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LIVRO

UNIDADE 1

Microbiologia
Weterinria
Bplicada
Virologia geral aplicada
medicina veterinria

Fernando Zawadzki
2016 por Editora e Distribuidora Educacional S.A

Todos os direitos reservados. Nenhuma parte desta publicao poder ser reproduzida
ou transmitida de qualquer modo ou por qualquer outro meio, eletrnico ou mecnico,
incluindo fotocpia, gravao ou qualquer outro tipo de sistema de armazenamento e
transmisso de informao, sem prvia autorizao, por escrito, da Editora e
Distribuidora Educacional S.A.

2016
Editora e Distribuidora Educacional S. A.
Avenida Paris, 675 Parque Residencial Joo Piza
CEP: 86041 -100 Londrina PR
e-mail: editora.educacional@kroton.com.br
Homepage: http://www.kroton.com.br/
Sumrio

Unidade 1 | Virologia geral aplicada medicina veterinria 7

Seo 1.1 - Estrutura viral 11


Seo 1.2 - Patognese viral 23
Seo 1.3 - Diagnstico virolgico 35
Seo 1.4 - Etiopatogenia viral 47
Palavras do autor

Bem-vindo ao mundo da Microbiologia. O livro Microbiologia Veterinria


Aplicada um novo conceito de livro didtico direcionado para estudantes de
Microbiologia do curso de Medicina Veterinria. Composto por quatro unidades
que iro abordar os fundamentos bsicos de Virologia, Bacteriologia e Micologia,
possui contedos amplamente revisados e atualizados, proporcionando ao aluno
o autoestudo, de modo a fixar o contedo abordado de forma simples e adequada.

A Microbiologia estuda os microrganismos acelulares (vrus), procariontes


(bactrias, arqueas) e eucariontes (fungos, algas) e suas propriedades fsico-
qumicas. Este estudo permitir que voc identifique os agentes patolgicos virais
que acometem as diferentes espcies animais de estudo, ou os alimentos que
supostamente poderiam estar contaminados por eles. Relatos de casos de seres
humanos acometidos por microrganismos ocorrem desde a Idade Mdia, como
o surto da Peste Bubnica, Yersinia pestis, que acometeu milhes de pessoas na
Europa. Com o avano tecnolgico (microscopia tica e microscopia eletrnica)
e o aperfeioamento de tcnicas laboratoriais foi permitida a identificao de
inmeros microrganismos patognicos que acometem os animais e o ser humano,
alm do desenvolvimento de vacinas e medicamentos.

Com o objetivo de incentivar o aluno a desenvolver o autoestudo, cada unidade


de ensino proporcionar a aproximao do contedo terico-prtico a partir da
situao de realidade profissional, levando-o ao autoquestionamento do contedo.
Portanto, ela ser elaborada conforme o contedo deste estudo, o que te permitir
solucionar cada uma de suas etapas com o auxlio do contedo abordado em
cada seo.

 Na unidade 1, abordaremos: estrutura viral, patognese viral, diagnstico


viral e etiopatogenia viral.

 Na unidade 2, abordaremos: classificao viral I, classificao viral II,


classificao viral III e doenas virais veterinrias.

 Na unidade 3, abordaremos: morfologia e identificao, classificao das


bactrias I, classificao das bactrias II, classificao das bactrias III.

 Na unidade 4, abordaremos: morfologia e identificao, identificao


dos fungos filamentosos, doenas fngicas veterinrias e fisiologia e
identificao das micotoxinas.
Prezado aluno, o mdico veterinrio deve estar apto a caracterizar e a identificar
o agente patolgico a fim de propor uma resoluo do caso em estudo. O material
deste livro contm informaes bsicas e sintetizadas a fim de proporcionar a
voc aluno o desenvolvimento do autoestudo, alm de assegurar uma formao
adequada para atuar nas diferentes reas de atuao da Medicina Veterinria.

Assim sendo, desejo a voc, leitor, boas-vindas e bons estudos!


Unidade 1

VIROLOGIA GERAL APLICADA


MEDICINA VETERINRIA

Convite ao estudo
Bem-vindo ao mundo da Virologia. Esta uma cincia que estuda os
vrus e suas propriedades fsico-qumicas. Os vrus so microrganismos
acelulares, extremamente pequenos, que podem infectar uma ampla
variedade de hospedeiros, como: animais, plantas, bactrias, e outros
tipos de clulas procariticas e eucariticas. Considerados parasitas
intracelulares obrigatrios, eles so dependentes da maquinaria celular
para desenvolver suas atividades biolgicas e se multiplicar. Mas, em um
ambiente extracelular, so considerados meras estruturas qumicas, sem
funo biolgica.

Diferentes agentes virais infectam animais de companhia e de


produo, causando danos na sade e no bem-estar dos animais,
alm de perdas econmicas. Portanto, compreender a Virologia de
fundamental importncia para o mdico veterinrio na sociedade atual, a
fim de estudar os mecanismos e patogenicidade virais, bem como suas
vias de transmisso e, dessa forma, aplicar os conhecimentos no controle
e no tratamento das doenas infecciosas. Os contedos abordados nesta
unidade de ensino permitiro que voc, aluno, compreenda os conceitos
e as definies bsicas de Virologia, os componentes estruturais que
constituem um vrus, as etapas de replicao viral na clula hospedeira,
bem como conhecer os principais mtodos de diagnsticos laboratoriais
e as alteraes morfolgicas causadas pelos vrus na clula hospedeira.

Competncia geral

Conhecer os principais microrganismos de interesse em Medicina


Veterinria (bactrias, fungos e vrus), enfocando particularmente a
taxonomia, caractersticas morfolgicas, ecolgicas, de sensibilidade,
resistncia e identificao laboratorial.
U1

Competncia tcnica

Conhecer e compreender as particularidades dos vrus classificados


nas diferentes famlias virais de importncia clnica para a veterinria.

Objetivos

Dentre os objetivos desta unidade, o aluno dever compreender:

 Conceitos e definies bsicas de Virologia;

 Caracterizar os componentes de uma partcula vrica;

 Compreender as etapas de replicao dos vrus DNA e RNA;

 Conhecer os principais mtodos de diagnstico laboratoriais;

 Compreender as alteraes morfolgicas ocorridas na clula


hospedeira;

 Aplicar o conhecimento adquirido no estudo em situaes


prximas da realidade profissional.

Para auxiliar o contedo das competncias que sero atribudas nesta


unidade, no pargrafo subsequente vamos apresentar uma Situao
de Realidade Profissional de um atendimento clnico realizado por um
mdico veterinrio. Nesta situao, aproximaremos os contedos tericos
com a prtica proposta nesta unidade. Leia com ateno o atendimento
clnico realizado.

Recentemente, um produtor rural chamou o mdico veterinrio de sua


confiana para fazer um atendimento clnico em sua propriedade. Durante
a visita, informou ao profissional que nos ltimos 3 dias a dieta das vacas
havia sido alterada e que elas estavam salivando. O mdico veterinrio
prosseguiu com o exame clnico das vacas em lactao e constatou
intensa salivao, algumas leses vesiculares no nariz e na mucosa oral e,
em outra vaca, foram observadas eroses e lceras na lngua com leses
vesiculares em um dos tetos. O exame clnico tambm foi realizado
em alguns sunos, mencionados pelo produtor, sendo constatada a
presena de leses vesiculares interdigitais (membro anterior e posterior)
acompanhadas de claudicao. Suspeitando ser uma doena vesicular
infecciosa, o mdico veterinrio realizou os procedimentos bsicos de
acordo com a legislao para casos de animais que apresentam leses
vesiculares, notificando, assim, o Servio Veterinrio Oficial ( 3, art.

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U1

4, Instruo Normativa n 44, de 2 de outubro de 2007). Ele indicou


a possibilidade da existncia de um ou mais animais que apresentavam
sinais clnicos compatveis com doena vesicular infecciosa.

Ento, vamos comear os estudos?

Mos obra e boa sorte!

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U1

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U1

Seo 1.1

Estrutura viral

Dilogo aberto

Ol, aluno! Seja bem-vindo primeira seo de estudos deste livro didtico!

Nesta seo, estudaremos as estruturas biolgicas e as propriedades fsico-


qumicas dos vrus. Para melhor compreender o contedo abordado, vamos
acrescentar informaes na situao-problema referente ao relato de caso
apresentado no Convite ao estudo, dessa forma, voc participar indiretamente
da resoluo do caso.

Em continuidade com o relato de caso apresentado na Situao de Realidade


Profissional, o Servio Veterinrio Oficial foi notificado (SVO), indicando a suspeita
de febre aftosa. Em seguida, um mdico veterinrio do SVO se deslocou at a
propriedade rural para realizar o levantamento das informaes (localizao da
propriedade, rebanho existente, movimentao de animais, compra e venda de
animais, vias de acesso propriedade, demais propriedades pertencentes ao
mesmo produtor, entre outras informaes) e para a coleta de amostras. De acordo
com ele, em casos suspeitos de febre aftosa, investigaes complementares so
necessrias para que se possa distinguir doenas vesiculares que apresentam sinais
clnicos semelhantes, tais como: febre aftosa, estomatite vesicular, doena vesicular
dos sunos e exantema vesicular. Segundo o mdico veterinrio, suspeita-se que
os animais foram acometidos por um vrus pertencente famlia Picornaviridae.

Para compreender melhor a situao apresentada, vamos fazer uma anlise


detalhada dos sujeitos que esto participando do texto. A seguir, vamos apresentar
algumas questes para ajudar voc a entender o atendimento clnico:

 Quais espcies animais foram mencionadas no texto?

 Quais os sinais clnicos apresentados no texto, aps o exame realizado nos


animais?

 O mdico veterinrio poderia proceder com a emisso de um resultado


final ao proprietrio sem um diagnstico laboratorial?

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U1

Mediante os contedos abordados nesta seo, defina o que um vrus. A


partcula viral caracterizada por dois grupos, como eles so denominados? Cite os
componentes que formam cada grupo da partcula viral e suas respectivas funes.

No pode faltar

Prezado aluno, a partir desta seo, vamos comear a estudar os contedos


aplicados Virologia, como conceitos, definies, taxonomia, morfologia, estruturas
biolgicas e as propriedades fsico-qumicas dos vrus. Eles so microrganismos
acelulares que podem infectar uma variedade ampla de hospedeiros, como animais,
plantas, bactrias e fungos, entre outras clulas eucariontes e procariontes. Dentre
as diferentes clulas hospedeiras, nesta seo abordaremos os vrus que infectam
as clulas animais. Vamos l!

Introduo Virologia

Os vrus so parasitas intracelulares obrigatrios, os quais necessitam de clulas


hospedeiras para se multiplicar. Para ativar suas funes biolgicas, eles infectam
a clula hospedeira, tornando o cido nuclico ativo e, com auxlio da maquinaria
celular, inicia-se a multiplicao da partcula vrica. Por outro lado, quando
presentes em um meio extracelular (fora da clula hospedeira) so considerados
meras estruturas qumicas, ou seja, uma partcula vrica inerte.

O termo vrus compreende o microrganismo (a palavra virus originria do


latim, que significa veneno), mas outras denominaes tambm so encontradas
na literatura, como partcula vrica, partcula viral ou vrion, utilizadas quando se
refere estrutura real do vrus, ou seja, a estrutura fsica completa que carrega
consigo o genoma. Dentre os componentes que constituem a partcula vrica
(capsdeo, genoma, envelope e matriz), o genoma contm uma pequena parte
dos genes que codificam outras protenas do capsdeo com o auxlio de enzimas
que sero utilizadas na multiplicao viral. Cada genoma viral constitudo de um
nico cido nuclico, ou seja, de um cido desoxirribonuclico (DNA) ou cido
ribonuclico (RNA), que, dependendo do vrus, pode conter DNA de fita simples ou
dupla, ou RNA de fita simples ou dupla.

Assimile

Os vrus so microrganismos acelulares, ou seja, no possuem clula.

O genoma viral composto por um nico cido nuclico (cido


ribonuclico RNA ou cido desoxirribonuclico DNA).

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O mundo dos vrus apresenta uma ampla variedade de espcies virais, as quais
so classificadas de forma hierrquica: ordem, famlia, subfamlia, gnero, espcie
e subespcie. As regras oficiais de classificao viral so determinadas pelo Comit
Internacional para Nomenclatura de Vrus (International Committe on Taxonomy
of Viruses), as quais so revisadas periodicamente, com o objetivo de atualizar e
incorporar novas descobertas cientficas.

Exemplificando

Para melhor compreender a taxonomia dos vrus, vamos classificar o


agente patognico da enfermidade Mamilite herptica bovina:

Famlia: Herpesviridae; Subfamlia: Alphaherpesvirinae; Gnero:


Simplexvirus; Espcie: Herpesvirus bovino; e Subespcie: BoHV-2.

Nas ltimas dcadas, a microscopia tica e eletrnica permitiu a identificao


de vrus extremamente pequenos, podendo, assim, caracterizar sua morfologia
e tamanho. Recentemente, com os avanos no estudo da genmica, o
sequenciamento do cido nuclico tem sido utilizado como critrio de taxonomia.
Demais conceitos, tambm importantes, permanecem nas atuais revises de
taxonmica viral, como: morfologia da partcula viral; sistema de classificao de
Baltimore com base nas propriedades do cido nuclico (DNA ou RNA); atividades
funcionais das protenas estruturais; propriedades fsico-qumicas (estabilidade
em pH, termo estabilidade e suscetibilidade a agentes qumicos); propriedades
biolgicas (modo de transmisso, patogenicidade, vetores, etc.); os quais so
empregados para caracterizar e classificar os vrus.

Componentes da Partcula vrica

Estruturalmente, os vrions so caracterizados em dois grupos: vrions ausentes


de envelope e vrions que contm o envelope. A diferena bsica entre estes dois
grupos est relacionada com a presena ou ausncia do envelope, sendo que
ambos possuem capsdeo e genoma (Figura 1.1).

Figura 1.1 | Componentes estruturais bsicos dos vrions: 1 Vrion sem envelope (a)
capsdeo e (b) genoma; 2 Vrion com envelope, (a) envelope, (b) capsdeo e (c) genoma.

Fonte: Adaptado de Flores (2012).

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U1

Conseguiu assimilar os componentes de um vrus? Foi fcil, no mesmo?


A seguir, vamos estudar detalhadamente os componentes dos vrions: envelope,
capsdeo, genoma e matriz. Vamos l!

Envelope

O envelope constitudo por uma membrana lipoproteica. Os lipdeos


(fosfolipdios e colesterol) presentes na bicamada lipdica so oriundos da membrana
da clula hospedeira, enquanto as protenas (glicoprotenas) so codificadas pelos
genes do vrion. Ambos os processos ocorrem durante a morfognese pelo
processo denominado brotamento (processo de insero dos nucleocapsdeo na
membrana da clula hospedeira).

As glicoprotenas so codificadas pelos genes no aparelho de Golgi e no


retculo endoplasmtico rugoso, as quais podem ser armazenadas no mesmo local
de sntese ou transferidas para a membrana plasmtica durante o brotamento.
As protenas integrais de membrana possuem uma parte interna (denominada
protenas transperifricas) e outra parte exposta (denominada cauda).

A cauda constituda de aminocidos hidrofbicos, os quais desempenham


diversas funes, como ligao aos receptores da clula, fuso do envelope e
membrana, penetrao do vrus na clula hospedeira e difuso do mesmo para
outras clulas. J a parte que est na transmembra tem a funo de ancorar a
protena. De modo geral, as glicoprotenas auxiliam os vrions nas interaes vrion
x clula para iniciar a infectividade.

Capsdeo

O capsdeo constitudo de uma camada proteica que envolve e confere


proteo ao genoma. Ela assegura a integridade do material gentico para
multiplicao viral. Durante a infeo viral de vrions sem envelope, as protenas
presentes no capsdeo interagem com a clula hospedeira e com os anticorpos
do sistema imune, em alguns casos, as inativa e favorece a penetrao do vrus.

Em sua estrutura, o capsdeo formado pela associao de diferentes tipos de


protenas ou de uma mesma protena. Para melhor compreender essa formao,
diferentes nomes so designados de acordo com associao de diferentes
protenas ou componentes. Alm das protenas de constituio da camada
proteica, outras protenas podem estar associadas com o genoma, esta associao
denomina-se ncleo ou core. Com o conceito formado sobre ncleo, denomina-
se nucleocapsdeo a associao do ncleo (core) e capsdeo.

O capsdeo constitudo por subunidades proteicas denominadas protmeros,


que, quando associados, formam unidades tridimensionais denominadas
capsmeros, as quais so responsveis por definir a simetria do vrion. Os vrions

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envelopados e no envelopados possuem duas principais simetrias: helicoidal e


icosadrica. Entretanto, alguns vrions podem apresentar simetrias complexas. Nas
figuras a seguir, sero apresentadas as duas principais simetrias e os componentes
bsicos dos vrions:

Figura 1.2 | Vrion de simetria helicoidal sem Figura 1.3 | Vrion de simetria icosadrica
envelope: (a) capsdeo, (b) genoma e (c) sem envelope: (a) capsdeo, (b) genoma e
capsmero. (c) capsmeros.

Figura 1.4 | Vrion de simetria helicoidal Figura 1.5 | Vrion de simetria isocadrica
com envelope: (a) capsdeo, (b) genoma, com envelope: (a) capsdeo, (b) genoma,
(c) capsmero (constitudo de subunidades (c) capsmero (constitudo de subunidades
de protmeros), (d) envelope e (e) protenas de protmeros), (d) envelope, (e) matriz e (f)
do envelope. protenas do envelope.

Fonte: Adaptado de Flores (2012).

Genoma

O genoma constitudo de uma nica molcula de cido nuclico:


desoxirribonuclico (DNA) ou ribonuclico (RNA). Assim, com base no cido
nuclico, os vrus podem ser classificados em vrus DNA e vrus RNA (classificao
de Baltimore). Entretanto, alguns vrus, como os retrovrus, utilizam ambos cidos
nuclicos nos diferentes estgios de multiplicao viral.

Estruturalmente, o genoma ser constitudo de um nico cido nuclico (DNA


ou RNA), o qual poder estar presente na forma de fita simples (fsDNA ou fsRNA) ou
em fita dupla (fdDNA ou fdRNA) e, em alguns casos, utiliza os dois cidos nuclicos
durante a multiplicao viral, porm o genoma viral sempre ser composto de um
nico cido nuclico.

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Figura 1.6 | Componentes do genoma viral

Fonte: Adaptado de Madigan (2010).

Os genomas dos vrus DNA so constitudos em sua maioria de fdDNA. De


acordo com o agente viral, a cadeia de fdDNA pode apresentar formas variadas,
como linear, circular ou semelhantes a um grampo de cabelo. Entretanto, alguns
podem apresentar fsDNA (parvovirus, circovirus e hepadnavirus). Os vrus RNA, em
sua maioria, so constitudos de fsRNA. Os vrus fsRNA lineares so constitudos
de uma nica molcula (denominados de monopartite ou de genomas no
segmentados) ou mais de uma molcula (denominados de multipartite ou genomas
segmentados). Com exceo de alguns vrus, como: reovirus e birnavirus, os quais
possuem genoma segmentados de fdRNA.

Durante o processo de replicao do genoma, o primeiro passo a traduo


do RNA. Uma caracterstica importante dos vrus RNAs o sentido que o genoma
se apresenta em relao ao RNA mensageiro no processo de traduo. Os vrus
RNAs de sentido positivo (polaridade positiva), possuem o mesmo sentido do RNA
mensageiro; enquanto outros possuem RNAs de sentido negativo (polaridade
negativa), ou seja, de sentido oposto ao RNA mensageiro. Os virus RNAs de
polaridade positiva so traduzidos diretamente no ribossomo da clula hospedeira,
enquanto os vrus que possuem RNAs de polaridade negativa no so traduzidos
diretamente no ribossomo, pois necessitam da enzima polimerase de RNA para
iniciar o processo de traduo.

Pesquise mais
Voc sabia que a classificao de Baltimore um sistema de classificao
viral baseado na sntese de RNA mensageiro? Acesse o link disponvel
em: <https://pt.wikipedia.org/wiki/V%C3%ADrus>. Acesso em: 27 maio
2016. e descubra mais sobre a classificao de Baltimore.

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Matriz

A denominao de matriz designada para as protenas que envolvem


o nucleocapsdeo. A matriz encontrada principalmente em vrus RNAs de
polaridade negativa, essas protenas desempenham papel importante na interao
entre os nucleotdeos com a cauda das glicoprotenas, durante o processo de
morfognese.

Protenas codificadas pelos vrus e outros componentes dos vrions

As protenas codificadas pelo genoma dos vrions so classificadas em


estruturais e no estruturais. Para compreender melhor, as protenas estruturais
esto presentes na estrutura do vrion, mais precisamente no capsdeo (core ou
ncleo). Enquanto as protenas no estruturais so as que desenvolvem atividades
enzimticas, dentre as quais pode-se citar as enzimas DNA polimerase e RNA
polimerase. A quantidade dessas protenas codificadas pelo genoma varia de
acordo com a complexidade do vrus.

Os principais componentes estruturais dos vrions foram descritos anteriormente,


porm outros componentes, como enzimas, protenas, lipdeos, carboidratos,
cidos nucleicos celulares e protenas celulares esto presentes nos vrions, os quais
desempenham papeis importantes durante o processo de multiplicao viral. So eles:

 Enzimas Os vrus de fsRNA e com polaridade negativa necessitam da enzima


polimerase de RNA para iniciar o processo de traduo. Diversas enzimas
presentes em diferentes vrions participam no processo de replicao viral,
como: endonucleases, proteases, quinases, integrases e ribonuclease.

 Lipdios Constitudos de fosfolipdios e colesterol, os lipdios constituem


de 20 a 35% da massa presente nos vrus envelopados. Os lipdios so
derivados da membrana da clula hospedeira.

 Carboidratos Constitudos de glicoprotenas, glicolipdios e


mucopolissacardeos, esto presentes no envelope de vrus simples e
associados com protenas internas em vrus complexos.

Propriedades biolgicas e fsico-qumicas das partculas vricas

Os vrus fora da clula hospedeira so considerados meras estruturas qumicas,


ou seja, so biologicamente inertes. Por outro lado, algumas partculas vricas
podem ser anmalas, ou seja, no causam infeces mesmo dentro da clula.
Esta anomalia pode ser causada por diversos fatores, que variam de acordo com
o vrus, dentre os quais, pode-se mencionar a ausncia de genoma (DNA ou RNA),
incompleta formao de segmentos genmicos; genomas com delees em
um ou mais genes, denominados de partculas defectivas; capsdeos vazios em
funo da degradao do genoma; formao de partculas vricas incompletas.

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Reflita

Os vrus so parasitas intracelulares obrigatrios.

Diferentes fatores podem comprometer as atividades funcionais dos vrions.


Fatores fsico-qumicos, como temperatura e pH, podem comprometer a integridade
das estruturas biolgicas dos vrions, inativando-os. Temperaturas na faixa de 55 a
60C causam desnaturao das protenas, o que compromete a integridade das
estruturas e das funes biolgicas dos vrions. Comparando os tipos de vrions
envelopados e os sem envelope, os que possuem envelope so mais suscetveis em
funo da presena de protenas na camada superficial. Alguns vrus so suscetveis
temperatura ambiente e quando so submetidos a processos de congelamento
e descongelamento. Pensando na conservao em longo perodo de tempo,
recomenda-se manter em temperaturas abaixo de -70C ou em nitrognio lquido,
a -196C. Porm, em processos de liofilizao das amostras, somente so eficientes
quando as amostras mantidas na faixa de -20 a 4C.

Em relao ao potencial hidrogeninico (pH), a integridade da atividade


biolgica dos vrions com envelope influenciada j no incio da queda do pH da
neutralidade para base cida (pH 6 para 5). Enquanto alguns vrions sem envelope
apresentam maior resistncia em condies de pH cido, assim denominadas de
cido-resistentes (ex. rotavrus). Algumas substncias qumicas, como formalina e
detergentes, atuam sobre as glicoprotenas do envelope, alterando a conformao
das protenas e comprometendo a atividade biolgica dos vrus (infectividade).
Outros solventes, como ter de petrleo e clorofrmio, comprometem os
componentes da camada lipdica.

Faa voc mesmo

Agora voc sabe o que um vrus? Ento, defina-o e explique: Por que
ele considerado parasita intracelular obrigatrio?

Sem medo de errar

Para compreender melhor a situao apresentada, vamos recapitular os pontos


que foram analisados anteriormente da Situao de Realidade Profissional, que
abrange as espcies animais, os sinais clnicos e o tipo de microrganismo suspeito.
De acordo com o descrito no relato de caso, duas espcies animais apresentaram
sinais clnicos, sendo 2 vacas e 3 sunos. Durante o exame clnico dos animais, as
vacas apresentavam intensa salivao, leses vesiculares no nariz e na mucosa oral,

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eroses e lceras na lngua, alm de leses vesiculares nos tetos. Enquanto isso, nos
sunos foram observadas leses vesiculares na interdigital dos ps (tanto no membro
anterior como membro posterior).

Ateno!

A doena causada por um vrus.

Os sinais clnicos auxiliam para predizer uma suspeita, porm no possvel


determinar um diagnstico definitivo neste caso. Assim, necessria a coleta de
material biolgico para anlise em laboratrio. O microrganismo suspeito que
est acometendo os animais o vrus da febre aftosa. Assim sendo, investigaes
complementares so necessrias para distinguir de outras doenas vesiculares que
apresentam sinais clnicos semelhantes. Com base nessas informaes, podemos
prosseguir com um estudo mais detalhado, conhecendo melhor o microrganismo.

Os vrus so microrganismos acelulares e extremamente pequenos, os quais


podem infectar uma variedade ampla de hospedeiros. So parasitas intracelulares
obrigatrios, os quais dependem das funes e do metabolismo celular para exercer
a atividade biolgica, ou seja, para se multiplicar. Estruturalmente, as partculas vricas
podem ser classificadas em dois grupos: com envelope ou sem envelope. Os vrus
envelopados constituem-se de: envelope, capsdeo, genoma e matriz, em alguns
casos. Enquanto isso, os vrus sem envelope so constitudos apenas de capsdeo
e genoma. O envelope constitudo de uma membrana lipoproteica. As protenas
existentes nesta camada so codificadas pelos genes, enquanto que os lipdios so
oriundos da membrana da clula hospedeira. O capsdeo constitudo de uma
camada proteica, o qual envolve e confere proteo ao genoma. Ambos, envelope
e capsdeo, conferem proteo ao genoma contra agentes qumicos, enzimticos
ou danos fsicos. O genoma constitudo de uma nica molcula de cido nuclico:
desoxirribonuclico (DNA) ou ribonuclico (RNA), o qual por codificar as protenas
e assegurar a replicao.

Avanando na prtica

Para auxiliar no contedo das competncias que foram atribudas, no pargrafo


subsequente, vamos apresentar uma nova Situao de Realidade Profissional, que
se refere ao atendimento clnico de um co. Nesta situao, aproximaremos os
contedos tericos com a prtica proposta nesta seo de ensino. Leia com ateno
o atendimento clnico realizado pelo mdico veterinrio.

Vrus da Cinomose Canina uma doena altamente contagiosa em ces

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U1

Recentemente, um proprietrio encaminhou seu co ao Hospital Veterinrio


da cidade. Durante o atendimento, o senhor relatou que seu animal apresentava
anorexia, tosse e vmito. Onde o animal permanecia, no havia vestgios de fezes ou
urina e o pote de gua permanecia cheio. De acordo com o proprietrio, o animal
tinha contato com outros animais da rua somente pela grade da cerca e durante o
perodo noturno. Alm disso, o proprietrio relatou que o animal tinha sido medicado
com um vermfugo h 6 meses e que a ltima vacina realizada foi a antirrbica
(o animal no tinha carteira de vacinao). Durante o exame clnico, o mdico
veterinrio constatou que o animal estava aptico, com leve desidratao, hipertermia
(40,0C), presena de carrapatos, secreo nasal e ocular mucopurulenta. Tambm
foi observado hiperceratose no nariz. Com base nos exames clnicos, foi solicitado
hemograma, contagem de plaquetas e hematozorios. Foi institudo um tratamento
de fluidoterapia infundido com um complexo vitamnico para o co. Os exames
evidenciaram linfopenia, indicando um processo infeccioso viral, trombocitopenia,
indicando a reduo de plaquetas e a presena de corpsculo de incluso nas clulas
de linfcitos e neutrfilo. Com a presena do corpsculo de Lentz, confirmado o
diagnstico para cinomose, a qual causada por um agente viral pertencente
famlia Paramyxoviridae que contm uma nica molcula de RNA.

Mediante os contedos abordados nesta seo, responda as seguintes questes:


Comente sobre os tipos de cidos nuclicos que um genoma viral pode apresentar.
Explique o que um vrus RNA de polaridade positiva e negativa.

Lembre-se

O genoma contm uma nica molcula de DNA ou RNA, que podem


estar presentes na forma de fita simples ou dupla. Os vrus RNAs de fita
simples podem apresentar RNA de polaridade positiva ou negativa.

Resoluo da situao-problema

Em continuidade com o relato de caso apresentado na nova Situao de


Realidade Profissional, os exames laboratoriais evidenciaram que o co estava
acometido pelo Vrus da Cinomose Canina (VCC). A cinomose uma doena
altamente contagiosa em ces e de mortalidade varivel. O VCC pertence famlia
Paramyxoviridae, subfamlia Paramyxovirinae, Gnero Morbillivirus, o qual contm
uma nica molcula de RNA de fita simples. Conhecer o tipo de cido nuclico que
o genoma contm importante para compreender a replicao viral que apresenta
diferentes caractersticas. Para melhor compreender os constituintes do genoma,
mediante o contedo estudado, vamos responder s questes do caso clnico.

Nas diferentes espcies virais, o genoma pode ser constitudo de uma molcula

20 Virologia geral aplicada medicina veterinria


U1

de cido desoxirribonuclico (DNA) ou de cido ribonuclico (RNA), porm nunca


ambos. As molculas de DNA e RNA podero estar presentes na forma de fita simples
(fsDNA ou fsRNA) ou em fita dupla (fdDNA ou fdRNA) e, em alguns casos, utilizam
os dois cidos nuclicos durante a multiplicao viral, porm o genoma viral sempre
ser composto de uma nica molcula de cido nuclico (DNA ou RNA).

Outra caracterstica importante dos vrus RNAs o sentido que o genoma se


apresenta em relao ao RNA mensageiro. Os vrus de sentido positivo (polaridade
positiva), possuem o mesmo sentido do RNA mensageiro, que permite serem
traduzidos diretamente no ribossomo. Enquanto os vrus de sentido negativo
(polaridade negativa) no so traduzidos diretamente no ribossomo, pois necessitam
da enzima RNA polimerase, que auxilia no processo de traduo.

Faa valer a pena!

1. A estrutura fsica do vrus denominada vrion, o qual possui


diferentes componentes que constituem sua estrutura.
Os principais componentes de uma estrutura vrica bsica so
denominados de _________________, ______________,
________________ e __________________.
Assinale a alternativa que completa corretamente as lacunas:
a) Capsdeo, genoma, envelope e glicerol.
b) Glicerol, capsdeo, genoma e matriz.
c) Capsdeo, genoma, envelope e matriz.
d) Antgeno, capsdeo, genoma e matriz.
e) Capsdeo, genoma, envelope e antgeno.

2. Os vrus so microrganismos extremamente pequenos e dependentes


da maquinaria da clula hospedeira.
Qual das caractersticas apresentadas a seguir, um vrus no apresenta?
Assinale a alternativa correta:
a) Os vrus so parasitas intracelulares obrigatrios.
b) Os vrus so considerados meras estruturas qumicas e biologicamente
inertes quando fora da clula hospedeira.
c) A estrutura fsica do vrus denominada de vrion, partcula vrica ou
partcula viral.
d) O capsdeo da partcula vrica composto de unidades morfolgicas

Virologia geral aplicada medicina veterinria 21


U1

denominadas de capsmeros.
e) O envelope composto de uma camada proteica presente em todos
os vrus RNA e DNA.

3. Os vrus podem ser constitudos de diferentes componentes, dentre


os quais, o genoma pode ser constitudo por um nico cido nuclico.
Como so chamados os dois principais cidos nuclicos? Assinale a
alternativa correta:
a) cido ribonuclico e cido desoxirribonuclico.
b) cido araquidnico e cido linolico.
c) cido ribonuclico e cido docadecanico.
d) cido desoxirribonuclico e cido docadecanico.
e) cido araquidnico e cido ribonuclico.

22 Virologia geral aplicada medicina veterinria


U1

Seo 1.2
Patognese viral

Dilogo aberto

Ol, aluno! Seja bem-vindo segunda seo de estudos deste livro didtico!

Nesta seo, estudaremos conceitos de suscetibilidade e permissividade dos


agentes virais e as etapas da replicao dos vrus DNA e RNA. Para auxiliar no
contedo abordado, vamos apresentar novas informaes na situao-problema
referente ao relato de caso apresentado no Convite ao estudo, dessa forma, voc
participar indiretamente na resoluo do caso.

Em continuidade ao relato de caso apresentado na Situao de Realidade


Profissional, o Servio Veterinrio Oficial foi notificado (SVO) com a suspeita de
febre aftosa (vrus pertencente famlia Herpesviridae). Diferentes tipos de amostras
(material biolgico) foram coletados dos animais suspeitos. Aps identificao,
foram enviados para anlise laboratorial (Laboratrios Nacionais Agropecurios
(LANAGRO), vinculado ao Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento
MAPA). As amostras enviadas continham fragmentos do epitlio vesicular da
regio oral, nasal e interdigital, alm do lquido esofgico-farngeo e do soro
sanguneo. A determinao de coletar diferentes tipos de materiais biolgicos
necessria em funo do vrus suspeito poder se replicar em diferentes clulas do
hospedeiro. Mediante os contedos abordados nesta seo, responda as questes
a seguir: a) Conceitue os termos a seguir: infeco, infeco produtiva, infeco
abortiva, suscetibilidade, permissividade e internalizao; b) Cite os processos de
penetrao que a partcula viral pode utilizar para introduzir o material gentico na
clula hospedeira.

No pode faltar

Ol, aluno! Nesta seo abordaremos os conceitos de suscetibilidade e


permissividade, e, em seguida, conheceremos as principais etapas que ocorrem
na replicao de uma partcula vrica. Vamos iniciar os estudos!

Suscetibilidade e permissividade dos agentes virais

Virologia geral aplicada medicina veterinria 23


U1

O termo infeco (derivada da palavra infere, do latim, que significa penetrar)


empregado para caracterizar todas as etapas do processo de replicao viral
(adsoro, penetrao, expresso gnica, replicao do genoma, morfognese,
maturao e egresso da prognie viral). O processo de replicao viral, tambm
denominado de ciclo replicativo, se inicia com a adsoro e penetrao, e
finalizado com as etapas subsequentes (internalizao, replicao, morfognese,
maturao e egresso). Alguns termos devem ser conhecidos para melhor
compreenso do ciclo replicativo. Vamos l!

Assimile

Infeco produtiva: quando todas as etapas so realizadas.

Infeo abortiva: a replicao parcial, ou seja, quando ocorre


interrupo de alguma etapa aps penetrao na clula hospedeira.

Naturalmente, todas as clulas vivas esto sujeitas infeco viral. No entanto,


a clula hospedeira pode apresentar particularidades ou fatores que interferem
nesse processo, que se caracteriza em duas situaes: suscetibilidade (refere-
se aceitabilidade das clulas do hospedeiro infeco viral) e permissividade
(refere-se as condies do ambiente intracelular para que ocorra o processo de
replicao viral).

Entretanto, ocorrem situaes em que a clula hospedeira no possui as duas


caractersticas de suscetibilidade e permissividade, impedindo o ciclo replicativo.
Para sua melhor compreenso, vamos exemplificar a situao. Vamos l!

Exemplificando

Clula no suscetvel: situaes em que a clula hospedeira


permissvel infeo, porm pela ausncia de receptores ou de outros
fatores (virais ou celulares) impede a penetrao do vrus.

Clulas semipermissivas: situaes em que a clula hospedeira


suscetvel infeco, porm ocorre a interrupo de alguma etapa
inicial do ciclo replicativo.

A interao entre hospedeiro e espcies virais complexa e envolve diversos


fatores. Dentre as espcies animais existe uma grande variao de suscetibilidade
s espcies virais, comprometendo ou no o ciclo replicativo. Na primeira etapa
do ciclo replicativo, a presena de molculas especficas na membrana plasmtica
(receptores virais) determinante na suscetibilidade e tropismo (aceitao do vrus
por determinadas clulas).

24 Virologia geral aplicada medicina veterinria


U1

Vocabulrio

Patgeno: refere-se ao agente infeccioso que causa a doena.

Patogenicidade: refere-se capacidade do agente de infectar a clula


hospedeira e causar a doena.

Patognese ou patogenia: refere-se as etapas ou mecanismos


envolvidos no desenvolvimento da doena.

Etapas da replicao dos vrus DNA e RNA

Os mecanismos envolvidos na replicao dos vrus DNA e nos vrus RNA so


semelhantes, porm com algumas caractersticas especficas. Neste tpico, vamos
apresentar as principais etapas de replicao, que so semelhantes para os vrus
DNA e RNA. Vamos l!

Adsoro

No processo inicial de infeco viral, a adsoro a primeira etapa para o


vrus penetrar na clula hospedeira. O contato entre a partcula vrica a clula
hospedeira um evento ao acaso, que ocorre por meio de uma interao qumica
independente de energia ou do metabolismo celular. Os receptores presentes na
clula hospedeira desempenham diferentes funes no metabolismo celular. Para
os vrus, estes receptores se tornam portas de entrada para iniciar a infeco.

De acordo com a estrutura da partcula vrica (vrions com ou sem envelope),


o processo de adsoro ser mediado por molculas (protenas, glicoprotenas,
lipdios, lipoprotenas, etc.) presentes na superfcie, as quais se se ligam aos
receptores da clula hospedeira (processo denominado Viral attachment proteins
VAPs). Nas partculas vricas sem envelope, o processo de adsoro mediado
pelas protenas do capsdeo, j nas partculas com envelope, o processo de
adsoro mediado pelas glicoprotenas ou glicolipdios.

Estudos mostram que cada partcula vrica possui local e receptor especfico
durante a adsoro para que ocorra penetrao. Nesses locais h a liberao
de sinais qumicos que auxiliam no processo de penetrao por endocitose. Em
alguns vrus, a ligao de um determinado receptor no suficiente para efetivar
a penetrao na clula hospedeira, desta forma, a partcula vrica interage com
outras protenas (denominadas de co-receptores). Com a fuso do envelope na
membrana celular, em seguida ocorre a formao da vescula endoctica, a qual
recobre o nucleocapsdeo.

Virologia geral aplicada medicina veterinria 25


U1

Exemplificando

Vrus DNA da famlia Parvoviridae (Parvovrus canino): liga-se ao


receptor transferrina localizado no endossomo.

Vrus RNA da famlia Flaviviridae (Vrus da diarreia viral bovina): liga-se


ao receptor CD46 bovino localizado no endossomo.

Penetrao

A etapa de penetrao ocorre aps a adsoro da partcula vrica na clula


hospedeira. Nessa etapa, existem mecanismos especficos de penetrao que
as partculas vricas utilizam, porm existem mecanismos diretos para transferir
o material gentico para a clula hospedeira. No mecanismo direto, o processo
ocorre mediante a adsoro de protenas virais com membrana lateral da clula,
porm este mecanismo, ou seja, a simples internalizao no assegura que a
replicao ir efetivar, em funo de vrios fatores envolvidos.

Em mecanismos especficos, a penetrao da partcula vrica pode ocorrer sem


prvia internalizao (na superfcie da clula) ou aps internalizao (no interior do
citoplasma) com a formao de vesculas. As etapas de penetrao e internalizao
da partcula vrica so consideradas um processo ativo, o qual mediado com
auxlio de energia proveniente da clula. Dentre os diferentes mecanismos para
introduzir o nucleocapsdeo (genoma e protenas) no interior da clula, pode-se
citar a penetrao por fuso na superfcie celular, a penetrao aps endocitose
(mediada por clatrina, caveolina ou lipdios) e a penetrao por fagocitose ou
macropinocitose. A seguir, vamos apresentar cada mecanismo. Vamos l!

Penetrao por fuso na superfcie

Neste mecanismo, o processo penetrao ocorre na superfcie da clula


hospedeira. O nucleocapsdeo penetra mediante um canal formado a partir
da fuso das protenas do envelope com a membrana da clula hospedeira.
No entanto, algumas barreiras presentes na clula hospedeira podem dificultar
a introduo do nucleocapsdeo para alcanar o local adequado. Dentre essas
barreiras, observa-se que clulas com citoesqueleto cortical de maior espessura
podem dificultar a penetrao do nucleocapsdeo, entretanto, a partcula vrica
desenvolve mecanismos alternativos e consegue chegar ao citoplasma celular.

Penetrao por endocitose

Este mecanismo amplamente utilizado pelos vrus com ou sem envelope (mais
relevante para os vrus envelopados) em funo de ser um processo natural que
ocorre na maioria das clulas. Nesse processo, a fuso dos vrions pode ocorrer

26 Virologia geral aplicada medicina veterinria


U1

em qualquer ponto da membrana da clula hospedeira. Em seguida, os vrions so


internalizados para assegurar seu deslocamento at o local de expresso gnica.

 Endocitose mediada por receptor clatrina: a clatrina uma protena que est
presente na parte voltada para o citoplasma em cavidades da membrana
plasmtica da clula hospedeira. Durante a formao da vescula, a clatrina
reveste a vescula e confere estabilidade. Aps a completa invaginao,
o revestimento de clatrina removido da vescula, a qual se desloca livre
em direo ao interior da clula. Durante o deslocamento, o ambiente
endossomal acidificado gradativamente (vrus de pH-dependentes). A
reduo do pH facilita a dissociao dos nucleocapsdeo do envelope e
promove sua liberao no citoplasma.

 Endocitose mediada por receptor caveolina: a caveolina uma protena


que est presente na membrana plasmtica das caveolas voltadas para o
citoplasma. As caveolas so pequenas invaginaes presentes na membrana
da clula hospedeira. Aps adsoro, as partculas vricas se movimentam
na superfcie da membrana da clula hospedeira, durante este percurso, a
partcula vrica capturada pelas caveolas. Em seguida, ocorre a formao
da vescula de caveolas se deslocam no citoplasma e se fundem aos
cavessomos (pH neutro), que so transportadas at a regio perinuclear do
retculo endoplasmtico.

 Endocitose mediada por lipdios: nesse processo, a clatrina ou caveolina


no participa da internalizao da partcula vrica. As molculas de
esfingolipdeos, glicoesfingolipdeos e/ou colesterol se associam formando
micro condomnios (lipd rafts), onde as partculas vricas se internalizam.
Posteriormente, so deslocados para o endossomo e, em seguida, ocorre
a penetrao para o compartimento citoplasmtico.

Penetrao por fagocitose ou macropinocitose

Alguns vrus utilizam a penetrao por fagocitose para internalizao da


partcula vrica e posterior penetrao para introduzir o material gentico. Nesta
via, a partcula vrica deve possuir caractersticas de pH-dependente, devido a
acidificao que ocorre nos endossomos e lisossomos com aps a fuso dos
fagossomos. Enquanto que, a penetrao por macropinocitose um processo de
internalizao de volumes elevados de substncias, as quais so direcionadas aos
endossomos e lisossomos.

Expresso gnica

Aps a penetrao no citoplasma celular, a partcula vrica no interior da vescula


se desloca de forma passiva at o local em que ocorrer a expresso gnica. Em
etapa anterior expresso gnica, os componentes do nucleocapsdeo devem ser

Virologia geral aplicada medicina veterinria 27


U1

expostos s enzimas para que ocorra a expresso gnica (transcrio e traduo),


evento denominado desnudamento. Durante a exposio dos componentes do
nucleocapsdeo, pode ser completa ou parcial. Em alguns vrus, ela pode ocorrer
mesmo com o desnudamento parcial e, em outras situaes, somente com o
desnudamento completo.

Nos vrus DNA e RNA, o RNA mensageiro ser responsvel pela transferncia
de informao do material gentico para sntese de protenas. Em grande maioria
dos vrus DNA, a expresso gnica ocorre no ncleo da clula. Barreiras so
observadas em relao da estrutura do ncleo celular (tamanho dos poros) que
limitam a entrada do nucleocapsdeo. Para contornar esta situao, a partcula
vrica faz interaes do nucleocapsdeo com componentes celulares. Partculas
vricas de tamanho superior so desintegradas ou deformadas, ao mesmo tempo,
partculas vricas de tamanho compatvel adentram intactas.

Nos vrus DNA, durante a expresso gnica, o genoma viral depender da


maquinaria celular para codificao de protenas (RNA mensageiro) que auxiliaram
no processo de replicao, com exceo dos vrus DNA poxvrus e asfarvrus, que
no so dependentes da maquinaria celular. J nos vrus RNA, a codificao de
protenas utiliza vias alternativas para sntese do RNA mensageiro, sem dependncia
da maquinaria celular, com exceo dos retrovrus.

No caso dos vrus RNA, a expresso gnica mediada de duas formas: para os
vrus RNA de polaridade positiva, o RNA mensageiro traduzido integralmente ou
parcialmente no ribossomo. Os vrus RNA de polaridade negativa so dependentes
da enzima RNA polimerase, a qual responsvel por iniciar o processo de replicao.

Reflita

Vrus RNA de sentido positivo precisa da estrutura denominada cap


na extremidade 5 (cap 5) ou a estrutura IRES (entrada interna de
ribossomo) para sere traduzido diretamente no ribossomo.

Vrus RNA de sentido negativo precisa que enzima RNA polimerase


sintetize RNA mensageiros com cap na extremidade 5 e cauda com
poliadenilados (poliA) na extremidade 3.

Replicao do genoma

As caractersticas da replicao do genoma so especificas de acordo com o tipo


de vrus (DNA ou RNA). De acordo com a classificao de Baltimore (1971), os vrus
so agrupados em 7 classes.

28 Virologia geral aplicada medicina veterinria


U1

Pesquise mais
Conhea as 7 classes propostas por Baltimore! Acesse o link disponvel
em: <https://pt.wikipedia.org/wiki/V%C3%ADrus>. Acesso em: 27 maio
2016. e descubra mais sobre esta classificao.

A replicao do genoma dos vrus DNA totalmente dependente da estrutura


celular para que ocorra a codificao das protenas, que varia de acordo com o
grau de complexidade do vrus (simples ou complexo). Em grande parte dos vrus
DNA, a replicao do genoma ocorre no ncleo celular, com exceo de alguns
vrus que ocorrem no citoplasma. A replicao do genoma utiliza fatores celulares,
regulatrios e enzimas que auxiliam na transcrio do RNA mensageiro, o qual
utilizado na traduo de protenas.

Caractersticas estruturais como topologia (circular, linear) e organizao


genmica (fita dupla ou fita simples) podem diferenciar os constituintes (fatores
celulares, regulatrios e protenas no-estruturais) que participam no mecanismo
de replicao e nas formas (linear, bidirecional, contnua, semidescontnua e crculo
rolante) que ocorrer a traduo. Caractersticas mais detalhadas do processo de
replicao podem ser estudas em cada uma das classes dos vrus DNA (vrus de
classe Ia, Ib, II e VII).

O ciclo replicativo dos vrus RNA, em sua maioria, ocorre no citoplasma e


mediado por enzimas polimerases de RNA (transcriptase ou replicases). As enzimas
estaro presentes no material gentico dos vrus RNA ou sero sintetizadas durante
a codificao de protenas (clulas eucariticas no possuem essas enzimas). Nos
vrus RNA de polaridade positiva a traduo ocorre diretamente.

J os vrus RNA de polaridade negativa, a enzima RNA polimerase deve ser


carreada para dentro do genoma, a qual auxiliar na transcrio do RNA mensageiro
de sentido antigenmico, o qual servir de molde para traduo do RNA no sentido
genmico. Caractersticas mais detalhadas do processo de replicao podem ser
estudas em cada uma das classes dos vrus RNAs (vrus da classe III, IVa, IVb, V e VI).

Reflita

Os vrus RNA de polaridade positiva so considerados infecciosos. A fita


de RNA positiva por si s suficiente para que ocorra traduo.

Os vrus RNA de polaridade negativa no so considerados infecciosos.


A enzima polimerase de RNA deve ser carreada para dentro do genoma
para ocorra a transcrio do RNA mensageiro e posterior traduo.

Virologia geral aplicada medicina veterinria 29


U1

Morfognese

Diferentes estruturas compem os vrus, as quais podem ser simples ou


complexas. Aps o ciclo de replicao do genoma (DNA ou RNA), a constituio
da partcula vrica se inicia com formao do capsdeo (morfognese). O capsdeo
formado pela associao de subunidades proteicas (protmeros) que constituem
a unidade morfolgica do capsdeo (capsmeros). Durante a formao do capsdeo
ocorre a incorporao do genoma no seu interior. Em relao as partculas vricas
que possuem envelope, o mesmo constitudo a partir de lipdios (fosfolipdios
e colesterol) da membrana da clula hospedeira (mecanismo denominado de
brotamento) e as protenas constituintes so codificadas pelo genoma viral.

Maturao e Egresso da prognie viral

O processo de maturao compreende a finalizao da morfognese da


estrutura viral e egresso para o meio extracelular. A maturao ocorrer em locais
diferenciados, conforme a classe viral (DNA ou RNA) e de acordo com o tipo de
vrus (com envelope ou sem envelope). Para vrus envelopados, a maturao
final, ou seja, a incorporao do envelope (lipdeos de membrana e protenas
codificadas pelo genoma) sobre o nucleocapsdeo poder ocorrer na membrana
do retculo endoplasmtico ou na membrana plasmtica (mecanismo denominado
de brotamento). Em relao ao egresso, trs principais mecanismos so descritos:
lise, exocitose e associado com o brotamento. Quando ocorre o brotamento nas
membranas celulares internas, a liberao ocorre pelo mecanismo de exocitose.
Quando a partcula vrica adquire o envelope na membrana plasmtica, o egresso
ocorrer em seguida do brotamento. Para vrus sem envelope, o mecanismo de
egresso mediado por lise celular.

Faa voc mesmo

Agora voc sabe como ocorre a replicao de um vrus DNA e RNA?


Descreva suas etapas! Vamos l!

Sem medo de errar

Mediante os contedos abordados nesta seo, vamos resolver as questes da


situao-problema. Vamos l!

Para compreender melhor a situao apresentada, vamos recapitular principais


pontos da situao-problema. O mdico veterinrio do Servio Veterinrio Oficial
coletou diferentes tipos de material biolgico (amostras), os quais foram identificados
e encaminhados para anlise laboratorial. A determinao de coletar diferentes tipos

30 Virologia geral aplicada medicina veterinria


U1

de materiais biolgicos necessria em funo de o vrus suspeito poder infectar


diferentes clulas do hospedeiro.

Na Virologia, o termo infeco empregado para caracterizar todas as etapas do


processo da replicao viral. Derivado do Latim, o termo origina-se da palavra infere,
que significa penetrao. A infeco pode ser produtiva ou abortiva. A primeira
quando a partcula vrica realiza todas as etapas de replicao, j a segunda, a
replicao parcial (interrupo de alguma etapa aps penetrao na clula
hospedeira).

O termo susceptibilidade refere-se aceitabilidade da clula hospedeira para


que ocorra a penetrao da partcula vrica, enquanto o termo permissividade est
relacionado com as condies do ambiente intracelular para que ocorra as etapas
subsequentes da replicao da partcula vrica (replicao, morfognese, maturao
e egresso).

Ateno!

O termo infeco designado quando a partcula viral completa todas


as etapas de replicao na clula hospedeira.

Os mecanismos de penetrao do material gentico da partcula vrica podem


ocorrer de forma direta ou especfica. No mecanismo direto, a adsoro das
protenas virais ocorre com a membrana lateral da clula de forma simples, que no
assegura as etapas subsequentes da replicao da partcula vrica. Os mecanismos
especficos podem ocorrer sem prvia internalizao (na superfcie da clula) ou aps
internalizao (no interior do citoplasma) com a formao de vesculas. As etapas de
penetrao e internalizao da partcula vrica considerado um processo ativo, o
qual mediado com auxlio de energia proveniente da clula. Dentre os diferentes
mecanismos para introduzir o nucleocapsdeo (genoma e protenas) no interior
da clula, pode-se citar a penetrao por fuso na superfcie celular, a penetrao
aps endocitose (mediada por clatrina, caveolina ou lipdios) e a penetrao por
fagocitose ou macropinocitose.

Avanando na prtica

Vrus da leucose aviria

Para auxiliar o contedo das competncias que foram atribudas nesta seo,
no pargrafo subsequente vamos apresentar uma nova Situao de Realidade
Profissional que se refere ao atendimento clnico de um co. Nesta situao,
aproximaremos os contedos tericos com a prtica proposta nesta seo de

Virologia geral aplicada medicina veterinria 31


U1

ensino. Leia com ateno o atendimento clnico realizado pelo mdico veterinrio.

Recentemente, um mdico veterinrio realizou um atendimento clnico em


uma propriedade rural. Durante a anamnese, o proprietrio do local relatou que a
produo de ovos reduziu em comparao com o ms anterior e que 3 galinhas
poedeiras morreram na ltima semana. Aps saber do ocorrido, o profissional
se deslocou at o galpo em que as galinhas poedeiras permaneciam, onde
encontrou mais duas aves mortas. Durante o exame clnico de algumas aves,
observou que a maioria estava inapetente, fraca e magra. Na avaliao clnica de
3 aves foi constatada barbela plida. Em seguida, foi realizada a necropsia das
duas aves encontradas mortas, quando foi constatada a presena de ndulos no
fgado, bao, intestino e corao. Amostras foram coletadas e identificadas para
serem analisadas em laboratrio. Com base nos achados clnicos e de necropsia, o
mdico veterinrio suspeitou de leucose aviria. Como exame complementar, foi
solicitado o exame ELISA (ktis comerciais) para deteco de anticorpos.

Descrio da situao-problema

Em continuidade ao relato de caso apresentado na nova Situao de Realidade


Profissional, o exame complementar evidenciou a presena do vrus da leucose
aviria,pertencente famlia Retroviridae, subfamlia Orthoretrovirinae retrovrus e
gnero Alpharetrovirus, (vrus RNA de classe VI). Mediante os contedos abordados
nesta seo, responda as questes a seguir: a) Explique a expresso gnica dos vrus
DNA e RNA; e b) Explique o processo de maturao e egresso dos vrus DNA e RNA.

Lembre-se

A codificao de protenas necessria para que ocorra a replicao


dos vrus DNA e RNA.

Resoluo da situao-problema

Os exames laboratoriais evidenciaram que as aves foram acometidas por um


vrus da famlia Retroviridae. Neoplasia a principal ocorrncia em aves infectadas
pelo vrus da leucose aviria.

A expresso gnica dos vrus DNA ocorre no ncleo da clula, a qual


totalmente dependente para a codificao de protenas (RNA mensageiro) para
que ocorra a replicao da partcula vrica. Durante esta etapa, o nucleocapsdeo
interage com os componentes celulares para contornar barreiras (tamanho de
poros) impostas durante a entrada ao ncleo. Assim, partculas vricas de tamanho
superior so desintegradas ou deformadas, enquanto as partculas vricas de
tamanho compatvel adentram intactas.

32 Virologia geral aplicada medicina veterinria


U1

Para os vrus RNA, a codificao de protenas utiliza vias alternativas para sntese
do RNA mensageiro e sem dependncia da maquinaria celular. A expresso gnica
ser mediada conforme a classe da partcula vrica vrus RNA de polaridade positiva
e vrus RNA de polaridade negativa. Para os vrus RNA de polaridade positiva, o RNA
mensageiro traduzido integralmente ou parcialmente no ribossomo, enquanto nos
vrus RNA de polaridade negativa, a expresso gnica somente ocorrer com auxlio
da enzima RNA polimerase, a qual inicia o processo de sntese do RNA mensageiro.

O processo de maturao compreende a finalizao da morfognese e o


egresso da partcula vrica para o meio extracelular. O local de maturao da
partcula vrica ocorrer de acordo com as caractersticas dos vrus (com envelope
ou sem envelope). Nos vrus desprovidos de envelope, a maturao ocorre no
ncleo para vrus DNA e no citoplasma para maioria vrus RNA, com algumas
excees. No caso de vrus envelopados, a maturao final ocorrer quando o
envelope for incorporado sobre o nucleocapsdeo, na membrana do retculo
endoplasmtico ou na membrana plasmtica.

No processo de egresso, as partculas vricas podem ser liberadas por lise


celular para os vrus DNA ou RNA sem envelope. J os vrus envelopados (DNA ou
RNA) o processo ocorrer por exocitose, quando o nucleocapsdeo recoberto
nas membranas internas dos componentes celulares. Por outro lado, quando a
partcula vrica adquire o envelope na membrana plasmtica o egresso ocorrer
em seguida do brotamento.

Faa voc mesmo

Mediante o contedo abordado nesta seo, pesquise mais sobre a


replicao das classes Ia, Ib, II e VII que compem os vrus DNA, e as
classes III, IVa, IVb, V e VI que compem os vrus RNA. Utilize o material
de apoio: Flores, E. F. Virologia Veterinria: virologia geral e doenas
vricas. 2. ed. Santa Maria: Ed. da UFSM, 2012. 1008 p.

Faa valer a pena!


1. Quando ocorre uma replicao parcial da partcula vrica, qual o
termo correto para denominar esse processo?
Assinale a alternativa correta:
a) Infeco produtiva.
b) Infeco celular.
c) Processo incompleto de maturao.

Virologia geral aplicada medicina veterinria 33


U1

d) Infeco abortiva.
e) Processo incompleto de penetrao.

2. A clula hospedeira apresenta particularidades ou fatores que


impedem ou permitem o processo de infeo. O termo permissividade
refere-se a que situao?
Assinale a alternativa correta:
a) Refere-se codificao de protenas presentes na membrana
plasmtica.
b) Refere-se s condies do ambiente intracelular para que ocorra o
processo de replicao viral.
c) Refere-se fase de maturao da partcula vrica.
d) Refere-se a um processo completo de maturao.
e) Refere-se ausncia de receptores na estrutura do envelope.

3. A primeira etapa de replicao do vrus DNA e RNA denominada


_____________ e a segunda etapa ________________.
Assinale a alternativa correta que completa a ordem das lacunas:
a) Penetrao e egresso.
b) Penetrao e adsoro.
c) Maturao e penetrao.
d) Replicao e egresso.
e) Adsoro e penetrao.

34 Virologia geral aplicada medicina veterinria


U1

Seo 1.3

Diagnstico virolgico

Dilogo aberto

Ol, aluno! Seja bem-vindo terceira seo de estudos deste livro didtico!

Nesta seo, estudaremos o princpio dos mtodos diretos de diagnstico


envolvendo a deteco de antgenos e cidos nuclicos dos agentes virais, tais
como imunocromatografia e reao em cadeia pela polimerase. Para auxiliar o
contedo abordado, vamos acrescentar novas informaes situao-problema
referente ao relato de caso apresentado no Convite ao estudo. Dessa forma, voc
participar indiretamente na resoluo do caso.

Em continuidade ao relato de caso apresentado na Situao de Realidade


Profissional, o Servio Veterinrio Oficial (SVO) foi notificado da suspeita de febre
aftosa (vrus pertencente famlia Herpesviridae). Diferentes tipos de amostras
foram coletados, identificados e enviados para anlise laboratorial (Laboratrios
Nacionais Agropecurios LANAGRO), o qual vinculado ao Ministrio da
Agricultura, Pecuria e Abastecimento MAPA. Dentre os vrios fatores que
podem comprometer as anlises laboratoriais, o procedimento de coleta,
acondicionamento, e quantidade, so pontos determinantes para obter um bom
resultado. De acordo com o responsvel tcnico do LANAGRO, amostras estavam
adequadamente acondicionadas e conservadas, porm algumas continham pouco
material para prosseguir com as anlises laboratoriais. As amostras continham
diferentes materiais biolgicos (fragmentos do epitlio vesicular das regies orais,
nasais e interdigitais; lquido esofgico-farngeo; e soro sanguneo) e eram de
diferentes espcies animais (bovino e suno). Para as amostras que continham
pouco material biolgico, o tcnico elegeu o mtodo de reao em cadeia pela
polimerase (PCR) em tempo real. Assim sendo, mediante os contedos abordados
nesta seo, explique o mtodo PCR em tempo real utilizado para deteco do
agente viral.

Virologia geral aplicada medicina veterinria 35


U1

No pode faltar

Ol, aluno! Nesta seo abordaremos os mtodos diretos de diagnstico


envolvendo a deteco de antgenos e cidos nuclicos dos agentes virais. Vamos
iniciar os estudos!

Princpios dos mtodos diretos de diagnstico envolvendo a deteco de


antgenos e cidos nuclicos dos agentes virais: imunocromatografia e reao
em cadeia pela polimerase.

O diagnstico laboratorial uma etapa complementar da investigao clnica


e epidemiolgica da enfermidade que est acometendo o animal. O sucesso do
resultado laboratorial est diretamente correlacionado com as aes mediadas
pelo profissional de campo (investigao clinico-patolgica, epidemiolgica,
coleta, identificao e envio do material) e pelo tcnico laboratorial (aplicao de
tcnicas adequadas para identificao da partcula vrica) na eleio do mtodo de
diagnstico, bem como na interpretao dos resultados com base nas informaes
de epidemiologia, patogenia e imunologia da doena suspeita. O material biolgico
a ser enviado para anlise laboratorial deve ser acompanhado do histrico clnico
(apresentando o maior nmero possvel de informaes), o qual ser importante
para o planejamento e direcionamento do mtodo de diagnstico laboratorial
mais apropriado.

Diferentes mtodos podem ser empregados para deteco do agente viral. A


confirmao da presena do vrus poder ser realizada com o auxlio de tcnicas que
demonstre diretamente o agente ou a partir dos produtos intermedirios gerados
durante o processo replicativo da partcula vrica ou a partir de seu componente
gentico. Dessa forma, os mtodos de deteco de agentes variam em diretos
(o agente viral detectado diretamente) e indiretos (propriedades biolgicas ou
produtos decorrentes da multiplicao viral), os quais sero utilizados de acordo
com as caractersticas, quantidades e qualidade do material biolgico, bem como
do tipo da partcula vrica. Da mesma forma, a capacitao da mo da obra e dos
recursos disponveis no laboratrio so determinantes para a eleio do mtodo
a ser aplicado. Em determinados casos, preconiza-se a utilizao de dois ou mais
mtodos de eleio para um diagnstico definitivo.

Assimile

Mtodos diretos: detectam vrus, antgenos e/ou cidos nuclicos.

Mtodos indiretos: detectam anticorpos especficos contra o vrus.

36 Virologia geral aplicada medicina veterinria


U1

Coleta de amostras

O material biolgico a ser encaminhado para o laboratrio dever apresentar


quantidade suficiente e uma conservao adequada para que o mtodo de
eleio apresente bons resultados. Neste sentido, o profissional de campo
deve possuir conhecimento suficiente para determinar a escolha do material
biolgico a ser encaminhado, bem como os procedimentos que sero adotados
para o acondicionamento (recipientes ou frascos) e conservao (solues ou
procedimentos adotados) das amostras, que devero chegar em tempo hbil no
laboratrio para que no comprometa a deteco do agente viral.

Reflita

Compreender a cintica da infeco viral em conjunto com a resposta


imunolgica do organismo animal importante para estabelecer o
exame laboratorial mais adequado e o tipo de material biolgico nas
diferentes fases da infeco viral.

Figura 1.7 | Infeco viral, resposta imunolgica e indicao do momento de coleta de


material para diagnstico laboratorial.

Fonte: Adaptado de Flores (2012).

Virologia geral aplicada medicina veterinria 37


U1

As embalagens (tubos de vidros ou plstico, sacos plsticos) a serem utilizadas


devem ser rotuladas (evitar rtulos de papel que deterioram ou desprendem quando
umedecidos), identificadas (caneta de tinta permanente ou lpis) individualmente,
lacradas e acondicionadas de forma a evitar a ruptura ou quebra do recipiente
durante o transporte. A seguir, na Figura 1.8 vamos apresentar outros cuidados a
serem seguidos conforme o tipo de material biolgico a ser coletado.

Figura 1.8 | Procedimentos adotados para encaminhamento de diferentes materiais


biolgicos para anlise laboratorial
Material biolgico Procedimento
Secrees nasais, oculares ou genitais Recomenda-se utilizar swab para a coleta.
Tecidos e fragmentos de rgos A coleta deve ser individual e assepticamente em frascos
(plstico ou vidro) estreis.
Fetos abortados Os fetos podem ser submetidos necropsia para a
coleta de tecidos e rgos ou encaminhados inteiros.
Plasma sanguneo Utilizar tubos estreis (plstico ou vidro), minimizar a
hemlise e utilizar citrato, heparina ou EDTA como
anticoagulante. Recomenda-se coletar de 2 a 3 mL para
pequenos animais e de 5 a 10 mL para grandes animais.
Soro sanguneo Utilizar tubos estreis (plstico ou vidro) sem
anticoagulantes e minimizar a hemlise. Recomenda-se
coletar de 2 a 3 mL para pequenos animais e de 5 a 10
mL para grandes animais.
Fezes Preferencialmente coletadas da ampola retal.
Fonte: Adaptado de Flores (2012).

Aps coleta, o material biolgico deve ser submetido ao processo de


conservao. As amostras devem ser armazenadas em condies de baixa
temperatura e encaminhadas para o laboratrio de forma mais rpida possvel.
Em situaes em que o intervalo varia de 2 a 3 dias, as amostras podem ser
transportadas em ambiente refrigerado a 4C. Entretanto, se o intervalo ultrapassar
3 dias, recomenda-se o congelamento das amostras (-20C ou -70C). Para
amostras sanguneas, o processo de congelamento no deve ser adotado, somente
a 4C. Como recipientes, recomenda-se utilizar caixas trmicas com revestimento
interno impermevel, para que no ocorra vazamentos durante o transporte.
Juntamente com a amostra, o profissional de campo deve emitir um relatrio
(histrico) detalhado, no qual dever constar informaes que podem auxiliar o
tcnico do laboratrio na eleio do mtodo de diagnstico mais adequado e,
quando necessrio, proceder mais de um mtodo de diagnstico.

38 Virologia geral aplicada medicina veterinria


U1

Exemplificando

Enfermidades respiratrias: recomenda-se coletar secrees nasais,


aspiradas, da nasofaringe, trato respiratrio superior, pulmes.

Enfermidades sistmicas: recomenda-se coletar secrees nasais,


fezes, soro, sangue integral, linfonodos, bao.

Enfermidades do trato reprodutivo: recomenda-se coletar placenta,


lquidos fetais, timo, bao, pulmo, crebro.

O procedimento de eleio do mtodo de diagnstico e as etapas dos


procedimentos adotadas para manipulao das amostras variam de acordo com
o laboratrio. Para exemplificar melhor as etapas de processamento, a figura
1.9 exemplifica o encaminhamento de uma amostra para ser analisada em um
determinado laboratrio.

Figura 1.9 | Fluxograma de encaminhamento e processamento de amostras para anlise


laboratorial.
Coleta e
Encaminhamento da
acondicionamento Laboratrio
amostra
da amostra

Recebimento e Interpretao do Elaborao da


registro da amostra histrico da amostra hiptese etiolgica

Escolha de um ou
Interpretao dos Encaminhamento
mais mtodos de
resultados dos resultados
diagnstico
Fonte: Adaptado de Flores (2012).

De acordo com o tipo de material biolgico, os procedimentos podem variar para


melhor se adequar ao mtodo de diagnstico de eleio. importante ressaltar que
as interpretaes dos resultados devem ser realizadas em conjunto com o histrico
clnico gerado pelo profissional de campo. Dessa forma, as informaes do histrico
clnico devem ser precisas e confiveis para evitar diagnsticos equivocados.

Virologia geral aplicada medicina veterinria 39


U1

Mtodos de diagnstico

Mesmo que determinadas enfermidades possam ser diagnosticadas pelos


aspectos clnicos, o diagnstico laboratorial uma ferramenta indispensvel para
confirmar a presena do agente viral, alm de direcionar aes adequadas para o
tratamento da enfermidade e para a preveno de futuras infeces virais. Diferentes
mtodos de diagnsticos podem ser utilizados para a deteco do agente viral que
compreendem em diretos (microscopia eletrnica; isolamento em cultivo celular;
hemaglutinao; deteco de antgenos imunofluorescncia, imunoperoxidase,
imunoenzimticos, cromatogrficos; e deteco de cidos nuclicos reao da
polimerase em cadeia) e indiretos (testes sorolgicos imunodifuso em gel de gar,
ELISA, soroneutralizao, fixao do complemento, inibio da hemaglutinao,
imunofluorescncia para anticorpos e imunocromatografia).

Vrios mtodos esto disponveis no mercado, porm alguns critrios devem


ser aplicados para a eleio do mtodo de diagnstico na deteco do agente
viral. Dentre estes critrios, pode-se citar: sensibilidade, especificidade, rapidez,
simplicidade, reprodutibilidade, automao e baixo custo. Dessa forma, vamos estudar
dois mtodos que podem ser empregados na rotina de laboratrio e que emitem
resultados confiveis: imunocromatografia e a reao em cadeia pela polimerase.

Imunocromatografia

Os testes imunocromatogrficos so apresentados em dispositivos portteis


confeccionados em material plstico, os quais compreendem em diferentes
formatos: imunocromatografia de fluxo lateral, imunocromatografia de dupla
migrao, imunoconcentrao ou de fase slida. Este mtodo de diagnstico
considerado um teste rpido e de fcil utilizao a campo, o qual permite o
monitoramento qualitativo. O princpio do teste se baseia em uma tcnica
simples, que compreende a reao antgeno-anticorpo. A amostra suspeita com
a partcula vrica reagir com o anticorpo especfico. Quando positivo, a presena
do antgeno ser revelada com o aparecimento de bandas ou focos de colorao
diferenciada. Normalmente, esta tcnica tem sido utilizada em campo, em clnicas
e ambulatrios pela simplicidade baixo custo.

Pesquise mais
Conhea o teste de Imunocromatogrfico de fluxo lateral! Acesse
o link disponvel em: <http://dx.doi.org/10.18677/Enciclopedia_
Biosfera_2015_232>. Acesso em: 20 mar. 2016.

40 Virologia geral aplicada medicina veterinria


U1

Reao em cadeia pela polimerase

A reao em cadeia pela polimerase (PCR) um mtodo de diagnstico que se


baseia na amplificao do nmero de molculas de cidos nuclicos existente na
amostra. O mtodo pode ser aplicado para diagnstico de qualquer agente viral e
em qualquer fase da infeco viral, desde que contenha molculas ou fragmentos
de cido nuclico. A tcnica permite a obteno dos resultados em poucas horas,
possui alta sensibilidade e especificidade, alm de poder ser aplicada em amostras
que passaram por processos inadequados de armazenamento e em amostras com
pouco material biolgico.

O mtodo de diagnstico PCR depende de um gradiente de temperatura que


compreende trs etapas: desnaturao (95C), anelamento (57C) e extenso
(72C). Os materiais a serem utilizados durante o processo de amplificao so:
amostra (material biolgico), primers, Taq DNA polimerase e nucleotdeos (dNTPs
Adenina, citosina, guanina e tamina). Para alcanar uma quantidade suficiente
da sequncia alvo, so necessrios 36 ciclos. Em cada ciclo a amplificao
exponencial, facilitando o aumento da sequncia alvo. Na primeira etapa, a amostra
ser submetida a um processo de desnaturao (95C) promovendo a separao da
hlice da molcula de cido nucleico. Na segunda etapa, a temperatura reduzida
para que ocorra a anelao dos primers (57C), que ir delimitar a regio-alvo
que ir ocorrer a amplificao. Posteriormente, na terceira etapa, a temperatura
elevada a 72C para que a enzima termoestvel (Taq DNA polimerase) possa inserir
os nucleotdeos na regio-alvo para formao das cadeias complementares, assim
finalizando o primeiro ciclo de um total de 36 ciclos.

Vocabulrio

Primers so indicadores inicias constitudos de oligonucleotdeos que


delimitam a regio-alvo a ser amplificada na fita do cido nuclico.

Com o avano tecnolgico, a tcnica PCR tem sido aperfeioada, e diferentes


procedimentos foram elaborados como nested-PCR, multiplex-PCR, RT-PCR e
real-time PCR. Dentre as tcnicas, o PCR em tempo real tem sido aprimorado para
ser executado a campo com a utilizao de termocicladores portteis, os quais
so acoplados em computadores e com auxlio de um software capta e quantifica
o sinal emitido de cada ciclo. Essa tcnica (PCR em tempo real) permite detectar,
quantificar e amplificar a molcula do cido nuclico no decorrer do processo,
que, alm do primer (indicador inicial) a tcnica mediada por uma sonda que
contm substncias (fluorforos) indicadoras que so liberadas durante o ciclo de
amplificao.

Virologia geral aplicada medicina veterinria 41


U1

Pesquise mais
Conhea o mtodo de reao em cadeia pela polimerase em tempo
real! Acesse o link disponvel em: <http://www.biotecnologia.com.br/
revista/bio33/pcr.pdf>. Acesso em: 20 mar. de 2016.

Sem medo de errar

Mediante os contedos abordados nesta seo, vamos resolver as questes da


situao-problema. Vamos l!

Para compreender melhor a situao apresentada, vamos recapitular os


principais pontos da situao-problema. Conforme o responsvel tcnico do
LANAGRO, as amostras estavam adequadamente armazenadas, porm algumas
continham pouco material para prosseguir com as anlises laboratoriais. Desta
forma, o tcnico elegeu o mtodo de reao em cadeia pela polimerase (PCR) em
tempo real para as amostras que continham pouco material biolgico.

A tcnica eleita pelo tcnico laboratorial permite a deteco do agente viral


em amostras com pouco material biolgico. O princpio da tcnica baseado
na amplificao do nmero de molculas ou fragmentos de cidos nuclicos
presentes na amostra. Dentre os materiais a serem utilizados teremos: amostra
(material biolgico), primers, Taq DNA polimerase (enzima termoestvel) e
nucleotdeos (dNTPs Adenina, citosina, guanina e timina). Com auxlio de um
termociclador, a molcula ou fragmento de cido nuclico (amostra) passa por
um processo de desnaturao (95C) que promove a separao da dupla hlice da
molcula de cido nuclico. Na sequncia, a temperatura reduzida (50 a 60C)
para ocorrer a ligao dos primers com a fita de cido nuclico, o qual delimita a
regio a ser amplificada. Posteriormente, a temperatura elevada a 72C para que
a enzima Taq DNA polimerase possa atuar. A enzima Tap DNA polimerase ir inserir
os nucleotdeos (bases nitrogenadas) para formao das cadeias complementares,
finalizando o primeiro ciclo do teste de PCR.

Ateno!

Para se obter uma quantidade suficiente da sequncia alvo necessrio


executar 36 ciclos de termociclagem.

42 Virologia geral aplicada medicina veterinria


U1

Avanando na prtica

Influenza equina

Para auxiliar no contedo das competncias que foram atribudas nesta seo,
no pargrafo subsequente vamos apresentar uma nova Situao de Realidade
Profissional, que se refere ao atendimento clnico. Nesta situao, aproximaremos
os contedos tericos com a prtica proposta nesta seo de ensino. Leia com
ateno o atendimento clnico realizado pelo mdico veterinrio.

Recentemente, o mdico veterinrio realizou um atendimento clnico de um


equino em uma propriedade rural. O proprietrio relatou que o animal vinha
apresentando sintomatologia respiratria h uma semana, aps ter participado de
uma cavalgada na cidade vizinha. Durante o exame, o mdico veterinrio constatou
secreo nasal serosa, hipertermia, anorexia, fraqueza e tosse no produtiva.
Amostras de secreo nasal foram coletadas, acondicionadas em um frasco estril
e identificadas. Da mesma forma, foi realizada coleta de sangue para obteno de
plasma sanguneo (tubo de 5 mL contendo EDTA). As amostras foram identificadas
individualmente, acondicionadas em recipientes apropriados e encaminhadas
para anlise laboratorial. Com base nos achados clnicos, o mdico veterinrio
suspeitou de um agente viral. Dessa forma, foi solicitado um exame de rotina
(hemograma) e um exame complementar (reao em cadeia pela polimerase -
PCR) para deteco de agente viral. Para exame de PCR, o mdico veterinrio
precisou enviar as amostras para um laboratrio a 700 km, j o hemograma foi
realizado em um laboratrio na cidade vizinha.

Descrio da situao-problema

Em continuidade ao relato de caso apresentado na nova Situao de Realidade


Profissional, o exame de PCR detectou a presena do vrus Influenza equina. O vrus
da Influeza equina pertence famlia Orthomyxoviridae, gnero Influenzavirus A e
subtipo H8N8. Mediante os contedos abordados nesta seo, responda questo
a seguir: a) Explique como deve ser o procedimento de acondicionamento das
amostras para serem encaminhadas para o laboratrio.

Lembre-se

A interpretao dos resultados dever ser realizada em conjunto com o


histrico clnico gerado pelo profissional de campo.

Virologia geral aplicada medicina veterinria 43


U1

Resoluo da situao-problema

O material biolgico deve ser submetido ao processo de conservao


imediatamente aps coleta. Em situaes em que o intervalo varia de 2 a 3 dias, as
amostras podem ser transportadas em ambiente refrigerado a 4C. Entretanto, se
o intervalo ultrapassar 3 dias, recomenda-se o congelamento das amostras (-20C
ou -70C). Para amostras sanguneas, o processo de congelamento no deve ser
adotado, somente a 4C.

Como recipientes, recomenda-se utilizar caixas trmicas com revestimento


interno impermevel, para que no ocorra vazamentos durante o transporte.
Juntamente com a amostra, o profissional de campo deve emitir um relatrio
(histrico) detalhado, o qual constar informaes que podem auxiliar o tcnico
do laboratrio na eleio do mtodo de diagnstico mais adequado e, quando
necessrio, proceder mais de um mtodo de diagnstico.

Faa voc mesmo

Agora, faa voc mesmo! Pesquise e estude o mtodo indireto ELISA.


Utilize o material de apoio: Flores, E. F. Virologia Veterinria: virologia
geral e doenas vricas. 2. ed. Santa Maria: Ed. da UFSM, 2012. 1008 p.

Faa valer a pena!

1. O _______________________ uma etapa complementar da


investigao clnica e epidemiolgica da enfermidade em auxilia na
deteco do agente viral.
Assinale a alternativa correta que completa as lacunas:
a) Tipo de animal.
b) Diagnstico laboratorial.
c) Processo de desnaturao das amostras.
d) Processo viral.
e) Processo incompleto de penetrao.

2. O profissional de campo deve possuir conhecimentos suficientes


para determinar a escolha do _________________ a ser encaminhado,
bem como os procedimentos adotados de __________________ e
_________________ das amostras.
Assinale a alternativa correta que completa as lacunas:

44 Virologia geral aplicada medicina veterinria


U1

a) Material biolgico, acondicionamento e conservao.


b) Tipo de partcula vrica, acondicionamento e conservao.
c) Tipo de frasco, acondicionamento e conservao.
d) Processo de higiene, conservao e material biolgico.
e) Tipo de processo de conservao, acondicionamento e material
biolgico.

3. Para a coleta de plasma sanguneo pode-se utilizar tubos com


________, _______ e/ou ________, e para coleta de soro utiliza-se
tubos ___________________.
Assinale a alternativa correta que completa as lacunas:
a) EDTA, citrato ou heparina e sem anticoagulantes.
b) EDTA, citrato ou heparina e com anticoagulantes.
c) Hepariana, citrato ou EDTA e com anticoagulantes.
d) Citrato, EDTA ou citrato e com anticoagulantes.
e) Dixidos de carbono, EDTA ou heparina e sem anticoagulantes.

Virologia geral aplicada medicina veterinria 45


U1

46 Virologia geral aplicada medicina veterinria


U1

Seo 1.4

Etiopatogenia viral

Dilogo aberto

Ol, aluno! Seja bem-vindo quarta seo de estudos deste livro didtico!

Nesta seo, estudaremos os efeitos citopticos e as alteraes morfolgicas


que os vrus podem causar na clula hospedeira. Para auxiliar o contedo abordado,
vamos acrescentar novas informaes na situao-problema referente ao relato
de caso apresentado no Convite ao estudo. Dessa forma, voc participar
indiretamente da resoluo do caso.

Em continuidade ao relato do caso, o tcnico laboratorial recebeu um laudo


contendo informaes detalhadas das leses observadas durante o exame clnico.
De acordo com o mdico veterinrio, a replicao viral pode ocorrer em diferentes
rgos ou tecidos do animal, sendo necessria a coleta de diferentes materiais
biolgicos. Durante o exame clnico, o mdico veterinrio observou que os animais
continham leses vesiculares intactas no nariz, vesculas rompidas na mucosa
bucal e lngua, alm de eroses com lceras. Com base nos achados clnicos, a
infeco viral causou danos nas clulas do hospedeiro. Com auxlio dos contedos
abordados nesta seo, responda s questes a seguir: Cite os possveis efeitos
citopticos que os vrus podem causar na clula hospedeira. Explique os efeitos
causados no sistema imune com o acmulo de imunocomplexos.

No pode faltar

Ol, aluno! Nesta seo abordaremos os efeitos citopticos e as alteraes


morfolgicas que os vrus podem causar na clula hospedeira. Vamos iniciar os
estudos!

Efeito citoptico dos vrus e alteraes morfolgicas

A interao entre produtos virais e componentes celulares da clula hospedeira


complexa, o que pode resultar ou no em um efeito em nvel celular ou de
hospedeiro. Normalmente, quando observados sinais clnicos em animais

Virologia geral aplicada medicina veterinria 47


U1

acometidos por doenas vricas, estes so decorrentes da resposta do hospedeiro


injria celular e/ou tecidual (perceptveis visualmente).

No processo de infeco viral, os vrus desenvolvem interaes com os


componentes celulares modificando a fisiologia celular da clula hospedeira. Os
produtos oriundos dessa interao (produtos virais ou acmulo de protenas e cidos
nuclicos) podem causar efeitos citopticos, como: lise celular, arredondamento,
vacuolizao, formao de sinccios, incluses, picnose e apoptose.

Reflita

Efeito citoptico: refere-se s alteraes morfolgicas observadas em


clulas infectadas por agentes virais.

Figura 1.10 | Conceito de iceberg do processo infeccioso, relao entre infeco e doena
em nvel celular e de hospedeiro

Fonte: Adaptado de Flores (2012).

A destruio celular decorrente de infees causadas por vrus nos tecidos-


alvo, bem como as alteraes fisiolgicas decorrentes das leses teciduais so
responsveis pelo desenvolvimento da doena.

48 Virologia geral aplicada medicina veterinria


U1

Assimile

Efeito em nvel celular: pode ser visualmente imperceptvel ou


perceptvel.

Efeito no hospedeiro: pode ser uma doena subclnica ou clnica.

Interao de produtos virais e componentes celulares

A patognese viral consiste em diversas fases que se inicia com a penetrao


do vrus na clula hospedeira, replicao viral, disseminao do vrus, leso celular,
resposta imunolgica do hospedeiro, eliminao do vrus ou estabelecimento
da infeco persistente e disseminao viral. Cada agente viral desencadear
interaes especficas com a clula hospedeira (formao de canais inicos,
atuao no processamento e transporte de RNA mensageiro, inibio da traduo
de RNA mensageiro, inibio da sntese de DNA e alguns casos estimulam a sntese
de DNA para disponibilizar condies e componentes para a replicao viral) a fim
de completar o ciclo replicativo.

Em determinados casos, alguns agentes virais so indutores de clulas tumorais


(benignas ou malignas), tais como os vrus DNA (adenovrus, hepadnavrus,
papilomavrus e poliomavrus) e RNA (retrovrus).

Exemplificando

7SVTIFSQFTTJNQMFYQSPEV[BQSPUFOB*$1 BRVBMEFTFODBEFJB
um efeito inibitrio sobre o transporte e processamento do RNA
mensageiro.

"EFOPWSVTQSPEV[BMHVNBTQSPUFOBTEFOPNJOBEBTEF&#,F&
, RVFQSPNPWFNPCMPRVFJPOBBDVNVMBPEF3/"NFOTBHFJSPT
celulares no citoplasma.

7SVTEBJOGMVFO[BQSPEV[BQSPUFOB. QSPEV[DBOBJTJOJDPTOB
membrana dos endossomos para o transporte de ons de H+ para o
interior da clula (acidificando o pH), os quais facilitam o processo de
fuso e desnudamento do nucleocapsdeo.

Virologia geral aplicada medicina veterinria 49


U1

Em outras situaes, os agentes virais desencadeiam interaes que interferem


no processo de apoptose celular (morte celular programada). Processo pelo qual
tem como objetivo favorecer a concluso do ciclo replicativo do vrus. Diversos
efeitos so desencadeados durante a interao das protenas virais com a clula
hospedeira, tais como: modificao, localizao e maturao de protenas;
aumento da permeabilidade da membrana plasmtica; desorganizao ou ruptura
do citoesqueleto da clula hospedeira; formao de estruturas com morfologia
mais ou menos definidas no citoplasma ou no ncleo da clula infectada
corpsculos de incluso.

Vocabulrio

Patogenicidade: capacidade de um agente produzir doena no


hospedeiro.

Virulncia: nvel de severidade da doena causada por um agente.

Tropismo: predileo de um vrus por determinadas clulas ou tecidos.

Efeitos nas clulas hospedeiras

No processo de replicao viral (interao entre agente viral e clula hospedeira),


os produtos virais oriundos da replicao viral podem afetar negativamente
a fisiologia celular, resultando em patologia celular. Cada efeito citoptico
desenvolvido na clula hospedeira ser caracterstico de acordo com os tipos
de vrus e com a funo dos diferentes mecanismos utilizados por eles para se
replicarem. Dentre os efeitos causados, pode-se citar:

 Alteraes morfolgicas (citomegalia e arredondamento celular);

 Lise celular;

 Fuso celular (formao de clulas gigantes denominadas de sinccios);

 Formao de vacolos (citoplasmtico);

 Formao de corpsculos de incluso (citoplasmtico ou nucleares).

Pesquise mais
Estude mais! Leia o artigo Visualizao de Incluso Viral em Hemcias
Relato de Caso. Acesse o link disponvel em: <www.eventosufrpe.com.
br/jepex2009/cd/resumos/R0539-1.pdf>. Acesso em: 14 abr. 2016.

50 Virologia geral aplicada medicina veterinria


U1

Dentre os efeitos citopticos apresentados anteriormente, a lise celular


considerada a patologia mais severa em uma infeo viral. Causada por vrus
denominados de citolticos, a absoro do lquido extracelular desencadeia a lise
celular, que leva morte e desintegrao celular. importante ressaltar que vrus
no-citolticos tambm podem desencadear patologias severas e levar morte do
hospedeiro. A maioria das doenas causadas pelos vrus no-citolticos pode ser
decorrente da resposta imunolgica do hospedeiro.

Vocabulrio

Vrus citoptico: a replicao resulta em citopatologia.

Vrus no-citoptico: a replicao no resulta em citopatologia.

Efeitos no sistema imunolgico

O sistema imunolgico tem como funo desencadear uma resposta


imunolgica contra as infeces vricas com o objetivo de eliminar ou neutralizar
as partculas virais. De acordo com o grau de leso celular (rgos envolvidos),
o sistema imunolgico ir produzir uma resposta imunolgica. A infeco viral
desencadeia uma resposta imunolgica diferente resposta de um agente
bacteriano patognico. Enquanto os leuccitos polimorfonucleares so ativados em
resposta inflamao aguda de um agente bacteriano, as clulas mononucleares
e linfcitos atuam em resposta a uma inflamao causada pelas leses virais. Os
linfcitos T citotxicos reconhecem os polipeptdios virais da superfcie celular
de clulas infectadas, lesionando-as. Entretanto, durante esse processo, os vrus
podem desenvolver diferentes imunopatologias (autoimunidade e deposio de
imunocomplexos) que podero causar leses celulares.

 Autoimunidade: um processo que pode ocorrer em determinadas


infeces vricas. Neste processo, ocorre a estimulao antignica de
protenas virias, semelhantes s protenas presentes no hospedeiro, ou
devido algum distrbio durante o processo de ativao dos linfcitos,
produzindo anticorpos contra protenas prprias.

 Imunocomplexos: formados por anticorpos ligados a partculas vricas ou


antgenos virais. A doena imunolgica ocorrer quando a produo de
imunocomplexos excedem a capacidade de eliminao do organismo.
Da mesma forma, os imunocomplexos contm vrus viveis que podem
penetrar em clulas como macrfagos e linfcitos ativados. Doenas
infecciosas como hepatite infecciosa canina, imunodeficincia felina,
peste suna clssica, anemia infecciosa equina, entre outras, desenvolvem
leses glomerulonefrite em funo do acmulo dos imunocomplexos

Virologia geral aplicada medicina veterinria 51


U1

nos glomrulos renais. Infeces secundrias, como estomatite crnica,


gengivites, leses de pele e abscessos subcutneos podem surgir em casos
que ocorre a depleo linfoide.

De modo geral, as alteraes imunolgicas mediadas pelas infeces


vricas podem aumentar a suscetibilidade a infeces secundrias e interferir
negativamente em uma resposta imunolgica contra a prpria infeco e diversos
outros agentes virais.

Figura 1.11 | Alteraes imunolgicas e seus mecanismos de induo


Famlia Herpesviridae Retroviridae Parvoviridae Coronaviridae
Alteraes
imunolgicas
Suscetibilidade a + + +
infeces
Proliferao + + + +
linfoide reduzida
Aumento de + + +
imunoglobulinas
Mecanismos
Replicao + + + +
em clulas
imunolgicas
Ativao do + +
sistema imune
Produtos de + +
moncitos de
linfcitos T-helper
Protenas virais + +
Fonte: Adaptado de Flores (2012).

Sem medo de errar

Mediante os contedos abordados nesta seo, vamos resolver as questes da


situao-problema. Vamos l!

Para compreender melhor a situao apresentada, vamos recapitular os


principais pontos da situao-problema. O tcnico laboratorial recebeu amostras
para anlise de diferentes materiais biolgicos coletados de um mesmo animal. Em
conjunto com as amostras, o mdico veterinrio encaminhou um laudo tcnico
contendo informaes detalhadas das leses observadas durante o exame clnico,
o que justificou a coleta de diferentes materiais biolgicos de um mesmo animal.
Foram observadas durante o exame clnico leses vesiculares intactas e rompidas.
De acordo com as informaes, pode-se concluir que a infeco viral causou

52 Virologia geral aplicada medicina veterinria


U1

efeitos citopticos nas clulas do hospedeiro.

Em resposta infeco viral, o sistema imune do animal ir desencadear


uma resposta imunolgica para eliminar ou neutralizar o agente agressor. Dessa
forma, anticorpos so produzidos pelo sistema imune, e se ligam s partculas
vricas ou antgenos virais, formando imunocomplexos. Quando o acmulo destes
imunocomplexos excedem a capacidade de eliminao do organismo, leses so
desenvolvidas nos glomrulos renais (glomerulonefrite). Da mesma forma, quando
ocorre depleo linfoide (perda de elementos), o organismo se torna suscetvel a
infeces secundrias (estomatite crnica, gengivites, leses de pele e formao
de abscessos subcutneos).

Ateno!

A interao entre produtos virais e componentes celulares da clula


hospedeira pode resultar ou no em um efeito citoptico em nvel
celular ou de hospedeiro.

Avanando na prtica

Doena vesicular dos sunos

Para auxiliar o contedo das competncias que foram atribudas nesta seo,
no pargrafo subsequente vamos apresentar uma nova Situao de Realidade
Profissional que se refere ao atendimento clnico. Nesta situao, aproximaremos
os contedos tericos com a prtica proposta nesta seo de ensino. Leia com
ateno o atendimento clnico realizado pelo mdico veterinrio.

Durante a visita tcnica de rotina em uma granja suna, o mdico veterinrio


observou algumas vesculas intactas e rompidas nos lbios e no focinho de dois
sunos. Durante a anamnese, o proprietrio relatou que os animais estavam em
boas condies (se alimentando e ingerindo gua), e que no havia observado as
leses. Em seguida, o mdico veterinrio realizou os procedimentos bsicos de
acordo com a legislao para casos de animais que apresentam leses vesiculares.
Notificou o Servio Veterinrio Oficial ( 3, art. 4, Instruo Normativa n 44,
de 2 de outubro de 2007) e indicou a possibilidade da existncia de um ou mais
animais que apresentavam sinais clnicos compatveis com doena vesicular
infecciosa. Com base nos achados clnicos, o mdico veterinrio suspeitou da
doena vesicular dos sunos.

Descrio da situao-problema

Em continuidade ao relato do caso, o teste ELISA evidenciou a presena do vrus

Virologia geral aplicada medicina veterinria 53


U1

da doena vesicular do suno, o qual pertence famlia Picornaviridae e gnero


Enterovrus. Mediante os contedos abordados nesta seo, responda a seguinte
questo: Cite as possveis interaes que o agente viral pode desencadear durante
o processo de infeco viral.

Lembre-se

A interpretao dos resultados de exames dever ser realizada em


conjunto com o histrico clnico gerado pelo profissional de campo.

Resoluo da situao-problema

Durante o processo de infeco viral, o agente agressor desencadear


interaes especficas com a clula hospedeira, dentre as quais pode-se citar:
a formao de canais inicos, atuao no processamento e transporte de RNA
mensageiros, inibio da traduo do RNA mensageiro, inibio da sntese de
DNA celular e, em alguns casos, estmulo da sntese de DNA para disponibilizar
condies e componentes para a replicao viral.

Faa voc mesmo

Agora, faa voc mesmo! Pesquise e estude sobre a Localizao das


infeces virais em nvel de hospedeiro. Utilize o material de apoio:
Flores, E. F. Virologia Veterinria: virologia geral e doenas vricas. 2. ed.
Santa Maria: Ed. da UFSM, 2012. 1008 p.

Faa valer a pena!

1. A interao entre produtos virais e componentes celulares da clula


hospedeira complexa, o que pode resultar ou no em um efeito em
nvel ___________ ou de _____________.
Assinale a alternativa correta que completa a ordem das lacunas:
a) Celular e citoplasma.
b) Virolgico e hospedeiro.
c) Celular e hospedeiro.
d) Virolgico e celular.
e) Citoplasma e ncleo.

54 Virologia geral aplicada medicina veterinria


U1

2. A lise celular um efeito visualmente __________________________.


Assinale a alternativa correta que completa a lacuna:
a) Imperceptvel.
b) Perceptvel.
c) Subclnico.
d) Retardatrio.
e) Imunolgico.

3. O vrus herpes simples produz uma protena denominada de


ICP 27, a qual desencadeia um efeito inibitrio sobre o transporte e
processamento do ___________________.
Assinale a alternativa correta que completa as lacunas:
a) RNA mensageiro.
b) cido desoxirribonuclico.
c) Anticorpo.
d) Lipdeos.
e) RNA ribossmico.

Virologia geral aplicada medicina veterinria 55


U1

56 Virologia geral aplicada medicina veterinria


U1

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ZAITZ, C. Compndio de Micologia MdicaFE3JPEF+BOFJSP&(, 

58 Virologia geral aplicada medicina veterinria


LIVRO

UNIDADE 2

Microbiologia
veterinria
aplicada
Famlias virais de
importncia em medicina
veterinria

Fernando Zawadzki
2016 por Editora e Distribuidora Educacional S.A

Todos os direitos reservados. Nenhuma parte desta publicao poder ser reproduzida
ou transmitida de qualquer modo ou por qualquer outro meio, eletrnico ou mecnico,
incluindo fotocpia, gravao ou qualquer outro tipo de sistema de armazenamento e
transmisso de informao, sem prvia autorizao, por escrito, da Editora e
Distribuidora Educacional S.A.

2016
Editora e Distribuidora Educacional S. A.
Avenida Paris, 675 Parque Residencial Joo Piza
CEP: 86041 100 Londrina PR
e-mail: editora.educacional@kroton.com.br
Homepage: http://www.kroton.com.br/
Sumrio

Unidade 2 | Famlias virais de importncia em medicina veterinria 5

Seo 2.1 - Classificao viral I 9


Seo 2.2 - Classificao viral II 23
Seo 2.3 - Classificao viral III 37
Seo 2.4 - Doenas virais veterinrias 53
Unidade 2

Famlias virais de
importncia em medicina
veterinria

Convite ao estudo
Ol, aluno! Seja bem-vindo Unidade 2 de estudos deste livro didtico!

Animais de companhia e de produo esto sujeitos a agentes


virais que causam enfermidades e interferem no bem-estar do animal,
provocando tambm perdas econmicas. Portanto, compreender os
agentes virais de fundamental importncia para o Mdico Veterinrio na
sociedade atual, pois estudando a patogenicidade viral, bem como suas
vias de transmisso, possvel aplicar os conhecimentos na preveno,
controle e tratamento das doenas infecciosas.

Os agentes virais so agrupados em famlias, de acordo com as


caractersticas estruturais, morfolgicas, genticas e biolgicas que
apresentam em comum. Hierarquicamente, os vrus so classificados
em ordens (viridae), famlias e subfamlias (virinae), gnero (vrus) e
espcie. Os contedos abordados nesta Unidade de Ensino permitiro
a voc, aluno, conhecer as famlias virais classificadas em I (RNA-vrus
Famlia Picornaviridae, Rhabdoviridae e Paramyxoviridae), II (RNA-vrus
Famlia Togaviridae, Flaviviridae, Retroviridae e Coronaviridae), III (DNA-
vrus Famlia Herpesviridae e Adenoviridae, Papovaviridae, Poxviridae
e Parvoviridae) e as principais doenas de importncia na medicina
veterinria cujos agentes esto classificados nas famlias virais.

Para auxili-lo no contedo abordado, vamos apresentar uma situao


da realidade profissional no Convite ao estudo, trazendo um atendimento
clnico realizado por um mdico veterinrio, com objetivo de aproximar os
contedos tericos com a prtica proposta nesta unidade. Bons estudos!

Competncia geral
U2

Conhecer os principais microrganismos de interesse em medicina


veterinria (bactrias, fungos e vrus), enfocando particularmente a
taxonomia, caractersticas morfolgicas, ecolgicas, de sensibilidade,
resistncia e identificao laboratorial.

Competncia tcnica

Conhecer e compreender as particularidades dos vrus classificados


nas diferentes famlias virais de importncia clnica para a veterinria.

Objetivos

Dentre os objetivos desta unidade, o aluno dever:

Conhecer as principais famlias RNA vrus;

Conhecer as principais famlias DNA vrus;

Conhecer as principais doenas de importncia na medicina


veterinria, cujos agentes esto classificados nas famlias virais.

Como j falamos, a fim de auxiliar o estudo e a assimilao das


competncias que sero atribudas nesta unidade, no pargrafo
subsequente vamos apresentar uma situao da realidade profissional
de um atendimento clnico realizado por um mdico veterinrio. Nesta
situao, aproximaremos os contedos tericos e a prtica proposta
nesta unidade. Leia com ateno o atendimento clnico realizado pelo
profissional de veterinria.

Recentemente, um grupo de alunos visitou o Laboratrio de anlises


clinicas do Hospital Veterinrio. O laboratrio recebe diferentes materiais
biolgicos para serem analisados. Durante os procedimentos de rotina,
o tcnico relata que a maioria das amostras que chegam no laboratrio
esto em condies adequadas (identificadas e armazenadas), porm,
algumas amostras contm quantidades insuficientes, o que pode
comprometer determinados mtodos laboratoriais. Desta forma, para as
amostras com pouca quantidade de material biolgico, o tcnico deve
estabelecer critrios para eleger o mtodo mais adequado, a fim de
prosseguir com a anlise laboratorial. Em seguida, o tcnico laboratorial
explica que fatores como a eleio do material biolgico a ser coletado
no campo, seu acondicionamento em frascos adequados e o mtodo
de conservao adotado para o transito das amostras at a chegada no
laboratrio possuem grande relevncia para obter bons resultados durante
a anlise laboratorial. Assim, cabe ao mdico veterinrio conhecer os

6 Famlias virais de importncia em medicina veterinria


U2

procedimentos adequados de acondicionamento e conservao de cada


tipo de material biolgico eleito para ser direcionado anlise laboratorial.
De acordo com o tcnico, o laboratrio possui equipamentos para a
deteco de agentes virais a partir mtodos diretos (microscopia eletrnica,
isolamento em cultivo celular, hemaglutinao, imunofluorescncia,
imunoperoxidase e reao da polimerase) e indiretos (ELISA ensaio
de imunoabsoro enzimtica indireta, soroneutralizao, fixao do
complemento, inibio da hemaglutinao, imunofluorescncia indireta).
Mediante a prestao de servios do Laboratrio, vamos acompanhar
diferentes anlises laboratoriais e seus respectivos casos clnicos.

Ento, vamos comear os estudos?

Mos obra e boa sorte!

Famlias virais de importncia em medicina veterinria 7


U2

8 Famlias virais de importncia em medicina veterinria


U2

Seo 2.1

Classificao viral I

Dilogo aberto

Ol, aluno! Seja bem-vindo seo de estudos deste livro didtico!

Nesta seo, estudaremos as estruturas biolgicas e as famlias RNA-vrus


Picornaviridae, Rhabdoviridae e Paramyxoviridae. Para melhor compreender
o contedo abordado, vamos acrescentar informaes na situao-problema
referente ao relato de caso apresentado no Convite ao estudo, dessa forma, voc
participar indiretamente da resoluo do caso.

Recentemente, o Laboratrio de anlises clnicas do Hospital Veterinrio


recebeu amostras para identificao de um agente viral. O mdico veterinrio
encaminhou um laudo tcnico anexo s amostras, contendo informaes
detalhadas do atendimento clnico e a suspeita de um agente viral. De acordo com
o laudo tcnico, as amostras foram coletadas em uma granja de aves comerciais
(galinhas poedeiras). Na anamnese, o proprietrio relatou que algumas aves
apresentavam sinais de fraqueza e reduo na produo de ovos. Em seguida, o
veterinrio relata ter encontrado aves com a doena na forma mais grave, sendo
que elas apresentavam sinais clnicos respiratrios, gastrointestinais e nervosos
(paralisia das asas, das patas e espasmos musculares). Mediante as informaes
levantadas, o profissional de veterinria suspeitou de um agente viral, o qual estava
acometendo as aves naquela propriedade. De acordo com o tcnico laboratorial,
as amostras recebidas continham material biolgico de fezes, pores da traqueia,
bao, pulmes e swabs traqueais e cloacais.

Mediante as informaes apresentadas, e com auxlio dos contedos abordados


nesta seo, responda s questes para a resoluo do caso clnico.

Qual o agente patolgico suspeito que est acometendo as galinhas


poedeiras?

Classifique o agente patolgico em famlia, subfamlia, gnero, espcie e


sorotipo.

O Tcnico laboratorial resolveu proceder com a tcnica de isolamento em

Famlias virais de importncia em medicina veterinria 9


U2

cultivo celular. Pesquise e descreva a tcnica de isolamento e identificao.

Explique o ciclo replicativo da famlia viral em que se enquadra o agente


patolgico diagnosticado nas galinhas poedeiras.

No pode faltar

Prezado aluno, a partir desta seo vamos comear a estudar as principais


caractersticas das famlias RNA-vrus Picornaviridae, Rhabdoviridae e
Paramyxoviridae. Vamos l!

Famlia Picornaviridae

A famlia Picornaviridae abrange uma ampla variedade de espcies virais, as


quais so classificadas em nove gneros (Enterovirus, Cardiovirus, Rhinovirus,
Hepatovirus, Erbovirus, Teschvirus, Aphtovirus e Parechovirus). Os gneros
desta famlia so icosadricos, ausentes de envelope e possuem RNA linear de
polaridade positiva. Os picornavrus acometem vrias espcies animais, como
cavalos, sunos, bovinos, roedores e pssaros. Dentre os principais gneros que
abrangem esta famlia esto: vrus da febre aftosa (febra aftosa acomete animais
da espcie bovina, ovina, caprina e suna), rinovrus equino (doena respiratria
aguda que acomete equinos), o vrus da hepatite dos patos (acomete os patos
domsticos), encefalomiocardite (miocardite e encefalite que acomete sunos e
roedores), doena vesicular dos sunos (acomete os sunos) e enterovirus bovino
(doena entrica e respiratria que acomete bovinos). Dentre os vrus da famlia
Picornaviridae de maior interesse veterinrio esto o vrus da febre aftosa, o vrus da
encefalomiocardite dos camundongos, Enterovirus bovino e o agente da doena
vesicular dos sunos. O vrus da febre aftosa acaba por destacar-se em funo da
grande repercusso sanitria e econmica, bem como os prejuzos causados pelas
barreiras impostas pelo comrcio internacional em animais e produtos crneos
oriundos de reas endmicas.

Reflita

A transmisso do vrus da febre aftosa extremamente alta entre


bovinos, ovinos, caprinos, sunos e outros animais biungulados. Sua
transmisso pode ocorrer de forma direta, pelo contato de animais
susceptveis com animais infectados, ou pelo contato indireto, por
meio de fmites ou subprodutos contaminados.

O diagnstico da doena febre aftosa realizado pela demonstrao


do vrus ou de antgenos virais presentes em tecidos ou fluidos de
animais infectados.

10 Famlias virais de importncia em medicina veterinria


U2

Quadro 2.1 | Principais agentes virais da famlia Picornaviridae.

Gnero Espcie Hospedeiro Doena


Aphtovirus Vrus da febre aftosa O Bovinos, ovinos, Febre aftosa
caprinos e sunos
Aphtovirus Vrus da rinite equina A Equinos Doena respiratria
aguda
Aviehepatovirus Vrus da hepatite dos Pato domstico Hepatite dos patos
patos
Cardiovirus Vrus da Sunos, roedores Miocardite, encefalite
encefalomiocardite
Enterovirus Vrus da doena Sunos Doena vesicular dos
Vesicular dos sunos sunos
Enterovirus Enterovrus bovino Bovinos Doena entrica e
respiratria
Fonte: Adaptado de Flores (2012) e Quinn (2005).

Estrutura viral

Os vrions pertencentes famlia Picornaviridae so ausentes de envelope, o


seu genoma constitudo de RNA de fita simples e de polaridade positiva. Os
agentes virais possuem formato icosadrico e uma superfcie composta por 60
unidades denominadas de protmeros, os quais so formados por quatro unidades
de protenas estruturais VP1, VP2, VP3 e VP4. A sequncia de aminocidos que
constituem as protenas estruturais determinante para o tropismo e patogenia
da partcula vrica, enquanto que as protenas no-estruturais esto envolvidas
na replicao do genoma e no processamento da poliprotena. O fato de seu
RNA ser de polaridade positiva permite que a sua traduo se d diretamente no
ribossomo, por outro lado, o RNA mensageiro que no possui cap na extremidade
5, depende de ser reconhecido pelo stio interno de entrada dos ribossomos
(internal ribossomal entry IRES). De modo geral, os vrions pertencentes famlia
Picornaviridae possuem resistncia ao ter, clorofrmio e lcool, entretanto,
quando submetidos a substncias como formaldedos, fenol e radiao inica
podem ter a partcula vrica inativada.

Exemplificando

As leses vesiculares e histopatolgicas da doena vesicular dos sunos


so clinicamente indistinguveis das causadas pelo vrus da febre aftosa,
pelo vrus da estomatite vesicular e pelo vrus do exantema vesicular.

O diagnstico do agente viral pode ser realizado utilizando diferentes


mtodos laboratoriais: Isolamento viral em clulas de cultivo, fixao
do complemento e ELISA, para a deteco de antgenos ou anticorpos.

Famlias virais de importncia em medicina veterinria 11


U2

Ciclo replicativo

Os receptores presentes na superfcie viral so determinantes pelo tropismo


tecidual. Alguns agentes virais so internalizados por endocitose (vrus da febre
aftosa) e, em outros casos, a penetrao ocorre na membrana plasmtica, sem que
haja a internalizao (poliovrus). Sugere-se que a protena VP1 auxilia na formao
de poros para que o genoma seja inserido na clula hospedeira (poliovrus). No
caso dos vrus que utilizam o processo de internalizao por endocitose, uma
srie de alteraes no capsdeo da partcula vrica (desnudamento e liberao do
genoma citoplasma) so desenvolvidas. A traduo e sntese do RNA genmico
dos pircornavrus ocorre no citoplasma das clulas hospedeiras, aps liberao do
RNA genmico no citoplasma, a IRES desenvolve uma estrutura secundria que
permitir a ligao dos RNAs mensageiros (independentes de cap) aos ribossomos,
os quais sero direcionados para iniciar o processo de traduo. A replicao do
RNA ser realizada em duas etapas, com auxlio da polimerase RNA dependente de
RNA, protenas virais e celulares. Na fase inicial, o RNA ser transcrito em molculas
de sentido negativo para serem utilizadas como molde para a replicao. Na fase
final (montagem do capsdeo e maturao), os produtos decorrentes da clivagem
pela polimerase RNA dependente de RNA sero organizados em uma estrutura de
protmeros (protenas VP0 (VP2 e VP4), VP1 e VP3). Em seguida ocorrer o egresso
por lise celular.

Vocabulrio

Epidemia: aumento significativo do nmero de casos de uma doena


em uma determinada populao, em um perodo de tempo.

Taxa de morbidade: frequncia de doena causada por um determinado


agente em relao populao de risco exposta.

Taxa de mortalidade: frequncia de morte causada por um determinado


agente em relao populao de risco exposta.

Fonte: Adaptado de Flores (2012) e Quinn (2005).

Famlia Rhabdoviridae

A famlia Rhabdoviridae (ordem Mononegavirales) classificada em seis


gneros, sendo que apenas dois gneros acometem plantas (Cytorhabdovirus e
Nucleohabdovirus) e os demais acometem animais e artrpodes (Vesiculovirus,
Lyssavirus, Ephemerovirus e Novirhabdovirus). Entre as principais doenas
causadas por agentes da famlia Rhabdoviridae esto a raiva e a estomatite
vesicular. O vrus da raiva uma doena preocupante para a sade pblica em
funo de ser uma zoonose, enquanto que o vrus da estomatite vesicular possui

12 Famlias virais de importncia em medicina veterinria


U2

uma grande repercusso econmica, pois acomete os animais de produo e


equinos, apresentando sinais clnicos semelhantes aos da febre aftosa.

Quadro 2.2 | Principais agentes virais da famlia Rhabdoviridae.

Gnero Espcie Hospedeiro Doena


Vesiculovirus Vrus da estomatite Mamferos, peixes, Estomatite vesicular,
vesicular insetos viremia primaveril das
carpas
Lyssavirus Vrus da raiva Mamferos, insetos Raiva
Ephemerovirus Vrus da febre efmera Mamferos, insetos Febre efmera de
dos bovinos bovinos
Novirhabdovirus Vrus da necrose Peixes Necrose
hematopoitica hematopoitica,
septicemia
hemorrgica
Fonte: Adaptado de Flores (2012) e Quinn (2005).

Estrutura viral

Os rabdovrus possuem estrutura no formato de basto, e suas dimenses esto


entre 100 e 430 nm de extenso por 40 a 100 nm de dimetro. O genoma consiste
em uma molcula de RNA de fita simples linear e de polaridade negativa, sendo
recoberto por nucleocapsdeo (constitudo de fosfoprotena e polimerase viral) e
envelope (constitudo de glicoprotena e lipdios derivados da clula hospedeira).
No genoma, regies denominadas de leader e trailer desempenham funes
importantes na regulao da transcrio e replicao viral. A regio leader uma
sequncia pequena, no traduzida, na extremidade 3 e a regio trailer encontra-
se na extremidade 5. A infectividade da partcula vrica estvel em condies
ambientais (termolbeis), porm sensvel radiao solar e a ultravioleta, bem
como a desinfetantes baseados em detergentes.

Ciclo replicativo

Vrus da estomatite vesicular

O ciclo replicativo inicia-se com a interao entre a glicoprotena G (presente


no envelope) e os receptores de superfcie da membrana da clula hospedeira.
Aps a adsoro, a penetrao viral ocorre pelo mecanismo de endocitose.
Com o auxlio da glicoprotena G, o envelope viral e a membrana endossomal
se unem, formando um complexo ribonucleoprotena. Em seguida, sob condio
de pH cido, o genoma RNA de fita simples (sentido negativo) liberado no
citoplasma para que ocorra o processo de transcrio, com o auxlio da enzima
RNA polimerase e a sntese das protenas N, P, M, G e L. Nesse processo, a
presena de protenas do nucleocapsdeo (fosfoprotena P e protena L) e outros
componentes so necessrios para que se inicie a transcrio do genoma viral.

Famlias virais de importncia em medicina veterinria 13


U2

O processo de transcrio determinado pela distncia do promotor nico


localizado na extremidade 3 (processo denominado de atenuao da transcrio),
o qual transcreve o genoma em protenas na seguinte ordem: N, P, M, G e L. Cada
RNA mensageiro possui uma estrutura cap na extremidade 5 e uma cauda poli-A
na extremidade 3, sendo que o mesmo pode codificar apenas uma protena.
Quando a sequncia 5-AGUUUUUUUCAUA-3 completada no final da protena
N, sinaliza o fim do processo de transcrio. Aps a traduo de protenas virais,
a qual est associada ao processo de transcrio, a RNA polimerase passa para o
processo de replicao viral, no qual ocorre a sntese de cadeias completas de
RNA no sentido positivo, e que sero utilizadas como moldes para sntese de RNA
no sentido genmico. Os RNAs de sentido genmico sero encapsidados pela
interao entre a protena N e a protena M. O complexo RNP interage com os
trmeros (glicoprotena G produzida no complexo de Golgi e inserida na membrana
plasmtica) na membrana plasmtica, adquirindo envelope lipoproteico por meio
de brotamento e liberao para o meio extracelular.

Pesquise mais
Estude mais! Pesquise mais! Conhea a doena infecciosa Raiva,
causada pelo vrus da raiva pertencente famlia Rhabdoviridae.
Acesse o link. Disponvel em: <https://pt.wikipedia.org/wiki/Raiva_
(doen%C3%A7a)>. Acesso em: 10 maio 2016.

Famlia Paramyxoviridae

A famlia Paramyxoviridae pertence ordem Mononegavirales, que inclui as


subfamlias Paramyxovirinae e Pneumovirinae. A subfamlia Paramyxovirinae possui
seis gneros (Respirovirus, Morbillivirus, Rubulavirus, Henipavirus, Avulavirus e
Vrus TPMV-like), enquanto que a subfamlia Pneumovirinae possui dois gneros:
Pneumovirus e Metapneumovirus. Dentre os principais agentes virais pertencentes
famlia Paramyxoviridae esto: o vrus respiratrio sincicial bovino; o vrus da
parainfluenza bovino tipo 3; o vrus da cinomose canina; o vrus da peste bovina; o
vrus da doena de Newcastle. Os vrus pertencentes a famlia Paramyxoviridae so
citolticos, os quais causam efeitos citopticos, como fuso entre clulas, incluses
intranucleares acidoflicas e alguns possuem propriedade de hemadsoro. Os
vrus da famlia Paramyxoviridae so envelopados e o genoma constitudo de
RNA de fita simples e de sentido negativo. So sensveis ao ambiente cido, aos
solventes lquidos, aos detergentes no-inicos e aos formaldedos. O processo de
congelamento e descongelamento, e a exposio por 30 minutos em temperatura
de 56C, podem comprometer a infectividade da partcula vrica.

14 Famlias virais de importncia em medicina veterinria


U2

Assimile

Aps instalao do Vrus da cinomose canina, inicialmente o agente


viral disseminado pelos rgos linfoides seguido de pico febril (viremia
primria). Quando o organismo no desenvolve uma resposta imune
adequada, o vrus passa a ser disseminado para a pele, trato digestivo,
respiratrio e sistema nervoso (viremia secundria).

Quadro 2.3 | Principais agentes virais da famlia Paramyxoviridae


Subfamlia Gnero Espcie Hospedeiro Doena
Respirovirus Vrus da Bovinos Doena respiratria subclnica
parainfluenza Ovinos ou branda, associada febre
bovina 3 do transporte em bovinos.
Vrus Sendai Camundongos Patgeno respiratrio
Sunos, ratos, (pneumonia em ratos).
hamsters e cobaias.
Vrus da Humanos,outros Infeces no trato respiratrio
parainfluenza primatas, hamsters, superior (tosse, dispneia,
humana 1 e 3 cobaias, fures, rouquido, febre).
ratos cauda de
algodo.
Morbillivirus Vrus da Caninos, lees, Doena aguda, envolvimento
cinomose fures, guaxinins, multissistmico e mortalidade
pandas. varivel.
Vrus da peste Bovinos, ovinos, Doena altamente contagiosa,
bovina caprinos e sunos. altas taxas de morbidade e
mortalidade.
Vrus da peste Ovinos, caprinos, Doena grave, semelhante
Paramyxovirinae

dos pequenos alguns ruminantes peste bovina, altas taxas de


ruminantes selvagens. morbidade e mortalidade.
Rubulavirus Vrus da Ces Doena branda ou inaparente
parainfluenza em ces; associada tosse
canina 2 dos canis.
Rubulavirus Sunos Doena do olho azul descrita
suno no Mxico.
Henipavirus Vrus Hendra Morcegos, Zoonose emergente que
equinos, humanos. acomete e equinos. Causa
gripe e doena neurolgica.
Apresentam febre e encefalite
aguda.
Vrus Nipah Morcegos ,sunos, Zoonose emergente que
humanos, caninos acomete os sunos. Causa
e felinos. gripe e doena neurolgica.
Apresentam febre e encefalite
aguda.
Avulavirus Vrus da Galinhas, patos, A virulncia varivel:
doena de gansos, perus, velognicas, mesognicas
Newcastle ou aves silvestres e lentignicas. Infeco
paramixovrus e aquticas, generalizada, sinais
avirio 1 humanos. respiratrios, gastrointestinais
e nervosos.
(continua)

Famlias virais de importncia em medicina veterinria 15


U2

Pneumovirus Vrus Bovinos, ovinos. Acomete o trato respiratrio


respiratrio superior, podendo progredir
sincicial bovino para o trato inferior
(bronquiolite e pneumonia).
Paramyxovirinae

Vrus Ovinos, bovinos. Acomete o trato respiratrio


respiratrio superior, podendo progredir
sincicial ovino para o trato inferior
(bronquiolite e pneumonia).
Metapneumovirus Vrus da Galinhas e perus. Sndrome da cara inchada dos
rinotraquete perus; Sndrome da cabea
dos perus ou inchada dos frangos.
pneumovrus
avirio
Fonte: Adaptado de Flores (2012) e Quinn (2005).

Estrutura do vrion e do genoma

Os vrus possuem formato esfrico ou pleomrficos, so envelopados e


possuem dimetro variando entre 150 e 300 nm. Alguns vrus podem apresentar
formato filamentoso, os quais apresentam comprimento entre 1000 a 10000
nm. As glicoprotenas H, HN e G esto presentes na superfcie do envelope, as
quais auxiliam no processo de fuso entre envelope e membrana celular. O
nucleocapsdeo constitudo pelo genoma RNA e protena N, P e L. O espao
entre nucleocapsdeo e envelope constitudo pela protena M. As glicoprotenas
H, HN e G, presentes no envelope, so responsveis pela etapa de adsoro, sendo
que cada uma possui uma funo especfica. A glicoprotena H possui atividade
hemaglutinante (H), a glicoprotena NH possui atividade hemaglutinante (H) e
neuraminidase (N), e a glicoprotena G auxilia na ligao dos receptores, quando
no houver as glicoprotenas HN e H. A glicoprotena de fuso (F) possui a funo
de fuso entre envelope e membrana celular. A protena M essencial durante o
processo de morfognese viral, interagindo com as glicoprotenas H, HN ou G com
o nucleotdeo, desencadeando o brotamento. A protena N confere proteo ao
genoma contra enzimas nucleases, e auxilia na morfognese de novas partculas
virais. A protena L auxilia no processo de polimerizao do RNA, enquanto que
as protenas P e N esto envolvidas no processo de sntese de RNA mensageiro
(transcrio), para auxiliar na sntese do RNA genmico a partir de RNA antigenmico.

Assimile

O vrus da doena de Newcastle apresenta trs tipos na forma


lentognica (infeco subclnica ou sinais respiratrios moderados):
mesognica (sinais respiratrios e ocasionalmente neurolgicos),
e velognica (neurotrpica: sinais respiratrios e neurolgicos e
viscerotrpica (leses hemorrgicas no intestino).

16 Famlias virais de importncia em medicina veterinria


U2

Ciclo replicativo

No processo infeccioso dos agentes virais pertencentes famlia


Paramyxoviridae, as partculas vricas se ligam em receptores especficos
(glicosaminoglicanos, cido silico, etc.) e penetram na clula hospedeira,
utilizando o mecanismo de fuso. No citoplasma, o nucleocapsdeo ser
transcrito com auxlio da RNA polimerase e protenas P e L, sendo que este
processo inicia-se a partir da extremidade 3. Nos vrus no-segmentados, o
genoma possui indicao de incio e trmino da transcrio, neste caso, os RNAs
mensageiros possuem a estrutura cap 5 na extremidade e so poliadenilados
(poli-A), os quais so traduzidos em protenas no ribossomo. A continuidade ou
o trmino do processo de transcrio tem seu controle a partir do acmulo de
protenas virais no citoplasma. As protenas P e N auxiliam na transcrio integral
do genoma e sntese de uma cpia de RNA antigenmico (sentido positivo),
a qual servir de molde para a sntese do RNA genmico (sentido negativo).
Sintetizado o RNA genmico, este se associar com a protena N, formando o
nucleocapsdeo (RNA+N). Em seguida, outras protenas P e L se associam ao
nucleocapsdeo, tal evento considerado como a fase inicial da morfognese.
Outros componentes, como as glicoprotenas NH e F (sintetizadas no retculo
endoplasmtico e modificadas no complexo de Golgi) so fixadas na membrana
plasmtica. Alm desses, um evento importante a clivagem da protena F0 em
F1 e F2, com auxlio de proteases, as quais so essenciais para a infectividade da
partcula vrica. Por fim, o nucleocapsdeo interage com auxlio da protena N e
M, resultando no processo de brotamento na membrana plasmtica e egresso da
partcula vrica para o meio extracelular.

Faa voc mesmo

Agora, faa voc mesmo! Pesquise e estude sobre o Complexo das


doenas respiratrias de bezerros. Acesse o link. Disponvel em: <www.ivis.
org/proceedings/abmg/2005/pdf08.pdf?LA=7>. Acesso em: 10 maio 2016.

Sem medo de errar

Para compreender melhor a situao apresentada, vamos recapitular os pontos


que foram analisados anteriormente da situao da realidade profissional.

Durante a visita tcnica de um grupo de alunos no Laboratrio de anlises


clinicas do Hospital Veterinrio, os mesmos observaram que o laboratrio possui
uma ampla gama de equipamentos, o que permite a execuo de diferentes anlises
laboratoriais. O laboratrio tem como objetivo prestar servios aos profissionais
da rea Veterinria, a fim de identificar agentes patolgicos, utilizando diferentes
mtodos de diagnsticos para auxiliar na resoluo de casos clnicos.

Famlias virais de importncia em medicina veterinria 17


U2

Mediante as informaes apresentadas na situao e com auxlio dos contedos


abordados nesta seo, responda s questes para a resoluo do caso clnico.

Qual o agente patolgico suspeito que est acometendo as galinhas


poedeiras?

O Mdico Veterinrio suspeitou de uma agente viral que pertence famlia


Paramyxoviridae denominado de vrus da doena de Newcastle ou paramixovrus
avirio tipo 1.

Classifique o agente patolgico em ordem, famlia, subfamlia, gnero,


espcie e sorotipo.

O vrus de Newcastle de ordem: Mononegavirales; famlia: Paramyxoviridae;


gnero: Avulavirus; espcie: paramixovrus avirio ou vrus da doena de Newcastle
e sorotipo: 1.

Explique o ciclo replicativo da famlia viral em que se enquadra o agente


patolgico diagnosticado nas galinhas poedeiras.

No processo infeccioso dos agentes virais pertencentes famlia


Paramyxoviridae, as partculas vricas se ligam em receptores especficos, que
permitem a ela penetrar na clula hospedeira mediante o mecanismo de fuso. No
interior da clula hospedeira (citoplasma), o nucleocapsdeo ser transcrito com
auxlio da RNA polimerase, e outras protenas P e L. A continuidade ou o trmino
do processo de transcrio tem controle a partir do acmulo de protenas virais no
citoplasma. As protenas P e N auxiliam na transcrio integral do genoma e sntese
de uma cpia de RNA antigenmico (sentido positivo), a qual servir de molde para
sntese do RNA genmico (sentido negativo). Sintetizado o RNA genmico, este se
associar com a protena N, formando o nucleocapsdeo (RNA+N). Em seguida,
outras protenas P e L se associam ao nucleocapsdeo, tal evento considerado
como a fase inicial da morfognese. Outros componentes, como as glicoprotenas
NH e F (sintetizadas no retculo endoplasmtico e modificadas no complexo de
Golgi) so fixadas na membrana plasmtica. Alm desses, um evento importante
a clivagem da protena F0 em F1 e F2, com auxlio de proteases, as quais so
essenciais para a infectividade da partcula vrica. Por fim, o nucleocapsdeo
interage com auxlio da protena N e M, resultando no processo de brotamento na
membrana plasmtica e egresso da partcula vrica para o meio extracelular.

Avanando na prtica
Doena Vesicular Suna

Descrio da situao-problema

18 Famlias virais de importncia em medicina veterinria


U2

Recentemente, o mdico veterinrio de uma cooperativa foi solicitado para


fazer uma visita tcnica em uma propriedade rural, que pertence a um dos
cooperados. O proprietrio relata que alguns sunos apresentavam apatia e
claudicao, porm, em algumas semanas os sintomas e as leses despareceram,
e os animais permaneceram em boas condies. Durante o exame clnico de
alguns sunos, o veterinrio observou leses vesiculares no focinho, nos lbios
e nas bandas coronrias em uma das patas do membro posterior. Em seguida, o
profissional coletou amostras das leses vesiculares (focinho, lbios e nas bandas
coronrias da pata) e identificou e acondicionou em recipientes adequados para
serem encaminhadas ao laboratrio de anlises clnicas. Mediante os sinais clnicos,
o veterinrio suspeitou de uma agente viral pertencente famlia Picornaviridae.
Suspeitando de uma doena vesicular infecciosa, o mdico veterinrio realizou
os procedimentos bsicos de acordo com a legislao para casos de animais que
apresentam leses vesiculares, notificando o Servio Veterinrio Oficial ( 3, art. 4,
Instruo Normativa n 44, de 2 de outubro de 2007), e indicando a possibilidade
da existncia de um ou mais animais que apresentavam sinais clnicos compatveis
com doena vesicular infecciosa.

Mediante as informaes apresentadas, e com auxlio dos contedos abordados


nesta seo, responda s questes para a resoluo do caso clnico.

Quais os possveis agentes patolgicos, pertencentes famlia Picornaviridae,


que podem estar acometendo os sunos naquela propriedade rural?

Explique o ciclo replicativo dos agentes pertencentes a famlia Picornaviridae.

Lembre-se

As partculas vricas pertencentes famlia Picornaviridae so vrus


envelopados, e seu genoma constitudo por um genoma contendo
RNA de fita simples e de polaridade positiva.

Resoluo da situao-problema

Em continuidade com o relato de caso, como se suspeitava de uma doena


vesicular infecciosa, foram realizados testes de diagnsticos para identificar
possveis agentes virais que causam doenas com sinais clnicos semelhantes
(febre aftosa, estomatite vesicular, exantema vesicular e doena vesicular dos
sunos). Os exames evidenciaram resultado negativo para o vrus da febre aftosa,
estomatite vesicular e exantema vesicular, no entanto, foi positivo para o vrus da
Doena vesicular dos sunos. O vrus da doena vesicular dos sunos pertence
famlia Picornaviridae e gnero Enterovirus. Agora, para melhor compreender o
agente viral, vamos responder as questes do caso clnico.

Famlias virais de importncia em medicina veterinria 19


U2

Quais os possveis agentes patolgicos, pertencentes famlia Picornaviridae,


que podem estar acometendo os sunos naquela propriedade rural?

Vrus da febre aftosa (famlia: Picornaviridae, gnero Aphtovirus). Vrus da


estomatite vesicular (famlia Rbadoviridae, gnero Vesiculovirus). Vrus da doena
vesicular dos sunos (famlia Picornaviridae, gnero Enterovirus).

Explique o ciclo replicativo dos picornavrus.

No processo de adsoro, os receptores presentes na superfcie viral so


determinantes pelo tropismo tecidual. O mecanismo de penetrao pode ser
especfico do grupo viral, ou individual de cada partcula vrica. Alguns agentes
virais so internalizados por endocitose (vrus da febre aftosa) e, em outros casos,
a penetrao ocorre na membrana plasmtica, sem que haja a internalizao
(poliovrus). Sugere-se que a protena VP1, presente nos poliovrus, forma poros
para que o genoma seja inserido na clula hospedeira. No caso dos vrus que
utilizam o processo de internalizao por endocitose, uma srie de alteraes no
capsdeo da partcula vrica (desnudamento e liberao do genoma citoplasma)
so desenvolvidas. Na fase de expresso gnica, a traduo e sntese do RNA
genmico dos picornavrus ocorre no citoplasma das clulas hospedeiras, mediante
um complexo de fatores virais e celulares. Aps liberao do RNA genmico no
citoplasma, os stios IRES desenvolvem uma estrutura secundria que permitir a
ligao dos RNAs mensageiros (independente de cap) aos ribossomos, os quais
sero direcionados para o processo de traduo. A replicao do RNA ser realizada
em duas etapas, com auxlio da polimerase RNA dependente de RNA, e com auxlio
das protenas virais e celulares. Na fase inicial, o RNA ser transcrito em molculas
de sentido negativo, para serem utilizadas como molde para a replicao. Na
fase final, os produtos decorrentes da clivagem pela polimerase RNA dependente
de RNA sero organizados em uma estrutura protmera (protenas VP0, VP1 e
VP3). Em seguida, a cada cinco protmeros, forma-se pentmeros e a cada doze
pentmeros origina-se o capsdeo.

Faa voc mesmo

Agora, faa voc mesmo! Pesquise mais sobre as principais doenas


e seus sinais clnicos da famlia: Picornaviridae, Rbadoviridae e
Paramyxoviridae. Utilize o material de apoio: QUINN, P. J. Microbiologia
veterinria e doenas infecciosas. Porto Alegre: Artmed, 2005. HIRSH,
D. C; ZEE, Y. C. Microbiologia veterinria. Rio de Janeiro: EGK, 2003.

20 Famlias virais de importncia em medicina veterinria


U2

Faa valer a pena!

1. Na famlia Picornaviridae, o gnero Aphtovirus se destaca entre os


demais vrus por sua importncia econmica e sanitria, j que o
causador da doena conhecida como febre aftosa. Com base nesta
afirmativa, indique os possveis hospedeiros do vrus da febre aftosa.
Assinale a alternativa correta.
a) Bovinos, sunos, galinhas poedeiras e humanos.
b) Ovinos, bovinos, caprinos e sunos.
c) Bovinos, patos, sunos e caprinos.
d) Ovinos, roedores, bovinos e sunos.
e) Bovinos, frangos de corte, caprinos e sunos.

2. Os picornavrus so capazes de infectar diferentes espcies animais,


como: cavalos, sunos, bovinos, roedores e pssaros. Os vrions
pertencentes famlia Picornaviridae so vrus ____________ de fita
____________, de polaridade ____________ e _________ envelope.
Assinale a alternativa que completa a ordem das lacunas.
a) RNA, fita dupla, negativa, com.
b) DNA, fita dupla, negativa, com.
c) DNA, fita simples, positiva, sem.
d) RNA, fita simples, positiva, sem.
e) RNA, fita linear, positiva, sem.

3. No ciclo reprodutivo dos picornavrus, a interao da partcula vrica


com os receptores da clula hospedeira o primeiro passo no processo
de replicao. Em qual estrutura das clulas hospedeiras acontece a
traduo e sntese do RNA genmico da famlia Picornaviridae?
Assinale a alternativa correta.
a) Mitocndrias.
b) Ncleo celular.
c) Envoltrio nuclear.
d) Citoplasma.
e) Incluses citoplasmticas.

Famlias virais de importncia em medicina veterinria 21


U2

22 Famlias virais de importncia em medicina veterinria


U2

Seo 2.2
Classificao viral II

Dilogo aberto

Ol, aluno! Seja bem-vindo mais uma seo de estudos deste livro didtico!

Nesta seo, estudaremos as estruturas biolgicas, o ciclo replicativo e


conheceremos as principais doenas causadas pelos agentes pertencentes s
famlias: Togaviridae, Flaviviridae, Retroviridae e Coronaviridae. Para auxiliar o
contedo abordado, vamos acrescentar novas informaes na situao-problema
apresentada no Convite ao estudo, dessa forma, voc participar indiretamente
da resoluo caso.

Recentemente, o laboratrio de anlises clnicas do Hospital Veterinrio


recebeu amostras para diagnstico laboratorial. O mdico veterinrio encaminhou
um laudo tcnico anexo s amostras, contendo informaes detalhadas do
atendimento clnico e indicando a suspeita de um agente viral. De acordo com o
laudo tcnico, as amostras foram coletadas de um gato com aproximadamente
2 anos de idade. Na anamnese, o proprietrio relatou que o animal j tinha sido
hospitalizado em outra clnica (2 atendimentos), pois apresentava anorexia, perda
de peso e desidratao, porm no obteve resoluo do caso. Desta forma, o
proprietrio procurou outra clnica, j que o gato voltou a apresentar sintomas
semelhantes, no entanto, o animal no resistiu e ocorreu o bito. Em seguida, o
veterinrio solicitou autorizao para fazer a autpsia do animal e coletar amostras
para proceder com o diagnstico final. Mediante as informaes levantadas, o
mdico veterinrio suspeitou de um agente viral, o qual estava acometendo o
animal. De acordo com o tcnico laboratorial, as amostras recebidas continham
material biolgico de lquido da cavidade abdominal e torcica (exsudato fibrinoso),
fezes, pores da traqueia, bao, fgado e pulmes. Mediante as informaes
apresentadas e com auxlio dos contedos abordados nesta seo, responda s
questes para a resoluo do caso clnico.

Qual o possvel agente patolgico suspeito que acometeu o gato?

Classifique o agente patolgico em famlia, subfamlia, gnero, espcie e


sorotipo.

Famlias virais de importncia em medicina veterinria 23


U2

Descreva a estrutura viral dos vrus pertencentes famlia do agente viral


que acometeu o gato.

No pode faltar

Ol aluno! Nesta seo, abordaremos os mtodos diretos de diagnstico,


envolvendo a deteco de antgenos e cidos nuclicos dos agentes virais. Vamos
iniciar os estudos!

Famlia Togaviridae

A famlia Togaviridae contm aproximadamente trinta espcies virais distribudas


em dois gneros denominados de Alfavirus e Rubivirus. Diversas doenas em animais
domsticos (aves e equinos) e silvestres (aves e mamferos) tm sido associadas aos
agentes virais pertencentes famlia Togaviridae. Os agentes virais pertencentes ao
gnero Alfavirus abrigam vrios patgenos que acometem humanos e animais,
os quais so transmitidos, principalmente, por vetores artrpodes, j o gnero
Rubivirus contm apenas o vrus da rubola que acomete os seres humanos.
Dentre os agentes virais de interesse veterinrio esto os vrus da encefalite equina
do Leste, do Oeste e venezuelana, entre outros de importncia regional.

Quadro 2.4 | Principais agentes virais pertencentes a famlia Togaviridae de gnero Alfavirus
Gnero Vrus Hospedeiros Espcies Doena Vetores Localizao
naturais animais
Encefalite Aves silvestres Equinos, aves Doena Mosquitos EUA, Amrica
equina do de reas domsticas febril, (Culiseta Central e
Leste pantanosas (faises, encefalite melanura, Aedes Caribe, costa
galinha, sollicitans, A. norte da
emas, patos) vexans) Amrica do Sul
Encefalite Aves silvestres, Equinos Encefalite, Mosquito Plancies centrais
equina do Pequenos doena (Culex tarsalis) e ocidentais dos
Oeste mamferos febril EUA e Canad
Encefalite Roedores Equdeos Encefalite, Mosquito Amrica
equina silvestres, (equinos, doena (Culex sp.) Central, norte/
venezuelana equinos (vrus asininos, febril noroeste da
Alfavirus

epizoticos) burros) Amrica do Sul


Higlands J Pssaros, Equinos Doena Mosquitos Amricas
mamferos febril,
encefalite
Chikungunya Primatas Primatas, Doena Mosquitos frica, ndia,
humanos febril, Sudeste
exantema, Asitico
artralgias
Semliki Pssaros Pssaros, Doena Mosquitos frica
Forest humanos, febril, rara
equinos encefalite
Getah Pssaros, Equinos Doena Mosquitos Sudeste
mamferos febril Asitico
Fonte: Adaptado de Flores (2012) e Quinn (2005)

24 Famlias virais de importncia em medicina veterinria


U2

Estrutura viral

Os agentes virais pertencentes famlia Togaviridae so envelopados, de


conformidade esfrica ou pleomrficos, dimetro de 70 nm, nucleocapsdeo
com 40 nm de dimetro, constitudo por 240 cpias da protena capsdeo com
simetria icosadrica. O seu genoma constitudo por uma molcula de RNA de
fita simples, linear e de polaridade positiva. Na organizao estrutural do genoma,
a extremidade 5 possui uma estrutura cap e a extremidade 3 poliadenilada.
Sequncias no-traduzidas so encontradas nas extremidades do genoma, as
quais so utilizadas para a sua transcrio e replicao.

Assimile

O genoma das famlias Togaviridae, Flaviviridae, Retroviridae e


Coronaviridae so constitudos pelo cido ribonucleico.

Ciclo replicativo

Os vrus classificados no gnero Alfavirus utilizam diferentes receptores para


iniciar o processo de infeco, de acordo com o agente viral. A penetrao ocorre
com auxlio de receptores (E2 e/ou E1), seguida de internalizao das partculas
vricas, o que ocorre por endocitose. A fuso do envelope viral com a membrana
dos endossomos ocorre sob pH baixo (5 a 6), o que justifica a classificao dos
vrus como pH-dependentes. Outros mecanismos so descritos na literatura,
como a formao de poros com auxlio da protena E1, permitindo a ejeo do
genoma diretamente no citoplasma, sem a penetrao do nucleocapsdeo. Para
isto, alteraes conformacionais so aplicadas na E1 sob condies de pH baixo,
porm, a penetrao do genoma ocorreria em pH prximo a neutro. Quando
h penetrao por endocitose, o desnudamento ocorre pela interao entre as
protenas do nucleocapsdeo e os ribossomos presentes na clula hospedeira.
No caso da penetrao por meio dos poros, o genoma j estaria desprovido do
nucleocapsdeo. Aps desnudamento, a traduo do RNA genmico ocorrer
diretamente no ribossomo. Nesse processo, ocorrer a sntese de protenas no-
estruturais (nsP1, nsP2, nsP3 e nsP4). A formao de um complexo entre a nsP4 e
demais nsPs responsvel pela formao de uma molcula de RNA antigenmico
(polaridade negativa), a qual servir de molde para sntese de RNA subgenmico.
O RNA subgenmico dar origem s protenas estruturais do capsdeo e s
glicoprotenas do envelope E1, E2 e E3, as quais passaro por transformaes
(glicosilao, acilao) no aparelho de Golgi. O RNA antigenmico servir de molde
para sntese do RNA genmico. Em seguida, a montagem do nucleocapsdeo
ocorre associada membrana do citoplasma (RNA genmico + protena C). Na
membrana plasmtica, ocorre interao com as caudas das glicoprotenas recm-
inseridas para completar a maturao e brotamento da partcula vrica.

Famlias virais de importncia em medicina veterinria 25


U2

Famlia Flaviviridae

A famlia Flaviviridae abriga vrias espcies virais que esto distribudas em trs
gneros: Flavivirus, Pestivirus e Hepacivirus, os quais so de importncia humana
e veterinria. Os agentes virais (vrus da febre amarela, vrus do oeste do Nilo, vrus
da encefalite japonesa, vrus da doena de Wesselsbron, vrus da encefalomielite
ovina mal-do-pulo e Vrus meningo-encefalite dos perus de Israel) pertencentes
ao gnero Flavivirus so transmitidos por insetos, os quais so considerados
zoonticos de importncia em sanidade animal. No gnero Pestivirus esto o
vrus da peste suna clssica, o vrus da diarreia viral bovina e o vrus da doena
da fronteira e, por fim, no gnero do Hepacivirus encontra-se apenas o vrus da
hepatite C, que acomete exclusivamente os seres humanos.

Quadro 2.5 | Principais agentes virais pertencentes a famlia Flaviviridae.


Gnero Vrus Hospedeiros Espcies animais Doena Localizao
naturais
Febre amarela Mosquitos Humanos Febre, calafrios, frica, Amrica
cansao, dor de do Sul e Central
cabea, dor muscular
Vrus da Mosquitos Ovinos, Abortos, hepatite, frica
doena de humanos, hemorragias,
Wesselsbron bovinos, malformaes
caprinos, sunos, congnitas
equinos mulas,
coelhos, ces e
aves silvestres.
Vrus do oeste Mosquitos Pssaros, Encefalite, doena frica, Europa,
Flavivirus

do Nilo humanos, febril EUA, Mxico,


equinos e aves. Amrica Central
Vrus da Mosquitos Aves aquticas, Encefalite (nascimento sia
encefalite equinos, sunos de leites fracos)
japonesa aborto e mortalidade
neonatal
Vrus da Carrapatos Ovinos, humanos, Encefalite Esccia, Irlanda
encefalomielite (Ixodes bovinos, sunos, do Norte
ovina (mal-do- ricinus) equinos e
pulo) cervdeos.
Vrus meningo- Mosquitos Perus Encefalite Israel e frica do
encefalite dos Sul.
perus de Israel
Vrus da - Bovinos,ovinos e Infeco inaparente, Ocorrncia
diarreia bovina sunos, diarreia bovina mundial
tipo 1 e 2
Vrus da - Ovinos Aborto e Ocorrncia
Pestivirus

doena da anormalidades mundial


fronteira congnitas
Vrus da peste - Sunos Alta mortalidade, Amrica do norte,
suna clssica infeco Austrlia, Pases
generalizada, sinais Europeus
nervosos, aborto
Fonte: Adaptado de Flores (2012) e Quinn (2005)

26 Famlias virais de importncia em medicina veterinria


U2

Estrutura viral

Os agentes virais pertencentes famlia Flaviviridae so esfricos (40-60 nm de


dimetro), envelopados (com duas ou trs protenas virais inseridas) e possuem o
nucleocapsdeo icosadrico. O genoma consiste em uma molcula de RNA de fita
simples e de polaridade positiva e a molcula de RNA apresenta duas regies no-
traduzidas nas extremidades 5 e 3. Neste processo no ocorre a sntese de RNAs
subgenmicos. As protenas estruturais so codificadas prximo extremidade 5
e as protenas no-estruturais so codificadas prximo extremidade 3.

Reflita

Para assegurar a inexistncia de possveis agentes patognicos em uma


determinada rea, propriedade ou instalao, deve-se proceder um
perodo de vazio sanitrio, no qual no poder haver animais!

Ciclo replicativo

No processo inicial de adsoro, ocorre a interao entre as protenas do


envelope viral e as protenas da membrana plasmtica da clula hospedeira. Em
seguida, inicia-se o processo de penetrao, o qual ocorre pelo mecanismo
de endocitose. Em fases subsequentes ocorrer a fuso entre o envelope e a
membrana endossomal, sob um meio de pH cido, o que auxiliar a dissociao
entre o capsdeo e o genoma, que liberado no citoplasma. O RNA genmico de
polaridade positiva ser traduzido diretamente no ribossomo, dando origem a uma
protena que ser clivada em outras protenas, as quais daro origem s protenas
estruturais e no-estruturais. As protenas no-estruturais auxiliaro na clivagem
de protenas que atuaro na replicao do genoma. No processo de replicao,
ser sintetizada uma molcula de RNA de sentido antigenmico, de polaridade
negativa. Esta molcula servir de molde para a sntese de RNAs de polaridade
positiva, que sero utilizados para novas etapas de traduo ou, em seguida, sero
encapsidados (etapa denominada de morfognese). A morfognese ocorrer na
regio perinuclear do citoplasma, em conjunto com as membranas do complexo
de Golgi e do retculo endoplasmtico. Em seguida, as partculas so lanadas no
citoplasma na forma de vacolos. A liberao da partcula vrica varia conforme o
vrus e a clula hospedeira, a qual pode no comprometer a integridade da clula
(a liberao ocorre na forma no-citoptica ou at a lise e destruio da clula).

Famlia Retroviridae

Os agentes virais pertencentes famlia Retroviridae esto inclusos em


duas subfamlias: Orthoretrovirinae (gneros: Alpharetrovirus, Betaretrovirus,
Gamaretrovirus, Deltaretrovirus, Epsilonretrovirus e Lentivirus) e Spumaretrovirinae

Famlias virais de importncia em medicina veterinria 27


U2

(gnero: Spumavirus). Os principais agentes virais de importncia veterinria esto


classificados nas subfamlias Orthoretrovirinae e Spumaretrovirinae.

Quadro 2.6 | Principais agentes virais pertencentes a famlia Retroviridae.


Subfamlia Gnero Vrus Espcies animais Doena
Alpharetrovirus Vrus da Leucose Frangos, faises, As aves com barbela plida,
aviria perdizes, fracas, magras e bursa de
codornas Fabricius aumentada.
Betaretrovirus Retrovrus ovino Ovinos Doena pulmonar neoplsica.
Jaagsiekte
Gammaretrovirus Vrus da leucemia Gatos Doena crnica,
felina imunossupresso, enterite e
neoplasia.
Deltaretrovirus Vrus da Leucose Bovinos Desenvolve linfosarcoma.
Orthoretrovirinae

bovina
Lentivirus Vrus da Bovinos Ampla distribuio,
imunodeficincia patogenicidade incerta.
bovina
Vrus da anemia Equinos Episdios febris recorrentes.
infecciosa equina
Vrus da Gatos Infeco duradora, viremia
imunodeficincia persistente.
felina
Vrus da artrite- Caprinos Infeco duradora, associado
encefalite caprina poliartrite e mastite
Vrus Maedi/Visna Ovinos Doena respiratria
dos ovinos progressiva, doena
neurolgica progressiva.
Fonte: Adaptado de Flores (2012) e Quinn (2005).

Estrutura viral

Os retrovrus so esfricos, possuem dimetro que varia entre 80 e 120 nm,


possuem duas molculas de RNA de fita simples (denominadas de diploides), as quais
so de polaridade negativa. So os nicos vrus, que acometem animais, com duas
molculas de RNA. O ncleo (core) formado pelo genoma e protenas (proteases
e integrases). O nucleocapsdeo (core + capsdeo) recoberto por uma camada
formada a partir de cpias da protena matriz, sendo que a protena matriz revestida
por um envelope lipoproteico, contendo duas glicoprotenas virais (transmembrana
e de superfcie). O genoma RNA possui trs genes principais (gag, pol e env) que
auxiliam na codificao de protenas, enzimas e protenas do envelope.

Assimile

A transmisso horizontal de agentes patognicos proporcionada


pelo contato entre indivduos decorrente do contato e convivncia
entre os animais.

28 Famlias virais de importncia em medicina veterinria


U2

A transmisso iatrognica de agentes patognicos ocorre durante


procedimentos mdicos.

A transmisso vertical de agentes patognicos ocorre dos progenitores


(pais) para a prognie (filhos).

Ciclo replicativo

O processo inicial de adsoro mediado por receptores especficos de


cada agente viral pertencente famlia Retroviridae. As clulas-alvo infectam,
principalmente, as clulas do sistema imunolgico (moncitos, macrfagos e/ou
linfcitos). O processo de fuso do envelope viral com a membrana plasmtica
auxiliado por protena transmembrana, que no dependente da reduo do pH, e
tal situao ocorre na superfcie da clula. Aps penetrao, o genoma liberado
no citoplasma (processo denominado de desnudamento) para que seja sintetizado
o DNA provrus (mecanismo denominado de transcrio reversa). Sintetizado o
DNA provrus (fita dupla), o mesmo se desloca at o interior do ncleo, onde
inserido no cromossomo celular com auxlio da enzima integrase. Nesta etapa,
ocorre a incorporao definitiva de uma cpia do genoma viral no cromossomo
do hospedeiro (etapa essencial para prosseguir com a replicao viral). Aps
integrao, o DNA provrus transcrito em RNAs mensageiros (RNA mensageiro
subgenmico e RNA mensageiro com extenso total do genoma), com auxlio da
enzima RNA polimerase II e fatores de transcrio celular. Os RNAs subgenmicos
so exportados para o citoplasma para serem traduzidos em protenas do
envelope, enquanto que os RNAs mensageiros de extenso total do genoma
sero traduzidos em protenas gag (group antigen) e pol (polimerase), utilizadas
para sntese de outras protenas, que sero encapsidadas nos nucleocapsdeos.
Na morfognese, o genoma e enzimas virais sero encapsidados juntamente com
as protenas estruturais. A morfognese ser completada na fase de brotamento
do nucleocapsdeo com a membrana plasmtica. Em outras situaes, os
nucleocapsdeos so inicialmente montados no citoplasma e deslocados at a
membrana plasmtica, interagindo com a protena da matriz e com as caudas das
glicoprotenas, resultando no brotamento e egresso da partcula vrica.

Pesquise mais
Pesquise mais! Leia o artigo sobre Prevalncia da infeco pelo vrus da
Leucose dos bovinos em animais da raa Simental, criados no estado
de So Paulo. Acesse o link. Disponvel em: <http://arsveterinaria.org.
br/index.php/ars/article/view/90/79>. Acesso: 20 maio 2016.

Famlias virais de importncia em medicina veterinria 29


U2

Famlia Coronaviridae

A famlia Coronaviridae constituda por dois gneros: Coronavirus e Torovirus.


O gnero Coronavirus subdividido em trs grupos (I, II e III), de acordo com a sua
reatividade sorolgica, enquanto que o gnero Torovirus no possui diviso por
grupo antignico. Os agentes virais pertencentes ao gnero Coronavirus causam
importantes doenas vricas em animais domsticos, como a peritonite infecciosa
dos felinos, a bronquite infecciosa das galinhas e a gastroenterite transmissvel dos
sunos. No gnero Torovirus, apenas dois agentes virais esto classificados, sendo
o vrus Breda que infecta bovinos e o vrus Berne que infecta equinos.

Quadro 2.7 | Principais agentes virais pertencentes famlia Coronaviridae.


Gnero Grupo Vrus Hospedeiro Doena
I Gastroenterite Sunos Gastroenterite
transmissvel viral (TGEV)
Coronavirus Respiratrio Sunos Respiratria, subclnica
Suno (PRCoV)
Diarreia epidmica suna Sunos Gastroenterite
(PEDV)
Peritonite infecciosa Gatos Peritonite
felina (FIPV)
Coronavirus felino (FCoV) Gatos Enterite, assintomtica
Coronavirus canino Ces Enterite
Coronavirus

(CCoV)
II Coronavirus humano Humanos Resfriado comum
(HCoV-229E)
Coronavirus bovino Bovino Gastroenterite
(BCoV)
Coronavirus dos perus Perus Enterite
(TCoV)
Coronavirus da hepatite Camundongos Hepatite
do camundongo (MHV)
Coronavirus humano Humanos Resfriado comum
(HCoV-OC43)
III Bronquite infecciosa das Galinhas Traqueobronquite,
galinhas (IBV) nefrite
- Torovirus bovino (BToV) Bovino Subclnica
Vrus Breda (BRV) Bovino Gastroenterite
Torovirus

Torovirus equinos (EToV) Equinos Subclnica


Vrus Berne (BEV) Equinos Gastroenterite
Torovirus humano (HToV) Humanos Gastroenterite
Torovirus suno (PToV) Sunos Subclnica
Fonte: Adaptado de Flores (2012) e Quinn (2005).

30 Famlias virais de importncia em medicina veterinria


U2

Estrutura viral

Os agentes virais pertencentes famlia Coronaviridae so envelopados,


pleomrficos e seu dimetro varia entre 80 e 120 nm. As protenas S presentes
na superfcie, conferem partcula vrica uma aparncia similar a um coroa, e tm
como funo auxiliar na ligao do vrion aos receptores celulares para que ocorra
fuso do envelope e da membrana celular. No envelope est presente a protena
M, que interage com o nucleocapsdeo, auxiliando na morfognese e brotamento
dos vrions. Possui a protena hemaglutinina-esterase (HE) que auxilia na clivagem
do cido silico e na patogenicidade dos vrus em animais. Seu genoma
constitudo por uma molcula de RNA de cadeia simples e polaridade positiva. O
RNA genmico possui cap na extremidade 5, e a extremidade 3 poliadenilada,
sendo que as protenas no-estruturais sero codificadas prximo extremidade 5
e as protenas estruturais prximo extremidade 3.

Vocabulrio

Hospedeiro: espcie animal que abriga e permite a multiplicao de


um agente biolgico.

Hospedeiro natural ou reservatrio: espcie animal na qual um


determinado agente mantido na natureza.

Vetor biolgico: inseto que participa biologicamente da transmisso


de um agente infeccioso (desenvolve alguma fase do seu ciclo no
organismo do vetor para posterior transmisso).

Ciclo replicativo

Na etapa de adsoro, a glicoprotena S presente no envelope viral auxiliar


na ligao dos receptores da membrana celular. Porm, alguns agentes virais
pertencentes famlia Coronaviridae utilizam a aminopeptidase N (metaloprotease)
como receptor. Em seguida, a penetrao pode ocorrer pelo mecanismo de
endocitose ou pela fuso do envelope com a membrana da vescula endoctica,
sob um meio de pH cido. Logo aps a penetrao, inicia-se o processo de
desnudamento para liberao do genoma no citoplasma. No citoplasma, o gene
1, presente no genoma, traduzido em uma poliprotena que ser utilizada para
sntese de enzimas, como a replicase viral, envolvida com a replicao da molcula
de RNA. A enzima polimerase viral utiliza o RNA genmico para sntese de uma
cpia de RNA de sentido negativo, a qual ser utilizada como molde para sntese
de RNA de extenso genmica e cpias de RNA mensageiros subgenmicos.
O RNA de extenso genmica ser utilizado na nova partcula vrica, e os RNAs
subgenmicos sero utilizados para a sntese de protenas estruturais e no-

Famlias virais de importncia em medicina veterinria 31


U2

estruturais. Em seguida, as protenas sero processadas e utilizadas nas fases


subsequentes do processo de replicao. De modo geral, a replicao do RNA
genmico ocorre de forma contnua, com auxlio de um RNA de polaridade
negativa, entretanto, em alguns casos, a sntese do RNA genmico tem ocorrido
de forma descontnua, com o auxlio de uma sequncia lder. O processo de
morfognese inicia-se com a associao de protenas N e genoma viral para a
formao do nucleocapsdeo. O nucleocapsdeo ir interagir com a protena M nas
membranas do retculo endoplasmtico e no complexo de Golgi, constituindo um
novo envoltrio (outras protenas participaram do processo E e M). Em seguida, o
vrion se desloca at a membrana plasmtica e, por exocitose, ocorre o egresso da
partcula vrica para o meio extracelular.

Faa voc mesmo

Agora, faa voc mesmo! Pesquise mais sobre as doenas e os sinais


clnicos da famlia: Togaviridae, Flaviviridae, Retroviridae e Coronaviridae.
Utilize o material de apoio: QUINN, P. J. Microbiologia veterinria e
doenas infecciosas. Porto Alegre: Artmed, 2005. HIRSH, D. C; ZEE, Y.
C. Microbiologia veterinria. Rio de Janeiro: EGK, 2003.

Sem medo de errar

Mediante os contedos abordados nesta seo, vamos resolver as questes da


situao-problema. Vamos l!

Para compreender melhor a situao apresentada, vamos recapitular os


principais pontos da situao-problema. Conforme o laudo tcnico, as amostras
biolgicas pertenciam a um gato jovem, com aproximadamente 2 anos de idade,
sendo que a doena provocou o bito do animal. O mdico veterinrio indicou
a suspeita de um agente viral, com base no histrico de persistncia da doena,
sinais clnicos e achados da necropsia. O tcnico procedeu com a anlise dos
materiais biolgicos, utilizando a tcnica de PCR em tempo real, com intuito de
detectar e identificar o agente viral para proceder uma resoluo do caso clnico.

Mediante as informaes apresentadas e com auxlio dos contedos abordados


nesta seo, vamos responder s questes do caso clnico.

Qual o possvel agente patolgico suspeito que acometeu o gato?

O agente patolgico suspeito o vrus da Peritonite infecciosa felina.

Classifique o agente patolgico em famlia, subfamlia, gnero, espcie e


sorotipo.

32 Famlias virais de importncia em medicina veterinria


U2

O agente patolgico suspeito pertence famlia Coronaviridae; gnero


Coronavirus; Grupo I e espcie Vrus da Peritonite Infecciosa Felina.

Descreva a estrutura viral dos vrus pertencentes famlia do agente viral


que acometeu o gato.

O agente virial pertence famlia Coronaviridae envelopado, pleomrfico e


possui um dimetro que varia entre 80 e 120 nm. Em sua superfcie est presente a
protena S, o que confere partcula vrica uma aparncia similar a um coroa, que
tem como funo auxiliar na ligao do vrion aos receptores celulares para que
ocorra fuso do envelope e da membrana celular. O envelope contm a protena
M, que interage com o nucleocapsdeo, auxiliando na morfognese e brotamento
dos vrions. Possui a protena hemaglutinina-esterase (HE) que auxilia na clivagem
do cido silico e na patogenicidade dos vrus em animais. Seu genoma
constitudo por uma molcula de RNA de cadeia simples e polaridade positiva. O
RNA genmico possui cap na extremidade 5, e a extremidade 3 poliadenilada,
sendo que as protenas no-estruturais sero codificadas prximo extremidade 5
e as protenas estruturais prximo extremidade 3.

Avanando na prtica

Leucose Enzotica Bovina

Recentemente, o mdico veterinrio da cooperativa foi solicitado para fazer


um atendimento clnico em uma propriedade leiteira. O proprietrio relatou que
duas vacas, com aproximadamente 5 anos de idade, apresentavam perda peso,
reduo do consumo e debilidade generalizada, sendo necessrio, inclusive,
retirar as vacas de sua linha de produo. Durante o exame clnico, o veterinrio
constatou que os animais apresentavam sintomas de fraqueza, anorexia, aumento
dos linfonodos superficiais (suspeita de massa tumoral) e ausncia de febre. Uma
das vacas apresentava exoftalmia unilateral. Em seguida, o veterinrio procedeu
com a coleta de sangue e material biolgico coletado na regio ocular para bipsia,
encaminhando-a para anlise. As amostras foram identificadas individualmente,
acondicionadas em recipientes apropriados e encaminhadas para anlise
laboratorial. Com base nos achados clnicos, o mdico veterinrio suspeitou de
um agente viral. Desta forma, solicitou um exame para deteco de agente viral.

Descrio da situao-problema

Em continuidade com o relato de caso, o tcnico laboratorial recebeu o


material biolgico com um laudo tcnico emitido pelo veterinrio. De acordo
com o laudo tcnico, os achados clnicos (aumento dos linfonodos, suspeita
de massa tumoral e exoftalmia unilateral) indicam a suspeita de um agente viral

Famlias virais de importncia em medicina veterinria 33


U2

pertencente famlia Retroviridae. Com base nas informaes e no tipo de material


biolgico, o tcnico laboratorial elegeu o mtodo de diagnstico ELISA, direto
para a deteco do agente viral. Os exames evidenciaram resultado positivo para o
vrus da Leucose Enzotica Bovina. Mediante as informaes apresentadas e com
auxlio dos contedos abordados nesta seo, responda seguinte questo para
compreender melhor o caso clnico.

Explique o ciclo replicativo dos agentes pertencentes famlia Retroviridae.

Resoluo da situao-problema

Explique o ciclo replicativo dos agentes pertencentes a famlia Retroviridae.

O ciclo replicativo inicia-se com o processo de adsoro, que mediado por


receptores especficos presentes em cada agente viral. As principais clulas-alvo
infectadas so as clulas do sistema imunolgico (moncitos, macrfagos e/ou
linfcitos). Em seguida, ocorre o processo de fuso entre o envelope viral e a
membrana plasmtica, tal processo auxiliado por uma protena transmembrana,
que no dependente da reduo do pH. Aps penetrao, o genoma liberado
no citoplasma (processo denominado de desnudamento) para que seja sintetizado
o DNA provrus (mecanismo denominado de transcrio reversa). Sintetizado o
DNA provrus (fita dupla), o mesmo desloca-se at o interior do ncleo, onde
inserido no cromossomo celular, com auxlio da enzima integrase. Nesta etapa,
ocorre a incorporao definitiva de uma cpia do genoma viral no cromossomo
do hospedeiro (etapa essencial para prosseguir com a replicao viral). Aps
integrao, o DNA provrus transcrito em RNAs mensageiros (RNA mensageiro
subgenmico e RNA mensageiro com extenso total do genoma), com auxlio da
enzima RNA polimerase II e fatores de transcrio celular. Os RNAs subgenmicos
so exportados para o citoplasma para serem traduzidos em protenas do envelope,
enquanto que os RNAs mensageiros de extenso total do genoma sero traduzidos
em protenas gag (group antigen) e pol (polimerase), utilizadas para sntese de
outras protenas, que tambm podero ser encapsidadas nos nucleocapsdeos.
Na morfognese, o genoma e enzimas virais sero encapsidados juntamente com
as protenas estruturais. A morfognese ser completada na fase de brotamento
do nucleocapsdeo com a membrana plasmtica. Em outras situaes, os
nucleocapsdeos so inicialmente montados no citoplasma e deslocados at a
membrana plasmtica, interagindo com a protena da matriz e com as caudas das
glicoprotenas, resultando no brotamento e egresso da partcula vrica.

34 Famlias virais de importncia em medicina veterinria


U2

Faa valer a pena!

1. A famlia Togaviridae contm, aproximadamente, trinta


espcies virais distribudas em dois gneros, denominados de
____________ e ____________. Os agentes virais pertencentes ao
gnero ____________ abrigam vrios patgenos que acometem
____________ e animais, os quais so transmitidos principalmente
por vetores _________________.
Assinale a alternativa correta que completa as lacunas.
a) Alfavirus, Rubivirus, Alfavirus, humanos, artrpodes.
b) Rubivirus, Alfavirus, Rubivirus, artrpodes, humanos.
c) Flavivirus, Pestivirus, Flavivirus, humanos, artrpodes.
d) Pestivirus, Flavivirus, Pestivirus, artrpodes, humanos.
e) Hepacivirus, Pestivirus, Hepacivirus, humanos, artrpodes.

2. Diversas doenas em animais domsticos (aves e equinos) e


silvestres (aves e mamferos) tm sido associadas com os agentes virais
pertencentes famlia Togaviridae. Com relao aos agentes virais
pertencentes famlia Togaviridae correto afirmar:
I. Os vrus no so envelopados e possuem conformidade esfrica ou
pleomrficos.
II. O seu genoma constitudo por uma molcula de DNA de fita
simples.
III. O RNA linear e de polaridade positiva.
IV. Na organizao estrutural do genoma, a extremidade 5 possui uma
estrutura cap e a extremidade 3 poliadenilada.
V. Sequncias no-traduzidas so encontradas nas extremidades
do genoma, as quais so utilizadas para transcrio e replicao do
genoma.
Assinale a afirmativa correta.
a) Apenas as afirmativas I, II e V esto corretas.
b) Apenas as afirmativas II, III e IV esto corretas.
c) Apenas as afirmativas IV e V esto corretas.
d) Apenas as afirmativas III, IV e V esto corretas.
e) Apenas as afirmativas II, III e V esto corretas.

Famlias virais de importncia em medicina veterinria 35


U2

3. No ciclo replicativo dos agentes virais pertencentes famlia


Togaviridae, o processo de penetrao ocorre com auxlio de
receptores denominados de E1 e/ou E2, seguido de internalizao
das partculas vricas, sendo que todo o processo mediado pelo
mecanismo de endocitose. Em seguida, ocorre a fuso do envelope
viral com a membrana dos endossomos, em meio de pH baixo (5 a
6). Em funo do processo de fuso ocorrer em pH baixo, estes vrus
acabam sendo classificados como:
Assinale a alternativa correta.
a) Vrus RNA de polaridade negativa.
b) Vrus de pH-dependentes.
c) Vrus DNA de polaridade positiva.
d) Vrus RNA de polaridade positiva.
e) Vrus DNA de polaridade negativa.

36 Famlias virais de importncia em medicina veterinria


U2

Seo 2.3

Classificao viral III

Dilogo aberto

Ol, aluno! Seja bem-vindo mais uma seo de estudos deste livro didtico!

Nesta seo, estudaremos as estruturas biolgicas, o ciclo replicativo e


conheceremos as principais doenas causadas pelos agentes pertencentes s
famlias: Herpesviridae, Adenoviridae, Papillomaviridae, Poxviridae e Parvoviridae.
Para auxiliar na compreenso dos contedos abordados, vamos acrescentar novas
informaes situao-problema apresentada no Convite ao estudo, dessa
forma, voc participar indiretamente da resoluo do caso.

Recentemente, o Laboratrio de anlises clnicas do Hospital Veterinrio


recebeu amostras para diagnstico laboratorial. O mdico veterinrio encaminhou
um laudo tcnico anexo s amostras, contendo informaes detalhadas do
atendimento clnico e indicando a suspeita de um agente viral. De acordo com o
laudo tcnico, as amostras foram coletadas de um equino com aproximadamente
3,5 anos de idade. Na anamnese, o proprietrio relatou que o animal se recusava
a cobrir as guas. Em seguida, o veterinrio realizou o exame clnico da genitlia
do cavalo, constatando a presena de ppulas vermelhas, vesculas e incio de
formao de lcera. Mediante as informaes levantadas, o profissional suspeitou
que o animal estava sendo acometido por um agente viral. Em seguida, o veterinrio
coletou amostras na genitlia do animal. De acordo com o tcnico laboratorial, as
amostras recebidas continham material biolgico da genitlia do animal. Mediante
as informaes apresentadas e com auxlio dos contedos abordados nesta seo,
responda s questes para a resoluo do caso clnico.

Qual o possvel agente patolgico?

Classifique o agente patolgico em famlia, subfamlia, gnero, espcie e


sorotipo.

Descreva a estrutura do agente viral.

Famlias virais de importncia em medicina veterinria 37


U2

No pode faltar

Ol aluno! Nesta seo abordaremos os mtodos diretos de diagnstico


envolvendo a deteco de antgenos e cidos nuclicos dos agentes virais. Vamos
iniciar os estudos!

Famlia Herpesviridae

A famlia Herpesviridae possui trs subfamlias: Alphaherpesvirinae, Betaherpesvirinae


e Gammaherpesvirinae. Os agentes virais de importncia veterinria esto
classificados nas subfamlias Alphaherpesvirinae e Gammaherpesvirinae. A subfamlia
Alphaherpesvirinae possui quatro gneros, Varicellovirus, Simplexvirus, Mardivirus e
Iltovirus, enquanto que os agentes virais pertencentes subfamlia Gammaherpesvirinae
no so classificados em gnero, assim, o Herpesvirus ovino tipo 1 (OvHV-1) e o
Herpesvirus suno tipo 2 (SuHV-2) no possuem subfamlia ou gnero.

Quadro 2.8 | Principais agentes virais pertencentes famlia Herpesviridae.


Subfamlia Gnero Vrus Doena
Varicellovirus Herpesvirus bovino tipo 1 Rinotraqueite infecciosa bovina/
(BoHV-1) vulvovaginite pustular infecciosa/
balanopostite pustular infecciosa,
abortos.
Simplexvirus Herpesvirus bovino tipo 2 Mamilite herptica bovina
(BoHV-2)
Herpesvirus bovino tipo 5 Encefalite herptica bovina
(BoHV-5)
Herpesvirus canino tipo 1 Infeco herptica em ces
(CaHV-1)
Herpesvirus caprino tipo Infeco herptica em caprinos
Alphaherpesvirinae

1 (CpHV-1)
Herpesvirus equino tipo Aborto herptico equino
1 (EHV-1)
Herpesvirus equino tipo Exantema coital equino
3 (EHV-3)
Herpesvirus equino tipo Rinopneumonite viral equina
4 (EHV-4)
Herpesvirus felino tipo 1 Rinotraqueite viral dos felinos
(FeHV-1)
Herpesvirus suno tipo 1 Doena de Aujeszky ou pseudoraiva
(SuHV-1)
Mardivirus Herpesvirus galideo tipo Doena de Marek
2 (GaHV-2)
Iltovirus Herpesvirus galideo tipo Doena de Marek
3 (GaHV-3)
(continua)

38 Famlias virais de importncia em medicina veterinria


U2

Herpesvirus galideo tipo 1 Laringotraqueite viral infecciosa


(GaHV-1)
Herpesvirus alcelaphine Febre catarral maligna
Gammaherpesvirinae

tipo 1 (AlHV-1)
Herpesvirus bovino tipo 4 Sinais respiratrios, abortos
(BoHV-4)
Herpesvirus ovino tipo 2 Febre catarral maligna associada a
(OvHV-2) ovinos
Herpesvirus ovino tipo 1 Adenomatose pulmonar associada a
(OvHV-1) Herpesvirus
Herpesvirus suno tipo 2 Citomegalovrus de sunos
(SuHV-2)
Fonte: Adaptado de Flores (2012) e Quinn (2005).

Estrutura viral

Os agentes virais pertencentes famlia Herpesviridae so envelopados, possuem


simetria icosadrica, com dimetro variando entre 120 e 300 nm. O genoma
constitudo por uma molcula de DNA linear de fita dupla e sua replicao ocorre no
ncleo da clula hospedeira. Os genes so transcritos, com o auxlio da maquinaria
celular (RNA polimerase e fatores de transcrio), em RNAs mensageiros, os quais
possuem cap na extremidade 5 e tm a extremidade 3 poliadenilada.

Assimile

O genoma das famlias Herpesviridae, Adenoviridae, Papillomaviridae,


Poxviridae e Parvoviridae so constitudos pelo cido
desoxirribonucleico.

Ciclo replicativo

O ciclo replicativo da subfamlia Alphaherpesvirinae pode ocorrer como uma


infeco aguda ou produtiva, e como uma infeco latente. Inicialmente, no
processo de adsoro ocorre uma interao entre glicoprotenas C e D, presentes
na partcula vrica, e as molculas de glicosaminoglicanos (sulfato de heparina),
presentes na membrana celular da clula hospedeira. Em seguida, ocorre a fuso do
envelope com a membrana plasmtica (evento que ocorre na superfcie celular), sem
internalizao por endocitose ou acidificao dos endossomos. Posterior fuso,
algumas protenas do tegumento se dissociam do nucleocapsdeo no citoplasma
e outras se deslocam at o ncleo celular. Prximo ao ncleo, o nucleocapsdeo
associa-se aos poros nucleares para liberao do genoma no interior do ncleo.
Logo em seguida, a transcrio do genoma inicia-se com auxlio da DNA polimerase
II e de fatores celulares e virais. A transcrio ocorre de forma sequencial, produzindo
primeiramente os genes alfa (transcrio imediata), seguidos dos genes beta (iniciais)

Famlias virais de importncia em medicina veterinria 39


U2

e gama (tardios). Os produtos dos genes alfa produziro protenas ICPO, ICP4, ICP22,
ICP27 e ICP47; a partir dos genes beta incluem-se as enzimas timidina quinase,
ribonucleotdeo redutase, protenas de ligao ao DNA, helicase e DNA polimerase
viral. Os genes tardios produziro as protenas estruturais do ncleo: capsdeo e
envelope. A replicao do genoma dependente de protenas codificadas, fatores
celulares, DNA polimerase, DNA ligase e topoisomerase II. Inicialmente, uma molcula
de DNA sintetizada na forma circularizada, posteriormente, ocorre uma replicao
bidirecional e, por fim, ocorre a alterao para um mecanismo de crculo rolante.
Aps a sntese das protenas estruturais (protenas tardias), o processo de montagem
do nucleocapsdeo inicia-se no citoplasma e finalizado no ncleo. As protenas
estruturais so transportadas para o interior do ncleo, onde ocorre a montagem do
capsdeo com o DNA genmico no seu interior. Aps o encapsidamento do genoma,
ocorre o processo de brotamento na membrana nuclear interna, com auxlio de
protenas do tegumento e glicoprotenas virais. Esse processo descrito de duas
formas: na primeira forma, o nucleocapsdeo pode adquirir o envelope por brotamento,
por meio da membrana nuclear interna, e, em seguida, perde a membrana, liberando
o capsdeo para o citoplasma; na segunda forma, o nucleocapsdeo encaminhado
diretamente para ao complexo de Golgi, onde ir adquirir o envelope. Por fim, as
partculas vricas sero transportadas em vesculas at a superfcie celular, na qual
ocorre o egresso por exocitose para o meio extracelular.

Famlia Adenoviridae

A famlia Adenoviridae composta por quatro gneros, Mastadenovirus,


Avianadenovirus, Atadenovirus e Siadenovirus, abrangendo uma gama de agentes
virais que podem acometer animais e seres humanos. Os agentes virais da famlia
Adenoviridae so classificados pela organizao genmica e pela similaridade do
gene que codifica a protena hexon dos vrions.

Quadro 2.9 | Principais agentes virais de interesse veterinrio pertencentes famlia


Adenoviridae.
Gnero Vrus Hospedeiro Doena
Mastadenovirus Adenovrus bovino (BAdV-A, Bovinos Infeco subclnica ou doena respiratria
BAdV-B e BAdV-C) leve
Adenovrus canino (CAdV-1 Ces CAdV-1: Hepatite infecciosa; CAdV-2:
e CAdV-2) Traqueobronquite infecciosa (tosse dos canis)
Adenovrus equino (EAdV-A Equinos Infeco subclnica ou doena respiratria
e EAdV-B) leve. Broncopneumonia e doena
generalizada com imunodeficincia
Adenovrus ovino (OAdV-A, Ovinos Infeco subclnica ou doena respiratria
OAdV-B e OAdV-C) leve
Adenovrus suno (PAdV-A, Sunos Infeco subclnica ou doena respiratria
PAdV-B e PAdV-C) leve
Adenovrus caprino Caprinos Infeco subclnica ou doena respiratria
(GAdV-A) leve
(continua)

40 Famlias virais de importncia em medicina veterinria


U2

Avianadenovirus Adenovrus avirio (FAdV-A, Galinhas Hepatite, doena respiratria


FAdV-B, FAdV-C, FAdV-D e
FAdV-E)
Adenovrus de Gansos Gansos Isolado de fgado e intestino
(GoAdV)
Atadenovirus Adenovrus bovino Bovinos Infeco assintomtica ou doena
(BAdV-D e BAdV-E) respiratria
Adenovrus de patos A Galinhas Hepatite em patos e sndrome da queda
(DAdV-A) DAdV-A de postura
Adenovrus ovino D Ovinos Infeco assintomtica ou doena OAV-D
(OAV-D) respiratria leve
Siadenovirus Adenovrus de perus A Faises Enterite hemorrgica em perus e TAdV-A
(TAdV-A) pancreatite
Fonte: Adaptado de Flores (2012) e Quinn (2005).

Estrutura viral

Os agentes virais pertencentes famlia Herpesviridae no possuem envelope,


so hexagonais e icosadricos, com dimetro aproximado de 80 nm. Possuem um
prolongamento proteico na superfcie do capsdeo, o qual denominado de fibra. Seu
genoma constitudo por uma molcula de DNA linear de fita dupla e sua replicao
ocorre no ncleo da clula hospedeira. O genoma possui 11 regies (cinco iniciais,
duas intermedirias e uma tardia) de transcrio, as quais codificaram protenas no-
estruturais (iniciais) e estruturais (tardias).

Reflita

No manejo sanitrio, a vacinao dos animais um dos principais


procedimentos para propiciar proteo contra agentes patognicos. As
vacinaes devem fazer parte de um programa de manejo sanitrio, de
acordo com o cronograma para atender s necessidades do rebanho.

Ciclo replicativo

No processo inicial de adsoro, as fibras de pentons ligam-se com os receptores


especficos presentes na membrana celular (integrinas). Diferentes receptores esto
presentes na membrana celular, os quais podem ser denominados de adenovrus
Coxsackie (CAR) e vitronectina. Em seguida, a partcula vrica internalizada por
endocitose, mediada pela protena clatrina. A vescula com a partcula vrica deslocada
at o ncleo, sendo que no decorrer do percurso o meio intravesicular acidificado.
O processo de acidificao auxiliar na desintegrao do capsdeo e liberao dos
demais componentes. Prximo dos poros presentes na membrana do ncleo, o
genoma transferido para o interior nuclear. Com auxlio da enzima RNA polimerase
II e fatores celulares, inicia-se o processo de transcrio. Na transcrio de genes, de

Famlias virais de importncia em medicina veterinria 41


U2

acordo com a regio do genoma, sero produzidos produtos que controlam o ciclo
celular para estabelecer um ambiente favorvel (regio E1A), produtos envolvidos na
replicao do DNA viral (regio E2) e fatores de virulncia (regio E3). A replicao do
DNA ocorre de forma contnua e em duas etapas: na primeira etapa, uma das cadeias
replicada em uma molcula de fita dupla, enquanto a outra cadeia circularizada;
na segunda etapa, a cadeia circularizada linearizada e o processo de replicao
finalizado quando as duas cadeias de DNA so replicadas. Finalizada a replicao do
DNA e a transcrio dos genes inicias e intermedirios, a expresso gnica passa a
transcrever os genes tardios no ribossomo, os quais produziro as protenas estruturais
que sero transferidas para o ncleo onde ocorrer a montagem da partcula vrica. Em
seguida, ocorrer o acmulo das partculas vricas no interior do ncleo e o egresso
ocorrer por lise celular, aps a morte celular.

Famlia Papillomaviridae

A famlia Papillomaviridae foi originada a partir do desmembramento da


famlia Papovaviridae, cujo nome derivado das iniciais de seus trs membros:
Papillomavirus, Polyomavirus e Simian Vacuolating Agent SV40. Essa separao
ocorreu no ano 2000 e foi feita pelo Comit Internacional para Taxonomia de
Vrus. A famlia Papillomaviridae caracterizada pela presena de leses tumorais
benignas e malignas nos epitlios cutneos e mucosos. Com base nas propriedades
filogenticas, a famlia Papillomaviridae composta por dezesseis gneros. Os
papilomavrus tm sido descritos em diferentes espcies animais, como aves,
animais domsticos e silvestres, alm de acometerem os seres humanos.

Quadro 2.10 | Principais agentes virais de interesse veterinrio pertencentes famlia


Papillomaviridae.
Gnero Espcie Patologia
Deltapapillomavirus Papilomavirus do alce europeu; Leses fibropapilomatosas em
Papilomavirus do cervo; Papilomavirus ungulados
ovino 1; Papilomavirus bovino 1 e 2
Epsilonpapillomavirus Papilomavirus bovino 5 Leses cutneas em bovinos,
fibropapilomas nos tetos (gros de
arroz)
Zetapapillomavirus Papilomavirus equino 1 Leses cutneas em equinos
Etapapillomavirus Papilomavirus do Chaffinch Leses cutneas em aves
Thetapapillomavirus Papilomavirus dos papagaios Leses cutneas em aves
Kappapapillomavirus Papilomavirus dos coelhos cauda-de- Leses cutneas e de mucosas em
algodo; Papilomavirus oral dos coelhos coelhos
Lambdapapillomavirus Papilomavirus oral canino; Papilomavirus Papilomavirus animal que causa
felino leses cutneas e de mucosas
Xipapillomavirus Papilomavirus bovino 3 Papilomavirus que induz verdadeiros
papilomas no hospedeiro, causando
leses cutneas e de mucosas
Pipapillomavirus Papilomavirus oral dos hamsters Leses mucosas em hamsters
Fonte: Adaptado de Flores (2012) e Quinn (2005).

42 Famlias virais de importncia em medicina veterinria


U2

Estrutura viral

Os agentes virais pertencentes famlia Papillomaviridae no so constitudos


de envelope, so pequenos, possuem simetria icosadrica e com dimetro
aproximado entre 52 e 55 nm. O genoma complexo, constitudo por uma molcula
de DNA de fita dupla circular. No h diferenas na organizao genmica entre os
gneros pertencentes famlia Papillomaviridae.

Ciclo replicativo

O processo de adsoro mediado por uma molcula sem identidade


conhecida. Em seguida, a partcula vrica penetra por endocitose e se desloca at
o ncleo da clula hospedeira. Durante o processo de deslocamento, a partcula
vrica passa pelo processo de desnudamento e, em seguida, o genoma liberado e
introduzido no ncleo celular por meio dos poros presentes na membrana nuclear.
No ncleo, a expresso gnica ocorre aproximadamente aps quatro semanas. A
expresso gnica dos Papilomavirus complexa, em funo da participao de
vrios componentes e formas de transcrio. De modo geral, as oncoprotenas
virais interferem no ciclo celular, sendo que o genoma do papilomavrus
mantido nas clulas tumorais. A replicao viral ocorre de acordo com as fases
de diferenciao celular, assim, o DNA passa a ser replicado em conjunto com
o ciclo de diviso celular e a sntese de cpias do DNA viral torna-se constante e
descontrolada. O processo de morfognese e maturao ainda ocorre no ncleo
celular, as protenas tardias so expressas, ocorrendo a morfognese do capsdeo,
mesmo na ausncia do DNA viral. Com auxlio de uma protena codificada, a
queratina intracelular desestabilizada e as partculas vricas sero liberadas para o
meio extracelular.

Famlia Poxviridae

Os agentes virais pertencentes famlia Poxviridae esto inclusos em duas


subfamlias: Entomopoxvirinae, que infectam insetos, e Chordopoxvirinae, que
infectam animais vertebrados. A subfamlia Chordopoxvirinae contm oito
gneros: Orthopoxvirus, Capripoxvirus, Suipoxvirus, Leporipoxvirus, Avipoxvirus,
Molluscipoxvirus, Yatapoxvirus e Parapoxvirus.

Famlias virais de importncia em medicina veterinria 43


U2

Quadro 2.11 | Principais agentes virais de interesse veterinrio pertencentes famlia


Poxviridae.
Gnero Vrus Espcies Informaes
animais
Orthopoxvirus Vrus da vaccnia Bovinos, Causa infeces. Usado como vetor viral
sunos, coelhos recombinante para a vacina da raiva.
e equinos
Vrus da varola Roedores, Roedores so reservatrios. A infeco causa
bovina gatos e bovinos leses na pele e raras leses nos tetos em
bovinos.
Vrus da varola dos Camelos Provoca infeco sistmica com leses tpicas
camelos de pox. Infeo severa em camelos jovens.
Vrus Uasin Gishu Vrios, equinos Provoca leses de pele semelhantes s dos
papilomas.
Vrus da varola dos Esquilos, Presente no Oeste e Centro da frica.
macacos humanos e
macacos
Vrus da ectromelia Camundongos Presente na Europa.
Capripoxvirus Vrus da varola dos Ovinos Transmissvel para humanos. Provoca leses
ovinos proliferativas no focinho e lbios.
Vrus da varola dos Caprinos Transmissvel para humanos. Provoca leses
caprinos proliferativas no focinho e lbios.
Vrus da doena da Bovinos e Presente na frica e sia.
pele nodulosa bfalos
Suipoxvirus Vrus da varola dos Sunos Transmisso pelo piolho do suno. Provoca
sunos uma doena de pele moderada.
Avipoxvirus Vrus da varola Frangos e perus Transmitida por artrpodes. Provoca leses
(bouba) aviria na cabea e na membrana da mucosa oral.
Leporipoxvirus Vrus do mixoma Coelhos Provoca uma doena branda.
Molluscipoxvirus Vrus do molluscum Humanos Presente em todo mundo.
contagiosum
Yatapoxvirus Vrus yabapox e vrus Macacos e Presente no oeste da frica.
tanpox humanos
Parapoxvirus Vrus da Bovinos Provoca leses nos tetos de vacas leiteiras.
pseudovarola bovina Em humanos, causa ndulo do ordenhador.
Vrus da estomatite Bovinos Transmissvel para humanos. Provoca leses
papular bovina papulares no focinho e na cavidade oral.
Vrus orf (ectima Ovinos e Provoca leses proliferativas no focinho e
contagioso) Caprinos nos lbios.
Vrus Ausdik Camelos Presente na frica e sia.
Parapoxvrus das Baleias e Presente em todo mundo.
baleias humanos
Fonte: Adaptado de Flores (2012) e Quinn (2005).

44 Famlias virais de importncia em medicina veterinria


U2

Estrutura viral

Os agentes virais da famlia Poxviridae possuem envelope, apresentam uma


simetria complexa, sendo que alguns contm formato de tijolo, com dimetro
entre 220 e 450 nm x 140 e 260 nm, e outros formatos ovoides, com dimetro
entre 250 e 300 nm x 160 e 190 nm. O genoma constitudo por uma molcula
de DNA linear de fita dupla. Durante o brotamento, a partcula vrica adquire um
envelope complementar, sendo que algumas partculas vricas que no adquirem o
envelope so menos infecciosas. As partculas vricas que no adquiriram o envelope
complementar so liberadas para o meio extracelular mediante a lise celular.

Exemplificando

A infeco latente caracterizada pela presena do genoma do agente


no hospedeiro, com uma expresso gnica ausente ou limitada e sem
produo de um agente infeccioso.

A infeco persistente ou crnica refere-se a um processo infeccioso


que persiste por um longo tempo.

A infeco sistmica refere-se a um processo de infeco que foi


disseminado por via sangunea a vrios rgos e tecidos.

Ciclo replicativo

No processo de adsoro, as partculas vricas se ligam nos receptores de


superfcie da membrana celular e penetram por fuso do envelope com a membrana
plasmtica. Aps penetrao por endocitose, a partcula vrica libera o genoma viral
no citoplasma, em seguida, produtos so codificados para que ocorra a transcrio
de protenas estruturais e no-estruturais, que auxiliaro na replicao do genoma. O
processo de expresso gnica compreende-se em trs etapas: transcrio de genes
iniciais, intermedirios e tardios. Com o auxlio da enzima RNA polimerase e outros
fatores celulares, o processo de transcrio iniciado. No citoplasma, a replicao
ocorrer em locais determinados, os quais so denominados de viroplasmas. A
replicao da molcula de DNA inicia-se a partir das extremidades do genoma,
resultando na produo de milhares de cpias do genoma viral. Na replicao inicial,
os produtos dos genes iniciais ligam-se aos promotores de genes intermedirios
e tardios, iniciando a codificao de protenas. Os produtos intermedirios esto
envolvidos com a transcrio dos genes tardios, enquanto que os genes tardios
iro sintetizar protenas estruturais, que auxiliaro no processo de morfognese. As
partculas vricas com envelope iro adquiri-lo em um processo que ocorrer no
complexo de Golgi. Desta forma, as partculas vricas envelopadas sero liberadas

Famlias virais de importncia em medicina veterinria 45


U2

para o meio extracelular pelo mecanismo de brotamento. Para as partculas vricas


no-envelopadas o processo de egresso ocorrer quando houver a lise celular.

Pesquise mais
Pesquise mais! Leia o artigo sobre Anlise filogentica de papilomavrus
bovino associado com leses cutneas em rebanhos do Estado do Paran.

Acesse o link. Disponvel em: <http://revistas.bvs-vet.org.br/pesqvetbras/


article/viewFile/13966/14831>. Acesso: 26 mai. 2016.

Famlia Parvoviridae

A famlia Parvoviridae constituda por duas subfamlias, a Parvovirinae e a


Densovirinae. Os agentes virais pertencentes subfamlia Parvovirinae infectam
animais vertebrados, enquanto que os agentes virais da subfamlia Densovirinae
infectam os insetos. A subfamlia Parvovirinae possui cinco gneros de importncia
veterinria.

Quadro 2.12 | Principais agentes virais de interesse veterinrio pertencentes famlia


Parvoviridae (subfamlia Parvovirinae).
Gnero Vrus Hospedeiro Manifestaes clnicas
Parvovirus Parvovirus de galinha Galinhas Subclnica
(chpv)
Vrus da Gatos Doena entrica e sistmica altamente
panleucopenia felina contagiosa. Apresenta depresso, vmito
(FPLV) e diarreia. Causa panleucopenia, enterite,
hipoplasia cerebelar
Parvovirus canino Ces Doena entrica altamente contagiosa,
(CPV) com depresso, vmito, disenteria e
imunossupresso. Causa leucopenia, miocardite,
enterite
Vrus da enterite das Martas (M. Panleucopenia, enterite
martas (MEV) Vision)
Parvovirus dos mos- Mo-pelada Panleucopenia, enterite
peladas (RPV) (racoon)
Vrus minuto dos Camundongos Deformidades congnitas
camundongos (MMV
ou MVM)
Parvovirus suno (PPV) Sunos Principal causa de natimortos, fetos
mumificados, Infertilidade e aborto.
Dependovirus Parvovirus de gansos Gansos Doena altamente contagiosa. Causa hepatite,
(GPV) miocardite e miosite
Parvovirus de patos Patos Hepatite e miocardite
Muscovy (MDPV)
(continua)

46 Famlias virais de importncia em medicina veterinria


U2

Bocavirus Parvovirus bovino Bovinos Surtos espordicos de diarreia. Doena


(BPV) subclnica
Vrus minuto canino Ces Difuso ampla do vrus. Causa diarreia
(cnmv)
Amdovirus Aleutian mink disease Martas Encefalopatia
virus (AMDV)
Fonte: Adaptado de Flores (2012) e Quinn (2005).

Estrutura viral

Os vrus pertencentes famlia Parvoviridae no possuem envelope, so


icosadricos e com tamanho variando entre 18 e 26 nm. A superfcie dos vrus
apresenta depresses, protuberncias e estruturas cilndricas circundadas por
depresses, as quais so importantes no processo de adsoro da partcula
vrica. O genoma constitudo por uma molcula de DNA de fita simples linear. A
replicao do genoma ocorre no ncleo celular com formao de corpsculos de
incluso intracelulares.

Assimile

Pandemia: refere-se a uma epidemia de propores continentais ou


mundiais.

Paraendmica: refere-se a uma doena de ocorrncia espordica ou


rara.

Letalidade: refere-se a uma medida da mortalidade entre os animais


que desenvolvem uma determinada doena.

Ciclo replicativo

O ciclo replicativo inicia-se com o processo de adsoro e com o


reconhecimento e ligao dos receptores (TfR, sialoglicoprotenas, carboidratos,
sulfato de heparina, integrina) virais na membrana celular da clula hospedeira. A
penetrao da partcula vrica mediada por endocitose, em seguida, a partcula
deslocada at as proximidades do ncleo da clula. Nos endossomos, as partculas
passam por um processo de acidificao, que promove alteraes na conformao
do capsdeo. Essas interaes compreendem-se em exposio da regio animo-
terminal da VP1, clivagem da regio amino-terminal da VP2 e desnudamento
do genoma. A regio amino-terminal da VP1 determinante na localizao na
membrana nuclear e na introduo do DNA e protenas para o ncleo celular.
No ncleo, inicia-se a sntese de DNA complementar, a qual ir sintetizar uma
molcula de DNA de fita dupla, com auxlio da enzima DNA polimerase e fatores
celulares. A molcula de DNA de fita dupla ser utilizada como molde pela RNA

Famlias virais de importncia em medicina veterinria 47


U2

polimerase II na sntese de RNAs mensageiros. Em seguida, ocorrer a expresso


das protenas NS1 e NS2. A NS1 auxiliar na expresso das protenas estruturais
(VP1, VP2 e VP3) e na fase final da replicao do DNA (funes de helicase e
endonuclease). A replicao inicia-se aps o ingresso do genoma no ncleo celular
por um mecanismo descrito como crculo rolante modificado. Nesse processo,
ocorrer a sntese de cadeias de DNA complementares, as quais serviro de molde
para serem utilizadas no processo de transcrio para a produo de quatro cpias
do genoma viral (duas de polaridade negativa e duas positivas), com auxlio da
endonuclease (NS1). Na morfognese, a molcula de DNA (polaridade negativa
ou positiva) ser encapsidada, sendo que, de modo geral, a molcula de DNA de
polaridade negativa eleita para encapsidao. A maturao ocorre no ncleo
celular e o egresso das partculas vricas ocorre por lise celular.

Faa voc mesmo

Agora, faa voc mesmo! Pesquise mais sobre as doenas e os sinais


clnicos da famlia: Herpesviridae, Adenoviridae, Papillomaviridae,
Poxviridae e Parvoviridae. Utilize o material de apoio: QUINN, P. J.
Microbiologia veterinria e doenas infecciosas. Porto Alegre: Artmed,
2005. HIRSH, D. C; ZEE, Y. C. Microbiologia veterinria. Rio de Janeiro:
EGK, 2003.

Sem medo de errar

Mediante os contedos abordados nesta seo, vamos resolver as questes da


situao-problema. Vamos l!

Para compreender melhor a situao apresentada, vamos recapitular os


principais pontos da situao-problema. Conforme o laudo tcnico, as amostras
biolgicas pertenciam a um equino com aproximadamente 3,5 anos de idade, que
estava recusando-se a cobrir as guas. O mdico veterinrio indicou a suspeita
de um agente viral com base nas leses apresentadas pelo animal. O tcnico
procedeu com a anlise do material biolgico, utilizando Microscopia eletrnica e
isolamento do vrus na cultura dos tecidos.

Mediante as informaes apresentadas, e com auxlio dos contedos abordados


nesta seo, vamos responder s questes do caso clnico.

Qual o possvel agente patolgico?

Herpesvirus equino tipo 3, causador do exantema coital equino.

Classifique o agente patolgico em famlia, subfamlia, gnero, espcie e

48 Famlias virais de importncia em medicina veterinria


U2

sorotipo.

Famlia Herpesviridae; Subfamlia Alphaherpesvirinae; Espcie Herpesvirus


equino; sorotipo 3 (EHV-3).

Descreva a estrutura do agente viral.

Os agentes virais pertencentes famlia Herpesviridae so envelopados,


possuem simetria icosadrica e com dimetro que varia entre 120 e 300 nm.
Seu genoma constitudo por uma molcula de DNA linear de fita dupla e sua
replicao ocorre no ncleo da clula hospedeira.

Avanando na prtica

Bouba aviria ou Difteria aviria

Recentemente, o mdico veterinrio da Cooperativa de Aves, foi solicitado para


fazer um atendimento clnico em uma propriedade rural. O proprietrio relatou que
alguns frangos apresentavam algumas salincias na forma de ndulos na crista.
Durante o exame clnico, o veterinrio constatou que algumas aves apresentavam
leses nodulares na crista, barbela e em outras reas da pele em que no havia
penas. Em outras aves, foram observadas vesculas e ulceraes com formao
de crostas. Tambm foram observadas leses necrticas amareladas na mucosa
da boca. Duas aves com leses necrticas foram sacrificadas para a realizao da
necropsia e coleta de amostras. Na necropsia, foram observadas leses necrticas
no esfago e traqueia. Com base nos achados clnicos, o mdico veterinrio
suspeitou de um agente viral. Desta forma, encaminhou as amostras para serem
analisadas em laboratrio, a fim de confirmar a suspeita.

Descrio da situao-problema

Em continuidade com o relato de caso, o tcnico laboratorial recebeu o


material biolgico com um laudo tcnico emitido pelo mdico veterinrio. De
acordo com o laudo tcnico, os achados clnicos (leses nodulares, vesculas,
ulceraes e leses necrticas) indicam a suspeita de um agente viral pertencente
famlia Poxviridae. Com base nas informaes e no tipo de material biolgico,
o tcnico laboratorial elegeu o mtodo de diagnstico imunoflorescncia para
deteco do agente viral. Os exames evidenciaram resultado positivo para o
vrus da varola (bouba) aviria. Mediante as informaes apresentadas, e com
auxlio dos contedos abordados nesta seo, responda seguinte questo para
compreender melhor o caso clnico.

Explique o ciclo replicativo dos agentes pertencentes a famlia Poxviridae.

Famlias virais de importncia em medicina veterinria 49


U2

Resoluo da situao-problema

Explique o ciclo replicativo dos agentes pertencentes a famlia Poxviridae.

No processo de adsoro, as partculas vricas ligam-se em receptores da


superfcie da membrana celular e penetram por fuso do envelope com a
membrana plasmtica. Aps penetrao por endocitose, a partcula vrica libera
o genoma viral no citoplasma, em seguida, produtos so codificados para que
ocorra a transcrio de protenas estruturais e no-estruturais, que auxiliaro na
replicao do genoma. O processo de expresso gnica compreende-se em trs
etapas: transcrio de genes iniciais, intermedirios e tardios. Com o auxlio da
enzima RNA polimerase e outros fatores celulares, o processo de transcrio
iniciado. No citoplasma, a replicao ocorrer em locais determinados, sendo
denominados de viroplasmas. A replicao da molcula de DNA inicia-se a partir
das extremidades do genoma, resultando na produo de milhares de cpias do
genoma viral. Na replicao inicial, os produtos dos genes iniciais ligam-se aos
promotores de genes intermedirios e tardios, iniciando a codificao de protenas.
Os produtos intermedirios esto envolvidos com a transcrio dos genes tardios,
enquanto que os genes tardios iro sintetizar protenas estruturais, que auxiliaram
no processo de morfognese. As partculas vricas com envelope iro adquiri-lo
em um processo que ocorrer no complexo de Golgi. Desta forma, as partculas
vricas envelopadas sero liberadas para o meio extracelular pelo mecanismo de
brotamento. Para as partculas vricas no-envelopadas, o processo de egresso
ocorrer quando houver a lise celular.

Faa valer a pena!

1. A famlia Herpesviridae possui trs subfamlias: Alphaherpesvirinae,


Betaherpesvirinae e Gammaherpesvirinae, sendo que os agentes
virais de importncia veterinria esto classificados nas subfamlias
__________________ e _______________________.
Assinale a alternativa correta que completa as lacunas.
a) Alphaherpesvirinae e Gammaherpesvirinae.
b) Betaherpesvirinae e Gammaherpesvirinae.
c) Betaherpesvirinae e Alphaherpesvirinae.
d) Entomopoxvirinae e Chordopoxvirinae.
e) Entomopoxvirinae e Betaherpesvirinae.

2. Na famlia Herpesviridae, os agentes virais possuem trs subfamlias:


Alphaherpesvirinae, Betaherpesvirinae e Gammaherpesvirinae.

50 Famlias virais de importncia em medicina veterinria


U2

Dentre estas famlias, as subfamlias Alphaherpesvirinae e


Gammaherpesvirinae apresentam agentes de importncia veterinria.
A subfamlia Alphaherpesvirinae apresenta quatro gneros que so
________, _________, _________ e _________.
Assinale alternativa que completa as lacunas corretamente.
a) Papilomavirus equino 1, Simplexvirus, Mardivirus e Iltovirus.
b) Varicellovirus, Simplexvirus, Mardivirus e Vrus da pseudovarola
bovina.
c) Varicellovirus, Vrus da estomatite papular bovina, Mardivirus e
Iltovirus.
d) Varicellovirus, Simplexvirus, Virus da panleucopenia felina e Iltovirus.
e) Varicellovirus, Simplexvirus, Mardivirus e Iltovirus.

3. Os agentes virais pertencentes famlia Herpesviridae no possuem


______________, so hexagonais, icosadricos, com dimetro
aproximado de 80 nm. Seu genoma constitudo por uma molcula
de ______________________ e sua replicao ocorre no ncleo da
clula hospedeira.
Assinale a alternativa correta.
a) Capsdeo e DNA linear de fita dupla.
b) Envelope e DNA linear de fita dupla.
c) Envelope e DNA circular de fita dupla.
d) Capsdeo e RNA linear de fita dupla.
e) Envelope e RNA linear de fita dupla.

Famlias virais de importncia em medicina veterinria 51


U2

52 Famlias virais de importncia em medicina veterinria


U2

Seo 1.4

Doenas virais veterinrias

Dilogo aberto

Ol, aluno! Seja bem-vindo mais uma seo de estudos deste livro didtico!

Nesta seo, vamos recapitular as principais caractersticas e agentes pertencentes


s famlias virais que estudamos nas sees anteriores (classificao viral I, II e III).
Em seguida, vamos conhecer algumas doenas causadas pelos agentes virais.
Para auxiliar na compreenso do contedo abordado, vamos acrescentar novas
informaes na situao-problema apresentada no Convite ao estudo, dessa
forma, voc participar indiretamente da resoluo do caso. Vamos l!

Recentemente, o Laboratrio de anlises clnicas do Hospital Veterinrio recebeu


amostras para diagnstico laboratorial. O mdico veterinrio encaminhou um
laudo tcnico anexo s amostras, contendo poucas informaes do atendimento
clnico e indicando a suspeita de um agente viral da Anemia Infecciosa Equina. De
acordo com o laudo tcnico, as amostras foram coletadas de um equino com
aproximadamente trs anos de idade. Na anamnese, o proprietrio relatou que
o animal adentrou a propriedade vizinha e permaneceu por 15 dias em contato
com outros equinos. O veterinrio no disponibilizou mais informaes no laudo,
solicitando apenas a confirmao da suspeita do agente viral. De acordo com
o tcnico laboratorial, as amostras (sangue com anticoagulante EDTA) estavam
adequadamente armazenadas. Mediante as informaes apresentadas, e com
auxlio dos contedos abordados nesta seo, responda s questes para a
resoluo do caso clnico.

Quais as espcies animais que o agente viral pode acometer?

Descreva a sintomatologia da Anemia Infecciosa Equina.

Descreva a leso que ocorre nos componentes do sangue e que desencadeia


a anemia nos animais infectados.

Ao final da seo, o aluno dever entregar um diagnstico laboratorial de


uma determinada infeco viral de importncia clnica veterinria.

Famlias virais de importncia em medicina veterinria 53


U2

No pode faltar

Ol, aluno! Nesta seo vamos abordar as principais caractersticas e agentes


pertencentes s famlias virais que estudamos nas sees anteriores. Vamos iniciar
os estudos!

Reflita

Entender a prevalncia e a distribuio das doenas virais em animais de


produo e de companhia de grande importncia para implementar
medidas de preveno, principalmente com adoo de prticas de
vacinao.

Principais doenas de importncia na medicina veterinria cujos agentes


esto classificados nas famlias virais

Classificao viral I

Na classificao viral I, vamos abordar as principais caractersticas e agentes virais


pertencentes s famlias Picornaviridae, Flaviviridae, Retroviridae e Coronaviridae.

Famlia Picornaviridae

Caractersticas dos agentes virais: vrus-RNA de fita simples, polaridade positiva,


no-envelopados e replicam-se no citoplasma.

Principais agentes virais de interesse veterinrio: Vrus da febre aftosa; Vrus da


rinite equina A; Vrus da hepatite dos patos; Vrus da encefalomiocardite; Vrus da
doena Vesicular dos sunos e Enterovrus bovino.

Famlia Rhabdoviridae

Caractersticas dos agentes virais: vrus-RNA de fita simples, polaridade negativa,


envelopados e replicam-se no citoplasma.

Principais agentes virais de interesse veterinrio: Vrus da estomatite vesicular;


Vrus da raiva; Vrus da febre efmera dos bovinos e Vrus da necrose hematopoitica.

Famlia Paramyxoviridae

Caractersticas dos agentes virais: vrus-RNA de fita simples, polaridade negativa,


envelopados e replicam-se no citoplasma.

Principais agentes virais de interesse veterinrio: Vrus da parainfluenza bovina 3;


Vrus Sendai; Vrus da parainfluenza humana 1 e 3; Vrus da cinomose; Vrus da peste

54 Famlias virais de importncia em medicina veterinria


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bovina; Vrus da peste dos pequenos ruminantes; Vrus da parainfluenza canina 2;


Rubulavirus suno; Vrus Hendra; Vrus Nipah; Vrus da doena de Newcastle ou
paramixovrus avirio 1; Vrus respiratrio sincicial bovino; Vrus respiratrio sincicial
ovino e Vrus da rinotraquete dos perus ou pneumovrus avirio.

Assimile

Uma clula susceptvel aquela que apresenta condies para o


desenvolvimento completo do ciclo replicativo.

Agora, vamos conhecer a distribuio geogrfica, as espcies animais


acometidas, a sintomatologia, as leses, o tratamento e os mtodos de diagnstico
de algumas doenas causadas por agentes virais da classe viral I. Vamos l!

Febre Aftosa

A febre aftosa causada por um agente viral pertencente ao gnero Aphtovirus,


da famlia Picornaviridae. A febre aftosa est presente no Continente Africano, na
Amrica do Sul, na sia e em algumas regies da Europa. Alguns pases, como
Inglaterra, Irlanda, Japo, Austrlia, Nova Zelndia e Amrica Central e do Norte,
so considerados livres da febre aftosa. O agente viral est classificado em sete
sorotipos (O, A, C, SAT1, STA2, SAT3 e sia1), conforme a regio. Na Amrica do Sul,
esto presentes os sorotipos O, A e C; na frica, esto presentes os sorotipos SAT1,
2, 3, A, O e C; na sia, esto presentes os sorotipos A, O, C e sia1. O vrus acomete
espcies animais de casco biungulados, como bovinos, bubalinos, ovinos, caprinos,
sunos, ruminantes silvestres. Esta doena caracterizada por febre, salivao
excessiva, laminite e leses vesiculares nas mucosas da boca (gengiva e lngua), nos
espaos interdigitais, no bere, nos tetos e na borda coronria do casco. A presena
de leses vesiculares na boca pode reduzir a ingesto de alimentos, e causar perda
de peso nos animais. No caso de leses vesiculares no espao interdigital ou na
borda coronria dos cascos, temos um quadro que favorece infeces secundrias
e o desenvolvimento de complicaes podais. Sua transmisso ocorre por contato
direto, por aerossis, fmites e vetores. Em produtos crneos (bacon, embutidos
e presunto), o vrus pode estar vivel por at 2 meses e, na carne congelada, por
at 3 meses. No estgio virmico, o vrus provoca leses e sinais clnicos. As leses
apresentam formao de vesculas, decorrentes da lise das clulas infectadas,
edema celular, extravasamento de lquidos do edema, alteraes degenerativas
e necrose do msculo cardaco. Na musculatura cardaca e esqueltica, pode-
se observar estrias amareladas no sentido longitudinal e necrose do miocrdio,
aspecto denominado de corao tigrado. No h tratamento e as medidas de
preveno incluem a restrio de importao de animais, fmites e produtos de
origem animal de regies endmicas. A implementao de programas de vacinao

Famlias virais de importncia em medicina veterinria 55


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no rebanho deve ser seguida conforme o rgo de fiscalizao. Em pases livres da


doena, animais infectados so colocados em quarentena e sacrificados.

Diagnstico laboratorial: Isolamento viral; Fixao de complemento; Soro


neutralizao; ELISA de captura; RT-PCR e PCR em tempo real.

Doena Vesicular dos Sunos

A doena vesicular suna uma enfermidade moderadamente contagiosa e


aguda. O agente viral, vrus da doena vesicular dos sunos, pertence ao gnero
Enterovirus, da famlia Picornaviridae. Esse vrus est presente em reas de
suinocultura, e, alm de sunos, o vrus pode acometer ovinos, camundongos e
seres humanos. A sintomatologia semelhante da febre aftosa, do exantema
vesicular suno e da estomatite vesicular suna. Em sunos, os sinais clnicos so
febre, leses vesiculares, perda de peso, laminite e dificuldade de locomoo. As
leses vesiculares so observadas nos lbios, nas narinas, na lngua, na pele, na
borda coronria, nas laterais e nas reas interdigitais do casco. O desenvolvimento
das vesculas ocorre, aproximadamente, entre 2 e 11 dias aps infeco (pico de
viremia entre 2 e 4 dias aps infeco e persiste at 7 dias). As leses vesiculares so
indistinguveis s da febre aftosa, essas leses podem passar a formar ulceraes,
principalmente nas reas do metatarso e metacarpo, e, em algumas situaes,
os cascos podem se desprender. No crebro, observa-se encefalite difusa e
agrupamentos de clulas da neuroglia. Infeces secundrias podem ocorrer. No
h tratamento, e as medidas de preveno incluem a restrio de importao de
regies endmicas. No h vacinas disponveis at o momento. Em pases livres da
doena, animais infectados so colocados em quarentena e sacrificados.

Diagnstico laboratorial: Isolamento viral em clulas de cultivo; Fixao do


complemento; ELISA de captura e Microscopia Eletrnica.

Raiva

O vrus da raiva est classificado no gnero Lyssavirus da famlia Rhabdoviridae.


A raiva est presente em grande parte das regies do mundo, com exceo das
Ilhas Britnicas, Japo, Austrlia, Escandinvia e Nova Zelndia. O vrus acomete
mamferos. Vrias espcies animais so importantes reservatrios da doena,
como morcegos, coiotes, raposas, gambs, quatis e lobos. O vrus da raiva
neurotrpico, afeta o sistema nervoso central de animais mamferos e seres
humanos. O vrus introduzido pelas terminaes nervosas perifricas e pode
atingir o sistema nervoso central pelo fluxo axoplsmico retrgrado. Os primeiros
sinais clnicos so observados aps a leso neural, que causada pela replicao
da partcula vrica. O vrus dissemina-se infectando vrios tecidos, mesmo os
no-nervosos, como as glndulas salivares. A presena do agente viral na saliva
favorece a sua transmisso. O perodo de incubao varia de 2 a 3 semanas at
6 meses. O quadro clnico caracterizado em trs fases: fase prodrmica (os

56 Famlias virais de importncia em medicina veterinria


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animais ficam confusos e desorientados), fase furiosa (aumento de agressividade


e hiperexcitabilidade, tendncia de morder) e fase silenciosa (dificuldade de
deglutio, fraqueza, salivao profusa e mandbula cada). Em ces, o perodo de
incubao pode ir de 3 a 8 dias. Os sinais clnicos apresentam salivao profusa,
associada espuma, convulses, dificuldade de engolir alimentos e gua, ausncia
de coordenao motora, paralisia dos msculos farngeos e da mandbula inferior.
Em gatos, os sinais clnicos so semelhantes aos dos ces. No caso de equinos,
a sintomatologia semelhante aos achados clnicos de equinos acometidos
por ttano, que apresentam dificuldade de engolir, ataxia e paralisia muscular.
Em bovinos, observada ausncia de ruminao, salivao, engasgos, tenesmo
e paralisia dos membros anteriores. Experimentalmente, em roedores, o vrus
encontrado na medula espinhal entre 24 e 72 horas aps incubao, e entre 96 e
192 horas no crebro. O vrus tambm pode alcanar o sistema nervoso central,
a partir das glndulas salivares, tonsilas e crneas. O animal em estado nervoso,
desenvolver sinais clnicos em, aproximadamente, uma semana, seguido de morte.
Animais e seres humanos vacinados, apresentam anticorpos neutralizantes a partir
da terceira semana aps aplicao. Diagnstico clnico deve ser diferenciado de
outras doenas que acometem o sistema nervoso central.

Diagnstico laboratorial: Imunofluorescncia; Isolamento viral (saliva e tecido


nervoso); Exame histopatolgico (demonstrao de corpsculo de Negri em
neurnios); Inoculao intracerebral de camundongos (desenvolve sinais clnicos
em 17 dias).

Estomatite Vesicular

O vrus da estomatite vesicular est classificado no gnero Vesiculovirus da


famlia Rhabdoviridae. O vrus pode infectar sunos, equinos, bovinos, mulas, veados
e seres humanos. A doena est presente na Amrica do Sul, Central e do Norte.
Geralmente, os surtos esto relacionados ao vrus da estomatite vesicular Indiana
e ao vrus da estomatite vesicular de New Jersey. Os animais infectados pelo vrus,
apresentam vesculas na mucosa da boca e da lngua, nos tetos, na borda coronria
e no espao interdigital do casco. A sintomatologia semelhante aos do exantema
vesicular do suno e da febre aftosa. A transmisso ocorre, principalmente, pelo
contato direto, sendo a saliva uma importante fonte de contaminao. Insetos,
como mosca dos estbulos, tabandeos e mosquitos, so considerados vetores da
doena. A infeco viral causa febre, eroses e as lceras so observadas de 4 a
6 dias aps infeco. Em casos severos, pode ocorrer descamao da mucosa da
lngua, associada salivao abundante e anorexia. No animal, o vrus encontrado
no lquido vesicular e na saliva, porm, no est presente no sangue. No ocorre
disseminao do vrus para outras regies do corpo. A patologia da estomatite
vesicular caracterizada pelo desenvolvimento de vesculas na boca, nos cascos
e nos tetos. Histologicamente, as leses so caracterizadas por infiltrao celular

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inflamatria, edema intracelular e necrose das clulas epiteliais. O aparecimento


e desaparecimento de leses varivel, desaparecendo em uma semana e, em
alguns casos, aparecendo entre 10 e 20 dias aps as primeiras leses. No h
tratamento para a doena. Na forma preventiva, esto disponveis vacinas vivas
atenuadas e inativadas.

Diagnstico laboratorial: Isolamento do vrus; Titulao de anticorpos pelo


mtodo ELISA; Microscopia eletrnica; Imunoeletrnica do lquido vesicular e
Colorao de anticorpos imunofluorescente.

Vocabulrio

Virose: refere-se doenas causadas por vrus.

Viremia: refere-se presena do vrus no sangue.

Soropositivo: refere-se ao indivduo que apresenta anticorpos


especficos

de um determinado agente.

Cinomose Canina

O vrus da cinomose canina est classificada no gnero Morbillivirus, da


subfamlia Paramyxovirinae, pertencente famlia Paramyxoviridae. O vrus est
presente em todo o mundo, infectando uma ampla variedade de animais, como
ces, raposas, lobos, coiotes, fures, martas, gambs, quatis e pandas. O co
o principal reservatrio do vrus, e elimina o agente viral por secrees nasais,
oculares, urina e fezes. A infeco pode desenvolver uma variedade de sinais
clnicos (desde assintomticos at sintomas graves) como febre bifsica, anorexia,
desidratao, secrees nasais e oculares, depresso, diarreia, vmito, leucopenia,
trombocitopenia, erupes cutneas, hiperceratose dos coxins dos membros e
do focinho, espasmos musculares, sinais de envolvimento do sistema nervoso.
Animais com baixa condio imunitria esto mais susceptveis a complicaes,
que podem levar morte. Dois dias aps infeco, possvel detectar o vrus em
linfonodos bronquiais e tonsilas. Do stimo ao nono dia, ocorre disseminao
viral para o sistema linftico, trato respiratrio, trato gastrointestinal, sistema
endcrino, sistema urogenital e dos coxins dos membros. A partir do nono dia, o
vrus atinge as clulas ependimais, gigantes e neuronais. Alteraes degenerativas,
intracitoplasmticas e corpsculos de incluso so observadas em clulas epiteliais.
A infeco viral induz imunidade nos ces, produzindo anticorpos neutralizantes que
permanecem, aproximadamente, por um ano. No h tratamento especfico para
animais infectados. O tratamento , basicamente, de suporte, com a utilizao de

58 Famlias virais de importncia em medicina veterinria


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antibiticos e anticonvulsivantes. Os animas que sobrevivem adquirem imunidade


contra o agente viral. A vacinao preventiva (vacinas vivas ou inativadas) a
medicao para controle da doena.

Diagnstico laboratorial: ELISA; Imunocromatogrficos; Isolamento e


identificao do agente viral; e Demonstrao do antgeno viral com auxlio da
tcnica de Imunofluorescncia indireta ou Peroxidase.

Doena de Newcastle

O vrus da doena de Newcastle, tambm conhecido como paramixovrus


avirio 1, est classificado no gnero Rubulavirus, da subfamlia Paramyxovirinae,
pertencente famlia Paramyxoviridae. A doena de Newcastle tem sido relatada
no mundo inteiro. As aves domsticas so consideradas os maiores reservatrios
do agente viral, porm, o vrus tem sido isolado em perus, patos, gansos, pardais e
corvos. A transmisso ocorre por aerossis em contato com trato respiratrio da
ave. A doena altamente infecciosa e caracterizada pela dificuldade respiratria,
diarreia e sinais neurolgicos. Seu perodo de incubao varia entre quatro e onze
dias. As aves infectadas comeam a liberar o vrus a partir do segundo para o
terceiro dia. De acordo com a virulncia da cepa (velognicas, mesognicas e
lentognicas), as aves produzem sintomatologia diferente. As cepas velognicas
causam uma infeco rpida e fatal, que envolve os rgos viscerais (Doyle) e
o sistema nervoso central (Beach). As cepas mesognicas causam sintomas
respiratrios e, s vezes, neurolgicos (Beaudette). As cepas lentognicas causam
uma doena branda ou inaparente (Hitchner). Em aves que apresentam a forma
mais grave da doena, observa-se necrose hemorrgica no trato respiratrio,
intestinal e nos rgos viscerais. Em aves que apresentam sintomas neurolgicos,
so observados necrose das clulas gliais, hipertrofia das clulas endoteliais e
degenerao neuronal. O hospedeiro pode desenvolver anticorpos a partir do
sexto ao dcimo dia, auxiliando contra o agente viral. O tratamento preventivo, e
envolve medidas como adotar um manejo sanitrio adequado, evitar exposio de
aves susceptveis ao agente viral e vacinar as aves.

Diagnstico laboratorial: Isolamento e identificao do vrus; Demonstrao do


antgeno com auxlio da imunofluorescncia; Demonstrao de anticorpos com
auxlio dos mtodos ELISA, Hemaglutinao ou Neutralizao.

Classificao viral II

Na classificao viral II, vamos abordar as principais caractersticas e agentes


virais pertencentes s famlias Togaviridae, Flaviviridae, Retroviridae e Coronaviridae.

Famlia Togaviridae

Caractersticas dos agentes virais: vrus-RNA de fita simples, polaridade positiva

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e envelopados.

Principais agentes virais de interesse veterinrio: Vrus da encefalite equina do


Leste; Vrus da encefalite equina do Oeste; Vrus da encefalite equina venezuelana;
Vrus Higlands J.; Vrus Chikungunya; Vrus Semliki Forest e Getah.

Famlia Flaviviridae

Caractersticas dos agentes virais: vrus-RNA de fita simples, polaridade


positiva, envelopados e replicam-se no citoplasma. Para a maioria dos Flavivirus, a
transmisso mediada por artrpodes.

Principais agentes virais de interesse veterinrio: Vrus da febre amarela; Vrus


da doena de Wesselsbron; Vrus do oeste do Nilo; Vrus da encefalite japonesa;
Vrus da encefalomielite ovina (mal-do-pulo); Vrus meningo-encefalite dos perus
de Israel; Vrus da diarreia bovina tipo 1 e 2; Vrus da doena da fronteira e Vrus da
peste suna clssica.

Famlia Retroviridae

Caractersticas dos agentes virais: vrus-RNA de fita simples linear, polaridade


positiva e envelopados. O RNA viral transcrito em DNA de fita dupla. O DNA de
fita dupla inserido no genoma da clula hospedeira.

Principais agentes virais de interesse veterinrio: Vrus da Leucose aviria; Retrovrus


ovino (Jaagsieke); Vrus da leucemia felina; Vrus da Leucose bovina; Vrus da
imunodeficincia bovina; Vrus da anemia infecciosa equina; Vrus da imunodeficincia
felina; Vrus da artrite-encefalite caprina e Vrus Maedi/Visna dos ovinos.

Famlia Coronaviridae

Caractersticas dos agentes virais: vrus-RNA de fita simples, polaridade positiva,


envelopados e sua replicao ocorre no citoplasma.

Principais agentes virais de interesse veterinrio: Vrus da gastroenterite


transmissvel viral (TGEV); Coronavirus Respiratrio Suno (PRCoV); Vrus da diarreia
epidmica suna (PEDV); Vrus da peritonite infecciosa felina (FIPV); Coronavirus
felino (FCoV); Coronavirus canino (CCoV); Coronavirus humano (HCoV-229E);
Coronavirus bovino (BCoV); Coronavirus dos perus (TCoV); Coronavirus da hepatite
do camundongo (MHV); Coronavirus humano (HCoV-OC43); Vrus da bronquite
infecciosa das galinhas (IBV); Torovirus bovino (BToV); Vrus Breda (BRV); Torovirus
equinos (EToV); Vrus Berne (BEV); Torovirus humano (HToV) e Torovirus suno
(PToV).

60 Famlias virais de importncia em medicina veterinria


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Exemplificando

A vacina inativada ou morta caracterizada por um agente inativado,


invivel e no-replicativo.

A vacina atenuada ou viva modificada caracterizada por um agente


vivel, porm, com patogenicidade e virulncia reduzidas.

A vacina monovalente contm antgenos de apenas um agente,


enquanto que, a vacina multivalente contm antgenos de vrios
agentes.

Agora, vamos conhecer a distribuio geogrfica, as espcies animais


acometidas, a sintomatologia, as leses, o tratamento e os mtodos de diagnstico
de algumas doenas causadas por agentes virais da classe viral II. Vamos l!

Diarreia Viral Bovina

O vrus da diarreia bovina est classificado no gnero Pestivirus, da famlia


Flaviviridae. Sua distribuio mundial e acomete, principalmente, bovinos (em
todas as idades), porm ovinos, caprinos e sunos tambm so susceptveis,
alm de serem considerados reservatrios do agente viral. Os vrus da diarreia
bovina esto distribudos em dois grupos, no grupo I, compreendem as cepas
clssicas, e, no grupo II, compreendem as cepas altamente patognicas. Animais
infectados podem apesentar diarreia, anorexia, salivao intensa, depresso,
desidratao, paralisao da ruminao, conjuntivite, ulceraes nas mucosas
da cavidade oral, congesto, aborto e teratognese. Em casos graves, os animais
podem apresentar febre e leucopenia. Em situaes que envolve uma infeco
persistente, o agente viral pode desenvolver doena das mucosas. No grupo II de
cepas altamente patognicas, os animais infectados apresentam trombocitopenia
intensa e hemorragia. Vacas prenhes, infectadas antes dos 180 dias de gestao,
produzem bezerros infectados persistentemente e apresentam imunossupresso.
O vrus teratognico, que pode resultar na morte do feto ou desenvolvimento de
anomalias (deformidade do sistema nervoso central, leses oculares e cerebelares
congnitas). Bovinos que se recuperaram da infeco viral, adquirem imunidade.
O tratamento preventivo, com a aplicao de vacinas. Em bezerros, anticorpos
colostrais persistem por 4 a 6 meses. Caso a vacinao seja inferior a 6 meses de
idade, a revacinao deve ser realizada.

Diagnstico laboratorial: Isolamento viral e Imunofluorescncia;


Soroneutralizao com demonstrao de anticorpos; Reao em cadeia da
polimerase (PCR). Diagnstico diferencial para febre catarral maligna ou peste
bovina e doenas com sintomatologias semelhantes.

Famlias virais de importncia em medicina veterinria 61


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Peste Suna Clssica

O vrus da peste suna clssica est classificado no gnero Pestivirus, da famlia


Flaviviridae. uma doena altamente contagiosa e sua distribuio mundial. O
vrus acomete sunos domsticos e silvestres. Parasitas pulmonares de sunos so
reservatrios do agente viral. A transmisso pode ocorrer por aerossis, fmites e
ingesto de materiais contaminados, sendo que os animais infectados apresentam
febre, anorexia, vmito, diarreia, descargas mucopurulentas nos olhos, ranger
dos dentes, distrbios locomotores, paralisia local e, s vezes, convulses.
Normalmente, os animais ficam em estado de depresso e sonolncia. Matrizes
infectadas acarretam em leites reduzidos, partos prematuros, natimortos,
tremores e ataxia cerebelar. O vrus possui afinidade para tecidos hematopoiticos
e vasculares, causando degenerao de vasos sanguneos, o que resulta em focos
de hemorragia, necrose e enfartamento de rgos internos. Observa-se, ainda,
a presena de linfonodos aumentados e petquias hemorrgicas na superfcie
serosa. Uma infeco secundria pode ocorrer, causando Pneumonia e Enterite
ulcerativa. Animais que se recuperam da infeco viral, adquirem imunidade
duradoura. O tratamento preventivo, com aplicao de vacinas que persistem
por apenas oito meses, isso quando so aplicadas vrias doses.

Diagnstico laboratorial: Isolamento viral; Imunofluorescncia direta; Testes


sorolgicos; Testes de neutralizao e ELISA.

Anemia Infecciosa Equina

O vrus da anemia infecciosa equina est classificado no gnero Lentivirus,


da subfamlia Orthoretrovirinae, da famlia Retroviridae. A doena est distribuda
mundialmente, com incidncia principalmente em pases de clima quente. O vrus
acomete equinos, pneis, asininos e muares. O agente viral pode ser transmitido
por insetos hematfagos (o vrus no se replica nos insetos), por fmites (agulhas
contaminadas), e para o potro, pela lactao. A sintomatologia caracterizada por
febre, anemia, anorexia, trombocitopenia, sudorese profusa e secreo no focinho
durante 3 a 5 dias. Na doena subaguda, observa-se fraqueza, depresso do sistema
nervoso central, apatia, anemia, edema, petquias e ataxia. Na forma crnica, a
anemia infeciosa equina denominada de Febre do pntano, os sintomas so
semelhantes aos da apresentao subaguda, porm, mais brandos e dificilmente
leva morte do animal. Os equinos podem carrear o vrus sem apresentar
sintomas. O desencadeamento dos sintomas pode ocorrer aps o animal passar
por algum tipo de estresse, ou com a utilizao de drogas imunossupressoras.
A replicao do vrus resulta em hemlise das hemcias e eritrofagocitose,
causada por macrfagos, o que desencadeia a anemia. Tambm se observa
comprometimento do metabolismo do ferro. Leses como hemorragia, edema
e degenerao so observadas em vrios rgos, alm de necrose de tecidos
linfticos. No h tratamento especfico, recomenda-se a terapia de suporte.

62 Famlias virais de importncia em medicina veterinria


U2

Animais infectados (qualquer equino ou pertencente famlia equidae) devem


ser isolados e sacrificados. Potros podem nascer ausentes do agente viral, porm
devem ser isolados da gua infectada e do aleitamento materno (transmitido pelo
leite). No utilizado vacinas para controle da doena.

Diagnstico laboratorial: Teste sorolgico Imunodifuso em gel de gar;


ELISA; Reao em cadeia da polimerase (PCR); Potros com at 6 meses de idade
podem apresentar resultados falso-positivo.

Classificao viral III

Na classificao viral III, vamos abordar as principais caractersticas e agentes


virais das famlias Herpesviridae, Adenoviridae, Papillomaviridae, Poxviridae e
Parvoviridae.

Famlia Herpesviridae

Caractersticas dos agentes virais: vrus-DNA de fita dupla, simetria icosadrica,


envelopados e replicam-se no ncleo. Causam doenas no sistema respiratrio,
reprodutivo e nervoso.

Principais agentes virais de interesse veterinrio: Herpesvirus bovino tipo 1


(BoHV-1); Herpesvirus bovino tipo 2 (BoHV-2); Herpesvirus bovino tipo 5 (BoHV-
5); Herpesvirus canino tipo 1 (CaHV-1); Herpesvirus caprino tipo 1 (CpHV-1);
Herpesvirus equino tipo 1 (EHV-1); Herpesvirus equino tipo 3 (EHV-3); Herpesvirus
equino tipo 4 (EHV-4); Herpesvirus felino tipo 1 (FeHV-1); Herpesvirus suno tipo 1
(SuHV-1); Herpesvirus galdeo tipo 2 (GaHV-2); Herpesvirus galdeo tipo 3 (GaHV-
3); Herpesvirus galdeo tipo 1 (GaHV-1); Herpesvirus alcelaphine tipo 1 (AlHV-1);
Herpesvirus bovino tipo 4 (BoHV-4); Herpesvirus ovino tipo 2 (OvHV-2); Herpesvirus
ovino tipo 1 (OvHV-1) e Herpesvirus suno tipo 2 (SuHV-2).

Famlia Adenoviridae

Caractersticas dos agentes virais: vrus-DNA de fita dupla, simetria icosadrica,


no-envelopados e replicam-se no ncleo. Desenvolvimento de corpsculos de
incluso intracelulares.

Principais agentes virais de interesse veterinrio: Adenovrus bovino (BAdV-A,


BAdV-B e BAdV-C); Adenovrus canino (CAdV-1 e CAdV-2); Adenovrus equino
(EAdV-A e EAdV-B); Adenovrus ovino (OAdV-A, OAdV-B e OAdV-C); Adenovrus
suno (PAdV-A, PAdV-B e PAdV-C); Adenovrus caprino (GAdV-A); Adenovrus avirio
(FAdV-A, FAdV-B, FAdV-C, FAdV-D e FAdV-E); Adenovrus de Gansos (GoAdV);
Adenovrus bovino (BAdV-D e BAdV-E); Adenovrus de patos A (DAdV-A); Adenovrus
ovino D (OAV-D) e Adenovrus de perus A (TAdV-A).

Famlia Papillomaviridae

Famlias virais de importncia em medicina veterinria 63


U2

Caractersticas dos agentes virais: vrus-DNA de fita dupla circular, simetria


icosadrica, no possuem envelope e a replicao ocorre no ncleo. Causa
papilomas e fibropapilomas em animais domsticos.

Principais agentes virais de interesse veterinrio: Papilomavirus do alce


europeu; Papilomavirus do cervo; Papilomavirus ovino 1; Papilomavirus bovino 1
e 2; Papilomavirus bovino 5; Papilomavirus equino 1; Papilomavirus do Chaffinch;
Papilomavirus dos papagaios; Papilomavirus do coelhos cauda-de-algodo;
Papilomavirus oral dos coelhos; Papilomavirus oral canino; Papilomavirus felino;
Papilomavirus bovino 3 e Papilomavirus oral dos hamsters.

Famlia Poxviridae

Caractersticas dos agentes virais: vrus-DNA, envelopados, simetria complexa e


replicam-se no citoplasma. Caracterizado por leses na pele dos aninais infectados.

Principais agentes virais de interesse veterinrio: Vrus da vaccnia; Vrus da


varola bovina; Vrus da varola dos camelos; Vrus Uasin Gishu; Vrus da varola
dos macacos; Vrus da ectromelia; Vrus da varola dos ovinos; Vrus da varola dos
caprinos; Vrus da doena da pele nodulosa; Vrus da varola dos sunos; Vrus da
varola (bouba) aviria; Vrus do mixoma; Vrus do molluscum contagiosum; Vrus
yabapox e vrus tanpox; Vrus da pseudovarola bovina; Vrus da estomatite papular
bovina; Vrus orf (ectima contagioso); Vrus Ausdik e Parapoxvrus das baleias.

Pesquise mais
Pesquise mais! Leia o artigo sobre Ectima contagioso em ovinos e
caprinos no semi-rido da Paraba.

Disponvel em: <http://www.scielo.br/pdf/pvb/v28n3/02.pdf>. Acesso


em: 19 jun. 2016.

Famlia Parvoviridae

Caractersticas dos agentes virais: vrus-DNA de fita dupla simples, no-


envelopados, simetria icosadrica e a replicao ocorre no ncleo celular.
Caracterizado por leses na pele em aninais infectados.

Principais agentes virais de interesse veterinrio: Parvovirus de galinha (CHPV);


Vrus da panleucopenia felina (FPLV); Parvovirus canino (CPV); Vrus da enterite das
martas (MEV); Parvovirus dos mos-peladas (RPV); Vrus minuto dos camundongos
(MMV ou MVM); Parvovirus suno (PPV); Parvovirus de gansos (GPV); Parvovirus de
patos Muscovy (MDPV); Parvovirus bovino (BPV); Vrus minuto canino (CNMV) e
Aleutian mink disease virus (AMDV).

64 Famlias virais de importncia em medicina veterinria


U2

Agora, vamos conhecer a distribuio geogrfica, as espcies animais


acometidas, a sintomatologia, as leses, o tratamento e os mtodos de diagnstico
de algumas doenas causadas por agentes virais da classe viral III.

Panleucopenia Felina

O vrus da panleucopenia felina est classificado no gnero parvovrus, da


subfamlia Parvovirinae, pertencente famlia Parvoviridae. Doena altamente
contagiosa, com incidncia mundial, acomete principalmente gatos, porm pode
infectar outros animais pertencentes famlia Felidae. A infeco pode ocorrer
por via oral ou respiratria. O perodo de incubao de aproximadamente 4 dias.
Os sintomas so caracterizados por febre, depresso, anorexia, vmito, morte
neonatal, anormalidades congnitas no sistema nervoso central (ataxia cerebelar),
quadro clnico que pode levar morte do animal. A viremia permanece de 1 a 7 dias
aps infeco do animal. Na urina, o agente viral encontrado entre o segundo ao
vigsimo segundo dia aps a infeco. Enquanto que, nas fezes, o vrus est presente
aps o vigsimo segundo dia. Leses macro e microscpicas so observadas no
intestino (edema, dilatao, necrose do epitlio das criptas intestinais) e no timo
(reduo do tamanho). Animais infectados produzem anticorpos aps seis a sete
dias da infeco, os quais podem persistir por anos. No h tratamento especfico
e eficaz. Na forma preventiva, vacinas esto disponveis comercialmente.

Diagnstico laboratorial: deteco de antgenos virais pelos mtodos ELISA ou


hemaglutinao; Corpsculos de incluso podem ser observados nas clulas das
criptas.

Parvovirose Canina

O parvovirus canino est classificado no gnero parvovrus, da subfamlia


Parvovirinae, pertencente famlia Parvoviridae. A doena est distribuda
mundialmente. O vrus infecta ces e membros da famlia Canidae (ex. lobos, raposas,
coiotes, ces do mato). A transmisso ocorre por meio de alimentos e gua, os
quais foram contaminados com fezes. A doena caracterizada por vmito, diarreia,
anorexia, febre, depresso, desidratao e linfopenia. Os locais de replicao viral
so: timo, tonsilas, linfonodos mesentricos, retrofarngeos e bao. A disseminao
do agente viral ocorre a partir do sexto dia e sua excreo detectvel a partir do
terceiro dia, com pico no stimo dia. Leses so observadas, principalmente, no
jejuno e no leo na forma de doena entrica grave. No intestino delgado, pode-
se observar atrofia das vilosidades do epitlio e necrose de criptas epiteliais. Ces
infectados pelo vrus podem desenvolver anticorpos de longa durao, que podem
persistir por at 24 meses. O tratamento baseia-se na reposio de lquido corpreos,
correo eletroltica e reduo da acidose. Na forma preventiva, a desinfeco do
ambiente deve ser estabelecida e associada com a vacinao dos animais (vacinas
inativadas requerem reforo entre 2 e 3 semanas).

Famlias virais de importncia em medicina veterinria 65


U2

Diagnstico laboratorial: Demonstrao do vrus ou antgenos nas fezes


utilizando microscopia eletrnica; ensaio imunoenzimtico ELISA, hemaglutinao
ou neutralizao viral.

Sem medo de errar

Mediante os contedos abordados nesta seo, vamos resolver as questes da


situao-problema. Vamos l!

Para compreender melhor a situao apresentada, vamos recapitular os


principais pontos da situao-problema. Recentemente, o Laboratrio de anlises
clnicas do Hospital Veterinrio recebeu amostras para diagnstico laboratorial. O
mdico veterinrio encaminhou um laudo tcnico anexo s amostras, contendo
poucas informaes do atendimento clnico e indicando a suspeita de um agente
viral da Anemia Infecciosa Equina. De acordo com o laudo tcnico, as amostras
foram coletadas de um equino, com aproximadamente trs anos de idade.
O tcnico procedeu com a anlise do material biolgico, utilizando a tcnica
de imunodifuso em gel de gar (Teste de Coggins). Mediante as informaes
apresentadas, e com auxlio dos contedos abordados nesta seo, vamos
responder s questes do caso clnico.

Quais as espcies animais que o agente viral pode acometer?

O vrus acomete equinos, pneis, asininos e muares.

Descreva a sintomatologia da Anemia Infecciosa Equina.

A sintomatologia caracterizada por febre, anemia, anorexia, trombocitopenia,


sudorese profusa e secreo no focinho, durante 3 a 5 dias. Na doena subaguda,
observa-se fraqueza, depresso do sistema nervoso central, apatia, anemia, edema,
petquias e ataxia. Na forma crnica, a anemia infeciosa equina denominada
como Febre do pntano, os sintomas so semelhantes aos da apresentao
subaguda, porm, mais brandos e dificilmente leva morte do animal. Os equinos
podem carrear o vrus sem apresentar sintomas. O desencadeamento dos sintomas
pode ocorrer aps o animal passar por algum tipo de estresse, ou com a utilizao
de drogas imunossupressoras.

Descreva a leso que ocorre nos componentes do sangue que desencadeia


a anemia nos animais infectados.

A replicao do vrus resulta em hemlise das hemcias e eritrofagocitose,


causada por macrfagos, o que desencadeia a anemia. Tambm se observa
comprometimento do metabolismo do ferro.

66 Famlias virais de importncia em medicina veterinria


U2

Faa voc mesmo

Agora, faa voc mesmo! Pesquise mais sobre as doenas dos


agentes virais que no foram abordados nesta seo e que pertencem
classificao I, II e III. Utilize o material de apoio: QUINN, P. J.
Microbiologia veterinria e doenas infecciosas. Porto Alegre: Artmed,
2005. HIRSH, D. C; ZEE, Y. C. Microbiologia veterinria. Rio de Janeiro:
EGK, 2003.

Avanando na prtica

Panleucopenia Felina

Recentemente, o Laboratrio de anlises clnicas do Hospital Veterinrio


atendeu um proprietrio de um gato, que solicitava um exame laboratorial para
diagnstico de uma agente viral. De acordo com o proprietrio, o seu animal j
havia sido atendido por um mdico veterinrio autnomo, o qual recomendou
um tratamento de suporte por um determinado perodo. O veterinrio suspeitou
de um agente viral, porm, ele no realizava exames laboratoriais para determinar
um diagnstico definitivo. O veterinrio, plantonista da clnica, procedeu com o
atendimento, constatando febre, vmito e depresso. Durante o atendimento
clnico, o animal teve vmito. Suspeitando de uma agente viral, o veterinrio
procedeu com a coleta do contedo do vmito, sangue e fezes do animal para
realizao do teste de diagnstico.

Descrio da situao-problema

Em continuidade com o relato de caso, o tcnico laboratorial recebeu o material


biolgico para a realizao do teste de diagnstico. O veterinrio indicou o teste
imunocromatogrfico para deteco do agente viral da Panleucopenia Felina. O
exame laboratorial evidenciou resultado positivo para o Vrus da panleucopenia
felina (FPLV). Para compreender melhor o caso clnico, e com auxlio dos contedos
abordados nesta seo, responda s seguintes questes.

Qual o perodo de viremia do agente viral e o tempo para a sua deteco


na urina e nas fezes do animal infectado?

Quais as leses (macro e microscpicas) observadas no intestino de animais


infectados pelo agente viral em questo?

Resoluo da situao-problema

Qual o perodo de viremia do agente viral e o tempo para a sua deteco

Famlias virais de importncia em medicina veterinria 67


U2

na urina e nas fezes do animal infectado?

A viremia permanece de 1 a 7 dias aps infeco do animal. Na urina, o agente


viral encontrado entre o segundo ao vigsimo segundo dia aps a infeco,
enquanto que nas fezes o vrus est presente aps o vigsimo segundo dia.

Quais as leses (macro e microscpicas) observadas no intestino de animais


infectados pelo agente viral em questo?

As leses macro e microscpicas so observadas no intestino (edema, dilatao,


necrose do epitlio das criptas intestinais) e no timo (reduo do tamanho).

Lembre-se

O vrus da panleucopenia felina um vrus-DNA de fita dupla simples,


no-envelopado, de simetria icosadrica e a replicao ocorre no
ncleo celular.

Faa valer a pena!

1. A febre aftosa causada por um agente viral pertencente ao gnero


Aphtovirus, da famlia Picornaviridae. Com relao febre aftosa,
correto afirmar:
I. A febre aftosa endmica e est presente no Continente Africano, na
Amrica do Sul, na sia e algumas regies da Europa.
II. Na Amrica do Sul, esto presentes os sorotipos sia1, O, A e C.
III. Na frica, esto presentes os sorotipos SAT1, 2, 3, A, O e C.
IV. Na sia, esto presentes os sorotipos A, O, C e SAT1.
V. O vrus acomete espcies animais de casco biungulados, como
bovinos, bubalinos ovinos, caprinos, sunos, ruminantes silvestres.
Assinale a alternativa correta.
a) Somente as afirmativas I, II e IV so corretas.
b) Somente as afirmativas I, III e V so corretas.
c) Somente as afirmativas II, III e IV so corretas.
d) Somente as afirmativas III, IV e V so corretas.
e) Somente as afirmativas II, IV e V so corretas.

68 Famlias virais de importncia em medicina veterinria


U2

2. O agente viral vrus da doena vesicular dos sunos pertence ao


gnero ______________, da famlia ______________. Esse vrus est
presente em reas de suinocultura, e, alm de sunos, o vrus pode
acometer ovinos, camundongos e seres humanos. A sintomatologia
semelhante da ___________, do __________________ e da
______________________.
Enunciado: Assinale a afirmativa que completa a sequncia correta das
lacunas.
a) Enterovirus, Picornaviridae, coronavirus respiratrio suno, exantema
vesicular suno e estomatite vesicular suna.
b) Enterovirus, Picornaviridae, febre aftosa, coronavirus respiratrio
suno, exantema vesicular suno e estomatite vesicular suna e peste
suna clssica.
c) Enterovirus, Picornaviridae, febre aftosa, exantema vesicular suno e
adenovrus suno.
d) Enterovirus, Picornaviridae, febre aftosa, coronavirus respiratrio
suno, exantema vesicular suno e estomatite vesicular suno e
estomatite vesicular suna.
e) Enterovirus, Picornaviridae, febre aftosa, exantema vesicular suno e
estomatite vesicular suna.

3. O vrus da raiva est classificado no gnero Lyssavirus, da famlia


Rhabdoviridae. Os primeiros sinais clnicos so observados aps a
leso neural, a qual causada pela replicao da partcula vrica. O
quadro clnico caracterizado em trs fases: _________________
(os animais ficam confusos e desorientados), ______________
(aumento de agressividade e hiperexcitabilidade, tendncia de morder)
e _________________ (dificuldade de deglutio, fraqueza, salivao
profusa e mandbula cada).
Assinale a afirmativa que completa a sequncia correta das lacunas.
a) Fase prodrmica, fase furiosa e fase silenciosa.
b) Fase furiosa, fase prodrmica e fase silenciosa.
c) Fase prodrmica, fase silenciosa e fase furiosa.
d) Fase aguda, fase prodrmica e fase silenciosa.
e) Fase silenciosa, fase prodrmica e fase furiosa.

Famlias virais de importncia em medicina veterinria 69


U2

70 Famlias virais de importncia em medicina veterinria


U2

Referncias

ALMEIDA, M. S. et al. Visualizao de Incluso Viral em Hemcias Relato de caso.


In. IX Jornada de ensino, pesquisa e extenso. Pernambuco: Universidade Federal
Rural de Pernambuco, 2009.
BERSANO, J. G.; VILLALOBOS, E. M. C.; BATLOUNI, S. R. Pesquisa do vrus da peste
suna clssica em sunos sadios abatidos em matadouros no estado de So Paulo.
Arquivos do Instituto Biolgico, So Paulo, v. 68, n. 1, p. 9-12, 2001.
DE ALMEIDA, S. Cincias farmacuticas: micologia. Rio de Janeiro: EGK, 2008.
ENGELKIRK, P. G. B. Microbiologia para as cincias da sade. 9. ed. Rio de Janeiro:
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FLORES, E. F. Virologia veterinria: virologia geral e doenas vricas. 2. ed. Santa
Maria: Ed. da UFSM, 2012. 1008 p.
GREENE, C. Doenas infecciosas em ces e gatos. 4. ed. So Paulo: Roca, 2015.
HIRSH, D. C.; ZEE, Y. C. Microbiologia veterinria. Rio de Janeiro: EGK, 2003.
JAPOLLA, G. et al. Teste imunocromatogrfico de fluxo lateral: uma ferramenta
rpida de diagnstico. Enciclopdia biosfera, Centro Cientfico Conhecer,
Goinia, v.11, n.22, p.232, 2015.
LYRA, T. M. P.; SILVA, J. A. The foot-and-mouth disease in Brazil, 1960-2002. Arquivo
Brasileiro de Medicina Veterinria e Zootecnia, v. 56, n. 5, p. 565-576, 2004.
MADIGAN, M. T. Microbiologia de Brock. 12. ed. Porto Alegre: Artmed, 2010. 1160
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MEINERZ, A. R. M. et al. Frequncia do vrus da leucemia felina (FeLV) em felinos
domsticos (Felis catus) semidomiciliados nos municpios de Pelotas e Rio Grande.
Cincia Animal Brasileira, v. 11, n. 1, p. 90-93, 2010.
PANDEY, R. Microbiologia veterinria: perspectivas clnicas e moleculares. So
Paulo: Roca, 1994.
PLAYFAIR, J.; CHAIN, B. M. Imunologia bsica: guia ilustrado de conceitos
fundamentais. So Paulo: Manole, 2013. 112 p.
QUINN, P. F. Microbiologia veterinria e doenas infecciosas. Porto Alegre:
Artmed. 2005.

Famlias virais de importncia em medicina veterinria 71


U2

SANTOS, N. S. Virologia humana. 3. ed. Rio de Janeiro: EGK, 2015.


ZAITZ, C. Compndio de micologia mdica. 2. ed. Rio de Janeiro: EGK, 2010.

72 Famlias virais de importncia em medicina veterinria


LIVRO

UNIDADE 

Microbiologia
Weterinria
Bplicada
Bacteriologia especial
aplicada Medicina
Veterinria

Fernando Zawadzki
2016 por Editora e Distribuidora Educacional S.A

Todos os direitos reservados. Nenhuma parte desta publicao poder ser reproduzida
ou transmitida de qualquer modo ou por qualquer outro meio, eletrnico ou mecnico,
incluindo fotocpia, gravao ou qualquer outro tipo de sistema de armazenamento e
transmisso de informao, sem prvia autorizao, por escrito, da Editora e
Distribuidora Educacional S.A.

2016
Editora e Distribuidora Educacional S. A.
Avenida Paris, 675 Parque Residencial Joo Piza
CEP: 86041 -100 Londrina PR
e-mail: editora.educacional@kroton.com.br
Homepage: http://www.kroton.com.br/
Sumrio

Unidade 3 | Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria 5

Seo 3.1 - Morfologia e identificao das bactrias 7


Seo 3.2 - Classificao das bactrias I 19
Seo 3.3 - Classificao das bactrias II 31
Seo 3.4 - Classificao das bactrias III 41
Unidade 3

Bacteriologia especial aplicada


Medicina Veterinria
Convite ao estudo
Ol, aluno! Seja bem-vindo Unidade 3 deste livro didtico!

Animais de companhia e de produo esto sujeitos a infeces


causadas por bactrias que desencadeiam enfermidades, interferem no
bem-estar do animal e causam perdas econmicas. Portanto, em uma
sociedade cada vez mais exigente, conhecer as principais bactrias
que causam doenas nos animais de fundamental importncia para
o Mdico Veterinrio, bem como aplic-los na preveno, controle e
tratamento das doenas infecciosas.

Competncia geral

Conhecer os principais microrganismos de interesse em medicina


veterinria (bactrias, fungos e vrus), enfocando particularmente a
taxonomia, caractersticas morfolgicas, ecolgicas, de sensibilidade,
resistncia e identificao laboratorial.

Competncia tcnica

Conhecer e compreender as particularidades das bactrias e processos


infecciosos de importncia clnica para a medicina veterinria.

Objetivos

O aluno dever:

 Conhecer a morfologia das bactrias.

 Conhecer o procedimento de identificao das bactrias.

 Conhecer os agentes na classificao das bactrias I (Famlia


Enterobacteriaceae).

 Conhecer os agentes na classificao das bactrias II (Gneros


Bacillus, Burkholderia e Borrelia).
U3

 Conhecer os agentes na classificao das bactrias III (Gneros


das bactrias: Staphylococcus, Streptococcus, Corynebacterium,
Listeria, Clostridium, Mycobacterium, Mycoplasma, Leptospira,
Brucela, Pasteurela e Pseudmonas).

Para auxiliar o contedo das competncias que sero atribudas nesta


unidade, vamos apresentar uma Situao da Realidade Profissional de um
atendimento clnico realizado por um mdico veterinrio. Nesta situao,
aproximaremos os contedos tericos com a prtica proposta nesta unidade.
Leia com ateno o atendimento clnico realizado pelo mdico veterinrio.

O laboratrio de anlises clnicas do Hospital Veterinrio recebe


diariamente vrios materiais biolgicos para serem analisados. O tcnico
laboratorial relata que a maioria das amostras que chegam ao laboratrio
esto em condies adequadas (identificadas e armazenadas). Ele ressalta
que, desde a eleio do material biolgico a ser coletado no campo
(materiais esterilizados), seu acondicionamento em frascos adequados,
mtodo de conservao adotado para o transporte das amostras at
a chegada no Laboratrio, possui grande relevncia para obter bons
resultados durante a anlise laboratorial. De acordo com o tcnico,
a demonstrao de agentes bacterianos mediada por tcnicas de
cultivo, colorao de esfregaos, mtodos moleculares e imunolgicos.
Mediante a prestao de servios do laboratrio vamos acompanhar
diferentes anlises laboratoriais e seus respectivos casos clnicos.

Vamos comear os estudos?

Boa sorte!

6 Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria


U3

Seo 3.1

Morfologia e identificao das bactrias

Dilogo aberto

Ol, aluno! Seja bem-vindo seo de estudos deste livro didtico!

Nesta seo estudaremos a morfologia e os procedimentos para identificao


das bactrias. Para melhor compreender o contedo abordado, vamos acrescentar
informaes na situao-problema referente ao relato de caso apresentado no
item Convite ao estudo, dessa forma, voc participar indiretamente na resoluo
do caso.

Recentemente, o professor da disciplina de microbiologia se direcionou ao


laboratrio de anlises clnicas do Hospital Veterinrio com os alunos para realizar
uma aula prtica, na qual os alunos realizaram a tcnica de colorao de Gram
(contedo aprendido em aula terica). O tcnico laboratorial preparou as colnias
bacterianas para serem utilizadas a partir da tcnica de cultivo em meio de gar
sangue. Na tcnica de cultivo, amostras de secrees foram coletados de animais
que estavam sendo atendidos no Hospital Veterinrio e que apresentavam um
quadro clnico de infeco na pele. Com objetivo de identificar e diferenciar uma
bactria Gram-positiva de uma Gram-negativa, os alunos procederam com a
tcnica e interpretao dos resultados.

Mediante as informaes apresentadas na situao e com auxlio dos contedos


abordados nesta seo, responda as questes para a resoluo do caso clnico:

 Com relao s bactrias Gram-positivas ou Gram-negativas, cite as


principais estruturas (externas e internas) e componentes importantes que
esto presentes nesses microrganismos.

 Cite as principais diferenas entre as bactrias Gram-positivas e Gram-


negativas.

 Cite as quatro etapas da tcnica de colorao Gram.

Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria 7


U3

No pode faltar

Prezado aluno, nesta seo comearemos a estudar a morfologia e os


procedimentos para identificao das bactrias. Vamos l!

Introduo a bacteriologia

Em 1673, Anton van Leeuwenhoek observou pela primeira vez microrganismos


vivos, sendo considerado o pai da Bacteriologia e da Protozoologia. Leeuwenhoek
polia pequenas lentes de vidro e as fixava em estruturas metlicas, o que possibilitou
ampliar um objeto de 200 a 300 vezes. Leeuwenhoek relatava suas observaes
em cartas, descrevendo a presena de uma ampla variedade de criaturas vivas
em diferentes materiais observados. A associao desses microrganismos com
doenas infecciosas foi descrita nos trabalhos de Louis Pasteur e Robert Koch,
no final do sculo XIX. Durante dois sculos de estudos, os pesquisadores Louis
Pasteur e John Tyndall comprovaram que a vida s pode surgir a partir de
vida preexistente (teoria denominada de biognese). Louis Pasteur contribuiu
significativamente para o desenvolvimento da microbiologia. Ele identificou formas
de vida que se desenvolviam em ambiente ausente de oxignio, classificando os
microrganismos dependentes de oxignio como aerbios e os microrganismos
no dependentes como anaerbios. Em 1884, Robert Koch e colaboradores
publicaram um procedimento experimental para comprovar que um determinado
microrganismo a causa de uma doena infecciosa especfica. Esse procedimento
ficou conhecido como Postulados de Koch, o qual utilizado at os dias de hoje.

Reflita

importante ressaltar que nem todas as doenas so causadas por


microrganismos.

Morfologia e arranjo bacteriano

As bactrias so microrganismos microscpicos que variam de 0,2 a 2,0m de


dimetro por 2 a 8m de comprimento. As bactrias tm duas formas bsicas: cocos
(esfricos) e bacilos (formato de basto e de espiral). Os arranjos dos cocos podem
ser descritos em diplococos, estreptococos, ttrades, sarcinas e estafilococos.
J os bacilos tm bacilo isolado, diplobacilos, estreptobacilos e cocobacilos. As
bactrias que apresentam formato de bastes curvos so denominadas de vibries,
as que apresentam forma helicoidal so denominadas de espirilos (movem-se com
auxlio de filamentos axiais) e as que apresentam formato helicoidal e flexvel so
denominadas de espiroqueta.

As bactrias possuem estruturas externas, como glicoclice, flagelos, filamentos

8 Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria


U3

axiais, fmbrias e pili. O glicoclice um componente importante para auxiliar as


bactrias a se fixarem no ambiente-alvo ou umas com as outras, que so constitudas
de polissacardeos e polipeptdios, formando uma superfcie constituda de cpsula.
Os flagelos tm uma estrutura helicoidal semirrgida que auxilia a clula a se mover
de acordo com a rotao (sentido horrio ou anti-horrio) do corpo basal. Os
flagelos podem ser peritrqueos (presentes em toda a clula) ou polares (presentes
nos polos das clulas). Quando polar, os flagelos podem ser classificados como
nonotrqueo (presena de apenas um nico flagelo), lofotrqueo (presena de
vrios flagelos) ou anfitrqueo (presena de flagelos em ambas extremidades). Os
flagelos so constitudos de trs componentes bsicos: filamento (constitudo pela
protena globular flagelina), gancho (poro ligeiramente mais espessa sobre a
base do filamento) e corpo basal (ancora o flagelo parede celular e membrana
plasmtica). As bactrias que no tm flagelo so denominadas de atrqueas. Os
filamentos axiais ou endoflagelos auxiliam as bactrias a se deslocarem. As fmbrias
e pili so apndices (semelhantes a pelos) menores que os flagelos. Os apndices
so constitudos por uma protena denominada de pilina, cuja funo auxiliar na
fixao e transferncia de DNA (cido desoxirribonucleico) e na constituio dos
biofilmes. Em relao ao pili, estas estruturas so mais longas que as fimbrias e a
clula bacteriana apresenta apenas uma ou duas unidades por clula bacteriana.

A parede celular das bactrias (Gram-positivas e Gram-negativas) constituda


por uma camada de peptideoglicanos,denominada de murena, com a funo
de conferir proteo clula. Estes peptideoglicanos so constitudos por
dissacardeos (monossacardeos: N-actilglicosamina e cido N-acetilmurmico)
que esto ligados por polipeptdeos. Porm, existem diferenas entre as bactrias
Gram-positivas e Gram-negativas. Bactrias Gram-positivas coram-se de violeta-
escuro ou prpura na tcnica de colorao de Gram; possuem vrias camadas
de peptideoglicana; esto presente nos cidos teicoicos; so ausentes de espao
periplasmtico e membrana externa; no contm contedo lipopolissacardeo;
o contedo de lipdeos baixo; possuem dois anis no corpo basal; produzem
exotoxinas; possuem alta resistncia ruptura fsica e alta resistncia ao
ressecamento. J as bactrias Gram-negativas coram-se de rosa ou vermelho na
tcnica de colorao de Gram; possuem uma fina camada de peptideoglicana;
ausncia do cido teicoico; possuem espao periplasmtico e membrana externa;
possuem alto contedo lipopolissacardeo, lipdeos e lipoprotenas; possuem
quatro anis no corpo basal; produzem endotoxinas e exotoxinas; possuem baixa
resistncia ruptura fsica e ao ressecamento.

Entre essas estruturas internas esto a membrana plasmtica, o citoplasma,


o nucleoide, os ribossomos e outras estruturas, que desempenham papel
importante para a sobrevivncia da bactria. A membrana plasmtica est presente
no interior da parede celular, que reveste o citoplasma. Sua constituio
basicamente de fosfolipdios e protenas. O citoplasma est presente no interior

Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria 9


U3

da membrana plasmtica e constitudo por, aproximadamente, 80% de gua e


outros componentes, como protenas enzimticas, lipdeos, carboidratos e ons
inorgnicos. No seu interior consta uma rea nuclear, ribossomos e depsitos de
reserva, denominados de incluses. No nucleoide est presente a molcula de DNA
(fita dupla, contnua e arranjada de forma circular), denominado de cromossomo
bacteriano. O cromossomo carrega toda informao gentica da clula
bacteriana, bem como suas funes celulares. Os ribossomos funcionam como
locais de sntese proteica e esto presentes no citoplasma da clula bacteriana
(procaritica). Os ribossomos contm duas subunidades de RNA, denominado de
RNA ribossmico.

Os endsporos so clulas desidratadas (ocorre principalmente nas bactrias


Gram-positivas) com paredes espessas para sobreviver em exposio de alta
temperatura, falta de gua, radiao e substncias qumicas. Seu processo de
formao se origina com a escassez de nutrientes, sendo denominado de
esporulao ou esporognese.

Assimile

Altamente desidratados, os endsporos podem permanecer dormentes


por milhares de anos, os quais voltam atividade biolgica (denominada
de germinao) sob um processo de leso fsica ou qumica sobre a
capa de protena, assim, permite penetrao da gua e o metabolismo
se inicia.

Caractersticas tintoriais e bioqumicas das bactrias

A visualizao de microrganismos Gram-positivos e Gram-negativos realizada


com auxlio de tcnicas de colorao. Anterior ao processo de colorao, os
microrganismos devem ser fixados em uma lmina de microscpio. A colorao
de bactrias se baseia em dois tipos de corantes, os quais esto classificados como
corantes cidos e corantes bsicos. A diferena entre os entre eles a presena
de ons positivos (corantes bsicos) e ons negativos (corantes cidos). Dentre os
corantes bsicos e cidos esto o cristal violeta, o verde de malaquita, a safranina e
o azul de metileno. Dentre as tcnicas de colorao esto a colorao lcool-cido
resistente (corar as clulas que no so lcool-cidas); colorao negativa para
cpsulas; colorao para endsporos (tcnica de Schaeffer-Fulton) e colorao de
flagelos (utiliza-se um mordente com o corante carbolfucsina).

Tcnica de colorao de Gram

Essa tcnica aplicada em bactrias Gram-positivas e Gram-negativas. O


procedimento compreende quatro etapas: a) o esfregao fixado com auxlio

10 Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria


U3

de calor ou substncia qumica, em seguida, submetido em um corante bsico


(corante de violeta); b) espera-se um curto perodo de tempo (1 minuto) para,
depois, lavar o esfregao com gua e aplicar o lugol (mordente). Aps a adio
do lugol, as bactrias Gram-positivas e Gram-negativas aparecem coradas na cor
prpura ou violeta escuro; c) em seguida, lava-se com gua e, posteriormente,
adiciona-se lcool ou lcool-acetona, o qual ir remover a colorao prpura
de algumas espcies bacterianas; d) ento, o esfregao lavado com gua para
retirada do lcool. Por fim, o esfregao submetido ao corante de safranina (cor
vermelha), lavado com gua e seco ao ar, para posterior anlise no microscpio.

Ambas as bactrias (Gram-positivas e Gram-negativas) retm o corante cristal


de violeta e lugol, os quais vo gerar uma cor violeta escuro ou prpura. Com a
aplicao do lcool na etapa subsequente, as estruturas que permanecem com
a cor violeta escuro ou prpura so classificadas como Gram-positivas e as que
perdem a cor so classificadas como Gram-negativas. Assim, a aplicao do
corante safranina ir corar a bactrias Gram-negativas de rosa. As bactrias Gram-
positivas no so afetadas pelo corante safranina, em funo de estarem com
corante prpura e iodo.

Exemplificando

Essa diferenciao de colorao das bactrias Gram-positivas e Gram-


negativas est relacionada parede celular de peptideoglicano (Gram-
positivas possuem parede mais espessa) e presena de uma camada
de lipopolissacardeo (presente em bactrias Gram-negativas).

Fatores de virulncia bacteriana

A virulncia bacteriana est relacionada com a sua habilidade de invadir e


produzir a doena no hospedeiro. A infeco por bactrias pode ocorrer de forma
exgena (transmisso direta ou indireta a partir de um animal ou do ambiente)
ou endgena (desencadeado em animais sob estresse). As vias de infeco no
hospedeiro podem ocorrer pelo tecido epitelial (pele), pelas membranas mucosas
(que revestem a conjuntiva, o trato gastrointestinal, urogenital e respiratrio), pelo
umbigo e canal da mama. Sendo que o trato gastrointestinal e respiratrio so as
principais portas de entrada.

Exemplificando

Um ponto determinante para que ocorra a infeco o nmero de


bactrias invasoras, o qual determinante no desenvolvimento da
doena. A virulncia de um microrganismo pode ser expressa como
DI50 (dose infectante para 50% de uma amostra de uma populao).

Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria 11


U3

Colonizao e crescimento

A colonizao se refere replicao da bactria na clula hospedeira. Um fator


limitante para o crescimento bacteriano a deficincia de ferro, sendo que sua maior
parte presente no organismo animal no est disponvel para a bactria, em funo
da forma em que o mineral se encontra ligado (lactoferrina e transferrina). Assim,
as bactrias ativam mecanismos para obter o ferro, causando lise de hemcias
com auxlio de siderforos. As bactrias apresentam tambm outras formas que a
auxiliam em sua fixao nos tecidos, esse mecanismo denominado de aderncia
ou adeso. Todo esse processo mediado por molculas (adesinas ou ligantes) que
se ligam receptores presentes na superfcie da clula de determinados tecidos
do hospedeiro. Outros fatores podem contribuir com a virulncia das bactrias,
dentre eles: a presena de capsula, os componentes da parede celular, a presena
de enzimas e variao antignica.

Disseminao no hospedeiro

A disseminao da bactria no organismo depender dos mecanismos de


defesa do hospedeiro. Algumas delas permanecem no local da infeco primria,
podendo ocorrer disseminao localizada. Esta pode ser facilitada com a presena
de leses no tecido do hospedeiro. A disseminao para organismo ocorre pela
corrente sangunea, pelo plasma ou em fagcitos. Quando ocorre septicemia,
as bactrias se multiplicam e persistem na corrente sangunea, levando ao
desenvolvimento de doena sistmica. Fatores que podem ser determinantes e
influenciar na infeco bacteriana:

a) Fatores determinantes relacionados ao patgeno bacteriano (virulncia;


estabilidade no meio ambiente; rota de entrada; dose infectiva; tropismo tecidual;
suscetibilidade s defesas do hospedeiro.

b) Fatores determinantes relacionados ao hospedeiro (espcie animal; raa;


idade; sexo; fatores genticos; fatores fisiolgicos; imunocompetnica).

c) Fatores modificantes (estresse ambiental; deficincia nutricional; leso


tecidual; imunossupresso; disfuno metablica; doena intercorrente).

Da mesma forma, as bactrias podem causar leses teciduais com auxlio


de exotoxinas e endotoxinas. As exotoxinas podem ser produzidas por bactrias
Gram-positivas ou Gram-negativas, enquanto que as endotoxinas esto presentes
na membrana externa das bactrias Gram-negativas, as quais so liberadas quando
a clula lisada.

12 Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria


U3

Pesquise mais
Agora com voc! Pesquise sobre Cultivo, preservao e inativao
das bactrias. Consulte o material de apoio:

QUINN, P. J. et al. Microbiologia veterinria e doenas infecciosas.


So Paulo: Artmed Editora, 2005.

Sem medo de errar

Para compreender melhor a situao apresentada, vamos recapitular os


pontos que foram analisados anteriormente. O laboratrio tem como objetivo
prestar servios aos profissionais da rea veterinria, a fim de identificar agentes
patolgicos, utilizando diferentes mtodos de diagnsticos para auxiliar na
resoluo de casos clnicos. Mediante as informaes apresentadas na situao-
problema e com auxlio dos contedos abordados nesta seo, responda s
questes para a resoluo do caso clnico.

 Com relao s bactrias Gram-positivas ou Gram-negativas, cite as


principais estruturas (externas e internas) e componentes importantes que
esto presentes nesses microrganismos.

Dentre as estruturas externas esto: o glicoclice, os flagelos, os filamentos, as


axiais, as fmbrias, a pili e a parede celular. Dentre as estruturas internas esto: a
membrana plasmtica, o citoplasma, o nucleoide, os ribossomos, as incluses e
os endsporos.

 Cite as principais diferenas entre as bactrias Gram-positivas e Gram-


negativas.

Bactrias Gram-positivas: na tcnica de reao de Gram coram-se de violeta-


escuro ou prpura; possuem vrias camadas de peptideoglicana; esto presentes
nos cidos teicoicos; so ausentes de espao periplasmtico e membrana externa;
no contm contedo lipopolissacardeo; o contedo de lipdeos baixo; possuem
dois anis no corpo basal; produzem exotoxinas; possuem alta resistncia ruptura
fsica e alta resistncia ao ressecamento.

Bactrias Gram-negativas: na tcnica de reao de Gram coram-se de rosa


ou vermelho; possuem uma fina camada de peptideoglicana; ausncia do cido
teicoico; possuem espao periplasmtico e membrana externa; possuem alto
contedo lipopolissacardeo, lipdeos e lipoprotenas; possuem quatro anis no
corpo basal; produzem endotoxinas e exotoxinas; possuem baixa resistncia
ruptura fsica e ao ressecamento.

Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria 13


U3

 Cite as quatro etapas da tcnica de colorao Gram.

O procedimento compreende quatro etapas: a) o esfregao fixado com


auxlio de calor e submetido em um corante bsico (corante de violeta); b) espera-
se um curto perodo de tempo e aplica-se ido (mordente). Aps lavagem do iodo,
bactrias Gram-positivas e Gram-negativas aparecem coradas na cor prpura ou
violeta escuro; c) nesta etapa, o esfregao lavado em lcool ou lcool-acetona, o
qual ir remover a colorao prpura de algumas espcies bacterianas; d) ento, o
esfregao lavado para ser retirado o lcool. Em seguida, o esfregao submetido
ao corante de safranina (cor vermelha), lavado e seco com papel, para posterior
anlise no microscpio.

Ateno

As bactrias so microrganismos microscpicos que variam de 0,2 a


2,0m de dimetro por 2 a 8m de comprimento. As bactrias tm
duas formas bsicas: cocos (esfricos) e bacilos (formato de basto e
de espiral).

Avanando na prtica

Carbnculo hemtico

Descrio da situao-problema

Recentemente, o mdico veterinrio de uma cooperativa foi solicitado para fazer


uma visita tcnica em uma propriedade rural que pertence a um dos cooperados.
O proprietrio relatou ao mdico veterinrio que encontrou um bovino morto no
pasto na parte da manh. Durante o exame clnico na parte da tarde, ele observou
que a carcaa j se encontrava em estado de inchao, no encontrou sinais de
picada de cobra, porm, havia sangue escuro no coagulado escorrendo pela
boca e narinas. Suspeitando de carbnculo hemtico, ele coletou amostras de
sangue e recomendou o aterramento da carcaa. De acordo com o mdico
veterinrio, a necropsia no foi realizada para evitar a esporulao e o risco de
contaminao ambiental prolongada. O material coletado foi acondicionado em
recipiente estril e devidamente lacrado para evitar possvel propagao do agente
suspeito. O profissional relatou que o agente suspeito denominado de Bacillus
anthracis (Bacilos Gram-positivos), produz uma toxina complexa que causa edema
(acmulo de fludo) e aumento da permeabilidade vascular (hemorragia extensa)
que leva morte do animal. Mediante as informaes apresentadas e com auxlio
dos contedos abordados nesta seo, responda as questes para a resoluo do
caso clnico.

14 Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria


U3

 Na tcnica de colorao de Gram, explique a diferenciao de colorao


das bactrias Gram-positivas em comparao com as bactrias Gram-
negativas.

 Explique a estrutura da parede celular das bactrias Gram-positivas e das


bactrias Gram-negativas.

Lembre-se

A parede celular das bactrias (Gram-positivas e Gram-negativas)


constituda por uma camada de peptideoglicanos (denominada de
murena) com a funo de conferir proteo clula.

Resoluo da situao-problema

Em continuidade com o relato de caso, como se suspeitava de um agente


bacteriano (Bacillus anthracis), o tcnico laboratorial procedeu com a tcnica de
cultivo (gar-sangue e gar de MacConkey a 37C por 24 a 48 horas) e a tcnica
de Gram, fixando o material em esfregaos e posterior colorao de Gram. A
identificao dos isolados foram baseados na morfologia colonial, na aparncia
microscpica dos esfregaos corados pela tcnica de Gram, pela ausncia de
crescimento em gar de MacConkey. Ambos os testes confirmaram a presena do
agente patolgico, confirmando, assim, que a morte do animal foi desencadeada
pelo agente Bacillus anthracis.

 Na tcnica de colorao de Gram, explique a diferenciao de colorao


das bactrias Gram-positivas em comparao com as bactrias Gram-
negativas.

A diferenciao de colorao das bactrias Gram-positivas e Gram-negativas


est relacionada parede celular de peptideoglicano (Gram-positivas possuem
parede mais espessa) e presena de uma camada de lipopolissacardeo (presente
em bactrias Gram-negativas). Com a aplicao de corante de cristal violeta e o
iodo, forma-se um complexo maior do que a molcula que entrou, impedindo
sua sada desse complexo nas bactrias Gram-positivas (permanecendo a cor
violeta escuro ou prpura), sendo que nas bactrias Gram-negativas a aplicao
do lcool rompe a camada de polissacardeos e o complexo de cristal violeta e
iodo removido da clula.

 Explique a estrutura da parede celular das bactrias Gram-positivas e das


bactrias Gram-negativas.

Nas bactrias Gram-positivas, a parede celular consiste em muitas camadas


de peptideoglicanos. Outros componentes tambm esto presentes na parede

Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria 15


U3

celular, como o cido teicoico, o qual est dividido em duas classes: cido
lipoteicoico (atravessa a camada de peptideoglicana) e o cido teicoico (ligado
camada peptideoglicana). As bactrias Gram-negativas, ao contrrio das bactrias
Gram-positivas, possuem poucas camadas de peptideoglicano, no contm os
cidos teicoicos e apresenta uma membrana externa. Entre a membrana externa
e a membrana plasmtica est presente o periplasma (fludo semelhante a um gel)
no qual se encontra os peptideoglicanos ligados s lipoprotenas. A membrana
externa constituda de uma molcula complexa de lipopolissacardeos (lipdeo
A, um cerne polissacardico e polissacardeo), lipoprotenas e fosfolipdios. Esta
membrana confere proteo bactria contra determinadas sustncias oriundas
do ambiente, por exemplo, penicilina, enzimas digestivas, detergentes, sais biliares
etc. Alm de conferir proteo, na membrana esto presentes canais de porinas
pelos quais so translocados os nutrientes (nucleotdeos, dissacardeos, peptdeos,
aminocidos, vitamina B12 e ferro) para o interior da bactria.

Faa voc mesmo

Agora com voc! Pesquise sobre bactrias. Consulte o material de


apoio:

QUINN, P. J. et al. Microbiologia veterinria e doenas infecciosas.


So Paulo: Artmed Editora, 2005.

Faa valer a pena

1. Em 1973, utilizando um aparato de estrutura metlica e com


pequenas lentes de vidro polidas (hoje conhecido como microscpio)
foi possvel ampliar de 200 a 300 vezes um objeto. Esse instrumento
permitiu, pela primeira vez, visualizar um microrganismo. Quem
considerado o pai da bacteriologia, que visualizou, pela primeira vez,
microrganismos vivos?
Assinale a alternativa correta.
a) Louis Pasteur.
b) John Tyndall.
c) Robert Koch.
d) Anton van Leeuwenhoek.
e Paul Ehrlich.

2. As bactrias so microrganismos microscpicos que variam de

16 Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria


U3

0,2 a 2,0m de dimetro por 2 a 8m de comprimento. As bactrias


possuem duas formas bsicas:__________ (esfricos) e __________
(formato de basto e de espiral). Os arranjos dos __________ podem
ser descritos em diplococos, estreptococos, ttrades, sarcinas e
estafilococos.
Assinale a alternativa correta que completa a ordem das lacunas.
a) Cocos, bacilos e cocos.
b) Bacilos, cocos e glicoclice.
c) Glicoclice, cocos e bacilos.
d) Bacilos, glicoclice e bacilos.
e) Cocos, glicoclice e cocos.

3. Bactrias que apresentam formato de bastes curvos so


denominadas de _________, para as que apresentam forma helicoidal
so denominadas de ___________ (movem-se com auxlio de
filamentos axiais) e as que apresentam formato helicoidal e flexvel so
denominadas de ____________.
Assinale a alternativa correta que completa a ordem das lacunas.
a) Espirilos, vibries e espiroqueta.
b) Vibries, espirilos e espiroqueta.
c) Espiroqueta, vibries e espirilos.
d) Bacilos, espirilos e espiroqueta.
e) Cocos, vibries e espirilos.

Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria 17


U3

18 Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria


U3

Seo 3.2
Classificao das bactrias I

Dilogo aberto

Ol, aluno! Seja bem-vindo seo de estudos deste livro didtico!

Nesta seo, estudaremos a Famlia Enterobacteriaceae e as principais doenas


de importncia na Medicina Veterinria. Para melhor compreender o contedo
abordado, vamos acrescentar informaes situao-problema referente ao relato
de caso apresentado no item Convite ao estudo, dessa forma, voc participar
indiretamente na resoluo do caso.

Recentemente, o laboratrio de anlises clnicas do Hospital Veterinrio recebeu


amostras para diagnstico laboratorial. Em anexo com as amostras, o mdico
veterinrio encaminhou um laudo tcnico contendo informaes detalhadas do
atendimento clnico e indicando a suspeita do agente bacteriano Escherichia coli.
De acordo com o laudo tcnico, as amostras foram coletadas de leites aps
desmame. Durante o exame clnico, o mdico veterinrio observou ataxia, apatia
e edema de face em alguns leites. Em outros, foi observado paralisia, tremores,
convulses e movimento de pedalagem. Mediante as informaes levantadas, o
profissional suspeitou que um agente bacteriano acometia o animal. Em seguida,
ele coletou amostras de secrees com o auxlio de swab estril para possvel
identificao do agente patolgico. De acordo com o tcnico laboratorial, as
amostras recebidas continham material biolgico de secreo.

Mediante as informaes apresentadas e com auxlio dos contedos abordados


nesta seo, responda s questes para a resoluo do caso clnico.

 Com relao ao agente patolgico suspeito Escherichia coli, cite o nome


da famlia bacteriana ao qual pertence.

 Cite as principais estruturas que favorecem a infeco no agente bacteriano


Escherichia coli.

 Cite os mtodos de identificao realizados para diferenciao dos


membros patognicos da famlia em que se enquadra o agente suspeito.

Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria 19


U3

No pode faltar

Prezado aluno, a partir desta seo vamos comear a estudar a morfologia e os


procedimentos para identificao das bactrias. Vamos l!

Famlia Enterobacteriaceae

As enterobactrias so classificadas como bastonetes retos e Gram-negativas.


So microrganismos anaerbios facultativos, no formam esporos, crescem em
meios no enriquecidos, fermentam glicose, aucares, lactose (Escherichia coli),
reduzem nitrato a nitrito, so oxidase-negativas, catalase-postivas e possuem
flagelos peritrqueos. Entre os produtos celulares de interesse mdico veterinrio
esto as endotoxinas e os siderforos. Os membros da famlia Enterobacteriaceae
so indistinguveis em seu aspecto morfolgico.

A Famlia Enterobacteriaceae est distribuda em trs categorias de interesse


veterinrio: patgenos principais: Escherichia (Escherichia coli), Salmonella
(Salmonella Thyphimurium, Salmonella Dublin e Salmonella Enteritidis) e Yersinia
(Yersinia pestis, Yersinia enterocolitica e Yersinia pseudotuberculosis); patgenos
oportunistas: Proteus (Proteus Mirabilis e Proteus vulgaris), Klebsiella (Klebsiella
pneumoniae), Enterobacter (Enterobacter aerogenes), Morganella (Morganella
morganii), Serratia (Serratia marcescens) e Edwardsiella (Edwardsiella tarda) e no
patgenos (isolados em fezes e ambiente), como Erwinia e Hafnia.

Diagnstico: a diferenciao dos membros patognicos pode ser realizada


pelos seguintes mtodos: cultura (meio gar MacConkey, gar verde-brilhante,
substrato/lactose, gar entrico de Hektoen, gar sorbitol MacConkey, gar
xilose lisina deoxicolato, meio de enriquecimento), testes bioqumicos, testes
imunolgicos (sorotipagem dos antgenos O, K, H e deteco de produtos de
virulncia) e PCR.

Assimile

Colnias fermentadoras de lactose cultivadas em gar MacConkey


apresentam colorao rosa.

Colnias no fermentadoras de lactose cultivadas em gar MacConkey


apresentam colorao plida.

20 Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria


U3

Morfologia e identificao das bactrias

Escherichia

O gnero Escherichia possui vrias espcies, sendo a Escherichia coli a mais


relevante na Medicina Veterinria. Os membros de Escherichia so fermentadores
de lactose, sua estrutura composta de cpsula (presena de mais de 80
antgenos), membrana externa (lipdeo A importante na virulncia), flagelos
peritrqueos, antgenos (O, H, K, usados na sorotipagem) e adesinas (promovem
a aderncia), componentes que favorecem a infeco do agente bacteriano. Em
mamferos, aps o nascimento, ocorre naturalmente a colonizao intestinal por
Escherichia coli, participando da microbiota intestinal. As linhagens patognicas
possuem fatores (cpsula, endotoxinas, enterotoxinas, siderforos, fator citotxico
necrosante, toxina shiga-smile e hemolisina) que auxiliam na colonizao das
superfcies das mucosas com produo de doena.

Reflita

Fatores que podem favorecer a infeco de Escherichia coli em animais


jovens so: imunidade insuficiente, superlotao e higiene deficiente,
microbiota mal estabelecida, sistema imunolgico imaturo, fatores
estressantes, aumento de linhagens patognicas, entre outros.

Diagnstico: o diagnstico laboratorial se baseia na demonstrao do agente.


As amostras incluem: leite masttico, amostras teciduais em casos de septicemia,
fezes de animais que apresentam doena entrica, urina e, em casos de piometra
ou metrite, coleta-se com swabs cervicais. Com relao demonstrao de
cepas produtoras de doena edematosa, alteraes teciduais macroscpicas e
microscpicas podem auxiliar no diagnstico. Em meio MacConkey (37C por 24 a
48 horas) as colnias apresentam cor rosa forte. No meio gar-sangue, as colnias
apresentam-se acinzentadas, redondas, brilhantes e com odor caracterstico. O teste
bioqumico necessrio para identificar casos isolados de mastite por coliforme
ou cistite. Pode ser realizado tambm o teste de aglutinao para descriminao
sorolgica (antgenos O e H) . Linhagens de Escherichia coli enterotoxignicas
podem ser confirmadas por mtodos imunolgicos (presena de enterotoxinas).
Para enterotoxinas (intestino delgado) pode-se empregar anticorpos monoclonais.
PCR: sondas de DNA especficas para genes de enterotoxinas (termolbeis e
termestveis).

Salmonella

As bactrias Salmonellas apresentam uma ampla variedade de sorotipos (mais de


2000), os quais no so fermentadores de lactose. Presentes no solo, na gua, em

Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria 21


U3

vegetais, na alimentao de animais, sendo que a infeco ocorrer pela ingesto


de bactrias viveis (no ambiente, as fezes so a principal fonte de contaminao).
Uma vez na mucosa intestinal, a Salmonella adere parede com auxlio das fmbrias,
produzindo invaginaes na membrana celular que permite a entrada da bactria
(por meio das vesculas ligadas membrana) para se replicarem. Fatores que podem
auxiliar na colonizao da Salmonella, como adesinas (processo de aderncia),
genes de invasiva (interiorizao da bactria), exotoxinas, enterotoxinas, siderforos
(permite o crescimento em condies de restrio de ferro), presena de plasmdeos
e o regulador SlyA que permite a bactria sobreviver dentro dos macrfagos.

Exemplificando

Fatores estressantes tm sido associados ao desenvolvimento da


infeco por Salmonella. Entre os fatores esto: superlotao, prenhez,
privao de gua, transporte, alteraes da dieta, procedimentos
cirrgicos e infeces intercorrentes.

Diagnstico: o diagnstico laboratorial se baseia na demonstrao do agente.


Em casos de infeco intestinal, recomenda-se como material de anlise, as fezes.
Em caso de infeco sistmica, aconselha-se a coleta de sangue (hemocultura),
bao e medula ssea (post mortem). Inoculao direta: utiliza-se meio de gar
MacConkey, gar verde-brilhate ou gar XLD (37C por at 48 horas). Inoculao em
caldo enriquecido: utiliza-se meio de gar XLD ou gar VB com caldos enriquecidos
de selenito de Ferro, Rappaport ou tetrationato podem ser utilizados (37C por at
48 horas). Colnias suspeitas observadas nos meios anteriores: utiliza-se meio de
gar TSI e caldo lisina descarboxilase. Confirmao sorolgica (teste bioqumico
disponvel comercialmente): antissoro polivalente. Sorotipagem (teste bioqumico
disponvel comercialmente): antissoro especfico H ou O. Biotipagem: utilizado
para distinguir sorotipos antigenicamente semelhantes (Salmonella Pullorum e
Salmonella Gallinarum). Fototipagem: utilizado para estudos epidemiolgicos
(caractersticas especficas). Testes sorolgicos: empregados para bovinos e ovinos
(ELISA e teste de aglutinao). PCR: pode ser utilizado para deteco do agente em
alimentos, fezes e gua.

Yersinia

O gnero Yersinia possui mais de 10 espcies, sendo que Yersinia pestis, Yersinia
enterocolitica, Yersinia pseudotuberculosis e Yersinia ruckeri so de interesse
Mdico Veterinrio. A Yersinia pseudotuberculosis possui mais de 10 sorotipos, dos
quais os sorotipos I, II e III esto presentes na maioria dos isolados. J a Yersinia
enterocolitica possui cinco bitipos, mais de 50 sorotipos e est presente em isolados,
principalmente os antgenos somticos 2, 3, 5, 8 e 9. As Y. pseudotuberculosis e
Y. enterocolitica so menos virulentas do que a Y. pestis, no apresentando uma

22 Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria


U3

infeco generalizada. A infeco pode ser facilitada por diversos fatores que
esto presentes nessas bactrias, como: protenas invasivas, protenas de adeso
e a protena GsrA (auxilia na sobrevivncia da bactria dentro dos macrfagos). A
Y. pestis apresenta fatores importantes como cpsula e ativador de plasminognio
(utilizado na disseminao), que a possibilita ser mais virulenta.

Diagnstico: o diagnstico laboratorial se baseia na demonstrao do agente.


Amostras de fezes, tecidos contaminados e ndulos linfticos podem ser utilizados
para anlise microbiolgica. Recomenda-se meios de cultura especficos (CIN)
para cultivo da Y. enterocolitica. A presena de sais biliares no meio pode inibir o
crescimento da Y. enterocolitica (o meio gar MacConkey possui baixo efeito
inibidor). Para amostras de tecidos, pode-se cultivar em meios de gar-sangue ou
gar MacConkey (37C por at 72 horas). Nos esfregaos de abcessos ou aspirado
de linfonodos podem ser demonstrados bacilos de colorao bipolar (mtodo
de Giemsa). Outros mtodos de diagnstico so testes diretos com anticorpos
fluorescentes e teste de hemaglutinao passiva em amostras de soro emparelhado
(utiliza-se antgeno frao 1A).

Patgenos oportunistas

Os patgenos oportunistas (Edwardsiella tarda, Enterobacter aerogenes,


Klebsiella pneumoniae, Morganella morganii, Proteus mirabilis, Proteus vulgaris e
Serratia marcescens) possuem mecanismos que auxiliam em sua sobrevivncia nos
tecidos ou rgos acometidos do hospedeiro. A presena de fatores como cpsula
(auxilia na inibio da fagocitose), adesinas (principalmente para as bactrias que
colonizam o trato urinrio), siderforos (permite a sobrevivncia em meio com limite
de ferro) e endotoxinas (causam efeitos txicos) auxiliam na colonizao desses
microrganismos nos tecidos e rgos. Porm, raramente a infeco por esses
microrganismos desencadear uma doena entrica.

Diagnstico: o diagnstico laboratorial se baseia na demonstrao do agente.


Amostras so obtidas de rgos infectados. Utiliza-se meio gar-sangue ou gar
MacConkey para cultivo (37C por 24 a 48 horas). A identificao dos isolados
se fundamenta na aparncia das colnias e em seu crescimento em meio gar
MacConkey (bacilos Gram-negativos). Aplica-se teste bioqumico para identificao
presuntiva ou definitiva.

Vocabulrio

Mordante: refere-se substncia adicionada a uma soluo corante


que a faz corar com mais intensidade.

Patgeno oportunista: refere-se a um microrganismo que


ordinariamente no causa doena, mas pode se tornar patognico em

Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria 23


U3

certas circunstncias.

Postulados de Koch: refere-se aos critrios utilizados para determinar o


agente etiolgico de uma doena infecciosa.

Principais doenas de importncia na Medicina Veterinria

Escherichia

As principais doenas de importncia na Medicina Veterinria so:

a) Entrica: Escherichia coli enterotoxignica (causa: diarreia em sunos,


bezerros e cordeiros recm-nascidos; diarreia ps-desmame em leites); E. coli
enteropatognica, e E. coli enteroagregativa (causa: diarreia em leites, cordeiros
e filhotes de ces); E. coli verotoxignica (causa: doena do edema em sunos;
enterocolite hemorrgica em bezerros; diarreia ps-desmame em leites; sndrome
da colite hemoltico-urmica hemorrgica em humanos); E. coli necrotoxignicas
(causa: colite hemorrgica em bovinos; enterite em leites e bezerros; diarreia em
coelhos; disenteria em equinos).

b) Septicmica: E. coli septicmicas (causa: colissepticemia em bezerros, leites,


filhotes de ces e aves domsticas; boca aguada em cordeiros; artrite; meningite).

c) No entrica: E. coli uropatognicas (causa: cistite em cadelas); E. coli


oportunista (causa: mastite por coliforme em vacas e porcas; piometra em cadelas
e cervdeos; metrite; onfalite em cordeiros e pintos).

Salmonella

As principais doenas de importncia na Medicina Veterinria so: Salmonella


Tiphimurium (causa: enterocolite e septicemia em vrias espcies animais;
intoxicao alimentar em humanos); Salmonella Dublin (causa: condies adversas
da doena em bovinos; enterocolite e septicemia em ovinos, equinos e ces);
Salmonella Choleraesuis (causa: enterocolite e septicemia em sunos); Salmonella
Pullorum (causa: pulorose diarreia branca bacilar em pintos); Salmonella
Gallinarum (causa: tifo avirio em aves adultas); Salmonella Arizonae (causa:
infeco do paraclon em perus); Salmonella Enteritidis (causa: doena subclnica
em aves domsticas; doena clnica em mamferos; intoxicao alimentar em
humanos); Salmonella Brandenburg (causa: aborto em ovinos).

Yersinia

As principais doenas de importncia na Medicina Veterinria so: Yersinia


enterocolitica (causa: infeces entricas e enterites (ocasionalmente) em sunos,
animais domsticos e silvestres; abortos em cabras); Yersinia pseudotuberculosis
(causa: enterite (animais jovens), infeces subclnicas (animais velhos), linfadenite

24 Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria


U3

mesentrica em cervdeos, ovinos, caprinos, bovinos, bfalos e sunos; abortos


espordicos em bovinos, ovinos, caprinos; necrose heptica focal e septicemia
em cobaias e animais de laboratrio; enterocolite e linfadenite mesentrica em
pssaros de gaiola); Yersinia pestis (causa: peste silvestre em roedores; peste felina
em gatos; peste bubnica em humanos); e Yersinia ruckeri (causa: inflamao
perioral em peixes).

Patgenos oportunistas

As principais doenas de importncia na Medicina Veterinria so: Klebsiella


pneumoniae (causa: mastite por coliformes em vacas; pneumonia em bezerros
e potros; endometrite em guas; infeces no trato urinrio de ces); Proteus
mirabilis e Proteus vulgaris (causa: infeco no trato urinrio de ces e equinos;
otite externa em ces); Enterobacter aerogenes (causa: mastite por coliforme
em vacas e porcas); Edwardsiella tarda (causa: diarreia e infeces em feridas); e
Serratia marcescens (causa: mastite bovina (raro); septicemia em frangos).

Pesquise mais
Leia mais sobre esse tema no seguinte artigo:

ANDREATTI FILHO, Raphael Lcio. et al. Sorovares de Salmonella


isoladosde materiais avcolas no perodo de 1994 a 1999. Revista de
educaocontinuada em medicina veterinria e zootecnia, So Paulo,
v. 4, n. 3, p. 90-101,2001. Disponvel em: <http://revistas.bvs-vet.org.br/
recmvz/article/view/3310/2515>. Acesso em: 14 jul. 2016.

Sem medo de errar

Para compreender melhor a situao apresentada, vamos recapitular os pontos


que foram analisados anteriormente na situao-problema.

O laboratrio tem como objetivo prestar servios aos profissionais da rea


Veterinria, a fim de identificar agentes patolgicos utilizando diferentes mtodos
de diagnsticos para auxiliar na resoluo de casos clnicos.

Mediante as informaes apresentadas e com auxlio dos contedos abordados


nesta seo, responda s questes para a resoluo do caso clnico.

 Com relao ao agente patolgico suspeito Escherichia coli, cite o nome


da famlia bacteriana a qual ele pertence.

O agente patolgico suspeito Escherichia coli pertence Famlia


Enterobacteriaceae.

Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria 25


U3

 Cite as principais estruturas que favorecem a infeco no agente bacteriano


Escherichia coli.

Sua estrutura composta de cpsula (presena de mais de 80 antgenos),


membrana externa (lipdeo A importante na virulncia), flagelos peritrqueos,
antgenos (O, H, K usados na sorotipagem) e adesinas (promove a aderncia) que
favorecem a infeco do agente bacteriano.

 Cite os mtodos de identificao realizados para diferenciao dos


membros patognicos da famlia em que se enquadra o agente suspeito.

A diferenciao dos membros patognicos pode ser realizada pelos seguintes


mtodos: formao da lactose em gar MacConkey; reaes em meios seletivos/
indicadores; morfologia das colnias; reaes no gar TSI (triple sugar iron);
testes bioqumicos adicionais; testes bioqumicos comerciais e sorotipagem de
Escherichia coli, espcies de Salmonella e de Yersinia.

Ateno

Entre os fatores predisponentes infeco por Escherichia coli esto:


superlotao, higiene deficiente, imunidade insuficiente, sistema
imunolgico imaturo, aumento de linhagens patognicas, microbiota
mal estabelecida e fatores estressantes.

Avanando na prtica

Mastite em vacas leiteiras

Descrio da situao-problema

Recentemente, o mdico veterinrio de uma cooperativa foi solicitado para


uma visita tcnica em uma propriedade rural que pertence a um dos cooperados.
O proprietrio relatou que uma das vacas apresentava sensibilidade dolorosa
durante a ordenha. Durante o exame clnico, o mdico veterinrio observou
depresso, sensibilidade dolorosa, aumento de temperatura regional e um quadro
febril. Suspeitando de mastite, ele coletou amostras de leite e de secrees do
teto da glndula mamria (utilizando swab esterilizado). O material coletado foi
acondicionado em recipiente estril (para evitar a contaminao ambiental),
lacrado e identificado. Em seguida, o profissional encaminhou as amostras para
anlise laboratorial para identificar o agente infeccioso.

Mediante as informaes apresentadas e com o auxlio dos contedos


abordados nesta seo, responda s questes para a resoluo do caso clnico.

26 Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria


U3

 Cite os fatores que predispe infeco pelo agente bacteriano suspeito


Escherichia coli.

 Classifique o agente bacteriano suspeito em entrico, septicmico ou no


entrico e cite as linhagens em cada categoria.

Lembre-se

A parede celular das bactrias (Gram-positivas e Gram-negativas)


constituda por uma camada de peptideoglicanos (denominada de
murena) com a funo de conferir proteo clula.

Resoluo da situao-problema

Em continuidade com o relato de caso, como se suspeitava de um agente


bacteriano, o tcnico laboratorial procedeu com a tcnica de cultivo (gar
MacConkey, a 37C por 24 a 48 horas), fixao do material em esfregaos e posterior
colorao de Gram. Na tcnica de cultivo, as colnias apresentaram colorao
rosa (em virtude da produo de cido a partir da lactose) e morfologicamente
no havia colnias mucoides. Na tcnica de colorao de Gram, as bactrias
apresentaram colorao rosa (a aplicao do corante safranina ir corar as bactrias
Gram-negativas na colorao rosa). Por fim, as amostras foram submetidas a um
teste bioqumico. Os resultados dos testes realizados evidenciaram a presena de
E. coli no material biolgico analisado.

 Cite os fatores que predispe infeco pelo agente bacteriano suspeito


Escherichia coli.

Entre os fatores predisponentes infeco por Escherichia coli esto:


imunidade insuficiente, superlotao, higiene deficiente, sistema imunolgico
imaturo, aumento de linhagens patognicas, microbiota mal estabelecida, fatores
estressantes, entre outros.

 Classifique o agente bacteriano suspeito em entrico, septicmico ou no


entrico e cite as linhagens em cada categoria.

O agente bacteriano suspeito E. coli causador de mastite est classificado


como no entrico. As linhagens bacterianas classificadas como entricas so:
E. coli enterotoxignica, E. coli enteropatognica, E. coli enteroagregativa, E. coli
verotoxignica e E. coli necrotoxignicas. As linhagens bacterianas classificadas
como septicmicas so: E. coli septicmicas. As linhagens bacterianas classificadas
como no entricas so: E. coli uropatognicas e E. coli oportunista.

Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria 27


U3

Faa voc mesmo

Agora com voc! Pesquise sobre patgenos oportunistas da Famlia


Enterobacteriaceae. Consulte o material de apoio:

QUINN, P. J. et al. Microbiologia veterinria e doenas infecciosas.


So Paulo: Artmed Editora, 2005.

Faa valer a pena

1. A famlia Enterobacteriaceae possui 46 gneros e 263 espcies e


subespcies de bactrias. Os membros dessa famlia so classificados
como:
Assinale a alternativa correta.
a) Gram-positivos.
b) Gram-negativos.
c) Bacilos.
d) Microrganismos aerbios.
e) Microrganismos ausentes de flagelos peritrqueos.

2. A famlia Enterobacteriaceae est distribuda em trs categorias de


interesse veterinrio: patgenos principais (causam doenas entricas
e sistmicas), patgenos oportunistas (causam doena clnica) e no
patgenos (isoladas em fezes e ambiente). Indique um dos gneros
classificados como no patgenos.
Assinale a alternativa correta.
a) Escherichia.
b) Salmonella.
c) Yersinia.
d) Erwinia.
e) Proteus.

3. Durante uma bateria de exames microbiolgicos, o tcnico laboratorial


isolou membros da famlia Enterobacteriaceae em amostras de fezes
de leites. Entretanto, a tcnica utilizada no possibilitou identificar

28 Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria


U3

especificamente o agente patognico. De acordo com o tcnico, os


membros da famlia Enterobacteriaceae so indistinguveis com base
na morfologia. Para auxili-lo, indique uma tcnica adequada para
identificar antgenos presentes no microrganismo e, assim, obter mais
informaes para identificar o agente patognico.
Assinale a alternativa correta.
a) Cultivo em meio gar MacConkey.
b) Cultivo em meio gar verde-brilhante.
c) Testes imunolgicos.
d) Cultivo em meio gar sorbitol MacConkey.
e) Cultivo em meio gar sangue.

Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria 29


U3

30 Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria


U3

Seo 3.3

Classificao das bactrias II

Dilogo aberto

Ol, aluno! Seja bem-vindo seo de estudos deste livro didtico!

Nesta seo estudaremos os gneros Bacillus, Burkholderia, Borrelia e


as principais doenas de importncia na Medicina Veterinria. Para melhor
compreender o contedo abordado, vamos acrescentar informaes na situao-
problema referente ao relato de caso apresentado no item Convite ao Estudo,
dessa forma, voc participar indiretamente na resoluo do caso.

Recentemente, o laboratrio de anlises clnicas do Hospital Veterinrio recebeu


amostras para diagnstico laboratorial. Em anexo com as amostras, o mdico
veterinrio encaminhou um laudo tcnico contendo informaes detalhadas do
atendimento clnico e indicando a suspeita de um agente bacteriano pertencente ao
gnero Bacillus. De acordo com o laudo tcnico, as amostras foram coletadas de
uma carcaa de bovino em estado inicial de decomposio. Durante o exame clnico,
o mdico veterinrio observou a carcaa inchada, presena de sangue escuro e no
coagulado escorrido pela boca, narinas e nus. Mediante as informaes levantadas,
o profissional suspeitou que um agente bacteriano acometia o animal. Em seguida, ele
coletou amostras de sangue perifrico e de secrees para uma possvel identificao
do agente patolgico. De acordo com o tcnico laboratorial, as amostras (sangue e
secrees) estavam identificadas e acondicionadas adequadamente.

Mediante as informaes apresentadas e com auxlio dos contedos abordados


nesta seo, responda s questes para a resoluo do caso clnico.

 Com relao ao gnero Bacillus do agente patolgico suspeito, cite


as espcies bacterianas de interesse veterinrio e suas doenas ou
consequncias da infeco.

 Cite as principais caractersticas dos agentes bacterianos pertencentes ao


gnero Bacillus.

 Descreva o diagnstico para agentes bacterianos pertencentes ao gnero


Bacillus.

Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria 31


U3

No pode faltar

Prezado aluno, a partir desta seo vamos conhecer os gneros Bacillus,


Burkholderia, Borrelia e as principais doenas de importncia na Medicina
Veterinria. Vamos l!

Bacillus

Estes microrganismos so classificados como Gram-positivos, anaerbios


facultativos e aerbios, crescem em meios no enriquecidos e so bastonetes
imveis que produzem esporos. Distribudos amplamente no meio ambiente, os
endsporos podem sobreviver por mais de 50 anos no solo. Fatores de virulncia
incluem: cpsula (capacita a forma vegetativa, de modo a evitar a fagocitose); a
toxina do edema (Edtx) causa leses hemorrgicas em mltiplos rgos e suprime
a agregao plaquetria induzida pela trombina e a coagulao; a toxina letal (Letx)
possui dois fatores: PA (Antgeno Protetor), responsvel pela ligao de LeTx s
clulas-alvo e o LF (Fator Letal), que responsvel por sua atividade txica; outros
produtos, como AtxA e AcpA (so produzidos em resposta aos fatores ambientais),
o InhA (inibidor imune A), o MprF (fator de resistncia a mltiplos peptdeos),
xido ntrico sintase (que protege a germinao de esporos da produo de xido
ntrico pelos macrfagos das clulas hospedeiras), so importantes na virulncia e
sobrevivncia da bactria. Solos ricos em clcio e nitrato, com pH variando de 5,0 a
8,0 e temperaturas de 15,5C, so fatores favorveis para que ocorra a esporulao
e proliferao bacteriana. A infeco ocorre pela ingesto de alimentos e gua,
exposio de feridas e picadas de artrpodes contaminados.

Assimile

A formao de endsporos o fator mais importante na persistncia e


na disseminao do Bacillus anthracis.

Diagnstico: carcaas de animais infectados apresentam inchao, no exibem


rigor mortis e apresentam sangue escuro e no coagulado escorrido pela boca,
narinas e nus. No se recomenda abrir a carcaa de animais infectados, a fim de
evitar contaminao ambiental. preciso coletar amostras de sangue perifrico
em bovinos e fluido peritoneal de sunos. Esse material pode ser cultivado em
gar-sangue e gar MacConkey (37C por 24 a 48 horas). Para identificao
dos isolados, os seguintes critrios podem ser seguidos: morfologia da colnia;
avaliao pela tcnica de colorao de Gram; e ausncia de crescimento no meio
gar MacConkey. Tambm podem ser realizados testes bioqumicos e teste de
Ascoli (para deteco de antgenos de Bacillus anthracis em materiais como couro).

32 Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria


U3

Exemplificando

Em casos suspeitos de carbnculo hemtico, o mdico veterinrio


deve informar imediatamente o Servio Veterinrio Oficial. Em regies
endmicas, aconselhvel a vacinao anual, principalmente em
bovinos e ovinos. Em regies no endmicas, aps o surto da doena,
deve-se proibir a movimentao de animais.

Burkholderia

Neste gnero, duas espcies so de interesse veterinrio, a Burkholderia


pseudomallei e a Burkholderia mallei. A espcie Burkholderia pseudomallei
aerbica, possui flagelo mvel, um bastonete Gram-negativo e possui cpsula
constituda de carboidratos. As colnias apresentam mucoides, que vo de lisas
opacas e rugosas (tornando-se marrom-amareladas), crescem em temperatura
de 42C, so oxidase-positiva, possuem odor de mofo, catalase-positiva, glicose-
positiva, lactose-positiva, sacarose-positiva, indol-negativa, hidrolisa a ureia, reduz
nitrato em gs nitrognio e a hidrlise ocorre em gar sangue. A parede celular
composta por lipopolissacardeos (lipdeo A, antgeno O e receptores Toll-like) e
protenas. Produtos celulares (adesina, cpsula, parede celular e outros produtos)
auxiliam sua aderncia, sobrevivncia e determina a virulncia da bactria.

A espcie Burkholderia mallei aerbica, no possui flagelo (no mvel),


um bastonete Gram-negativo e possui cpsula constituda de carboidratos. As
colnias apresentam-se de brancas e lisas marrom e granulares, no possuem
odor caracterstico, no crescem a 42C, no so mveis, possuem ao oxidase
varivel (oxidase-negativa, glicose-positiva, lactose-negativa e sacarose-negativa),
catalase-positiva, indol-negativa, catabolizam a glicose por meio de reao de
oxidao, hidrolisam a ureia e reduzem nitrato sem produo de gs. A parede
celular composta de lipopolissacardeos (lipdeo A, antgeno O e receptores Toll-
like) e protenas. Produtos celulares (cpsula, parede celular e produtos diversos)
auxiliam sua aderncia, sobrevivncia e determinante na virulncia da bactria.

Diagnstico: as amostras devem ser manipuladas em capela de biossegurana.


Coleta-se descarga de tecidos afetados, abcessos e sangue. Burkholderia mallei
cresce em meios contendo 1% de glicerol e em meio gar MacConkey (37C por
dois a trs dias). Burkholderia pseudomallei cresce em meios com gar-sangue e
gar MacConkey (37C por 24 a 48 horas). Para identificao dos isolados, observa-
se a morfologia da colnia, odor e caractersticas bioqumicas. Para diferenciao
da Burkholderia pseudomallei e Burkholderia mallei, observa-se caractersticas de
motilidade, crescimento em meio com citrato, reduo de nitrato em nitrognio
gasoso e crescimento em temperatura de 42C. Sorologicamente, a doena do

Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria 33


U3

mormo diagnosticada com auxlio do teste de fixao de complemento. Para fins


de comrcio internacional de animais, aplica-se o teste de fixao de complemento
e o teste ELISA. O teste intradermopalpebral da malena indica a infeco, ele tem
sido utilizado para identificao de animais infectados e erradicao do mormo.

Reflita

Equinos com caractersticas da doena do mormo devem ser submetidos


a uma lista de diagnstico diferencial: garrotilho (Streptococcus
equi), linfangite epizotica (Histoplasma farciminosum), melioidose
(Burkholderia pseudomallei), esporotricose (Sporothrix schenckii) e
linfangite ulcerativa (Corynebacterium pseudotuberculosis).

Borrelia

As bactrias pertencentes ao gnero Borrelia so mais longas e largas do


que as espiroquetas, so parasitas obrigatrios, Gram-negativas, possuem um
cromossomo linear de fita dupla, plasmdeos lineares e circulares, possuem uma
bainha externa que recobre fibrilas axiais (contendo de 15 a 20 endoflagelos).
Esses patgenos so transmitidos por artrpodes (carrapatos), os quais adquirem
a bactria de animais (camundongos, ratos silvestres, porcos-espinho, lagartos
e aves) infectados. As bactrias so diferenciadas de outras espiroquetas pela
morfologia, pelo DNA genmico e por caractersticas bioqumicas.

Diagnstico: demonstrao do agente bacteriano. Histrico de exposio infestao


por carrapatos. Aplica-se microscopia de campo escuro com imunofluorescncia
para demonstrao do microrganismo em tecidos e fluidos. Aplica-se o teste de
imunofluorescncia indireta (ELISA) e testes imunoenzimtico. Aplica-se o teste de
PCR em amostras de tecido ou de fludo, utilizando Primers especficos de DNA. Para
o isolamento em cultivo, utiliza-se material coletado da orelha obtido por bipsia com
punch de ces e camundongos, o meio gar BSKII sob temperatura de 33C.

Vocabulrio

Microrganismo aerbico: refere-se aos microrganismos que requerem


oxignio (O2) para seu crescimento.

Microrganismo anaerbico: refere-se aos microrganismos que no


requerem oxignio (O2) para seu crescimento.

Microrganismo anaerbico facultativo: refere-se aos microrganismos


que podem crescer na presena ou na ausncia de oxignio molcula
(O2).

34 Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria


U3

Principais doenas de importncia na Medicina Veterinria

Bacillus

As principais doenas de importncia na Medicina Veterinria so: Bacillus anthracis


(Bovinos e ovinos: antraz agudo causa septicemia, superagudo fatal; Sunos: antraz
subagudo causa edema na regio da faringe; Equinos: antraz subagudo causa edema
localizado, pode ocorrer septicemia associada com clica e enterite; Humanos:
apresenta a forma cutnea (infeo com pus semelhante a um furnculo), pulmonar
(semelhante a uma gripe, seguido de problemas respiratrios graves) e intestinal (febre,
diarreia e vmitos com presena de sangue); Bacillus cereus (Bovinos: causa mastite,
porm raro; Humanos: causa intoxicao alimentar e infeces nos olhos); Bacillus
licheniformis (Bovinos e ovinos: causa abortos espordicos); Bacillus larvae (Abelhas:
causa a doena de crias americanas).

Burkholderia

As principais doenas de importncia na Medicina Veterinria so: Burkholderia


mallei (Equinos (humanos e carnvoros so suscetveis): causa a doena do mormo);
e Burkholderia pseudomallei (Vrias espcies de animais (bovinos, sunos, ces, gatos,
macacos, roedores, camelos, pssaros, peixes, etc.) e infeco ocasional (humanos so
suscetveis): causa a doena de Melioidose).

Pesquise mais
Leia mais sobre o tema no seguinte artigo:

ZAPPA, Vanessa; LEOPOLDINO, Danielly Cristina de Castro;


OLIVEIRA,Richard Guimares de; Mormo em equinos. Revista Cientfica
Eletrnica de Medicina Veterinria, So Paulo, ano 7, n. 12, jan. 2009.
Disponvel em: <http://www.faef.revista.inf.br/imagens_arquivos/
arquivos_destaque/nx84WKidH1wD4Os_2013-6-21-11-56-24.pdf>.
Acesso em: 20 jul. 2016.

Borrelia

As principais doenas de importncia na Medicina Veterinria so: Borrelia anserina


(Borreliose aviria: acomete aves, causa processo febril, depresso, perda de peso e
anemia); Borrelia theileri (Borreliose bovina: acomete ruminantes e equinos, causando
quadro febril com anemia); Borrelia burgdorferi lato sensu (Borreliose de Lyme: acomete
ces, equinos, bovinos, ovinos e humanos, causando febre, letargia, artrite e distrbios
cardacos, renais e neurolgicos); Borrelia coriaceae (Aborto enzotico bovino: acomete
bovinos e cervdeos, causa aborto); Borrelia recurrentis (Febre recorrente: acomete
vrias espcies, causa um processo febril com ciclos de febre).

Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria 35


U3

Sem medo de errar

Para compreender melhor a situao apresentada, vamos recapitular os pontos


que foram analisados anteriormente. O laboratrio tem como objetivo prestar servios
aos profissionais da rea Veterinria, a fim de identificar agentes patolgicos, utilizando
diferentes mtodos de diagnsticos para auxiliar na resoluo de casos clnicos.
Mediante as informaes apresentadas e com auxlio dos contedos abordados nesta
seo, responda s questes para a resoluo do caso clnico.

 Com relao ao gnero Bacillus do agente patolgico suspeito, cite as espcies


bacterianas de interesse veterinrio e suas doenas ou consequncias da
infeco.

Bacillus anthracis (Bovinos e ovinos: antraz agudo causa septicemia, superagudo


fatal; Sunos: antraz subagudo causa edema na regio da faringe; Equinos: antraz
subagudo causa edema localizado; pode ocorrer septicemia associada com clica
e enterite; e Humanos: apresenta a forma cutnea, pulmonar e intestinal); Bacillus
cereus (Bovinos: causa mastite, porm raro; Humanos: causa intoxicao alimentar
e infeces nos olhos); Bacillus licheniformis (Bovinos e ovinos: causa abortos
espordicos); e Bacillus larvae (Abelhas: causa a doena de crias americanas).

 Cite as principais caractersticas dos agentes bacterianos pertencentes ao


gnero Bacillus.

As espcies bacterianas pertencentes ao gnero Bacillus so classificadas em Gram-


positivas, anaerbias facultativas e aerbias, crescem em meios no enriquecidos e so
bastonetes imveis que produzem esporos.

 Descreva o diagnstico para agentes bacterianos pertencentes ao gnero


Bacillus.

As carcaas de animais infectados apresentam-se inchadas, no exibem rigor


mortis, pode-se observar a presena de sangue escuro e no coagulado, que pode
estar escorrido pela boca, pelas narinas e nus. No se recomenda abrir a carcaa
de animais infectados, a fim de evitar contaminao ambiental. preciso coletar
amostras de sangue perifrico em bovinos e fluido peritoneal de sunos. Esse material
pode ser cultivado em gar-sangue e gar MacConkey (37C por 24 a 48 horas). Para
identificao dos isolados, os seguintes critrios podem ser seguidos: morfologia da
colnia; avaliao pela tcnica de colorao de Gram; e ausncia de crescimento no
meio gar MacConkey. Testes bioqumicos podem ser aplicados para identificao da
espcie bacteriana. O teste de Ascoli pode ser aplicado para deteco de antgenos de
Bacillus anthracis em materiais como couro.

36 Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria


U3

Faa voc mesmo

Agora com voc! Pesquise sobre a Instruo normativa n 50, de


24 de setembro de 2013, que aborda sobre as doenas de notificao
obrigatria ao servio veterinrio oficial, composto pelas unidades do
Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento e pelos rgos
Estaduais de Defesa Sanitria Animal.Acesse o site do Ministrio
da Agricultura Pecuria e Abastecimento no seguinte link: <http://
sistemasweb.agricultura.gov.br/sislegis/action/detalhaAto.do?method
=abreLegislacaoFederal&chave=50674>. Acesso em: 20 jul. 2016.

Ateno

Bacillus so classificados como Gram-positivos, anaerbios facultativos


e aerbios, crescem em meios no enriquecidos e so bastonetes
imveis que produzem esporos.

Avanando na prtica

Mormo

Descrio da situao-problema

Recentemente, o laboratrio de anlises clnicas do Hospital Veterinrio recebeu


amostras para diagnstico laboratorial. Em anexo com as amostras, o mdico
veterinrio encaminhou um laudo tcnico contendo informaes detalhadas do
atendimento clnico e indicando a suspeita de um agente bacteriano pertencente
ao gnero Bacillus. De acordo com o laudo tcnico, as amostras foram coletadas
de uma carcaa de bovino em estado inicial de decomposio. Durante o
exame clnico, o mdico veterinrio observou a carcaa inchada, presena de
sangue escuro e no coagulado escorrido pela boca, narinas e nus. Mediante
as informaes levantadas, o profissional suspeitou que um agente bacteriano
acometia o animal. Em seguida, ele coletou amostras de sangue perifrico e de
secrees para uma possvel identificao do agente patolgico. De acordo com
o tcnico laboratorial, as amostras (sangue e secrees) estavam identificadas e
acondicionadas adequadamente.

Mediante as informaes apresentadas e com auxlio dos contedos abordados


nesta seo, responda s questes para a resoluo do caso clnico.

 Com relao ao gnero Bacillus do agente patolgico suspeito, cite

Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria 37


U3

as espcies bacterianas de interesse veterinrio e suas doenas ou


consequncias da infeco.

 Cite as principais caractersticas dos agentes bacterianos pertencentes ao


gnero Bacillus.

Lembre-se

O teste da malena um mtodo eficaz para a confirmao da suspeita


na triagem de animais que estiveram em contato com a bactria. A
malena injetada intradermicamente abaixo da plpebra inferior, o
resultado ser positivo quando ocorrer aumento do volume e descarga
ocular purulenta aps 24 horas.

Resoluo da situao-problema

Em continuidade com o relato de caso, como se suspeitava de um agente


bacteriano, o tcnico laboratorial procedeu com a tcnica de cultivo em placas
de Petri contendo gar glicerol e gar MacConkey (submetidos a 37C e 42C por
24 a 48 horas) e teste bioqumicos. Os resultados evidenciaram colnias brancas e
lisas, ausncia de hemlise e odor, alm de que no houve crescimento na placa
que foi submetida a 42C. O teste bioqumico foi positivo para glicose e negativo
para oxidase, lactose e sacarose. Os resultados evidenciaram positivo para o agente
bacteriano Burkholderia mallei, causador da doena do Mormo.

 Com relao ao gnero Burkholderia, cite as espcies bacterianas de


interesse veterinrio e suas doenas ou consequncias da infeco.

Burkholderia mallei: Equinos (humanos e carnvoros so suscetveis): causa


a doena do mormo; Burkholderia pseudomallei: Vrias espcies de animais
(humanos so suscetveis): causa a doena de Melioidose.

 Cite os procedimentos e tcnicas de diagnstico para deteco dos agentes


bacterianos pertencentes ao gnero Burkholderia.

As amostras devem ser manipuladas em capela de biossegurana. Como


material de anlise, coleta-se descarga de tecidos afetados, abcessos e sangue.
A Burkholderia mallei cresce em meios contendo 1% de glicerol e em meio gar
MacConkey (37C por dois a trs dias). J a Burkholderia pseudomallei cresce
em meios com gar-sangue e gar MacConkey (37C por 24 a 48 horas).
Para identificao dos isolados, observa-se a morfologia da colnia, odor e
caractersticas bioqumicas. Para diferenciao da Burkholderia pseudomallei e
Burkholderia mallei, deve-se observar caractersticas de motilidade, crescimento
em meio com citrato, reduo de nitrato em nitrognio gasoso e crescimento em

38 Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria


U3

temperatura de 42C. Sorologicamente, a doena do mormo diagnosticada com


auxlio do teste de fixao de complemento. Para fins de comrcio internacional
de animais, aplica-se o teste de fixao de complemento e o teste ELISA. O teste
intradermopalpebral da malena indica a infeco, o qual tem sido utilizado para
erradicao do mormo.

Faa valer a pena

1. O gnero Bacillus apresenta mais de 50 espcies. Dentre essas


espcies, os agentes de interesse veterinrio so:
Assinale a alternativa correta.
a) Bacillus anthracis, Bacillus cereus, Bacillus licheniformis e Bacillus
larvae.
b) Bacillus anthracis, Burkholderia mallei, Bacillus licheniformis e
Bacillus larvae.
c) Bacillus anthracis, Bacillus cereus, Bacillus licheniformis e
Burkholderia pseudomallei.
d) Bacillus anthracis, Bacillus cereus, Burkholderia mallei e Bacillus
larvae.
e) Bacillus anthracis, Burkholderia pseudomallei, Bacillus licheniformis
e Bacillus larvae.

2. Distribudos amplamente no meio ambiente, as espcies de Bacillus


produzem endsporos, favorecendo sua sobrevivncia no solo por
mais de 50 anos. A presena de fatores de virulncia como a cpsula
e a toxina do edema so importantes na virulncia e sobrevivncia da
bactria. Com relao s caractersticas do gnero Bacillus, correto
afirmar:
Assinale a alternativa correta.
a) So agentes virais.
b) So microrganismos Gram-positivos.
c) No produzem esporos.
d) So bastonetes imveis.
e) So microrganismo anaerbios estritos.

3. A doena est presente no mundo inteiro, sendo que os animais


ruminantes so mais susceptveis, enquanto que sunos e equinos

Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria 39


U3

so moderadamente susceptveis. Presentes no ambiente, esses


microrganismos produzem endsporos altamente resistentes, o
que favorvel para sua disseminao. Com relao aos agentes
pertencentes ao gnero Bacillus, correto afirmar:
I. So microrganismos Gram-negativos, anaerbios facultativos e
aerbios e crescem em meios no enriquecidos.
II. A presena de cpsula causa leses hemorrgicas em mltiplos
rgos e suprime a agregao plaquetria induzida pela trombina e
coagulao.
III. As carcaas de animais infectados apresentam inchao, no exibem
rigor mortis e presena de sangue escuro e no coagulado escorrido
pela boca, narinas e nus.
IV. No se recomenda abrir a carcaa de animais infectados, a fim de
evitar contaminao ambiental.
V. A formao de endsporos o fator mais importante na persistncia
e na disseminao do Bacillus anthracis.
Assinale a alternativa correta.
a) Somente as afirmativas II, IV e V so corretas.
b) Somente as afirmativas I, II e IV so corretas.
c) Somente as afirmativas II, III e V so corretas.
d) Somente as afirmativas I, III e IV so corretas.
e) Somente as afirmativas III, IV e V so corretas.

40 Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria


U3

Seo 3.4

Classificao das bactrias III

Dilogo aberto

Ol, aluno! Seja bem-vindo seo de estudos deste livro didtico!

Nesta seo estudaremos os gneros Staphylococcus, Streptococcus,


Corynebacterium, Listeria, Clostridium, Mycobacterium, Mycoplasma, Leptospira,
Brucella, Pasteurella e Pseudomonas e as principais doenas de importncia na
Medicina Veterinria.

Para melhor compreender o contedo abordado, vamos acrescentar


informaes na situao-problema referente ao relato de caso apresentado no
item Convite ao Estudo, dessa forma, voc participar indiretamente na resoluo
do caso.

Recentemente, o laboratrio de anlises clnicas do Hospital Veterinrio


recebeu amostras para diagnstico laboratorial. Em anexo com as amostras,
o mdico veterinrio encaminhou um laudo tcnico contendo informaes
detalhadas do atendimento clnico e indicando a suspeita de um agente bacteriano
pertencente ao gnero Brucella. De acordo com o laudo tcnico, o proprietrio
relatou a ocorrncia de um aborto aps o quinto ms de gestao do animal.
Durante o exame clnico, o mdico veterinrio no observou sinais clnicos
evidentes. Em seguida, foi coletado amostras de sangue do animal que abortou
e de vacas em lactao para serem analisadas em laboratrio. De acordo com o
tcnico laboratorial, as amostras (sangue) estavam identificadas e acondicionadas
adequadamente.

Mediante as informaes apresentadas e com auxlio dos contedos abordados


nesta seo, responda s questes para a resoluo do caso clnico.

 Cite as principais espcies do gnero Brucella.

 Descreva as caractersticas dos microrganismos pertencentes ao gnero


Brucella.

 Cite dois mtodos sorolgicos utilizados no diagnstico da brucelose.

Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria 41


U3

No pode faltar

Prezado aluno, a partir desta seo vamos comear a estudar os gneros


Staphylococcus, Streptococcus, Corynebacterium, Listeria, Clostridium,
Mycobacterium, Mycoplasma, Leptospira, Brucella, Pasteurella e Pseudomonas e
as principais doenas de importncia na Medicina Veterinria. Vamos l!

Gnero Staphylococcus

Os microrganismos pertencentes ao gnero Staphylococcus so Gram-


positivos, imveis, anaerbicos facultativos, com oxidase-negativa e catalase-
positiva. A principal diferenciao entre as espcies desse gnero a partir da
sntese da coagulase. Essa diferenciao importante para a caracterizao
de espcies que apresentam infeco (coagulase-negativa) e so toxignicas
(coagulase-positiva). No so formadores de esporos, porm sobrevivem em
objetos inanimados e ambientes inspitos por longo perodo de tempo.

Diagnstico: arranjos de estafilococos podem ser observados em esfregaos


com pus, quando corados apropriadamente. Isolamento bacteriano em meio
gar-sangue, gar-sangue seletivo e gar MacConkey (37C por 24 a 48 horas).
Como critrio de identificao, observa-se: caractersticas da colnia, presena
ou ausncia de hemlise, ausncia de crescimento no meio gar MacConkey,
produo de catalase, coagulase e perfil bioqumico.

Assimile

Os estafilococos so bactrias piognicas que causam leses


supurativas em animais infectados.

Gnero Streptococcus

Os microrganismos pertencentes ao gnero Streptococcus so classificados


como cocos Gram-positivos, anaerbios facultativos, imveis e com catalase-
negativa. A diferenciao entre as espcies do gnero Streptococcus baseado
no tipo de hemlise, no agrupamento de Lancefield e em testes bioqumicos.
Os estreptococos produtores de alfa-hemlise so menos patognicos do que
aqueles beta-hemolticos.

Diagnstico: amostras contendo agentes suspeitos devem ser rapidamente


cultivados, pois as espcies so altamente suscetveis dessecao. Isolamento
bacteriano em meio de cultura; esfregao; reao em cadeia da polimerase;
testes da catalase; agrupamento Lancefield e testes bioqumicos. Como critrio de
identificao, observa-se: colnias pequenas e translcidas (algumas mucoides),

42 Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria


U3

hemlise em gar-sangue, cadeias de cocos Gram-positivos, ausncia de


crescimento em gar MacConkey (exceo da E. Faecalis) e catalase-negativa.

Gnero Corynebacterium

Os microrganismos pertencentes ao gnero Corynebacterium esto


classificados como Gram-positivos e so morfologicamente corineformes.
Esses microrganismos no produzem esporos, so catalase-positiva, oxidase-
negativa, anaerbia facultativa, so imveis e necessitam de meios enriquecidos
para o seu crescimento. A diferenciao das corinebactrias baseada na
morfologia, aparncia da colnia, reaes bioqumicas e pelo teste de hemlise
(Corynebacterium pseudotuberculosis). Esses microrganismos so em sua maioria
oportunista, com exceo do Corynebacterium bovis.

Diagnstico: utiliza-se amostras de tecidos afetados, pus, exsudato e urina.


Isolamento bacteriano em meio de cultura. Como critrio de identificao, observa-
se: presena ou ausncia de hemlise, caractersticas das colnias e pleomorfismo
corineforme. Testes bioqumicos e especficos (Corynebacterium renale) e teste
de intensificao da hemlise (Corynebacterium pseudotuberculosis).

Gnero Listeria

Os microrganismos pertencentes ao gnero Listeria esto classificados como


bacilos Gram-positivos, crescem em meios no enriquecidos e em temperatura
varivel de 4 a 45C. Esses microrganismos so mveis, anaerbios facultativos,
com catalase-positiva e oxidase-negativa. A diferenciao entre as espcies
baseada na hemlise em gar-sangue, no teste de CAMP e a produo de cido
a partir de aucares. Kits bioqumicos e fagotipagem podem ser utilizados para
diferenciao das espcies bacterianas.

Diagnstico: amostras dependem da forma da doena: a) sinais neurolgicos:


fluido cerebrospinal e tecidos da medula; b) aborto: cotildones, descargas
uterinas e contedo abomasal do feto; c) septicemia: fgado ou bao. Testes e
mtodos: isolamento bacteriano; imunofluorescncia; exame histopatolgico;
teste da catalase e teste de CAMP. Como critrios de identificao, observa-se:
colnias pequenas, lisas e planas de colorao azul-esverdeada; catalase-positiva;
CAMP-positivo; e isolados incubados em caldo apresentam motilidade rotativa.

Gnero Clostridium

Os microrganismos pertencentes ao gnero Clostridium so bacilos (retos


ou levemente curvos) Gram-positivos e requerem meios enriquecidos para o
crescimento. Possuem flagelos peritrqueos, so mveis (exceto Clostridium
perfringens), com catalase-negativa, oxidase-negativa, produzem endsporos
e a maioria das espcies patognicas so anaerbias estritas (algumas so

Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria 43


U3

aerotolerantes). A diferenciao entre as espcies pode ser baseada no tamanho,


forma e localizao dos endsporos; cromatografia gs-lquido (identificao de
cidos orgnicos); testes bioqumicos e mtodos de neutralizao das toxinas.

Diagnstico: a) Ttano: sinais clnicos, diferenciao de intoxicao por


estricnina, esfregaos de leses corados pelo mtodo de Gram, cultivo em
anaerobiose a partir de tecido necrtico de feridas e demonstrao de neurotoxina
circulante; b) Botulismo: sinais clnicos, histrico de acesso a alimentos
contaminados, demonstrao da toxina no soro de animais infectados e deteco
de genes que codificam a toxina do Clostridium botulinum pelo mtodo de reao
em cadeia da polimerase; testes de neutralizao de toxinas e identificao de
toxinas em restos de alimentos; c) Clostrdios histotxicos: tcnicas de anticorpos
fluorescentes, cultivo em gar-sangue para Clostridium perfringens (tipo A), teste
de CAMP-positivo e reao de nagler; d) Clostrdios enteropatognicos: sinais
clnicos, achados post-mortem, esfregaos diretos da mucosa ou de contedo do
intestino delgado, teste de neutralizao de toxinas (inoculao de camundongos
ou cobaias), ELISA para detectar toxinas e glicosria (rim polposo).

Gnero Mycobacterium

Os microrganismos pertencentes ao gnero Mycobacterium so classificados


como bacilos (cidos resistentes) Gram-positivos, aerbios, imveis e no
formadores de esporos. Embora sejam classificados como Gram-positivos, a
presena do cido miclico e de lipdeos na parede celular impedem a entrada
de corantes pela tcnica de Gram. Para diferenciao das espcies bacterianas
preciso se ater s caractersticas culturais, testes bioqumicos, anlises
cromatogrficas, tcnicas moleculares, inoculao em animais e a tcnica de
colorao de Ziehl-Neelsen.

Diagnstico: a) Tuberculose bovina: prova da tuberculina intradrmica (teste


cervical intradrmico nico e o teste cervical intradrmico comparativo); teste
com base no sangue (ensaio interferon-gama e ELISA para deteco de anticorpos
circulantes); isolamento de Mycobacterium bovis (descontaminao de outras
espcies) em meios a base de ovos ou de gar enriquecidos com soro ou sangue
(mais de 12 semanas podem ser necessrias para o crescimento); critrios de
identificao (aparncia, taxa de crescimento, temperatura, pigmentao das
colnias, colorao Ziehl-Neelsen-positivas, tcnicas bioqumicas, analticas
e moleculares); b) Tuberculose em frangos e outras espcies: amostras para
microscopia direta (raspagens, bipsia do reto por puno), cultura (fezes), testes
sorolgicos (soro), post-mortem (tecidos infectados e linfonodos regionais),
esfregaos corados pela tcnica de Ziehl-Neelsen e PCR. Critrios de identificao
(colnias menores que 1mm e colnias Ziehl-Neelsen-positivas).

44 Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria


U3

Reflita

A tuberculose em bovinos causada pelo Mycobacterium bovis, sua


transmisso ocorre principalmente por aerossis gerados por animais
infectados.

Gnero Mycoplasma

Os microrganismos pertencentes ao gnero Mycoplasma so pleomrficos,


anaerbios facultativos, no se coram pelo mtodo de Gram e requerem meios
enriquecidos para o seu crescimento. Esses microrganismos possuem uma tripla
camada de membrana externa flexvel, porm no possuem uma parede celular
rgida. A diferenciao entre eles baseada pela especificidade ao hospedeiro,
requerimentos para colesterol, morfologia da colnia, por reaes bioqumicas e
mtodos sorolgicos.

Diagnstico: as amostras para exame laboratorial incluem raspados da


mucosa, exsudato traqueal, aspirados, tecido pulmonar, leite de mastite e fluidos
das articulaes, as quais devem ser entregues sob refrigerao em um perodo
de 48 horas. Testes e mtodos: reao em cadeia da polimerase; imunolgicos;
sorolgicos (teste de fixao do complemento, testes de aglutinao rpida,
testes de inibio da hemaglutinao); isolamento bacteriano (10% de CO2,
atmosfera mida, 37C por 14 dias). Critrios de identificao: microcolnias no
formato de ovo frito, requerimentos de colesterol para crescimento, tamanho das
microcolnias, perfil bioqumico, etc.

Vocabulrio

Bactria Gram-negativa: refere-se a bactria que perde a cor do cristal


violeta na descolorao por lcool; ela se cora de vermelho aps
tratamento com safranina.

Bactria gram-positiva: refere-se a bactria que retm a cor do cristal


violeta aps descolorao por lcool; ela se cora de prpura-escuro.

Sorovar: refere-se a uma variao dentro de uma espcie, tambm


denominado de sorotipo.

Gnero Leptospira

Os microrganismos pertencentes ao gnero Leptospira possuem morfologia


espiralada com extremidades no formato de gancho, so Gram-negativas (porm
no se coram bem com corantes convencionais), so mveis, possuem flagelo

Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria 45


U3

ligado parede celular em cada extremidade do microrganismo, possui membrana


externa, parede celular e a maioria requer meios especializados. A visualizao
auxiliada com microscpio de campo escuro. A diferenciao entre as espcies
pode ser mediada por anlises sorolgicas, atualmente, tambm ocorre pela
homologia no DNA.

Diagnstico: Em amostras de urina fresca possvel identificar o microrganismo


com o auxlio de microscopia de campo escuro. No sangue, pode-se identificar
o microrganismo nos sete primeiros dias e na urina, nas duas semanas aps a
infeco inicial. O isolamento bacteriano requer meios especializados, utiliza-
se meio-base EMJH com 1% de albumina de soro bovino e Tween 80. Para
identificao de isolados, analisado o perfil de DNA e a sorologia. Em tecidos
(rins, fgado e pulmes), tm sido utilizado mtodos de anticorpos fluorescentes e
testes sorolgicos (teste de aglutinao microscpica).

Gnero Brucella

Os microrganismos pertencentes ao gnero Brucella so cocobacilos Gram-


negativos e imveis. Esses microrganismos so aerbios, capnoflicas, catalse-
positiva, oxidase-positiva (exceo da Brucella ovis e da Brucella neotomae),
urase-positiva (exceo Brucella ovis). A diferenciao entre as espcies
de Brucella baseada pelas caractersticas das colnias, testes bioqumicos,
inibio de crescimento por corantes, requerimentos especficos em culturas e,
para identificao definitiva, aplica-se a tcnica de aglutinao com soro mono
especfico.

Diagnstico: o diagnstico se baseia em testes sorolgicos, isolamento e


identificao do microrganismo. Amostras de cotildones, abomaso fetal e secreo
uterina podem ser utilizados em esfregaos corados pelo mtodo Ziehl-Neelsen-
modificado. Isolamento e identificao de Brucella abortus confirmatrio.
Critrios de identificao: aparncia das colnias, microrganismos pela tcnica de
Ziehl-Neelsen-modificado-positivo, atividade urase, biotipagem e aglutinao de
clulas bacterianas com antissoro; testes intradrmicos (Brucelina); diagnstico
sorolgico (rosa-de-bengala, soroaglutinao lenta com 2-mercaptoetanol); ensaio
de imunoadsoro enzimtica; ensaio homogneo de fluorescncia polarizada;
fixao de complemento e mtodos moleculares (PCR).

Exemplificando

A brucelose bovina causada pela bactria Brucella abortus, a


transmisso ocorre principalmente pela ingesto do microrganismo,
porm a infeco pode ocorrer pelo contato venreo, inalao,
penetrao em leses presentes na pele ou por transmisso

46 Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria


U3

transplacentria. A brucelose bovina causa aborto, orquite e pode ser


excretada pelo leite.

Gnero Pasteurella

Os microrganismos pertencentes ao gnero Pasteurella so pequenos bacilos


Gram-negativos, anaerbios facultativos, imveis, so oxidase-positivos, a maioria
das espcies so catalase-postiva e crescem em meios no-enriquecidos.
A diferenciao entre as espcies se baseia nas caractersticas coloniais, no
crescimento das colnias, em reaes bioqumicas, sorotipagem e biotipagem.

Diagnstico: esfregaos podem ser corados pelo mtodo de Giemsa ou pelo


de Leishman. Para o isolamento bacteriano utiliza-se o meio gar-sangue e gar
MacConkey. Para seleo da Pasteurella multocida pode-se utilizar neomicina,
bacitracina e actidiona. Como critrio de identificao, observa-se as caractersticas
coloniais, crescimento em gar MacConkey, teste positivo para oxidase e perfil
bioqumico.

Gnero Pseudomonas

Os microrganismos pertencentes ao gnero Pseudomonas so bastonetes


Gram-negativos, aerbios, possuem parede celular circundada por uma cpsula,
possuem flagelos polares e so mveis. A diferenciao entre as espcies baseada
nas caractersticas bioqumicas das colnias, na temperatura de crescimento (42C),
produo de oxidase, positivo para oxidao de glicose, negativo para oxidao
de lactose e sacarose e muitas espcies produzem pigmentos em meios sem
corantes gar-nutriente. Pigmentos produzidos por Pseudomonas aeruginosa:
piocianina (verde-azulado), pioverdina (amarelo-esverdeado), piorubina (vermelho)
e piomelanina (marrom-escuro).

Diagnstico: para isolamento bacteriano, utiliza-se gar-sangue e gar


MacConkey. Como critrio de identificao incluem a morfologia da colnia,
odor caracterstico (semelhante uva), produo de piocianina (azul-esverdeado),
lactose-negativa, colnias descoradas em meio gar MacConkey, perfil bioqumico
e oxidase-positivo.

Principais doenas de importncia na Medicina Veterinria

Gnero Staphylococcus

Os principais microrganismos de importncia veterinria e suas condies


clnicas: Staphylococcus aureus (bovinos: mastite e impetigo no bere; ovinos:
mastite, piemia pelo carrapato, foliculite benigna e dermatite; caprinos: mastite
e dermatite; sunos: botriomicose da glndula mamria e impetigo na glndula
mamria; equinos: cordo esquirroso e mastite; ces e gatos: condies

Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria 47


U3

supurativas; aves domsticas: artrite e septicemia em perus, pododermatite


ulcerativa e onfalite em aves recm-eclodidas); Staphylococcus intermedius (ces:
pioderma, endometrite, cistite, otite externa e condies supurativas; gatos: diversas
complicaes piognicas; bovinos: raramente mastite); Staphylococcus hyicus
(sunos: epidermite exsudativa, artrite; bovinos: raramente mastite); Staphylococcus
aureus, subespcie anaerobius (ovinos: linfadenite); Staphylococcus schleiferi
subespcie coagulans (ces: otite externa).

Gnero Streptococcus

Os principais microrganismos de importncia veterinria e suas condies


clnicas: Streptococcus pyogenes (humanos: febre escarlate, infees na garganta
e febre reumtica); Streptococcus agalactiae (bovinos, ovinos e caprinos: mastite
crnica; humanos e ces: septicemia neonatal); Streptococcus dysgalactiae
(bovinos: mastite aguda; cordeiros: poliartrite); Streptococcus equisimilis (equinos:
abscessos, endometrite e mastite; sunos, bovinos, ces e pssaros: condies
supurativas); Streptococcus equi (equinos: garrotilho, prpura hemorrgica
e condies supurativas); Streptococcus zooepidemicus (equinos: mastite,
pneumonia e infeces no umbigo; bovinos, cordeiros, sunos e aves domsticas:
condies supurativas e septicemia); Enterococcus faecalis (diversas espcies
animais: condies supurativas); Streptococcus suis (sunos: septicemia, meningite,
artrite e broncopneumonia; bovinos, ovinos, equinos e gatos: condies supurativas;
humanos: septicemia e meningite); Streptococcus porcinus (sunos: linfadenite
submandibular); Streptococcus canis (animais carnvoros: septicemia neonatal,
condies supurativas e sndrome do choque txico); Streptococcus uberis
(bovinos: mastite); e Streptococcus pneumoniae (porcos da ndia: pneumonia;
humanos e primatas: pneumonia, septicemia e meningite).

Gnero Corynebacterium

Os principais microrganismos de importncia veterinria e suas condies


clnicas: Corynebacterium bovis (bovinos: mastite subclnica); Corynebacterium
kutscheri (roedores de laboratrio: abscessos superficiais, focos caseopurulentos
no fgado, pulmo e nos linfonodos); Corynebacterium pseudotuberculosis
(bitipo redutor de nitrato em ovinos e caprinos: linfadenite caseosa; bitipo
no redutor de nitrato, equinos e bovinos: linfangite ulcerativa e abscessos);
Corynebacterium renale tipo I (bovinos, ovinos e caprinos: cistite, pielonefrite
e balanopostite ulcerativa); Corynebacterium pilosum tipo II (bovinos: cistite e
pielonefrite); Corynebacterium cystitidis tipo III (bovinos: cistite grave e, raramente,
pielonefrite); Corynebacterium ulcerans (bovinos: mastite).

Gnero Listeria

Os principais microrganismos de importncia veterinria e suas condies


clnicas: Listeria monocytogenes (ovinos, bovinos e caprinos: encefalite na forma

48 Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria


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nervosa, aborto, septicemia e endoftalmite na forma ocular; ces, gatos e equinos:


aborto, septicemia e encefalite; sunos: aborto, septicemia e encefalite; bovinos:
raramente causa mastite; pssaros: septicemia); Listeria ivanovii (ovinos e bovinos:
aborto); e Listeria innocua (ovinos: raramente ocorre meningoencefalite).

Gnero Clostridium

Os principais microrganismos de importncia veterinria e suas condies


clnicas: Clostridium tetani (vrias espcies: um tipo antignico, causa o ttano
e espasmos musculares); Clostridium botulinum (vrias espcies: oito toxinas
classificadas em tipo de A a G, causa o botulismo e paralisia flcida); Clostridium
chauvoei (bovinos e ovinos: carbnculo sintomtico); Clostridium septicum
(bovinos, sunos e ovinos: edema maligno; ovinos: abomasite e febre carbuncular);
Clostridium novyi Tipo A (carneiros jovens: cabea inchada e infeces em feridas);
Clostridium perfringens tipo A (frangos: enterite necrtica; sunos: enterocolite
necrosante e gangrena gasosa; caninos: gastrenterite hemorrgica), tipo B
(cordeiros: disenteria; bezerros e potros: enterite hemorrgica); tipo C (ovinos
adultos: enterotoxemia struck; caprinos e bovinos: morte sbita; frangos: enterite
necrtica; sunos recm-nascidos: enterite hemorrgica); tipo D (ovinos: doena
do rim polposo; bezerros, caprinos adultos e cabritos: enterotoxemia); tipo E
(bezerros: enterite hemorrgica; coelhos: enterite); Clostridium sodellii (bovinos,
ovinos e equinos: miosite; cordeiros: abomasite); Clostridium novyi tipo B (ovinos:
hepatite necrtica infecciosa doena negra; bovinos: ocasionalmente, hepatite
necrtica infecciosa); e Clostridium haemolyticum (bovinos: hemoglobinria
bacilar; ovinos: ocasionalmente, ocorre hemoglobinria bacilar).

Gnero Mycobacterium

Os principais microrganismos de importncia veterinria e suas condies


clnicas: Mycobacterium tuberculosis (principalmente humanos e primatas em
cativeiro e, ocasionalmente, ces, gatos, psitacdeos e canrios: causa tuberculose);
Mycobacterium bovis (principalmente bovinos e, ocasionalmente, veados,
gambs, texugos, humanos, gatos e outras espcies de mamferos: tuberculose);
Mycobacterium avium (principalmente espcies avirias (exceto psitacdeos)
e, ocasionalmente, sunos e bovinos: tuberculose (bovinos infectados com o
Mycobacterium avium apresentam sensibilidade tuberculina); Mycobacterium
microti (principalmente ratos silvestres e, ocasionalmente, mamferos:
tuberculose); Mycobacterium marinum (principalmente peixes e, ocasionalmente,
humanos, mamferos aquticos e anfbios: tuberculose); Mycobacterium
leprae (principalmente humanos e, ocasionalmente, tatus e chimpanzs:
lepra); Mycobacterium lepramurium (principalmente ratos e camundongos
e, ocasionalmente, gatos: lepra murina e lepra felina); Mycobacterium avium e
subespcie paratuberculosis (principalmente bovinos, ovinos, caprinos, veados e,
ocasionalmente, demais ruminantes: paratuberculose ou doena de Johne).

Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria 49


U3

Pesquise mais
Leia mais sobre o tema no seguinte artigo:

RUGGIERO, A. P. et al. Tuberculose bovina: alternativas para o


diagnstico. Arquivos do Instituto Biolgico, So Paulo, v. 74, n. 1, p.
55-65, jan./mar. 2007. Disponvel em: <http://www.biologico.sp.gov.
br/docs/arq/v74_1/ruggiero.pdf>. Acesso em: 20 jul. 2016.

Gnero Mycoplasma

Os principais microrganismos de importncia veterinria e suas condies


clnicas: Mycoplasma mycoides (bovinos: pleuropneumonia contagiosa);
Mycoplasma bovis (bovinos: mastite, pneumonia e artrite); Mycoplasma agalactia
(ovinos e caprinos: agalactia contagiosa); Mycoplasma capricolum subespcie
capripneumoniae (caprinos: pleuropneumonia contagiosa); Mycoplasma
capricolum subespcie capricolum (ovinos e caprinos: septicemia, mastite,
poliartrite e pneumonia); Mycoplasma mycoides subespcie mycoides (caprinos e
ovinos: pleuropneumonia, mastite, septicemia e poliartrite); Mycoplasma mycoides
subespcie capri (caprinos: septicemia, pleuropneumonia, artrite e mastite);
Mycoplasma hyopneumoniae (sunos: pneumonia enzotica); Mycoplasma
hyorhinis (sunos jovens: poliserosite); Mycoplasma gallisepticum (frangos e perus:
doena respiratria crnica e sinusite infecciosa); Mycoplasma synoviae (aves
domsticas: sinovite infecciosa); e Mycoplasma meleagridis (perus: aerossaculite,
deformidades sseas, ecloso e reduo na taxa de crescimento).

Gnero Leptospira

Os principais microrganismos de importncia veterinria e suas condies


clnicas: Leptospira borgpetersenii sorovar hardjo e Leptospira interrogans
sorovar hardjo (bovinos e ovinos: abortos, natimortos e agalactia; humanos:
gripe semelhante influenza e, ocasionalmente, doena heptica ou renal);
Leptospira borgpetersenii sorovar tarassovi (sunos: falncia reprodutiva, abortos
e natimortos); Leptospira interrogans sorovar bratislava (sunos, equinos e ces:
abortos, natimortos e falha reprodutiva); Leptospira interrogans sorovar canicola
(ces e sunos: doena renal crnica em animais adultos, abortos, natimortos,
nefrite aguda em filhotes e doena renal em sunos jovens); Leptospira interrogans
sorovar grippotyphosa (bovinos, sunos e ces: abortos e doena septicmica em
animais jovens); Leptospira interrogans sorovar icterohaemorrhagiae (bovinos,
ovinos, sunos, ces e humanos: doena septicmica aguda em animais jovens,
abortos, hepatite com ictercia e doena hemorrgica superaguda); Leptospira
interrogans sorovar pomona (bovinos e ovinos: doena hemoltica aguda em
animais jovens e abortos; sunos: septicemia em leites, falncia reprodutiva e

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abortos; e equinos: abortos e oftalmia peridica).

Gnero Brucella

Os principais microrganismos de importncia veterinria e suas condies


clnicas: Brucella abortus (principalmente em bovinos: aborto e orquite;
ocasionalmente em ovinos, caprinos e sunos: aborto; equinos: bursite; humanos:
febre intermitente e doena sistmica); Brucella melitensis (principalmente em
caprinos e ovinos: aborto, orquite e artrite; ocasionalmente em bovinos: aborto
e brucelas no leite; humanos: febre de Malta e doena sistmica grave); Brucella
susis (principalmente em sunos: aborto, artrite, orquite, infertilidade e espondilite;
ocasionalmente em humanos: febre intermitente e doena sistmica); Brucella
ovis (principalmente ovinos: epididimite e aborto); e Brucella canis (principalmente
em ces: epididimite, aborto, discoespondilite e esterilidade em machos;
ocasionalmente em humanos: doena sistmica moderada).

Gnero Pasteurella

Os principais microrganismos de importncia veterinria e suas condies clnicas:


Pasteurella multocida tipo A (bovinos: pasteurelose pulmonar bovina, conhecida
como febre do transporte, associada ao complexo de pneumonia enzotica de
bezerros e, raramente, mastite; ovinos: mastite e pneumonia; sunos: rinite atrfica
e pneumonia; aves domsticas: clera aviria; coelhos: espirros e corrimento nasal;
demais espcies animais: pneumonia aps estresse); tipo B (bovinos e bfalos:
septicemia hemorrgica); tipo D (sunos: rinite atrfica e pneumonia); tipo E (bovinos
e bfalos: septicemia hemorrgica); Pasteurella haemolytica bitipo A (bovinos:
pasteurelose pulmonar bovina, conhecida como febre do transporte; ovinos:
septicemia em animais jovens, pneumonia e mastite gangrenosa); Pasteurella
trehalosi ou Pasteurella haemolytica bitipo T (ovinos: septicemia).

Gnero Pseudomonas

Os principais microrganismos de importncia veterinria e suas condies


clnicas: Pseudomonas aeruginosa (bovinos: mastite, pneumonia, metrite,
dermatite e enterite em bezerros; sunos: infeces respiratrias e otite; equinos:
pneumonia, infeces no trato genital, ceratite ulcerativa; ovinos: podrido da l,
mastite, pneumonia e otite mdia; ces e gatos: cistite, otite externa, pneumonia e
ceratite ulcerativa; musteldeos: septicemia e pneumonia hemorrgica; chinchilas:
pneumonia e septicemia; rpteis em cativeiro: estomatite necrtica).

Faa voc mesmo

Agora com voc! Pesquise mais sobre a patogenia e sinais clnicos


das doenas que estudamos nesta seo. Consulte os materiais de
apoio:

Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria 51


U3

FLORES, E. F. Virologia veterinria: virologia geral e doenas vricas. 2.


ed. Santa Maria: UFSM, 2012.

Quinn, P. J. et. al. Microbiologia veterinria e doenas infecciosas.


Porto Alegre: Artmed Editora, 2005.

Sem medo de errar

Para compreender melhor a situao apresentada, vamos recapitular os


pontos que foram analisados anteriormente na situao-problema. O laboratrio
tem como objetivo prestar servios aos profissionais da rea Veterinria, a fim de
identificar agentes patolgicos utilizando diferentes mtodos de diagnsticos para
auxiliar na resoluo de casos clnicos.

Mediante as informaes apresentadas e com auxlio dos contedos abordados


nesta seo, responda as questes para a resoluo do caso clnico.

 Cite as principais espcies do gnero Brucella.

Os principais microrganismos do gnero Brucella so: Brucella abortus, Brucella


melitensis, Brucella suis, Brucella ovis, Brucella canis e Brucella neotomae.

 Descreva as caractersticas dos microrganismos pertencentes ao gnero


Brucella.

Os microrganismos pertencentes ao gnero Brucella so cocobacilos Gram-


negativos e imveis. Esses microrganismos so aerbios, capnoflicas, catalse-
positiva, oxidase-positiva (exceo de Brucella ovis e de Brucella neotomae) e
urase-positiva (exceo Brucella ovis).

 Cite dois mtodos sorolgicos utilizados no diagnstico da brucelose.

Dois mtodos de diagnstico sorolgico so: rosa-de-bengala e soroaglutinao


lenta com 2-mercaptoetanol.

Ateno

Os microrganismos pertencentes ao gnero Brucella so cocobacilos


Gram-negativos e imveis. Esses microrganismos so aerbios,
capnoflicas, catalse-positiva, oxidase-positiva (exceo da Brucella
ovis e da Brucella neotomae), urase-positiva (exceo Brucella ovis).

52 Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria


U3

Avanando na prtica

Tuberculose em bovinos

Descrio da situao-problema

Recentemente, um mdico veterinrio foi solicitado para realizar o atendimento


clnico em uma propriedade leiteira. O proprietrio solicitou que ele realizasse a
prova da tuberculina intradrmica de quatro vacas leiteiras que estava adquirindo.
Durante o exame clnico dos animais, o mdico veterinrio no constatou sinais
clnicos caractersticos da doena. Os animais foram submetidos ao teste de
tuberculinizao cervical simples. Os resultados evidenciaram negativo para trs
animais e inconclusivo para um animal. Em seguida, o profissional submeteu os
animais ao teste intradrmico cervical comparativo, o qual resultou em positivo. Por
isso, ele informou ao Servio Oficial Veterinrio a existncia de um animal positivo
para tuberculose. Em seguida, amostras de sangue foram coletadas e encaminhadas
para anlise em laboratrios credenciados pelo Servio Oficial Veterinrio.

Mediante as informaes apresentadas e com auxlio dos contedos abordados


nesta seo, responda s questes para auxiliar na resoluo do caso clnico.

 Qual a espcie bacteriana que est causando a tuberculose nos bovinos


leiteiros?

 Qual o procedimento para diferenciao de espcies bacterianas


pertencentes ao gnero Mycobacterium?

 Quais so as caractersticas das espcies bacterianas pertencentes ao


gnero Mycobacterium?

 Cite os testes realizados para identificao de animais.

 Quais so as caractersticas dos meios utilizados para o cultivo do


microrganismo causador da tuberculose bovina?

Lembre-se

Com relao aos microrganismos do gnero Mycobacterium, embora


sejam classificados como Gram-positivos, a presena do cido miclico
e de lipdeos na parede celular impedem a entrada de corantes pela
tcnica de Gram.

Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria 53


U3

Resoluo da situao-problema

Em continuidade com o relato de caso, o Servio Oficial Veterinrio j havia


indicado positivo para o animal e procedeu com as medidas em conformidade com
a Lei. No laboratrio, o tcnico procedeu com a tcnica adequada para o agente
suspeito. As amostras foram descontaminadas para permitir o crescimento do
Mycobacterium bovis. Em seguida, a amostra foi cultivada em meio gar enriquecido
com sangue em tubo inclinado a 37C. A presena do agente bacteriano se
confirmou com 27 dias de incubao. Os resultados evidenciaram a presena da
bactria Mycobacterium bovis.

 Qual a espcie bacteriana que est causando a tuberculose nos bovinos


leiteiros?

O agente causador da tuberculose em bovinos a bactria Mycobacterium bovis.

 Qual o procedimento para diferenciao de espcies bacterianas


pertencentes ao gnero Mycobacterium?

A diferenciao das espcies bacterianas se baseia nas caractersticas culturais,


testes bioqumicos, anlises cromatogrficas, tcnicas moleculares, inoculao em
animais e a tcnica de colorao de Ziehl-Neelsen.

 Quais so as caractersticas das espcies bacterianas pertencentes ao gnero


Mycobacterium?

Os microrganismos pertencentes ao gnero Mycobacterium so classificados


como bacilos (cidos resistentes) Gram-positivos, aerbios, imveis e no formadores
de esporos.

 Cite os testes realizados para identificao de animais.

Prova da tuberculina intradrmica (teste intradrmico cervical nico e teste


intradrmico cervical comparativo).

 Quais so as caractersticas dos meios utilizados para o cultivo do


microrganismo causador da tuberculose bovina?

O isolamento do Mycobacterium bovis (descontaminao de outras espcies)


dever ser realizado em meios a base de ovos ou de gar enriquecidos com soro ou
sangue (mais de 12 semanas podem ser necessrias para o crescimento).

54 Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria


U3

Faa valer a pena

1. Os microrganismos pertencentes ao gnero Staphylococcus


acometem uma ampla variedade de animais, causando desde infeces
localizadas, como mastite em bovinos e otite externa em ces, at
quadros de septicemia. Com relao s caractersticas dos agentes
bacterianos pertencentes ao gnero Staphylococcus, correto afirmar.
Assinale a alternativa correta.
a) So microrganismos Gram-positivos.
b) So microrganismos mveis.
c) So microrganismos anaerbios estritos.
d) So microrganismos oxidase-positiva e catalase negativa.
e) A principal diferenciao entre as espcies do gnero a sntese de
coagulase.

2. Bovinos leiteiros esto sujeitos infeces nas glndulas mamrias,


infeco denominada Mastite. Esse processo infeccioso causa grandes
prejuzos produo de leite e ao produtor, podendo ocorrer o
descarte do animal infectado, caso no haja um tratamento adequado.
O gnero Streptococcus possui dois microrganismos causadores da
mastite: a bactria Streptococcus agalactiae e Streptococcus uberis.
Com relao s caractersticas dos microrganismos pertencentes ao
gnero Streptococcus, correto afirmar:
Assinale a alternativa correta.
a) So microrganismos que possuem estruturas de bacilus.
b) So microrganismos anaerbios estritos.
c) No causam hemlise em meio gar-sangue.
d) No crescem em meio gar MacConkey.
e) So microrganismos Gram-negativos.

3. Os microrganismos pertencentes ao gnero Corynebacterium


causam infeces em bovinos (mastite subclnica), ovinos e caprinos
(linfadenite caseosa), roedores (abcessos e focos caseopurulentos no
fgado, pulmo e linfonodos) e equinos (abcessos e linfangite ulcerativa).
Com relao s caractersticas dos microrganismos pertencentes ao
gnero Corynebacterium, correto afirmar:
I. So microrganismos Gram-negativos.

Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria 55


U3

II. Morfologicamente so classificados como corineformes.


III. So microrganismos produtores de esporos.
IV. So microrganismos de catalase-positiva.
V. So microrganismos de oxidase-negativa.
Assinale a alternativa correta.
a) Somente as afirmativas II, IV e V so corretas.
b) Somente as afirmativas I, II e IV so corretas.
c) Somente as afirmativas II, III e V so corretas.
d) Somente as afirmativas I, III e IV so corretas.
e) Somente as afirmativas III, IV e V so corretas.

56 Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria


U3

Referncias

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br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0100-736X2012000700008#title>. Acesso
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ENGELKIRK, P. G. B. Microbiologia para as cincias da sade. 9. ed. Rio de Janeiro:
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microbiologia mdica. Revista de Cincias Farmacuticas Bsica e Aplicada, So
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58 Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria


U3

aque/3b2tWyo5eouIkUC_2014-7-27-17-8-33.pdf>. Acesso em: 21 ago. 2016.


ZAPPA, Vanessa; LEOPOLDINO, Danielly C. C.; OLIVEIRA, Richard G.; Mormo em
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jul. 2016.

Bacteriologia especial aplicada Medicina Veterinria 59


LIVRO

UNIDADE 4

Microbiologia
veterinria
aplicada
Micologia geral e especial
aplicada medicina
veterinria

Fernando Zawadzki
2016 por Editora e Distribuidora Educacional S.A

Todos os direitos reservados. Nenhuma parte desta publicao poder ser reproduzida
ou transmitida de qualquer modo ou por qualquer outro meio, eletrnico ou mecnico,
incluindo fotocpia, gravao ou qualquer outro tipo de sistema de armazenamento e
transmisso de informao, sem prvia autorizao, por escrito, da Editora e
Distribuidora Educacional S.A.

2016
Editora e Distribuidora Educacional S. A.
Avenida Paris, 675 Parque Residencial Joo Piza
CEP: 86041 100 Londrina PR
e-mail: editora.educacional@kroton.com.br
Homepage: http://www.kroton.com.br/
Sumrio

Unidade 4 | Micologia geral e especial aplicada medicina veterinria 5

Seo 4.1 - Morfologia e identificao dos fungos 7


Seo 4.2 - Identificao dos fungos filamentosos 17
Seo 4.3 - Doenas fngicas veterinrias 31
Seo 4.4 - Fisiologia e identificao das micotoxinas 45
Unidade 4

Micologia geral e especial


aplicada medicina veterinria
Convite ao estudo
Ol, aluno! Seja bem-vindo unidade de estudos 4 deste livro didtico!

Animais de companhia e de produo esto sujeitos a infeces


causadas por fungos. Os agentes fngicos produzem infeces
superficiais, cutneas ou subcutneas na pele, nos cabelos ou nas
unhas, sem necessariamente ocasionar danos sade animal. Animais
imunossuprimidos esto mais sujeitos a infeces profundas ou
sistmicas causadas por fungos patognicos ou oportunistas, que podem
comprometer a sade do animal. Portanto, conhecer os fungos e as
suas caractersticas morfolgicas de fundamental importncia para o
mdico veterinrio em uma sociedade cada vez mais exigente, podendo,
dessa forma, aplicar os conhecimentos na preveno, no controle e no
tratamento de doenas fngicas.

Competncia geral

Conhecer os principais microrganismos de interesse em medicina


veterinria (bactrias, fungos e vrus), enfocando particularmente a
taxonomia, ou seja, as caractersticas morfolgicas, ecolgicas, de
sensibilidade, de resistncia e de identificao laboratorial.

Competncia tcnica

Conhecer e compreender as particularidades dos fungos e dos


processos infecciosos (por fungos) de importncia clnica para a
veterinria.

Objetivos

Entre os objetivos desta unidade, o aluno dever:

Conhecer a morfologia dos fungos.

Conhecer o procedimento de identificao dos fungos.


U4

Identificar fungos filamentosos.

Conhecer as principais doenas fngicas de interesse veterinrio.

Conhecer a fisiologia e a identificao de micotoxinas.

Para auxiliar o contedo das competncias que sero atribudas nesta


unidade, no pargrafo subsequente, apresentaremos uma situao da
realidade profissional de um atendimento clnico realizado por um mdico
veterinrio. Nessa situao, aproximaremos os contedos tericos da
prtica proposta nesta unidade. Leia, com ateno, o atendimento clnico
realizado pelo mdico veterinrio:

O hospital veterinrio (HV) da universidade possui uma alta rotina de


atendimento clnico, cirrgico e de anlises laboratoriais, atendendo
animais de companhia e de produo. Diariamente, o HV de pequenos
animais atende, em mdia, de 10 a 15 animais (ces, gatos, pssaros e
animais silvestres), enquanto que o HV de grandes atende uma mdia
de quatro animais (equinos, bovinos, ovinos e sunos). O HV de grandes
animais conta com uma equipe de atendimento a campo, que presta
servios clnicos, cirrgicos e de coleta de material para anlises
laboratoriais na propriedade rural. Para dar suporte rotina de atendimento
clnico, o HV possui um laboratrio de anlises clnicas (LAC), que realiza
diferentes anlises laboratoriais e que tambm presta servios para outras
clnicas veterinrias. O LAC disponibiliza diversos equipamentos para a
identificao de agentes patognicos, com o objetivo de proporcionar um
diagnstico preciso e rpido. De acordo com o tcnico, a demonstrao
de agentes fngicos mediada por exames microscpicos, de cultura
(isolamento e identificao) e histopatolgico. Mediante a prestao de
servios do LAC, vamos acompanhar as diferentes anlises laboratoriais e
os seus respectivos casos clnicos.

Vamos comear os estudos?

Mos obra e boa sorte!

6 Micologia geral e especial aplicada medicina veterinria


U4

Seo 4.1

Morfologia e identificao dos fungos

Dilogo aberto

Ol, aluno! Seja bem-vindo seo de estudos deste livro didtico!

Nesta seo, estudaremos a morfologia e os procedimentos para a identificao


dos fungos. Para melhor compreender o contedo abordado, vamos acrescentar
informaes situao-problema referente ao relato apresentado no item Convite
ao estudo. Dessa forma, voc participar indiretamente da resoluo do caso:

Recentemente, o hospital veterinrio de pequenos animais realizou o


atendimento clnico de um co com, aproximadamente, 2 anos e meio de idade,
que apresentava uma infeco auricular havia 10 dias. Apesar disso, o proprietrio
relatou que o animal estava em dia com as vacinas. Durante o exame clnico,
o mdico veterinrio confirmou a existncia do quadro infeccioso, observando
hipersecreo das glndulas ceruminosas (produo excessiva e reteno de
cera), exsudato inflamatrio e restos necrticos acumulados no canal do ouvido.
Tambm, foi observada uma dermatite seborreica na pele do animal. De acordo
com o mdico veterinrio, nesse caso, o quadro de infeco podia ser decorrente
de uma infeco bacteriana ou fngica e estar associada com a imunossupresso.
Em seguida, foram coletadas amostras do exsudato do canal auditivo e realizada
raspagem de pele para anlise laboratorial.

Mediante as informaes apresentadas na situao da realidade profissional, e


com auxlio dos contedos abordados nesta seo, responda aos enunciados, a
seguir, para a resoluo do caso clnico:

Com relao aos agentes fngicos, descreva suas principais caractersticas.

Descreva a estrutura da clula fngica.

Micologia geral e especial aplicada medicina veterinria 7


U4

No pode faltar

Prezado aluno, a partir desta seo, comearemos a estudar a morfologia e os


procedimentos para identificao dos fungos. Vamos l!

Introduo aos estudos dos fungos

A micologia um ramo da microbiologia que estuda os fungos. Os fungos


so microrganismos celulares eucariticos que esto classificados no reino
Fungi. Nele, esto classificadas as leveduras (unicelulares), os bolores ou mofos
(pluricelulares) e os cogumelos (espcies macroscpicas). Os fungos so
classificados separadamente dos animais, das bactrias e das plantas, em funo
da presena de quitina e glucanos em sua parede celular. Apesar de estarem
relacionados com o desenvolvimento de doenas, os fungos possuem um papel
importante na decomposio de resduos orgnicos (plantas e animais mortos) e
na ciclagem de nutrientes. Para manter as funes vitais, os fungos absorvem a
matria orgnica dissolvida atravs da membrana plasmtica e se reproduzem a
partir de esporos ou fragmentos de hifas. Alm de participarem na decomposio
de matria orgnica, os fungos possuem outras funes importantes, como na
produo de alimentos (na fabricao de pes ou no processo de fermentao de
cerveja e vinhos), na confeco de medicamentos (na produo de antibiticos)
e na fabricao de produtos qumicos (na fabricao de detergentes). Entretanto,
os fungos patognicos e oportunistas podem causar infeces em animais e
humanos. Os fungos so causadores de infeces superficiais, cutneas ou
subcutneas na pele, nos cabelos ou nas unhas, sem necessariamente ocasionar
danos sade animal. Animais imunossuprimidos esto sujeitos a infeces
profundas ou sistmicas causadas por fungos patognicos ou oportunistas, que
podem comprometer sua sade.

Reflita

Os fungos so microrganismos eucariotas, sendo, as leveduras,


unicelulares, e os fungos filamentosos, pluricelulares.

Caracterizao morfolgica e fisiolgica da colnia e da clula fngica

Os fungos so microrganismos eucariotas, no-fotossintticos, uni e


pluricelulares, quimioheterotrficos (que obtm nutrientes por absoro), so
aerbios (sendo, muitos, aerbios estritos), possuem uma parede celular constituda
de quitina e polissacardeos e crescem em um ambiente de pH variando de 5,5 a 6.

Os fungos que apresentam esporos so denominados de telemrficos. Os


esporos podem apresentar flagelos (zosporos) ou no. Os zosporos apresentam

8 Micologia geral e especial aplicada medicina veterinria


U4

o grupo filogentico denominado de quitridiomicetos (fungos ancestrais que vivem


em meio aqutico e solos midos). Os esporos ausentes de flagelos apresentam
o grupo filogentico zigomicetos (hifas cenocticas). Ainda nos esporos ausentes
de flagelos, h outras duas divises denominadas de ascsporos, em que est
presente o grupo filogentico ascomicetos (hifas septadas), e os basidisporos, em
que est presente o grupo filogentico basidiomicetos (hifas septadas). Os fungos
deuteromicetos no so considerados um grupo filogentico fngico. Os fungos
classificados como deuteromicetos so fungos que no possuem um processo de
reproduo conhecido.

Morfologicamente, os fungos filamentosos se apresentam na forma de hifas


ramificadas (fungos pluricelulares) e as leveduras se apresentam na forma oval ou
esfrica (fungos unicelulares). A estrutura da clula fngica composta de parede
celular, membrana plasmtica, citoplasma, ncleo e cpsula. A parede celular
constituda de componentes como glucanas, mananas, quitina, protenas e lipdios,
que conferem rigidez clula fngica. A membrana plasmtica est associada
ao citoplasma, sendo composta por duas camadas de fosfolipdios, recobertas
por protenas. Nessa membrana, contm esteris em forma de ergosterol. No
citoplasma, encontram-se as incluses de glicognio, mitocndrias, vacolos
de alimentos, gordura, condrioma, ribossomos e retculo endoplasmtico,
que participam da sntese e do metabolismo energtico. No ncleo, esto as
molculas de DNA, RNA, juntamente com outras protenas. importante ressaltar
que os fungos podem apresentar mais de um ncleo, onde ocorrer a produo
do RNA ribossomal. Alguns fungos podem apresentar uma cpsula constituda
de mucopolissacardeos, sendo importante para a patognese do fungo, com a
funo de inibir a fagocitose.

Assimile

A classificao taxonmica dos fungos realizada pelas caractersticas


morfolgicas, e os fungos so agrupados de acordo com as
caractersticas comuns.

Identificao e caracterizao dos miclios

A identificao dos fungos baseada no estgio sexual e nas caractersticas


morfolgicas das espcies fngicas. De modo geral, os fungos so caracterizados
em leveduras (unicelular, em forma ovoide ou esfrica), bolores ou mofos
(pluricelular, em forma de hifas ramificadas), que so fungos microscpicos, e os
cogumelos, que so considerados macroscpicos.

Os fungos que apresentam a forma de hifas ramificadas so denominados de


fungos filamentosos e so pluricelulares. As hifas podem ser septadas (divide a hifa

Micologia geral e especial aplicada medicina veterinria 9


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em unidades semelhantes a uma clula) ou cenocticas (ausente de septos). As


hifas crescem por alongamento das extremidades a partir dos esporos, processo
denominado de esporulao. Em condies ideais para o crescimento, as hifas
desenvolvem uma massa filamentosa que denominada de miclio (visvel a olho
nu). A regio da hifa que obtm o nutriente para o seu crescimento denominada
de hifa vegetativa (miclio vegetativo) e a regio da hifa que est envolvida com
a reproduo denominada de hifa reprodutiva ou area (miclio reprodutivo).
Alguns fungos (principalmente os patognicos) podem apresentar as duas formas
de crescimento (hifas ramificadas e oval ou esfrica), sendo denominados de
dimrficos. Outros fungos que produzem formas adicionais a essas duas so
denominados de polimrficos.

Exemplificando

Nos nveis taxonmicos, os sufixos empregados so: diviso (sufixo


mycota); classe (mycetes); ordem (ales); famlia (aceae); gnero e
espcie (no h uma em especfico). Exemplo: reino: Fungi; diviso:
Ascomycota; classe: Hymenomycetes; ordem: Tremellales; famlia:
Filobasidiaceae; gnero: Filobasidiella; espcie: Neoformans.

Condios e tipo de reproduo das clulas fngicas

Normalmente, os fungos produzem esporos assexuais. Os esporos assexuais


produzem dois tipos de esporos: os conidisporos ou condios e o esporangisporo.
Os condios so formados nas extremidades dos conidiforos. Os condios
formados a partir de uma hifa septada so denominados de artrocondios. Enquanto
que os condios so formados a partir da clula parental, sendo denominados
de blastocondios. Os condios formados pelo arredondamento e alargamento
no interior de um segmento da hifa so denominados de clamidocondios. O
esporangisporo formado no interior de um esporngio (bolsa) localizado na
hifa area, denominando-se esporangiforo. Os esporos sexuais produzem os
filos ascsporos, basidisporos e zigsporos. Os ascsporos se originam mediante
a fuso do ncleo de duas clulas, que podem ser similares ou diferentes. Os
basidisporos so formados por meiose nos basdios. Enquanto que os zigsporos
so decorrentes da fuso de ncleos de duas clulas similares, caracterizando-se
pela presena de um esporo no interior de uma parede espessa.

O ciclo reprodutivo dos fungos leveduriformes pode ocorrer na forma sexuada


e assexuada. Na forma assexuada, a reproduo pode ocorrer por cissiparidade
(diviso direta) ou por brotamento (gemulao). No processo de reproduo por
cissiparidade, as leveduras dividem o ncleo por amitose, que gera clulas idnticas.
No processo de reproduo por gemulao, a reproduo pode gerar mais de 24
clulas-filhas por cada brotamento, sendo formadas clulas de tamanho desigual.

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U4

Nesse processo, a clula parental desenvolve uma protuberncia na superfcie


externa da clula. Durante o desenvolvimento da protuberncia (broto), o ncleo
da clula parental se divide e migra para o broto. Em seguida, a parede celular
sintetizada e o broto desmembrado da clula parental. Os brotos que no
se separam da clula parental so denominados de pseudo-hifas e permanecem
conectadas com as clulas parentais.

Vocabulrio

Clamidsporo: estrutura constituda de reserva nutritiva, com


membrana espessa que resiste aos fatores externos.

Demcio ou demaciceo: fungo negro que tem pigmento melanoide


em sua parede celular.

Hialino: no apresenta cor, translcido, assume a cor do corante


utilizado.

Em fungos filamentosos, a formao de esporos pode ocorrer na forma


assexuada e sexuada. A reproduo assexuada caracterizada por duas fases,
a mitose e, subsequentemente, a diviso celular, enquanto que a reproduo
sexuada caracterizada em trs fases, ou seja, a plasmogamia, a cariogamia e a
meiose. Na fase plasmogamia, o ncleo haploide de uma clula doadora penetra
no citoplasma da clula receptora. Na fase cariogamia, os ncleos se fundem para
constituir um ncleo zigoto diploide. Na fase de meiose, o ncleo diploide origina
um ncleo haploide (esporos sexuais). Os esporos so formados a partir das hifas
areas, que podem ser assexuais (geneticamente idnticos clula parental) ou
sexuais (que apresentam caractersticas de ambas as linhagens parentais).

Pesquise mais
Agora com voc! Leia o artigo referenciado a seguir:

ALMEIDA, M. S. et al. Isolamento microbiolgico do canal auditivo de


ces saudveis e com otite externa na regio metropolitana de Recife,
Pernambuco. Pesquisa Veterinria Brasileira, Rio de Janeiro, v. 36, n. 1,
p. 29-32, jan. 2016. Disponvel em: <http://dx.doi.org/10.1590/S0100-
736X2016000100005>. Acesso em: 19 Ago. 2016.

Micologia geral e especial aplicada medicina veterinria 11


U4

Sem medo de errar

Para compreender melhor a situao apresentada, vamos recapitular os pontos


que foram analisados anteriormente. O hospital veterinrio possui um laboratrio
de anlises clnicas, que tem como objetivo dar suporte aos atendimentos clnicos
realizados no HV e prestar servios aos profissionais da rea veterinria externa, a fim
de identificar agentes patolgicos, utilizando diferentes mtodos de diagnsticos.

Mediante as informaes apresentadas na situao-problema, e com o auxlio


dos contedos abordados nesta seo, responda aos enunciados, a seguir, para a
resoluo do caso clnico:

Com relao aos agentes fngicos, descreva suas principais caractersticas.

Resposta: Os fungos so microrganismos eucariotas, no-fotossintticos,


uni e pluricelulares, quimioheterotrficos (que obtm nutrientes por absoro),
possuem uma parede celular constituda de quitina e polissacardeos e crescem
em um ambiente de pH variando de 5 a 6.

Descreva a estrutura da clula fngica.

Resposta: A estrutura da clula fngica composta por parede celular,


membrana plasmtica, citoplasma, ncleo e cpsula. A parede celular constituda
de componentes como glucanas, mananas, quitina, protenas e lipdios, que
conferem rigidez clula fngica. A membrana plasmtica est associada ao
citoplasma, sendo composta por duas camadas de fosfolipdios, recobertas por
protenas. Nessa membrana, contm esteris que so em forma de ergosterol.
No citoplasma, encontram-se as incluses de glicognio, mitocndrias, vacolos
de alimentos e gordura, condrioma, ribossomos e retculo endoplasmtico,
que participam da sntese e do metabolismo energtico. No ncleo, esto as
molculas de DNA, RNA, juntamente com outras protenas. importante ressaltar
que os fungos podem apresentar mais de um ncleo, onde ocorrer a produo
do RNA ribossomal. Alguns fungos podem apresentar uma cpsula constituda de
mucopolissacardeos, que importante para a patognese do fungo com a funo
de inibir a fagocitose.

Ateno

Morfologicamente, os fungos filamentosos (bolores e mofos) se


apresentam na forma de hifas ramificadas (fungos pluricelulares), e as
leveduras, na forma oval ou esfrica (fungos unicelulares).

12 Micologia geral e especial aplicada medicina veterinria


U4

Avanando na prtica

Criptococose felina

Descrio da situao-problema

Recentemente, o hospital veterinrio de pequenos animais realizou o


atendimento clnico de um gato com suspeita de criptococose felina. O
proprietrio relatou ao mdico veterinrio que o seu animal comeou a apresentar
leses cutneas no pescoo e na cabea h algumas semanas. O animal no
tinha histrico de vacinao ou de medicao. Durante o exame clnico, o
mdico veterinrio observou leses cutneas na face, no pescoo e na cabea.
Examinando a cavidade nasal, foi observada a presena de granulomas em forma
de plipos. Em seguida, com o auxlio de uma lmina de bisturi estril, foi realizada
uma raspagem nos locais que apresentavam as leses. O material coletado foi
encaminhado para anlise laboratorial.

Mediante as informaes apresentadas, e com o auxlio dos contedos


abordados nesta seo, responda aos enunciados, a seguir, para a resoluo do
caso clnico:

Caracterize, morfologicamente, as leveduras.

Com relao aos agentes fngicos, descreva o ciclo reprodutivo das


leveduras.

Lembre-se

A identificao dos fungos baseada, principalmente, nas caractersticas


morfolgicas.

Resoluo da situao-problema

Em continuidade ao relato de caso, as amostras foram submetidas a um exame


direto, de cultura e cultivo em lmina, para isolamento e identificao do agente
fngico. Ambos os testes confirmaram a presena do agente fngico Cryptococcus
neoformans.

Caracterize morfologicamente as leveduras.

Resposta: As leveduras so unicelulares e apresentam uma forma oval ou


esfrica.

Com relao aos agentes fngicos, descreva o ciclo reprodutivo das


leveduras.

Micologia geral e especial aplicada medicina veterinria 13


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Resposta: A reproduo em leveduras pode ocorrer de forma assexuada


ou sexuada. Na forma assexuada, a reproduo pode ocorrer por cissiparidade
(diviso direta) ou por brotamento (gemulao). No processo de reproduo por
cissiparidade, as leveduras dividem o ncleo por amitose, que gera clulas idnticas.
No processo de reproduo por gemulao, a reproduo pode gerar mais de 24
clulas-filhas por cada brotamento, sendo formadas clulas de tamanho desigual.
Nesse processo, a clula parental desenvolve uma protuberncia em sua superfcie
externa. Com o crescimento da protuberncia (broto), o ncleo da clula parental
se divide e migra para o broto. Em seguida, a parede celular sintetiza, e o broto
desmembrado da clula parental. Os brotos que no se separam da clula parental
so denominados de pseudo-hifas.

Faa voc mesmo

Agora com voc! Pesquise sobre tcnicas laboratoriais utilizadas em


micologia mdica. Consulte o seguinte material de apoio:

ZAITZ, C. et. al. Compndio de micologia mdica. 2. ed. Rio de Janeiro:


Guanabara Koogan, 2012.

Faa valer a pena

1. Os fungos so classificados separadamente de animais, bactrias e


plantas. A classificao decorrente dos componentes que compe sua
estrutura da clula fngica. Com relao aos fungos, marque V para
verdadeira e F para falsa:
( ) Os fungos filamentosos so unicelulares.
( ) Os bolores e mofos so fungos filamentosos.
( ) Os cogumelos so classificados como fungos.
( ) As leveduras so clulas pluricelulares.
( ) Os fungos decompem em matria orgnica.
Assinale a alternativa que indica a sequncia correta da classificao das
afirmaes entre verdadeiras e/ou falsas:
a) F, V, V, F e V.
b) V, F, F, V e F.
c) V, F, V, F e V.
d) F, V, F, V e V.
e) V, V, V, F e F.

14 Micologia geral e especial aplicada medicina veterinria


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2. Os fungos possuem funes importantes na produo de alimentos


(na fabricao de pes, no processo de fermentao de cerveja e
vinhos), na confeco de medicamentos (na produo de antibiticos)
e na fabricao de produtos qumicos (na fabricao de detergentes).
Entretanto, os fungos patognicos e oportunistas podem causar
infeces em animais e humanos. A seguir, complete as lacunas,
descrevendo sobre os fungos. A ______________ um ramo da
microbiologia que estuda os fungos. Os fungos so microrganismos
celulares _____________, que esto classificados no ____________.
No reino Fungi, esto presentes as ________________ (unicelulares),
os _______________ (pluricelulares) e os _________________
(espcies macroscpicas).
Assinale a alternativa correta que completa a ordem das lacunas:
a) Bacteriologia, eucariticos, reino Fungi, leveduras, bolores ou mofos
e cogumelos.
b) Micologia, procariticos, reino Fungi, leveduras, bolores ou mofos
e cogumelos.
c) Micologia, eucariticos, reino Fungi, leveduras, bolores ou mofos e
cogumelos.
d) Bacteriologia, procariticos, reino Fungi, bolores ou mofos, leveduras
e cogumelos.
e) Micologia, eucariticos, reino Fungi, cogumelos, leveduras e bolores
ou mofos.

3. Vrias tcnicas so utilizadas para estabelecer ou confirmar um


diagnstico fngico. Os fungos so identificados, principalmente, com
base na morfologia da clula fngica. Com relao morfologia dos
fungos, correto afirmar:
I. Os fungos leveduriformes apresentam hifas ramificadas.
II. Os fungos filamentosos apresentam a forma oval ou esfrica.
III. Os fungos possuem parede celular.
IV. No citoplasma, encontram-se as incluses de glicognio.
V. A membrana plasmtica contm esteris que esto na forma de
ergosterol.
A seguir, assinale a alternativa correta:
a) Somente as afirmativas II, IV e V so corretas.
b) Somente as afirmativas I, II e V so corretas.
c) Somente as afirmativas I, III e V so corretas.

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d) Somente as afirmativas III, IV e V so corretas.


e) Somente as afirmativas I, II e III so corretas.

16 Micologia geral e especial aplicada medicina veterinria


U4

Seo 4.2
Identificao dos fungos filamentosos

Dilogo aberto

Ol, aluno! Seja bem-vindo seo de estudos deste livro didtico!

Nesta seo, estudaremos a identificao dos fungos filamentosos de


importncia na medicina veterinria. Para melhor compreender o contedo
abordado, acrescentaremos informaes situao-problema, referente ao relato
de caso apresentado no item Convite ao estudo. Dessa forma, voc participar
indiretamente na resoluo do caso:

Recentemente, o laboratrio de anlises clnicas do hospital veterinrio recebeu


amostras para o diagnstico de um agente fngico. Junto s amostras, o mdico
veterinrio encaminhou um laudo tcnico, contendo informaes detalhadas do
atendimento clnico e indicando a suspeita de um agente fngico. De acordo com o
laudo tcnico, as amostras de tecido post-mortem foram coletadas de um bezerro
decorrente de um aborto. O proprietrio relata que as vacas se apresentavam em
condies normais e estavam mantidas em pastagem, entretanto, nas ltimas
semanas, os animais passaram a receber feno e, dias depois, uma das vacas, que
estava no final da gestao, abortou. Imediatamente, ele entrou em contato com o
mdico veterinrio que, logo em seguida, se deslocou para a propriedade. No exame
clnico, foi confirmado um aborto no final da gestao. Os cotildones apresentavam-
se aumentados e os necrticos e o tecido placentrio intercotiledonrio, espesso e
rgido. Ao realizar uma inciso nos cotildones afetados, foi observado vasculite.
Verificando a alimentao fornecida, constatou-se que o feno estava em condies
inadequadas para ser fornecido aos animais, contendo mofo em grande parte do
estoque. Dessa forma, o mdico veterinrio descartou hipteses de outras doenas
reprodutivas e indicou a suspeita de uma infeco fngica, causando um aborto
mictico. Posteriormente, coletaram-se amostras teciduais para anlise laboratorial
e secrees da vagina da vaca que abortou.

Mediante as informaes apresentadas, e com o auxlio dos contedos


abordados nesta seo, responda aos enunciados, a seguir, para a resoluo do
caso clnico:

Cite os gneros pertencentes ao filo Zygomycota.

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Descreva as caractersticas macroscpicas das colnias das espcies


fngicas Mortierella wolfii e Saksenaea vasiformis.

No pode faltar

Prezado aluno, a partir desta seo, comearemos a identificao dos fungos


filamentosos de importncia na medicina veterinria. Vamos l!

Identificao por gnero e espcie

A diferenciao entre os fungos baseada, principalmente, na estrutura


morfolgica, porm outros procedimentos laboratoriais podem ser adotados,
como mtodos moleculares, de cultivo em meio artificial, testes histopatolgicos
e testes sorolgicos. Morfologicamente, h dois principais tipos de fungos de
interesse veterinrio: os filamentosos, denominados de bolores ou mofos, e os
leveduriformes, denominados de leveduras.

Assimile

Os fungos filamentosos apresentam hifas ramificadas que podem ser


septadas ou cenocticas (ausentes de septo), enquanto as leveduras
apresentam a forma oval ou esfrica.

Os agentes fngicos classificados no grupo dermatfitos apresentam trs


gneros denominados de Microsporum, Trichophyton e Epidermophyton. Estes
fungos apresentam hifas septadas, crescem lentamente, so aerbios estritos e
suas colnias so pigmentadas. A seguir, algumas caractersticas morfolgicas dos
macrocondios de determinados fungos do gnero Microsporum: Microsporum
canis (macrocondio fusiforme, rugoso, com parede grossa e com at quinze
septos); Microsporum gypseum (macrocondio em forma de canoa, rugoso, com
parede fina e at seis septos); Microsporum nanum (macrocondio em forma
de pera ou ovoide, rugoso e com parede fina) e Trichophyton mentagrophytes
(macrocondio em forma de charuto, liso, com parede fina e at sete septos).

No gnero Aspergillus, os agentes fngicos so filamentosos, aerbios,


saprofticos, possuem hifas septadas, hialinas, conidiforos, crescem em ngulo
reto, a ponta do conidiforo cresce e apresenta forma de uma vescula recoberta
por estruturas (mtula, filide e condio). Seu crescimento rpido, formando
colnias de colorao verde-azulada, preta, marrom, amarela ou avermelhada
(anverso). As colnias podem apresentar at 5 cm de dimetro, com crescimento
entre 20C a 50C. A colorao do reverso, que determinada pela pigmentao
dos condios, de amarelo-claro a castanho-claro e, com o tempo, passa a
ser acinzentada. Aspergillus niger so granulares e apresentam colnias pretas.

18 Micologia geral e especial aplicada medicina veterinria


U4

Aspergillus flavus possuem textura felpuda e colorao amarelo-esverdeada.


Aspergillus terrus possuem textura granular e apresentam colorao marrom-
avermelhadas. A aplicao lactonefol-azul de algodo sobre as cabeas aspergilares
permite caracterizar o tamanho, a forma das vesculas, a posio das filides e a
cor dos condios. Procedimentos moleculares e sorolgicos podem ser adotados
na deteco de fungos Aspergillus fumigatus.

Reflita

A espcie Aspergillus fumigatus responsvel pela maioria das infeces


em animais.

Os fungos classificados como dimrficos apresentam-se na forma filamentosa


e leveduriforme. Entre as espcies classificadas nesse grupo, esto os filos:
Blastomyces dermatitidis, Histoplasma capsulatum, Histoplasma farciminosum,
Coccidioides immitis e Sporothrix schenckii:

Os Blastomyces dermatitidis, na forma filamentosa, apresentam condios


em forma oval ou de pera sobre conidiforos ou nas hifas septadas, e na
forma de levedura, apresentam uma forma oval com parede espessa. As
colnias podem apresentar colorao branca e algodonosas, passando
para marrom com o envelhecimento da colnia (quando incubado de
25C a 30C), alm da formao de condios ovais ou em forma de pera, a
partir dos conidiforos ou das hifas. Na forma de leveduras, essas colnias
fngicas apresentam cor de creme a castanho-claro e so enrugadas e
cerosas. Procedimentos moleculares, histopatolgicos de tecidos afetados
e sorolgicos podem auxiliar no diagnstico.

Fungos Histoplasma capsulatum e farciminosum apresentam colnias


de colorao branca a amareladas, com hifas areas algodonosas. Em
colnias velhas, observa-se a produo de microcondios tuberculados,
a partir de conidiforos delgados, que se assemelham a um girassol. Na
forma de leveduras, esse fungo apresenta colnias arredondadas, mucoides
e colorao creme. Outros procedimentos, como colorao de Giemsa,
exame histopatolgico de tecidos afetados e mtodo molecular, podem
auxiliar no diagnstico do agente fngico.

Os fungos no filo Coccidioides immitis apresentam grandes esfrulas,


contendo endsporos e, na forma filamentosa, apresenta hifas septadas
com artrsporos. Em meios de cultivo, as colnias apresentam aspecto
brilhante, colorao acinzentadas, midas e, com o tempo, tornam-se
brancas e algodonosas. Culturas suspeitas podem ser confirmadas com
testes de imunodifuso. Outros mtodos podem ser adotados para a

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identificao fngica, com o auxlio de testes de aglutinao, fixao de


complemento, inoculao intraperitoneal em camundongos e mtodos
moleculares.

Os Sporothrix schenckii apresentam-se na forma filamentosa e


leveduriforme. Na forma filamentosa, as hifas so septadas com
conidiforos cnicos e condios na forma de rosetas, enquanto, na forma
de levedura, estes fungos apresentam formas pleomrficas, com formato
de charuto. Em laboratrio, as colnias apresentam crescimento rpido,
so rugosas, duras e possuem colorao branca, tornando-se de pretas
a marrons (em cultivo a 25C). O agrupamento de condios (forma de
pera) nos conidiforos delgados apresentam forma de roseta. Em cultivo
entre 35C a 37C, as colnias apresentam cor de creme a castanho-
claro, sendo que as leveduras apresentam formato de charuto. Outros
mtodos podem ser utilizados na deteco do agente fngico, como o
exame histopatolgico de tecidos suspeitos, imunoperoxidase e tcnicas
de anticorpos fluorescentes.

Os fungos pertencentes ao filo Zygomycota possuem hifas asseptadas


largas, crescem rpido, os esporangisporos so produzidos
assexuadamente e os zigsporos so esporos sexuados. No filo
Zygomycota, duas ordens so de interesse veterinrio, os Mucorales
e os Entomophthorales. Desses, os Mucorales possuem seis gneros
(Absidia, Mucor, Rhizomucor, Rhizomucor, Mortierella e Saksenaea) e os
Entomophthorales possuem dois gneros (Basidiobolus e Conidiobolus)
de importncia veterinria.

Os fungos de ordem Mucorales (fungos-alfinete ou fungo-do-po)


apresentam esporngios escuros em forma de pera (Absidia) e redondo
(Mucor, Rhizomucor e Rhizopus). Os esporangiforos so ramificados,
produzem filamentos rizoides, localizados nos esporangiforos (Absidia),
entre os esporangiforos (Rhizomucor), em baixo dos esporangiforos
(Rhizopus), sendo o gnero Mucor ausente. Uma estrutura denominada
de apfise observada no gnero Absidia, ausente no gnero Mucor
e imperceptvel nos gneros Rhizomucor e Rhizopus. Duas espcies
principais (Mortierella wolfii e Saksenaea vasiformis) esto associadas a
doenas em animais. As colnias dos gneros Absidia, Mucor, Rhizomucor
e Rhizopus so felpudas acinzentadas ou marrom-acinzentadas. No caso
das colnias da espcie Mortierella wolfii, so aveludadas, brancas e
com contornos lobulados, enquanto que a espcie Saksenaea vasiformis
apresenta colnias de penugens brancas. Outros procedimentos podem
ser utilizados para a identificao do agente (histopatolgica, mtodos de
anticorpos fluorescentes e testes sorolgicos).

20 Micologia geral e especial aplicada medicina veterinria


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Os fungos de ordem Entomophthorales apresentam uma nica


caracterstica, que a produo de um nico condio. Microscopicamente,
os Basidiobolus possuem hifas largas asseptadas, com zigosprios redondos
e de parede espessa. Os Conidiobolus possuem conidiforos nicos com
condios esfricos. Macroscopicamente, a diferenciao desses fungos
mediada pela morfologia da colnia: na espcie de Basidiobolus, as
colnias so lisas, apresentam odor de terra e colorao cinza-amarelada
e possuem forma plana com superfcie pulverulenta e branca; para as
espcies de Conidiobolus, as colnias apresentam cor de creme que se
tornam marrons, so planas, lisas e com superfcie pulverulenta e branca.
O exame histopatolgico pode auxiliar na identificao do agente fngico.

Vocabulrio

Artrocondios: esporos formados e liberados no processo de


fragmentao das hifas.

Clamidsporos: esporos de parede espessa que contm produtos de


armazenamento.

Esporangisporos: esporos formados por zigomicetos.

Processamento de amostras

Os resultados laboratoriais esto diretamente relacionados com o


acondicionamento e o processamento do material biolgico a ser analisado. O
acondicionamento do material biolgico que ser encaminhado ao laboratrio
deve ser adequado e o processamento da amostra condizente com o exame
eleito para a identificao do agente fngico. A manipulao de espcimes
suspeitas deve ser executada em cabines de biossegurana para minimizar riscos
de contaminao ambiental e infeces em humanos. Entre os diversos materiais
biolgicos que se pode utilizar na identificao de agentes fngicos, esto: pele e
pelos, escarro, unhas, sangue e aspirado de medula ssea, urina, fezes, secrees
de pele ou conduto auditivo, aspirado gstrico, pus (material de abscesso), aspirado
traqueal e secreo coletada por broncoscopia, lquor, bipsia de tecido, contedo
de micose ocular, leso de nariz e seios paranasais, mucosa oral e orofaringe,
secreo vaginal e lquidos corporais.

As amostras devem ser acondicionadas em recipientes estreis, que possibilitam


a vedao, e devem ser identificadas corretamente (espcie animal, sexo, idade, tipo
de amostra, data e local de coleta). Um laudo tcnico com informaes detalhadas
sobre o caso clnico deve acompanhar a amostra, a fim de auxiliar o tcnico
na eleio da metodologia mais adequada para o isolamento e a identificao
do agente fngico. Os diversos materiais biolgicos que podem ser eleitos no

Micologia geral e especial aplicada medicina veterinria 21


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momento da coleta, como pus, fezes, urina e secrees, devem ser condicionadas
sob refrigerao em caixa trmica, com o auxlio de gelo, e encaminhados para o
laboratrio, em at duas horas aps coleta. Para pus e material de abscesso, deve-
se utilizar seringa com agulha estril. Materiais biolgicos, como lquor e lquidos
cavitrios, devem ser encaminhados em recipientes lacrados, sob temperatura
ambiente, at o laboratrio, e processados com urgncia. Outros materiais, como
sangue e puno da medula ssea, tambm devem ser analisados imediatamente.
No caso do sangue, deve ser assim para evitar sua coagulao. Na coleta de pele
e pelos, a superfcie deve ser descontaminada com o auxlio de lcool 70%, antes
do procedimento. Em seguida, com o auxlio de uma lmina de bisturi estril,
deve-se raspar as escamas cutneas da borda das leses, que sero condicionadas
em uma lmina de microscopia. Deve-se utilizar swabs estreis umedecidos em
soluo salina para secrees e pele do conduto auditivo externo. Na coleta de
material oriundo de micose ocular, no se deve proceder a coleta com swabs, e
sim, mediar por bipsia, aspirador ou raspagem. Tecidos oriundos de necropsia ou
bipsia devem ser coletados com instrumentos esterilizados e acondicionados em
recipientes estreis com soluo salina.

No laboratrio, as amostras devem ser processadas adequadamente para


prosseguir com o mtodo de diagnstico eleito. No caso de pelos, unhas e escamas
de pele, as amostras devem ser submetidas a um processo de clareamento para
a anlise microscpica. No processo de clareamento, emprega-se uma soluo
aquosa constituda de KOH, a 20%. No caso de cultivo em meio artificial, as amostras
devem ser inoculadas diretamente, sem passar por nenhum processamento. Em
amostras de urina, elas podem ser centrifugadas em velocidade de 1500 a 2000
rpm, por 10 minutos, para a anlise microscpica. Para o cultivo, elas so semeadas
por esgotamento em meio de cultura. Para secrees, lquor e fludos corporais,
as amostras em estado lquido devem ser centrifugadas em velocidade de 1500 a
2000 rpm, por 10 minutos, para concentr-las. No caso de coleta do material com
auxlio de swabs, deve-se colocar em soluo salina e centrifugar, para concentrar
a amostra. O material obtido aps a centrifugao pode ser utilizado para o exame
microscpico ou para o cultivo em meio de cultura. As amostras de tecidos
obtidos por bipsia ou necropsia devem ser fragmentadas para o cultivo em meio
de cultura, a fim de proporcionar maior contato. Deve-se utilizar utenslios estreis
no processo de manipulao das amostras. Em amostras de escarro, a poro
purulenta deve ser eleita para a coleta, evitando as pores liquefeitas. Para anlise
microscpica, as amostras devem ser submetidas a soluo de KOH, a 20%, a fim
de fluidificar a amostra. No caso de cultivo em meio de cultura, as amostras no
devem ser processadas com a soluo de KOH. No caso da utilizao de amostras
de sangue e aspirados da medula ssea, elas no precisam passar pelo processo de
preparao. As amostras no devem ser coletadas com anticoagulantes e devem
ser cultivadas imediatamente em meio de cultura.

22 Micologia geral e especial aplicada medicina veterinria


U4

Exemplificando

Na anlise macroscpica de fungos filamentosos, observam-se


superfcie, cor, pigmento difusvel no meio de cultura e textura.

Na anlise microscpica de fungos filamentosos, observam-se


estruturas como hifa (septada ou cenoctica e hialina ou demcia),
presena de esporos, forma e disposio.

Exames micro e macroscpicos

Na micologia, diferentes tcnicas esto disponveis para estabelecer ou


confirmar o diagnstico de uma infeo causada por um agente fngico. Entre
as tcnicas utilizadas, esto os exames microscpicos (como exame micolgico
direto) e macroscpicos (como cultivo em meio de cultura e lmpada de Wood
etc), que permitem a identificao ou a indicao de um agente fngico.

No exame microscpico, as amostras devem ser processadas antes de serem


visualizadas no microscpio ptico, o que permite a visualizao do agente fngico
na amostra analisada. Com o auxlio de um microscpico ptico, diferentes
procedimentos podem ser adotados (preparados para melhor visualizao),
conforme o tipo de material biolgico. Entre as tcnicas utilizadas, esto o exame
microscpico com hidrxido de potssio, o exame microscpico com tinta
nanquim, o exame microscpico pelo mtodo de Gram e o exame microscpico
com colorao pantica:

a) No exame microscpico com hidrxido de potssio (KOH), as amostras de


tecidos, unhas, pelos, pele e demais materiais biolgicos espessos so submetidas a
uma soluo de KOH, a 20%. Nessa tcnica, um fragmento da amostra colocado
em uma lmina de microscopia e, em seguida, adiciona-se uma gota de KOH, a
20%, que submetida a um ligeiro aquecimento na chama do bico de Bunsen para
melhorar o processo de clareamento. Em seguida, deve-se esperar 20 minutos
para posterior leitura no microscpico ptico nas objetivas 10x e 40x.

b) No exame microscpico com tinta nanquim, as amostras de secrees,


exsudatos, urina e lquor so submetidas a tinta nanquim. Nessa tcnica, uma gota
da amostra centrifugada colocada em uma lmina de microscopia e, em seguida,
adiciona-se uma gota da tinta nanquim. Feito isso, coloca-se uma lamnula e se
visualiza em microscpio ptico com objetiva 10x e 40x. Os agentes fngicos
ficam evidentes pela colorao do fundo negro causado pela tinta.

c) No exame microscpico pelo mtodo de Gram, as amostras de fezes,


urina e secrees so submetidas tcnica de colorao de Gram, que auxilia

Micologia geral e especial aplicada medicina veterinria 23


U4

na descriminao de agentes fngicos em uma amostra suspeita. Porm, essa


tcnica no permite identificar os agentes virais. Com o auxlio de uma lmina de
microscopia, a amostra empregada sobre a lmina fixada com a ajuda do calor e
submetida ao procedimento de colorao da tcnica de Gram. Aps concludo,
a lmina analisada em microscopia ptica.

d) No exame microscpico com colorao pantica, as amostras de sangue,


aspirados, secrees cutneas e de medula ssea so submetidas ao processo
colorao (Giemsa, Wright ou Leishman). A tcnica procede-se com a preparao
de um esfregao com a amostra eleita, em seguida, fixa-se com metanol e, ento,
o esfregao submetido ao processo de colorao (Giemsa, Wright ou Leishman).
Posteriormente, a lmina preparada analisada em microscpio ptico.

No exame macroscpico, os aspectos morfolgicos so observados visualmente


com o auxlio de uma lupa, porm sem a ajuda de um microscpio ptico. No
exame macroscpico, dois mtodos so amplamente utilizados: a tcnica de
cultivo, que permite identificar o agente suspeito, e a lmpada de Wood, que nos
fornece um indicativo da presena de agentes fngicos. Assim, prevalecer o meio
de cultura como mtodo essencial no diagnstico de agentes fngicos.

O mtodo de cultura uma tcnica macroscpica empregada no isolamento


e na identificao de agentes fngicos (filamentosos e leveduriformes). Nessa
tcnica, amostras de sangue, lquor, pus, urina, escarros, fragmentos de tecidos,
entre outros materiais biolgicos, podem ser cultivados em meio cultura. Entre
as caractersticas coloniais de fungos filamentosos, observa-se o tamanho, a
aparncia, a cor do anverso e do reverso e a presena de elevao ou depresso na
superfcie. As leveduras podem ser diferenciadas por aparncia, tamanho e forma
das clulas. Normalmente, os bolores formam colnias grandes com crescimento
e alongamento de hifas em sua periferia, enquanto que as colnias de leveduras
so moles, lisas e redondas. A morfologia colonial de alguns fungos dermatfitos
caracterizada da seguinte forma: Microsporum canis (anverso: de branco a
amarelado, com periferia laranja-claro; reverso: laranja-amarelado ou marrom-
alaranjado); Microsporum gypseum (anverso: de amarelo a castanho com bordas
brancas e friveis; reverso: de amarelado a marrom-avermelhado); Trichophyton
equinum (anverso: inicialmente, branco e felpudo, seguido de amarelado e
pregueado; reverso: de amarelo a marrom-avermelhado escuro) e Trichophyton
mentagrophytes (anverso: de castanho-claro a amarelo e pulverulento; reverso: de
castanho-claro a marrom-escuro).

A lmpada de Wood uma tcnica empregada para indicar a presena de


agentes fngicos na superfcie da pele e em pelos. Emite uma luz ultravioleta,
com comprimento de onda que varia de 320 a 450 nm, em que, quando em
contato com o material biolgico, parte da onda absorvida (onda curta) e a outra
emitida (onda longa). A presena da substncia pteridina na pele ou nos pelos,

24 Micologia geral e especial aplicada medicina veterinria


U4

que produzida pelo fungo, emite fluorescncia com a aplicao da lmpada de


Wood, permitindo visualizar uma colorao. A substncia pteridina sintetizada
por fungos que infectaram pelos em fase de crescimento ativo, o que no ocorre
em uma infeco pilosa. Dermatfitos da espcie Microsporum canis apresentam
cor verde azulada. Outros dermatfitos tambm podem fluorescer, apresentando
colorao diferente, como o T. schoenleini, que apresenta colorao verde-palha,
e o fungo Malassezia spp. apresenta colorao de tom prateado. Essa tcnica
disponibiliza um diagnstico rpido, porm a interpretao por profissionais
inexperientes pode obter um diagnstico incorreto. Assim, para confirmar o agente
fngico, recomendado prosseguir com a tcnica de cultura.

Pesquise mais
Agora com voc! Leia o artigo a seguir disponvel em:

CEOLIN, L. V. et al. Diagnstico macro e microscpico de aspergilose


em frangos de corte. Acta Scientiae Veterinariae, Santa Maria, v. 40,
n. 3, p. 1061, 2012. Disponvel em: <http://www.repositorio.unicamp.
br/bitstream/REPOSIP/90157/1/2-s2.0-84868008219.pdf> Acesso em:
1 set. 2016.

Sem medo de errar

Para compreender melhor a situao apresentada, vamos recapitular os


pontos da situao-problema que foram analisados anteriormente. O laboratrio
tem como objetivo prestar servios aos profissionais da rea veterinria, a fim de
identificar agentes patolgicos, utilizando diferentes mtodos de diagnsticos
para auxiliar na resoluo de casos clnicos. De acordo com o tcnico, o cultivo
da amostra recebida (tecido cotiledonar) e o exame histolgico evidenciaram a
presena de um agente fngico da espcie Mortierella wolfii, indicando que o
aborto foi mictico.

Mediante as informaes apresentadas, e com o auxlio dos contedos


abordados nesta seo, responda aos enunciados, a seguir, para a resoluo do
caso clnico:

Cite os gneros pertencentes ao filo Zygomycota de acordo com a


classificao da ordem.

Resposta: Os gneros pertencentes ao filo Zygomycota esto classificados


em duas ordens: Mucorales e Entomophthorales. Na ordem Mucorales, esto
os gneros Absidia, Mucor, Rhizomucor, Rhizopus, Mortierella e Saksenaea. Na
ordem Entomophthorales, esto os gneros Basidiobolus e Conidiobolus.

Micologia geral e especial aplicada medicina veterinria 25


U4

Descreva as caractersticas macroscpicas das colnias das espcies


fngicas Mortierella wolfii e Saksenaea vasiformis.

Resposta: As colnias da espcie Mortierella wolfii so aveludadas, brancas e


com contornos lobulados, enquanto que a espcie Saksenaea vasiformis apresenta
colnias de penugens brancas.

Ateno

As espcies fngicas classificadas na ordem Mucorales esto presentes


no solo, na vegetao, e os seus esporos podem ser aerotransportados.

Avanando na prtica

Micose das bolsas guturais

Descrio da situao-problema

Recentemente, o mdico veterinrio foi solicitado para fazer uma visita tcnica
em uma propriedade rural. O proprietrio possui uma criao de equinos da raa
Puro Sangue Ingls e, de acordo com o relato dele, um de seus cavalos estava
apresentando dificuldade para engolir e descarga nasal. Durante o exame clnico do
cavalo, o mdico veterinrio observou disfagia, epistaxe e descarga nasal unilateral,
com aumento de volume ps-auricular. Com o auxlio de um endoscpio,
prosseguiu com o exame no trato respiratrio, onde visualizou um acmulo de
exsudato inflamatrio na bolsa gutural. De acordo com os achados clnicos, foi
indicada a suspeita de um agente fngico. Em seguida, foram coletados espcimes
de secreo e tecido por bipsia, para serem analisados em laboratrio.

Mediante as informaes apresentadas, e com o auxlio dos contedos


abordados nesta seo, responda ao enunciado, a seguir, para a resoluo do
caso clnico:

A secreo nasal amostrada foi submetida a uma anlise microscpica com


tinta nanquim. Descreva os procedimentos desse mtodo.

Lembre-se

Os aspergilos so fungos filamentosos que habitam o solo e a matria


orgnica em decomposio.

26 Micologia geral e especial aplicada medicina veterinria


U4

Resoluo da situao-problema

Em continuidade com o relato de caso, as amostras de secreo e de tecidos


foram submetidas anlise laboratorial. Ambas foram cultivadas em meio de
cultura, a fim de verificar a possibilidade do crescimento de colnias fngicas.
Posteriormente, foram analisados os aspectos macroscpicos das colnias fngicas
e, em seguida, um fragmento de cada colnia foi submetido anlise microscpica.
Os resultados evidenciaram a presena da espcie fngica Aspergillus fumigatus.

A secreo nasal amostrada foi submetida a uma anlise microscpica com


tinta nanquim. Descreva os procedimentos desse mtodo.

Resposta: Para secrees, lquor e fludos corporais, as amostras em estado


lquido devem ser centrifugadas em velocidade de 1500 a 2000 rpm, por 10 minutos,
com o objetivo de concentrar a amostra. No caso de coleta do material com o
auxlio de swabs, coloca-se em soluo salina e centrifuga-se para concentrar a
amostra. No exame microscpico com tinta nanquim, as amostras de secrees,
exsudatos, urina e lquor so submetidas tinta nanquim. Nessa tcnica, uma gota
da amostra centrifugada colocada em uma lmina de microscopia e, em seguida,
adiciona-se uma gota da tinta nanquim. Feito isso, coloca-se uma lamnula e se
visualiza em microscpico ptico com objetiva 10x e 40x. Os agentes fngicos
ficam evidentes pela colorao do fundo negro causado pela tinta.

Faa voc mesmo

Agora com voc! Pesquise sobre leveduras e doenas em animais


e elabore o diagnstico laboratorial de uma determinada infeco
fngica de importncia clnica da veterinria. Consulte o material de
apoio:

QUINN, P. J. et al. Microbiologia veterinria e doenas infecciosas.


Artmed, 2005.

Faa valer a pena

1. Os agentes fngicos so classificados em grupos com base em


suas caractersticas morfolgicas. O grupo de fungos dermatficos
classifica-se em diferentes gneros, que apresentam hifas septadas,
so aerbios, crescem lentamente e suas colnias so pigmentadas.
Com relao aos gneros pertencentes ao grupo dermatfitos, marque
V para verdadeira e F falsa.
( ) O gnero Blastomyces est classficados no grupo dermatfitos.

Micologia geral e especial aplicada medicina veterinria 27


U4

( ) O gnero Microsporum est classficado no grupo dermatfitos.


( ) O gnero Epidermophyton est classficado no grupo dermatfitos.
( ) O gnero Trichophyton est classificado no grupo dermatfitos.
( ) O gnero Aspergillus est classficado no grupo dermatfitos.
A seguir, assinale a alternativa correta na descrio da sequncia de
verdadeiro e falso, em relao s afirmativas anteriores:
a) F, V, V, V e F.
b) V, F, F, V e V.
c) V, F, V, F e V.
d) F, V, F, V e V.
e) V, V, V, F e F.

2. O gnero Blastomyces est classificado nos fungos dimrficos, que


apresentam a forma filamentosa e leveduriforme. Com relao espcie
Blastomyces dermatitidis, complete o enunciado a seguir: os Blastomyces
dermatitidis, na forma _____________, apresentam condios em forma
oval ou de pera sobre __________ ou nas ____________; e na forma
de levedura, apresentam uma forma _______ com parede espessa. As
colnias podem apresentar colorao ______________ passando para
______ com o envelhecimento da colnia (quando incubado de 25C a
30C), alm da formao de condios ovais ou em forma de pera, a partir
dos conidiforos ou das hifas.
Assinale a alternativa correta que completa a ordem das lacunas:
a) Leveduriforme, conidiforos, hifas septadas, oval, branca e
algodonosas, verde.
b) Filamentosa, conidiforos, hifas septadas, oval, branca e algodonosas,
marrom.
c) Leveduriformes, conidiforos, hifas septadas, oval, branca e
algodonosas, marrom.
d) Filamentosa, condios, hifas septadas, oval, marrom e algodonosas,
branca.
e) Filamentosa, conidiforos, hifas cenciticas, oval, branca e
algodonosas, verde.

3. Os fungos Sporothrix schenckii esto classificados como


fungos dimrficos, que pertencem ao gnero Sporothrix da famlia
Ophiostomataceae. Com relao espcie Sporothrix schenckii,

28 Micologia geral e especial aplicada medicina veterinria


U4

correto afirmar:
I. No exame laboratorial, pode-se encontrar o fungo Sporothrix
schenckii na forma de levedura.
II. No exame laboratorial, pode-se encontrar o fungo Sporothrix
schenckii na forma filamentosa.
III. Em colnias velhas, observa-se produo de microcondios
tuberculados a partir das hifas septadas.
IV. Na forma de leveduras, este fungo apresenta colnias arredondadas,
mucoides e de colorao creme.
V. Procedimentos, como colorao de Giemsa, exame histopatolgico
de tecidos afetados e mtodo molecular, no auxiliam no diagnstico
do agente fngico em funo do fungo ser dimrfico.
Leia e analise o texto e as afirmativas anteriores, assinalando a alternativa
correta, a seguir:
a) Somente as afirmativas II, IV e V so corretas.
b) Somente as afirmativas I, II e V so corretas.
c) Somente as afirmativas I, III e V so corretas.
d) Somente as afirmativas I, II e IV so corretas.
e) Somente as afirmativas I, II e III so corretas.

Micologia geral e especial aplicada medicina veterinria 29


U4

30 Micologia geral e especial aplicada medicina veterinria


U4

Seo 4.3

Doenas fngicas veterinrias

Dilogo aberto

Ol, aluno! Seja bem-vindo seo de estudos deste livro didtico!

Nesta seo, estudaremos algumas doenas fngicas de importncia na medicina


veterinria. Para melhor compreender o contedo abordado, acrescentaremos
informaes situao-problema referente ao relato de caso apresentado no item
Convite ao estudo. Dessa forma, voc participar indiretamente na resoluo do caso:

Recentemente, o laboratrio de anlises clnicas do hospital veterinrio recebeu


amostras para diagnstico de um agente fngico. Juntamente s amostras,
o mdico veterinrio encaminhou um laudo tcnico, contendo informaes
detalhadas sobre o atendimento clnico. O proprietrio relatou que o animal
estava em condies normais e que, recentemente, comearam a aparecer
leses cutneas na face. Durante o exame clnico, o mdico veterinrio observou
leses cutneas na face, na cabea e no pescoo. Examinando a cavidade nasal,
presenciou granulomas em forma de plipos. Em seguida, foi realizada uma
bipsia de tecido e coletado exsudato para serem encaminhados para a anlise
laboratorial. No laudo tcnico, o mdico veterinrio indicou a suspeita de um
agente fngico da espcie Cryptococcus neoformans.

Mediante as informaes apresentadas, e com o auxlio dos contedos


abordados nesta seo, responda aos enunciados, a seguir, para a resoluo do
caso clnico:

Entre as espcies fngicas de levedura, quais so as de importncia em


doenas de animais?

Descreva as caractersticas da infeco, o fator de virulncia do agente


fngico e os aspectos clnicos de animais infectados pelo fungo
Cryptococcus neoformans.

Micologia geral e especial aplicada medicina veterinria 31


U4

No pode faltar

Prezado aluno, a partir desta seo, comearemos a estudar as doenas


fngicas de importncia na medicina veterinria. Vamos l!

Caracterizao da espcie animal envolvida

Os fungos filamentosos e leveduriformes de interesse veterinrio esto


classificados em trs grandes grupos: os dermatfitos, as micoses subcutneas
e as micoses sistmicas. Entre as diversas espcies fngicas, poucos agentes
fngicos so considerados virulentos (patgenos primrios) e outra minoria,
oportunistas. Os patgenos primrios so capazes de iniciar uma infeo fngica
em um hospedeiro que apresenta condies normais de sade, enquanto que os
agentes oportunistas causam uma infeco fngica em indivduos que apresentam
um comprometimento de suas barreiras protetoras, como leses na pele e nas
membranas mucosas ou falha do sistema imune. Todas as espcies animais esto
sujeitas a infeces fngicas, podendo adquirir os fungos a partir do solo ou
em contato com outros animais infectados. Aproximadamente 90% dos fungos
acometem animais de companhia.

Assimile

Os fungos filamentosos so caracterizados por hifas ramificadas, que


podem ser septadas ou cenocticas.

Fungos dermatfitos

Os dermatfitos apresentam diversas espcies fngicas classificadas em


trs principais gneros: Microsporum, Trichophyton e Epidermophyton, que
esto classificados como geoflicos, zooflicos e antroflicos. Entre os gneros
dermatfitos, o gnero Microsporum e Trichophyton apresentam maior
patogenicidade quando comparado com o gnero Epidermophyton. A seguir,
constam alguns fungos de interesse veterinrio e seus respectivos hospedeiros
dos gneros Microsporum e Trichophyton:

O gnero Microsporum apresenta algumas espcies fngicas de interesse


veterinrio e seus respectivos hospedeiros: Microsporum canis var. canis
(gatos e ces), Microsporum canis var. distortum (ces), Microsporum
equinum (equinos), Microsporum gallinae (frangos e perus), Microsporum
gypseum (equinos, ces, roedores), Microsporum nanum (sunos) e
Microsporum persicolor (rato silvestre).

O gnero Trichophyton apresenta algumas espcies fngicas de


interesse veterinrio e seus respectivos hospedeiros: Trichophyton

32 Micologia geral e especial aplicada medicina veterinria


U4

equinum (equinos), Trichophyton equinum var. autotrophicum (equinos),


Trichophyton mentagrophytes var. erinacei (porco-espinho e ces),
Trichophyton mentagrophytes var. mentagrophytes (roedores, ces,
equinos e outras espcies animais), Trichophyton mentagrophytes var.
quickeanum (camundongo), Trichophyton simii (macaco, aves domsticas
e ces) e Trichophyton verrucosum (bovinos).

Reflita

Os fungos geoflicos habitam e se replicam em solo com presena


de material queratinoso em decomposio, enquanto que os fungos
zooflico e antroflico so patgenos obrigatrios e incapazes de se
replicar no solo. Sendo assim, os animais podem se infectar com fungos
geoflicos a partir do solo e de animais infectados.

Fungos do gnero Aspergillus

O gnero Aspergillus possui uma grande quantidade de espcies fngicas,


porm apenas um nmero limitado causa doena em ces, gatos, aves, equinos
e bovinos. Entre as espcies fngicas do gnero Aspergillus, a espcie Aspergillus
fumigatus o agente fngico que est mais envolvido no processo de infeco,
quando comparado s espcies Aspergillus flavus, Aspergillus niger, Aspergillus
terreus, Aspergillus nidulans, Aspergillus flavipes e Aspergillus deflecteus. Entre os
animais acometidos pelas espcies do gnero Aspergillus, esto: aves, equinos,
bovinos, gatos e ces.

Fungos dimrficos

As espcies fngicas, que se apresentam tanto na forma filamentosa, quanto na


forma leveduriforme, so denominados de fungos dimrficos. Entre os gneros que
apresentam essas caractersticas esto os Blastomyces, Histoplasma, Coccidioides
e Sporothrix. As espcies fngicas associadas a doenas em animais e humanos
so: Blastomyces dermatitidis (ces e humanos); Histoplasma capsulatum (ces,
gatos e humanos); Coccidioides immitis (ces, equinos e humanos); Histoplasma
farciminosum (equinos); e Sporothrix schenckii (equinos, gatos, ces e humanos).

Leveduras

As leveduras esto presentes no meio ambiente, causando infeces


oportunistas em animais. Entre as leveduras de importncia veterinria, esto as
espcies Candida albicans, Cryptococcus neoformans e Malassezia pachydermatis.
A espcie Candida albicans est presente em plantas, no trato digestivo e urogenital
de animais. O Cryptococcus neoformans var. neoformans pode ser isolado em
fezes de pombos, em aves e em solos com resduos de excrementos. Outra espcie

Micologia geral e especial aplicada medicina veterinria 33


U4

Cryptococcus neoformans var. gattii tem sido isolada em rvores do gnero


Eucalyptus. Em mamferos e aves, a Malassezia pachydermatis est presente em
regies da pele que possuem grande nmero de glndulas sebceas. Em ces,
a Malassezia pachydermatis pode ser encontrada no canal auditivo externo, na
regio anal, nos lbios e na pele interdigital. As infeces decorrentes por Candida
albicans esto associadas imunossupresso, acometendo bezerros, guas,
vacas, frangos, ces, gatos, equinos, sunos, potros e filhotes de ces e gatos. Entre
as espcies acometidas por Cryptococcus neoformans, esto: equinos, bovinos,
gatos e ces. A Malassezia pachydermatis acomete, principalmente, a espcie
canina, em casos que envolvem imunossupresso.

Fungos zigomicetos

Os fungos pertencentes ao filo Zygomycota possuem duas ordens de interesse


veterinrio (Mucorales e Entomophthorales), sendo que a ordem Mucorales possui
seis gneros (Absidia, Mucor, Rhizomucor, Rhizopus, Mortierella e Saksenaea) e a
ordem Entomophthorales, dois gneros (Basidiobolus e Conidiobolus). A infeco
por agentes fngicos pertencentes ordem Mucorales causa mucormicose em
bovinos, sunos, gatos e ces, e a infeco por agentes pertencentes ordem
Entomophthorales causa entomoftoromicoses em equinos, ces e ovinos.

rgo ou sistema orgnico comprometido e caractersticas das leses:


histrico clnico e caracterizao da forma de reproduo do agente

Fungos dermatfitos

Os fungos dermatfitos so capazes de colonizar o extrato crneo (todo o


tecido que produz queratina), como pele, pelos, unhas e chifres. A severidade
das leses decorrente da virulncia do dermatfito e em funo da resposta
imunolgica do hospedeiro. Assim, animais recm-nascidos com imunidade no
adquirida, animais em idade avanada, animais que apresentam leses na pele ou
animais imunossuprimidos esto mais suscetveis infeco fngica.

Fatores como umidade e calor auxiliam no crescimento de hifas e na germinao


de esporos. A infeco pode causar resposta inflamatria localizada, decorrente
dos produtos metablicos produzidos durante o crescimento das hifas. A presena
de hifas pode causar hiperplasia epidrmica e hiperqueratose. Animais infectados
podem desenvolver uma resposta imunolgica transitria, o que normalmente
resulta em eliminao dos dermatfitos e na resoluo da leso, porm pode
ocorrer reinfeco.

Em gatos, a dermatofitose causada, principalmente, por Microsporum


canis. Animais infectados apresentam alopecia com leses circulares,
dermatite miliar, pseudomicetomas, onicomicose e, raramente, leses
generalizadas em animais que esto imunossuprimidos.

34 Micologia geral e especial aplicada medicina veterinria


U4

Em ces, a dermatofitose por ser causada por Microsporum canis,


Microsporum gypseum, Trichophyton mentagrophytes e Trichophyton
mentagrophytes var. erinacei. Animais infectados apresentam reas de
alopecia, pelos quebrados, escamao e zonas inflamatrias. Em menor
incidncia, pode-se observar foliculite e onicomicose.

Em bovinos, a dermatofitose causada pelo Trichophyton verrucosum. A


ocorrncia da dermatofitose em bovinos , principalmente, nos meses de
inverno. Bovinos (terneiros, novilhas e vacas) apresentam leses na face,
ao redor dos olhos, no pescoo e nos membros. So observadas reas de
alopecia com formao de crostas branco-acinzentadas.

Em equinos, a dermatofitose causada por Microsporum equinum e


Trichophyton equinum e Trichophyton equinum var. autotrophicum. A
localizao das leses de alopecia pode indicar a via de infeco, que pode
ser decorrente de contato direto com utenslios (regio de encilhar) ou
pelo solo (regio do dorso). Em contato com bovinos infectados, pode-se
adquirir o dermatfito Trichophyton verrucosum.

Vocabulrio

Micose sistmica: refere-se a uma infeco fngica em tecidos


profundos.

Micose subcutnea: refere-se a uma infeco fngica do tecido abaixo


da pele.

Micose superficial: refere-se a uma infeco fngica localizada na


superfcie de clulas epidrmicas e em folculos pilosos.

Fungos do gnero Aspergillus

Presentes no solo ou em matria orgnica em decomposio, a infeco em


animais pode ocorrer na forma respiratria (inalao dos esporos) ou na forma
sistmica, aps inalao (acompanhada com a imunossupresso). Entre as
doenas causadas em animais domsticos por espcies do gnero Aspergillus,
esto: em aves (pneumonia incubadora, pneumonia e aerossaculite e aspergilose
generalizada); em equinos (micose nas bolsas guturais, granuloma nasal, ceratite e
aspergilose intestinal); em bovinos (aborto mictico, mastite mictica, pneumonia
mictica e aspergilose); em gatos (aspergilose sistmica); e em ces (otite externa,
aspergilose nasal e disseminada).

A pneumonia de incubadora de frangos jovens causada pelo fungo


Aspergillus fumigatus, acometendo aves recm-chocadas e causando

Micologia geral e especial aplicada medicina veterinria 35


U4

sonolncia, inapetncia, presena de ndulos amarelados nos pulmes e


nos sacos areos.

A aspergilose de aves adultas acomete aves domsticas, pinguins de


cativeiro, psitacdeos e aves de rapina. A infeco ocorre pela inalao
de esporos presentes na cama ou em alimentos contaminados. Animais
infectados apresentam emagrecimento, dispneia, ndulos amarelados nos
pulmes e em sacos areos (semelhantes a leses de tuberculose aviria).

A micose das bolsas guturais acomete equinos e causada pelo fungo


Aspergillus fumigatus. Animais infectados apresentam epistaxe, disfagia,
hemiplegia da laringe, necrose tecidual, trombose, eroso da parede dos
vasos sanguneos e leso neural.

A aspergilose em ces, acomete animais jovens e de meia idade de


raas dolicoceflicas. Animais infectados apresentam espirros, crises
de epistaxe, descarga nasal sanguinopurulenta profusa e persistente e
radioluminescncia aumentada dos ossos das conchas nasais.

O aborto mictico em vacas decorrente da ingesto de fenos, silagens ou


gros contaminados pelo fungo Aspergillus fumigatus. Animais infectados
apresentam placentite e aborto no final da gestao.

Fungos dimrficos

A infeco ocorre, principalmente, pela inalao (via respiratria), podendo ser


disseminada para os demais rgos do animal. A infeco tambm pode ocorrer
atravs de leses decorrentes em tecidos drmicos.

As espcies fngicas, seus hospedeiros e a doena so apresentados a


seguir: Blastomyces dermatitidis (em ces e humanos, causam leses em
pulmes, metstases para a pele e outros tecidos); Histoplasma capsulatum
(em ces, gatos e humanos, causam leses em pulmes e metstases para
outros rgos); Coccidioides immitis (em ces, equinos e humanos, causam
leses em pulmes e metstases para os ossos); Histoplasma farciminosum
(em equinos, causam leses na pele, vasos linfticos e nos linfonodos); e
Sporothrix schenckii (em equinos, gatos, ces e humanos, causam leses
na pele e em vasos linfticos).

Exemplificando

A resposta inflamatria causada por fungos patgenos variada


e, dependendo de sua durao, a inflamao poder ser aguda
(caracterizada por fenmenos exsudativos, como edema, fibrina,

36 Micologia geral e especial aplicada medicina veterinria


U4

presena de leuccitos, neutrfilos e hemcias) ou crnica


(caracterizada por fenmenos produtivos, como proliferao vascular,
deposio de colgenos, fibroblastos e a presena de moncitos,
linfcitos e plasmcitos).

A Blastomicose canina acomete machos jovens de raas esportivas por


meio de inalao do agente fngico. Animais infectados apresentam tosse,
dispneia e intolerncia ao exerccio. A baixa imunidade do animal pode
favorecer a disseminao do agente fngico para a pele, os olhos e os
ossos. Inicialmente, pode estar limitada aos pulmes e linfonodos.

A Histoplasmose canina e felina ocorre pela inalao do agente fngico.


Os macrfagos alveolares absorvem os microcondios que, na forma de
levedura, acabam se replicando. Animais infectados apresentam leses
granulomatosas nos pulmes. Ces apresentam leses ulcerativas
intestinais, diarreia, emagrecimento e tosse crnica. Com menor frequncia,
os ces podem apresentar claudicao, disfuno neurolgica, linfadenite
perifrica, ndulos ulcerativos e leses nos olhos. Em gatos, raramente
ocorre leses nos intestinos, porm inclui depresso, dispneia, perda de
peso e febre.

A Coccidioidomicose equina uma doena pulmonar com presena de


tosse. Outros sinais clnicos no especficos so observados, como febre
intermitente, perda de peso, dor abdominal e musculoesqueltico. A dor
musculoesqueltica ocorre em um tero dos animais infectados. Em casos
de aborto decorrente pela infeco do agente Coccidioides immitis, foram
observados espessamento da placenta, leses no cordo umbilical e a
presena de ndulos nos pulmes do feto.

A Esporotricose felina causa leses nodulares na cabea, na cauda e nas


extremidades dos membros. Ao longo do curso da doena, os ndulos
ulceram e liberam exsudato seropurulento, podendo expor o tecido
muscular e sseo. A presena de grande nmero de agentes fngico pode
ser um risco para seres humanos que manipulam animais infectados.

Leveduras

As leveduras esto presentes no meio ambiente, na pele e nas mucosas de


animais. Sua infeo ocorre em funo de fatores predisponentes, como terapia
antimicrobiana ou imunidade deficiente.

Candida albicans

O agente fngico Candida albicans possui fatores de virulncia (proteases


e fosfolipases) que auxiliam na penetrao tecidual. Na fase inicial da infeco,

Micologia geral e especial aplicada medicina veterinria 37


U4

mecanismos fagocticos podem eliminar grande parte das leveduras, porm


a presena de fosfolipases nas extremidades das hifas auxiliam na invaso. Por
outro lado, fatores predisponentes, como doenas, distrbios da microbiota (uso
prolongado de antibiticos), defeitos na imunidade e leses na mucosa, favorecem
o estabelecimento da infeco.

As infeces decorrentes por Candida albicans esto associadas,


principalmente, imunossupresso, acometendo bezerros (lceras
gastroesofgicas, ruminite e doena disseminada), guas (piometra), vacas
(aborto, mastite e reduo de fertilidade), frangos (aftas no esfago ou no
papo), ces (enterite e leses cutneas), gatos (urocistite, piotrax, leses
oculares e doena disseminada), equinos (leses oculares), sunos (lceras
gastroesofgicas e doena disseminada), potros (estomatite mictica) e
filhotes de ces e gatos (estomatite mictica).

Cryptococcus neoformans

As infeces ocasionadas pelo fungo Cryptococcus neoformans ocorrem pela


inalao do agente fngico que est presente em poeira contaminada. Em animais
infectados, os fungos podem se fixar nos seios nasais, nas cavidades nasais e nos
pulmes. Entre os fatores de virulncia, esto a presena de cpsula que atua
como antifagocitria e a fenol oxidase, que degrada a catecolamina e acumula
a substncia melanina, agindo contra os efeitos txicos dos radicais livres. Alm
disso, esses fungos podem crescer em temperatura corporal de mamferos. Sua
disseminao a partir do sistema respiratrio decorrente da imunidade mediada
por clulas.

Entre as doenas causadas por Cryptococcus neoformans, esto: em


equinos (sinusite, leses cutneas, pneumonia, meningoencefalite,
granuloma nasal e aborto); em bovinos (granuloma nasal e mastite); em
gatos (infeces cutneas, nervosas, respiratrias e oculares); e em ces
(doena disseminada com sinais neurolgicos e oculares).

Malassezia pachydermatis

A Malassezia pachydermatis pode ser encontrada em regies da pele que


apresentam um grande nmero de glndulas sebceas, em mamferos e aves.
Associada com otite externa e dermatite seborreica em ces, a colonizao do
agente fngico est correlacionada com casos de imunossupresso.

A presena do agente fngico Malassezia pachydermatis no conduto


auditivo de ces produz proteases (enzimas proteolticas), que podem
causar leses no conduto auditivo. importante ressaltar que outros
agentes bacterianos podem estar associados infeco. A otite externa
caracterizada por secrees e prurido intenso, decorrentes da produo

38 Micologia geral e especial aplicada medicina veterinria


U4

excessiva e da reteno de cera ocasionada pela hipersecreo das


glndulas ceruminosas. A presena de agentes fngicos causam alteraes
que contribuem para o processo inflamatrio.

A dermatite seborreica canina ocorre em animais que apresentam


imunossupresso e dobras na pele, com persistncia de alta umidade.
Animais infectados apresentam prurido, eritema, exsudato gorduroso,
aglutinao de pelos e odor ftido.

Fungos zigomicetos

Raramente, infeces causadas por fungos Zigomicetos acometem animais


imunocompetentes sadios, ocorrendo, principalmente, em animais predispostos
(devido ao uso de antibiticos por longo perodo ou imunodeficincia). A infeco
por agentes fngicos pertencentes ordem Mucorales causam mucormicose, em
bovinos, e caracterizada por aborto, pneumonia aps aborto, ruminite, lcera
do abomaso, granuloma cranial, linfadenite mediastinal e mesentrica; em sunos,
observa-se enterite (leites), lceras gastrintestinais, linfadenite mesentrica e
mandibular; em gatos caracterizada por pneumonia necrosante focal e enterite
necrtica; e em ces, caracterizada por enterite. No caso de agentes fngicos
de ordem Entomophthorales, estes causam entomoftoromicoses em equinos
que apresentam granulomas cutneos causados por espcies de Basidiobolus e
granulomas nasais causados por espcies de Conidiobolus; em ces, caracterizada
por granulomas pulmonares e gastrintestinais causados por espcies de Basidiobolus
e granulomas subcutneos causados por espcies de Conidiobolus; e em ovinos,
observa-se granulomas causados por espcies de Conidiobolus.

O aborto mictico causado por fungos do gnero Aspergillus, porm


casos de aborto mictico tm sido relatado por espcies fngicas do
gnero Absidia, Mucor, Rhizopus e a espcie Mortierella wolfii. A infeco
decorrente da ingesto de forragens conservadas mofadas (silagens e
fenos). Animais infectados apresentam leses nos cotildones (aumentados
e necrticos), tecido placentrio espessado, rgido e leses na pele dos
fetos abortados.

A ruminite mictica em bovinos caracterizada por leses na mucosa


ruminal, que est associada com distrbios metablicos, como a acidose
ltica. Em animais que apresentam a infeco, observa-se artrite trombtica,
podendo causar infarto, hemorragia, necrose e peritonite fibrintica.

Pesquise mais
Agora com voc! Leia o artigo:

KOMMERS, Glaucia Denise et al. Criptococose pulmonar granulomatosa

Micologia geral e especial aplicada medicina veterinria 39


U4

em um equino. Cincia Rural, Santa Maria, RS, v. 35, n. 4, p.938-


940, ago. 2005. Disponvel em: <http://dx.doi.org/10.1590/S0103-
84782005000400032>. Acesso em: 7 set. 2016.

Sem medo de errar

Para compreender melhor a situao apresentada, vamos recapitular os pontos


que foram analisados, anteriormente, da situao-problema:

O laboratrio tem como objetivo prestar servios aos profissionais da rea


veterinria, a fim de identificar agentes patolgicos, utilizando diferentes mtodos
de diagnsticos para auxiliar na resoluo de casos clnicos. De acordo com o
tcnico, o cultivo da amostra e o exame microscpico confirmou a suspeita do
agente fngico da espcie Cryptococcus neoformans, diagnosticando a doena
criptococose felina.

Mediante as informaes apresentadas, e com o auxlio dos contedos


abordados nesta seo, responda aos enunciados, a seguir, para a resoluo do
caso clnico:

Entre as espcies fngicas de levedura, quais so as espcies de importncia


em doenas de animais?

Resposta: Entre as leveduras de importncia veterinria, esto as espcies


Candida albicans, Cryptococcus neoformans e Malassezia pachydermatis.

Descreva as caractersticas da infeco, o fator de virulncia do agente


fngico e os aspectos clnicos de animais infectados pelo fungo
Cryptococcus neoformans.

Resposta: As infeces ocasionadas pelo fungo Cryptococcus neoformans


ocorrem pela inalao do agente fngico, que est presente em poeira contaminada.
Em animais infectados, os fungos podem se fixar nos seios e nas cavidades nasais e
nos pulmes. Entre os fatores de virulncia, esto a presena da cpsula que atua
como antifagocitria e a fenol oxidase, que degrada a catecolamina e acumula
a substncia melanina, agindo contra os efeitos txicos dos radicais livres. Alm
disso, esses fungos podem crescer em temperatura corporal de mamferos. Sua
disseminao a partir do sistema respiratrio decorrente da imunidade mediada
por clulas. Entre as doenas causadas por Cryptococcus neoformans, esto:
equinos (sinusite, leses cutneas, pneumonia, meningoencefalite, granuloma
nasal e aborto); bovinos (granuloma nasal e mastite); em gatos (infeces cutneas,
nervosas, respiratrias e oculares); e em ces (doena disseminada com sinais
neurolgicos e oculares).

40 Micologia geral e especial aplicada medicina veterinria


U4

Ateno

Animais que apresentam fatores predisponentes, como terapia


antimicrobiana ou imunidade deficiente, esto sujeitos infeo por
leveduras.

Avanando na prtica

Coccidioidomicose equina

Descrio da situao-problema

Recentemente, o mdico veterinrio foi solicitado para fazer uma visita tcnica
em uma propriedade rural. O proprietrio possui uma criao de cavalos da
raa Manga larga. De acordo com o relato do proprietrio, um de seus cavalos
apresentava perda de peso, dor abdominal e febre. Durante o exame clnico do
cavalo, o mdico veterinrio avaliou o animal, que j estava em um estgio mais
avanado, e observou febre intermitente, tosse, dor abdominal, perda de peso,
envolvimento pulmonar e musculoesqueltico. De acordo com os achados
clnicos, foi indicada a suspeita de um agente fngico. Em seguida, foram coletados
espcimes de secreo nasal, para serem analisados em laboratrio.

Mediante as informaes apresentadas, e com o auxlio dos contedos


abordados nesta seo, responda ao enunciado, a seguir, para a resoluo do
caso clnico:

Descreva as caractersticas da doena coccidioidomicose equina.

Lembre-se

As espcies fngicas se apresentam tanto na forma filamentosa quanto


na forma leveduriforme, assim, denominados de fungos dimrficos.

Resoluo da situao-problema

Em continuidade ao relato de caso, as amostras de secreo foram submetidas


anlise laboratorial. A amostra foi cultivada em meio de cultura, a fim de verificar
a possibilidade do crescimento de colnias fngicas. Posteriormente, foram
analisados os aspectos macroscpicos das colnias fngicas e, em seguida, um
fragmento de cada colnia foi submetido anlise microscpica. Os resultados
evidenciaram a presena da espcie fngica Coccidioides immitis.

Micologia geral e especial aplicada medicina veterinria 41


U4

Descreva as caractersticas da doena coccidioidomicose equina.

Resposta: A coccidioidomicose equina uma doena pulmonar com a


presena de tosse. Outros sinais clnicos no especficos so observados, como
febre intermitente, perda de peso, dor abdominal e musculoesqueltica. A dor
musculoesqueltica ocorre em um tero dos animais infectados. Em casos de
aborto decorrente pela infeco do agente Coccidioides immitis, foram observados
espessamento da placenta, leses no cordo umbilical e a presena de ndulos
nos pulmes do feto.

Faa voc mesmo

Agora com voc! Pesquise sobre microrganismos de importncia


veterinria semelhantes a fungos. Consulte o material de apoio:

QUINN, P. J. et al. Microbiologia veterinria e doenas infecciosas.


Artmed, 2005.

Faa valer a pena

1. Durante um exame clnico de um co com aproximadamente 3


anos de idade, o mdico veterinrio constatou a presena de reas de
alopecia, escamao e pelos quebrados com zonas inflamatrias. De
acordo com os sinais clnicos, ele suspeitou de dermatofitose, que
causada por um agente fngico. Com relao aos dermatfitos, marque
V para verdadeira e F falsa:
( ) Os dermatfitos de interesse veterinrio esto classificados em dois
gneros, Microsporum e Aspergillus.
( ) O agente fngico Trichophyton mentagrophytes var. erinacei
acomete, principalmente, porco-espinho e ces.
( ) O agente fngico Sporothrix schenckii pertencente ao gnero
Trichophyton acomete, principalmente, equinos, ces e roedores.
( ) O agente fngico Coccidioides immitis pertencente ao gnero
Trichophyton acomete, principalmente, frangos e perus.
( ) O agente fngico Trichophyton verrucosum acomete bovinos.
Escolha a alternativa a seguir, que corresponda, na ordem correta, sua
anlise das afirmativas anteriores, quanto verdadeiras ou falsas:
a) F, V, V, V e F.
b) F, V, F, F e V.
c) V, F, V, F e V.

42 Micologia geral e especial aplicada medicina veterinria


U4

d) F, V, F, V e V.
e) V, V, V, F e F.

2. Todas as espcies animais esto sujeitos a infeces fngicas,


que podem adquirir os fungos a partir do solo ou em contato com
outros animais infectados. Entre as diversas espcies fngicas, poucos
agentes fngicos so considerados virulentos (patgenos primrios) e
outra minoria, oportunistas. A seguir, complete o enunciado:
Os _________________ so capazes de iniciar uma ________________
em um hospedeiro que apresenta _________________ de sade,
enquanto os agentes _______________ causam uma infeco fngica
_____________ que apresentam _________________ de suas
barreiras protetoras, como __________ e nas membranas mucosas
ou falha ___________________.
Assinale a alternativa correta que completa a ordem das lacunas:
a) Patgenos oportunistas, infeo bacteriana, condies normais,
primrios, em indivduos, comprometimento, leses na pele, do
sistema imune.
b) Patgenos primrios, infeo fngica, condies normais,
oportunistas, em indivduos, comprometimento, leses na pele, do
sistema imune.
c) Patgenos primrios, infeo fngica, condies normais,
oportunistas, em indivduos, comprometimento, leses na pele, do
sistema reprodutivo.
d) Patgenos oportunistas, infeo fngica, condies normais,
primrios, em indivduos, comprometimento, leses na pele, do
sistema imune.
e) Patgenos oportunistas, infeo fngica, condies anormais,
primrios, em indivduos, comprometimento, leses na pele, do
sistema reprodutivo.

3. A dermatofitose em bovinos causada pelo agente fngico


Trichophyton verrucosum. Entre os bovinos, os terneiros so mais
sucetveis infeco fngica, causando leses na face e ao redor dos
olhos. Com relao ao gnero Trichophyton, correto afirmar que:
I. O agente fngico Trichophyton equinum acomete equinos.
II. Roedores, ces, equinos so suscetveis espcie fngica
Trichophyton mentagrophytes var. mentagrophytes.
III. O agente fngico Trichophyton mentagrophytes var. quickeanum

Micologia geral e especial aplicada medicina veterinria 43


U4

acomete, principalmente, equinos.


IV. A espcie fngica Trichophyton equinum var. autotrophicum
acomete, principalmente, bovinos.
V. Em casos de dermatofitose em bovinos, o principal agente fngico
do gnero Thichophyton o fungo Trichophyton verrucosum.
A seguir, assinale a alternativa correta:
a) Somente as afirmativas II, IV e V so corretas.
b) Somente as afirmativas I, II e IV so corretas.
c) Somente as afirmativas I, III e V so corretas.
d) Somente as afirmativas I, II e V so corretas.
e) Somente as afirmativas I, II e III so corretas.

44 Micologia geral e especial aplicada medicina veterinria


U4

Seo 4.4

Fisiologia e identificao das micotoxinas

Dilogo aberto

Ol, aluno! Seja bem-vindo seo de estudos deste livro didtico!

Nesta seo, estudaremos a fisiologia e a identificao das micotoxinas


importantes na medicina veterinria. Para melhor compreender o contedo
abordado, vamos acrescentar informaes situao-problema referente ao relato
de caso apresentado no item Convite ao estudo. Dessa forma, voc participar,
indiretamente, da resoluo do caso:

Durante a aferio de produo de leite em uma propriedade rural, o proprietrio


constatou que a produo semanal teve uma reduo de 10%. Procurando entender
a situao, ele observou que a reduo estava relacionada a um grupo de animais.
Ento, entrou em contato com um mdico veterinrio, a fim de que o auxiliasse
no caso. Durante a visita tcnica, o mdico veterinrio constatou que, do grupo
de animais que apresentou reduo na produo de leite, trs vacas apresentavam
cambaleio, sonolncia e pequenos episdios de convulses. Durante a anamnsia,
o proprietrio informou que este lote de animais foi remanejado para uma rea de
azevm perene, onde estavam por duas semanas. Analisando o local, o mdico
veterinrio constatou que os animais estavam pastejando o azevm em um
estdio vegetativo desenvolvido, que continha espigas. Tambm foi observado,
o fornecimento de aveia no coxo para as vacas em lactao, constatando que
o produto estava em condies inadequadas, apresentando mofos. Descartando
outras hipteses, e com base nos sinais clnicos, o mdico veterinrio suspeitou
de micotoxinas. Como recomendao, solicitou que remanejassem os animais
para outra pastagem e suspendessem o fornecimento de aveia. Em seguida, foram
coletadas amostras de azevm perene e de aveia gro para detectar a presena de
agentes fngicos e micotoxinas.

Mediante as informaes apresentadas, e com o auxlio dos contedos


abordados nesta seo, responda aos enunciados, a seguir, para a resoluo do
caso clnico:

Quais so os principais gneros de fungos que produzem micotoxinas?

Micologia geral e especial aplicada medicina veterinria 45


U4

Descreva os mtodos de diagnstico para a identificao de micotoxinas.

No pode faltar

Prezado aluno, a partir desta seo, comearemos a fisiologia e a identificao


das micotoxinas de importncia na medicina veterinria. Vamos l!

Identificao e fisiologia dos fungos produtores de micotoxinas de interesse


veterinrio

Mais de 100 espcies fngicas podem produzir micotoxinas, porm somente


algumas so de interesse mdico veterinrio e de sade pblica, estando associadas
a doenas em animais e humanos. Dessas, as principais esto classificadas em trs
gneros, que so: Aspergillus, Fusarium e Penicillium. Os gneros Aspergillus e
Penicillium pertencem ao reino Fungi, filo Ascomycota, classe Erotiomycetes, ordem
Eurotiales e famlia Trichocomaceae. O gnero Fusarium pertence ao reino fungi,
filo Ascomycota, classe Sordariomycetes, ordem Hypocreales, famlia Nectriaceae.

Assimile

O termo micotoxina derivado de duas palavras, sendo uma de


origem grega mykes, que significa fungo, e outra de origem do latim
toxican, que significa toxina.

O desenvolvimento de fungos produtores de micotoxinas ocorre na planta e no


processo de armazenamento. Entre os fungos de interesse mdico veterinrio, temos
os do gnero Aspergillus e Penicillium, que se desenvolvem durante o processo
de armazenamento de gros, enquanto os do gnero Fusarium se desenvolvem
durante o amadurecimento dos gros na planta. Os fatores que propiciam o
desenvolvimento fngico esto relacionados com o ambiente em que o fungo se
encontra. Para fungos que esto em crescimento na planta (lavoura ou pastagens),
os fatores esto relacionados com a condio climtica, a espcie de planta-alvo
e o estdio de desenvolvimento da planta. Em fungos que crescem em alimentos
(cereais) estocados, os fatores esto relacionados com a qualidade dos gros, as
condies de estocagem, as condies sanitrias (presena de insetos ou caros)
e de transporte. Na fase de produo de micotoxinas, os fatores esto relacionados
com ao tipo e concentrao no gro. Os fungos podem ser eliminados dos gros,
porm, uma vez produzida a micotoxina, o processo de eliminao do fungo no
elimina a toxina. No animal, fatores como espcie animal, idade, sexo, rgos
afetados, influncias climticas e durao de exposio micotoxina so favorveis
para a contaminao de micotoxinas.

46 Micologia geral e especial aplicada medicina veterinria


U4

A contaminao animal e humana pode ser indireta ou direta. Na forma indireta,


a infeco ocorre pela ingesto de alimentos e raes contaminados por fungos
toxignicos que foram eliminados, porm a micotoxina permaneceu no produto. Na
forma direta, a infeco ocorre pela ingesto de alimentos e raes contaminados
com fungos toxignicos, sendo que a micotoxina ser formada posteriormente. As
micotoxinas so metablitos secundrios que possuem baixo peso molecular, so
termoestveis, no so antignicas e sua toxicidade permanece aps sua exposio
a temperaturas elevadas (como peletizao).

Reflita

As micotoxinas so contaminantes naturais em alimentos e so


produzidas medida que o fungo atinge a sua maturidade.

Entre as principais espcies que esto associadas produo de micotoxinas


de interesse mdico veterinrio, esto: Aspergillus flavus (aflatoxinas B1, B2, G1 e
G2), Aspergillus ochraceus (ocratoxinas A, B e C), Aspergillus clavatus (neurotoxina
no identificada), Fusarium moniliforme (fumonisinas B1, B2, A1 e A2), Fusarium
solani (metablitos secundrio derivados do 4-ipomeanol), Fusarium graminearum
(zearalenona), Penicillium viridicatum (ocratoxinas A, B e C), Diplodia maydis
(neurotoxina no identificada), Pithomyces chartarum (esporidesmina), Claviceps
purprea (ergotamina, ergometrina e ergocristina), Neophytodium coenophialum
(ergovalina), Phomopsis leptostromiformis (fomopsinas A e B), Acremonium lolli
(lolitrema), Claviceps paspali (paspalitremas A e B), Myrothecium verrucaia (roridinas
e verrucarinas) e Rhizoctonia leguminicola (eslaframina).

O crescimento fngico caracterizado em quatro fases, que so a fase de


latncia, a fase exponencial, a fase estacionria e a fase de declnio. A produo
da micotoxina ocorrer entre a fase final do crescimento exponencial e o incio
do perodo estacionrio do agente fngico. Nesse perodo, a produo das
micotoxinas ocorrer mediante a presena de precursores metablicos, como
aminocidos (esporidesminas, xantocilina e gliotoxina), acetil-CoA e malonil-CoA
(aflatoxina, citreoviridina, esterigmatocistina, patulina, cido peniclico, rugulosina,
citrinina, citromicetina, zearalenona e luteoesquirina), aminocidos associados
com policetdeos (ocratoxinas A e citocalasinas), aminocidos associados com
mevalonato (alcaloides do ergot, furmitremorginas e cido cicloaznico).

Para o isolamento e a identificao dos agentes fngicos em gros e plantas,


aplicam-se tcnicas de cultivo, microscopia (microscpio estereoscpico) e tcnicas
moleculares. As amostras devem passar por uma assepsia superficial, com uma
soluo com 1% de hipoclorito de sdio, por trs minutos. Em seguida, as amostras
podem ser cultivadas em meio gar Batata Dextrose e incubadas, aerobiamente,
a 25C, durante um perodo de cinco dias. Aps, como critrios de identificao,

Micologia geral e especial aplicada medicina veterinria 47


U4

observar a morfologia colonial.

Na identificao de micotoxinas, as amostras devem ser cuidadosamente


selecionadas e armazenadas a -20C, at o incio da anlise. A identificao
de micotoxinas mediada por diferentes mtodos, que podem ser por triagem,
semiquantitativos (cromatografia de camada delgada, tcnicas de imunoensaio,
como ELISA, e tcnicas imunocromticas) e quantitativos (cromatografia de alta
eficincia acoplada fluorescncia e ao UV, cromatografia lquida acoplada
espectrofotometria de massa e cromatografia gasosa acoplada espectrofotometria
de massa), que utilizam colunas de imunoafinidade ou colunas de carvo e alumina.

Vocabulrio

Citotoxicidade: refere-se exposio de substncias txicas de origem


natural ou artificial, que causa danos s clulas (citotoxinas).

Hepatotoxicidade: refere-se exposio de substncias txicas de


origem natural ou artificial, que causa danos ao fgado (hepatotoxinas).

Neurotoxicidade: refere-se exposio de substncias txicas de


origem natural ou artificial, que altera a atividade normal do sistema
nervoso, de tal forma a causar danos ao tecido nervoso (neurotoxinas).

Caracterizao e ao das micotoxinas nas diferentes espcies animais

Diversas espcies de animais, como sunos, aves, bovinos, equinos, ovinos,


ces e outras espcies de animais domsticos, esto sujeitos contaminao por
micotoxinas. A contaminao pode ser direta ou indireta, conforme mencionado
anteriormente. Entre as doenas causadas por micotoxinas, esto a aflatoxicose,
diplodiose, ergotismo, eczema facial, toxicose pela festuca, toxicose pelo mofo
da batata-doce, leucoencefalomalcia, ocratoxicose, estrogenismo, toxicose
pela eslaframina, edema pulmonar suno, cambaleio pelo penitrema, tremores
induzidos por Aspergillus clavatus, cambaleio pelo paspalo, sndrome hemorrgica,
cambaleio pelo azevm e estaquibotriotoxicose. A seguir, sero caracterizadas
algumas doenas causadas por micotoxinas de interesse veterinrio:

Aflatoxicose: em animais suscetveis, como sunos, aves domsticas,


bovinos, ces e trutas, que apresentam a doena aflatoxicose, os achados
clnicos so caracterizados por anorexia e reduo da produo de leite
devido imunossupresso, hepatotoxicidade, teratognese e atividade
carcinognea causada pela micotoxina. A aflatoxicose causada por
aflatoxinas B1, B2, G1 e G2 produzidas pelo fungo Aspergillus flavus e
Aspergillus parasiticus, que contaminam gros de amendoim e soja.

48 Micologia geral e especial aplicada medicina veterinria


U4

Ergotismo: animais suscetveis, como bovinos, ovinos, cervdeos, equinos,


sunos e aves domsticas, se contaminam com micotoxinas denominadas
de ergotamina, ergometrina e ergocristina, causando convulses, gangrena
nas extremidades, agalactia, hipertermia em ambientes de clima quente,
devido neurotoxicidade e vasoconstrio causada pela micotoxina. A
doena causada pelo fungo Claviceps purprea, que est presente em
gramneas, cereais e nas espigas de azevm.

Eczema facial: a doena causada pelo fungo Pithomyces chartarum, que


produz a micotoxina denominada de esporidesmina. Animais suscetveis,
como equinos, bovinos e ovinos, apresentam fotossensibilizao e ictercia
devido hepatotoxicidade e ocluso biliar causada pela micotoxina.
O fungo est presente na palha de azevm (usada como cama para os
animais), em pastagem de Brachiaria spp e no trevo branco.

Ocratoxicose: animais suscetveis, como sunos e aves domsticas,


apresentam queda na produo de ovos, em aves, e polidispsia, poliria, em
sunos, devido a alteraes renais degenerativas causada pela micotoxina.
A ocratoxicose causada pelos fungos Aspergillus ochraceus, Penicillium
viridicatum, entre outras espcies do gnero Aspergillus e Penicillium. As
ocratoxinas A, B e C produzidas esto presentes no milho, trigo e cevada.

Estrogenismo: a doena causada pela micotoxina zearalenona produzida


pelo fungo Fusarium graminearum e outras espcies do gnero Fusarium.
Animais suscetveis, como sunos, bovinos e ovinos, apresentam hiperemia,
edema da vulva e desenvolvimento precoce das mamas, anestro, tamanho
reduzido da leitegada e reduo da fertilidade em bovinos e ovinos, devido
atividade estrognica causada pela micotoxina. O fungo se instala em gros
estocados, como de milho e cevada, silagem de milho e em cereais peletizados.

Sndrome hemorrgica: a doena causada por micotoxinas denominadas


de toxina T-2 e diacetoscirpenol, que so produzidas pelos fungos Fusarium
graminerarum, Fusarium sporotrichoides, entre outras espcies do gnero
Fusarium. Animais infectados apresentam leses necrticas na pele e no
trato alimentar associadas a hemorragias decorrentes da imunossupresso
e coagulopatia causada pela micotoxina. Estes fungos esto presentes em
cereais e palhas.

Cambaleio pelo azevm perene: animais suscetveis, como bovinos, aves


domsticas, sunos, ovinos, equinos e cervdeos, apresentam tremores
musculares, descoordenao, ataque convulsivo repentino e colapso,
devido neurotoxicidade causada pela micotoxina. A doena causada
pela micotoxina lolitrema, produzida pelo fungo Acremonium lolli, que se
instala no azevm perene.

Micologia geral e especial aplicada medicina veterinria 49


U4

Exemplificando

A toxicose pela eslaframina causa salivao, lacrimejamento, inchao


e diarreia em bovinos, devido ao colinrgica da micotoxina
eslaframina produzida pelo fungo Rhizoctonia leguminicola presente
em pastagens, trevo vermelho e feno.

Meios de controle do crescimento fngico

Para o desenvolvimento de micotoxinas, condies ambientais e outros fatores


devem ser predisponentes para o crescimento fngico, uma vez que a produo
da micotoxina ocorrer entre a fase final do crescimento exponencial com o
incio do perodo estacionrio do agente fngico. Entre os fatores mencionados
anteriormente, a presena de oxignio, temperatura, umidade, condies sanitrias
(insetos e caros) e qualidade do material (gros inteiros ou quebrados) so
aspectos importantes a serem observados. Para evitar a produo de micotoxinas
em gros e a contaminao animal, medidas preventivas se iniciam no plantio dos
cereais, seguido no processo de armazenamento e da seleo de ingredientes
(gros e forragens conservadas) para a formulao de raes. De maneira geral,
essas medidas se baseiam em dois pontos-chaves: preveno de contaminao e
crescimento fngico em gros e detoxificao de compostos txicos sintetizados
pelos fungos nos gros.

A campo, as medidas a serem adotadas se iniciam com a escolha de variedades


que apresentam maior resistncia a agentes fngicos (melhoramento gentico),
plantio com nmero de plantas e espaamento adequado, para obter melhor
aerao e insolao, aquisio de fungicidas registrados e aplicados em estdios
corretos do desenvolvimento da planta e colheita do gro com baixa umidade e
impureza. Entre os agentes fngicos de interesse veterinrio, as espcies do gnero
Fusarium so os principais agentes que se desenvolvem em gros a campo.

No processo de armazenamento de gros, os fungos de interesse veterinrio


de maior incidncia pertencem ao gnero Penicillium e Aspergillus. O controle se
inicia desde a comercializao de gros, que deve ser regida conforme a legislao
vigente (compra de fornecedores idneos), seguido de controle qumico, fsico ou
biolgico. Basicamente, os pontos-chaves para se obter um bom armazenamento
de cereais esto relacionados com a estrutura de armazenamento, que deve
permitir o controle de umidade, temperatura, entrada oxignio adequada
(ventilao) e controle de insetos. O tempo de armazenamento do produto pode
influenciar no crescimento fngico, quando as condies so favorveis para o
seu desenvolvimento. importante ressaltar que as medidas adotadas podem
eliminar o fungo, entretanto, se ocorrer a produo da micotoxina, ela no

50 Micologia geral e especial aplicada medicina veterinria


U4

eliminada. Dessa forma, necessrio o monitoramento para verificar a presena


de micotoxinas nos gros armazenados.

Em relao aos animais suscetveis, a forma de controle baseada na preveno.


Entre os cuidados, esto: comprar ingredientes (gros) de fornecedores idneos,
evitar a utilizao de raes ou alimentos suspeitos e no utilizar alimentos em
estado de deteriorao e que apresentem mofos. Animais em estado nutricional
adequado e com boa imunidade so menos suscetveis a infees causadas por
agentes patognicos ou intoxicaes. O conhecimento prvio de uma possvel
instalao do fungo e dos aspectos relacionados com a produo de micotoxinas
pode evitar a contaminao por micotoxinas. Para cereais que apresentam alguma
contaminao por micotoxinas, pode-se utilizar adsorventes na formulao da
dieta, a fim de reduzir os danos provocados por micotoxinas. Entre os adsorventes,
esto os derivados de argila (aluminossilicato de sdio, bentonitas, sepiolita,
montmorilonita, diatominas e aluminossilicato de clcio), que apresentam alta
eficincia no sequestro de micotoxinas (aflotoxinas). Esses adsorventes possuem
carga negativa, enquanto as toxinas apresentam carga positiva, sendo, assim,
absorvidas e tornando-as inertes (sem efeitos txicos).

Pesquise mais
Agora com voc! Leia o artigo disponvel em:

TESSARI, E. N. C. et al. Efeitos da aflatoxina sobre as aves: reviso


de literatura. Revista Cientfica Eletrnica de Medicina Veterinria,
So Paulo, n. 18, p. 1-20, 2012. Disponvel em: <http://faef.revista.
inf.br/imagens_arquivos/arquivos_destaque/IHlMAvHqsVawq
5g_2013-6-28-18-13-38.pdf>. Acesso em: 17 set 2016.

Sem medo de errar

Para compreender melhor a situao apresentada, vamos recapitular os pontos


que foram analisados, anteriormente, na situao-problema:

O laboratrio tem como objetivo prestar servios laboratoriais aos profissionais


da rea veterinria, a fim de identificar agentes patolgicos a partir de diferentes
mtodos de diagnsticos para auxiliar na resoluo de casos clnicos. De acordo
com o tcnico, o cultivo da amostra e o exame microscpico confirmou a presena
do Claviceps purpurea. Utilizando cromatografia de alta eficincia, detectou-se a
presena das micotoxinas ergotamina e ergometrina.

Mediante as informaes apresentadas, e com o auxlio dos contedos


abordados nesta seo, responda aos enunciados, a seguir, para a resoluo do

Micologia geral e especial aplicada medicina veterinria 51


U4

caso clnico:

Quais so os principais gneros de fungos produzem micotoxinas?

Resposta: Os principais gneros de interesse mdico veterinrio e de sade


pblica, e que esto associados com a produo de micotoxinas, so os gneros
Aspergillus, Fusarium e Penicillium.

Descreva os mtodos de diagnstico para identificao de micotoxinas.

Resposta: A identificao de micotoxinas mediada por diferentes mtodos,


que podem ser por triagem, semiquantitativos (cromatografia de camada delgada,
tcnicas de imunoensaio, como ELISA, e tcnicas imunocromticas) e quantitativos
(cromatografia de alta eficincia acoplada fluorescncia e ao UV, cromatografia
lquida acoplada espectrofotometria de massa e cromatografia gasosa acoplada
espectrofotometria de massa), que utilizam colunas de imunoafinidade ou colunas
de carvo e alumina.

Ateno

Na identificao das micotoxinas, as amostras devem ser,


cuidadosamente, selecionadas e armazenadas a -20C at o incio da
anlise.

Avanando na prtica

Eczema facial

Descrio da situao-problema

Recentemente, o mdico veterinrio foi solicitado para fazer um atendimento


clnico em uma propriedade. De acordo com o relato do proprietrio, alguns
ovinos comearam a apresentar edemas e rachaduras na pele. Durante o
exame clnico do cavalo, o mdico veterinrio observou que as leses estavam
concentradas na cabea, confirmando a presena de edema e com rachaduras na
pele. Prosseguindo com a anamnese, o proprietrio relatou que o lote de ovinos
que apresentou edema e rachaduras na pele estava em pastagem de Brachiaria
decumbens. Descartando outras hipteses, o mdico veterinrio suspeitou de
fotossensibilizao, causada por um agente fngico que poderia estar instalado
em tal pastagem. Como medida adotada, foi recomendo remanejar os ovinos
para abrigos com alimentao, gua e sombreamento, a fim de prosseguir com o
tratamento. Em seguida, amostras de sangue com anticoagulante e amostras de
pastagem foram coletadas para serem analisadas em laboratrio.

52 Micologia geral e especial aplicada medicina veterinria


U4

Mediante as informaes apresentadas, e com o auxlio dos contedos


abordados nesta seo, responda aos enunciados, a seguir, para a resoluo do
caso clnico:

Descreva um procedimento de identificao para agentes fngicos em


gros.

Descreva a tcnica de cultivo para o isolamento de agentes fngicos em


gros.

Lembre-se

As espcies fngicas se apresentam tanto na forma filamentosa quanto


na forma leveduriforme, assim denominados de fungos dimrficos.

Resoluo da situao-problema

Em continuidade ao relato de caso, as amostras foram submetidas anlise


laboratorial. A amostra foi cultivada em meio de cultura, a fim de verificar a
possibilidade do crescimento de colnias fngicas. Posteriormente, foram
analisados os aspectos macroscpicos das colnias fngicas e, em seguida, um
fragmento de cada colnia foi submetido anlise microscpica. Os resultados
evidenciaram a presena da espcie fngica Pithomyces chartarum.

Cite duas tcnicas para identificao de agentes fngicos em gros.

Resposta: Para o isolamento e a identificao dos agentes fngicos em gros


e plantas, pode-se aplicar a tcnica de cultivo, de microscopia estereoscpica e
tcnicas moleculares.

Descreva a tcnica de cultivo para isolamento de agentes fngicos em


gros.

Resposta: As amostras devem passar por uma assepsia superficial com uma
soluo a 1% de hipoclorito de sdio, por trs minutos. Em seguida, as amostras
podem ser cultivadas em meio gar Batata Dextrose e incubadas, aerobiamente,
a 25C, durante um perodo de cinco dias. Aps, como critrios de identificao,
observar a morfologia colonial.

Faa voc mesmo

Agora com voc! Pesquise sobre as caractersticas das doenas


causadas por micotoxinas que no foram abordadas nesta seo:
diplodiose, toxicose pela festuca, toxicose pelo mofo da batata-doce,

Micologia geral e especial aplicada medicina veterinria 53


U4

leucoencefalomalcia, toxicose pela eslaframina, edema pulmonar


suno, cambaleio pelo penitrema, tremores induzidos por Aspergillus
clavatus, cambaleio pelo paspalo e estaquibotriotoxicose. Consulte o
material de apoio:

QUINN, P. J. et al. Microbiologia veterinria e doenas infecciosas.


Artmed, 2005.

Faa valer a pena

1. As micotoxinas podem causar grandes prejuzos na produo animal.


Mais de 100 espcies fngicas produzem micotoxinas, no entanto,
apenas as espcies fngicas pertencentes ao gnero Aspergillus,
Fusarium e Penicillium so de interesse veterinrio. Com relao
toxinomina fngica, marque V para verdadeira e F falsa.
( ) O gnero Aspergillus pertence ao reino Fungi.
( ) O gnero Penicillium pertence ao filo Acomycota.
( ) O gnero Fusarium pertence classe Sordarimycetes.
( ) O gnero Fusarium pertence ordem Eurotiales.
( ) O gnero Penicillium pertence famlia Nectriaceae.
A seguir, assinale a alternativa correta na descrio da sequncia de
verdadeiro e falso, em relao s afirmativas anteriores:
a) F, V, V, V e F.
b) F, F, F, F e V.
c) V, V, V, F e V.
d) V, V, V, F e F.
e) V, V, V, F e F.

2. O termo micotoxina tem sido utilizado para definir substncias


que so prejudiciais para animais de produo e companhia, alm de
acometer seres humanos. A seguir, complete o enuciado que explica a
origem da palavra micotoxina:
O termo micotoxina derivado de duas palavras, sendo uma de origem
grega, _________, que significa ___________, e outra de origem do
latim, __________, que significa ___________. Assinale a alternativa
correta que completa a ordem das lacunas:

54 Micologia geral e especial aplicada medicina veterinria


U4

a) Toxican, bactria, mykes e vrus.


b) Mykes, bactria, toxican e toxina.
c) Toxican, toxina, mykes e fungos.
d) Toxican, fungo, mykes e toxina.
e) Mykes, fungo, toxican e toxina.

3. A produo de micotoxinas pode ocorrer, a campo, na planta, ou


durante o processo de armazenamento do gro. A contaminao
animal e humana ocorre de forma direta ou indireta. Com relao
produo de micotoxinas, correto afirmar que:
I. Um dos fatores que interferem na produo de agentes fngicos na
planta a condio climtica.
II. A qualidade do gro importante para evitar a instalao de fungos
no processo de armazenamento.
III. A presena de caros e insetos pode favorecer a instalao de
fungos no gros armazenados.
IV. A durao de exposio e concentrao da micotoxina no favorece
no processo de contaminao animal.
V. Os fungos no so eliminados dos gros com o auxlio de processos
fsicos e qumicos, porm, uma vez produzida a micotoxina, ela
pemanece presente no gro.
A seguir, assinale a alternativa correta:
a) Somente as afirmativas II, IV e V so corretas.
b) Somente as afirmativas III, IV e V so corretas.
c) Somente as afirmativas I, II e III so corretas.
d) Somente as afirmativas II, III e V so corretas.
e) Somente as afirmativas I, II e IV so corretas.

Micologia geral e especial aplicada medicina veterinria 55


U4

56 Micologia geral e especial aplicada medicina veterinria


U4

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QUINN, P. F. Microbiologia veterinria e doenas infecciosas. Porto Alegre:
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ZAITZ, C. Compndio de micologia mdica. 2. ed. Rio de Janeiro: EGK, 2010.

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