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Descobriu-se recentemente que bactérias e fungos podem sintetizar antibióticos de natureza peptídica com
forte proporção de aminoácidos não convencionais que os ribossomas são incapazes de incorporar nas
proteínas. A descoberta deste mecanismo ocorreu quando cientistas que trabalhavam na biossíntese de um
antibiótico, a gramicidina S, observaram que os extratos celulares da bactéria que produz este antibiótico
continuam a sintetizá-lo mesmo que se adicione uma enzima que destrói o RNA ou uma substância que
impede a síntese proteica ao nível dos ribossomas. Descobriram que na síntese destes antibióticos estavam
envolvidas enzimas de grandes dimensões, que designaram por sintetases de péptidos não ribossomais
(NRPS). No cromossoma bacteriano, são vários os genes que estão implicados na codificação de uma NRPS.
Esta enzima é composta por vários módulos (em geral, uma dezena) ligados uns aos outros. Cada módulo é
responsável pela incorporação específica de um dado aminoácido na cadeia polipeptídica em crescimento.
Uma NRPS só catalisa a síntese de uma molécula bem definida, sendo a sucessão dos diferentes módulos o
que determina a composição do produto, como se evidencia na Figura 2. Em 1995, conseguiu-se trocar a
ordem das sequências de DNA que codificam módulos inteiros de uma NRPS. Esta manipulação conduziu à
síntese de uma nova enzima, que produziu péptidos inéditos. Também já foi possível transferir genes
responsáveis pela síntese de NRPS da bactéria Streptomyces lasaliensis para a bactéria Escherichia coli. Esta
última bactéria é a mais conhecida, a que se sabe manipular melhor e a que se utiliza para produzir moléculas
em quantidades industriais. Em 2002, quando pela primeira vez foi sequenciado o genoma de uma bactéria
produtora de antibióticos, Streptomyces coelicor, descobriram-se vários genes correspondentes a NRPS, mas
que não se exprimiam, isto é, fontes potenciais de NRPS responsáveis pela síntese de novos péptidos. Surge
assim o desafio de tentar obter novas NRPS e de selecionar, do ponto de vista farmacológico, as mais
interessantes.
1. O aumento das doenças infeciosas resistentes aos antibióticos, como a tuberculose multirresistente, tem
vindo a preocupar a comunidade científica internacional, que aposta cada vez mais em investigação
biomédica.
Explique de que modo a sequenciação do genoma de S. coelicor e a utilização de E. coli podem contribuir para
a produção de novos antibióticos.
Contaminação por urânio nas drenagens de minas Na região Centro de Portugal, todas as minas de rádio e de
urânio estão encerradas, embora ainda existam resíduos a céu aberto, responsáveis pela contaminação das
águas próximas. Para explicar a presença de duas espécies de fungos pluricelulares aquáticos (da classe dos
Ascomycetes) em águas contaminadas com metais pesados, os investigadores colocaram duas hipóteses:
Hipótese 1: Se a presença das espécies de fungos pluricelulares aquáticos no curso de água contaminado
ocorre devido à tolerância ao aumento da concentração de metais, então espera-se que estirpes das duas
espécies obtidas, quer de águas não contaminadas, quer de águas contaminadas, se comportem igualmente
bem quer em meios de cultura preparados com água contaminada, quer em meios de cultura preparados com
água não contaminada.
Hipótese 2: Se a presença das espécies de fungos pluricelulares aquáticos no curso de água contaminado é
explicada por adaptações genéticas aos contaminantes, então espera-se que estirpes das duas espécies
obtidas de águas contaminadas se comportem melhor num meio de cultura preparado com água contaminada
do que num meio de cultura preparado com água não contaminada.
Método:
1 – Foram isoladas estirpes de duas espécies de fungos pluricelulares aquáticos através da recolha de folhas
submersas com esporos de Tricladium splendens e de Varicosporium elodeae numa ribeira de referência e
numa ribeira contaminada com metais pesados.
2 – Amostras das duas espécies de fungos colhidas no curso de água de referência foram deixadas crescer
em meio de agar com extrato de malte (MEA), preparado com água do curso de água de referência. Amostras
das duas espécies de fungos colhidas no curso de água contaminado foram deixadas crescer em MEA,
preparado com água do curso de água contaminado. Todas as amostras foram deixadas crescer durante 15
dias, sob o fotoperíodo do mês de abril, à temperatura de 20 ºC.
3 – Após 15 dias de incubação, cortaram-se fragmentos de 3 mm de diâmetro da periferia de cada uma das
quatro colónias em crescimento. Foram inoculados fragmentos em meio MEA preparado com água de um
curso contaminado e com água de um curso de referência, de acordo com a Tabela 1. Realizaram-se três
repetições por tratamento.
4 – O diâmetro das colónias foi medido em duas direções perpendiculares, até a colónia se encontrar a 1 cm
da periferia da caixa.
TABELA 1
CRESCIMENTO DAS
ENSA ESPéCIES RIBEIRA DE MEIO DE
IO ORIGEM CULTURA ESTIRPES (mm/dia)
Baseado em Ferreira, V., Gonçalves, A. L., Pratas, J. e Canhoto, C., «Contamination by uranium mine drainages affects fungal growth and
interactions between fungal species and strains», Micology, 102, 2010
(A) 1 e 4.
(B) 1 e 3.
(C) 2 e 4.
(D) 2 e 3.
5. Explique, com base nos dados, qual das duas hipóteses, hipótese 1 ou hipótese 2, é apoiada pelos
resultados obtidos na experiência relativos a V. elodeae.
A água é o maior fator limitante no desenvolvimento das plantas. O stress produzido pelo défice hídrico
estimula a produção de ácido abcísico (ABA), que faz os iões potássio saírem das células guarda,
influenciando a taxa de transpiração. Contudo, como a abertura estomática é uma característica que é
adaptável às condições ambientais, cada espécie tem um comportamento diferente quando sujeita a défice
hídrico.
Para avaliar os efeitos do défice hídrico nas trocas de CO 2 e de H2O, utilizaram-se, cinco meses após a sua
germinação, plantas de Tabebuia aurea.
Dois grupos de seis plantas foram colocados em estufa com as seguintes condições: temperatura média de 20
ºC, humidade relativa (atmosférica) de 60 ± 10% e uma intensidade de luz de 65% da intensidade média da luz
diurna.
Após a aclimatação, os dois grupos de plantas foram sujeitos, durante 21 dias, às seguintes condições
hídricas:
Grupo A – manteve-se a irrigação diária.
Grupo B – suspendeu-se a irrigação durante os primeiros 14 dias;
– a partir do 14.º dia reiniciou-se a irrigação diária.
Foram medidas as trocas gasosas em todas as plantas, utilizando-se sempre as mesmas folhas, durante 21
dias. Todas as outras condições permaneceram idênticas nos dois grupos de plantas, tendo sido feitas
medições diárias em todas as plantas de cada grupo.
Os gráficos seguintes mostram a variação da taxa de transpiração e da taxa fotossintética ao longo dos 21
dias, nos dois grupos de plantas.
Baseado em Oliveira, A. K. M. et al., «Gas exchange of potted Tabebuia aurea plants under hydric stress»,
Acta Scientiarum, Agronomy, 2011
6. A variável independente em estudo na experiência descrita é
7. Explique em que medida os resultados da experiência descrita permitem concluir que Tabebuia aurea
apresenta mecanismos de tolerância ao stress hídrico.
Em diferentes discos contendo meio de cultura com timidina tritiada e colcemida*, foram colocadas as
seguintes populações de células: células G1 não fundidas (G1), células G1 fundidas entre si (G1/G1) e
células G1 fundidas com células S (G1/S).
O Gráfico 1 traduz o registo da variação da percentagem de células marcadas, em cada um dos discos,
ao longo de 16 horas.
Em diferentes discos contendo meio de cultura com colcemida, foram colocadas as seguintes populações de
células: células G2 não fundidas (G2), células G2 fundidas entre si (G2/G2), células S não fundidas (S),
células S fundidas entre si (S/S) e células S fundidas com células G2 (S/G2).
O Gráfico 2 traduz o registo da variação do índice de mitose (obtido pela divisão do número de células em
mitose pelo número de células contabilizadas) ao longo de 18 horas.
Gráfico 2
1
Aumento da marcação radioativa (%)
x
100 0,8 S
x
G
2
Índice de mitose
75 0,6
G2/G2
x
G1
/G
50 0,4
1
G1
S/G2x S/
S/
25 S
0,2
G1
0
0 x
0 4 8 12 16 x
0 4 8 12 16 20
Tempo após a fusão de células (hora)
Tempo após a fusão de células (hora)
Gráfico 1
8. Indique os discos que servem de controlo na experiência 1.
10. Explique, de acordo com os resultados obtidos na experiência 1, a variação de valores na marcação
radioativa de células G1/S.
Os seres que vivem no Antártico estão sujeitos a fatores abióticos muito limitantes. A baixa temperatura
aumenta a viscosidade dos fluidos nestes seres e, no verão, o degelo conduz à variação da salinidade da
água do mar. As águas frias e salgadas da região são ricas em oxigénio, pois nestas condições este gás
torna-se mais solúvel.
Nos «peixes do gelo», os vasos são de grande calibre, o sangue não possui hemoglobina e o oxigénio
difunde-se diretamente dos capilares para os tecidos, que se apresentam muito vascularizados e com grande
densidade de mitocôndrias, características bem evidenciadas no tecido muscular cardíaco.
Os «peixes do gelo», alguns insetos e alguns répteis possuem, no seu fluido circulante, proteínas
com um papel anticongelante, que permitem o bloqueio do crescimento de cristais de gelo.
Certas espécies de bacalhau do Ártico exibem uma proteína idêntica à dos «peixes do gelo», mas que não é
transcrita a partir do mesmo gene. A evolução destas proteínas é uma das mais fantásticas adaptações
moleculares que caracterizam a evolução biológica.
Baseado em Pellé, M., «La Nature malgré tout», Science et vie, dezembro 2011
11. A alta viscosidade do sangue dos «peixes do gelo» não constitui um obstáculo à distribuição de oxigénio
às células porque
A exposição contínua ao oxigénio (O2), fator essencial à sobrevivência de formas de vida aeróbias, tem como
consequência a formação nos seres vivos de vários tipos de moléculas e de radicais – entre os quais se
encontra o peróxido de hidrogénio (H2O2). Considera-se que existe stresse oxidativo quando ocorre um
desequilíbrio entre concentrações de moléculas oxidantes e antioxidantes a favor da concentração das
moléculas oxidantes, criando uma situação de dano potencial. Apesar de as células terem evoluído no sentido
de desenvolverem mecanismos protetores, o stresse oxidativo está relacionado com diversas doenças, como,
por exemplo, no caso da espécie humana, o cancro e a doença de Parkinson.
Um dos efeitos mais interessantes na resposta ao stresse oxidativo por parte dos organismos, denominado
«resposta adaptativa», consiste num aumento da capacidade de sobrevivência à exposição a uma dose letal
quando um organismo é previamente exposto a uma dose subletal. Considera-se uma dose letal a que
provoca a morte de uma percentagem elevada de organismos de uma população.
No Gráfico 1, apresentam-se os resultados de um estudo de sobrevivência de células de leveduras sujeitas a
uma concentração de 600 μM de H2O2 durante 30 minutos e durante 90 minutos. Neste estudo, compararam-
se células não adaptadas (controlo) com células adaptadas a 150 μM de H2O2. Com o objetivo de se
investigar a resposta adaptativa em leveduras da espécie Saccharomyces cerevisiae, foi estudada a relação
entre as alterações de permeabilidade e a fluidez da membrana plasmática durante a sua adaptação a uma
dose subletal de H2O2. A fluidez da membrana plasmática foi determinada através da anisotropia de
fluorescência, sabendo-se que, quanto mais altos forem os valores, menos fluida é a membrana plasmática.
As medições da anisotropia de fluorescência, traduzidas nos Gráficos 2A e 2B, foram realizadas aos 30 e aos
60 minutos, em células de controlo e em células cultivadas num meio contendo uma dose subletal de 150 μM
de H2O2. Nas medições foram utilizadas duas sondas distintas, uma colocada na zona mais interna da
membrana – zona apolar da bicamada – (Gráfico 2A) e a outra localizada mais à superfície da membrana
(Gráfico 2B).
Gráfico 2A Gráfico 2B
12. Na experiência cujos resultados estão traduzidos no Gráfico 1, o controlo contém células de leveduras que
foram colocadas, sequencialmente,
(A) num meio sem adição de H2O2 e num meio com uma dose subletal de H2O2.
(B) em dois meios, ambos com uma dose subletal de H2O2.
(C) em dois meios, ambos sem adição de H2O2.
(D) num meio sem adição de H2O2 e num meio com uma dose letal de H2O2.
14. Explique, com base nos resultados traduzidos nos Gráficos 2A e 2B, de que modo a variação da fluidez da
membrana plasmática pode contribuir para regular o fluxo de H2O2 durante a resposta adaptativa em S.
cerevisiae.
Nas últimas décadas, muitas bactérias patogénicas de transmissão alimentar têm mostrado resistência aos
antibióticos atualmente disponíveis, relançando a necessidade de pesquisar novas moléculas dotadas de
atividade antimicrobiana. Nos Açores, devido à sua natureza vulcânica, ocorrem numerosos habitats terrestres
extremos – como as grutas lávicas e as fumarolas – que albergam comunidades microbianas únicas. Nas
grutas lávicas, as comunidades bacterianas sésseis (ao contrário das planctónicas, que vivem dispersas no
meio aquático) aderem a superfícies sólidas, produzindo redes gelatinosas que as imobilizam e protegem – os
biofilmes. A investigação a seguir apresentada pretendeu pesquisar a atividade antimicrobiana de culturas
bacterianas isoladas de biofilmes de grutas lávicas (GBO e GTM) e de amostras de solo de fumarolas (P) –
isolados –, face a bactérias patogénicas transmitidas pelos alimentos – microrganismos indicadores –, por
meio de dois métodos: o ensaio de inoculação cruzada de culturas em agar (ensaio 1, que permitiu o estudo
da atividade antimicrobiana de trinta isolados em agar contra oito microrganismos indicadores) e o ensaio de
difusão em agar de culturas do isolado GTM1B2 crescido em diferentes meios de cultura líquidos (ensaio 2,
que permitiu o estudo da atividade antimicrobiana do isolado GTM1B2 em diferentes meios de cultura líquidos
contra oito microrganismos indicadores).
15. Relativamente à atividade antimicrobiana das amostras testadas no ensaio 1 (Gráfico 1), a análise dos
resultados da investigação permite afirmar que
(A) os isolados das fumarolas inibiram, pelo menos, sete dos indicadores.
(B) os isolados GTM inibiram, pelo menos, um dos indicadores.
(C) os isolados das grutas lávicas inibiram, pelo menos, cinco dos indicadores.
(D) os isolados GBO inibiram, pelo menos, um dos indicadores.
17. Relativamente à atividade antimicrobiana do isolado GTM1B2 e de acordo com os dados obtidos no ensaio
2 (Gráfico 2), é correto afirmar que
(A) os meios de cultura líquidos utilizados limitam a atividade antimicrobiana do isolado contra microrganismos
do género Listeria.
(B) o meio ½R2B é limitante para a atividade antimicrobiana do isolado contra Proteus sp.
(C) o meio NtB é limitante para a atividade antimicrobiana do isolado contra Escherichia coli.
(D) os meios de cultura líquidos utilizados limitam a atividade antimicrobiana do isolado contra ambas as
estirpes de Staphylococcus aureus.
A produção de biocombustíveis com recurso a culturas como a soja depende, em termos de produtividade, da
ocupação exclusiva de grandes extensões de solo. As microalgas afiguram-se como uma alternativa para a
produção de combustíveis, uma vez que têm a capacidade de duplicar a sua biomassa várias vezes por dia e
de produzir, pelo menos, quinze vezes mais óleo por hectare do que as culturas alimentares concorrentes.
Para otimizar os processos de produção e extração dos óleos, recorre-se ao aumento do teor lipídico,
bloqueando as vias metabólicas responsáveis pela acumulação de compostos energéticos, como o amido, e à
diminuição do catabolismo dos lípidos. O silenciamento por mutação de genes das vias metabólicas referidas
ou a redução significativa da quantidade de mRNA desses mesmos genes também podem conduzir a um
aumento do teor lipídico celular. Após a extração dos óleos para a produção de biodiesel, os glúcidos (hidratos
de carbono) existentes no bolo vegetal remanescente podem ser utilizados como substrato para a produção de
etanol. O dióxido de carbono, resultante do processo de fermentação, pode, por sua vez, ser utilizado na
produção de mais biomassa (microalgas), o que permite o funcionamento em sistema fechado e uma
otimização de todo o processo bioenergético.
18. O aumento do teor lipídico nas microalgas pode ser conseguido através da redução da
(A) síntese dos lípidos e do bloqueio das vias anabólicas dos glúcidos.
(B) degradação dos lípidos e do bloqueio das vias catabólicas dos glúcidos.
(C) síntese dos lípidos e do bloqueio das vias catabólicas dos glúcidos.
(D) degradação dos lípidos e do bloqueio das vias anabólicas dos glúcidos.
Métodos e resultados
1 – Os morangueiros foram plantados em vasos idênticos contendo uma mistura de solo, vermiculite e
fertilizante orgânico, estando sujeitos às seguintes condições: uma temperatura de 25 °C durante o dia e de 18
°C durante a noite, 60% de humidade, um fotoperíodo de 12 horas, uma intensidade de fluxo de fotões de 450
µmol m–2 s–1 e rega até ao limite da capacidade de retenção de água do solo.
3 – O registo fotográfico do efeito dos glúcidos no desenvolvimento e no amadurecimento dos frutos está
traduzido na Figura 2. Os resultados da análise quantitativa do efeito dos glúcidos na acumulação de
antocianinas estão registados no Gráfico 1.
2
Tempo após os tratamentos com glúcidos (dia)
4
600 Manitol
gg-1de fruto)
Sacarose
5 500
Glucose Frutose
400
Quantidade de antocianinas (
6
300
200
7
100
8
0
0 2 4 6 8 10 12 14
1 cm Tempo após os tratamentos com glúcidos (dia)
Figura 2 Gráfico 1
Baseado em H. Jia et al., «Sucrose functions as a signal involved in the regulation of
strawberry fruit development and ripening», New Phytologist, 198, 2013
19. No estudo apresentado, constitui uma variável dependente
20. De acordo com a Figura 2, o início do amadurecimento dos morangos ocorreu ao _______ após ter sido
realizado o tratamento químico com _______.
21. Um dos procedimentos experimentais que contribuíram para a validade dos resultados foi a injeção dos
frutos de diferentes morangueiros com
22. Explique de que forma a análise quantitativa da acumulação de antocianinas, por ação da sacarose e da
glucose, registada no Gráfico 1, contribui para a confirmação dos resultados apresentados na Figura 2.
As larvas do inseto Phyllonorycter blancardella desenvolvem-se nas folhas da macieira Malus domestica,
garantindo a persistência de zonas verdes nas folhas que, no outono, vão amarelecendo. As larvas escavam
galerias, alimentando-se dos tecidos foliares. Este inseto estabelece também uma relação simbiótica com a
bactéria Wolbachia. No sentido de saber se a bactéria Wolbachia está implicada na interação entre o inseto e a
planta hospedeira, efetuou-se o estudo que a seguir se apresenta.
Métodos e resultados:
1 – Em dois conjuntos de placas de Petri, um contendo solução de glucose a 40% e o outro contendo solução
de glucose a 40% e 1% de antibiótico, colocaram-se, durante três dias, insetos fêmeas e insetos machos.
2 – Seguidamente, para a postura dos ovos, fêmeas de cada um dos grupos (fêmeas sujeitas a alimentação
com antibiótico e fêmeas sujeitas a alimentação sem antibiótico) foram colocadas individualmente em folhas de
macieira com três anos de idade. As árvores foram mantidas em estufa, sob condições controladas de
temperatura, humidade, radiância e ciclo natural de dia/ noite, que simulavam o verão. Procedeu-se a rega
diária, até ao aparecimento das larvas.
3 – Ao fim de dez dias, macieiras de cada um dos grupos foram colocadas fora da estufa, sob condições
outonais, para permitir o natural envelhecimento das folhas. As restantes árvores permaneceram na estufa
(sob as condições controladas que simulavam o verão).
4 – Posteriormente, procedeu-se à observação das características dos insetos, que eclodiram dos ovos e que
completaram o seu desenvolvimento, das características das folhas (presença ou ausência de ilhas verdes) e
do estado de infeção por Wolbachia. Os resultados estão expressos na Tabela 1.
5 – Mediram-se, também, os níveis de citocininas* nos tecidos foliares. Os resultados estão registados no
Gráfico 1.
* Hormonas vegetais envolvidas em diversos processos biológicos, como a inibição do envelhecimento, a manutenção da
clorofila e o controlo da mobilização de nutrientes para as folhas.
Sobrevivência
Sobrevivência
, reprodução e
Insetos , reprodução e
desenvolvime
não Si desenvolvime
nto normais (n
sujeitos m nto normais (n
= 20)
a = 15) Presença
(emergiram
antibiótic 18) de ilhas
o verdes
Alta taxa de
Insetos Sobrevivência mortalidade,
sujeitos N , reprodução e modificação do
a ã desenvolvime comportamento
antibiótic o nto normais (n alimentar, reprodução Ausência de
o = 15) baixa (n = 22)
ilhas verdes
(emergiram 3)
Gráfico 1
1400
1000
800
Concentração de citocininas (fmol mg )
-1
600
400
200
0
tecidos tecidos
tecidos tecidos
sem galerias sem galerias
com galerias com galerias
(controlo (controlo
(insetos não (insetos
verde) sujeitos a amarelo)
sujeitos a
antibiótico) antibiótico)
23. A situação de controlo desta experiência implicou a
(A) não sujeição dos insetos a antibiótico e a colocação das árvores no exterior.
(B) sujeição dos insetos a antibiótico e a permanência das árvores na estufa.
(C) não sujeição dos insetos a antibiótico e a permanência das árvores na estufa.
(D) sujeição dos insetos a antibiótico e a colocação das árvores no exterior.
26. Relacione a influência do antibiótico com as características das folhas amarelas outonais, de acordo com
os resultados expressos na Tabela 1.
Em 1961, Marshall Nirenberg e James Matthaei foram os autores do primeiro grande avanço na decifração do
código genético. Nas suas experiências utilizaram extratos celulares da bactéria Escherichia coli e
oligonucleótidos sintéticos, em vez de mRNA natural, como informação padrão para a síntese proteica. Com o
extrato celular de E. coli, preparou-se um sistema de reação completo, com todos os componentes
necessários à síntese proteica, incluindo um RNA sintético formado apenas com nucleótidos de uracilo (poli-
U). Foram realizados vários ensaios, nos quais se testou individualmente cada um dos 20 aminoácidos. Para
tal, o aminoácido testado encontrava-se marcado radioativamente. Na Tabela 1, está registada a incorporação
nas proteínas, em diferentes condições experimentais, do aminoácido fenilalanina marcado radioativamente.
Aos ensaios 2 e 4 não foram adicionados, respetivamente, poli-U e ATP. No ensaio 3 foram extraídos os
ribossomas. Os ensaios 5 e 6 e os ensaios 7 e 8 continham, respetivamente, os antibióticos puromicina e
cloranfenicol e as enzimas hidrolíticas RNAase e DNAase. Noutras experiências, Nirenberg e Matthaei
mostraram que a síntese de um péptido constituído por resíduos do aminoácido lisina estava dependente da
adição de poli-A, um RNA formado apenas com nucleótidos de adenina, ao sistema de reação; o mesmo
acontecia com a adição de poli-C, um RNA formado apenas com nucleótidos de citosina, que era específico
para a síntese de um péptido constituído apenas pelo aminoácido prolina. Gobind Khorana, agraciado com o
Prémio Nobel da Fisiologia ou Medicina em 1968, tal como Marshall Nirenberg, realizou diversas experiências
que contribuíram definitivamente para a decifração do código genético. A partir de polímeros de
ribonucleótidos, de sequência conhecida, demonstrou que a repetição de dois nucleótidos alternados n vezes,
por exemplo (UC)n, contém informação necessária à síntese do péptido (ser-leu)n, em que UCU codificava a
incorporação do aminoácido serina e CUC codificava a incorporação do aminoácido leucina.
Radioatividade
emitida por mg de
Ensaio Condições experimentais proteína por minuto
(A) ribossomas.
(B) ATP.
(C) DNA.
(D) poli-U.
28. As experiências de Gobind Khorana demonstraram que a informação utilizada diretamente na síntese de
um péptido se encontra na sequência de conjuntos de
A fermentação de vegetais contribui para a sua conservação e para a obtenção de produtos com interesse
nutricional.
A fermentação láctica pode ocorrer por duas vias: a via homoláctica, cujo produto final é o ácido láctico, e a via
heteroláctica, que origina, entre outros, ácido láctico e ácido acético. As culturas bacterianas de arranque
(culturas previamente selecionadas e cultivadas em laboratório) constituem uma alternativa à «flora
microbiana» indígena (que ocorre de forma natural nos vegetais). Entre outros aspetos, a utilização dessas
culturas possibilita o início mais rápido da fermentação, conduzindo a acidificações mais rápidas, que evitam a
deterioração dos vegetais por diminuírem a ação de micro-organismos deteriorantes. Com o objetivo de avaliar
o efeito de diversas bactérias ácido-lácticas na fermentação de uma mistura de vegetais, foi desenvolvida a
investigação seguinte.
Métodos e resultados
1 – Produziu-se uma mistura de vegetais contendo 45% de couve, 20% de cenoura, 10% de cebola, 2% de sal
e 23% de água.
2 – A mistura de vegetais, não sujeita a esterilização, foi submetida a três tratamentos: A – sem inoculação; B
– inoculação com uma cultura bacteriana de arranque mista (contendo mais do que uma espécie bacteriana)
denominada COOP; C – inoculação com uma cultura bacteriana de arranque mista denominada F3.
3 – Cada um dos ensaios foi incubado a 20 °C, durante 72 h, e posteriormente armazenado a 4 °C.
4 – Em cada ensaio, avaliou-se a produção de ácido láctico e de ácido acético aos 0, 1, 3, 7 e 30 dias. Os
resultados constam dos gráficos A, B e C, apresentados na Figura 2.
Ver gráficos exame 2015 1º Fase Grupo II
29. De acordo com o objetivo da investigação descrita, uma das variáveis dependentes em estudo é
(A) no ensaio sem inoculação, a concentração de ácido acético estabilizou a partir do 2.º dia.
(B) a produção de ácido láctico atingiu um valor máximo quando se utilizou a cultura bacteriana F3.
(C) no ensaio com a cultura COOP, a concentração de ácidos aumentou continuamente.
(D) a diminuição da concentração de ácido láctico, nos ensaios B e C, ocorreu ao mesmo tempo.
32. De acordo com alguns investigadores, a otimização da fermentação industrial de uma mistura de vegetais
é atingida quando, além da produção de ácido láctico, ocorre também a produção moderada de ácido acético.
Fundamente a escolha de um dos processos (A, B ou C), em detrimento dos outros, para aplicação na
fermentação industrial de misturas de vegetais, considerando os resultados obtidos nos três ensaios.
Nos mamíferos, a hormona antidiurética, ADH, liga-se a recetores na membrana das células epiteliais dos
tubos coletores e desencadeia uma sequência de reações intracelulares de regulação das aquaporinas, AQP-
2, proteínas membranares que intervêm no transporte da água.
No sentido de se perceber o efeito da ADH nas AQP-2, realizaram-se dois estudos.
Estudo 1
No primeiro estudo, pretendeu investigar-se o modo como a ADH intervém na regulação da permeabilidade
dos tubos coletores.
Métodos e resultados
1 – Isolaram-se tubos coletores de um rim de rato.
2 – Utilizaram-se marcadores para localizar as AQP-2 nas células dos tubos coletores, em diferentes
condições – sem ADH e com ADH.
Vesicula
AQP-2
Estudo 2
No segundo estudo, pretendeu investigar-se a influência da ADH na quantidade de AQP-2 nas células dos
tubos coletores.
Métodos e resultados
1 – Utilizaram-se duas linhagens de ratos – ratos normais e ratos incapazes de produzir ADH.
2 – As duas linhagens de ratos foram submetidas a tratamentos com ADH e a tratamentos com moléculas
antagonistas dos recetores de ADH (moléculas que bloqueiam o recetor).
3 – Os valores obtidos, relativos à quantidade de AQP-2 nas células, foram comparados com os valores de
referência obtidos em ratos das duas linhagens não submetidos a qualquer tratamento.
33. Da análise dos resultados do primeiro estudo, podemos concluir que a hormona ADH intervém na
35. A partir da análise dos resultados do segundo estudo, pode inferir-se que
(A) a variação da quantidade de AQP-2 é semelhante nas duas linhagens de ratos quando tratadas com um
antagonista do recetor de ADH.
(B) a ligação de ADH aos recetores da membrana altera a quantidade de AQP-2 nas células dos ratos normais.
(C) a quantidade de AQP-2 nas células depende exclusivamente da ligação de ADH às células-alvo nos tubos
coletores.
(D) a utilização do antagonista do recetor de ADH não influencia a quantidade de AQP-2 nas células dos ratos
incapazes de produzir ADH.
36. Explique, tendo em conta os valores de referência das duas linhagens, em que medida os resultados
obtidos para a linhagem de ratos que não produzem ADH permitem responder ao objetivo do segundo estudo.
As amibas são protozoários capazes de colonizar grande variedade de ambientes e, na sua forma vegetativa
(trofozoíto), multiplicam-se por fissão binária. Alimentam-se por fagocitose de outros protozoários, de fungos,
de algas e de bactérias. No entanto, algumas bactérias resistem à ação das amibas, evitando a inclusão em
vesículas fagocíticas (fagossomas), ou, quando incluídas, evitando a digestão e utilizando-as como
hospedeiras. Estas bactérias multiplicam-se num fagossoma da amiba, que não se funde com os lisossomas,
podendo ser libertadas para o meio, quer por lise das células hospedeiras, quer através de vesículas. A
coevolução entre as bactérias e as amibas originou espécies bacterianas que se tornaram endossimbiontes
obrigatórios e outras que infetam e destroem os protozoários hospedeiros.
As auxinas são fito-hormonas responsáveis pelo crescimento das plantas, sintetizadas preferencialmente nos
ápices caulinares. Estas fito-hormonas estão envolvidas no aumento de plasticidade da parede celular e na
subsequente deposição de materiais, que leva à expansão das células vegetais. As auxinas induzem o
aumento da concentração de H+ na parede celular, que promove a separação das fibras de celulose e a
inclusão de novos polímeros; seguidamente, as células absorvem água, o que faz aumentar o seu
comprimento, levando a um alongamento dos tecidos.
Em 1926, Frits Went conseguiu demonstrar experimentalmente os efeitos de uma substância, a que deu o
nome de auxina, no crescimento de coleóptilos1 de Avena sativa, na ausência de luz. A Figura 1 traduz
esquematicamente parte do procedimento experimental seguido por Frits Went e os resultados que obteve.
Ápice do coleóptilo
Coleóptilo sem
ápice
.... .
.... . Bloco de ágar
..
..
Coleóptilo sem o ápice
2h
. ....
.... ... . . ..
... . ...
..
... ... . Medição do ângulo da
.... ...
. .. . curvatura do coleóptilo
.
... . .
.. . .
1 Coleóptilo – estrutura de proteção das primeiras folhas, resultante da germinação das cariopses («sementes») das gramíneas.
38. Formule a hipótese que Frits Went pretendeu confirmar com a atividade experimental descrita.
39. Para a validade da demonstração do efeito da auxina nesta experiência, foi fundamental
A vespa Dryocosmus kuriphilus, originária da China, é uma das pragas mais prejudiciais do castanheiro, sendo
atualmente considerada uma ameaça para os soutos1 europeus, pois a população do inseto não é controlada
de forma natural.
As fêmeas induzem a formação de galhas2 na planta, possivelmente através de substâncias existentes na
saliva. As galhas prejudicam o normal desenvolvimento vegetativo do castanheiro, quer através de uma
diminuição do crescimento dos ramos, quer através do impedimento da formação de frutos, podendo conduzir
à morte da planta. Entre junho e julho, as fêmeas adultas depositam, no interior de gomos foliares, os ovos,
que eclodem de 30 a 40 dias depois. As larvas desenvolvem-se lentamente durante o outono e o inverno. Na
primavera, alimentam-se intensamente dos tecidos das galhas, durante 20 a 30 dias, e transformam-se em
pupas. A nova geração de vespas, formadas por partenogénese, emerge entre maio e julho.
O vento e o voo das fêmeas adultas contribuem para a dispersão da praga. Existem, no entanto, algumas
variedades de castanheiros resistentes, como, por exemplo, a resultante do cruzamento entre Castanea sativa
e Castanea crenata. Nestas variedades, não há formação de galhas, as larvas dos insetos não se
desenvolvem, e as folhas apenas apresentam leves deformações.
2 Galhas – estruturas de proteção e alimentação das larvas de alguns insetos, formadas a partir da multiplicação de células dos tecidos
vegetais.
O órix-da-arábia, Oryx leucoryx, é um mamífero pertencente à família Bovidae. Esta espécie, classificada como
vulnerável, habita nos desertos da Península Arábica, onde, no verão, a água é escassa e o conteúdo
nutricional da vegetação é pobre. Com o intuito de investigar os mecanismos utilizados pelo órix-da-arábia para
ajustar a sua fisiologia a uma progressiva restrição de água e de alimento, desenvolveu-se o estudo seguinte.
Métodos e resultados
1 – Selecionaram-se 14 fêmeas, que foram distribuídas, aleatoriamente, pelo grupo experimental (7 fêmeas) e
pelo grupo de controlo (7 fêmeas). Os animais foram mantidos ao ar livre, em espaços individuais de 40 m2,
com sombra disponível.
2 – Durante 5 meses (período de aclimatação fisiológica), forneceu-se ao grupo de controlo 2 kg/dia de feno e
4,5 L/dia de água. No grupo experimental, o tratamento iniciou-se com as mesmas quantidades de feno e de
água, que foram reduzidas gradualmente (15% a cada 3 semanas) até se atingir 0,8 kg/dia de feno e 1,2 L/dia
de água.
9000
TMR (kJ/dia)
8000
7000
6000
72 76 80 84 88 92 96 72 76 80 84 88 92 96
– Grupo experimental
– Grupo de controlo
750
TPTAE (g/dia)
600
450
300
72 76 80 84 88 92 96 72 76 80 84 88 92 96
Nota – não foi possível medir a TMR e a TPTAE de um dos animais do grupo de controlo
44. De acordo com os resultados registados, pode inferir-se que ocorreu _______ considerável da média da
massa corporal no grupo _______.
45. Explique em que medida a metodologia desenvolvida e os resultados obtidos mostram que o órix-da-
-arábia é um animal capaz de ajustar a sua fisiologia às condições do deserto no verão.
Na produção agrícola, podem ser utilizados diversos inseticidas, como o Diclorvos (DDVP) e a Deltametrina
(DTM). Estas classes de inseticidas afetam o sistema nervoso, causando a paralisia dos insetos. Os inseticidas
da classe do DDVP impedem a ação de enzimas, tais como as esterases, que são necessárias à degradação
dos neurotransmissores. Já os inseticidas da classe da DTM atuam nos canais de sódio do axónio, retardando
a repolarização do neurónio.
Com o intuito de avaliar a toxicidade de fórmulas comerciais do DDVP e da mistura deste com a DTM, foi
desenvolvido um estudo de toxicidade em peixes da espécie Danio rerio.
Concentraç
ão DDVP
Mortes (%)
(µg L1)
0,010 0
0,020 0
0,040 100
Tabela 2 – Determinação da toxicidade da mistura dos inseticidas DDVP e DTM em peixes da espécie Danio
rerio
Concentraç Concentraç
ão DDVP ão DTM
Mortes (%)
(µg L1) (µg L1)
47. Refira a diferença das condições a que foram submetidos os grupos de controlo, relativamente àquelas a
que foram submetidos os restantes grupos.
• a utilização isolada de 0,078 µg L−1 de DTM provoca 50% de mortes em Danio rerio;
• as enzimas esterases catalisam a hidrólise da DTM;
• o DDVP impede a ação das esterases.