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INSTRUÇÕES
1. Usar avental de mangas longas e sapato fechado.
2. Manter as unhas sem esmalte e retirar adornos: anéis, pulseiras e brincos.
3. Antes de entrar no laboratório proceder à higienização das mãos e antebraços.
4. Ler o roteiro da aula antes de iniciar o experimento.
5. Separar os utensílios e ingredientes necessários à execução do experimento, reunindo todos em um só
local.
6. Sempre transportar os alimentos e utensílios em bandejas.
7. Escolher utensílios com capacidade de acordo com o experimento a executar.
8. Usar o material adequado (tábua, faca, trinchante, bacia, entre outros) para limpar, cortar e higienizar
os alimentos.
09. Anotar todos os resultados no roteiro da aula e tirar fotos.
10. Ao terminar o experimento, proceder à higienização dos materiais utilizados durante a aula, secar e
guardar nos devidos lugares. Deixar a bancada limpa e em ordem.
ROTEIRO
1) Objetivo: Verificar o efeito dos métodos de branqueamento para evitar//diminuir o
escurecimento enzimático em alimentos vegetais não processados.
2) Introdução teórica: Frutas e vegetais armazenados, mesmo à temperatura de congelamento
podem-se deteriorar em razão da presença de certas enzimas. Portanto, estes para serem preservados
por enlatamento, congelamento ou desidratação, são submetidos, em sua maioria, a um pré-
tratamento, conhecido como branqueamento.
A operação de branqueamento visa à inativação de enzimas como as PPOs, além da fixação
da cor, a remoção de oxigênio e a diminuição da carga microbiana inicial presente na superfície do
alimento. Geralmente não é uma operação da fase de acabamento, sendo seguida de outras como
congelamento, esterilização e desidratação.
Polifenoloxidases (PPOs) são enzimas intracelulares que ocorrem em plantas, animais e
fungos e estão envolvidas no escurecimento de frutas, vegetais, cereais e leguminosas. As
polifenoloxidases atuam sobre uma grande variedade de substratos, como exemplo, nas batatas, o
substrato predominante é a tirosina. As reações enzimáticas que envolvem a polifenoloxidase (PPO)
ocorrem nos alimentos (frutas e vegetais) durante o processamento e armazenamento, em que
geralmente são cortados e expostos ao ar. Os tecidos vegetais contêm quantidades abundantes de
compostos fenólicos, que são os substratos dessa enzima. Nas frutas e vegetais intactos a reação não
ocorre devido ao fato dos substratos fenólicos estarem compartimentalizados nos vacúolos dos
vegetais, mas, quando estes sofrem dano mecânico, rompem-se as membranas responsáveis pela
compartimentalização e a reação dispara.
Muitos métodos têm sido utilizados numa tentativa de prevenir este indesejável
escurecimento enzimático e a forma mais corrente de inativar a enzima polifenoloxidase é
utilizando algum método de branqueamento. Como exemplo cita-se o uso de ácido cítrico que inibe
a enzima pelo fato de baixar o pH e o tratamento térmico brando com temperaturas variando entre
70°C e 100°C por alguns minutos.
3) Material e métodos:
3.1 Materiais
Béqueres de 500 mL
Peneiras
Faca
Batata inglesa
Pipeta graduada de 1,0 mL
Pêra de borracha ou pipetador manual para uso na pipeta
Bacia de plástico
Panela de aço inox
Etiquetas ou rótulos adesivos
Embalagens plásticas transparentes
3.2 Equipamentos
Fogão
Forno micro-ondas
Geladeira ou freezer
3.3 Reagentes
Hipoclorito de Sódio (água sanitária)
Ácido Cítrico 1%
Pipetar um (1) mL de ácido cítrico em um balão volumétrico de 100 mL e completar até o menisco com água
destilada, fechar o balão e homogeneizar.
Guaiacol 1%
Pipetar um (1) mL de guaiacol em um balão volumétrico de 100 mL e completar até o menisco com água
destilada, fechar o balão e homogeneizar.
H2O2 10 volumes
3.4 Métodos
3.4.3 Branqueamento
5) Referências
ORDOÑEZ, J. A.; RODRÍGUEZ, M.; ALVAREZ L.; SANZ M.; MINGUILLÓN, G.; PERALES,
L.; CORTECERO, M. Tecnologia de alimentos: componentes dos alimentos e processos. Porto
Alegre: Ed. Artmed, 2005.
CLERICI, M. T. P. S.; SEBASTIÃO, R. H.; OLIVEIRA, L. C.; DOS SANTOS, M. S.; MORAES,
A. L. L.; CLARETO, S. S. Escurecimento enzimático: uma aula prática. Revista de Ensino de
Bioquímica, v. 12, n. 2, 2014.