Valproato de
sdio
Varfarina
Varicela
1 trimestre: 17% de
abortos; 2 trimestre:
25% de abortos ou
doena grave; 3
trimestre: 65% tm
infeco subclnica
<30 dias aps a concepo, para espinha
bfida; 1 trimestre, para
dismorfias
Entre a 6 e a 9 semana
aps a concepo (30%
de risco)
1 trimestre
Aborto espontneo, nados-mortos, prematuridade,

hidrocefalia, calcificaes intracraneanas ao acaso, atraso
mental, convulses, surdez, atrofia do nervo ptico,
cegueira, coriorretinite, cataratas, trombocitopenia, anemia,
hidrpsia fetal
Anencefalia, espinha bfida, mielomeningocelo, atraso de
desenvolvimento, fcies tpico (v.g., hipoplasia da face
mdia, micrognatia)
Atraso de desenvolvimento intra-uterino, atraso mental,
microcefalia, atrofia do nervo ptico, hipoplasia nasal,
anomalias do esqueleto
Cicatrizes cutneas, atrofia muscular, microftalmia,
microcefalia, atraso mental
347
348
Para um mesmo agente teratognico, os efeitos em termos de gravidade

podem variar em diferentes indivduos, o que ter a ver com a susceptibilidade gentica. Por sua vez, a concentrao do agente teratognico em
contacto com o embrio ou feto tambm influencia o seu efeito, havendo
um aumento de risco, para doses mais elevadas. Contudo, muito pequena
a diferena entre os limiares de concentrao mxima e mnima do
teratogneo, para os quais se observa teratognese, na ausncia de efeito
letal para o embrio.
O momento em que o embrio ou feto exposto aco do teratogneo um factor crucial a considerar na avaliao das consequncias da
exposio. Para os diferentes agentes teratognicos, h perodos crticos durante os quais se faz sentir a sua aco malformativa, em relao com a fase
de desenvolvimento das estruturas alvo, no momento da exposio (Tabela
XVI.5). Como regra geral, deve-se ter presente que, nas fases embrionrias mais
precoces (at formao dos trs folhetos embrionrios), os teratogneos tm
uma letalidade elevada, mais do que um efeito teratognico. O perodo mais
crtico do desenvolvimento intrauterino para o estabelecimento de defeitos
congnitos situa-se entre o 18 dia e o final da 8 semana, com um pico crtico
cerca do 30 dia, quando tm lugar as fases fundamentais da organognese
(Tabela XV.1). Nas fases mais tardias da gravidez, as consequncias so
habitualmente moderadas, sob o ponto de vista morfolgico. Contudo, se a
exposio aos teratogneos afectar a formao dos tecidos, podem ocorrer
anomalias graves como o atraso mental.
O crebro um dos rgos com um perodo crtico mais longo, devido
extenso de tempo necessrio para o seu desenvolvimento. Assim, a
probabilidade de sofrer agresses durante o desenvolvimento tambm
maior, pelo que h um nmero elevado de sndromas em que o atraso mental
est presente.
Relativamente ao efeito teratognico dos agentes infecciosos durante a
gravidez, refira-se a elevada vulnerabilidade do sistema nervoso central com
a ocorrncia frequente de microcefalia, atraso mental, convulses,
perturbaes do tnus muscular e dos movimentos e deficincias da audio
e da viso.
A preveno a base para evitar a teratognese. Por isso, essencial
investir no esclarecimento e na educao da populao sobre as condies
e os agentes mais frequentemente envolvidos e sobre as formas de os evitar.
A associao entre a ingesto de determinadas substncias e a ocorrncia

de anomalias de causa teratognica remonta, pelo menos, a Aristteles
(384 a.C. a 322 a.C.) ao ter correlacionado a existncia de problemas em
filhos de mes alcolicas.
Por ser uma condio bastante frequente, registe-se a forma de lidar com
a administrao de antiepilpticos durante a gravidez. Se as convulses
tiverem cessado h mais de dois anos, deve ser proposta a suspenso da
medicao antes de a mulher engravidar. Se houver necessidade de manter
a medicao durante a gravidez, deve ser feita monoterapia, para reduzir o
risco de malformaes.
349
CAPTULO XVII
GENES DE REGULAO DA PROLIFERAO CELULAR.

APOPTOSE. SENESCNCIA
1. GENES DE REGULAO DA PROLIFERAO CELULAR

H vrios tipos de genes envolvidos na regulao da proliferao celular:
de uma forma directa, os protooncogenes e os antioncogenes; de uma forma
indirecta, entre outros, os genes de reparao do DNA e os genes de
metabolismo de genotxicos (Fig. XVII.1). Estes genes, quando alterados a
nvel estrutural ou da sua expresso, podem aparecer relacionados com o
desenvolvimento de cancro.
Genes de reparao do DNA

Genes de metabolismo
351
Protooncogenes
Antioncogenes
Fig. XVII.1 Esquema ilustrativo do equilbrio entre os protooncogenes e os antioncogenes.
1.1. PROTOONCOGENES E ONCOGENES

Os protooncogenes so genes celulares normais, que codificam protenas
constituintes de uma rede implicada na recepo e transduo de sinais e
na regulao da expresso gnica. Desse modo, participam na regulao da
proliferao celular.
Os mecanismos bioqumicos pelos quais actuam os protooncogenes so
a fosforilao de protenas a nvel dos aminocidos tirosina, serina ou
treonina, a regulao metablica por meio de protenas que ligam GTP (como
as protenas G) ou, para os factores de transcrio, a formao de complexos
proteicos ou a interaco protena-DNA.
Os produtos codificados pelos diferentes protooncogenes distribuem-se
desde o espao extracelular at ao ncleo numa rede em que se encontram
factores de crescimento, receptores de membrana, transdutores intracelulares
de sinais e factores de transcrio nucleares (Fig. XVII.2).
Membrana citoplasmtica
Espao extracelular
HIST1
RAS
MET
Ncleo
SIS
SCR
TRK
MOS
ETS
RET
RAF
REL
ERBB2
ERBA
ERBB2
MYC
MYB
BCL2
ABL
FOS
Factor de
crescimento
JUN
KIT
BCL2
352
BCL2
FMS
Citoplasma
Retculo endoplasmtico
Mitocndria
Fig. XVII.2 Distribuio dos produtos dos protooncogenes pelos compartimentos extracelular e
intracelular. A notao em itlico indica os respectivos genes codificadores.
1.1.1. FACTORES DE CRESCIMENTO E RECEPTORES DE MEMBRANA
Alguns protooncogenes codificam protenas que se localizam no meio

extracelular e funcionam como factores de crescimento, de que so exemplo
o SIS para o factor de crescimento derivado de plaquetas (PDGF) ou o HST1/K-FGF para o factor de crescimento angiognico (Fig. XVII.2). Os factores
de crescimento so molculas de primordial importncia para as clulas
quiescentes entrarem em ciclo celular e progredirem ao longo de G1.
Outros protooncogenes codificam receptores da membrana citoplasmtica.
Estes receptores possuem um domnio extracelular como local de ligao para
o agonista (factor de crescimento), uma parte intramembranar e um domnio
citoplasmtico que, quando ocorre a ligao do agonista ao receptor, expressa
actividade proteinacinase (na maioria das vezes, uma tirosinacinase cuja
funo consiste em transferir um grupo fosfato para a protena alvo). Os genes
ERBB2, TRK, MET, KIT, ROS ou RET, so exemplos de protooncogenes que
codificam receptores de membrana (Fig. XVII.2).
O gene ERBB2 codifica uma protena transmembranar estruturalmente
semelhante a outros receptores para factores de crescimento como o EGF.
O domnio interno deste receptor tem actividade proteinacinase e, em casos
de mutao pontual ou de amplificao, verifica-se aumento da actividade
de cinase. At agora, ainda no foi identificado o ligando para este receptor,
admitindo-se que seja um mitognio. A activao constitucional da protena
ERBB2 d origem a um estmulo mitognico na ausncia de ligando, por
continuada actividade de cinase do domnio interno.
1.1.2. TRANSDUO INTRACELULAR DE SINAIS
Para a transmisso do estmulo mitognico, desde a membrana celular at

ao ncleo, necessria a interveno de uma complexa rede de vias de
sinalizao, envolvendo vrios produtos de protooncogenes como so exemplos
os genes da famlia RAS. A nvel do citoplasma, foram encontradas protenas
transdutoras de sinais com actividade cinase para a serina ou para a treonina,
tambm codificadas por protooncogenes (v.g., MOS, RAF) (Fig. XVII.2).
A famlia dos genes RAS (HRAS, KRAS, NRAS) o prottipo dos
protooncogenes que codificam protenas transdutoras de sinais. As protenas,
com 21kDa e com actividade GTPase intrnseca, ligam-se face interna da
353
membrana celular, por grupos farnesil. Esta funo permite-lhes activar a via
de transduo de sinais das MAP cinases envolvida na transmisso de
informao desde receptores da superfcie da membrana citoplasmtica at
genes envolvidos no controlo da proliferao celular. Pensa-se que estes genes,
quando mutados ou hiperexpressos, contribuam para a proliferao celular ou
que potenciem a resposta a estmulos hormonais ou a factores de crescimento.
A actividade da protena p21 regulada pela ligao e pela hidrlise de
GTP. Quando o GTP est ligado, a protena p21 activa a funo
proteinacinase, promovendo a sua fosforilao, como ocorre com a protena
codificada pelo protooncogene RAF. Neste caso, a protena RAF fosforilada
actua em alvos como as protenas do citoesqueleto ou factores de transcrio
como o AP1. O complexo AP1 induz, por sua vez, a expresso de genes
envolvidos no controlo da proliferao celular. A hidrlise do GTP em GDP
inibe a actividade da p21. Nos processos neoplsicos, as mutaes que
envolvem os genes RAS estabilizam a conformao activa da protena p21,
resultando num estmulo contnuo para a proliferao, independente de
estmulos exteriores. A p21 mutada inibe a hidrlise do GTP. A activao da
p21 ocorre por via de diversos tipos de receptores para factores de
crescimento (v.g., IGF-1, receptores com actividade de cinase, receptores
associados a protenas G).
A destruio da ligao farnesil elimina a capacidade de transduo de
sinais, o que tem motivado o ensaio de substncias que inibam a farnesilao
de modo a inibir a actividade do gene RAS nas clulas tumorais.
1.1.3. FACTORES DE TRANSCRIO NUCLEARES
354
As protenas codificadas por protooncogenes, que se localizam no

ncleo, funcionam como factores de transcrio. Esto implicadas
directamente na regulao da expresso gnica e, desse modo, no controlo
da proliferao e da diferenciao celular. Estas funes resultam da sua
capacidade para se ligarem ao DNA ou para interagirem com outras protenas,
modulando a expresso de outros genes celulares especficos. So exemplos
destes protooncogenes que funcionam como factores de transcrio, o FOS,
o JUN, a famlia MYC ou o MYB. Os factores de transcrio nuclear ligam-se a sequncias de DNA especficas iniciando a transcrio de genes
importantes na replicao do DNA e na diviso celular (Fig XVII.2).
O protooncogene MYC codifica um factor de transcrio que se liga a

sequncias especficas do DNA, sendo esta ligao mais eficiente quando a
protena MYC forma um complexo com uma protena designada por MAX.
Para que a protena MYC cause cancro deve interagir com a protena MAX e o
complexo ligar-se ao DNA. A protena MAX forma complexos MAX/MAX, mas
a ligao destes complexos s mesmas sequncias de DNA no provoca cancro.
1.2. ONCOGENES
As mutaes a nvel dos protooncogenes que levem a alteraes
quantitativas ou qualitativas dos produtos que codificam, podem originar
transformao celular, de um modo dominante (a mutao induz a aquisio
de novas caractersticas pela clula, que lhe conferem vantagem proliferativa)
(Fig. XVII.3). Nas condies anteriores, estes genes designam-se por oncogenes
(onkos, que significa tumor ou massa) e funcionam como aceleradores da
proliferao celular. Os primeiros oncogenes foram identificados no genoma
de alguns retrovrus e actualmente conhece-se mais de uma centena.
Alteraes
quantitativas
Alteraes
qualitativas
Dominante
Genes de reparao
do DNA
Protooncogenes
Ganho funcional
(oncogenes)
Proliferao e
diferenciao celular
Genes de metabolismo
de genotxicos
neoplasia
Antioncogenes
Perda funcional
Recessivo/dominante
negativo
Deleo
Inactivao
Fig. XVII.3 Diagrama de grupos de genes envolvidos na regulao da proliferao celular e de vias e
causas que podem conduzir a proliferao neoplsica.
355
356
As mutaes de protooncogenes so quase sempre somticas, sendo as

duas excepes conhecidas as mutaes germinais dos protooncogenes RET e
MET que, quando herdadas, predispem, respectivamente, para a neoplasia
endcrina mltipla do tipo 2A e para o carcinoma papilar renal. As mutaes
que originam oncogenes comportam-se de forma dominante, sendo necessria
apenas a mutao de um dos alelos para que ocorra a estimulao da
proliferao celular ou o desenvolvimento do fentipo tumoral.
O mecanismo de mutao de um protooncogene, pode ser de natureza
quantitativa (atravs do aumento da produo de uma protena normal) ou
qualitativa (atravs da produo de uma protena alterada com propriedades
diferentes da original). Os tipos de mutaes mais frequentes so a
amplificao, a mutao pontual e a translocao cromossmica.
A amplificao gnica constitui um dos mecanismos que originam
oncogenes de uma forma quantitativa. Quando passvel de deteco por
estudo citogentico, a amplificao gnica assume, frequentemente, a forma
de regies de colorao homognea (HSR, de homogeneous staining regions) ou de microcromossomas (dmin, de double minutes). Estas formas
traduzem a presena de mltiplas cpias de um gene. Na leucemia
promieloctica aguda e no carcinoma de pequenas clulas do pulmo, o
nmero de cpias do gene MYC pode atingir cerca de oitenta e no carcinoma da mama tm sido detectados casos com amplificao de ERBB2 at
trinta vezes. A amplificao pode, contudo, no ser visvel por citogentica
e, ainda assim, haver um nmero bastante elevado de cpias de um gene,
detectvel por estudos moleculares de hibridao.
A amplificao gnica tem sido correlacionada com a aquisio de
resistncia a determinadas substncias antineoplsicas e com pior prognstico
para as situaes tumorais em que se verifica. Encontra-se associada fase
de progresso tumoral de cerca de 10% das neoplasias humanas.
As mutaes pontuais podem tambm originar oncogenes. Verificou-se que
os protooncogenes da famlia RAS podem adquirir capacidades oncognicas por
mutao pontual, de que so exemplos as mutaes a nvel dos codes 12, 13
e 59-61. As formas oncognicas de RAS foram encontradas em diversos tumores
humanos, como ocorre no carcinoma da bexiga em que uma mutao pontual
a nvel do codo 12 do gene RAS, leva substituio de uma glicina por uma
valina. Estas mutaes pontuais podem ocorrer por induo com carcinogneos
qumicos idnticos aos que se detectam no fumo do tabaco.
A translocao pode ser detectada por estudos citogenticos quando a

extenso do fragmento translocado est acima do limite de resoluo da
microscopia de luz. A translocao pode originar alteraes quantitativas ou
qualitativas. Uma alterao qualitativa ocorre, por exemplo, na leucemia
mielide crnica. Neste caso, a translocao t(9;22)(q34;q11) provoca a
transposio do protooncogene ABL do cromossoma 9 para o cromossoma
22 onde se recombina com a regio BCR. A sequncia hbrida BCR-ABL
resultante produz uma protena com actividade tirosinacinase aumentada.
A translocao t(14;18) observada no linfoma folicular de clulas B justape
o gene BCL2 com o locus da cadeia pesada das imunoglobulinas. O gene de
fuso derivado origina uma produo elevada de protena BCL2 com
interferncia na morte celular programada.
A presena dos oncogenes provoca um aumento do ritmo proliferativo
das clulas, de um modo inadequado. Em clulas normais, um nico
oncogene no parece suficiente para provocar a tumorigenicidade celular: em
fibroblastos embrionrios, mantidos em cultura, necessria a associao dos
oncogenes RAS e MYC para se obter um fentipo tumorignico, tendo-se
verificado que a transfeo isolada com cada um deles no provoca
tumorigenicidade. A necessidade de dois ou mais oncogenes, para provocar
a tumorigenicidade de clulas em primoculturas, sugere uma explicao para
os vrios estdios da carcinognese: cada etapa da tumorignese pode
significar uma nova e diferente alterao no genoma celular, a qual poder,
frequentemente, envolver a activao de um protooncogene como o RAS ou
o MYC ou, em outras situaes, alteraes a nvel de antioncogenes.
1.3. ANTIONCOGENES OU GENES DE SUPRESSO TUMORAL

O segundo grupo de genes que referimos constitudo pelos
antioncogenes ou genes supressores tumorais (Fig. XVII.3). So genes que
participam na regulao da proliferao e da diferenciao celular,
contrabalanando o estmulo proliferativo dos protooncogenes, atravs de
uma aco inibidora. semelhana dos protooncogenes, so sequncias de
DNA altamente conservadas ao longo da evoluo filogentica, o que
sugestivo da sua importncia no controlo da proliferao e da diferenciao
celular.
357
As protenas codificadas pelos genes de supresso tumoral distribuemse pela membrana citoplasmtica, pelo citoplasma, pela membrana nuclear
e pelo ncleo (Fig. XVII.4).
As mutaes dos antioncogenes podem ser somticas (adquiridas) ou
germinais (herdadas) (Fig. XVII.5). So conhecidas vrias sndromas neoplsicas
hereditrias, atribudas a mutaes germinais de antioncogenes. Nestes casos,
a inactivao do primeiro alelo herdada e a do segundo alelo somtica.
Nos casos hereditrios, h heterozigotia constitucional devido herana de
um alelo mutado e de um alelo normal, com produo de apenas 50% de
protena antioncognica normal, pelo que basta a perda ou inactivao do
nico alelo funcional para haver ausncia de produo da protena
antioncognica.
Membrana citoplasmtica
Espao extracelular
Ncleo
BRCA2
A
P
C
TP53
VHL
RB
p21
NF1
WT1
DCC
BRCA1
MTS1
358
Citoplasma
Mitocndria
Fig. XVII.4 Distribuio dos produtos dos antioncogenes pelos compartimentos da clula. A notao
em itlico indica os respectivos genes codificadores.
Tumores
espordicos
1 mutao
2 mutao
Somtica
Somtica
1014 clulas
sem mutao
1 clula
1 clula
Tumor
Proliferao clonal
Tumores
hereditrios
1 mutao
Somtica
1014 clulas
com a 1 mutao
(Heterozigotia constitucional)
1 clula
1 clula
Tumor
Proliferao clonal
Fig. XVII.5 Etapas subjacentes tumorignese em condies espordicas e em condies hereditrias.

A colorao branca da figura humana significa ausncia de mutao constitucional, em comparao
com a colorao cinzenta a traduzir heterozigotia constitucional para uma mutao de susceptibilidade
para o cancro.
A perda de heterozigotia (LOH, loss of heterozygosity) uma das

formas que traduz a perda do alelo funcional, sendo um achado frequente
em clulas de vrios tipos de tumores (Fig. XVII.6). A sua caracterizao
permitiu localizar vrios antioncogenes. Nas condies dominantes negativas,
no observada LOH.
As mutaes mais frequentemente observadas nos antioncogenes
(Fig. XVII.6) so as mutaes pontuais, as microdelees ou as inseres de
um ou mais nucletidos causando mutaes do tipo frameshift. Podem
ainda resultar de delees mais ou menos extensas de fragmentos cromossmicos. Dados mais recentes apontam para um outro mecanismo de inactivao, atravs da metilao de bases citosina, na regio promotora do gene.
359
C
N
Locus
CT
N
M
No-disjuno No-disjuno Recombinao

com duplicao
mittica
Converso
gnica
Deleo
localizada
Mutao
pontual
Hipermetilao
Fig. XVII.6 Mecanismos conducentes a perda de heterozigotia (LOH) num locus antioncognico.
C a identificao das bandas N (alelo normal) e M (alelo mutado) evidenciam a heterozigotia
constitucional presente em DNA de tecido no tumoral; T o estudo do DNA de clulas tumorais
mostra perda da banda N, como sinal de LOH.
A metilao da regio promotora um exemplo de uma alterao epigentica

que leva ausncia da expresso do gene, sem contudo haver uma alterao
estrutural deste.
1.3.1. GENE RB
360
A compreenso do carcter recessivo dos antioncogenes teve como

suporte importante os estudos de Alfred Knudson, em 1971, baseados na
observao das formas de ocorrncia e frequncia do retinoblastoma.
O retinoblastoma ocorre de uma forma hereditria em cerca de 10% dos
casos e de uma forma espordica nos restantes. A taxa de mutaes de
novo relativamente elevada.
O gene associado ao retinoblastoma est localizado em 13q14 e designa-se abreviadamente por gene RB. Codifica uma protena designada
comummente como p105RB, que est envolvida na regulao do ciclo celular
(Figs. XVII.7 e XVII.8).
G1p34CDK
G1p34CDK
G1p34CDK
D
G1p34CDK
(proteinacinase)
(proteinacinase)
(proteinacinase)
(proteinacinase)
p105RB+P
p105RB+P
p105RB
p105RB+E1A
E2F
E2F
E2F
E2F
(livre)
(complexado)
(livre)
(livre)
Transcrio
Transcrio
Transcrio
Transcrio
Entrada em S
Entrada em S
Entrada em S
Entrada em S
Fig. XVII.7 A Regulao da entrada de uma clula em fase S. B Na ausncia de actividade

proteinacinase, a entrada em S inibida, por no fosforilao de P105RB. C e D Mimetizao das condies que conduzem a clula a entrar em fase S, por ausncia de p105RB, por inactivao ou perda do
gene RB (C) ou por complexao da protena p105RB normal pela protena oncognica virusal E1A (D).
G1p34CDK
p21
(+)
p105RB(-P)
p105RBE2F
(+)
(+)
()
Leses do DNA
TP53
()
MDM2
E2F
()
G1
(+)
() BAX
BCL-2
Fig. XVII.8 Leses do DNA e mecanismos de paragem do ciclo celular.
Na forma hereditria, o retinoblastoma atinge cerca de 45% (1) dos

descendentes de um sobrevivente com retinoblastoma e apresenta focos
tumorais nicos ou mltiplos, unilaterais ou bilaterais. Na forma espordica
, habitualmente, unilateral e unifocal. Com base nos dados anteriores,
Knudson desenvolveu, em 1971, a hiptese das duas mutaes (two hits)
para explicar o desenvolvimento do retinoblastoma. Na forma hereditria, de
natureza dominante, uma mutao patognica do gene Rb herdada atravs
(1)
Este valor resulta do facto de a penetrncia do gene Rb mutado ser incompleta, da ordem de
90%, e de ser de 50% a probabilidade de transmisso do alelo mutado a um descendente
(50% 90%=45%).
361
das clulas germinais e a segunda mutao do gene ocorre nas clulas

somticas; na forma no hereditria, as duas mutaes(1) ocorrem numa
mesma clula somtica (Fig. XVII.5).
Em indivduos com retinoblastoma hereditrio h heterozigotia
constitucional, pelo que todas as clulas nucleadas do organismo tm um
alelo mutado. No entanto, nestes indivduos, para alm do retinoblastoma,
apenas os osteossarcomas, os tumores dos tecidos moles e os melanomas
ocorrem com uma incidncia superior da populao geral. As razes para
este facto ainda no so conhecidas.
Os casos espordicos de retinoblastoma so raros, com uma prevalncia
de 1/40.000. Nos indivduos com a forma espordica, as duas mutaes (uma
em cada alelo do gene) so somticas e tm de ocorrer antes da diferenciao
completa da retina. A probabilidade de um indivduo desenvolver mais do que
um foco tumoral muitssimo pequena, sendo o tumor, nestas condies,
geralmente unifocal e unilateral.
1.3.2. GENE TP53
362
O gene TP53 localiza-se em 17p13. Codifica uma fosfoprotena

designada TP53, identificada pela primeira vez na dcada de 70. Deve o seu
nome ao facto de se tratar de uma fosfoprotena com um peso molecular
aproximado de 53 kDa.
As mutaes inactivadoras deste gene, considerado um gene supressor
tumoral, so as mutaes mais frequentes nas neoplasias humanas.
A severidade das manifestaes de uma mutao do gene TP53, em termos
de maior ou menor penetrncia numa famlia, correlaciona-se com a sua
localizao, sendo maior se est localizada nas sequncias que codificam o
domnio da protena TP53 que se liga ao DNA.
A protena TP53 desempenha um importante papel no controlo da
proliferao celular, quer parando a progresso do ciclo celular em G1/S para
permitir a reparao em caso de leses do DNA, quer induzindo a apoptose,
em resposta a leses mais extensas. Pelo seu papel, tambm conhecida
como guardio do genoma humano.
(1) As duas mutaes podem ocorrer em tempos diferentes: a primeira mutao ocorre numa
clula somtica e a segunda em clula descendente desta por mitose ou mitoses sucessivas.
As funes da TP53 resultam, pelo menos em parte, da sua actuao

como factor de transcrio. Foram j identificados centenas de genes cujos
nveis de transcrio podem ser aumentados ou reduzidos pela expresso da
TP53. Entre os genes alvo encontram-se os que codificam protenas que
actuam na apoptose, na interrupo do ciclo celular, no citoesqueleto e na
matriz extracelular, como factores crescimento ou seus inibidores, ou como
factores inibidores da angiognese. Outra funo importante a sua
interferncia na reaco celular a estmulos proliferativos dependentes de
oncogenes como as formas mutadas de RAS ou MYC. A presena de TP53
intacta impede a aco tumorignica dominante destes oncogenes,
favorecendo a ocorrncia de senescncia e apoptose.
A ausncia de protena TP53 funcional favorece no s a imortalizao
da clula, como tambm a acumulao de leses do DNA que normalmente
conduziriam apoptose. A instabilidade genmica e cromossmica associada
disfuno da TP53 no atribuda apenas falncia dos mecanismos que
permitem controlar a proliferao celular e a eliminao das clulas mutadas
mas tambm interveno directa da TP53 no desencadear dos mecanismos
de reparao do DNA.
A funo da protena TP53 pode ser alterada por mutaes gnicas em
domnios que afectem a sua funo, na maioria das vezes nos exes 5 a 8,
ou por mutaes em outros genes que controlam os nveis celulares e a
funo da TP53, como a protena MDM2 (Fig. XVII.8). Algumas mutaes do
tipo missense, que ocorrem nos exes 5 a 8 e que resultam na substituio
de um nico aminocido, afectam a capacidade de ligao da protena ao
DNA e impedem a sua funo como factor de transcrio. As mutaes
podem, tambm, ser do tipo frameshift ou nonsense, resultando na
produo de uma protena truncada disfuncional.
Algumas mutaes do gene TP53 originam uma protena no funcional
que se acumula no ncleo porque escapa normal degradao pela via da
ubiquitina-proteossoma. A deteco celular por tcnicas de imunohistoqumica , por isso, frequentemente utilizada para diagnstico indirecto da
existncia de mutaes do gene TP53. Contudo, esta tcnica origina falsos
negativos, porque nem todas as mutaes originam acumulao da TP53, assim
como falsos positivos se forem utilizadas tcnicas muito sensveis dado que a
protena tambm se pode acumular como resposta a agresses extracelulares.
363
A presena, em heterozigotia, de uma mutao patognica do gene

TP53, responsvel pelo efeito de dominncia negativa (Fig. IV.3).
1.3.3. GENE PTEN
O gene PTEN/MMAC/TEP1 um gene de supresso tumoral, localizado em

10q23.3, que codifica uma fosfatase que actua sobre produtos envolvidos em
vias de sinalizao intracelulares, tais como o AKT, a cinase p27 e a ciclina D1.
A actividade de fosfatase lipdica, que a protena codificada por este gene
evidencia, a principal responsvel pela funo supressora tumoral, ao regular
negativamente a via de transduo de sinais do PI3K (fosfoinositido 3-cinase)
envolvida no controlo da apoptose e proliferao celular. A hiperexpresso do gene
PTEN inibe o crescimento celular e induz a paragem do ciclo celular em G1, com
aumento do inibidor da cinase p27. provvel que a inactivao do gene PTEN
resulte em progresso do ciclo celular por diminuio dos nveis da protena
inibidora p27. Outras funes tm recentemente sido atribudas protena PTEN,
incluindo a regulao da adeso, migrao e diferenciao celulares.
1.4. GENES DE REPARAO DO DNA

Os genes de reparao do DNA esto envolvidos de forma indirecta na
regulao da proliferao celular (Fig. XVII.3). Quando se verifica incapacidade das
clulas para repararem leses do DNA, estas podem ocorrer em qualquer locus e,
por isso, tambm em genes directamente envolvidos na regulao do ciclo celular
e no controlo da proliferao, como os protooncogenes ou os antioncogenes.
364
As alteraes do DNA podem decorrer de erros de replicao e da

agresso por agentes mutagnicos endgenos ou ambientais (de natureza
fsica, qumica ou biolgica) (Fig. XVII.9). Os carcinogneos qumicos podem
provocar metilao (reparada directamente pela enzima O6-metilguanina-DNA
metiltransferase) ou modificaes covalentes do DNA que originam aductos
(reparadas pelas enzimas de exciso). Os aductos podem tambm ser
provocados pela radiao UV e por espcies livres de oxignio.
Agentes agressores do genoma
Qumicos
Fsicos
Biolgicos
CLULAS
Paragem do ciclo e
reparao do DNA
Apoptose
Necrose
Acumulao de
mutaes do DNA
Fig. XVII.9 Diagrama dos tipos de agressores das clulas e do genoma e das possveis consequncias.
1.5. GENES DE METABOLISMO DE GENOTXICOS

Os genes de metabolismo esto envolvidos numa rede complexa de vias
metablicas de biotransformao de xenobiticos, alguns deles genotxicos
e potenciais carcinogneos (Figs. X.3 e X.4). O seu envolvimento na regulao
da proliferao celular (Fig. XVII.3) indirecto, verificando-se quando a sua
actuao ou a ausncia ou deficincia da sua actuao conduzem produo
de molculas mutagnicas ou impossibilidade de as eliminar, com
consequente agresso do DNA e, eventualmente, de genes envolvidos
directamente na regulao da proliferao celular (protooncogenes ou
antioncogenes).
Os genes de metabolismo mais comuns so polimrficos, conferindo
diferenas individuais no que respeita capacidade ou eficincia metablica,
em face de determinados compostos genotxicos, consoante o gentipo (par
de alelos) presente num indivduo. Esta variabilidade gentica, a que
corresponde uma variabilidade fenotpica, poder ser responsvel por
diferentes nveis de proteco para carcinogneos qumicos e, consequentemente, diferentes nveis de susceptibilidade para o cancro.
365
Sob o ponto de vista genotpico, os loci destes genes podem-se

apresentar como homozigticos para o alelo normal, heterozigticos e
homozigticos para o alelo recessivo. H ainda a possibilidade de estarem
presentes polimorfismos associados a uma actividade enzimtica excessiva em
comparao com a que se verifica para a forma normal do alelo (v.g., os
polimorfismos MspI e Ile-Val do gene CYP1A1) ou mutaes em regies
reguladoras da transcrio que igualmente causem aumento da sua expresso
(v.g., a substituio de uma base na regio reguladora do gene CYP2E1).
A presena, num mesmo indivduo, de dois gentipos de susceptibilidade
em termos de metabolismo de genotxicos pode aumentar significativamente
o risco relativo para o cancro, em comparao com a soma das parcelas
quando cada um se encontra isoladamente.
2. REGULAO DA PROLIFERAO CELULAR NORMAL E NEOPLSICA
366
A proliferao celular est sujeita a mecanismos complexos de regulao

que envolvem as protenas do ciclo celular e protenas codificadas por
protooncogenes e antioncogenes.
No que respeita ao ponto de restrio R1, a actividade proteinacinase
do complexo ciclina G1-p34 CDK vai aumentar o nvel de fosforilao da
protena antioncognica p105RB (Fig. XVII.7-A).
O grau de fosforilao da protena p105RB varia consoante a fase do
ciclo celular: no incio de G1 est desfosforilada, aumentando a fosforilao
ao longo de G1. Nas clulas que deixam G0 e entram em ciclo h um
aumento da fosforilao de p105RB e nas clulas que se diferenciam observase um decrscimo do seu grau de fosforilao.
A protena p105RB tem a capacidade de formar complexos com outras
protenas quando no est fosforilada. Entre as protenas com que forma
complexos encontra-se o factor de transcrio E2F. Compreende-se assim
como crucial o grau de fosforilao da protena p105RB j que a
complexao dos factores de transcrio vai inibir a progresso do ciclo
celular. Quando a protena p105RB est fosforilada deixa os factores de
transcrio livres, em condies de promoverem a transcrio de genes cujos
produtos so essenciais para a progresso do ciclo. O retorno da protena
p105 RB a um estado no fosforilado em consonncia com o efeito transitrio

do complexo ciclina G1-p34CDK promovido por fosfatases codificadas por
genes que, atendendo sua funo de supressores da proliferao, podero
tambm ser classificados como antioncogenes.
H trs condies que mimetizam a fosforilao da protena p105RB
(Fig. XVII.7-B,C,D): a mutao a nvel da regio activa do gene, a deleo do
gene, ou a inactivao da forma normal desta protena (forma no fosforilada), por complexao com uma protena virusal e subsequente destruio
do complexo como sucede com a protena virusal E1A. Na eventualidade de
as fosfatases no actuarem, ser tambm mimetizada a ausncia da protena
p105RB.
Nas condies em que no haja formao do complexo ciclina-p34CDK
com surgimento de actividade de cinase, a protena p105RB no fosforilada
pelo que ocorre complexao dos factores de transcrio e inibio da entrada
das clulas na fase S do ciclo (Fig. XVII.7-B).
Fisiologicamente, a paragem do ciclo celular requer protena p105RB no
fosforilada, o que implica ausncia de actividade de proteinacinase, por parte
do complexo ciclina G1-p34CDK. Ter, por isso, de haver um mecanismo que actue
ao nvel deste complexo. Esta mediao parece ser feita por outra protena
designada p21 com capacidade para inibir a actividade fosforilativa daquele
complexo (Fig. XVII.8). As concentraes da protena p21 so consistentemente
mais baixas em clulas imortalizadas comparativamente com as clulas normais.
Em clulas sujeitas a agresso do genoma por radiao ionizante
verificou-se aumento da concentrao da protena p21 associado a aumento
da concentrao da forma normal da protena TP53 que, por sua vez, resulta
do aumento da expresso do antioncogene TP53, como resposta agresso.
O aumento de concentrao da protena TP53 induz o aumento de expresso
da protena codificada pelo gene GADD45. Esta protena liga-se ao PCNA e,
por esta via, bloqueia a sntese do DNA e pra a proliferao celular.
Em clulas de indivduos com ataxia telangiectasia sujeitas a radiao
ionizante verificou-se que no h aumento da expresso de TP53 nem
paragem do ciclo celular em R1. A protena TP53 surge, assim, como um
travo do ciclo celular nos casos em que h necessidade de reparao do
DNA. O aumento da expresso do gene TP53 est tambm envolvido na
paragem do ciclo celular na transio G2/M (ponto de restrio R3) nos casos
de agresso por radiao ionizante.
367
368
O gene MDM localizado no cromossoma 12 codifica uma protena que

se liga protena antioncognica TP53 e tem sido referenciado como um dos
reguladores da expresso desta protena (Fig. XVII.8). Quando amplificado,
estabiliza e inactiva a protena TP53, mimetizando uma condio que
corresponde a alteraes mutacionais do gene TP53.
Do que se acaba de enunciar, pode deduzir-se uma cascata de
acontecimentos conducente suspenso do ciclo celular sempre que
necessrio prolongar a fase G1 do ciclo para preparar a clula para entrar
na fase S. Esta paragem do ciclo essencial para reparar o DNA e manter a
estabilidade do genoma antes que se repliquem erros que tenham
eventualmente alterado a sequncia nucleotdica de genes envolvidos na
regulao do ciclo celular como os protooncogenes ou os antioncogenes e
que poderiam conduzir a proliferao neoplsica.
Em sntese, quando h agresso do DNA, a sequncia de acontecimentos
poder ser (Fig. XVII.8):
1 agresso do genoma;
2 aumento da expresso da protena TP53;
3 aumento da expresso da protena p21;
4 inibio da actividade de proteinacinase do complexo ciclina-p34CDK;
5 no fosforilao da protena p105RB;
6 complexao de factores de transcrio (v.g., E2F) pela protena
p105RB no fosforilada;
7 inibio da transcrio de genes cujos produtos so essenciais para
a progresso do ciclo;
8 paragem do ciclo celular;
9 reparao integral das leses do DNA;
10 reduo da concentrao da protena TP53;
11 reduo da expresso da protena p21;
12 aumento da actividade de cinase do complexo ciclina-p34CDK;
13 aumento do nvel de fosforilao da protena p105RB;
14 libertao de factores de transcrio;
15 prosseguimento do ciclo celular e entrada da clula na fase S.
A paragem do ciclo celular tem como objectivo permitir a reparao do
DNA. No entanto, quando os genes de reparao do DNA esto alterados,
ainda que o mecanismo de paragem do ciclo celular esteja mantido, a
reparao do DNA deficiente e com o retomar do ciclo celular pode ter

lugar a acumulao de alteraes do DNA. Estas alteraes podero incluir
uma mutao dominante que origine um oncogene, com consequente
vantagem proliferativa para um clone celular e formao de um tumor, ou a
mutao de um locus antioncognico, com consequncias idnticas devido
perda de uma funo mediada pela protena antioncognica.
Neste enquadramento, provvel que um importante mecanismo
conducente proliferao neoplsica seja a perda da capacidade das clulas
para verificarem, antes da diviso, se a replicao do DNA est terminada,
se houve lugar reparao das leses do DNA ou se ocorreu a segregao
dos cromossomas. Quando os mecanismos de verificao funcionam e so
detectadas anomalias, as clulas interrompem a progresso do ciclo celular
num dos pontos de restrio que se encontram ao longo do ciclo, para
que seja feita a reparao e no haja diviso que origine clulas com
alteraes. Quando se verifica perda ou deficincia destes mecanismos de
verificao (v.g., mutao do gene TP53), pode ocorrer proliferao
neoplsica, uma vez que o ciclo celular progride com a eventual acumulao
de anomalias do genoma passveis de interferir com a regulao normal da
proliferao celular e tumorignese.
3. APOPTOSE
A agresso de uma clula pode conduzir necrose celular se a agresso
muito violenta, paragem temporria do ciclo celular com reparao integral das leses do DNA e restitutio ad integrum, acumulao de leses do
DNA por incapacidade para a reparao integral, apesar da ocorrncia de
paragem temporria, ou paragem do ciclo e evoluo para um processo
de morte celular programada (apoptose) (Fig. XVII.9).
A necrose celular conduz ao aparecimento de um citoplasma
electrolucente e edema mitocondrial, mantendo-se o ncleo aparentemente
intacto. considerado um processo degenerativo passivo que pode ser
induzido por aco directa de txicos e por agresses fsicas.
A apoptose um processo fisiolgico iniciado pela activao de caspases
(proteases), pelo qual as clulas morrem de uma forma programada.
369
370
O processo activado por alteraes a nvel de estmulos especficos.

A apoptose envolve a compactao do citoplasma, uma elevada condensao
da cromatina, o blebbing da membrana e a clivagem internucleossomal
do DNA genmico (formao de corpos apoptticos). A fragmentao
internucleossomal mediada por uma endonuclease endgena dependente
de Ca2+/Mg2+. Esta enzima ataca o DNA de ligao entre os nucleossomas
espaados de 185 bp ao longo da molcula de DNA. No final, a clula
fragmenta-se em pequenos corpos que so fagocitados e digeridos pelos
macrfagos, sem desenvolvimento de resposta inflamatria.
A apoptose um processo normal durante a morfognese embrionria
e fetal (v.g., para formao dos espaos interdigitais), para a renovao celular
e talvez para a limitao da amplitude e da durao da resposta imunolgica.
Calcula-se que, em mdia, cerca de 5 107 clulas morrem diariamente, por
apoptose, na espcie humana.
Em alguns tecidos, o seu papel parece tambm importante na transformao
neoplsica. A velocidade de acumulao de clulas num tecido poder derivar
de um aumento da proliferao celular, mas tambm de uma reduo do ritmo
da morte celular programada. Por isso, aceitvel que o crescimento neoplsico
possa tambm dever-se ou ser promovido por factores que inibam a apoptose.
A apoptose obedece a mecanismos de regulao mediados por estmulos
fisiolgicos (v.g., nveis hormonais) que implicam a expresso de genes cujos
produtos so pr-apoptticos e de genes cujos produtos so anti-apoptticos.
Os genes BCL2, BAX e BCLX pertencem a uma famlia de genes que aparecem
envolvidos na regulao da renovao celular nos tecidos normais atravs dos
ritmos de proliferao e de morte celular. O protooncogene BCLX (um inibidor
da apoptose pertencente famlia do gene BCL2) origina, por splicing
alternativo, duas protenas com propriedades diferentes: a BCLX L que
mimetiza a protena BCL2 e inibe a apoptose e a BCLXS que contraria a
capacidade da protena BCL2.
As protenas da famlia BCL2 podem formar homodmeros e/ou
heterodmeros entre si. O tipo de associao que estabelecem e a
concentrao de cada membro parecem responsveis pela orientao dada
s clulas no sentido da sobrevivncia ou da morte celular.
Em alguns rgos como o ovrio e o estmago os genes BCL2 e BCLXL
so anti-apoptticos e os genes BAX e BCLXL so pr-apoptticos, enquanto
que em rgos como a mama e a prstata ocorrero outros equilbrios.
4. SENESCNCIA
A senescncia, ou envelhecimento, um processo multifactorial em que
estaro envolvidos cerca de 7.000 genes e mltiplos factores ambientais.
Os fentipos da senescncia parecem ser modulados por mutaes e
polimorfismos genticos. Cerca de 1% dos genes ter um efeito major. Assim,
a heterogeneidade gnica, a natureza multifactorial e a variabilidade da
interaco com o meio devida aos polimorfismos devero ser os responsveis
pela considervel multiplicidade de padres de envelhecimento.
A longevidade , em vrios aspectos, um caracter tipicamente multifactorial, que varia numa escala contnua dentro de uma populao e entre
populaes, que est sujeito a efeitos ambientais variados e responde
presso de seleco. Na espcie humana, a longevidade evidencia uma
hereditabilidade moderada de cerca de 30%, conforme estudos de
concordncia realizados em gmeos. Os estudos de adopo tambm
demonstraram alguma influncia da hereditariedade na idade de falecimento.
Um indivduo que tenha um progenitor falecido antes dos 50 anos tem um
risco de morrer com idade inferior a 50 anos que duas vezes superior ao
risco observado em indivduos cujos pais faleceram em idades superiores
quela. Comparativamente, a idade de falecimento dos pais adoptivos no
mostrou qualquer associao com a idade de falecimento dos filhos
adoptivos.
Os genes que retardam o aparecimento de doenas esto envolvidos na
longevidade. Nestes genes, algumas variaes allicas podero antecipar o
aparecimento de doenas tardias como no caso da doena de Alzheimer, ou
de variaes allicas do receptor para a vitamina D que criam susceptibilidade
para a osteoporose.
4.1. O LIMITE PROLIFERATIVO DE HAYFLICK

O limite de Hayflick foi descrito em 1961, deduzido a partir de
experincias feitas com clulas em culturas. Por estas experincias, foi
demonstrado que as clulas humanas normais se dividem cerca de 50-70
vezes, aps o que atingem o seu limiar para a replicao e entram em
senescncia.
371
372
As clulas obtidas de um dador adulto dividem-se um menor nmero

de vezes, comparativamente com o nmero de divises registado para clulas
embrionrias. Ainda assim, mesmo as clulas recolhidas de uma pessoa
bastante idosa mantm a capacidade de se dividir cerca de vinte vezes.
Na fase ps-replicativa, as clulas senescentes tm um citoplasma mais
abundante do que nas fases proliferativas e um ncleo um pouco aumentado.
No citoplasma de muitas clulas senescentes acumulam-se lipofuscinas como
resultado das reaces de peroxidao lipdica.
A limitao proliferativa poder justificar as atrofias observadas em
diversos tecidos. H, contudo, focos de hiperplasia que podem alternar com
zonas de atrofia, provavelmente em associao com desregulao do controlo
da proliferao. Esta desregulao poder estar associada ao aumento da
incidncia de cancro que acompanha o envelhecimento e tambm com a
aterosclerose por proliferao da camada ntima das artrias.
A capacidade proliferativa limitada das clulas em cultura, que est na
base da paragem da replicao celular, aps um previsvel nmero de divises,
implica que haja um mecanismo de contagem das mitoses. Este mecanismo
reside na alterao do processo de restaurao do comprimento dos
telmeros, por perda de actividade da telomerase.
Os telmeros so complexos nucleoproteicos que definem o topo dos
cromossomas, previnem a sua fuso aberrante, protegem-nos da degradao
por exonucleases e estabilizam a estrutura dos cromossomas. A sequncia de
DNA dos telmeros tm um comprimento de cerca de 10.000 a 20.000 bp,
sendo constituda por sequncias repetitivas 5'-TTAGGG-3' numa cadeia de
DNA e 5'-CCCTAA-3' na cadeia complementar. O comprimento dos telmeros
especfico de cada espcie a nvel das clulas germinais.
A replicao dos telmeros processada por uma polimerase prpria a
telomerase. Trata-se de uma enzima ribonucleoproteica, cuja componente de
RNA tem uma sequncia que serve de modelo para adio de unidades
repetitivas aos telmeros. Deste modo, a telomerase promove a compensao
da perda de DNA que ocorre com a replicao e contribui para a estabilidade
dos cromossomas, mantendo constante o comprimento dos telmeros. Na
ausncia de telomerase, os telmeros encurtam progressivamente medida que
as clulas se dividem, at ao ponto em que atingido um comprimento crtico
(ponto de restrio M1) que corresponde ao limite de Hayflick. Neste momento
as clulas perdem capacidade replicativa e entram em senescncia (Fig. XVII.10).
10.000
a
20.000 bp
TP53
p105RB
M1
50-70 divises celulares
M2
Imortalizao
divises adicionais
Senescncia replicativa
(Limite de Hayflick)
Apoptose
Fig. XVII.10 Limite proliferativo de Hayflick. O ponto M1 pode ser ultrapassado pelas clulas se
houver deficincia de regulao. A ultrapassagem do ponto M2, por deficincia da apoptose, pode
conduzir imortalizao das clulas.
A paragem das divises celulares em M1 requer a aco das protenas

TP53 e p105RB. Se estas protenas no actuarem, as clulas continuam a
dividir-se e continua o encurtamento dos telmeros. assim atingido um
segundo limiar crtico (ponto de restrio M2) em relao ao comprimento
dos telmeros, com o consequente incremento da instabilidade cromossmica
(Fig. XVII.10). Neste momento, desencadeada a apoptose. No entanto, pode
ocorrer a ultrapassagem ocasional do ponto M2 por algumas clulas, o que
traduz a sua imortalizao e envolve, com grande probabilidade, a
recuperao da actividade da telomerase de modo a estabilizar o comprimento dos telmeros. No entanto, foram descritas algumas linhas celulares
tumorais com o comprimento dos telmeros conservado e sem actividade da
telomerase, o que sugere que outros mecanismos como a recombinao
podem estar subjacentes. As clulas imortalizadas podem ser tumorignicas.
A telomerase expressa pelas clulas do embrio e do feto, durante os
primeiros trs a cinco meses de vida intra-uterina. A sua expresso mantm-se nas stem cells, embora os nveis de expresso sejam inferiores aos das
clulas embrionrias mas, ainda assim, compatveis com um retardamento do
encurtamento dos telmeros. Est tambm presente em cerca de 85% dos
tumores da espcie humana, permitindo s clulas neoplsicas restaurar,
continuamente, o comprimento dos telmeros, o que no ocorre na generalidade das clulas somticas(1).
(1) Como exemplo, compare-se a actividade da telomerase em clulas do cancro da mama em
diferentes estdios, com a actividade em clulas normais. Assim, considerando a actividade da
telomerase como 100%, em clulas tumorais do estdio IV, ser de 96% no estdio III, de 68% no
estdio I e de 4% nos tecidos normais.
373
A valorizao da actividade da telomerase como indicador de prognstico

e como base para o desenho de abordagens teraputicas em situaes
tumorais no est ainda definitivamente assumida, nomeadamente devido a
resultados de investigao contraditrios, sua presena em clulas no
neoplsicas e ao facto de no estar sempre presente nas clulas tumorais.
Na ausncia de telomerase, a replicao do DNA, mediada pela
polimerase do DNA, inicia-se a partir de uma sequncia de RNA que funciona
como primer. Assim, em cada ciclo de replicao, uma regio terminal do
telmero no replicada. Desta forma, as clulas em senescncia replicativa,
como as que so recuperadas de dadores idosos, apresentam telmeros mais
curtos.
O sucessivo encurtamento dos telmeros, por falta de actividade da
telomerase poder ser a base para a paragem da diviso celular resultante
da expresso gnica de molculas inibidoras da diviso celular. A molcula
inibidora poder consistir na protena p21. Nas clulas senescentes, h um
aumento da concentrao da protena p21.
4.2. PROGERIAS
As progerias so formas severas de envelhecimento prematuro (v.g.,
sndroma de Hutchinson-Gilford e sndroma de Werner). Nas progerias, as
clulas uma vez postas em cultura dividem-se apenas 10-30 vezes, ao
contrrio do que se observa com as clulas de indivduos normais em que o
nmero de divises de cerca de 50.
A sndroma de Hutchinson-Gilford uma forma de progeria muitssimo
rara e severa. As clulas apresentam telmeros muito curtos e dividem-se um
nmero reduzido de vezes em cultura. A criana nasce com aspecto normal,
374
verificando-se reduo do ritmo de crescimento ao fim do primeiro ano de

vida. A criana apresenta baixa estatura, ausncia de tecido celular
subcutneo, micrognatia e alopcia. Durante a infncia comea a sofrer um
processo de envelhecimento acelerado com aparecimento de rugas, calvcie,
aterosclerose, doena cardaca coronria e insuficincia cardaca congestiva.
A morte ocorre habitualmente por enfarte do miocrdio ou acidente vascular cerebral cerca dos 12 anos, sendo raros os casos que chegam aos 20 anos.
A sndroma de Werner tambm representa uma forma de envelhecimento humano precoce. Ocorre com uma frequncia de 1/330.000. uma
situao de natureza autossmica recessiva para um locus do brao curto do
cromossoma 8. Por isso, mais frequente nas populaes com elevada
consanguinidade. Est em causa a presena de telmeros mais curtos desde
o incio da vida e falta de actividade da enzima helicase. As clulas destes
doentes, quando postas em cultura, dividem-se apenas cerca de um tero do
nmero de vezes observado em clulas retiradas de indivduos normais. Os
indivduos so normais at adolescncia. O quadro evolui com baixa estatura
e, numa fase precoce da vida, enfraquecimento e branqueamento do cabelo,
uma face envelhecida, cataratas, calcificaes subcutneas, atrofia da pele e
do tecido subcutneo dos membros, osteoporose, diabetes mellitus,
aterosclerose, instabilidade cromossmica e susceptibilidade aumentada para
diversas formas de tumores benignos e malignos. A morte ocorre em mdia
na dcada dos 40 anos, com as caractersticas prprias da velhice,
habitualmente com enfarte do miocrdio ou cancro. Nestes casos, o cancro
mais frequentemente de origem mesenquimatosa, em comparao com a
origem epitelial mais comummente observada no envelhecimento normal.
375
CAPTULO XVIII
GENES E CANCRO
1. INTRODUO
Actualmente, um em cada quatro europeus desenvolve alguma forma
de cancro durante a vida. Mesmo para as neoplasias comuns, h uma
percentagem de casos de cancro, entre 5% e 10%, de natureza hereditria.
Se a percentagem pode parecer relativamente baixa em relao aos casos
espordicos, nas famlias em que est presente uma forma mutada de um
gene que cria aumento de susceptibilidade, a percentagem de doentes pode
aproximar-se de 50%, dependendo esta percentagem da penetrncia mais
ou menos elevada da mutao presente.
O cancro, como doena multifactorial, desenvolve-se pela interaco de
factores ambientais e de factores genticos. No processo que conduz ao
cancro, possvel definir vrias etapas, correspondentes a acontecimentos
mutagnicos, em mdia em 4 a 6 genes, que conferem vantagem em termos
de sobrevivncia das clulas em que ocorrem. Por este motivo, a incidncia
da maioria dos tumores aumenta com a idade.
Uma determinada mutao pode conferir susceptibilidade que apenas se
exprima face exposio a factores desencadeantes ambientais (v.g., fumo
do tabaco) como ocorre com determinados fentipos metablicos ou com
defeitos de reparao do DNA. Na presena da agresso, pode ocorrer uma
nova mutao que confira vantagem proliferativa clula com autonomizao
subsequente e expanso clonal. A seleco clonal pode tambm partir de uma
populao estimulada de uma forma policlonal (o que origina hiperplasia).
377
Subsequentemente, uma das clulas adquire uma mutao que lhe confere
vantagem e origina um clone. Nos dois casos, a ocorrncia de mutaes
adicionais poder conduzir aquisio de um fentipo invasivo e metasttico.
O crescimento de um tumor depende do ritmo proliferativo das clulas
tumorais, da percentagem de clulas em proliferao e da extenso da morte
de clulas tumorais.
As clulas neoplsicas exprimem genes diferentes (ou, pelo menos,
diferentes em termos qualitativos ou quantitativos) dos que so expressos nas
clulas normais correspondentes, podem ter uma capacidade proliferativa
aumentada, podem evidenciar autocrinia, tm capacidade angiognica,
adquirem capacidade metasttica, iludem o sistema de vigilncia imunolgica
e resistem apoptose.
Em clulas neoplsicas provenientes de diversos rgos, frequente
encontrarem-se alteraes nos mesmos genes pertencentes a um grupo
restrito (v.g., MYC, RAS, TP53 ou RB), dada a sua relevncia no controlo da
proliferao celular.
2. O CANCRO COMO DOENA DE GENES
378
As neoplasias, sejam espordicas ou hereditrias, tm origem gentica,

na medida em que resultam de alteraes mais ou menos complexas e
sucessivas da informao gentica presente numa determinada clula. Estas
alteraes podem afectar mecanismos de regulao da proliferao celular,
da apoptose ou da senescncia celular.
Os genes so o rgo em causa, quando se aborda a gentica do cancro.
A evidncia dada aos genes resulta de mltiplas observaes, como sejam:
a identificao de sndromas de natureza hereditria em que o risco
de ocorrncia de cancro nos membros de uma famlia muito maior
do que na populao geral;
a associao entre alteraes genticas e cancro (v.g., alteraes
cromossmicas especficas de determinados tipos de neoplasias);
a correlao entre a agresso do DNA por agentes de natureza fsica,
qumica ou biolgica que actuam como carcinogneos e o
aparecimento de fentipos celulares transformados;
a capacidade oncognica de alguns retrovrus devida presena no seu

genoma de um oncogene;
a transformao celular resultante da transfeo com DNA extrado de
clulas neoplsicas;
a correlao entre a incapacidade para reparar o DNA alterado e a
grande susceptibilidade dos indivduos afectados para desenvolverem
neoplasias;
as alteraes epigenticas da expresso de determinados genes em
relao com a ocorrncia de tumores.
3. O DILOGO ENTRE O GENOMA E O MEIO AMBIENTE

Os factores ambientais que tm sido identificados como agentes
etiolgicos do cancro, so de natureza qumica, fsica e biolgica. A exposio
aos agentes ambientais est associada ao desenvolvimento da grande maioria
dos casos de cancro.
Em relao com a exposio a molculas ambientais que os organismos
vivos tm necessidade de metabolizar ou eliminar, foram seleccionados
mltiplos e complexos sistemas enzimticos, altamente polimrficos.
A iniciao, a promoo e a progresso de um tumor, como etapas da
carcinognese qumica, resultam da interaco entre factores ambientais e
individuais. A predisposio individual criada ou aumentada pelos agentes
iniciadores e a proliferao provocada, numa segunda etapa, pelos agentes
promotores cuja aco conduz malignidade. O citocromo P450 est
frequentemente envolvido na activao de promotores tumorais. So
exemplos de promotores, as dioxinas e os agentes que libertam radicais livres
como o tetracloreto de carbono e os raios ultravioleta, bem como molculas
endgenas como os cidos biliares e algumas hormonas.
Quando se comparam diferentes indivduos, observa-se uma variao
interindividual no que concerne susceptibilidade para o cancro, decorrente
da presena de determinados gentipos herdados e dos factores ambientais.
A susceptibilidade ou a resistncia para o cancro traduzem a probabilidade de
um indivduo vir a desenvolver cancro num determinado perodo da vida ou
durante a vida, consoante o perodo de tempo em que se considere a incidncia.
379
Knudson, em 1985, dividiu uma populao em quatro unidades

demogrficas que designou por oncodemes cada uma com diferentes
expectativas de vir a ter cancro em funo das variveis ambientais e
hereditrias (Fig. XVIII.1).
O primeiro grupo constitudo pelos indivduos com cancro provocado
pela exposio inevitvel a mutagneos ambientais (v. g., radiao csmica)
e pela instabilidade inerente ao material gentico. Cada cancro tem uma
determinada incidncia universal, devida mutagnese espontnea. No seu
conjunto, representariam cerca de 20% dos casos de cancros e corresponderiam ao nmero de cancros no erradicveis.
Exposio N
Indivduos N
Exposio
Indivduos N
II
Exposio N
Indivduos
Exposio N
Indivduos D
III
IV
380
Fig. XVIII.1 Oncodemes de Knudson. I exposio ambiental normal e condies genotpicas normais;
II exposio ambiental aumentada e condies genotpicas normais; III exposio ambiental normal
e condies genotpicas deficientes; IV exposio ambiental normal e condies genotpicas marcadas
por mutaes de natureza dominante, em termos de susceptibilidade para o cancro.
O segundo grupo engloba os indivduos com cancros devidos exposio

excessiva a mutagneos. Nestas condies, so ultrapassados os nveis basais
de exposio. A capacidade constitucional dos indivduos suficiente para
fazer face aos nveis basais mas insuficiente para responder s solicitaes
adicionais.
O terceiro grupo inclui os indivduos em que o cancro resulta de um
insuficincia gentica relativa para tolerar a exposio a carcinogneos, no
havendo necessidade de ultrapassar os nveis basais para se desenvolver
cancro. Engloba situaes, como o xeroderma pigmentosum, em que se
verificam alteraes em genes cujos produtos so responsveis pela
manuteno da estabilidade do genoma, bem como os casos em que ocorre
um fentipo metablico (um polimorfismo) favorecedor da activao de
mutagneos.
O quarto oncodeme constitudo por indivduos com um risco muito alto
de desenvolver cancro. So as situaes comummente designadas por
hereditrias, embora, na realidade, o que herdado uma elevada predisposio para o cancro, resultante da presena de mutaes dominantes em
genes envolvidos directamente na regulao da proliferao celular. O ambiente
ter um papel pouco significativo.
O conhecimento do dilogo entre os genes e o meio ambiente, poder
permitir modificar a susceptibilidade para o cancro, por alterao da exposio
ambiental, nomeadamente a agentes genotxicos. O dilogo entre o mdico
e o consulente, no ambiente de uma consulta de Gentica Tumoral apresenta-se como o melhor recurso para perceber o que est em causa e para planear
as intervenes mais adequadas.
4. CONSULTA DE GENTICA TUMORAL

381
4.1. FINALIDADES DA CONSULTA DE GENTICA TUMORAL

A recolha da histria pregressa e da histria familiar no mbito de uma
consulta de Gentica Tumoral tem, como primeira finalidade, a diferenciao
entre a natureza espordica ou hereditria, para alm do apoio ao
diagnstico, ao prognstico, s intervenes para diagnstico pr-sintomtico
quando indicado, aos clculos de risco para o consulente ou familiares, s

intervenes preventivas e identificao dos membros da famlia para os
quais est indicado o acompanhamento no mbito desta consulta (Tabela
XVIII.1). A manuteno de um registo dos casos familiares e o envolvimento
na investigao, na educao mdica e na educao das populaes so
tambm finalidades da consulta de Gentica Tumoral.
Tabela XVIII.1. Finalidades de uma consulta de Gentica Tumoral

FINALIDADES
Esclarecer a natureza espordica ou hereditria da condio tumoral

Contribuir para um prognstico preciso
Apoiar as propostas de diagnstico pr-sintomtico
Deduzir o risco para cancro no consulente e em familiares
Apoiar as propostas de ndole mdica ou cirrgica para interveno preventiva
Manter um registo dos casos familiares
Participar na investigao, na educao mdica e na educao das populaes
4.2. CRITRIOS PARA ACESSO A UMA CONSULTA DE GENTICA TUMORAL

Nos critrios de acesso consulta de Gentica Tumoral, deve ser tida em
considerao a sua natureza genrica (Tabela XVIII.2). Devem tambm estar
sempre presentes, as caractersticas das condies hereditrias (Tabela XVIII.3).
Tabela XVIII.2. Critrios para acesso a uma consulta de Gentica Tumoral

CRITRIOS
382
1. Confluncia de neoplasias comuns numa famlia:

a) trs ou mais neoplasias do mesmo tipo ou pertencentes a um espectro neoplsico conhecido
(v.g., mama, ovrio, endomtrio, colon e prstata), em familiares prximos, sobretudo se
ocorrerem em idades jovens;
b) duas neoplasias do mesmo tipo ou de um espectro conhecido, em familiares prximos, sendo
uma delas diagnosticada antes dos 50 anos;
c) existncia de um familiar em primeiro grau com uma neoplasia comum diagnosticada antes
dos 40 anos ou, no caso da prstata, antes dos 55 anos;
2. Presena de duas ou mais neoplasias pouco frequentes num mesmo indivduo ou em familiares
prximos (v.g., tumor cerebral e sarcoma);
3. Ocorrncia de cancro em contexto sindromtico (v.g., glioma na neurofibromatose tipo I,
melanoma na sndroma de nevus displsicos).
Tabela XVIII.3. Caractersticas dos tumores hereditrios

CARACTERSTICAS
Precocidade do aparecimento
Elevado nmero de casos na famlia
Proximidade do parentesco entre os indivduos atingidos
Bilateralidade
Multicentralidade sincrnica ou metacrnica
Diversos tipos de tumores primrios pertencentes a um espectro, num mesmo indivduo ou nos
membros da famlia
Maior risco de ocorrncia em indivduos de sexo em que o tumor raro
4.3. TESTES PREDIZENTES DE SUSCEPTIBILIDADE PARA O CANCRO

Os testes predizentes devem ser realizados no mbito de uma consulta
de Gentica Tumoral, dada a possibilidade de os consulentes serem
confrontados com resultados analticos que os coloquem perante um elevado
risco para desenvolverem cancro, na maioria das vezes no tendo capacidade
para perceberem o alcance e as limitaes desses resultados, e sendo ou
sentindo-se saudveis. Por isso, os mdicos desta consulta devem ter
experincia no que respeita s metodologias clnicas e laboratoriais aplicadas
oncogentica, interpretao dos resultados de gentica molecular e
forma de se relacionar com os consulentes. Por outro lado, o apoio
psicolgico dos consulentes deve ser assegurado.
Em indivduos adultos, a realizao de testes predizentes e o
conhecimento do seu resultado obedecem a diversas motivaes:
deciso sobre o casamento e a constituio de famlia;
planeamento do futuro em termos de riscos financeiros e de
responsabilidades profissionais;
combate ansiedade motivada por experincias prvias relacionadas
com a doena neoplsica;
aceitao de intervenes de ndole profiltica (v.g., cirurgia do clon,
da mama ou do ovrio), ou adopo de estilos de vida que contrariem
o risco gentico;
aceitao da incluso em projectos de investigao sobre propostas de
quimiopreveno ou de rastreio;
identificao dos familiares no atingidos para que se libertem de
protocolos de rastreio caros e invasivos.
383
Os teste predizentes podem tambm estar associados a inconvenientes,

entre os quais se destacam:
a dificuldade em lidar com a certeza de ser portador de um gene de
susceptibilidade para cancro e a possibilidade de desenvolver patologia
do foro psiquitrico;
a eventual perturbao decorrente de se reconhecer como transmissor
a um filho, da susceptibilidade para o cancro;
o prejuzo a nvel do emprego ou de prmios de seguros se for
obrigado a declarar o seu estatuto genotpico, ou se, eventualmente,
no for mantida a confidencialidade;
a incerteza frequente, no que respeita previso sobre os rgos que
sero atingidos, ao risco para os diferentes rgos atingidos, idade
de aparecimento e agressividade da doena;
a dificuldade que, por vezes, existe de estabelecer o balano entre o
benefcio e o risco para os meios disponveis para rastreio (v.g.,
vantagem da mamografia em idades muito jovens em mulheres
portadoras de heterozigotia para o gene da ataxia telangiectasia ou
de mutao do gene TP53, versus aumento de risco iatrognico para
cancro);
a falta de meios de rastreio que assegurem, de forma eficaz, a deteco
precoce de leses neoplsicas, e de opes teraputicas ou preventivas
que permitam ganhos em termos de cura ou de sobrevivncia.
4.4. SEGUIMENTO DOS CONSULENTES

Numa consulta de Gentica Tumoral, o seguimento dos consulentes
384
depende, em primeiro lugar, da caracterizao da situao como espordica

ou hereditria (Fig. XVIII.2). Num segundo nvel, devero ser equacionadas
trs possibilidades para as condies hereditrias:
o diagnstico sintomtico possvel;
no aparente a presena de doena e resta a proposta de rastreio
por ausncia de testes genticos aplicveis;
possvel a realizao de testes predizentes.
Histria
familiar
Diagnstico
Preditivo
E
t
i
o
l
o
g
i
a
Hereditria
Risco: populao geral

() Mutao conhecida na famlia
Regio no estudada
() Sem prvio resultado Outro gene
Populao geral
Exames
de rastreio
(+) Mutao desconhecida inconclusivo
Preveno
(+) Mutao conhecida
Cirurgia
Quimiopreveno
Modificar exposio
Exames de rastreio
Diagnstico Precoce
Teraputica
Curativa
Paleativa
Diagnstico Sintomtico
Teraputica
Curativa
Paleativa
Espordica
Risco: populao geral
Fig. XVIII.2 Diagrama para seguimento de consulentes em Consulta de Gentica Tumoral.
Se a mutao presente no consulente j tiver sido identificada em

indivduos doentes, poder ser indicado o risco para vir a ter cancro e devero
ser apresentadas e analisadas com o consulente as solues e os recursos
disponveis para rastreio, diagnstico precoce e preveno. Se a mutao
presente no consulente for desconhecida, o resultado inconclusivo.
A situao deve ser analisada com o consulente e devem ser oferecidos os
exames de rastreio disponveis mais adequados.
Quando no detectada nenhuma mutao, colocam-se duas
possibilidades, com ilaes diversas. Se no encontrada a mutao
patognica conhecida na famlia, o risco para cancro, no indivduo estudado,
o da populao geral. Se no detectada nenhuma mutao, mas no h
resultados prvios na famlia, fica a incerteza, uma vez que o resultado se
pode dever a no ter sido estudada a regio correcta, ao facto de estar em
causa outro gene, ou ento inexistncia de mutao, sendo, neste caso o
risco para cancro igual ao da populao geral. Na ausncia de uma certeza,
devem ser oferecidos os exames de rastreio que a arte mdica considere mais
adequados.
385
4.5. DECLARAO DE CONSENTIMENTO INFORMADO

No decorrer da consulta de Gentica Tumoral que antecede a deciso
de recolher material biolgico para extraco de DNA e a realizao de
estudos moleculares, explicada a necessidade de o consulente assinar,
juntamente com o mdico, uma Declarao de Consentimento Informado(1).
Os termos da declarao devem ser lidos e descodificados da forma julgada
mais adequada melhor compreenso de cada consulente. Antes da
assinatura, deve ainda ser perguntado ao consulente se no tem dvidas em
relao ao seu contedo e s implicaes que podem advir da realizao do
estudo gentico, manifestando o mdico toda a disponibilidade para prestar
os esclarecimentos adicionais que forem julgados oportunos.
(1) Declarao de Consentimento Informado (Modelo utilizado na Consulta de Tumores

Hereditrios dos Hospitais da Universidade de Coimbra):
386
No decorrer da Consulta de Tumores Hereditrios foram-me explicadas, de forma compreensvel

e adequada, as bases genticas que podem estar subjacentes situao tumoral que motivou a
minha vinda Consulta. Dessa forma, pude compreender a importncia e as limitaes dos estudos
moleculares de DNA e as vantagens que podem advir do seu conhecimento para mim e para os meus
familiares, em termos de determinao do risco, de planeamento do seguimento para diagnstico
precoce e de eventual interveno preventiva. Foi-me dada oportunidade de esclarecer todas as
minhas dvidas.
A assinatura deste consentimento confirma a minha autorizao para a colheita de sangue e
para que no DNA a extrair sejam feitas as anlises de mutaes associadas minha condio ou de
elementos da minha famlia, que se mostrem adequadas no momento presente e que haja
disponibilidade para executar, ou que venham a ser consideradas importantes no futuro face evoluo
do conhecimento cientfico.
At comunicao dos resultados, poderei optar por no os conhecer. Foi-me garantido que
os resultados sero mantidos em rigorosa confidencialidade e que apenas sero comunicados aos
mdicos assistentes com a finalidade de orientar o rastreio, o tratamento e o meu seguimento ou de
familiares meus. A amostra do meu DNA que fica em arquivo poder ser removida e destruda a todo
o momento, se vier a ser essa a minha deciso expressa.
Autorizo ainda a utilizao do DNA em investigao mdica destinada a aprofundar o
conhecimento da origem das situaes tumorais, uma vez asseguradas as condies estritas de
anonimato, por codificao das amostras de DNA.
Nome do consulente
Assinatura do consulente
O Mdico (nome e assinatura)
Local e data
5. CANCRO HEREDITRIO
O mesmo tipo de tumor pode ocorrer devido acumulao de mutaes
de origem somtica ou devido herana, ao longo das geraes, de uma
mutao hereditria (Tabela XVIII.3).
5.1. POLIPOSE CLICA FAMILIAR

A FAP uma sndroma neoplsica de natureza dominante, com uma
prevalncia prxima de 1 em cada 10.000 nascimentos. O desenvolvimento
do tumor devido a mutaes do gene supressor tumoral APC. provvel
que a expresso do gene esteja sob a influncia de um locus modificador,
dada a diversidade das apresentaes clnicas registadas numa famlia (para
uma mesma mutao).
As mutaes do gene APC conduzem, em mais de 90% dos casos de
FAP, a protenas truncadas no funcionais. A deleo ou insero de pequenas
sequncias, no exo 15, volta do codo 1309, constituem as mutaes mais
frequentes.
As formas mutadas da protena APC dimerizam, na maioria das vezes,
com a forma normal desta protena, actuando de um modo dominante
negativo no aparecimento da FAP. Em alguns casos, a protena mutada
incapaz de dimerizar, o que poder explicar o nmero reduzido de plipos
em famlias com formas atenuadas de FAP.
Os plipos aparecem predominantemente no clon distal e no recto,
ainda durante a infncia (em mdia pelos 10 anos de idade), vrios anos antes
do aparecimento de cancro. Podem tambm surgir no tracto gastrointestinal
superior. Em mdia, o nmero de plipos clicos, no momento do diagnstico
igual ou superior a 100, ainda que um menor nmero, quando associado
a histria familiar de polipose clica, seja muito sugestivo de FAP. Entre os
30 e os 40 anos de idade, o nmero de plipos , em mdia, de cerca de
1000 (Fig. XVIII.3). Na grande maioria dos casos, h tambm hiperplasia
congnita do epitlio pigmentar da retina, vsivel por fundoscopia, o que
constitui um excelente sinal da presena de mutaes do gene APC.
Na ausncia de colectomia total profiltica, a evoluo para carcinoma
colorrectal precoce, com uma idade mdia de diagnstico de 39 anos.
387
Fig. XVIII.3 Imagem do lmen do clon numa situao de polipose

clica familiar. visvel o nmero muito elevado de plipos.
388
Cerca de 100% dos doentes com FAP tm cancro colorrectal, por volta dos
50 anos de idade.
Uma possvel sequncia de acontecimentos para desenvolvimento do
fentipo metasttico parece incluir (Fig. XVIII.4):
hiperproliferao do epitlio clico e formao de adenomas da classe
I, na presena de mutao herdada do gene APC, ou mutao somtica
nos casos espordicos;
subsequente mutao do protooncogene KRAS, com evoluo dos
adenomas para a classe II;
inactivao do antioncogene DCC e evoluo para adenomas da classe III;
mutao do antioncogene TP53 e evoluo para carcinoma in situ;
mutao em genes inibidores da metastizao e estabelecimento de
metstases.
Nos membros das famlias com histria de FAP, a deteco molecular da
mutao no gene APC, em linfcitos de sangue perifrico, deve ser feita logo
aps o nascimento ou nos primeiros anos de vida. Tambm nos indivduos
em que a doena foi confirmada clinicamente, deve ser feita a pesquisa da
mutao presente na famlia.
Mutao
do gene
Mutao
do gene
Mutao
do gene
Mutao
do gene
APC
KRAS
DCC
TP53
Epitlio
normal
Adenoma
classe I
Adenoma
classe II
Adenoma
classe III
Mutao de
gene supressor
da metastizao
Carcinoma
Metstases
Fig. XVIII.4 Polipose clica familiar. Sequncia de acontecimentos conducentes a carcinoma metasttico
do clon. Adaptado de Vogelstein B e Kinzler KW, Trends Genet 9:138, 1993.
A vigilncia de indivduos portadores de mutao em APC deve ser feita

a partir dos 10 anos de idade, por rectosigmoidoscopia. No entanto, quando
h histria de malignizao precoce, deve ser feita colonoscopia completa. Uma
vez feito o diagnostico de FAP, a colonoscopia deve ser realizada cada 6 a 12
meses. Deve tambm ser feita endoscopia gastroduodenal, cada 2 a 3 anos,
para rastreio de plipos. Aps a deteco de plipos, deve ser feita endoscopia
anual. Para prevenir o desenvolvimento de carcinoma do clon, a colectomia
total profiltica deve ser realizada cerca dos 20 anos, ou em idade mais precoce,
tendo em considerao a idade em que ocorreram os casos familiares.
Nos familiares em risco (Fig. XVIII.5), em que no seja detectada a
mutao do gene APC, est indicada a realizao de rectosigmoidoscopia aos
18, 25 e 35 anos. A colonoscopia dever iniciar-se aos 50 anos, com uma
periodicidade de 3 a 5 anos.
49
38
389
23
16
23

Desenvolveu tumores desmides
Presena de mutao frameshift, gene APC, exo 15, codo 1319
Nota: A deleo de uma citosina no codo 1319 origina um codo stop TGA, no codo 1320
Fig. XVIII.5 Heredograma caracterstico de polipose clica familiar, variante de Gardner. visvel a
natureza autossmica dominante desta condio.
5.2. CANCRO DA MAMA

O cancro da mama afecta, aproximadamente, uma em cada 10 a uma
em cada 12 mulheres nos pases ocidentais. Em Portugal, no decnio
1976-85, o cancro da mama foi responsvel por 30% dos cancros
diagnosticados em mulheres. A incidncia de cancro da mama tem
aumentado de forma sistemtica na maior parte dos pases, tendo-se
verificado um aumento de 2,4% por ano em Portugal, entre 1976 e 1985.
considerada uma doena da civilizao actual!
Encontram-se duas formas de cancro da mama: uma forma espordica,
responsvel pela grande maioria das situaes e uma forma hereditria
(Fig. XVIII.6) responsvel por cerca de 5% a 10% de todos os cancros da
mama e pela maioria dos que tm um incio precoce. Consideram-se casos
precoces de cancro da mama quando ocorrem antes dos 50 anos de idade.
Considera-se que h um baixo risco para cancro da mama quando este
inferior a 15% durante a vida, um risco moderado quando se situa entre
15% e 30% e um risco elevado quando superior a 30%. Na Tabela XVIII.4
esto representados os valores de risco em funo da histria familiar.
73 A
75 A
52 A
55 A
47 A
47 A
40 A
BRCA2+
Carcinoma mama
390
36 A
2
BRCA2
Carcinoma do ovrio
Cancro do pulmo
Cancro da lngua
Fig. XVIII.6 Heredograma de uma famlia em que est presente uma sndroma neoplsica
mama-ovrio por mutao do gene BRCA2. Trata-se de uma deleco de 4 bp, no exo 11 - BRCA2
(3036del4).
Tabela XVIII.4. Risco relativo para cancro da mama na mulher, em funo da histria familiar
FAMILIAR DOENTE
CONDIO OBSERVADA
RR
Irm
Irm
1 grau
Irm
Irm
Me + irm
Me + irm
Ps-menopausa
Pr-menopausa
Pr-menopausa, bilateral
Bilateral, <50 anos
Bilateral, <40 anos
2-3
5
9
6
10,5
14
39, 47-51*
Pr-menopausa, bilateral
(*) Valores referidos em trabalhos diferentes.
H diversos genes envolvidos no cancro da mama hereditrio (Tabela

XVIII.5), sendo as mutaes em BRCA1 e BRCA2 as que surgem com mais
frequncia. A penetrncia das mutaes do gene BRCA1 pode atingir cerca
de 80%, pelos 70 anos. O risco para a mama contralateral, numa mulher
com mutao em BRCA1 que tenha sido afectada por cancro da mama da
ordem de 65% aos 70 anos. Para o cancro do ovrio, o risco de cerca de
45%. H ainda um risco de 6% para cancro do clon e de 8% para cancro
da prstata. Nas mulheres com mutao em BRCA2, o risco para cancro da
mama aos 70 anos pode chegar aos 85%, sendo de cerca de 10% para o
cancro do ovrio. As mutaes em BRCA2 esto associadas a um risco de
6% de ocorrncia de cancro da mama no sexo masculino.
Tabela XVIII.5. Genes associados a formas hereditrias de cancro da mama
SNDROMA FAMILIAR
(genes mutados)
TIPOS DE CANCRO/PENETRNCIA,
EM PORTADORES DE MUTAES
TIPO DE
HEREDITARIEDADE
Sndroma mama/ovrio
(BRCA1 - 17q21.1)
Cancro da mama
(BRCA2 - 13q12-13)
Muir-Torr
(variante de HNPCC)
Mama ( 85%); ovrio ( 45%); clon (6%, aos 70 anos);

prstata (8%, aos 70 anos)
Mama ( 85%); ovrio (10% a 15%); c. mama no sexo
masculino (6%, aos 70 anos)
Espectro de tumores de HNPCC, com maior frequncia de
mltiplos tumores primitivos; c. da laringe; c. mama; carcinoma
basocelular; tumores gl. sebceas; queratoacantomas
Mltiplos hamartomas cutneos; macrocefalia; c. mama
em mulheres jovens; c. da tiride (papilar); c. gastrointestinais; c. da pele
Plipos/hamartomas (sobretudo no jejuno); c. mama
(idade mdia: 35 anos, frequentemente bilateral); c. clon,
estmago e duodeno; tumores do ovrio (sex cord);
c. clulas de Sertoli; pigmentao mucocutnea
Ataxia telangiectasia; possvel excesso de c. mama em
indivduos heterozigticos
Tumores na infncia: sarcomas, crebro, leucemia,
suprarrenais; outras localizaes tumorais: c. mama (idade
jovem), pulmo, laringe
AD
Cowden
(PTEN - 10q22-23)
Peutz-Jeghers
(STK11 - 19p13)
Ataxia telangiectasia
(ATM - 11q22-23)
Li-Fraumeni
(TP53 - 17p13.1)
AD Autossmico dominante; AR Autossmico recessivo.
AD
AD
AD
AD
AR
AD
391
O rastreio das mulheres e dos homens com elevado risco para cancro
da mama deve ser precoce e regular (Tabela XVIII.6).
Tabela XVIII.6. Rastreio para diagnstico precoce de cancro da mama, ovrio,

prstata ou clon, na presena de mutaes em BRCA1 ou BRCA2
EXAME DE RASTREIO
Vigilncia da mama:
Auto-exame da mama
Exame clnico com avaliao da mama
Mamografia + ecografia concomitante
Vigilncia do ovrio:
Consulta com avaliao plvica
Ecografia transvaginal com Doppler a cores
CA125
Vigilncia da prstata:
Toque rectal
PSA
Vigilncia do clon:
PSO
Colonoscopia
PERIODICIDADE
INCIO
Mensal
2-4 vezes/ano
Anual
18 anos
25-35 anos
25-35 anos
Semestral
Semestral
Semestral
25-35 anos
25-35 anos
25-35 anos
Anual
Anual
50 anos
50 anos
Anual
Cada 3-5 anos
50 anos
50 anos
PSO pesquisa de sangue oculto nas fezes; PSA antignio especfico da prstata.
As intervenes para preveno do cancro da mama em portadores de

mutaes patognicas em BRCA1 ou BRCA2 passam pela proposta de
mastectomia total bilateral e de salpingo-ooforectomia bilateral, bem como
pela quimiopreveno (Tabela XVIII.7).
392
Tabela XVIII.7. Preveno do cancro da mama e do ovrio em portadores

de mutaes em BRCA1 ou BRCA2
TIPO DE ACTUAO
Mastectomia total bilateral

Salpingo-ooforectomia bilateral
Quimiopreveno:
- Para o cancro da mama (tamoxifeno)
- Para o cancro do ovrio (contracepo oral)
IDADE
Opo a considerar a partir dos 35 anos

Opo a considerar a partir dos 35 anos (e da
deciso da mulher de no voltar a engravidar)
Opo a considerar a partir dos 35 anos (e da
deciso da mulher de no voltar a engravidar)
5.3. SNDROMA DE LYNCH E CARCINOMA COLORRECTAL

A sndroma de Lynch tipo II ou HNPCC a causa mais frequente de
cancro do clon de natureza hereditria. No espectro desta sndroma incluemse ainda os tumores do endomtrio, do estmago, ovrio, intestino delgado,
sistema hepatobiliar e das vias urinrias altas. de transmisso autossmica
dominante (Fig. XVIII.7), com penetrncia incompleta estimada em cerca de
70%. As mutaes dos genes MSH2, MLH1, PMS1, PMS2 e MSH6, envolvidos
na reparao dos erros de emparelhamento, tm sido associadas a HNPCC.
A instabilidade de microssatlites ocorre em cerca de 95% dos tumores da
sndroma HNPCC.
39
80
84
42
30
42
46 46
52
40
2
(+/+)
33
(/+)
21
29
(+/)
(/)
(/+)
30
4
(+/)
(/)
(+/+)
(+/+)
(/)
(+/+)
4
(/)
(/+)
393
Cancro colorrectal (CCR)
Cancro estmago
CCR + Cancro do endomtrio
( / )
Presena (+) ou ausncia () de mutao nos genes MSH2/MLH1
Fig. XVIII.7 Heredograma caracterstico de uma famlia com sndroma de Lynch tipo II.
Para o diagnstico clnico de HNPCC, foram estabelecidos os critrios de

Amesterdo (Tabela XVIII.8) e, posteriormente, foram definidos os critrios de
Bethesda (Tabela XVIII.9).
Tabela XVIII.8. Critrios de Amesterdo para diagnstico de HNPCC

CRITRIOS DE AMESTERDO
Carcinoma colorrectal em, pelo menos, trs familiares

Um doente deve ser familiar em 1 grau dos outros dois afectados
Devem existir pelo menos duas geraes consecutivas afectadas
Um caso, pelo menos, deve ser diagnosticado antes dos 50 anos
A FAP deve ser excluda
Tabela XVIII.9. Critrios de Bethesda para diagnstico de HNPCC

CRITRIOS DE BETHESDA
Indivduos com CCR cuja famlia apresenta critrios de Amesterdo

Indivduos com duas neoplasias sincrnicas ou metacrnicas, do espectro do HNPCC
Indivduos com CCR e um familiar em 1 grau com CCR e/ou neoplasia do espectro HNPCC e/ou
adenoma colorrectal; uma das neoplasias diagnosticada antes dos 45 anos e o adenoma antes dos
40 anos
Indivduos com CCR ou carcinoma do endomtrio diagnosticado antes dos 45 anos
Indivduos com carcinoma do clon direito e com padro histolgico indiferenciado (slido/cribiforme)
diagnosticado antes dos 45 anos
Indivduos com CCR de clulas em anel de sinete (mais de 50% das clulas) diagnosticado antes
dos 40 anos
Indivduos com adenomas diagnosticados antes dos 40 anos
CCR carcinoma colorrectal.
394
O programa de vigilncia dos indivduos abrangidos por HNPCC, deve

considerar os rgos em risco, diferenciando as intervenes, consoante haja
ou no diagnstico molecular positivo nos indivduos (Tabela XVIII.10).
Os demais rgos do espectro, devem ser vigiados anualmente, sempre que
tenha havido membros na famlia com cancro localizado no respectivo rgo.
As medidas de preveno destinadas aos portadores de mutaes
patognicas associadas a HNPCC, encontram-se resumidas na Tabela XVIII.11.
Tabela XVIII.10. Protocolo de vigilncia dos indivduos que tiveram cancro do espectro
da sndroma de Lynch
EXAME DE RASTREIO
PERIODICIDADE IDADE DE INCIO
A. Presena de critrios clnicos para HNPCC e diagnsico molecular

Exame mdico
Semestral/anual
Colonoscopia total
Cada 1-3 anos
Anual
Histeroscopia e bipsia dirigida
Anual
Ecografia transvaginal/Doppler a cores e doseamento do CA125 Anual
B. Presena de critrios clnicos e diagnsico molecular negativo
Colonoscopia
De 2 em 2 anos
20-25 anos
20-25 anos
40 anos
25 anos
25 anos
20-25 anos
Tabela XVIII.11. Intervenes preventivas em portadores de mutaes patognicas

associadas a HNPCC
TIPO DE INTERVENO
Colectomia total
Histerectomia total + Salpingo-ooforectomia bilateral
IDADE
Aps deteco de plipos

A considerar a partir dos 35 anos
395
CAPTULO XIX
TERAPIA GNICA
1. INTRODUO
A terapia gnica tem como finalidade curar uma doena de natureza
gentica, por integrao, em clulas do organismo, de uma cpia normal de
um gene mutado ou em falta, ou por modulao da expresso gnica.
A terapia gnica apresenta-se como a quarta revoluo nas abordagens
mdicas das doenas. A primeira consistiu no combate s infeces atravs
de medidas sanitrias, a segunda assentou no aperfeioamento da cirurgia
com anestesia e a terceira processou-se atravs da vacinao e do recurso
aos antibiticos. As tcnicas de recombinao do DNA contribuiram
decisivamente para o desenvolvimento da terapia gnica.
Em termos de hereditariedade para uma doena, a preveno primria
implica que seja evitada a formao do gentipo anormal responsvel, o que
pressupe uma interveno antes da formao do embrio e do seu
desenvolvimento. Quando no tem lugar a preveno primria, o recurso
consiste na preveno secundria atravs do DPI seguido de no implantao
do embrio no tero materno, ou do DPN e da eventual interrupo da
gravidez. A preveno secundria permite alterar a frequncia de nascimentos
com um determinado fentipo anormal. Na ausncia de preveno primria
ou secundria, haver que recorrer s formas de tratamento disponveis
(Tabela XIX.1), actuando a nvel sintomtico ou, quando for possvel, a nvel
do gentipo atravs de terapia gnica.
397
Tabela XIX.1. Mtodos de interveno teraputica em doenas de natureza gentica

MTODOS DE INTERVENO
Afastamento de factores ambientais deletrios

Modificao da dieta
Teraputica medicamentosa
Cirurgia para exrese do rgo doente
Administrao do produto em falta
Modulao da expresso gnica
Transplantao de clulas ou de rgos
Terapia gnica
Para que a terapia gnica possa ser considerada um recurso na prtica

clnica, so ainda necessrias aquisies aparentemente inatingveis, como
sejam as que permitam aos vectores uma direccionalidade segura em termos
de clulas alvo quando esta for necessria, uma adequada insero no locus
homlogo em contraposio insero ao acaso no genoma, uma dosagem
gnica adequada, um efeito de cura que se prolongue durante a vida do
indivduo, custos reduzidos, efeitos colaterais reduzidos e uma relao risco/
benefcio atractiva.
2. BASES GENTICAS PARA A TERAPIA GNICA

A terapia gnica pode ser equacionada para condies hereditrias ou
adquiridas. Entre as condies hereditrias, os casos de natureza monognica
so os que permitem uma racionalizao mais objectiva. Quando a hereditariedade multifactorial est subjacente, haver que identificar, entre os genes
398
envolvidos, um que seja determinante na gnese ou no controlo da doena

em causa e cuja substituio ou modulao por terapia gnica possa travar
o processo patognico, sem esquecer que um melhor conhecimento dos
factores ambientais e uma actuao consistente a este nvel poder ser mais
eficaz e menos problemtica.
A racionalizao das condies monognicas diversa, consoante se trate
de hereditariedade recessiva, dominante ou dominante negativa.
Nos casos recessivos, espera-se que, em homozigotia, haja perda da

funo devido a ausncia do produto proteico por no expresso dos dois
alelos do locus, ou do alelo nico na hemizigotia observada para o
cromossoma X no sexo masculino. A soluo passar pela incorporao na
clula de uma cpia do alelo normal que, uma vez expressa, proporciona a
recuperao da funo atravs do seu produto proteico. Para muitos casos
de doena provocados por deficincia de uma enzima devida a homozigotia
recessiva, bastar a reposio de cerca de 10% dos nveis enzimticos
normais, para que a deficincia seja corrigida, o que no exige elevada
eficcia da terapia gnica.
Quando a alterao gnica de natureza dominante, coexistem num
locus a forma normal e a forma mutada do alelo, esta ltima responsvel pela
patologia presente. Por isso, no bastar transferir para as clulas a forma
normal do gene (que j est presente em heterozigotia), mas sim proceder
de modo a que no se observe expresso do alelo mutado. Para concretizar
este objectivo, podem-se antever as seguintes abordagens:
inactivao do produto proteico por complexao da protena anmala
com outra protena ou por alterao do seu grau de acetilao,
fosforilao ou metilao;
degradao do respectivo RNAm;
inactivao do RNAm por meio de uma cadeia de RNA antisense
produzida a partir da sequncia sense do alelo mutado ou
recorrendo a uma sequncia oligonucleotdica complementar para a
regio do RNAm onde tem incio a traduo ribosmica;
modulao da expresso do alelo mutado de modo a inibir a sua
transcrio.
Nos casos dominantes negativos, tambm no bastar incorporar nas
clulas uma cpia normal do alelo. Esta j est presente em heterozigotia.
O recurso poder passar pela inactivao selectiva da expresso do alelo
mutado intervindo a nvel do DNA (por inibio alelo-especfica ou por
recombinao homloga), do RNAm ou do produto proteico.
399
3. CRITRIOS DE SELECO DAS DOENAS PARA TERAPIA GNICA

Uma doena poder ser objecto de terapia gnica se se verificarem os
seguintes critrios:
perigo de vida na ausncia de terapia gnica e inexistncia de recursos
teraputicos alternativos;
um relao favorvel na ponderao do risco/benefcio para o indivduo
e para a espcie;
clonagem e sequenciao prvia do gene em causa e dos seus
elementos reguladores;
conhecimento da patologia molecular da doena;
ausncia de preciso da dosagem gnica;
existncia de solues tcnicas para introduzir o gene nas clulas ou
para modular a expresso do alelo mutado;
identificao das clulas alvo e da proporo de clulas a tratar para
obter efeito teraputico;
existncia de experimentao prvia em modelos animais que
demonstre a segurana do mtodo.
4. ABORDAGENS PARA TERAPIA GNICA

4.1. TERAPIA GNICA SOMTICA
400
A terapia gnica somtica feita em clulas somticas do indivduo

doente, submetidas a transfeo ou transduo com o gene normal. Entende-se que a terapia gnica somtica no atinge as clulas da linha germinal.
Por isso, um processo comparvel transplantao de um orgo. Pode curar
o indivduo mas o mecanismo somtico responsvel pela cura no
transmitido aos descendentes. Neste aspecto, tem efeitos idnticos a outras
teraputicas de suporte da vida. Possibilita o aumento de frequncia de
formas allicas mutadas associadas gnese de doenas.
A terapia gnica poder ainda ser realizada a nvel fetal. Durante o
desenvolvimento fetal h mais clulas-mes multipotentes, o sistema
imunolgico ainda no est desenvolvido e a interveno nesta fase previne
a acumulao de leses devidas falta de produto ou da sua forma alterada.
4.2. TERAPIA GNICA GERMINAL

A terapia gnica pode ser aplicada a clulas germinais (quando se dirige
a um gmeta ou ao ovo). Nestas condies, todas as clulas do organismo
sero portadoras da cpia normal do gene inserido, inclusive as clulas
precursoras dos gmetas. Deste modo, os descendentes de um indivduo
tratado no sero doentes. Contudo, o genoma da espcie pode ser
modificado por esta via, devido codificao proporcionada por um gene
heterlogo ou por eventuais alteraes provocadas pela insero do gene ao
acaso como acontece actualmente. Se a terapia gnica for ps-zigtica, a
nvel do embrio em fase precoce do desenvolvimento, o gene pode-se inserir
em todos os blastmeros e equivaler a terapia gnica germinal, ou pode
inserir-se nuns blastmeros e no se inserir noutros, originando um mosaico.
4.3. TERAPIA GNICA EX VIVO

As metodologias de terapia gnica ex vivo so viveis quando o defeito
est presente em clulas do sangue ou quando o defeito sistmico e pode
ser corrigido atravs da transfeo ou transduo de clulas sem especificidade tecidular. As clulas so recolhidas do doente, so tratadas in vitro
e, posteriormente, reintroduzidas no organismo.
Actualmente, a terapia gnica realizada, na maioria das vezes, ex vivo.
Para cumprirem a sua misso, as clulas devem ser facilmente obtidas, crescer
bem em cultura, suportar as manipulaes destinadas integrao do DNA
recombinante, ser facilmente reincorporadas no organismo aps tratamento
ex vivo e manter-se viveis no organismo durante um longo perodo de
tempo.
As clulas-mes da medula ssea (stem cells) congregam muitas destas
caractersticas e apresentam-se como excelentes alvos quando as alteraes
so sistmicas ou pertencem ao sistema hematopoitico. Estas clulas, pela
sua natureza multipotente, originam diversos tipos de clulas do sangue.
Em alternativa, podem-se obter clulas multipotentes hematopoiticas a partir
de sangue do cordo umbilical ou da parede do saco vitelino fetal. O recurso
aos ilhus sanguneos do saco vitelino permite ainda obter clulas precursoras
401
das clulas endoteliais localizadas na periferia dos ilhus. Para ultrapassar a

limitao decorrente do baixo ndice proliferativo das clulas-mes da medula
ssea e a sua contra-indicao quando necessria uma elevada quantidade
do produto, possvel aumentar o seu indce proliferativo recorrendo a
factores de crescimento. Ser tambm de considerar a utilizao de
sequncias intensificadoras da transcrio a inserir no vector utilizado.
Os linfcitos perifricos possuem algumas caractersticas que os
recomendam como clulas alvo para terapia gnica, tendo sido usados no
caso pioneiro de tratamento da deficincia em adenosina desaminase.
Os fibroblastos da pele tambm tm sido usados como clulas alvo para
transfeo ou transduo ex vivo com posterior incorporao no organismo
por injeco na cavidade peritoneal ou nos planos subcutneos. De igual
modo, as clulas da epiderme podem ser postas em cultura e originar
quantidades elevadas de clulas que, aps terapia gnica, podem ser
enxertadas na pele do dador de modo a constituirem-se numa parte da
epiderme com capacidade para produzir molculas com efeito teraputico que
o organismo no sintetiza ou que produz de um modo deficiente. As clulas
hepticas apresentam-se igualmente como candidatas a manipulao ex vivo
para terapia gnica e posterior injeco na veia porta de modo a veicularem
para o fgado cpias normais de um gene mutado. O mesmo se passa em
relao s clulas satlites das fibras musculares estriadas, como clulas
quiescentes com capacidade para proliferarem em cultura e serem objecto
de terapia gnica e posterior injeco na massa muscular.
4.4. TERAPIA GNICA IN SITU

A terapia gnica in situ pode ter lugar quando possvel definir um
402
territrio do organismo com uma via de acesso especfica (v.g., territrios

vasculares bem delimitados como os do fgado, dos rins e do crebro, ou as
vias respiratrias). Um ensaio de terapia gnica da fibrose qustica consistiu
na inalao de aerossis com vectores recombinantes portadores de cpias
normais do gene CFTR. O tratamento da distrofia muscular por injeco do
gene normal no tecido muscular outro exemplo de um ensaio de terapia
gnica in situ.
4.5. TERAPIA GNICA IN VIVO

A terapia gnica in vivo executada no indivduo, sem definio de um
territrio especfico, por injeco na corrente sangunea dos vectores
recombinantes. Esta via depara com mltiplas dificuldades, de que so
exemplo a aco do sistema imunolgico e a no selectividade dos vectores
para as clulas alvo.
5. MTODOS PARA TERAPIA GNICA

Tm sido desenvolvidas e propostas mltiplas estratgias para proceder
terapia gnica, de natureza fsica, qumica, biolgica e por modulao da
expresso gnica (Tabela XIX.2).
Tabela XIX.2. Mtodos para terapia gnica

MTODOS
Mtodos fsicos ou qumicos:

Microinjeco
Injeco directa nos tecidos
Microprojcteis com DNA adsorvido
Acoplagem do DNA a um complexo dextrano/DEAE com carga elctrica positiva (endocitose)
Co-precipitao do DNA com fosfato de clcio (endocitose)
Electroporao
Lipossomas
Conjugao do DNA com protenas
Mtodos biolgicos:
Retrovrus
Adenovrus
Vrus adeno-associados
Vrus herpes
Modulao da expresso gnica:
Produo de RNAm antisense
Utilizao de sequncias oligonucleotdicas sintticas complementares para a regio iniciadora da traduo
Modificao do grau de metilao do DNA
Recombinao homloga
Quimeraplastia
403
5.1. LIPOSSOMAS
A utilizao de lipossomas tem despertado intensa investigao e alguma
esperana. O DNA, sob a forma de plasmdeo, pode ser incorporado em
vesculas lipdicas designadas lipossomas. Quando os lipossomas se fundem
com a membrana citoplasmtica permitem que o DNA entre para dentro das
clulas, ocorrendo a transfeo. Os lipossomas permitem incorporar nas
clulas genes de grandes dimenses juntamente com as respectivas
sequncias reguladoras e ainda os elementos centromricos e telomricos que
possibilitam a replicao autnoma do DNA incorporado. A eficincia da
transferncia baixa.
5.2. MTODOS BIOLGICOS
404
As tcnicas de recombinao do DNA vieram possibilitar o uso de vrus

de RNA (retrovrus) e de DNA (adenovrus) como vectores para o DNA.
Quando o DNA incorporado nas clulas por meio de um vrus, aps a sua
insero no genoma virusal, o processo de transferncia do DNA designa-se
por transduo.
So exigncias a concentrar num vector virusal:
que proporcione uma incorporao estvel do gene no genoma do
hospedeiro;
que possibilite a terapia de um nmero de clulas suficiente;
que o nvel de expresso seja controlado de modo adequado e nas
clulas alvo (o recombinante deve incluir a regio codificadora e as
sequncias promotora e intensificadora do gene);
que haja vantagem em termos de risco/benefcio devido possibilidade
de mutagnese insercional e ao aumento de risco de neoplasia;
que haja ausncia de problemas ticos, nomeadamente os que
decorrem da eventual integrao no genoma de clulas germinais.
5.2.1. RETROVRUS
Os retrovrus possuem a informao gentica sob a forma de RNA. Cerca

de 80% do genoma de um vrus como o da leucemia murina de Moloney
(um retrovrus amplamente usado para terapia gnica) so constitudos por
trs genes (Fig. XIX.1): gag que codifica o antignio especfico do grupo, pol
que codifica a transcriptase inversa e env que codifica as protenas do
invlucro. Para alm destas sequncias, o genoma dos retrovrus possui ainda
uma sequncia de reconhecimento do RNA durante a encapsulao e, nas
direces 5' e 3', sequncias designadas long terminal repeats (LTRs) com
funo reguladora.
Os retrovrus, aps penetrarem nas clulas, libertam o genoma de RNA
e recorrendo maquinaria ribossmica das clulas sintetizam as protenas
virusais. A transcriptase inversa promove a sntese de uma cadeia de DNA
complementar do genoma virusal. Esta cadeia simples, por aco da
polimerase do DNA transformada em cadeia bicatenar, ficando apta a ser
inserida no genoma celular sob a forma de provrus de DNA, por meio da
enzima integrase. Cumprida a integrao no genoma da clula hospedeira,
o genoma proviral replicado quando as clulas se dividem, transcrito em
RNA e o RNA traduzido em protenas virusais. As protenas virusais e as
partculas de RNA virusal transcritas proporcionam a produo de grandes
quantidades de vrus, o que se traduz em infeco da clula hospedeira.
As sequncias retrovirais utilizadas em terapia gnica resultam de
manipulaes do mbito da engenharia gentica dirigidas para anular a
capacidade replicativa dos vrus e assim evitar o desenvolvimento de uma
virose. So retiradas aos retrovrus as sequncias gag, pol e env codificadoras
das protenas estruturais e, no seu lugar, inserida a sequncia correspondente ao gene exgeno a incorporar nas clulas para terapia gnica, juntamente com as respectivas sequncias reguladoras e de poliadenilao (Fig. XIX.1).
A
LTR
LTR
gag
pol
env
405
B
LTR
5
LTR
gene exgeno
Fig. XIX.1 Esquema de um retrovrus (A) e do vector para terapia gnica (B) que resulta das
modificaes realizadas no retrovrus. LTR long terminal repeat; gag, pol e env genes estruturais
que codificam, respectivamente, o antignio especfico, a transcriptase inversa e a protena do invlucro.
A negro est representado o gene exgeno transportado pelo vector.
Consequentemente, o retrovrus recombinante perde capacidade para

transformar o seu genoma de RNA em DNA, por ausncia de codificao para
a transcriptase inversa e perde capacidade para replicar. Por isso, necessrio
recorrer a clulas de empacotamento em que foi incorporado um retrovrus
auxiliar manipulado geneticamente para manter os genes estruturais mas
incapaz de se constituir em partculas virusais infecciosas por ausncia da
sequncia .
Os vectores derivados de retrovrus apresentam como vantagens:
elevada eficincia, j que podem ser transduzidas cerca de 100% das
clulas;
ausncia de toxicidade;
transduo simultnea de tantas clulas quantas as desejadas;
em condies apropriadas, a possibilidade de insero, no genoma das
clulas hospedeiras, de apenas uma cpia do DNA transduzido, num
nico lugar, embora ao acaso, ao contrrio dos mtodos fsicos pelos
quais so, habitualmente, incorporadas mltiplas cpias;
insero do DNA no genoma e estabilidade do efeito teraputico durante bastante tempo, com raros riscos para as clulas, j que no tm
capacidade para formar partculas infecciosas.
As desvantagens dos retrovrus decorrem:
da necessidade de as clulas estarem em diviso para se incorparem
no ncleo;
da inactivao rpida pelo complemento do soro;
da capacidade limitada em termos de comprimento do gene a inserir,
que no ultrapassa as 8 Kb;
da instabilidade, podendo a purificao reduzir a eficcia da
406
transduo;
da eventual mutagnese insercional provocada pela insero ao acaso;
da dificuldade de regular com preciso a dosagem gnica;
da possibilidade de expresso transitria;
da possibilidade, ainda que remota, de incorporao do genoma proviral recombinante nas clulas germinais, sem se poder prever ou tratar
eventuais consequncias para as geraes vindouras.
Situaes como a SIDA, diversas formas de cancro e a doena de

Gaucher so exemplos de doenas que tm sido seleccionadas para terapia
gnica, recorrendo aos vectores retrovirais.
5.2.2. ADENOVRUS
Os adenovrus tm um genoma constitudo por uma dupla cadeia de

DNA linear com cerca de 35 kb. Evidenciam um tropismo natural para o
epitlio respiratrio, o tracto gastro intestinal e a crnea e incorporam-se nas
clulas por endocitose mediada por receptores. Como vectores para a terapia
gnica, apresentam as seguintes vantagens em relao aos retrovrus:
permitem a obteno de elevadas concentraes virusais;
so estveis;
possibilitam a tranferncia de genes e a sua expresso em clulas em
mitose e em clulas que no esto em diviso;
podem infectar, virtualmente, todos os tipos de clulas humanas;
a recombinao rara;
tm um risco de mutagnese insercional muito reduzido por no serem,
habitualmente, incorporados no genoma;
Como desvantagens dos adenovrus enunciam-se:
a possibilidade de gerarem ttulos elevados de anticorpos
neutralizantes, com reduo de eficcia, em particular nos casos de
sucessivas administraes;
os efeitos secundrios devidos resposta inflamatria, para doses
elevadas;
a aco transitria por no insero no genoma e a necessidade de
repetir as administraes;
a eliminao rpida das clulas infectadas por aco de linfcitos T;
Como exemplo de utilizao dos adenovrus em terapia gnica refira-se
a sua aplicao em ensaios de terapia gnica na fibrose qustica, na
deficincia em -1-antitripsina e para transferir genes para o sistema nervoso
central.
407
5.2.3. VRUS ADENO-ASSOCIADOS
Os vrus adeno-associados so constitudos por uma cadeia simples de

DNA. Tm um local especfico de integrao no genoma, a nvel do
cromossoma 19, em 19q13.3-qter. Habitualmente, a infeco ocorre na
presena de um vrus auxiliar, seja um adenovrus ou um vrus herpes simplex.
Os vrus adeno-associados integram-se no genoma das clulas em diviso
e mantm-se transitoriamente em posio extracromossmica nas clulas que
no esto em diviso. Como vectores proporcionam um efeito teraputico
prolongado e no tm aco txica. Tm ainda um elevado grau de
segurana, sendo apenas conservados menos de 5% do seu genoma, a que
no corresponde nenhum gene virusal. Uma das limitaes do seu uso
decorre da baixa capacidade ao comportarem apenas sequncias de DNA at
4,5 kb.
Na ausncia de vrus auxiliar, a juno da sequncia promotora do
parvovrus B19 a este vector confere-lhe especificidade infecciosa para as
clulas da medula ssea precursoras dos glbulos vermelhos. Procedendo a
terapia gnica ex vivo em clulas da medula ssea e reinjectando-as na
corrente circulatria, ser possvel tratar doenas associadas a alteraes
genticas presentes nos glbulos vermelhos, recorrendo a este tipo de vrus.
Assim, uma condio como a anemia de clulas falciformes poder ser tratada
com este vector recombinado com o gene humano da -globina.
5.2.4. VRUS HERPES
Os vrus herpes, como vectores para terapia gnica, encontram particu408
lar utilizao nas condies que envolvem o sistema nervoso central devido
ao seu tropismo selectivo para o sistema nervoso central. Estes vrus no
necessitam de clulas em diviso e no inserem os genes que transportam
no genoma da clula hospedeira. Podem transportar fragmentos de DNA com
uma dimenso de cerca de 30 kb. O tratamento de doenas neurolgicas
como a doena de Parkinson ou as neoplasias do sistema nervoso central
poder passar pela utilizao destes vectores.
5.3. MODULAO DA EXPRESSO GNICA

A modulao da expresso gnica pode-se realizar nos diversos
patamares de regulao da expresso gnica, desde o DNA at forma
funcional da protena.
A nvel do DNA, a terapia gnica poder recorrer utilizao de
sequncias oligonucleotdicas especficas para uma determinada regio do
genoma na qual origina a formao de uma tripla hlice de DNA. A formao
de tripla hlice de DNA afecta a transcrio do DNA e, consequentemente,
poder inibir a expresso de uma mutao.
Para contrariar a expresso gnica, sem actuar a nvel do gene, pode-se
recorrer neutralizao do RNAm, por ligao de uma cadeia complementar
de RNA, de modo a formar-se uma cadeia bicatenar de RNA. Desta forma,
no haver traduo do RNAm em protena, a nvel dos ribossomas. Por outro
lado, o RNA , nestas condies, rapidamente destrudo. A cadeia
complementar de RNA usada para terapia designa-se por antisense.
A introduo de sequncias antisense nas clulas pode ser feita por meio
de um vector recombinante construdo para exprimir a sequncia sense do
gene em quantidades elevadas (Fig. XIX.2). Por esta metodologia, tem sido
possvel provocar a reverso do comportamento tumorignico de clulas
neoplsicas, a uma condio em que a sua capacidade proliferativa idntica
observada em clulas normais. tambm verosmel a sua utilizao para
anular a expresso de outros fentipos celulares patolgicos resultantes de
mutaes dominantes como as que ocorrem a nvel do protooncogene RAS
no cancro do pulmo.
Outra forma de teraputica com molculas antisense baseia-se na
utilizao de oligonucletidos monocatenares sintetizados in vitro, complementares para o codo AUG iniciador da traduo e para as sequncias
anexas da cadeia de RNAm transcrita pela clula. Estes pequenos
oligonucletidos penetram nas clulas com relativa facilidade e, por
complementaridade, vo originar uma sequncia bicatenar na regio de
iniciao da traduo, inibindo a produo da protena codificada pelo RNAm
original. Para extenses de oligmeros com mais de 15-17 nucletidos dever
haver no genoma apenas uma sequncia complementar o que possibilita uma
hibridao especfica.
409
Cadeia de DNA sense
Transcrio
Cadeia de DNA sense
C GGAAG C GGUUGGUGAGG C
RNA antisense
Cadeia de DNA antisense
RNAm sense
G C C UU C G C C AA C C A C U C C G
Transcrio
RNAm sense
Traduo
Cadeia de DNA antisense
Protena
RNAm sense
C GGAAG C GGUUGGUGAGG C
Ausncia de protena
RNA antisense
Fig. XIX.2 Esquema ilustrativo do modo de actuao das sequncias antisense, em terapia gnica.
410
O recurso terapia gnica por metodologia antisense parece til em

doenas em que h expresso de uma protena com funo alterada (v.g.,
oncogenes), ou seja, nos casos de mutaes dominantes. Nas mutaes
dominantes negativas poder tambm ser til, ao inibir a produo do
monmero mutado, deixando que os monmeros sem alterao oligomerizem
e formem complexos funcionais.
Os problemas relacionados com a utilizao de sequncias antisense
resultam da sua destruio pela DNase e da consequente semi-vida curta, da
necessidade de doses elevadas, da sua administrao por via parenteral e da
dificuldade de obter especificidade para as clulas alvo.
Durante o processo de diferenciao das funes celulares h genes que
so sucessivamente inactivados. Uma das formas de inactivao mediada
pela metilao das bases citosina. Nesta perspectiva, se forem administradas,
num indivduo adulto, molculas que induzam a desmetilao, ser possvel
reactivar estes genes tornando-os acessveis transcrio. Este processo foi
ensaiado para tratamento de casos de anemia de clulas falciformes.

O aumento de expresso do gene da cadeia da hemoglobina permite a
substituio das cadeias anormais nas molculas de hemoglobina adulta,
com consequente aumento de concentrao da hemoglobina fetal.
A 5-azacitidina inicialmente usada como agente indutor da produo
aumentada de hemoglobina fetal foi abandonada devido aos seus efeitos
carcinognicos e substituda pela hidroxiureia. Ensaios realizados em doentes
com anemia de clulas falciformes demonstraram uma melhoria significativa
dos sintomas devido administrao de hidroxiureia e ao consequente
aumento de expresso de hemoglobina fetal.
5.4. RECOMBINAO HOMLOGA

A recombinao homloga surge como uma resposta de eleio da
terapia gnica, nos casos em que h necessidade de preciso no processo
de recombinao subjacente insero de DNA estranho numa clula.
A recombinao homloga consiste na substituio de um alelo, em vez da
adio de um alelo normal mantendo-se os dois alelos pr-existentes.
A sequncia gnica incorporada pela clula aproxima-se do locus homlogo
e substitui um dos alelos. Nas clulas humanas, este processo parece ocorrer
com uma baixa frequncia, da ordem de 10-6. Nestas condies, o nmero
de clulas tratadas extremamente baixo, mesmo partindo de elevadas
quantidades iniciais. Embora o nmero de clulas tratadas por recombinao
homloga seja partida previsivelmente reduzido, se forem usadas clulas
embrionrias para transfectar em cultura, e se as clulas que sofrerem
recombinao homloga forem seleccionadas e o seu nmero ampliado em
cultura, ser possvel obter uma quantidade suficiente para obter efeitos
teraputicos num embrio ou no indivduo adulto.
411
5.5. QUIMERAPLASTIA
Este procedimento conduz reparao de um alelo mutado. Recorre a
uma sequncia sinttica de DNA com algum RNA distribudo ao longo da
sequncia. Tem uma extenso de cerca de 25 a 40 nucletidos, o que
suficiente para lhe conferir especificidade, em termos da sequncia mutada

a que se destina no genoma da clula. Organiza-se espacialmente como dupla
hlice.
O quimeraplasto emparelha com a sequncia alvo que se pretende
corrigir, por meio das suas pores de RNA. Por sua vez, introduz um erro
de emparelhamento de bases que activa os sistemas de reparao do DNA.
Tendo como modelo a sequncia de DNA do quimeraplasto, as enzimas de
reparao iro reparar a sequncia mutada do genoma da clula.
6. EXEMPLOS DE TERAPIA GNICA

6.1. IMUNODEFICINCIA SEVERA POR DFICE DE ADENOSINA DESAMINASE
412
Na imunodeficincia severa por dfice de adenosina desaminase (ADA),

h um bloqueio da via metablica que transforma a toxina desoxi-inosina em
cido rico. Se a toxina no for metabolizada acumula-se e destri os
linfcitos T. Na ausncia de linfcitos T helper no h estimulao dos
linfcitos B de modo a produzirem anticorpos. A falta de actividade dos
linfcitos T e B predispe os indivduos para infeces e para desenvolverem
cancro.
H alguns anos, os doentes com dfice de ADA comearam a ser
tratados com administrao de enzima de origem bovina modificada por
adio de cadeias de polietileno. Os doentes passaram a viver com menos
risco de infeco mas, ainda assim, com tendncia para sofrer infeces.
A terapia gnica para a deficincia em ADA, realizada em 1990 nos
Estados Unidos, em duas doentes, foi a primeira interveno de terapia gnica
humana a nvel mundial, feita com aprovao prvia. A partir de sangue
perifrico foram isolados linfcitos, posteriormente transduzidos com vectores
retrovirais recombinantes portadores de cpias normais do gene que codifica
a enzima ADA. Os vectores retrovirais recombinantes foram construdos de
modo a reduzir as capacidades patognicas da componente retroviral e a
inserir o gene da ADA. Aps a transduo dos linfcitos com os vectores
recombinantes, as clulas foram reinjectadas nas doentes. Os linfcitos at
a incapazes de produzir ADA passaram a produzir a enzima, aps integrao
do gene normal da ADA no seu genoma. Actualmente, as crianas tratadas

tm uma vida normal, sem receio de infeces.
Foi conseguido o tratamento das crianas, mas no a cura. Como os
linfcitos tm uma vida de alguns meses, o tratamento tem se ser repetido
periodicamente, para repor uma populao de linfcitos com capacidade para
produzir ADA em quantidade suficiente. A alternativa a esta soluo parece
passar pela transduo de clulas-mes da medula ssea que originam
linfcitos T. Quando estas clulas se dividem, uma das clulas-filhas continua
como clula-me e a outra evolui para formas com diferenciao funcional
e capacidade para sintetizar ADA. Assim, a populao de clulas-mes
manter ao longo da vida a correco para a deficincia.
Num ensaio em curso desde Maio de 1993 em doentes com deficincia
de ADA, foram colhidas clulas-mes do cordo umbilical que, aps
tratamento com um vector recombinante para o gene normal da adenosina
desaminase foram injectadas nos recm-nascidos. Lentamente, a percentagem
de clulas T com expresso de ADA tem vindo a aumentar desde valores de
1/10.000 aps alguns meses de tratamento at cerca de 3% ao fim de dois
anos de evoluo.
6.2. FIBROSE QUSTICA

A fibrose qustica a causa mais frequente de morte, entre as doenas
autossmicas recessivas. Embora as crianas com homozigotia para o forma
mutada do gene CFTR tenham pulmes normais na altura do nascimento, a inflamao e as alteraes pulmonares observam-se muito precocemente, cerca das
quatro semanas. Por isso, a terapia gnica da fibrose qustica, quando for possvel,
dever ocorrer nas primeiras semanas de vida, para evitar a degradao da
funo respiratria. Idealmente, dever ocorrer in utero, o que no momento
presente no possvel antecipar como forma de tratamento realizvel.
A terapia gnica com a forma normal do gene CFTR permitiria a
transduo das clulas de revestimento das vias respiratrias e a sntese da
forma normal do transportador de cloro, evitando as consequncias que advm
da sua ineficcia. Estes ensaios foram iniciados por via inalatria com adenovrus
recombinantes portadores da forma normal do gene, tendo sido observada
expresso do gene nas clulas do revestimento nasal mas no a nvel pulmonar.
413
Com o recurso aos adenovrus, aos vrus adeno-associados e aos

complexos de plasmdeos e lipossomas, j foram realizados vrios ensaios
clnicos de fase I. Os resultados mostram que h alguma expresso gnica,
ainda que transitria. A via endotraqueal levou, predominantemente,
deposio do DNA transferido para as clulas do epitlio bronquiolar (v.g.,
clulas de Clara), enquanto que a administrao intravenosa possibilitou a
chegada do DNA at regio alveolar, inclusive com localizao nos
pneumcitos tipo II. semelhana dos resultados de outros estudos, a
expresso gnica foi transitria.
6.3. TRATAMENTO DO CANCRO
414
Ao contrrio de situaes extremamente raras como o caso da

deficincia em ADA em que foi a novidade que chamou a ateno, o impacto
da terapia gnica ser seguramente enorme em termos de sade pblica,
quando permitir tratar situaes comuns como o cancro. A dificuldade da
terapia gnica do cancro prende-se com a dificuldade de atingir todas as
clulas com o tratamento ou, pelo menos, um nmero suficiente de clulas
que permita eliminar as restantes por efeito citotxico de bystander.
O melanoma foi a primeira situao de cancro em que foi ensaiada a
terapia gnica, em 1991. Foram isolados linfcitos do doente com
especificidade para infiltrarem os tumores slidos (TILs) e para matarem as
clulas quando administrados conjuntamente com interleucina 2. Os TILs
foram postos em cultura e transduzidos com retrovrus recombinantes
portadores do gene que codifica o factor de necrose tumoral (TNF).
Seguidamente, os TILs foram injectados na esperana de que infiltrassem o
tumor e produzissem TNF, uma molcula com uma actividade anticancerosa
potente, embora com efeitos txicos severos quando administrada por via
sistmica.
Na terapia gnica dos tumores cerebrais tem sido ensaiado o recurso a
genes suicidas. Esta abordagem baseia-se no facto de os neurnios no
se dividirem e, em contrapartida, as clulas neoplsicas, nomeadamente nos
casos de glioblastoma, terem uma actividade proliferativa elevada. Recorrendo
a retrovrus, apenas haver transduo das clulas em diviso, com proteco
dos neurnios. Os retrovrus recombinantes so veiculados at massa
tumoral por injeco estereotxica de uma suspenso de fibrolastos

previamente transduzidos com retrovrus recombinantes para o gene da
timidinacinase. Os retrovrus libertados na massa tumoral procedem
transduo das clulas neoplsicas e proporcionam a produo de timidinacinase nestas clulas. A morte selectiva das clulas tumorais desencadeada
recorrendo ao ganciclovir, como pr-droga antivrica. Esta molcula, na
presena de timidinacinase, transformada em intermedirios citotxicos que
eliminam selectivamente as clulas tumorais transduzidas e, por efeito bystander, as clulas neoplsicas vizinhas.
O recurso a genes suicidas tem vantagens que resultam do seu efeito
txico em clulas que podem ser resistentes a teraputicas citotxicas
convencionais, da necessidade de expresso durante um curto perodo de
tempo e de ser necessrio transduzir apenas cerca de 10% das clulas
neoplsicas para que todas as clulas do tumor sejam mortas por efeito
bystander.
6.4. HIPERCOLESTEROLMIA FAMILIAR

Em casos de hipercolesterolmia familiar tem vindo a ser ensaiada a terapia
gnica, recorrendo a clulas hepticas que so transfectadas com um
recombinante portador do gene que codifica a forma normal do receptor de
membrana para as LDLs. Posteriormente, as clulas so injectadas na veia porta.
6.5. TERAPIA GNICA DE DOENAS AGUDAS

Para alm das doenas hereditrias, uma outra rea de utilizao da
terapia gnica poder ter como objectivo o tratamento de doenas adquiridas,
modulando a expresso de um determinado gene. Nestas condies, a
expresso temporria do gene transduzido, sendo uma limitao da terapia
gnica nos casos hereditrios, poder ser suficiente para contribuir para o
tratamento. Como exemplo, refira-se a transduo do gene da ciclo-oxigenase
em casos de leso aguda do pulmo, cuja expresso resulta no aumento da
expresso de prostaciclina e PGE2 pelos pulmes e inibe o edema e a
hipertenso pulmonar induzida pela endotoxina.
415
CAPTULO XX
ACONSELHAMENTO GENTICO
1. INTRODUO
O aconselhamento gentico , por excelncia, um acto mdico em que
se salienta a comunicao entre o mdico e o doente ou consulente.
O aconselhamento gentico o processo pelo qual uma pessoa doente ou
os seus familiares em risco para uma doena, que pode ser hereditria, so
informados sobre as consequncias da doena, a probabilidade de a
desenvolverem ou transmitirem e os modos de a prevenir ou melhorar.
Assim tem sido definido o aconselhamento gentico por Peter Harper nas
sucessivas edies do seu livro Practical Genetic Counselling. Para a OMS,
o aconselhamento gentico define-se como a preveno de gentipos que
comportam uma doena e/ou um defeito congnito, mediante a identificao
prospectiva ou retrospectiva dos acasalamentos que sejam capazes de
produzi-los. Para o Comit para o Aconselhamento Gentico da Sociedade
Americana de Gentica Humana, consiste num processo de comunicao
que aborda os problemas humanos relacionados com o aparecimento ou com
o risco de recorrncia de uma determinada alterao numa famlia.
A dimenso educativa tambm faz parte do processo de aconselhamento
gentico.
O aconselhamento gentico denominado retrospectivo quando j existe
um indivduo afectado na famlia. Se o aconselhamento gentico se
desenvolve numa famlia, na ausncia de algum afectado, designa-se como
prospectivo.
417
2. ETAPAS DO ACONSELHAMENTO GENTICO

Um processo de aconselhamento gentico estabelece-se no mbito da
relao mdico/doente. Tem, como ponto de partida, uma condio
presumivelmente de natureza hereditria e, por isso, associada a risco de
recorrncia. Inclui as seguintes etapas:
elaborao de um diagnstico seguro e, quando tal no for possvel,
a excluso de algumas doenas (uma etapa essencial para suportar as
etapas subsequentes);
determinao do curso da doena, do prognstico e das formas de
tratamento ou preveno;
identificao da forma de transmisso hereditria e do risco para o
prprio ou para a descendncia;
identificao das opes perante um determinado risco de recorrncia;
comunicao dos factos ao consulente (outra etapa crucial e de grande
exigncia e sensibilidade) com indicao das consequncias da doena
em termos fenotpicos, do seu curso e dos riscos de ocorrncia no
prprio ou em descendentes, dos meios de tratamento, de preveno,
ou de minorar as suas consequncias, das opes reprodutivas para
evitar o nascimento de descendentes doentes;
definio de formas de actuao no respeito pelas aspiraes do
consulente e da famlia e pelos seus princpios ticos, morais e
religiosos, bem como de seguimento com destaque para o apoio
psicolgico, tendo presente que haver frequentemente um processo
de adaptao pessoal ou de uma famlia face a uma anomalia ou
doena ou a um risco de recorrncia.
418
3. INDICAES PARA O ACONSELHAMENTO GENTICO

O aconselhamento gentico pode ser dirigido a um nico consulente,
aos membros de uma famlia, ou, de uma forma alargada, aos membros de
uma comunidade. Neste ltimo caso, a generalidade das pessoas no tem
histria familiar de anomalias genticas (v.g., grvidas com idade avanada,
rastreios bioqumicos, ecografias de rotina).
O aconselhamento gentico est indicado, sempre que uma etiologia

gentica seja evidente ou possvel, ou quando for necessrio excluir uma
causa hereditria:
em gravidezes em idade avanada ( 35 anos);
nos casos de gravidez em mulheres portadoras de doenas que podem
afectar o desenvolvimento embrionrio e/ou fetal (v.g., epilepsia, diabetes);
quando se verifica esterilidade conjugal;
em casais consanguneos;
quando um dos cnjuges apresenta uma alterao gentica;
quando h anomalias cromossmicas conhecidas na famlia;
quando os dois cnjuges apresentam a mesma alterao congnita
(v.g., surdez, paralisia cerebral);
quando h abortos de repetio num casal;
quando numa famlia existe um elemento com anomalias congnitas
graves, concomitantes ou no com atraso mental, no sentido de
esclarecer as causas daquela ocorrncia e estabelecer os riscos de
recorrncia;
quando h na famlia uma histria de doena grave;
quando h numa famlia vrias membros com uma determinada
doena ou vrias formas de doena enquadrveis numa condio
sindromtica (v.g., vrias formas de cancro pertencentes ao espectro
da sndroma de Lynch);
como suporte a tratamentos mdicos, cirrgicos ou dietticos de
doenas genticas.
4. REGRAS BSICAS PARA O ACONSELHAMENTO GENTICO

A comunicao entre o mdico e o consulente corporiza a essncia da
arte mdica. Desde o primeiro contacto, o consulente deve sentir um
ambiente de proximidade e de confiana propiciador de uma abertura que
ultrapasse naturais inibies e permita um relato fiel e sem evitamentos dos
factos relativos sua condio e/ou dos membros da sua famlia.
419
420
Para a comunicao dos dados relativos a uma condio, devem ser tidos
em considerao o momento e os recursos de linguagem que o julgamento
personalizado do mdico entender adequados, face ao nvel scio-educativo
e cultural do consulente e ao seu estado emocional. O nmero de sesses
de consulta deve tambm ser ajustado, tendo em mente que o
aconselhamento gentico no se esgota, habitualmente, numa nica sesso.
Sendo um processo e no um acontecimento, deve ser continuado, quando
necessrio, de modo a suportar as decises do consulente.
Deve ser tida em ateno a necessidade de fazer compreender os
mecanismos que originam a condio, as formas de manifestao e evoluo,
o prognstico, as solues teraputicas, preventivas ou de alvio das
manifestaes, o modo de transmisso hereditria, o risco de vir a desenvolver
a doena e/ou de recorrncia noutros membros da famlia, as formas de
rastreio e as eventuais opes em termos de reproduo. Ser com base
nessas informaes e no conhecimento que o consulente construir a partir
delas que tomar as suas decises informadas.
O mdico deve evitar qualquer atitude coerciva relativamente ao
consulente. Deve apresentar factos, abstendo-se de emitir juzos de valor
ainda que o consulente se dirija ao mdico e pergunte como decidiria se
estivesse nas suas condies ou quando a deciso do consulente de risco
elevado. O processo de aconselhamento gentico deve deixar ao consulente
a liberdade de decidir por si, a partir do conhecimento de toda a informao
disponvel, dada sem qualquer direccionalidade por parte do mdico
geneticista. Face a estas exigncias, o aconselhamento gentico um acto
mdico, que consubstancia por excelncia o exerccio da arte mdica, como
j se referiu.
Outro aspecto do aconselhamento tem a ver com a necessidade de se
criar um clima de esperana que contrarie alguma tendncia natural para se
referirem apenas as vertentes mais negativas. Este aspecto deve ser cuidado
em interligao com a indicao dos riscos e com eventuais recursos de DPI
ou DPN, bem como com os recursos teraputicos, preventivos ou de
diagnstico precoce. Veja-se o caso do risco de recorrncia de uma condio
homozigtica recessiva num casal. A existncia de um filho afectado indica
um risco de recorrncia de 1 em 4 (ou de 25%). A probabilidade de 3 em 4
(ou seja, de 75%), de nascer um filho no afectado em prxima gravidez,
deve tambm ser indicada. Se o risco de recorrncia de uma afeco for, por
exemplo, de 1 em 20 (ou seja, de 5%), dever-se- indicar que h uma

probabilidade de 19 em 20 de um prximo filho nascer sem a doena (ou
seja de 95%). A deciso informada caber ao consulente!
A identificao de membros da famlia em risco, pe o problema
relacionado com a forma de os contactar. O consulente habitualmente o
melhor meio de comunicar com o indivduo em risco e de o esclarecer sobre
a necessidade de procurar uma Consulta de Gentica. Quando o consulente
deseja o anonimato, ou pretende no divulgar a sua ligao ao caso, poder
indicar o mdico de famlia como intermedirio para o contacto dos indivduos
que, pelo heredograma, estejam em risco.
5. O DIAGNSTICO GENTICO COMO SUPORTE DO ACONSELHAMENTO

Um diagnstico correcto constitui a pedra angular do processo de
aconselhamento gentico. Exige, como em qualquer consulta mdica, a
elaborao de uma histria clnica cuidada em que seja dada particular
ateno histria familiar e ao heredograma. No decorrer da elaborao da
histria clnica, as eventuais preocupaes que aflijam o consulente e que no
sejam relevantes para a sua condio, devem tambm ser identificadas e
esclarecidas pelo mdico, para que a ansiedade seja quebrada. Deve tambm
ser realizado um exame fsico cuidadoso. Entre os meios complementares para
o diagnstico gentico incluem-se o caritipo, estudos moleculares,
bioqumicos, enzimticos, radiolgicos ou outros. O diagnstico gentico
destina-se, semelhana dos diagnsticos noutras reas da Medicina, a
confirmar a presena de uma doena.
Veja-se o caso, relativamente frequente, de um indivduo com
dificuldades srias de aprendizagem. Para um diagnstico etiolgico, nem
sempre conseguido, deve ser considerada uma avaliao clnica cuidada que
inclua a histria familiar e obsttrica, a elaborao do caritipo tendo presente
que, em mdia, apenas 6% destes casos mostram alteraes citogenticas,
o estudo molecular do gene FMR1 para despistar uma sndroma do X-frgil
(que mostrar alteraes apenas em cerca de 6% dos casos), o estudo
imagiolgico do sistema nervoso central e, eventualmente, estudos
metablicos se houver dados que os justifiquem.
421
H diversas situaes que podem dificultar o diagnstico gentico:

quando o doente faleceu sem que tenha sido diagnosticada a causa da
doena ou tenham sido realizados os exames complementares de
diagnstico disponveis (podero restar fotografias, peas de anatomia
patolgica, relatrios clnicos, a descrio de familiares, a possibilidade de
excluir determinadas condies ainda que sem um diagnstico preciso);
quando no possvel chegar a um diagnstico de certeza por
conhecimento inadequado da literatura (ou por a condio no ter
ainda sido descrita), o que acontece com um nmero significativo de
situaes genticas, mesmo recorrendo ao contributo de colegas de
diversas especialidades;
quando o doente chega Consulta de Gentica com um diagnstico
errado que assumido como verdadeiro e sobre o qual se desenvolve
o processo de aconselhamento;
quando, para uma determinada condio, h dificuldade no
estabelecimento da correlao gentipo/fentipo pela existncia de
eventual heterogeneidade gnica, de pleiotropismo, de penetrncia
incompleta, de expressividade varivel, de variabilidade da idade de
expresso clinicamente aparente, ou quando tenha resultado de
mosaicismo gonadal ou de relaes extra-conjugais;
quando esto disponveis testes predizentes adequados mas existem
questes ticas relevantes que questionam a sua realizao.
6. OPES E SEGUIMENTO
422
Num processo de aconselhamento gentico, as opes devem ser

analisadas com o consulente em termos de teraputica, de formas de
preveno, de eventuais alternativas reprodutivas e de seguimento.
No mbito das opes reprodutivas surgem como hipteses a ponderar:
ter filhos e recorrer a DPN ou DPI se estiverem disponveis; recorrer a tcnicas
de procriao medicamente assistida como a inseminao heterloga ou a
ddiva de ovcitos; no ter filhos e adoptar uma criana; no ter filhos e no
adoptar uma criana. essencial um esclarecimento adequado sobre as
possibilidades indicadas, em termos de vantagens e de inconvenientes.
Com o avano dos meios complementares de diagnstico postos ao

servio do diagnstico gentico, nomeadamente pelo estudo molecular do
DNA, cada vez mais possvel modificar o clculo de risco e aconselhar de
uma forma bastante mais precisa. No entanto, nos casos em que estes
estudos no estejam disponveis ou o consulente no o deseje, o mdico ter
de se basear na avaliao clnica.
Os aspectos relacionados com o seguimento tm a ver com o
planeamento de prximas consultas do mbito da Gentica ou de reas de
especialidade para interveno teraputica ou diagnstico precoce, com
tarefas que sejam assumidas pelo consulente como sejam o contacto e a
sensibilizao de familiares para virem consulta, ou a recolha de dados
adicionais sobre a histria familiar, mas tambm com a disponibilizao de
recursos humanos para apoio psicolgico que ajudem a ultrapassar eventuais
sentimentos de culpa que a consulta ou consultas no resolvam.
O sucesso de uma consulta de aconselhamento gentico pressupe a
compreenso dos dados comunicados. Para complementar o aconselhamento
e apoiar essa compreenso, deve ser posteriormente elaborada e enviada ao
consulente uma carta em que seja sintetizado o contedo da consulta ou
consultas realizadas e aberta a possibilidade de realizao de nova consulta
se surgirem dvidas por parte do consulente.
7. MOMENTOS PARA O DIAGNSTICO E O ACONSELHAMENTO GENTICO

Face existncia de um risco gentico, o diagnstico e o aconselhamento
gentico podem ser pr-matrimonial, pr-concepcional, pr-implantatrio, prnatal e ps-natal. Os procedimentos devem assentar numa percepo clara do
que se procura e dos momentos mais adequados para a sua realizao.
423
7.1. ACONSELHAMENTO GENTICO PR-MATRIMONIAL

O aconselhamento pr-matrimonial tem lugar antes do casamento. Est
indicado quando h consanguinidade entre os futuros membros do casal,
quando h antecedentes familiares para uma doena gentica e, em bases
populacionais, para rastreio de portadores de formas allicas com mutaes

recessivas frequentes em determinadas populaes e que sejam responsveis
por doenas graves em homozigotia.
Quando conjugado com a realizao de testes genticos para deteco
de portadores de alelos mutados, permite o cruzamento de informao sobre
o estatuto gentico dos elementos do futuro casal.
Como exemplos de rastreio de portadores, refiram-se os que foram
realizados entre judeus Ashkenazi, para deteco de heterozigotos para a
mutao responsvel pela doena de Tay-Sachs(1) e os rastreios realizados
entre habitantes de Malta, Grcia e Itlia para preveno da talassmia .
O diagnstico gentico realizado em perodo pr-matrimonial tem como
problemas ticos a perda de privacidade e a eventual estigmatizao, com
rejeio social dos portadores.
7.2. ACONSELHAMENTO GENTICO PR-CONCEPCIONAL
424
O perodo pr-concepcional representa, para um casal, a melhor

oportunidade para proceder ao aconselhamento gentico, ao permitir a realizao
dos estudos necessrios, sem a presso do tempo que se impe quando j existe
uma gravidez em curso. Os estudos podem ser demorados, quando implicam
diversos membros de uma famlia. Por outro lado, e face a eventuais riscos, o
casal tem oportunidade de ser esclarecido sobre possveis medicamentos a tomar
ou a evitar, cuidados de sade a ter, infeces a tratar ou escolhas a realizar em
termos reprodutivos, sem ficar limitado ao DPI ou ao DPN.
So indicaes para aconselhamento gentico pr-concepcional:
abortos de repetio;
filho anterior com cromossomopatia;
esterilidade num membro do casal;
filho anterior com malformaes mltiplas;
doenas hereditrias na famlia;
histria familiar de atraso mental;
consanguinidade.
(1) A doena de Tay-Sachs uma afeco de natureza autossmica recessiva, rara na populao
geral, que afecta o crebro e provoca morte precoce cerca dos 3 a 4 anos de idade. Entre Ashkenazis,
a frequncia de portadores do alelo mutado de 1 em cada 30 indivduos, em comparao com a
populao geral em que de 1 para 300.
7.3. DIAGNSTICO E ACONSELHAMENTO GENTICO PR-IMPLANTATRIO

O DPI permite fazer o diagnstico de anomalias genticas em embries
obtidos por fecundao in vitro, antes de serem implantados no tero. uma
alternativa ao DPN, para casais com um elevado risco de transmitirem doenas
genticas graves. No entanto, para casais sem problemas de esterilidade,
enfrenta as dificuldades inerentes reproduo medicamente assistida por
fecundao in vitro.
Calcula-se que este tipo de diagnstico gentico, quando seguido de no
implantao do embrio na cavidade uterina, reduza em 95% o risco de um casal
portador de uma doena gentica grave transmitir essa doena a um descendente.
A primeira doena a ser estudada com o recurso a DPI foi a fibrose
qustica, em 1992. At agora, o DPI tem sido realizado:
em embries obtidos de casais portadores de mutaes associadas a
doenas monognicas (Tabela XX.1);
para a determinao do sexo do embrio em casais portadores de
doena ligada ao cromossoma X;
para detectar complementos cromossmicos anormais em embries
(v.g., embries de mulheres com mais de 35 anos, com recurso ao
estudo de glbulos polares);
para identificar embries portadores de alteraes estruturais no
equilibradas (v.g., translocaes).
Tabela XX.1. Exemplos de doenas monognicas em que tem sido usado DPI
EXEMPLOS DE DOENAS MONOGNICAS
Doenas autossmicas dominantes:

Coreia de Huntington
Distrofia miotnica
FAP
Sndroma de Marfan
Doenas autossmicas recessivas:
Anemia de clulas falciformes
Doena de Tay-Sachs
Fibrose qustica
Hiperplasia congnita da suprarrenal
Talassmia
Doenas ligadas ao cromossoma X:
Distrofia muscular de Becker
DMD
Hemofilia
Sndroma do X-frgil
425
Os casais em que tenham ocorrido mltiplos abortos (por eventual

presena de aneuploidias nos embries) podero tambm beneficiar desta
tcnica.
O DPI pode ser realizado:
nos glbulos polares do ovcito e do zigoto, o que apenas permite
estudar mutaes presentes no DNA materno;
em um ou dois blastmeros colhidos em embries com trs dias de
desenvolvimento (com 6 a 8 clulas), obtidos por fecundao in vitro
por injeco intracitoplasmtica;
por bipsia de cerca de 10 clulas da trofoectoderme do blastocisto,
cerca do 5-6 dia de desenvolvimento, fase em que o embrio se
apresenta com cerca de 100 clulas.
426
A bipsia de um ou dois blastmeros o mtodo mais frequentemente

usado. A bipsia da trofoectoderme caiu em desuso para estudo pr-implantatrio, embora permita maior segurana dos resultados, provavelmente pelo
facto de apenas cerca de 40% a 50% dos embries em cultura atingirem a
fase de blastocisto.
O DPI um mtodo que exige rapidez na obteno dos resultados, no
podendo demorar mais do que 48 horas, para que o embrio se encontre
com boa viabilidade para ser implantado no tero. Os estudos cromossmicos
so realizados, habitualmente, por hibridao in situ.
Uma das limitaes mais significativas do DPI reside na eficincia,
relativamente baixa, da fecundao in vitro, uma vez que no mais de 20%
a 30% dos casais conseguem uma gravidez por ciclo de fecundao in vitro.
ainda uma tcnica associada a cerca de 5% a 10% de falsos positivos
ou falsos negativos, pelo que os resultados devem ser confirmados por DPN.
Falsas condies de homozigotia podem ocorrer por falha de amplificao
de um dos alelos, por PCR. Assim, nos casos de mutaes autossmicas, se
o estudo por PCR no amplificar o alelo mutado, origina-se um falso negativo
que pode determinar a transferncia de um embrio portador da mutao.
Os erros associados a DPI em mutaes autossmicas so mais frequentes
nos casos de natureza dominante (cerca de 15%), em comparao com os
casos de natureza recessiva (cerca de 1,8%). Nos casos de natureza recessiva
ligada ao X, a probabilidade de erro de cerca de 7%.
Na eventualidade de haver mosaicismo a nvel dos blastmeros e se for

estudada uma nica clula, o resultado do DPI tambm pode induzir em erro.
Se forem usadas duas clulas em vez de uma, reduz-se a probabilidade de
erro.
A capacidade de implantao ligeiramente afectada pela prvia colheita
de clulas, levando degenerescncia dos embries em menos de 5% dos
casos, para equipas bem treinadas.
7.4. DIAGNSTICO E ACONSELHAMENTO GENTICO PR-NATAL

O diagnstico e o aconselhamento pr-natais assentam, predominantemente, no DPN realizado no perodo fetal da gravidez. O primeiro DPN
realizado em Portugal, teve lugar no Porto, em 1972. O DPN permite que
os pais tomem decises com base em factos em vez de clculos de risco
empricos. Contudo, nenhum teste pr-natal pode garantir que um feto ser
normal, para alm da doena investigada e, mesmo nesta, tendo em
considerao as limitaes do mtodo utilizado.
So indicaes para DPN:
idade da me superior a 35 anos;
existncia de um filho anterior portador de cromossomopatia;
progenitor portador de cromossomopatia equilibrada;
possibilidade de ocorrncia de sndroma de X-frgil;
risco elevado para doena de causa monognica;
abortos mltiplos;
anomalias detectadas por ecografia;
suspeita de anomalias fetais sugeridas por rastreio bioqumico (v.g.,
valores anormais de -fetoprotena);
histria de defeitos do tubo neural;
anomalias mltiplas em filho anterior, ainda que sem diagnstico mdico;
ansiedade materna.
A ecografia o meio complementar de diagnstico mais frequentemente
utilizado no DPN.
A amniocentese habitualmente realizada s 15 semanas de gestao
e a bipsia das vilosidades corinicas entre as 9 e as 12 semanas de gestao.
427
Estes procedimentos constituem as fontes mais comuns de obteno de

clulas com origem fetal para DPN, seja para estudos citogenticos ou
moleculares. A amniocentese executada com um agulha fina introduzida
no tero atravs da parede abdominal, sob controlo ecogrfico. So recolhidos cerca de 20 a 30 ml de lquido amnitico, por aspirao com uma
seringa. A bipsia das vilosidades pode ser executada por via vaginal ou por
via abdominal, sendo colhidos cerca de 20 a 40 mg de tecido corinico.
A amniocentese permite, para alm dos estudos nas clulas fetais, a
realizao de doseamentos bioqumicos. No soro materno, tambm pode ser
realizado o doseamento bioqumico de substncias, de que so exemplo as
indicadas na Tabela XIV.7.
As clulas fetais podem tambm ser isoladas do sangue circulante
materno, onde se encontram em pequena quantidade. Como tcnica no
invasiva, ainda que sem utilizao prtica actualmente, tem despertado
grande interesse.
A ecografia fetal pode constituir um recurso precioso, como acontece
no rastreio de defeitos do tubo neural, em conjugao com o doseamento
da -fetoprotena, no soro materno, ou da trissomia 21.
O DPN por amniocentese est associado a um risco de aborto da ordem
de 0,5% a 1%, quando a colheita de lquido amnitico realizada 15
semana de gestao, e de cerca de 2%, se a amniocentese for realizada
precocemente, entre a 12 e a 14 semanas de gravidez. O risco provocado
pela amniocentese vem adicionar-se ao risco de abortamento espontneo
que, pela 15 semana, da ordem de 2,5%. Para a bipsia das vilosidades
existe um risco de aborto de 1% a 2%, para alm de um ligeiro aumento
de risco para defeitos congnitos, sobretudo dos membros, quando
realizada precocemente.
428
7.5. DIAGNSTICO E ACONSELHAMENTO GENTICO PS-NATAL

Os estudos para diagnstico gentico ps-natal so habitualmente feitos
em linfcitos do sangue perifrico ou em fibroblastos. Podem recorrer
citogentica, a FISH e a estudos moleculares do DNA. Abrangem os processos
de diagnstico neonatal e, em idades posteriores, o rastreio de portadores
de mutaes recessivas e o diagnstico pr-sintomtico. Esto ainda indicados
em fetos com malformaes mltiplas, em crianas com malformaes

mltiplas ou atraso de desenvolvimento, em indivduos com atraso mental,
nos casos de fentipo sugestivo de anomalias dos cromossomas sexuais e em
familiares de portadores de anomalias estruturais dos cromossomas.
O diagnstico neonatal justifica-se quando a deteco da deficincia de
causa gentica passvel de abordagem teraputica, como acontece com a
FCU ou o hipotiroidismo congnito.
O rastreio de portadores pode ser realizado em sub-populaes em que
haja uma frequncia aumentada de alelos de um determinado gene com
mutaes recessivas, na expectativa de reduzir os casamentos ou as gravidezes
entre heterozigotos e de diminuir a incidncia da doena.
A realizao de diagnstico pr-sintomtico deve atender s vantagens
e aos inconvenientes do diagnstico predizente. A sua realizao em crianas
deve ter lugar apenas quando a expresso da mutao em causa precoce
e h recursos mdicos disponveis para beneficiar o portador da mutao.
429
CAPTULO XXI
TICA EM GENTICA
1. INTRODUO
A tica uma rea do saber que investiga sobre o que bem no agir
do homem, na busca do comportamento que conduza plena realizao da
pessoa, no mbito de uma solidariedade com os outros que seja globalmente
justa. a cincia da moral e a arte de dirigir a conduta. Os limites ticos
divergem em funo das restries que modelam o mundo moral das
comunidades e dos indivduos, devendo prevalecer a busca da humanizao
e a interrogao sobre o dever, e no sobre a capacidade de fazer.
Especificamente, a tica mdica est delimitada no seu mbito pelo que
diz respeito vida, atravs de juzos sobre as implicaes e os limites morais
(em contexto mdico) para os actos humanos e as aplicaes dos novos
conhecimentos e tecnologias que a cincia vem proporcionando. Neste
aspecto, a tica mdica um processo nunca acabado que se deve
desenvolver a par e passo com o desenvolvimento da cincia, para que este
desenvolvimento passe a fazer parte da vida das pessoas, sem as agredir.
O compartimento da tica mdica relativa gentica inclui as condies
provocadas por alteraes de um ou mais genes ou do nmero ou da
estrutura dos cromossomas que conduzem expresso de sinais e sintomas
de doena no seu todo ou em parte. As alteraes genticas podem ser
herdadas (constitucionais, ou seja presentes em todas as clulas do
organismo) ou adquiridas (presentes apenas em algumas clulas do
organismo, por terem ocorrido aps a formao do ovo ou zigoto).
431
2. PRINCPIOS TICOS
Os problemas ticos so resolvidos tendo em considerao os princpios
ticos, mas tambm os standards da profisso, as expectativas da sociedade,
os desejos individuais, os benefcios esperados, as diversas opes abertas, a
disponibilidade de recursos, os valores do doente ou consulente e o contexto
das relaes. A tica serve a tomada de decises e as melhores escolhas.
No campo especfico da tica biomdica, trata-se de defender a
autonomia e a liberdade de cada pessoa, ela que um valor intrnseco, no
instrumental, tendo em considerao o respeito pela natureza pessoal das
decises subsequentes ao conhecimento de um resultado, pela autodeterminao individual e pela confidencialidade.
No tempo presente, os avanos dos conhecimentos da biologia, da
gentica e da medicina j permitem realizar e sobretudo antecipar
intervenes que podem atentar contra eventuais equilbrios atingidos pela
Natureza viva. Entre as questes que se levantam encontram-se as que
questionam sobre quais as mudanas que, operadas sobre esta Natureza,
se podem considerar ainda dentro dos valores da moralidade e da tica.
Entre os aspectos essenciais para resolver dilemas em Medicina,
encontram-se os princpios ticos bsicos que sustentam a dignidade da
pessoa: autonomia e vulnerabilidade, beneficncia, no-maleficncia, justia
e confidencialidade.
2.1. AUTONOMIA E VULNERABILIDADE
432
O exerccio da autonomia implica esclarecimento adequado e completo

do consulente ou doente, baseado na verdade e na fidelidade em referncia
ao estado da arte. Diz respeito liberdade de decidir, como um direito do
indivduo, sem qualquer tipo de interferncia ou coaco, seja de quem for.
Pressupe que as decises do indivduo no colidem com a vida e com o
respeito que a esta devido, nem com as finalidades da Medicina.
No mbito da autonomia desenvolve-se o dilema do direito a saber/no
saber os resultados de testes genticos realizados pelo indivduo. O direito a
no saber pode ser contrariado, se os resultados originarem um dever moral
em relao a terceiros. Assim, se houver familiares com risco acrescido para
uma doena e o seu tratamento ou preveno depender da utilizao do

resultado de um teste realizado em indivduo que tenha decidido no querer
saber, este resultado deve ser usado para orientar o acompanhamento dos
indivduos em risco, ainda que as intervenes desenvolvidas nos seus
familiares revelem o seu estatuto gentico. Idntico raciocnio se poder
aplicar aos casos em que um indivduo conhecedor do resultado de um teste
gentico que tenha realizado, no queira que o seu estatuto seja conhecido,
ainda que essa posio prejudique terceiros.
A autonomia pessoal deve ser encarada olhando o indivduo inserido em
famlias e na sociedade, pelo que o interesse do outro deve ser ponderado
quando este puder beneficiar, muito significativamente, da informao
recolhida num dos seus membros. At ao limite do possvel, deve ser evitado
o prejuzo de quem acabou por contribuir com os resultados do seu estudo
para o conhecimento de alteraes genticas numa famlia (no-maleficncia).
Contudo, e indo mais alm, quando o conhecimento da gentica vier a
possibilitar ilaes mais profundas e mais seguras sobre a associao entre
determinadas susceptibilidades e o estatuto multignico individual, previsvel
que o respeito pela autonomia venha a ser ainda mais mitigado, em particular
quando o uso dos dados individuais se reflectir no bem comum dos cidados
(v.g., em pilotos de avio ou de outros transportes pblicos vs. susceptibilidade para doenas agudas, em agentes de segurana vs. predisposio
para o uso descontrolado da fora).
O princpio da autonomia , frequentemente, sobrevalorizado e invocado
de forma desadequada. Como exemplo, refira-se a deciso de uma me que
interrompe uma gravidez face a um teste predizente indicador de elevada
probabilidade de o filho vir a ter uma doena grave em adulto. Se a
autonomia deve ser modelada no respeito pelo outro, a deciso da me
deve ponderar os interesses do outro que o seu filho e no decidir apenas
em funo de si.
Em sentido contrrio, no ser infrequente caracterizar como
irresponsvel a deciso de um casal que, sendo conhecedor do resultado de
um teste gentico, decide implantar um embrio ou no interromper uma
gravidez, estando presente uma anomalia gentica patognica grave in utero,
no perodo ps-natal ou mesmo de expresso tardia. Ser esta deciso
moralmente errada? Mesmo que o seja para alguns, no o ser para todos.
No parece, contudo, que o conhecimento dado por um teste predizente
433
transforme, em irresponsvel, uma deciso que pondere e respeite o valor

da vida!
Recentemente, foi considerado relevante para a reflexo tica, o princpio
do respeito pela vulnerabilidade. Este princpio aplica-se a pessoas com
reconhecida incapacidade para decidir de forma autnoma, como ocorre com
crianas, com portadores de atraso mental ou com doentes em coma. Nestes
casos, havendo limites ao princpio da autonomia, prevalece o princpio da
beneficncia, presumindo-se na deciso tomada por terceiros que a pessoa
em causa decidiria em funo dos critrios do bem comum.
O princpio da autonomia tambm valido para o mdico, tambm ele
pessoa, cujos juzos, atitudes e comportamentos sero igualmente ditados em
funo de valores prprios.
2.2. BENEFICNCIA
Por este princpio, as intervenes mdicas devem contribuir para o bem
estar e a dignidade pessoal, elegendo os actos entendidos como os melhores
para o interesse do doente ou consulente. Contudo, o referido interesse no
depende, em exclusivo, dos actos do mdico, mas tambm dos valores
prprios pelos quais se rege.
No caso particular dos testes genticos, a sua realizao apenas deve ter
lugar se for possvel antecipar um benefcio para o indivduo em causa.
Os resultados de testes genticos apenas devem ser confiados a mdicos
com experincia na sua interpretao e no aconselhamento que deles decorra.
2.3. NO-MALEFICNCIA
434
A no-maleficncia retoma o princpio de Hipcrates primum non nocere.

Tal significa que a interveno mdica no d origem a dano no doente, de
forma intencional ou por negligncia. Nos cuidados a ter para cumprir este
princpio, inclui-se tambm o consentimento informado, no que respeita
garantia dos direitos individuais de no divulgao dos resultados, do direito
a no saber e explicao dos procedimentos, dos benefcios e dos eventuais
malefcios pessoais.
2.4. JUSTIA
Considerando a sade como um bem bsico, todos os cidados devem
estar no mesmo plano de igualdade, em termos de acesso aos benefcios
proporcionados pelo sistema de sade, para que se espelhe o princpio da
justia. Num Estado Social, a justia implica discriminao positiva, com
atribuio de custos de forma proporcional ao rendimento e no aos gastos
pessoais com as necessidades em cuidados de sade.
Noutra dimenso mais ampla, a justia implicar que se combatam as
assimetrias no acesso aos bens da sade j disponveis, que se verifiquem
dentro de um mesmo pas ou entre pases em estdios de desenvolvimento
diversos.
O pensamento aristotlico ajudou a fundamentar o princpio da justia
ao defender que iguais devem ser tratados de forma igual e desiguais de
forma desigual.
2.5. CONFIDENCIALIDADE
A confidencialidade sustenta a autonomia, a beneficncia e a no-maleficncia.
Quando a confidencialidade dos testes genticos no mantida, podem
ocorrer problemas graves, como sejam o conhecimento da falsa paternidade
de um filho do casal, at a desconhecida, o conhecimento de um gentipo
associado a risco gentico elevado para determinada doena pelo outro
membro do casal ou por familiares contra a vontade expressa do portador,
ou a divulgao e conhecimento de gentipos de susceptibilidade para
doenas do adulto jovem por empregadores ou seguradoras.
Na opinio de alguns autores, o dever moral de avisar familiares de
portadores de mutaes associadas a doenas graves, nomeadamente no
mbito da oncologia, e que da podem tirar benefcio, mediante diagnstico
precoce ou preveno, prevalece sobre a confidencialidade, com base no
paternalismo justificado. Algumas vantagens deste conhecimento podem
passar, por exemplo, pelo tratamento e preveno de doenas, pelo
435
planeamento das opes reprodutivas tendentes a evitar a transmisso de

alelos deletrios ou pela escolha da ocupao profissional, de modo a evitar
as consequncias desfavorveis da exposio a determinado poluente
ambiental causador de doena na presena de um gentipo de
susceptibilidade. Contudo, a divulgao dos resultados pode trazer algumas
desvantagens para o indivduo, como sejam a dificuldade de emprego ou a
perda do emprego, a no aceitao de propostas de seguros ou o aumento
do montante dos prmios pelas seguradoras, perturbaes nas relaes
familiares, acasalamentos no ao acaso, angstia a nvel psicolgico e na
relao social.
A confidencialidade tambm pode acarretar penalizaes para a
sociedade. Assim, indivduos que se saibam portadores de mutaes de
susceptibilidade para doenas graves ou mortais, podero contratar, junto de
companhias de seguros, elevadas indemnizaes, a receber pelo prprio ou
por familiares, mediante o pagamento de prmios calculados para a
esperana mdia de vida da populao a que pertence e no para condies
particulares. As penalizaes decorrentes da falta de honestidade de uns
poucos, poder-se-o traduzir em aumento dos prmios a pagar pelos
contratantes em geral para cobertura do excesso de perdas das companhias
de seguros, sem vantagens adicionais, ou na neutralizao da
confidencialidade, pelo menos acima de determinados escales de
indemnizao.
A utilizao de DNA de forma annima, para investigao, no parece
ofender a condidencialidade e no carecer, por isso, de autorizao.
Contudo, quando estes estudos forem feitos em grupos populacionais bem
delimitados e com um nmero reduzido de membros, e caso haja resultados
que se traduzam na presena de formas allicas deletrias, podem surgir
436
sentimentos de excluso em relao ao grupo populacional em causa, pela

parte das populaes vizinhas, bem como reduo da auto-estima nos seus
membros. E ainda que em regime de anonimato, se as indicaes obtidas
demonstrarem que as populaes estudadas podem beneficiar da aplicao
dos conhecimentos cientficos resultantes da investigao, devero ser
equacionadas as melhores formas de fazer incidir os seus benefcios sobre
os membros da populao em causa.
3. A VIDA HUMANA, DO EMBRIO AO SER ADULTO

Uma vida humana um continuum com origem no momento da
fecundao. No ovo, resume-se todo o potencial da herana gentica de cada
ser humano, de forma irrepetvel. A identidade gentica, em relao ao DNA
nuclear do ovo, vai-se manter ao longo do desenvolvimento e durante a vida
de cada indivduo, para todas as clulas nucleadas de um ser humano adulto.
Um embrio humano poder no ser considerado pessoa, mas ningum
pode negar que rene em si toda a potencialidade para vir a ser pessoa.
Incontestavelmente, desde os seus primrdios como ovo, que uma forma
de vida, que vida humana e nada mais, e que, globalmente, a informao
codificada no DNA nica. Em sequncia, nenhuma informao gentica lhe
ser acrescentada durante a ontognese. So excepes ao que se acaba de
afirmar:
os linfcitos B maduros devido recombinao somtica;
os gmetas devido reduo haplide do seu complemento cromossmico;
as clulas do organismo em que ocorram mutaes.
Ao longo de fases sucessivas, o embrio evolui ganhando em
complexidades de que a vontade e a conscincia humanas iro ser expresso
superior e fundamento da dignidade do homem! Por tudo isto, o embrio
humano um fim em si e tem uma dignidade intrnseca desde a sua
concepo, que torna inaceitvel a sua instrumentalizao como se de um
objecto se tratasse.
O embrio humano, sendo uma nova vida humana, no propriedade
de ningum, e neste ningum incluem-se os pais. Aos pais e sociedade
compete, antes, garantir a sua proteco, concedendo todos os meios que
a cincia pode disponibilizar para garantir a sua sobrevivncia e desenvolvimento. O conhecimento e as tecnologias a que a humanidade tem acesso
actualmente devem ser usadas para defender e incrementar a dignidade
humana e no para atentar contra essa dignidade.
Noutra dimenso, a enorme diversidade que concedida pelos
mecanismos subjacentes criao de cada embrio aparece, aos olhos do
conhecimento actual, como insubstituvel para a preservao e a evoluo
adaptativa da espcie humana e permite levantar questes relevantes no que
respeita clonagem somtica para fins reprodutivos.
437
4. QUESTES ASSOCIADAS CLONAGEM SOMTICA

Justificar-se- a clonagem somtica humana para fins reprodutivos?
A resposta negativa parece bvia:
por razes ticas, destacando-se o facto de um embrio clonado no
reproduzir as potencialidades que decorrem da diversidade presente
nos embries obtidos por fecundao, pelo que negada a essncia
e o potencial da criao, inerentes a uma nova vida humana, na sua
unicidade; ser, por isso, reproduo, mas no criao;
por razes cientficas, pela ateno a dar precauo como princpio
a respeitar face falta de estudos prvios em animais, capazes de
conceder segurana ao mtodo, ao registo de problemas de sade nos
animais em que foi utilizada esta metodologia, ao atentado
diversidade que o processo representa e ao elevado nvel de ignorncia
actual, nomeadamente no que respeita s formas de ultrapassar as
consequncias do encurtamento dos telmeros e do imprinting;
por razes prticas, tendo em considerao a baixssima rentabilidade
dos mtodos descritos at agora;
por razes legais, uma vez que o Protocolo Adicional Conveno
sobre Direitos Humanos e Biomedicina,(1) j ratificado por Portugal,
com efeitos a partir do dia 1 de Dezembro de 2001, probe a clonagem
humana para fins reprodutivos, por considerar a criao deliberada de
seres humanos geneticamente idnticos uma instrumentalizao de
seres humanos contrria dignidade humana e um mau uso da
biologia e da medicina.
438
Ainda assim, poder ser avanado um registo utilitarista e a invocao

da necessidade mdica da clonagem reprodutiva para prevenir doenas
hereditrias. Contudo, trata-se de um argumento que anulado pelo recurso
fecundao in vitro, para obteno de embries, seguida de diagnstico
gentico pr-implantatrio, se no forem consideradas as questes ticas
resultantes da eliminao de embries humanos. A defesa da clonagem para
(1) O Protocolo Adicional Conveno sobre Direito Humanos e Biomedicina foi aprovado pelo
Conselho da Europa em Janeiro de 1998. No artigo 1, estabelece que Any intervention seeking to
create a human being genetically identical to another human being, whether living or dead, is
prohibited, e que For the purpose of this article, the term human being genetically identical to
another human being means sharing with another the same nuclear gene set.
combater formas de esterilidade sem outra soluo alternativa, choca com

as razes antes aduzidas contra a clonagem reprodutiva.
Quanto clonagem somtica para fins teraputicos, encontra-se num
estdio experimental muito precoce e as aplicaes enunciadas correspondem
a hipteses, dentro do que racionalmente expectvel! Mantm-se, por isso,
as objeces de natureza cientfica e prtica. Contudo, no campo tico, existe
a possibilidade de no ser atribudo o mesmo nvel de dignidade ao embrio
obtido por clonagem somtica, em comparao com a dignidade intrnseca
do potencial nico de vida humana do embrio resultante da fecundao.
Ponderando este aspecto e a eventual necessidade de recorrer clonagem
teraputica para fins mdicos, como nico recurso para tratar casos extremos
de doena grave numa pessoa, poder-se- chegar a um ponto em que a
ponderao dos valores em causa sustente a sua realizao.
Naturalmente que um embrio obtido por clonagem somtica para fins
teraputicos no diverge biologicamente de um embrio que seja clonado,
pelo mesmo processo, para fins reprodutivos. O abuso parece estar mais do
lado de quem utilize este tipo de metodologia para fins reprodutivos,
ignorando o atentado que faz ao processo de criao de vida humana, pelas
limitaes deste tipo de embrio, e as consequncias graves por que se teme,
actualmente, para o ser humano da resultante. Em caso de abuso, um
recurso mdico pensado para tratar o sofrimento poderia vir a ser
transformado em fonte de sofrimento para o ser humano que, eventualmente, viesse a desenvolver-se por este processo. O princpio da precauo
deve, por isso, imperar.
Nesta, como noutras reas do conhecimento, no ser o medo de alguns,
em relao ao uso indevido do conhecimento, que evitar o progresso
cientfico e tcnico, mas ser uma conscincia tica bem formada de todos
os cidados que evitar desmandos e usos indevidos desse mesmo progresso!
H pois lugar para a educao especificamente dirigida para a compreenso
da cincia e para o seu potencial e finalidade, no que respeita promoo
do bem-estar humano que pode conceder e ao mal que, por abuso ou
inconscincia, pode provocar.
A argumentao anterior poder estar no fio da navalha! Poder mesmo
ser perigosa, quando atribui s finalidades e mobilizao ou no dos meios
para as atingir (implantao ou no do embrio clonado no tero materno)
a razo para o ganho de dignidade desta forma de vida humana, ou para a
439
ausncia dessa dignidade e a sua transformao ipso facto em recurso

teraputico! Talvez que, nesta fundamentao, haja inclusive algum nvel de
contaminao decorrente do utilitarismo positivista!
Como contraponto, regresse-se ao embrio humano criado por
fecundao. Este embrio facilmente compreendido como vida humana
nica e com dignidade intrnseca, determinada por uma s finalidade natural e servida por um s caminho (as clulas gamticas haplides so
produzidas exclusivamente para a criao de um novo ser humano). Na
clonagem somtica, a gnese do embrio determinada por mtodos contra natura, a finalidade tem determinao exgena ao embrio (a informao
diplide do DNA do ncleo de uma clula somtica nunca seria o DNA de
um embrio sem uma vontade extrnseca e tem limitaes quando usada para
esse fim) e, geneticamente, no se verifica unicidade no que informao
do DNA nuclear diz respeito. Contudo, se as finalidades de uma clonagem
somtica forem abusivamente alteradas no sentido da reproduo, e embora
tal determinao exgena no altere as previsveis limitaes biolgicas do
embrio assim clonado, as finalidades passam a ser sobreponveis s do
embrio criado por fecundao. No ganhando, por isso, qualidades idnticas
s deste, ganhar idntica dignidade, atravs das finalidades.
Apesar de todo o envolvimento emocional e de interesses materiais
actualmente associados clonagem somtica, talvez que, num futuro
prximo, venha a diluir-se a sensao de necessidade prtica de a desenvolver,
mesmo para fins teraputicos. Na verdade, nos organismos adultos existem
clulas multipotentes (clulas estaminais, no diferenciadas), a partir das quais
poder vir a ser possvel obter clulas para fins teraputicos, por diferenciao
induzida. Por outro lado, o sangue do cordo umbilical tambm possui clulas
indiferenciadas que podero vir, igualmente, a constituir-se como alternativa
clonagem para fins teraputicos.
440
5. A DESCOBERTA DO GENOMA HUMANO E O EUGENISMO

A designao genoma humano muito mais do que o genoma de
um nico ser humano, dizendo respeito espcie! H grupos populacionais
em que algumas formas alternativas dos genes so raras ou podem mesmo
faltar, embora sejam frequentes noutras populaes, para j no falar no

nmero elevadssimo de diferentes formas que muitos dos genes humanos
podem apresentar em diferentes indivduos e populaes. Por isso, o
cumprimento do Programa do Genoma Humano inclui a sequenciao de
um pool de DNA obtido de 30 seres humanos, de diferentes etnias.
A descoberta do genoma humano consiste na sequenciao de todos
os pares de bases constituintes do genoma. Sequenciar significa determinar
a ordem pela qual as bases se organizam nos cromossomas. Se fizermos
corresponder cada base a uma letra, esta sequncia ocupar cerca de mil
livros, com mil pginas cada um e trs mil letras por pgina.
Para muitos cientistas da actualidade, a sequenciao do genoma
humano poder ser o precursor de um inevitvel retorno eugenia porque
proporcionar, em larga escala, um conhecimento cientfico mais rigoroso do
genoma e as metodologias prticas necessrias para o desenvolvimento de
estratgias da sade pblica. Ser a eugenia a face oculta da Gentica,
tendo por base o conhecimento do genoma humano e o diagnstico
gentico?
seguramente preocupante que surja algum com poder para decidir
quais as caractersticas que so inerentes a uma sociedade e que devem ser
preservadas e melhoradas e quais as que devem ser eliminadas. Contudo, o
conhecimento da Gentica tambm poder contribuir para perceber que,
afinal, todos os seres humanos so portadores de uma ou outra anomalia
gentica e que, por isso, no h lugar para tentaes eugnicas. Poder ainda
fazer perceber como a diversidade o melhor recurso para a sobrevivncia
das espcies..
Na verdade, as vises eugnicas e as tentativas de normalizao dos
seres, por eugenia negativa, so um atentado diversidade. A procura do
indivduo ideal, do ser perfeito, do filho que se deseja ter, limitar, partida,
a esperana de vida dos embries e dos fetos que, por deciso em que no
podem tomar parte, so eliminados. Ser legtimo eliminar um embrio ou
feto, por se concluir que poder vir a ter uma doena grave numa fase
relativamente precoce da sua vida adulta (v.g., 30 ou 40 anos)? No esta,
actualmente, a esperana de vida da generalidade dos recm-nascidos em
frica? No foi com menos de 40 anos que morreram Schubert e Mozart?
441
A grande maioria das caractersticas observveis em cada pessoa (o seu

fentipo) resulta do dilogo entre os cerca de 30.000 a 40.000 genes
herdados dos pais e o meio ambiente. A descoberta do genoma
humano, vista por muitos como a chave capaz de desvendar os segredos do
futuro de cada ser humano, inscrito nas suas primeiras clulas, afigura-se-nos que vir a ser um dicionrio dos genes. Contudo, possuir um dicionrio no escrever uma obra-prima!
O homem, cada pessoa, essa obra prima que, nas suas dimenses
biolgicas, psicolgicas, relacionais, culturais e espirituais, existe como uma
realidade, bem mais complexa do que o produto da expresso linear dos seus
genes!
6. A QUESTO DA NORMALIDADE LUZ DA GENTICA
442
A definio de normalidade no deve assentar num qualquer modelo

de perfeio humana determinada por um padro ideal de genoma!
Manipular o genoma para o melhorar, em nome de um padro considerado
normal, esquecer uma regra de ouro: a sobrevivncia das espcies tem na
diversidade o seu melhor recurso. Na verdade, nem sempre um gene alterado
significa desvantagem e logo ameaa vital para o seu portador. Assim, todas
as aces dirigidas para reduzir o fundo gnico da espcie humana, seja
atravs de normalizao por intervenes eugnicas, seja por clonagem ou
por seleco de embries em funo de determinadas caractersticas, devem
ser consideradas como um atentado contra a humanidade e, por isso,
proscritas.
Nem sempre um gentipo considerado normal favorvel ao seu
portador. Considere-se, a este propsito, o que pode ocorrer com o processo
de eliminao de xenobiticos ambientais. Um indivduo portador da forma
normal de um gene que codifique uma enzima envolvida no metabolismo
de um carcinogneo (v.g., hidroxilase da debrisoquina) quando contacta com
a molcula, metaboliza-a e transforma-a numa molcula no carcinognica.
Contudo, se este mesmo indivduo contactar com uma molcula pr-carcinognica (como tal, no carcinognica), cujo metabolismo seja mediado
pela mesma enzima, tem lugar a formao de molculas carcinognicas com
consequente aumento de risco para o cancro. Em contraponto, para um

indivduo deficiente para aquela enzima, por mutao do respectivo gene,
a exposio ao mesmo pr-carcinogneo no representa aumento de risco
para o cancro, devido a incapacidade para proceder ao seu metabolismo.
Neste caso, uma deficincia gentica equivale a vantagem biolgica.
Este exemplo demonstra como a definio de normalidade deve considerar
o par genoma/ambiente e no apenas a presena ou ausncia da forma
normal dos genes. O domnio desta rea do conhecimento, poder vir a
influenciar no futuro, entre outras reas, a escolha da ocupao profissional,
mas sobretudo a modificar o pensamento sobre o determinismo gentico e
a viso reducionista do homem aos seus genes.
Pensar-se que o conhecimento do genoma permite saber o futuro de um
indivduo, no passa de um desejo que, no momento presente, apenas pode
ser bem caracterizado num nmero reduzido de situaes. Por isso, a partir
do conhecimento actual, parece imprudente regular conflitos de interesses
entre os pais e o embrio ou o feto com o recurso eliminao destes,
mesmo quando as doenas so de expresso tardia, tendo padres de
normalidade do genoma humano, como referncia.
O eugenismo um atentado diversidade. Fomentar a riqueza do fundo
gnico atravs da diversidade, sem seleco dos seus portadores, ser a
melhor defesa contra as incertezas da presso de seleco. As foras de
seleco podem-se alterar a todo o momento, transformando em
desvantagem, ou mesmo em factor letal, a presena de formas de genes at
agora consideradas como as mais adequadas. Nessa altura, poderiam ser as
formas allicas consideradas agora deficientes a concederem vantagem e
a permitirem a sobrevivncia da Humanidade.
7. A QUESTO DAS DOENAS GRAVES E DE EXPRESSO TARDIA LUZ DA GENTICA

Face ao exposto, surgem ainda perguntas claras e incmodas: o que
uma doena grave luz dos resultados do diagnstico citogentico ou
molecular, seja pr-implantatrio ou pr-natal? Em que bases genticas
podero ser definidos os limiares da normalidade para seleco dos
embries ou fetos a eliminar? Ser legtimo fazer uma lista de doenas graves
443
e estigmatizantes, inicialmente indicativa e mais tarde, eventualmente

compulsiva, no que respeita a intervenes de normalizao? O embrio,
o feto ou a criana com uma alterao gentica que origine uma doena
grave em adulto j um doente? Ser moralmente aceitvel eliminar
embries ou fetos com base numa probabilidade de morte mais precoce?
Dentro de 30 a 40 anos, no sero as potencialidades teraputicas
decorrentes dos avanos cientficos entretanto conseguidos suficientes para
curarem as doenas que hoje so incurveis nos adultos e que levam
eliminao dos embries portadores da respectiva alterao gentica?
O portador de um gentipo anormal ser doente, apenas e s quando
apresentar sinais e sintomas resultantes da expresso desse gentipo.
Por outro lado, dever-se- ter presente que, para muitos genes, h
penetrncia incompleta e expressividade varivel das suas formas mutadas,
pelo que uma percentagem significativa dos portadores poder nunca vir a
ter sinais e sintomas de doena, embora uma forma mutada do gene esteja
presente e possa ser transmitida descendncia.
O que somos e como somos vai muito para alm de um pretenso
determinismo gentico. Por maioria de razo, quando o determinismo
para a sade ou para a doena pode ter muito a ver com o ambiente,
como se demonstrou para a FCU, ou quando um gentipo considerado
deficiente pode ser protector em determinadas condies ambientais, como
tambm ficou esclarecido!
Est tambm em causa uma viso reducionista do homem, no
pensamento comum contemporneo, alimentada pela ignorncia arrogante
de muitos que olham o homem como fruto da aco nica dos genes imersos
nos cerca de 2 metros de DNA de cada clula humana!
444
8. QUESTES ASSOCIADAS TERAPIA GNICA

A terapia gnica de clulas somticas actualmente aceite, sem
contestao tica. O mesmo no se passa com a terapia gnica germinal que,
embora ainda hipottica, vem sendo apontada como moralmente no
aceitvel. Ser esta razo moral vlida, face possibilidade de este tipo de
terapia poder conduzir eliminao de centenas de doenas genticas graves
em descendentes de portadores de mutaes patognicas (embora no

permita eliminar a ocorrncia de doena por mutaes de novo)? Ou no
ter a Medicina, pelo contrrio, a obrigao moral de investigar e de
aprofundar os conhecimentos que tornem esta abordagem segura e eficaz,
de modo a cumprir uma das suas misses mais nobres?
Naturalmente que a obrigao moral dos mdicos consiste em
disponibilizarem os melhores recursos que o progresso cientfico e o estado
da arte proporcionem para a preveno e a cura das doenas ou para
corrigir as alteraes genticas ou circunscrever os seus efeitos.
As resistncias ticas so desejveis, enquanto persistirem os problemas
tcnicos e cientficos actuais. As intervenes teraputicas a nvel das clulas
germinais levantam questes ticas srias, como sejam os possveis limites
morais quando se mexe (indevidamente) com a natureza humana, a dimenso
da responsabilidade das geraes actuais para com as geraes futuras por
uma eventual alterao do genoma com consequncias no previsveis e
deletrias (solidariedade com o futuro!), a utilizao de embries humanos
precoces para investigao gentica, os relevantes riscos clnicos e o perigo
social. No estado actual do conhecimento e por precauo (uma vez mais),
no parece moralmente aceitvel aplicar a terapia gnica em clulas germinais
ou embrionrias precoces.
No entanto, quando estiverem ultrapassados os problemas que nos dias
de hoje inibem o recurso terapia gnica germinal, continuar a fazer sentido
no colocar este recurso ao servio do homem, de forma a corrigir doenas
hereditrias graves?
A terapia gnica embrionria poder vir a permitir a correco de um
genoma e a viabilizao da existncia de um indivduo que, na ausncia de
teraputica, no atingiria as fases mais avanadas do desenvolvimento
embrionrio ou fetal e no chegaria a nascer. Ser a existncia provocada
deste ser humano melhor do que a sua no existncia, se o embrio com a
anomalia gentica fosse entregue s foras de seleco natural? Para a
espcie parece vir a ser vlida. A nvel individual, a interveno configura um
acto mdico precoce de sustentao de uma vida embrionria, j existente,
como acontece com as intervenes mdicas no perodo fetal e ps-natal,
sempre que uma interveno mdica cura uma doena ou retarda a morte.
Os reflexos para a descendncia apenas acrescentam valor interveno.
445
9. QUESTES ASSOCIADAS AOS TESTES GENTICOS

Os testes genticos so recursos analticos destinados a estudar o material gentico, envolvendo clulas somticas ou germinais, que devem ser
realizados no interesse dos doentes ou consulentes, seja este interesse de
natureza clnica ou para investigao. As finalidades dos testes genticos
podem ser o diagnstico, o rastreio ou a monitorizao. Os testes genticos
para diagnstico destinam-se a identificar ou confirmar uma doena.
O rastreio tem como finalidade a deteco, em indivduos saudveis, de
gentipos associados a susceptibilidade para determinadas doenas
monognicas ou multifactoriais relacionadas com exposio ambiental.
A monitorizao gentica, destina-se a acompanhar periodicamente indivduos
expostos a determinadas condies ambientais, no que respeita aquisio
de mutaes genticas especficas.
Os testes genticos devem ter reproducibilidade, elevada especificidade
e sensibilidade e valor preditivo.
Habitualmente, um teste gentico dirige-se para uma condio em particular. No entanto, h testes genticos que originam informao aplicvel a
rgos distintos, como pode ocorrer com a caracterizao do gene APOE, em
que possvel deduzir consequncias em termos de risco para doena
coronria cardaca e para doena de Alzheimer. Nestes casos, o consulente
deve ser previamente alertado para esta dimenso pleiotrpica dos resultados
do teste, durante a consulta de aconselhamento gentico.
Os testes genticos podem ter como objectivo o diagnstico clnico, o
diagnstico de heterozigotia, o diagnstico pr-sintomtico ou predizente, o
DPN ou o DPI.
446
9.1. TESTES GENTICOS PR-SINTOMTICOS OU PREDIZENTES

Designam-se por testes genticos pr-sintomticos ou predizentes, os
estudos genticos feitos em indivduos sem manifestaes de doena (sem
sinais, nem sintomas). Permitem identificar os portadores de uma forma
mutada de um gene que seja, com grande probabilidade, patognica em
idade posterior ao momento de realizao do teste, ou para os descendentes.

Devem ser realizados nos indivduos afectados e nos membros da famlia que,
atravs do heredograma, sejam identificados como eventuais portadores da
mutao patognica, em particular nos elementos da famlia em que se
suspeite de um risco inicial de 50%.
Apenas tem sentido a realizao de testes pr-sintomticos nos casos em
que a identificao de uma mutao patognica possa ser acompanhada de
propostas que, objectivamente, se traduzam em vantagem para o portador
da mutao, por eliminao ou reduo do risco, seja por tratamento mdico
ou cirrgico, seja por rastreio para diagnstico precoce ou ainda por aces
preventivas.
A reflexo levantada sobre as consequncias da realizao dos testes
genticos predizentes e os cuidados postos na sua realizao, tem vindo a
contracenar com a liberalidade e a falta de orientaes observadas com a
comunicao dos resultados de exames fsicos, sendo que, por vezes, estes
tambm tm um valor predizente igualmente elevado. Quando est em causa
o acautelar de consequncias negativas decorrentes da comunicao ao
consulente de informao predizente de doena, no parece sensato tratar
de modo diferente a informao que advm de testes genticos da que
advm do exame fsico.
A realizao dos testes predizentes deve ter lugar no mbito de uma
consulta de Gentica Mdica e ser precedida de aconselhamento gentico e
da assinatura de consentimento informado pelo doente ou consulente, ou
pelos pais ou representantes legais no caso de menores ou de indivduos sem
competncia para o fazerem, depois de devidamente informados e
esclarecidos. O pessoal mdico deve ser experimentado no que respeita s
metodologias clnicas e laboratoriais aplicadas, interpretao dos resultados
de gentica molecular e forma de se relacionar com os consulentes, em
particular quando estes so confrontados com resultados analticos que os
podem colocar perante um elevado risco para desenvolverem doena grave,
muitas vezes sendo e sentindo-se saudveis. Por isso, a comunicao dos
resultados dever igualmente ocorrer durante nova consulta de Gentica
Mdica. Sempre que as circunstncias clnicas o justifiquem, deve ser
disponibilizado apoio psico-social.
Em indivduos adultos, a realizao de testes predizentes tem
frequentemente a ver com decises como o casamento e a gestao de filhos,
447
a assuno de responsabilidades profissionais ou de riscos financeiros, a

aceitao ou rejeio de intervenes profilticas de natureza cirrgica, a
mudana de estilos de vida que procurem contrariar o risco gentico, a
incluso em projectos de investigao destinados a avaliar a eficcia de
rastreios ou de ensaios de quimiopreveno, a necessidade de viver com
certezas, o combate ansiedade originada pela experincia vivida com casos
familiares e a distino entre familiares portadores e no-portadores da
mutao patognica presente na famlia.
9.1.1. BENEFCIOS E MALEFCIOS DOS TESTES GENTICOS PREDIZENTES
448
Entre os potenciais benefcios decorrentes dos testes genticos

predizentes indicam-se a libertao da necessidade de testes peridicos,
quando indicados, para os no portadores da mutao, a aceitao, de forma
esclarecida, dos procedimentos de rastreio, de tratamento, de preveno
mdica ou cirrgica, ou de investigao, a reduo da ansiedade, uma melhor
adaptao aos acontecimentos futuros, no caso dos portadores, e uma
escolha de percursos de vida mais realistas.
Como malefcios referem-se as perturbaes psicolgicas, o stress
familiar e a discriminao em bases genticas.
As perturbaes psicolgicas podem surgir face a um teste que indique
a presena de uma forma patognica de um gene, levando o indivduo a ter
dificuldade em lidar com a certeza de ser portador do gene de susceptibilidade. A ansiedade, o medo, os sentimentos de culpa (por exemplo em
relao transmisso da susceptibilidade a um descendente) e a depresso
so manifestaes frequentes, sem esquecer o risco de suicdio.
As manifestaes podem ser potenciadas pela dificuldade do mdico em
prever, com a necessria preciso, nas condies sindromticas presentes
numa dada famlia, o risco para os diferentes rgos atingidos, a idade de
aparecimento e a agressividade da doena.
De forma estranha, e ao contrrio do que seria de esperar, um teste
negativo para uma mutao associada a uma doena grave, pode induzir a
sndroma da culpa do sobrevivente.
As repercusses familiares podem-se traduzir ao nvel relacional, da
constituio de casais e das escolhas reprodutivas. Quando so detectadas
mutaes em filhos, os pais podem desenvolver sentimentos de culpa, ao
ponto de afectarem gravemente a sua existncia. Por outro lado, os pais

podem passar a olhar os filhos como doentes, ainda que na ausncia de
quaisquer sinais ou sintomas que apenas em adulto tero probabilidade de
ocorrer nos casos de expresso tardia, bem como excesso de proteco, eventual afastamento, ou atitudes que conduzam a diminuio da auto-estima
do filho.
Nos casos de expresso tardia, pode ocorrer a excluso social de toda
uma famlia.
A discriminao gentica pode ocorrer quando a informao gentica
usada contra indivduos, se for obrigado a declar-la ou se, eventualmente, no
for mantida confidencial. O uso abusivo poder ocorrer por parte de
companhias de seguros, de empregadores pela seleco na admisso, no
promoo ou despedimento, ou de entidades bancrias negando emprstimos.
Pelos riscos de discriminao ou de estigmatizao, a aplicao de testes genticos deve ser cuidadosamente ponderada no que respeita aos
eventuais falsos positivos quando se recorre a mtodos de elevada
sensibilidade. Nesta perspectiva, seria menos problemtico o recurso a testes com especificidade absoluta, para evitar falsos positivos, ainda que desse
modo, pudessem ocorrer falsos negativos.
A utilizao da informao gentica por parte dos estados poder
conduzir a discriminao dirigida contra grupos sociais ou tnicos (v.g., por
restrio imigrao, por reduo de direitos ou por aplicao de medidas
eugnicas). De uma forma ainda mais gravosa, poder-se- antever o seu uso
como fundamento de polticas de sade baseadas em novas formas de
eugenia.
No sentido oposto, a ausncia de disponibilidade dos testes e/ou das
condies para a sua execuo, em grande parte das sociedades humanas
actuais, pode ser encarada como discriminatria, ao negar a estes povos as
vantagens concedidas pela realizao dos testes genticos, acentuando
assimetrias no acesso aos bens concedidos pelos progressos da cincia.
9.2. TESTES GENTICOS EM CRIANAS

Nos casos em que a susceptibilidade gentica existe e a expresso
tardia, os testes predizentes no devem ser realizados antes dos 18 anos.
449
A excepo diz respeito aos casos em que a penetrncia se verifica na infncia

ou adolescncia e possvel uma interveno mdica para minorar, atrasar
ou impedir as consequncias clnicas. Se no se verificarem estes pressupostos
de excepo, os testes predizentes no devem ser aplicados em crianas.
Com limitaes diversas, est recomendada a realizao de testes
predizentes em crianas, nos casos em risco para a sndroma MEN2A (carcinoma medular da tiride, devido a mutaes do RET), para a FAP (mutaes
do gene APC), para o cancro gstrico difuso hereditrio e, eventualmente, para
a sndroma de Li-Fraumeni (mutaes do gene TP53). Contudo, no parece
vantajosa a realizao de testes predizentes em crianas em risco para
condies como a ataxiatelangiectasia ou a neurofibromatose tipo I, pelo facto
de as manifestaes clnicas serem precoces e raramente deixarem dvidas.
Por vezes, pode ser necessrio realizar testes genticos em crianas ou
menores de 18 anos, para esclarecimento de uma situao familiar. Nesses
casos, o resultado s deve ser comunicado ao indivduo testado quando
atingir a maioridade e se ele o desejar.
Face ao envolvimento frequente de factores hereditrios e de factores
ambientais na gnese de mltiplas doenas, previsvel a vantagem que
resulta da identificao de gentipos predisponentes, de forma a evitar que
o par deletrio gentipo/ambiente se conjugue. Nestes casos, tambm estar
indicado o estudo gentico em criana, sempre que haja evidncia de
exposio aos factores agressores do genoma, dado que a acumulao de
mutaes se verifica desde as idades mais jovens.
Entre os possveis malefcios dos testes genticos feitos em crianas,
incluem-se a anulao do princpio da autonomia, quando adulto, a subverso
da confidencialidade, a eventual discriminao em termos de educao, relaes
interpessoais, constituio de famlia, emprego e seguros, a perturbao da
auto-estima da criana e a perturbao da relao afectiva dos pais com a
450
criana seja no sentido do excesso de proteco seja no sentido da rejeio.
9.3. TESTES GENTICOS PR-NATAIS

Os testes genticos pr-natais apoiam o DPN entendido como o conjunto
de procedimentos realizados para determinar se um feto portador ou no
de uma anomalia congnita. No devem ser realizados apenas com o

objectivo de efectuar um diagnstico pr-sintomtico mais precoce, devendo
a sua utilizao ser reservada para condies que se associem a doena grave.
No aparente a vantagem de realizar DPN para mutaes de expresso
tardia, na ausncia de uma pr-determinao do casal para interromper uma
gravidez de risco para esta situao. Para alm dos juzos e das razes que
determinam ou inibem a interrupo de uma gravidez nestas condies,
acresce o facto de os pais ficarem de posse da informao respeitante ao
estatuto gentico do filho. Em particular, no caso de a mutao patognica
estar presente, aquele conhecimento poder afectar o equilbrio do processo
educacional e relacional entre os pais e o filho.
A questo major associada ao DPN reside no aborto provocado, devido
presena de eventuais anomalias fetais. No entanto, o diagnstico gentico
pr-natal tambm pode servir para desencadear intervenes teraputicas
fetais com respeito pela vida e pela integridade do feto e que busquem a
sua cura e o seu bem-estar.
9.4. TESTES GENTICOS PR-IMPLANTATRIOS

Os testes genticos pr-implantatrios no so considerados uma
interveno destrutiva do embrio, apesar da ligeira reduo da capacidade de
implantao que acarretam. No entanto, a destruio poder vir a ocorrer se
o casal, na sequncia de um resultado que indique a presena de mutao
considerada patognica, vier a decidir no autorizar a transferncia do embrio
para o tero da mulher. Desta forma, evitada uma provvel interrupo de
gravidez durante a fase fetal do desenvolvimento embrionrio, aps DPN.
Os casais que no se questionam em relao dignidade do embrio
antes da implantao, optam mais facilmente pelo DPI, em comparao com
o DPN. Entre as razes mais frequentemente apontadas para a procura de
DPI contam-se a objeco interrupo de uma gravidez por razes morais
ou religiosas, o risco associado condio de portador de uma doena
gentica hereditria em conjunto com a existncia de esterilidade a requerer
fecundao in vitro para conseguir uma gravidez e a experincia adquirida
com a realizao prvia de interrupo voluntria de gravidez e o desejo de
no repetir esta interveno.
451
452
Sob o ponto de vista tico, dever-se- atentar na essncia do diagnstico

gentico pr-implantatrio como mtodo de apoio a decises eugnicas,
mesmo quando usado para evitar doenas hereditrias graves. Nos casos
de mutaes patognicas ligadas ao cromossoma X, pode ser usado para
determinar o sexo e sustentar a eliminao de embries do sexo masculino
de modo a evitar o nascimento de indivduos afectados. Contudo, desta
forma, metade dos embries masculinos eliminados nem sequer so
portadores da mutao patognica. A sua utilizao para escolha do sexo ou
para utilizaes sem justificao mdica, por simples escolha dos pais, ser
ainda mais gravosa.
No infrequente o argumento de que a nica atitude mdica e
moralmente defensvel consiste na eliminao dos embries portadores de
defeitos genticos, para prevenir o nascimento de pessoas com anomalias
graves causadoras de dor e sofrimento que tornariam a sua existncia em
vidas que no so dignas de serem vividas (que no merecem ser vividas)!
Os dados antes expressos sobre a natureza do embrio e as ponderaes que
decorrem dos princpios ticos podero suportar a defesa de posies
contrrias a esta viso eugnica e atentatria do respeito devido vida
humana. Assim, se h anomalias que so incompatveis com o desenvolvimento e o parto a termo, ou que permitindo eventualmente o parto no
deixam dvidas sobre a impossibilidade de sobrevivncia para alm de um
curto perodo de vida ps-natal sujeita a limitaes gravssimas pelas
anomalias presentes (v.g., anencefalia, agenesia renal), outras h que, com
limitaes de grau diverso permitem uma sobrevivncia prolongada e com
vida de relao interpessoal (v.g., trissomia 21), para j no falar nas
alteraes genticas de expresso tardia, em que podero mediar dezenas
de anos entre o nascimento e a manifestao de doena associada mutao
presente no embrio. Ainda que as manifestaes ps-natais sejam graves e
conducentes a morte, o embrio, o recm-nascido, o jovem ou o adulto no
podem ser considerados doentes, por serem portadores de uma mutao
gentica. S-lo-o, apenas, quando se expressarem os sinais e os sintomas
da doena e no perdero, por isso, em dignidade. Ser ainda de ter presente
que a dignidade humana no pode ser considerada maior ou menor, em
funo da existncia ou no de anomalias genticas ou somticas.
Um outro argumento baseia-se no direito do casal sade reprodutiva
atravs do rastreio gentico em embries (ou fetos), com a consequente
eliminao dos que evidenciem uma mutao associada a doena gentica

ou em que haja a suspeita de estar presente uma mutao patognica.
No entanto, estando em causa um embrio e no a preveno da sua criao,
a liberdade para decidir se um embrio deve ou no ser implantado no tero
por razes genticas, nomeadamente para preveno de doenas de
expresso ps-natal, no parece ser uma questo de sade reprodutiva!
Em rigor, no se trata de cuidar da sade do embrio, mas de seleccionar
uns e de eliminar outros.
Com o peso que lhe dado pela considerao que merecem os direitos
humanos, argumentam outros que negar a um casal, por determinao legal ou por poltica de um pas, a deciso pessoal e a escolha reprodutiva no
que respeita interrupo de uma gravidez em bases genticas um
atentado contra os direitos humanos. Mas s-lo-, quando a escolha conduz
a interrupo de uma gravidez por uma anomalia gentica que permita vida
de relao ps-natal, ou quando se verifica expresso tardia, ainda que a
doena seja grave? No ser, pelo contrrio, um atentado aos direitos
humanos e contra a autonomia de um cidado em potncia com dezenas
de anos para viver nos casos de expresso tardia?
Em sntese, a ideia subjacente ao DPI , frequentemente, de utilitarismo
relativista desenvolvido em funo de pretensos direitos e interesses do
embrio (ou do feto, para o DPN), mas o que est em causa um servio a
prestar ao bem comum ou ao bem-estar privado dos pais. Por outro lado,
quando a preocupao diz respeito ao facto de a eliminao do embrio
ocorrer antes da nidao vs. aps a nidao, ou nas fases precoces vs. fases
tardias do desenvolvimento fetal, est em causa a construo de uma
graduao artificial do valor da vida consoante a fase do desenvolvimento
em que esta se encontre, ignorando a dignidade intrnseca do embrio ou
do feto. Esta viso poder levar, por extenso, a aplicar o mesmo raciocnio
para o perodo ps-natal, com a construo de uma escala relativista da valia
da vida e da sua dignidade para ser vivida, em funo do desvio da
normalidade e do grau sempre subjectivo do sofrimento que,
supostamente, a anomalia gentica ir provocar, da capacidade de relao,
da produtividade e da utilidade ou inutilidade de uma vida. No limite,
tal relativismo, mais cedo ou mais tarde, sustentar tambm a eutansia, de
forma a eliminar vidas que no sejam consideradas dignas de serem vividas
pelos padres objectivos do normal. Em sintonia com o raciocnio an-
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terior, aos que, por seu prprio juzo, julguem no cumprir os parmetros
de dignidade para viver, restar reconhecerem-se como um peso para a
sociedade, ou sentirem o prolongar da sua existncia como um crime
contra essa sociedade. Sero, desse modo, induzidos a perceber que o seu
ciclo de vida se esgotou, ainda que pudessem encontrar felicidade num raro
momento entre o seu sofrer, ou encontrassem no sofrimento a via para
discernir um sentido para a vida. A subjectividade da vida e da felicidade,
passaria a ter regras para poder ser vivida. E certamente que, quando o
prprio fosse incompetente para o fazer, seriam terceiros a decidir se esta
deveria ou no ser vivida, em nome dos poderes institudos e no entendimento do que seria pretensamente melhor para a pessoa.
454
CAPTULO XXII
GLOSSRIO
ABERRAO CROMOSSMICA: Qualquer anomalia do nmero ou da estrutura dos cromossomas,

visvel por meio de microscopia de luz.
ABERRAO CROMOSSMICA PRIMRIA: Alterao citogentica detectada repetidamente em todas
as clulas de um clone tumoral e pelo menos uma vez como a nica alterao citogentica
presente.
ABERRAO CROMOSSMICA SECUNDRIA: Alterao citogentica detectada repetidamente nas
clulas de um clone tumoral, mas nunca observada como a nica alterao citogentica
presente nas clulas do clone.
ABORTO: Expulso espontnea ou provocada do embrio ou do feto. No caso do feto, refere-se
sua expulso antes de ser vivel.
ACNTRICO: Fragmento cromossmico sem centrmero.
CIDOS NUCLEICOS: Molculas polimricas constitudas por nucletidos: acido desoxirribonucleico
e cido ribonucleico (ver DNA e RNA).
ACONSELHAMENTO GENTICO: Processo que permite a uma pessoa doente ou aos seus familiares
em risco para uma doena, que pode ser hereditria, serem informados sobre as
consequncias da doena, a probabilidade de a desenvolver ou transmitir e os modos de a
prevenir ou melhorar.
ACROCNTRICOS: Cromossomas cujo centrmero se encontra perto da extremidade, de modo que
um dos braos muito curto (cromossomas 13-15, 21, 22 e Y).
ADIO (lei): A lei da adio em clculo de probabilidade decorre do facto de dois acontecimentos
serem mutuamente exclusivos, como acontece com uma gravidez: o embrio ou do sexo
masculino ou do sexo feminino. A probabilidade de ser do sexo masculino de 1 em 2 ou
seja de 1/2, e h idntica probabilidade de ser do sexo feminino, ou seja tambm de 1/2.
A probabilidade do descendente ser do sexo masculino ou do sexo feminino igual a um,
o que equivale soma da probabilidade de ocorrncia de cada acontecimento: (1/2+1/2=1).
ADENINA (abreviatura: A): constitui uma das quatro bases que integram o DNA.
ADENOVRUS: Um vrus de DNA, de cadeia dupla.
AGENESIA: Ausncia ou paragem do desenvolvimento de um rgo ou de uma parte do corpo.
AGREGAO FAMILIAR: Diz-se que h agregao para uma determinada doena quando o risco
maior entre os familiares de um indivduo com essa doena do que na populao controlo,
ou h uma histria familiar positiva a proporo de casos com um familiar afectado
maior do que a proporo encontrada num grupo controlo adequado.
ALELO: Forma alternativa de um gene. Refere-se a um de dois ou mais alelos que podem ocorrer
num mesmo locus de um par de cromossomas homlogos (um dos alelos de origem
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456
paterna, o outro de origem materna). Os alelos podem ser diferentes, por exemplo, devido
ao polimorfismo de um nico nucletido.
ALFA-FETOPROTENA: Protena normalmente produzida durante o perodo fetal do desenvolvimento
intra-uterino. A sua concentrao no sangue materno, durante uma gravidez, encontra-se
aumentada nos defeitos do tubo neural e diminuda nas trissomias 21, 18 e 13. O gene
localiza-se em 4q11-q22.
ALOGNICO (enxerto): Transplantao de clulas, tecidos ou rgos entre membros da mesma espcie,
no idnticos geneticamente.
ALU (sequncia): Uma das sequncias do DNA humano, melhor conhecida, com cerca de 300 pares
de bases, moderadamente repetitiva, localizada em zonas intergnicas ou intrnicas do
DNA. Ocorre cerca de 600.000 vezes no genoma humano, estatisticamente, uma vez de 5
em 5 kb. um bom marcador para identificar DNA humano (v.g., em hbridos celulares)
Deve o seu nome enzima de restrio que a cliva (endonuclease Alu I).
AMINOCIDOS: Unidades qumicas que entram na formao dos polipeptdeos. Existem 20
aminocidos diferentes. A sua ordem num polipeptdeo determinada pela sequncia dos
codes do RNAm.
AMNIOCENTESE: Procedimento para obteno de lquido amnitico e do seu contedo celular por
via transabdominal, para DPN. Realiza-se, habitualmente, pela 15 semana de gravidez.
Permite detectar anomalias cromossmicas, defeitos do tubo neural, metabolopatias e
defeitos moleculares.
AMPLIFICAO (de DNA): Produo de mltiplas cpias de uma sequncia de DNA.
ANAFASE: Estdio da mitose no qual, aps clivagem do centrmero, as cromtides-irms se separam
e migram para os plos do fuso, por meio das fibras (microtbulos) do fuso. Na anafase I
da meiose, os cromossomas homlogos de cada par, aps desaparecimento dos quiasmas,
separam-se e migram cada um para um plo do fuso. A anafase II da meiose semelhante
da mitose.
ANEUPLOIDIA: Situao em que h um nmero de cromossomas que no um mltiplo exacto do
nmero haplide (v.g., 2n-1 ou 2n+1, em que n o nmero haplide de cromossomas).
ANOMALIAS CONGNITAS: Alteraes estruturais ou funcionais decorrentes de perturbaes do
desenvolvimento fsico (anomalias da morfognese) presentes ou determinadas no momento
do nascimento ou in utero, que no sejam originadas por traumatismos durante o parto.
Podem no ser diagnosticadas ao nascer, em funo da localizao e/ou traduo funcional.
ANTECIPAO: Traduz a tendncia evidenciada por algumas doenas para se manifestarem em idade
mais jovem e/ou exprimirem um aumento de severidade quando o gene com a mutao
passa de pais para filhos, ao longo das geraes, o que poder ocorrer por aumento do
nmero de sequncias repetitivas (v.g., X-frgil, coreia de Huntington, distrofia miotnica).
ANTICODO: Tripleto de nucletidos do RNA de transferncia que hibrida com o tripleto complementar
(codo) do RNAm.
ANTIONCOGENES (tambm designados genes supressores tumorais): Genes celulares normais, de
natureza recessiva, cuja perda ou inactivao de um ou dos dois alelos, pode conduzir ao
desenvolvimento de uma neoplasia. Esto implicados na regulao da proliferao, da
diferenciao e da senescncia celulares. A funo das protenas codificadas pelos
antioncogenes contrabalana o estmulo proliferativo das protenas codificadas pelos
protooncogenes.
ANTISENSE (Antisentido) (cadeia): Cadeia de DNA que, numa regio da cadeia dupla, no codifica
para a sequncia polipeptdica, mas complementar da sequncia de DNA codificadora
(cadeia sense) e que serve de molde para a sntese do RNAm.
ANTISENSE (teraputica): procedimento teraputico pelo qual uma sequncia oligonucleotdica
hibrida com uma molcula de RNAm mutada, de forma a evitar a sua expresso, ao bloquear
a traduo em protena, a nvel do ribossoma. As sequncias antisentido tm normalmente
entre 12 e 50 nucletidos.
APLASIA: Ausncia de um rgo ou tecido por falta de proliferao celular, com origem durante o
desenvolvimento intrauterino ou ps-natal.
APOPTOSE: Involuo ou morte celular programada que ocorre num tecido ou rgo. Envolve a
compactao do citoplasma, uma elevada condensao da cromatina, o blebbing da
membrana e a clivagem internucleossomal do DNA genmico (formao de corpos
apoptticos) por meio de uma endonuclease. H genes pr-apoptticos e genes anti-apoptticos.
A PRIORI (risco): Indica o clculo de risco inicial para a ocorrncia de uma determinada doena, sem
ter em considerao o efeito dos factores modificadores (v.g., diagnstico gentico, idade
de aparecimento, penetrncia).
ARMS (amplification refractory mutation system): Forma de PCR alelo-especfica, que utiliza primers que permitem discriminar sequncias de DNA com uma nica base diferente. Assim,
possvel caracterizar um polimorfismo dos alelos de um locus, mas tambm uma
determinada mutao pontual patognica.
ASO (sequncias alelo-especficas): Sequncias de DNA com uma sequncia homloga de partes de
alelos especficos, habitualmente com 18 a 20 nucletidos. Em condies de hibridao
bem determinadas e usando dois ASOs que difiram apenas numa base, possvel distinguir
fragmentos de DNA que tenham apenas uma base nucleotdica diferente (v.g., heterozigotia
para um locus devida a uma mutao pontual).
ASSOCIAO: No mbito dos defeitos congnitos dismrficos refere-se ocorrncia concomitante,
em dois ou mais indivduos, de um grupo de malformaes mais frequentemente do que
seria de esperar ao acaso, sem terem a ver com uma determinada anomalia da embriognese.
A associao designa-se, frequentemente, pelo acrnimo constitudo pelas primeiras letras
das palavras que traduzem as anomalias observadas (v.g., CHARGE: colobomas, heart defects, atresia choanae, mental retardation, growth retardation, ear anomalies).
AUTOCRINIA: Produo por uma clula, de uma hormona, factor de crescimento ou outra substncia,
para a qual a mesma clula exprime os correspondentes receptores.
AUTLOGO (enxerto): Transplantao realizada com clulas ou tecidos do prprio indivduo.
AUTORRADIOGRAFIA: Deteco de molculas marcadas com um radio-istopo, por meio de um
filme de raios X, aps separao electrofortica ou cromatogrfica.
AUTOSSOMAS: Todos os cromossomas humanos, com a excepo dos cromossomas sexuais.
Na espcie humana h 22 pares de autossomas.
AUTOSSMICO: Caracter ou doena resultante da expresso fenotpica de gene ou alterao gentica
com localizao num dos autossomas.
AUTOSSOMOPATIA: Doena resultante de uma anomalia cromossmica localizada num dos
autossomas.
BAC: (ver Cromossoma bacteriano artificial).
BACTERIFAGOS: Vrus que infectam bactrias, constitudos por um revestimento proteico e DNA
ou RNA como material gentico. Em biologia molecular so usados como vectores, na
clonagem.
BANDEAMENTO CROMOSSMICO (Banding): Processo tcnico que permite observar um padro
determinado de bandas claras e escuras para cada cromossoma. O padro de bandas
depende da tcnica usada e do corante (Ex.: GTG refere-se a bandas G, obtidas por
tratamento com tripsina (T), seguido de colorao com Giemsa (G).
Tipos de bandas:
Bandas C: Bandas produzidas pela colorao da heterocromatina constitutiva.
Bandas G: Bandas produzidas por vrios mtodos e coradas com Giemsa.
Bandas N (ou bandas NOR): Bandas que englobam regies relacionadas com organizadores
nucleolares (nucleolar organizers), ou sejam, as hastes dos cromossomas acrocntricos.
Bandas Q: Bandas fluorescentes obtidas por colorao com quinacrina.
Bandas R: Bandas que so o inverso das bandas G ou Q.
Bandas T: Bandas terminais localizadas nos topos dos cromossomas.
BARR (Cromatina de): Cromatina sexual constituda por um corpsculo corado intensamente,
encontrada normalmente nas clulas somticas femininas (derivado do cromossoma X
inactivado).
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BASE (anlogo): molcula qumica com estrutura semelhante a uma das bases que constituem o
DNA e que pode ter um efeito mutagnico quando se incorpora na cadeia de DNA em
lugar da base, seja por emparelhamento indevido ou por erro de localizao (v.g., o bromouracil, um anlogo da timina, uma vez incorporado no lugar desta, pode emparelhar
com adenina, mas tambm com guanina aps modificao tautomrica, o que origina
uma mutao pontual em prxima replicao: G-C em vez de T-A).
BASES (emparelhamento): Estabelecimento de pontes de hidrognio entre adenina e timina (AT, duas
pontes) e citosina e guanina (CG, trs pontes) no DNA e entre adenina e uracilo no RNA
quando em dupla cadeia (AU, duas pontes).
BASES (nucleotdicas): molculas que entram na constituio dos cidos nucleicos (no DNA: adenina,
timina, citosina, guanina); no RNA, a timina substituda por uracilo).
BAYES (teorema): operao que, em relao ocorrncia de determinado acontecimento, como ser
portador de uma mutao, permite derivar a indicao de uma probabilidade ou risco
posterior mais preciso, a partir de uma probabilidade conjunta obtida por combinao da
probabilidade a priori com a probabilidade condicional decorrente do efeito dos factores
modificadores (ver a priori).
BIBLIOTECA DE DNA: (ver Livraria).
BIOTECNOLOGIA: Metodologias assentes na utilizao de organismos vivos em processos industriais.
BIVALENTES: Figuras observadas durante a primeira diviso da meiose, resultantes da ligao, por
meio de quiasmas, das duas cromtides de um cromossoma, altamente condensadas, com
as duas cromtides do cromossoma homlogo (ver Quiasmas). Estas figuras tambm se
designam por ttradas.
bp (base pair): Par de bases complementares do DNA.
CAPPING: (ver Processamento do RNAm).
CARCINOGNEO: Qualquer agente que provoque alteraes numa clula, da resultando o
desenvolvimento de um fentipo maligno.
CARGA GENTICA: Conjunto de genes encontrados numa populao que reduzem, em graus variados,
a capacidade de sobrevivncia ou de reproduo dos indivduos em que ocorrem.
Em Gentica Mdica, a carga refere-se ao impacto total de uma alterao ou conjunto de
alteraes de natureza gentica sobre o doente, os membros da sua famlia e a sociedade.
CARITIPO: Conjunto de cromossomas de uma clula. Nome tambm comummente usado para a
distribuio padronizada dos cromossomas metafsicos ou pr-metafsicos, tendo em conta
as dimenses, a morfologia e o nmero (ver Ideograma).
CLULAS MULTIPOTENTES: Clulas que podem dar origem a diversos tecidos (v.g., clulas estaminais
do adulto).
CLULAS PLURIPOTENTES: Clulas do embrio que podem dar origem a um organismo completo
mas no aos seus anexos (vg. clulas da massa celular interna).
CLULAS TOTIPOTENTES: Clulas totalmente indiferenciadas, que podem dar origem a todas as
clulas de um organismo e aos seus anexos embrionrios (vg. zigoto, primeiros blastmeros
do embrio).
CENTIMORGAN (cM): Unidade de distncia gentica entre genes. Dois loci esto separados 1 cM se
h a probabilidade de 1% de recombinao entre eles durante uma diviso meitica. Em
mdia, a distncia gentica de 1 cM equivalente a uma megabase (1.000 kb).
CENTRMERO: Constrio dos cromossomas dos seres eucariotas, constituda por heterocromatina,
pela qual as cromtides esto ligadas e onde se encontra o cinetocoro.
CHAPERONE: Protena que participa na dobragem e na localizao de outras protenas. Liga-se a
regies hidrofbicas que no esto normalmente expostas na protena madura, quando as
protenas esto a ser produzidas ou parcialmente dobradas.
CICLINAS: Protenas envolvidas na regulao do ciclo celular, produzidas em fases especficas do ciclo
e que, quando formam complexos com as cinases dependentes de ciclinas possibilitam
que estas adquiram capacidade fosforilativa sobre determinadas protenas alvo.
CICLO CELULAR: Perodo de tempo relativo a um ciclo de multiplicao celular, que inclui a replicao
do DNA e a diviso nuclear e citoplasmtica. Estende-se desde o momento em que se
conclui a mitose de uma clula (progenitora) at se completar a mitose subsequente em

uma ou duas das clulas filhas. Divide-se nas fases G1, S, G2 e M.
CINETOCORO: Estrutura proteica que se associa ao centrmero, ao qual se ligam os microtbulos do
fuso.
CIS: Indica a localizao de dois genes num mesmo cromossoma.
CISTRO: A mais pequena unidade de material gentico que responsvel pela sntese de uma
cadeia polipeptdica especfica.
CITOCINESE: Diviso de uma clula em duas clulas-filhas.
CITOGENTICA: Ramo da Gentica que se dedica principalmente ao estudo microscpico dos
cromossomas e da sua relao com o fentipo.
CITOSINA (abreviatura: C): constitui uma das quatro bases que integram o DNA.
CLONAGEM: Processo pelo qual se reproduzem molculas, clulas ou organismos iguais entre si e a
um exemplar nico inicial.
CLONAGEM EMBRIONRIA: Obteno de embries geneticamente idnticos, por diviso das clulas
totipotenciais de um embrio.
CLONAGEM DE DNA (ou clonagem molecular): Isolamento de um fragmento de DNA, seguido de
produo de vrias cpias (ver: Clones), por multiplicao num vector (plasmdeo, fago,
cosmdeo, BAC, YAC) ou por PCR, para permitir a sequenciao ou estudo.
CLONAGEM FUNCIONAL: Metodologia de clonagem em que o conhecimento do produto de um
gene e da sua funo serve de base clonagem do gene em causa (ver Gene candidato).
CLONAGEM POSICIONAL (ou gentica inversa): Clonagem de um gene pela sua posio no
cromossoma, antes de se conhecer o produto que codifica, ao contrrio do caminho seguido
tradicionalmente pelo qual um gene clonado aps a identificao prvia do produto
codificado. Em Gentica Mdica, refere-se aplicao do mapeamento gnico humano
para clonar o gene responsvel por uma doena e, a partir da sequncia, predizer a estrutura
da protena responsvel pelo fentipo alterado.
CLONAGEM REPRODUTIVA (humana): Obteno de embries humanos por clonagem somtica ou
embrionria e subsequente implantao intra-uterina para se desenvolverem como fetos e
originarem novos indivduos.
CLONAGEM SOMTICA: obteno de embries geneticamente idnticos, por transplantao do
ncleo diplide de uma clula somtica de um indivduo para o citoplasma de um ovcito
ou de um ovo previamente enucleado.
CLONAGEM TERAPUTICA: Obteno de embries por clonagem somtica ou embrionria,
desenvolvidos in vitro at fase de blastocisto (sem implantao intra-uterina). Da massa
celular interna dos blastocistos, so colhidas clulas pluripotentes para fins teraputicos,
eventualmente aps a induo especfica da diferenciao no tipo de clulas ou tecidos
necessrios para o tratamento.
CLONE CELULAR: Conjunto de clulas geneticamente idnticas, com origem, por diviso mittica,
numa nica clula-me.
CLONES DE DNA: Mltiplos fragmentos iguais, obtidos por meio de tcnicas de recombinao do
DNA.
CODO: Sequncia de trs bases consecutivas que no DNA e aps a transcrio no RNAm codificam
para um aminocido.
CODO INICIADOR: constitudo pelo tripleto ATG (AUG no RNAm), que representa sempre o primeiro
codo de um RNAm, nos eucariotas. Codifica para metionina.
CODO DE TERMINAO (codo stop): representado por um dos trs codes UAA, UAG ou
UGA do RNAm. Estes codes no especificam para nenhum aminocido, sendo a sua
presena o sinal de terminao da traduo do RNAm.
CDIGO GENTICO: Correspondncia entre tripletos de nucletidos e a sequncia de aminocidos
que determinam durante a traduo do RNAm, a nvel dos ribossomas.
CDIGO GENTICO (Degenerescncia): Traduz a possibilidade de um mesmo aminocido ser codificado
por codes diferentes (v.g., os codes CUU, CUC, CUA e CUG codificam todos para a
leucina)
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CODOMINNCIA: Situao em que h expresso individual dos dois alelos de um locus, num
heterozigoto.
COEFICIENTE DE CONSANGUINIDADE: Proporo de alelos idnticos, herdados a partir de um ancestral comum. Designa-se habitualmente por r.
COEFICIENTE DE ENDOCRUZAMENTO: Proporo de loci para os quais pode ocorrer homozigotia
em descendentes de acasalamento entre consanguneos. Designa-se por F.
COMPLEMENTAO (Anlise de): Mtodo gentico para testar se duas mutaes que produzem um
fentipo semelhante so ou no allicas. Quando se observa complementao, por exemplo,
aps hibridaes celulares, este resultado indica que a mutao se localiza em genes no
allicos e, por isso, o hbrido obtido no apresenta o fentipo provocado pelas mutaes
em causa.
COMPLEMENTARIDADE (DNA): Emparelhamento especfico da adenina com a timina e da citosina
com a guanina na cadeia bicatenar de DNA, por ligao covalente.
CONCORDNCIA (entre gmeos): Presena do mesmo trao nos dois membros de um par de gmeos.
CONGNITO: Caracter que est presente (ou determinado) no momento do nascimento. No
sinnimo de gentico (ver Gentico). Pode ser de origem ambiental ou hereditria.
CONGLUMERADOS DE GENES (Gene clusters): Grupos de dois ou mais genes, estruturalmente
relacionados, em ligao muito prxima. Provavelmente, tiveram origem por duplicao
gnica (v.g., genes do sistema HLA, genes das globinas).
CONSANGUNEO (Casamento): Casamento entre pessoas com um ou mais antepassados comuns.
CONSANGUINIDADE: Refere-se situao de parentesco devida a, pelo menos, um tronco comum
(at trisav). Quando existe apenas um tronco comum, designa-se como consanguinidade
simples; quando h mais do que um tronco comum, como consanguinidade mltipla.
A designao de consanguinidade dupla refere-se a condies em que h dois troncos
comuns em igual situao, relativamente aos indivduos consanguneos em questo.
CONSENSUS (sequncias): Sequncias de DNA relacionadas, embora no iguais. Para cada posio
da sequncia consensus indica-se o nucletido mais frequentemente encontrado nos
diversos estudos moleculares destas sequncias. Em comum, podem ligar a mesma protena
reguladora dos genes.
CONSENTIMENTO: Acto pelo qual uma pessoa afirma o seu acordo no que respeita realizao de
um diagnstico ou tratamento, ou concorda com a sua incluso num processo de
investigao.
CONSTITUCIONAL: Diz-se de uma caracterstica gentica que est presente em todas as clulas
nucleadas do organismo.
CONTIGS (de DNA): Fragmentos contguos de DNA clonado que possuem sequncias de bases em
comum nos seus topos. Pela sobreposio das regies comuns, possvel reconstituir a
ordem dos fragmentos e a sequncia final de nucletidos na cadeia de DNA antes da
fragmentao.
CONVERSO GNICA: Processo que consiste na substituio de um alelo, num locus, por uma cpia
de outro alelo presente no mesmo cromossoma, no cromossoma homlogo ou noutro
cromossoma. A converso gnica um mecanismo gentico que origina genes com
sequncia idntica onde os genes no eram idnticos. Trata-se, por isso, de uma troca
unidireccional de material gentico.
CORDOCENTESE: Procedimento para obter sangue fetal directamente do cordo umbilical, por puno
percutneo, destinado a DPN ou teraputica fetal
COSMDEO: Vectores sintticos para clonagem de genes que replicam como um plasmdeo, e que
podem inserir grandes fragmentos de DNA estranho (at 50 kb).
CpG (ilhas): Regies do DNA com uma extenso habitualmente inferior a 1 kb, com elevada densidade
de dinucletidos CpG (bases citosina hipometiladas e bases guanina). Estas sequncias
dinucleotdicas (5-CpG-3) encontram-se, com frequncia, no topo 5 dos genes, onde
so um sinal para a metilao por uma metiltransferase especfica da citosina e tm uma
funo reguladora da expresso gnica mediada pelo grau de metilao.
CRESCIMENTO EXPONENCIAL: No mbito da multiplicao celular, traduz a proliferao clonognica

de todas as clulas de uma populao (1, 2, 4, 8, 16, 32,), o que corresponde a dizer que
nenhuma clula entre em quiescncia (G0).
CRESCIMENTO GOMPERTZIANO: Proliferao clonognica, traduzida por uma curva Gompertziana,
em que o crescimento de uma neoplasia diminui com o tempo, tendendo para um plateau.
CROMTIDES: As duas cadeias de DNA, ligadas pelo centrmero de um cromossoma, originadas
pela replicao do DNA. Na anafase, as duas cromtides separam-se e do origem a dois
cromossomas.
CROMATINA: Conjunto de cidos nucleicos e protenas constituintes dos cromossomas.
CROMOSSOMA BACTERIANO ARTIFICIAL: Vector para clonagem de DNA que consiste num
recombinante de plasmdeo F, inserido numa bactria. Comporta fragmentos de DNA com
tamanho at 300 kb.
CROMOSSOMA EM ANEL: Cromossoma que resulta da fuso das duas extremidades de um
cromossoma, aps perda dos segmentos distais.
CROMOSSOMA HUMANO ARTIFICIAL: Cromossoma artificial que funciona como vector capaz de
transportar um fragmento de DNA at 10 Mb. Inclui um centrmero e telmeros na sua
estrutura, para permitir a integrao no ncleo de clulas humanas e a sua replicao.
A elevada capacidade poder ser usada para a terapia gnica, nos casos de genes de
grandes dimenses.
CROMOSSOMA MARCADOR: Pequeno cromossoma extra, com estrutura anormal.
CROMOSSOMAS: Estruturas em que se encontram os cerca de dois metros de DNA de um genoma
diplide humano. Alm do DNA, so constitudos por mltiplas protenas histnicas e no
histnicas. Nas clulas interfsicas dispem-se como estruturas muito finas, abaixo do limiar
de resoluo da microscopia de luz. Durante a mitose os cromossomas sofrem condensao
tornando-se visveis em microscopia de luz. Os pares de cromtides visveis durante a mitose
resultam da condensao dos cromossomas duplicados durante a fase S do ciclo celular.
CROMOSSOMAS HOMLOGOS: Elementos de um par de cromossomas idnticos, que formam sinapse
durante a meiose. Um dos cromossomas herdado do pai e o outro herdado da me.
CROSSING-OVER (ver Entrecruzamento).
DALTON: Unidade de peso igual ao peso de um io de hidrognio.
DALTONISMO: Diz respeito cegueira para as cores. Os indivduos no tm a percepo das trs
cores primrias o vermelho, o verde e a azul. Podem ser monocromticos se vem
apenas uma das cores ou dicromticos se vem duas cores, em oposio aos indivduos
tricromticos nos quais h viso completa para as trs cores. Na deficincia para uma das
cores pode ocorrer deuteranopia ou protanopia, ambas ligadas ao cromossoma X.
DEFORMAO: Conformao ou posio anormal de uma parte do organismo, causada por foras mecnicas.
Podem ser intrnsecas do feto (v.g., p equino por miopatia) ou extrnsecas a ele (v.g., p equino
por oligomnios), e podem aparecer no perodo pr-natal ou na vida extra-uterina.
DELEO: Tipo de aberrao cromossmica em que h perda de parte de um cromossoma (um
brao ou uma parte intersticial ou terminal de um brao cromossmico). A nvel molecular,
significa a perda de um ou mais nucletidos no DNA.
DEONTOLOGIA: Conjunto de deveres especficos e de normas de comportamento prprios do exerccio
de uma determinada actividade profissional, que se fundam nos usos e nas tradies da
respectiva profisso.
DERIVA GENTICA: Fixao de alelos numa populao isolada, de tal modo que alelos que ocorrem
normalmente na espcie humana, numa populao extensa, no fazem parte do fundo
gnico da populao em causa.
DERMATOGLIFOS: Padres ou tipos de distribuio das pregas ou sulcos das palmas e dedos das
mos e das plantas e dedos dos ps.
DESEQUILBRIO DE LIGAO: Ocorrncia em associao, com uma frequncia diferente da que seria
de esperar (para mais ou para menos) se houvesse uma combinao meitica ao acaso, de
alelos localizados em loci diferentes (ver Ligao e Equilbrio de ligao).
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DESNATURAO: Separao das cadeias complementares de DNA e/ou RNA por aco de solues
bsicas ou por elevao da temperatura.
DEUTERANOPIA: incapacidade de detectar a cor verde devido a deficincia das protenas absorventes
de luz (opsinas), em parte dos cones da retina. Estes indivduos so dicromticos, j que
tm percepo para o azul e o vermelho.
DIAGNSTICO GENTICO PR-IMPLANTATRIO: conjunto de procedimentos destinados a realizar
estudos genticos (cromossmicos ou gnicos) em glbulos polares colhidos do zigoto, ou
em um ou dois blastmeros colhidos do embrio de 6 a 8 clulas. O embrio obtido por
fecundao in vitro, estando indicada a injeco intracitoplasmtica do espermatozide.
DIAGNSTICO PR-NATAL: conjunto de procedimentos que so realizados para determinar se um
embrio ou feto portador ou no de uma anomalia congnita.
DIANDRIA: condio em que o complemento de 46 cromossomas tem origem exclusivamente no
progenitor do sexo masculino.
DICNTRICO: Cromossoma anormal, com dois centrmeros. Constitui uma estrutura tpica subsequente
a exposio a radiaes ionizantes.
DICTITENO (estadio): Estadio tardio da profase I que se verifica na ovognese e corresponde
suspenso da meiose dos ovcitos primrios at que os indivduos do sexo feminino atinjam
a maturidade sexual. Aps a menarca, os folculos ovricos maduros recrutados em cada
ciclo libertam os ovcitos primrios do dictiteno quando ocorre a ovulao.
DIGINIA: condio em que o complemento de 46 cromossomas tem origem exclusivamente no
progenitor do sexo feminino.
DIPLOIDIA: Nmero normal de cromossomas nas clulas somticas (2n), o que corresponde a duas
cpias de cada cromossoma. Na espcie humana, 2n=23 pares de cromossomas ou seja,
46 cromossomas (ver Haplide).
DISMORFOLOGIA: Parte da cincia mdica que estuda o desenvolvimento fsico anormal (anomalias
da morfognese).
DISCORDNCIA (entre gmeos): No mbito da Gentica, indica a presena de um trao apenas num
dos membros de um par de gmeos.
DISPLASIA: Defeito primrio que envolve uma organizao anormal das clulas nos tecidos, ou dos
tecidos numa determinada estrutura.
DISRUPO: No mbito dos defeitos congnitos dismrficos, a disrupo um defeito morfolgico
ou estrutural de um rgo, parte de um orgo ou de uma regio importante do organismo,
resultante de uma influncia externa ou de uma interferncia num processo de desenvolvimento que originalmente (intrinsecamente) era normal (v.g., focomelia por ingesto de
talidomida no perodo embrionrio, anoftalmia por irradiao). No hereditria, embora
factores hereditrios possam predispor para o seu desenvolvimento.
DISSOMIA (Uniparental): Os dois homlogos de um par cromossmico so herdados de um dos pais,
com ausncia do homlogo correspondente que deveria ser herdado do outro progenitor.
DISTROFIA: Processo e consequncias de afeces hereditrias progressivas de clulas especficas
num ou mais tecidos, que tm inicialmente uma funo normal.
DIVISO EQUATORIAL: Segunda diviso da meiose, em que se separam as cromtides no complemento
cromosmico haplide.
DIVISO REDUCIONAL: Primeira diviso da meiose, em que o nmero de cromossomas se torna
haplide (separao dos cromossomas homlogos).
DIZIGTICOS (Gmeos): Resultam da fecundao simultnea de dois vulos, cada um por um
espermatozide, havendo apenas isocronia. As semelhanas so idnticas s observadas
entre irmos com diferentes idades.
DNA: cido desoxirribonucleico. Estrutura bicatenar, formada por duas cadeias constitudas pelos
desoxirribonucletidos de adenina (A), timina (T), citosina (C) e guanina (G), enroladas em
hlice e de modo que em frente a uma timina fica na cadeia complementar uma adenina
e em frente a uma citosina fica na cadeia complementar uma guanina. Entre as duas
cadeias, os nucletidos esto ligados por pontes de hidrognio (duas entre A e T e trs
entre C e G). Ao longo de cada cadeia os nucletidos esto unidos por ligaes diester de
fosfato. A sequncia de nucletidos na cadeia de DNA representa a informao gentica.
DNA-B: Estado conformacional do DNA hidratado, enrolado em dupla hlice para a direita, conforme
descrito por Watson e Crick.
cDNA (DNA complementar): Sequncia de DNA unicatenar, obtida a partir de RNAm, por meio da
enzima transcriptase inversa. O cDNA permite estudar a sequncia do RNAm (que
produzido pela clula aps o splicing).
DNA SATLITE: Regies de DNA constitudas por pequenas sequncias repetidas milhares de vezes,
de localizao maioritariamente pericentromrica. Deve o seu nome ao facto de formar
pequenas bandas separadas por centrifugao em gradiente de densidade.
DNA-Z: Estado conformacional do DNA, com enrolamento para a esquerda, encontrado em condies
fisiolgicas em fragmentos curtos de sequncias CpG (citosina guanina), com as bases
citosina metiladas.
DOENA GENTICA: Condio provocada por alteraes de um ou mais genes ou do nmero ou da
estrutura dos cromossomas e que conduzem expresso de sinais e sintomas de doena
no seu todo ou em parte. As alteraes podem ser herdadas (ver: Constitucional), ou
adquiridas (presentes apenas em algumas clulas do organismo, por terem ocorrido aps a
formao do ovo ou zigoto).
DOMINANTE: Refere-se a um caracter que se exprime quando h heterozigotia para o gene que o
determina. A expresso ocorre na presena de uma cpia normal do alelo.
DOMINANTE NEGATIVO: Condio em que a protena codificada por um alelo mutado no dominante,
vai inactivar em parte a protena codificada pelo alelo normal do mesmo locus. Tal facto
verifica-se quando os produtos gnicos se organizam em oligmeros para produzirem
molculas funcionais. Nestes casos, a percentagem de molculas funcionais muito menor
do que a percentagem de 50%:50% que partida se observa para o monmero proteico
normal e para o monmero proteico mutado.
DOMNIO: Unidade estrutural ou funcional de uma protena.
DOSAGEM GNICA: Nmero de alelos para um gentipo particular, o que depende do grau de ploidia.
DROPOUT ALLICO: fenmeno que se traduz na ausncia de amplificao de um dos alelos de um
locus durante a PCR. A falta de amplificao de um dos alelos, embora presente, pode
conduzir a erro de diagnstico na ausncia de controlos, uma vez que um gentipo
heterozigtico aparece como homozigtico.
ECOGENTICA: Diz respeito ao estudo da interaco entre os genes e o meio ambiente, em particular gentica da susceptibilidade a molculas patognicas e a xenobiticos.
EFEITO FUNDADOR: Designao que traduz a ocorrncia mais frequente (em comparao com a
populao geral) de determinadas alteraes genticas em populaes particulares
descendentes de um nmero relativamente restrito de ancestrais, dos quais um ou uns
poucos teriam as alteraes em causa.
ELECTROFORESE: Tcnica que permite a separao de molculas (v.g., fragmentos de DNA, RNA,
protenas) por meio de corrente elctrica, de acordo com a carga, tamanho e/ou forma,
variveis que determinam a velocidade a que a molcula se move no meio de suporte (v.g.,
gel de agarose ou de poliacrilamida).
ELECTROFORESE (de campo pulstil, pulsed field gel electrophoresis): Variante de electroforese em
gel que permite separar fragmentos de DNA extensos (at 2.000 kb), por alterao do
ngulo segundo o qual o campo elctrico aplicado.
ELECTROFORESE (de gradiente desnaturante, denaturing gradient gel electrophoresis): Variante
de electroforese em gel com um gradiente desnaturante (v.g., temperatura), que permite
detectar mutaes do DNA.
EMBRIO: Designao do produto de concepo que, na espcie humana, se estende at oitava
semana do desenvolvimento intra-uterino.
ENDOGAMIA: Acasalamento entre indivduos com grau de parentesco prximo (ver Consanguinidade).
ENDONUCLEASES (ou enzimas de restrio): Enzimas que fragmentam o DNA atravs da hidrlise
das ligaes internas de diester de fosfato. As endonucleases de restrio cortam o DNA
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bicatenar em locais especficos. A especificidade dada pela sequncia de nucletidos que

a enzima reconhece, ocorrendo corte do DNA sempre que a encontra. O nmero de
fragmentos de DNA e o seu tamanho dependem da extenso da sequncia de
reconhecimento. Quanto maior a sequncia especfica (habitualmente entre 4 e 8
nucletidos), menor o nmero de fragmentos de DNA obtidos e maior a sua extenso,
dada a menor probabilidade de se repetir ao longo da cadeia de DNA. Fazem parte do
sistema de proteco das bactrias contra a invaso da clula por DNA estranho. A sua
designao deriva do nome da bactria de que foi isolada (v.g., EcoRI, de E. coli).
ENDOREDUPLICAO: Os cromossomas mantm-se em metafase e ocorre um novo ciclo de replicao
de DNA, aparecendo, por isso, 92 cromossomas em metafase.
ENGENHARIA GENTICA: Procedimentos experimentais baseados em tcnicas de recombinao
gentica para manipular um gene ou genes, ou para produzir novas combinaes de genes,
de forma a modificar as caractersticas de um organismo.
ENTRECRUZAMENTO (crossing-over): Troca de material gentico, entre cromossomas homlogos,
durante a profase I da meiose. Pode tambm ocorrer durante a mitose, embora em muito
baixa frequncia (ver Quiasmas).
ENTRECRUZAMENTO ASSIMTRICO (assimetric crossing-over): No so trocados segmentos iguais
entre os cromossomas homlogos. Tem como resultado a perda de material cromossmico
num dos cromossomas homlogos e o ganho de material pelo outro cromossoma homlogo.
ENZIMAS DE RESTRIO (ver Endonucleases).
EPIDEMIOLOGIA: Estudo da distribuio das doenas, das suas causas e dos factores modificadores.
EPIGENTICO (Efeito): Refere-se a alteraes num fentipo que no resultam de uma modificao na
sequncia de DNA do genoma da clula. Podem, contudo, ser estveis e hereditrias e
serem provocadas por alteraes a nvel do grau de metilao do DNA, da activao da
transcrio, do controlo da traduo ou de modificaes ps-traduo.
EPISTASIA: Modulao da expresso de um gene por aco de outro gene localizado num locus
diferente.
EQUILBRIO DE LIGAO: Condio em que a frequncia de associao resultante da combinao
meitica entre alelos de diferentes loci a esperada, como resultado do produto da
frequncia de cada alelo para o seu prprio locus (ver Ligao e Desequilbrio de
ligao).
ESPORDICO: Refere-se a um trao que aparece num nico indivduo, entre os descendentes de um
tronco comum de uma famlia, que no tem base gentica, pelo que no transmitido
descendncia.
ESTs (Expressed sequence tags, marcadores de genes expressos): So sequncias curtas de cDNA
com algumas centenas de pares de bases, obtidas a partir de fragmentos de RNA mensageiro
correspondentes a genes expressos. O seu nmero superior ao nmero de genes.
Correspondem a genes expressos em determinados tecidos. Tm sido usados para localizar
genes.
TICA: rea do saber que investiga sobre o que bem no agir do homem na busca do comportamento
que conduza plena realizao da pessoa, no mbito de uma solidariedade com os outros
que seja globalmente justa.
EUCARIOTA: Qualquer clula ou organismo em que o ncleo est envolvido por membrana nuclear
(os fungos, as plantas e os animais so eucariotas).
EUCROMATINA: Regies da cromatina que, no bandeamento cromossmico, aparecem pouco coradas
e que correspondem a regies ricas em genes.
EUFENIA: Utilizao de medidas de ndole ambiental, como sejam substncias qumicas ou factores
de crescimento, para melhorar a eficincia de um rgo (v.g., do sistema nervoso central).
EUGENIA: Utilizao de medidas de ndole gentica destinadas a melhorar ou aumentar, em futuras
geraes, as qualidades hereditrias de uma populao inteira.
EUPLOIDIA: condio em que uma clula apresenta o nmero normal de cromossomas para a espcie
(n=46, na espcie humana).
EXES: Regies de um gene que so transcritas e que so usadas para a clula produzir RNAm, por
splicing do RNAhn.
EXONUCLEASES: Enzimas que removem os nucletidos, sequencialmente, a partir das extremidades
de uma molcula de um cido nucleico. Hidrolizam as ligaes diester de fosfato dos
nucletidos terminais.
EXPRESSO GNICA: Diz respeito aos acontecimentos que conduzem manifestao funcional de
um gene, desde a quantidade de cpias e a disponibilidade para serem transcritas,
transcrio, traduo a nvel citoplasmtico, eventual modificao da molcula proteica
aps a traduo e mesmo associao de molculas entre si ou de molculas proteicas
com outro tipo de molculas para se constituir uma molcula funcional.
EXPRESSIVIDADE: Traduz diferenas quantitativas na expresso de um gene, podendo a expresso
do caracter variar de pouco acentuada a grave (grau de expresso a nvel individual).
A forma fruste consiste na expresso muito discreta de uma anomalia, doena ou sndroma,
sendo, por isso, difcil de distinguir na linha normal da variao.
FAGO: Vrus que infecta e replica em bactrias (ver Bacterifago).
FAMILIAR: Qualquer condio (trao) que mais comum em parentes de um indivduo afectado do
que na populao geral. Pode no ser de natureza gentica.
FAMILIAR (doena): Na doena familiar, o padro de hereditariedade facilmente identificado, mas a
ligao a um gene especfico ou a um locus cromossmico no foi estabelecido.
FAMLIAS de GENES (Gene families): Grupos de genes que apresentam homologia das suas
sequncias e que, presumivelmente, tiveram origem num gene ancestral comum. A maioria
das famlias de genes est dispersa por diversos cromossomas, embora algumas se
apresentem em conglomerados num mesmo cromossoma (ver Conglomerados de genes).
FARMACOGENTICA: Cincia que estuda as variaes entre indivduos, controladas geneticamente,
no que diz respeito absoro, distribuio, biotransformao e eliminao de frmacos e
alimentos, bem como resposta do organismo aos frmacos.
FASE: Indica a distribuio cromossmica dos alelos de dois loci em ligao, (em conjuno, coupling, quando esto no mesmo cromossoma; em repulso, quando se encontram em
cromossomas diferentes, distribudos por cada um dos cromossomas do par de homlogos
do progenitor de que foram herdados). Quando se conhece a fase, possvel saber, sem
ambiguidade, se houve ou no recombinao meitica.
FENOCPIA: Fentipo devido aco de factores ambientais, que mimetiza um caracter determinado
geneticamente.
FENTIPO: Caractersticas fsicas, bioqumicas e/ou fisiolgicas observadas num indivduo ou numa
clula, resultantes da interaco do meio ambiente com um gene ou genes.
FETO: Designao do produto de concepo que, na espcie humana, abrange o perodo
compreendido entre a oitava semana do desenvolvimento intra-uterino e o momento do
nascimento.
FETOSCOPIA: Mtodo de observao directa do feto in utero, por meio de endoscpio flexvel
introduzido atravs da parede abdominal. utilizada para fazer DPN ou para tratamento
do feto.
FINGERPRINT (Gentico): Padro de fragmentos de restrio do DNA, detectado por uma sonda
que reconhece muitos loci altamente polimrficos, e que nico para cada indivduo.
FISH (ver Hibridao in situ).
FITNESS (aptido): Traduz a aptido de um indivduo para sobreviver e se reproduzir. Pode ser
explicitada pela razo entre o nmero de indivduos com determinado gentipo numa
populao e o nmero de indivduos esperado pelo equilbrio de Hardy-Weinberg.
FLANQUEADORAS (Regies): Sequncias de DNA, localizadas a montante (5; upstream) do local
de incio da transcrio e a jusante (3; downstream) do sinal terminador da transcrio.
FLUXO GENTICO: Conjunto de caracteres hereditrios especfico de uma populao, transmissveis
no todo ou em parte, que podem evoluir no espao e no tempo, em funo das migraes
ou da miscigenao populacional.
FRATRIA: Conjunto de irmos e irms descendentes de um casal.
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FREQUNCIA: Termo sem especificidade cientfica que usado, correntemente, como sinnimo de
incidncia, quando se calcula o nmero de vezes que um gene se repete numa populao.
FUNDO GNICO (Gene Pool): Conjunto de alelos disponveis em todos os membros de uma
populao com capacidade reprodutiva, a partir do qual se constitui o contedo em genes
dos gmetas.
GMETAS: Clulas reprodutivas maduras (ovcitos e espermatozides), com um nmero haplide
de cromossomas, com capacidade para originarem um ovo ou zigoto, por fecundao de
um ovcito por um espermatozide.
GMEOS: Irmos que se desenvolvem simultaneamente durante uma gravidez.
GMEOS DIZIGTICOS: Irmos que se desenvolvem simultaneamente numa mesma gravidez, a partir
de dois ovos independentes. Podem ser do mesmo sexo ou de sexo diferente. Tm 50% de
identidade gentica entre si.
GMEOS MONOZIGTICOS (ou gmeos verdadeiros): Irmos que se desenvolvem a partir de um
nico ovo inicial. partida tm 100% de identidade gentica. Em consequncia do momento
do desenvolvimento embrionrio, mais precoce ou mais tardio, em que se d a separao
das clulas e a formao dos dois embries, os gmeos monozigticos podem ser
dicorinicos, monocorinicos diamniticos, monocorinicos monoamniticos ou siameses.
GMEOS MONOZIGTICOS DICORINICOS: Cada gmeo tem a sua placenta e o seu saco corinico.
A separao celular muito precoce.
GMEOS MONOZIGTICOS MONOCORINICOS E DIAMNITICOS: gmeos com uma placenta e
um saco corinico comuns, mas cada um com o seu saco amnitico. Tm origem na diviso
das clulas da massa celular interna, na fase de blastocisto e so os mais frequentes.
GMEOS MONOZIGTICOS MONOCORINICOS E MONOAMNITICOS: Gmeos que partilham uma
placenta e um saco amnitico comuns. A diviso das clulas ocorre aps a primeira semana
de desenvolvimento embrionrio.
GMEOS SIAMESES: Gmeos monozigticos que se encontram ligados por partes do corpo. Partilham
a placenta e um mesmo saco corinico e amnitico. Resultam de uma diviso do embrio
para alm das duas semanas de desenvolvimento. Quanto mais tardia for a diviso, maior
a extenso das partes do corpo ligadas entre si, podendo chegar partilha comum de rgos.
GENE: Unidade de hereditariedade. Sequncia da cadeia nucleotdica de DNA capaz de transmitir
informao gentica e de expressar essa informao por codificao de uma cadeia
polipeptdica (um gene pode codificar cadeias polipeptdicas diferentes, v.g., quando ocorre
splicing alternativo) (ver splicing).
GENE CANDIDATO: Indica o gene que se considera estar associado a determinado caracter ou doena,
no decorrer de estudos moleculares, face protena que codifica ou s suas caractersticas
conhecidas.
GENES CONSTITUTIVOS (housekeeping genes): Genes que so, teoricamente, expressos em todas
as clulas, uma vez que codificam protenas implicadas em funes bsicas necessrias
para a sobrevivncia de todos os tipos celulares (v.g., G6PD, genes envolvidos na diviso
celular). No diferenciam as clulas umas das outras. A sua expresso no depende de
factores de regulao.
GENE DE FUSO: Gene resultante da combinao de dois genes ou de partes de dois genes.
GENES HOMETICOS: Genes filogeneticamente conservados implicados na regulao do
desenvolvimento embrionrio, que apresentam em comum uma sequncia de DNA de
cerca de 60 pares de bases, designada por homeobox. Quando mutados podero estar
na origem de malformaes.
GENES INDUZVEIS: Genes cuja intensidade de expresso influenciada por factores reguladores
externos clula.
GENE MODIFICADOR: Gene que influencia a expresso de outro gene.
GENTICA: Cincia que estuda as leis da hereditariedade.
GENTICA HUMANA: Ramo da Gentica que estuda as variaes genticas da espcie humana.
GENTICA DE POPULAES: Ramo da Gentica que estuda a frequncia com que ocorrem os genes
normais ou anormais numa populao, estabelecendo as diferenas quantitativas da sua
frequncia. Trata-se assim de uma rea da Gentica dedicada ao estudo da variabilidade

hereditria e das formas como influenciada ao longo das geraes e em funo dos
factores ambientais.
GENTICA MDICA: Ramo da Gentica que estuda os mecanismos da transmisso hereditria e da
expresso gnica aplicados patologia humana.
GENTICA MOLECULAR: Estudo da estrutura, da forma de expresso e da funo dos genes, a nvel
molecular.
GENTICO: Diz respeito a uma situao ou trao que depende da expresso de um gene ou genes
para se manifestar. Pode ser ou no hereditrio.
GENOCDIO: Eliminao de todos os elementos de um grupo tnico ou de uma raa.
GENOMA: Todo o componente gentico de um vrus ou de um procariota ou, nos seres eucariotas, o
componente gentico haplide ou diplide.
GENTIPO: Constituio gnica de um indivduo no que diz respeito aos alelos de um locus.
GERMINAL (Linha): Diz respeito s clulas que, nas gnadas do respectivo sexo, do origem aos
gmetas masculinos (espermatozides) ou femininos (ovcitos).
GONOSSOMAS: Os dois cromossomas sexuais X e Y.
GRELHA de LEITURA (Reading frame): Uma das trs possibilidades de leitura de uma sequncia de
nucletidos, como uma srie de tripletos (cdigo gentico). A grelha de leitura estabelece
se um nucletido do RNAm fica como primeiro, segundo ou terceiro nucletido de um
codo. A grelha de leitura determinada pelo codo iniciador (AUG) e define, assim, os
conjuntos de trs nucletidos que so lidos como codes.
GUANINA (abreviatura: G): constitui uma das quatro bases que integram o DNA.
HAPLOIDIA: Situao em que uma clula contm metade do nmero de cromossomas caracterstico
da espcie. O nmero normal de cromossomas nos gmetas humanos haplide (n=23),
correspondente a uma nica cpia de cada cromossoma.
HAPLOINSUFICINCIA: Situao em que os 50% de protena codificada e produzida por um indivduo
heterozigtico para um determinado locus no so suficientes para manter a funo em
nveis normais.
HAPLTIPO: Conjunto de alelos em ligao muito prxima, habitualmente herdados em conjunto,
como uma unidade, presentes em diferentes loci de um cromossoma (v.g., complexo HLA).
HARDY-WEINBERG (equilbrio de): Estabelece que a proporo relativa dos diferentes gentipos no
se altera de uma gerao para a outra, dentro de determinados princpios. Permite
caracterizar as relaes de equilbrio entre as frequncias allicas e as frequncias genotpicas
numa populao.
HEMIZIGOTIA: Presena de um nico alelo no genoma, condio que se verifica, normalmente, para
a grande maioria dos loci do cromossoma X, nos indivduos do sexo masculino. Corresponde
tambm a condies anormais (v.g., aps deleo) em que, em vez de um gentipo diplide,
se encontra uma nica cpia de um alelo.
HEREDITRIO: Refere-se a trao ou caracter que se transmite geneticamente dos progenitores
descendncia.
HEREDITARIEDADE CITOPLASMTICA (Hereditariedade materna): Transmisso de um trao
exclusivamente atravs dos familiares do sexo feminino.
HEREDITABILIDADE: proporo do efeito fenotpico devido expresso dos genes envolvidos. Resulta
do efeito aditivo da expresso dos genes envolvidos mais o efeito interactivo (epistasia).
HEREDOGRAMA: Representao esquemtica de um conjunto de indivduos com ligaes de
parentesco entre si e com ponto de partida num propositus. Sinnimo de rvore genealgica
(pedigree).
HERMAFRODITA: Indivduo que possui tecido gondico masculino e tecido gondico feminino.
HETEROCROMATINA: Parte da cromatina que cora intensamente com o bandeamento C ou NOR,
composta por sequncias repetitivas de DNA e que se mantm condensada durante a
interfase. Corresponde a regies pobres em genes e replica muito tardiamente na fase S do
ciclo celular.
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HETEROCROMATINA CONSTITUTIVA: Encontra-se junto dos centrmeros de todos os cromossomas,

no brao longo do cromossoma Y e nos satlites dos cromossomas acrocntricos.
Corresponde ao DNA satlite.
HETEROCROMATINA FACULTATIVA: Corresponde a eucromatina, em condio inactiva para a
transcrio (v.g., cromossoma X sujeito a lionizao).
HETEROCROMOSSOMAS: Cromossomas X e Y.
HETEROCROMOSSOMOPATIA: Doena resultante de uma anomalia cromossmica localizada num
dos heterocromossomas.
HETERODUPLEX (DNA): Extenso de DNA bicatenar em que no h complementaridade integral
entre as sequncias das duas cadeias.
HETEROGENEIDADE ALLICA: Condio em que um fentipo (ou fentipos muito semelhantes) so
determinados, de um modo independente, por alelos diferentes localizados no mesmo
locus.
HETEROGENEIDADE GENTICA: Condio em que um fentipo (ou fentipos muito semelhantes)
so determinados, de um modo independente, por alelos localizados em loci diferentes.
HETERLOGO (enxerto): Transplantao de clulas, tecidos ou rgos entre espcies diferentes.
HETEROMORFISMOS: Polimorfismos estruturais hereditrios observveis nos cromossomas devido a
variaes da quantidade de heterocromatina constitutiva.
HETEROPLASMIA: Traduz a presena de mais do que um tipo de DNA mitocondrial numa clula (v.g.,
DNA mutado e DNA normal).
HETEROZIGOTIA: Condio em que ocorrem dois alelos diferentes num determinado locus de um
par de cromossomas homlogos.
HETEROZIGOTO COMPOSTO: Gentipo em que esto presentes dois alelos mutantes diferentes, no
mesmo locus de cromossomas homlogos (v.g., um indivduo com um alelo para a
hemoglobina S e um alelo para a hemoglobina C, o que origina hemoglobina SC).
HIBRIDAO: Ligao de sequncias unicatenares de cidos nucleicos (DNA ou RNA) atravs da
complementaridade de bases, que d origem a uma molcula bicatenar (de dupla cadeia),
que pode ser um hbrido de DNA/DNA, DNA/RNA ou RNA/RNA.
HIBRIDAO CELULAR: Fuso de duas ou mais clulas diferentes, acompanhada de fuso dos
respectivos ncleos, com formao de um ncleo nico.
HIBRIDAO IN SITU: Mtodo pelo qual uma sonda marcada, de DNA ou de RNA, detecta uma
sequncia nucleotdica por ligao complementar, em cortes de tecidos ou em esfregaos
de clulas ou cromossomas. Quando a sonda marcada com um fluorocromo, o
procedimento designa-se FISH (fluorescent in situ hybridization).
HIPERDIPLOIDIA: Encontram-se cromossomas adicionais em nmero no-mltiplo de n. O nmero
modal ser 47 ou maior (ver Aneuploidia).
HIPERTELORISMO: Aumento da distncia intercantal interna e interpupilar.
HIPODIPLOIDIA: Nmero de cromossomas menor que 2n, sem ser n. O nmero modal ser 45 ou
menor (ver Aneuploidia).
HIPOPLASIA: Reduo do volume de um rgo ou da quantidade de um tecido, devido a insuficincia
da proliterao celular.
HIPOTELORISMO: Reduo da distncia intercantal interna e interpupilar.
HISTONAS: Protenas associadas ao DNA nos cromossomas, ricas em aminocidos bsicos (lisina ou
arginina), que constituem uma parte importante das nucleoprotenas dos seres eucariotas.
HLA (human leukocyte antigen): Sistema de histocompatibilidade determinado por um complexo
de loci localizados no cromossoma 6, em que os antignios se encontram na superfcie de
todas as clulas, com excepo dos glbulos vermelhos. Est envolvido nas respostas
imunolgicas normais e aparece ligado rejeio de enxertos quando no h compatibilidade
entre o dador e o receptor.
HOLNDRICO: Caracter hereditrio que ocorre apenas nos elementos do sexo masculino de uma
famlia. devido presena de um gene no cromossoma Y.
HOMEOBOX: (ver Genes hometicos).
HOMLOGOS: (ver Cromossomas homlogos).
HOMLOGOS (genes): Genes cujas sequncias partilham frequentemente (embora nem sempre)
significativas semelhanas e que representam verses actuais de um gene antigo que, em
determinado momento, sofreu duplicao.
HOMOPLASMIA: Traduz identidade de todas as cpias do DNA mitocondrial numa clula.
HOMOZIGOTIA: Condio em que ocorrem dois alelos idnticos num determinado locus de um par
de cromossomas homlogos.
HOTSPOT: Local de um gene em que ocorrem mutaes com elevada frequncia.
HOUSEKEEPING GENES (ver Genes constitutivos).
HUGO (Human genome organization): Organizao criada em 1988 para coordenar a investigao
internacional no mbito do genoma humano.
IDEOGRAMA: Disposio ordenada dos cromossomas, por grupos, a partir da microfotografia do
caritipo.
IDENTIDADE GNICA: Define a probabilidade de dois alelos, escolhidos ao acaso, serem idnticos por
terem sido herdados de um ancestral comum.
IMPRINTING GENMICO: Um dos genes do par de alelos de um locus tem expresso diferente do
outro gene desse locus, em funo do sexo do progenitor de que foi herdado (origem
paterna ou materna). Como consequncia, o contributo paterno e materno para o genoma
do zigoto (em termos funcionais) pode no ser equivalente, provavelmente devido a graus
de metilao diferentes.
INCESTO: Acasalamento entre indivduos que sejam familiares em primeiro grau (entre progenitores
e descendentes e entre os membros de uma fratria).
INCIDNCIA: Nmero de casos novos que ocorrem durante um determinado perodo de tempo.
A taxa de incidncia refere-se ao nmero de casos que ocorrem num determinado perodo
de tempo, numa determinada populao (com especificao do nmero de elementos do
universo considerado) (Ex.: nmero de casos/ano/milhar de pessoas).
INDEPENDNCIA: Em anlise estatstica, traduz a ausncia de efeito entre a ocorrncia de um
acontecimento e a probabilidade de ocorrncia de outro acontecimento (v.g., o facto de,
numa primeira gravidez, o embrio ser do sexo masculino, no afecta a probabilidade de,
numa segunda gravidez, o embrio ser do mesmo sexo ou do sexo oposto).
NDICE MITTICO: Fraco de uma populao celular que est em diviso num determinado momento.
INICIAO ALEATRIA (Random priming): Utilizao de pequenas sequncias de seis pares de bases
nucleotdicas ao acaso, como iniciadoras da replicao de DNA, para obter sequncias
altamente especficas de DNA marcado (ver Nick translation).
INJECO INTRACITOPLASMTICA DO ESPERMATOZIDE (ICSI): Tcnica in vitro de reproduo
medicamente assistida, habitualmente oferecida a homens que produzem espermatozides
imveis ou em muito pequena quantidade. A fecundao obtida por injeco de um
nico espermatozide no citoplasma de um ovcito.
INTENSIFICADORES (Enhancers): Sequncias reguladoras da expresso do DNA, com localizao
cis, que podem promover um aumento significativo de transcrio de um gene,
independentemente da sua posio ou orientao relativamente ao gene, por ligao de
factores de transcrio especficos.
INTERFASE: Perodo do ciclo celular, metabolicamente activo, localizado entre duas mitoses. Tendo
como referncia a replicao dos cromossomas, a interfase divide-se nas fases G1, S e G2.
INTERGNICO (DNA): Sequncias de DNA, localizadas entre os genes acessveis transcrio.
INTRES: Segmentos de um gene, inicialmente transcritos no RNAhn, mas removidos durante o
splicing. No so encontrados no RNAm.
INVERSO: Anomalia resultante de duas fracturas num mesmo cromossoma, seguida de rotao de
180 do fragmento resultante, correspondente ao material cromossmico localizado entre
as duas fracturas.
INVERSO PARACNTRICA: O segmento cromossmico localizado entre as duas fracturas e sujeito a
inverso no engloba o centrmero.
INVERSO PERICNTRICA: O segmento cromossmico sujeito a inverso, entre os dois pontos de
fractura, engloba o centrmero.
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ISOCROMOSSOMA: Cromossoma cujos braos tm um comprimento igual; resulta de uma diviso

transversal do centrmero. um cromossoma anormal com duas cpias de um brao,
tendo os dois braos do cromossoma as mesmas dimenses e os mesmos loci numa
sequncia inversa (em espelho, a partir do centrmero). O outro brao perdido.
ISODISSOMIA UNIPARENTAL: Consiste em um descendente herdar duas cpias de um dos homlogos
de um par cromossmico paterno ou materno, com ausncia do homlogo que deveria
herdar do outro progenitor.
ISOLADO POPULACIONAL: Agrupamento endogmico de um agregado de pessoas mais ou menos
isolado do resto da populao (v.g., por razes geogrficas, culturais, sociais ou religiosas).
JUSANTE (down-stream): Direco correspondente parte terminal 3 de uma sequncia
nucleotdica.
kb (quilobase): Mil pares de bases, numa sequncia de DNA.
KNOCKOUT: Diz respeito inactivao de um gene para se determinar a sua funo ou participao
em vias metablicas ou no desenvolvimento de um fentipo.
LETAL GENTICO: Diz-se de uma mutao que no compatvel com a reproduo dos seus portadores,
independentemente de afectar ou no a sobrevivncia do indivduo. A existncia de
indivduos portadores decorre de mutaes de novo.
LIGAO GNICA (Linkage): Associao, suficientemente prxima, de genes no allicos no mesmo
cromossoma, de modo que no ocorre a sua segregao independente (ver Equilbrio de
ligao e Desequilbrio de ligao).
LINHA: Sequncia de pessoas, ao longo das geraes, pelas quais um indivduo de uma famlia se
liga ao seu consanguneo.
LIONIZAO: Inactivao ao acaso, durante a vida embrionria, de um dos cromossomas X das
clulas somticas femininas com um caritipo normal (46,XX), nas regies no homlogas
relativamente ao cromossoma Y (a maior parte do cromossoma). Quando h mais de dois
cromossomas X, as cpias supranumerrias tambm so inactivadas.
LIPOSSOMA: Vescula lipdica com dupla camada, usada como vector para mediar o transporte de
DNA para dentro das clulas, em terapia gnica.
LIVRARIA: Coleco alargada de clones recombinantes de DNA, em que fragmentos de DNA genmico
ou DNA complementar foram inseridos num determinado vector. Uma livraria genmica
consiste numa coleco de vectores em que os fragmentos de DNA inseridos so
representativos de todo o genoma da espcie estudada (uma ou mais cpias de cada regio).
LOCUS (Plural: loci): Determinado local de um cromossoma em que se encontra um gene.
LOD SCORE: Mtodo estatstico para verificar se dois loci esto ou no em ligao. Consiste no
logaritmo na base 10 da probabilidade de existir ligao, sobre a probabilidade de no
existir. Considera-se um valor de +3 (possibilidade de 1.000:1) como prova de ligao
gnica e um valor de 2 como indicador de no ligao.
LOH (loss of heterozigosity): Perda do alelo responsvel pela heterozigotia constitucional para um
determinado locus, no DNA de um clone celular (v.g., clulas tumorais) em comparao
com o DNA das restantes clulas do organismo (v.g., sangue perifrico). Quando o alelo
perdido corresponde nica cpia funcional do par de alelos de um locus, h perda da
funo do gene. Se for um locus antioncognico, corresponde ao segundo acontecimento
que antecede a tumorignese.
MALFORMAO: No mbito dos defeitos congnitos dismrficos, a malformao um defeito
morfolgico ou estrutural primrio de um rgo, parte de um rgo ou de uma regio do
organismo, que resulta de um processo do seu desenvolvimento intrinsecamente anormal
(v.g., lbio leporino, mielomeningocelo, apndices pr-auriculares). So frequentemente
familiares. As malformaes podem ser nicas (na sua maioria de natureza polignica) ou
mltiplas (de origem cromossmica, teratognica, monognica ou desconhecida).
MAPA GNICO (ou carta gnica): Localizao relativa dos diversos loci nos cromossomas.
MAPEAMENTO GNICO: Estudo da posio dos genes nos cromossomas.
MAPEAMENTO FSICO: Assinala a posio dos genes, indicando as distncias em bp, kb ou Mb.
MAPEAMENTO GENTICO: Assinala a localizao de genes clonados atravs de estudos de ligao

gnica em famlias. As distncias so indicadas em unidades de recombinao
(centimorgans).
MAPEAMENTO DE RESTRIO: Indicao dos pontos de reconhecimento por enzimas de restrio,
para uma determinada extenso de DNA.
MARCADORES: Sequncias polimrficas, habitualmente localizadas em regies no codificadoras do
DNA (v.g., RFLPs, VNTRs, microsatlites) que esto em ligao com um determinado locus
associado a uma doena ou caracter.
Mb (megabase): Um milho de pares de bases.
MEIOSE: Processo de diviso celular que, nos seres eucariotas diplides, origina gmetas ou esporos
com apenas uma cpia de cada par de cromossomas homlogos, por ncleo.
MENDELIANA (Hereditariedade): Refere-se transmisso de um caracter, independentemente do
sexo, atravs de um nico gene. Tambm se designa por hereditariedade unifactorial.
METACNTRICO: Cromossoma cujo centrmero est no meio do cromossoma, de tal modo que os
braos tm um comprimento quase igual (cromossomas 1,3,16, 19 e 20).
METAFASE: Estdio da mitose em que cada par de cromtides-irms, no mximo de condensao e
apenas ligadas entre si pelo centrmero, se dispem na placa equatorial do fuso (placa
metafsica). Na metafase I da meiose, so os pares de cromossomas homlogos (bivalentes),
ligados entre si pelos quiasmas, que se dispem no plano equatorial do fuso. A metafase II
da meiose semelhante da mitose.
METSTASE: Localizao tumoral secundria resultante da fixao de clulas tumorais aps deslocao
a partir do foco tumoral primitivo.
METILAO (do DNA): Ligao covalente de um grupo metil ao DNA. Nos eucariotas, a citosina a
base mais frequentemente metilada, originando-se 5-metilcitosina. O grau de metilao
est associado ao estado funcional dos genes: quanto mais metilado estiver um gene,
menor ser o seu nvel de expresso (transcrio).
MICROCHIP DE DNA (DNA microarray): Processo de rastreio gentico que envolve a distribuio,
de forma ordenada, de centenas ou milhares de sequncias diferentes de DNA num suporte
slido (v.g., lmina de microscpio). As sequncias aderidas ao suporte slido podem
corresponder a sequncias mutadas que sejam patognicas para o homem, ou a sequncias
corespondentes a alelos normais que se deseje identificar (v.g., alelos do sistema de
histocompatibilidade HLA). Quando se hibrida o DNA de um indivduo contra o microchip, vo-se detectar, em simultneo, as diversas mutaes presentes nesse indivduo (ou
os alelos que se deseje caracterizar), pela sua ligao complementar s sequncias aderidas.
MICROCROMOSSOMAS (dmin, double minutes): Fragmentos cromossmicos muito pequenos,
com ou sem centrmero, que so a expresso citogentica de amplificao gnica somtica
e que tm sido relacionados com fenmenos de resistncia quimioterapia em clulas
neoplsicas (ver Regies de colorao homognea).
MICRODELEO: Perda de material cromossmico, com uma extenso que no permite a sua
visualizao por microscopia de luz (menor do que 4x106 bp).
MICRONCLEOS: Pequenos ncleos separados que contm alguns cromossomas ou fragmentos de
cromossomas e que no participam na mitose normal.
MICROSSATLITES (ver VNTRs): Ao contrrio dos VNTRs, a sequncia de bases mais curta, podendo
ser constituda por apenas duas bases. Estas sequncias podem variar bastante de
comprimento, de um alelo para outro, o que as torna altamente informativas para estudos
de ligao gnica.
MINISSATLITES: (O mesmo que VNTRs).
MISMATCH (erro de emparelhamento): Condio em que, numa determinada posio da dupla
cadeia de DNA, no se verifica a complementaridade de bases nucleotdicas (A-T; C-G).
MITOCONDRIAL (hereditariedade): Hereditariedade que tem por base os genes localizados nas
mitocndrias e que so transmitidos exclusivamente por via materna.
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MITOSE: Processo pelo qual as clulas eucariotas se dividem com manuteno do nmero normal de
cromossomas.
MONOCLONAL (tumor): Consiste num tumor em que as clulas constituintes tm origem numa
nica clula inicial. A caracterizao pode ser feita pela deteco da mesma alterao
citogentica em todas as clulas do tumor.
MONOGNICO: Caracter ou afeco causada por um s alelo ou um s par de alelos situados num
determinado locus.
MONMERO: Unidade constituinte de uma molcula polimrica (ver Oligmero).
MONOSSOMIA: Presena, nas clulas, de uma nica cpia de um par cromossmico, em vez de duas.
MONOSSOMIA PARCIAL: Condio em que falta parte de um cromossoma, pelo que existe apenas
uma cpia da extenso cromossmica em causa, num indivduo.
MONOZIGTICOS (Gmeos): Gmeos provenientes do mesmo zigoto, resultante da fecundao de
um nico vulo por um nico espermatozide; gmeos geneticamente idnticos.
MONTANTE (Sequncias de) (upstream): Sequncias de DNA localizadas a montante de um
determinado gene (direco 5, oposta da transcrio), envolvidas na regulao da sua
expresso. Em sentido oposto, ficam as sequncias de jusante (downstream).
MOSAICISMO: Presena no mesmo indivduo de duas ou mais linhas celulares provenientes de um
nico zigoto (mosaico), mas com gentipo ou caritipo diferente, resultantes de mutao
ou no-disjuno cromossmica (ver Quimera).
MOSAICISMO FISIOLGICO: (ver Lionizao).
MOSAICISMO GERMINAL (ou mosaicismo gonadal): Presena de duas ou mais populaes celulares
da linha germinal, geneticamente diferentes.
MULTIFACTORIAL (Hereditariedade): Caracter ou doena dependente da interaco de factores
ambientais mltiplos, com vrios genes localizados em diferentes loci (no confundir com
poligenia). Os traos multifactoriais podem ser descontnuos e contnuos.
MULTIPLICAO (lei): A lei da multiplicao em clculo de probabilidade decorre do facto de dois
acontecimentos serem independentes como acontece em relao ao risco de doena para
dois descendentes de um doente com uma condio mendeliana autossmica dominante,
em duas gravidezes sucessivas. Os acontecimentos que, na primeira gravidez, levam
segregao do alelo normal ou do alelo mutado no afectam o que acontece numa gravidez
subsequente, j que so factos independentes. Assim, se numa primeira gravidez, o risco de
transmitir o alelo mutado e de ter um filho doente de 1/2, tal probabilidade de 1/2 mantm-se numa segunda gravidez. A probabilidade de ter os dois filhos doentes igual ao produto
da probabilidade presente em cada uma das gravidezes, ou seja de 1/4 (1/2x1/2=1/4).
MUTAO: Toda a alterao permanente do genoma de uma clula em relao a uma sequncia de
DNA de referncia, transmissvel s clulas filhas. Pode dizer respeito a um nico nucletido
(ver Mutao pontual) ou ser mais extensa. Uma mutao que ocorre nos gmetas
hereditria; uma mutao que ocorre nas clulas somticas no hereditria.
MUTAO (Taxa de): Nmero de mutaes que ocorre num locus determinado, expresso por gene e
por gerao.
MUTAO DE NOVO: Mutao que aparece pela primeira vez num elemento de uma famlia, por
alterao ocorrida no DNA da clula germinal de um dos progenitores.
MUTAO FRAMESHIFT: Alterao da sequncia de bases de um gene, por deleo ou insero,
que conduz a modificao da grelha de leitura (a reorganizao da sequncia de bases
origina uma nova sequncia de codes). Habitualmente provoca o aparecimento prematuro
de um codo stop.
MUTAO MISSENSE: Mutao num codo, de que resulta a codificao para um aminocido
diferente do inicial, dando origem substituio de um aminocido na cadeia polipeptdica.
MUTAO LETAL: Mutao que no permite a sobrevivncia de uma clula ou organismo.
MUTAO NONSENSE: Qualquer mutao, seja por substituio de uma base ou por alterao do
agrupamento dos nucletidos em tripletos, que origine um codo de terminao (ver Codo
de terminao). A designao nonsense resulta do facto de no codificar para qualquer
aminocido.
MUTAO PONTUAL: Substituio de um nucletido por outro.

MUTAO SINNIMA: Mutao que se traduz pela substituio de uma base num codo, sem
alterar o aminocido que codifica, o que se deve degenerescncia do cdigo gentico
(ver Cdigo gentico).
MUTAO SOMTICA: Alterao do material gentico numa clula somtica. No hereditria,
embora se transmita a todas as clulas-filhas.
MUTAES DINMICAS: Dizem respeito alterao do nmero de tripletos repetitivos que se
encontram em determinadas regies do genoma. O aumento do nmero de tripletos ocorre
ao longo de geraes sucessivas. Quando o nmero de tripletos repetitivos ultrapassa um
limiar crtico, varivel para diferentes condies, a mutao torna-se patognico e h
manifestaes de doena. Ultrapassado o nmero limite patognico, a severidade da doena
pode aumentar em funo do aumento do nmero de unidades repetitivas e a idade de
aparecimento da doena pode ser mais precoce.
MUTAGNEO: Agente fsico, qumico ou biolgico capaz de aumentar a taxa de mutao, devido s
alteraes que provoca a nvel do DNA.
NO-DISJUNO: Situao em que as duas cromtides de um cromossoma metafsico no se separam
pelo centrmero, de modo a migrarem cada uma para o plo respectivo do fuso. O mesmo
pode ocorrer com os cromossomas homlogos durante a meiose. Origina alteraes
numricas dos cromossomas.
NICK TRANSLATION: Mtodo que permite a substituio de nucletidos numa dupla cadeia de
DNA, pelos mesmos nucletidos, mas marcados (v.g., radioistopo, biotina, fluorescena),
durante a reparao com polimerase do DNA, aps actuao da desoxirribonuclease.
As duas cadeias so marcadas por este processo.
NORTHERN BLOT: Mtodo utilizado para transferir fragmentos de RNA de um gel de agarose para
um suporte slido (nitrocelulose ou outro), para posterior hibridao.
NUCLEASES (ver Endonucleases): Enzimas que cortam a cadeia nucleotdica de DNA (designadas
como DNAses) ou de RNA (designadas como RNAses).
NUCLESIDOS: Unidades constitudas por um acar (ribose ou desoxiribose) e uma base azotada
(prica ou pirimdica).
NUCLEOSSOMA: Unidade base da cromatina, constituda por quatro pares de protenas histnicas e
uma extenso de 146 pares de bases da cadeia de DNA enrolados volta das histonas.
O grau de compactao do DNA linear devido ao enrolamento da cadeia nos nucleossomas
de seis vezes.
NUCLETIDOS: Molculas constitudas por um nuclesido e um grupo fosfato, cuja polimerizao d
origem cadeia de DNA (acar: desoxirribose) ou de RNA (acar: ribose).
NULISSOMIA: Ausncia dos dois membros de um par de cromossomas homlogos.
OLIGONUCLETIDOS: Molculas monocatenares de DNA que consistem numa sequncia curta de
nucletidos (a maioria das vezes com 20-30 nucletidos). So habitualmente usados para
PCR, sequenciao e como sondas.
OLIGMERO: polmero constitudo por um nmero reduzido de unidades (monmeros).
ONCOGENES: Sequncias de DNA resultantes da alterao quantitativa ou qualitativa de
protooncogenes, implicadas, de um modo dominante, na induo e/ou manuteno da
transformao celular.
ORF (open reading frame) (ver Grelha de leitura): Consiste na sequncia de nucletidos localizados
entre o codo iniciador e o codo terminador de um gene, capaz de codificar uma
cadeia polipeptdica. A definio exacta do nucletido em que se inicia a traduo do
RNAm essencial para definir a sequncia de codes que ir determinar a ordem dos
aminocidos no polipptido.
ORTLOGOS (genes): Dois genes homlogos de diferentes organismos que derivam de um gene
inicial, por especiao (so ramos da evoluo filogentica).
p: Brao curto de um cromossoma.
PALNDROMA: Extenses de DNA que contm a mesma sequncia 5 3 nas duas cadeias
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complementares (v.g., 5 GAATTC 3 / 3 CTTAAG 5). Constituem locais de reconhecimento

das enzimas de restrio tipo II.
PANMIXIA: Unies (ou casamentos) feitos ao acaso.
PARACRINIA: Produo por uma clula, de hormonas, factores de crescimento ou outras substncias
cujas clulas alvo se encontram na sua vizinhana.
PARLOGOS (genes): membros de uma famlia de genes presentes num mesmo organismo, que
derivam de um gene inicial por duplicao, seguida de divergncia.
PARENTESCO (grau de): Forma de indicar a proximidade gentica entre dois indivduos, pela proporo
de genes idnticos que possuem, herdados de um mesmo ancestral (v.g., os familiares em
primeiro grau tm 50% dos genes idnticos (pais/filhos e irmos), enquanto que os familiares
em segundo grau (tios/sobrinhos) tm 25% dos genes idnticos).
PARTENOGNESE: Segmentao do ovcito em blastmeros, sem fecundao prvia.
PASSO: Nos clculos de consanguinidade, um passo representa uma gerao. Entre duas pessoas
consecutivas da linha que liga dois indivduos consanguneos conta-se um passo.
PCR (Polymerase Chain Reaction): Reaco de polimerizao em cadeia utilizada para amplificar
determinadas sequncias de DNA. So usadas duas sequncias oligonucleotdicas de DNA
flanqueadoras, como iniciadoras da replicao (primers) e recorrendo a uma polimerase
do DNA fazem-se replicaes sucessivas da sequncia de DNA inicial.
PENETRNCIA: Traduz a frequncia da expresso fenotpica de um determinado gene numa populao.
quantificada em percentagem (razo percentual entre o nmero de indivduos que exprime
o gene e o nmero de indivduos da populao que efectivamente o transporta no seu
genoma). A ausncia de penetrncia a ausncia de expresso do gene no fentipo,
embora o gene exista no genoma. H penetrncia completa (100%) quando o gene se
manifesta sempre que est presente. A penetrncia incompleta pode ser elevada ou baixa.
Nos casos de baixa penetrncia podero estar em causa variaes subtis da sequncia de
DNA ou polimorfismos que concedem um aumento pequeno ou moderado do risco relativo
para o caracter ou doena em causa.
PIRIMIDINAS: Bases azotadas dos cidos nucleicos: timina no DNA; uracilo no RNA; citosina no DNA
e no RNA.
PLACA EQUATORIAL: Regio que durante a mitose corresponde zona mdia do fuso, em que se
dispem os cromossomas durante a metafase.
PLASMDEO: Molcula de DNA circular, bicatenar, com capacidade de replicao autnoma no
citoplasma de uma bactria especfica. Usado como vector para a clonagem do DNA.
PLEIOTROPISMO: Situao em que um nico gene influencia vrios aspectos do fentipo,
aparentemente no correlacionados.
PLOIDIA: Nmero de cromossomas numa clula (ver Haploidia, Euploidia, Aneuploidia e Poliploidia).
POLIADENILAO: (ver Processamento do RNAm).
POLIALELIA: Existncia de vrios alelos numa populao, que concorrem para um nico locus.
O gentipo de cada indivduo consiste num dos pares de alelos resultantes das combinaes
possveis entre o total de alelos.
POLICLONAL (tumor): Consiste num tumor em que as clulas constituintes tm origem em mais do
que uma clula inicial. A caracterizao pode ser feita pela deteco de diferentes alteraes
citogenticas, em clulas pertencentes ao mesmo tumor.
POLIGENIA: Situao em que um caracter ou doena determinado por vrios genes localizados em
loci diferentes, com efeitos aditivos (ver Multifactorial).
POLIMERASES (do DNA): Enzimas que, a partir de uma sequncia de iniciao (primer), sintetizam
DNA, a partir de um molde (template) de DNA, por incorporao de nucletidos na
extremidade 3 da nova cadeia de DNA.
POLIMERASES (do RNA): Enzimas que catalisam a produo de RNA, a partir de um modelo de DNA.
POLIMORFISMO (gentico): Ocorrncia simultnea, numa mesma populao, de duas ou mais formas
alternativas de um gene ou de uma sequncia de DNA no codificador, em tais frequncias
que o mais raro no pode ser mantido apenas por mutao. Nenhum dos alelos raro,
ocorrendo com uma frequncia de, pelo menos, 0,01 (1%). Os polimorfismos instalam-se
por seleco dos portadores, face vantagem que concedem em determinadas condies
ambientais. Num determinado momento, pela diversidade que concedem, podem ser
recursos para a sobrevivncia das espcies vivas, na sua adaptao a alteraes ambientais.
POLIMORFISMO INFORMATIVO: Diz-se de um marcador polimrfico que apresenta heterozigotia.
A heterozigotia permite distinguir os dois alelos e seguir o trajecto de um gene ou doena
hereditria numa determinada famlia. Quando os dois membros de um casal so
heterozigticos para um determinado locus, o marcador polimrfico inteiramente
informativo.
POLIMORFISMO EQUILIBRADO: Polimorfismo que mantido pela vantagem selectiva concedida pela
condio heterozigtica em comparao com as condies homozigticas (para a forma normal ou mutada do gene) e a aptido mais reduzida dos indivduos homozigticos para
sobreviverem e se reproduzirem (v.g., nas regies estabilizadas para a endemia de malria, a
forma allica para a hemoglobina S (HbS, responsvel pela anemia de clulas falciformes) tem
uma elevada frequncia, devido proteco que concede contra a malria nos heterozigotos).
POLIMORFISMO NEUTRO: Polimorfismo gentico que no afecta a aptido para a sobrevivncia ou a
reproduo.
POLIMORFISMO DE NUCLEOTDEO NICO (SNP): Polimorfismo devido substituio de um nico
nucletido.
POLIMORFISMO TRANSITRIO: Condio em que a frequncia de um alelo polimrfico se altera,
sendo substitudo por outro alelo que d vantagem biolgica superior (v.g., em populaes
em que a malria deixou de existir, a frequncia do alelo que codifica HbS tem vindo a
diminuir, assumindo, nestas condies ambientais, o comportamento de um polimorfismo
transitrio).
POLIPLOIDIA: Presena de um nmero de cromossomas mltiplo do nmero haplide de cromossomas,
mas diferente de dois; por ex.: 3n, 4n, ou seja, 69, 92, etc.
POLISSOMIA: Situao em que numa clula ou clulas de um organismo diplide existem mais do
que dois homlogos de um par de cromossomas, mantendo-se normalmente a diploidia
para os restantes pares de homlogos (ver Trissomia).
POPULAO: Grupo de organismos de uma mesma espcie que vivem num determinado espao.
PORTADOR (Carrier): Indivduo saudvel que possui um gene mutado na forma heterozigtica, ou
uma translocao ou inverso cromossmica equilibrada.
PORTADOR OBRIGATRIO: Indivduo saudvel sobre o qual se pode afirmar que portador de
determinado alelo mutado (uma vez excludas as relaes extra-conjugais), face aos
elementos da famlia que expressam a doena ou caracter associado a essa forma allica
(v.g., a me e as filhas de um homem com uma doena recessiva ligada ao cromossoma X,
como a hemofilia; a me e as filhas so heterozigticas obrigatrias).
PREDISPOSIO GENTICA: Factor ou conjunto de factores de natureza gentica que predispe para
uma determinada patologia ou patologias ou que, pelo contrrio, protege o seu portador
de determinada patologia ou patologias.
PREVALNCIA: Nmero total de casos de uma doena ou caracter existente numa populao num determinado
momento. A taxa de prevalncia refere-se ao nmero total de casos por mil indivduos.
PR-MUTAO: Uma alterao num gene, clinicamente insignificante, que predispe para uma
subsequente mutao completa.
PRIO: Pequena partcula infecciosa, de natureza proteica, que resiste inactivao pelos processos
que modificam os cidos nucleicos.
PRIMEIRO GRAU (Familiares em): Os familiares mais prximos (v.g., pais, filhos e irmos), com uma
identidade gnica de 50%.
PRIMER (SEQUNCIA DE INICIAO): Oligonucletido curto de DNA ou de RNA, complementar
para o incio duma sequncia nucleotdica e que serve de ponto de partida para esta ser
copiada por uma polimerase de DNA. Na medida em que no genoma humano, uma
sequncia com 17 ou mais bases nucleotdicas tem a probabilidade de apenas surgir uma
vez, para primers curtos com um nmero de nucletidos superior a 17, de esperar
uma hibridao com especificidade para a sequncia de DNA que se deseja.
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PROBABILIDADE: Proporo de vezes que, numa srie de ensaios, se espera que ocorra um determinado
acontecimento.
PROBANDO: O mesmo que caso index, propositus ou consultando. Indivduo que procura a
consulta de Gentica para aconselhamento e que, pela primeira vez, chama a ateno
para uma famlia. O heredograma feito a partir do probando.
PR-CARCINOGNEO: Molcula que requer metabolismo prvio para se transformar em carcinogneo.
PROCARIOTA: Organismo unicelular que no tem membrana nuclear. As bactrias e as arquibactrias
so procariotas.
PROCESSAMENTO (do RNAhn): Processo de maturao do transcrito primrio de RNA constitudo
pelo capping, splicing e poliadenilao.
O capping consiste na adio de guanosina metilada ao terminal 5 da cadeia de RNAm.
reconhecido pelos ribossomas como o sinal de iniciao para a sntese proteica.
O splicing consiste na remoo intranuclear das sequncias de intres do RNAhn de
modo a formar o RNAm, por juno dos exes. Quando se verifica splicing alternativo,
ocorre seleco de diferentes sequncias de exes a partir do mesmo RNAhn, o que origina
diferentes RNAm que codificam polipeptdeos diferentes, a partir do mesmo gene.
A poliadenilao consiste na adio de uma sequncia de nucletidos de adenina
(20-200) ao terminal 3 do RNAm.
PROFASE: Estdio inicial da mitose em que a cromatina inicia a sua condensao, dando origem aos
cromossomas j visveis no final da profase, altura em que a membrana nuclear se fragmenta.
Formam-se as estruturas do fuso. Na profase I da meiose, constituda pelos estdios
leptteno, zigteno, paquteno, diplteno e diacinese, formam-se os cromossomas divalentes
por emparelhamento dos cromossomas homlogos (cada um com duas cromtides),
condensao e estabelecimento dos quiasmas.
PROMOTOR (da transcrio): Sequncia de DNA a que se liga a polimerase do RNA, para ter incio a
transcrio. Encontra-se a montante do local de incio da transcrio do gene, em posio
muito prxima (v.g., a sequncia promotora identificada como TATA box esta localizada a
uma distncia de 10 bp). A posio das sequncias promotoras determina onde comea a
transcrio e qual a cadeia de DNA que escolhida como modelo.
PROPOSITUS (fem.: proposita): Indivduo que chama a ateno de um mdico para o estudo da
famlia e a partir do qual elaborado o heredograma.
PROTANOPIA: Incapacidade de detectar a cor vermelha devido a deficincia das protenas absorventes
de luz (opsinas), por uma parte dos cones da retina. Estes indivduos so dicromticos j
que tm percepo para o verde e o azul.
PROTEOMA: Total de protenas codificadas pelo genoma.
PROTOONCOGENES: Genes celulares normais implicados na regulao da proliferao e da
diferenciao celular, altamente conservados durante a evoluo filogentica. Embora em
nmero elevado, podem ser agrupados funcionalmente em quatro grupos, de acordo com
a aco desempenhada pelas molculas que codificam: factores de crescimento; receptores
para os factores de crescimento; transductores de sinais; factores de transcrio.
PROVRUS: Sequncia de DNA capaz de se integrar no genoma de uma clula, resultante da transcrio
inversa do genoma de um retrovrus durante a fase de infeco e replicao. transcrito
em RNA virusal e tambm em RNAm que codifica as protenas oncognicas e as protenas
do vrus.
PSEUDOAUTOSSMICAS: Regies do cromossoma X e do cromossoma Y que contm genes
homlogos e emparelham e sofrem recombinao durante a meiose.
PSEUDODIPLOIDIA: O nmero de cromossomas diplide, mas h anomalias a nvel do caritipo,
devidas a rearranjos cromossmicos ou perda de cromossomas e duplicao de outros.
PSEUDOGENES: Formas inactivadas de genes que tero sido funcionais durante a evoluo filogentica,
mas que, devido a uma ou mais mutaes ou a perda da sequncia promotora, no so
passveis de expresso. Tm uma elevada semelhana com genes conhecidos.
PSEUDO-HERMAFRODITA: Indivduo que apenas possui um tipo de tecido gondico, masculino ou

feminino. Um pseudo-hermafrodita masculino possui testculos e um fentipo feminino.
Um pseudo-hermafrodita feminino possui ovrios e um fentipo masculino.
PURINAS: Bases azotadas dos cidos nucleicos: adenina e guanina no DNA e no RNA.
q: Brao longo de um cromossoma.
QTLs: (quantitative trait loci): Loci subjacentes a traos multifactoriais complexos (ver Trao quantitativo).
QUIASMAS: Locais pelos quais as cromtides de cada par de cromossomas homlogos se mantm
em contacto nas figuras bivalentes, apesar de estarem separadas noutras regies, e onde
ocorre a troca de partes homlogas, entre as cromtides de cada um dos cromossomas
homlogos (ver Entrecruzamento).
QUIMERA: Indivduo que possui clulas provenientes de dois zigotos diferentes.
RASTREIO (gentico): Estudo em larga escala para despitagem dos elementos de uma populao de
forma a identificar os que esto em risco de desenvolver ou de transmitir uma doena.
RECESSIVO: Gene ou caracter que s se manifesta em homozigotia ou em hemizigotia.
RECOMBINAO: Troca de material gentico entre regies homlogas de um par de cromossomas
homlogos, durante a diviso celular (mitose ou meiose).
RECOMBINANTE (de DNA): Resulta da insero artificial, para efeito de clonagem gnica, de uma
sequncia de DNA de um organismo no genoma de outro (vector).
RECORRNCIA: repetio de uma condio.
REGIES DE COLORAO HOMOGNEA (hsr, Homogeneous staining regions): Expresso
citogentica de amplificao gnica somtica, traduzida em extenses anormais de um
cromossoma com a mesma intensidade de colorao. Tm sido relacionadas com
fenmenos de aquisio de resistncia quimioterapia, em clulas neoplsicas (ver
Microcromossomas).
RECORRNCIA (risco): Probablidade de se repetir em prxima gestao, uma condio j observada
num ou mais descendentes de um casal.
REPLICAO (de DNA): Produo de duas cadeias duplas de DNA, a partir de uma cadeia dupla
inicial, por complementaridade de bases.
RETROTRANSPOSO: Molcula de DNA que se pode transpor de um local do genoma para outro
local desse mesmo genoma, mediante transcrio inicial em RNA, a que se segue a formao
de cDNA e a recombinao deste com o DNA genmico. Um retrotransposo tem uma
existncia unicamente intracelular. Codifica transcriptase inversa.
RETROVRUS: Vrus de RNA, capaz de codificar uma transcriptase inversa. Replica atravs de uma
fase intermdia com produo de DNA complementar e insero deste no DNA da clula
hospedeira.
RETROVRUS DE TRANSFORMAO AGUDA (Acute transforming retrovrus): Vrus que integrou
no seu genoma sequncias originrias de um genoma hospedeiro (sequncias virusais
oncognicas) e que lhe permitem provocar a formao rpida de tumores ou a transformao
de clulas em cultura.
RFLPs (Restriction Fragment Length Polymorphism): Variao, entre indivduos, do comprimento
dos fragmentos de DNA obtidos com enzimas de restrio. Resulta de alteraes da
sequncia de nucletidos do DNA, que ocorrem, normalmente, cerca de uma vez em cada
cem pares de bases e que podem alterar o stio de restrio identificado pela nuclease
utilizada. uma condio herdada de forma mendeliana, que pode ser usada nos estudos
de ligao gnica.
RIBOZIMA: Pequena molcula de RNA com actividade enzimtica, capaz de clivar alvos especficos de
uma sequncia de RNA, por destruio da ligao fosfodiester.
RISCO: Probabilidade de ocorrncia de um acontecimento particular.
RISCO ABSOLUTO: Traduz a probabilidade dos consulentes virem a ter uma determinada doena num
determinado perodo de tempo, por aco de um determinado factor de risco especfico.
RISCO EMPRICO: No mbito da Gentica, traduz o risco de recorrncia para alteraes de natureza
polignica ou multifactorial baseado nos dados colhidos da experincia prtica nos membros
de uma populao, e no em clculos assentes em princpios tericos gerais.
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RISCO RELATIVO (caractersticas monognicas): risco dado pelo quociente entre a probabilidade de
ocorrncia de determinada doena ou caracter devido presena de um gentipo
predisponente e a probabilidade de ocorrncia da mesma condio nos indivduos da
populao sem aquele gentipo.
RNA: cido ribonucleico. Estrutura unicatenar constituda pela sequncia dos ribonucletidos de
adenina (A), guanina (G), citosina (C) e uracilo (U), unidos por ligaes diester de fosfato.
H trs grupos principais de RNA: RNA mensageiro (RNAm) que corresponde a 5% do RNA
celular e em que a ordem dos codes assegura a sequncia de aminocidos para a sntese
de uma cadeia polipeptdica; RNA de transferncia (RNAt) que assegura a correspondncia
entre os codes e os aminocidos e corresponde a 15% do RNA celular; RNA ribossmico
(RNAr) que representa 80% do RNA celular e participa na constituio dos ribossomas.
Para alm destes tipos de RNA, h ainda pequenas molculas de RNA nuclear que participam
na juno dos exes de RNA e pequenas molculas de RNA citoplsmico que participam na
sinalizao de protenas sintetizadas.
Logo aps a transcrio, ainda dentro do ncleo, o RNA designa-se por RNA heterogneo
(RNAhn), sendo constitudo por sequncias resultantes da transcrio dos exes e dos intres.
O RNAhn, aps processamento, origina o RNAm.
SATLITES: Pequenos segmentos de cromatina em posio distal em relao constrio secundria,
localizados nos braos curtos dos cromossomas acrocntricos.
SCE (Sister Chromatid Exchange): Troca recproca de material cromossmico entre cromtidesirms (as duas cromtides resultantes da replicao do DNA, na fase S do ciclo celular).
SEGREGAO: Em Gentica, significa separao dos dois alelos de um locus durante a meiose.
Uma vez que um par de alelos ocupa as duas posies de um locus (uma posio em cada
cromossoma homlogo), cada alelo passa para um gmeta diferente.
SELECO NATURAL: Processo evolutivo assente em gentipos que criam vantagem reprodutiva
para os seus portadores e, consequentemente, um maior nmero de descendentes.
SELVAGEM (gene; wild type gene): Forma do gene que se encontra habitualmente na natureza.
SENSE (cadeia) (ver Antisense): Cadeia do DNA que num gene apresenta a mesma sequncia
nucleotdica do RNAm (neste, com substituio da base timina por uracilo) e que corresponde
sequncia codificadora.
SEQUNCIA: No mbito dos defeitos congnitos dismrficos, refere-se ao conjunto de alteraes
funcionais ou defeitos estruturais que ocorrem como consequncia de uma nica anomalia
inicial, seja uma malformao, uma disrupo ou uma deformao (v.g., sequncia de
Potter: a agenesia renal ou obstruo uretral origina oligomnios que provoca deformaes
fetais secundrias e hipoplasia pulmonar com dificuldade respiratria).
SEQUENCIAO DE DNA: Determinao da ordem pela qual se encontram as bases pricas e
pirimdicas num fragmento de DNA.
SEXO (Influenciado pelo): Designa as situaes em que a expresso de determinados traos
autossmicos ocorre mais frequentemente num sexo que no outro (v.g., gota e calvcie no
sexo masculino).
SEXO (Ligado ao): Designao que se refere aos traos ou caracteres determinados por genes localizados
nos cromossomas sexuais (X ou Y) (v.g., DMD e hemofilia no cromossoma X).
SEXO (Limitado ao): Situaes raras em que determinados traos genticos autossmicos se verificam
apenas num sexo (v.g., hidrometrocolpos, no sexo feminino).
SILENCIADORES (silencers): Sequncias de DNA que, por ligao de factores de transcrio
especficos, reduzem ou anulam a expresso de um gene (elementos reguladores negativos).
SNDROMA: Conjunto de sinais e sintomas, mas tambm de alteraes funcionais ou bioqumicas
que ocorrem em associao uns com os outros. A caracterizao de uma sndroma pode
no identificar a causa, mas reduz o nmero de possibilidades. Numa sndroma h um
espectro fenotpico, ou seja o total de anomalias que a caracterizam. Habitualmente, no
esto presentes todas as manifestaes fenotpicas da sndroma, num mesmo indivduo,
sendo tambm frequente observar variao da intensidade da expresso de uma ou mais
das manifestaes.
SNDROMA POLIMALFORMATIVA: Grupo de anomalias primrias que ocorrem num indivduo, que
constituem um padro que se repete em diversos indivduos e que se pensa estarem
relacionadas patogenicamente.
SINTNICOS (Genes): Genes cujos loci se encontram no mesmo cromossoma, podendo ou no estar
em ligao.
STIO FRGIL (Fragile site): Regio cromossmica com tendncia para sofrer fracturas. Apresenta-se como um hiato que no cora e que envolve habitualmente as duas cromtides, sempre
precisamente o mesmo em todas as clulas de um indivduo ou na sua descendncia,
herdado de um modo mendeliano codominante e detectvel em condies apropriadas
de cultura in vitro (meio pobre em cido flico), pela produo de fragmentos acntricos,
cromossomas com delees e figuras multirradiais.
SNPs (ver Polimorfismo de nucleotdeo nico).
SOMTICO: Diz respeito s clulas, estruturas e processos encontrados num indivduo, excludas as
clulas germinais.
SONDA (Probe): Sequncia de cidos nucleicos (DNA ou RNA) marcada por radioactividade, peroxidase ou luminescncia, que serve para localizar determinadas sequncias de DNA, por
complementaridade (hibridao). H sondas genmicas, de cDNA, de RNA e
oligonucleotdicas (obtidas por sntese de DNA). A designao de uma sonda obedece na
sua nomenclatura indicao do grupo de cromossomas e do cromossoma especfico a
que se destina, bem como do locus com que hibrida (v.g., D15S10: sonda destinada ao
locus 10, do cromossoma 15).
SOUTHERN BLOT: Mtodo descrito pela primeira vez por E. Southern, utilizado para transferir
fragmentos de DNA de um gel de agarose ou poliacrilamida, para um suporte slido
(nitrocelulose ou outro), permitindo a posterior hibridao.
SPLICING: (ver Processamento do RNAhn).
SPLICING ALTERNATIVO: (ver Processamento do RNAhn).
SSCP (single strand conformation polymorphism): Polimorfismo devido a variao da sequncia de
uma cadeia nica de DNA que origina alterao conformacional secundria e altera a
velocidade de migrao por electroforese em gel no desnaturante.
STRs (short tandem repeats): Curtas sequncias nucleotdicas repetitivas (microssatlites ou
minissatlites) que se encontram no DNA. Os STRs so bons marcadores polimrficos para
estudos de ligao gnica, devido ao seu elevado polimorfismo.
STSs (sequence tagged sites): Regies nicas de DNA, de pequena extenso, para as quais esto
disponveis pares de primers para fazer PCR, que podem ser usadas como marcadores para
o mapeamento do DNA ou para a localizao de genes, particularmente na clonagem posicional.
SUBMETACNTRICO: Cromossoma cujo centrmero se situa entre o meio do cromossoma e uma das
extremidades, embora distante desta (variante entre acrocntrico e metacntrico)
(cromossomas 2, 4-12, 17, 18 e X).
SUPERGENE: Refere-se a uma srie de genes que controla, habitualmente, aspectos relacionados de um
fentipo, que esto em ligao prxima num mesmo cromossoma e que conferem vantagem
biolgica quando herdados em conjunto. Pode, contudo, ocorrer crossing-over ocasional.
TANDEM REPEAT (unidade repetitiva): Pequena sequncia de DNA que se repete como mltiplas
cpias adjacentes, com a mesma orientao, na cadeia de DNA.
TAUTOMERISMO: Modificao espontnea do ismero estrutural de uma molcula (v.g., uma base
nucleotdica) para outro ismero devido mudana reversvel da posio de um proto.
Ao poder alterar a especificidade do emparelhamento entre as bases, pode-se constituir
em mecanismo mutagnico do DNA.
TELOCNTRICO: Cromossoma com centrmero numa das extremidades. No existe normalmente na
espcie humana.
TELOFASE: Estdio da mitose em que as cromtides (23 pares de cromtides homlogas para cada
plo) atingem os plos do fuso e comeam a descondensar, a membrana nuclear
restabelecida e comea a citocinese. Na telofase I da meiose, encontra-se em cada plo do
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fuso um nmero haplide de cromossomas, cada um com duas cromtides. A telofase da

meiose II semelhante da mitose.
TELMEROS: Extremidades dos cromossomas. A sua estrutura apresenta uma sequncia semelhante
em todos os cromossomas (TTAGGG) que se repete milhares de vezes. A sua funo
facilitar a replicao do DNA nas extremidades dos cromossomas e manter a estabilidade
dos cromossomas. Em cada ciclo de replicao do DNA, os telmeros sofrem um
encurtamento. O acumular dos sucessivos encurtamentos funciona como relgio biolgico
que determina o momento em que uma clula normal deixa de se dividir.
TEMPO DE DUPLICAO (de uma populao celular ou tumor): Tempo que uma populao celular
ou tumor demora para duplicar o seu nmero e a sua massa.
TEMPO DE GERAO CELULAR (Cell generation time): Intervalo entre a diviso de uma clula e a
diviso das clulas-filhas.
TERAPIA GNICA: Procedimento destinado a curar uma doena de natureza gentica, por integrao,
em clulas do organismo, de uma cpia normal de um gene mutado ou em falta, ou por
modulao da expresso gnica. A terapia gnica somtica atinge apenas as clulas
somticas. A terapia gnica germinal altera o genoma das clulas germinais.
TERATOGNEO: Agente ou factor que pode causar anomalias de forma e funo (defeitos congnitos)
num embrio ou feto que esteja exposto sua aco, por perturbao do seu desenvolvimento normal.
TESTE GENTICO: Procedimento analtico dirigido para a caracterizao de um gene especfico, do
produto que codifica ou da sua funo, ou para o estudo de outro tipo de DNA ou
cromossomas, em qualquer dos casos destinado a detectar ou excluir a presena de uma
alterao associada a doena ou anomalia de natureza gentica, que pode ser transmitida
descendncia.
TESTE GENTICO (pr-sintomtico ou predizente): Estudo gentico feito em indivduos sem
manifestaes de doena (sem sinais, nem sintomas). Permite identificar os portadores de
uma forma mutada de um gene que, com grande probabilidade, seja patognica em idade
posterior ao momento de realizao do teste, ou para os descendentes.
TIMINA (abreviatura: T): constitui uma das quatro bases que integram o DNA.
TRADUO: Sntese de uma protena, a nvel ribossmico, a partir da sequncia de RNAm.
TRAO: Qualquer caracterstica determinada por um gene.
TRAO QUANTITATIVO: Caracterstica que pode ser medida numa escala contnua (v.g., altura, peso).
Resulta da aco combinada de vrios genes e de factores ambientais.
TRANS: Refere-se a genes localizados em cromossomas opostos de um par, ou a uma aco num
cromossoma que exercida por um factor. O cromossoma em que se exerce o efeito trans
difere daquele em que se encontra o locus que codifica o factor em causa.
TRANSCRIO (do DNA): Produo de RNAm a partir da cadeia anti-sense do gene, pela polimerase
do RNA.
TRANSCRIO (factores): Protenas envolvidas na regulao da transcrio do RNAm.
TRANSCRIPTASE INVERSA: Enzima capaz de utilizar RNA como molde para sintetizar DNA (cDNA).
A transcriptase inversa uma polimerase de DNA.
TRANSCRIPTOMA: Total de RNAm transcrito a partir de um genoma.
TRANSDUO: Aquisio e transferncia de sequncias celulares eucariotas por um retrovrus, de
modo a que passem de uma clula para outra.
TRANSFEO (de clulas eucariotas): Transferncia de DNA estranho para clulas eucariotas, por
meios fsicos ou virusais, com a finalidade de ser integrado no seu genoma.
TRANSFORMAO BACTERIANA: Aquisio de novos marcadores genticos por bactrias, devido
incorporao de DNA adicional.
TRANSFORMAO CELULAR: Processo subjacente converso de uma clula normal, numa clula
imortalizada com capacidade tumorignica. Geralmente, a transformao celular resulta
da cooperao entre produtos oncognicos que funcionam como factores de crescimento
e produtos oncognicos pertencentes aos outros grupos (ver Protooncogenes).
TRANSGNICO (animal): Animal em que todas as clulas so portadoras de material gentico estranho
espcie, passvel de transmisso descendncia por se encontrar tambm nas clulas
germinais.
TRANSIO: Mutao que consiste na substituio de uma base prica por outra base prica ou de
uma pirimdica por outra pirimdica.
TRANSLOCAO: Mecanismo de rearranjo cromossmico, pelo qual uma parte de um cromossoma
se muda para outro cromossoma.
TRANSLOCAO EQUILIBRADA: Tipo de translocao em que no h perda ou ganho de material
cromossmico no portador. O portador de uma translocao equilibrada no evidencia
alteraes fenotpicas associadas anomalia cromossmica, embora possa ter descendentes
afectados.
TRANSLOCAO RECPROCA: Designa a condio em que h troca de fragmentos entre dois
cromossomas no homlogos.
TRANSLOCAO ROBERTSONIANA: Ocorre entre dois cromossomas acrocntricos por fuso dos
braos longos pelo centrmero e perda dos braos curtos.
TRANSPOSES (ou Jumping genes): so sequncias de DNA capazes de se replicarem, de se auto-excisarem e de se inserirem numa posio cromossmica diferente.
TRANSVERSO: Mutao que consiste na substituio de uma base prica por uma base pirimdica
ou vice-versa.
TRIPLETO: Sequncia de trs bases da molcula de DNA ou de RNA que codifica para um aminocido
especfico.
TRIPLOIDIA: Condio em que, na espcie humana, esto presentes 69 cromossomas (3n) devido
existncia de um conjunto haplide (n) supranumerrio de cromossomas, em vez do nmero
diplide (2n) (ver Diplide e Haplide).
TRISSOMIA: Presena de um cromossoma supranumerrio, numa clula ou clulas de um organismo
diplide. O nmero de cromossomas de 2n+1.
TRISSOMIA PARCIAL: Presena supranumerria de uma determinada extenso de um cromossoma,
para a qual se encontram trs cpias num indivduo.
TRONCO COMUM: Pessoa de quem descendem dois indivduos consanguneos.
UNIDADES REPETITIVAS (Tandem repeats): Srie de mltiplas cpias de uma mesma sequncia de
DNA, dispostas umas a seguir s outras no mesmo cromossoma.
VALOR PREDITIVO (teste gentico): O valor preditivo explicita a proporo de indivduos com doena
entre os que tm um resultado positivo para um determinado teste.
VECTOR: Um plasmdeo, fago, cosmdeo, BAC ou YAC, no qual possvel inserir sequncias de DNA
estranho, para proceder sua clonagem.
VILOSIDADES (bipsia das): Processo para obteno de clulas das vilosidades corinicas destinadas
realizao de DPN precoce, ou seja entre as 9 e as 12 semanas de gravidez.
VNTRs (Variable Number of Tandem Repeats): Polimorfismos de comprimento resultantes do nmero
varivel de vezes que uma sequncia de DNA se repete. So sequncias curtas, com cerca
de 20 bp, que se repetem uma a seguir outra. O comprimento das sequncias repetitivas
pode variar entre os indivduos, pelo que, sendo uma condio herdada de uma forma
mendeliana, pode ser usada nos estudos de ligao gnica.
WESTERN BLOT: Tcnica utilizada para transferir protenas de um gel para um suporte slido, para
detectar protenas habitualmente por mtodos imunolgicos.
YAC (Yeast artificial chromosome): Cromossoma artificial construdo com regies centromricas e
telomricas dos cromossomas da levedura, por forma a permitir a insero de grandes
fragmentos de DNA heterlogo (maiores do que 100 kb), mantendo a sua capacidade de
replicao.
ZIGOTO: Clula diplide resultante da fecundao de um gmeta feminino haplide por um gmeta
masculino tambm haplide, seguida de fuso dos pr-ncleos.
ZINC-FINGER (protenas): Protenas implicadas na regulao da transcrio que se ligam ao DNA,
por meio de estruturas semelhantes a dedos e que ligam um tomo de zinco.
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ZOO BLOT: Metodologia usada para identificar sequncias de DNA que se tenham conservado ao
longo da evoluo filogentica. Uma sequncia de DNA humano, por exemplo, utilizada
como sonda e posta em condies de hibridao com amostras de DNA de outras espcies
animais.
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487
NDICE REMISSIVO
Acatalsia, 219
Acetiltransferases, 216
cido flico, 228
cido retinico, 346
Aconselhamento gentico, 290, 417
etapas, 418
indicaes, 418
regras bsicas, 419
pr-concepcional, 424
pr-implantatrio, 425
pr-matrimonial, 423
pr-natal, 427, 428
Adenosina desaminase (dfice), 412
Adenovrus, 407
Aductos, 364
-fetoprotena, 293
1-antitripsina (deficincia), 228
Agregao familiar, 109, 141
Alcaptonria, 204
lcool, 222, 346
Alcoolismo, 147, 222
Aminoglicosdeos, 211
Amniocentese, 290, 427
Amplificao gnica, 31, 356
Anafase, 236
Androgneos, 346
Anemia de Fanconi, 65
Aneuploidia, 265
Antiepilpticos (gravidez), 349
major, 338
minor, 338
Anomalia congnita, 337

Antioncogenes, 357
Apoptose, 369
Associao, 340
Ataxia telangiectasia, 65, 367, 391
Atraso mental, 148
Atrofia muscular espinhobulbar, 162
Autonomia, 432
Autossoma, 244
BACs, 82
Bandas, 249
C, 251
G, 251
N, 251
Q, 251
R, 251
T, 251
Bases nucleotdicas, 14
Beneficncia, 434
Benzo(a)pireno, 213
-hCG livre, 293
Blastocisto, 310
Blastmeros, 310
Brao curto, 245
Brao longo, 245
Brometo de etdio, 85
Bromodeoxiuridina, 235
(CA)n, 46, 74
Cadeia antisense, 24
489
490
Cadeia sense, 24
Cadeias de DNA, 16
Clculo de probabilidades, 192
Calvcie, 135
Canais de Mller, 328
Canais de Wolff, 327
Cancro, 149, 377
da mama hereditrio, 390, 392
do clon, 146, 387, 393
doena de gnes, 371
hereditrio, 383
e susceptibilidade individual, 379
Capacidade informacional, 10
Carcinogneo, 214
Caritipo, 246
indicaes, 248
Clulas de Leydig, 327
Clulas multipotentes, 317
Clulas neoplsicas, 378
Clulas pluripotentes, 316
Clulas totipotentes, 316
Centimorgan, 77
Centrmero, 245
CHARGE, 340
Ciclinas, 238, 361, 366
Ciclo celular, 232, 368
Citogentica, 243, 253
Citomegalovrus, 346
Clonagem, 323
de DNA, 80
embrionria, 323
funcional, 78
posicional, 78
reprodutiva, 325
somtica, 323, 438
teraputica, 325
Cloroquina, 346
Cocana, 346
Codo, 27
Cdigo gentico, 27
Co-dominncia, 112
Coeficiente de consanguinidade, 174
Coeficiente de endocruzamento, 175
Colagneo, 39
Colchicina, 249
Colesterol, 40
Confidencialidade, 435
Congnito, 107
Conjugao bacteriana, 12
Consanguinidade, 168, 180, 181, 193
Consentimento informado, 386
Consulta de Gentica Tumoral, 381
seguimento de doentes, 384
Cor da pele, 137
Coreia de Huntington, 162
Cosmdeos, 82
Critrios de Amesterdo, 394
Critrios de Bethesda, 394
Cromatina, 36
de Barr, 321
Cromossoma, 18
acrocntrico, 245
em anel, 259, 272
Filadlfia, 255, 357
metacntrico, 245
submetacntrico, 245
Cromossomopatias, 281
Crossing-over, 42, 240
Curva bimodal, 137
Curva de Gauss, 138
Curva trimodal, 137
CYP450, 213
Debrisoquina hidroxilase, 214
Debrisoquina, 211
Defeitos do tubo neural, 227
Deficincia em G6PD, 119
Deformao, 341
Deleo, 270
intersticial, 259
terminal, 260, 271
Deriva gentica, 173
Desnaturao do DNA, 17
Diabetes mellitus, 149, 345
diacinese, 241
Diagnstico gentico, 422
pr-implantatrio, 425
pr-natal, 427
Diandria, 264
Dicntrico, 260
Dietilstilbestrol, 346
Diferenciao,
gonadal, 326
sexual masculina, 326
sexual feminina, 328
Digenismo, 160
Diidrotestosterona, 328
Diploidia, 264
Diplteno, 240
Dispermia, 264
Displasia, 342
Disrupo, 341
Dissomia uniparental, 161, 265
Distncia gentica, 76
Distrofia miotnica tipo 1, 162
Distrofia muscular de Duchenne, 122
mosaicismo, 195
Diversidade humana, 41
DNA, 14
B, 17
metilao, 35, 321, 359
Z, 17
Doena,
bipolar, 152
cardaca coronria, 151
das vacas loucas, 14
de Alzheimer, 150
de Charcot-Marie-Tooth, 128
de Creutzfeld-Jakob, 13, 133
de Gaucher, 209
de Machado-Joseph, 162
de Tay-Sachs, 424
grave, 443
multifactorial, 140, 196
Doenas (distribuio), 105
Doenas genticas (caractersticas), 106
Dominncia negativa, 59
Dosagem gnica, 58, 263
Drepanocitose, 171
Duas mutaes (hiptese), 361
Duplicao, 260, 273
Ecogentica, 220
Ecografia fetal, 428
Embrio, 308, 311
Embrioblasto, 310
Emparelhamento assimtrico, 53
Encefalopatia espongiforme, 13
Endocruzamento, 175
Endogomia, 174
Endonuclease, 61
Enzima de restrio, 71, 80
Epistasia, 134
Erros inatos do metabolismo, 204
Espermatcito tipo I, 266

Espermatognese, 319
Esquizofrenia, 153
Estenose hipertrfica do piloro, 145
Estreptomicina, 346
Estriol, 293
ESTs, 90
Estudos de adopo, 141
Estudos de associao, 68
Estudos de famlias, 141
Estudos populacionais, 140
tica, 431
mdica, 431
Eucromatina, 18
Eugenia, 441
Euploidia, 264
Exame objectivo, 97
Exo, 20
Exciso, 61
de bases (BER), 61
de nucletidos (NER), 61, 62
Expresso gnica, 31
Expresso tardia, 107
Expressividade varivel, 132
Factores de transcrio, 34, 354
Familiar, 107
Farmacogentica, 210
Favismo, 224
FCU, 128, 345
Fenformina, 211
Fenilalanina hidroxilase, 206
Fenilalanina, 206
Fenilalaninmia, 345
Fenilcetonria, 206
Fenobarbital, 211
Fenocpia, 135
Fentipo, 203
Feto, 308
Fibrose qustica, 117, 178, 413
FISH, 252, 253
Fitohemaglutinina, 248
Fluconazol, 346
Fosfodiesterase, 61
Fosforilao, 39, 361, 366
Fotoliase, 60
Fraco de recombinao, 76
Fragmentos de Okazaki, 22
491
Frequncia allica, 169, 176

Frequncia genotpica, 177
Frutose, 225
Fumo do tabaco, 347
492
G6PD (deficincia), 217, 224

Galactosmia, 226
Gastrulao, 312
Gmeos, 321
dizigticos, 142, 322
monozigticos, 142, 322
siameses, 322
Gene(s), 20
APC, 387
AR, 133
BRCA1, 132, 391
BRCA2, 391
da globina, 49
DAX-1, 330
de metabolismo, 365
de reparao do DNA, 364
ERBB2, 353
FGFR2, 133
FMR1, 163, 421
hbridos, 53
hometicos, 314
HOX, 315
MDM, 361, 368
MYC, 355
NF1, 20
ortlogos, 90
parlogos, 90
PRNP, 133
PTEN, 364
RAS, 353
RB, 360
SHH, 316
SOX9, 330
SRY, 4, 327, 328
suicidas, 414
TP53, 31, 59, 362
WT1, 36, 37
Gentica de populaes, 167
Gentica, 1
Genoma, 19
haplide, 19, 68
humano, 19
mitocondrial, 21
sequenciao, 5, 87
Glutationa S-transferases, 215
Gonadotrofina corinica humana, 311
Grelha de leitura, 24
Grupos sanguneos, 44, 134
Guthrie, 208
Halotano, 211
Haplo-insuficincia, 58
Hardy-Weinberg (equilbrio), 170, 178
Hayflick (limite), 371
Helicase, 22
Hemizigotia, 108
Hemocromatose, 227
Hemofilia A, 179, 200
Hemoglobina S, 171
Hereditabilidade, 142, 143
Hereditariedade, 107
autossmica dominante, 111
autossmica recessiva, 114
dominante ligada ao X, 123
ligada ao cromossoma Y, 124
mitocondrial, 155, 196
multifactorial, 138
multifactorial (critrios), 144
polignica, 137
recessiva ligada ao X, 119
Heredograma, 98
simbologia, 100
Hermafroditismo verdadeiro, 332
Herpes simplex, 347
Herpes zoster, 347
Heterocromatina, 18
Heterocromossomas, 244
Heterogeneidade allica, 133
Heterogeneidade gnica, 128
Heteromorfismos, 244
Heteroplasmia, 155, 196, 323
Heterozigotia, 108
constitucional, 358
Hibridao, 468
de clulas somticas, 89
genmica comparativa, 254
in situ, 89, 251
Hidantona, 347
Hipercolesterolmia familiar, 223, 415
Hiperplasia congnita da suprarrenal,
334
Hipertenso arterial, 153

Hipertermia, 347
maligna, 218
Hipotiroidismo congnito, 208
Histria clnica, 94
familiar, 93, 96
obsttrica, 95
HLA-B27, 69
HNPCC, 65, 393
preveno, 395
vigilncia, 394
Holoprosencefalia, 297
Homeobox, 314
Homocistinria, 130
Homoplasmia, 155
Homozigotia, 108
Impresses digitais, 137
Imprinting, 157
materno, 157, 158, 159
paterno, 157, 159
Incontinentia pigmenti, 126, 199
Influncia do sexo, 135
Informatividade, 76
Inibina A, 293
Insero, 260
Insnia familiar mortal, 134
Instabilidade de microssatlites, 64
Interaco gnica, 133
Intolerncia, 225
Intro, 20, 37
Inverso, 275
paracntrica, 261, 275
pericntrica, 261, 275
Isocromossoma, 261, 274
Isodissomia uniparental, 161
Isolado populacional, 173
Isoniazida, 211, 218
Justia, 435
Knock-out, 20
Kuru humano, 14
Lbio leporino/fenda palatina, 146
Lactase, 225
Lagging, 266
LDLs, 223
Leptina, 154
Leptteno, 239
Letal gentico, 57
Leucemia linfoblstica aguda, 75
Leucemia mieloblstica aguda, 255
Leucemia mielide crnica, 53, 357
Ligao gnica, 70, 75
Limitao ao sexo, 135
Linfcitos (TILs), 414
Linfoma folicular, 357
Linguagem da vida, 28
Linha, 168
Lionizao, 319
assimtrica, 320
Lipossomas, 404
Livraria de DNA, 83
Locus, 108
Longevidade, 371
Malformao congnita, 342
de causa cromossmica, 344
de causa materna, 345
de causa monognica, 343
de causa multifactorial, 342
de causa teratognica, 345
Mapeamento fsico, 89
Mapeamento gentico, 77
Meiose, 42, 231, 239, 241
Melanina, 137
Mendel, 2
Mendeliano, 110
Metafase, 235
5-metilcitosina, 35
Microarray, 91
Microcefalia, 135
Microcromossomas, 356
Microssatlites, 45
Migrao, 171
Minissatlites, 45
Mismatch repair, 63
Mitose, 231, 235, 241
Mola hidatiforme, 317
parcial, 318
Molcula informacional, 9
Monossomia, 265
Morfognese, 312
Mosaicismo, 289
gonadal, 127, 195
493
Mosaico, 264
Mutao, 49, 171
de novo, 56, 126, 194
dinmica, 52, 162
dominante, 57
frameshift, 52
letal, 125
letal in tero, 199
missense, 50
nomenclatura, 54
nonsense, 50
patogenicidade, 55
pontual, 50, 356
por fuso de genes, 53
recessiva, 58
sinnima, 50
Mutagneo, 48
No-disjuno, 266, 282
No-maleficncia, 434
Necrose celular, 369
Nested PCR, 84
Neurofibromatose tipo I, 130
Neuropatia ptica hereditria de Leber, 155
Nidao, 310
Nitrofurantona, 211
Nobel, 7
Normalidade, 442
Nortriptilina, 211
Nuclena, 4
Nucleossoma, 18
494
Obesidade, 154
Odds ratio, 69
Oligmero, 39
OMIM, 6
Oncodemes, 380
Oncogenes, 355
Ontogenia, 308
Open reading frame, 24
Organismo geneticamente modificado, 6
Osteogenesis imperfecta, 126, 128
Ovelha Dolly, 324
Ovo, 310
Paludismo, 172
Panmixia, 170
Paquteno, 240
Paratio, 229
Passo, 168
Paternidade extraconjugal, 136
PCR, 84
aplicaes, 86
vantagem, 86
in situ, 254
Penetrncia, 29
incompleta, 131, 197, 202
Perda de heterozigotia, 359
Perxido de hidrogneo, 211
Plasmdeo, 82
Pleitropismo, 130
Polialelismo, 43, 127
Poligenia, 41
Polimerase da poli (ADP-ribose), 66
Polimerase do DNA, 29, 60
Polimorfismos de DNA, 44
Polipose clica familiar, 387, 389
Poliploidia, 265
Pontes de hidrognio, 17
Porfiria aguda intermitente, 130, 131,
212, 219
Ps-traduo, 38
Prio, 13
Primaquina, 211, 217
Primers, 84
Pr-carcinogneo, 214
Processamento do RNAhn, 36
Profase, 235
Progeria, 374
Projecto do Genoma Humano, 5
Pruliferao celular, 366
Promotor, 33
Protena(s),
G, 39
histnicas, 18
PrP, 13
p105RB, 361, 366
p21, 354
p34CDK, 238
Protooncogenes, 352
Pseudogene, 20
Pseudo-hermafroditismo feminino, 333
Pseudo-hermafroditismo masculino, 335
Pterigium coli, 299
Puberdade, 331
Punnett, 112
Quebra cromossmica, 269

Quimera, 265
Quimeraplastia, 411
Radiaes ionizantes, 347
Receptor CCR5, 56
Recombinao de DNA, 78
homloga, 235, 411
Regies de colorao homognea, 356
Regulao da expresso gnica, 32
Regulao epigentica, 35
Reparao do DNA, 60
Replicao do DNA, 22
Retinoblastoma, 115, 360
Retrorregulao, 40
Retrotransposes, 270
Retrovrus, 404
RFLPs, 45, 71
Ribozima, 25
Risco, 477
absoluto, 188
de recorrncia, 188, 197, 344
de recorrncia (Down), 289
emprico, 189
gentico, 187, 190
relativo, 188
RNA, 24
heterogneo, 20
Rubola, 347
Segregao independente, 2
Seleco, 171
Senescncia, 371
Sequncia, 340
antisense, 409
de Potter, 341
intensificadora, 33
palindrmica, 81
promotora, 33
silenciadora, 35
Sexo,
cromossmico, 319, 331
determinao, 318, 330
diferenciao, 327
genital, 331
gondico, 331
legal, 332
psicolgico, 331
social, 332
somtico, 331
Shakespeare, 1
SIDA, 56
Sfilis, 347
Sndroma, 478
de Angelman, 271
de Apert, 344
de Bloom, 65
de Cowden, 391
de Crouzon, 344
de Di Giorge, 316
de feminizao testicular completa,
329, 335
de feminizao testicular incompleta, 336
de Hutchinson-Gilford, 374
de Klinefelter, 302
de Li-Fraumeni, 391
de Lynch tipo II, 393
de Marfan, 114, 130
de Meckel, 344
de Muir-Torr, 391
de Peutz-Jeghers, 391
polimalformativa, 340
de Prader-Willi, 271
de Turner, 121, 298
de Werner, 375
do miar do gato, 271, 284
do olho do gato, 272
do X-frgil, 163
neoplsica mama/ovrio, 391
Sister chromatid exchange, 235, 236
Stio frgil, 261
SNPs, 45, 46, 220
Southern blotting, 71
Splicing, 25
alternativo, 36
Stem cells, 401
STRs, 46, 74
STS, 90
Succinilcolina, 211, 217
Sulfonamidas, 211
Surdez, 128, 132
Surfactante, 314
Talidomida, 347
Talmude, 1
TATA box, 33
495
Taxa de mutao, 47
Telocntrico, 245
Telofase, 237
Telomerase, 373
Telmeros, 245, 372
Teorema de Bays, 200
Terapia gnica, 397, 444
ex vivo, 401
in situ, 402
in vivo, 403
germinal, 401
somtica, 400
Teratogneos, 136, 345, 346
Teste de Paigen, 226
Testes genticos, 446
e cancro, 383
em crianas, 450
predizentes, 447
pr-implantatrios, 451
pr-natais, 451
Testoterona, 328
Tetraciclina, 347
Tetrassomia, 265
Toxoplasmose, 347
Traduo do RNAm, 26, 38
Transcrio, 32
do DNA, 24, 32
Transcriptase inversa, 24
Transduo, 12
Transfeo, 12
Transformao bacteriana, 11
Translocao, 276
equilibrada, 277
496
insercional, 278
recproca, 261, 277
robertsoniana, 262, 277, 289
Transplantao, 75
Triploidia, 265
Trissomia, 265
13, 284, 296
18, 284, 294
21, 283, 284
livre, 290
XXX, 305
XYY, 305
Trofoblasto, 310
Tronco, 168
Tumores hereditrios, 383
Valproato de sdio, 347
Varfarina, 347
Variaes raras, 44
Varicela, 347
VATER, 340
Vectores, 82
Vrus adeno-associados, 408
Vrus de RNA, 24
Vrus herpes, 408
Vrus HIV, 56
VNTRs, 45, 74
Xeroderma pigmentosum, 62, 65
YACs, 82
Zigteno, 239
Zigoto, 310
ISBN 972-8704-12-7
789728 704124
FERNANDO J. REGATEIRO
Srie
Ensino

Coimbra University Press
2007
M a n u a l
Manual de Gentica Mdica
Genti
Mdi
FERNANDO
J.
REG

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Manual de gentica mdica

Imprensa da Universidade de Coimbra

(Pgina deixada propositadamente em branco)

Manual de Gentica Mdica

Imprensa da Universidade de Coimbra

Victor Hugo Fernandes

2003, IMPRENSA DA UNIVERSIDADE DE COIMBRA

(Pgina deixada propositadamente em branco)

Se recordarmos que o nmero exacto de cromossomas na espcie

Na gnese deste trabalho, encontra-se o exemplo dos mestres cujo

CAPTULO II. BASES CELULARES E MOLECULARES DA HEREDITARIEDADE ..............

Conceito de molcula informacional...........................................

CAPTULO I. HISTRIA E DESENVOLVIMENTO DA GENTICA

CAPTULO III. REGULAO DA EXPRESSO GNICA

CAPTULO IV. DIVERSIDADE HUMANA. MUTAES. REPARAO DO DNA .............

CAPTULO V. MTODOS DE ESTUDO DO GENOMA HUMANO ..............................

CAPTULO VI. HISTRIA FAMILIAR. HEREDOGRAMA ...........................................

Exame objectivo e meios complementares de diagnstico.......... 97

CAPTULO VII. TIPOS DE HEREDITARIEDADE ......................................................

5.2.2.4. Estudos de gmeos e hereditabilidade........................................

CAPTULO VIII. GENTICA DE POPULAES .......................................................

CAPTULO IX. CLCULOS DE RISCO

CAPTULO X. ERROS INATOS DO METABOLISMO. FARMACOGENTICA. ECOGENTICA.

Deficincia em cido flico e defeitos do tubo neural................

CAPTULO XI. DIVISO CELULAR .....................................................................

CAPTULO XII. CARITIPO HUMANO ................................................................

CAPTULO XIII. ALTERAES CROMOSSMICAS NUMRICAS E ESTRUTURAIS .........

CAPTULO XIV. CROMOSSOMOPATIAS ..............................................................

CAPTULO XV. GENTICA DO DESENVOLVIMENTO ..............................................

CAPTULO XVI. ANOMALIAS CONGNITAS ........................................................

CAPTULO XVII. GENES DE REGULAO DA PROLIFERAO CELULAR.

Genes de regulao da proliferao celular ................................

CAPTULO XVIII. GENES E CANCRO

Seguimento dos consulentes ......................................................

CAPTULO XIX. TERAPIA GNICA .....................................................................

CAPTULO XX. ACONSELHAMENTO GENTICO

O diagnstico gentico como suporte do aconselhamento.........

CAPTULO XXI. TICA EM GENTICA ................................................................

CAPTULO XXII. GLOSSRIO

Polimorfismos do comprimento de fragmentos de restrio

HISTRIA E DESENVOLVIMENTO DA GENTICA

Os primeiros fundamentos cientficos da Gentica devem-se a Gregor

condies de hemizigotia no sexo masculino, para os genes localizados no

2. BASES CROMOSSMICAS DA GENTICA

Em 1923, foi identificado o cromossoma Y. Painter descreve a

3. BASES MOLECULARES DA GENTICA

Em 1867, Miescher isolou uma substncia acdica a partir de leuccitos

humano, com a localizao do gene autossmico responsvel pelo tipo

No momento actual, com o que se conhece da sequenciao do Genoma Humano e fazendo

Previamente, em 1988, fora criada, na Sua, a Organizao para o Genoma

4. PRMIOS NOBEL NA REA DA GENTICA

1968 Robert W. Holley, Hara G. Khorana e Marshal W. Nirenberg, pela

BASES CELULARES E MOLECULARES DA HEREDITARIEDADE

1. CONCEITO DE MOLCULA INFORMACIONAL

No entanto, em termos de evoluo molecular, o RNA, como molcula

1.1. DEMONSTRAO DA CAPACIDADE INFORMACIONAL DO DNA

A capacidade informacional do DNA foi demonstrada por Griffith em

mortos se encontravam pneumococos S vivos. Algum componente dos

Pneumococos da estirpe S mortos pelo

Fig. II.1 Ilustrao das experincias de transformao bacteriana demonstrativas da capacidade

As experincias de conjugao bacteriana realizadas com E. coli tambm

causa (v.g., fibroblastos com deficincia para a produo de timidinacinase,

1.2. PRIES COMO MOLCULAS INFORMACIONAIS