Universidade do Grande Rio - Unigranrio

Curso: Biomedicina
Valor da avaliação:
Disciplina-Turma: Técnicas Moleculares e laboratoriais
(x) AV1 ( ) AV2 ( ) AVS ( ) 2ª Ch. AVS
Professor(a): Natália de Morais Cordeiro Data: 25-09-2021
Aluno(a):
Matrícula:
1. Classifique como verdadeiras ou falsas as seguintes afirmações,
justificando as falsas:
a) Na técnica de PCR, a etapa de emparelhamento é essencialmente uma
hibridação. Verdadeira
b) Em geral, as experiências com PCR requerem um único primer. Falsa - Dois
primers são utilizados para cada reação de PCR, e eles são projetados de
modo em que se englobem a região de interesse.
c) A técnica de PCR é constituída por diversas etapas que se repetem por 3
ciclos. Falsa - O procedimento é repetido dezenas de vezes até que, o nível
desejado de amplificação seja obtido.
d) Na reação de PCR, durante o processo de polimerização, o DNA neo-
sintetizado pode sofrer mutações. Verdadeira
e) Existem diferentes tipos de DNAs polimerases termoestáveis, que podem
ser utilizadas indiscriminadamente nas reações de PCR. Falsa - A PCR
depende de uma DNA polimerase termoestável, e, a Taq polimerase, requer
primers de DNA projetados especificamente para a região de interesse do
DNA.
2) Fale sobre as DNAs polimerases utilizadas no PCR, seu uso e
características.
As DNA polimerase utilizadas no PCR - são a Taq polimerase, primers, DNA
molde e nucleotídeos.
Taq Polimerase: é utilizada na amplificação de fragmentos
Primers: são pedaços fragmentados de DNA de fita simples.
DNA molde: uma fita de DNA que foi separada e que dará início a fita de RNA.
Nucleotídeos: são os construtores de ácidos nucleicos, o DNA e o RNA.
3) Um pesquisador pretende amplificar por PCR a região reguladora de
um gene de B. subtilis, contida na sequência abaixo indicada:
5’ ACTGATGCTAGTGACACCCAG ... (150 pb) ...
ACTTACATTAGGAAATTCAAA 3’
Que primers permitem amplificar a região?
a) 5’ ACTGATGCTAGTGAC 3’ e 5’ ATTAGGAAATTCAAA 3’
b) 5’ TGACTACGATCACTG 3’ e 5’ TAATCCTTTAAGTTT 3’
c) 5’ ACTGATGCTAGTGAC 3’ e 5’ TTTGAATTTCCTAAT 3’
d) 5’ GTCACTAGCATCAGT 3’ e 5’ TAATCCTTTAAGTTT 3’
e) 5’ GTCACTAGCATCAGT 3’ e 5’ ATTAGGAAATTCAAA 3’
4) Descreva características de um primer e sua utilidade.
O primer são segmentos de ácidos nucleicos necessário para realizar o início
de uma replicação do DNA. Entretanto, geralmente o primer possui de 18 a 22
bases e a utilidade de um primer é para realizar o anelamento.