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Resumo: Melipona fasciculata Smith (tiúba), abelha social sem ferrão, produz mel, cera e geoprópolis sendo
cultivada no Estado do Maranhão. O trabalho objetivou o desenvolvimento e validação de metodologia analítica
para padronização de extratos de geoprópolis de Melipona fasciculata, fundamentada na concentração de
flavonóides e polifenóis totais. Os geoprópolis foram coletados em meliponários no município de Palmerândia,
na região da Baixada Ocidental Maranhense. Dos geoprópolis foram obtidos extratos alcoólicos, hidroalcoólicos
e aquosos, empregando planejamento fatorial de operação de extração (maceração e aparelho de Soxhet),
hidromódulo (relação droga/solvente) e líquido extrator (etanol 100%, etanol 70%, etanol 50% e água).
Nos extratos foi determinada a concentração de polifenóis e flavonóides totais, por métodos colorimétricos
com reagente Folin-Ciocalteau e cloreto de alumínio, medidos por espectrométria na região do UV-Vis. Os
resultados demonstraram que os extratos obtidos por processo de maceração com etanol puro e etanol a
70% na relação de hidromódulo 1:5, apresentaram maiores rendimentos extrativos e teores de polifenóis
e flavonóides totais. Os dados validam metodologia analítica para padronizar extrativos de geoprópolis de
Melipona fasciculata Smith no município de Palmerândia e contribuem para determinar o padrão de qualidade
deste produto natural.
Palavras-chave: Geoprópolis. Melipona fasciculata. Padronização de extratos. Flavonóides totais. Polifenois totais.
Abstract: Melipona fasciculata Smith (“tiúba”), native and stingless bees that produces honey, wax and
geoprópolis and is cultived in Maranhão State. This study aimed to standardize the methodology for the
extraction of geopropolis employing the quantification of total polyphenols and flavonoids compounds as
parameters. The geopropolis proceeding from “meliponarios” of city Palmerândia-MA of which were obtained
from alcoholic extracts, hydroalcoholic and aqueous using factorial design factors: operation of extraction
(maceration and apparatus Soxhlet) hidromodul (ratio drug / solvent) and extractor liquid (100% ethanol,
70% ethanol, 50% ethanol and water). In the extracts was evaluated the concentration of total polyphenols
and flavonoids,through the Folin-Ciocalteu and aluminum chloride colorimetric methods using UV-Vis
spectrophotometric method. The results showed that the extracts obtained with pure ethanol and 70% ethanol
and hidromodul 1:5, showed higher extraction efficiency, and higher concentrations of total polyphenols and
flavonoids. The results valid the analithical method to extratives Melipona fasciculata geopropolis as basis
for the obtaining of data for the quality control and standardization of the product.
Keywords: Geopropolis. Melipona fasciculata. Standardization of extracts. Total Flavonoids. Total polyphenol.
* Trabalho premiado durante o XXI Encontro do SEMIC realizado na UFMA entre os dias 17 e 19 de dezembro de 2009
** Graduanda (Farmácia), Bolsista Iniciação Científica CNPq, Laboratório Farmacognosia I, Departamento de Farmácia, Centro de
Ciências Biológicas e da Saúde, UFMA. E-mail: mayara_301@hotmail.com.
*** Pós-graduando (Doutorando), Programa RENORBIO, Laboratório Farmacognosia I, Departamento de Farmácia, Centro de
Ciências Biológicas e da Saúde, UFMA.
**** Pós-graduando (Mestrado em Ciências da Saúde), Laboratório Farmacognosia I, Departamento de Farmácia, Centro de
Ciências Biológicas e da Saúde, UFMA.
***** Graduanda (Medicina), bolsista Iniciação Científica CNPq, Laboratório Farmacognosia I, Departamento de Farmácia, Centro
de Ciências Biológicas e da Saúde, UFMA.
****** Doutora em Produtos Naturais e Cinéticos Bioativos, Laboratório de Farmacotécnica Homeopática, Departamento de Farmácia,
Centro de Ciências Biológicas e da Saúde, UFMA.
******* Doutora em Química Orgânica, Laboratório Farmacognosia I, Departamento de Farmácia, Centro de Ciências Biológicas e
da Saúde, UFMA.
Tabela 1 - Rendimento (%) dos extratos de geoprópolis de Melipona fasciculata Smith obtidos por maceração (24h) e remaceração
(+24h), com emprego de diferentes relações de hidromódulo e líquidos extratores
Tabela 3 - Avaliação qualitativa e semiquantitativa de constituintes químicos dos extratos de geoprópolis de Melipona fasciculata Smith
obtidos por maceração e remaceração, com emprego de diferentes relações de hidromódulo
Compostos
Triterpenos Esteróides Alcalóides
fenólicos*
Extrato/Hidromódulo
24 h +24 h 24 h +24 h 24 h +24 h 24 h +24 h
EG4M + ++ - - - - - -
EG8M + ++ - - - - - -
* Resultados expressos como média dos ensaios de avaliação qualitativa e semiquantitativa de constituintes químicos realizados em
triplicata nos extratos de geoprópolis de Melipona fasciculata Smith, obtidos por maceração (24h) e remaceração (+24h), com emprego de
diferentes relações de hidromódulo (EG1M - EG8M). Critérios quanto ao grau de intensidade dos constituintes analisados: (+++) resultado
fortemente positivo, (++) resultado moderamente positivo, (+) resultado fracamente positivo e (-) resultado negativo.
Tabela 4 - Avaliação qualitativa e semiquantitativa de constituintes químicos dos extratos de geoprópolis de Melipona fasciculata Smith,
obtidos em aparelho de Soxhlet, com emprego de diferentes relações de hidromódulo
Compostos
Extrato/Hidromódulo Triterpenos Esteróides Alcalóides
fenólicos*
EG2S +++ ++ - -
Hidromódulo
1:2
EG3S ++ ++ - -
EG4S + - - -
EG8S + - - -
* Resultados expressos como média dos ensaios de avaliação qualitativa e semiquantitativa de constituintes químicos realizados em
triplicata nos extratos de geoprópolis de Melipona fasciculata Smith, obtidos em aparelho de Soxhlet, com emprego de diferentes relações
de hidromódulo (EG1S - EG8S). Critérios quanto ao grau de intensidade dos constituintes analisados: (+++) resultado fortemente positivo,
(++) resultado moderamente positivo, (+) resultado fracamente positivo e (-) resultado negativo.
Tabela 5 - Teores de flavonóides e polifenóis totais nos extratos de geoprópolis de Melipona fasciculata Smith, obtidos por maceração e
remaceração, com emprego de diferentes relações de hidromódulo
Extrato/Hidromódulo
24 horas +24 horas 24 horas +24 horas
Hidromódulo EG6M 1,65 ± 0,006 1,60 ± 0,002 37,04 ± 0,011 35,08 ± 0,02
1:5
EG7M 1,39 ± 0,003 1,43 ± 0,007 36,31 ± 0,004 36,95 ± 0,007
(a) Resultados expressos como médias ± desvio padrão dos ensaios de avaliação quantitativa flavonóides totais e polifenóis totais nos
extratos de geoprópolis de Melipona fasciculata Smith, obtidos por maceração (24h) e remaceração (+24h), com emprego de diferentes
relações de hidromódulo (EG1M - EG8M) (n: 3), (b) expresso como equivalente de quercetina; (c) expresso como equivalente de ácido
gálico.
Tabela 6 - Teores de flavonóides e polifenóis totais nos extratos de geoprópolis de Melipona fasciculata Smith, obtidos em aparelho de
Soxhlet, com emprego de diferentes relações de hidromódulo
(a) Resultados expressos como médias ± desvio padrão dos ensaios de avaliação quantitativa flavonóides totais e polifenóis totais nos
extratos de geoprópolis de Melipona fasciculata Smith, obtidos em aparelho de Soxhlet, com emprego de diferentes relações de hidromódulo
(EG1S - EG8S) (n: 3), (b) expresso como equivalente de quercetina; (c) expresso como equivalente de ácido gálico
fasciculata, obtidos nesse estudo, variaram Cristina Aranha Batista, e bolsa de Doutorado
de 7,36% a 37,04%. Os extratos etanólicos de Richard Pereira Dutra; à Central Analítica do
e hidroalcoólicos, com hidromódulo 1:5, Departamento de Química/UFMA pelo uso do
apresentaram maiores valores de polifenóis espectrofotômetro UV-Vis.
totais. Os valores de polifenóis totais encontrados
nos extrativos de geoprópolis obtidos com REFERÊNCIAS
aparelho de Soxhlet variaram de 7,73% a
14,35%, em ambos as relações de hidromódulos.
ABREU, B.V.B. Polifenóis de geoprópolis de
Resultados semelhantes foram descritos por
Melipona fasciculata Smith (tiúba) coletadas em
Cunha et al. (2004) em métodos extrativos com municípios do Cerrado maranhense. Monografia
própolis de Apis mellifera. (Graduação em Farmácia) - Universidade Federal
Vale enfatizar que, com o procedimento de do Maranhão, São Luís, 2008.
maceração por mais 24 horas (remaceração),
ABREU, B.V.B.; BATISTA, M.C.A.; AZEVEDO, C.C.;
foram obtidas concentrações mais elevadas
DUTRA, R.P.; NOGUEIRA, A.M.C.; COSTA, M.C.P.;
de compostos fenólicos e flavonóides totais RIBEIRO, M.N.S. Quantificação de polifenóis de
quando comparados aos valores obtidos na geoprópolis de Melipona fasciculata Smith coletado
primeira extração (Tabela 5), comprovando, no cerrado maranhense. Revista de Ciências da
assim, a importância de realização de extração Saúde, v. 8, n. 1, p. 18-24, jun. 2006.
sequencial nas amostras de geoprópolis de ADELMANN, J. Própolis: variabilidade
Melipona fasciculata. Dados semelhantes foram composicional, correlação com a flora e
obtidos por Adelmann (2005) com própolis de bioatividade antimicrobiana/antioxidante. 186f.
Apis mellifera. Dissertação (Programa de Pós-Graduação em
Como a classificação de padrão de identi- Ciências Farmacêuticas), Setor de Ciências da
dade e qualidade de própolis de Apis mellifera Saúde, Universidade Federal do Paraná, Curitiba,
está relacionada aos teores de flavonóides e 2005.
polifenóis totais (BRASIL, 2001) e consideran- APICULTURA. 2004. Disponível em: <http://www.
do que atualmente não dispomos de legislação breyer.ind.br/apicultura/apicultura.htm>. Acesso
específica para produtos de abelhas sem ferrão, em: 7 jan 2009.
estudos de padronização de produtos apícolas ASSUNÇÃO, A.K.M. Efeito antitumoral do
são essenciais na transformação em produto tratamento profilático com extrato hidroalcoólico
alimentício e/ou farmacêutico; assim esse es- de geoprópolis de Melipona fasciculata Smith. São
tudo certamente contribuírá na determinação Luís, 44f. Monografia (Graduação em Ciências
da qualidade e validação de geoprópolis da Biológicas) - Universidade Federal do Maranhão,
Melipona fasciculata Smith (tiúba). 2008
AZEVEDO, C.C.A. Compostos fenólicos e
4 CONSIDERAÇÕES FINAIS atividade antioxidante de geoprópolis de Melipona
fasciculata (Tiúba) cultivada na região da Baixada
Os resultados demonstrados nesse estudo maranhense. 46f. Monografia (Graduação em
evidenciam que a obtenção de extratos de Farmácia), Universidade Federal do Maranhão, São
geoprópolis de Melipona fasciculata Smith (tiúba) Luís, 2009.
sofre influência das variáveis: procedimento BANKOVA, V. Chemical diversity of propolis and the
extrativo, líquido extrator e hidromódulo. Isso problem of standardization. J. Ethnopharmacol, n.
comprova que maceração com emprego de 100, p.114-117, 2005.
etanol puro, na relação de hidromódulo de BANKOVA, V.; POPOVA, M. Propolis of stingless
1:5, representa o extrato com melhor perfil bees: a promising source of biologically active
químico, fundamentado nos teores de polifenóis compounds. Pharmacognosy Reviews, v.1, n.1, p.
e flavonóides totais, podendo ser utilizado como 88-92, 2007.
parâmetro para padronização na obtenção de BRASIL. Ministério da Agricultura, Pecuária e do
extratos do material em estudo, contribuindo Abastecimento. Instrução Normativa nº3, de 19 de
no padrão de qualidade. janeiro de 2001. Aprova os regulamentos Técnicos
de Identidade e Qualidade de Apitoxina, Cera de
AGRADECIMENTOS Abelha, Geléia Real, Geléia Real Liofilizada, Pólen
Apícola, Própolis e Extrato de Própolis, conforme
Ao BASA pelo auxilio financeiro do projeto consta dos Anexos desta Instrução Normativa.
“Caracterização da própolis de geoprópolis de Diário Oficial da União, Brasília, DF, 23 jan 2001.
Seção 1, p. 18.
tiúba (Melipona compressipes fasciculata Smith)
como base para certificação do recurso natural”; CHAILLOU, L. L.; HERRERA, H. A.; MAIDANA, J. F.
ao CNPq pelas bolsas de Iniciação Cientifica Estudo de própolis de Santiago Del Estero, Argentina.
de Mayara Soares Cunha e Vanessa do Amaral Ciên Tecnol Aliment, v. 24, p. 11-15, 2004.
Neiva; à FAPEMA pelas bolsas de Mestrado CÂMARA, J.Q.; SOUSA, A.H. d.; VASCONCELOS,
de Bruno Vinicius de Barros Abreu e Marisa W.E. d.; FREITAS, R.S.; MAIA, P.H.S.; ALMEIDA,