Exportao de Protenas e Lipdios do RE Golgi

As protenas recm-sintetizadas entram na via

biossinttica-secretora no RE, atravessando sua membrana, a
partir do citosol.
O transporte, a partir do RE para o aparelho de Golgi e a
partir deste para a superfcie celular e demais localizaes
intermediado por vesculas de transporte, atravs de ciclos de
brotamento e fuso das mesmas.
Default via a partir do RE, atravs do aparelho de Golgi,
para a superfcie celular; parece que as protenas no necessitam de
sinais especficos
O aparelho de Golgi, principal stio de sntese de
carboidratos, a estao de seleo e despacho dos produtos
oriundos do RE.

COMPLEXO DE GOLGI
. O aparelho de Golgi est normalmente localizado prximo ao ncleo da clula e, em
clulas animais, est freqentemente prximo ao centrossomo. O Golgi especialmente
proeminente nas clulas especializadas para secreo (ex: caliciforme).
Morfologia e Ultra.estrutura

Recuperao de Protenas Residentes no RE.

. Vesculas destinadas para o aparelho de Golgi brotam a partir de uma regio
especializada do RE, denominada elementos de transio, cuja membrana no
apresenta ribossomos a ela ligados.
. Estas vesculas transportaro qualquer protena do RE para o aparelho de Golgi,
desde que elas estejam corretamente dobradas e montadas.
. Protenas incorretamente dobradas e montadas so retidas e degradadas no RE.
Assim, o RE parece ser um dos principais stios de degradao de protenas (os outros
so os lisossomos e o citosol).
. A reteno de protenas solveis residentes do RE (ex: BiP) mediada por um sinal de
reteno no RE, identificado como KDEL (Lys-Asp-Glu-Leu) no seu C-terminal .
. A reteno de algumas protenas transmembranosas no RE similarmente detectada
por uma curta sequncia C-terminal, contendo dois resduos de lisina (KKXX).
. Na rede cis do Golgi, uma protena receptora especfica, ligada membrana, liga-se a
um desses sinal de reteno e empacota a protena em vesculas especiais de transporte
retornando-a para o RE.

Compartimentalizao Funcional do Aparelho de GOLGI - glicosilao de protenas

. Uma nica espcie de oligossacardeo N-ligado adicionado em bloco a muitas

protenas no RE, e este oligossacardeo tambm aparado ainda no lmen do RE e,
posteriormente, sofre modificaes e adies, no aparelho de Golgi.

. Como resultado, encontramos duas grandes classes de oligossacardeos ligados a

glicoprotenas de mamferos:

oligossacardeos complexos (B)

oligossacardeos ricos em manose (C).

Glicosilao de Protenas destinadas para Secreo ou para a Membrana Plasmtica

Processamento de oligossacardeo N-ligado de Protenas Lisossomais

Proteoglicanas
. Algumas protenas-ncleo tm acares (GAG) adicionados a grupos OH em cadeias
laterais de serinas ou treoninas selecionadas, formando as proteoglicanas.
. Esta glicosilao O-ligada, catalisada por uma srie de glicosil-transferases que
usam acares ligados a nucleotdeos, no lmen do aparelho de Golgi, para adicionar,
um a um, resduos de acares s protenas.
. Uma N-acetilglicosamina adicionada primeiro, seguido de um nmero varivel de
resduos de acares.
. Assim, muito das proteoglicanas formadas so retidas e se tornam componentes da
matriz extracelular, enquanto outras permanecem ancoradas membrana plasmtica e
outras ainda, formam o componente principal de materiais viscosos (ex: muco).
Sntese de Esfingomielina e Glicolipdios
. O Ceramide, que sintetizado no RE, convertido para esfingomielina (o nico tipo
de fosfolipdio no glicerol), quando um grupo fosforilcolina transferido da
fosfatidilcolina para o Ceramide.
. Alternativamente, a adio de carboidratos ao Ceramide produz uma variedade de

diferentes Glicolipdios.
Clula Vegetal - a parede celular das plantas composta por 3 principais tipos de
polissacardeos:
Celulose - constituinte predominante, um simples polmero linear de glicose,
sintetizado na superfcie celular, pelas enzimas presentes na membrana plasmtica;
Hemicelulose e Pectina - so complexas cadeias moleculares ramificadas, sintetizadas
no aparelho de Golgi e transportadas, em vesculas, para a superfcie celular.
. Nas clulas vegetais, a sntese desses polissacardeos representa 80% da atividade
metablica do aparelho de Golgi.

Exportao de Protenas do aparelho de Golgi

. As Protenas que passam pelo aparelho de Golgi, exceto aquelas que ali permanecem
como residentes, so selecionadas na rede Golgi Trans e, atravs de transporte
vesicular, atingem seu destino final, pelas seguintes rotas:

1. Secreo Contnua de Protenas (Bulk flow) - na ausncia de sinais especficos, as

protenas no seletivas so transportas via RE aparelho de Golgi membrana
plasmtica e/ou superfcie celular. Opera em todas as clulas, principalmente
incorporando protenas e lipdios na MP;
2. Secreo regulada - protenas especficas so produzidas e estocadas em vesculas
especializadas e secretadas em resposta a sinais do meio ambiente. Exemplos:
liberao de hormnios pelas clulas endcrinas, neurotransmissores pelos neurnios,
enzimas digestivas das clulas acinares do pncreas, etc;
3. Transporte de enzimas para os lisossomos
Introduo Morfologia e Funes dos LISOSSOMOS
Morfologia

. Os lisossomos (significa corpo litico) so organelas em forma de sacos

membranosos contendo enzimas hidrolticas usadas para a digesto intracelular
controlada, de macromolculas, sendo muito variveis em forma e tamanho.

. Os Lisossomos foram primeiramente, postulados pelos estudos bioqumicos de

Christian De Duve e col. (1955), que observaram uma marcante atividade da fosfatase
cida, na frao mitocondrial de homogenato de hepatcitos de rato.

. Recentrifugando a frao mitocondrial, mostraram que a maioria da atividade da

fosfatase cida residia na frao light, e no na heavy (a mitocondrial). Em
seguida, outras hidrolases cidas foram detectadas na primeira frao.

. No ano seguinte, utilizando o material de De Duve e col., Novikoff identificou

morfologicamente, ao MET, uma frao rica em lisossomos.

. Os lisossomos so encontrados em todas as clulas eucariticas.

. Contm cerca de 50 ou mais tipos de enzimas hidrolases, incluindo proteases,

nucleases, glicosidases, lipases, fosfolipases, fosfatases e sulfatases, sendo todas
hidrolases cidas.

.O lisossomo contm uma nica membrana limitante e a maioria de suas protenas so

caracteristicamente muito glicosiladas, auxiliando a proteg-la das proteases do
lmen.

. Para sua atividade tima, as enzimas necessitam de um pH cido, e o lisossomo

atravs de uma bomba de H + presente em sua membrana, mantm o pH em torno de
5.0 em seu interior.

. A identificao da atividade da fosfatase cida, a nvel ultra-estrutural, atualmente,

aceita como marcadora para a identificao dos Lisossomos (Novikoff, 1961).

. A heterogeneidade morfolgica dos lisossomos reflete sua grande variedade de

funes digestivas , incluindo a quebra de restos intra e extracelulares, destruio de
microrganismos fagocitados e a produo de nutrientes para a clula.

Lisossomos - Vacolos de Clulas Vegetais e de Fungos

. Muitas clulas vegetais e de fungos contm uma ou mais vesculas muito grandes,
cheias de lquido, denominadas vacolos, ocupando de 30 a 90% do volume celular.

. Os vacolos contm uma variedade de enzimas hidrolticas, mas com funes

diferentes:
1. Atuam como organelas de armazenamento para nutrientes ou dejetos;
2. compartimentos de degradao;
3. como controladores da presso de turgor (presso osmtica que preciona a parede
celular de dentro para fora e evita que a clula sofra colapso);
4. funcionam como um aparelho homeosttico, permitindo clula vegetal suportar
grandes variaes no seu ambiente.

. Vacolos diferentes com funes distintas (ex: digesto e armazenamento) esto

frequentemente presentes na mesma clula.

Vias do Trfego Intracelular

. Em geral, os lisossomos so os locais de convergncia de vias do trfego intracelular.

Enzimas digestivas so levadas at eles atravs de uma via, com fluxo no sentido sada
do RE , atravs do Golgi.

. As substncias a serem digeridas chegam aos lisossomos atravs de pelo menos trs
vias, de acordo com sua origem:

1. Endocitose as molculas endocitadas so, inicialmente, levadas at as

vesculas
intracelulares, pequenas, formato irregular, denominadas endossomos prematuros;
. algumas molculas ingeridas so seletivamente recuperadas e recicladas na
membrana plasmtica, enquanto outras passam para os endossomos tardios;
. nesta organela, atravs da fuso de duas correntes do transporte por vesculas, as
substncias chegando para a digesto encontram, as hidrolases dos lisossomos que
esto saindo do aparelho de Golgi.
. o endossomo tardio possui um pH em seu interior levemente cido (pH = 6,0) e
acredita-se que seja o local onde a digesto das molculas endocitadas inicie.
. o lisossomo maduro se forma a partir dos endossomos tardios (no se sabe ainda
como este processo ocorre), que perde algumas protenas da membrana e ocorre um
decrscimo do pH interno.

2.Autofagia via utilizadas em todos os tipos de clulas para descartar partes

obsoletas da prpria clula.
. o processo parece iniciar-se com a organela a ser descartada, sendo envolvida por
membranas derivadas do RE, formando o autofagossomo, que a seguir se funde com
um lisossomo (ou endossomo tardio).
3.Fagocitose ocorre principalmente em clulas especializadas (macrfagos,
neutrfilos) que capturam e degradam grandes partculas, bactrias, clulas mortas
ou microrganismos outros, que necessitam ser eliminados do corpo.
. estas partculas so capturadas em vacolos fagocticos (fagossomos) os quais
fundem-se com os lisossomos, resultando na digesto de seu contedo.
. esses lisossomos formados (fagolisossomos) so muito heterogneos em forma e
tamanho, determinados pelo contedo do material que est sendo digerido.

4. Sinal de Superfcie existe, provavelmente, uma Quarta via atravs da qual

protenas citoslicas so transportadas diretamente para o lisossomo onde so
degradadas.
. so protenas que contm sinais em sua superfcie (KFERQ, onde (K) = lisina, (F) =
fenilalanina, (E) = glutamato, (R) = arginina e (Q) = glutamina) e que as tornam
capazes de serem seletivamente levadas aos lisossomos para degradao.
Enzimas Lisossomais
. As duas classes de protenas (as hidrolases lisossomais e as protenas de membrana)
so sintetizadas no RE rugoso e so transportadas atravs do aparelho de Golgi.
. As vesculas de transporte que carregam estas protenas at os endossomos tardios,
que depois formam os lisossomos, brotam da rede de Golgi trans.
Hidrolases Lisossomais possuem uma marca nica na forma de grupos manose-6fosfato (M6P) que so adicionados, exclusivamente aos oligossacardeos N-ligados,
enquanto esto no lmen da rede de Golgi cis.
. Os grupos M6P so reconhecidos por:
1.
protenas receptoras - M6P, do tipo transmembranosas, presentes na rede de
Golgi trans, e:
2.
Protenas especiais de revestimento que so montadas na superfcie da
membrana e ajudam as vesculas brotarem da membrana do Golgi trans.
Transporte de Hidrolases Lisossomais recm-sintetizadas para os Lisossomos

. A protena receptora de M6P liga oligossacardeos especficos em pH 7, na rede

Golgi trans e os libera em pH 6, no interior dos endossomos tardios.
. No endossomo tardio, as hidrolases se dissociam do receptor M6P , podendo iniciar a
digesto de material proveniente dos endossomos prematuros.
. Os receptores M6P localizam-se em vesculas que brotam dos endossomos tardios e
retornam para a membrana da rede de Golgi trans, para reutilizao.
. IMP: nem todas as molculas marcadas para serem enviadas aos lisossomos atingem
seu destino: algumas escapam para a superfcie celular, via default.
Entretanto, alguns receptores M6P tambm entram na via para a MP e recuperam as
hidrolases para os lisossomos, via endocitose mediada por receptores.
. As protenas destinadas aos vacuolos possuem curtas sequncia-sinal ao invs de
carboidratos marcadores (Gln-Arg-Pro-Leu).
. As Protenas da Membrana dos Lisossomos tambm so marcadas por sequncia
sinal
Transporte Vesicular
. O transporte de molculas, do RE para o aparelho de Golgi, e deste para outros
compartimentos do sistema de endomembranas, realizado por contnuo brotamento
e fuso de vesculas de transporte.
. As vesculas desempenham um papel similar no transporte de material capturado na
superfcie celular. Assim, a seletividade deste transporte importantissimo para a
manuteno da organizao funcional da clula
. Vesculas que brotam de membranas normalmente tm uma distinta cobertura
protica sobre sua superfcie citoslica, sendo denominadas de vesculas cobertas.

. Diversos tipos de vesculas cobertas so responsveis pelos diferentes tipos de

transportes
Tipo Vescula

Protena Cobertura Origem

Destino

Clatrina
Clatrina

Clatrina+adaptina 1 Aparelho Golgi

Clatrina+adaptina 2 M. Plasmtica

Lisossomo (endoss.)
Endossomos

COP
COP
COP

COP 1
COP 1
COP 2

Cisternas Golgi
RE
Aparelho Golgi

Cisternas Golgi
Aparelho Golgi
RE