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Sebenta Genetica Medica PDF
Sebenta Genetica Medica PDF
ICBAS 2010/2011 2S
Rui Silva
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1 Aula Morfologia do cromossoma
1) Ciclo celular
A interfase corresponde ao perodo entre o final de uma diviso celular e o incio da outra.
Geralmente a clula encontra-se nesta fase durante a maior parte da sua vida. Durante esta fase os
cromossomas no so visveis ao microscpio ptico. A interfase divide-se em trs fases:
Fase G1
Nesta fase sintetizam-se muitas protenas, enzimas e RNA, verifica-se tambm a formao de
organitos celulares e, consequentemente, a clula cresce.
Fase S
nesta fase que ocorre a auto-replicao das molculas de DNA
A partir deste momento os cromossomos passam a possuir dois cromatdeos ligados por um
centrmero.
Fase G2
Neste perodo d-se a sintese de molculas necessrias diviso celular (como os centrolos).
As fases G e S possuem estas denominaes em decorrncia de abreviaes do ingls - G para gap e S
para synthesis
Prfase
a etapa mais longa da mitose;
Os filamentos de cromatina enrolam-se, tornando-se cada vez mais curtos, possibilitando assim o seu
visionamento no Microscpio ptico;
Os dois pares de centrolos afastam-se em sentidos opostos, entre eles forma-se o fuso acromtico
(sistema de microtbulos protecos que se agrupam e formam fibrilas);
Quando os centrolos alcanam os plos da clula o Invlucro nuclear quebra e os nuclolos
desaparecem.
Metfase
Os Cromossomos atingem a mxima condensao;
O fuso acromtico completa o desenvolvimento e algumas fibrilas ligam-se aos centrmeros (as outras
ligam os dois centrolos);
Os Cromossomos encontram-se alinhados no plano equatorial (plano equidistante dos dois plos da
clulas) constituindo a Placa equatorial.
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Anafase
A anafase uma fase rpida, caracterizada pela migrao dos cromossomos para os plos do fuso.
A anfase comea pela duplicao dos centrmeros, libertando as cromtides-irms. As fibras do fuso,
ligadas aos centrmeros, encurtam, puxando os cromossomos para os plos da clula.
D-se a clivagem dos centrmeros. Os cromatdios que antes pertenciam ao mesmo cromossoma,
agora separados, constituem dois cromossomas independentes.
APC (anaphase promoting complex) activa induz: i) a degradao de coesinas localizadas na regio
centromrica que mantm juntos os cromatdios durante toda a primeira parte da mitose, e ii)
activao da separase.
Contudo, uma clula s entra em anafase quando todos os cromossomas estiverem biorientados e o
fuso exercer a devida tenso sobre os cromossomas. Quem monotoriza este processo?
Checkpoint mittico (complexos com protenas Bub1, Bub3, BubR1, Mad1, Mad2 e cdc20) ->
Inibio da APC (anaphase promoting complex) at todos os cromossomas estarem biorientados
Telfase
A membrana nuclear forma-se volta dos cromossomas de cada plo da clula, passando a existir
assim dois ncleos com informao gentica igual;
Os nclolos reaparecem; O fuso mittico dissolve-se; Os Cromossomos descondensam e tornam-se
menos visveis;
Citocinese
Corresponde diviso celular e, consequentemente, individualizao das duas clulas-filhas
2) Cromossomas
Cromatidio brao curto p
- brao longo q
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(a) centrmero ou constrio primria
(b) constrio secundria (NOR, ou regio do organizador nucleolar)
(c) satlite diferenciado
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2.3.3) Erro na meiose, por erro
No cossing-over em paquteno -> recombinao gentica
Na separao de cromossomas homlogos
Na separao de cromatdios
2.5) Em resumo
Alteraes cromossmicas durante a meiose: sndromes constitucionais
Alteraes durante a mitose: anomalias cromossmicas adquiridas
-o mosaicismo
-a instabilidade cromossmica e o cancro
Eucromatina Heterocromatina
Condensao varivel ao longo do ciclo celular Fortemente condensada, considerada acclica
Composta predominantemente por: DNA de Composta predominantemente por. DNA
sequncia nica, satlite altamente repetitivo,
rica nos pares de bases G-C rica nos pares de bases A-T
Geneticamente activa Geneticamente inactiva
DNA de replicao precoce no perodo S DNA de replicao tardia no perodo S
2.1) Heterocomatina
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2.1.1) Localizao da heterocromatina
regio justacentromrica
brao longo do Y (Y)
telmeros
braos curtos dos acrocntricos (p)excepto nas NORs
O gene XIST no produz uma protena, mas antes um transcrito de RNA que permanece no ncleo,
cobre o X donde transcrito e inactiva-o, por alterao da estrutura da cromatina mediada pelos
mecanismos de metilao de DNA e desacetilao histnica, excepto nas regies que permanecem
activas
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O X inactivo tanto pode ser o de origem paterna como o de origem materna, nas diferentes clulas do
mesmo organismo (ao acaso no 16 dia do desenvolvimento embrionrio hiptese de Lyon).
A inactivao uma vez ocorrida mantm-se constante para cada linha celular
Gene
Efeito
Mendeliana Mendeliana C/ Galtoniana Cromossomica
Pleiotropismo
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Malformaes congnitas
Sndromes polimalformativos s. cromossmicos; s. mendelianaos com politropismo
Doenas monognicas d. autossomicas recessivas, dominantes, ligadas ao x
Doenas comuns da vida adulta
3) Histria
3.1) O mendelismo antes de Mendel
Hereditariedade ligada ao X
1532 - Talmud dispensa circunciso a RNs com familiares com tendncia a hemorragias
1803, 1813, 1815, 1820 (Otto, Hay, Buels, Nasse) - transm. hemofilia
1876 (Horner) - padro de transmisso do daltonismo
Hereditariedade dominante - 1750s (Maupertuis) - polidactilia
Hereditariedade recessiva - 1857 (Bemiss) - consanguinidade
3.2) Mendelismo
Gregor Mendel (1822-1884) infere a existncia de unidades/genes determinantes da hereditariedade
Partculas discretas
transmitindo-se intactas
caractersticas recessivas podem permanecer escondidas uma ou mais geraes, mas a
contribuio de cada progenitor sempre igual
O facto de se terem comprovado as leis de Mendel para caractersticas humanas raras (mais evidentes)
levou convico de que s se aplicariam a elas:
3.3) Galtonismo
Galton (1822-1911)
Hereditary Genius (1869)
mtodo dos gmeos (1876)
" identificao pelas impresses digitais
caractersticas quantitativas
coeficiente de correlao
regresso para a mdia
mistura proporcional de factores de cada antepassado
lei da hereditariedade ancestral (1/4, 1/16, 1/64, ...) (1889)
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eugenia
3.4) Conciliao
As duas explicaes alternativas da hereditariedade, que se apresentavam como antagnicas, so
conciliadas por R.A. Fisher, 1918:
As caractersticas de tipo quantitativo podem ser "controladas" por vrios genes cada um com um
efeito pequeno sobre a caracterstica e a dominncia nem sempre completa.
Genetic linkage is the tendency of certain loci or alleles to be inherited together. Genetic loci that are
physically close to one another on the same chromosome tend to stay together during meiosis, and are
thus genetically linked.
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tamanho finito da amostra (gentica humana)
impreciso da observao humana
identificao fenotpica (caractersticas pouco definidas/diferenciveis)
variao de classificaes (dificuldades, variao com conhecimento)
loci mltiplos: efeitos aditivos (caracteres polignicos)
heterogeneidade gentica
fecundao no-sexuada
atribuio errada de paternidade/maternidade
1.2) No-penetrncia
1.2.1) Penetrncia incompleta - quando indivduos com o gentipo apropriado para dada afeco
gentica so fenotipicamente normais
1.7) Epistasia se a anulao de um gene (a montante numa cadeia metablica) anla o feito de um
outro gene (a jusante na cadeia).
1.8) Genes modificadores genes situados em loci secundrios para um fentipo mas que
influenciam o efeito final do gene principal responsvel pelo fenipo (maior ou menor gravidade ou
inicio mais cedo)
1.9) Conceito de dominante e recessivo - fazem sentido, mas so atributos do fentipo, no dos
genes!
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2) Desvios ao mendelismo
antecipao
casos espordicos (isolados)
dissomia uniparental
imprinting genmico
outros efeitos de origem parental
mosaicismo germinal
desvio meitico
outras causas de distoro de taxas de segregao
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mutaes de novo (acondroplasia)
penetrncia dependente da idade (Huntington)
penetrncia incompleta (retinoblastoma)
expressividade varivel (distrofia miotnica)
5) Hereditariedade no-mendeliana?
Hereditariedade multifactorial; cromossmica; materna
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Doena de Machado-Joseph - (CAG)n
Alelo normal: tamanho no varia
Alelo expandido: varia em 55% transmisses
Maior nas transmisses paternas (casos juvenis)
8 Aula - Epigentica
1) Epigentica
Epigentica estudo das mudanas na funo gentica, que so mitotica e meioticamente
herdveis e no implicam alterao na sequncia do DNA!
Por vezes sinnimo de hereditariedade no-mendeliana!
1.2) Metilao
1.2.1) Definio
Modificao covalente do DNA, pela adio de um CH3 na posio 5 do anel da citosina, no contexto
de um dinucletotdeo CpG (5-CG-3)
1.2.2) Excepo: genes em regies que sofrem imprinting e os genes inactivados no crom. X
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1.2.3) O padro de metilao
varia entre tecidos da mesma pessoa
varia entre diferentes pessoas
poder variar em certas doenas complexas
diferentes perfis em populaes animais
pode fornecer informaes sobre SNPs (CpGs)
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O epigenoma adequirido, transmite-se descendncia e explica a hereditariedade do cancro,
farmacogenetica, clonagem, etc.
Mudanas mitticas e meiticas herditrias sem alterao do DNA
3) Origem da Aneuploidia
3.1) Erros de anafase (meitica e mittica)
3.1.1) Mecanismos
No-disjuno
Separao precoce dos cromatdios em meiose I (pr-diviso)
3.1.2) Consequncias
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Erros na diviso meitica -> formao de gmetas nulissmicos e dissmicos
Erros na diviso mittica -> formao de clulas monossmicas e trissmicas. Quando ocorre na 2
diviso, ou superior, d mosaicismo.
3,2) Mosaicismo
3.2.1) No disjuno primria Embrio normal (46) que tem uma diviso mittica errada e d
clulas 47. Quanto mais tardia, maior a predominncia de clulas normais
3.2.1) No disjuno secundria Embrio anormal (47) que tem uma diviso mittica errada e d
clulas 47. Quanto mais tardia, menor a predominncia de clulas normais
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A no-disjuno / pr-diviso depende: Incidncia, Factores de predisposio, Causas genticas
5.1.1) Motivo
Alterao do checkpoint meitico na meiose feminina <- pois como em cada ovulao se forma
apenas um gmeta, no pode haver seleco positiva, como acontece na espermatognese
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Ainda no foi identificado um gene mutante especfico, no entanto:
A presena de caritipo anormal num dos pais (constitucional ou em mosaicismo)
Um defeito em genes envolvidos na funo do centrmero (aneuploidia em meiose II e mitose)
Podem ser causas para o facto de um casal que j tem uma criana com trissomia ter um risco 10x
mais elevado de ter outra criana com trissomia.
2) Tipos de quebras
No perodo G1: quebras cromossmicas -> alteraes cromossmicas
Nos perodos S e G2: quebras cromatdicas -> instabilidade cromossmica
Variaes de forma
Heterocromatina justacentromrica dos cromossomas 1, 9, 16
Constrio secundria dos cromossomas acrocntricos 13, 14, 15, 21 e 22
Polimorfismo do Y
3) Nomenclatura das alteraes cromossmicas estruturais
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3.1) Intra-cromossomicas
3.1.1) Deleco - terminal ou intersticial
3.1.4) Desvio passagem de um bocado do cromossoma para outro local do mesmo cromossoma
3.1.5) Cromossoma em anel, por quebra nos dois cromatdios ou num s cromatdio, faz com que as
pontas colem formando um anel
3.1.6) Isocromossoma em vez dos cromatidios se separarem separam-se os 2 braos pequenos juntos
e os 2 grandes juntos.
3.2) Inter-cromossomicas
3.2.1) Translocao recproca (quebra na ponta) troca entre 2 cromossomas
Pode ser equilibrada ou desequilibrada com formao de cromossomas acntricos e dicntricos, que se
colam pelas pontas partidas
3.2.5) Translocao robertsoniana - Quebra dos centrmeros nos cromossomas acrocntricos (13, 14,
15, 21 e 22), com formao de cromossomas acntricos (braos curtos) e dicntricos (braos longos)
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5.1) Alterao cromossmica equilibrada - no h aumento nem perda de material gentico activo
fentipo normal
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1) Cromossoma X
1.1) Hiptese de Lyon (1961) inactivao ao acaso do X
O corpsculo de Barr nas clulas femininas corresponde ao cromossoma X inactivo
Este tanto pode ser o de origem paterna como o de origem materna, nas diferentes clulas do mesmo
organismo (ao acaso)
Aproximadamente ao 16 dia do desenvolvimento embrionrio (nas clulas somticas)
A inactivao uma vez ocorrida mantm-se constante para cada linha celular
Nas clulas gamticas (ocitos) h reactivao do X inactivo
O gene XIST no produz uma protena, mas antes um transcrito de RNA que permanece no ncleo,
cobre o X de onde transcrito e inactiva-o, por alterao da estrutura da cromatina mediada pelos
mecanismos de metilao de DNA e desacetilao histnica.
Nas polissomias do X s fica um X activo, os outros so inactivados
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Sndrome de Rett
Exclusivamente em raparigas.
Causa hereditariedade dominante ligada ao X, com letalidade no sexo masculino hemizigtico
Seleco positiva
Aumento do ndice de proliferao celular, evoluo de novos loci com funes novas vantajosas
Seleco negativa
Diminuio do ndice de proliferao celular por alteraes genicas ou cromossmicas
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2) Cromossoma Y
Gene determinante da diferenciao sexual masculina SRY, no brao curto do Y
SOX-9 (17q24) - necessria para transcrio do hormnio anti-mlleriano (MIF), sua reduo
resulta em feminilizao
DAX-1 Inibe a diferenciao testicular e como conseqncia a gnada acaba se tornando ovrio
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- Participam na preparao do tecido bipotencial para a etapa da determinao do sexo gondico
1) Definies
Sexo so as caractersticas fsicas com que nascemos
Gnero tem a ver com identidade, a forma como nos percepcionamos e nos identificam enquanto
homens e mulheres
Orientao sexual tem a ver com quem gostamos, por quem sentimos atrao e desejo
Sexo gentico/Determinao sexual: determinado pelos cromossomos e pelos genes (XX ou XY)
Sexo gonadal: determinado pela histologia gonadal (testculo ou ovrio) que induzida pelos genes
Sexo hormonal: determinado pelos hormnios femininos (estrgeno e progesterona) e masculinos
(testosterona)
Sexo fenotpico (morfolgico): determinado pela genitlia externa e caractersticas sexuais 2as, que
so induzidos pelos hormnios produzidos nas gnadas
Sexo social: interao ambiente/social/personalidade/etc.
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baixa estatura proporcionada
implantao de cabelos em tridente na nuca
hiperconvexidade das unhas de mos e ps
hipogonadismo hipergonadotrfico, com amenorria primria
3.1.1) Caritipos
46,XX - 50%
46,XY - 20%
46,XY/45,X
20%
46,XY/46,XX
Caritipo 46,XX/46,XY
resultado de dupla fecundao de gmeta feminino com dois ncleos por dois espermatozides X e Y,
ou por
fuso precoce - quimera - de dois zigotos de sexos diferentes
3.3) Homem XX / Mulher XY
Troca de genes responsveis pelo sexo gonadal no crossing-over
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3.4) Sexo reverso XY (disgenesia gonadal pura XY)
Phenotypic sex reversal in humans having two copies of the DAX1 locus
Mutao em SOX-9 Displasia camptomlica
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4.2) Pseudo-hermafroditismo feminino
46,XX com genitlia masculina ou ambgua
Agentes genotxicos
Ambientais - Qumicos,radiaes, vrus
Endgenos - stress oxidativo (excesso de radicais livres)
do
Mutaes somticas
Mutaes genicas - alterao a nvel de um gene
Mutaes cromossmicas - alterao na estrutura de um cromossoma
Mutaes genmicas - alterao no n de cromossomas
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Organizao estrutural do cromossoma
Proteco extracelular
Reparao do DNA
Controlo do ciclo celular (checkpoints)
2categoria tumores que resultam de uma exposio em excesso aos agentes mutagnicos.
3categoria - inclui tumores que resultam de uma relativa insuficincia gentica para tolerara
exposio aos agentes mutagnicos.
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Aparecem quase sempre como nica alterao e associadas a tipos especficos de tumor.
Principal valor: no diagnstico
Ex: Leucemia mieloide crnica, t9;22 cromossoma filadelfia
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5) Importncia dos estudos citogenticos no cancro - concluso
Identificao das alteraes primrias - importncia no diagnstico e no prognstico
Identificao das alteraes secundrias - importncia no prognstico
Identificao de alteraes recorrentes ps tratamento - avaliao da remisso
Genes supressores tumorais e predisposio para cancro, ex: APC polipose adenomatosa familiar
Oncogenes e predisposio para cancro ex: KIT - Tumores do estroma gastrointestinal
Sndromes humanos com instabilidade genmica Sndrome de Lynch (HNPCC) MLH1, MSH2/
BRCA1 is a human caretaker gene that helps repair damaged DNA, or destroy cells if DNA cannot be
repaired. If BRCA1 is damaged, damaged DNA is not repaired properly and this increases risks for
cancers
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1.2) Estudo gentico dos genes BRCA1/2
1.2.1) Critrios de refernciao - n de casos na familia e a idade no seu diagnstico
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As alteraes genticas e moleculares so as que melhor se correlacionam com a agressividade das
neoplasias, por isso para alm do diagnstico histolgico e da avaliao do grau de malignidade de um
carcinoma da mama mandatria a anlise da expresso de recptores hormonais e da C-erbB2:
Teoria dos dois eventos da carcinognese -1 point mutation; 2 cross delection of tumor supressor
gene
4.1.2) Luminal B
C-erbB2 / HER-2 negativo, R. progesterona e estrognio positivo (menor quantidades), Ki67 alto
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O cancro da mama triplo negativo um tumor agressivo, porque apesar de ser negativo para os 3
marcadores tende a crescer mais rapidamente, tem mais possibilidades de metstizar, reincide mais
frequentemente e menos provvel de ser detectado numa mamografia anual. Tem um prognstico
mais reservado do que os cancros da mama que so receptores hormonais positivos. Parte da razo a
falta de tratamentos especficos para este tipo de cancro da mama.
17 Aula PAF
1) PAF
A polineuropatia amiloidtica familiar uma amiloidose hereditria autossmica dominante, que se
manifesta na idade adulta.
A sua principal manifestao clnica uma neuropatia mista, sensitiva, autonmica e motora,
progressiva e fatal.
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1.0) Tipos de PAF
Tipo 1 Portuguesa ou Japonesa. Local de inicio: ps
Tipo 2 Indiana. Local de inicio: mos
Tipo 3 Iowa. Local de inicio: ps e mas
Tipo 4 Filandesa. Local de inicio: ?
1.2) Etiologia
provocada pela deposio de uma protena (quase sempre a transtirretina) mutante sob a forma de
substncia amilide. Alterao gentica no cromossoma 18.
1.3) Patologia
Patognese da leso nervosa
So as fibrilhas de amilide, precursoras da amilide madura que tm um efeito txico sobre as
fibras
As fibras no mielinizadas e pouco mielinizadas so mais susceptveis, sendo afectadas primeiro e
mais gravemente.
So as pores terminais dos nervos perifricos, mais distantes dos corpos celulares que so mais
susceptveis, Por isso as neuropatias axonais comeam nos ps e so ascendentes.
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2 Envolvimento tardio das fibras grossas e mais mielinizadas
perda sensitiva propioceptiva
defices motores ascendentes
1.4) Sintomatologia
Uma amiloidose sistmica...
Apesar de uma deposio generalizada (ex: renale vitrea) de substncia amilide quase toda a
sintomatologia se deve leso dos nervos perifricos, somticos e vegetativos.
Neuropatia motora
Incio nos membros inferiores com p pendente
Mas tambm atrofia das mos e envolvimento craniano
Disautonomia
Atingimento precoce e muito marcado.
Disfuno autonmica a responsvel por grande parte da morbilidade e mesmo mortalidade da
doena.
O compromisso autonmico constitui o aspecto mais peculiar desta doena
S a neuropatia diabtica apresenta por vezes um componente disautonmico importante mas que
nunca assume as mesmas propores.
Aparelho cardio-circulatrio
Perturbaes da conduo cardaca
Do bloqueio AV 1 grau at paragem cardaca Hipotenso ortosttica
Das tonturas ortostticas at perda de conscincia
Desregulao vasomotora perifrica
Dos ps sempre frios gangrena
Aparelho digestivo
Secura de boca, disfagia alta
Estase gstrica
Do enfartamento s crises de vmitos incoercveis
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Alterao do trnsito intestinal
Da obstipao grave at diarreia incontrolvel
Disfuno esfincteriana
Da incontinncia espordica permanente
Aparelho gnito-urinrio
Impotncia
Frigidez
Bexiga neurognea
Da reteno incontinncia permanente
Olhos
Diminuio da secreo das lgrimas
Do simples incmodo leso grave da crnea
Perda de reaco pupilar
Desadaptao luz e acomodao
Sudao
Secura distal com compensao proximal
Pele seca e atrfica e excesso de sudao proximal
Intolerncia ao calor
1.5) Tratamento
Fundamental tratar os sintomas energicamente
O transplante heptico constitui hoje uma forma eficaz de impedir a progresso da doena. Os doentes
transplantados vivem mais do que os no transplantados
Medicamento que actua estabilizando a protena e que tambm se revelou eficaz a travar a progresso
da doena, sem efeitos colaterais significativos.
18 Aula Machado-Joseph
1) Caracterizao
Doena neurodegenerativa autossomica dominante, resultante de mutaes dinnicas do tipo CAG
A severidade depende da dose do gene: homozigtico mais severo
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2) Alterao gentica
Autossomica dominante, resultante de mutaes dinnicas no brao longo do cromossoma 14 com
expano do tripleto CAG.
No portadores CAG entre 12 e 44 repeties
Portadores CAG entre 61 e 87 repeties
Quanto maior o n de repeties maior a probabilidade de ter a doena
O gene mutado codifica a protena ataxina 3, a qual vai acumular e provocar a doena.
3) Sintomatologia
Tipo 1 (23%) Tipo 2 (26%) Tipo 3 ( 51%)
Aos 24 anos Aos 26 anos Aos 47 anos
Ataxia Cerebelosa Ataxia Cerebelosa Ataxia Cerebelosa
Sndrome Piramidal Sndrome Piramidal Sndrome Piramidal
Sndrome extrapiramidal
Oftalmoplegia externa Oftalmoplegia externa Oftalmoplegia externa
Amiotrofias perifricas
Mais severa Evoluo mediana Forma + benigna
Rpida evoluo Pode evoluir para os tipos 1 e 3
4) Epidemiologia
Expresso particular em Portugal, nomeadamente em S. Miguel (GGC) e Flores (ACA)
Afecta homens e mulheres na mesma proporo
1.2) Servios
Estudos de agregao familiar: componente gentica de uma doena e a contribuio relativa dos
genes e ambiente
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Estudos de segregao: determinar o padro de hereditariedade de uma doena (p.ex. dominante ou
recessivo)
Estudos de Linkage: qual a regio do genoma onde se localiza o gene responsvel pela doena
Estudos de Associao: qual alelo de determinado gene que est associado com a doena
As duas formas mais comuns da doena: enxaqueca sem aura (MO) e enxaqueca com aura (MA)
Aura - sintomas neurolgicos transitrios (visuais, sensitivos, dfices motores ou da fala)
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Agregao familiar da enxaqueca: risco aumentado para os familiares -> componente gentica
Diversos loci de susceptibilidade j foram descritos, mas os genes envolvidos na MA e MO: ainda no
foram identificados
Associao: relao entre alelos -> alelos do marcador tm diferentes frequncias relativas nos
indviduos afectados e no afectados
4.1.2) Desvangagens
Dificuldades em constituir grupos de controlo
Dificuldades na interpretao do significado da associao allica
Pode ser sujeito a estratificao da populao
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Haploview
Blocos de LD
TagSNPs (correlao SNPs)
Maximizar informao
Diminuir tamanho amostra
No h perda de poder estatstico: no h informao redundante
1) Conceitos de Linkage
A anlise de ligao gentica baseada no estudo da recombinao e no clculo de estimativas da taxa
de recombinao
Em famlias (de preferncia de vrias geraes) podemos identificar recombinantes e no-
recombinantes genotipando progenitores e filhos para pares de loci
Resto da aula estatstica -> no me apeteceu estar a passar por no achar relevante!
1) Aconselhamento gentico
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1.1) Aspecto mdico Diagnstico
1.1.1) Diagnstico clnico
Exame clnico
Colheita histria familiar (mais casos familiares com fentipo alargado?)
2) Teste Gentico
Anlise de um gene especfico, seu produto ou funo (ou outra anlise de DNA ou cromossmica),
para detectar ou excluir uma alterao possivelmente associada a uma doena gentica.
Diagnsticos
Pr-sintomticos
Genes de susceptibilidades
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2.2) Testes preditivos e pr-sintomticos em doenas de incio tardio
Deteco de pessoas saudveis que, no futuro, viro ou podero vir a apresentar uma doena
hereditria ou uma susceptibilidade aumentada para certas doenas comuns da vida adulta.
Permitido por: Progresso na anlise do genoma humano; Diagnstico molecular de doenas
genticas
J podemos predizer, mas ainda no tratar, ou prevenir muitas delas! Ento para qu fazer?
O teste pode ser oferecido de forma segura s pessoas em risco, reduzindo a incerteza (diminuido a
ansiedade, melhorando a vida familiar e a sua segurana econmica) e melhorando a sua qualidade de
vida.
No entanto, Children and adolescents should NOT be tested for late-onset, incurable diseases, due
to Loss of autonomy; Discrimination
2.2.1) Critrios
1. desejar ter acesso informao gentica
2. capacidade legal de consentimento informado
3. diagnstico gentico estabelecido em familiar
4. risco de 50%
5. estar ainda assintomtico
2.2.2) Regras
1. reconhecer direito a no saber
2. aconselhamento gentico e apoio psicossocial
3. centros experientes em testes genticos e QA
4. privacidade e confidencialidade estritas
5. os resultados de testes pr-sintomticos ou preditivos (como os da investigao!) no so
informao mdica no devendo ser includa nos processos mdicos hospitalares
2.3.1) Limitations
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population diversity
doubtful benefits for population screening
only small change in relative risk
limited usefulness at the individual level
4) Quality assurance
harmonization of nomenclature, procedures and policies
certification/accreditation of laboratories and clinical services
construction of reference materials (RMs) for lab practice
proficiency testing (PT) for external quality control (EQA)
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DTC selling of genetic tests that have proven utility - should be performed in the context of heath-care
and proper genetic counselling
If no proven clinical utility, they may produce more harm than good to the general public and the
society.
The Portuguese law already prohibits DTC testing.
1) Anomalias Congnitas
Major 2% - ex: cardiovascular
minor 10% - ex: estenose dos ductos lacrimais
2) Anomalias nicas
Malformao; Disrupo; Deformao; Displasia
3) Anomalias Mltiplas
Sequncia; Sndrome; Associao
4) Causas de anomalias
4.1) Causas genticas
Cromossomopatias
Monognicas
Multifactorial
Heterogeneidade gentica (DTN)
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Explicao aos pais????
5) Anomalias
Dismorfia - Alterao estrutural / fenotpica
Nascimento ou Ps-natal
Antropometria
Avaliao qualitativa vs Avaliao quantitativa
Abordagem estandardizada -> Fivel e reprodutvel
Crescimento previsvel, proporcional, harmonioso
Comparao com a populao geral, outras partes do corpo, populao de referncia
Dx anomalias
Avaliao do desenvolvimento
Anomalias podem:
desaparecer com o desenvolvimento
s ser evidentes na infncia tardia
ser transitrias
Fita mtrica; Mquina fotogrfica; Grficos de medidas e percentis; Base de dados de dismorfologia
Alterao fenotpica
1. Variante Minor - fenognegese
Variante comum: > 4%
Anomalia minor: < 4%
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24 Aula Embriologia e Gmeos
S figuras, sem informao -> ver sebenta
1) Objetivos do DPN
A) Oferecer opes esclarecidas aos pais sujeitos a terem um filho com anomalia
B) Oferecer ao casal um manejo adequado do feto, quer seja a interrupo, ou alguma interveno
pr, peri ou ps-natal
C) Tratar o feto afetado - ex.: puncionar bexigoma de fetos com vlvula de uretra posterior, o que
previne as deformaes da seq. de Potter e o comprometimento renal
D) Tranquilizar e reduzir a ansiedade, sobretudo entre grupos de alto risco
E) Permitir que casais em risco de terem uma criana com uma anomalia, que de outro modo
renunciariam a gerar filhos, comecem uma gestao sabendo que a presena ou ausncia do
distrbio no feto ser confirmada
3) Limitao do DPN
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No se pode presumir que o DPN exclui totalmente as anomalias fetais ou as doenas genticas!
O princpio determinar se o feto tem uma determinada condio para qual seu risco elevado,
quando comparado com a populao geral, seja por idade materna avanada, ou histria familiar ou
fatores ambientais definidos.
4.1.3) Ecografia
o mtodo mais comum de diagnstico de fetos com anomalias, quando no h idade materna
avanada nem histria familiar. Indicaes.
1. Rastrear aneuploidias - Translucncia da nuca (TN)
2. Diagnstico de sndromes genticos - morfolgica
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3. Diagnstico de malformaes multifatoriais - morfolgica
4. Determinao do sexo do feto
4.1.4) Radiografia
Os maiores efeitos sobre o feto associados radiao so atraso mental, microcefalia e atraso de
crescimento
No parece haver um aumento do risco para atraso mental em fetos expostos radiao ionizante em
doses inferiores a 5 rads, em idades gestacionais inferiores a 8 semanas ou superiores a 25 semanas
4.1.5) Isolamento de clulas fetais da circulao materna ou de DNA ou de RNA fetal livre
4.2) Invasivos
Indicaes
1. Idade materna avanada (>35 anos), pois a partir desta idade o risco de cromossomopatia
semelhante ao risco de abortamento por amniocentese ou bipsia de vilosidades corinicas
2. Filho anterior com cromossomopatia (evento novo): h maior probabildade de ter outro filho
afectado mesmo os pais sendo normais, provavelmente por mosaicismo ou tendncia no-
disjuno
3. Pais com anomalias cromossmicas
4. Histria familiar de doena hereditria que pode ser diagnosticada por mtodo bioqumico ou
molecular
5. Histria familiar de doena ligada ao X: mesmo quando no possvel o diagnstico, para
identificao do sexo fetal
6. Risco de DFTN: quando h familiares em 1 grau com DFTN ou probabilidade alta por
mtodos no invasivos (-fetoprotena no LA)
7. Alterao no rastreio bioqumico ou na ecografia (TN ou morfolgica)
4.2.1) Amniocentese
Retirada atravs de puno guiada por, transabdominal ou transvaginal.
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O LA contm clulas que podem ser cultivadas para citogentica, testes bioqumicos ou
extrao de DNA para testes moleculares. No LA tambm pode ser doseada a a-fetoprotena.
Risco de abortamento da ordem de 0,5%
Habitualmente, a amniocentese feita entre a 15a e 16 semanas de gestao, mas,
quando necessrio, pode ser feita precocemente entre a 10 e 14a semanas
4.2.3) Cordocentese
Puno do cordo umbilical, para obteno direta de sangue fetal entre a 19 e 21a semanas de
Vantagem de resultados mais rpidos
Tambm til quando a amniocentese fracassou ou quando o diagnstico por DNA impossvel,
mas a doena pode ser detectada por exames bioqumicos no sangue ou plasma
Muito til para serologia, em caso de doenas infecciosas
A incidncia de perda fetal de 2 a 3%
4.2.3) Fetoscopia
Introduo de um endoscpio transabdominal para verificar a anatomia fetal, realizar uma bipsia
de pele ou a puno do cordo umbilical
Feita entre as 15 e 18 semanas de gestao, quando a proporo entre o fluido amnitico e o feto
maior, alm de que, nessa fase, o LA ainda bastante lmpido, permitindo melhor viso
Utilizada para investigao anatmica em doenas que no podem ser pesquisadas por US (ou cujo
sinal anatmico fundamental para o estabelecimento do diagnstico sindrmico) e em alteraes
dermatolgicas ainda impossveis de deteco por tcnicas de biologia molecular (bipsia de pele)
Risco de perda fetal de 3 a 5% (alm de complicaes, como amniorrexis crnica, parto prematuro,
infeces e descolamento da placenta)
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4.2.4) Diagnstico gentico pr-implantao
Consiste em selecionar embries que esto livres de uma doena gentica especfica e transfer-los
para o tero
realizado atravs da micromanipulao do embrio do perodo de mrula (6 a 8 clulas), sendo
retiradas uma ou duas clulas para estudo
Em citogentica, a FISH permite o diagnstico numa nica clula
Os embries normais so transferidos para o tero e no h associao positiva com anomalias
fetais
Os embries afetados so descartados
Nem sempre os embries transferidos chegam a uma gravidez vivel
1) Tipos de Rastreio
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8. a proviso dos servios de sade deve ser adequada para a carga extra de trabalho clnico
resultante a triagem
9. os riscos, tanto fsicos quanto psicolgicos, devem ser menores do que os benefcios
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1.1) Uso de cido flico pr-concepo
Suplementao diria de cido flico no perodo periconcepcional e durante a gestao diminuem
significativamente a chance de ocorrncia de algumas malformaes (principalmente defeitos de
fecho do tubo neural - DFTN)
Recomenda-se o uso dirio de 0,4 mg de cido flico at o final do terceiro trimestre de gravidez
Esta recomendao especialmente importante para mulheres que:
j tiveram algum filho com este tipo de malformao
usam medicamento que aumente o risco de defeito de fecho do tubo neural (como cido valprico e
carbamazepina)
tm diabetes tipo 1
1.3) Educao em sade para evitar exposio a agentes teratogneos (lcool, medicamentos, etc.
2.3) Legislao adequada que garanta aos pais a opo (no obrigatoriedade) de interromperem
a gestao
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3.1) Rastreio neonatal
1) Estratgias de tratamento
1.3) Desvio
Desviar a rota metablica alterada para uma alternativa onde no h deficincia enzimtica, de forma
que o substrato seja metabolizado e no se acumule
bastante eficaz, desde que o produto da rota alternativa no seja txico
Exemplo: distrbios do ciclo da uria, onde o amnio, que neurotxico, convertido em ureia, um
produto benigno e excretvel; este desvio feito administrando benzoato de sdio,
1.4) Inibio
Consiste em inibir a sntese do substrato cuja enzima est deficiente
Exemplo: inibio da sntese heptica de colesterol com administrao de lovastatina nas pessoas
afetadas por hipercolesterolemia familiar
1.5) Depleo
Consiste em remover o substrato nocivo que est em excesso
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Exemplos: uso da plasmaferese para retirar colesterol nos doenes com hipercolesterolemia familiar ou
flebotomia nos doentes com hemocromatose
1.8) Chaperonas
Protenas que, alm de auxiliar o enovelamento proteico, encaminham a protena para a destruio,
caso no seja possvel atingir a configurao correta
As chaperonas constituem um importante passo na pesquisa de doenas lisossmicas
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1.11.1) Clulas estaminais do cordo
Tm caractersticas adultas, sendo no entanto mais imaturas e ainda pouco estimuladas
O cordo umbilical contem uma quantidade de clulas estaminais adultas num nvel restrito, que
atende as necessidades de um doente no mximo com 50 a 60kg utiliza-se a tcnica de adicionar
dois cordes para um mesmo doente, o que proporciona o uso em adultos de maior peso
Usadas no transplante de medula ssea - indicado para doentes com leucemias, linfomas, anemias
graves, anemias congnitas, hemoglobinopatias, imunodeficincias congnitas, mieloma mltiplo,
alm de outras doenas do sistema sanguneo e imune (cerca de 70 indicaes)
1.12.2) Requisitos
1. Identidade do defeito molecular O gene e a base bioqumica da doena devem ser
conhecidos
2. Uma cpia funcional do gene Um clone cDNA do gene (ou o prprio gene se ele no for
muito grande) deve estar disponvel
5. Relao risco-benefcio favorvel A doena, sem tratamento, deve ser to grave que
justifique os riscos envolvidos numa terapia ainda no totalmente confivel
6. Controle adequado do gene transferido O gene transferido (sem mutao) precisa ser
adequadamente controlado na talassemia, por exemplo, uma sobre-expresso do gente normal
levaria ao desequilbrio das cadeias globinas e o resultado final seria um tratamento ineficaz
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Ela deve ser acessvel para introduo direta do gene ou, em alternativa, deve ser possvel fazer o
gene chegar at esta clula, por exemplo, por meio da corrente sangunea
8. Fortes evidncias de eficcia e segurana Estudos in vitro e em animais devem indicar que a
terapia segura e confivel
9. Aprovao regulamentar essencial que a terapia tenha sido aprovada pelos comits ticos e
governamentais competentes
1.12.3.1) O mtodo ex vivo - realizado com a colheita de clulas alvo, transferncia do gene e
transplante das clulas no hospedeiro
1.12.4) Riscos
Reao adversa (imune) em funo do vetor especialmente comum no caso de vetores virais
1.12.5) Consensos
1.12.5.1) Licitute
Em clulas somticas
Na preveno e tratamento de doenas genticas
1.12.5.1) Ilicitute
Para fins eugnicos
Para melhoramento de caractersticas triviais
Em clulas germinativas, ainda que para tratamento
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1.12.6) Quando no possvel tratar?
Gene ou a fisiopatologia da doena no conhecida
Mutaes que atuam no perodo embrionrio, num momento to precoce que causam alteraes
irreversveis antes de serem diagnosticadas - muitas causam abortamento
Fentipos muito graves, especialmente no caso dos EIM, situaes que levam a ausncia da
protena - no existe protena com funo residual que possa ser aumentada
Um tratamento bem sucedido das alteraes patolgicas num rgo pode ser seguido de problemas
inesperados em tecidos que no incio no pareciam clinicamente envolvidos:
doentes com cistinose, com insuficincia renal crnica, quando submetidos a transplante renal ficam
curados da insuficincia renal, mas a longo prazo a cistinose tambm lesa clulas da tiride e do
pncreas, levando a hipotiroidismo e diabetes
doentes com retinoblastoma (forma hereditria) frequentemente desenvolvem tumores em outros
tecidos (osteosarcoma)
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